SU1138073A1

SU1138073A1 - Способ разрушени клеточной оболочки хлореллы

Info

Publication number: SU1138073A1
Application number: SU762426425D
Authority: SU
Inventors: Ольга Николаевна Альбицкая; Лидия Сергеевна Лосякова; Наталья Петровна Ошанина; Светлана Семеновна Воронкова; Ольга Павловна Кожемякина
Original assignee: Всесоюзный Научно-Исследовательский Биотехнический Институт
Priority date: 1976-12-02
Filing date: 1976-12-02
Publication date: 1985-02-07
Also published as: SU731935A1

Abstract

1. СПОСОБ РАЗРУШЕНИЯ КЛЕТОЧНОЙ ОБОЛОЧКИ ХЛОРЕЛЛЫ, предусматривающий тепловую обработку суспензии хлореллы, охлаждение ее с последующим ферментативным гидролизом, отличающийс тем, что, с целью более полного разрушени клеточных оболочек и увеличени тем самым выхода белковых веществ, тепловую обработку суспензии осуществл ют при 85-95&deg;С в течение 3-5 мин с последующим ее охлаждением до 45-48&deg;С, а ферментативный гидролиз провод т путем обработки водной суспензии хлореллы культурой гриба Trichoderma lignorum 6 С в течение 1-3 ч. 2. Способ по п. 1, отличающийс , что культуру гриба Trichoderma lignorum 6 С внос т в количестве 250-400 кд С/ фермента на 100 г сухого веса хлореллы.

Description

оо оо о со

Изобретение относитс к микробиологической промышленности и касаетс приготовлени белково-витаминных обогатителей кормов, используемых в сельском хоз йстве.

Известен способ приготовлени напитка из хлореллы, заключающийс в том, что свежую хлореллу суспендируют в воде, к суспензии добавл ют жидкую протеазу, продуцируемую микрооргацизмами Bacillus natto, котора вызывает автолиз хлореллы 1.

Недостаткол этого способа вл етс невысокий выход белковых веществ.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому эффекту вл етс способ разрущени клеточной оболочки хлореллы, предусматривающий тепловую обработку суспензии хлореллы, охлаждение ее с последующим ферментативным гидролизом. Гидролиз хлореллы провод т путем воздействи на оболочку цитолитическим ферментным препаратом, полученным из гриба Irichothecium roseum. Ферментный препарат внос т в количестве, равном 5%, и выдерживают в течение 1748 ч с толуолом. Перед введением ферментного препарата водоросли стерилизуют (про паривают) с дес тью част ми воды в течение 1 ч и охлаждают до 40°С 2.

Недостатками известного способа вл ютс длительность процесса тепловой обработки (пропаривание до 1 ч и ферментативный гидролиз до 17-48 ч), недостаточно полное разрушение клеток хлореллы, что снижает усво емость ее белков при включении в корма дл животных, и низкий выход белковых веществ из клеток, а также добавление толуола в гидролизуемую смесь и последующее его отделение от гидролизата .

Цель изобретени - более полное разрущение клеточных оболочек и увеличение тем самым выхода белковых веществ.

Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу разрушени клеточной оболочки хлореллы, предусматривающему тепловую обработку суспензии хлореллы , охлаждение ее с последующим ферментативным гидролизом, тепловую обработку суспензии осуществл ют при 85-95°С в течение 3-5 мин с последующим ее охлаждением до 45-58°С,а ферментативный гидролиз провод т путем обработки водной суспензии хлореллы культурой гриба Trichoderma lignorurn 6 С 6 течение 1-3.

Причем культуру гриба Trichoderma lignorum 6С внос т в количестве 250-400 кд 5 С, фермента на 100 г сухого веса хлореллы .

Способ осуществл ют следующим образом .

