SK6692001A3

SK6692001A3 - Certain substituted caprolactams, pharmaceutical compositions containing them and their use in treating tumors

Info

Publication number: SK6692001A3
Application number: SK669-2001A
Authority: SK
Inventors: Frederick Ray Kinder Jr; Kenneth Walter Bair; Christopher Turchik Jagoe; Richard William Versace; Sompong Wattanasin
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1998-11-17
Filing date: 1999-11-15
Publication date: 2001-10-08
Also published as: UY25807A1; AU1506000A; CZ20011707A3; ZA200103419B; DE69916488D1; AR023914A1; JP2002529536A; PT1131297E; AU748016B2; NO20012428L; CA2347773A1; IL142701A0; BR9915436A; WO2000029382A1; CN1326445A; NO20012428D0; ATE264309T1; JP3550545B2; KR20010080461A; CO5140099A1

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka oblasti chemoterapeutických účinných látok, zvlášť určitých substituovaných kaprolaktámov, farmaceutických kompozícií, obsahujúcich uvedené kaprolaktámy, spôsobu liečby nádorov, použitia uvedených kaprolaktámov moterapii nádorov, a spôsobu výroby týchto zlúčenín.

Doterajší stav techniky v cheRakovina predstavuje vážny zdravotný problém na celom V dôsledku toho sa podniklo veľké množstvo výskumov s nájsť vhodné spôsoby liečby a zmiernenie rakoviny u človeka.

svete.

cieľom

V oblasti chemoterapeutík sa výskum zameriava na vývoj protinádorových látok, účinných proti rôznym typom rakoviny. Často však vyvinuté protinádorové látky, pri ktorých sa našla účinnosť proti nádorovým bunkám, sú bohužiaľ toxické aj pre zdravé bunky. Po podaní protinádorovej zlúčeniny pacientovi, ktorý potrebuje protirakovinovú terapiu, sa táto toxicita prejavuje príznakmi, ako je úbytok váhy, nausea, zvracanie, strata vlasov, únava, svrbenie, halucinácie, nechutenstvo atď. .

Naviac bežne používané chemoterapeutické látky nevykazujú požadovanú účinnosť lebo spektrum ich účinnosti proti rôznym typom rakoviny nie je tak široké, ku toho nie sú majú aj niek, ako by bolo žiaduce. V dôsledje veľký dopyt po chemoterapeutických činidlách, ktoré len účinnejšie proti všetkým typom rakoviny, ale ktoré vyšší stupeň selektivity na likvidáciu rakovinových bupričom by nemali normálne zdravé bunky, protinádorové činidlá, žiadny

Hľadajú zvlášť (alebo len minimálny) vplyv na sa vysoko účinné a selektívne proti rakovine hrubého čreva,

·· ·	··	··	·· ·
• · · ·	• · ·	• · · ·
• · ·	•	• ···	• · ·
·· ···	• ·	··	·· ··

močového mechúra, prostaty, žalúdka, pankreasu, prsníkov, pľúc, pečene, mozgu, testes, vaječníkov, krčku maternice, kože, vulvy a tenkého čreva. Navyše, účinné látky proti rakovine hrubého čreva, prsníkov, pľúc a prostaty, práve tak ako proti melanómom, sú zvlášť žiadané, pretože proti týmto typom rakoviny neexistuje v súčasnosti žiadna zvlášť účinná terapia.

Podstata vynálezu

Predložený vynález opisuje nové protinádorové zlúčeniny, ktoré sú účinné proti rôznym rakovinovým bunkám. Vynález sa týka zvlášť niektorých substituovaných kaprolaktámov, ktoré vykazujú vysoký stupeň selektivity v likvidácii rakovinových buniek. Podstatou predloženého vynálezu je zistenie, že niektoré substituované kaprolaktámy sú použiteľné pri liečbe nádorov.

kde

R¹ je (Ci-6) alkýlová skupina alebo (C3-6) cykloalkylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo (Ci-β) alkylová skupina;

X je (C1-12) alkylénová skupina; (C₂-i₂) alkenylénová skupina;

alebo (C2-12) alkinylénová skupina;

m je 0 alebo 1; a

R³ je (C₃__B) cykloalkylová skupina; alebo aromatický cyklický systém, zvolený z II, III, IV a V:

···

“b

Μ (V) kde

R⁴ je atóm vodíka, atóm chlóru alebo metoxylová skupina;

R⁵ je atóm vodíka, atóm chlóru, (Ci-ig) alkylová skupina alebo (Ci-ig) alkoxylová skupina; a

Z je atóm kyslíka, atóm síry, skupina N-H, alebo skupina

N-CH₃;

alebo ich farmaceutický prijateľných solí s kyselinami, ak prichádzajú do úvahy.

Výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde

R¹ je (Ci-e) alkylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo (Ci_₄) alkylová skupina;

X je (Ci-g) alkylénová skupina alebo (C₂-6) alkenylénová skupina;

m je 0 alebo 1; a

R³ je (C3-8) cykloalkylová skupina; alebo aromatický cyklický systém, zvolený z II, III, IV a V, kde

R⁴ je atóm vodíka, atóm chlóru alebo metoxylová skupina;

R⁵ je atóm vodíka, atóm chlóru, (Ci-is) alkylová skupina alebo (Ci-is) alkoxylová skupina; a

Z je atóm kyslíka, atóm síry, skupina N-H, alebo skupina N-CH₃;

alebo ich farmaceutický prijateľné soli s kyselinami, ak prichádzajú do úvahy.

·· • · • · ·· • · · • · ··· ·· ··· ·· ·· ·· · • ··· • ·· • ·· • ·· ·····

Ešte viac sú výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde

R¹ je izopropylová skupina alebo terc-butylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo metylová skupina;

m je 0 alebo 1;

X je (Ci-6) alkylénová skupina; a

R³ je (C5-7) cykloalkylovú skupina; alebo aromatický cyklický systém zvolený z Ila a V:

4’

Ila V kde

R⁴' je v meta-polohe a je atóm vodíka alebo atóm chlóru; a

R⁵' je v para-polohe a je atóm vodíka, atóm chlóru, (Ci_is) alkylová skupina alebo (Cx-ie) alkoxylová skupina;

Zvlášť výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde

R¹ je izopropylová skupina alebo terc-butylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo metylová skupina;

m je 0 alebo 1;

X je metylénová skupina alebo etylénová skupina; a

R³ je (C5-7) cykloalkylovú skupina, fenylová skupina, 3,4-dichlórfenylová skupina, 4-metoxyfenylová skupina, 4-n-decylfenylová skupina, 4-n-decyloxyfenylová skupina alebo 3-pyridylová skupina;

s výhradou, že keď m sa rovná 0, R³ je (C5-7) cykloalkylová skúpi5

··		•	e ·		··	• a
»	•	··	•	•	•	•	• 4
•	•	•	•	•	···	•	•
e	•	•	•	•	• ·	•	•
··		• · ·	··		• ·	• ·	4

na, 4-n-decylfenylová skupina alebo 4-n-decyloxyfenylová skupina;

Ďalší aspekt predloženého vynálezu sa týka farmaceutických kompozícií, zvlášť na liečbu nádorov u teplokrvných živočíchov, ktoré obsahujú farmaceutický prijateľný nosič alebo riedidlo a protinádorovo účinnú dávku už uvedenej zlúčeniny všeobecného vzorca I, výhodne 3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu alebo 3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-3-fenylpropoxy)-2#-azepin-3-yl]non-6-énamidu alebo farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinou, ak táto soľ môže vzniknúť.

Ďalší aspekt predloženého vynálezu sa týka spôsobu liečby nádorov, vyznačujúcej sa tým, že sa cicavcovi, vyžadujúcemu takú liečbu, podá terapeuticky účinné množstvo už uvedenej zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo jej farmaceutický prijateľnej adičnej soli s kyselinou, ak táto soľ môže vzniknúť.

Ešte ďalší aspekt predloženého vynálezu sa týka použitia zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo farmaceutický prijateľnej soli takej zlúčeniny, na prípravu farmaceutickej kompozície na použitie v chemoterapii nádorov.

Ďalej sa predložený vynález týka použitia zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo farmaceutický prijateľnej soli takej zlúčeniny, na chemoterapiu nádorov.

V skôr uvedených definíciách:

1) alkylové skupiny obsahujúce 1 až 6 atómov uhlíka majú buď priamy alebo rozvetvený reťazec, pričom príklady posledných uvedených zahŕňajú izopropylovú skupinu, izobutylovú skupinu, terc-butylovú skupinu, izopentylovú skupinu, neopentylovú skupinu, izohexylovú skupinu, 3-metylpentylovú skupinu, 2,2-dimetylbutylovú skupinu, 2,3-dimetylbutylovú skupinu a 1,1,2,2-tetrametyletylovú skupinu; a

2) alkylové skupiny a alkoxylové skupiny, obsahujúce 1 až 18 atómov uhlíka, majú buď priamy alebo rozvetvený reťazec.

Výraz (C1-12)alkylénová skupina znamená v tomto texte dvojväzbovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktorá sa skladá výhradne z atómov uhlíka a atómov vodíka a ktorá obsahuje 1 až 12 atómov uhlíka. Príklady alkylénových skupín zahŕňajú metylénovú skupinu, etylénovú skupinu, propylénovú skupinu, butylénovú skupinu, pentylénovú skupinu, 3-metylpentylénovú skupinu atď. .

Výraz (C2-12) alkenylénová skupina znamená v tomto texte dvojväzbovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktorá sa skladá výhradne z atómov uhlíka a atómov vodíka, ktorá obsahuje prinajmenšom jednu dvojitú väzbu uhlík-uhlík, a ktorá má 2 až 12 atómov uhlíka. Príklady alkenylénových skupín zahŕňajú etenylénovú skupinu, propenylénovú skupinu, butenylénovú skupinu, pentenylénovú skupinu, 3-metylpentenylénovú skupinu atď..

Výraz (C2-12) alkinylénová skupina znamená v tomto texte dvojväzbovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktorá sa skladá výhradne z atómov uhlíka a atómov vodíka, ktorá obsahuje prinajmenšom jednu trojitú väzbu uhlik-uhlík, a ktorá má 2 až 12 atómov uhlíka. Príklady alkinylénových skupín zahŕňajú acetylénovú skupinu, propinylénovú skupinu, butinylénovú skupinu, pentinylénovú skupinu, 3-metylpentinylénovú skupinu atď..

Adičné soli zlúčenín všeobecného vzorca I s kyselinami môžu byť soli s farmaceutický prijateľnými organickými alebo anorganickými kyselinami. Aj keď výhodné adičné soli s kyselinami sú soli s kyselinou chlorovodíkovou a kyselinou metánsulfónovou, môžu sa použiť aj soli s kyselinou sírovou, kyselinou fosforeč-

nou, kyselinou citrónovou, kyselinou fumarovou, kyselinou maleinovou, kyselinou benzoovou, kyselinou benzénsulfónovou, kyselinou jantárovou, kyselinou vinnou, kyselinou mliečnou a s kyselinou octovou.

Kaprolaktámy všeobecného vzorca I sa môžu pripraviť nasledujúcim spôsobom:

kde R¹, R², X, m a R³ sú definované skôr.

Čo sa týka jednotlivých stupňov, aminokaprolaktámu všeobecného vzorca všeobecného vzorca VII, čim sa získa ·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· ··· • · · · · ··· · e • · · ···· ··· ·· ··· ·· ·· ·· ··· stupeň A zahŕňa acyláciu

VI laktónovým derivátom diamidová zlúčenina všeobecného vzorca VIII. Acylácia sa uskutočňuje v polárnom organickom rozpúšťadle, výhodne v protickom polárnom rozpúšťadle ako je izopropanol, pri teplote mierne pod bodom varu použitého rozpúšťadla alebo pri teplote bodu varu rozpúšťadla, počas 4 až 48 hodín.

Stupeň B sa týka hydrolýzy 1,3-dioxánovej skupiny, spoločnej diamidovým zlúčeninám všeobecného vzorca VIII, čím sa získa substituovaná kaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca I. Hydrolýza sa typicky uskutočňuje rozpustením amidu v zmesi rozpúšťadiel, pozostávajúcich z 1) protickej kyseliny, výhodne organickej kyseliny ako je kyselina trifluóroctová, 2) z protického rozpúšťadla, výhodne vody, a 3) z inertného organického rozpúšťadla, výhodne cyklického éteru ako je tetrahydrofurán, pri teplote 0°C až 25°C počas 5 minút až 2 hodín.

