SU1451165A1 - Способ получени ноурзеотрицина - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности и может быть использовано при производстве антибиотиков. Цель изобретени  - повышение концентрации целевого продукта , в культуральной жидкости. Сущность предложени  сводитс  к тому, что питательную среду дл  выращивани  продуцента Streptcmyces noursei lA 3890 подвергают стерилизации, при этом в среду дополнительно ввод т фосфат- осаждающие ионы металлов и карбонат кальци , концентрацию ионов сульфата увеличивают и подщелачивают среду дл  снижени  концентрации фосфатов. --, В процессе ферментации, осуществл емой в услови х аэрации и перемешивани , регулируют величину рН, кок- центрацию глюкозы и аммонийного азота , а начина  с 1,5-2 ч от начала ферментации дробно подают в культу- ральную жидкость фосфаты. После завершени  ферментации выдел ют целевой продукт. 5 табл. i (Л

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности и может быть использовано дл  получени  стреп тотрицинового антибиотика ноурзеотри цина.

В случае биосинтеза микроорганизмом Streptomyces ШЕТ 1А 389U b стрептотрицинового антибиотика ноур- зеотрицина известно, что аминокислоты и аммонийные соли отрицательно вли ют на этот биосинтез (Grafe, U., Stendal, А., Bocker, Н.и Thrum, Н. Z.Allg. Mikrobiol. 20, 185-194, 1980

Недостатком технического применени   вл етс  то, что нитрат аммони   вл етс  взрывчатым веществом и использование его допускаетс  только в сочетании с мерами безопасности. Кроме того, обнаружено в фильтрате культуры в конце лабораторной ферментации не более 3000 мкг ноурзео- трицина на 1 мл только при прибавлении относительно дорогих и вредных рп  окружающей среды ингибиторов дыхани  и переноса аминокислот, например о-аминобензойной кислоты (ОАВА) (Grafe, и., Bocker, Н., Reinhardt, G и Thrum, Н. Z. Allg. Mikrobiol 14, 659-673, 1974.

Известно, что избыточный фосфат отрицательно вли ет на биосинтез р да вторичных метаболитов (Martin, J.F., Adv. Biochem. Eng. 6, 105-127, 1977. Поэтому некоторые технические процессы микробиологической ферментации дл  получени  антибиотиков провод т при концентраци х фосфата, субоптимальных дл  роста микробиологического продуцента. В технических фер- ментаци х дл  получени  вторичных метаболитов, как правило, используют такие компоненты среды растительного и животного происхождени , как крахмал , соевый шрот, кукурузный экстракт , меласса, м сной экстракт и др. Общее содержание фосфата и биологическа  доступность (растворимость) комплексного субстрата различное в зависимости от его происхождени  и обработки.

Таким образом, общий фосфат различного содержани , переносимый через комплексные субстраты в среду глу- . бинного культивировани , присутству- ет в начале ферментации в виде растворенного немедленно доступного фосфата .

o

S

0

5

0

5

0

5

0

Цель изобретени  - повышение концентрации целевого продукта в культу- ральной жидкости.

При ферментаци х дп  получени  ноурзеотрицина после понижени  начальной концентрации фосфата ниже считав шегос  ранее оптимальным значени  и последующего прибавлени  соответствующего или более высокого количества фосфата в процессе культивировани , добавл емого по определенному режиму времени, получаютс  значительно более высокие выходы ноурзеотрицина .

Кроме того найдено, что в CaCOj- содержащей питательной среде при замене источника азота нитрата аммони  на сульфатсодержащий сульфат аммони  в соотношении, стехиометрическом в отношении содержани  азота, начальна  концентраци  фосфата снижаетс  от 15 мг/л фосфатного фосфора (Р) до 1-3 мг/л в собственно неизменной среде после стерилизации вод ным паром под давлением.

Начальную концентрацию растворимого биологически немедленно доступного фосфата в простерилиэованной среде можно снизить соответствующим согласованием режима стерилизации и содержани  сульфатных ионов и неор- анических солей или ионов металлов, дающих вместе с фосфатными или сульфатными ионами трудно растворимые осадки.

