SK13952000A3 - Farmaceutické zlúčeniny na zobrazovanie porúch angiogenézy - Google Patents

Farmaceutické zlúčeniny na zobrazovanie porúch angiogenézy Download PDF

Info

Publication number
SK13952000A3
SK13952000A3 SK1395-2000A SK13952000A SK13952000A3 SK 13952000 A3 SK13952000 A3 SK 13952000A3 SK 13952000 A SK13952000 A SK 13952000A SK 13952000 A3 SK13952000 A3 SK 13952000A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
acid
substituted
group
cyclo
asp
Prior art date
Application number
SK1395-2000A
Other languages
English (en)
Inventor
Miland Rajopadhye
David Scott Edwards
Thomas David Harris
Stuart J. Heminway
Shuang Liu
Prahlad R. Singh
Original Assignee
Dupont Pharmaceuticals Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dupont Pharmaceuticals Company filed Critical Dupont Pharmaceuticals Company
Publication of SK13952000A3 publication Critical patent/SK13952000A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
    • A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
    • A61K49/227—Liposomes, lipoprotein vesicles, e.g. LDL or HDL lipoproteins, micelles, e.g. phospholipidic or polymeric
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Acoustics & Sound (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Farmaceutické zlúčeniny na zobrazovanie porúch angiogenézy
Oblast techniky
Vynález opisuje nové farmaceutické látky použitelné na diagnostiku a liečbu nádorových ochorení, spôsoby zobrazovania nádorov v organizmu pacienta a spôsoby liečby rakoviny u pacientov. Vynález rovnako opisuje nové farmaceutické zlúčeniny použitelné na monitorovanie terapeutickej angiogenézy a na deštrukciu novej vaskulatúry. Farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu zahŕňajú čast zodpovednú za smerovanie (namierenie) do miesta pôsobenia (dalej v texte smerujúca čast alebo smerujúca skupina), ktorá sa viaže na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, terapeuticky účinný rádioizotop alebo čast použitelnú na diagnostické zobrazenie a, ked je to žiadúce, skupinu spojujúcu hore spomínané časti. Terapeuticky účinný rádioizotop emituje častice alebo elektróny schopné pôsobít cytotoxicky. Čast na diagnostické zobrazenie je rádioizotop emitujúci pozitróny alebo gama žiarenie, kontrastná látka pre magnetickú rezonanciu, kontrastná látka pre rôntgenové žiarenie alebo kontrastná látka pre ultrazvuk.
Doterajší stav techniky
V Spojených štátoch aj v celom svete je rakovina jedným z hlavných zdravotných problémov. Predpokladá sa, že v roku 1998 bude v Spojených štátoch diagnostikovaných viac ako 1 milión nových prípadov invazívnych nádorových ochorení. Prevládajúcimi formami tohto ochorenia sú pevné nádory píúc, prsníka, prostaty, hrubého čreva a rekta. Rakovina je zvyčajne diagnostikovaná kombináciou testov uskutočňovaných in vitro a využitím zobrazovacích metód. Medzi tieto zobrazovacie metódy patrí rôntgenová počítačová tomografia (rôntgenová CT), magnetická rezonancia (MRI), vyšetrenie ultrazvukom a scintigrafia rádionuklidov. Na zosilnenie obrazu získaného rontgenovou CT, MRI alebo vyšetrením ultrazvukom je pacientovi zvyčajne aplikovaná dajaká kontrastná látka. Pri scintigrafii ·· »* *· ·· ·· • · · · · · · · · · · * «·ββ· « ! ! ·β · · I • · · · ··· ·· ·» ·· ······ ·· · rádionuklidov je nezbytné podanie rádiofarmaka schopného lokalizácie v nádoroch.
V závislosti od druhu a rozsahu ochorenia, je pri liečbe rakoviny zvyčajne používané ožiarovanie externým zdrojom žiarenia a chemoterapia, a to bud v kombinácii alebo samostatne.
V súčasnosti je dostupné velké množstvo chemoterapeutických látok, ale všetky tieto látky postrádajú špecifickosť voči nádorom (v porovnaní so zdravým tkanivom) a dôsledkom tejto skutočnosti je výskyt nežiadúcich vedľajších účinkov. Účinnosť liečby týmito postupmi je rovnako limitovaná, dokladom toho je vysoká mortalita pacientov trpiacich rôznymi typmi nádorových ochorení, najmä potom pacientov postihnutých prevládajúcim typom nádorov, čo sú pevné nádory. Je preto potrebné vyvinúť efektívnejšie a špecifickejšie spôsoby liečby.
I napriek množstvu dostupných rozličných zobrazovacích metód na diagnózu rakoviny existuje potreba zlepšenia týchto metód. Osobitne žiadúce je vyvinúť metódy, ktorými je možné lepšie odlíšiť rakovinu od iných patologických stavov alebo benígnych fyziologických abnormalít. Jedným zo spôsobov, ako dosiahnuť toto požadované zlepšenie, by bola aplikácia metalofarmaka (farmaceutickej zlúčeniny obsahujúcej atóm kovu), ktorý je špecificky lokalizovaný do nádoru tým, že sa viaže na nejaký receptor exprimovaný iba v nádoroch alebo exprimovaný v nádoroch v ďaleko väčšej miere ako v iných tkanivách. Lokalizácia metalofarmaka môže byť následne detekovaná bud, v prípade určitých rádiofarmak, detekciou emitovaného žiarenia alebo, v prípade kontrastných látok pre magnetickú rezonanciu, sledovaním vplyvu týchto látok na rýchlosť relaxácie molekúl vody v ich bezprostrednej blízkosti.
Tento prístup využívajúci metalofarmaka špecifické pre nejaký nádor môže byt rovnako využitý pri liečbe rakoviny tým, že metalofarmakon obsahuje rádioizotop emitujúci dajaké častice. Rádioaktívny rozpad daného izotopu v mieste nádoru má potom za následok vznik ionizujúceho žiarenia s intenzitou ·· • · · • · • · · · • · · · • · ·· » · · · b · · · ·· ·· ·· ·· vykazujúcou toxický vplyv na nádorové bunky. Špecifickosť tohto prístupu minimalizuje množstvo zdravého tkaniva, ktoré je vystavené pôsobeniu cytotoxickej látky, a môže preto poskytnúť účinnejšiu liečbu s menším množstvom nežiadúcich vedlajších účinkov.
Predošlé snahy o dosiahnutie týchto požadovaných zlepšení pri diagnostike a liečbe rakoviny sa sústredili na využitie rádioaktívne značených monoklonáIných protilátok, fragmentov protilátok a iných proteínov alebo polypeptidov (tzn. zlúčeniny s molekulovými hmotnosťami vyššími ako 10000 daltonov), ktoré sa viažu na povrchové receptory nádorových buniek. Špecifickosť týchto rádiofarmak je často velmi vysoká, avšak aj tu existuje niekolko nevýhod. Po prvé, vzhladom na ich vysoké molekulové hmotnosti, sú zvyčajne odstraňované z krvného prúdu velmi pomaly, a dôsledkom toho je vyššie pozadie (v krvi) na obrazoch. Vzhladom na ich vysoké molekulové hmotnosti, tieto látky rovnako obťažne prenikajú z krvného prúdu k miestu nádoru a potom iba pomaly difundujú mimocievnym priestorom k povrchu nádorových buniek. To má za následok skutočnosť, že k receptorom prenikne iba velmi obmedzené množstvo rádiofarmaka a preto je dosiahnutá velmi nízka intenzita signálu pri zobrazovaní alebo nedostatočný cytotoxický účinok pri liečbe.
Alternatívne prístupy pre diagnostiku (zobrazovanie) a liečbu rakoviny zahŕňajú použitie malých molekúl, ako napríklad peptidov, ktoré sa viažu na povrchové receptory nádorových buniek. Na diagnostické zobrazovanie nádorov exprimujúcich receptor pre somatostatin je v mnohých krajinách klinicky používaný peptid (viažuci sa na receptor pre somatostatin) značený rádioizotopom 111In (^^-^In-DTAP-D-Phe^-okteotid; Baker a další, Life Sci., 49: 1583 až 1591, 1991; a Krenning a ďalší, Eur. J. Nucl. Med., 20: 716 až 731, 1993). Za účelom liečby uvedených typov rakoviny boli testované vyššie dávky tohto rádiofarmaka (Krenning a ďalší, Digestion, 57: 57 až 61, 1996). Niekolko skupín skúma možnosť použitia analógu 111In-DTAP-D-Phe1-okteotidu značeného Tc-99m na diagnostické ·· ·· t· ·· ·· • · · · ···· ·· ···« · · ··« • · · · · · · · ·· · • · · · ··· · · ·· ·· ·· ···· ·· zobrazovanie a analógov značených Re-186 pre liečbu (Flanagan a ďalší, Patentová prihláška US 5556939; Lyle a další, Patentová prihláška US 5382654; a Albert a další, Patentová prihláška US 5650134).
Angiogenéza je proces, pri ktorom sa vytvárajú nové cievy z existujúcich kapilár alebo post-kapilárnych žiliek. Tento proces je dôležitou súčasťou najrôznejších fyziologických procesov vrátane ovulácie, embryogenézy, hojenia rán a tvorby kolaterálnej vaskulatúry srdca. Tento proces hrá rovnako klúčovú úlohu pri velkom počte patologických stavov ako napríklad pri raste nádorov a metastáz, diabetickej retinopatii a degenerácii makuly. Uvedený proces je zahájený aktiváciou existujúcich endoteliáIných buniek ciev ako reakcie na pôsobenie množstva cytokinov a rastových faktorov. Cytokiny alebo angiogénne faktory uvolňované nádormi stimulujú endoteliálne bunky ciev prostredníctvom interakcií so špecifickými povrchovými receptormi buniek pre tieto faktory. Takto aktivované endoteliálne bunky sekretujú enzýmy degradujúce bazálnu membránu ciev. Endoteliálne bunky následne proliferujú a prenikajú do tkaniva nádoru. Dochádza k diferenciácii týchto buniek za tvorby dutín, čo je v podstate nové vetvenie existujúcich ciev. Takto vzniknuté cievy následne privádzajú k nádorom živiny, čím umožňujú ich další rast a vytvárajú cestu pre proces tvorby metastáz.
Z fyziologických podmienok je proliferácia endoteliálnych buniek proces velmi pomalý, ale tento proces je na krátky čas urýchlený počas embryogenézy, ovulácie alebo hojenia poranení. Toto dočasné zrýchlenie metabolizmu buniek je riadené kombináciou množstiev stimulačných a inhibičných rastových faktorov. Pri patologickej angiogenéze je táto prirodzená rovnováha porušená, čo má za následok zvýšenú proliferáciu endoteliálnych buniek. Medzi dosial identifikované faktory stimulujúce angiogenézu patrí bázický rastový faktor fibroblastov (bFGF), angiogenin, TGF-alfa, TGF-beta a rastový faktor vaskulárneho endo5 • t ·· ·· ·· ·· · • · · · · · · · ···· • · ·· · · ·»·· ······· ···· · ···· · · · ·· · ·· ·· «· ···· ·· ··· télia (VEGF). Naproti tomu interferon-alfa, interferon-beta a trombospondin sú príkladom faktorov inhibujúcich angiogenézu.
Proliferácia a migrácia endoteliáIných buniek v extracelulárnej matrix sú sprostredkované interakciou s velkým počtom adhezívnych molekúl buniek (Folkman J., Náture Medicíne, 1:27 až 31, 1995). Integríny sú rôznorodou skupinou heterodimérnych povrchových bunkových receptorov, ktorých prostredníctvom interagujú endoteliálne bunky s extracelulárnou matrix, s inými typmi buniek a vzájomne medzi sebou. Integrín ανβ3 je receptor pre širokú škálu proteínov extracelulárnej matrix s exponovanou tripeptidovou sekvenciou Arg-Gly-Asp. Tento integrín sprostredkováva adhéziu medzi bunkami a ligandami uvedeného integrínu, ktorými sú (medzi inými) vitronektín, fibronektín a fibrinogén. Integrín αγβ3 je na normálnych cievach exprimovaný v minimálnej miere, ale u človeka je jeho expresia podstatne zvýšená na bunkách ciev vnútri najrôznejších nádorov. Receptory ανβ3 sprostredkovávajú interakcie endoteliálnych buniek a extracelulárnej matrix a ulahčujú migráciu buniek v smere angiogénneho signálu, tzn. smerom k populácii nádorových buniek. Angiogenéza indukovaná bFGF a TNF-alfa je závislá od expresie integrínu ανβ3, zatiaí čo angiogenéza indukovaná VEGF závisí od integrínu ανβ5 (Cheresh a další, Science, 270:1500 až 1502, 1995). Ďalším dôležitým mechanizmom, ktorého prostredníctvom stimuluje VEGF angiogenézu, je indukcia expresie integrínov α1β1 a α2βχ na P°vrchu endoteliálnych buniek (Senger a další, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:13612 až 13617, 1997).
Angiogénne faktory interagujú s povrchovými receptormi endoteliálnych buniek akými sú napríklad tyrozín-kinázové receptory EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin a Axl. Receptory Flk-1/KDR, neuropilin-1 a Flt-l rozpoznávajú VEGF a tieto interakcie hrajú klúčovú úlohu pri angiogenéze indukovanej VEGF. Subpopulácia tyrozín-kinázových receptorov Tie je rovnako exprimovaná predovšetkým pri procese tvorby ciev.
·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ··
S ohladom na dôležitosť angiogenézy pre rast nádorov a proces metastazovania je vyvíjané množstvo chemoterapeutických prístupov, ktoré s týmto procesom interferujú alebo tento proces blokujú. Jeden z týchto prístupov zahŕňa využitie anti-angiogénnych proteínov akými sú napríklad angiostatin alebo endostatin. Angiostatin je fragment plazminogénu s velkosťou 38 kDa, pri ktorom bolo na živočíšnych modeloch preukázané, že je silným inhibítorom proliferácie endoteliálnych buniek (O'Reilly a cťalší, Celí, 79:315 až 328, 1994). Endostatin je 20 kDa C-koncový fragment kolagénu XVIII, pri ktorom boli rovnako preukázané silné inhibičné vlastnosti (O'Reilly a cťalší, Celí, 88:277 až 285, 1997).
Na živočíšnych modeloch bolo preukázané, že systemická terapia endostatinom pôsobí protinádorovo. Humánne klinické štúdie uvedených dvoch chemoterapeutických látok biologického pôvodu boli však, s ohladom na nedostatok týchto chemoterapeutik, zrušené.
Iným prístupom pri anti-angiogénnej terapii je použitie smerujúcich častí (targeting moiety) interagujúcich s povrchovými receptormi endoteliálnych buniek exprimovanými v angiogénnej vaskulatúre, ku ktorým sú pripojené chemoterapeutické látky. Na myšom modele opisujú Burrows a Thorpe (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:8996 až 9000, 1993) použitie konjugátu protilátka-imunotoxín na odstránenie nádorov prostredníctvom deštrukcie vaskulatúry v týchto nádoroch. Použitá protilátka bola pripravená proti velkému histokompatibiInému komplexu II. triedy endoteliálnych buniek a následne bola konjugovaná s cytotoxickou látkou, deglykozylovaným reťazcom A ricínu. Rovnaká skupina (Clin. Cancer Res., 1:1623 až 1634, 1995) skúmala použitie protilátok namierených proti endoglinu, povrchovému receptoru endoteliálnych buniek, a konjugovaných s deglykozylovaným reťazcom A ricínu. Obidva uvedené konjugáty vykazovali na myších modeloch výraznú protinádorovú aktivitu. Pre rutinné použití v humánnej medicíne majú však obidva tieto
Ί • t ·· ·· ·· ·» ···· ···· · · • · ·· β 9 9 9
9 9 9 9 9 * · · · · • · 9 9 9 9 9 9 9
99 99 9999 99 konjugáty rad nedostatkov. Ako pri väčšine protilátok alebo iných, velkých cudzorodých proteínov, i tu existuje nezanedbatelné riziko imunologickej toxickosti, ktorá môže obmedziť alebo zabrániť aplikácii luďom. I keď smerovanie do vaskulatúry môže zvýšiť lokálnu koncentráciu pripojených chemoterapeutických látok, tieto látky musia, aby sa prejavil ich cytotoxický účinok, byt z protilátky odštiepené a preniknúť dovnútra bunky dajakým transportným mechanizmom alebo difúziou.
Je preto žiadúce poskytnúť anti-angiogénne zlúčeniny a látky na zobrazovanie nádorov alebo novej vaskulatúry, ktoré nevykazujú nevýhody spojené so špatnou difúziou a transportom, možnou imunologickou toxickosťou, obmedzenou dostupnosťou a/alebo nedostatkom špecifickosti.
Raste rovnako záujem o terapeutickú angiogenézu za účelom zlepšenia prietoku krvi v ischemických alebo nedostatočne prekrvených miestach organizmu. Niekolko výskumných pracovísk používa na vytváranie novej vaskulatúry v končatinách alebo srdci lokálnu aplikáciu rastových faktorov. Pri tejto aplikácii sú najčastejšie používané rastové faktory VEGF a bFGF. Medzi publikácie z posledných rokov patrí: Takeshita a ďalší, J. Clin. Invest., 93:662 až 670, 1994; a Schaper W. a Schaper J., Collateral Circulation: Heart, Brain, Kidney, Limbs, Kluwer Academic Publishers, Boston, 1993. Hlavnými aplikáciami skúmanými v radu laboratórií sú aplikácie vedúce k zlepšeniu prietoku krvi srdcom a zlepšeniu prietoku krvi v periférnych cievach končatín. Henry T. a ďalší (J. Amer. College Cardiology, 31:65A, 1998) napríklad opisujú použitie rekombinantného ludského VEGF na zlepšenie krvného zásobenia srdca u ludí. Pacientom boli aplikované infúzie rhVEGF a zlepšenie krvného zásobenia srdca bolo sledované metódou nukleárnej perfúzie 30 a 60 dní po infúzii. Približne 50% pacientov vykazovalo pri diagnostike nukleárnou perfúziou zlepšenie, zatial čo angiografiiou bolo preukázané vytváranie nových kolaterálnych ciev pri 5/7 pacientov.
·· ·· ·· ·· ·· ···· + · · · ·· • · ·· · · ··· • ·· · · · · · ·· · • · · · ··· · · • · · · ·· ···· ··
Je preto žiadúce objaviť spôsob diagnostiky zlepšenia krvného zásobenia srdca, ktorý by bol zameraný na novo vytvorené kolaterálne cievy, a nie, ako v prípade diagnostiky nukleárnou perfúziou, iba dôsledkom vzniku nových kolaterálnych ciev.
Podstata vynálezu
Vynález opisuje anti-angiogénne farmaceutické zlúčeniny obsahujúce smerujúcu časť, ktorá sa viaže na receptor exprimovaný v novo vytvorenej vaskulatúre nádoru, ión rádioaktívneho kovu, ktorý emituje ionizujúce žiarenie ako napríklad častice beta, častice alfa a Augerove alebo Coster-Kronigove elektróny, a, ked je to žiadúce, skupinu spojujúcu hore uvedené časti. Časť viažuca sa na receptor smeruje použitý rádioizotop do novo vytvorenej vaskulatúry nádoru. Rádioizotop emituje beta alebo alfa častice s intenzitou pôsobiacou cytotoxicky a vedúci k deštrukcii buniek. Vzhladom na schopnosť žiarenia prenikať tkanivom nie je nutné, aby cytotoxická látka difundovala alebo bola transportovaná dovnútra bunky, až kde môže pôsobiť cytotoxicky.
Vynález dalej opisuje farmaceutické zlúčeniny pre liečbu reumatickej artritídy. Tieto farmaceutické zlúčeniny obsahujú smerujúcu časť, ktorá sa viaže na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, rádioizotop emitujúci žiarenie s cytotoxickými účinkami (tzn. častice beta, častice alfa a Augerove alebo Coster-Kronigove elektróny) a, ked je to žiadúce, skupinu spojujúcu hore uvedené časti. Pri reumatickej artritíde je vrastanie cievnatého tkaniva zápalového pôvodu (panus) spôsobené nadmernou produkciou angiogénnych faktorov prostredníctvom infiltrovaných makrofágov, buniek imunitného systému alebo buniek zápalu. Rádiofarmaka podlá vynálezu emitujúce cytotoxické žiarenie môžu byť teda použité na zničenie novo vytvorenej vaskulatúry a tým na liečbu tohto ochorenia.
·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · · • · ·· · · · · ······· ···· · • » · · · · · · · · ·· ·· ·· ···· ·· ···
Vynález ďalej opisuje látky na zobrazovanie (diagnostiku) nádorov, kde tieto látky zahŕňajú smerujúcu časé, ktorá sa viaže na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, čaši použiteínú na diagnostické zobrazenie, ako napríklad rádioizotop emitujúci pozitróny alebo gama žiarenie, kontrastnú látku pre magnetickú rezonanciu, kontrastnú látku pre róntgenové žiarenie alebo kontrastnú látku pre ultrazvuk, a, keď je to žiadúce, skupinu spojujúcu hore spomínané časti.
Vynález ďalej opisuje látky na monitorovanie (zobrazovanie) priebehu a výsledkov terapeutickej angiogenézy. Tieto látky obsahujú smerujúcu časé, ktorá sa viaže na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, časé použiteínú na diagnostické zobrazenie a, keď je to žiadúce, skupinu spojujúcu hore spomínané časti. Zlúčeniny podía vynálezu na diagnostické zobrazovanie môžu byé intravenózne aplikované pravidelne po aplikácii rastových faktorov a diagnostické zobrazovanie postihnutých miest (srdca alebo končatín) bude vykonané pri využití štandardných postupov. Takto bude sledovaný priebeh a výsledky terapeutickej angiogenézy (tzn. zobrazovaná tvorba nových ciev).
Vynález ďalej opisuje zlúčeniny použiteíné na prípravu farmaceutických prípravkov podía vynálezu. Tieto zlúčeniny obsahujú peptidovú alebo peptidomimetickú smerujúcu časé (označovaná Q), ktorá sa viaže na nejaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, chelátor kovov alebo časé viažucu kovy (označovaná C^) a, keď je to žiadúce, skupinu spojujúcu hore spomínané časti (označovaná Ln). Tieto zlúčeniny môžu obsahovaé jednu alebo viac chrániacich skupín pripojených k chelátoru kovov alebo časti viažucej kovy. Uvedené chrániace skupiny zlepšujú stabilitu pri dlhodobom skladovaní a sú odstránené tesne pred alebo počas syntézy rádiofarmaka. Zlúčeniny podía vynálezu môžu takisto obsahovaé peptidovú alebo peptidomimetickú smerujúcu časé, ktorá sa viaže na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvý• · • · «· «· • · · · « · ·· ·· ·· • Λ · · • · β ·· ·· ···· sená (Q), dajakú povrchovo aktívnu látku (označovaná sf) a, keď je to žiadúce, spojujúcu skupinu (Ln).
Farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu môžu byt použité na diagnostické a/alebo terapeutické účely. Diagnostické rádiofarmaka podlá vynálezu sú farmaceutické zlúčeniny obsahujúce diagnosticky využitelný rádionuklid (tzn. ión rádioaktívneho kovu emitujúci diagnosticky detekovatelné pozitróny alebo gama žiarenie). Terapeutické rádiofarmaka podlá vynálezu sú farmaceutické zlúčeniny obsahujúce terapeuticky využitelný rádionuklid, ión rádioaktívneho kovu emitujúci častice beta, častice alfa a Augerove alebo Coster-Kronigove elektróny.
Zlúčeniny obsahujúce ión rádioaktívneho kovu emitujúce pozitróny alebo gama žiarenie sú použitelné na zobrazovanie nádorov scintigrafiou gama žiarenia alebo pozitrónovou emisnou tomografiou. Zlúčeniny obsahujúce ión rádioaktívneho kovu emitujúce pozitróny alebo gama žiarenie sú rovnako použitelné na diagnostiku terapeutickej angiogenézy scintigrafiou gama žiarenia alebo pozitrónovou emisnou tomografiou. Farmaceutické zlúčeniny obsahujúce ión rádioaktívneho kovu emitujúci častice sú použitelné na liečbu rakoviny tým, že do nádorov vnášajú cytotoxickú dávku žiarenia. Farmaceutické zlúčeniny obsahujúce ión rádioaktívneho kovu emitujúceho častice sú rovnako použitelné na liečbu reumatickej artritídy tým, že ničia novo vytvorenú vaskulatúru. Zlúčeniny obsahujúce ión paramagnetického kovu sú použitelné ako diagnostické kontrastné látky pre nukleárnu magnetickú rezonanciu. Zlúčeniny obsahujúce jeden alebo viac atómov absorbujúcich rôntgenové žiarenie alebo tažkých atómov s atómovým číslom vyšším ako 20 sú použi_ telné ako diagnostické kontrastné látky pre rôntgenové žiarenie. Zlúčeniny obsahujúce mikrobubliny biokompatibiIného plynu, dajaký kvapalný nosič a mikročastice povrchovo aktívnej látky sú použitelné ako kontrastné látky pre ultrazvuk.
(1) Prvé výhodné rozpracovanie vynálezu opisuje novú zlúčeninu obsahujúcu: smerujúcu časť a dajaké chelátotvomé činidlo, kde uvedená smerujúca čast spojená s chelátotvomým činidlom je peptid alebo peptidomimetikum viažúce sa na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, a v tejto zlúčenine sú medzi smerujúcou častou a chelátotvomým činidlom 0 až 1 spojujúce skupiny.
(2) Vo výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedenou smerujúcou častou dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-l/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, ανβ3, ανβ5, β^βχ, α4βι» αιβι a α2β2 a medzi smerujúcou častou a chelátotvomým činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
(3) Vo výhodnejšom rozpracovaní vynálezu je uvedeným receptorom integrín ανβ3 a daná zlúčenina je opísaná vzorcom:
alebo (Qj^j-L^— (Ch)^1 kde Q je peptid nezávisle vybraný zo skupiny:
R3-R4 . L-M' ,
K je dajaká L-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν-2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
K' je dajaká D-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, ·· ·· ·· ·· ·· • 9 · · · · · · · · • ·· · · · · · ··· · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν-2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
L je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-alanín a D-alanín;
M je kyselina L-asparágová;
M' je kyselina D-asparágová;
R1 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, fenylalanin, tienylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, 1-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín a metionín;
R2 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, valin, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1, 2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín, metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4octovú;
R3 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu ·
• ·
·· ·· • · · · • · ·· · · · • 4 · 9 • 9 ··
D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín a D-metionín;
R4 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín, D-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
R5 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, kyselinu L-2-aminohexánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-lnaftylalanín, L-lyzín, L-serín, L-ornitín, kyselinu L-1,2diaminobutánovú, kyselinu L-1,2-diaminopropánovú, L-cysteín, L-penicilamín, L-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1, R2, R3, R4 alebo R5 substituovaný väzbou k Ln, a ďalej za predpokladu, že keď R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylarginín, ďalej za predpokladu, že ked R4 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K a K' sú N-metylarginín a ďalej za predpokladu, že keď R5 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K* je N-metylarginín;
d je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;
i
I I
4 • · · · • a 44 • · · · * • 4 4 4 ·· ·· ·· • · · • · • 4 • 4 4444
Ln je spojujúca skupina opísaná vzorcom: (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g,-(Z)k-(W)h,-(CR8R9)glI-(W)h„-(CR8aR9a)g„, , za predpokladu, že g+h+g'+k+h'+g+h+g' sa nerovná nule;
W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=O),
C(=0)0, 0C(=0), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, S02, (OCH2CH2)S, (CH2CH2O)s,, (OCH2CH2CH2)s„, (CH2CH2CH2O)t a (aa)t«;
aa je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená aminokyselina;
Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 3 R10, C3_1Q cykloalkyl substituovaný o až 3 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci i až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 3 R10;
R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, COOH, SO3H, PO3H, Cx až C5 alkyl substituovaný 0 až 3 R10, aryl substituovaný 0 až 3 R10, benzyl substituovaný o až 3 R10 a C-^ až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 3 R10, NHCÍ-OÍR11, C(=O)NHR1:L, NHC(=0)NHR13-, NHR11, R11 a väzbu k Ch;
R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k C^, COOR11, OH, NHR11, SO3H, P03H, aryl substituovaný 0 až 1 R11, C·^ až C5 alkyl substituovaný 0 až 1 R12, Cj až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 1 R12 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R11;
··
»· • · · · • · ·· ·· ·· • · · · • · · • · · · e· ·· • · · ·· ····
R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej; H, aryl substituovaný 0 až 1 R12, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 1 R12, C3_lo cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R12, polyalkylénglykol substituovaný 0 až 1 R12, karbohydrát substituovaný 0 až 1 R12, cyklodextrín substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanou 0 až 1 R12, polykarboxyalkyl substituovaný 0 až 1 R12, polyazaalkyl substituovaný 0 až 1 R12, peptid substituovaný 0 až 1 R12, kde uvedený peptid obsahuje 2 až 10 aminokyselín a väzbu k Ch;
R12 je väzba k Ch;
k je číslo vybrané z nasledujúcich; 0, 1 a 2;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
h' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
7, 8, 9 a 10;
g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
7, 8, 9 a 10;
s' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
t je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
7, 8, 9 a 10;
ť je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
je časť viažuca kov opísaná vzorcom vybraným zo skupiny:
A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 a A8 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: N, NR13, NR13R14, S, SH, S(Pg), 0, OH, PR13, PR13R14, P(0)R15R16 a väzbu k Ln;
E je dajaká väzba, CH alebo spojujúca skupina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: 0χ až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný
·· ·· 99 ·· ··
• · • · • 9 • 9 • · • ·
• · ·· • • • • ·
• · 9 9 9 • • • 9
·· 99 99 ···· ·· ··
O až 3 R17, C3_j0 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17, heterocyklo-C1_10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, kde uvedenou heterocyklickou skupinou je 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N,
S a O, C6_10 aryl-C1_10 alkyl- substituovaný 0 až 3 R17, cl-10 alkyl-C6_io aryl- substituovaný 0 až 3 R17 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci l až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3
R13 a R14 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, atóm vodíka, 0τ až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný 0 až 3 R17, ci_io cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17, heterocyklo-C-L_10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, kde uvedenou heterocyklickou skupinou je 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0, C6_10 aryl-C1_1Q alkyl- substituovaný 0 až 3 R17, ci_io alkyl-Cg_10 arY1_ substituovaný 0 až
R17, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a o a substituované 0 až 3 R17a elektrón za predpokladu, že ked bud R13 alebo R14 je elektrón, potom druhý z tejto dvojice je rovnako elektrón;
alebo R13 a R14 spoločne vytvárajú =C(R20)(R21);
R15 a R16 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, -OH, Οχ až C1Q alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný 0 až 3 R17, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17, heterocyklo-Cj.jLQ alkyl substituovaný 0 až 3 R17, kde uvedenou heterocyklickou skupinou je 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, s a o, C6_10 aryl-C1_1Q alkyl- substituovaný 0 až 3 R17, c1_10 alkyl-C6_10 aryl- substituovaný 0 až 3 R17 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až ··
·· ·· • · · · • · ·· • · · · · • · · · ·· ·· ·· • · · • · • · · • · ···· ·· heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 3 R17;
R17 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R18, -C(=O)R18, -C(=O)N(R18)2, -CHO, -CH2OR18, -0C(=0)R18, -OC(=O)OR18a, -OR18, -OC(=O)N(R18)2, -NR19C(=0)R18 -NR19C(=O)OR18a, -NR19C(=O)N(R18)2, -NR19SO2N(R18)2, -NR19SO2R18a, -SO3H, -SO2R18a, -SR18, -S(=O)R18a, -SO2N(R18)2, -n(r18)2, -NHC(=S)NHR18, =nor18, no2, -C(-O)NHOR18, -C(=O)NHNR18R18a, -OCH2CO2H, 2-(1-morfolino)etoxy, C^-Cg alkyl, C2-C4 alkenyl, C3-Cg cykloalkyl, C3-Cg cykloalkylmetyl, c2”c6 alkyloxyalkyl, aryl substituovaný 0 až 2 R18 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0;
R18, R18a a R19 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, H, Cj^-Cg alkyl, fenyl, benzyl, Cj-Cg alkyloxy, halid, nitro, kyano a trifluórmetyl ;
Pg je chrániaca skupina tiolu;
R20 a R21 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
H, C-l až C1Q alkyl, -CN, -CO2R25, -C(=O)R25, -C(=O)N(R25)2, c2”c10 1_alk®n substituovaný 0 až 3 R23, C2-C10 1-alkín substituovaný 0 až 3 R23, aryl substituovaný 0 až 3 R23, nesaturovaný 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituovaný 0 až 3 R23 a nesaturovaný C3_lo karbocyklus substituovaný 0 až 3 R23;
alternatívne vytvárajú R20 a R21 spolu s divalentným uhlíkovým radikálom, ku ktorému sú pripojené, štruktúru:
·· ·· »· ·· ·· ·
• • • · • • • · • · • ·
• • ·· • • • • ·
•
• • • · • • • • ·
• · ·· ·· ···· ·· • ·
R22 a r23 S£ nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
H, R14, ci~c10 alkyl substituovaný 0 až 3 R24, C2-C10 alkenyl substituovaný 0 až 3 R24, c2-cio substituovaný 0 až
R24, aryl substituovaný 0 až 3 R24, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R24 a c3_iq karbocyklus substituovaný 0 až 3 R24;
alternatívne vytvárajú R22 a R23 kondenzovaný aromatický alebo 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O;
a a b označujú pozície možného výskytu dvojných väzieb a n je 0 alebo l;
R24 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R25, -C(=O)R25, -C(=O)N(R25)2, -N(R25)3+, -CH2OR25, -OC(=O)R25, -OC(=O)OR25a, -OR25, -OC(=O)N(R25)2, -NR26C(=O)R25,
-NR26C(=O)OR25a, -NR26C(=O)N(R25)2, -NR26SO2N(R25)2 ,
-NR26SO2R25a, -SO3H, -SO2R25a, -SR25, -S(=O)R25a,
-so2n(r25)2, -n(r25)2, =nor25, -c(=o)nhor25, -och2co2h a 2-(l-morfolino)etoxy; a
R25, R25a a R26 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: atóm vodíka a C-^ až Cg alkyl; a dajakú jej farmaceutický prijateínú soí.
(4) V ešte výhodnejšom rozpracovaní opisuje vynález zlúčeninu, kde:
• · ·· ·· ·· ·· ···· ···· • · ·· · · · • ·· ··· · · ·· · ···· ··· · · ·· ·· ·· ···· ··
L je glycín;
R1 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: L-valín, D-valín, alanin, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, tyrozín, fenylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, lyzín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú a kyselinu 1,2-diaminopropánovú;
R^ je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: valín, alanin, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
R3 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2-diaminobutánovú a kyselinu D-l,2-diaminopropánovú;
je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-l-naftylalanín, D-lyzín, D-ornitín, kyselinu D-l,2-diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
·· ·· ·· ·· • · · • · • · · • · · ·· ·· ·· • · · • · • · · • · ···· ·· · • ·
R5 je dajaká aminokyselina voliteľne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-l-naftylalanín, L-lyzín, L-ornitín, kyselinu L-l,2-diaminobutánovú, kyselinu L-l,2-diaminopropánovú a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
d je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2 a 3;
W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: O, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=O), C(=O)O, 0C(=0), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, S02, (OCH2CH2)S, (CH2CH2O)S,, (OCH2CH2CH2)s„ a (CH2CH2CH2O)t;
Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 1 R10, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 1 R10;
R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, COOH, S03H, Cj až C5 alkyi substituovaný 0 až 1 R10, aryl substituovaný 0 až 1 R10, benzyl substituovaný 0 až 1 R10 a C1 až Cg alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 1 R10, NHC(=O)R1:L, C(=O)NHRi:l, NHC(=0)NHRi:l, NHR11, R11 a väzbu k Ch;
R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: COOR11, OH, NHR11, SO3H, aryl substituovaný 0 až 1 R11, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a a substituované 0 až 1 R11, až C5 alkyi substituovaný 0
·· ·· ·· ·· ·· ·
• · • · • · • · • · • ·
• · ·· • · • • ·
• · • · • · • • ·
·· ·· ·· ···· ·· ··
až 1 R12, Cj až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k C^;
R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný 0 až 1 R12, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 1 R12, polyalkylénglykol substituovaný 0 až 1 R12, karbohydrát substituovaný 0 až 1 R12, cyklodextrín substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k Ch;
k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0 alebo 1;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0 alebo 1;
h' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0 alebo 1;
s je číslo vybrané z nasledujúcich: o, 1, 2, 3, 4a5;
s' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
t je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 a A8 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: NR13, NR13R14, S, SH, S(Pg), OH a väzbu k Ln;
E je dajaká väzba, CH alebo spojujúca skupina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej:
Cj až Cj0 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný až 3 R17, C3_j0 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17 a 5 až členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a o a substituované o až 3
·· ·· ·· ·· ·· ·
• • • · • • • · • • • ·
• • ·· • • • • •
•
• • • · • • • • 9
·· • · ·· ···· ·· • ·
R13 a R14 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, atóm vodíka, až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R·1·7, aryl substituovaný 0 až 3 R17, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R17a elektrón za predpokladu, že ked bud R13 alebo R14 je elektrón, potom druhý z tejto dvojice je rovnako elektrón;
alternatívne R13 a R14 spoločne vytvárajú =C(R20)(R21);
R17 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3,
-CN, -CO2R18, -c(=o)r18, -c(=o)n(r18)2, -ch2or18, -oc(=o)r18, -0C(=0)0R18a, -OR18, -OC(=O)N(R18)2, -NR19C(=O)R18, -NR19C(=O)OR18a, -NR19C(=O)N(R18)2, -NR19SO2N(R18)2, NR19SO2R18a, -SO3H, -SO2R18a, -S(=O)R18a, -SO2N(R18)2,
-N(R18)2, -NHC(=S)NHR18, =N0R18, -C(=O)NHNR18R18a, -OCH2CO2H a 2-(l-morfolino)etoxy;
R18, R18a a R19 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, Ha C^-Cg alkyl;
R28 a R21 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
H, Cj až C5 alkyl, -CO2R25, C2-C5 1-alkén substituovaný 0 až 3 R23, C2-Cg 1-alkín substituovaný 0 až 3 R23, aryl substituovaný 0 až 3 R23 a nesaturovaný 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N,
S a 0 a substituovaný 0 až 3 R23;
alternatívne vytvárajú R20 a R21 spolu s divalentným uhlíkovým radikálom, ku ktorému sú pripojené, štruktúru:
n
·· *· ·· ·· ·· ·
• • • · • « • · • · • ·
• • ·· • • • • ·
•
• • i · • • • • ·
·· ·· ·· ···· ·· e·
R22 a R23 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
H a R24;
alternatívne vytvárajú R22 a R23 kondenzovaný aromatický alebo 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O;
R24 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: -CO2R25, -C(=O)N(R25)2,-CH2OR25, -OC(=O)R25, -OR25, -SO3H, -N(R25)2 a -OCH2CO2H? a
R25 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: atóm vodíka a C-^ až C3 alkyl.
(5) V ešte výhodnejšom rozpracovaní opisuje vynález zlúčeninu, kde:
Q je peptid vybraný zo skupiny:
R3· je L-valín, D-valín, D-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln alebo L-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln;
R2 je L-fenylalanín, D-fenylalanín, D-l-naftylalanín, kyselina 2-aminotiazol-4-octová, L-lyzín volitelne substituo vaný na e aminoskupine väzbou k Ln alebo tyrozín volitelne substituovaný na hydroxyskupine väzbou k Lfi;
R3 je D-valín, D-fenylalanín alebo L-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln;
·· ·· ·· ·· 99 9
• · • · • • • · • · 99
• · ·· • • • • ·
• · • · • • • • ·
·« ·· 99 9999 99 99
R4 je D-fenylalanín, D-tyrozín substituovaný na hydroxyskupine väzbou k Ln alebo L-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln;
za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1 alebo R2 substituovaný väzbou k Ln, a dalej za predpokladu, že ked R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylarginín;
d je 1 alebo 2;
W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: NHC(=O), C(=O)NH, C(=0), (CH2CH2O)si a (CH2CH2CH2O)t;
R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, NHC(=O)R1X a väzbu k Ch;
k je 0;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2 a 3;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
s* je 1 alebo 2;
t je 1 alebo 2;
·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ·· ···· ·· · · · • · · · · · · · ·· · ···· ··· · · ·· ·· ·· ···· ··
E—ή'
A3 Á5
Aj-E-A7
A8
A1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: OH a väzbu k Ln;
A2, A4 a A6 sú N;
A3, A5 a A® sú OH;
t k je väzba k Ln alebo NH-vazba k Ln;
17.
E je dajaký C2 alkyl substituovaný 0 až 1 R r!7 je =0;
alternatívne, Ch je
A1 je NH2 alebo N=C(R20)(R21);
E je dajaká väzba;
A2 je NHR13;
R13 je heterocyklus substituovaný R17, kde tento heterocyklus je bud pyridín alebo pyrimidín;
R17 bud väzba k Ln, C(=O)NHR18 alebo C(=0)R18;
R18 je väzba k Ln;
_np25
R24 je zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: -CO2R*3, -OR*3,
-so3h a -N(r25)2;
R25 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: atóm vodík a metyl;
·· ·· ·· ·· • ·· · · ·· · ···· · · · · · • · « · · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· · ·· alternatívne :h
A1, A2, A3 a A4 sú N;
A5, A6 a A8 sú OH;
A7 je väzba k Ln;
E je C2 alkyl substituovaný 0 až 1 R17; a r17 je =0.
(6) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní, opisuje vynález zlúčeninu vybranú zo skupiny zahŕňajúcej:
(a) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)Val};
(b) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N—[2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-18-amino-l4aza-4,7,10-oxy-15-oxo-oktadekanoyl)-3-aminopropyl)-Val};
(c) [2—[ [[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina] -Glu(cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl) -Val-Arg-GlyAsp} )-cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl )-Val-Arg-Gly-Asp);
(d) cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys( [2— [ [[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
(e) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
• ·
• · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· (f) C2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
(g) [2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Phe-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
(h) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([ 2— [ [[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
(i) [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal};
(j) cyklo{Arg-Gly-Asp-Lys([ 2—[ [[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Val};
(k) [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp))-cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp};
(l) cyklo{(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl ]hydrazono] metyl ]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly};
(m) cyklo{D-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}i (n) [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg};
(o) cyklo{D-Phe-D-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Asp-Gly-Arg};
(p) cyklo{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys-([2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
(q) cyklo[Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
(r) 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(karboxymetyl)-1cyklododecy 1) acetyl-Glu (cyklo {Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}) -cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
(s) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA)};
(t) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}2(DTPA);
(u) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA-3-aminopropyl)-Val};
€· • · · • · ·· • · · ·
9 9 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · ·· · • · · ·· ···· (v) cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
(w) cyklo{Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3aminopropyl)-Val};
(x) cyklo{Cys(2-aminoetyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5[ karbonyl]-2-pyridinyl] hydrazono] metyl]-benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
(y) cyklo{HomoLys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[ 2-[ [ [5-[karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl ]-benzénsulfónová kyselina]-3aminopropyl)-Val};
(z) cyklo {Orn (d-N-benzylkarbamoy1) -Gly-Asp-D-Tyr (N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
(aa) cyklo(Dap(b-(benzimidazolylacetyl) )-Gly-Asp-D-Tyr(N— [ 2 — [ C [ 5 — [ karbonyl ] -2-pyridinyl ] hydrazono ] metyl ] -benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
(bb) cyklo{Orn(d-N-2-imidazoliny1)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[2-[[[5-[karbonyl ]-2-pyridinyl ]hydrazono ]metyl ]-benzénsulf ónová kyselina])};
(cc) cyklo {Orn (d-N-benzylkarbamoy 1) -Gly-Asp-D-Phe-Lys(N— [2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulf ónová kyselina])};
(dd) cyklo{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[ 2-[ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl ] hydra zono ] metyl ] -benzénsulf ónová kyselina ] -3aminopropyl)-D-Asp-Gly};
(ee) cyklo {Orn (d-N-benzy lkarbamoy 1) -D-Val-D-Tyr (N- [ 2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl] hydra zono] metyl]-benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly); a (ff) cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-D-Val-D-Tyr(N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly};
alebo ich farmaceutický prijatelnú sol.
·· ·· • · (7) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní, opisuje vynález súpravu (kit) obsahujúci dajakú zlúčeninu podlá vynálezu.
(8) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, uvedená súprava podlá vynálezu ďalej obsahuje jeden alebo viac pomocných ligandov a dajakú redukujúcu látku.
(9) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, sú uvedenými pomocnými ligandami tricín a TPPTS.
(10) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedenou redukujúcou látkou cín(II).
(11) V druhom výhodnom rozpracovaní vynález opisuje nový diagnostický alebo terapeutický metalofarmakon obsahujúci: dajaký kov, chelátotvorné činidlo schopné chelátovať daný kov a smerujúcu časť, kde táto smerujúca časť, naviazaná na uvedené chelátotvorné činidlo, je peptid alebo peptidomimetikum a viaže sa na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená. V tejto zlúčenine sú smerujúca časť a chelátotvorné činidlo spojené 0 až 1 spojujúcou skupinou.
(12) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedeným metalofarmakom diagnostický rádiofarmakon, uvedeným kovom je rádioizotop vybraný zo skupiny: 99mTc, 95Tc, i:L1In, 62Cu, 64Cu, 67Ga a 68Ga; smerujúcou časťou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, ανβ3, ανβ5, α5βχ, α4β1, α1^1 a a2^2' a medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
(13) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedenou smerujúcou časťou dajaký cyklický pentapeptid a receptorom je ανβ3.
·· ·· ·· • · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · · • · · ·· ···· ·· (14) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedeným rádioizotopom 99mTc alebo 95Tc, a rádiofarmakon dfalej obsahuje dajaký prvý pomocný ligand a dajaký druhý pomocný ligand schopné tento rádiofarmakon stabilizovať.
