SK82795A3

SK82795A3 - Difluoropentapeptide derivatives of antiinflammatory agents

Info

Publication number: SK82795A3
Application number: SK827-95A
Authority: SK
Inventors: John Mcmillan Mciver
Original assignee: Procter & Gamble
Priority date: 1992-12-22
Filing date: 1993-12-16
Publication date: 1995-12-06
Also published as: PE5195A1; NO952485L; JPH08505143A; AU697299B2; AU5803994A; FI953106A0; CA2152267A1; BR9307728A; PL177914B1; CZ286126B6; FI953106A; RU95113497A; RU2141971C1; KR950704350A; PL309638A1; NO952485D0; CZ164595A3; WO1994014842A1; HUT72977A; CN1095072A

Description

Protizápalové zlúčeniny všeobecného vzorca I, (v ktorom význam substituentov je uvedený v opise), sú obsiahnuté vo farmaceutických prípravkoch, ktoré sa používajú na liečenie zápalov alebo bolestí.

R¹ R²R

I II x- (CH₂>_n-V-Z-CH-C(O)-NH-CH-CH-C(O) -NH-CH š 4I

R⁵ R⁴C«O

YO-C(O) -CH-NH-C(O) -CH-NH-C(O) -CP₂

Difluoropentapeptidové deriváty protizápalových činidiel

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka nových peptidových derivátov, ktoré sa používajú ako protizápalové činidlá.

Doterajší stav techniky

Určité polypeptidové deriváty s rôznou biologickou aktivitou sú známe. Nasledujúce odkazy popisujú takéto polypeptidové deriváty : US patent č. 4 242 329, vydaný Claesonovi, Simonssonovi a Arielly-ovi 30. decembra 1980, US patent č. 4 316 889 vydaný

Bajuszovi, Hasenohri-ovi, Barabasovi a Bagdymu 23. februára 1982, US patent č. 4 399 065, vydaný Bajuszovi, Hasenohri-ovi, Barabasovi a Bagdymu 16. augusta 1983, US patent č. 4 401 594, vydaný Umezawovi, Takeuchiovi, Aoyagi-ovi, Sainovi a Somenovi 30. augusta 1983, US patent č. 4 478 745 Bajuszovi, Hasenohri-ovi, Barabasovi a Bagdymu 23. októbra 1984, US patent č. 4 528 133, vydaný Kasafírkovi, Fricovi, Slabému a Robalovej 9. júla 1985, US patent č. 4 596 789, vydaný Dutta-ovi, Steinovi, Trainorovi a Wildongerovi 24. júna 1986, US patent č. 4 623 639, vydaný Hassalovi,

Johnsonovi a Robertsovi 18. novembra 1986, US patent č. 4 703 036 vydaný Bajuszovi, Hasenohri-ovi, Barabasovi, Bagdymu, Dioszegiovi, Fittlerovi, Jozsa-ovi, Horváthovi a Jozstovi 27. októbra 1987, US patent č. 4 880 780, vydaný Trainorovi a Steinovi 14.

novembra 1989, US patent č. 4 883 863, vydaný Abeovi, Yaginumovi, Nagasawa-ovi a Kuroiwa-ovi 28. novembra 1989, US patent č. 4 923 890, vydaný Trainorovi a Steinovi 8. mája 1990, US patent č.

066 643, vydaný Abelesovi a Gelbovi 19. novembra 1991, PCT patentová prihláška č. 84/00365 Galpina a Wilbiho, publikovaná 2. februára 1985, PCT patentová prihláška č. 87/02675 Hoovera, publikovaná 7. mája 1987, japonská patentová prihláška č.

47-30618 Toray Inds. Inc., publikovaná 9. novembra 1972, japonská patentová prihláška č. 57-145846 Mitsubishi Chem. Ind. KK, publikovaná 19. júla 1974, japonská patentová prihláška č. 58-164563 Daiichi Kagaku Yaku, publikovaná 25. marca 1982, európska patentová prihláška č. 0275101 Merrell Dow Pharmaceuticals, Inc., publikovaná 20. júla 1988, Aoyagi, Miyata, Nanbo, Kojima, Matsuzaki, Ishizuka, Takeuchi a Umezawa Biological Activities of Lepeptins, The Journal of Antibiotics, Vol. XXII, č. 11/november 1969/, str. 558-568, Bajusz, Barabas, Toinay, Szell a Bagdy Inhibition of Thrombin and Trypsin by Tripeptide Aldehydes, Int. J. Peptide Protein Res., Vol. 12 (1978), str. 217-221, Gaal, Bacsy a Rappay Cationic Ferritin Uptake by Cultured Anterior Pituitary Cells Trated with the Proteinase Inhibitor, BOC-DPhe-Phe-Lys-H, Histochemistry, Vol. 88 (1988), str. 401 až 406, Makara, Rappay, Garamvolgyi, Nagy, Danko a Bajusz The Tripeptide Aldehyde, Boc-DPhe-Phe-Lysinal, is a Novel Ca²⁺ Channel inhibitor in Pituitary|Cells : European Journal of Pharmacology, Vol. 151 (1988), str. 147 až 149, Nagy, Makara, Horvath, Rappay, Kurcz a Bajusz Tripeptide Aldehyde Protease Inhibitors May Depress in Vitro Prolactin and Growth Hormone Release, Endocrinology, Vol 116, č. 4 (1985), str. 1426 až 1432, Rappay, Makara, Bajusz a Nagy Various Proteinase Inhibitors Decrease Prolactin and Growth Hormone Release by Anterior Pituitary Cells Life Sciences, Vol. 36 (1985), str. 549 až 555.

Cieľom predloženého vynálezu je poskytnúť nové difluoropentapeptidové deriváty, ktoré sú použiteľné ako protizápalové činidlá.

Ďalším cieľom predloženého vynálezu je poskytnúť, nové difluoropentapeptidové deriváty, ktoré znižujú kostnú resorpciu a/alebo heterotropnú tvorbu kostí spojenú s reumatoídnou artritídou .

Cieľom vynálezu je tiež uvedenie nových farmaceutických prípravkov, obsahujúcich určité difluoropentapeptidové deriváty.

Cieľom vynálezu je tiež uvedenie metódy liečenia zápalových chorôb použitím zlúčenín podľa vynálezu.

Podstata vynálezu

Predložený vynález sa týka protizápalových zlúčenín nasledujúceho vzorca (I)

R¹ R²R

I II

X-(CH₂)_n -V-Z-CH-C(O)-NH-CH-CH-C(0)-NH-CH

R⁵ R⁴Č=0

I II

YO-C(O)-CH-NH-C(O)-CH-NH-C(O)-CF₂ (I) kde

a) X je zvolený zo skupiny zahrňujúcej cyklický alkyl so 4 do asi 15 atómami uhlíka, rozvetvený alkyl s aspoň dvoma rozvetveniami so 6 do asi 15 atómami uhlíka a arylalkyl so 6 do asi 15 atómami uhlíka,

b) n je celé číslo od 0 do asi 2

c) -V- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej -0C(0)-, -N.(Q)C(O)-, -N(Q)C(S)-, -C(0)-, -S0₂- a -P(O)(OH)-,

d) -Q je vodík, alebo priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómov uhlíka, alebo -Q- a -X- sú kovalentne naviazané za tvorby cyklickej skupiny, ktorá obsahuje dusík, ku ktorému je Q naviazané a od asi 5 do asi 20 atómov uhlíka,

e) Z je -0- alebo -NH-, ak je V -0C(0)-, je -Z- -NH-,

f) -R¹ je zvolený zo skupiny zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómov uhlíka, cyklický alkyl nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 arylalkyl, v atómy uhlíka dvojnými väzbami s 3 do asi 10 atómami uhlíka a ktorom alifatická časť, je nasýtená a má 1 alebo 2 a uhlíkový atóm naviazaný k -R¹ je buď v D alebo

L konfigurácii,

g) -R² je zvolený zo skupiny zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómami uhlíka, cyklický alkyl nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 3 do asi 10 atómami uhlíka, a arylalkyl, v ktorom alifatická časť je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka a uhlíkový atóm naviazaný k -R je v L konfigurácii,

h) -R³ je -(CH₂)_m-A-NH₂ alebo -(CH₂)_m-A-B-C(NH₂)NH, v ktorom m je celé číslo od 1 do asi 6, -A- je kovalentná väzba alebo p-fenyl alebo p-cyklohexy| a -B- je kovalentná väzba alebo -NH a uhlíkový atóm naviazaný k -R³ je v L konfigurácii,

i) -R⁴ je zvolené zo skupiny zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómami uhlíka, cyklický alkyl nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 3 do asi 10 atómami uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka a uhlíkový atóm naviazaný k -R⁴ je v L konfigurácii,

j) -R⁵ je -(CH₂)_m-A-NH alebo -(CH₂)_m-A-B-C(NH₂)=NH, v ktorom m je celé číslo od 1 do asi 6, -A- je kovalentná väzba alebo p-fenyl alebo p-cyklohexyl a -B- je kovalentná väzba alebo -NH- a uhlíkový atóm naviazaný k -R⁵ je v D alebo v L konfigurácii a

k) Z je vodík alebo metyl.

Vynález zahrňuje tiež farmaceutické prípravky obsahujúce vyššie uvedené zlúčeniny a spôsoby liečenia zápalov alebo bolestí použitím týchto zlúčenín a prípravkov.

