SU1384206A3 - Способ культивировани бактерий ВоRDетеLLа реRтUSSIS - Google Patents
Способ культивировани бактерий ВоRDетеLLа реRтUSSIS Download PDFInfo
- Publication number
- SU1384206A3 SU1384206A3 SU823505901A SU3505901A SU1384206A3 SU 1384206 A3 SU1384206 A3 SU 1384206A3 SU 823505901 A SU823505901 A SU 823505901A SU 3505901 A SU3505901 A SU 3505901A SU 1384206 A3 SU1384206 A3 SU 1384206A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- medium
- cyclodextrin
- dimethyl
- methyl
- concentration
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/10—Protozoa; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к медицинской микробиологии и может быть использовано дл накоплени биомассы коклюшных бактерий в 1-й фазе. Цель изобретени - снижение посевной дозы микроорганизмов за счет повышени ростовых свойств среды, а также стимулирование роста микроорганизмов. Суспензию бактерий Bordetella pertussis в 1-й фазе выращивают в плотной или жидкой питательной среде Штайнера-Шольте, дополнительно содержащей производные о/ -или /з -цикло- декстринов в концентрации I - 5000 мгк/мл среды. Посевы инкубируют при 30-38 0 в стационарных или погруженных аэробных услови х.При этом можно получить рост при посевной дозе 10 кл./мл.Дл дополнительной стимул ции роста в состав среды ввод т казаминокислоты в количестве 0,5-10 мг/мл среды. На плотной среде диаметр колоний составл ет 1,0 - - 1,2 мм. 1 з.п. ф-лы, 3 табл. СО
Description
оо
00 4
to
О
о
сн
Изобретение относитс к медицинской микробиологии и может быть ис- пользовано дл накоплени биомассы коклюшных бактерий.
Цель изобретени - снижение посевной дозы микроорганизмов за счет повышени ростовых свойств среды, а также стимулирование роста микроорганизмов .
Способ осуществл ют следующим образом .
Питательную среду Штайнера-Шоль- те (ШШ) готов т, -путем добавлени дополнительного раствора, который получают стерилизацией с использованием миллипорового фильтра (0,45 мкм) из водного раствора, содержащего,г: 1-цистеин 4; сульфат двухвалентного железа I; аскорбинова кислота 2; никотинова кислота 0,4; глютатион восстановленного типа на 1 л раствора в концентрации 1 об.% к основной среде 10. Основную среду получают путем приготовлени водного раствора , содержащего, г: глютамат натри 10,7; 1-пролин 0,24; хлористый натрий 2,5; дигидрофосфат кали 0,5 хлористый калий 0,2; хлористый маг- . НИИ 0,1; хлористый кальций 0,02; три соксиметиламиномеЧ ан. на I л раствора 1,525, значение рН довод т до 7,6, затем стерилизуют в автоклаве при 121 С в течение 15 мин. В зависимости от концентрации микроорганизмов в среду ввод т соответствующие количества циклодекстрина (ЦЦ) или его производной.
Дл усилени роста микроорганизмов наиболее предпочтительным вариантом среды вл етс питательна среда ШШ с 0,5-10 г/л казаминокислот.
Дл выращивани ; культуры можно использовать известные способы и услови . Однако выращивание при встр хивании вл етс предпочтительным, и его желательно проводить при 30 - 38 С в течение 10-100 ч.
Bordetella pertussis 1-й фазы штамм Тохама выращивгиот при на среде ШШ, содержащей метил-р-цикло- декстрин, в течение 48 ч. Надосадоч- ную жидкость (рН 8,3), полученную центрифугированием культуральной жидкости , подают на колонку с оксиапа- титом, уравновешенную 0,01 М фосфатным буфером (рН 8,0). Раствор,выход щий из колонки, подкисл ют до рН 6,0 и вновь подают на колонку с
оксиапатитом, уравновешенную 0,01 М фосфатным буфером (рН 6,0), и затем элюируют св занный белок 0,1 М фосфатным буфером (рН 7,0), содержащим 0,5 М NaCl, Полученный элюат подвергают аффинной хроматографии, использу гаптоглобин-сефарозу 4В, и затем злюируют целевой Продукт 0,1 М фос0 фатным буфером (рН 7,0), содержащим 0,5 М NaCl и 3 М тиоцианата кали .
Нитевидный гемагглютинин получают посредством элюироэани св занного
5 белка в колонке с оксиапатитом (рН 8,о) 0,1 М фосфатным буфером (рН 7,0), содержащим 0,5 М NaCl, и очищают методом аффинной хроматографии на ran- тоглобулин-сефарозе 4Б.
