SK47695A3

SK47695A3 - Boropeptide derivatives, method of their preparation and pharmaceutical agents containing these derivatives

Info

Publication number: SK47695A3
Application number: SK476-95A
Authority: SK
Inventors: Sergio Mallart; Gilbert Lassalle; Thomas A Purcell; Jean-Claude Muller
Original assignee: Synthelabo
Priority date: 1994-04-12
Filing date: 1995-04-11
Publication date: 1995-12-06
Also published as: EP0677531A1; FI951726A0; CA2146833A1; IL113332A0; PL308074A1; NZ270913A; JPH07285990A; CN1113493A; FR2718451A1; KR950032225A; FR2718451B1; AU1638095A; HU9501041D0; NO951418D0; NO951418L; ZA952983B; HUT71617A; CZ92295A3; FI951726A; RU95105419A

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka boropeptidových derivátov, spôsobu ich prípravy a ich terapeutického použitia.

Podstata vynálezu

Zlúčeniny podľa vynálezu zodpovedajú všeobecnému vzorcu I

RH:

OR³

OR⁴ (I) v ktorom

R znamená atóm vodíka alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka alebo priamu alebo rozvetvenú -CO-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alebo priamu alebo rozvetvenú -CO^-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka,

R¹ znamená fenylovú skupinu alebo cyklohexylovú skupinu,

R² znamená skupinu rsV^/ alebo skupinu

NÍ^NH \=z

R⁵'\ kde R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, a

R³ a R⁴ každý znamená atóm vodíka alebo spolu znamenajú zvyšok díhydroxylovanej zlúčeniny, akou je napríklad 2,3-butándiol, 2,3-dimetyl-2,3-butándiol alebo (lalfa, 3alfa, 5alfa)-2,6,6-trimetylbícyklo/3.1.l/-heptán-2,3-díol/(+)-alfa· pinandíol/.

Podľa definície všeobecných substituentov R³ a R⁴ majú zlúčeniny podľa vynálezu 3 alebo 7 asymetrických centier. Zlúčeniny podľa vynálezu môžu existovať vo forme optických alebo geometrických izomérov v čistom stave alebo vo forme zmesí a tieto formy tiež spadajú do rozsahu vynálezu. Výhodnými zlúčeninami podľa vynálezu, ktoré majú 3 asymetrické centrá, sú deriváty D-alanyl-L-prolínamídu s konfiguráciou /2(R)/, zatiaľ čo výhodnými zlúčeninami podľa vynálezu, ktoré majú 7 asymetrických centier sú deriváty D-alanyl-N-/(4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)metyl/-L-prolínamidu s konfiguráciou /3aS,/2 (R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu existovať vo forme voľných zásad alebo vo forme adičných solí s farmaceutický prijateľnými kyselinami alebo zásadami a tieto formy takisto spadajú do rozsahu vynálezu.

Výhodnými zlúčeninami podľa vynálezu sú zlúčeniny, v ktorých R^a znamená skupinu

v ktorej R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 áž 4 atómy uhlíka. Z týchto zlúčenín sú výberovými zlúčeninami podľa vynálezu zlúčeniny, v ktorých R znamená atóm vodíka alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, R¹ znamená fenylovú skupinu a R³a R⁴ každý znamená atóm vodíka.

Nakoniec najzaujímavejšou zlúčeninou podľa vynálezu je kyselina (R)-/l-/(D-fenyl-alanyl-L-prolyl)amino/-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl/borónová a jej adičné soli s farmaceutický prijateľnými kyselinami a zásadami.

Zlúčeniny podľa vynálezu, v ktorých R² znamená skupinu sa môžu syntetizovať podľa nasledovnej reakčnej schémy 1.

Reakčná schéma 1

Borotripeptid všeobecného vzorca II (v ktorom R^x má vyššie uvedený význam, R³ a R⁴ spolu znamenajú zvyšok dihydroxylovanej zlúčeniny, ktorá sa definovala vyššie, R⁶ znamená buď atóm vodíka, keď R⁷ znamená -CO-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka v priamom alebo rozvetvenom uhlíkovom reťazci, alebo -C0₂-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka v priamom alebo rozvetvenom uhlíkovom reťazci, keď R⁷ znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka v priamom alebo rozvetvenom uhlíkovom reťazci), sa uvedie do reakcie so zlúčeninou všeobecného vzorca III (v ktorej R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka) v rozpúšťadle, akým je napríklad dioxán, pri vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca la. Potom v prípade, že je žiadúce získať zlúčeninu všeobecného vzorca Ib (v ktorej R, R¹a R^s majú vyššie uvedené významy), sa môže zlúčenina všeobecného vzorca la uviesť do reakcie s kyselinou chlorovodíkovou alebo s chloridom boritým.

Zlúčeniny podľa vynálezu, v ktorých R^Ä znamená skupinu \_/

NH v ktorej R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, sa môžu syntetizovať podľa reakčnej schémy 2.