Výraz alkyl tak, ako je tu používaný, pokiaľ nie je inak uvedené, zahrňuje uhlík obsahujúce reťazce, ktoré môžu byť. priame, rozvetvené alebo cyklické, ktoré môžu byť nasýtené alebo nenasýtené a ktoré môžu byť nesubstituované alebo substituované. Použitý výraz cyklický alkyl môže mať všetky alebo len časť tu uvedeného celkového počtu atómov uhlíka v alkylovej skupine, v cyklickom kruhu samotnom. Cyklický alkyl zahrňuje monocykloal kyl, bicykloalkyl a/alebo tricykloalkyl.

Výhodnými alkylmi sú tie, ktoré sú uvedené v tomto odstavci. Výhodným alkylom je alkyl nasýtený. Výhodné alkyly sú nesubstituováné. Uprednostňované alkylové substituenty sú zvolené z halogénu, amino, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, arylu a trifluormetylu. Tu používaný výraz alkoxy je -O-alkyl. Je výhodné, ak substituovaný alkyl je mono-, di- alebo tri- substituovaný, najmä monosubstituovaný.

Výraz aryl tak, ako je tu používaný, pokiaľ nie je inak uvedené, zahrňuje arylové kruhy, ktoré môžu byť nesusbtituované alebo substituované. Výhodným arylom je ten, ktorý je uvedený v tomto odstavci, pokiaľ nie je uvedené inak v jednotlivých príkladoch uskutočnenia. Preferovaným arylom je fenyl a naftyl, najmä však fenyl a mono-, di,- tri- alebo i nesubstituovaná aryly. Výhodnejším arylom je monosubstituovaný alebo nesubstituovaný, najmä nesubstituovaný. Preferované arylové substituenty zahrňujú alkyl, halogén, amino, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro a trifluormetyl.

Výraz arylalkyl tak, ako je tu používaný, znamená alkyl substituovaný arylom. Výhodným arylalkylom je arylmetyl.

Výraz alifatický tak, ako je tu používaný, znamená otvorený uhlíkatý reťazec, obsahujúci časti arylalkylov.

Popis obsahuje nasledujúce skratky, ktoré pre aminokyseliny môžu označovať aminokyseliny samotné alebo častejšie

aminokyselinové derivátov.

skupiny, ktoré sú časťou štruktúry peptidových

Arg Orn	arginyl ornityl
Leu	leucinyl
Gly t-Bug Phe	glycyl terc, butylglycyl fenylalanyl

Adoc	adamantyloxykarbonyl
Z	benzyloxykarbonyl
Boe	terc. butyloxykarbonyl
DECP	dietylkyanofosfonát
Me	metyl
Et	etyl
TEA	trietylamín
DMF	dimetylformamid
TFA	trifluoracetát
ipa Bn	izopropanol benzyl
Lys Ac	lyzyl acetyl
TLC	tenkovrstevná chromatografia
TSA	kyselina toluénsulfónová
THF	tetrahydrofurán
HOBt	hydroxybenzotriazol
DCC	dicyklohexylkarbodiimid
DIPEA	N,N-diizopropyletylamín
Chg Cha	cyklohexylglycyl cyklohexylalanyl
Nal	neftylalanyl
Trp Adg pGphe 3,5-Dmadoc	tryptofyl adamantylglycyl p-guanidinofenylalanyl 3,5-dimetyladamantyloxykarbonyl
eBroc	endo-borny1oxykarbonyl
Noc	naftyloxykarbonyl
Moc	mentyloxykarbonyl
Ad	adamantoyl
Fmoc	fluorenylmetoxykarbonyl
Ada	adamantanacetyl
Adac	adamantylaminokarbonyl
Mnoc	morfolinyl
Norad	noradamantoyl
Hadoc	homoadamanty1oxykarbonyl
Foc	fenyloxykarbonyl
Imoc	izometyloxykarbonyl

Ipoc izopinokamfanyloxykarbonyl

HPLC vysokotlaková kvapalinová chromatografia

Novými protizápalovými zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú tie, ktoré majú nasledujúci chemický vzorec :

R¹ R²R

I

X-(CH₂)_n-V-Z-CH-C(0)-NH-CH-CH-C(0)-NH-CH

R⁵ R⁴C=0

I

YO-C(O)-CH-NH-C(O)-CH-NH-C(O)-CF₂(I)

Vo vzorci (I) je n celé číslo od 0 do asi 2, výhodne je n 0 alebo 1.

Vo vzorci (I) je -R¹ zvolené zo skupiny, zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómami uhlíka; cyklický alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 3 do asi 10 atómami uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť, je nasýtená a ma 1 alebo 2 atómy uhlíka. Preferovaný -R^x je nasýteným alkylom. Výhodnými alkylmi sú alkyly nenasýtené, alebo sú to arylalkyly, najmä benzyl a naftyl. Výhodným cyklickým alkylom je cyklický C₂ - Cg (výhodnejším C₅ - Cg) metyl alebo adamantylmetyl. Preferovaný -R¹ je hydrofóbny, výhodne s hydrofobicitou koncentrovanou tesne k atómu uhlíka, ku ktorému je -R¹ naviazaný. Špecifické príklady takýchto -R¹ zahrňujú terc, butyl, 1,1-dimetylpropyl, izopropyl, izobutyl, sek. butyl, neopentyl, cyklohexyl, cyklohexylmetyl, adamantyl, adamantylmetyl.

Vo vzorci (I) je uhlík, ku ktorému je -R¹ naviazaný, buď v D alebo v L konfigurácii, -výhodne v konfigurácii D. Štruktúra -ZCH(R¹)-C(0)- je aminokyselinovou skupinou ( ďalej -AA¹), ak je -Z- -NH ; preferované aminokyselinové skupiny pre -AA¹- zahrňujú t-Bug, Val, íle, Leu, Chg, Cha, Phe, Nal, Trp a Adg; výhodnejšie sú to t-Bug, Val a íle, najvýhodnejšie je -AA¹- t-Bug.

n

Vo vzorci (I) je -R zvolene zo skupiny, zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómami uhlíka; cyklický alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 3 do asi 10 atómami uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť: je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka. Preferovaným rozvetveným alebo cyklickým alkylom je alkyl nasýtený a nesubstituovaný. Rozvetvený alkyl má 3 až 5 atómov uhlíka, najvýhodnejším rozvetveným alkylom je izobutyl.

Preferovaný cyklický alkyl má C-j-C·?, výhodnejšie C^-Cg, cyklický kruh naviazaný k metylénu, etylénu alebo n-propylénu (výhodne metylénu alebo etylénu, výhodnejšie metylénu), ktorý je naviazaný na atóm uhlíka vo vzorci (I), ku ktorému je -R¹naviazaný. Preferovaným arylalkylom je benzyl, p-hydroxybenzyl a naftyl.

.v

Výhodný -R je zvolený zo skupiny zahrnujúcej izopropyl, izobutyl, sek. butyl, cyklohexylmetyl, benzyl a naftyl; najvýhodnejším je benzyl.

Vo vzorci (I) je uhlík, na ktorom je -R naviazaný, bud v D alebo v L konfigurácii, výhodne v konfigurácii D. Štruktúra -ZCH(R²)-C(O) - je aminokyselinovou skupinou (ďalej -AA²-), výhodné aminokyselinové skupiny pre -AA²- zahrňujú Phe, Nal, Cha, Leu n a íle, najvýhodnejšou je -AA-Phe.

Vo vzorci (I) je -R² -(CH₂)_m-A-NH₂ alebo

-(CH₂)_m-A-B-C(NH₂)=NH, pričom m je celé číslo od 1 do asi 6, -Aje kovalentná väzba, p-fenyl alebo p-cyklohexyl a -B- je kovalentná väzba alebo -NH-. Ak -A- je kovalentná väzba, je m výhodne 2-5, výhodnejšie 2-4, ešte výhodnejšie 3 alebo 4. Ak -Aje p-fenyl alebo p-cyklohexyl, je m výhodne 1-4, výhodnejšie 1-3, ešte výhodnejšie 1. -A- je výhodne kovalentná väzba, -B- je výhodne -NH-. Ešte výhodnejšie je -R² 3-guanidino-n-propyl alebo

4-amino-n-butyl.

Vo vzorci (I) je uhlík, na ktorom je -R³ naviazaný, buď v D alebo v L konfigurácii, výhodne v konfigurácii D. Štruktúra -NH-(CH(R³)-C(0)- je aminokyselinovou skupinou (ďalej -AA³-), výhodné aminokyselinové skupiíny pre -AA³- zahrňujú Arg, Lys, homo-Arg, p-amidino-phe a pGphe; najpreferovanejšou -AA³ - je Lys, íle, najvýhodnejšou je -AA²-Phe.

Vo vzorci (I) je -R⁴ zvolené zo skupiny, zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómov uhlíka, cyklický alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 3 do asi 10 atómami uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť, je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka. Preferované rozvetvené alebocyklické alkyly sú nasýtené a nesubstituované. Rozvetvený alkyl má 3 až 5 atómov uhlíka, najvýhodnejším rozvetveným alkylom je izobutyl. Cykloalkyl má C₃-C₇, výhodnejšie C₅-Cg cyklické kruhy naviazané na metyléne, etyléne alebo n-propyléne (výhodne metyléne alebo etyléne, výhodnejšie na metyléne), ktorý je naviazaný na uhlíkový atóm vo vzorci (1), na ktorý je naviazaný -R⁴. Preferovanejší -R⁴ je zvolený zo skupiny, zahrňujúcej izopropyl, izobutyl, sek. butyl, cyklohexylmetyl, benzyl a naftyl, výhodnejší je benzyl.