(15) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedeným rádioizotopom 99mTc.
(16) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedený rádiofarmakon vybraný zo skupiny zahŕňajúcej:
99m«pc ( tricín) (TPPTS) (cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr (N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-Val));
99mTc(tricín)(TPPMS)(cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly));
99mTc(tricín)(TPPDS)(cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly));
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5-[karbonyl] 2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly));
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido])));
99mTc(tricín)(TPPTS)([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Phe-Glu(cyklo(LysArg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe});
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2—[[[5[karbonyl]-2-pyridinyl)hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] ) )};
99mTc(tricín)(TPPTS)([2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyse1ina]-Glu(cyklo{Lys-ArgGly-Asp-D-Nal})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal});
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N—[[5— [karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-18-amino-14-aza-4,7,10-oxy15-oxo-oktadekoyl)-3-aminopropyl)-Val));
®Tc( tricín)(TPPTS)(N-[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-Glu(O-cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))-O-cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe));
e· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · ·· ·· ·· • · · · • · · • · · • · · ···· ·· 99mTc(tricín)(TPPTS)(N-[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-Glu(O-cyklo(D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp))0-cyklo(D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp));
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-Lys(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido])-D-Val));
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(D-Lys([2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl)hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-DPhe-D-Asp-Gly-Arg});
99mTc(tricín)(TPPTS)([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{D-LysD-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg});
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo{D-Phe-D-Lys([2-[[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Asp-Gly-Arg});
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys(N— [[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido])));
99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2[C[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]))}; a 99mTc(tricín)(1,2,4-triazol)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N[ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-Val)).
(17) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedeným rádioizotopom i:L1In.
(18) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedený rádiofarmakon vybraný zo skupiny zahŕňajúcej:
(DOTA-111^)-Glu (cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe);
cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys (DTPA-i:L1In)); a cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) 2 (DTPA-li:LIn).
(19) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedeným metalofarmakom terapeutický rádiofarmakon, uvedeným kovom je rádioizotop vybraný zo skupiny: 186Re, 188Re, 153Sm, 166Ho, 177Lu, 149Pm, 90Y, 212Bi, 103Pd, 109Pd, 159Gd, 140La, 198Au, • · · • · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · v · · · ·· ·· »· • · · ·· ···· ♦» 199Au, 169Yb, 175Yb, 165Dy, 166Dy, 67Cu, 105Rh, 111Ag, a 192Ir; smerujúcou časťou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, 0^3, ανβ5, a50ľ “4^1» αιΡι a α2β2, a medzi smerujúcou častou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
(20) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedenou smerujúcou častou dajaký cyklický pentapeptid a receptorom je ανβ3.
(21) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedeným rádioizotopom L53Sm.
(22) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je rádiofarmakon vybraný zo skupiny zahŕňajúcej:
cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-153Sm));
cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-153Sm); a cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA(15 3 Sm)-3-aminopropy1)-Va1) (23) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedeným rádioizotopom 177Lu.
(24) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je rádiofarmakon vybraný zo skupiny zahŕňajúcej:
cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-177Lu));
(D0TA-1777Lu)-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-177Lu); a cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA(177Lu)-3-aminopropyl)-Val) (25) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je
QQ uvedeným rádioizotopom Y.
· ·· ·· ·· ·· ···· ···· · · · ··· · · · · · ···· · · · · .
· ·· · ···· ·· · (26) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu ide o rádiofarmakon:
(DOTA-90Y)-Glu(cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))-cyklo{LysArg-Gly-Asp-D-Phe);
(27) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedeným metalofarmakom kontrastná látka pre MRI, uvedeným kovom je ión paramagnetického kovu vybraný zo skupiny: Gd(III), Dy(III), Fe(III) a Mn(II); smerujúcou častou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-l/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, ανβ3, ανβ5, a^lf α4βι, α^β^ a α202' a medzi smerujúcou častou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
(28) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedenou smerujúcou častou dajaký cyklický pentapeptid a receptorom je ανβ3· (29) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedeným iónom kovu Gd(III).
(30) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedenou kontrastnou látkou:
cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA(Gd(III))-3-aminopropyl)Val).
(31) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedeným metalofarmakom kontrastná látka pre rôntgenové žiarenie, uvedený kov je vybraný zo skupiny: Re, Sm, Ho, Lu, Pm, Y, Bi, Pd, Gd, La, Au, Au, Yb, Dy, Cu, Rh, Ag a Ir; smerujúcou častou je dajaký cyklický pentapeptid, uvedeným receptorom je αγβ3, a medzi smerujúcou častou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
·· • · · • · ·· • · · • · · ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · • · · · · • · ···· ·· * (32) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob liečby reumatickej artritídy pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: podanie terapeutického rádiofarmaka podlá vynálezu schopného lokalizácie v novo vytvorenej vaskulatúre organizmu pacienta, a to injekčné alebo infúziou.
(33) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob liečby rakoviny u pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: podanie terapeutického rádiofarmaka podlá vynálezu pacientovi, a to injekčné alebo infúziou.
(34) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob diagnostického zobrazovania angiogenézy v organizmu pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: (1) podanie diagnostického rádiofarmaka podlá vynálezu, kontrastnej látky pre MRI podlá vynálezu alebo kontrastnej látky pre rôntgenové žiarenie podlá vynálezu pacientovi, a to injekčné alebo infúziou; (2) zobrazenie miesta v organizmu pacienta, kde dochádza k vytváraniu nových krvných ciev.
(35) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob diagnostického zobrazovania rakoviny v organizmu pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: (1) podanie diagnostického rádiofarmaka podlá vynálezu pacientovi, a to injekčné alebo infúziou; (2) monitorovanie organizmu pacienta pomocou plenárnej alebo SPECT scintigrafie, žiarenia gama alebo pozitrónovej emisnej tomografie.
(36) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob diagnostického zobrazovania rakoviny v organizmu pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: (1) podanie kontrastnej látky pre MRI podlá vynálezu; a (2) monitorovanie organizmu pacienta s využitím magnetickej rezonancie.
(37) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob diagnostického zobrazovania rakoviny v orga·· ·· ·· • · · • · ··
9 9
99 nizmu pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: (1) podanie kontrastnej látky pre róntgenové žiarenie podía vynálezu; a (2) monitorovanie organizmu pacienta pomocou rôntgenovej počítačovej tomografie.
(38) V tretom výhodnom rozpracovaní vynález opisuje novú zlúčeninu použiteínú v prípravku na kontrastné zobrazovanie ultrazvukom a obsahujúcu: smerujúcu čast a dajakú povrchovo aktívnu látku, kde uvedená smerujúca čast spojená s povrchovo aktívnou látkou je peptid alebo peptidomimetikum viažuce sa na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, a v tejto zlúčenine sú medzi smerujúcou častou a povrchovo aktívnou látkou 0 až 1 spojujúca skupina.
(39) Vo výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedenou smerujúcou častou dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, ανβ3, αγβ5, a4Pľ αιβι a α2^2' a medzi smerujúcou častou a a povrchovo aktívnou látkou je umiestnená spojujúca skupina.
(40) Vo výhodnejšom rozpracovaní vynálezu je uvedeným receptorom integrín ανβ3 a daná zlúčenina je opísaná vzorcom:
(Q)d-L„-Sf kde Q je cyklický pentapeptid nezávisle vybraný zo skupiny:
xL\ /R\ \ r \ r \ r
R’-R2 R3—R4 L-M’ \ / R3—R5
M' • · ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · · · · · • · · · · · · · · · ·· ·· ···· ·· ·
K je dajaká L-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
K' je dajaká D-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
L je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-alanín a D-alanín;
M je kyselina L-asparágová;
M' je kyselina D-asparágová;
r! je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucin, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, 1-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1, 2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín a metionín;
R2 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucin, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1, 2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· ·· • · β · · · • · · · · • · · · · · · • · · · · ·· ···· ·· cysteín, penicilamín, metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4octovú;
O
R je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín a D-metionín;
R4 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-l-naftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l, 2-diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín, D-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
R5 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, kyselinu L-2-aminohexánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-l-naftylalanín, L-lyzín, L-serín, L-ornitín, kyselinu L-l,2-diaminobutánovú, kyselinu L-l,2-diaminopropánovú, L-cysteín, L-penicilamín, L-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1, R2, R3, R4 a R5 substituovaný väzbou k Ln, a ďalej za predpokladu, že keď R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylargi39 nín, dalej za predpokladu, že ked R4 je kyselina 2-aminotiazol4-octová, potom K a K' sú N-metylarginín a dalej za predpokladu, že ked R5 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K' je Nmetylarginín;
d je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
7, 8, 9 a 10;
Sf je povrchovo aktívna látka, ktorá je bud lipidovej povahy alebo zlúčenina opísaná vzorcom:
Έ’-Α10
A9
A9 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej OH a OR27;
A10 je OR27;
R27 je C(=O)Cj_2q alkyl;
E1 je ci-io alkenyl substituovaný 1 až 3 R28;
R28 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, -PO3H-R30, =0, -CO2R29, -C(=O)R29, -C(=O)N(R29)2, -CH2OR29, -OR29, -N(R29)2, 03 až C5 alkyl a C2 až C4 alkenyl;
R29 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, H, až Cg alkyl, fenyl, benzyl a trifluórmetyl;
R30 je väzba k Ln;
Ln je spojujúca skupina opísaná vzorcom: (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g,-(Z)k-(W)h,-(CR8R9)g„-(W)h„-(CR8aR9a)g„, , ·· • · · • · ·· • · ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · • a ·· ·· • e · · • · · • · · ·· ···· • · ·· ·
W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: 0, S, NH, NHC(=0), C(=O)NH, C(=0), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO2, (OCH2CH2)20_200 , (CH2CH2O)20_200, (OCH2CH2CH2)20-200' CH2CH2CH2°)20-200 a (aa)t«;
aa je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená aminokyselina;
Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 3 R10, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 3 R10;
R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, COOH, SO3H, PO3H, až C5 alkyl substituovaný 0 až 3 R10, aryl substituovaný 0 až 3 R10, benzyl substituovaný 0 až 3 R10 a až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 3 R10, NHC(=O)R1:L, C(-0)NHR1X, NHC(=O)NHR11, NHR11, R11 a väzbu k Sf;
R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Sf, COOR11, OH, NHR11, S03H, PO3H, aryl substituovaný 0 až 3 R11, C-^ až C5 alkyl substituovaný 0 až 1 R12, Cjl až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 1 R12 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R11;
R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný 0 až 1 R12, až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované ·· • · · • · ·· ·· ·· • · · · • · ·· ·· • · · · • · · • · · · ·· ·· • · · ·· ···· ·· ·
O až 1 R12, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k S^;
R12 je väzba k S^;
k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
h' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;
g1 je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;
ť je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8, 9 a 10;
a dajakú jej farmaceutický prijatelnú sol.
(41) V inom, ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu, je uvedená zlúčenina opísaná vzorcom:
Q-Ln-Sf kde Q je cyklický pentapeptid nezávisle vybraný zo skupiny:
·· ·· • · · · · • · ·· · • 4 4 · · · • · 4 · · • 4 4 • ·
4
4
4· 4444
K je dajaká L-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l, 2-diaminopropánovú;
K' je dajaká D-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l, 2-diaminopropánovú;
L je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-alanín a D-alanín;
M je kyselina L-asparágová;
M' je kyselina D-asparágová;
R1 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, 1-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín a metionín;
R je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, valín, alanín, leucín, izoleucín, «φ ·· ·· ·· ·· ···· ···· ··· ···· ·· · · φφφφ ··· ·· φφ φφ φφ φφφφ *· · norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1, 2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín, metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4octovú;
R3 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín a D-metionín;
je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-l-naftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2-diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín, D-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
R5 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, kyselinu L-2-aminohexánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-l-naftylalanín, L-lyzín, L-serín, L-ornitín, kyselinu L-l,2-diamino• ·· ·· ·· ·· ··· ···· ··· • ·· · · 9 9 9 ·· ··· · · · · · ··· · · · · · ·· ·· ···· ·· · butánovú, kyselinu L-l,2-diaminopropánovú, L-cysteín, L-penicilamín, L-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1, R2, R3, R4 a R5 substituovaný väzbou k Ln, a dalej za predpokladu, že ked R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylarginín, čfalej za predpokladu, že ked R4 je kyselina 2-aminotiazol4-octová, potom K a K' sú N-metylarginín a dalej za predpokladu, že ked R5 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K' je Nmetylarginín;
S^= je povrchovo aktívna látka, ktorá je bud lipidovej povahy alebo zlúčenina opísaná vzorcom:
A®
A9 je OR27?
A10 je OR27?
R27 je C(=O)C1_25 alkyl?
E1 je C1-4 alkylén substituovaný 1 až 3 R28?
R28 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, -PO3H-R30, =0, -CO2R29, -C(=O)R29, -CH2OR29, -OR29, a Cy až C5 alkyl?
R29 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, H, Cy až C6 alkyl, fenyl a benzyl?
R30 je väzba k Ln?
Ln je spojujúca skupina opísaná vzorcom: (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g,-(Z)k-(W)hi-(CR8R9)g„-(W)hi,-(CR8aR9a)g„, , ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· ···· · · · · · ···· · · · · · ·· ·· ·· ···· ··
W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: 0, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=0), C(=0)0, 0C(=0), NHC(=S)NH, NHC(=0)NH, S02, (OCH2CH2)20_200/ (CH2CH20)20-200· (°CH2CH2CH2^20-200' (CH2CH2CH2°^20-200 a (aa)t.;
aa je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená aminokyselina;
Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 3 R10, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 3 R10;
R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, C-^ až C5 alkyl substituovaný 0 až 3 R10, a Cj až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 3 R10 a väzbu k Sf;
R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Sf, COOR11, OH, NHR11, až C5 alkyl substituovaný 0 až 1 R12 a C-^ až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 1 R12;
R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný 0 až 1 R12, c3-10 cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k s^;
R12 je väzba k S^;
k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, l a 2;
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
·· ·· ·· ·· ·· ···· · · · · ··· ···· · · ··· • · · ·«· · · · · · ···· ··· · · ·· ·· ·· ··· ·· · h' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5?
h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;, g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5?
g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
s* je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
t je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
ť je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
a dajakú jej farmaceutický prijatelnú sol.
(42) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynálezu, je zlúčenina vybraná zo skupiny:
1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)-dodekán-1,12-dion;
1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12((w-amino-PEG3400-a-karbonyl)-cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))dodekán-l,12-dion;
1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12((w-amino-PEG3400-a-karbonyl)-Glu-(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-PheLys))2)-dodekán-1,12-dion.
·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ··· ···· ·· ··· • ·· ··· · · ·· · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· · (43) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový prípravok kontrastnej látky pre ultrazvuk, kde tento prípravok obsahuje:
(a) zlúčeninu zahŕňajúcu: dajaký cyklický pentapeptid viažuci integrín ανβ3, povrchovo aktívnu látku a spojujúcu skupinu medzi uvedeným cyklickým pentapeptidom a povrchovo aktívnou látkou;
(b) nosič prijateíný pre parenterálnu aplikáciu; a (c) echogénny plyn.
(44) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynálezu, uvedený prípravok kontrastnej látky pre ultrazvuk ďalej zahŕňa: kyselinu 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidovú, 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidylcholín a N-(metoxypolyetylénglykol 5000 karbamoyl)-l,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3osfatidyletanolamín.
(45) V inom výhodnom rozpracovaní vynálezu je uvedeným echogénnych plynom C2_5 perfluórkarbón.
(46) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje spôsob diagnostického zobrazovania rakoviny v organizmu pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: (1) podanie prípravku kontrastnej látky pre ultrazvuk podía vynálezu pacientovi, a to buď injekčné alebo infúziou; a (2) monitorovanie organizmu pacienta sonograficky.
(47) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový spôsob diagnostického zobrazovania novo vytvorených ciev v organizmu pacienta, kde tento spôsob zahŕňa: (1) podanie prípravku kontrastnej látky pre ultrazvuk podía vynálezu pacientovi, a to bud injekčné alebo infúziou; a (2) zobrazenie miesta v organizmu pacienta, kde dochádza k vytváraniu nových ciev.
• · ·· ···· ···· ·· • · ·· · · · · · • ·· ··· · · ·· · ···· · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·· (48) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový prípravok terapeutického rádiofarmaka zahŕňajúci:
(a) terapeutický rádiofarmakon podlá vynálezu; a (b) nosič prijatelný pre parenterálnu aplikáciu.
(49) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový prípravok diagnostického rádiofarmaka zahŕňajúci:
(a) dajaký diagnostický rádiofarmakon, kontrastnú látku podlá vynálezu pre MRI alebo kontrastnú látku podlá vynálezu pre rôntgenové žiarenie; a (b) nosič prijatelný pre parenterálnu aplikáciu.
(50) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový prípravok terapeutického rádiofarmaka zahŕňajúci: rádioaktívne značenú smerujúcu časť, kde uvedenou smerujúcou časťou je dajaká zlúčenina Q a rádioaktívnou značkou je dajaký terapeuticky používaný izotop vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: 35s, 32pf 125Ir 132x a 211Ät.
(51) V inom, ešte výhodnejšom, rozpracovaní vynález opisuje nový prípravok terapeutického rádiofarmaka zahŕňajúci: rádioaktívne značenú smerujúcu časť, kde uvedenou smerujúcou časťou je dajaká zlúčenina Q a rádioaktívnou značkou je dajaký terapeuticky používaný izotop, a to izotop 133,I.
Ďalšie výhodné rozpracovania vynálezu opisujú diagnostické súpravy na prípravu rádiofarmak využitelných na diagnostické zobrazovanie rakoviny alebo tvorby nových ciev. Tieto diagnostické súpravy podlá vynálezu zahŕňajú jednu alebo viac ampuliek obsahujúcich sterilné, nepyrogénne zmesi obsahujúce preddefinované množstvo dajakej zlúčeniny podlá vynálezu a volitelne ďalšie zložky ako napríklad jeden alebo dva pomocné ligandy, redukčné činidlá, transferové ligandy, tlmivé roztoky, látky ulahčujúce lyofilizáciu, stabilizátory, solubilizátory a bakteriostatika. Prídavok jednej alebo viacerých volitelných zložiek do prípravku velmi často ulahčuje syntézu ···· · · · · ·· ···· · · · · · • ·· ··· · · ·· · ···· · · · · koncovým užívatelom, ulahčuje výrobu súpravy, predlžuje čas použiteľnosti súpravy alebo zvyšuje stabilitu a predlžuje životnosť daného rádiofarmaka. Pridanie jedného alebo viacerých pomocných ligandov je nezbytné pri diagnostických súpravách zahŕňajúcich činidlá obsahujúce hydrazín alebo hydrazón. Celý prípravok alebo iba jeho čaši; môžu byť v jednej alebo viacerých ampulkách a to nezávisle vo forme sterilného roztoku alebo lyofilizovanej pevnej látky.
Definície
Zlúčeniny opísané vo vynáleze môžu obsahovať asymetrické centrá. Ked to nie je určené inak, do rozsahu vynálezu spadajú všetky chirálne, diastereoizoméŕne a racemické formy uvedených zlúčenín. Zlúčeniny podlá vynálezu môžu rovnako obsahovať vela geometrických izomérov olefínov, dvojných väzieb C=N a podobne, a všetky tieto stabilné izoméry takisto spadajú do rozsahu vynálezu. Je zrejmé, že zlúčeniny podlá vynálezu obsahujú asymetricky substituované uhlíkové atómy a môžu byt teda izolované ako opticky aktívne alebo racemické formy. Príprava opticky aktívnych foriem zlúčenín je v súčasnosti známa a zahŕňa napríklad oddelenie jednotlivých racemických foriem alebo syntézu z opticky aktívneho východiskového materiálu. Je známe, že existujú dva odlišné izoméry (cis a trans) peptidovej väzby. Obidva tieto izoméry môžu byť rovnako prítomné v zlúčeninách podlá vynálezu a všetky tieto stabilné izoméry takisto spadajú do rozsahu vynálezu. D- a L-izoméry jednotlivých aminokyselín sú v tejto prihláške opísané pri použití ustálených trojpísmenových skratiek aminokyselín, ako je naznačené v nasledujúcom príklade: D-Leu alebo L-Leu.
Ked existuje možnosť výskytu viac ako jedného variantu akéhokolvek substituentu alebo akéhokoľvek vzorca, pri každom takom výskyte je definícia tohto substituentu (alebo vzorca) nezávislá od jeho definície v každom inom prípade. Ked je napríklad znázornené, že dajaká skupina je substituovaná 0 až • · ·· • · · · ···· ·· ···· · · ··· • · · · · · · » ·· ·· ·· ···· ··
R52, potom uvedená skupina môže byt voliteíne substituovaná až dvoma R52 a v každom jednotlivom prípade je R52 nezávisle vybraná z definovaného zoznamu všetkých možných R52. Príkladom rovnako môže byt prípad skupiny -N(R53)2, kde každý z dvoch substituentov R53 na dusíku je nezávisle vybraný z definovaC o ného zoznamu všetkých možných R . Kombinácie substituentov a/alebo premenných sú povolené iba vtedy, kečf tieto kombinácie umožňujú vytvorenie stabilnej zlúčeniny. Keď je väzba k dajakému substituentu znázornená tak, že kríži väzbu spojujúcu dva atómy v kruhu, potom tento substituent môže byt naviazaný na akýkoívek atóm tvoriaci tento kruh.
Termínmi farmaceutická látka, farmaceutická zlúčenina sú označované zlúčeniny podía vynálezu, ktoré môžu byt premenené na metalofarmakon podía vynálezu. Tieto reakčné činidlá môžu byt využité priamo pri príprave metalofarmaka podía vynálezu alebo môžu byt súčastou dajakej súpravy podía vynálezu.
Termín väzbová látka označuje metalofarmakon podía vynálezu, ktorý má afinitu k receptoru pre vitronektín a je schopný sa na tento receptor viazat. Väzbové látky podía vynálezu majú vo výhodnom rozpracovaní Ki < 1000 nM.
Termín metalofarmakon používaný v tejto prihláške označuje dajakú farmaceutický prijatelnú zlúčeninu obsahujúcu kov, kde táto zlúčenina je použitelná na diagnostické zobrazovanie, diagnostické zobrazovanie magnetickou nukleárnou rezonanciou, diagnostické kontrastné zobrazovanie alebo diagnostické zobrazovanie rôntgenovým žiarením. Spomínaný kov je nepostrádateíný pre vznik detekovateíného signálu pri diagnostických aplikáciách a je zdrojom cytotoxického žiarenia pri rádioterapeutických aplikáciách. Termínom rádiofarmakon sa rozumie metalofarmakon, v ktorom je uvedeným kovom dajaký rádioizotop.