0 Пример. Лиофилизированную культуру Bordetella pertussis штамм Тохама 1-и фазы суспендируют в 1%-ном растворе казаминокислоты и затем выращивают на среде Борде-Ген5 гона (ВГ), содержащей 20% лошадиной крови, из которой удален белок, при 35°С в течение 3 сут. Одну полную петлю с культурой растущих клеток стимулируют на среде БГ в тече0 ние 24 ч и суспендируют в среде ШШ. Получают суспензию концентрацией клеток 5-10 кл./мл.
Плотную среду ШШ с плотностью агара 1,2%, содержащую ДЦ или его. про5 изводнук, нанос т на пластины, затем распьш ют микробную суспензию до содержани 10 клеток на одну пластину.
Результаты роста бактерий (число
0 колоний) после четырехсуточного инкубировани при 35°С представлены в табл.1.
Пример 2. Суспензию дл ино- «кулировани , полученную по примеру
5 1,инокулируют в 1 мл жидкой среды ШШ, . содержащей метил-/1-ЦЦ при числе -клеток 10, и инкубируют при 35°С в L- пробирке Монода с возвратно-поступательным встр хиванием.
Результаты вли ни концентрации метил-р-ЦЦ на мутность среды с культурой в зависимости от времени инкубации приведены в табл.2
г Из табл. 2 следует,- что при добавлении метил- -ЦЦ в среду в количестве от 1 до 500 мкг/мл степень помутнени среды возврастает пропорционально количеству ЦЦ, что свидетель0
ствует о промотировании роста микробов .
П р и м е р 3. Готов т плотную среду ШШ, при этом увеличивают концентрацию глютатиона восстановленного типа в 1,5 раза по сравнению с известной прописью I среды, и добавл ют различные концентрации казаминокис- лот и метил- -ЦЦ. На каждую пластину со средой высевают 10 клеток Bordet eila pertussis 1-и фазы штамм Тохама и выращивают 3 дн при 35 С,
Результаты вли ни казаминокис- лот и метил- -ЦЦ на рост бактерий Bordetella pertussis приведены в табл.3.
Из данных табл.3 следует, что в отсутствии добавок на среде 1Ш11 при посевной дозе 10 кл./мл рост отсутствует , в то врем как при добавлении метил- -Ш1 в интервале 500 - 1000 мкг/мл количество колоний возрастает , а при добавлении казамино- кислоты в количестве от 500 до 5000 мкг/мл размер колоний увеличиваетс и их легко наблюдать (1,0- 1,2 мм по сравнению с 0,8 мм в контроле ) .
П р и м е р 4. Жидкую среду ШШ усовершенствованного типа готов т путем добавлени казаминокислоты в количестве 10 мг/мл. Увеличивают концентрацию глютатиона в 1,5 раза и в 20 раз концентрацию аскорбиновой кислоты и используют в количестве 1 об.% от основной среды. Метил-/5-ЦД добавл ют в соответствующие пробы среды в количествах от 50 до 5000 мкг/мл. Приготовление пробы сред разливают по 200 мл в колбы Са- кагучи. Каждую порцию среды инокули- руют суспензией бактерий при концентрации клеток 1,5-10 кл./мл и инкубируют.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что добавление произ 10 10
10-100 100-500 10-100 10-100
водного ЦЦ в культуральную среду в количестве от 50 до 2000 мкг/мл в присутствии казаминокислоты усили-
вает рост клеток Bordetella pertussis .
Использование циклодекстринов позвол ет повысить ростовые свойства среды, что в свою очередь позвол ет
снизить посевную дозу инокул та,стабилизировать процесс культивировани , а добавление казамииокислот - получать более пышный рост бактерий.
Claims (2)
1.Способ культивировани бактерий Bordetella pertussis в 1-й фазе на/или в питательной среде Штайне-
ра-Шольте, содержащей источники углерода , азота, набор минеральных солей , аминокислот и витаминов, в стационарных или погруженных аэробных услови х при 30-38°С, отличающ и и с тем, что, с целью снижени посевной дозы микроорганизмов за счет повышени ростовых свойств среды, культивирование осуществл ют в присутствии гексакис-(2,6-о-диметил )-о/-циклодекстрина или гептакис- (2,6-о-диметил)- -циклодекстрина в концентрации 1 - 5000 мкг/мл питательной среды.
