SK8096A3

SK8096A3 - 2,9-disubstituted purin-6-ones, manufacturing process thereof, pharmaceutical agent containing these subtances and their use

Info

Publication number: SK8096A3
Application number: SK80-96A
Authority: SK
Inventors: Ulrich Niewohner; Erwin Bischoff; Helmuth Schutz; Elisabeth Perzborn; Matthias Schramm
Original assignee: Bayer Ag
Priority date: 1995-01-19
Filing date: 1996-01-18
Publication date: 1996-08-07
Also published as: HUP9600106A3; FI960225A; NO960223L; FI960225A0; MA23778A1; DE19501482A1; CO4700523A1; US5861404A; BG61728B1; TR199600028A2; EP0722944A1; PL312354A1; EE9600018A; JPH08231545A; ZA96398B; IL116769A0; NZ280830A; AU4097996A; IL116769A; TW314519B

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka 2,9-disubstituovaných purín-6-ónov, spôsobu ich výroby, farmaceutického prostriedku tieto látky obsahujúceho a ich použitia na výrobu liečiv, najmä na ošetrenie zápalov, tromboembolických ochorení srdca a obehového systému a ochorenia urogenitálneho systému.

Doterajší stav techniky

Z publikácie J. Pharm. Sci., 74 (10), 1082 - 1085, 1985 a J.

Hetero. Chem.. 19 (1), 33 - 40, 1982 sú známe niektoré 2-fenylsubstituované 6H-purín-6-óny.

Okrem toho sú popísané ΙΗ-9-metyl-substituované puríny a oxazolopyrimidíny (pozri napríklad Khim.-Farm. Zh. 8 (4), 26 - 28 a Bull. Chem. Soc. Jap. 43 (12), 3509 - 3513 (1970)).

Ďalej sú známe z JP 47 021 434 9-substituované hypoxantíny.

Tiež sú známe purínové deriváty s regulujúcim účinkom na rast rastlín a 2-substituované 9-(4-metylbenzyl)-9H-puríny s antirhinovirusovým účinkom (pozri Egypt. J. Chem., Vol. Data 1990, 33 (3), 243 - 253, 1991 a J. Med. Chem. 32 (1), 218 - 224, 1989.

Fosfodiesterázy (PDE) hrajú významnú intracelulárnej hladiny cGMP a cAMP. Z fosfodiesterázových izoenzýmových skupín úlohu v regulácii doteraz popísaných

PDE I až PDE

V (nomenklatúra podía Beava a Reifsyndera (pozri Beavo, J. A.

a Reifsynder, D. H.: Trends in Pharmacol. Sci. 11, 150 - 155 (1990))) sú Ca-calmodulinom aktivované PDE I, cGMP stimulovateľné

PDE II a cGMP špecifické PDE V v podstate zodpovedné za metabolizmus cGMP. Na základe rôzneho rozdelenia týchto cGMP metabolizovatelných PDE v tkanivách by sa mala zvyšovať vždy podlá rozdelenia zodpovedajúceho izoenzýmu v tkanivách hladina cGMP v zodpovedajúcom tkanive. Toto môže viesť k špecifickému antiagregatorickému, antispastickému, cievne dilatačnému, antiarytmickému a/alebo protizápalovému účinku.

Podstata vynálezu

Predmetom predloženého vynálezu purin-6-óny všeobecného vzorca I sú 2,9-disubstituované

(I)>

v ktorom

R¹ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 2 až 10 uhlíkovými atómami, ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná atómom halogénu, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou skupinou s až 6 uhlíkovými atómami,

R² znamená vodíkový atóm, hydroxyskupinu, azidovú skupinu alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 6 uhlíkovými atómami, alebo znamená skupinu -O-SC^Rg, pričom

R⁵ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 4 uhlíkovými atómami alebo fenylovú skupinu,

R³ znamená vodíkový atóm alebo

R² a R³ znamená spoločne zvyšok =0,

R^ znamená vodíkový atóm alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 4 uhlíkovými atómami a

A znamená zvyšok vzorca alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 20 uhlíkovými atómami, alebo cykloalkylovú skupinu s 3 až 7 uhlíkovými atómami, alebo fenylovú skupinu, ktoré sú prípadne až dvakrát rovnako alebo rôzne substituované atómom halogénu, karboxylovou skupinou, trifluórmetylovou skupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou, alkoxykarbonylovou alebo alkoxylovou skupinou so vždy až 5 uhlíkovými atómami, ktoré samé môžu byť substituované fenylovou skupinou a/alebo sú cyklény prípadne substituované fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná priamou alebo rozvetvenou alkoxyskupinou s až 5 uhlíkovými atómami, a ich tautoméry a soli.

Látky podlá predloženého vynálezu sa môžu tiež vyskytovať ako soli. V rámci predloženého vynálezu sú výhodné fyziologicky neškodné soli.

Fyziologicky neškodné soli môžu byť soli zlúčenín podlá predloženého vynálezu s anorganickými alebo organickými kyselinami. Výhodné sú soli s anorganickými kyselinami, ako je napríklad kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fosforečná alebo kyselina sírová, alebo s organickými karboxylovými alebo sulfónovými kyselinami, ako je napríklad kyselina octová, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina jablčná, kyselina citrónová, kyselina vínna, kyselina mliečna, kyselina benzoová, kyselina metánsulfónová, kyselina etánsulfónová, kyselina fenylsulfónová, kyselina toluénsulfónová alebo kyselina naftaléndisulfónová.