Reakčná schéma 2

(IV)

2) HCI

Ί

Reakčná schéma 2 (pokračovanie)

R^ffR⁷

OR’ (Ic)

OR^

NH

KCl

•NH //

HCI •tx' /3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa/-2-(3-brómpropyl)3a,5,5-trimetylhexadyhydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol všeobecného vzorca IV sa uvedie do reakcie s jodidom sodným v rozpúšťadle, akým je napríklad acetón, pri vzniku /3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa/-2-(3-jódpropyl)-3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborolu všeobecného vzorca V, ktorý sa kondenzuje so zlúčeninou všeobecného vzorca VI (v ktorom R^s má vyššie uvedený význam) pri vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca VII, pričom sa táto reakcia uskutočňuje v rozpúšťadle, akým je tetrahydrofurán, pri teplote medzi -78 a 20 °C. Potom sa v súlade s postupom analogickým s postupom, ktorý opísal Mattheson v Organomettalics, (1984), 3, 614, uvedie do reakcie zlúčenina vzorca VII s dichlórmetyllítiom v prítomnosti chloridu zinočnatého v rozpúšťadle, akým je tetrahydrofurán, pri teplote medzi -100 a 20 °C pri vzniku zlúčeniny vzorca VIII, ktorá sa uvedie do reakcie s bis(trimetylsilyl )amidom lítnym, pričom táto reakcia sa uskutočňuje v rozpúšťadle, akým je tetrahydrofurán, pri teplote medzi -78 a 20 °C. Získa sa zlúčenina, ktorá sa uvedie do reakcie s kyselinou chlorovodíkovou v rozpúšťadle, akým je dioxán, pričom sa získa hydrochlorid kyseliny (R)-alfa-aminobutánborónovej vzorca X, ktorý sa uvedie do reakcie s diolom vzorca XI (v ktorom R³ a R⁴ spolu znamenajú zvyšok vyššie definovanej dihydroxylovanej zlúčeniny) pri vzniku hydrochloridu vzorca XII, potom sa zlúčenina vzorca XII kondenzuje s aktivovanou formou dipeptidu vzorca XIII (v ktorom R¹ má vyššie uvedený význam, R^s znamená buď atóm vodíka, keď R⁷ znamená -CO-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka v priamom alebo rozvetvenom uhlíkovom reťazci, alebo -CO^-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka v priamom alebo rozvetvenom uhlíkovom reťazci, keď R⁷ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, a X znamená buď l-pyrrolidinyl-2,5-diónovú skupinu alebo 2-metylpropyloxykarbonylovú skupinu) pri vzniku zlúčeniny, ktorá sa uvedie do reakcie s kyselinou chlorovodíkovou, pričom sa získa zlúčenina vzorca Ic. Potom v prípade, že sa má získať zlúčenina vzorca Id (v ktorom R, R¹ a R⁵ majú vyššie uvedené významy), sa môže zlúčenina vzorca Ic uviesť do reakcie s kyselinou chlorovodíkovou alebo chloridom boritým.

Východiskové zlúčeniny použité pri spôsobe podľa vynálezu sú buď komerčne prístupné alebo sú opísané v literatúre alebo sa môžu pripraviť postupmi, ktoré sa tam opisujú, alebo postupmi, ktoré sú odborníkovi známe.

Tripeptidy vzorca II sa takto opisujú v európskej patentovej prihláške 0293881.

N-Acetyl-D-fenylalanyl-L-prolín, /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-N-acetyl-D-fenylalanyl-N-/4-bróm-l-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid a 1-/N-/(1,l-dimetyletoxy/-D-fenylalanyl/-Lprolín opisuje Kettner a kol. v J. Biol. Chem. (1990), 265, 18289.

/3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)/-2-(3-Brómpropyl)-3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol sa opisuje v európskej prihláške 0293881.

2-/ (1,1-Dímetyletyl)dimetylsilyl/-N,N-dimetyl-lH-imídazol -1-sulfonamid opisuje Ngochíndo v J. Chem. Soc. Perkin Trans. (1990), 1, 1645.

Príprava zlúčenín vzorca XII sa opisuje vo francúzskej patentovej prihláške FR 9404287.

Príprava zlúčenín vzorca XIII (v ktorom R⁶ znamená priamu alebo rozvetvenú -CO^-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a R⁷ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka) sa uskutočňuje pri použití zodpovedajúcich východiskových zlúčenín vzorca XIII (v ktorom R⁷ znamená atóm vodíka) postupom, ktorý opisuje Bajusz v J. Med. Chem., (1990), 33, 1729-1735.

V nasledujúcej časti opisu sa vynález bližšie objasní pomocou konkrétnych príkladov jeho uskutočnenia, pričom tieto príklady majú len ilustračný charakter a nijako neobmedzujú rozsah vynálezu, ktorý je jednoznačne vymedzený definíciou patentových nárokov. Chemické štruktúry získaných zlúčenín sa potvrdili elementárnou mikroanalýzou a infračervenou a nukleárnou magnetickorezonančnou spektroskopiou. Čísla zlúčenín, ktoré sa uvádzajú v záhlaví jednotlivých príkladov zodpovedajú číslam, pod ktorými sa tieto zlúčeniny uvádzajú v ďalej zaradenej tabuľke. Pomer uvedený v zátvorkách znamená molárny pomer kyselina/zásada.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1 (zlúčenina 1) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-N-Acetyl-D-fenylalanyl-N-/-4-(lH-imidazol-l-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahydro4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid-hydrochlorid (1:1) .

1.1. /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-N-Acetyl-D-fenylalanyl-N-/-4-(ΙΗ-imidazol-l-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahyro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid g (4,8 mmolov) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta,

7aalfa//-N-acetyl-D-fenylalanyl-N-/4-bróm-l-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamidu a 0,902 g (9,6 mmolov) lH-imidazolu sa rozpustí v 10 ml dioxánu. Roztok sa zohrieva na teplotu 80 °C po dobu 6 hodín, potom sa rozpúšťadlo odparí pri vákuu. Zvyšok sa vyberie 50 ml dichlórmetánu a organická fáza sa potom postupne premyje 5 % vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného. Táto fáza sa potom vysuší nad síra12 nom sodným, prefiltruje a odparí. Zvyšok sa prečistí chromatograf icky na stĺpci silikagélu s použitím elučnej sústavy, ktorú tvorí zmes metanolu a dichlórmetánu v objemovom pomere 9:95. Získa sa 1,2 g produktu vo forme oleja.