Termín stabilná zlúčenina alebo stabilná štruktúra používaný v tejto prihláške označuje zlúčeninu, ktorá môže byť ·· ·· · · ·· ·· ···· ···· ··· ···· · · · · · • ·· · · · · · · · · ···· · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· · z reakčnej zmesi vyizolovaná do použiteľného stupňa čistoty a upravená do formy účinnej farmaceutickej látky.
Termín substituovaný používaný v tejto prihláške označuje skutočnosť, že jeden alebo viac atómov vodíka na príslušnom atómu alebo skupine je nahradený dajakou skupinou z predloženého zoznamu, a to za predpokladu, že nie je prekročená maximálna väznost daného atómu alebo skupiny, a že výsledkom takej substitúcie je stabilná zlúčenina. Ked je substituentom keto skupina (tzn. =0), potom sú na príslušnom atómu nahradené dva vodíky.
Termín väzba používaný v tejto prihláške označuje dajakú jednoduchú alebo dvojnú väzbu.
Termín sol používaný v tejto prihláške je definovaný v zmysle CRC Handbook of Chemistry and Physics, 65. vydanie, CRC Press, Boca Raton, Fla, 1984, ako akákoľvek látka schopná vytvárať iné ako vodíkové alebo hydroxylové ióny. Termín farmaceutický prijatelné soli označuje deriváty zlúčenín podľa vynálezu modifikované tak, že vytvárajú kyslé alebo zásadité soli. Príkladom farmaceutický prijateľných solí sú (vyratúvanie nie je limitujúce) soli bázických zvyškov, ako napríklad amínov, a anorganických alebo organických kyselín; anorganické alebo organické soli kyslých zvyškov, ako napríklad karboxylových kyselín; a podobne.
Termín farmaceutický prijateľný používaný v tejto prihláške označuje zlúčeniny, materiály, prípravky a/alebo dávkovacie formy, ktoré sú podľa lekárskeho úsudku vhodné na použitie, pri ktorom dochádza ku kontaktu hore uvedených s ľudskými alebo živočíšnymi tkanivami, a to bez nadmernej toxickosti, podráždenia, alergickej reakcie alebo iných problémov alebo komplikácií a pri zaistení prijateľného pomeru úž itok/ri z iko.
·· ·· ·· ·· ·· · • · · · · ·· · · · · ···· · · ···· • · · ··· · · ·· · · ···· · · ··· ·· ·· ·· ···· ·· ···
Termín farmaceutický prijateľné soli označuje deriváty zlúčenín podľa vynálezu, kde materská zlúčenina je modifikovaná tak, že existuje vo forme kyslej alebo bázickej soli. Príkladom farmaceutický prijateľných solí sú (vyratúvanie nie je limitujúce) soli bázických zvyškov, ako napríklad amínov, a anorganických alebo organických kyselín; anorganické alebo organické soli kyslých zvyškov, ako napríklad karboxylových kyselín; a podobne. Príkladom farmaceutický prijateľných solí sú bežne používané netoxické soli alebo kvartérne amóniové soli materské zlúčeniny a netoxických anorganických alebo organických kyselín. Príkladom takých netoxických solí sú soli odvodené od anorganických kyselín ako napríklad kyseliny chlorovodíkovej, chromovodíkovej, sírovej, amodosírovej, fosforečnej , dusičnej a podobne; a soli pripravené z organických kyselín ako napríklad kyseliny octovej, propánovej, butándiovej, glykolovej, stearovej, mliečnej, vínnej, citrónovej, askorbovej, pamoovej, maleínovej, hydroxymaleínovej, fenyloctovej, glutámovej, benzoovej, salicylovej, sulfanilovej, 2-acetoxybenzoovej, fumarovej, toluénsulfónovej, metánsulfónovej, etándisulfónovej, oxalovej, 2-hydroxyetánsulfónovej a podobne.
Farmaceutický prijateľné soli podľa vynálezu môžu byť z materskej zlúčeniny, ktorá obsahuje dajakú bázickú alebo kyslú časť, syntetizované tradičnými postupmi. Tieto soli môžu byť všeobecne pripravené reakciou uvedených zlúčenín vo forme volných báz alebo kyselín so stechiometrickým množstvom zodpovedajúcej bázy alebo kyseliny vo vode alebo dajakom organickom rozpúšťadle alebo v zmesi vody a organického rozpúšťadla; vo výhodnom rozpracovaní sú využívané nevodné médiá ako napríklad éter, etylacetát, etanol, izopropanol alebo acetonitril. Zoznamy vhodných solí môžu byť nájdené v publikácii Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. vydanie, Mack Publishing Co., Easton, PA 18042, strana 1418, 1985, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
·· ·· ·· ·· ·« · • · · · · · · · ···· • · ·· ·· ···· • · · · · · · ··· · · ······· ··· ·· ·· »· ···· ·· ···
Termín alkyl používaný v tejto prihláške označuje ako rozvetvené, tak nerozvetvené nasýtené alifatické uhlovodíkové skupiny s definovaným počtom uhlíkových atómov. Cx_10 alkyl zahŕňa Cx, C2, C3, C4, C5, C6, C?, Cg, Cg a C10 alkylové skupiny. Príkladom alkylov sú (vyratúvanie nie je limitujúce) metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, s-butyl, t-butyl, n-pentyl a s-pentyl. Termín halogénalkyl používaný v tejto prihláške označuje ako rozvetvené, tak nerozvetvené nasýtené alifatické uhlovodíkové skupiny s definovaným počtom uhlíkových atómov, substituované 1 alebo viacerými halogénmi (napríklad -CyFw, kde v=laž3aw=laž (2v+l)). Príkladom halogénalkylov sú (vyratúvanie nie je limitujúce) trifluórmetyl, trichlórmetyl, pentafluóretyl a pentachlóretyl. Termín alkyloxy používaný v tejto prihláške označuje alkylovú skupinu ako je definovaná hore s označeným počtom atómov uhlíka spojených prostredníctvom kyslíkového mostíka. 0χ_10 alkyloxy zahŕňa Cx, C2, C3, C4, C5, Cg, C7, Cg, Cg a C10 alkyloxy skupiny. Príkladom alkyloxy zlúčenín sú (vyratúvanie nie je limitujúce) metyloxy, etyloxy, n-propyloxy, i-propyloxy, n-butyloxy, s-butyloxy, t-butyloxy, n-pentyloxy a s-pentyloxy skupiny.
Termín cykloalkyl používaný v tejto prihláške označuje nasýtené cyklické skupiny, ako napríklad cyklobutyl, cyklopropyl alebo cyklopentyl. C3_7 cykloalkyl zahŕňa C3, C4, C5,
C6 a C7 cykloalkylové skupiny.
Termín alkenyl používaný v tejto prihláške označuje ako rozvetvené, tak nerozvetvené uhlovodíkové reťazce s jednou alebo viacerými nenasýtenými väzbami medzi dvoma atómami uhlíka v miestach, kde je výskyt takej väzby možný. Príkladom sú napríklad etenyl alebo propenyl. C2_10 alkenyl zahŕňa C2, C3, C4, Cg, Cg, C7, C8, Cg a C10 alkenylové skupiny.
4 4 4 · 4 ·· • · 4 4 · · ·
4 44 · · 4 • · · · · 4 · ·
4 4 4 4 4 4
44 44 4444
4 4
44 4
Termín alkinyl používaný v tejto prihláške označuje ako rozvetvené, tak nerozvetvené uhíovodíkové reťazce s jednou alebo viacerými trojnými väzbami medzi dvoma atómami uhlíka v miestach, kde je výskyt takej väzby možný. Príkladom sú napríklad etinyl alebo propinyl. C2_10 alkinyl zahŕňa C2, C3,
C4, C5, C6, C7, CQ, C9 a C1Q alkinylové skupiny.
Termín karbocyklus alebo karbocyklický zvyšok používaný v tejto prihláške označuje akúkoívek stabilnú 3, 4,
5, 6 alebo 7-člennú monocyklickú alebo bicyklickú zlúčeninu alebo 7, 8, 9, 10, 11, 12 alebo 13-člennú bicyklickú alebo tricyklickú zlúčeninu, pričom každá z týchto zlúčenín môže byt nasýtená, čiastočne nenasýtená alebo aromatickej povahy. Príkladom takých karbocyklov sú (vyratúvanie nie je limitujúce) cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, adamantyl, cyklooktyl, [3.3.0]bicyklooktán, [4.3.0]bicyklononán, [4.4.0]bicyklodekán, [2.2.0]bicyklooktán, fluórenyl, fenyl, naftyl, indanyl, adamantyl a tetrahydrogennaftyl.
Termín alkylaryl používaný v tejto prihláške označuje akúkoívek arylovú skupinu nesúcu alkylovú skupinu s dĺžkou reťazca 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 alebo 10 uhlíkových atómov. Termín arylalkyl používaný v tejto prihláške označuje akúkoľvek alkylovú skupinu s dĺžkou reťazca 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7,
8, 9 alebo 10 uhlíkových atómov nesúcu arylovú skupinu. Termín arylalkylaryl používaný v tejto prihláške označuje akúkoívek arylovú skupinu nesúcu alkylovú skupinu s dĺžkou reťazca 1 až 10 uhlíkových atómov nesúcu arylovú skupinu. Termín heterocykloalkyl používaný v tejto prihláške označuje akúkoívek alkylovú skupinu s dĺžkou reťazca 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 alebo 10 uhlíkových atómov nesúcu dajaký heterocyklus.
Termín heterocyklus alebo heterocyklický systém používaný v tejto prihláške označuje akýkoívek stabilný 5, alebo 7-členný monocyklický alebo bicyklický alebo 7, 8,
9, 10-členný bicyklický heterocyklický kruh, pričom každá ·· ·· • · · · · · · • · · · a • · * · · · · · ·· · • · · · · · ·· ·» ·· ·· ···· ·· • ·· z týchto zlúčenín môže byť nasýtená, čiastočne nenasýtená alebo nenasýtená (aromatickej povahy) a je tvorená uhlíkovými atómami a 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómami nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej N, NH, O a S. Tento termín rovnako označuje akúkoľvek bicyklickú skupinu, v ktorej je akýkoľvek z hore uvedených heterocyklických kruhov spojený s benzénovým jadrom. Heteroatómy dusíka a síry môžu byť oxidované. Heterocyklický kruh môže byt k ďalšej skupine pripojený akýmkoľvek heteroatómom alebo atómom uhlíka za predpokladu, že vznikne stabilná štruktúra. Atóm dusíka v heterocykle môže byť vo forme kvartérnej soli. Ked je celkový počet atómov s a O v heterocykle vyšší ako 1, potom vo výhodnom rozpracovaní tieto atómy spolu nesusedia. Vo výhodnom rozpracovaní nie je celkový počet atómov S a O v heterocykle vyšší ako 1. Termín aromatický heterocyklický systém alebo heteroaryl používaný v tejto prihláške označuje akýkoľvek stabilní 5, 6 alebo 7členný monocyklický alebo bicyklický alebo 7, 8, 9, 10-členný bicyklický heterocyklický aromatický kruh tvorený uhlíkovými atómami a 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómami nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej N, NH, O a S. Je potrebné zdôrazniť, že celkový počet atómov síry alebo kyslíka nie je v aromatickom heterocykle vyšší ako 1.
Príkladom heterocyklov sú (vyratúvanie nie je limitujúce): akridinyl, azocinyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiof uranyl, benzotiofenyl, benzoxazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzizoxazolyl, benzizotiazolyl, benzimidazolinyl, karbazolyl, 4aH-karbazolyl, karbolinyl, chromanyl, chromenyl, cinolinyl, dekahydrochinolinyl, 2H,6H1,5,2-ditiazinyl, dihydrofuro[2,3-b]tetrahydrofurán, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, lH-indazolyl, indolenyl, indolinyl, indolizinyl, indolyl, 3H-indolyl, izobenzofuranyl, izochromanyl, izoindazolyl, izoindolinyl, izoindolyl, izochinolinyl, izotiazolyl, izoxazolyl, metyléndioxyfenyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydroizochinolinyl, oxadiazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxa·· ·9 • · · · · · · • · · · · • · · ··· · · ·· · ···· ··· · · ·· ·· ·· ···· ·· • · • t· diazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, oxazolidinyl, oxazolyl, oxazolidinyl, pyrimidinyl, fenantridinyl, fenantrolinyl, fenazinyl, fenotiazinyl, fenoxytiinyl, fenoxazinyl, ftalazinyl, piperazinyl, piperidinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, piperonyl, pteridinyl, purinyl, pyranyl, pyrazinyl, pyrazolidinyl, pyrazolinyl» pyrazolyl, pyridazinyl, pyridooxazol, pyridoimidazol, pyridotiazol, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrolidinyl, pyrolinyl, 2H-pyrolyl, pyrolyl, chinazolinyl, chinolinyl, 4Hchinolizinyl, chinoxalinyl, chinuklidinyl, tetrahydrofurány1, tertahydroizochinolinyl, tertahydrochinolinyl, tetrazolyl, 6H-l,2,5-tiadiazinyl, 1,2,3-tiadiazolyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 1,2,5-tiadiazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, tiantrenyl, tiazolyl, tienyl, tienotiazolyl, tienooxazolyl, tienoimidazolyl, tiofenyl, triazinyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,5triazolyl, 1,3,4-triazolyl a xantenyl. Vo výhodnom rozpracovaní sú používané (vyratúvaniue nie je limitujúce): pyridinyl, furanyl, tienyl, pyrolyl, pyrazolyl, pyrolidinyl, imidazolyl, indolyl, benzimidazolyl, ΙΗ-indazolyl, oxazolidinyl, benzotriazolyl, benzizoxazolyl, oxindolyl, benzoxazolinyl a izationyl. Medzi tieto heterocykly rovnako patria kondenzované kruhy a spiro-zlúčeniny obsahujúce napríklad niektorý z hore uvedených heterocyklov.
Termín polyalkylénglykol označuje polyetylénglykol, polypropylénglykol alebo polybutylénglykol s molekulovou hmotnosťou nižšou ako približne 5000 a zakončený buď hydroxylovou skupinou alebo alkyléterom.
Termín karbohydrát označuje polyhydroxy aldehyd, ketón, alkohol alebo kyselinu, alebo ich deriváty, vrátane polymérov týchto zlúčenín, kde je väzba medzi monomérmi typu acetalu.
Termín cyklodextrxn označuje dajaký cyklický oligosacharid. Príkladom cyklodextrínov sú (vyratúvanie nie je limitujúce) α-cyklodextrin, hydroxyetyl-a-cyklodextrín, hydroxypropyl-a-cyklodextrín, β-cyklodextrín, hydroxypropyl57 ·· ·· ·· ·· ·· · • ••e ···· ···· • · ·· · · ···· ······· · · · · · ······· 9 9 9 ·· ·· 9999 ·· ··· β-cyklodextrín, karboxymetyl^-cyklodextrín, dihydroxypropylβ-cyklodextrín, hydroxyetyl^-cyklodextrín, 2,6-di-0-metylβ-cyklodextrín, sulfátovaný β-cyklodextrín, τ-cyklodextrín, hydroxypropyl-T-cyklodextrín, dihydroxypropyl-T-cyklodextrín, hydroxyetyl-T-cyklodextrín a sulfátovaný T-cyklodextrín.
Termín polykarboxyalkyl používaný v tejto prihláške označuje alkylovú skupinu s počtom uhlíkových atómov v rozmedzí 2 až 100 s množstvom karboxylových substituentov. Termín polyazaalkyl používaný v tejto prihláške označuje rozvetvenú alebo nerozvetvenú alkylovú skupinu s počtom uhlíkových atómov v rozmedzí 2 až 100, kde tento uhľovodíkový reťazec je prerušený alebo substituovaný väčším počtom aminoskupín.
Termín redukujúca látka, redukčné činidlo označuje dajakú zlúčeninu reagujúcu s rádionuklidom, ktorý je zvyčajne získavaný vo forme relatívne nereaktívnej zlúčeniny vo vysokom oxidačnom stave, tak, že znižuje oxidačný stav daného rádionuklidu predávaním elektrónu (elektrónov), čím ho robí viac reaktívny. Príkladom redukčných činidiel použiteľných pri príprave rádiofarmak alebo diagnostických súprav využiteľných pri príprave hore uvedených rádiofarmak sú (vyratúvanie nie je limitujúce) chlorid cínatý, fluorid cínatý, kyselina formamidínsulfínová, kyselina askorbová, cysteín, fosfíny a meďné alebo železnaté soli. Ďalšie redukčné činidlá sú opísané v prihláške PCT 94/22496, Brodack a ďalší, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Termín transferový ligand označuje dajaký ligand vytvárajúci s iónom kovu prechodný komplex, ktorý je natoľko stabilný, aby bránil priebehu nežiadúcich vedľajších reakcií, ale ktorý je natoľko labilný, aby mohol byť premenený na metalofarmakon. Vznik tohto prechodného komplexu je uprednostňovaný kinetický, zatiaľ čo vznik metalofarmaka je uprednostňovaný termodynamicky. Príkladom transferových ligandov použiteľných ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· • · ·· · · · · · • ·· · · · · · · · · ···· ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· · pri príprave rádiofarmak alebo diagnostických súprav využiteíných pri príprave hore uvedených rádiofarmak sú (vyratúvanie nie je limitujúce) glukonát, glukoheptonát, manitol, glukarát, kyselina N,N,N',N'-etyléndiamíntetraoctová, pyrofosfát a mety léndif osf onát . Všeobecne je možné povedať, že transferové ligandy obsahujú ako donorové atómy 0 alebo N.
Termín donorový atóm označuje atóm, ktorý je chemickou väzbou priamo pripojený k atómu kovu.
Termín pomocné ligandy alebo ko-ligandy označuje ligandy, ktoré sú do rádiofarmaka začlenené počas syntézy. Ich úlohou je, spolu s chelátotvorným činidlom alebo jednotkou viažucou kov, vyplniť koordinačnú sféru daného rádionuklidu.
Pri rádiofarmakách s binárnym systémom ligandov obsahuje koordinačná sféra daného rádionuklidu jedno alebo viac chelátotvorných činidiel alebo jednotiek viažucich kov (z jednej alebo viacerých zlúčenín podía vynálezu) a jeden alebo viac pomocných ligandov a to za predpokladu, že celkovo sú prítomné dva typy ligandov, chelátotvorných činidiel a jednotiek viažucich kov. Napríklad rádiofarmakon obsahujúci jedno chelátotvorné činidlo alebo jednotku viažucu kov z jednej zlúčeniny podía vynálezu a dva rovnaké pomocné ligandy alebo ko-ligandy je považovaný za rádiofarmakon s binárnym systémom ligandov. Rovnako tak rádiofarmakon obsahujúci dve chelátotvorné činidlá alebo dve jednotky viažuce kov z jednej alebo dvoch zlúčenín podía vynálezu je považovaný za rádiofarmakon s binárnym systémom ligandov. Pri rádiofarmakách s ternárnym systémom ligandov obsahuje koordinačná sféra daného rádionuklidu jedno alebo viac chelátotvorných činidiel alebo jednotiek viažucich kov (z jednej alebo viacerých zlúčenín podía vynálezu) a jeden alebo viac pomocných ligandov rozdielnych typov a to za predpokladu, že celkovo sú prítomné tri typy ligandov, chelátotvorných činidiel a jednotiek viažucich kov. Napríklad rádiofarmakon obsahujúci jedno chelatátvorné činidlo alebo jednotku viažucu kov z jednej zlúčeniny podía vynálezu a dva odlišné ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ··· «··· ·· · · · • ·· · · · · · ·· · ···· · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· · pomocné ligandy alebo ko-ligandy je považovaný za rádiofarmakon s ternárnym systémom ligandov.
Pomocné ligandy alebo ko-ligandy použiteľné na prípravu rádiofarmak alebo diagnostických súprav využiteľných pri príprave takých rádiofarmak obsahujú jeden alebo viac donorových atómov kyslíka, dusíka, uhlíka, síry, fosforu, arzénu, selénu a telúru. Ligandom môže byt transferový ligand použitý pri syntéze rádiofarmaka a tento môže rovnako slúžiť ako pomocný ligand alebo ko-ligand v inom metalofarmaku. Ked je daný ligand označovaný ako transferový ligand alebo pomocný ligand (ko-ligand) závisí od toho, či tento ligand zostane v koordinačnej sfére rádionuklidu v danom rádiofarmaku. To je determinované koordinačnou chémiou daného rádionuklidu a chelátotvorného činidla alebo jednotky viažucej kov danej zlúčeniny alebo zlúčenín.
Termín chelátotvorné činidlo, chelátor kovov alebo jednotka viažuca kov označuje časť alebo skupinu na zlúčenine, kde táto časť alebo skupina viaže ión kovu, a to prostredníctvom chemickej väzby jedného alebo viacerých donorových atómov.
Termín väzbové miesto označuje miesto in vitro alebo in vivo, ktoré viaže dajakú biologicky aktívnu molekulu.
Termín diagnostická súprava alebo súprava označuje sadu zložiek (označovanú ako farmaceutický prípravok) v jednej alebo viacerých ampulkách, kde tieto zložky sú koncovým užívateľom v klinickom alebo lekárenskom zariadení použité na prípravu diagnostického rádiofarmaka. Súprava obsahuje všetky zložky nezbytné na syntézu a použitie diagnostického rádiofarmaka s výnimkou zložiek, ktoré sú koncovému užívateľovi bežne dostupné. Takými zložkami sú napríklad voda alebo fyziologický roztok pre injekcie, roztok rádionuklidu, zariadenie slúžiace na zahriatie súpravy počas syntézy rádiofarmaka, ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· ·· ··· ” ······· ·· ·· ·· ·· ···· ·· « a keď je to žiadúce zariadenie nezbytné na aplikáciu rádiofarmaka do organizmu pacienta, ako napríklad striekačky, a tieniaci materiál a diagnostické zariadenie.
Terapeutické rádiofarmaka, prípravky s kontrastnou látkou pre rôntgenové žiarenie, prípravky s kontrastnou látkou pre ultrazvuk a metalofarmaka s kontrastnou látkou pre magnetickú rezonanciu sú koncovému užívateíovi dodávané v konečnej podobe zvyčajne ako prípravok v jednej ampulke, a to vo forme lyofilizovanej pevnej látky alebo vodného roztoku. V závislosti od dodávanej forme potom koncový užívate! rozpustí lyofilizát vo vode alebo fyziologickom roztoku a odoberie príslušnú dávku na aplikáciu pacientovi alebo jednoducho odoberie príslušnú dávku z vodného roztoku.
Termín látka uíahčujúca lyofilizáciu označuje dajakú zložku, ktorá má príhodné fyzikálne vlastnosti pre proces lyofilizácie, ako je napríklad teplota skleného prechodu. Táto zložka je pridaná k prípravku za účelom zlepšenia fyzikálnych vlastností zmesi všetkých zložiek tohto prípravku pri lyofilizácii.
Termín stabilizátor označuje dajakú zložku pridávanú do metalofarmaka alebo diagnostickej súpravy za účelom stabilizácie daného metalofarmaka alebo za účelom predĺženia životnosti diagnostickej súpravy. Ako stabilizátory môžu slúžiť antioxidanty, redukčné činidlá alebo vychytávače radikálov, a tieto stabilizátory môžu vylepšovať stabilitu napríklad tým, že prednostne reagujú s látkami, ktoré degradujú dajaké iné zložky súpravy alebo metálofarmakonu.