Alternatívne sa diamidové zlúčeniny všeobecného vzorca VIII môžu pripraviť podľa nasledujúcej trojstupňovej reakčnej schémy:

acylácia

Stupeň 2 hydrolýza

Stupeň

XI

O

VIII ·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· ··· • · · ο · ··· · · • · ···· ··· ·· ··· ·· ·· «· ··· kde X, m a R³ a R¹ a R² sú definované skôr, a R⁶ je skupina, chrániaca alkoholy. Skupina R⁶ je výhodne silylová skupina ako je terc-butyldimetylsilylová skupina.

Čo sa týka jednotlivých stupňov, stupeň 1 zahŕňa acyláciu aminokaprolaktámu všeobecného vzorca IX laktônovým derivátom všeobecného vzorca VII, čim sa získa diamidová zlúčenina všeobecného vzorca X. Acylácia sa uskutočňuje za prítomnosti zásady, výhodne alkylamínovej zásady ako je diizopropyletylamín, a polárneho organického rozpúšťadla, výhodne protického polárneho rozpúšťadla ako je izopropanol, pri teplote o niečo nižšej ako teplota varu, alebo pri teplote varu použitého rozpúšťadla, počas 4 až 48 hodín.

Stupeň 2 sa týka hydrolýzy skupiny R⁶, spoločnej diamidovým zlúčeninám všeobecného vzorca X, čím sa získa hydroxykaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca XI. Hydrolýza sa typicky uskutočňuje za prítomnosti fluoridu, výhodne fluoridovej soli ako je tetrabutylamóniumfluorid, a v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v cyklickom éteri ako je tetrahydrofurán, pri teplote 0°C až 25°C, počas 5 minút až 2 hodín.

Stupeň 3 sa týka acylácie hydroxykaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca XI reakciou s acylchloridom všeobecného vzorca R³(X)_mCOCl, kde R³, X a m sú definované skôr, ktorou sa získa diamidová zlúčenina všeobecného vzorca VIII. Acylácia sa uskutočňuje za prítomnosti zásady, výhodne alkylamínovej zásady ako je trietylamín, a v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -78°C až 25°C počas 1 až 24 hodín.

Alternatívne sa acylácia hydroxykaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca XI v stupni 3 môže uskutočniť reakciou s karboxylovou kyselinou všeobecného vzorca R³(X)_mCO₂H, kde R³, X a m sú definované skôr, za prítomnosti činidla na kondenzáciu kar11 ·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· ··· • · · · · ·φ· ·· • · · ·· · 4 · 9 ·· • · · ······ ·· ··· ·· ·· ··e boxylových kyselín, výhodne diimidu ako je hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu, a vhodného aktivačného činidla, bežného pre diimidové kondenzačné reakcie, výhodne substituovaného pyridínu ako je 4-dimetylaminopyridín, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -78°C až 25°C počas 1 až 24 hodín.

Aminokaprolaktámové zlúčeniny všeobecného vzorca VI sa môžu pripraviť podľa nasledujúcej schémy:

cyklizácia

Stupeň la

acylácia

Stupeň 2a

Stupeň 3a silylácia

hydrolýza <-------Stupeň 5a

XVII

alkylácia ·*-------Stupeň 4a v

XVI

Stupeň 6a ▼

acylácia

hydrolýza

----►

Stupeň 7a

kde R⁶,

R², X, m a R³ sú definované skôr, a kde R⁷ je skupina, obsahujúca karbonyl. R⁷ je výhodne alkoxykarbonylová skupina ako ·· · ·· ·· ·· ···· ··· ··· • « · · · ··· · · je terc-butyloxykarbonylová skupina.

Čo sa týka jednotlivých stupňov, stupeň la zahŕňa cyklizáciu hydroxylyzinu XII (alebo akejkoľvek jeho soli alebo hydrátu) na hydroxycyklolyzín XIII. Cyklizácia sa typicky uskutočňuje za prítomnosti kondenzačného činidla, výhodne diimidu ako je hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu, a vhodného aktivačného činidla, bežného pre diimidové kondenzačné reakcie, výhodne N-hydroxyzlúčeniny ako je hydrát 1-hydroxybenztriazolu, za prítomnosti zásady ako je trietylamín, v polárnom organickom rozpúšťadle, výhodne v amide ako je N,N-dimetylformamid, pri teplote 0°C až 40°C, počas 12 až 72 hodín.

Stupeň 2a zahŕňa N-acyláciu hydroxycyklolyzínovej zlúčeniny XIII a vzniká N-acylhydroxycyklolyzínová zlúčenina všeobecného vzorca XIV. Acylačné činidlo je typicky chlorid kyseliny alebo anhydrid kyseliny. V prípade, ak R⁷ je terc-butyloxykarbonylová skupina, acylačné činidlo je cŕiterc-butyldikarbonát. Reakcia sa uskutočňuje za prítomnosti zásady, výhodne alkylamínovej zásady ako je trietylamín, v polárnom organickom rozpúšťadle, výhodne v amide ako je Ν,Ν-dimetylformamid, pri teplote 0°C až 40°C, počas 1 až 24 hodín.

Stupeň 3a zahŕňa O-silyláciu N-acylhydroxycyklolyzínovej zlúčeniny všeobecného vzorca XIV, čím sa získa silyléterová zlúčenina všeobecného vzorca XV. Silylačné činidle je typicky silylchlorid alebo silyltrifluórmetánsulfonát. V prípade, ak R⁶ je terc-butyldimetylsilylová skupina, silylačné činidlo je terc-butyldimetylsilylchlorid. Reakcia sa uskutočňuje za prítomnosti zásady, výhodne slabej zásady ako je imidazol, v polárnom organickom rozpúšťadle, výhodne v amide ako je Z\7,N-dimetylformamid, pri teplote 0°C až 40°C, počas 1 až 24 hodín.

Stupeň 4a zahŕňa N-alkyláciu silyléterovej zlúčeniny všeobecného vzorca XV alkylhalogenidom alebo alkylsulfonátom (pričom alkyl je definovaný skôr ako R²) , čim sa získa N-alkylkaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca XVI. Alkylácia sa ušku13 ·· · ·· ·· 99 • ••f ··· ··· • · · · · »·· « ·

9 9 9 9 9 9 9 9 9 99 999 99 99 99 999 točňuje za prítomnosti silnej zásady, výhodne amidu alkalického kovu ako je nátrium bis(trimetylsilyl)amid, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v cyklickom éteri ako je tetrahydrofurán, pri teplote -100°C až 25°C, počas 5 minút až 2 hodín.

Stupeň 5a sa týka hydrolýzy skupiny R⁶, ktorá je spoločná N-alkylkaprolaktámovým zlúčeninám všeobecného vzorca XVI, čím sa získa hydroxykaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca XVII.

Hydrolýza sa typicky uskutočňuje za prítomnosti fluoridu, výhodne fluoridovej soli ako je tetrabutylamóniumfluorid, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v cyklickom éteri ako je tetrahydrofurán, pri teplote 0°C až 25°C, počas 5 minút až 2 hodín.

Stupeň 6a sa týka acylácie hydroxykaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca XVII a vzniká esterová zlúčenina všeobecného vzorca XVIII, a to reakciou s chloridom kyseliny všeobecného vzorca R³(X)_mCOCl, kde R³, X a m sú definované skôr, za prítomnosti zásady, výhodne alkylamínovej zásady ako je trietylamín, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -78°C až 25°C, počas 1 až 24 hodín.

Alternatívne sa acylácia hydroxykaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca XVII v stupni 6a môže uskutočňovať reakciou s karboxylovou kyselinou všeobecného vzorca R³(X)_mCC>2H, kde R³, X a m sú definované skôr, za prítomnosti činidla na kondenzáciu karboxylových kyselín, výhodne diimidu ako je hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu, a vhodného aktivačného činidla, bežného pre diimidové kondenzačné reakcie, výhodne substituovaného pyridínu ako je 4-dimetylaminopyridín, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlorovancm alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -78°C až 25°C počas 1 až 24 hodín.

Stupeň 7a sa týka hydrolýzy skupiny R⁷ v esterovej zlúčenine všeobecného vzorca XVIII, čím sa získa aminokaprolaktámová zlú14

	··	•		··	··	··
•	•	··	•	•	•	• ·	• ·
•	•	•	•	•		• ·
•	•	•	•	•	• ·	• ·
	• ·	···		··	··	··	··

cenina všeobecného vzorca VI. Hydrolýza sa typicky uskutočňuje za prítomnosti protickej kyseliny, výhodne organickej kyseliny ako je kyselina trifluóroctová, halogenovodík alebo silylhalogenid, výhodne silyljodid ako je trimetylsilyljodid, a v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -100°C až 25°C počas 1 minúty až 2 hodín.

Aminokaprolaktámové zlúčeniny všeobecného vzorca Vla sa môžu pripraviť podlá ďalej uvedenej schémy:

XIV

hydrolýza

Stupeň 2b

kde R⁷, X, m a R³ sú definované skôr.

Čo sa týka jednotlivých stupňov, stupeň lb sa týka acylácie hydroxykaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca XIV a vzniká esterová zlúčenina všeobecného vzorca XVIIla, a to reakciou s chloridom kyseliny všeobecného vzorca R³(X)_mCOCl, kde R^J, X a m sú definované skôr, za prítomnosti zásady, výhocne alkylaminovej zásady ako je trietylamín, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -78°C až 25°C, počas 1 až 24 hodín.

Alternatívne sa acylácia hydroxykaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca XIV v stupni lb môže uskutočniť reakciou s karboxylovou kyselinou všeobecného vzorca R³(X)_mCO₂H, kde R³, X a m sú definované skôr, za prítomnosti činidla na kondenzáciu karboxylových kyselín, výhodne diimidu ako je hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu, a vhodného aktivačného činidla, bežného pre diimidové kondenzačné reakcie, výhodne substituovaného pyridínu ako je 4-dimetylaminopyridin, v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri -78°C až 25°C, počas 1 až 24 hodín.

·· • · · • · ·· · ·· ·· ·« • · · · · · • · ··· · I • ·· ·· ·· ·

Stupeň 2b sa týka hydrolýzy skupiny všeobecného vzorca XVIIIa, čenina všeobecného vzorca čím sa získa

R⁷ v esterovej zlúčenine aminokaorolaktámová zlúVla. Hydrolýza sa typicky uskutočňuje kyseliny, ako je kyselina trifluóroctová, nid, výhodne silyljodid organickom rozpúšťadle, chlórmetán, pri teplote dín.

za prítomnosti protickej ako je

Aminokaprolaktámové pripraviť nasledovne:

výhodne organickej kyseliny halogenovodík alebo silylhalogetrimetylsilyljodid, a v inertnom chlórovanom výhodne -100°C až zlúčeniny

25°C, počas všeobecného alkáne ako je di1 minúty až 12 hovzorca IXa sa môžu

hydrolýza

kde R⁷ a R⁶ sú definované

R⁷ v esterovej zlúčenine všeobecného vzorca XV, nokaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca typicky uskutočňuje za prítomnosti protickej organickej dík alebo skôr. Reakcia sa týka hydrolýzy skupiny čím sa získa amilyljodid,

IXa. Hydrolýza sa kyseliny, výhodne kyseliny ako je kyselina trifluóroctová, halogenovosilylhalogenid, výhodne silyljodid ako je trimetylsia v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote -100°C až 25°C počas 1 minúty až 2 hodín.

Laktónové zlúčeniny všeobecného vzorca VII sa môžu pripraviť podľa nasledujúcej schémy:

·· • · • ·	• • · •	·· ·· • · · • · ···	·· • · • ·	• ·
··	···	·· ··	··	• ·

diketalizácia

---►

Stupeň lc

XIX

metylácia

Stupeň 2c

Scupeň

3c hydrolýza

Stupeň 5c

R¹ je

XXIII v

kde definované skôr.

Čo sa týka jednotlivých stupňov, záciu polyhydroxylaktónu všeobecného stupeň lc zahŕňa diketalivzorca XIX reakciou s acetónom, čim sa získa bis(acetonid) XX. Diketalizácia sa uskutočňuje v acetóne ako rozpúšťadle, s použitím katalyzátora ako je jód, pri teplote v rozsahu 0°C a teplotou varu, počas 2 až 48 hodín.

Stupeň 2c zahŕňa metyláciu bis(acetonidu) XX pôsobením metylačného činidla ako je metyljodid, čím sa získa metyléter XXI. Metylácia sa uskutočňuje za prítomnosti vody a zásady, výhodne oxidu kovu ako je kysličník strieborný, a v inertnom organickom rozpúšťadle, výhodne v chlórovanom alkáne ako je dichlórmetán, pri teplote v rozsahu 0°C a teplotou varu, počas 12 hodín až 7 dní.