Vo vzorci (I) je uhlík, na ktorý je -R⁴ naviazaný, buď v D alebo v L konfigurácii, výhodne v konfigurácii D. Štruktúra -NH-CH(R⁴)-C(O)- je aminokyselinovou skupinou (ďalej -AA⁴-), výhodné aminokyselinové skupiny pre -AA⁴- zahrňujú Phe, Nal, Cha, Leu a íle,· najvýhodnejšou je -AA⁴-Leu.

Vo vzorci (I) je -R⁵ skupinou -(CH₂)_m-A-NH₂ alebo -(CH₂)_m -A-B-C(NH₂)=NH, v ktorej m je celé číslo od 1 do asi 6, -A- je kovalentná väzba, p-fenyl alebo p-cyklohexyl a -B- je kovalentná väzba alebo -NH. Ak -A- je kovalentná väzba, je m výhodne 2-5, výhodnejšie 2-4, ešte výhodnejšie 3 alebo 4. Ak je -A- p-fenyl alebo p-cyklohexyl, je m výhodne 1-4, výhodnejšie 1-3, ešte výhodnejšie 1. -A- je výhodne kovalentná väzba, -B- je výhodne -NH-, ešte výhodnejšie je -R⁵ 3-guanidino-n-propyl alebo

4-amino-n-butyl.

Vo vzorci (I) je uhlík, na ktorý je -R⁵ naviazaný, buď v D alebo v L konfigurácii, výhodne v konfigurácii D. Štruktúra -NH-CH(R⁵)-C(O)- je aminókyselinovou skupinou (ďalej -AA⁵-), preferované aminokyselinové skupiny pre -AA⁵- zahrňujú Arg, homo-Arg, Lys, p-amidino-phe a pGphe; najvýhodnejšou -AA⁵- je Arg.

Vo vzorci (I) je Y vodík alebo metyl.

Vo vzorci (I) je Z -O- alebo -NH, výhodným -Z- je -NH.

Vo vzorci (I) je V zvolené zo skupiny -OC(O)-, -N(Q)C(O)-, -N(Q)C(S)-, -C(O)-, -SO2- a -P(O)(OH). Výhodné V je zvolené z -OC(O)- alebo -N(Q)C(O)-, najvýhodnejšie -V- je -OC(O)-. Ak je V -OC(O)-, Z je -NH.

Vo vzorci (I) je X zvolený z cyklického alkylu so 4 do asi 15 atómami uhlíka a s aspoň dvoma rozvetveniami, a arylu so 6 do asi 15 atómami uhlíka. Výhodný -X má od 6 do 12 atómov uhlíka, výhodnejšie -X má od 8 do 10 atómov uhlíka. Preferované alkylové časti X sú nasýtené, X je nesubstituovaný alebo je substituovaný nesubstituovaným alkylom alebo arylom. Takýmito cyklickými alkylmi sú monocykloalkyl, bicykloalkyl a tricykloalkyl, viac výhodnými sú bicykloalkyl a tricykloalkyl, najmä tricykloalkyl. Uvádzaný cykloalkyl má 5 alebo 6 atómov uhlíka, výhodnejšie 6 atómov uhlíka, v každom cyklickom kruhu. Vysoko preferovaným -X je adamantyl, ďalšími aryl-X sú fluorenyl, naftyl a fenyl, nesubstituované alebo substituované alkylom. Zvlášť výhodným aryl-X je naftyl a fluorenyl. Ak je -X aryl alebo cyklický alkyl, jen výhodne 1.

Vo vzorci (I) ak je -V -N(Q)C(O)- alebo -N(Q)C(S)-, je -Q zvolené zo skupiny, zahrňujúcej vodík; priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami s 1 do asi 6 atómov uhlíka; alebo -Q a -X sú kovalentne naviazané za vzniku cyklickej skupiny, ktorá obsahuje dusík, na ktorý je naviazané -Q a od asi 5 do asi 20 atómov uhlíka. Výhodné -Q-X má od 6 do 15 atómov uhlíka, výhodnejšie od 8 do 12 atómov uhlíka.

Výhodný -Q-X je nesubstituovaný alebo substituovaný nesubstituovaným alkylom alebo arylom. Výhodný cyklický

Q / \

-N - Xje monocyklický, bicyklický alebo tricyklický, výhodnejší je monocyklický, najvýhodnejším -Q je vodík.

Vo vzorci (I) preferovaný C-(CH₂)_n-V- (ďalej tu X'-) zahrňuje Adoc, Ad, Fmoc, Ada, Adac, Mnoc, Norad, Hadoc, Foc, Imoc, Ipoc a eBroc, najvýhodnejším -X'- je Adoc.

Uvádzané protizápalové zlúčeniny podľa predloženého vynálezu zahrňujú farmaceutický prijateľné soli vyššie uvedených zlúčenín. Zvlášú výhodné soli zahrňujú adičné soli, ktoré sú vytvorené silnou kyselinou s vyššie uvedenými zlúčeninami. Uprednostňované sú tie adičné soli, kde buď -R³ alebo -R⁴ alebo obidva sú protonova□ c né, čo dáva kladný náboj na -R a -R³ skupinách. Tieto zlúčeniny podľa vynálezu sú často asociované s jednou alebo viacerými molekulami vody vo forme hydrátov.

Protizápalové zlúčeniny, ktoré sú predmetom vynálezu, zahrňujú nasledujúce zlúčeniny :

Adoc-D-tBug-Phe-Lys-C(O)CF₂C(O)-Leu-Arg-OMe

Adoc-D-tBug-Phe-Lys-C(O)CF₂C(O)-Gly-Arg-OMe

Adoc-D-tBug-Phe-Lys-C(0)CF₂C(0)-D-Phe-Arg-OMe

Adoc-D-tBug-Phe-Lys-C(0)CF₂C(0)-Leu-D-Arg-OMe

Mnoc-D-Phe-Phe-Arg-C(0)-CF₂C(O)-Leu-Lys-OMe eBroc-D-tBug-Phe-pGphe-C(0)CF₂C(0)-Ala-Arg-OMe Ipoc-D-Nal-Phe-Arg-C(0)CF₂C(0)-Gly-Arg-OMe Adoc-D-Phe-Phe-Lys-C(0)CF₂C(0)-Leu-Arg-0H Noc-D-tBug-Phe-Lys-C(0)CF₂C(0)-Ala-Lys-OMe.

Farmaceutické prípravky

Farmaceutické prípravky podľa predloženého vynálezu obsahujú bezpečné a účinné množstvo difluoropentapeptidového derivátu a farmaceutický prijateľný nosič. Takéto prípravky typicky obsahujú od asi 0,1 % do asi 95 % hmotnostných difluoropentapeptidového derivátu, výhodne od asi 1 % do asi 90 % a -výhodnejšie od asi 5 % do asi 75 % hmotnostných.

Výraz farmaceutický prijateľný nosič tak, ako je tu popísaný, znamená jeden alebo viac kompatibilných pevných alebo kvapalných riedidiel, plnív alebo enkapsulačných substancií, ktoré sú vhodné na podanie človeku alebo nižším živočíchom, výraz kompatibilný tak, ako je tu použitý, znamená, že zložky farmaceutických prípravkov sú schopné sa kontaktovať, s difluoropentapeptidovým derivátom podľa vynálezu a s každou ďalšou zložkou tak, že nedochádza k žiadnej interakcii, ktorá by -významne znížila farmaceutickú účinnosť prípravku v bežných podmienkach použitia. Farmaceutický prijateľné nosiče musia, samozrejme, mať dostatočne vysokú čistotu a dostatočne nízku toxicitu, aby boli vhodné na podanie človeku alebo nižšiemu živočíchovi, ktorí sú liečení.

Niektorými príkladmi substancií, ktoré môžu byť farmaceutický prijateľnými nosičmi, sú cukry, ako je laktóza, glukóza a sacharóza, škroby, ako je kukuričný škrob a zemiakový škrob, celulóza a jej deriváty, ako je natriumkarboxymetylcelulóza, etylcelulóza a acetát celulózy, ďalej práškový tragant, slad, želatína, talok, kyselina stearová, stearát horečnatý, síran vápenatý, rastlinné oleje, ako je podzemnicový olej, olej zo semien bavlníka, sezamový olej, olivový olej, kukuričný olej a oleje teobroma, ďalej sú to polyoly, ako je propylénglykol, glycerín, sorbitol, mannitol a polyetylénglykol, ďalej kyselina alginová, apyrogénna voda, izotonický salinický roztok, roztoky fosfátových pufrov, kakaové maslo (čipkový základ), emulgátory, ako je Tween^R, zmáčacie činidlá a lubrikanty, ako je laurylsulfát sodný, farbiace činidlá, ochuťovacie činidlá, stabilizátory, antioxidanty, ochranné látky, ako i iné netoxické kompatibilné substancie používané vo farmaceutických prípravkoch. Vo farmaceutický prijateľnom nosiči na použitie podľa vynálezu môžu bytí zahrnuté ďalšie kompatibilné farmaceutické aditíva.

Farmaceutický prijateľný nosič použitý v spojení s difluoropentapeptidovýmderivátom.podľa vynálezu sa používa v koncentrácii postačujúcej na poskytnutie praktickej veľkosti vzhľadom k dávke. Farmaceutický prijateľný nosič tvorí asi od 5 % do 99,9 % hmotnosti farmaceutických prípravkov podľa vynálezu, výhodne od asi 10 % do asi 99 % a výhodnejšie od asi 25 % do asi 95 %.