Termín solubilizátor” označuje dajakú zložku, ktorá zlepšuje rozpustnosť jedného alebo viacerých komponentov v médie používanom na formulácii prípravku.
·· ·· ·· ·· ·· ·
• • • · • · • · • · • ·
• • ·· • · • • ·
•
• • • · • · • • ·
·» ·· ·· ···· ·· ··
Termín bakteriostatikum označuje dajakú zložku, ktorá inhibuje rast baktérií v prípravku, a to bučí počas skladovania pred vlastným použitím prípravku alebo potom, čo je diagnostická súprava použitá na syntézu rádiofarmaka.
Termín aminokyselina používaný v tejto prihláške označuje dajakú organickú zlúčeninu nesúcu ako bázickú aminoskupinu, tak kyslú karboxylovú skupinu. Tento termín zahŕňa prirodzene sa vyskytujúce aminokyseliny (napríklad L-aminokyseliny), modifikované alebo neobvyklé aminokyseliny (napríklad D-aminokyseliny), a rovnako aminokyseliny, ktoré sa prirodzene vyskytujú vo volnej forme alebo vo forme konjugátov, ale zvyčajne nie sú súčasťou proteínov. Tento termín rovnako zahŕňa modifikované alebo neobvyklé aminokyseliny, ako napríklad aminokyseliny opísané v publikácii Roberts a Vellaccio, The Peptides, 5:342 až 429, 1983, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu. Príkladom prirodzene sa vyskytujúcich aminokyselín sú (vyratúvanie nie je limitujúce) alanín, arginín, asparagín, kyselina asparágová, cysteín, kyselina glutámová, glutamín, glycín, histidín, izoleucín, leucín, lyzín, metionín, fenylalanín, prolín, serín, treonín, tryptofán, tyrozín a valín. Príkladom prirodzene sa vyskytujúcich neproteínových aminokyselín sú (vyratúvanie nie je limitujúce) kyselina arginínjantárová, citrulín, kyselina cysteínsulfínová, 3,4-dihydroxyfenylalanín, homocysteín, homoserín, ornitín, 3-monojódtyrozín, 3,5-dijódtyrozín, 3,5,5'trijódtyrozín a 3,3',5,5'-tetrajódtyrozín. Príkladom modifikovaných alebo neobvyklých aminokyselín, ktoré môžu byť použité pri praktickom využití vynálezu, sú (vyratúvanie nie je limitujúce) D-aminokyseliny, hydroxylyzín, 4-hydroxyprolín, aminokyseliny chránené skupinou N-Cbz, kyselina 2,4-diaminobutánová, homoarginín, norleucín, kyselina N-metylaminobutánová, naftylalanín, fenylglycín, β-fenylprolín, terc-leucín, 4-aminocyklohexylalanín, N-metyl-norleucín, 3,4-dehydroprolín, N,N-dimetylaminoglycín, N-metylaminoglycín, kyselina 4-aminopiperidín-4karboxylová, kyselina 6-aminokaprónová, kyselina trans-4-(amino• · · · • · · • · · · • · · ·· ···· ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· ·· • · • · • · · • · ·· metyl)-cyklohexánkarboxylová, kyseliny 2-, 3-a 4-(aminometyl)benzoové, kyselina l-aminocyklopropánkarboxylová a kyselina 2-benzyl-5-aminopentánová.
Termín ”peptiď' používaný v tejto prihláške označuje dajakú lineárnu zlúčeninu zloženú z dvoch alebo viacerých aminokyselín (tak ako sú definované v tejto prihláške) spojených peptidovou väzbou. Termín peptid používaný v tejto prihláške označuje časť, ktorá má molekulovú hmotnosť nižšiu ako 10000 Da výhodnejšie potom nižšiu ako 5000 Da a ešte výhodnejšie nižšiu ako 2500 Da. Termín peptid rovnako označuje zlúčeniny obsahujúce ako peptidovú, tak nepeptidovú časť, ako napríklad pseudopeptid alebo peptidomimetikum alebo iné zložky neaminokyselinovej povahy. Zlúčeniny obsahujúce ako peptidovú tak nepeptidovú časť môžu byť rovnako označované ako peptidové analógy .
Termín pseudopeptid alebo peptidomimetikum označuje dajakú zlúčeninu, ktorá mimikuje štruktúru dajakého aminokyselinového zvyšku alebo peptidu napríklad tým, že namiesto peptidovej väzby sú peptidomimetikum a dajaká aminokyselina spojené iným spôsobom (pseudopeptidovou väzbou), a/alebo že je použitý neaminokyselinový substituent a/alebo dajaká modifikovaná aminokyselina. Termín pseudopeptidová časť alebo pseudopeptidový zvyšok označuje časť pseudopeptidu alebo peptidomimetika nachádzajúceho sa v dajakom peptide.
Termín peptidová väzba označuje kovalentnú amidovú väzbu vytvorenú medzi karboxylovou skupinou jednej aminokyseliny a aminoskupinou druhé aminokyseliny, pričom pri vytvorení tejto väzby je uvolnená molekula vody.
Termín peptidová väzba označuje kovalentnú amidovú väzbu vytvorenú medzi karboxylovou skupinou jednej aminokyseliny a aminoskupinou druhej aminokyseliny, pričom pri vytvorení tejto väzby je uvolnená molekula vody.
• · ·· ·· • · · · • · ·· ·· ·· • · · • · ·· ···· ··
Termín peptidové väzby označuje izostéry peptidovej väzby, ktoré môžu byť použité namiesto klasickej amidovej väzby. Tieto substituované väzby alebo väzby ekvivalentné väzbe amidovej sú tvorené kombináciou atómov, ktoré zvyčajne nenachádzame v peptidoch alebo proteínoch, a ktoré napodobujú priestorové usporiadanie amidovej väzby, a ktoré by mali stabilizovať molekulu voči enzýmatickej degradácii.
V prihláške sú použité nasledujúce skratky:
Acm acetamidometyl b-Ala, beta-Ala alebo bAla kyselina 3-aminopropánová
ATA kyselina 2-aminotiazol-5-octová
Boe
CBZ, Cbz alebo Z
Cit
Dap
DCC
DIEA
DMAP
EOE
HBTU
Hynie
NMeArg alebo MeArg
NMeAsp
NMM
OcHex
OBzl
OSu alebo skupina 2-aminotiazol-5-acetyl t-butyloxykarbonyl karbobenzyloxy citrulín kyselina 2,3-diaminopropánová d i cyklohexylkarbod i imid diizopropyletylamín 4-dimetylaminopyridín etoxyetyl
2-(lH-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3tetrametylurónim hexafluórfosfát skupina boc-hydrazinónikotinylová alebo kyselina 2-(((5-(karbonyl)2-pyridinyl)hydrazono)metylJbenzénsulfónová a-N-metylarginín kyselina a-N-metyl asparágová
N-metylmorfolín
O-cyklohexyl
O-benzoyl
O-sukcínimidyl
• t »· ·· ·· ·· ·
• • • • • • • · • • ··
• • ·· • • • • •
• · • • • • • • •
·· ·· ·· ···· ·· ··
TBTU 2-(ΙΗ-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3tetrametylurónim tetrafluórborát
THF tetrahydrofuranyl
THP tetrahydropyranyl
Tos tozyl
Tr trityl
V prihláške sú použité nasledujúce tradičné trojpísmenové skratky aminokyselín; tradičné jednopísmenové skratky aminokyselín nie sú v tejto prihláške používané.
Ala alanín
Arg arginín
Asn asparagín
Asp kyselina asparágová
Cys cysteín
Glu kyselina glutámová
Gin glutamín
Gly glycín
His histidín
Ile izoleucín
Leu leucín
Lys lyzín
Met metionín
Nie norleucín
Orn ornitín
Phe fenylalanín
Phg fenylglycín
Pro prolín
Sar sarkozín
Ser serín
Thr treonín
Trp tryptofán
Tyr tyrozín
Val valín
·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· · · ···· · · ··· • · · ··· · · ·· · • · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ··
Farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu obsahujú smerujúcu časť, ktorá sa viaže na dajaký receptor, ktorého expresia je v novo vytvorenej vaskulatúre nádoru zvýšená. Smerujúce časti používané na smerovanie na receptory VEGF, Flk-1/KRD, Flt-1 a neuropilin-1, zahŕňajú peptidy alebo peptidomimetika, ktoré sa k týmto receptorom viažu s vysokou afinitou. Boli napríklad syntetizované peptidy zahŕňajúce oblasť 23 aminokyselín z C-koncovej domény VEGF, ktoré kompetitívne inhibujú väzbu VEGF na receptor pre VEGF (Soker a ďalší, J. Biol. Chem., 272:31582 až 31588, 1997). Lineárne peptidy s dĺžkou 11 až 23 aminokyselín, ktoré sa viažu na receptor pre bázický FGF (bFGFR), sú opísané v publikácii Cosic a ďalší, Mol. and Celí. Biochem., 130:1 až 9, 1994. Uprednostňovaným lineárnym peptidovým antagonistom bFGFR je peptid s dĺžkou 16 aminokyselín Met-Trp-Tyr-Arg-Pro-Asp-Leu-Asp-Glu-Arg-Lys-Gln-Gln-Lys-Arg-Glu Gho a ďalší (Cancer Research, 57:3733 až 3740, 1997) opisujú identifikáciu krátkych peptidov, ktoré sa s vysokou afinitou viažu na receptor pre angiogenín exprimovaný na povrchu endoteliálnych buniek. Výhodne používaným peptidom je Ala-Gln-LeuAla-Gly-Glu-Cys-Arg-Glu-Asn-Val-Cys-Met-Gly-Ile-Glu-Gly-Arg, v ktorom dva cysteínové zvyšky vytvárajú intramolekulárnu disulfidovú väzbu. Yayon a ďalší (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:10643 až 10647, 1993) opisujú ďalšie lineárne peptidové antagonisty FGFR, identifikované pri využití fágovej peptidovej knižnice s náhodilou sekvenciou prezentovaných peptidov (random phage-displayed peptide library). Väzba bFGF na receptor je s výhodou inhibovaná dvoma lineárnymi oktapeptidmi - Ala-Pro-Ser-Gly-His-Tyr-Lys-Gly a Lys-Arg-Thr-Gly-Gln-TyrLys-Leu.
Smerujúce časti používané na smerovanie na integríny exprimované v novo vytvorenej vaskulatúre nádorov obsahujú peptidy alebo peptidomimetika, ktoré viažu ανβ3, ανβ5, <χ5β1# α4β1, α1^1 a α2^2* pierschbacher a Rouslahti (J. Biol. Chem., 262:17294 až 17298, 1987) opisujú peptidy, ktoré selektívne viažu α5β1 a ανβ3. Prihláška US 5536814 opisuje peptidy, ktoré • · ·· ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· • · « · • · · ·· ···· • · ·· s vysokou afinitou viažu integrín α^β^. Burgess a Lim (J. Med. Chem., 39:4520 až 4526, 1996) popisujú syntézu troch peptidov, ktoré sa s vysokou afinitou viažu na ανβ3: cyklo[Arg-Gly-AspArg-Gly-Asp] , cyklo[Arg-Gly-Asp-Arg-Gly-D-Asp] a lineárny peptid Arg-Gly-Asp-Arg-Gly-Asp. Prihlášky US 5770565 a US 5776591 opisujú peptidy, ktoré sa s vysokou afinitou viažu na ανβ3· Prihlášky US 5767071 a US 5780426 opisujú cyklické peptidy, ktoré majú aminokyselinový zvyšok Arg umiestnený pomimo cyklus, a ktoré sa s vysokou afinitou viažu na integrín ανβ3. Srivatsa a ďalší (Cardiovascular Res., 36:408 až 428, 1997) opisujú cyklického peptidového antagonistu integrínu ανβ3 - cyklo[Ala-Arg-Gly-Asp-Mamb]. Tran a ďalší (Bioorg. Med. Chem. Lett., 7:997 až 1002, 1997) opisujú cyklický peptid cyklo[Arg-Gly-Asp-Val-Gly-Ser-BTD-Ser-Gly-Val-Ala], ktorý sa s vysokou afinitou viaže na ανβ3· Arap a ďalší (Science, 279:377 až 380, 1998) opisujú cyklické peptidy cyklo[CysAsp-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys] a cyklo[Cys-Asn-Cys-GlyAsp-Cys], ktoré sa viažu na ανβ5 a αγβ3. Corbett a ďalší (Bioorg. Med. Chem. Lett., 7:1371 až 1376, 1997) opisujú sériu peptidomimetik selektívne viažucich ανβ3· Haubner a ďalší (Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 36:1374 až 1389, 1997) opisujú peptidové a peptidomimetické antagonisty integrínu ανβ3 získané z peptidových knižníc.
Smerujúce časti podľa vynálezu majú vo výhodnom rozpracovaní väzbovú afinitu k integrínu ανβ3 nižšiu ako 1000 nM.
Vo výhodnejšom rozpracovaní vynálezu majú smerujúce časti podľa vynálezu väzbovú afinitu k integrínu ανβ3 nižšiu ako 100 nM. V ešte výhodnejšom rozpracovaní vynálezu majú smerujúce časti podľa vynálezu väzbovú afinitu k integrínu cl^3 nižšiu ako 10 nM.
Kontrastné látky podľa vynálezu pre ultrazvuk zahŕňajú množstvo rôznorodých smerujúcich častí rozpoznávajúcich novo vytvorenú vaskulatúru nádorov a pripojených k alebo začlenených do mikrobubliny biokompatibiIného plynu, kvapalného nosiča a mikročastice dajakej povrchovo aktívnej látky, a
·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ···· ďalej voliteľne obsahujú spojujúcu časť (Ln) medzi smerujúcimi časťami a mikrobublinkami. V tomto kontexte termín kvapalný nosič označuje vodný roztok a termín povrchovo aktívna látka označuje akýkoľvek amfifilný materiál, ktorý znižuje napätie na fázovom rozhraní. Zoznam povrchovo aktívnych látok vhodných na prípravu mikročastíc povrchovo aktívnych látok je opísaný v prihláške EP0727225A2, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu. Termín mikročastice povrchovo aktívnej látky označuje nanočastice, lipozómy, vezikuly a podobne. Biokompatibilným plynom môže byt vzduch alebo dajaký fluórkarbón, ako napríklad C3-C5 perfluóralkán, napríklad perfluórpropán, perfluórbután alebo perfluórpentán. Tento biokompatibilný plyn je príčinou odlišnej echogenickosti a preto pozorovaného kontrastu pri ultrazvukovej diagnostike. Uvedený plyn je zapuzdrený alebo uzatvorený v mikročastici, ku ktorej je pripojená smerujúca časť a to buď priamo, alebo voliteľne spojujúcou skupinou. Spomínané pripojenie môže byť realizované kovalentnou väzbou, iónovou väzbou alebo van der Waalsovými silami. Špecifickými príkladmi takých kontrastných látok sú perfluórkarbóny ohraničené vrstvou lipidov s pripojenými peptidmi alebo peptidomimetikmi viažucimi receptory exprimované na novo vytvorenej vaskulatúre nádorov.
Skratka Sf používaná v tejto prihláške označuje dajakú povrchovo aktívnu látku, ktorá je buď lipidom alebo zlúčeninou opísanou vzorcom A1-E-A2, definovanou v predchádzajúcom texte. Táto povrchovo aktívna látka je použitá za účelom vytvorenia vezikuly (napríklad mikročastice), ktorá môže obsahovať echogénny plyn. Prípravky obsahujúce kontrastné látky podľa vynálezu pre ultrazvuk uzatvoria (zapuzdria) po pretrepaní, premiešaní (a podobne) vo vezikule echogénny plyn takým spôsobom, že výsledný produkt môže byť využitý ako kontrastná látka pre ultrazvuk.
• · ·· • · • · • · • · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · · ·· ····
Termín vezikula označuje gulovitú entitu, ktorá je charakterizovaná prázdnym vnútorným priestorom. Vo výhodnom rozpracovaní sú vezikuly pripravené pri využití lipidov, vrátane najrôznejších lipidov opísaných v tejto prihláške. V každej jednotlivej vezikule môžu byt lipidy vo forme jednej vrstvy (monovrstvy) alebo dvojvrstvy a také lipidové mono- alebo dvojvrstvy môže byt vo vezikule jedna alebo viac. V prípade, že je vo vezikule viac ako jedna mono- alebo dvojvrstva, sú tieto zvyčajne kocentrické. Termín lipidové vezikuly používaný v tejto prihláške zahŕňa entity všeobecne označované ako lipozómy, micely, bubliny, mikrobublinky, mikročastice a podobne. Lipidy môžu byt teda využité na vytvorenie unilamelárnej vezikuly (ohraničenej jednou monovrstvou alebo dvojvrstvou), oligolamelárnej vezikuly (ohraničenej približne dvoma alebo približne tromi monovrstvami alebo dvojvrstvami) alebo multilamelárnej vezikuly (ohraničenej viac ako približne tromi monovrstvami alebo dvojvrstvami). Prázdny vnútorný priestor vezikul môže byt vyplnený dajakou kvapalinou, vrátane napríklad vody, plynom, prekurzorom plynu a/alebo pevným alebo rozpusteným materiálom, vrátane napríklad (ked je to žiadúce) dajakou biologicky aktívnou látkou.
Termín vezikulárna kompozícia označuje dajakú kompozíciu, ktorá je pripravená pri využití lipidov, a ktorá obsahuje vezikuly.
Termín vezikulárny prípravok označuje kompozíciu, ktorá obsahuje vezikuly a dajakú biologicky aktívnu látku.
Termín mikročastice používaný v tejto prihláške označuje vo výhodnom rozpracovaní častice s veíkostou najviac 10 mikrometrov. Lipozóm, ako je definovaný v tejto prihláške, môže obsahovať jednu lipidovú vrstvu (lipidová monovrstva), dve lipidové vrstvy (lipidová dvojvrstva) alebo viac ako dve lipidové vrstvy (lipidová multivrstva). Termín lipozómy zvyčajne označuje sférický klaster alebo agregát amfifilných zlú• · • · • · · • · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· · • · · ·· ···· čenín, vrátane zlúčenín lipidovéj povahy, zvyčajne vo forme jednej alebo viacerých kocentrických vrstiev, napríklad dvojvrstiev. Tieto entity môžu byť rovnako označované ako lipidové vezikuly.
Termín bubliny používaný v tejto prihláške označuje vezikuly, ktoré sú zvyčajne charakterizované existenciou jednej alebo viacerých membrán alebo stien obklopujúcich vnútorný prázdny priestor, ktorý je vyplnený dajakým plynom alebo prekurzorom tohto plynu. Príkladom bublín sú lipozómy, micely a podobne.
Termín lipid označuje dajakú syntetickú alebo prirodzene sa vyskytujúcu amfifilnú zlúčeninu, ktorá obsahuje časť hydrofilnú a časť hydrofóbnu. Príkladom lipidov sú mastné kyseliny, neutrálne tuky, fosfatidy, glykolipidy, alifatické alkoholy a vosky, terpény a steroidy.
Termín lipidová kompozícia označuje kompozíciu, ktorá obsahuje dajakú zlúčeninu lipidovéj povahy. Príkladom lipidových kompozícií sú emulzie, suspenzie a vezikulárne kompozície.
Termín lipidový prípravok označuje kompozíciu, ktorá obsahuje dajakú zlúčeninu lipidovej povahy a dajakú biologicky aktívnu látku.
Príkladom rôznych typov vhodných lipidov a najmä vhodných lipidov sú: fosfatidylcholíny ako napríklad dioleoylfosfatidylcholín, dimyristoylfosfatidylcholín, dipalmitoylfosfatidylcholín (DPPC) a distearoylfosfatidylcholín; fosfatidyletanolamíny ako napríklad dipalmitoylfosfatidyletanolamín (DPPE), dioleoylfosfatidyletanolamín a N-sukcinyl-dioleoylfosfatidyletanolamín; fosfatidylseríny; fosfatidylglyceroly; sfingolipidy; glykolipidy ako napríklad gangliosid GM1; glukolipidy; sulfatidy; glykosfingolipidy; fosfatidové kyseliny ako naprí• · · · • · t • · · • · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· • · · ·· ···· • · ·· · klad kyselina dipalmitoylfosfatidová; kyselina palmitová; kyselina steárová; kyselina arachidónová; kyselina laurová? kyselina myristová; kyselina lauroleová; kyselina fyzeterová; kyselina myristoleová; kyselina palmitoleová; kyselina petroselénová; kyselina oleová; kyselina izolaurová; kyselina izomyristová; kyselina izopalmitová; kyselina izostearová; cholesterol a deriváty cholesterolu ako napríklad cholesterol hemisukciát, cholesterol sulfát a cholesteryl-(4'-trimetylamónioj-butanoát; estery mastných kyselín a polyoxyetylénov? polyoxyetylénové alkoholy; étery polyoxyetylénových alkoholov; estery polyoxyetylovaného sorbitanu a mastných kyselín? glycerol polyoxyetylénglykol oxystearát; glycerol polyoxyetylénglykol ricínoleát; etoxylované steroly sójových bobov? etoxylovaný ricínový olej; polyméry polyetoxylén-polyoxypropylénových mastných kyselín; polyoxyetylované stearáty? kyselina 12-( ((7 ’-dimetylaminokumarin-3-yl)-karbonyl)-metylamino)oktadekánová ? kyselina N-[12-(((7'-dimetylaminokumarin-3-yl)karbonyl) -metylamino) -oktadekanoyl ] -2-amino-palmitová; 1,2dioleoyl-sn-glycerol; 1,2-dipalmitoyl-sn-3-sukcinylglycerol ? l,3-dipalmitoyl-2-sukcinyl-glycerol; a l-hexadecyl-2-palmitoyl-glycerofosfoetanolamín a palmitoylhomocysteín? lauryltrimetylamónium bromid; cetyltrimetylamónium bromid? myristyltrimetylamónium bromid; alkyldimetylbenzylamónium chloridy ako napríklad zlúčeniny, kde alkylom je dajaký C12, C14 alebo alkyl; benzyldimetyldodecylamónium bromid; benzyldimetyldodecylamónium chlorid; benzyldimetylhexadecylamónium bromid; benzyldimetylhexadecylamónium chlorid; benzyldimetyltetradecylamónium bromid; benzyldimetyltetradecylamónium chlorid; cetyldimetyletylamónium bromid; cetyldimetyletylamónium chlorid; cetylpyridínium bromid; cetylpyridínium chlorid;
N-[ (1,2,3-dioleoyloxy)-propyl]-N, N, N-trimetylamónium chlorid (DOTMA); 1,2-dioleoyloxy-3-(trimetylamonium)-propán (DOTAP);
a 1,2-dioleoyloxy-c- (4' -tr imetylamónium) -butanoyl-sn-glycerol (DOTB).