Stupeň 3c zahŕňa hydrolýzu metyléteru XXI, vedúcu k dihydroxyzlúčenine všeobecného vzorca XXII. Hydrolýza sa uskutočňuje za prítomnosti vody a protickej kyseliny, výhodne karboxylovej kyseliny ako je kyselina octová, pri teplote 5°C až 35°C počas 1

99 • •	• •	• ·· •	·· • •	• •	·· • ···	99	• 9
• •	• •
•	•	•	•	•	• ·	9	•
99		999	• e		• 9	• 9		• 9

až 24 hodín.

Stupeň 4c zahŕňa oxidatívne štiepenie dihydroxyzlúčeniny XXII, ktorým sa získa aldehyd XXIII. Reakcia sa uskutočňuje v prítomnosti oxidačného činidla, výhodne jodistanovej soli ako je jodistan sodný, v protickom rozpúšťadle, výhodne v alkanole ako je metanol, pri teplote 0°C až 25°C, počas 10 minút až 4 hodín.

Stupeň 5c zahŕňa olefináciu aldehydu XXIII, vedúcu k laktónovej zlúčenine všeobecného vzorca VII. Olefinácia sa uskutočňuje za prítomnosti organokovovej zlúčeniny, výhodne organochrómovej zlúčeniny ako je nestály medziprodukt, vzniknutý z chloridu chrómnatého a dijódalkánu (definovaný ako R¹CHI₂, kde R¹ je definované skôr), v prítomnosti zmesi rozpúšťadiel, pozostávajúcich z 1) polárneho organického rozpúšťadla, výhodne amidového rozpúšťadla ako je Ν,Ν-dimetylformamid, a 2) inertného organického rozpúšťadla, výhodne cyklického éteru ako je tretrahydrofurán, pri teplote -80°C až 25°C, počas 5 minút až 4 hodín.

Aj keď sa produkt ktorejkoľvek skôr opísanej reakcie môže, ak je to potrebné, čistiť obvyklými metódami ako je chromatografia alebo rekryštalizácia (v prípade, ak produkt je tuhá látka), sa surový produkt jednej reakcie výhodne použije bez čistenia v ďalšej reakcii.

Ako je odborníkom zrejmé, substituované kaprolaktámové zlúčeniny všeobecného vzorca I obsahujú asymetrické atómy uhlíka. Rozumie sa teda, že individuálne stereoizoméry sú zahrnuté v rozsahu predloženého vynálezu.

Ako je naznačené skôr, niektoré zlúčeniny všeobecného vzorca

I tvoria farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami.

Napríklad voľná zásada zlúčeniny všeobecného vzorca I môže reakciou s kyselinou chlorovodíkovou tvoriť zodpovedajúcu hydrochloridovú soľ, zatiaľ čo reakcia voľnej zásady zlúčeniny všeobecného vzorca I s kyselinou metánsulfónovou poskytne zodpove• α ·· • · · • · ··· ·· • · · • · • · · e· ··· ·· • · · • · • · · ·· ··· dajúcu mesylátovú sol. Všetky farmaceutický prijateľné adičné soli zlúčenín všeobecného vzorca I sú zahrnuté v rozsahu vynálezu .

Ďalší aspekt predloženého vynálezu sa týka spôsobu prípravy kaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktorá v prvom stupni zahŕňa acyláciu aminokaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca VI

(VI) reakciou s laktónom všeobecného vzorca VII

(VII) za prítomnosti polárneho organického rozpúšťadla, čím sa získa diamidová zlúčenina všeobecného vzorca VIII

(VIII) kde R¹, R²,

X, m a R³ sú definované skôr, a v druhom stupni sa diamidová zlúčenina, získaná v prvom stupni, hydrolyzuje tak, že sa rozpustí v zmesi rozpúšťadiel, čím sa získa požadovaná kaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca I. Acylácia v prvom stupni sa výhodne uskutočňuje v izopropanole pri teplote o niečo nižšej ako je teplota varu izopropanolu,

·· • · • ·	• ·· •	··	·· • ···	··	··
• •	• •	• •	• e
• ·	•	•	•	• ·	•	•
··	···		··	• ·	··		··

zatiaľ čo hydrolýza v druhom stupni sa uskutočňuje v zmesi, zloženej z protickej organickej kyseliny, protického rozpúšťadla a inertného organického rozpúšťadla, výhodne v zmesi kyseliny trifluóroctovej, vody a tetrahydrofuránu.

Ako je uvedené skôr, všetky zlúčeniny všeobecného vzorca I a ich zodpovedajúce farmaceutický vhodné kyslé soli sú protinádorové látky, ktoré účinne inhibujú rast rôznych lymfómov, sarkómov, karcinómov, myelómov a leukemických bunkových línii. Protinádorovú účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I je možné preukázať pomocou rastového testu ADGMA (Anchorage Dependent Growth Monolayer Assay), v ktorom sa meria schopnosť testovaných látok inhibovať proliferáciu adherujúcich buniek, rastúcich v jednoduchej vrstve. Tento postup sa prevzal z testu National Cancer Inštitúte (NCI), ktorý využíva 60 bunkových línií s nasledujúcou modifikáciou: 1) ako predstaviteľ dôležitého tumoru sa zvolila jedna bunková línia prsníkového karcinómu, to znamená MDA-MB-435, a 2) na stanovenie bunkovej hustoty sa použil tetrazóliový derivát MTS.

Pomocou testu ADGMA je možné zistiť počet živých buniek po trojdennom pôsobení testovaných zlúčenín, vzhľadom na množstvo buniek v okamihu pridania látky. Životaschopnosť buniek sa meria pomocou tetrazóliového derivátu, to znamená vnútornej soli

3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-5-(3-karboxymetoxyfenyl)-2-(4-sulfofenyl)-2H-tetrazólia (MTS), ktorý sa pôsobením životaschopnej bunky a v prítomnosti elektrónakceptora (PMS, fenazín metosulfát) metabolický redukuje na vo vode rozpustný formazánový derivát. Absorbancia pri 490 nm (A₄₉₀) formazánového derivátu je priamo úmerná počtu životaschopných buniek. Hodnota IC50 potom predstavuje koncentráciu testovanej látky, pri ktorej je celkový počet buniek znížený na 50% výsledného počtu buniek vzhľadom na celkový počet kontrolných buniek. Ak dôjde k inhibícii bunkovej proliferácie, potom test definuje látky ako cytostatické (počet buniek po trojdennom pôsobení látky > počet buniek v okamihu prídavku látky) alebo cytotoxické (počet buniek po trojdennom pôso20

·· ·		··	··
• · ··	•	• ·	•	•	• ·
• · ·	•	• ···	•	•
*· ···	··	··	··	··

beni látky < počet buniek v okamihu prídavku látky).

Bunková línia prsníkového karcinómu MDA-MB-435 sa získala z Američan Type Culture Collection (ATCC) a po rozmrazení sa použila v rozsahu 4. až 20. pasáže. Prsníkovy karcinóm MDA-MB-435 sa kultivoval v médiu DME/F12 s prídavkom 10% hovädzieho fetálneho séra, ďalej obsahujúcom 15 mM HEPES (pH 7,4), 100 U/ml penicilínu a 100 mg/ml streptomycínu.

Kultivované bunky sa uvoľnia pôsobením trypsínu, suspendujú sa a bunková hustota sa stanoví na počítači Coulter. Bunky sa ďalej inokulujú (3000/jamka) do kultivačného média (100 μΐ/jamka) na 96-jamkové misky. Inokulované množstvo predstavuje, ako sa zistilo v predbežných experimentoch, 75-90% konfluencie zodpovedajúcej štvordennej kultivácii. Začiatočná bunková hustota, stanovená po jednodňovej kultivácii, je asi o 0,15 - 0,20 absorbančných jednotiek väčšia ako absorbancia média. 96-Jamkové misky sa vysejú v deň 0 a testované zlúčeniny sa pridávajú v deň 1. Kontrolné misky, ktoré obsahujú len médium, sú rad A, a misky inokulované sú rad B. Jeden deň po inokulácii sa do misiek pridajú testované látky vo výslednom objeme 100 μΐ. Do kontrolných misiek sa pridá 10 μΐ zmesi MTS [pripraví sa čerstvá v deň pridania do misiek v pomere 10 μΐ roztoku PMS (0,92 mg/ml) k 190 μΐ roztoku MTS (2 mg/ml)] a 100 μΐ média. Začiatočná bunková hustota každej línie sa stanoví meraním absorbancie A₄₉o za 4 hodiny po prídavku MTS. Za tri dni po pridaní testovaných zlúčenín sa do každej jamky pipetuje 10 μΐ zmesi MTS a A₄₉c sa odmeria znova po 4 hodinách. Hodnoty A₄₉₀, namerané pre misky s bunkami, sa korigujú na absorbanciu média a na začiatočnú hustotu buniek, aby sa získali hodnoty čistého nárastu. Hodnoty IC50 sa stanovia z grafického vynesenia percent čistého nárastu ako funkcie koncentrácie zlúčeniny. Percentá čistého nárastu sa počítajú ako (bunka + látka A₄₉o - začiatočná A₄₉₀/bunka + látkové vehikulum A₄₉q - začiatočná A₄₉q) .

	·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· · · • · · 9 · ··· * ·
21	·· ··· ·· ·· ·· ·

Nájdené hodnoty IC50 (priemer ± smerodajná odchýlka) v μΜ sú uvedené v tabuľke 1

Tabuľka 1

Zlúčenina	MCA-MB-435
Príklad 1	0,068 ± 0,04
Príklad 2	0,115 ± 0,04
Príklad 3	0,032 ± 0,014
Príklad 4	0,01 ± 0,01
Príklad 5	0,465 ± 0,204
Príklad 6	0,065 ± 0,001
Príklad 7	0,262 ± 0,07
Príklad 8	0,175 ± 0,007
Príklad 9	0,335 ± 0,141
Príklad 10	0,008 ± 0,004
Príklad 11	0,019 ± 0,005
Príklad 12	0,034 ± 0,046
Príklad 13	0,30 ± 0,00
Príklad 14	1,24 ± 0,20
Doxorubicín (známa antineoplastická zlúčenina)	0,137 ± 0,105

Protinádorovú účinnosť látok všeobecného vzorca I je možné ďalej stanoviť využitím modelu atýmusových (deficientných na T bunky) nahých myšiach, ktorý je štandardom na nájdenie a vývoj liečiv v preklinickej onkológii. Tento model umožňuje stanoviť schopnosť testovaných zlúčenín inhibovať rast ľudských nádorových štepov (medzidruhových transplantátov), ktoré subkutánne rastú v nahej atýmusovej myši. Použije sa pri ňom histologický získaný nádor prsníkového karcinómu MDA-MB-435.

Bunky (3 milióny) sa s.c. implantujú do pravej slabiny atýmusovej myši (nu/nu) a nádor sa nechá rásť až do objemu ·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· ··· • · · · · ··· · ♦ ··· ···· ··· • í ··· ·· ·· ·· ··· mm³. Testované zlúčeniny sa aplikujú (v prostredí 5% dextrózy a vodného 10% DMSO) intravenózne trikrát týždenne, počas troch týždňov. Zlúčeniny sa aplikujú v dávkovom režime, aby sa mohol vyhodnotiť rozsah aktivity (účinnosti a toxicity) pre danú zlúčeninu. Ako pozitívna kontrola slúži doxorubicín, aplikovaný i.v. trikrát týždenne.

Toxicita sa hodnotí sledovaním priemernej skupinovej telesnej váhy dvakrát týždenne, a raz denne celkovou prehliadkou. Účinnosť terapie sa raz týždenne monitoruje meraním dĺžky, šírky a hĺbky nádoru s použitím digitálneho hmatadla, pripojeného k automatickému zberaču dát. Skutočný rast nádoru (AMTV) v priebehu terapie sa zistí po odpočítaní priemerného objemu nádoru (MTV) na začiatku terapie od výslednej hodnoty MTV. Protinádorová aktivita sa vyjadrí ako % T/C (AMTV liečenej skupiny: AMTV kontrolnej skupiny x 100). Štatistická významnosť sa hodnotila jednoduchým t-testom podlá Študenta (p<0,05).

Výsledky pre zlúčeniny v príkladoch 1 až 10, ktoré sa testovali proti MDA-MB-435 nádorovým štepom 3x/týždeň počas 3 týždňov, sú uvedené v tabuľke 2.