Причиной снижени  такой начал ь- ной концентрации в случае присутстви  достаточного количества сульфатных ионов  вл етс  сдвиг кислотности слабокислой питательной среды в сторону щелочных значений рН в процессе стерилизации, вызываемый осаждением CaS04 и св занный удалением из среды физиологически кислых сульфатных ионов . Соответственно начальна  концентраци  растворимого или биологически доступного фосфата, снижаетс  также вследствие установки щелочного значени  рН перед стерилизацией. Увеличение значени  рН обеспечивает создание благопри тных условий дп  осаждени  фосфата с определенными присутствующими в питательной среде ионами металлов. Осаждению фосфатсо- держащих осадков способствует направленное прибавление таких ионов металлов , как, например, железо (III),

алюминий (III), магний (II), кальций (II), цинк (II), и другие.

Особенно благопри тное вли ние на осаждение фосфата оказывает примен емый в большинстве технических ферментации метод стерилизации непосредственно воздействующим вод ньм паром под давлением, а также присутствие СаСО,, который используетс  в качестве буфера дл  регулировани  рН в процессе ферментации.

Содержание фосфата можно снизить также уменьшением доли фосфатсодер- жащих комплексных субстратов. Так, например, используемый в ферментации ноурзеотрицина зкстракт соевого шрот содержит около 8 г фосфатного фосфора на 1 г шрота.

В перечисленных услови х начальна концентраци  растворенного или доступного фосфата настолько низка , что специфические дл  ноурзеотрицино продуцирующих микроорганизмов верхние предельно допустимые значени  фосфата остаютс  ниже этого предела. Таким образом, такие небольшие концентрации фосфата позвол ют путем прибавлени  определенного количества фосфата после стерилизации получить среду, в значительной степени стандартизованную по фосфату. Кроме того режим подачи фосфата позвол ет управл ть фосфатным обменом микроорганизмов таким образом, чтобы можно было получить продукт с высоким выходом. Фосфат может подаватьс  в виде раствора или твердого вещества или суспензии . Фосфат может присутствовать либо в форме свободных фосфатных ионов, либо в виде химически или фи- зически св занного фосфата. Подачу фосфата или фосфатсодержащих веществ осуществл ют в зависимости от режима подачи после стерилизации или во врем  ферментации способом разового и/или многоразового и/или непрерывного прибавлени . Непрерывное прибавление фосфата может осуществл тьс  с различной скоростью подачи во врем  ферментации.

Изобретение по сн етс  следующими примерами.

Пример 1. Лиофилизированные на почве консервированные споры се- лектанта NG 13-14 ноурзеотрицинообразующего штамма Streptomyces noursei i IMET lA 3890 b йысевают на подход щую агаровую среду, например, агар

,с 5 0 5 0

0

Эмерсона. Примерно через 7-дневный период инкубировани  при З0 с вырезают участки мицелиального газона размером около 2 см, а ими засевают культуру предварительного выращивани . Среда предварительного выращивани  содержит на 1 л водопроводной воды следующие вещества, г: гйюкоза 40, обезмасл на  соева  мука 15, 0,3, NaCl 5 и СаСО, 3. Кислотность среды устанавливают перед стерилизацией на значение рН 6,5. Эту среду заливают в закрываемые ватной пробкой широкогорлые бутылки емкостью 500 мл кажда  в количествах по 50 мл. Стерилизацию осуществл ют 35-минутным нагревом до 121°С в автоклаве .

Засе нные культуры предварительного выращивани  инкубируют в тече- н.ие 48 ч при 29°С на качалке. При помощи 150 мл полученного таким образом посевного материала засевают 2500 мл основной культуры в лабораторном ферментаторе.

Дл  основной культуры используют среду, содержащую в 1 л следующие питательные вещества, г: картофель- ный крахмал 32, глюкоза 29, обезмас- лена  соева  мука 11, (NH4)iS04 11, MgSO xyHjO 2, NaCl 1, СаСО 6 и 0,5. На 2500 мл питательной среды прибавл ют 1 мл антафрона в качестве пеногасител  на силиконовой основе. Кислотность перед стерилизацией имеет значение рН 6,0. После стерилизации заполненного 250 мл культуральной жидкости ферментатора при в автоклаве и последующего охлаждени  до ЗО с стартовую кислотность устанавливают от рН 8,4 до рН 6,8, прибавл   асептическую добавку 10%-ной стерильной серной кислоты. Засе нные ферментационные среды инкубируют в течение 468 ч при и скорости аэрации 2500 мл воздуха в 1 мин при перемешивании с числом оборотов 800 об/мин. Лпуст  1,5 ч после засева основной культуры, при помощи перистальтического насоса-дозатора непрерьтно прибавл ют раствор 4 г KHjPO на 1 л дистиллированной воды в течение 5 ч со скоростью подачи 1,8 мл/ч; вслед за этим раствор прибавл ют в течение 21 ч со скоростью дозировани  3,5 мл/ч. Во врем  ферментации в асептических услови х периодически