2.Способ ПОП.1, о тлич аю- щ и и с тем, что, с целью стимулировани роста микроорганизмов, в питательную среду дополнительно ввод т казаминокислоты, при этом в плотный вариант среды добавл ют 0,5
10 мг/кл среды казаминокислот при
концентрации гексакис-(2,6- о-диме- тил)-с/-циклодекстрина или гексакис- (2,6-о-диметил )-/5-циклодекстрина 250-1000 мкг/мл среды, а в жидкий вариант среды казаминокислоты добавл ют в концентрации 5-20 мг/мл среды при концентрации циклодекстрина 50 - 2000 мкг/мл среды. IТ а б л и ц а 1
10-100 100-500 10
500-1000 100-500 10
100-500 100-500 10
Метил- -ЦЦ Этил-/ г-1Щ
гвд
Метил-} -ЦЦ
10 .flO 10 10 10-100 100-50010-100
10 10 100-500 500-1000 500-1000 100-50010-100
10 10 10-100 10-100 100-500 100-50010-100
10 10 ОО 10 10-100 10-100100-500
Q МО 10 10-100 100-500100-500
Примечание. «/-метилциклодекстрии-о -ЦЦ; гексакис-(2,6-о-диметил)-(циклодекстрин - метил- /-ЦД , гептакис-(2,6-о-диметил)-/з- циклодекстрин - метил-/ -ЦД.
Т а б л.и ц а 2
Концентраци
Степень помутнени среды (ОП 650 ммк)
через, ч
О 1
5
10
50
100
500
00
0,005 0,010 0,01 1 0,015 0,015 0,015 0,016 0,007
Продолжение табл.1
через, ч
0,280 0,340 0,330 0,370 0,430 0,430 0,540 0,300
0,490 0,540 0,540 0,500 0,675 0,695 0,747 0,485
Таблица 3
Колонии относительно малого размера,
iПродолжение табл.3
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP16347881A JPS5918989B2 (ja) | 1981-10-15 | 1981-10-15 | 生物学的活性物質の製法 |
JP16347781A JPS5953833B2 (ja) | 1981-10-15 | 1981-10-15 | 培養方法及び培地 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1384206A3 true SU1384206A3 (ru) | 1988-03-23 |
Family
ID=26488902
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU823505901A SU1384206A3 (ru) | 1981-10-15 | 1982-10-15 | Способ культивировани бактерий ВоRDетеLLа реRтUSSIS |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4500639A (ru) |
EP (1) | EP0077646B1 (ru) |
KR (1) | KR870001650B1 (ru) |
AU (1) | AU554066B2 (ru) |
CA (1) | CA1198702A (ru) |
DE (1) | DE3279841D1 (ru) |
ES (1) | ES516507A0 (ru) |
MY (1) | MY100052A (ru) |
SU (1) | SU1384206A3 (ru) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1213234A (en) * | 1983-03-30 | 1986-10-28 | Akihiro Ginnaga | Method for the production of ha fraction containing protective antigens of bordetella pertussis and pertussis vaccine |
JPS6176422A (ja) * | 1984-09-22 | 1986-04-18 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 百日ぜきコンポ−ネントワクチンおよび百日ぜき・ジフテリア・破傷風混合ワクチンの製造方法 |
FR2596413B1 (fr) * | 1986-03-27 | 1988-06-10 | Merieux Inst | Nouveaux milieux de culture de bacteries appartenant au genre bordetella, contenant des derives etherifies de polymeres de d-glucose, et leur application |
FR2597344B1 (fr) * | 1986-04-16 | 1989-06-23 | Merieux Inst | Perfectionnement au procede de purification d'antigenes proteiques de bacteries appartenant au genre bordetella, en vue de l'obtention d'un vaccin acellulaire. |
CA1337859C (en) * | 1987-04-24 | 1996-01-02 | Masashi Chazono | Method for culturing bordetella pertussis, a pertussis toxoid and a pertussis vaccine |
US5139776A (en) * | 1987-04-24 | 1992-08-18 | The Research Foundation For Microbial Diseases Of Osaka University | Method for culturing Bordetella pertussis, a pertussis toxoid and a pertussis vaccine |
CY1934A (en) | 1989-11-06 | 1990-11-01 | Smithkline Beecham Biolog | Process |
US5866375A (en) * | 1991-10-31 | 1999-02-02 | Chiron S.P.A. | Method for the culture of microorganisms of the genera helicobacter, campylobacter and arcobacter employing culture media comprising cyclodextrins |
IT1251751B (it) * | 1991-10-31 | 1995-05-23 | Sclavo Ricerca S R L | Metodo per la coltura di microrganismi dei generi helicobacter, campylobacter e arcobacter, utilizzando terreni di coltura contenenti ciclodestrine o metil-cellulosa o loro miscele |
EP2430040A1 (en) | 2009-05-11 | 2012-03-21 | Novartis AG | Antigen purification process for pertactin antigen |