Zlúčeniny podlá predloženého vynálezu všeobecného vzorca I sa môžu vyskytovať v rôznych stereochemických formách, ktoré sa správajú buď ako obraz a zrkadlový obraz (enantioméry) alebo nie ako obraz a zrkadlový obraz (diasteroméry). Vynález sa týka ako antipódov, tak tiež racemických foriem a diastereomérnych zmesí. Racemické formy sa dajú rovnako ako diastereoméry známym spôsobom rozdeliť na stereoizomérne jednotné súčasti.

Výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I v ktorom

R¹ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 2 až 8 uhlíkovými atómami, ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná atómom fluóru, chlóru alebo brómu, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou skupinou s až 4 Uhlíkovými atómami,

R² znamená vodíkový atóm, hydroxyskupinu, azidovú skupinu alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 4 uhlíkovými atómami, alebo znamená skupinu -O-SO₂R₅, pričom

R⁵ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami alebo fenylovú skupinu,

-> ,

R znamena vodíkový atóm alebo

R² a R³ znamená spoločne zvyšok =0,

R⁴ znamená vodíkový atóm alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami a

A znamená zvyšok vzorca alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 19 uhlíkovými atómami, alebo cyklopropylovú, cyklopentylovú, cyklohexylovú, cykloheptylovú alebo fenylovú skupinu, ktoré sú prípadne až dvakrát rovnako alebo rôzne substituované atómom fluóru, chlóru alebo brómu, karboxylovou skupinou, nitroskupinou, hydroxyskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou, alkoxykarbonylovou alebo alkoxylovou skupinou so vždy až 4 uhlíkovými atómami, ktoré samé môžu byť substituované fenylovou skupinou a/alebo sú cyklény prípadne substituované fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná priamou alebo rozvetvenou alkoxyskupinou s až 4 uhlíkovými atómami, a ich tautoméry a soli.

Obzvlášť výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I v ktorom

R¹ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 2 až 7 uhlíkovými atómami, ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná atómom fluóru, chlóru alebo brómu, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou skupinou s až 3 uhlíkovými atómami,

R² znamená vodíkový atóm, hydroxyskupinu, azidovú skupinu alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami, alebo znamená skupinu -O-SO₂R₅, pričom

R³ znamená vodíkový atóm alebo

R² a R³ znamená spoločne zvyšok =0,

R⁴ znamená vodíkový atóm alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú

skupinu	s až 3	uhlíkovými	atómami a
A znamená	zvyšok	vzorca
				r°
				^0

alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 18 uhlíkovými atómami, alebo cyklopropylovú, cyklopentylovú, cyklohexylovú, cykloheptylovú alebo fenylovú skupinu, ktoré sú prípadne až dvakrát rovnako alebo rôzne substituované atómom fluóru, chlóru alebo brómu, karboxylovou skupinou, nitroskupinou, hydroxyskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou, alkoxykarbonylovou alebo alkoxylovou skupinou so vždy až 3 uhlíkovými atómami, ktoré samé môžu byť substituované fenylovou skupinou a/alebo sú cyklény prípadne substituované fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná priamou alebo rozvetvenou alkoxyskupinou s až 3 uhlíkovými atómami, a ich tautoméry a soli.

Predmetom predloženého vynálezu je ďalej spôsob výroby 2,9disubstituovaných purín-6-ónov všeobecného vzorca I, ktorého podstata spočíva v tom, že sa najprv zlúčeniny všeobecného vzorca II

v ktorom majú R¹, R², R³ a R⁴ vyššie uvedený význam, prevedú reakciou so zlúčeninami všeobecného vzorca II

A - CO - Cl (III), v ktorom má A vyššie uvedený význam, v inertných rozpúšťadlách a za prítomnosti bázy na zlúčeniny všeobecného vzorca IV v ktorom majú A, R¹,

(IV)

R², R³ a R⁴ vyššie uvedený význam, a v druhom kroku sa v inertných rozpúšťadlách a za prítomnosti bázy cyklizujú, a substituenty R¹, R², R³ a R⁴ sa acyláciou, oxidáciou a/alebo výmenou azidu zavádzajú, prípadne derivatizujú.

Spôsob podľa predloženého vynálezu je možné znázorniť pomocou nasledujúcej reakčnej schémy.

príkladovo

NaH/THF

----------►

Pyridín, DMAP,

Toluol

Pre prvý krok spôsobu podľa predloženého vynálezu sú vhodné inertné organické rozpúšťadlá, ktoré sa za daných reakčných podmienok nemenia. K týmto patria výhodne étery, ako je napríklad dietyléter, dioxán, tetrahydrofurán, glykolmonometyléter a glykoldimetyléter, halogenované uhľovodíky, ako je napríklad dichlórmetán, trichlórmetán, tetrachlórmetán, dichlóretylén a trichlóretylén a d’alej etylester kyseliny octovej, toluén, acetonitril, triamid a acetón. Samozrejme, rozpúšťadiel. Obzvlášť kyseliny hexametylfosforečnej, pyridin je tiež možné použiť zmesi uvedených výhodný je tetrahydrofurán, toluén alebo pyridin.