Výťažok: 41 %, /alfa/²⁰ = -77,5 ° (c = 1,5, chloroform).

D

1.2. /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-N-Acetyl-D-fenylalanyl-N-/-4-(lH-imidazol-l-yl)-l-(3a, 5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid-hydrochlorid (1:1)

V 3 ml chloroformu sa rozpustí 1,2 g (1,97 mmolu) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-N-acetyl-D-fenylalanyl-N-/4-(ΙΗ-imidazol-l-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahyro-4,6metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamidu a získaný roztok sa ochladí na teplotu 0 °C. K roztoku sa pridá 20 ml 0,IN roztoku kyseliny chlorovodíkovej v izopropanole a zmes sa mieša po dobu 15 minút pri teplote 0 °C, potom sa uskutoční zahustenie pri vákuu. Zvyšok sa vysuší nad oxidom fosforečným a rozotrie v éteri. Získa sa 1 g produktu vo forme pevnej amorfnej látky.

Teplota topenia: 99 ^eC, výťažok: 78 %, /alfa/²⁰ = -90,4 ° (c = 1,1, chloroform).

Príklad 2 (zlúčenina 2) (R)-N-Acetyl-D-fenylalanyl-N-/l-borono-4-(1H) imidazol-l-yl)butyl/-L-prollnamid-hydrochlorid (1:1)

V 6 ml bezvodého dichlórmetánu sa rozpustí 700 mg (1,2 mmolu) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-N-acetyl-Dfenylalanyl-N-/4-(ΙΗ-imidazol-l-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid13 hydrochloridu. Získaný roztok sa ochladí na teplotu -78 °C a k takto ochladenému roztoku sa po kvapkách v priebehu 15 minút pridá 5 ml (5 mmolov) IM roztoku chloridu boritého v dichlórmetáne. Zmes sa mieša po dobu 15 minút pri teplote -78 °C a po dobu 45 minút pri teplote 0 °C, potom sa pomaly pridá 15 ml vody. Roztok sa mieša po dobu 30 minút pri teplote 0 °C, potom sa pridá 10 % roztok kyseliny octovej. Fáza sa oddelí a vodná fáza sa trikrát extrahuje 10 ml éteru, potom sa odparí do sucha. Zvyšok sa prečistí chromatograficky na stĺpci Biogelu P2 pri použití elučného činidla, ktoré tvorí 10 % roztok kyseliny octovej. Frakcia obsahujúca produkt sa zahustí a zvyšok sa rozotrie v éteri. Získa sa produkt vo forme bieleho prášku, ktorý sa zriedi v 2 ml vody. Získa sa roztok, ktorý sa prečistí chromatograficky na stĺpci Bíogradu AG 1W8 (v cykle OH“), pričom elúcia sa uskutočňuje vodou a IN roztokom kyseliny chlorovodíkovej. Frakcia obsahujúca produkt sa zahustí a zvyšok sa rozotrie v éteri.

Získa sa 50 mg produktu.

Teplota topenia: 168-175 °C (pri rozklade), výtažok: 10 %, /alfa/²⁰ = -118,5 ° (c = 0,6, voda).

D

Príklad 3 (zlúčenina 3) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-N-Acetyl-D-fenylaíanyí-N-/4-(lH-imidazol-4(5)-yí)-1-(3a,5,5-trímetylhexahydro4,6-metano-l,3,2-benzodíoxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid-hydrochlorid (1:1)

3.1 /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)//-alfa(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)-lH-imidazol-4(5)-butánamín-hydrochlorid (2:1)

3.1.1. /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)/-2-(3jódpropyí)-3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano14

1,3,2-benzodioxaborol

Roztok 37 g (122 mmolov) /3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)/-2-(3-brómpropyl)-3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano1,3,2-benzodioxaborolu a 72,7 g (488 mmolov) jodidu sodného v 500 ml acetónu sa zohrieva na teplotu varu pod spätným chladičom po dobu 24 hodín. Rozpúšťadlo sa potom odparí a zvyšok sa vyberie zmesou 500 ml éteru a 100 ml vody obsahujúcej 1 g siričitanu sodného. Organická fáza sa vysuší nad síranom horečnatým, potom sa sfiltruje a odparí. Získa sa 40 g produktu, ktorý sa použije bezprostredne v nasledovnom reakčnom stupni. Výťažok: 95 %.

3.1.2. /3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa/-2-/(1,1-Dimetyletyl)dimetylsilyl/-N,N-dimetyl-4(5)-/3-(3a,5,5trímetylhexahydró-4,6-metano-l, 3,2-benzodioxaborol2-y1)propyl/-lH-imidazol-l-sulfonamid

70,5 g (244 mmolov) 2-/(l,l-dimetyletyl)dimetylsilyl/-N,N-dimetyl-lH-imidazol-l-sulfonamidu sa rozpustí v 250 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu -78 °C a k zmesi sa pridá 152 ml (244 mmolov) 1,6M roztoku n-butyllítia v hexáne. Zmes sa mieša po dobu jednej hodiny pri teplote -78 °C, potom sa pridá 40 g (115 mmolov) /3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa/-2-(3-jódpropyl)-3a,5,5-trímetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodoxaborolu v roztoku v 100 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa mieša po dobu jednej hodiny pri teplote medzí -78 a 20 °C a potom po dobu 2 hodín pri teplote 20 °c. Reakčná zmes sa potom naleje do 350 ml zmesi ľadu a vody obsahujúcej 14,5 g (121 mmolov) hydrogénsulfátu sodného. Vodná fáza sa extrahuje trikrát 100 ml éteru, potom sa éterové fázy zlúčia, vysušia nad síranom horečnatým, sfíltrujú a odparia. Zvyšok sa prečistí chromatograficky na stĺpci silikagélu pri použití elučnej sústavy, ktorú tvorí 20 % roztok etylacetátu v hexáne.