GB201316351D0 (ru) * | 2013-09-13 | 2013-10-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2240969A (en) * | 1937-08-19 | 1941-05-06 | Lederle Lab Inc | Pertussis toxin and toxoid |
DE1056082B (de) * | 1956-02-06 | 1959-04-30 | Dr Jaroslav Vintika | Verfahren zur Herstellung von zur Bakterienanreicherung von landwirtschaftlichen Kulturboeden und als Eiweissfuttermittel geeigneten Bakterienpraeparaten |
GB1145320A (en) * | 1966-05-20 | 1969-03-12 | Ustav Ser A Ockovacich Latek O | Process for the preparation of bacterial cultures for vaccines against pertussis and |
US3577319A (en) * | 1968-05-27 | 1971-05-04 | American Cyanamid Co | Large scale cultivation of bordetella pertussis cells for vaccine production |
JPS5133961B1 (ru) * | 1971-03-22 | 1976-09-22 | ||
EP0012718B1 (en) * | 1978-12-07 | 1981-09-16 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Intra-respiratory vaccine, modified bacteria strain used in it, vaccine dose form and process for preparing it |
JPS5953038B2 (ja) * | 1979-04-07 | 1984-12-22 | メルシャン株式会社 | サイクロデキストリンの製造法 |
-
1982
- 1982-09-29 US US06/427,039 patent/US4500639A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-10-07 CA CA000413002A patent/CA1198702A/en not_active Expired
- 1982-10-07 AU AU89192/82A patent/AU554066B2/en not_active Expired
- 1982-10-14 EP EP82305465A patent/EP0077646B1/en not_active Expired
- 1982-10-14 ES ES516507A patent/ES516507A0/es active Granted
- 1982-10-14 DE DE8282305465T patent/DE3279841D1/de not_active Expired
- 1982-10-15 SU SU823505901A patent/SU1384206A3/ru active
- 1982-10-15 KR KR8204639A patent/KR870001650B1/ko active
-
1987
- 1987-02-05 MY MYPI87000101A patent/MY100052A/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU554066B2 (en) | 1986-08-07 |
DE3279841D1 (en) | 1989-08-31 |
MY100052A (en) | 1989-06-29 |
EP0077646B1 (en) | 1989-07-26 |
EP0077646A3 (en) | 1986-03-26 |
ES8404407A1 (es) | 1984-05-01 |
EP0077646A2 (en) | 1983-04-27 |
ES516507A0 (es) | 1984-05-01 |
KR840002030A (ko) | 1984-06-11 |
KR870001650B1 (ko) | 1987-09-18 |
AU8919282A (en) | 1983-04-21 |
US4500639A (en) | 1985-02-19 |
CA1198702A (en) | 1985-12-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SU1384206A3 (ru) | Способ культивировани бактерий ВоRDетеLLа реRтUSSIS | |
US4965205A (en) | Culture medium for bacteria of the bordetella genus containing etherified derivative of D-glucose and a cyclodextrin | |
Medill et al. | A synthetic medium for the L type colonies of Proteus | |
JP2000093162A (ja) | 有胞子乳酸菌の培養方法 | |
RU2518282C1 (ru) | Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба | |
JP2751862B2 (ja) | 発酵法による微生物凝集剤の製造方法 | |
US4699786A (en) | Enhanced large scale cultivation of bordetella pertussis cells for vaccine production using lactoglobulin | |
CN111454858A (zh) | 一种运用栅栏技术抑制产胺菌积累生物胺的方法 | |
JP2769168B2 (ja) | ビール有害菌の検出用培地 | |
RU2158302C2 (ru) | Питательная среда для роста бифидо- и лактобактерий | |
CN109988733A (zh) | 一种链球菌特异性固体培养基、制备方法及其应用 | |
JPH0549491A (ja) | 微細藻類から多糖類を生産する方法 | |
RU1549227C (ru) | Способ получения комплекса литических ферментов | |
RU1822860C (ru) | Питательна среда дл биосинтеза пигмента реNIсILLIUм RUвRUм | |
RU95111037A (ru) | Способ изготовления вакцины против сибирской язвы животных | |
RU2104014C1 (ru) | Состав питательной среды для роста бифидобактерий | |
Moghadam et al. | Application of fermentor technology in production of diphtheria toxin | |
SU1063836A1 (ru) | Способ выращивани микобактерий туберкулеза | |
JPS5867182A (ja) | 培養方法及び培地 | |
SU1014881A1 (ru) | Способ получени биомассы @ @ | |
US4562070A (en) | Method of enhancement of piliated phase of Bordetella bronchiseptica | |
RU1792615C (ru) | Способ культивировани продуцента бета-экзотоксина | |
KR960004035B1 (ko) | 세팔로스포린 c를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 세팔로스포린 c의 제조방법 | |
RU2288950C1 (ru) | Питательная среда (жидкая) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов | |
SU1447266A3 (ru) | Способ получени фракции НА, содержащей защитный антиген ВоRDетеLLа реRтUSSIS |