514511656

берут пробы культуральной жидкости(180 об/мин). Использу  12UU мл nojiyи в них методом диффузии в агар сченной таким образом культуральной

использованием микроорганизма Bacil-жидкости первой предварительной кульlus subtilis АТСС 6633 в качестветуры, на второй стадии предварительтест-микроорганизма определ ютного культивировани  засевают 150 л

содержание ноурзеотрицин-основани ,термостерилизованной среды (в тече-.

глюкозы, аммонийного азота и твердыхние 60 мин при ) такого же сое-веществ . Параметры РО, рН и содер-тава, как на первой стадии предварижание COj в отход щих из аппарата IQтельного культивировани , содержащейгазах контролируют в ходе/ процессас  в ферментаторе из специальной выметодом измерени  с регистрацией.сококачественной стали (общий объем

Снижение значени  кислотности куль-250 л) , оснащенном устройствами дл 

туральной жидкости ниже значени подачи стерильного воздуха и перемерН 5,8 предотвращают прибавлением 5шивающим устройством. Культивирование

стерильного 5%-ного раствора едкогопровод т при 27-29 С, скорости работы

натра.перемешивающего устройства 240 об/мин

При снижении концентрации глюкозыи скорости подачи воздуха 1 л на 1 л до 5 г/л или. аммонийного азота докультуральной жидкости в 1 мин. 0,5 г/л, что отражаетс  на увеличе- . 2о Дл  основной культуры используют НИИ измеренных значений рН и РО аферментаторы из специальной высоко- также на снргжении содержани  СО качественной стали (общий объем - в отход щих газах, прибавл ют перио-710 л), оснащенные устройствами дл  дически 25 г глюкозы или 10 г подачи стерильного воздуха и располо- (NN4)4804 в виде концентрированных 25женным в центре аппарата перемешиваю- стерильных растворов.щим устройством, которые заполнены

Дальнейшую ферментацию провод т500 л питательной среды каждый (ребез прибавлени  , глюкозы ицептуру см. пример 1). В качестве

(NH4)iS04 в аналогичных услови х. По-пеногасител  прибавл ют, 0,5 г/л ансле прекращени  ферментации в культу- JQтафрона. Кислотность устанавливают

ральной жидкости присутствуют четкоперед стерилизацией на значение в

обнаруживаемые .количества глюкозыпределах рН 6,7-7,0. Стерилизацию

и аммони . Концентрации ноурзеотри-питательной среды (без компонента

цин-основани , определенные в фильт-глюкозы) провод т на месте предвариратах культур обоих различных фермен-тельным подогревом паром рубашки притационных процессов, приведены в .мерно до 70 с и последующим нагревом

табл. 1.острым паром до 121°С в течение

П р и м е р 2. Лиофилизированный15 мин. После охлаждени  до темперана глюкозо-желатине консервированныйтуры около 30°С прибавл ют в асептимицёлий (вес брутто консервированного ческих услови х глюкозу в виде 50%-

содержимого - около 300 мг) названно-,ного водного раствора, раздельно прого в примере 1 ноурзеотрицинообразую-стерилизованного 30-минутным нагревом

щего щтамма стрептомицетов суспенди-до 121 C. Перед посевом при помощи

руют с 3 мл 0,9%-ного раствора хло-стерильной 10%-ной серной кислоты ристого натри , 0,5 мл этой суспензии снижают стартовую кислотность рН

служит в качестве инокулюма дл  400мл-8,6 до значени  в пределах рН 6,9-7,1. среды предварительного культивирова- Ферментационные среды основной

ни  первой стадии.культуры, засе нные кажда  5% иноку-.