Získa sa 45 g produktu.

Výťažok: 73 %, /alfa/²⁰ +12,5 ° (c = 1,9, chloroform).

D

3.1.3. /3aS-/2(S), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-4-Chlór-4-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-2-/(1,1-dímetylety1)dimetylsilyl/-N,N-dimetyl-lH-imidazol-l-sulfonamíd

Roztok 8,3 g (98 mmolov) dichlórmetánu v 100 ml tetrahydrofuránu sa ochladí na teplotu -100 °C. K takto ochladenému roztoku sa pridá 39,1 ml (98 mmolov) 2,5M roztoku n-butyllítia v hexáne. Zmes sa ponechá pri tejto teplote po dobu 15 minút, potom sa pridá 45 g (89 mmolov) /3aS-(3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa)/-2-/(1,1-dímetyletyl)dimetylsilyl/-N,Ndimetyl-4(5)-/3-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2benzodioxaborol-2-yl)propyl/-lH-imidazol-l-sulfonamid v roztoku v 50 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa ponechá pri teplote -100 °C po dobu 15 minút, potom sa k nej pridá 9,8 g (70 mmolov) roztoku chloridu zinočnatého v 50 ml tetrahydrofuránu. Zmes sa nechá ohriať na teplotu 20 °C v priebehu 16 hodín. Potom sa pri vákuu odparí a zvyšok sa vyberie zmesou 200 ml dichlórmetánu a 50 ml vody. Fázy sa oddelia a vodná fáza sa extrahuje 100 ml dichlórmetánu. Organické fázy sa zlúčia, vysušia nad síranom horečnatým, sfiltrujú a odparia. Farebný zvyšok sa prečistí chromatograficky na silikagéli pri použití elučnej sústavy, ktorú tvorí zmes etylacetátu a hexánu v objemovom pomere 20:80.

Získa sa 40 g produktu vo forme bezfarebného oleja.

Výťažok: 80 %, /alfa/²⁰ +15,9 ° (c = 2,65, chloroform).

D

3.1.4. /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-4(5)-/4amino-4-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2benzodioxaborol-2-yl)butyl/-N,N-dimetyl-lH-imidazol 1-sulfonamid-hydrochlorid (1:1)

12,6 g (78 mmolov) 1,1,1,3,3,3-hexametylsilazánu sa rozpustí v 80 ml tetrahydrofuránu a k získanému roztoku sa pridá 31 ml (78 mmolov) 2,5M roztoku n-butyllítia v hexáne. Zmes sa ponechá po dobu jednej hodiny pri teplote -78 ^eC, potom sa k nej pridá 40 g (71 mmolov) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta,7aalfa//-4(5)-/4-chlór-4-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-2-/(1,1-dimetyletyl)dimetylsilyl/-N,N-dimetyl-lH-imidazol-l-sulfonamidu v roztoku v 80 ml tetrahydrofuránu. Zmes sa mieša po dobu jednej hodiny pri teplote -78 °C a potom po dobu 16 hodín pri teplote 20 °C. Reakčná zmes sa potom ochladí na teplotu -78 °C, potom sa k nej pridá 78 ml (312 mmolov) 4N roztoku kyseliny chlorovodíkovej v díoxáne a zmes sa mieša po dobu jednej hodiny pri teplote -78 °C a potom po dobu 2 hodín pri teplote 20 °C. Zmes sa odparí pri vákuu a zvyšok sa vyberie 200 ml chloroformu. Získaná zmes sa odparí. Získa s 32 g produktu vo forme oleja, ktorý sa rozotrie v éteri.

Získa sa produkt vo forme pevnej látky.

Výťažok: 89 %, teplota topenia: 90-92 °C, /alfa/²⁰ +11 ° (c = 1, metanol).

D

3.1.5. /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-alfa(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodíoxaborol-2-yl)-lH-imidazol-4(5)-butánamín-hydrochlorid (2:1) g (70 mmolov) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta,

7aalfa//-4(5)-/4-amino-4-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano1,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-N,N-dimetyl-lH-imidazol-lsulfonamid-hydrochloridu v roztoku v 200 ml 4N kyseliny chlorovodíkovej sa zohrieva na teplotu varu po dobu 3 hodín. Roztok sa extrahuje štyrikrát 100 ml éteru, potom sa odparí do sucha. Zvyšok sa vyberie 100 ml metanolu a k získanej frakcii sa pridá 11,9 g (70 mmolov) /lR-(lalfa, 2alfa, 3alfa, 5alfa/-2,6,6-trimetylbicyklo/3.1.l/heptán-2,3-diolu. Zmes sa mieša po dobu 16 hodín pri teplote 20 °C, potom sa odparí do sucha. Získa sa 27 g produktu vo forme oleja, ktorý sa rozotrie v éteri. Získa sa produkt vo forme pevnej látky.

Teplota topenia: 75-80 °C.