Ako bázy sú vhodné všeobecne hydridy alebo alkoholáty alkalických kovov, ako je napríklad hydrid sodný alebo terc.-butylát draselný alebo cyklické amíny, ako je napríklad piperidín, pyridin, dimetylaminopyridín alebo alkylamíny s 1 až 4 uhlíkovými atómami, ako je napríklad trietylamín. Obzvlášť výhodný je hydrid sodný, pyridin alebo dimetylaminopyridín.

Bázy sa všeobecne používajú v množstve 1 mól až 4 mól, výhodne 1,2 mól až 3 mól, vzťahujúc na jeden mól zlúčeniny všeobecného vzorca II.

Reakčné teploty sa môžu všeobecne pohybovať v širokom rozmedzí, zvyčajne sa pracuje v rozmedzí -20 °C až 200 ’C, výhodne 0 C až 25 ’C.

Pri jednom variante sa reakcia vykonáva v pyridíne, do ktorého sa pridá katalytické množstvo DMAP. Prípadne sa môže ešte pridať toluén.

Ako rozpúšťadlá pre cyklizáciu sú vhodné bežné organické rozpúšťadlá. K týmto patria výhodne alkoholy, ako je napríklad metylalkohol, etylalkohol, propylalkohol, izopropylalkohol alebo' butylalkohol, étery, ako je napríklad dioxán alebo tetrahydrofurán, alebo dimetylformamid alebo dimetylsulfoxid. Obzvlášť výhodne sa používajú alkoholy, ako je metylalkohol, etylalkohol, propylalkohol alebo izopropylalkohol. Rovnako tak je možné použiť zmesi uvedených rozpúšťadiel.

Ako báza pre cyklizáciu prichádzajú všeobecne do úvahy bežné anorganické bázy. K týmto patria výhodne hydroxidy alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín, ako je napríklad hydroxid sodný, hydroxid draselný alebo hydroxid bárnatý, uhličitany alkalických kovov, ako je napríklad uhličitan sodný, uhličitan draselný alebo hydrogénuhličitan sodný, alkoholáty alkalických kovov, ako je napríklad metanolát sodný, metanolát draselný, etanolát sodný, etanolát draselný alebo terc.-butylát draselný. Obzvlášť výhodný je uhličitan draselný a hydroxid sodný.

Všeobecne sa pri cyklizácii používa báza v množstve 2 mól až 6 mól, výhodne 3 mól až 5 mól, vzťahujúc na jeden mól zlúčeniny všeobecného vzorca IV.

Cyklizácia sa vykonáva všeobecne pri teplote v rozmedzí 0 “C až 160 ’C, výhodne za varu použitého rozpúšťadla.

Cyklizácia sa všeobecne vykonáva pri normálnom tlaku, je však ale tiež možné pracovať za zvýšeného alebo zníženého tlaku, napríklad pri tlaku v rozmedzí 0,05 až 0,5 MPa.

Reakcia s chloridmi alkylsulfónových kyselín prebieha, keď sa vychádza zo zodpovedajúcich voľných hydroxylových kyselín, v niektorom z vyššie uvedených rozpúšťadiel a v niektorej z báz, výhodne s dichlórmetánom a trietylamínom pri teplote v rozmedzí -20 C až 20 ’C, výhodne pri 0 “C a pri normálnom tlaku.

Zavádzanie azidového zvyšku sa vykonáva všeobecne reakciou zodpovedajúcich alkýlsulfonyloxysubstituovaných zlúčenín s azidom sodným v niektorom z vyššie uvedených rozpúšťadiel, výhodne v dimetylformamide, pri teplote v rozmedzí 50 °C až 120 ’C, výhodne 100 ’C a za normálneho tlaku.

Ketóny sa vyrobia zo zodpovedajúcich hydroxyzlúčenín pomocou známych metód (Schwernova oxidácia).

Enantiomérne čisté zlúčeniny sú dostupné pomocou známych metód, napríklad chromátografiou racemických zlúčenín všeobecného vzorca I na chirálnych fázach.

Zlúčeniny všeobecného vzorca III sú známe.

Zlúčeniny všeobecného vzorca IV sú z väčšej časti nové a môžu sa napríklad vyrobiť vyššie popísaným spôsobom.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II sú z väčšej časti nové a môžu sa napríklad vyrobiť tak, že sa

2-amino-2-kyanoacetamid vzorca V

nechá reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca VI

(VI) v ktorom majú R¹, R², R³ a R⁴ vyššie uvedený význam, v inertných rozpúšťadlách a za prítomnosti trietylortoformiátu.

Ako rozpúšťadlá pre jednotlivé kroky spôsobu sú vhodné bežné' inertné organické rozpúšťadlá, ktoré sa za daných reakčných podmienok nemenia. K týmto patria výhodne étery, ako je napríklad dietyléter, dioxán, tetrahydrofurán, glykolmonometyléter a glykoldimetyléter, uhlovodíky, ako je napríklad benzén, toluén, xylén, hexán, cyklohexán alebo ropné frakcie, halogenované uhlovodíky, ako je napríklad dichlórmetán, trichlórmetán, tetrachlórmetán, dichlóretylén, trichlóretylén alebo chlórbenzén a ďalej etylester kyseliny octovej, acetonitril, triamid kyseliny hexametylfosforečnej, dimetylformamid, acetón alebo dimetoxyetán. Samozrejme je tiež možné použiť zmesi uvedených rozpúšťadiel. Obzvlášť výhodný je acetonitril.