Tabuľka 2

Zlúčenina	Dávka (gmol/kg)	AMTV (mm³)	%T/C	Mŕtve/celkom
Príklad 1	10	107	61*	0/8
Príklad 1	33	43	24*	0/8
Príklad 1	100	-11	-6*	0/8
Príklad 2	10	94	67	0/8
Príklad 2	33	19	13*	0/8
Príklad 3	10	69	39*	0/8
Príklad 3	33	49	28*	0/8
Príklad 4	10	93	ŠT	0/8
Príklad 4	33	21	12'	0/8
Príklad 4	100	-23	-13’	0/8

	··	•	··	··	··
4	•	··	• ·	•	• ·	• ·
•	•	•	•	•	···	•	•
•	•	•	•	•	• ·	•	•
	··	···	··	··	··	··

Zlúčenina	Dávka (μπιοΐ/kg)	AMTV (mm³)	%T/C	Mŕtve/celkom
Príklad 5	10	130	92	0/8
Príklad 5	33	62	44’	0/8
Príklad 6	10	66	47'	0/8
Príklad 6	33	48	34*	0/8
Príklad 7	10	101	72	0/8
Príklad 7	33	61	43*	0/8
Príklad 8	10	87	62	0/8
Príklad 8	33	94	67	0/8
Príklad 9	10	107	76	0/8
Príklad 9	33	68	48*	0/8
Príklad 10	10	115	64’	0/8
Príklad 10	33	4	2’	0/8
Príklad 11	10	135	76	0/8
Príklad 11	33	76	43*	0/8
Príklad 12	10	78	52	0/8
Príklad 12	33	11	7*	0/8
doxorubicín	2 mg/kg	74	42’	0/8

Hodnoty % T/C sú štatisticky signifikantné (p < 0,05; Študentov test).

Presné dávkovanie zlúčenín všeobecného vzorca I pri použití na inhibíciu nádorov závisí od niekoľkých faktorov, zahŕňajúcich pacienta, charakter a závažnosť liečeného stavu, spôsob podania a podanú zlúčeninu. Všeobecne sa docieli vyhovujúca inhibicia nádorov, keď sa zlúčenina všeobecného vzorca I aplikuje parenterálne, napríklad intraperitoneálne, intravenózne, intramuskulárne, subkutánne, intratumorálne alebo rektálne, alebo enterálne, napríklad orálne, výhodne intravenózne alebo orálne, zvlášť intravenózne pri dennej dávke 1-300 mg/kg telesnej hmotnosti, alebo pre väčšinu väčších primátov pri dennej dávke 50-5000 mg, výhodne 500-3000 mg. Výhodná intravenózna denná dávka je 1-75 mg/kg telesnej hmotnosti, alebo, pre väčšinu ·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· ··· • · · · · ··· · · • · ······ ·· ··· ·· ·· ·· · väčších primátov, 50-1500 mg. Typické intravenózne dávkovanie je 20 mg/kg trikrát až päťkrát týždenne.

Obvykle sa podá na začiatku menšia dávka a dávkovanie sa postupne zvyšuje, až sa určí optimálna dávka pre pacienta. Horná hranica dávkovania je určená vedľajšími účinkami a môže sa stanoviť pre pacienta pokusne.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu kombinovať s jedným alebo viacerými farmaceutický prijateľnými nosičmi a prípadne s jedným alebo viacerými ďalšími obvyklými farmaceutickými adjuvantami a môžu sa aplikovať enterálne, napríklad orálne, vo forme tabliet, toboliek, atď., alebo parenterálne, napríklad intraperitoneálne alebo intravenózne, vo forme sterilných injektabilných roztokov alebo suspenzií. Enterálne a parenterálne kompozície sa môžu pripraviť obvyklými spôsobmi.

Infúzne roztoky podľa predloženého vynálezu sú výhodne sterilné. Sterilizácia sa môže ľahko uskutočniť napríklad filtráciou cez sterilné filtračné membrány. Aseptická príprava akejkoľvek kompozície v kvapalnej forme, aseptické plnenie liekoviek a/alebo kombinácia farmaceutickej kompozície podľa predloženého vynálezu s vhodným riedidlom za aseptických podmienok sú odborníkovi dobre známe.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu formulovať do enterálnych a parenterálnych farmaceutických kompozícií, obsahujúcich nádor inhibujúci množstvo aktívnej zlúčeniny, a to vo forme jednotlivých dávok, pričom také prostriedky obsahujú farmaceutický prijateľný nosič.

Nasledujúce príklady uskutočnenia opisujú reprezentatívne zlúčeniny, ktoré zahŕňa predložený vynález, a ich syntézu.

Rozumie sa, že uvedené príklady sú myslené len na ilustráciu a rozsah vynálezu nijako neobmedzujú.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

a) Príprava γ-laktónu kyseliny 3,5:6,7-bis-O-(1-metyletylidén)-a-D-glukoheptónovej γ-Laktón kyseliny α-D-lukoheptónovej (500 g, 2,4 mol) sa pridá do 9 litrov acetónu v 5 galónovom plastovom valci. Zmes sa mechanicky mieša tak dlho, až sa vačšina pevnej látky rozpustí (15 - 20 minút) . Do roztoku laktónu sa pridá po častiach jód (60 g, 0,236 mol) v priebehu 5-10 minút. Výsledná zmes sa mieša cez noc. Zmes sa rozloží prídavkom nasýteného roztoku Na₂S₂O₃(1,3 litra). Získaný roztok sa zahustí vo vákuu na asi polovicu pôvodného objemu a pridá sa roztok chloridu socného (5 litrov). Výsledná zmes sa extrahuje etylacetátom (3 x 1,2 litra). Organické vrstvy sa spoja a odparia sa do sucha. Pevná látka sa rozmieša so zmesou éteru a hexánu (3:7) a sfiltru^e sa. Filtračný koláč sa premyje dietyléterom (50 ml) a vysuší sa na vzduchu. Získa sa 599 g (86,5%) požadovanej zlúčeniny vo forme bieleho prášku.

NMR (CDC1₃) : δ 4,62 (m, IH) , 4,50 (m, IH) , 4,35 (m,2H), 4,07 (m, IH), 3,93 (m,lH), 3,82 (dd,lH), 3,08 (d, IH) , 1,51 (s,3H), 1,44 (s,3H), 1,39 (s,3H), 1,35 (s,3H);

¹³C NMR (CDCI3) δ 174,4, 109,4, 98,6, 72,8, 71,4, 69,3, 68,4, 67,8, 66, 7, 28,6, 26, 7, 24,6, 19,3.

b) Príprava γ-laktónu kyseliny 2-O-metyl-3,5:6,7-bis-O-(1-metyletylidén)-α-D-glukoheptónovej ·· · ·· ·· ·· ···· ··· ··· • · · · · ··· · · • · · ·· ·· ··· · ·· · ···· « · ·· ··· ·· ·· ·· · γ-laktón kyseliny 3,5:6,7-bis-O-(1-metyletylidén)-α-D-glukoheptónovej (719 g, 2,49 mol) sa pridá k 4,5 litrom CH₂C1₂ v 5 galónovom plastovom valci a zmes sa mieša pod dusíkom. Pridá sa metyljodid (2500 g, 17,6 mol) a ihneď po ňom kysličník strieborný (1750 g, 7,58 mol). K reakčnej zmesi sa pridá voda (30 ml) a teplota sa udržiava pri 15 - 30°C ľadovým kúpeľom. Reakčná zmes sa mieša v tme počas 18 hodín, potom sa zriedi 1,5 litrom CH₂C1₂, pevná látka sa odfiltruje, premyje sa ďalšími 2,2 litrami CH₂C1₂, a vyhodí sa. Filtrát sa odparí do sucha, odparok sa suspenduje v éteri (1,5 litra), filtruje sa a vysuší. Výťažok 618 g (82%) produktu.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 4,75 (m,1H) , 4,33 (m,1H), 4,29 (m,1H), 4,15 (m, 1H), 4,07 (m,lH), 3,96 (dd,lH), 3,83 (dd,1H), 3,65 (s,3H), 1,57 (s,3H), 1,42 (s,6H), 1,35 (s,3H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 172,5, 109,6, 98, 5, 79,0, 73, 1, 69, 5, 68,6,

67,5, 66,9, 59, 1, 28,9, 26, 9, 24,9, 19,4.

c) Príprava γ-laktónu kyseliny 2-O-metyl-3, 5-0-(1-metyletylidén)-a-D-glukoheptónovej γ-laktón kyseliny 2-O-metyl-3,5:6,7-bis-O-(1-metyletylidén)-α-D-glukoheptónovej (618 g, 2,05 mol) sa rozpustí v 8 litroch zmesi kyseliny octovej a vody (1:1) v priebehu 30 minút a roztok sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Potom sa roztok odparí vo vákuu do sucha. Tuhý zvyšok sa suspenduje v 3 - 5 litroch horúceho acetónu a sfiltruje sa. Po vysušení v sušiarni pri 20 -30°C sa získa 363 g (67,6%) požadovanej zlúčeniny.

^XH NMR (CDCI3) : δ 4,92 (d,1H) , 4,80 (m,lH), 4,47 (d,1H), 4,42 (t,

1H), 4,39 (m,lH), 3,95 (dd,1H), 3,75 (m,2H), 3,4 (s,3H), 2,5 (m, 1H), 1,42 (s,3H), 1,22 (s,3H).

d) Príprava γ-laktónu kyseliny 2,4-0-(1-metyletylidén)-5-O-metyl-

• · · · · · ·· ·· ·· ·

-L-glukurónovej γ-laktón kyseliny 2-O-metyl-3,5-0-(1-metyletylidén)-a-D-glukoheptónovej (200 g, 0,76 mol) sa rozpustí v zmesi metanolu a vody (1:1, 3,6 litrov). Zmes sa mieša za chladenia v ľadovom kúpeli pri teplote asi 8°C. Pridá sa po častiach pevný NaľO^ (213 g, 0,98 mol). Reakcia je podľa TLC (silikagél, 5% metanolu, 15% etylacetátu v CH2CI2) hotová v priebehu 40 minút. K reakčnej zmesi sa pridá pevný chlorid sodný, aby sa nasýtil metanolický roztok. Pevné podiely sa odfiltrujú a premyjú 2 litrami CH₂C1₂. Filtrát sa premyje CH₂C1₂ (7 x 500 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušia nad síranom sodným, sfiltrujú sa a zahustia na sirup, ktorý po pridaní hexánu tvorí zrazeninu. Zrazenina sa odfiltruje a premyje éterom. Časť surového produktu (50 g) sa rozpusti v 3 litroch chloroformu a zahreje sa do varu. Potom sa na rotačnej odparke odparí 2,1 litra chloroformu za atmosférického tlaku (metanol je strhnutý koevaporáciou s chloroformom) a zvyšok sa odparí do sucha. Po vysušení vo vákuu cez ncc sa získa 44 g požadovaného produktu vo forme pevnej látky.

^XH NMR (CDCI3) : Ô 9,60 (S,1H), 4,78 (m, 1H) , 4,42 (S,2H), 4,15 (dd,lH), 3,65 (d,3H), 1,58 (s,3H), 1,55 (s,3H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 198,8, 171,9, 99, 0, 78,4, 74,4, 72, 9, 68,4,

67,4, 59,2, 28,7, 19,0.

e) Príprava laktónu kyseliny (6E)-6,7,8,9-tetradeoxy-8,8-dimetyl-2-O-metyl-3,5-O-(1-metyletylidén)gulo-non-6-enónovej

Do 2 litrovej banky s okrúhlym dnom sa predloží CrCl₂ (50 g, 41 mmol), bezvodý THF (750 ml) a DMF (32 ml) . Zmes sa mieša pod dusíkom jednu hodinu a potom sa pomaly pridá roztok γ-laktónu kyseliny 2,4-0-(1-metyletylidén)-5-O-metyl-L-glukurónovej (12 g, 50 mmol) a 1,l-dijód-2,2-dimetylpropánu (15 ml) v 500 ml bezvodého THF. Po pridaní sa reakčná zmes mieša 1,5 hodiny pri teplote miestnosti a potom sa rozloží pridaním nasýteného vodného ·· · ·· ·· ·· • ·· ··· ··· • · · · ··· · · • · ·· · · ··· · ·· ···· ·· ♦ · ··· ·· ·· ·· · roztoku NH₄C1. Zvyšok sa roztrepe medzi etylacetát a vodu a podrobí sa chromatografii v sústave 5% etylacetátj v CH₂C1₂. Získa sa 9 g (63%) požadovaného produktu vo forme bielej kryštalickej látky.