Среда предварительной культурылюма второй стадии предварительного

имеет тот же состав и кислотность,культивировани , культивируют в течто в примере 1. Среду заливают в за-чение 120 ч при температуре в предекрываемые ватной пробкой широкогорлыелах 28-30°С и со скоростью подачи

бутылки емкостью 2500 мл в количествахвоздуха 500 л в 1 мин (давление

по 400 мл. Стерилизацию провод т0,14-0,16 МПа) при перемешивании

35-минутным нагревом до 121 С в авто-(320 об/мин), клаве. К одной из двух культур ферментаОхлажденные до комнатной темпера- тора, начина  со 2-го ч и конча  32-м

туры и засе нные культуры инкубируютч после засева, прибавл ют при помов течение 48 ч при на качалкещи перистальтического насоса-доздто7

pa с посто нной скоростью водный раствор, содержащий 87 мг/л КН2Р04, так что в течение 30 ч на 1 л культуры прибавл ют 40 мг фосфатного Р.

Во врем  ферментации в асептичес- ких услови х периодически берут пробы культуральной жидкости и в них методом диффузии в агар с использованием микроорганизма Bacillus subtili ATGC 6633 в качестве тест-микроорганизма- определ ют концентрацию ноур- зеЬтрицин-основани  и содержание глюкозы, аммонийного азота и твердых веществ. Параметры рН и содержание СО в отход щих газах контролируют в ходе процесса измерением с регистрацией .

При падении концентрации глюкозы ниже 5 г/л или аммонийного азота ни- же 0,5 г/л, что видно по нарастанию значений рН и снижению содержани  СО в отход щих газах, периодически прибавл ют 5000 г глюкозы или 1800 г сульфата аммони  в виде концентриро- ванного стерильного водного раствора

В другую культуру ферментатора фосфата глюкозу или сульфата аммони  не добавл ют. Регулирование значени  рН не осуществл етс ; непрерывно из- мер емые значени  кислотности лежат в пределах рН 6,4-7,2. В момент прекращени  ферментации в культуральной жидкости содержитс  более 5 г/л глюкозы и 0,5 г/л аммонийного азота.

Концентраци  ноурзеотрицин-основа- ни , определенные в фильтратах культур обеих различных ферментации, приведены в табл. 2.

П р и м е р 3. Лиофилизированный на глюкозо-желатине консервированный -мицелий (вес брутто консервированного содержимого около 300 мг) селектанта ноурзеотрицинообразующего штамма 1МЕТ IA 3890 b обрабатывают в отноше- НИИ предварительного культивировани , как описано в примере 2.

Дл  основной культуры используют лабораторный ферментатор общим объемом 7 л, оснащенный устройствами дл  подачи стерильного воздуха и расположенным в центре перемешивающим устройством , который заполн ют 4,5 л питательной среды.

Культивирование провод т в модифи- цированной среде (по примеру 1), содержащей 60 г/л глюкозы. В качестве пеногасител  прибавл ют 0,5 г анта165

Q 5

JQ 25

Q

5

5

фрона Ш-40 на 1 л культуральной жидкости.

Дл  моделировани  технических условий стерилизацию провод т в ферментаторе из специальной высококачественной стали, заполненном 2500 л питательной среды без глюкозного компонента . Кислотность устанавливают перед стерилизацией на рН 7,4. Стерилизацию провод т на месте предварительным Подогревом паром рубашки до и последующим нагревом острым паром до в течение 15 мин. После охлаждени  до прибавл ют в асептических услови х глюкозу, раздельно про- стерилизованную в виде 50%-ного раст- в.ора 30-минутным нагревом до 120°С. Перед засевом понижают стартовую кислотность от значени  рН 8,1 серной кислотой таким образом, чтобы стартовое значение рН составл ло после засева 7,4. Ферментационную культуру засевают 4% инокулюма второй стадии предварительного культивировани . Дл  проведени  опыта из ферментатора перевод т 4,5 л среды в лабораторный ферментатор, который стерилизуют раздельно в незаполненном состо нии в автоклаве.

Основную культуру выращивают в течение 146 ч При 29 с и скорости аэрации 4,5 л воздуха в 1 мин. Начальное число оборотов перемешивающего устройства 800 об/мин увеличивают дл  улучшени  снабжени  культуры кислородом; начина  с 28-го ч число оборотов мешалки составл ет 1000 об/ /мин. Между 2-м и 40-м ч после засева при помощи перистальтического насоса прибавл ют 784 мг в виде водного раствора с разной скоростью подачи в пределах 1,25-1,75 мг фосфатного Р в 1 ч и на 1 л культуральной жидкости. Автоматической подачей 25%-ного водного раствора аммиака обеспечивают поддержание регулируемого значени  на уровне не менее рН 6,2 и тем самым достаточное снабжение культуры аммонийным азотом. Глюкозу прибавл ют периодически в виде концентрированного водного раствора тогда,:когда результаты анализов, проводимых по ходу ферментации, показывают падение концентрации глюкозы ниже 10 г/л. Во врем  ферментации в асептических услови х периодически берут пробы культуральной жидкости и в фильтратах культуры определ ют концентрацию ноурэеотрицин-основани  мтодом диффузии в агар (табл. 3).