Reakčné teploty sa môžu pohybovať všeobecne v širokom rozmedzí, zvyčajne sa pracuje v rozmedzí 0 “C až 180 ’C, výhodne 30 ’C až 150 ’C.

Kroky spôsobu podlá predloženého vykonávajú pri normálnom tlaku, je však vynálezu sa všeobecne ale tiež možné pracovať pri zvýšenom alebo zníženom tlaku, napríklad pri tlaku v rozmedzí

0,05 až 0,5 MPa.

Zlúčeniny vzorca V sú známe (pozri Logemann, G. Shaw, Chemistry and Industry, 1980 (13), 541 - 542).

Aminy všeobecného vzorca VI sú čiastočne známe alebo nové a potom sa môžu vyrobiť pomocou známych metód (pozri L. R. Krepski a kol., Synthesis, 1986, 301 - 303).

Zlúčeniny podlá predloženého vynálezu všeobecného vzorca I a la vykazujú nepredpokladatelné cenné farmakologické spektrum účinku.

Tieto zlúčeniny inhibujú jednu alebo viacero c-GMP metaboližujúcich fosfodiesteráz (PDE I, PDE II a PDE V). Toto vedie k diferencovanému vzostupu c-GMP. Zvýšenie hladiny c-GMP môže viesť k .antitrombotickému, vazodilatačnému, antiarytmickému a/alebo protizápalovému účinku. Selektivita je spoluurčovaná rozdelením izoenzýmov v tkanivách.

Okrem toho zosilňujú zlúčeniny podlá predloženého vynálezu účinok substancií, ako je napríklad EDRF (Endothelium derived relaxing factor) a ANP (atrial natriuretic peptide), ktoré zvyšujú hladinu c-GMP.

Môžu sa teda použiť v liečivách na ošetrenie zápalových ochorení ako je napríklad astma, zápalových dermatóz, na ošetrenie vysokého krvného tlaku, stabilnej a instabilnej angíny, ochorení periférnych a kardiálnych ciev a arytmií, na ošetrenie tromboembolytických ochorení a ischémií ako je infarkt myokardu, mozgová mŕtvica, tranzistorické a ischemické ataky, angína pectoris, poruchy periférneho prekrvenia, potlačenie restenóz, ako po trombolýznych terapiách, perkutánnych transluminálnych angioplastiách (PTA) a bypasse, perkutánnych transluminálnych koronárnych angioplastiách (PTCA) a bypasse, na ošetrenie septického šoku a ochorení urogenitálneho systému, ako je napríklad hypertrofia prostaty, impotencia a inkontinencia.

Aktivita fosfodiesteráz (PDE) c-GMP stimulovateľná PDE II, c-GMP inhibovateľná PDE III a c-AMP špecifická DDE-IV boli izolované z bravčového alebo hovädzieho srdečného myokardu. Ca-Cal-modulinstimulovateľná PDE I bola izolovaná z bravčovej aorty alebo bravčového mozgu. C-GMP-špecifická PDE V bola získaná z bravčového tenkého čreva, bravčovej aorty a/alebo ľudských krvných doštičiek. Čistenie sa vykonáva pomocou aniónovej výmennej chromátografie na MonoQ^RPharmacia v podstate podľa metódy M. Hoeyho a Miles D. Houslayho, Biochemical Pharmacology, diel 40, 193 - 202 (1990).

Stanovenie enzýmovej aktivity sa vykonáva v testovacej vsádzke 100 μΐ v 20 mM Tris/Hcl-pufre pH 7,5, ktorý obsahuje 5 mM MgCl₂, 0,1 mg/ml albumínu z hovädzieho séra a bud 800 Bq ^JHcGMP alebo ³HcAMP.. Konečná koncentrácia zodpovedajúcich nukleotidov je 10⁶ mól/1. Reakcia sa naštartuje prídavkom enzýmu, množstvo enzýmu je odmerané tak, aby počas inkubačnej doby 30 minút zreagovalo asi 50 % substrátu. Aby sa otestovala cGMP stimulovateľná PDE II, použije sa substrát ³HcAMP a do vsádzky sa pridá 10“⁶ neznačenej cGMP. Aby sa otestovala Cacalmodulínzávislá PDE I, pridá sa a 0,1 μΜ calmodulínu. Reakcia acetonitrilu, ktorý obsahuje 1 do reakčnej vsádzky 1 μΜ CaCl₂sa ukončí prídavkom 100 μΐ mM cAMP a 1 mM AMP. 100 μΐ reakčnej vsádzky sa rozdelí na HPLC a štiepne produkty sa on line kvantitatívne stanovia pomocou prietokového scintilačného počítača. Meria sa koncentrácia substrátu, pri ktorej sa rýchlosť reakcie zníži o 50 %.

Tabulka Inhibícia fosfodiesteráz in vitro

Pr.	PDE I IC₅₀ (nM)	PDE II IC₅₀ (nM)	PDE ^IC50	V (nM)
5	10	3	50
8	40	2
14	4	0.6	0.	3
20	1	0.4	1
25	3	0.1	10

Zlúčeniny sa skúšajú na antihypertenzivnu aktivitu na narkotizovaných ošípaných.

Antihypertenzívna aktivita sa meria po intravenóznej aplikácii na SHR-krysách.

Na stanovenie cyklických nukleotidov sa odoberie tkanivo srdca a aorty a bezprostredne potom sa hlboko zmrazí. Vzorky sa pod kvapalným dusíkom rozomelú na prášok, extrahujú sa 70 % etylalkoholom a stanoví sa obsah cGMP a cAMP pomocou komerčných rádioimunoassay (Amersham).