Celkové jednotlivé dávky difluoropentapeptidových derivátov podľa vynálezu sa vo farmaceutických prípravkoch obecne používajú v množstvách od asi 1 mg do asi 1000 mg, výhodne od asi 50 mg do asi 800 mg, výhodnejšie od asi 100 mg do asi 500 mg.

Voľba farmaceutický prijateľného nosiča, ktorý bude používaný v spojení s difluoropentapeptidovými derivátmi podľa vynálezu je obmedzená typom podávania. Výhodnými spôsobmi podávania účinných látok podľa vynálezu sú injekčné, ingesčné, inhalačné a topické.

Spôsoby a materiály na výrobu injekcií sú popísané v Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. vyd., 1985, kapitola 85, str. 1518, ktorých popis je tu zahrnutý ako celok. Obecne sú preferované tri typy injekčných dávkových foriem : (1) vodné roztoky, (2) nevodné roztoky a (3) emulzie. Injekčné dávkové formy typicky obsahujú od asi 0,001 mg/ml do asi 10 mg/ml, výhodne od asi 0,4 mg/ml do asi 0,6 mg/ml zlúčeniny podľa vynálezu. Injektovatel'né dávkové prípravky podľa vynálezu zahrňujú sterilné vodné roztoky alebo emulzie s pH od asi 3 do asi 8 (výhodnejšie pH je asi od 4 do asi 6).

Preferované farmaceutické nosiče, v ktorých môžu byť. difluoropentapeptidové deriváty podľa vynálezu podávané ingesčne, sú proteinoidnými . mikrokapsulami popísanými v nasledujúcich patentoch : US patent č. 4 895 725, Kantor, Steiner & Pack, 23. január 1990, US patent č. 4 925 673, Steiner & Rosen, 15. máj 1990,

US patent č. 4 976 968, Steiner, 11. december 1990 a US patent č.

983 402, Steiner, 8. január 1991. Všetky patenty sú tu uvedené ako odkazy v celom ich rozsahu.

Spôsoby produkcie protizápalovej aktivity a analgézie

Predložený vynález zahrňuje tiež metódy produkcie protizápalovej aktivity a/alebo analgézie u ľudí a nižších živočíchov podávaním, človeku alebo nižšiemu živočíchovi v prípade potreby takejto liečby, bezpečného a účinného množstva dufluoropentapeptidového derivátu podľa vynálezu. Množstvo môže byť podané v jedinej dávke alebo vo viacerých dávkach opakovane počas liečby. Ak sú dávky vyššie ako sú tu popísané účinné na redukciu zápalu a produkciu analgézie, je potrebné venovať pozornosť niektorým jednotlivcom na zabránenie nežiadúcich vedľajších účinkov. Difluoropentapeptidové deriváty a prípravky podľa predloženého vynálezu môžu byť použité na potlačenie zápalov rôznych chorôb vo svaloch, kĺboch a pod., spojených s chorobou a traumatom, na liečbu a prevenciu proti bolesti.

Výhodnými spôsobmi podávania difluoropentapeptidových derivátov podľa vynálezu sú injekčné, ingesčné, inhalačné a topické spôsoby. Špecifické spôsoby podávania zahrňujú bez toho, aby boli nimi tak obmedzené, orálne, ingesčné, injekčné ako intamuskulárne, intravenózne, intraperitoneálne, intradermálne a subkutánne; inhalačné ; a topické, ako transdermálne, orálne, mukosálne a sublinguálne.

Výraz bezpečné a účinné množstvo tak, ako sa tu uvádza, znamená dostatočne vysoké množstvo difluoropentapeptidového derivátu alebo prípravku na to, aby výrazne pozitívne modifikovalo stav liečby, ale dostatočne nízke na vylúčenie nežiadúcich vedľajších účinkov (pri odpovedajúcom pomere prínos/riziko) v rozsahu hodnotenia lekárom. Bezpečné a účinné množstvo difluoropentapeptidového derivátu alebo prípravku sa mení podľa jednotli vého liečeného stavu, veku a fyzických podmienok liečeného pacienta, náročnosti stavu, priebehu liečby, charakteru súbežnej liečby, špecificky použitej účinnej zložky, konkrétneho farmaceutický prijateľného nosiča, ktorý je použitý a podobných faktorov podľa poznatkov a zistení príslušného lekára.

Výhodné denné dávky difluoropentapeptidových derivátov podľa vynálezu sú v rozmedí od asi 0,1 mg/kg telesnej hmotnosti do asi 500 mg/kg, výhodnejšie od asi 1 mg/kg do asi 100 mg/kg, ešte výhodnejšie od asi 2 mg/kg do asi 50 mg/kg. Možné je podávať od 1 do asi 4 jednotlivých dávok na deň, výhodnejšie od asi 2 do asi 3 jednotlivých dávok na deň. Výhodné množstvo difluoropentapeptidových drivátov podávané injekčné je asi od 0,1 mg/kg/deň do asi 50 mg/kg/deň, výhodnejšie od asi 1 mg/kg/deň do asi 10 mg/kg/deň. Výhodné množstvo difluoropentapeptidových derivátov podávaných orálne ingesciou je od asi 5 mg/kg/deň do asi 100 mg/kg/deň. Výhodné množstvo difluoropentapeptidových derivátov podávané inhalačné je od asi 0,1 mg/kg/deň do asi 500 mg/kg/deň, výhodnejšie od asi 5 mg/kg/deň do asi 100 mg/kg/deň. Výhodné množstvo difluoropentapeptidových derivátov podávané topicky je od asi 1 mg/kg/deň do asi 500 mg/kg/deň, výhodnejšie od asi 50 mg/kg/deň do asi 250 mg/kg/deň.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Spôsoby syntézy zlúčenín

Nasledujúce neobmedzujúce schémy a príklady demonštrujú spôsoby syntézy difluoropentapeptidových derivátov podľa predloženého vynálezu.

1. Syntéza Adoc-D-t-Bug-Phe-Lys-C(0)-CF₂-C(0)-Leu-Arg-OMe

Adoc-D-t-Bug-OH : K roztoku 48,8 g (0,370 M) D-t-butylglycínu v 371 ml IN NaOH a 159 ml dioxanu pri 0° C sa pridá 33,9 g (0,40 M) NaHCC>2 a potom po kvapkách roztok 80,0 g (0,40 M) adamantylfluoroformiátu v 371 ml dioxanu počas 3 hodín. Zmes sa mieša pri tejto teplote 0,5 hod. Roztok sa mieša 3 hod. a pH sa Tento roztok sa extrahuje EtOAc a pH 3. Tento kyslý roztok sa rozpúšťadlo sa odstráni, čím sa podľa TLC homogénny (94/5/1 - CH₂ a chladiaci kúpeľ sa odstráni, upraví na 10 pomocou IN NaOH. zvyšná vodná fáza sa okyslí na extrahuje EtOAc, suší sa a získa 118 g produktu, ktorý je !l₂/ipa/AcOH) , Rf = 0,90.

Adoc-D-t-Bug-Phe-OBn : K roztoku 115 g (0,37 M) Adoc-D-t-Bug-OH a L-Phe-OBn-pTSA (0,36 M) v 1 1 CH₂C1₂ sa pridá 74,6 g (0,74 M) TEA a potom 60,8 g (0,37 M) DECP a výsledný roztok sa cez noc mieša. Rozpúšťadlo sa odstráni a produkt sa znova rozpustí v EtOAc a premyje sa postupne soľankou, 0,4 N HCI a nasýteným hydrogénuhličitanom sodným. Roztok sa suší a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli a získa sa tak 186 g produktu. TLC (85/15 - hexán/EtOAc), Rf = 0,40.

Adoc-D-t-Bug-Phe-OH(1) : Do suchej banky pod dusíkom sa pridá 34,0 g 5 % paládia na uhlí. Banka sa ochladí na -78° C a pridá sa 200 ml suchého odplyneného MeOH. K tejto kaši sa pridá 8,8 ml kyseliny mravčej (88 %) a potom sa pridá zmes 36,0 g Adoc-D-t-Bug-Phe-OBn (0,066 M) v 10 ml MeOH a 4,4 ml kyseliny mravčej. Chladiaci kúpeľ sa odstráni a kaša sa mieša 2 hodiny. Potom sa pridá ďalších 200 ml 4,4 % kyseliny mravčej v MeOH a kaša sa cez noc mieša. Zmes sa odfiltruje cez papierový filter so sklenenými vláknami pod dusíkom. Filtrát sa znova filtruje cez lôžko celitu na odstránenie všetkých stôp katalyzátora. Odstránením rozpúšťadla sa získa 17,3 g produktu.

-Boe, -Z-Lys-C(OH)-CF₂-C(o)-OEt(3) : K roztoku 79,2 g (1,21 M) aktivovaného zinku v 0,600 1 THF sa pridá 2,36 g etylbromodifluoroacetátu a roztok sa refluxuje. Akonáhle sa začne s refluxom, prikvapká sa zmes 236 g (1,16 M) etylbromdifluoroacetátu a 176 g (0,485 M) (2) v 1,80 1 THF. Na syntézu (2) viď Burkhart J., N. Peet a P. Bey A Novel Method for the Preparation of Peptidyl a-Keto Esters, Tetrahedron Letters, Vol. 31, č. 10, str. 1385-1388 (1990) . Roztok sa refluxuje hodinu, potom sa ochladí a rozloží nasýteným hydrogénsíranom draselným. Rozložený produkt sa zriedi EtOAc a postupne sa premyje nasýteným KHSO₄, nasýteným

NaHCO₃ a soľankou. Po tomto postupe nasleduje sušenie pomocou MgSO₄ a odstránenie rozpúšťadla. Zvyšok sa chromatografuj e na silikagéli a získa sa 68,0 g čistého produktu, Rf = 0,20 70/25 hexan/EtOAc.