Пример4. В процессе фермен тации, проводимом аналогично примеру 3, долю сульфата цинка среды основной культуры замен ют на 0,2 г/л Fe,j,(SO)j- , Концентраци , ноурзе трицина в фильтрате культуры составл ет после 120-часовой ферментации 8200 мкг/мл (табл. 4).

Пример5, В процессе ферментации , проводимом аналогично примеру 3, долю сульфата цинка замен ют

на 0,13 г/л Al(S04) 5 tSHjO. Концен раци  ноурзеотрицина в фильтрате культуры составл ет после 120-часовой ферментации 8400 мкг/мл (табл.4

Примерб. В дальнейшей ферментации , проводимой аналогично примеру 5, количество содержащегос  в питательной среде обезмасл ного соевого шрота снижают от 11 до 4 г/л Лалёе значение рН среды устанавливают перед стерилизацией разбавленным водным раствором едкого натра на рН 8,1. После стерилизации паром под давлением значение рН устанавливают концентрированной серной кислотой таким образом, чтобы оно сосг тавл ло рН 7,2 после засева. Фосфат прибавл ют между 2-м и 72-м часами при помощи водного раствора KHjPO, который прибавл ют с посто нной скоростью таким образом, чтобы бьшо обеспечено снабжение фосфатом в количестве 1,4 мг фосфатного Р в 1 ч и на 1л культуральной жидкости. В процессе ферментации глюкозу пе

риодически прибавл ют таким образом,, чтобы концентраци  глюкозы не снизилась ниже 1 г/л. Значение рН поддерживают титрованием 25%-ным раствором гидроокиси аммони  на уровне рН 6,0.Получаемые концентрации ноурзео- трицина приведены в табл. 5.

Таким образом, использование предлагаемого изобретени  позвол ет повысить концентрацию антибиотика в культуральной жидкости.

зобретени 

Ф о р м у si а и

Способ получени  ноурзеотрицина путем ферментации штамма Streptomyces noursei lA 3890 в стерильной питательной среде при аэрации, перемешивании и регулировании величины рН, концентрации глюкозы и аммонийного азота с последующим выделением целевого продукта, отличающийс   тем, что, с целью повышени  концентрации целевого продукта в культуральной жидкости, начало ферментации ведут при лимитировании фосфата, при этом снижение начальной

концентрации фосфата в питательной среде осуществл ют в процессе стерилизации в присутствии фосфатосаж- дающих ионов металлов и карбоната кальци  с одновременным повышением величины рН среды и концентрации ионов сульфата, а через 1,5-2 ч от начала ферментации осуществл ют дробиую подачу фосфата в культуральную жидкость .

. Т а б л и ц а

.Содержание ноурзеотрицина в культурах штамма Streptomyces noursei IMET lA 3890 b-ll NG 13-14 с добавками KHj,P04 , глюкозы и (NH4),jS04 и без добавок в лабораторном ферментаторе в зависимости от времени

ферментации

1035

2980 5412

8311 8800

249

165 294

213 195

140,

9230

213

100

100 100

100 100

4005

100

145116512

Таблица2

Содержание ноурэеотрицина в культурах штамма Streptomyces noursei IMET lA 3890 b-II NG 13-14 с добавками , глюкозы и (NH4)2S04 и без добавок в ферментаторе емкостью 500 л в зависимости от времени

ферментации

Врем  фермента- С добавкамиБез добавок (контроль)

ции, ч 1 1

мкг/мл %мкг/мл I %

MITL Iiniirj B«B «B«B«BaiB -. ш1л л,,тт,лт - - - - - --,- - , , |,

20 225216t04 100

i i1600228702100

6848582991627 100

924903208, 2362100

11668621913585100

14477812002885100

ТаблицаЗ

Содержание ноурзеотрицина в культуре селектанта штамма Streptomyces noursei IMET lA 3890 b с добавками , глюкозы и (NN4)4 S04 в ферментаторе емкостью 4,5 л в зависимости от времени ферментации