Erekciu vyvolávajúci účinok sa meria na narkotizovaných králikoch (C. G. Stief a kol., World Journal Urology, str. 233 - 236).

Substancie sa aplikujú v dávkach 0,1 až 10 mg/kg buď priamo do corpus cavernosum, alebo intraduodenálne, rektálne, orálne, transdermálne alebo intravenózne.

Nové účinné látky sa môžu pomocou známych spôsobov previesť na bežné prípravky, ako sú tabletky, dražé, pilulky, granuláty, aerosóly, sirupy, emulzie, suspenzie a roztoky, za použitia inertných, netoxických, farmaceutický vhodných nosičov alebo rozpúšťadiel. Pri tom by mala byť prítomná terapeuticky účinná zlúčenina v koncentrácii asi 0,5 až 90 % hmotnostných celkovej zmesi, to znamená v množstve, ktoré je dostatočné na to, aby sa dosiahol udávaný účinok.

Prípravky sa napríklad vyrobia rozptýlením účinnej látky v rozpúšťadlách a/alebo nosných látkach, pripadne za použitia emulgačných a/alebo dispergačných činidiel, pričom napríklad v prípade vody ako zried’ovacieho činidla sa prípadne môžu použiť ako pomocné rozpúšťacie prostriedky organické rozpúšťadlá.

Aplikácia sa vykonáva zvyčajnými spôsobmi, výhodne orálne, parenterálne, transdermálne, perlinguálne alebo intravenózne.

Všeobecne sa ukázalo na dosiahnutie požadovaných výsledkov ako výhodné podávať účinné látky všeobecného vzorca I pri intravenóznej aplikácii v celkovom množstve asi 0,01 až asi 10 mg/kg, výhodne asi 0,1 mg/kg až 10 mg/kg telesnej hmotnosti.

Môže byť prípadne potrebné od vyššie uvádzaných množstiev upustiť, a síce v závislosti od telesnej hmotnosti, prípadne od typu aplikácie, od závažnosti ochorenia, ale tiež od individuálnej znášanlivosti voči lieku, prípadne od druhu a typu prípravku a od okamihu, prípadne intervalu, pri ktorom aplikácia prebieha. Tak môže byť v niektorých prípadoch dostatočné vychádzať z nižších ako vyššie uvedených minimálnych množstiev, zatial čo v iných prípadoch sa musí uvedená horná hranica prekročiť. V prípade aplikácie väčších množstiev je možné odporučiť rozdelenie tejto dávky na nie^olko jednotlivých dávok v priebehu dňa.

Príklady vyhotovenia vynálezu

Východiskové látky

Všeobecný pracovný predpis pre syntézu 1-substituovaných

5-acylamino-imidazol-4-karboxamidy (vzorec IV)

Metóda A mmólov l-substituovaného 5-amino-imidazol-4-karboxamidu a 15 mmólov hydridu sodného (60 % disperzia v minerálnom oleji) (prípadne 30 mmólov hydridu sodného, pokiaľ R² znamená hydroxyskupinu) sa v 50 ml absolútneho tetrahydrofuránu mieša po dobu 3 hodiny pri teplote 20 °C (ťažko rozpustné imidazoly sa až 3 hodiny refluxujú). Pri teplote 20 C sa prikvapká 10 mmólov chloridu kyseliny (prípadne 20 mmólov pri prítomnosti hydroxylovej skupiny) v 2,5 ml absolútneho tetrahydrofuránu a reakčná zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Rozpúšťadlo sa potom vo vákuu odparí, získaný zvyšok sa vyberie do 50 ml etylesteru kyseliny octovej a vytrepe sa 50 ml vody. Organická fáza sa oddelí, vysuší sa pomocou bezvodého síranu sodného a rozpúšťadlo sa vo vákuu odparí. Získaný zvyšok sa čistí rekryštalizáciou alebo okamihovou chromatografiou.

Metóda B.

mmól l-substituovaného 5-amino-imidažol-4-karboxamidu sa rozpustí v 20 ml vysušeného pyridínu. Po prídavku 50 mg 4dimetylaminopyridínu (DMAP) sa prikvapká 11 mmól chloridu kyseliny (prípadne 22 mmól, pokiaľ R² znamená hydroxylovú skupinu) pri teplote 20 “C (pevné chloridy kyseliny sa rozpustia v malom množstve absolútneho toluénu). Reakčná zmes sa mieša po dobu jednej hodiny pri teplote 20 °C, v niektorých prípadoch je potrebné jednohodinové až dvojhodinové zahriatie na teplotu 50°C (DC-kontrola). Vsádzka sa potom vleje do 100 ml ľadovej vody a trikrát sa vytrepe vždy 50 ml etylesteru kyseliny octovej. Spojené etylacetátové fázy sa premyjú dvakrát 1 n kyselinou chlorovodíkovou a raz nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušia sa pomocou bezvodého síranu sodného a vo vákuu sa zahustia. Získaný zvyšok sa čistí pomocou okamihovej chromatografie alebo rekryštalizáciou.