Суспензию хлореллы с влажностью биомассы не менее 80% подвергают нагреву, например, на вод ной бане при 85-95°С в течение 3-5 мин с последующим охлаждением до 45-48°С. Затем провод т гидролиз культурой гриба Trichoderma lignorum 6С

5 в течение 1-3 ч в количестве 250-400 ед С-фермента на 100 г сухого веса хлореллы. После тепловой обработки фермент и хлореллу суспендируют в воде (1000 мл воды на 100 г сухого вещества) при 4,8 и инкубируют 1-3 ч при 48-50°С.

В случае разрушени клеточной оОолочки высушенной хлореллы ферментативному гидролизу подвергают суспензию биомассы, предварительно высушенной при 110-130°С, без ее тепловой обработки при соотношении

5 воды и абсолютно сухого вещества хлореллы 10:1.

Пример 1. Ферментативный способ разрущени клеточных оболочек пастообразной хлореллы.

Пастообразную хлореллу (влажность

биомассы не менее 80%) подвергают нагреву на вод ной бане 3-5 мин при 85 и 95°С и провод т гидролиз культурой гриба Trichoderma lignorum 6С в количестве 400 ед С-фермента на 100 г абсолютного сухого

5 веса хлореллы.

После тепловой обработки фермент и хлореллу суспендируют в воде (1000 мл воды на 100 г сухого вещества) при рН 4,8 и инкубируют в течение 1-3 ч при 48-50°С с

перирдическим перемешиванием. 0

Дл определени степени гидролиза клеток- смесь центрифугируют при 6000 об/мин 5 мин и в надосадочной жидкости определ ют выход растворимого бел5 ка.

Данные исследований вли ни ферментативного гидролиза на выход в супернатант растворимого белка при предварительной тепловой обработке приведены в таблице. Результаты таблицы показывают, что количество белка, вышедшего в раствор из клеток, составл ет 3 ч инкубации от общего количества белка в пробе (в контроле 5,3%), т.е. при данной обработке полностью происходит выход всех водорастворимых белков из клеток в раствор. Продолжительность предварительной тепловой обработки хлореллы в течение трех и п ти минут обеспечивает одинаковое количество белка, вышедшего из клеток в раствор. Пример 2. Ферментативный способ разрушени клеточных оболочек высушенной хлореллы. На 100 г хлореллы, высушенной при 110°С, добавл ют культуру гриба Trichoderma lignorum 6 С в количестве 5 г (400 ед. С-фермента на 100 г абсолютно сухого вещества) и провод т гидролиз, аналогично гидролизу пастообразной хлореллы по примеру 1, но без предварительной тепловой обработки суспензии клеток хлореллы, при соотношении воды и абсолютно сухого веса хлореллы 10:1. После гидролиза содержание белка в супериатанте составл ет 17% от обшего его количества в образце. Преимуществом предлагаемого способа разрушени клеточной оболочки хлореллы вл етс сокращение времени проведени ферментативного гидролиза примерно в 6 раз, исключение операции добавки в гидролизуемую смесь толуола, вл ющегос токсичным легковоспламен ющимс веществом , сокращение времени тепловой обработки до 5 мин вместо 1 ч со снижением температуры до 85-95°С вместо 100°С, исключение операции тепловой обработки суспензии высушенной хлореллы, сокращение расхода электроэнергии в 5-16 раз и увеличение выхода белка в раствор до 17% от общего количества в-место 11%.

Claims

1. СПОСОБ РАЗРУШЕНИЯ КЛЕТОЧНОЙ ОБОЛОЧКИ ХЛОРЕЛЛЫ, пре дусматривающий тепловую обработку суспензии хлореллы, охлаждение ее с последующим ферментативным гидролизом, отличающийся тем, что, с целью более полного разрушения клеточных оболочек и увеличения тем самым выхода белковых веществ, тепловую обработку суспензии осуществляют при 85-95°С в течение 3-5 мин с последующим ее охлаждением до 45-48°С, а ферментативный гидролиз проводят путем обработки водной суспензии хлореллы культурой гриба Trichoderma lignorum 6 С в течение 1-3 ч.

2. Способ по π. 1, отличающийся тем, что культуру гриба Trichoderma lignorum 6 С вносят в количестве 250-400 кд С» фермента на 100 г сухого веса хлореллы. § >