Врем  ферментации, ч Концентраци  ноурзеотри1 ина , мкг/мл

20320

442330

68 .6240

92 116 146

8010 11040 14070

1314511

Т а б л и ц а 4

Содержание ноурзеотрицина проведенной ферментации в соответствии с примером 4 с ионами железа (ill) и ферментации в соответствии с примером 5 с ионами алюмини  (ill) в зависимости от времени ферментации

Врем  ферментации,

Концентраци  ноурзеотрицина , мкг/ /мл, по примеру

530

800

2500 3200 5400 6300 7250 7400

8200

8400

651

ТаблицаЗ

Содержание ноурзеотрицина в куль- туральной жидкости лабораторного ферментатора с добавками , глюкозы и гидроокиси аммони , содержащей ионы алюмини  (III), в зависимости от времени ферментации

Врем  ферментации , ч

Концентраци  ноурзеотрицина , мкг/мл

24 48 72 96

J.20

800

2000

5660

8900

11000

Claims (1)

15 Формула изобретения

Способ получения ноурзеотрицина путем ферментации штамма Streptomyces noursei ΙΑ 3890 в стерильной пита. 20 тельной среде при аэрации, перемешивании и регулировании величины pH, концентрации глюкозы и аммонийного азота с последующим выделением целевого продукта, отличающий25 с я тем, что, с целью повышения концентрации целевого продукта в культуральной жидкости, начало ферментации ведут при лимитировании ' · фосфата, при этом снижение начальной 3Q концентрации фосфата в питательной среде осуществляют в процессе стерилизации в присутствии фосфатосаждающих ионов металлов и карбоната кальция с одновременным повышением 35 величины pH среды и концентрации ионов сульфата, а через 1,5-2 ч от начала ферментации осуществляют дробную подачу фосфата в культуральную жидкость.

Таблица 1 Содержание ноурзеотрицина в культурах штамМа Streptomyces noursei ΙΜΕΤ ΙΑ 3890 b-II NG 13-14 с добавками КН_гРО₄, глюкозы и (ЫНд^БОд и без добавок в лабораторном ферментаторе в зависимости от времени ферментации

Время ферментации, ч ------------------------------_г---------------------------- J С добавками Без добавок (контроль) мкг/мл Г * мкг/мл . | % 24 1035 249 415 100 48 2980 165 1805 100 72 5412 294 1840 100 96 8311 213 3905 100 120 8800 ¹⁹⁵ 4520 100 140. 9230 213 4005 100

1 2

Таблица2 Содержание ноурзеотрицина в культурах штамма Streptomyces noursei IMET ΙΑ 3890 b-II NG 13-14 с добавками КН₂Р0₄, глюкозы и (NH₄)₂S0₄ и без добавок в ферментаторе емкостью 500 л в зависимости от времени ферментации

Время ферментации, ч

С добавками

Бёз добавок (контроль) мкг/мл

20 225 216 104 100 44 1600 228 702 100 68 4858 299 1627 ¹ 100 92 4903 208 2362 100 116 6862 191 3585 100 144 7781 200 2885 100

ТаблицаЗ Содержание ноурзеотрицина в культуре селектанта штамма Streptomyces noursei ΙΜΕΤ ΙΑ 3890 b с добавками КН₄РО₄, глюкозы и (NH₄)₂S0₄ в ферментаторе емкостью 4,5 л в зависимости от времени ферментации

Время ферментации, ч Концентрация ноурзеотрицина, мкг/мл 20 320 44 2330 68 6240 92 8010 116 11040 146 14070

13 1451165 14

Т а б л и ц а 4

Содержание ноурзеотрицина проведенной ферментации в соответствии с примером 4 с ионами железа (ill) и ферментации в соответствии с примером 5 с ионами алюминия (ill) в зависимости от времени ферментации

Время ферментации, ч

.24 530 800 48 2500 3200 72 5400 6300 96 7250 7400 120 8200 8400

Таблица5

Содержание ноурзеотрицина в культуральной жидкости лабораторного ферментатора с добавками КН^Р0₄ , глюкозьг и гидроокиси аммония, содержащей ионы алюминия (III), в зависимости от времени ферментации

10 Концентрация ноур- . зеотрицина, мкг/ /мл, по примеру

Время ферментации, ч Концентрация ноурзеотрицина, мкг/мл ьэ I I I I I • I I I I 800 48 2000 72 5660 96 8900 120 11000