·· ·· ·· • · · · · • · ·· ·· ··· • ·· ··· · · ·· · • · · · ··· ·· ·· ·· ······ ··
Echogénnym plynom môže byť jeden plyn alebo zmes plynov ako napríklad CF4, C2Fg, C3F8, cyklo-C4F8, C4F10, C5F12, cykloC5F10J cyklo-C4F7(l-trifluórmetyl), propán(2-trifluórmetyl)1,1,1,3,3,3-hexafluór a bután(2-trifluórmetyl)-1,1,1,3,3,3,
4,4,4-nonafluór. S výhodou sú používané rovnako zodpovedajúce nenasýtené verzie hore uvedených zlúčenín, napríklad C2F4,
C3F6 a izoméry C4F8. Použitelné sú rovnako zmesi týchto plynov, osobitne potom zmesi perfluórkarbónov s inými perfluórkarbónmi a zmesi perfluórkarbónov s inými inertnými plynmi ako napríklad vzduchom, N2, 02, He a podobne. Príklady hore uvedných plynov môžu byť nájdené v prihláške US 5595723 (Quay), ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Kontrastné látky podlá vynálezu pre róntgenové žiarenie obsahujú jednu alebo viac smerujúcich častí rozpoznávajúcich novo vytvorenú vaskulatúru nádorov pripojených k jednej alebo viacerým častiam absorbujúcim róntgenové žiarenie alebo jednému alebo viacerým ťažkým atómom s atómovým číslom vyšším ako 20, a dalej volitelne obsahujú spojujúcu časť (Ln) medzi smerujúcimi časťami a atómami absorbujúcimi róntgenové žiarenie. V kontrastných látkach pre róntgenové žiarenie je často používaným ťažkým atómom jód. Nedávno boli opísané kontrastné látky pre róntgenové žiarenie obsahujúce cheláty kovov (Wallace R., prihláška US 5417959) a polycheláty s množstvom najrôznejších atómov kovov (Love D., prihláška US 5679810).
Ešte novejšie boli ako kontrastné látky pre róntgenové žiarenie opísané polyjaderové komplexy klasterov (prihlášky US 5804161, PCT WO91/14460 a PCT WO92/17215). Príkladom kontrastných látok pre róntgenové žiarenie sú nerádioaktívne alebo prirodzene sa vyskytujúce analógy hore uvedených rádionuklidov (napríklad Re, Sm, Ho, Lu, Pm, Y, Bi, Pd, Gd, La, Au, Yb, Dy, Cu, Rh, Ag a Ir).
Kontrastné látky podlá vynálezu pre MRI obsahujú jednu alebo viac smerujúcich častí rozpoznávajúcich novo vytvorenú ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· • · ·· ·· ··· • · · · · · · · ·· · • · · · · · · · · ·· ·· ·· ···· ·· vaskulatúru nádorov pripojených k jednému alebo viacerým iónom paramagnetického kovu, a ďalej volitelne obsahujú spojujúcu časť (Ln) medzi smerujúcimi časťami a týmito iónmi paramagnetického kovu. Ióny paramagnetických kovov sú vo forme komplexov alebo častíc oxidov týchto kovov. Prihlášky US 5412148 a US 5760191 opisujú príklady chelátotvorných činidiel iónov paramagnetických kovov na použitie v kontrastných látkach pre MRI. Prihlášky US 5801228 US 5567411 a US 5281704 opisujú príklady polychelátorov využiteľných na komplexáciu viac ako jedného iónu paramagnetického kovu na použitie v kontrastných látkach pre MRI. Prihláška US 5520904 opisuje farmaceutický prípravok obsahujúci častice s iónmi paramagnetických kovov použiteľný ako kontrastná látka pre MRI.
Farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu sú opísané vzorcami (Q)d-Ln-(ch-X), (Q)dLn(chxl)ď· (Q)dLn(chx2)d a (Q)d-Ln-(Ch-X3), kde Q reprezentuje peptid alebo peptidomimetikum, ktoré sa viaže na dajaký receptor exprimovaný v novo vytvorenej vaskulatúre nádorov, d je číslo z intervalu 1 až 10, Ln reprezentuje spojujúcu skupinu (použitú v prípadoch, keď je to žiadúce), označuje dajaký chelátor kovu alebo skupinu viažucu kovy, X reprezentuje dajaký rádioizotop, X1
O reprezentuje ión paramagnetického kovu, X reprezentuje nerozpustné pevné častice obsahujúce ión paramagnetického kovu alebo ťažký atóm, d je číslo od 1 do 100 a X3 reprezentuje mikročastice povrchovo aktívnej látky naplnené echogénnym plynom. Vo výhodnom rozpracovaní obsahujú farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu smerujúce časti (Q), ktorými sú peptidy alebo peptidomimetika viažuce sa na receptory pre vitronektín ανβ3 a ανβ5. Vo výhodnejšom rozpracovaní podlá vynálezu obsahujú farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu smerujúce časti (Q), ktorými sú peptidy alebo peptidomimetika viažuce sa na receptor ανβ3· V najvýhodnejšom rozpracovaní vynálezu obsahujú farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu smerujúce časti (Q) viažuce sa na receptor αγβ3, kde tieto smerujúce časti zahŕňajú jeden až desať cyklických pentapeptidov alebo peptido·· ·· ·· • · · · • 4 44 • · · · • 4 4 4 ·· ·· ·· • · · 4
4 · • · 4 ·· 4444 mimetik, ktoré môžu byť nezávisle pripojené k dajakému terapeutickému rádioizotopu alebo časti vhodnej na diagnostiku, a ďalej zahŕňajú (ked je to žiadúce) spojujúcu časť (Ln) medzi smerujúcimi skupinami a terapeutickými rádioizotopmi alebo časťami vhodnými na diagnostiku. Uvedené cyklické pentapeptidy obsahujú tripeptidovú sekvenciu, ktorá sa viaže na receptor ανβ3, a dalej dve aminokyseliny, z ktorých akákoívek môže byť pripojená k Ln, Ch, X2 alebo X3. Dôsledkom interakcie uvedenej tripeptidovej rozpoznávacej sekvencie cyklickej peptidovej alebo peptidomimetickej časti s receptorom ανβ3 je lokalizácia farmaceutickej zlúčeniny v novo vytvorenej vaskulatúre nádorov, ktorá exprimuje receptor ανβ3·
Farmaceutické zlúčeniny podía vynálezu môžu byť syntetizované pri využití niekoíkých prístupov. Jeden z týchto prístupov zahŕňa syntézu peptidovej alebo peptidomimetickej smerujúcej časti (Q) a priame pripojenie jednej alebo viacerých týchto častí (Q) k jednému alebo viacerým chelátotvorným činidlom alebo častiam viažúcim kovy (Ch), alebo k pevnej častici obsahujúcej ión paramagnetického kovu alebo ťažký atóm, alebo k mikročastici obsahujúcej echogénny plyn. Iný prístup zahŕňa pripojenie jednej alebo viacerých smerujúcich častí (Q) k spojujúcej časti (Ln), ktorá je následne pripojená k jednému alebo viacerým chelátotvorným činidlom alebo častiam viažucim kovy (Ck), alebo k pevnej častici obsahujúcej ión paramagnetického kovu alebo ťažký atóm, alebo k mikročastici obsahujúcej echogénny plyn. Iný prístup, výhodný pri syntéze zlúčenín, kde d je 1, zahŕňa syntézu časti Q-Ln tak, že pri syntéze peptidu alebo peptidomimetika je použitý dajaký aminokyselinový zvyšok alebo mimetikum aminokyseliny s naviazanou Ln. Takto pripravená časť Q-Ln je následne pripojená k jednému alebo viacerým chelátotvorným činidlom alebo častiam viažucim kovy (Ck), alebo k pevnej častici obsahujúcej ión paramagnetického kovu alebo ťažký atóm, alebo k mikročastici obsahujúcej echogénny plyn. Iný prístup zahŕňa syntézu peptidu alebo peptidomimetika (Q) obsahujúceho fragment spojujúcej časti ·· • · » · · • · fl • ·· ·· ···· (Ln), a jeden alebo viac takých fragmentov je potom pripojených k druhému fragmentu spojujúcej časti, a následne je celá spojujúca časť pripojená k jednému alebo viacerým chelátotvorným činidlom alebo častiam viažucim kovy (C^), alebo k pevnej častici obsahujúcej ión paramagnetického kovu alebo ťažký atóm, alebo k mikročastici obsahujúcej echogénny plyn.
Peptidy alebo peptidomimetika (Q), ktoré môžu niesť spojujúcu skupinu (Ln) alebo fragment takej spojujúcej skupiny, môžu byt syntetizované pri využití štandardných metód odborníkom dobre známych. Vo výhodnom rozpracovaní sú používané nasledujúce metódy (vyratúvanie nie je limitujúce).
Proces predlžovania peptidov alebo peptidomimetik zvyčajne zahŕňa odštiepenie chrániacej skupiny z alfa-aminoskupiny C-koncového zvyšku a pripojenie dalšej vhodne chránenej aminokyseliny prostredníctvom peptidovej väzby pri využití opísaných metód. Proces odštepovania chrániacej skupiny a pripojovania dalšej aminokyseliny je opakovaný tak dlho, kým nie je získaná požadovaná sekvencia. Na pripojovanie môžu byt v jednotlivých krokoch využívané jednotlivé aminokyseliny alebo fragmenty kondenzačných reakcií (dve až niekolko aminokyselín) alebo kombinácie obidvoch procesov alebo môže byť použitá metóda syntézy peptidov na pevnej fáze, ako je pôvodne opísaná v publikácii Merrifield, J. Am. Chem. Soc., 85:2149 až 2154, 1963, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Peptidy alebo peptidomimetika môžu byt rovnako syntetizované pri využití automatických syntetizérov. Ďalšie spôsoby syntézy peptidov a peptidomimetik sú opísané v nasledujúcich publikáciách: Stewart a Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 2. vydanie, Pierce Chem. Co., Rockford, IL, 1984; Gross, Meienhofer, Udenfried, The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, zväzky 1, 2, 3, 5 a 9, Academic Press, New York, 1980 až 1987; Bodanszky, Peptide Chemistry: A Practical Textbook, ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · e ··· • ·· ··· · · ·· · • · · · ··· » · ·· ·· ·· ···· ·· ·
Springer-Verlag, New York, 1988; a Bodanszky a ďalší, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, New York, 1984, ktoré sú tu uvedené zámenou za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Kondenzácia dvoch aminokyselinových derivátov, aminokyseliny a peptidu alebo peptidomimetika, dvoch peptidových alebo peptidomimetických fragmentov alebo cyklizácia peptidu alebo peptidomimetika môžu byť vykonávané pri využití štandardných metód, akými sú napríklad azidový spôsob, postup využívajúci zmiešaného anhydridu kyseliny uhličitej (izobutyl chlórformiát), postup využívajúci karbodiimidy (dicyklohexylkarbodiimid, diizopropylkarbodiimid alebo karbodiimidy rozpustné vo vode), postup využívajúci aktívne estery (estery p-nitrofenolu, imidoestery N-hydroxysukcinátu), postup využívajúci Woodwardove činidlo K, postup využívajúci karbonyldiimidazol, postup využívajúci deriváty fosforu ako napríklad ΒΟΡ-Cl alebo oxidačne-redukčná metóda. Účinnosť niektorých z týchto metód (najmä postup využívajúci karbodiimid) môže byt zvýšená prídavkom 1-hydroxybenztriazolu. Tieto kondenzačné reakcie môžu byt vykonávané buď v roztoku (kvapalná fáza) alebo na pevnej fáze.
Aby nedochádzalo k vytváraniu nežiadúcich väzieb, musia byť funkčné skupiny aminokyselín alebo mimetik aminokyselín počas kondenzačných reakcií chránené. Zoznam chrániacich skupín použiteíných v týchto prípadoch je uvedený v publikáciách Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1981 a The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, zväzok 3, Academic Press, New York, 1981, ktoré sú tu uvedené zámenou za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Alfa-karboxylová skupina C-koncového zvyšku je zvyčajne chránená dajakým esterom, ktorého odštiepením je opäť vytvorená volná karboxylová skupina. Medzi tieto chrániace skupiny φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ ··
Φ φ φ φ φ φ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ φφ φ φ φ φφ φφφφ φ φ φφ φ patria: 1) alkyi estery ako napríklad metyl alebo t-butyl, 2) aryl estery ako napríklad benzyl alebo substituovaný benzyl alebo 3) estery, ktoré môžu byť štiepené pôsobením slabej bázy alebo miernymi redukčnými podmienkami; takými estermi sú napríklad estery trichlóretylu alebo fenacylu. V prípade syntézy na pevnej fáze je C-koncová aminokyselina pripojená k nerozpustnému nosiču (zvyčajne polystyrénu). Tieto nerozpustné nosiče obsahujú skupinu, ktorá reakciou s karboxylovou skupinou vytvára väzbu, ktorá je stabilná pri predlžovaní reťazca, ale môže byť lahko štiepená neskoršie. Príkladom takých nosičov sú: oxímové živice (DeGrado a Kaiser, J. Org. Chem., 45:1295 až 1300, 1980), chlórmetylénové a brómmetylénové živice, hydroxymetylénové živice a aminometylénové živice. Vela z týchto živíc sú komerčne dostupné aj s vopred naviazanou požadovanou aminokyselinou.
Alfa-amínová skupina každej aminokyseliny musí byť chránená. Na tento účel môže byť použitá akákoľvek známa chrániaca skupina. Príkladom takých chrániacich skupín sú chrániace skupiny: 1) acylového typu ako napríklad formyl, trifluóracetyl, ftalyl a p-toluénsulfonyl; 2) typu aromatických karbamátov ako napríklad benzyloxykarbonyl (CBz) a substituované benzyloxykarbonyly, l-(p-bifenyl)-l-metyletoxykarbonyl a 9-fluórenylmetyloxykarbonyl (Fmoc); 3) typu alifatických karbamátov ako napríklad terc-butyloxykarbonyl (Boe), etoxykarbonyl, diizopropylmetoxykarbonyl a alyloxykarbonyl; 4) typu karbamátov cyklických alkylov ako napríklad cyklopentyloxykarbonyl a adamantyloxykarbonyl; 5) alkylového typu ako napríklad trifenylmetyl alebo benzyl; 6) trialkylsilány ako napríklad trimetylsilán; a 7) typy obsahujúce tiol ako napríklad fenyltiokarbonyl a ditiasukcinolyl. Vo výhodnom rozpracovaní sú ako chrániace skupiny alfa-amínu používané Boe alebo Fmoc. Množstvo aminokyselín alebo mimetik aminokyselín vhodne chránených pre peptidovú syntézu je komerčne dostupných.
• · • · · • · ·· ·· • · · • · t· • · · · • · · · ·· ·· ·· • · · · ·· ···· ·· ·
Pred naviazaním ďalšej aminokyseliny je chrániaca skupina alfa-amínu odštiepená. Keď je ako chrániaca skupina použitý Boe, toto štiepenie sa vykonáva kyselinou trifluóroctovou (buď samotnou alebo v zmesi s dichlórmetánom) alebo HCl v dioxáne. Vzniknutá amóniová soí je pred ďalším kondenzačným krokom neutralizovaná zásaditými roztokmi ako napríklad vodnými tlmivými roztokmi alebo terciárnymi amínmi v dichlórmetáne alebo dimetylformamide. Keď je ako chrániaca skupina použitý Fmoc, je vykonávané štiepenie piperidínom alebo substituovanými piperidínmi v dimetylformamide. Okrem toho môže byť rovnako použitý akýkoívek sekundárny amín alebo vodný zásaditý roztok. Odstránenie chrániacej skupiny je vykonávané v teplotnom rozmedzí O’C až izbová teplota.
Akákoívek aminokyselina alebo mimetikum aminokyseliny nesúca na postrannom reťazci dajakú funkčnú skupinu musí byť počas syntézy peptidu chránená dajakou z hore uvedených chrániacich skupín. Odborníkom je zrejmé, že voíba a použitie vhodných chrániacich skupín pre funkční skupiny na postranných reťazcoch aminokyselín bude závisieť od danej aminokyseliny alebo mimetika aminokyseliny a výskytu ďalších chrániacich skupín v peptide alebo peptidomimetiku. Voíba chrániacich skupín postranných reťazcov je dôležitá preto, že tieto chrániace skupiny nesmejú byť odštiepené pri štiepení chrániacich skupín alfa-amínu alebo pri kondenzácii na alfa-amínovú skupinu.
Keď je napríklad ako chrániaca skupina alfa-amínu použitý Boe, potom je možné použiť nasledujúce chrániace skupiny postranných reťazcov: pre arginín p-toluénsulfonyl (tozyl) a nitro zlúčeniny; pre lyzín benzyloxykarbonyl, substituované benzyloxykarbonyly, tozyl alebo trifluóracetyl; pre kyselinu glutámovú a asparágovú estery benzylu alebo alkylu ako napríklad cyklopentyl; pre serín a treonín étery benzylu; pre tyrozín substituované étery benzylu alebo 2-brómbenzyloxykarbonyl; pre cysteín p-metylbenzyl, p-metoxybenzyl, acetamidometyl, benzyl alebo t-butylsulfonyl; a indolový kruh tryptofánu môže • · • · · • · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· • · · ·· ···· • · ·· · byť ponechaný buď nechránený alebo môže byť ochránený formylovou skupinou.
Keď je ako chrániaca skupina alfa-amínu použitý Boe, potom je zvyčajne možné použiť chrániace skupiny postranných reťazcov na báze terc-butylu. Pre lyzín môže byť použitý napríklad Boe, pre serín, treonín a tyrozín éter terc-butylu a pre kyseliny glutámovú a asparágovú ester terc-butylu.
Po ukončení elongácie peptidu alebo peptidomimetika alebo po ukončení elongácie a cyklizácie cyklického peptidu alebo peptidomimetika sú všetky chrániace skupiny odstránené. Pri syntéze v kvapalnej fáze sú chrániace skupiny odstránené spôsobom, ktorý závisí od chemickej podstaty zvolených chrániacich skupín. Tieto spôsoby sú odborníkom dobre známe.
Keď je na syntézu cyklického peptidu alebo peptidomimetika použitý prístup syntézy na pevnej fáze, potom by tento peptid alebo peptidomimetikum mali byť z živice odštiepené bez súčasného odštiepenia chrániacich skupín postranných reťazcov, pretože tieto by mohli interferovať s procesom cyklizácie. Čiže keď bude cyklizácia peptidu alebo peptidomimetika vykonaná v roztoku, potom musia byť podmienky zvolené tak, aby boli získané volná alfa-karboxylová skupina a alfaamino skupina, ale súčasne neboli odštiepené zvyšné chrániace skupiny. Inou možnosťou je odštiepenie peptidu alebo peptidomimetika z živice hydrazinolýzou a následná kondenzácia azidovou metódou. Iným vhodným spôsobom je syntéza peptidu alebo peptidomimetika na oxímovéj živici s následným intramolekulárnym nukleofilným vytesnením z živice, čím je pripravený cyklický peptid alebo peptidomimetikum (Osapay, Profit a Taylor, Tetrahedron Letters, 43:6021 až 6124, 1990). Pri použití oxímovéj živice je zvyčajne zvolená Boe stratégia.
V tomto prípade sú chrániace skupiny postranných reťazcov s výhodou odstraňované pri 0°C pôsobením bezvodého HF obsahujúceho aditiva ako napríklad dimetylsulfid, anizol, tio·· • · · • 9 ·· ·· • · · · • 9 ·· • · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · • · · ·· ····
9 ·· · anizol alebo p-krezol. Odštiepenie peptidu alebo peptidomimetika môže byt rovnako vykonané inými kyslými reakčnými činidlami ako napríklad zmesou kyselín trifluórmetánsulfónovej/trifluóroctovej.
Neštandardné aminokyseliny používané v tejto prihláške môžu byt syntetizované štandardnými postupmi odborníkom dobre známymi (The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, zväzok 5, strany 342 až 449, Academic Press, New York, 1981). Aminokyseliny s alkylom naviazaným na amínovú skupinu môžu byt pripravené postupmi opísanými skôr (Cheung a ďalší, Can. J. Chem., 55: strana 906, 1977? a Freidinger a díalší, J. Org. Chem., 48: strana 77, 1987), ktoré sú tu uvedené zámenou za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Iné postupy, ktoré môžu byt odborníkmi použité pri syntéze peptidových a peptidomimetických smerujúcich skupín, sú opísané v prihláške PCT W094/22910, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Pripojenie spojujúcej skupiny (Ln) k peptidom alebo peptidomimetikom (Q); chelátotvorných alebo väzbových častí (¾) k peptidom alebo peptidomimetikom (Q) alebo spojujúcim skupinám (Ln); a peptidov alebo peptidomimetik obsahujúcich čast spojujúcej skupiny k druhej časti tejto spojujúcej skupiny tak, že je vytvorená skupina (Q)(j”Ln a následne k časti Ch; môže byt uskutočnené štandardnými spôsobmi. Medzi tieto patrí (vyratúvanie nie je limitujúce) amidácia, esterifikácia, alkylácia a tvorba močovín a tiomočovín. Spôsoby pre také pripojenia sú opísané v publikácii Brinkley M., Bioconjugate Chemistry, 3(1):1992, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Na pripojenie peptidov alebo peptidomimetik (Q) k pevným časticiam obsahujúcim ióny paramagnetických kovov alebo ťažkých kovov (X2) môže odborník využiť množstvo spôsobov modi• · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· • · · • · • · · • · ·· · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · • · · · • · · ·· ···· fikácie povrchu týchto častíc. Všeobecným prístupom je pripojenie smerujúcej časti Q alebo kombinácie (Qj)Ln k dajakej väzbovej skupine, ktorá reaguje s dajakou zložkou na povrchu uvedenej pevnej častice. Takými väzbovými skupinami môže byt akýkoľvek z množstva silánov, ktoré reagujú s hydroxylovými skupinami na povrchu pevnej častice (pozri prihlášku USAN 60/092360), alebo tiež polyfosfonáty, polykarboxyláty, polyfosfáty alebo ich zmesi, ktoré je možné naviazať na povrch uvedenej pevnej častice, ako je opísané v prihláške US 5520904.
Na pripojenie peptidov alebo peptidomimetik (Q) k mikročasticiam povrchovo aktívnej látky (X3) môže byť využité množ stvo reakčných schéma. Tieto sú ilustrované v nasledujúcom texte, kde Sf reprezentuje časť povrchovo aktívnej látky vytvárajúcej mikročastice.
Acylačná reakcia:
Sf-C(=O)-Y + Q“NH2 alebo -> Sf-C(=O)-NH-Q
Q-OH alebo Sf-C(=O)-O-Q
Y je odstupujúca skupina alebo aktívny ester
Reakcia za vzniku disulfidu:
Sf-SH + Q-SH -> Sf-S-S-Q
Reakcia za vzniku sulfónamidu:
Sf-S(=O)2-Y + q-nh2 --> Sf-S(=O)2-nh-q
Reduktívna amidácia:
+ q-nh2
Sf-CHO > Sf-NH-Q ·· ·· · · ·· ·· ···· ···· ··· ···· · · ··· • · · ··· · · ·· · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
Substituenty Sf a Q môžu byť v týchto reakčných schémach rovnako zamenené.
