SU1756348A1 - Штамм гриба OoSpoRa LастIS, гидролизующий жиры и жиросодержащие вещества - Google Patents

Abstract

Использование: биотехнологи , пищева  промышленность. Сущность изобретени : возможность использовани  штамма дл  гидролиза жиров. Штамм Oospora Sactls ВКПМ F-412 получен обработкой УФ-лучами штамма Уз/Ш-2. Колонии белые, бархатистые , плоские с выпуклой серединой. Кра  состо т из пр мых мицелиевидных нитей. Полученна  культурзльна  жидкость имеет высокую лмпазную активность с сокращенной продолжительностью культивировани . Максимальна  активность липазы до 5,9- 6,1 102 ед/мл наблюдаетс  при рН 4,9.

Description

Изобретение относитс к биотехнологии и касаетс  штаммов, гидролизующих ли- пиды.

Известны штаммы Glotrlchum candldum, Rhizopus microsporus, Oospora tragrans. Geotrlchum matalense и другие, способность разрушать жиры и жироподоб- ные вещества.

Наиболее близким к изобретению  вл етс  микроскопический гриб Oospora lactls штамм УзЛМ-2.

Известный штамм обладает недостаточно высокой липолитической активностью.

Целью, изобретени   вл етс  получение более эффективного штамма с повышенной липолитической активностью и сокращенной продолжительностью культивировани .

Полученный штамм Oospora Jactis ВКПМ F-412 имеет следующие морфолого- культуральные и физиолого-биохимические характеристики: культура образует хорошо развитый мицелий величиной 4-10 мкм в поперечнике с редкими перегородками. Отдельные ветки мицели  расчлен ютс  поперечными перегородками на дрожжевидные клетки-оидии, которые сначала имеют резко обрезанные концы, затем они округл ютс . Оидии размером (7-20) (6-9) мкм располагаютс  цепочками, которые легко распадаютс . Иногда они образуют внутри нити мицели . Встречаютс  крупные клетки раз- мером (10-28) (12-18) мкм, составл ющие 12%, а также 15% карликовые клетки размером (1,5-4) (1,2-3,5) мкм. Молоко гриб пеп- тонизирует, желатин разжижает.

В качестве источников углерода культура усвамвает глюкозу, сахарозу, лактозу, мальтозу, галактозу, ксилозу, арабинозу, крахмал,  блочную, лимонную, уксусную кислоты, а также оливковое, хлопковое, подсолнечное , кукурузное масла, гов жий и бараний жиры.

В качестве источников азота используют аммонийные соли: МЖНаРОз, ( (МНФР04, NKtoCI. NhWOa, (NH4kS04. Несколько хуже растет на средах с нитратными сол ми: NaNOa. КМОз. Са(МОз)2сл

Температурные точки роста: минимум 3-4°С, максимум 37°С, оптимум 18-28°С. При низких температурах рост идет медленно . Отношение к рН питательной среды: растет при 4,5-8,0, оптимум 6,2-6,4. При крайних значени х рН рост культуры сильно замедл етс . Штамм хранитс  при 4°С, на среде сусло-агар 7° Блг в течение 6 мес. Штамм получен ультрафиолетовым облучением по известному способу бактерицидной лампой БУВ-30, длина волны 2537 А°. Водную суспензию гриба подвергали воздействию УФ-лучей в течение 5, 10, 20, 30, 45, 60 и 120 с. В результате отбора гриба с выживаемостью 3-80% получен штамм ВКПМ F-412, имеющий высокую липолити- ческую активность. Предварительный отбор , проведенный качественным методом липазной активности, вы вил культуры, образующее зоны гидролиза жира, превышающий размер колонии на 6-11 мм по сравнению с известным способом 5-10 мм.

Дл  сравнени  штаммов УзЛМ-2 и F- 412, их выращивание производилась на среде следующего состава, %: настой хлопкового шрота 2; ()2S04 0,3; СаСОз 0,1; масло хлопковое 1.

В качестве посевного материала использована водна  суспензи  2-суточной культуры, выращенной на сусло-агаре. Суспензи  вносилась в количестве 1%, в колбу емкостью 750 мл, содержащую 100 мл питательной среды.

Липолитические свойства полученного

мутанта изучали по сравнению с известным способом в адекватных услови х.

Количественный анализ отобранных вариантов показал, что у штамма ВКПМ F-412 наиболее высокой липолитической активностью обладает культуральна  жидкость, полученна  в результате культивировани  при 18°СирН4,9.

Интенсивное размножение клеток при

культивировании штамма ВКПМ F-412 наступает через 12 ч, а у прототипа через 15 ч и соответственно продолжительность культивировани  сокращаетс  на 3-4 ч. При этом максимальное накопление липазы у

штамма ВКПМ F-412 наступает через 18-19 ч при культивировании на круговой качалке со скоростью вращени  150-200 об/мин, активностью 4,9-5,9 102 ед/мл, у прототипа через 24 ч. Максимальна  активность липазы до 5,9-6,1 10 ед/мл наблюдаетс  при рН 4,9, котора   вл етс  оптимальным условием дл  проведени  технологического процесса при гидролизе жира.

Штамм ВКПМ F-412 показал себ  стэбильным при культивировании как продуцирующий активную липазу и его можно рекомендовать дл  гидролиза жира.

Пример. Выращивание штамма проводили на среде следующего состава, %:

настой хлопкового шрота 2; (N4)2504 0,3; СаСОз 0,1, масло хлопковое 1, на круговой качалке 200 об/мин, в колбах емкостью 750 мл, содержащих 100 мл питательной среды, в которую внесена в количстве 1 % суспензи  2-суточной культуры. Культивирование проводилось в течение 18ч при 28°С. Полученна  культуральна  жидкость используетс  дл  разложени  жиросодержащих продуктов.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Штамм гриба Oospora lactis ВКПМ F-412, гидролизующий жиры и жиросодержащие вещества.

   Г

   Среда, Т ,возраст, услови  роста

   Размеры, I Характер роста (пленка, кольцо, осадок, мкмI помутнение, рост по стенке пробирки)

   Сусло-агар 2-суточна , 26°С МО

   Рыбный гидролизат, 2-суточный, 1,9-8 26°С

   Чапека (с агаром)

   Жидкое сусло (7 Блг) 2-су- t-IO

   точна , 26°С

   Колонии в одно-двухсуточной культуре белые бархатистые, плоские с выпуклым центром и мицелевидным краем диаметром 6-11 см. Воздушный мицелий хорошо снимаетс , субстратный врастает в агар

   На среде с рыбным гидролизатом в центре колонии исчезает белый бархаристый пушо и по вл етс  матовый кремоваты. налет, который со временем занимает всю колони

   Колонии в одно-двухсуточной культуре белые бархатистые, но менее пушистые, мицелевидным краем диаметром 5-10 см. Рост медленнее, чем на сусло-агаре.

   Через двое суток культура образует тонкую пленку на поверхности среды, котора  со временем превращаетс  в толстую бархатистую, белую пленку. В

   Среда, Т,возраст, услови  роста

   Размеры, I Характер роста (пленка, кольцо, ослл 1 , мкмI помутнение, рост по стенке пробирки)

   МПБ (м со-пептонный бульон), Ы О 2-суточнэ , 26 С

   Чапека (жидка ), 2-суточна , -10 26° С

   Продолжение таблицы

   среде помутнение и ос док отсутстпует. Пигмент не образует.

   Образует пленку также,как   жидком сусле, по вл етс  чуть-чуть осадок. Пигмент не образует.

   Образуетс  тонка  пленка,менее пушиста , белого цвета