-Boe, -Z-Lys-C(OH)-CF₂-C(0)-ONa(4) : K roztoku 1,00 g (0,002 M) (3) v 10 ml MeOH sa pridá 2 ml IN NaOH a roztok sa mieša pri teplote miestnosti 5 hodín a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí v malom množstve vody a mliečny roztok sa extrahuje éterom. Voda sa odstráni z vodnej fázy a zvyšok sa dokonale vysuší umiestnením pod vákuovú pumpu na 24 hodín. Získa sa 0,069 g produktu.

-Boe, -Z-Lys-C(OH)-CF₂-C(O)-Leu-Arg(N0₂-0Me (5) : K roztoku 0,500 g (1,03 mmólu) (4) a 0,470 g (1,26 mmólu) Leu-Arg(N0₂)-OMe.HCI v 30 ml DMF sa pridá naraz 0,019 (1,26 mmólu) HOBt. Tento prídavok sa pridáva po kvapkách 0,260 g (1,26 mmólu) DCC v 3 ml DMF. Nakoniec sa pridá 0,003 ml DIPEA a roztok sa mieša 48 hodín. DMF sa odstráni vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v EtOAc. Roztok sa premiestni do deliacej nálevky a premyje sa 0,1 N HCI, nasýteným hydrogénuhličítanom sodným a soľankou. Etylacetátová vrstva sa suší síranom horečnatým, filtruje a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli a získa sa 0,420 g produktu. Rf = 0,68- 90/10 CH₂Cl₂/MeOH.

-Z-Lys-C(OH)-CF₂-C(O)-Leu-Arg(N0₂)-OMe.HCl : K roztoku (5) (17,3 g, 0,022 M) v 200 ml dioxanu sa pridá 66,8 ml (0,220 M) 3,3 M HCI v dioxane a zmes sa mieša hodinu. V tomto čase sa pridá ďalších 5 ml 3,3 M HCI v dioxane a roztok sa mieša ďalších 0,25 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa umiestni pod vákuovú pumpu. Pevný zvyšok sa titruje s éterom pod dusíkom a filtruje sa. Získa sa tak 16,0 g bielej pevnej látky.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Lys(Z)-C(OH)-CF₂-C(O)-Leu-Arg(N0₂)-OMe (6) _:

K roztoku 16,0 g zvyšku z predchádzajúcej reakcie (0,022 M) a

11,1 g (1) (0,024 M) v 300 ml CH₂C1₂ sa pridá

TEA po kvapkách s nasledujúcim prídavkom po

6,69 ml (0,048 M) kvapkách 3,64 ml (0,024 M)

DECP.

Roztok sa mieša cez noc a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí v EtOAc a postupne sa premyje 0,1 N HCI, nasýteným NaHCOg a soľankou. Roztok sa suší, rozpúšťadlo sa odstráni a získa sa 26,6 g látky, ktorá sa chromatografuje na silikagéli a získa sa 12,7 g čistého produktu. Rf = 0,85, 90/10 CH₂Cl₂/MeOH.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Lys(Z)-C(0)CF₂C(0)-Leu-Arg(N0₂)-OMe : K suspenzii 14,3 g (0,034 M) Dess-Martinovho perjodinanu v 1,15 1 CH₂C1₂sa pridá 0,910 ml suchého pyridínu a potom po kvapkách 12,7 g (0,011 M) (6) v 2,3 1 CH₂C1₂. Príprava Dess-Martinovho perjodinanu sa uskutočňuje, viď Dess D. a J. Martin, Journal of Organic Chemistry, Vol. 48, str. 4155-4156 (1983). Suspenzia sa mieša 2 hodiny a pridá sa 58,7 g (0,24 M) Na₂S₂0₄ v nasýtenom NaHCO₃ a výsledný roztok sa mieša 0,5 hodiny. Fázy sa oddelia a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom. Spojené organické fázy sa sušia a rozpúšťadlo sa odstráni. Získa sa 13,9 g produktu, ktorý sa použije v nasledujúcej reakcii bez čistenia. Rf = 0,30 - 95/5 CH₂Cl₂/MeOH.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Lys-C(O)CF₂C(O)-Leu-Arg-OMe (7) : K roztoku 13,4 g (0,012 M) zvyšku z predchádzajúcej reakcie v 200 ml suchéhoo DMF sa pridá 6 g paládia na uhlí a výsledná suspenzia sa 0,5 hodiny odplyňuje. K tejto suspenzii sa pridá 8 ml 3,3 M HCI v dioxane. Reakčná zmes sa umiestni do Paarovej trepačky a 6 hodín sa hydrogenuje. Suspenzia sa filtruje cez Celíte a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje pomocou HPLC s rezervnou fázou (CH₃CN/H₂O) a získa sa 6,5 g produktu.

-NaOH _r

1) HCI dioxan

2) Adoc-D-tBug-Phe-OH

DECP

TEA

1) Dess-Martin

----------->

II. Syntéza Adoc-D-t-Bug-Phe-Arg-C(O)-CF₂-C(O)-Ala-Arg-OMe Adoc-D-t-Bug-OH : K roztoku 48,8 g (0,370 M) D-t-butylglycínu v 371 ml IN NaOH a 159 ml dioxanu pri 0° C sa pridá 33,9 g (0,40 M) adamantylfluoroformiátu v 371ml dioxanu počas 3 hodín. Zmes sa pri tejto teplote mieša 0,5 hodiny a chladiaci kúpeľ sa odstráni. Roztok sa mieša 3 hodiny a pH sa upraví na 10 IN NaOH. Tento roztok sa extrahuje EtOAc a zvyšná vodná fáza sa okyslí na pH 3. Kyslý roztok sa extrahuje EtOAc, suší sa a rozpúšťadlo sa odstráni. Získa sa 118 g produktu, ktorý je podľa TLC homogénny (94/5/1 - CH₂Cl₂/i-pa/AcOH), Rf = 0,90.

Adoc-D-t-Bug-Phe-OBn : K roztoku 115 g (0,37 M) Adoc-D-t-Bug-OH a L-Phe-OBn.pTSA (0,36 M) vil CH₂C1₂ sa pridá 74,6 g (0,74 M) TEA a potom sa pridá 60,8 g (0,37 M) DECP a výsledný roztok sa mieša cez noc. Rozpúšťadlo sa odstráni a produkt sa znova rozpustí v EtOAc a postupne sa premyje soľankou, 0,4 N HCI a nasýteným hydrogénuhličitanomk sodným. Roztok sa suší a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje na siiikagéli a získa sa tak 186 g produktu. TLC (85/15 -hexán/EtOAc)- Rf = 0,40.

Adoc-D-t-Bug-Phe-OH (1) : Do suchej banky pod dusíkom sa pridá

34,0 g 5 % paládia na uhlí. Banka sa ochladí na -78° C a pridá sa 200 mlodplyneného MeOH. K tejto suspenzii sa pridá 8,8 ml kyseliny mravčej (88 %) a potom sa pridá zmes 36,0 g Adoc-D-t-Bug-Phe-OBn (0,066 M) v 100 ml MeOH a 4,4 ml kyseliny mravčej. Chladiaci kúpeľ sa odstráni a suspenzia sa mieša 2 hodiny. Potom sa pridá ďalších 200 ml 4,4 % kyseliny mravčej v MeOH a suspenzia sa mieša cez noc. Zmes sa odfiltruje cez filtračný papier so sklenenými vláknami pod dusíkom. Filtrát sa znova odfiltruje cez lôžko Celitu na odstránenie všetkých stôp katalyzátora. Odstránením rozpúšťadla sa získa 17,3 g produktu.

-Boe, -Z-Lys-C(OH)-CF₂-C(O)-OEt (3) : K roztoku 79,2 g (1,21 M) aktivovaného zinku V 0,600 1 THF sa pridá 2,36 g etylbrómdifluoroacetátu a roztok sa umiestni na reflux. Akonáhle začne reflux, prikvapká sa zmes 236 g (1,16 M) etylbrómdifluoroacetátu a 176 g (0,485 M) (2) v 1,80 1 THF. Roztok sa hodinu refluxuje, ochladí a preruší nasýteným KHSO₄. Produkt sa zriedi EtOAc a postupne sa premyje nasýteným KHSO4, nasýteným hydrogénuhličitanom sodným a soľankou. Nasleduje sušenie síranom horečnatým a odstránenie rozpúšťadla. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli. Získa sa 68,0 g čistého produktu, Rf = 0,20 75/25 hexán/EtOAc.

-Boe, -Z-Lys-C(OH)-CF₂-C(O)-ONa (4) : K roztoku 1,00 g (0,002 M) (3) v 10 ml MeOH sa pridá 2 ml IN NaOH. Roztok sa mieša pri teplote miestnosti 5 hodín a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí v malom množstve vody a mliečny roztok sa extrahuje éterom. Voda z vodnej fázy sa odstráni a zvyšok sa starostlivo vysuší umiestnením pod vákuovú pumpu na 24 hodín. Získa sa 0,069 g produktu.