3.2. Ester N-acetyl-D-fenylalanyl-L-prolínu s 1-hydroxypyrolidín-2,5-diónom g (20 mmolov) N-acetyl-D-fenylalanyl-L-prolínu sa suspenduje v zmesi 100 ml etylacetátu a 5 ml dimetylformamidu. K získanej suspenzii sa pridá 2,53 g (22 mmolov) 1-hydroxypyrolidín-2,5-diónu a získaná zmes sa ochladí na teplotu 0 °C. Potom sa po malých porciách pridá 4,53 g (22 mmolov) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu v pevnej forme. Zmes sa mieša pri teplote 20 °C po dobu 20 hodín, potom sa rezultujúca suspenzia sfiltruje. Filtrát sa postupne premyje 20 ml 5 % roztoku hydrogénuhlíčítanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, potom sa vysuší nad síranom horečnatým. Získaný zvyšok sa rozotrie v éteri.

Získa sa 8 g sklovitého produktu, ktorý sa použije ako taký v nasledovnom reakčnom stupni.

3.3. /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-N-acetyl

D-fenylalanín-N-/4-(lH-imidazol-4(5)-yl-1-(3a,5,5trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol2-yl)butyl/-L-prolínamid-hydrochloríd (1:1)

2,4 g (6,4 mmolu) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-alfa-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzo díoxaborol-2-yl)-lH-ímidazol-4(5)-butánamín-hydrochloridu sa rozpustí v 20 ml dichlórmetánu a k získanému roztoku sa pridá 2,5 g (6,4 mmolu) esteru N-acetyl-D-fenylalanyl-L-prolínu s l-hydroxypyrolidón-2,5-diónom, potom sa získaná zmes ochladí na teplotu -30 °C. Po kvapkách sa pridá 3,6 ml (25,6 molu) trietylamínu a získaná zmes sa mieša po dobu 2 hodín pri teplote -30 °C a po dobu 2 hodín pri teplote 20 °C. Potom sa pridá 20 ml 5 % vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a vodná fáza sa dvakrát extrahuje 20 1 dichlórmetánu. Organické fázy sa zlúčia, vysušia nad síranom sodným, sfiltrujú a odparia.

Zvyšok sa vyberie 10 ml izopropanolu, potom sa pri teplote 0 °C pridá 64 ml 0,IN roztoku kyseliny chlorovodíkovej v izopropanoli. Po odparení sa zvyšok odfarbí živočíšnym uhlím v etylacetáte a prečistí chromatograficky na stĺpci Sephadexu LH-20 pri použití metanolu ako elučného činidla. Eluát obsahujúci produkt sa odparí a zvyšok sa rozotrie v éteri. Získajú sa 2 g produktu vo forme bezfarebnej pevnej látky.

Teplota topenie: 130-135 °C, výťažok: 51 %, /alfa/²⁰ = -112,1 ° (c = 1, chloroform).

D

Príklad 4 (zlúčenina 4) (R)-N-Acetyl-D-fenylalanyl-N-/l-borono-4-(lH-imidazol-4(5)-ylbutyl/-L-prolínamid-hydrochlorid (1:1) g (3 mmoly) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-N-acetyl-D-fenylalanín-N-/4-(lH-imidazol-4(5)-yl-1(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/-L-prolínamid-hydrochloridu sa rozpustia v 30 ml dichlórmetánu. Roztok sa ochladí na teplotu -78 °C, potom sa k takto ochladenému roztoku pridá po kvapkách 12 ml IM roztoku chloridu boritého v dichlórmetáne. Reakčná zmes sa ponechá po dobu 15 minút pri teplote -78 °C, potom sa umiestni na ľad a mieša po dobu 45 minút pri teplote 0 °C. Pridá sa 30 ml vody, potom sa oddelia fázy. Organická fáza sa dvakrát extrahuje 25 ml 10 % roztoku kyseliny octovej a vodná fáza sa trikrát extrahuje 25 ml éteru. Vodné fázy sa zlúčia, zahustia a zvyšok sa zriedi 10 ml metanolu a odparia. Zvyšok sa potom prečistí chromatografiou na stĺpci Bio-gelu P2 pri použití 10 % roztoku kyseliny octovej ako elučného činidla a následnou chromatografiou na stĺpci Bio-gelu P2 pri použití lmM roztoku kyseliny chlorovodíkovej ako elučného činidla.

Získa sa 800 mg produktu.

Teplota topenia: 155-160 °C, výťažok: 52 %, /alfa/²⁰ -98,5 ° (c = 0,65, voda).

D

Príklad 5 (zlúčenina 5) /3aS-/2/R/S(R)//, 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-/2-/2-///4-(1H -Imidazol-4-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l ,3,2-benzodioxaborol-2-yl)butyl/amino/karbonyl/pyrolidín-l-yl/2-oxo -1-(fenylmety1)etyl/karbamát-hydrochlorid (1:1)

K 7,2 g (7,2 mmolu) N-/(1,1-dimetyletoxy)karbonyl/D-fenylalanyl-L-prolínu v roztoku v 30 ml tetrahydrofuránu sa pri okolitej teplote pridá 2,3 ml (21 mmolov) N-metylmorfolínu. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu -20 °C, potom sa k nej pridá 2,72 ml (21 mmolov) izobutylformiátu. Reakčná zmes sa mieša po dobu 15 minút pri teplote -20 ^eC, potom sa k nej pridá 7,5 g (20 mmolov) /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-alfa-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)-lH-imidazol-4(5)-butánamínu v roztoku v 10 ml chloroformu a 5,6 ml (40 mmolov) trietylamínu. Reakčná zmes sa mieša po dobu 30 minút pri teplote -20 °C a potom ešte po dobu 24 hodín pri okolitej teplote. Zmes sa zriedi 300 ml etylacetátu a postupne premyje 200 ml vody a 200 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, potom sa vysuší nad síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparí do sucha a zvyšok sa vyberie 50 ml dichlórmetánu. Hydrochlorid sa pripraví pridaním 20 ml roztoku izopropanolu v 0,lN kyseline chlorovodíkovej, potom sa prečisti chromatograficky na stĺpci Lichoprepu RP 18 pri použití elučnej sústavy, ktorú tvorí gradient acetonitrilu v 0,02N kyseline chlorovodíkovej (20 % až 100 %).