Pomocou obidvoch týchto spôsobov sa vyrobia l-substituované

5-acylamino-imidazol-4-karboxamidy, uvedené v nasledujúcej tabuľke I:

Tabuľka

Pr.	A	R⁴	R²	R¹	metóda	výťažok (%)	Y
I	-ch₃	ch₃	A	n-Hexyl	A	33	0,40
II	-C(CH₃)₃	ch₃	0 Ϊ -O^C(CH₃)₃	n-Hexyl	A	28	0,45
III	-n-C₁₇H_3J	ch₃	0 X	n-Hexyl	B	50	0,48
IV	-c₆h₅	ch₃	0 11	n-Hexyl,	A	19	0,39
V	-4-Cl-C₆H₃	ch₃		n-Hexyl	A	15	0,40

Pr.	A	R⁴	R²	R¹	netoda	výťažok (%)	^RZ
VI	σ	ch₃		n-Hcxyl	B	52	0,43
VII	σ	ch₃	H	n-Hexyl	A	16	0,38
VIII	σ	ch₃	-°¾		B	45	0,41
IX	o	H	H	^^-0	B	41
x	o	H	H		B	27,9
XI		H	H		B	17,3
XII		H	H	^-^-0	B	37,9
XIII		H	H		B	29,2

Pr.	A	R⁴	R²	R¹	t metóda	výťažok (%)	Rf₊
XIV	-<	H	H		B	38,7
XV	--^~^NOa	H	H		B	15,7
XVI	--OMa	H	H		B	183
XVII	OMe	H	H		B	44,7
XVIII	MeO -b	H	H		B
XIX		H	H	ohch^-Q	B	48
XX		H	H	otosos-Q	B	34,8
XXI	~P CO₂Me	H	H	^o^-Q	B	14,5
XXII	—Q-co^	H	H	<ρντ-<0	B	11.4
XXIII	-CJ CO₃Me	H	H	^WV-0	B	28,7

Pr.	A	R⁴	R²	R¹	metóda	výťažok (%)	+ ^Rf
XXIV	OM· --CM.	H	H		B	11.7
XXV	τχ>	H	H		B
XXVI		H	H		B
XXVII	-o-	H	H i		B	45	0.41

* pohyblivá fáza: dichlórmetán/metylalkohol 10 : 1

Výrobné príklady

Všeobecný pracovný predpis pre syntézu 2,9-disubstituovaných purín-6-ónov (vzorec I)

Metóda A mmól 1-substituovaného 5-acylamino-imidazol-4-karboxamidu a 5 mmólov uhličitanu draselného sa varí v 20 ml etylalkoholu a 10 ml vody cez noc pod spätným chladičom. Rozpúšťadlo sa potom vo vákuu odparí, získaný zvyšok sa vyberie do 20 ml etylesteru kyseliny octovej a vytrepe sa nasýteným roztokom chloridu sodného. Organická fáza sa oddelí, vysuší sa pomocou bezvodého síranu sodného a vo vákuu sa zahustí. Získaný zvyšok sa čistí rekryštalizáciou alebo okamihovou chromatografiou.

Metóda B (podľa EP 0 526 004) mmól l-substituovaného 5-acylamino-imidazol-4-karboxamidu, 5 mmólov uhličitanu draselného a 1 ml 30 % roztoku peroxidu vodíka sa varí v 10 ml etylalkoholu cez noc pod spätným chladičom (DC-kontrola). Ďalšie spracovanie sa vykonáva analogicky ako podľa predpisu A.

Podľa týchto predpisov sa vyrobia 2,9-disubstituované purín-

6-óny, uvedené v nasledujúcej tabuľke 1.

4-> 4->	O O CM O	u o £j CM	O O CO	u 0 C\	0,38	0,41
výťažok (%)	tT *Τ	CD O*	m	00 oC	00* cn	ΤΓ* ’ST
metóda	-
<	<	<	<			c
	n	π	n	n	Π	A
	V	v	Ψ	V	U	Y
	í. z o.	L x (J.	L x ςξ	L x o	*η X o		L T o
	x Q	x o	x o	x o	X^Ro		X* o
	X U	x o	x Q	x u	T o		x* o
CH tí	E	►w 4-4		x -	*r·	4i
T tí	E	►x	T	-T*	x
			<5	o s
	n	n	A]	íA
	M	T	v				y
	1	1	T	T			1
(X	cr\	o	—	CM	m	tt

•P -P	U o ΤΓ Cx	O o C\ m	o o vn CM		u o Cx xr	ω o xr xo
výťažok (%)	n	n oC -O“			σγ có* ’T	cm m
metóda	<	c	<	<	<	<
tí	9 •r« X o ŕ# x o ce X Q	9 X o r* X o, x* o	9 •r· X o c* x x ω	9 •r· X o Λ· x x* o	9 it x (J, x* o~ x o	9 X o r· X o r· X Q
cs tí	T	x	—-	-r·	s
v tí		T				—t
<	Γ4 O 9	<u S O 9	© 9°	9^	9	XX J
k Cm	ι/Ί	o		oo	Cs	O CM

P P	O o co CM	ω o rh CM	o o m CM	195°C	u o CM OO
výťažok (%)	vÝ ΓΊ	(N cC cs	\O tt*	O* m	cm* '’T
me tóda	<	<	C	<	<
C$	9 X o ŕ* x O x* o	9 •r« I o rx X o* x o	9 X (J. x* o T o	9 X ϋ 12 (J. ľŕ O	9 *r< r q, x o x o
C4 tí	s	T*	T*	>—1
-r tí	T t—	^ri ' ►M	*r	E
	Q-?	x_ o u 9	T CM O íý	0) S © o ’9	0^0 0
í. CL,	CM	CM CM	m CM	tr CM	CM