-Boe, -Z-lys-C(OH)-CH₂-C(O)-Leu-Arg(N0₂)-OMe (5) :

K roztoku 0,500 g (1,03 mmólu) a (4) a 0,470 g (1,26 mmólu) Leu-Arg(NO₂)-OMe.HCI sa naraz pridá 0,019 g (1,26 mmólu) HOBt v 30 ml DMB. Potom nasleduje prikvapkanie 0,260 g (1,26 mmólu) DCC v 3 ml DMF. Nakoniec sa pridá 0,003 ml DIPEA a roztok sa mieša 48 hodín. DMF sa odstráni vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v EtOAc. Roztok sa umiestni do deliacej nádobky a premyje sa 0,1 N HCI, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a soľankou. Etylacetátová vrstva sa suší síranom horečnatým, odfiltruje sa a rozpúšťadlo sa odtsráni. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli. Získa sa 0,420 g produktu, Rf = 0,68- 90/10 C^C^/MeOH.

-Z-Lys-C(OH)-CH₂-C(O)-Leu-Arg(NO₂)-OMe.HCI (5) : K roztoku (5) (17,3 g, 0,022 M) v 200 ml dioxanu sa pridá 66,8 ml (0,220 M) 3,3 M HCI v dioxáne. Zmes sa mieša hodinu. Potom sa pridá ďalších 5 ml 3,3 M HCI v dioxáne a roztok sa mieša ďalších 0,25 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa umiestni pod vákuovú pumpu. Pevný zvyšok sa trituruje s éterom pod dusíkom a filtruje. Získa sa 16,0 g pevnej bielej látky.

Adoc-D-t-Bug-Phe-lys(Z)-C(OH)-CH₂-C(0)-Leu-Arg(N0₂)-OMe (6) :

K roztoku 16,0 g surového produktu z predchádzajúcej reakcie (0,022 M) a 11,1 g (1) (0,024 M) v 300 ml CH₂C1₂ sa pridá 6,69 ml (0,048 M) TEA po kvapkách a potom sa prikvapká 3,64 ml (0,024 M) DECP. Roztok sa cez noc mieša a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí v EtOAc a postupne sa premyje 0,1 N HCI, nasýteným hydrogénuhličitanom sodným a soľankou. Roztok sa suší a rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu. Získa sa 26,6 g látky, ktorá sa chromatografuje na silikagéli a získa sa 12,7 g čistého produktu. Rf = 0,85- 90/10- CH₂Cl₂/MeOH.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Lys(Z)-C(OH)CF₂C(0)-Leu-Arg-(N0₂)-OMe : K suspenzii 14,3 g (0,034 M) Dess Martinovho perjodinanu v 1,15 1 CH₂C1₂ sa pridá 0,910 ml suchého pyridínu a potom sa po kvapkách pridá 12,7 g (0,011 M) produktu z predchádzajúcej reakcie v 2,3 1 CH₂C1₂. Suspenzia sa mieša 2 hodiny a pridá sa 58,7 g (0,24 M) Na₂S₂O₄ v nasýtenom NaHSO₃. Výsledný roztok sa mieša 0,5 hodiny. Fázy sa oddelia a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom. Spojené organické fázy sa sušia a odstránením rozpúšťadla sa získa 13,9 g produktu, ktorý sa použije bez čistenia v nasledujúcej reakcii. Rf = 0,30- 95/5 CH₂Cl₂/MeOH.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Lys-C(0)CF₂C(0)-Leu-Arg-OMe. TFA (7) ·. K roztoku

13,4 g (0,012 M) surového produktu z predchádzajúcej reakcie v 200 ml suchého DMF sa pridá 6 g paládiovej černe. Výsledná suspenzia sa 0,5 hodiny odplyňuje. K tejto suspenzii sa pridá 8 ml 3,3 M HCI v dioxáne. Reakčná zmes sa umiestni do Paarovej trepačky a hydrogénuje sa 6 hodín. Suspenzia sa odfiltruje cez Celíte a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje HPLC s reverznou fázou (CH₃CN/H₂O/TFA) a získa sa 6,5 g produktu.

-Boc-gama-Bn-gama-Z-Orn-C (OH)-CF₂-C (O) OEt (9) ·. K roztoku 5,67 g (0,087 M) aktivovaného zinku v suchom THF sa pridá 1,0 g etylbromodifluoroacetátu a teplota sa zvýši na teplotu refluxu. Potom sa pridá 15,2 g (0,037 M) -Bn, -Z- Boc-ornitinalu (8) a 16,9 g (0,083 M) etylbrómdifluoroacetátu v THF a suspenzia sa refluxuje 0,5 hodiny. Roztok sa ochladí a preruší nasýteným KHSO₄, zriedi EtOAc a premyje sa nasýteným KHSO₄, nasýteným NaHC0₃ a soľankou. Roztok sa suší a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli a získa sa 6,58 g produktu. Rf = 0,22 99/l-CH₂Cl₂/ipa.

-Boc-gama-Bn-gama-Z-Orn-C(OH)-CF₂-C(O)ONa : Ester (9) (0,965 g, 1,71 mmólu) sa rozpustí v 15 ml MeOH a pridá sa 1,71 ml NaOH. Roztok sa mieša 3 hodiny a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa umiestni pod vákuovú pumpu na noc a použije sa v nasledujúcej reakcii v množstve 0,870 g.

-Boc-gama-Bn-gama-Z-Orn-C(OH)-CF₂-C(O)-Ala-Arg(N0₂)-OMe (10)

K roztoku 0,870 g (1,56 mmólu) surového produktu z predchádzajúcej reakcie a 0,579 g (1,90 mmólu) Ala-Arg(NO₂)-OMe.HCI v 80 ml suchého DMF sa pridá 0,283 g (2,09 mmólu) HOBt a potom nasleduje prídavok 0,392 g (1,90 mmólu) DCC v 20 ml DMF a 0,068 ml (0,39 mmólu) DIPEA. Zmes sa mieša 18 hodín pri teplote miestnosti a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí vEtOAc a premyje sa 0,1 N HCI, nasýteným hydrogénuhličitanom sodným a soľankou. Roztok sa suší a rozpúšťadlo sa odstráni. Chromatografiou na silikagéli sa získa 0,520 g produktu. Rf = 0,20 a 0,22.

-Boc-Orn-C(OH)-CF₂-C(O)-Ala-Arg(N0₂)-OMe : Tripeptid (10) (0,338 g, 0,43 mmólu) sa rozpustí v 10 ml DMF a pridá sa 0,15 g paládiovej černe. Suspenzia sa odplyní a pridá sa 0,20 ml 4,0 M HCI v dioxáne. Zmes sa hydrogenuje na Paarovom prístroji a filtruje sa cez Celíte. Zvyšok sa znovu rozpustí v MeOH a pridá sa 0,20 g hydroxidu paladnatého. Suspenzia sa hydrogenuje na Paarovom prístroji pri 350 kPa. Suspenzia sa sfiltruje cez Celíte a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa použije v nasledujúcej reakcii bez čistenia.

-Boc-Arg(Z)₂-C(OH)-CF₂-C(0)-Ala-Arg(N0₂)-OMe (11) : Surový amin (0,220 g, 0,39 mmólu) sa rozpustí v THF a pridá sa 0,325 g (0,91 mmólu) N,N-bis-Z-S-izotiomočoviny. K tomuto roztoku sa pridá 0,150. g Hg(OAc)₂ (0,47 mmólu) a zmes sa cez noc mieša. Roztok sa zriedi EtOAc a postupne sa premyje 0,1 N HCI, nasýteným hydrogénuhličitanom sodným a soľankou. Organické fázy sa sušia a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli a získa sa 0,170 g Produktu ako zmes diastereoizomérov. Rf = 0,60 0,62 - 5 % MeOH/CH₂Cl₂.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Arg(Z)₂-C(OH)-CH₂-C(O)-Ala-Arg(N0₂)-OMe (12) K roztoku 0,228 g (0,262 mmolu) (11) v 5 ml dioxánu sa pridá 0,656 ml HCI v dioxáne. Roztok sa mieša 1 hodinu a pridá sa ďalších 0,656 ml HCI v dioxáne. Po miešaní po ďalšiu hodinu sa rozpúšťadlo odstráni a zvyšok sa cez noc umiestni pod vákuovú pumpu. Produkt hydrolýzy sa rozpustí v 5 ml CH₂C1₂ a spojí sa s 0,120 g (0,262 mmolu) Adoc-D-t-Bug-Phe-OH. K tomuto roztoku sa pridá 0,073 ml ((0,525 mmólu) TEA a potom sa pridá 0,043 ml DECP. Výsledná zmes sa mieša cez noc. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa chromatografuje na silikagéli. Získa sa 0,086 g produktu ako zmesi diastereomérov. Rf = 0,65- 0,68 - 4 % ipa/CH₂Cl₂.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Arg(Z)₂-C(0H)-CF₂-C(O)-Ala-Arg(N0₂)-OMe

K suspenzii 0,094 g (0,16 mmólu) Dess-Martinovho perjodinanu v 5 ml CH₂C1₂ sa striekačkou pridá 0,091 g (0,052 mml) (12) rozpusteného v 0,5 m. Zmes sa mieša 0,5 hodiny a pridá sa 0,385 g (1,55 mmólu) Na₂S₂O₃ v nasýtenom hydrogénuhličitane sodnom. Po 0,5 hodine sa roztok extrahuje EtOAc a organická fáza sa oddelí a suší sa s MgS0₄. Odstránením rozpúšťadla sa získa 0,94 g surového produktu. Rf = 0,68- 0,71 - 4 % ipa/CH₂Cl₂.