Získa sa 5 g produktu vo forme hydrochloridu.

Teplota topenia: 115-120 °C, výťažok: 45 %, /alfa/²⁰ -106 ° (c = 1, chloroform).

Príklad 6 (zlúčenina 6) (R)-/l-/(D-fenylalanyl-L-prolyl)amino/-4-(lH-imidazol-4-yl)butyl/borónová kyselina vo forme hydrochloridu (3:1)

Z 698 mg (1 mmol) 1,l-dimetyletyl-/3aS-/2/R/S(R)//, 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-/2-/2-///4-(lH-imidazol-4-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-y1)-butyl/-amino/karbonyl/pyrolídín-l-yl/-2-oxo-l-(feny Imety 1)etyl/karbamát-hydrochloridu sa postupom podlá príkladu 4 a po prečistení na stĺpci Lichoprepu RP 18 pri elúcii gradíentom acetonitrilu v 0,02N kyseline chlorovodíkovej získa 300 mg požadovanej zlúčeniny.

Teplota topenia : 194 °C, /alfa/²⁰ -131 ° (c = 1,3, voda).

D

Príklad 7 (zlúčenina 7)

1,l-Dimetyletyl-/3aS-/2/R/S(R)//, 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-/2-/2-///4-/5-metyl-lH-imidazol-4-yl)-1-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2-benzodioxaborol-2-yl)-butyl/amino/karbonyl/pyrolidín-l-yl/-2-oxo-l-(fenyImety1)etyl/karbamáthydrochlorid (1:1)

Tento produkt sa pripraví postupom, ktorý sa opisuje v príklade 5 z /3aS-/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//-5-metyl-alfa-(3a,5,5-trimetylhexahydro-4,6-metano-l,3,2benzodioxaborol-2-yl)-lH-imidazol-4-butánamín-hydrochloridu. Získa sa 600 mg produktu.

Teplota topenia: 85-90 °C, /alfa/²⁰ -53,2 ° (c = 0,86, metanol). o

V nasledujúcej tabuľke sa uvádzajú chemické štruktúry a chemické vlastnosti niektorých zlúčenín podľa vynálezu. V stĺpci R³- symbol -C₆H_s znamená fenylovú skupinu a symbol

-C₆H_xi znamená cyklohexylovú skupinu. V stĺpci Soľ symbol HCI znamená hydrochlorid a údaj v zátvorkách znamená molárny pomer kyselina/zásada. V stĺpci T.t.(°C) symbol d znamená, že topenie prebieha pri rozklade.

Tabuľka

Tabul'ka (pokračovanie)

g o J	130-135	155-160	115-120	194	85-90
0 rH Ό (0 a V >tn a M o	E U 0 ι-H V_i ' 0 m Sj <H 0 i—4 ô rH	(0 t m ú «. co cn in 1 VD o	-106 (1; chloroform ) i	<0 Ό O rH > n r-4 ·*» 1 n H rH	rH 0 q (0 CN e n ^Βlf) 1 co co * o
rH 0 0]	f—j o ·· X rt	<-H iH G ·· X H	fH rH u ·· CS Ή	f—1 H G ·· X n	fH G ·· X H
<· · CS	<ú.-	X 1	m.	X 1	ΛΔ
m cx		x 1	Y-—ί__υ	x 1	\-4-s
cs. CS	<\J 2·^	x / 2^_ / <\j		3: / 2___ / <\j 2---	cC o
Ts'	X c 1	Wk x Ό G 1	wn x Ό G 1	wn x J= 1	x G 1
x	—1 x G O G 1	x G O G l	m «n x G G O O G 1	x 1	ÍR m x G G O O G 1
>G	n		in	VO	r*

Tabuľka ( pokračovanie)

Zlúčeniny podľa vynálezu sa testovali za účelom stanovenia ich účinku voči trombínom a trypsínu in vitro pri použití nasledovných testov.

1) Zrážanie ľudského fibrinogénu bovinným trombínom

Testovaná zlúčenina alebo jej vehikulum (10 ^ul) sa inkubuje po dobu 2 minút pri teplote 37 °C v roztoku ľudského fibrinogénu (200 ul, 2 mg/ml vo fyziologickom roztoku). Potom sa pridá 200 ^ul bovinného trombínu rozpusteného v destilovanej vode. Finálna koncentrácia trombínu činí 0,5 jednotky NIH/ml. Zmes sa mieša a zaznamenáva sa doba v sekundách potrebná na vytvorenie viditeľnej fibrínovej siete. Inhibícia tvorby fibrínu sa kvantifikuje výpočtom koncentrácie zlúčeniny, ktorá predlžuje dobu potrebnú na vyzrážanie fibrínovej siete o 100 % (CA ).