Príklad 29

9-(2-metánsulfonyloxy-3-nonyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ón

0,36 g (1 mmól) 9-(2-hydroxy-3-nonyl)-2-cyklohexyl-purín-

6-ónu (príklad 6) a 0,3 ml trietylamínu sa mieša v 5 ml absolútneho dichlórmetánu pri teplote 0 °C. Potom sa prikvapká

0,1 ml chloridu kyseliny metánsulfónovej, rozpusteného v 2,5 ml absolútneho dichlórmetánu. Po 30 minútach pri teplote 0 °C sa reakčná zmes vytrepe 10 ml nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu. sodného, 10 ml 2 n roztoku kyseliny chlorovodíkovej a 10 ml nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného. Organická fáza sa vysuší pomocou bezvodého síranu sodného, rozpúšťadlo sa vo vákuu odparí a získaný zvyšok sa čistí pomocou okamihovej chromatografie za použitia zmesi etylacetátu, dichlórmetánu a metylalkoholu ako eluačného činidla.

Výťažok: 0,198 g (45,2 %) Rf = 0,52 (dichlórmetán/metylalkohol 10 : 1).

Príklad 30

9-(2-metánsulfonyl-6-fenyl-3-hexyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ón

V názve uvedená zlúčenina sa vyrobí analogicky ako je popísané v príklade 29, keď sa vychádza z 9-(2-hydroxy-6-fenyl-

3-hexyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ónu (príklad 8).

Výťažok: 89,7 % Rf = 0,5 (dichlórmetán/metylalkohol 10 : 1).

Príklad 31

9-(2-azido-3-nonyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ón

0,381 g (0,87 mmól) 9-(2-metánsulfonyloxy-3-nonyl)-2cyklohexyl-purín-6-ónu (príklad 29) a 0,113 g (1,74 mmól) azidu sodného sa mieša cez noc v 5 ml absolútneho dimetylformamidu pri teplote 100 ’C. Potom sa ochladí na teplotu 20 ’C, zmieša sa s 30 ml etylesteru kyseliny octovej a dvakrát sa premyje vždy 50 ml vody a raz 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Po vysušení pomocou bezvodého síranu sodného sa rozpúšťadlo vo vákuu odparí a získaný zvyšok sa čistí pomocou okamihovej chromátografie (eluačné činidlo : dichlórmetán/metylalkohol 30 : DVýťažok: 0,311 g (92,8 %)

R_f = 0,55 (dichlórmetán/metylalkohol 10 : 1).

Príklad 32

9-(2-azido-6-fenyl-3-hexyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ón

V názve uvedená zlúčenina sa vyrobí analogicky ako je popísané v príklade 31, keď sa vychádza z 9-(2-metánsulfonyloxy-

6-fenyl-3-hexyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ónu (príklad 30). Výťažok: 0,372 g (78,2 %) Rf = 0,54 (dichlórmetán/metylalkohol 10 : 1).

Príklad 33

9-(2-oxo-3-nonyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ón

CH.

K 0,15 ml oxalylchloridu v 5 ml absolútneho dichlórmetánu sa pri teplote -60 °C prikvapká 0,2 ml absolútneho dimetylsulfoxidu v 3 ml absolútneho dichlórmetánu a reakčná zmes sa mieša po dobu 20 minút pri teplote -60 °C. Potom sa pomaly prikvapká 540 mg (1,5 mmól) 9-(2-hydroxy-3-nonyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ónu (príklad 6) v 3 ml dichlórmetánu a mieša sa po dobu jednej hodiny pri teplote -60 °C. K tomuto roztoku sa prikvapká 1 ml trietylamínu v 3 ml dichlórmetánu, reakčná zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti, pridá sa 7 ml vody a organická fáza sa oddelí. Organická fáza sa potom premyje 10 ml 2 n kyseliny chlorovodíkovej a 10 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysuší sa pomocou bezvodého síranu sodného a vo vákuu sa zahustí. Získaný zvyšok sa čistí pomocou okamihovej chromátografie (eluačné činidlo : dichlórmetán/metylalkohol 40 : 1).

Výťažok: 0,416 g (77,4 %)

Rf = 0,47 (dichlórmetán/metylalkohol 10 : 1).

Príklad 34

9-(2-oxo-6-fenyl-3-hexyl)-2-cykIohexyl-purín-6-ón

V názve uvedená zlúčenina sa vyrobí analogicky ako je popísané v príklade 33, keď sa vychádza z 9-(2-hydroxy-6-fenyl3-nonyl)-2-cyklohexyl-purín-6-ónu (príklad 8).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 2,9-disubstituované purin-6-óny všeobecného vzorca I v ktorom

R¹ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 2 až 10 uhlíkovými atómami, ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná atómom halogénu, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou skupinou s až 6 uhlíkovými atómami,

R² znamená vodíkový atóm, hydroxyskupinu, azidovú skupinu alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 6 uhlíkovými atómami, alebo znamená skupinu -O-SO₂R₅, pričom

R⁵ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 4 uhlíkovými atómami alebo fenylovú skupinu,

R³ znamená vodíkový atóm alebo

R² a R³ znamená spoločne zvyšok =0,

R⁴ znamená vodíkový atóm alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 4 uhlíkovými atómami a

