RU2033427C1 - Способ выделения рибофлавина - Google Patents
Способ выделения рибофлавина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2033427C1 RU2033427C1 SU915010244A SU5010244A RU2033427C1 RU 2033427 C1 RU2033427 C1 RU 2033427C1 SU 915010244 A SU915010244 A SU 915010244A SU 5010244 A SU5010244 A SU 5010244A RU 2033427 C1 RU2033427 C1 RU 2033427C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- riboflavin
- fermentation
- solution
- isolation
- centrifugation
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P25/00—Preparation of compounds containing alloxazine or isoalloxazine nucleus, e.g. riboflavin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: биотехнология. Сущность изобретения: способ предусматривает нагрев полученной после ферментации суспензии рибофлавина с максимальным содержанием сухих веществ при температуре 35 - 55°С в квазианаэробных условиях в течение 6 - 28 ч и при значении pH 4 - 9. Из полученного после индуцированного автолиза раствора, содержащего рибофлавин, последний выделяют центрифугированием, декантированием и сушат. 2 з.п. ф-лы, 3 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологическому способу получения рибофлавина (витамина В2), в частности к способу выделения рибофлавина из раствора ферментации.
Известен способ выделения рибофлавина из раствора ферментации, на котором раствор ферментации, содержащий максимальное количество рибофлавина, в течение 15-45 мин нагревают при температуре 50-65оС с последующим разбавлением 25-100 об. водой, полученный разбавленный раствор подвергают центрифугированию с последующим суспендированием полу- ченного центрифугата в 100-300 об. воде и повторным центрифугированием, и в случае необходимости сушкой центрифугата, причем с целью повышения степени выделения путем солюбилизации протеинсодержащего или подобного протеину материала или его перевода в материал сниженной плотности, поддающийся отделению путем центрифугирования, перед центрифугированием можно обрабатывать раствор протеолитическим энзимом при значении рН 6,0-9,0 в течение 1-5 ч [1]
Недостаток известного способа заключается в том, что из-за разбавления получают значительно большее количество суспензии ферментации, подлежащей обработке, вследствие чего значительно повышаются расходы на обработку и потери рибофлавина из-за растворенного в добавленной воде рибофлавина. Кроме того, несмотря на использование сравнительно дорогостоящих протеолитических энзимов, выход не полностью удовлетворяет.
Недостаток известного способа заключается в том, что из-за разбавления получают значительно большее количество суспензии ферментации, подлежащей обработке, вследствие чего значительно повышаются расходы на обработку и потери рибофлавина из-за растворенного в добавленной воде рибофлавина. Кроме того, несмотря на использование сравнительно дорогостоящих протеолитических энзимов, выход не полностью удовлетворяет.
Задача изобретения заключается в развитии способа, позволяющего при ферментации рибофлавина по возможности простым и экономичным образом повысить содержание рибофлавина в сушенном, в частности прошедшем распылительную сушку, продукте ферментации и до минимума сократить потери рибофлавина во время переработки.
Поставленная задача решается в способе выделения рибофлавина из раствора ферментации путем обработки раствора, содержащего максимальное количество рибофлавина, отделения содержащего рибофлавин осадка от раствора и сушки за счет того, что обработку осуществляют в условиях, индуцирующих автолиз полученных клеток.
Под индукцией автолиза понимают образование и активацию собственных внутриклеточных энзимов, разлагающих стенки клеток и протеины.
Автолиз микроорганизмов может индуцироваться путем т.н. факторов стресса в микроорганизмах.
Такими факторами стресса для микроорганизмов являются, например, нехватка питательных веществ, повышение температуры, нехватка кислорода, изменения значения рН и изменения давления или осмотического давления в среде, а также добавление к среде солей, тензидов или жирных кислот и облучение ультрафиолетовым светом или рентгеновскими лучами (Acta Biotechnol, 5, 1985, 2, с. 129-136).