^XH NMR (CDClj) : δ 5,82 (d, IH) , 5,58 (q, IH) , 4,71 (m, 1H) , 4,46 (m, IH), 4,10 (dd,lH), 4,0 (m, IH) , 3,66 (s,3H), 1,58 (s,3H), 1,53 (s,3H), 1,07 (s,9H);

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 172,5, 147,0, 120,2, 98,7, 79, 1, 71,9, 70,3,

67,6, 59,2, 33,2, 29,3, 19,3.

f) Príprava (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-ónu

Do 1 litrovej banky sa k 500 ml DMF pridá za miešania (5R)-5-hydroxy-L-lyzín (10 g, 0,040 mol), hydrát 1-hydroxybenzotriazolu (8,2 g, 0,060 mol) a hydrochlorid 1-[3-(dimetylamino)propyl]-3-etylkarbodiimidu (11,6 g, 0,060 mol). Po pol hodine sa pridá trietylamín (16,8 ml, 0,120 mol) a reakčná zmes sa mieša 48 hodín pri teplote miestnosti. Potom sa pridá diterc-butyldikarbonát (17,6 g, 0,080 mol) a trietylamín (16,8 ml, 0,120 mol) a v miešaní sa pokračuje počas 16 hodín. Reakčná zmes sa sfiltruje, aby sa odstránil hydrochlorid trietylamínu, a rozpúšťadlo sa odparí na rotačnej odparke vo vysokom vákuu. Zvyšný hustý olej sa rozpustí v 150 ml CH₂C1₂ a aplikuje sa na kolónu silikagélu (150 g, 40 x 250 mm). Elúciou CH₂C1₂ z 3% metanolu sa získa surový produkt ako tuhá látka. Tá sa rozpustí v 120 ml horúceho CH₂C1₂ a ochladí sa na -20°C počas jednej hodiny. Vypadnutá pevná látka sa odfiltruje a premyje sa 50 ml CH₂C1₂. Spojené filtráty sa odparia do sucha. K tomuto odparku sa pridá CH₂C1₂ (40 ml) a vzniknutá suspenzia sa mieša 0,5 hodiny pri teplote miestnosti. Suspenzia sa sfiltruje a pevná látka sa premyje 25 ml CH₂C1₂. Pevné látky sa spoja, čím sa získa 5,57 g (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl) aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-ónu.

·· · ·· ·· ·· • · · · · · · ··· • · · · · ··· · t

300 MHz ^XH NMR (DMSO): Ô 7,42 (t,lH,J=5,l Hz), 6,38 (d,1H, J=6,6 Hz), 4,60 (d,lH,J=4,2 Hz), 4,07 (m, 1H) , 3,74 (m,1H) , 3,32 (m,lH), 3,03 (m,lH), 1,8-1,5 (m,4H), 1,39 (s,9H).

g) Príprava (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklohexánkarbonyl)oxy-2H-azepin-2-ónu

Trietylamín (8,4 ml, 60 mmol) sa pridá pri teplote 5°C k roztoku cyklohexánkarbonylchloridu (6,3 g, 43,0 mmol·) a (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-ónu (7,0 g, 28,7 mmol) v 100 ml CH2CI2. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc, potom sa pretrepe s vodou a organická vrstva sa vysuší nad síranom sodným a zahustí sa na rotačnej odparke. Odparok sa chromatografuje v sústave 5% etylacetát-CH₂C12, čím sa získa 10,1 g (99,5%) (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl )aminohexahydro-6-(cyklohexánkarbonyl)oxy-2H-azepin-2-ónu vo forme bielej pevnej látky.

^ľH NMR (CDCI3) : δ 5,89 (d,J=5,27 Ηζ,ΙΗ), 5,65 (t,J=4,90 Ηζ,ΙΗ),

4,89 (s,lH), 4,30 (q,J=4,14 Hz,1H), 3,49 (m,2H), 2,31 (tt,

J=10,92 Hz a 3,39 Ηζ,ΙΗ), 2,13 (d,J=14,32 Ηζ,ΙΗ), 1,98 (d,

J=13,56 Hz,2H), 1,88 (d,J=14,31 Hz,2H), 1,75 (d,J=ll,30 Hz,2H),

1,66 (s,2H), 1,45 (s,9H), 1,30 (m,5H).

h) Príprava (SS^RÍ-S-aminohexahydro-ô-ícyklohexánkarbonylJoxy-2H-azepin-2-ónu

K roztoku (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklohexánkarbonyl)oxy-2H-azepin-2-ónu (10 g, 28,2 mmol) v 40 ml CH2CI2 sa pri teplote miestnosti pridá TFA (25 ml). Reakčný roztok sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu a potom sa zahustí na rotačnej odparke pri teplote kúpeľa < 20°C. Odparok sa zriedi CH2CI2 (100 ml) a premyje sa NH₄OH (10 ml) a potom vodou 2 x 20 ml) . Po vysušení nad síranom sodným sa zmes adsorbuje na silikagéli a chromatografuje sa v CH₂C12_Z obsahujúcom 5% metanolu. Získa sa tak 6, 0 g (85,0%) (3S,6R)-3-aminohexahydro-6-(cyk30 lohexánkarbonyl)oxy-2H-azepin-2-ónu vo forme bielej tuhej látky.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 6,91 (s,lH), 4,91 (s,lH), 4,39 (S,2H), 3,87 (d, J=9,80 Ηζ,ΙΗ), 3,48 (t,J=6,02 Ηζ,ΙΗ), 3,43 (dd,J=15,45 Hz a 4,90 Ηζ,ΙΗ), 2,30 (tt,J=10,92 Hz a 3,39 Ηζ,ΙΗ), 2,13 (m,1H), 1,91 (m, 4H), 1,73 (m,2H), 1,65 (m,1H), 1,40 (q,J=ll,68 Hz,4H), 1,24 (m,

2H) .

i) Príprava (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3, 4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu

Roztok laktónu kyseliny (6E)-6,7,8,9-tetradeoxy-8,8-dimetyl-2-O-metyl-3,5-0-(1-metyletylidén)-gulo-non-6-enovej (1,0 g,

3,5 mmol) a (3S, 6R)-3-aminohexahydro-6-cyklohexánkarboxy-2//-azepin-2-ónu (2,5 g, 9,8 mmol) v 4 ml izopropanolu sa mieša 24 hodín za refluxu. Reakčná zmes sa adsorbuje na silikagéli a podrobí sa chromatografii (eluent 2% metanol-CH₂Cl₂) . Získa sa tak 1,85 g (97%) požadovaného produktu vo forme bielej tuhej látky.

^XH NMR (CDCI3) : δ 7,58 (d,J=6,341 Ηζ,ΙΗ), 5,80 (t,J=7,68 Ηζ,ΙΗ),

5,78 (d,J=15,83 Ηζ,ΙΗ), 5,53 (dd,J=15,83 Hz a 6,78 Ηζ,ΙΗ), 4,92 (sd,J=3,39 Ηζ,ΙΗ), 4,60 (dd,J=0,42 Hz a 7,4 Ηζ,ΙΗ), 4,28 (d,

J=6,79 Ηζ,ΙΗ), 4,07 (dd,J=7,54 Hz a 1,13 Ηζ,ΙΗ), 3,90 (d, J=7,15 Ηζ,ΙΗ), 3,52 (dd,J=12,05 Hz a 7,91 Hz,2H), 3,48 (s,3H), 2,82 (d,J=9,04 Hz,1H), 2,32 (m,1H), 2,12 (m,1H), 2,00 (m,2H), 1,89 (d,J=13,06 Hz,2H), 1,75 (m,4H), 1,66 (m,lH), 1,46 (d, J=4,90 Hz,6H), 1,38 (m,2H), 1,26 (m,3H), 1,03 (s,9H).

j) Príprava výslednej zlúčeniny (2R, 3R, 4S,5R, 6E)-3,5-(Metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-2V- [ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid (3,8 g, 7,1 mmol) sa pri teplote 0°C pridá v jednej dávke k miešanej zmesi TFA (10 ml),

THF (10 ml) a vody (5 ml) . Reakčná zmes sa mieša pri tejto tep31 lote 30 minút a zahusti sa na rotačnej odparke pri teplote kúpeľa < 20°C. K odparku sa pridá nasýtený roztok NH4HCO3 (5 ml) a zmes sa mieša 15 minút. Potom sa zahustí vo vákuu a odparok sa chromatografuje (eluent 2% metanol-CH2C12). Získa sa tak produkt ako biela tuhá látka, ktorej rozpustnosť vo vode je 3,7 mg/ml. Tento materiál sa ďalej čistí s použitím preparatívnej HPLC (reverzná fáza, eluent 90¾ CH₃CN - voda). Získa sa tak 2,9 g (82,4¾) výslednej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky, t.t. 79 - 80°C.

^XH NMR (CDCI3) : δ 8,00 (d,J=6,30 Ηζ,ΙΗ), 5,98

5,83 (d,J=15,77 Hz,1H),

5,42 (dd,J=15,76 Hz a

7,25

Ηζ,ΙΗ), 4,93 (m,1H), 5,56 (m,1H),

4,22 (m,2H), 3,82 , 3,81 (t,

J=5,99 Hz,1H),

3,49 (dd,J=15,77

Hz a

5,36 Hz,1H),

3,30 (d,J=7,25

J=ll,19 Hz,1H),

Ηζ,ΙΗ), 3,10 (s,lH), 2,31

2,00 (m,2H), 1,88 (m,3H), 1,76 (s,2H), 1,65 (d,

J=0,87

Ηζ,ΙΗ), 1,42 (m,2H), 1,25 (m,4H), 1,02 (s,9H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 175, 19, 174,11, 172,12, 145, 74, 123,20, 81,10,

74,50, 72,75, 72,45, 66,74, 59,93, 51,66, 43,31, 43,22, 33,03,

31,96, 29,43, 29,07, 29,00, 25,70, 25,65, 25,39, 25,36.

Príklad 2 (2R,3R, 4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklopentylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3 -yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo cyklopentánkarbonylchloridu. Získa sa tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklopentánkarbonyl) oxy-2ŕf-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, čim sa získa výsledná zlúčenina. Rozpustnosť vo vode je 18 mg/ml, t.t. 75 - 76°C.

^XH NMR (DMSO): δ 7,81 (d,J=6,47 Hz,1H), 7,76 (t,J=6,07 Ηζ,ΙΗ),

5,64 (d,J=15,77 Ηζ,ΙΗ), 5,34 (dd,J=15,76 Hz a 2,84 Ηζ,ΙΗ), 4,80 (S,1H), 4,57 (d,J=4,73 Ηζ,ΙΗ), 4,48 (d,J=6,94 Ηζ,ΙΗ), 4,45 (m,

1H) , 4,36 (d,J=5,83 Ηζ,ΙΗ), 3,98 (m, 1H) , 3,71 (d,J=6,94 Ηζ,ΙΗ),

3,57	(td,J=6,78 Hz a 2,68	Ηζ,ΙΗ), 3,52 (dd,J=15,61	Hz a 4	,57 Hz,
1H) ,	3,34 (td,J=6,15 Hz a	2,84 Ηζ,ΙΗ), 3,32 (s,3H)	, 3,23	(m, 1H) ,
2,72	(m, 1H) , 2,50 (m,lH),	1,93 (m,2H), 1,80 (m,2H)	, 1,73	(m,3H) ,
1,61	(m,2H), 1,53 (m,2H),	0,98 (s,9H);
¹³C NMR (DMSO): δ 174,75,	173,56, 169,73, 141,69,	125,32,	81,60,
72,82	, 72,54, 70,80, 67,20, 57,31, 50,95, 43,21,	32,44,	31,31,

29,45, 29,38, 25,30, 25,23.

Príklad 3 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-W-[(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cykloheptylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo zmesi, obsahujúcej kyselinu cykloheptánkarboxylovú, hydrochlorid 1-(3-dimetylamino propyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridín. Získa sa tak (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cykloheptánkaropísaným v príkladoch lh, bonyl)oxy-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom, li a v poslednom stupni príkladu

84-86°C.

1, čím sa získa výsledná zlúčenina,

1.1.

^lH NMR (CDC1₃) : δ

8,00 (d,J=6,30 Hz, 1H) , 5, 93 t,J=5,52 Hz,1H),

5, 83 (d,J=15,77 Ηζ,ΙΗ),

5,42 (dd,J=15,7 Hz a

7,26 Ηζ,ΙΗ) , 4,93

Hz a 6,31 Ηζ,ΙΗ), 4,23 (m,2H), 3,82 (m,

·· · • · ·· • · ·	·· • · • ·	• • ···	·· • · • ·	• ·
·· ···	··	··	• ·	• ·

2Η), 3,61 (t,J=6,14 Ηζ,ΙΗ), 3,57 (m,lH), 3,55 (s,3H), 3,49 (dd,

J=15,60 Hz a 5,20 Ηζ,ΙΗ), 3,29 (d,J=7,25 Ηζ,ΙΗ), 3,10 (s,lH),

2,50 (m,lH), 2,17 (m,lH), 1,95 (m,4H), 1,70 (m,1H), 1,65 (m,2H), 1,55 (m,4H), 1,47 (m,4H), 1,02 (s,9H);

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 176, 17, 174,07, 172,14, 145,75, 123,20, 81,08, 74,51, 72,76, 72,44, 66,79, 59,95, 51,67, 45,07, 43,36, 33,03,

31,95, 30,91, 30,84, 29,43, 28,24, 28,21, 26,26, 25,73.