A znamená zvyšok vzorca alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 20 uhlíkovými atómami, alebo cykloalkylovú skupinu s 3 až 7 uhlíkovými atómami, alebo fenylovú skupinu, ktoré sú prípadne až dvakrát rovnako alebo rôzne substituované atómom halogénu, karboxylovou skupinou, trifluórmetylovou skupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou, alkoxykarbonylovou alebo alkoxylovou skupinou so vždy až 5 uhlíkovými atómami, ktoré samé môžu byť substituované fenylovou skupinou a/alebo sú cyklény prípadne substituované fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná priamou alebo rozvetvenou alkoxyskupinou s až 5 uhlíkovými atómami, a ich tautoméry a soli.
2. 2,9-disubstituované purín-6-óny podľa nároku 1 všeobecného vzorca I v ktorom

Rl znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 2 až 8 uhlíkovými atómami, ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná atómom fluóru, chlóru alebo brómu, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou skupinou s až 4 uhlíkovými atómami,

R² znamená vodíkový atóm, hydroxyskupinu, azidovú skupinu alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 4 uhlíkovými atómami, alebo znamená skupinu -O-SO2R5, pričom

R⁵ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami alebo fenylovú skupinu,

R³ znamená vodíkový atóm alebo

R² a R³ znamená spoločne zvyšok =0,

R⁴ znamená vodíkový atóm alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami a

A znamená zvyšok vzorca alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 19 uhlíkovými atómami, alebo cyklopropylovú, cyklopentylovú, cyklohexylovú, cykloheptylovú alebo fenylovú skupinu, ktoré sú prípadne až dvakrát rovnako alebo rôzne substituované atómom fluóru, chlóru alebo brómu, karboxylovou skupinou, nitroskupinou, hydroxyskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou, alkoxykarbonylovou alebo alkoxylovou skupinou so vždy až 4 uhlíkovými atómami, ktoré samé môžu byť substituované fenylovou skupinou a/alebo sú cyklény pripadne substituované fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná priamou alebo rozvetvenou alkoxyskupinou s až 4 uhlíkovými atómami, a ich tautoméry a soli.
3. 2,9-disubstituované purín-6-óny podl’a nároku 1 všeobecného vzorca I v ktorom

R¹ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 2 až 7 uhlíkovými atómami, ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, ktorá sama môže byť substituovaná atómom fluóru, chlóru alebo brómu, nitroskupinou, kyanoskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou skupinou s až 3 uhlíkovými atómami,

R² znamená vodíkový atóm, hydroxyskupinu, azidovú skupinu alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami, alebo znamená skupinu -O-SO₂R₅, pričom

R⁵ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami alebo fenylovú skupinu,

R² znamená vodíkový atóm alebo

R² a R² znamená spoločne zvyšok =0,

R⁴ znamená vodíkový atóm alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 3 uhlíkovými atómami a

A znamená zvyšok vzorca alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s až 18 uhlíkovými atómami, alebo cyklopropylovú, cyklopentylovú, cyklohexylovú, cykloheptylovú alebo fenylovú skupinu, ktoré sú prípadne až dvakrát rovnako alebo rôzne substituované atómom fluóru, chlóru alebo brómu, karboxylovou skupinou, nitroskupinou, hydroxyskupinou alebo priamou alebo rozvetvenou alkylovou, alkoxykarbonylovou alebo alkoxylovou skupinou so vždy až 3 uhlíkovými atómami, ktoré samé môžu byt substituované fenylovou skupinou a/alebo sú cyklény prípadne substituované fenylovou skupinou, ktorá sama môže byt substituovaná priamou alebo rozvetvenou alkoxyskupinou s až 3 uhlíkovými atómami,' a ich tautoméry a soli.
4. 2,9-disubstituované purín-6-óny podlá nároku 1 až 3 na terapeutické použitie.
5. Spôsob výroby 2,9-disubstituovaných purín-6-ónov všeobecného vzorca I podlá nárokov 1 až 3_Ύ vyznačujúci sa tým, že sa najprv zlúčeniny všeobecného vzorca II (Π) (III), ί η ο 4 v ktorom majú R , R , R^J a R vyššie uvedený význam, prevedú reakciou so zlúčeninami všeobecného vzorca II

A - CO - C1 v ktorom má A vyššie uvedený význam, v inertných rozpúšťadlách a za prítomnosti bázy na zlúčeniny všeobecného vzorca IV

A-CO-HN

R‘ v ktorom majú A, R¹, R², R³ a R⁴ vyššie uvedený význam, a v druhom kroku sa v inertných rozpúšťadlách a za prítomnosti bázy cyklizujú, a substituenty R¹, R², R³ a R⁴ sa acylájciou, oxidáciou a/alebo výmenou azidu zavádzajú, prípadne derivatizujú.
6. Liečivo, obsahujúce 2,9-dísubstituované purín-6-óny podľa nárokov 1 až 3.
7. Liečivo podľa nároku 6 na ošetrenie zápalov, tromboembolických ochorení, ako i ochorení srdca a krvného obehu.
8. Použitie 2,9-disubstituovaných purín-6-ónov podľa nárokov 1 až 3 na výrobu liečiv.
9. Použitie podľa nároku 8 na výrobu liečiv na ošetrenie zápalov, tromboembolických ochorení, ako i ochorení srdca a krvného obehu.
10. Liečivá podľa nároku 6 a 7 na ošetrenie impotencie.