В качестве образующих рибофлавин микроорганизмов можно использовать, например, штамм-продуцент Ashbya gossypii и его мутанты, штамм-продуцент Eremothecium ashbyii и его мутанты, и микроорганизмы родов Candida, Torulopsis, Bacillus или Saccharomyces.
Особенно пригодным фактором стресса является повышение при нехватке кислорода.
Таким образом, у образующих рибофлавин штаммов Ashbya gossypii и его мутантов образование и активацию энзимов, разлагающих стенки клеток и протеины, можно индуцировать путем нагревания раствора ферментации, содержащего максимальный выход рибофлавина, при температуре 35-55оС, предпочтительно 40-49оС, в частности 40-48оС, а именно при значении рН 4-9, предпочтительно 5-8, в частности 6-7, при почти полном исключении кислорода, т.е. без вентиляции, в течение 6-28 ч, предпочтительно 14-24 ч.
Получение рибофлавина путем ферментации или брожения известно. Данный метод включает стерилизацию питающей среды и прививку в нее способного к образованию рибофлавина микроорганизма, например Ashbya gossypii или Eremothecium ashbyii, с последующим инкубированием. При достижении или примерном достижении выхода рибофлавина путем ферментации максимума ферментацию оканчивают. После предлагаемого индуцированного автолиза раствора ферментации рибофлавин можно выделять известным образом путем центрифугирования или декантирования и последующей сушки осадка. Сушку можно осуществлять путем распылительной сушки.
П р и м е р 1. По окончании ферментации рибофлавина, при которой в растворе ферментации достигнуто содержание рибофлавина > 5 г/л, раствор при указанных в табл. 1 значениях рН и при умеренном размешивании без введения воздуха нагревают при температуре 45оС в течение 17 ч. Затем твердые компоненты нагреваемого таким образом раствора ферментации в лабораторной центрифуге количественно осаждают. Осадок затем сушат до того, как вес больше не изменяется, и определяют содержание рибофлавина в сушенном осадке.
П р и м е р 2. По окончании ферментации рибофлавина в сосуде ферментации емкостью 2000 л, при которой достигнуто содержание рибофлавина > 5 г/л, раствор ферментации в квазианаэробных условиях (умеренное размешивание без введения воздуха) при значении рН, равном 6,8, инкубируют при температуре 45оС в течение 24 ч. Затем автолизованный раствор ферментации декантируют и подвергают распылительной сушке. При этом содержание рибофлавина в прошедшем распылительную сушку осадке составляет 90 мас.
П р и м е р 3. По окончании ферментации рибофлавина, осуществляемой с использованием штамма Ashbya gossypii, полученный раствор ферментации, имеющий содержание рибофлавина > 5 г/л, при умеренном размешивании без введения воздуха при значении рН 6,5, инкубируют при температуре 45оС. Несколько раз отбирают пробы, каждый раз по истечении 2-4 ч. Для исследования проб 45 мл пробы подвергают центрифугированию в лабораторной центрифуге при 2200 об. в 1 мин в течение 5 мин. Затем осадок ресуспендируют в одинаковом количестве 0,9% -ного водного раствора поваренной соли и дополнительно центрифугируют в указанных выше условиях. Затем полученный осадок подвергают лиофилизации. Результаты приведены в табл.2.
П р и м е р 4. По окончании ферментации рибофлавина с использованием Ashbya gossypii полученный раствор ферментации, имеющий содержание рибофлавина, превышающее 5 г/л, разделяют и инкубируют.
Пробы затем центрифугируют в лабораторной центрифуге, полученный осадок дважды промывают солевым раствором, ресуспендируют и вновь центрифугируют. Затем осадок лиофилизуют. Полученные результаты приведены в табл.3.