Adoc-D-t-Bug-Phe-Arg(0)-CF₂-C(O)-Ala-Arg-OMe-TFA (13)

Surový alkohol sa rozpustí v 2 ml DMF a pridá sa 50 mg paládiovej černe. Suspenzia sa odplyní a pridá sa 0,40 ml 4,0 M HCI v dioxáne. Zmes sa hydrogenuje v Paarovom prístroji 20 hodín pri 350 kPa. Suspenzia sa filtruje cez Celíte a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa chromatografuje na kolóne s reverznou fázou (CH₂CN/H₂O/TFA) a získa sa 0,044 g čistého produktu.

N,N'-bis-karbobenzyloxy-S-metyl-izotiomočovina (14) : K roztoku diméru sulfátu S-metyl-izotiomočoviny (5,00 g, 18,0 mmólu) v studenom (0° C) IN NaOH (36,0 ml, 36,0 mmólu) sa pridá po kvapkách (79,0 mmólu) benzylchloroformiátu a 79,0 ml (79,0 mmólu) IN NaOH z deliacej nálevky. Suspenzia sa mieša 0,5 hodiny pri 0° C a 1,5 hodiny pri teplote miestnosti. Roztok sa extrahuje etylacetátom, suší sa síranom horečnatým a filtrát sa odparí. Chromatografiou na silikagéli sa získa 2,62 g čistého produktu. Rf = 0,40 (15 % EtOAc/pet éter).

Z

CF2BrCO2Et

Zn

1) NaOH

2) AJa-Leu-OMe-HCI DCC

HOBt

H

I

NH

1)H₂

2)N,N‘-bis-CBz-S-methyl· i so thi omoč o v iaa.

1) HCI

2) Adoc-D-tBug-Phe-OH DECP

TEA'

H

1) Dess-Martin —--------2) H2Pd

2.7

ι

III. Syntéza N-koncových spojovacích prvkov

Adac-D-t-Bug-Phe-OBn : K roztoku 5 ml 15 % roztoku fosgénu v toluéne sa pod argónom pridá 0,140 ml TEA (1,00 mmólu). Pridá sa 0,112 g (0,750 mmólu) 1-adamantanamínu v 1 ml toluénu po kvapkách striekačkou. Výsledná suspenzia sa mieša 0,3 hodiny a nadbytok fosgénu sa odstráni prebublávaním argónom. Pevné látky sa odfiltrujú saním cez sintrovanú sklenenú nálevku a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa znova rozpustí v dichlórmetáne a ochladí sa na 0° C pod argónom. K tomuto roztoku sa pridá 0,140 ml TEA (1,00 mmólu) a potom naraz 0,100 g (0,250 mmólu). Získa sa výsledný roztok, ktorý sa chromatografuje na silikagéli a získa sa 0,350 g produktu.

Hydrogenácia tejto zlúčeniny nasledovaná postupnou kondenzáciou s produktom (11) hydrolýzy dáva zlúčeniny, ktoré sú vhodne spracované na alternatívne N-koncové spojovacie prvky.

Metódy testovania aktivity zlúčenín

Nasledujúce neobmedzujúce postupy sú metódami na testovanie protizápalovej a/alebo analgetickej aktivity difluoropentapeptidových derivátov podl'a predloženého vynálezu.

Niektoré enzýmové inhibičné skúšky sú pre naznačenie protizápalovej účinnosti zlúčenín známe. Takéto enzýmové skúšky sú vhodné na meranie aktivity zlúčenín podľa predloženého vynálezu a zahrňujú nasledujúce : prasačí pankreatický kallikreín (PPK) viď odkazy A, E a F; ľudský ľadvinový kallikreín (HUK) -viď odkazy E a F; ľudský plazmový kallikreín (HPK) - viď odkazy B a E; ľudský plazmín (HP) - viď odkazy B a C; a urokinázu (UK) - viď odkaz D. Uvedené odkazy sú nasledujúce :

(A) Lottenberg R., U. Christensen, C.M. Jackson & P. L.Coleman, Assay of Coagulation Proteases Using peptide Chromogenic and Fluorogenic Substrates, Methods in Enzymology, zv. 80, Academic Press, New York, NY (1981), str. 341-361; (B) Geiger R., Kallik.rein, Methods of Enzymatic Analysis, zv. V, 3. vyd.,

Bergmeyer, ed., Academic Press, New York, NY (1984), str. 129-143; Morris J.P., S. Blatt, J.R. Powell, D.K. Strickland & F.J. Castellino Role of Lysine Binding Regions in the Kinetic Properties of Human Plasmin, Biochemistry, z. 20, č. 17 (18. august 198), str. 4811; (D) Wohl R.C., L. Summaria & K.C. Robbins Kinetic of Activation of Human Plasminogen by Different Activator Species at pH 7,4 and 37° C, The Journal Biological Chemistry, zv. 255, č. 5 (10. marec 1980), str. 2005-2013; (E) Okunishi, H.J. Burton & J. Spragg Specifity of Substráte Analogue Inhibitors of Human Urinary Kallikrein, Hypertension, zv. 7, č. 3, dod. 1 (máj-jún 1985), str. 1-72-175; (F) Amundsen E., J. Putter, P. Friberger, M. Knos, M. Larsbraten & G. Claeson Methods for Determination of Glandular Kllikrein by Means of a Chromogenic Tripeptide Substráte, v Kininy - II. časť. A, Fuji S. a kol. , vyd. Plénum Press, New York, NY (1979), str. 83-95.

Ďalšia vhodná skúška aktivity je založená na metóde stanovenia inhibície pomaly viažúcich enzýmov, popísaná v Imperiáli B. & R.H. Abeles Inhibition of Serine Proteases by Peptidyl Fluoromethyl Ketones, Biochemistry, zv. 25 (1986), str. 3760-3767. Metóda je modifikovaná, ako je to uvedené ďalej za účelom štúdia inhibície pomalej väzby ľudského plazmínu, pankreatického kallikreínu teliat a ľudského plazmového kallikreínu.

Reakcie : Reakčné zmesi obsahujú 78 mM tris-HCl pufru, pH 7,4, 78 mM NaCl, 0,2 mg/ml sérového hovädzieho albumínu, 0,2 mM

S-2251 (D-Val-Leu-Arg-p-nitroamid), 0,5 j./ml plazmínu (1 mM) a rôzne koncentrácie testovanej zlúčeniny, ktorá je študovaná, v celkovom objeme 1 ml. Zásobný roztok plazmínu je 1 j./ml v 50 % glyceríne. Zmena absorbancie spôsobená uvoľnením p-nitroanilínu enzymatickým štiepením S-2251 sa sleduje použitím HP-8450 spektrofotometra, meria sa pri ^400-410^ a⁴70~490 Teplota je 30° C.

Výpočty : ^Kobsd ^{a v}s (stabilná inhibičná rýchlosť) sa stanoví uvedením postupovej krivky (prvých 20 minút) do integrovanej rovnice rýchlosti (i) použitím LabtechNotebook R software. Hodnotená k-[_ sa vypočíta pre každý beh z vg a neinhibovaná rých losť v (rovnice ii) , s (S) =0,2 mM a = 0,77 mM

i) A = v_st-[(v_s-v_o)k_obsd](exp)(k_obsdt) + A_oiii) k-L = (I) [ (v/v_s-l] (1+(s)/k^

Graf k_obgd oproti koncenrácii testovanej zlúčeniny pre rôzne behy sa potom prevedie do priamky, y = mx + b (viď rovnicu iii) ; potom sa vypočíta k_on m(l + (S)/k^) a k_off = b.

I

Niektoré skúšky in vivo na predpovedanie protizápalovej účinnosti zlúčenín sú známe, takéto in vivo skúšky sú vhodné na meranie aktivity zlúčenín podľa predloženého vynálezu a sú popísané v nasledujúcich odkazoch, ktoré sú tu zahrnuté :

Winter C.A., E.A. Risley, G.V. Nuss Carragenin-Induced Edema in Hind Paw of the Rat as as Assay for Antiinflammatoery Drugs, Proc. Soc. exp. Biol., N.Y., zv. 111 (1962), str. 544-547; Vander Wende, C. & S. Margolin Analgesic Tests Based Úpon Experimentally Induced Acute Abdominal Pain in Rats, Federal Proceedings, zv. 15 (1956), str. 494; Blackham A., J.W. Burns, J.B. Farmer, H. Radziwonik, J. Westwick An X-RAy Analysis of Adjuvant Arthritis in the Rat, The Effect of Prenisolone and Indomethacin, Agents and Actions, zv. 7/1 (1977), str. 145-151; Winter C.A. & G.W. Nuss Treatment of Adjuvant Arthritis in Rats with Anti-Inflammatory Drugs, Arthritis and Rheumatism, zv. 9, č. 3 (jún 1966), str. 394-404; a Francis M.D., K. Hovancik & R.W. Boyce NE-58095 : A Diphosphonate which Prevents Bone Erosion and Preserves Joint Architecture in Experimental Arthritis, Int. J. Tiss. Reac., zv. XI, č. 5 (1989), str. 239-252.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Prípravky a metódy použitia zlúčenín

Nasledujúce neobmedzujúce príklady predstavujú prípravky a použitie podľa predloženého vynálezu.