Príklad 4 (2R, 3R, 4 S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-3-fenylpropoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexá.nkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo 3-fenylpropionylchloridu. Získa sa tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(l-oxo-3-fenylpropoxy)-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom, opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, čím sa získa výsledná zlúčenina. Rozpustnosť vo vode je 0,8 mg/ml, t.t. 75 - 77°C.

^XH NMR (CDCI3) : δ 7,96 (d,J=6,15 Ηζ,ΙΗ), 7,31 (t,J=7,25 Hz,2H),

7,23

1H) , (t,J=7,57 Ηζ,ΙΗ), 7,20 (d,J=7,41 Hz,2H), 5,82 (d,J=15,76 Hz

5,62 (s,lH), 5,41 (dd,J=15,76 Hz a 7,09 Ηζ,ΙΗ), 4,92 (s,

1H) ,

3,60

J=7,57 Hz,2H),

2,67 (t,J=7,72 Hz,2H), 2,06 (d,J=ll,98 Ηζ,ΙΗ), ¹³C NMR (CDCI3) :

128,42,

59,83,

51,49, 43,22, 35,78, 33,02, δ 173,96, 172,05,

Ηζ,ΙΗ), 1,88 (S,1H

126,52, 123,21, 81,18,

), 1,70	(m, 1H) ,	1,02 (s,	9H) ;
172,00,	145,68,	140,08,	128,61,
74,46,	72,69,	72,50,	67,14,
31,79,	31,07,	29,43, 25	,58.

• •	• • · •	·· • · • ·	··
• ···	• •
•	•	• ·	• ·	•
	• · ·	··	··

Príklad 5 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [ (3S, 62?) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3- [3-pyridyl] propoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo zmesi kyseliny 3-(pyridyl)-propiónovej, hydrochloridu 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridínu. Získa sa tak (3S, 62?) -3- (terc-butoxykarbonyl) aminohexahydro-6- (l-oxo-3- [3-pyridyl]propoxy)-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom, opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, čím sa získa výsledná zlúčenina.

³H NMR (CDC1₃) : δ 8,46 (s,2H), 7,97 (d,J=6,2 Hz, 1H) , 7,53 (m, 1H) , 7,23 (m,lH), 5,88 (t,J=6,0 Ηζ,ΙΗ), 5,81 (d,J=15,6 Ηζ,ΙΗ), 5,4 (dd,J=15,6 Hz a 7,3 Ηζ,ΙΗ), 4,93 (m,lH), 4,27 (s,lH), 4,23-4,19 (m,lH), 3,8 (m,2H), 3,59 (d,J=5,2 Hz,1H), 3,52 (s,3H), 3,48 (m, 2H), 3,28 (s,lH), 3,19 (s,lH), 2,95 (t, J=7,3 Hz, 2H) , 2,67 (t,

J=7,3 Hz,2H), 2,1-1,67 (m,6H), 1,0 (s,9H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 174,0, 172,0, 171,5, 149, 7, 148,0, 145,7,

136,0, 135,5, 123,6, 123,2, 81,2, 74,5, 72,7, 72,5, 67,6, 59,8,

51,6, 43,3, 35,2, 33,0, 31,8, 29,4, 28,0, 25,5. HPLC: C-18 Novapac, 4,6 x 250 mm, 1,5 ml/min.; sústava: 25% MeCN/75% H₂O (izokraticky); retenčný čas: 13,7 min.

Príklad 6 (2R, 32?, 4S, 52?, 62ľ) -3, 4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-W- [ (3S, 62?) -hexahydro-2-oxo-6- (cyklohexylmetylkarbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príkla35 ·· • · · • · ·· ·· ·· • · · · • · ··· · • · · ·· ··· • · · · · · ·· ·· ·· de lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo zmesi kyseliny cyklohexyloctovej, hydrochloridu 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridínu. Získa sa tak (3S, 62?)-3

-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklohexylmetylkarbo nyl)oxy-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom, opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, čím sa získa výsledná zlúčenina.

^TH NMR (CDC1₃) : δ 7,98 (d,J=6,2 Ηζ,ΙΗ), 5,83-5,7 (m,lH), 5,80 (d, J=15,6 Hz, IH) , 4,94 (m,lH), 4,52 (m, IH) , 4,2 (m,2H), 3,78 (m,

2H), 3,6-3,48 (m,3H), 3,52 (s,3H), 3,23 (d, J=7,3 Ηζ,ΙΗ) , 3,06 (m,lH), 2,80 (d,J=7 Hz,2H), 2,13-1,63 (m,12H), 1,30-0,85 (m,5H), 1,0 (s,9H);

δ 174,0, 172,3, 172,2, 145,7,

123,3, 81,1, 74,5, ¹³C NMR (CDCI3)

72,8,	72,5,	67,0,	60,0,	51,7,
29,5,	26,1,	26,0,	25, 7.	HPLC:

1,5 ml/min.; 40% MeCN/60% H₂O

43,5, 42, 1, 35,0, 33,0, 32,0,

C-18 Novapac, 4,6 x 250 mm, (izokraticky); retenčný čas:

11,5 min..

Príklad 7 (2R, 3R, 4S, 5R, 6ŕľ) -3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [ (3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-2-fenyletoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6enamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo zmesi kyseliny fenyloctovej, hydrochloridu 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridínu. Získa sa tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl) aminohexahydro-6-(l-oxo-2-fenyletoxy)-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom, opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, ·· • ·· •· ·· ·· •· · •· ··· ·· • ·· •· • · · • · ··· • · · · ·· ·· • · · ·· ··· čim sa získa výsledná zlúčenina.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,96 (d,J=6,2 Ηζ,ΙΗ), 7,28 (m,5H), 5,80 (d,

J=15,8 Ηζ,ΙΗ), 5,68 (t,J=6,4 Ηζ,ΙΗ), 5,39 (dd,J=15,8Hz a 7,3 Hz, 1H) , 4,93 (m,lH), 4,53-4,47 (m,1H) , 4,22-4,18 (m,2H), 3,60-3,56 (m,2H), 3,52 (s,3H), 3,48-3,38 (m,2H), 3,27 (d,J=6,6 Hz, 1H),

3,08 (s,1H), 2,15-1,67 (m,5H), 1,0 (s,9H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 173,9, 172,1, 170,8, 145,8, 133,6, 129,2, 128,8, 127,4, 123,2, 81,1, 74,5, 72,7, 72,4, 67,6, 59, 9, 51,6,

43,2, 41,5, 33,0, 31,8, 29,4, 25,5. HPLC: C-18 Novapac, 4,6x250 mm, 1,5 ml/min.; sústava 10 - 100% MeCN/voda [>20 min. gradient]; retenčný čas: 12,2 min..

Príklad 8 (2R,3R,4 S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-2-[3,4-dichlórfenyl]etoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo zmesi kyseliny 3, 4-dichlórfenyloctovej, hydrochloridu 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridínu. Získa sa tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-β-(l-oxo-2-[3,4-dichlórfenyl]etoxy)-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg podrobí postupom, opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, čím sa získa výsledná zlúčenina, 1.1. 132 - 136°C.

^XH NMR (CDCI3) : δ 8,00 (d, J=6 Hz, 1H) , 7,51 (s,lH), 7,41 (m,2H), 7,16 (dd,J=3 Hz a 9 Ηζ,ΙΗ), 5,77 (d,J=16 Ηζ,ΙΗ), 5,42 (dd,J=8 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 4,93 (d,J=3 Hz,1H), 4,55 (q,J=6 Ηζ,ΙΗ), 4,19 (m, 1H), 3,83 (m,3H), 3,63 (d, J=6 Hz, 3H) , 3,48 (m, 6H) , 3,39 (s,lH), ·· · ·· ···· · ···· ······· • · · · · ·· · · · 37 · · ·*· ·· ·*· ! · ·· ··· ·· ·· ·· ···

2,13 (d,J=16 Ηζ,ΙΗ), 2,00 (m,2H), 1,77 (q,J=12 Ηζ,ΙΗ), 1,03(s,

9H) , ;

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 169,1, 144,2, 133,5, 131, 5, 130,9, 130,8,

129,8, 128,5, 123,4, 81,3, 73,6, 72,2, 71,7, 67,6, 58,4,50,8,

49,3, 42,0, 32,3, 31,1, 30,7, 28,8, 24,8.

Príklad 9 (2R, 3R, 4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-W-

- [ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-2- [4-metoxyfenyl] etoxy) -2H-az epin- -3-yl]non-6-énamid

a) Príprava (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-

- terc-butyldimetylsilyloxy-2ŕí-azepin-2-ónu (3S, 6R)-3-(terc-Butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-ón (25 g, 102 mmol), terc-butyldimetylsilylchlorid (23,16 g, 153 mmol) a imidazol (10,45 g, 153 mmol) sa zmiešajú so 60 ml DMF. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc, potom sa zriedi 1 litrom vody a vzniknutá zmes sa extrahuje zmesou etylacetátu a hexánu (1:1; 2 x 200 ml). Organické vrstvy sa spoja, premyjú sa roztokom chloridu sodného, vysušia sa nad síranom sodným a zahustia. Prečistenie odparku kryštalizáciou (etylacetát-hexán) poskytne 28,5 g (78%) (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl) aminohexahydro-6-terc-butyldimetylsilyloxy-2íT-azepin-2— ónu vo forme bielej tuhej látky, t.t. 65 - 66°C.

¹H NMR (CDCI3) : δ 5,86 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 5,58 (t,J=6 Ηζ,ΙΗ), 4,18 (m,lH), 3,91 (s,lH), 3,35 (dd,J=6Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 3,07 (m,lH),

1,80 (m,4H), 1,40 (s,9H), 0,83 (s,9H), 0, 004 (s,6H).

b) Príprava (3S,6R)-3-aminohexahydro-6-terc-butyldimetylsilyl oxy-2/í-azepin-2-ónu (3S, 6R)-3-(terc-Butoxykarbonyl) aminohexahydro-6-terc-butyl·· · ·· ·· ·· • · ·· ··· ··· • · · · · ··· · · ··· ···» ··· ·· ··· ·· ·· ·· ··· dimetylsilyloxy-2H-azepin-2-ón (8,0 g, 22 mmol) sa rozpusti v 40 ml CH2CI2 a roztok sa ochladí na -78°C. Pridá sa pomaly trimetylsilyljodid (3,5 ml, 24,5 mmol) a zmes sa nechá reagovať pri teplote -78 °C počas 30 minút. Potom sa reakčná zmes zahreje na 0°C a mieša sa 15 minút. Roztok sa sfarbi do žlta. Zmes sa rozloží prídavkom roztoku NH4HCO3 (3,43 g, 44 mmol) v 30 ml metanolu a 15 ml vody. Po zahustení sa zmes podrobí chromatografii v zmesi CH₂C12-metanol (95:5), čim sa získa 5,45 g (96%) (35,6R)-3-aminohexahydro-6-terc-butyldimetylsilyloxy-2/í-azepin-2-ónu vo forme bielej tuhej látky.

¹HNMR (CDCls) : δ 5,61 (s,lH), 3,88 (s,lH), 3,42 (d,J=8 Ηζ,ΙΗ),

3,32 (dd,J=6 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 3,06 (m,lH), 1,87 (m,2H), 1,76 (m,

1H), 1,65 (s,3H), 0,83 (s,9H), 0,001 (s,6H).

c) Príprava (2R,3R,45,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-ÄZ- [ (35, 6R) -hexahydro-2-oxo-6-terc-butyldimetylsilyloxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu (35, 6R) -3-Aminohexahydro-6-terc-butyldimetylsilyloxy-2/7-azepin-2-ón (5,45 g, 21 mmol), laktón kyseliny (65)-6,7,8,9-tetradeoxy-8,8-dimetyl-2-O-metyl-3,5-0-(1-metyletylidén)-gulo-non-6-énonovej (3,0 g, 11 mmol) a diizopropyletylamín (4,6 ml, 26 mmol) sa pri teplote miestnosti zmiešajú s 30 ml izopropanolu. Zmes sa zahrieva do varu pod spätným chladičom cez noc, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a zahusti sa. Zvyšok sa podrobí chromatografii v zmesi CH₂C12-metanol (98:2), čím sa získa 2,53 g (42%) (2R, 3R,45,5R, 6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-W-[(35,6R)-hexahydro-2-oxo-6-terc-butyldimetylsilyloxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu vo forme bielej tuhej látky.