Spojujúca skupina Ln môže mat niekoľko funkcií. Po prvé oddeľuje chelátor kovov alebo časť viažucu kov (C^), pevnú časticu obsahujúcu ión paramagnetického kovu alebo ťažký atóm (X2) alebo mikročasticu povrchovo aktívnej látky (X3) a jeden alebo viac peptidov alebo peptidomimetik (Q), čím je minimalizovaná možnosť, že by časti Ch-X, C^-X1, X2 a X3 mohli interferovať s interakciou rozpoznávacích sekvencii Q s receptormi exprimovanými na neovaskulatúre nádorov. Nezbytnosť začlenenia spojujúcej skupiny do reakčného činidla je závislá od chemickej podstaty častí Q, Ch-X, Cj^-X1, X2 a X3. Keď nemôžu byt časti C^-X, C^h-X·1·, X2 a X3 pripojené ku Q bez podstatného zníženia afinity tejto časti k uvedeným receptorom, potom je spojujúca skupina použitá. Spojujúcía skupina rovnako umožňuje pripojenie niekoľkých peptidov alebo peptidomimetik (Q) k jednej skupine, ktorá je potom pripojená k Ch-X, C^-X1,
X2 a X3.
Spojujúca skupina rovnako umožňuje začlenenie modifikátoru farmakokinetických vlastností do farmaceutickej zlúčeniny podľa vynálezu. Tento modifikátor farmakokinetických vlastností ovplyvňuje distribúciu injektovanej farmaceutickej zlúčeniny v organizmu spôsobom, ktorý je odlišný od interakcie smerujúcich skupín (Q) s receptormi exprimovanými v neovaskulatúre nádorov. Ako modifikátory farmakokinetických vlastností môže byt využité množstvo najrôznejších funkčných skupín vrátane, vyratúvanie nie je obmedzujúce, karbohydrátov, polyalkenylglykolov, peptidov a iných polyaminokyselín a cyklodextrínov. Tieto modifikátory môžu byť využité na zvýšenie alebo naopak zníženie hydrofility a/alebo na zvýšenie alebo zníženie rýchlosti clearence z krvného toku. Tieto modifikátory môžu byť rovnako využité na určenie spôsobu eliminácie danej farmaceutickej zlúčeniny z organizmu. Vo výhodnom rozpracovaní sú požívané modifikátory farmakokinetických vlastností, ktoré ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· • · ·· ·· ··· • · · ··· · · ·· · ••e· · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· · prispievajú k stredne rýchlej alebo rýchlej clearence z krvného prúdu a k zvýšeniu renálnej exkrécie danej farmaceutickej zlúčeniny.
Chelátor kovov alebo jednotka viažuca kov (C^) sú zvolené tak, aby vytvárali stabilné komplexy s iónmi kovov zvolenými pre príslušnú aplikáciu. Chelátotvorné činidlá alebo jednotky viažuce kov pri diagnostických rádiofarmakonov sú zvolené tak, aby vytvárali stabilné komplexy s rádioizotopmi, ktoré emitujú diagnosticky využiteľné žiarenie gama alebo pozitróny. Takými rádioizotopmi sú napríklad 99mTc, 95Tc, li:LIn, 62Cu, 60Cu, 64Cu, 67Ga, 68Ga a 86Y.
Chelátory izotopov technécia, medi a gália sú vybrané zo skupiny zahŕňajúcej diaminditioly, monoamín-diamidditioly, triamid-monotioly, monoamin-diamid-monotioly, diamindioxímy a hydrazíny. Tieto chelátotvorné činidlá sú zvyčajne tetradentátne s donorovými atómami vybranými zo skupiny zahŕňajúcej dusík, síru a kyslík. Vo výhodnom rozpracovaní obsahujú farmaceutické zlúčeniny chelátotvorné činidlá, kde donorovými atómami sú dusík vo forme amínu a síra vo forme tiolu, a kde väzbovými jednotkami sú hydrazíny. Atómy síry vo forme tiolu a hydrazíny môžu niesť chrániacu skupinu, ktorá môže byt nahradená bud pred použitím farmaceutickej látky na syntézu rádiofarmaka alebo výhodnejšie in situ pri syntéze daného rádiofarmaka.
Príklady chrániacich skupín pre tioly sú uvedené v publikácii Greene a Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991, ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu. Môže byť použitá akákoľvek chrániaca skupina pre tioly v súčasnosti známa. Príkladom chrániacich skupín pre tioly sú (vyratúvanie nie je limitujúce): acetamidometyl, benzamidometyl, 1-etoxyetyl, benzoyl a trifenylmetyl.
·· ·· ·· • · · • t ·· ·· • · · · • « ·· • · · · • · · · ·· ·· • · ·· ·
Príkladom chrániacich skupín pre hydrazínové väzbové jednotky sú hydrazóny, ktorými môžu byť hydrazóny aldehydov alebo ketónov so substituentmi vybranými zo skupiny zahŕňajúcej vodík, alkyl, aryl a heterocyklus. Osobitne výhodné sú hydrazóny opísané v prihláške USSN 08/476296 (doposiaí v konaní), ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Keď je hydrazínová väzbová jednotka naviazaná k rádionuklidu kovu, potom je označovaná ako hydrazido alebo diazenido skupina a slúži ako bod pripojenia tohto rádionuklidu k zvyšku rádiofarmaka. Diazenido skupina môže byť buď koncová (k rádionuklidu je naviazaný iba jeden atóm v tejto skupine) alebo chelátotvorná. Aby bolo možné takú diazenido skupinu označiť ako chelátotvornú, musí byť k uvedenému rádionuklidu pripojený ešte aspoň jeden atóm tejto skupiny. Atómy účastniace sa väzby na tento kov sú označované ako donorové atómy.
Chelátory pre 111In a 86Y sú zvolené zo skupiny zahŕňajúcej cyklické a acyklické polyaminokarboxyláty ako napríklad DTPA, DOTA, DO3A, 2-benzyl-DOTA, kyselinu alfa-(2-fenetyl)1 4,7,10-tertaazacyklododekán-l-acetát-4,7,10-tris(metyloctovú), kyselinu 2-benzyl-cyklohexyldietyléntriamínpentaoctovú, 2-benzyl-6-metyl-DTPA a 6,6''-bis[N, N,N,N-tetra(karboxymetyl)aminometyl)-4 '-(3-amino-4-metoxyfenyl) ]2,2':6',2”-terpyridín. Postupy syntézy chelátorov, ktoré nie sú komerčne dostupné môžu byť nájdené v publikáciách Brechbiel M. a Gansow O., J. Chem. Soc. Perkin Trans, 1: strana 1175, 1992; Brechbiel M. a Gansow O., Bioconjugate Chem., 2: strana 187, 1991; Deshpande S. a ďalší, J. Nucl. Med., 31: strana 473, 1990; Kruper J., prihláška US 5064956 a Toner J., prihláška US 4859777, ktoré sú tu uvedené zámenou za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
• · ·· ·· • · · · · • · ·· · • · · · · · • · · · · ·· ·· ·· • · ···· ··
Koordinačná sféra iónu kovu zahŕňa všetky ligandy a skupiny účastniace sa väzby s týmto kovom. Koordinačné čislo (počet donorových atómov) stabilného rádionuklidu prechodného kovu je zvyčajne celé číslo väčšie alebo rovné 4 a menšie alebo rovné 8. To znamená, že k tomuto kovu je naviazaných 4 až 8 atómov a koordinačná sféra tohto kovu je úplná. Koordinačné číslo požadované na vytvorenie stabilného komplexu s rádionuklidom je určené identitou tohto rádionuklidu, jeho oxidačným stavom a typom donorových atómov. Keď chelátotvorné činidlo alebo jednotka viažuca kov neposkytujú všetky atómy nezbytné na stabilizáciu rádionuklidu kovu tým, že by úplne zaplnili koordinačnú sféru tohto kovu, potom je koordinačná sféra doplnená donorovými atómami iných ligandov označovaných ako pomocné ligandy alebo koligandy, ktoré môžu byt rovnako koncové alebo chelátotvorné.
Ako pomocné ligandy alebo koligandy môže slúžit veľké množstvo ligandov a ich voľba závisí od takých premenných ako napríklad ľahkosti syntézy daného rádiofarmaka, chemických a fyzikálnych vlastností pomocného ligandu, rýchlosti tvorby, výťažku a počtu izomérnych foriem výsledných rádiofarmak, možnosti aplikovať taký pomocný ligand alebo koligand do organizmu pacienta bez nežiadúcich fyziologických reakcií a zlučiteľnosti uvedeného ligandu v prípravku vo forme lyofilizovanej látky. Náboj a lipofilnost použitého pomocného ligandu bude ovplyvňovať náboj a lipofilnost daného rádiofarmaka. Napríklad použitie 4, 5-dihydroxy-l,3-benzén disulfonátu bude mat za následok vznik rádiofarmaka s dvoma záporne nabitými skupinami navyše, pretože sulfonátové skupiny budú za fyziologických podmienok záporne nabité. Použitie N-alkyl substituovaných 3,4-hydroxypyridónov bude mat za následok vznik rádiofarmak s rôznym stupňom lipofilnosti a to v závislosti od veľkosti použitých alkylových substituentov.
Výhodne používané rádiofarmaka podľa vynálezu obsahujúce technécium zahŕňajú hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku
44 • · · · • 4 44
4 4 4
4 4 · • 4 44
44
4 4 4
4 4 • 44 4 • · · ·· 4444 • 4 4 • 4
4 4 • 4
4 viažucu kov a dajaký pomocný ligand (AL1) alebo dajakú jednotku viažucu kov a dva typy pomocných ligandov (AL1 $a_45va a
L2 alebo dajaký tetradentátny chelátor obsahujúci dva atómy dusíka a dva atómy síry. Pomocné ligandy Ajjj obsahujú dva alebo viac tvrdých donorových atómov ako napríklad kyslík alebo dusík vo forme amínu (sp3 hybridizovaný). Tieto donorové atómy obsadzujú v koordinačnej sfére daného rádionuklidu aspoň dve miesta; pomocný ligand ÄL1 funguje v ternárnom systému ligandov ako jeden z troch ligandov. Príkladom pomocných ligandov A^i sú (vyratúvanie nie je limitujúce) ligandy s dvoma atómami kyslíka a funkcionalizované aminokarboxyláty. Veíké množstvo týchto ligandov je dostupných komerčne.
Pomocné ligandy sa dvoma atómami kyslíka zahŕňajú ligandy, ktoré do koordinačnej väzby s daným iónom kovu vstupujú prostredníctvom aspoň dvoch donorových atómov kyslíka. Príkladom takých zlúčenín (vyratúvanie nie je limitujúce) sú: glukoheptanoát, glukonát, 2-hydroxyizobutyrát, laktát, tartarát, manitol, glukarát, maltol, koji-kyselina, kyselina 2,2-bis(hydroxymetyl)propiónová, 4,5-dihydroxy-l,3-benzéndisulfonát alebo substituované alebo nesubstituované 1,2alebo 3,4-hydroxypyridóny. (Názvy ligandov v týchto príkladoch môžu označovať ako protónované tak neprotónované formy týchto ligandov).
Funkcionalizované aminokarboxyláty zahŕňajú ligandy, ktoré ako donorové atómy obsahujú kombináciu dusíka vo forme amínu a kyslíka. Príkladom takých zlúčenín (vyratúvanie nie je limitujúce) sú: kyselina iminodioctová, kyselina diaminopropánová, kyselina nitrilotrioctová, kyselina N, N'-etyléndiamíndioctová, kyselina Ν,Ν,Ν'-etyléndiamíntrioctová, kyselina hydroxyetyletyléndiamíntrioctová a N,N'-etyléndiamín bis-hydroxyfenylglycín. (Názvy ligandov v týchto príkladoch môžu označovať ako protónované, tak neprotónované formy týchto ligandov).
φφ φ • · · · • φ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ φ φ φ φφ φφφφ
Rad funkcionalizovaných aminokarboxylátov je opísaný v prihláške US 5350837 (Bridger a ďalší), ktorá je tu uvedená zámenou za prenesenie jej celého obsahu do opisu tohto vynálezu. Použitie týchto zlúčenín ulahčuje tvorbu komplexov proteínov modifikovaných hydrazínom s technéciom. Zistili sme, že použitie niektorých z týchto aminokarboxylátov má za následok zvýšenie výťažkov rádiofarmak podlá vynálezu. Vo výhodnom rozpracovaní sú pomocné ligandy AL1 vo forme funkcionalizovaných aminokarboxylátov odvodených od glycínu; najvýhodnejší je tricín - (tris(hydroxymetyl)metylglycín).
V najvýhodnejšom rozpracovaní zahŕňajú rádiofarmaka podlá vynálezu obsahujúce technécium hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku viažucu kov a dva typy pomocných ligandov označovaných AL1 a AL2 alebo chelátotvorné činidlo na báze diamínditiolu. Druhý typ pomocných ligandov (AL2) zahŕňa jeden alebo viac donorových atómov vybraných zo skupiny: fosfor vo forme fosfínu, arzén vo forme arzánu, dusík vo forme imínu (hybridizácia sp2), síra (hybridizácia sp2) a uhlík (hybridizácia sp); tzn. atómy, ktoré majú charakter p-kyseliny. Ligandy AL2 môžu byť vo forme monodentátnej, bidentátnej alebo tridentátnej, kde dentátnosť je definovaná počtom donorových atómov v príslušnom Ugande. Jeden z dvoch donorových atómov v bidentátnom ligande a jeden z troch donorových atómov v tridentátnom ligande musí byt mäkký donorový atóm. V prihláškach USSN 08/415908 a USSN 60/013360 a 08/646886, ktoré sú doposial v konaní, a ktoré sú tu uvedené zámenou za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu, sme opísali skutočnosť, že rádiofarmaka obsahujúce jeden alebo viac pomocných ligandov alebo koligandov AL2 sú v porovnaní s rádiofarmakami, ktoré neobsahujú jeden alebo viac pomocných ligandov alebo koligandov AL2» stabilnejšie. To znamená, že majú minimálny počet izomérnych foriem, ktorých relatívne pomery sa v priebehu času podstatne nemenia, a že po zriedení zostávajú v podstate nezmenené.
• β ·· • · · • · • · · • ·· ·· ·· • · · ·· ···· ··
Ligandy AL2, ktoré obsahujú donorové atómy vo forme fosfínov alebo arzénov, sú trojnásobne substituované fosfíny, trojnásobne substituované arzány, štvornásobne substituované difosfiny a štvornásobne substituované diarzány. Ligandy AL2, ktoré obsahujú dusík vo forme iminu, sú nenasýtené alebo aromatické 5 alebo 6 početné heterocykly zahŕňajúce dusík. V ligandoch, ktoré zahŕňajú síru (hybridizácia sp2), sú donorovými atómami tiokarbonyly obsahujúce časť C=S. V ligandoch, ktoré zahŕňajú uhlík (hybridizácia sp), sú donorovými atómami izonitrily obsahujúce časť CNR, kde R je organický radikál. Veíké množstvo týchto ligandov je dostupných komerčne. Izonitrily môžu byt syntetizované postupmi opísanými v prihláškach EP 0107734 a US 4988827, ktoré sú tu uvedené zámenou za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu.
Výhodne používanými pomocnými ligandami AL2 sú trojnásobne substituované fosfíny a nenasýtené alebo aromatické 5 alebo 6 početné heterocykly. Najvýhodnejšie používanými pomocnými ligandami AL2 sú trojnásobne substituované fosfíny a nenasýtené 5 početné heterocykly.
Pomocné ligandy AL2 môžu byt substituované alkylom, arylom, alkyloxylom, heterocyklom, aralkylom, alkarylom a arylalkarylom a môžu, ale nemusia, niesť funkčné skupiny zahŕňajúce heteroatómy ako napríklad kyslík, dusík, fosfor alebo síru. Príkladom takých funkčných skupín sú (vyratúvanie nie je limitujúce): hydroxyl, karboxyl, karboxamid, nitro, éter, ketón, amino, amónium, sulfonát, sulfónamid, fosfonát a fosfónamid. Tieto funkčné skupiny môžu byť zvolené tak, aby pri ligandoch menili lipofilnost a rozpustnosť vo vode, čo môže ovplyvniť biologické vlastnosti rádiofarmak ako napríklad distribúciu v necieíových tkanivách, bunkách a tekutinách, a mechanizmus a rýchlosť eliminácie z organizmu.
Chelátotvorné činidlá alebo časti viažuce kov pri terapeutických rádiofarmakách sú zvolené tak, aby vytvárali sta• · ·· • · · · ···· • · ·· · · · • ·· ··· · · • · · · · * · ·· ·· ·· ···· bilné komplexy s rádioizotopmi, ktoré emitujú častice alfa, častice beta a Augerove alebo Coster-Kronigove elektróny. Takými rádioizotopmi sú napríklad: 186Re, 188Re, 153Sm, 166Ho, 177Lu, 149Pm, 9°Y, 212Bi, 103Pd, 109Pd, 159Gd, 140La, 198Au, 1AU, 169yb/ 175yb/ 165Dyí 166βγ, 67Cu> 105Rhf lllAg a
Chelátory izotopov rénia, medi, paládia, platiny, irídia, rodia, striebra a zlata sú vybrané zo skupiny zahŕňajúcej diamínditioly, monoamín-monoamidditioly, triamid-monotioly, monoamín-diamidmonotioly, diamíndioximy a hydrazíny. Chelátory izotopov ytria, vizmutu a lantanoidov vybrané zo skupiny zahŕňajúcej cyklické a acyklické polyaminokarboxyláty ako napríklad DTPA, DOTA, DO3A, 2-benzyl-DOTA, kyselinu alfa-(2fenetyl) 1,4,7,lO-tertaazacyklododekán-l-acetát-4,7,10-tris(metyloctovú), kyselinu 2-benzyl-cyklohexyldietyléntriamínpentaoctovú, 2-benzyl-6-metyl-DTPA a 6,6-bis[N,N,N,Ntetra(karboxymetyl)aminometyl)-4'-(3-amino-4-metoxyfenyl)]2,2':6',2-terpyridín.
Chelátotvorné činidlá pri kontrastných látkach pre magnetickú rezonanciu sú zvolené tak, aby vytvárali stabilné komplexy s iónmi paramagnetických kovov ako napríklad Gd(III), Dy(III), Fe(III) a Mn(II), sú vybrané zo skupiny zahŕňajúcej cyklické a acyklické polyaminokarboxyláty ako napríklad DTPA, DOTA, DO3A, 2-benzyl-DOTA, kyselinu alfa-(2-fenetyl) 1,4,7,10tertaazacyklododekán-l-acetát-4,7,lO-tris(metyloctovú), kyselinu 2-benzyl-cyklohexyldietyléntriamínpentaoctovú, 2-benzyl6-metyl-DTPA a 6,6-bis[N, N,N,N-tetra(karboxymetyl)aminometyl) -4'-(3-amino-4-metoxyfenyl)]-2,2':6',2-terpyridín.
Rádiofarmaka podľa vynálezu obsahujúce technécium alebo rénium a zahŕňajúce hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku viažucu kov môžu byt ľahko pripravené zmiešaním soli daného rádionuklidu, farmaceutickej látky podľa vynálezu, pomocného ligandu AL1, pomocného ligandu AL2 a dajakej redukujúcej látky ·· • · · · ···· · · · • · ·· · · ··· • · · · · · · · ·· · ··· 9 ··· ·« ·· ·· ·· ···· ·· · ·· ·· ·· vo vodnom roztoku pri teplotách v rozmedzí 0 až 100C. Rádiofarmaka podlá vynálezu obsahujúce technécium alebo rénium a zahŕňajúce tetradentátny chelátor s dvoma atómami dusíka a dvoma atómami síry môžu byť lahko pripravené zmiešaním soli daného rádionuklidu, farmaceutickej látky podlá vynálezu a dajakej redukujúcej látky vo vodnom roztoku pri teplotách v rozmedzí 0 až 100°C.
Keď sa vyskytuje vo farmaceutickej látke podlá vynálezu jednotka viažuca kov vo forme hydrazónu, musí byt tento pred vytvorením komplexu s rádionuklidom kovu najskôr premenený na hydrazín, ktorý môže (ale nemusí) byť protónovaný. Premena hydrazónovej skupiny na hydrazín môže byt vykonaná pred vlastnou reakciou s rádionuklidom. V tomto prípade nie sú rádionuklid a pomocný ligand(-y) alebo ko-ligand(-y) zmiešané priamo s farmaceutickou látkou, ale s hydrolyzovanou formou tejto látky nesúcou chelátotvorné činidlo alebo jednotku viažucu kov. Premena hydrazónovej skupiny na hydrazín môže byť rovnako vykonaná v prítomnosti rádionuklidu. v tomto prípade je farmaceutická látka zmiešaná s príslušným rádionuklidom a pomocným ligandom(dmi) alebo koligandom(dmi) a pH reakčnej zmesi musí byť neutrálne alebo kyslé.
Rádiofarmaka podlá vynálezu zahŕňajúce hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku viažucu kov môžu byt alternatívne pripravené najskôr zmiešaním soli daného rádionuklidu, pomocného ligandu AL1 a dajakej redukujúcej látky vo vodnom roztoku pri teplotách v rozmedzí 0 až 100’C, čím je vytvorený prechodný komplex rádionuklidu s pomocným ligandom AL1. Následne je pridaná farmaceutická látka podlá vynálezu a pomocný ligand AL2 a reakcia ďalej prebieha pri teplotách v rozmedzí 0 až 100°C. Rádiofarmaka podlá vynálezu zahŕňajúce hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku viažucu kov môžu byt alternatívne pripravené najskôr zmiešaním soli daného rádionuklidu, pomocného ligandu ALľ farmaceutickej látky podlá vynálezu a dajakej redukujúcej látky vo vodnom roztoku pri teplotách v rozmedzí 0 až ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· ···· ·· ··· • · · ··· β · ·· · • · · · ··· · a ·· ·· ·· ···· ·· ·
100’C, čím je vytvorený prechodný komplex rádionuklidu. Následne je pridaný pomocný ligand AL2 a reakcia ďalej prebieha pri teplotách v rozmedzí 0 až 100’C.
Rádionuklidy technécia a rénia sú vo výhodnom rozpracovaní vo forme technécistanu alebo rénistanu s farmaceutický prijatelným katiónom. Vo výhodnom rozpracovaní ide o technecistan sodný, ktorý je získavaný z komerčných generátorov Tc-99m. Množstvo technécistanu použité na prípravu rádiofarmak podlá vynálezu sa môže pohybovať v intervale 0,1 mCi až 1 Ci, výhodnejšie potom v intervale 1 až 200 mCi.
Množstvo farmaceutickej látky podlá vynálezu použitej na prípravu rádiofarmak podlá vynálezu obsahujúcich technécium alebo rénium sa môže pohybovať v intervale 0,01 μg až 10 mg, výhodnejšie potom v intervale 0,5 yg až 200 μg. Použité množstvo bude závislé od obsahu ďalších reaktantov a identity rádiofarmak podlá vynálezu, ktoré budú pripravované.