2) Zrážanie ľudského fibrinogénu ľudským trombínom

Testovaná zlúčenina alebo jej vehikulum (10 ^ul) sa inkubuje po dobu 2 minút pri teplote 37 °C v roztoku ľudského fibrinogénu (200 ul, 2 mg/ml vo fyziologickom roztoku). Potom sa pridá 200 /Ul ľudského trombínu rozpusteného v destilovanej vode. Finálna koncentrácia trombínu činí 2 jednotky NIH/ml. Zmes sa mieša a zaznamenáva sa doba v sekundách potrebná na vytvorenie viditeľnej fibrínovej siete. Inhibícia tvorby fibrínu sa kvantifikuje výpočtom koncentrácie zlúčeniny, ktorá predlžuje dobu potrebnú na vyzrážanie fibrínovej siete o

100 % (CA ).

' x o o ¹

3) Koagulácia potkanej plazmy bovinným trombínom

Potkaní samčekovia CD s telesnou hmotnosťou 150 až 200 g sa anestetizujú nembutalom (60 mg/kg, 0,1 ml/kg). Anestetizo26 vaným potkanom sa z retro-orbitálneho splavu odoberie krv na 3,8 % trojsódnu sol kyseliny citrónovej. Plazma sa pripraví z krvi 15 minútovým odstredením pri 3600 g a pri okolitej teplote. Testovaná zlúčenina alebo jej vehikulum (10 ^ul) sa inkubuje s 200 /Ul uvedenej plazmy pri teplote 37 °C po dobu 2 minút, potom sa pridá 200 ^ul roztoku bovinného trombínu. Finálna koncentrácia trombínu činí 0,75 jednotky NIH/ml. Zaznamená sa doba v sekundách potrebná ku koagulácii potkanej plazmy. Inhibícia trombínu sa kvantifikuje výpočtom koncentrácie, ktorá predlžuje dobu potrebnú ku koagulácii plazmy o 100 %.

4) Agregácía králičích krvných doštičiek ľudským trombínom

Pokusným zvieratám sa kardiálnou punkciou odoberie krv na 3,8 % trojsódnu soľ kyseliny citrónovej (1 objem na 9 objemov krvi). Odobraná krv sa odstreďuje pri 250 g po dobu 10 minút. Takto získaná plazma bohatá na krvné doštičky (P₃P) sa izoluje a uskutoční sa stanovenie počtu doštičiek. Ku doštičkám P₃P sa pridá 2 ng/ml prostacyklínu v roztoku v ľadovom Tris-pufri (pH=9,0). Zmes sa odstreďuje pri 110 g po dobu 10 minút, potom sa dekantuje. Znovu sa pridá prostacyklín v roztoku (50 mM, pH 12) hydroxidu sodného tak, aby sa dosiahla finálna koncentrácia 200 ng/ml. Doštičky P^P sa znovu odstredia pri 800 g po dobu 10 minút. Plazma chudobná na doštičky sa odstráni a zostávajúca peleta sa suspenduje v objeme tyrodu, obsahujúcom 200 ng/ml prostacyklínu, ktorý sa rovná východiskovému objemu P₃P. Táto suspenzia sa odstreďuje pri 800 g po dobu 10 minút. Suspendovanie pelety sedimentu a odstreďenie suspenzie sa opakuje ešte raz pri rovnakých podmienkach. Finálna peleta sa suspenduje v roztoku tyrodu bez prostacyklínu, potom sa suspenzia nechá v kľude po dobu 2 hodín, aby sa umožnila úplná eliminácia prostacyklínu. Agregácia týchto krvných doštičiek sa indukuje ľudským trombínom vo finálnej koncentrácii 0,3 jednotky NIH/ml. Zaznamenajú sa zmeny optickej hustoty za použitia 4 kanálového agregometra. K suspenzii doštičiek (maximálny pridaný objem 3 ^ul) sa 2 minúty pred pridaním trombínu pridá testovaná zlúčenina. Stanoví sa koncentrácia, ktorá inhibuje uvedenú agregáciu o 50 % (CI_so).

5) Účinok na bovinný trypsín

Testovaná zlúčenina alebo jej vehikulum (50 ^ul) sa inkubuje po dobu 5 minút pri okolitej teplote s 50 _zul bovinného trypsínu rozpusteného v Tris-HCl-pufri (pH=8,0). Finálna koncentrácia trombínu činí 229 jednotiek/ml. Reakcia sa spustí pridaním substrátu, ktorým je N-alfa-benzoyl-L-arginín-4-nitroanilín (50 ^uM). Zmes sa inkubuje po dobu 20 minút pri okolitej teplote, potom sa zmeria optická hustota uvoľneného

4-nitroanilínu pri 405 nm. Z kalibračnej krivky sa po odpočítaní optickej hustoty zodpovedajúcej slepému pokusu (100 ^ul pufra + 50 ul substrátu) vypočíta koncentrácia 4-nítroanílínu. Stanoví sa koncentrácia, ktorá inhibuje o 50 % enzymatickú účinnosť trypsínu (CI_so).

Zlúčeniny podľa vynálezu sa paralelne testovali za účelom inhibície koagulácie potkanej plazmy ex vivo. Pokusným zvieratám sa pred odberom krvi podá intravenózne, perorálne alebo subkutánne testovaná zlúčenina. Potom sa meria doba potrebná ku koagulácii plazmy trombínom rovnako ako pri teste 3).

Zlúčeniny podľa vynálezu sú inhibítory trombínu a majú v tomto ohľade CA a Cl v rozmedzí medzi 10^-a a 10~⁶M. Nexoo so vykazujú žiadnu alebo vykazujú len malú inhibičnú účinnosť voči bovinnému trypsínu, čo dokazuje ich špecifičnosť.

Tieto zlúčeniny inhibujú koaguláciu potkanej plazmy pri dávkach nižších ako 1 mg/kg pri intravenóznej aplikácii, pričom sú rovnako účinné pri perorálnom a subkutánnom podaní.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť užitočné pri všetkých klinických indikáciách spojených s trombózou alebo pri klinických indikáciách, v rámci ktorých by mohlo dôjsť k trom28 botíckým komplikáciám.