^XH NMR (CDCI3) : δ 7,53 (d,J=6 Hz,1H), 5,72 (d, J=16 Hz, 1H) , 5,47 (dd,J=6 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 4,47 (m,lH), 4,22 (d,J=6 Hz,1H), 4,03 (d,J=8 Ηζ,ΙΗ), 3,91 (m,lH), 3,82 (d,J=7 Ηζ,ΙΗ), 3,48 (d,J=9 Hz,

··	• ·· •	·· • 9	• •	·· • ···	·· • •	• •	• ·
• •	• 9
•	•	•	•	•	• ·	•	•
··		···	··		• ·	··		··

1Η), 3,43 (s,3H), 3,35 (d,J=6 Hz,1H), 3,09 (m,1H), 2,77 (d,

J=9 Ηζ,ΙΗ), 1,83 (m,2H), 1,77 (m,2H), 1,41 (d,J=6 Hz,6H), 0,97 (s,9H), 0,83 (s,9H), 0,005 (s,6H);

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 172,2, 169,6, 148,3, 145,3, 121,5, 108,8, 99, 6,

81.4, 80,5, 79,2, 78,2, 74,4, 73,1, 69,1, 67,9, 65,8, 59,2,

56.4, 51,7, 36,8, 36,5, 33,1, 29,6, 29,4, 19,1.

d) Príprava (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-hydroxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(Metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-terc-butyldimetylsilyloxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid (2,5 g, 4,6 mmol) sa rozpustí v 30 ml THF. Pridá sa 1,0 M roztok tetrabutylamóniumfluoridu v THF (13,8 ml, 14 mmol) pri teplote miestnosti a zmes sa mieša 3 hodiny. Potom sa zmes zahustí a podrobí sa chromatografii v zmesi CH₂C12-metanol (95:5), čím sa získa 1,8 g (91%) (2F,3R,4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-hydroxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu vo forme bielej tuhej látky.

*H NMR (CDCI3) : δ 7,61 (d, J=6 Hz, 1H) , 6,45 (t, J=6 Hz, 1H) , 5,77 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 5,52 (dd,J=6 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 4,56 (m,lH), 4,28 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 4,06 (d,J=8 Ηζ,ΙΗ), 4,00 (m,1H), 3,91 (d,J=8 Hz,

1H), 3,54 (m,lH), 3,47 (s,3H), 3,35 (m,2H), 3,08 (d,J=8 Ηζ,ΙΗ),

2,76 (d,J=6 Hz,1H), 2,02	(m,2H), 1,83	(m,2H),	1,45	(s,6H), 1,03
(s,9H);
¹³C NMR (CDCI3) : δ 175,1,	169,7, 145,3,	121,5,	99,7,	83, 1, 80, 6,
74,5, 73,2, 65,8, 64,6,	59,1, 51,8,	45,9,	34,5,	33,1, 29,5,

29,3, 25,1, 19,1, 13,7.

e) Príprava (2R, 3R,4S,SR,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihyd-

·· • · • ·	• • · •	··	·· • ···	·· • · • ·	• • · •
• •	• •
• ·	•	•	•	• ·	• ·	• •
··	···	··		··	• ·	···

roxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-W-[(3 S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-2- [4-metoxyfenyl] etoxý) -2H-azepin-3-yl] non-6-énarr.idu

Kyselina 4-metoxyfenyloctová (0,35 g, 2,1 mmol), hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (0,42 g,

2,1 mmol) a DMAP (0,17 g, 1,4 mmol) sa zmiešajú s 30 ml CH2CI2 a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 30 minút. Pridá sa (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [(3S,6R}-hexahydro-2-oxo-6-hydroxy-2fí-azepin-3-yl]non-6-énamid (0,6 g, 1,4 mmol) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Po zahustení sa odparok podrobí chromatografii v zmesi CH2C12-metanol (98:2), čím sa získa 0,644 g (80%) (2R_f3R, 4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-2-[4-metoxyfenyl ]etoxý)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamidu vo forme bielej tuhej látky.

^rH NMR (CDCI3) : δ 7,56 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 7,18 (d,J=8 Hz,2H), 6,86 (d,J=8 Hz,2H), 5,78 (d,J=16 Ηζ,ΙΗ), 5,62 (t,J=6 Ηζ,ΙΗ), 5,52 (dd,J=6 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 4,93 (s,lH), 4,58 (m,lH), 4,28 (d, J=12 Ηζ,ΙΗ), 4,06 (d,J=8 Hz,1H), 3,88 (d,J=7 Hz,1H), 3,80 (s, 3H), 3,56 (s,2H), 3,48 (s,5H), 2,82 (d,J=11 Hz,1H), 2,05 (m,3H) , 1,71 (s,2H), 1,42 (d,J=6 Hz,6H), 1,03 (s,9H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 174,3, 171,1, 169,7, 158, 9, 145,3, 130,2,

125,7, 121, 6, 114,2, 99,7, 80, 6, 74,5, 73,3, 67,7, 65,8, 59,3,

55,3, 51,7, 43,3, 40,6, 33,1, 31,8, 31,4, 29, 4, 25,8, 19, 1.

f) Príprava výslednej zlúčeniny

Zmes TFA, THF a vody (3:3:2; 30 ml) sa pridá pri teplote 0°C do banky, obsahujúcej (2R, 3R,4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-2-[4-metoxyfenyl]etoxý)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid (0,64 g, 1,1 mmol). Zmes sa nechá reagovať 30 minút pri teplote 0°C a potom sa odparí vo vysokom vákuu do sucha. Zvyšok sa neu-

•· •· •· •· ·· ·· · · · · • · · · · · ·· ·· ·· · tralizuje roztokom NH₄HCO₃ (1,2 g v 20 ml vody). Zmes sa odparí do sucha vo vysokom vákuu a odparok sa podrobí chromatografii v zmesi CH2C12-metanol (95:5), čím sa získa 0,35 g (60%) výslednej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky.

³H NMR (CDC1₃) : δ 7,98 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 7,18 (d,J=9 Hz,2H),6,87 (d,J=9 Hz,2H), 5,83 (d,J=16 Ηζ,ΙΗ), 5,72 (t,J=6 Ηζ,ΙΗ), 5,42 (dd,J=8 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 4,93 (d,J=3 Ηζ,ΙΗ), 4,53 (m,1H),4,23 (t,J=6 Hz,2H), 3,81 (m,2H), 3,80 (s,3H), 3,61 (t,J=5 Ηζ,ΙΗ), 3,57 (s,2H), 3,54 (s,3H), 3,47 (m,lH), 3,30 (d,J=7 Ηζ,ΙΗ), 3,12 (s,lH), 2,16 (d, J=16 Ηζ,ΙΗ), 1,99 (m,2H), 1,82 (m,lH),1,72 (s,lH), 1,04 (s, 9H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 173, 8, 172,2, 171,1, 158, 9, 145,8, 130,2,

125,6, 123,2, 114,2, 81,0, 74,5, 72,8, 72,4, 67,5, 60,0,55,3,

51, 6, 43,2, 40,6, 33, 0, 31,8, 31,3, 29, 4, 25,6.

Príklad 10 (2R, 3R, 4S, 5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3 S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-([4-n-decyloxyfenyl]karbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade 9e, s tým rozdielom, že namiesto kyseliny 4-metoxyfenyloctovej sa použije približne ekvivalentné množstvo kyseliny 4-decyloxybenzoovej. Získa sa tak (2R, 3R,4S,5R,6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-([4-n-decyloxyfenyl]karbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid. Ten sa namiesto produktu z príkladu 9e v podstate podrobí postupu, opísanému v poslednom stupni príkladu 9, čím sa získa výsledná zlúčenina ako tuhá látka, t.t. 70 - 74°C.

¹H NMR (CDC1₃) : δ 8,06 (d, J=6 Hz, 1H) , 7,96 (d,J=9 Hz,2H), 6,90 (d,J=9 Hz,2H), 6,05 (t,J=6 Hz,1H), 5,80 (d,J=15 Hz,1H), 5,44 • · · ·· ·· ··· · • · · ···· ·· ·· ··· ·· ·· ·· (dd,J=7 Hz a 15 Ηζ,ΙΗ), 5,20 (m,1H), 4,63 (m,lH), 4,25(t,

J=6 Ηζ,ΙΗ), 4,02 (t,J=6 Hz,2H), 3,84 (dd,J=7 Hz a 13 Hz,2H),

3,69 (m, 1H) , 3,62 (m,2H), 3,38 (d, J=5 Hz, 1H) , 3,56 (s,3H), 3,33 (S,1H), 3,15 (S,1H), 2,32 (d,J=12 Hz,1H), 2,13 (t,J=12 Hz,1H),

2,01 (m,2H), 1,82 (m,2H), 1,48 (m,2H), 1,30 (m, 12H) , 1,05(s,

9H), 0,94 (t,J=6 Hz,3H);

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 174,1, 172,1, 165,2, 163,4, 145,7, 131,7,

123,2, 121,6, 114,2, 81,1, 74,5, 72,7, 72,4, 68,3, 67,2,59,9,

51,7, 43, 6, 33,0, 32,1, 31,9, 29, 5, 29, 4, 29, 3, 29,2, 29, 0,

25,9, 22,6, 14,1.

Príklad 11 {2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N- [(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-3-fenyl-2-propenoxy)-2H-azepin-3—y1]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade lg, s tým rozdielom že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo cínnamoylchloridu. Získa sa tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(l-oxo-3-fenyl-2-propénoxy)-2H-azepin-2-ón. Ten sa namiesto produktu z príkladu lg v podstate podrobí postupom, opísaným v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1, čím sa získa výsledná zlúčenina vo forme tuhej látky, t.t. 83 - 85°C.

^ľH NMR (DMSO): δ 8,03 (m, 1H) , 7,71 (d, J=16 Hz, 1H) , 7,54 (m,2H),

7,41 (m,2H), 6,45 (d,J=16 Hz,1H), 5,97 (m,1H), 5,81 (d,J=16 Hz,

1H), 5,45 (dd,J=16 Hz a 8 Ηζ,ΙΗ), 5,09 (m,1H), 4,58 (m,lH), 4,22 (m,2H), 3,81 (m,2H), 3,62 (m,4H), 3,54 (s,3H), 3,30 (d,J=8 Hz,

1H), 3,10 (S,1H), 2,25 (m,1H), 2,00 (m,3H), 1,02 (s,9H);

¹³C NMR (DMSO): δ 174,10, 172,15, 166,01, 145,91, 145,75, 134,03, 130,70, 129,00, 128,22, 123,20, 117,34, 81,10, 74,50, 72,76,

72,46, 67,29, 59,93, 51,67, 43,51, 33,03, 32,00, 29,43, 25,75.

Príklad 12 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3 S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-([4-n-decylfenyl]karbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate spôsobom, opísaným v príklade 9e, s tým rozdielom, že namiesto kyseliny 4-metoxyfenyloctovej sa použije približne ekvivalentné množstvo kyseliny 4-decylbenzoovej. Získa sa tak (2R, 3R,4S, 5R, 6E)-3,5-(metyletylidén)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-([4-n-decylfenyl]karbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid. Ten sa namiesto produktu z príkladu 9e v podstate podrobí postupu, opísanému v poslednom stupni príkladu 9, čím sa získa výsledná zlúčenina, t.t. 60 - 64°C.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 8,06 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 7,94 (d, J=8 Hz,2H),7,26 (d,J=8 Hz,2H), 6,10 (t,J=7 Hz,IH), 5,85 (d,J=16 Hz,IH),5,45 (dd,J=8 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ), 5,22 (d,J=3 Ηζ,ΙΗ), 4,64 (dd,J=6 Hz a

Ηζ,ΙΗ), 4,25 (t,J=6 Hz,2H), 3,84 (dd,J=6 Hz a 11 Hz,2H), 3,69 (t,J=7 Ηζ,ΙΗ), 3,63 (dd,J=5 Hz a 8 Hz,2H), 3,56 (s,3H), 2,68 (t, J=8 Hz,2H), 2,34 (d,J=13 Ηζ,ΙΗ), 2,14 (t,J=12 Ηζ,ΙΗ), 2,04(t,

J=ll Ηζ,ΙΗ), 1,96 (t,J=3 Hz,IH), 1,63 (m,2H), 1,32 (m,18H), 1,82 (m,2H), 1,05 (s,9H), 0,90 (t,J=7 Hz,3H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 174,1, 172, 1, 165,5, 149, 3, 145,7, 129, 7,

128,6, 127,0, 123,2, 81,1, 74,5, 72,7, 72,4, 67,4, 59,9,51,7,

43,5, 36, 0, 33,0, 32,1, 31,9, 31, 1, 29, 6, 29, 5, 29,4, 29, 3,

29,2, 25,9, 22, 6, 14,1.