Príklad I

Boli vyrobené známymi postupmi tablety s nasledujúcim zložením :

Zložka	Množstvo (mq)
Noc-D-t-Bug-Phe-lys-C(0)CP₂C(0)-Leu-Arg-OMe	400
mikrokryštalická celulóza	200
predželatinovaný škrob	200
Povidone K-30	40
stearát horečnatý	20
Jedna tableta sa podáva štyrikrát denne	pacientovi na zmier

nenie zápalu kĺbov spôsobeného artritídou.

Príklad II

Známymi postupmi sa vyrobí roztok s nasledujúcim zložením ·.

Zložka	Množstvo ( % )
eBroc-D-t-Bug-Phe-Arg-C(0)CF₂C(0)-Gly-Arg-Ome	2,5
glycerín	4,0
metylparaben	0,2
propylparaben	0,1
Carbopol 934	0, 15
NaOH	0,46
cetylstearylpalmitát	1, o
kyselina stearová	0,5
lanolínové mastné kyseliny	0,5
cetylalkohol	3, 0
zantamová guma	0,3
stearoyl-2-laktoát sodný	0,75
izopropylmyristát	2,0
voda	q.s.

Jeden gram roztoku sa podáva topicky na spálenú plochu kože dvakrát denne na potlačenie zápalu a bolesti.

Príklad III

Roztok sa vyrobí známymi prostriedkami

tak, že každé 2 ml

roztoku má nasledujúce zloženie :

Zložka	Množstvo (mq)
Adoc-D-Phe-Phe-Lys-C(OôCF₂C(0)-D-Phe-Arg-OH benzalkoniumchlorid	80 40
sterilný vodný salinický roztok	q.s.

ml dávka roztoku sa injektuje intramuskulárne pacientovi s artritídou na potlačenie zápalu a bolesti.

Príklad IV

Roztok sa vyrobí známymi prostriedkami a má nasledujúce zloženie :

Zložka______________________________________________Množstvo (%)

Adoc-D-t-Bug-Phe-Arg-C(0)CF₂C(0)-Ala-Arg-OH5,0 benzalkoniumchlorid0,02 sodná soľ karboxymetylcelulózy0,01 vodný salinický roztokq.s.

0,2 ml dávka roztoku sa podáva inhalačné pacientovi na uvoľnenie zablokovania horných ciest dýchacích spôsobeného astmou.

Aj keď boli popísané -výhodné uskutočnenia predloženého vynálezu, bude odborníkom v danom odbore známe, že je možné uskutočniť rôzne zmeny a modifikácie predloženého vynálezu bez toho, aby bola narušená myšlienka a rozsah vynálezu. Nasledujúce nároky chránia všetky takéto modifikácie, ktoré sú v rozsahu predloženého vynálezu.

Claims

γν

1. Zlúčenina všeobecného vzorca ·

X-(CH₂)_n-V-Z-CH-C(O)-NH-CH-CH-C(O)-NH-CH

C=O

YO-C(O)-CH-NH-C(O)-CH-NH-C(O)-CF₂ kde

a) X je zvolený zo skupiny zahrňujúcej cyklický alkyl majúci od 4 do 15 atómov uhlíka, rozvetvený alkyl aspoň s dvoma rozvetveniami majúci od 6 do 15 atómov uhlíka a arylalkyl majúci od 6 do 15 atómov uhlíka,

b) n je celé číslo od 0 do 2,

c) -V- je zvolené zo skupiny, zahrňujúcej -0C(0)-, -N(Q)C(O)-, -N(Q)C(S)-, -C(O)-, -SO₂- a -P(O)(OH)-,

d) -Q- je vodík, alebo priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 1 do 6 atómov uhlíka, alebo -Q- a -X- sú kovalentne naviazané za tvorby cyklickej skupiny, ktorá obsahuje dusík, na ktorý je Q naviazané a od 5 do 20 atómov uhlíka,

e) -Z- je -O- alebo -NH-, ak je V -OC(O)-, je -Z- -NH-,

f) -R¹- je zvolený zo skupiny zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 1 do 6 atómov uhlíka, cyklický alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 3 do 10 atómov uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka a uhlíkový atóm naviazaný na -R¹ je buď V D alebo v L konfigurácii,

g) -R² je zvolený zo skupiny zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 1 do 6 atómov uhlíka, cyklický alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 3 do 10 atómov uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka a uhlíkový atóm naviazaný na -R² je buď v D alebo v L konfigurácii,

h) -R³ je -(CH₂)_m-A-NH₂ alebo -(CH₂)_m-A-B-C(NH₂)NH, kde m je celé číslo od 1 do 6, -A- je kovalentná väzba alebo p-fenyl alebo p-cyklohexyl a -B- je kovalentná väzba alebo -NH, a uhlíkový atóm naviazaný na -R³ je v L konfigurácii,

i) -R⁴ je zvolený zo skupiny zahrňujúcej priamy alebo rozvetvený alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 1 do 6 atómov uhlíka, cyklický alkyl, nasýtený alebo nenasýtený s 1 alebo 2 dvojnými väzbami, majúci od 3 do 10 atómov uhlíka a arylalkyl, v ktorom alifatická časť je nasýtená a má 1 alebo 2 atómy uhlíka a uhlíkový atóm naviazaný na -R⁴ je buď v D alebo v L konfigurácii,

j) -R⁵ je -(CH₂)_m-A-NH₂ alebo -(CH₂)_m-A-B-C(NH₂)=NH, kde m je celé číslo od 1 do 6, -A- je kovalentná väzba alebo p-fenyl alebo p-cyklohexyl a -B- je kovalentná väzba alebo -NH- a uhlíkový atóm naviazaný na -R⁵ je v D alebo v L konfigurácii a

k) -Y- je vodík alebo metyl a jej farmaceutický prijateľné soli a hydráty.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde

a) -V- je -OC(O)- alebo -NHC(O)- a -Z- je -NH-,

b) n je 0 alebo 1,

c) m je celé číslo od 1 do 5,

d) -X- je nasýtený alebo nenasýtený bicyklo alebo tricykloalkyl, majúci od 8 do 12 atómov uhlíka, alebo substituovaný aryl, majúci od 8 do 12 atómov uhlíka a

e) -R¹, -R² a -R⁴ sú zvolené z priameho alebo rozvetveného alkylu, majúceho od 1 do 5 atómov uhlíka, cyklického alkylu, majúceho od 3 do 6 atómov uhlíka a benzylu.
3. Zlúčenina podl'a nároku 1 alebo 2, kde

a) -R³ je -(CH₂)_m-A-NH₂-, kde -A- je kovalentná väzba a m je od 3 do 5,

b) -R⁵ je -(CH₂)_m-A-B-C(NH₂)-NH, kde -A- je kovalentná väzba, -Bje -NH- a m je od 2 do 4,

c) -Y- je metyl a

d) -V- je -0C(0)-.
4. Zlúčenina podľa nároku 1, 2 alebo 3, kde

a) -X- je tricakloalkyl a

b) -R¹ a -R⁴ sú nasýtení a nenasýtené, priame alebo rozvetvené alkyly, majúce od 1 do 4 atomov uhlíka a -R je benzyl.
5. Zlúčenina vzorca

II x¹-aa¹-aa²-aa³-cf₂-c-aa⁴-aa⁵-oy kde

a) -AA¹- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej terc, butylglycyl, valyl, izoleucyl, leucyl, cyklohexylglycyl, cyklohexylalanyl, fenylalanyl, naftylalanyl, tryptofyl a adamantylglycyl,

b) -AA²- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej fenylalanyl, naftylalanyl, cyklohexylalanyl, leucyl a izoleucyl,

c) -AA³- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej arginyl, homoarginyl, lyzyl, p-guanidinofenylalanyl, p-amidinofenylalanyl a p-aminofenylalanyl,

d) -AA⁴- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej fenylalanyl, naftylalanyl, cyklohexylalanyl, leucyl a izoleucyl,

e) -AA^- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej arginyl, homoarginyl, lyzyl, p-guanidinifenylalanyl, p-amidinofenylalanyl a p-aminofenylalanyl,

f) -X¹- je zvolený zo skupiny zahrňujúcej adamantyloxykarbony1, adamantoyl, fluorenylmetoxykarbonyl, adamantanacetyl, adamantylaminokarbonyl, noradamantoyl, morfolinyl, homoadamantyloxykarbonyl, fenchyloxykarbony1, izomentyloxykarbonyl, izopinogamfanyloxykarbonyl, 3,5-dimetyladamantyloxykarbonyl, endo-bornyloxykarbonyl, naftyloxykarbonyl a mentyloxykarbony1 a

g) -Y- je vodík alebo metyl.
6. Zlúčenina podl'a nároku 5, kde

a) -AA⁵- je arginyl,

b) -AA³- je lyzyl a

c) -X¹- je zvolený zo skupiny zahrňujúcej adamantyloxykarbony1, endo-bornyloxykarbonyl a izopinogamfanyloxykarbonyl.
7. Zlúčenina podľa nároku 5 alebo 6, kde

a) -AA¹- je zvolené zo skupiny zahrňujúcej terc, butylglycyl, valyl a izoleucyl,

b) -AA²- je fenylalanyl a

c) -AA⁴ - je leucyl.
8. Zlúčenina podľa nároku 5,6 alebo 7, kde

a) -AA¹- je terc, butylglycyl,

b) -X¹- je adamantyloxykarbony1 a

c) -Y- je metyl.
9. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa hociktorého z nárokov 1 až 8 a farmaceutický prijateľný nosič.
10. Použitie zlúčeniny podľa hociktorého z nárokov 1 až 8 na výrobu liečiva na liečbu zápalu alebo bolesti.