Путем нагревании при температуре 50-60оС в течение 45 мин (согласно прототипу) достигается лишь открытие содержащих рибофлавин клеток, благодаря чему содержание клеток может вытекать. Поэтому в микроскопическом изображении стенки клеток (в опытах А и Б) полностью сохранились, и биомасса содержится в лиофилизованном осадке. В отличии от этого в условиях автолиза согласно изобретению (опыт 1) клетки полностью разлагаются энзимом, т.е. в микроскопическом изображении раствора ферментации не видно ни клеток, ни стенок клеток.
Claims (3)
1. СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ РИБОФЛАВИНА, предусматривающий нагрев ферментативной суспензии рибофлавина, содержащей максимальное количество рибофлавина, отделение содержащего рибофлавин осадка от жидкой фракции центрифугированием и сушку, отличающийся тем, что нагрев ферментативной суспензии ведут при 35 - 55oС в квазианаэробных условиях в течение 6 28 ч и pH 4 9.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что нагрев осуществляют при 40 - 49oС.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что нагрев осуществляют в течение 14 24 ч.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DEP4037441.6 | 1990-11-24 | ||
DE4037441A DE4037441A1 (de) | 1990-11-24 | 1990-11-24 | Verfahren zur erhoehung des riboflavin-gahaltes in spruehgetrockneten fermenteraustraegen bei riboflavin-fermentationen |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2033427C1 true RU2033427C1 (ru) | 1995-04-20 |
Family
ID=6418862
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU915010244A RU2033427C1 (ru) | 1990-11-24 | 1991-11-22 | Способ выделения рибофлавина |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5981212A (ru) |
EP (1) | EP0487985B1 (ru) |
JP (1) | JP2525529B2 (ru) |
CA (1) | CA2056040A1 (ru) |
DE (2) | DE4037441A1 (ru) |
DK (1) | DK0487985T3 (ru) |
ES (1) | ES2085402T3 (ru) |
RU (1) | RU2033427C1 (ru) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6573074B2 (en) * | 2000-04-12 | 2003-06-03 | Smithkline Beecham Plc | Methods for ansamitocin production |
EP1731617A1 (de) * | 2005-06-06 | 2006-12-13 | DSM IP Assets B.V. | Rückführung lysierter Biomasse als Nährmedium bei der fermentativen Herstellung von Riboflavin |
MY176569A (en) * | 2014-12-10 | 2020-08-17 | Basf Se | Method of removing dna from biotechnological products |
CN114410536B (zh) * | 2022-01-28 | 2023-12-26 | 北京四良科技有限公司 | 一种细菌培养释放胞内酶的方法 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES367258A1 (es) * | 1969-05-14 | 1969-10-01 | Melgarejo Osborne | Procedimiento para el aprovechamiento como pienso de la le-vadura de cerveza por autolisis rapida. |
RO60041A2 (ru) * | 1973-11-13 | 1976-06-15 | ||
US4165250A (en) * | 1975-08-29 | 1979-08-21 | Merck & Co., Inc. | Riboflavin purification |
DE3007829C2 (de) * | 1980-02-29 | 1987-01-29 | Institut evoljucionnoj morfologii i ekologii životnych imeni A.N. Severcova Akademii Nauk SSSR, Moskau/Moskva | Verfahren zur Herstellung eines Vitaminkonzentrats für Nahrungszwecke |
FR2481079A1 (fr) * | 1980-04-28 | 1981-10-30 | Inst Evoljutsionnoi Morfolo | Procede de preparation d'un concentre vitaminique alimentaire a partir de levures alimentaires et concentre vitaminique obtenu par ledit procede |
CH668081A5 (de) * | 1983-06-02 | 1988-11-30 | Vnii Genetiki Selek | Verfahren zur herstellung von riboflavin. |
BR8402432A (pt) * | 1984-05-02 | 1985-12-24 | Univ Pernambuco | Processo para producao de hecogenina a partir da fermentacao anaerobica do suco de sisal |
DE3689174T2 (de) * | 1985-07-29 | 1994-02-03 | Daicel Chem | Verfahren zur Herstellung von Riboflavin. |