Príklad 13 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-3-[3-tiofenyl[etoxy)-2H44 ·· · ·· ·« ·· • · ·· · · · · ♦ · • · · · · ··· · ·

-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate podľa postupu v príklade lg, s tým rozdielom, že sa namiesto cyklohexánkarbonylchloridu použije približne ekvivalentné množstvo zmesi, zloženej z nasledujúcich zlúčenín: 3-tiofénoctová kyselina, hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridín. Získa sa (3S,6 J?) — 3— (terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(1-oxo-3-[3-tiofenyl]etoxy)-2H-azepin-2-ón, ktorý sa použije namiesto produktu z príkladu lg a nechá sa reagovať ako je v podstate opísané v príkladoch lh, li a v poslednom stupni príkladu 1. Získa sa tak výsledná zlúčenina. HPLC (C—18 Novapac, 4,6x250 mm,

1,5 ml/min.), sústava: 35% MeCN/65% H2O (izokraticky), retenčný čas: 7,89 minút.

^ľH	NMR (CDC1₃	): δ	7,97 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ), 7	,30 (m,1H),	7,14	(m, 1H) ,
7,	00 (m,1H),	5,83	(m,lH), 5,81	(d,J=16	Ηζ,ΙΗ), 5,40	(dd,	J=7 Hz
a	16 Hz,1H),	4,90	(m,1H), 4,45	(m, 1H) ,	4,15 (m,1H),	3,75	(m,2H),
3,	66 (s,2H),	3,57	(s,3H), 3,40	(m,2H),	3,32 (d,J=7	Ηζ,ΙΗ)	, 3,12
(s	,1H), 1,7 (	4H)	, 1,01 (s,9H)	r

¹³C NMR (CDCI3) : δ 174,0, 172,1, 170,3, 145, 7, 133,1, 126,2,

123,3, 123,1, 81,2, 74,5, 72,8, 72,5, 67,8, 59,9, 51,6, 43,2,

36, 0, 33,0, 31,8, 29, 5, 25, 6.

Príklad 14 (2R, 3R, 4S, 5R, 6E) -3, 4,5-Trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-AZ-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-3-[3-indolyl]etoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid

Reakcia sa uskutoční v podstate podľa postupu v príklade lg, s tým rozdielom, že namiesto cyklohexánkarbonylchloridu sa použije približne ekvivalentné množstvo zmesi, zloženej z nasledujúcich zlúčenín: 3-indoloctová kyselina, hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 4-dimetylaminopyridín.

··

Získa sa (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(1-oxo-3-[3-indolyl]etoxy)-2H-azepin-2-ón, ktorý sa použije namiesto produktu z príkladu lg a nechá sa reagovať ako je v podstate opísané v príkladoch lh a li a v poslednom stupni príkladu 1, čím sa získa výsledná zlúčenina.

HPLC (C—18 Novapac, 4,6 x 250 mm, 1,5 ml/min) , sústava: 35% MeCN/65% H₂O (izokraticky), retenčný čas: 9,2 minút.

^ľH NMR (CDC1₃) : δ

8,47 (s,1H), 7,90 (d,J=6 Ηζ,ΙΗ),

7,55 (d,

J=8 Hz,1H), 7,36 (d,J=8

Ηζ,ΙΗ), 7,20-7,05 (m,3H),

5, 81

J=16 Hz,1H), 5,75 (m, 1H) ,

1H) , 4,45-4,30 (m,2H), 4,25

2,15-2,00 (m,lH), 2,00-1,60 ¹³C NMR (CDCI3) : δ 173,9,

122,3, 119,8, 118,6, 111,5,

59, 7, 51,5, 43,1, 33,0, 31,8

5,37 (dd,J=8 Hz a 16 Ηζ,ΙΗ) (m, , 4,8

>-4,15 (m,lH), 3,9-3,7 (m,4H), 3,65-
3,45-3,30 (m,lH), 3,25-3,10 (	m,2H),
(m,4H),	0,99 (s,9H);
171,9,	145,7, 136,2, 127,1,	123,3,
108,0,	81,6, 74,4, 72,7, 72,6,	67,5,
, 31,6,	29, 5, 25,6.

Príklad 15

Infúzny roztok

Zlúčenina z príkladu 1 (15 mg) sa rozpustí v 98-100% propylénglykole (1,0 ml). Roztok sa sterilné filtruje cez filter s pórmi veľkosti 0,22 μ a naplní sa do 1 ml ampúl, ktoré sa skladujú a expedujú. Naplnené ampuly sú stále prinajmenšom 12 mesiacov pri teplote 2 až 8°C. Pred intravenóznou aplikáciou sa obsah ampuly pridá k 250 až 1000 ml 5% roztoku glukózy vo vode pre injekcie. Takto pripravený intravenózny roztok je stály 8 hodín pri teplote miestnosti.

V ďalšom sú uvedené zodpovedajúce štruktúry zlúčenín, pripravených v príkladoch 1 až 14:

Príklad 1

Príklad 2

Príklad 3

Príklad 4

Príklad 5

Príklad 6

IH ÔH O

Príklad 7

Príklad 8

Príklad 9

Príklad 10

Príklad 11

)H OH O aa

·· aa

Príklad

Príklad 14

W 66A-20CH

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

·· • • • • • • · • • « • • • • ·· • ··· • · • · • • • • • • • • • • · • • • · ··· ·· ·· • · • ·

kde

R¹ je (Ci-s) alkylová skupina alebo (C3-5) cykloalkylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo (Ci_₆) alkylová skupina;

X je (C1-12) alkylénová skupina; (C2-12) alkenylénová skupina;

alebo (C2-12) alkinylénová skupina;

m je 0 alebo 1; a

R³ je (C₃_g) cykloalkylová skupina; alebo aromatický cyklický

systém, zvolený z II, III, IV a V: d 4 -R⁵ z Q (II) (III) (IV)

(V) kde

R⁴ je atóm vodíka, atóm chlóru alebo metoxylová skupina;

R⁵ je atóm vodíka, atóm chlóru, (Ci-ig) alkylová skupina alebo (Ci-is) alkoxylová skupina; a Z je atóm kyslíka, atóm síry, skupina N-H, alebo skupina N-CH₃;

alebo ich farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami, ak prichádzajú do úvahy.

·· • · • · • • · • • ·· • · · • · ··· ·· · • · · · • · · • · • · · • · · · ·· ··
2.

Zlúčenina všeobecného vzorca I, podlá nároku 1, v ktorej

R¹ je (Ci_e) alkylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo (C1-4) alkylová skupina;

je (Ci-g) alkylénová skupina alebo (C₂-6) alkenylénová skupina;

je

0 alebo 1; a

R³ je systém, (C3-8) cykloalkylová skupina; alebo aromatický cyklický z II, III, IV a V, kde zvolený

R⁴ je atóm vodíka, atóm chlóru alebo metoxylová skupina;

R⁵ vodíka, atóm chlóru, je atóm (Ci-ig) alkoxylová skupina; a (Ci-ιβ) alkylová skupina alebo je atóm kyslíka, atóm síry, skupina N-H, alebo skupina

N-CH₃;

alebo ich farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami, ak prichádzajú do úvahy.
3. Zlúčenina všeobecného vzorca I, podľa nároku 1 alebo 2, v ktorej

R¹ je izopropylová skupina alebo terc-butylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo metylová skupina;

m je 0 alebo 1;

X je (C1-6) alkylénová skupina; a

R³ je (C5-7) cykloalkylová skupina; alebo aromatický cyklický systém zvolený z Ha a V:
4’

Ila

V ·· · ·· ·· ·· · ···· · · · ···· • · · · · ··· · · · ·· a········ a eaa aeaa a a a aa aaa aa aa aa aae kde

R⁴' je v meta-polohe a je atóm vodíka alebo atóm chlóru; a

R⁵' je v para-polohe a je atóm vodíka, atóm chlóru, (Ci-i₈) alkylová skupina alebo (Ci-i₈) alkoxylová skupina;

alebo ich farmaceutický prijatelné adičné soli s kyselinami, ak prichádzajú do úvahy.

4. Zlúčenina všeobecného vzorca I, podlá ktoréhokoľvek z nárokov

1 až 3, v ktorej

R¹ je izopropylová skupina alebo terc-butylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo metylová skupina;

m je 0 alebo 1;

X je metylénová skupina alebo etylénová skupina; a

R³ je (C5-7) cykloalkylová skupina, fenylová skupina, 3,4-dichlórfenylová skupina, 4-metoxyfenylová skupina, 4-n-decylfenylová skupina, 4-n-decyloxyfenylová skupina alebo 3-pyridylová skupina;

s výhradou, že keď m sa rovná 0, R³ je (C5-7) cykloalkylová skupina, 4-n-decylfenylová skupina alebo 4-n-decyloxyfenylová skupina;

alebo ich farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami, ak prichádzajú do úvahy.
5. Zlúčenina všeobecného vzorca I, podľa nároku 1, vybraná zo zlúčenín

3.4.5- trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[hexahydro-2-oxo-6-

-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid a

3.4.5- trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[hexahydro-2-oxo-6-(1-

-oxo-3-fenylpropoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.

·· · ·· ·· ·· ···· · · · ·· • · · 0 0 οοο ο ο

Ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο ·· ··· ·· ·· ·· ···
6. Zlúčenina všeobecného vzorca I, podlá nároku 1, zvolená zo (2R, 3R, 4S, 5R,6E)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3 S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3yl]-non-6-énamid a (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-N-[(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-3-fenylpropoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
7. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu všeobecného vzorca I podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, ak prichádza do úvahy, spolu s farmaceutický prijateľným nosičom.
8. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 7, vyznačujúca sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktorou je 3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-M- [hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2/í-azepin-3-yl] -non-6-énamid.
9. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 7, vyznačujúca sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktorou je 3,4,5-trihydroxy-2-metoxy-8,8-dimetyl-A7- [hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-fenylpropoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-énamid.
10. Spôsob liečby nádorov, vyznačujúci sa tým, že sa cicavcovi, ktorý takú liečbu potrebuje, podá terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I, podľa ktoréhokolvek z nárokov 1 až 6, alebo jej farmaceutický prijateľnej adičnej soli s kyselinou, ak prichádzajú do úvahy.
11. Farmaceutická kompozícia na liečbu nádorov u teplokrvných živočíchov vrátane človeka, vyznačujúca sa tým,

·· · • · ·· ·· · • · ·· • • · • · ·· • · · • • ··· • · · ·· ··· • · ·· ·· ··

že obsahuje protinádorovo účinnú dávku zlúčeniny všeobecného vzorca I, podlá ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6 alebo farmaceutický prijateľnú soľ takej zlúčeniny, spolu s farmaceutickým nosičom.
12. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I, podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, alebo farmaceutický prijateľnej soli takej zlúčeniny, na prípravu farmaceutického prostriedku na použitie v chemoterapii nádorov.
13. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I, podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, alebo farmaceutický prijateľnej soli takej zlúčeniny, na chemoterapiu nádorov.
14. Spôsob prípravy kaprolaktámovej zlúčeniny všeobecného vzorca

R¹ je (Ci_g) alkylová skupina alebo (C3-6) alkylová skupina;

R² je atóm vodíka alebo (Ci_₆) alkylová skupina;

X je (C1-12) alkylénová skupina; (C2-12) alkenylénová skupina; alebo (C2-12) alkinylénová skupina;

m je 0 alebo 1; a

R³ je (C3-8) čykloalkylová skupina; alebo aromatický cyklický systém, zvolený z II, (II) (III)

III, (V) (IV) kde

R⁴ je atóm vodíka, atóm chlóru alebo metoxylová skupina;

R⁵ je atóm vodíka, atóm chlóru, (Ci_i₈) alkylová skupina alebo (Ci-ia) alkoxylová skupina; a

Z je atóm kyslíka, atóm síry, skupina N-H, alebo skupina

N-CH₃;

alebo ich farmaceutický prijateľných adičných ak prichádzajú v prvom stupni solí do úvahy, sa acyluje vyznačuj úc aminokaprolaktámová s kyselinami, sa tým, že zlúčenina všeobec- (VI) reakciou s laktónovou zlúčeninou všeobecného vzorca VII (VII) v prítomnosti polárneho, organického rozpúšťadla, pričom vzniká diamidová zlúčenina všeobecného vzorca VIII kde symboly R¹, R², X, m a R³ sú definované v nároku 1,

• Φ · • · • · ·· · • · ·· • • · • · ·· • · · • • ··· • · · ·· ··· • · • · ·· ··

a v druhom stupni sa diamidová zlúčenina, získaná v prvom stupni, hydrolyzuje rozpustením v zmesi rozpúšťadiel, čím sa získa požadovaná kaprolaktámová zlúčenina všeobecného vzorca I.
15. Spôsob podľa nároku 14, vyznačujúci sa tým, že acylačný stupeň sa uskutočni v prítomnosti izopropanolu pri teplote trocha nižšej ako je teplota varu izopropanolu.