Kvôli tomuto účelu sa môžu zlúčeniny podľa vynálezu formulovať vo formách vhodných pre perorálne, parenterálne alebo intravenózne podanie, akými sú tablety, dražé, želatínové tobolky, kapsule, pitné alebo injikovateľné suspenzie alebo roztoky a podobne, v kombinácii s vhodnými pomocnými látkami a v množstve, ktoré pacientovi umožňuje denne dávku účinnej zlúčeniny 1 až 1000 mg a to v jedinej dávke alebo v niekoľkých dielčich dávkach.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčeniny všeobecného vzorca I v ktorom

R znamená buď atóm vodíka alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka alebo priamu alebo rozvetvenú -CO-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alebo priamu alebo rozvetvenú -CO^-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka,

R^x znamená buď fenylovú skupinu alebo cyklohexylovú skupinu, R² znamená buď skupinu kde R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, a

R³ a R⁴ každý znamená atóm vodíka alebo spolu znamenajú zvyšok dihydroxylovanej zlúčeniny, vo forme optických alebo geometrických izomérov, v čistom stave alebo vo forme zmesí ako aj ich adičných solí s farmaceutický prijateľnými kyselinami a zásadami.
2. Zlúčeniny podľa nároku 1, v ktorých zvyšok dihydroxylovane j zlúčeniny je zvolený z množiny zahrňujúcej zvyšok 2,3-butándiolu 2,3-dimetyl-2,3-butándiolu a (lalfa, 3alfa, 5alfa)2,6,6-trimetylbicyklo/3.1.1/heptán-2,3-diolu /(+)-alfa-pinandiolu/.
3. Zlúčeniny podľa nároku 1 a 2 majúce podľa významov R³ a R⁴ konfiguráciu /2(R)/ alebo /3aS,/2(R), 3aalfa, 4beta, 6beta, 7aalfa//.
4. Zlúčeniny podľa niektorého z nárokov 1 až 3 všeobecného vzorca I, v ktorom R² znamená skupinu v ktorej R⁵ znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka.
5. Zlúčeniny podľa nároku 4 všeobecného vzorca I, v ktorom R znamená atóm vodíka alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, R¹ znamená fenylovú skupinu a R³ a R⁴ každý znamená atóm vodíka.
6. Zlúčenina podía nároku 1, ktorú tvorí kyselina (R)-/l/(D-fenylalanyl-L-prolyl)amino/-4-(lH-imidazol-4-butyl/borónová, ako i jej adičné soli s farmaceutický prijateľnými kyselinami a zásadami.
7. Spôsob prípravy zlúčenín podľa nároku 1 všeobecného vzorca I, v ktorom R² znamená skupinu v ktorej R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, vyznačený tým, že sa borotripeptid všeobecného vzorca II

Br v ktorom R¹ má význam uvedený v nároku 1, R³ a R⁴ spolu znamenajú zvyšok dihydroxylovanej zlúčeniny, ktorá sa definovala v nároku 1, R^e znamená buď atóm vodíka, keď R⁷ znamená priamu alebo rozvetvenú -CO-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alebo priamu alebo rozvetvenú -CO^-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, keď R⁷ znamená atóm vodíka alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, uvedie do reakcie so zlúčeninou všeobecného vzorca III č'<=J

CIII) v ktorom R⁵ má význam uvedený v nároku 1, pri vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca la a potom sa v prípade, keď sa vzorca lb má získať zlúčenina všeobecného

Q K

HCI v ktorom R, R^x a R^s majú významy uvedené v nároku 1, uvedie do reakcie zlúčenina všeobecného vzorca la s kyselinou chlorovodíkovou alebo s chloridom boritým.
8. Spôsob prípravy zlúčenín podľa nároku 1 všeobecného vzorca I , v ktorom R² znamená skupinu

NH v ktorej R^s znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka, vyznačený tým, že sa hydrochlorid všeobecného vzorca XII (XII) v ktorom R³ a R⁴ spolu znamenajú zvyšok dihydroxylovanej zlúčeniny definovanej v nároku la R^s má význam uvedený v nároku 1, kondenzuje s aktivovanou formou dipeptidu všeobecného vzorca xiii *· v ktorom R¹ má význam uvedený v nároku 1, R^e znamená buď atóm vodíka, keď R⁷ znamená priamu alebo rozvetvenú -CO-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alebo priamu alebo rozvetvenú -CO^-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, keď R⁷znamená atóm vodíka alebo priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 atómy uhlíka a X znamená buď 1pyrolidinyl-2,5-diónovú skupinu alebo 2-metylpropyloxykarbonylovú skupinu, pri vzniku zlúčeniny, ktorá sa uvedie do reakcie s kyselinou chlorovodíkovou pri vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca lc

0R^J <

OR⁴

HCI (lc) potom sa v prípade, keď sa má získať zlúčenina všeobecného vzorca Id v ktorom R, R¹ a R^s majú významy uvedené v nároku 1, uvedie do reakcie zlúčenina všeobecného vzorca Ic s kyselinou chlorovodíkovou alebo s chloridom boritým.
9. Liečivo, vyznačené tým, že obsahuje zlúčeninu podía niektorého z nárokov 1 až 5.
10. Farmaceutický prostriedok, vyznačený tým, že obsahuje zlúčeninu podľa niektorého z nárokov 1 až 5 v kombinácii s príslušnou farmaceutickou pomocnou látkou.