DE3688245T2 (de) * | 1985-12-20 | 1993-10-21 | Zeagen Inc | Herstellung von Riboflavin mit Hefe. |
JPS63112965A (ja) * | 1986-06-09 | 1988-05-18 | Takeda Chem Ind Ltd | 酵母エキスの製造法 |
JPS6365312A (ja) * | 1986-09-08 | 1988-03-23 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 角速度センサ |
-
1990
- 1990-11-24 DE DE4037441A patent/DE4037441A1/de not_active Withdrawn
-
1991
- 1991-11-14 DK DK91119429.8T patent/DK0487985T3/da active
- 1991-11-14 EP EP91119429A patent/EP0487985B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-11-14 DE DE59107684T patent/DE59107684D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-11-14 ES ES91119429T patent/ES2085402T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-11-20 US US07/795,158 patent/US5981212A/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-11-22 JP JP3307364A patent/JP2525529B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1991-11-22 CA CA002056040A patent/CA2056040A1/en not_active Abandoned
- 1991-11-22 RU SU915010244A patent/RU2033427C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Патент ФРГ N 2920592, кл. C 12P 25/00, опублик.1979. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE59107684D1 (de) | 1996-05-23 |
CA2056040A1 (en) | 1992-05-25 |
DK0487985T3 (da) | 1996-05-13 |
JP2525529B2 (ja) | 1996-08-21 |
EP0487985A2 (de) | 1992-06-03 |
US5981212A (en) | 1999-11-09 |
DE4037441A1 (de) | 1992-05-27 |
EP0487985B1 (de) | 1996-04-17 |
EP0487985A3 (en) | 1993-05-19 |
ES2085402T3 (es) | 1996-06-01 |
JPH04316495A (ja) | 1992-11-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4218481A (en) | Yeast autolysis process | |
FI58513B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett stabilt glukosisomerasenzymkoncentrat | |
Lukondeh et al. | Evaluation of Kluyveromyces marxianus as a source of yeast autolysates | |
US3649455A (en) | Production of lipase | |
RU2033427C1 (ru) | Способ выделения рибофлавина | |
US4165250A (en) | Riboflavin purification | |
US3960659A (en) | Treatment of proteinaceous material | |
US3996104A (en) | Process for preparing from a microbial cell mass a protein concentrate having a low nucleic acid content, and the protein concentrate thus obtained | |
US3934039A (en) | Process for the production of microorganism lysates | |
EP0072978B1 (de) | Verfahren zur Herstellung saurer Protease | |
US4133904A (en) | Treatment of single cell protein | |
RU2148636C1 (ru) | Способ получения дрожжевого низкомолекулярного экстракта и вещество, получаемое этим способом | |
SU1138073A1 (ru) | Способ разрушени клеточной оболочки хлореллы | |
US3627095A (en) | Nutritive protein from cellulose | |
CA2044781A1 (en) | Spheroplast fusions of phaffia rhodozyma cells | |
US2904439A (en) | Yeast extraction | |
US3997397A (en) | Production of proteic materials from yeast cells | |
US3663373A (en) | Process for the preparation of iodinin | |
US3832284A (en) | Method for manufacture of alpha-galactosidase by microorganisms | |
SU884574A3 (ru) | Способ получени протеина из суспензии микроорганизмов | |
RU1836420C (ru) | Способ выделени выращенных клеток микроорганизмов из питательного бульона | |
RU2084171C1 (ru) | Способ получения осветленного экстракта автолизированных дрожжей | |
RU2742054C1 (ru) | Способ получения нуклеината натрия из биомассы микроводоросли Chlorella vulgaris Beijerink | |
RU2742056C1 (ru) | Способ получения нуклеината натрия из микроводоросли Chlorella vulgaris Beijerink | |
SU1056909A3 (ru) | Способ получени глицерин-дегидрогеназы |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20091123 |