Množstvo použitých pomocných ligandov ÄL1 sa pohybuje v intervale 0,1 mg až 1 g, výhodnejšie potom v intervale 1 mg až 100 mg. Presné množstvo pre príslušný rádiofarmakon je funkciou identity tohto rádiofarmaka podlá vynálezu, použitého postupu a množstva a identít ďalších reaktantov. Použitie príliš velkého množstva AL1 bude mat za následok tvorbu vedlajších produktov obsahujúcich AL1 značených technéciom bez biologicky aktívnej molekuly alebo vedlajších produktov obsahujúcich biologicky aktívne molekuly značené technéciom spolu s pomocným ligandom AL1, ale bez pomocného Ugandu AL2. Po~ užitie príliš malého množstva AL1 bude mat za následok tvorbu iných vedlajších produktov ako napríklad vedlajších produktov obsahujúcich biologicky aktívne molekuly značené technéciom spolu s pomocným ligandom AL2, ale bez pomocného ligandu AL1 alebo tvorbu redukovaného hydrolyzovaného technécia alebo technécia vo forme koloidu.
• · ·· ·* ·· ·· ·· • · · · ···· · • · ·· ·· ··· • · · · · · · · · · · • · · · ··· · ·· ·· ·· ···· ·· ·
Množstvo použitých pomocných ligandov A^2 sa pohybuje v intervale 0,001 mg až 1 g, výhodnejšie potom v intervale 0,01 mg až 10 mg. Presné množstvo pre príslušný rádiofarmakon je funkciou identity tohto rádiofarmaka podlá vynálezu, použitého postupu a množstva a identít ďalších reaktantov. Použitie príliš velkého množstva A^2 bude mať za následok tvorbu vedľajších produktov obsahujúcich AL2 značených technéciom bez biologicky aktívnej molekuly alebo vedľajších produktov obsahujúcich biologicky aktívne molekuly značené technéciom spolu s pomocným ligandom A^2, ale bez pomocného ligandu A^. Keď farmaceutická látka obsahuje jeden alebo viac substituentov, ktoré zahŕňajú mäkké donorové atómy (ako sú definované hore), potom, aby sa zamedzilo interferencii týchto substituentov pri koordinácii pomocného ligandu AL2 k použitému rádionuklidu kovu, je nezbytné použiť aspoň 10 násobný molárny prebytok pomocného ligandu A^2 voči farmaceutickej látke opísanej vzorcom 2.
Redukujúcimi činidlami vhodnými na syntézu rádiofarmak podľa vynálezu sú cínaté soli, soli ditioničitanu alebo hydrogensiričitanu, soli tertahydroboritanu a kyselina formamidínsulfínová, kde uvedené soli sú farmaceutický prijateľné. Vo výhodnom rozpracovaní sú ako redukujúce látky používané cínaté soli. Množstvo použitého redukujúceho činidla sa môže pohybovať v intervale 0,001 až 10 mg, výhodnejšie potom v intervale 0,005 mg až 1 mg.
Špecifické zloženie rádiofarmak podľa vynálezu zahŕňajúcich hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku viažucu kov bude závisieť od identity použitej farmaceutickej látky podľa vynálezu, identity použitého pomocného ligandu ALľ identity použitého pomocného ligandu AL2 a identity použitého rádionuklidu. Rádiofarmaka obsahujúce hydrazidovú alebo diazenidovú jednotku viažucu kov syntetizované z farmaceutických látok v koncentráciách <100 μg/πtl budú zahŕňať jednu hydrazidovú a ·· • · · • · ·· ··
• · · · · · · ·· ·· ·· ···· • · ·· · jednu diazenidovú skupinu. Rádiofarmaka syntetizované z farmaceutických látok v koncentráciách >1 mg/ml budú zahŕňať dve hydrazidové a dve diazenidové skupiny z dvoch molekúl použitých farmaceutických látok. Pri väčšine aplikácií môže byt injektované iba obmedzené množstvo biologicky aktívnej molekuly, pretože pri vyššom aplikovanom množstve dochádza k výskytu nežiadúcich vedľajších účinkov ako napríklad chemickej toxickosti, interferencii s biologickými procesmi alebo zmenenej biodistribúcii použitého rádiofarmaka. Rádiofarmaka vyžadujúce vyššie koncentrácie farmaceutický aktívnych látok zahŕňajúcich biologicky aktívnu molekulu budú preto musieť byt po syntéze zriedené alebo purifikované tak, aby nedochádzalo k výskytu nežiadúcich vedľajších účinkov.
Identity a použité množstvá pomocných ligandov AL1 a AL2 budú určovat hodnoty premenných y a z. Premenné y a z môžu nezávisle nadobúdať celočíslové hodnoty od 1 do 2. Kombinácia hodnôt y a z bude opisovať koordinačnú sféru technécia, ktorá je tvorená najmenej piatimi a maximálne siedmimi donorovými atómami. Pri monodentátnych pomocných ligandoch Al2 môže z byt 1 alebo 2; pri bidentátnych alebo tridentátnych pomocných ligandoch AL2 sa z rovná 1. Pre monodentátne ligandy je výhodné, keď y sa rovná 1 alebo 2 a z sa rovná 1. Pre bidentátne alebo tridentátne ligandy je výhodné, ked y sa rovná 1 a z sa rovná 1.
Rádiofarmaka podľa vynálezu obsahujúce indium, med, gálium, striebro, paládium, ródium, zlato, platinu, vizmut, ytrium a dajaký lantanoid môžu byt ľahko pripravené zmiešaním soli daného rádionuklidu a farmaceutickej látky podľa vynálezu vo vodnom roztoku pri teplotách v rozmedzí 0 až 100’C. Tieto rádionuklidy sú zvyčajne získavané vo forme zriedených vodných roztokov v anorganických kyselinách ako napríklad kyseline chlorovodíkovej, dusičnej alebo sírovej. Tieto rádionuklidy sú zmiešané s jedným až približne 1000 ekvivalentmi farmaceutických látok podľa vynálezu rozpustenými vo vodnom roz93 ·· ·· ·· · • · · · 9 · • · · · · · · • · · · · · ·· ···· ·· ··· toku. Za účelom udržania pH v intervale 3 až 10 je zvyčajne použitý dajaký tlmivý roztok.
Metalofarmaka podlá vynálezu obsahujúce gadolínium, železo alebo mangán môžu byť lahko pripravené zmiešaním soli iónu paramagnetického kovu a farmaceutickej látky podlá vynálezu vo vodnom roztoku pri teplotách v rozmedzí 0 až 100“C. Tieto ióny paramagnetických kovov sú zvyčajne získavané vo forme zriedených vodných roztokov v anorganických kyselinách ako napríklad kyseline chlorovodíkovej, dusičnej alebo sírovej. Tieto ióny paramagnetických kovov sú zmiešané s jedným až približne 1000 ekvivalentmi farmaceutických látok podlá vynálezu rozpustenými vo vodnom roztoku. Za účelom udržania pH v intervale 3 až 10 je zvyčajne použitý dajaký tlmivý roztok.
Celkový čas prípravy bude závisieť od identity použitého iónu kovu, identít a množstiev ďalších reaktantov a postupu použitého pri príprave. Príprava môže byť ukončená (výťažok rádiofarmaka vyšší ako 80 %) za menej ako 1 minútu alebo môže vyžadovať viac času. Keď je nezbytné alebo žiadúce pripraviť metalofarmakon s vyššou čistotou, môžu byt reakčné produkty purifikované pri využití akéhokoľvek z počtu postupov odborníkom známych. Takými postupmi sú napríklad kvapalinová chromatografia, extrakcia v pevnej fáze, extrakcia rozpúšťadlom, dialýza alebo ultrafiltrácia.
Medzi tlmivé roztoky použitelné pri príprave metalofarmak a v diagnostických súpravách na prípravu rádiofarmak patrí (vyratúvanie nie je limitujúce) fosfát, citrát, sulfosalicylát a acetát. Úplnejši zoznam je uvedený v publikácii Pharmacopeia.
Medzi látky uľahčujúce lyofilizáciu použitelné pri príprave diagnostických súprav na prípravu rádiofarmak patrí (vyratúvanie nie je limitujúce) manitol, laktóza, sorbitol, dextrán, Ficoll a polyvinylpyrolidín (PVP).
·· ··
99 ·· • · · · ···· ·« 9 9 99 9 9 9 9 9 • · · · · · · · ·· · • · · · ··· · · ·· ·· ·· ···· ··
Medzi stabilizátory použiteľné pri príprave metalofarmak a v diagnostických súpravách na prípravu rádiofarmak patrí (vyratúvanie nie je limitujúce) kyselina askorbová, cysteín, monotioglycerol, hydrogensiričitan sodný, disiričitan sodný, kyselina gentizová a inozitol.
Medzi solubilizátory použiteľné pri príprave metalofarmak a v diagnostických súpravách na prípravu rádiofarmak patrí (vyratúvanie nie je limitujúce) etanol, glycerín, polyetylénglykol, propylénglykol, polyoxyetylén sorbitan monooleát, sorbitan monooleát, polysorbáty, blokové kopolyméry poly(oxyetylén)poly(oxypropylén)poly(oxyetylén) (Pluronics) a Iecitín. Vo výhodnom rozpracovaní sú používané polyetylénglykol a Pluronics.
Medzi bakteriostatika použiteľné pri príprave metalofarmak a v diagnostických súpravách na prípravu rádiofarmak patrí (vyratúvanie nie je limitujúce) benzylalkohol, benzalkóniumchlorid, chlórbutanol a metyl, propyl a butylparabén.
Niektorá zo zložiek diagnostickej súpravy môže rovnako plniť viac ako jednu funkciu. Redukčné činidlo môže rovnako slúžiť ako stabilizátor, tlmivý roztok ako transferový ligand, látka uľahčujúca stabilizáciu ako transferový alebo pomocný ligand alebo koligand a podobne.
Diagnostické rádiofarmaka sú aplikované intravenóznou injekciou a to zvyčajne vo fyziologickom roztoku a v dávke 1 až 100 mCi na 70 kg telesnej hmotnosti alebo výhodnejšie v dávke 5 až 50 mCi na 70 kg telesnej hmotnosti. Diagnostická detekcia je vykonávaná známymi spôsobmi.
Terapeutické rádiofarmaka sú aplikované intravenóznou injekciou a to zvyčajne vo fyziologickom roztoku a v dávke 0,1 až 100 mCi na 70 kg telesnej hmotnosti alebo výhodnejšie v dávke 0,5 až 5 mCi na 70 kg telesnej hmotnosti.
·· • ·
·· ·· • · · · • · ·· ··
Kontrastné látky podlá vynálezu pre magnetickú rezonanciu môžu byť použité spôsobom podobným pre iné látky pre MRI, pozri napríklad prihlášky US 5155215; US 5087440; Margerstadt a ďalší, Magn. Reson. Med., 3; strana 808, 1986; Runge a ďalší, Radiology, 166: strana 85, 1988; a Bousquet a ďalší, Radiology, 166: strana 693, 1988. Všeobecne je možné povedať, že pacientom sú intravenózne aplikované sterilné vodné roztoky kontrastných látok v dávkach v rozmedzí 0,01 až 1,0 mmol na kilogram telesnej hmotnosti.
Pri použití ako kontrastná látka pre rôntgenové žiarenie by mala zlúčenina podlá vynálezu obsahovať dajaký ťažký” atóm v koncentrácii 1 mM až 5 M, výhodnejšie potom 0,1 M až 2 M.
Dávky, aplikované intravenóznou injekciou, sa budú zvyčajne pohybovať v intervale 0,5 mmol/kg až 1,5 mmol/kg, výhodnejšie potom 0,8 mmol/kg až 1,2 mmol/kg. Diagnostická detekcia je vykonávaná známymi spôsobmi, výhodne potom róntgenovou počítačovou tomografiou.
Kontrastné látky podlá vynálezu pre ultrazvuk sú aplikované intravenóznou injekciou v množstve 10 až 30 μΐ echogénneho plynu na kilogram telesnej hmotnosti alebo infúziou rýchlosťou približne 3 μΐ/kg/min. Diagnostická detekcia je vykonávaná známymi sonografickými spôsobmi.
Vynález bude ďalej opísaný v oddiele Príklady uskutočnenia vynálezu. Tieto príklady vynález iba dokreslujú a nemali by byť chápané ako obmedzenie rozsahu vynálezu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
V tomto oddiele sú opísané reprezentatívny materiál a spôsoby, ktoré môžu byť využité pri príprave zlúčenín podlá vynálezu.
·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· · · · • · ·· · · · ·· • · * ··· · · · · · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
Manuálna syntéza peptidov na pevnej fáze bola vykonávaná v 25 ml polypropylénových filtračných skúmavkách zakúpených od BioRad Inc. alebo v 60 ml sklenených reakčných nádobkách zakúpených od spoločnosti Peptides International. Oxímová živica (úroveň substitúcie = 0,96 ramol/g) bola pripravená opísaným spôsobom (DeGrando a Kaiser, J. Org. Chem., 45:1295, 1980) alebo bola zakúpená od spoločnosti Novabiochem (úroveň substitúcie = 0,62 mmol/g). Všetky chemikálie a rozpúšťadlá boli použité bez ďalšieho prečistenia tak, ako boli dodané od spoločností uvedených v dfalšom texte. Aminokyseliny (chránené Boe) a iné aminokyseliny môžu byt zakúpené od spoločností Bachem Inc., Bachem Biosciences Inc. (Philadephia, PA), Advanced ChemTech (Louisville, KY), Peninsula Laboratories (Belmont, CA) alebo Sigma (St. Louis, MO). 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetrametylurónium hexafluórfosfát (HBTU) a TBTU boli zakúpené od spoločnosti Advanced ChemTech. Nmetylmorfolin (NMM), m-krezol, kyselina D-2-aminobutánová (Abu), trimetylacetylchlorid, diizopropyletylamín (DIEA),
1,2,4-triazol, dihydrát chloridu cínatého a tris(3-sulfonátfenyl)fosfín vo forme trisodnej soli (TPPTS) boli zakúpené od Aldrich Chemical Company. Bis(3-sulfonátfenyl)fenylfosf in vo forme disodnej soli (TPPDS) bol pripravený opísaným spôsobom (Kuntz E., prihláška US 4248802). (3-sulfonátfenyl)difenylfosfín vo forme sodnej soli (TPPMS) bol zakúpený od spoločnosti TCI America, Inc. Tricin bol získaný od spoločnosti Research Organics, Inc. Technécium-99m-pertechneát (99mTcO4_) bol získaný z generátoru TechenliteR 99Mo/99lnTc spoločnosti DuPont Pharma. In-lll-chlorid (IndichlorR) bol získaný od spoločnosti Amersham Medi-Physics, Inc. Sm-153chlorid a lutécium-177-chlorid boli získané z University of Missouri Research Reactor (MURR). Ytrium-90-chlorid bol získaný od spoločnosti Pacific Northwest Research Laboratories. Dimetylformamid (DMF), etylacetát, chloroform (CHC13), metanol (MeOH), pyridín a kyselina chlorovodíková (HCI) boli získané od spoločnosti Barker. Acetonitril, dichlórmetán (DCM), kyselina octová (HOAc), kyselina trifluóroctová (TFA), etyléter, • · · · • · φ • φ φ φ φ ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · φ φφ φφφφ ·· φ φ φφ φ trietylamín, acetón a síran horečnatý boli rovnako získané komerčne. Absolútny etanol bol získaný od spoločnosti Quantum Chemical Corporation.
Všeobecný postup syntézy peptidov na pevnej fáze pri využití Boc-aminokyselín a oxímovej živice - príprava cyklických peptidov
Vhodne chránené cyklické peptidy (opísané v Príkladoch uskutočnenia vynálezu) boli pripravené manuálnou syntézou peptidov na pevnej fáze pri použití Boc-teabag chémie (pozn. reagencie uzatvorené v čajovom zálievkovom vrecku; Houghron, 1985) na p-nitrobenzofenón oxímovej živici (DeGrado, 1982; Scarr a Findeis, 1990). Čajové vrecká” (5,0 x 5,0 cm) boli vyrobené z polypropylénových filtrov (0,75 mesh, Spectra Filters) a naplnené 0,5 g (alebo 1 g) oxímovej živice. Kondenzačná reakcia a odštepovanie chrániacich skupín boli vykonávané v polypropylénovom reaktore za stáleho trepania v stolnej trepačke. Pri syntéze medziproduktu chránený pentapeptid-živica bol najskôr na oxímovú živicu naviazaný BocGly-OH (úroveň substitúcie = 0,69 mmol/g alebo 0,95 mmol/g). Naviazanie Boc-Gly-OH na oxímovú živicu bolo vykonané použitím piatich ekvivalentov tejto aminokyseliny, HBTU a diizopropyletylamínu (DIPEA) v DMF. Naviazanie prvej aminokyseliny trvalo zvyčajne 1 až 2 dni. Po dôkladnom premytí boli úrovne substitúcie stanovované metódou pri využití kyseliny pikrovej (Stewart a Martin). Nezreagované oxímové skupiny na živici boli zablokované roztokom DIPEA a trimetylacetylchloridu v DMF. Chrániaca skupina Boe bola odstránená pomocou 50% alebo 25%
TFA v DCM (30 minút). Kondenzačné reakcie s ďalšími bocaminokyselinami boli uskutočňované podobným spôsobom (trepanie cez noc, 1 až 2 dni) a výťažky kondenzačných reakcií pre každú ďalšiu pridanú aminokyselinu boli stanovené metódou s využitím kyseliny pikrovej.
·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · · · · · • · · ··· · · · · · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
Všeobecný postup syntézy peptidov na pevnej fáze pri využití Fmoc-aminokyselín a HMPB-BHA živice - príprava cyklických peptidov
Vhodne chránené lineárne peptidové prekurzory cyklických peptidov (opísané v Príkladoch uskutočnenia vynálezu) boli pripravené automatizovanou syntézou peptidov na pevnej fáze pri použití Fmoc-chémie a HMPB-BHA živice s využitím syntetizéru Advanced ChemTech, model 90. Syntéza medziproduktov chránený pentapeptid-živica bola vykonávaná postupným naväzovaním (3 hodiny) Fmoc-aminokyselín na komerčne dostupnú živicu Fmoc-Gly-HMPB-BHA (Novabiochem, zvyčajne 2 gramy, substitúcia 0,47 až 0,60 mmol/g) pri použití 3 až 5 ekvivalentov jednotlivých aminokyselín, HBTU, HOBt a diizopropyletylamínu (DIPEA) v DMF. Chrániaca skupina Fmoc bola odstránená pomocou 20% piperidínu v DMF (30 minút). Peptidy boli z živice HMPB-BHA odštiepené pôsobením 1% roztoku TFA/DCM a peptidy boli zhromaždené v roztoku pyridínu v metanole (1:10). Lineárne chránené peptidy boli izolované odstránením rozpúšťadiel a reakčných činidiel vo vákuu a trituráciou surových peptidov v diétylétere.
Syntéza niekoíkých aminokyselín, ktoré nie sú komerčne dostupné, je opísaná v nasledujúcich odsekoch.
Syntéza Tfa-aminokyselin
Boc-HomoLys(Tfa)-OH a Boc-Cys( 2-N-Tfa-aminoetyl )-OH boli pripravené reakciou Boc-HomoLys-OH respektíve Boc-Cys(2-aminoetyl)-OH s etyltioltrifluóracetátom vo vodnom roztoku NaOH a purifikované rekryštalizáciou z etanolu.
Syntéza Boc-Orn(d-N-benzylkarbamoylu)
Do roztoku Boc-Orn (l mmol) v DMF (30 ml) bol pridaný benzylizokyanát (2,2 mmol) a diizopropylamín (3 mmol). Táto • · · • · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · ·· ···· • · ·· · reakčná zmes bola následne miešaná cez noc pri izbovej teplote. Prchavé zložky boli odstránené vo vákuu a surový materiál bol purifikovaný na chromatografickom stĺpci. Týmto postupom bol získaný požadovaný produkt.
Syntéza Boc-Orn(d-N-l-Tos-2-imidazolinylu)
Roztok Boc-Orn (10 mmol), l-tozyl-2-metyltio-2-imizolínu (12 mmol; ktorý bol pripravený reakciou komerčne dostupného 2-metyltio-2-imizolínhydrojodidu a anhydridu kyseliny ptoluénsulfónovej v metylénchloride (0°C až izbová teplota) v prítomnosti trietylamínu) a diizopropylamínu (12 mmol) bol miešaný pod spätných chladičom cez noc. Prchavé zložky boli odstránené a požadovaný produkt bol izolovaný chromatograf icky.
Syntéza Dap(b-(l-Tos-2-benzimidazolylacetylu))
K roztoku kyseliny l-Tos-2-benzimidazolyloctovej (10 mmol, pripravenej pri využití tozylchloridu za opísaných štandardných podmienok) a N-metylmorfolínu (10 mmol) v bezvodom DMF bol pridaný izobutylchlórformiát (10 mmol). Roztok bol 5 až 10 minút miešaný na íadovom kúpeli a následne bol pridaný rovnaký objem Boc-Orn-OH (10 mmol) a N-metylmorfolínu (20 mmol) v bezvodom DMF. Reakčná zmes bola miešaná cez noc pri izbovej teplote, prchavé zložky boli odstránené a požadovaný produkt bol izolovaný chromatografický. (Inou možnosťou je použitie Boc-Orn-OMe a izolovaný produkt je vystavený pôsobeniu vodného roztoku LiOH, čím sa získa produkt vo forme kyseliny).
Používané metódy analytickej HPLC sú opísané ďalej:
·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • ; ·· « · ··· • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
100
HPLC metóda č. 1
Prístroj: Kolóna: Detektor:
Prietoková rýchlosť Teplota kolóny: Objem vzorky: Mobilná fáza:
HP1050
Vydac C18 (4, 6 x 250 mm)
Detektor s diódovou mriežkou
220nra/500ref
1,0 ml/min
50°C μΐ
A: 0,1% TFA vo vode
B: 0,1% TFA v zmesi ACN/voda (9:1)
Gradient A: Čas (min) % A % B
0 80 20
20 0 100
30 0 100
31 80 20
Gradient B: Čas (min) % A % B
0 98 2
16 63,2 36,8
18 0 100
28 0 100
30 98 2
Príklad 1
Syntéza cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] -3aminopropyl)-Val} ·· ·· · ·· ·· • · · · ···· ··· • J ·· ·· · · · • · · · ··· · « __ ·· ·· ·· ···· ·· ·
- 101 -
Čast A: Príprava cyklo{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3aminopropyl)-Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-aminopropyl)-Val-Arg(Tos)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po piatich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,7474 g,
0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná íadová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50*C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu. Výsledkom bolo 444,4 mg požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C51H63Ngo12S, 1025,43; zmeraná molekulová hmotnosť, 1026,6 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 14,366 minút, čistota = 75%.
Čast B: Príprava soli cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl)Val} s kyselinou trifluóroctovou
102
Cyklo {Arg (Tos) -Gly-Asp (OBz 1) -D-Tyr (N-Cb z- 3 -aminopropyl) Val} (0,150 g, 0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35’C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Potom bola reakčná zmes ochladená na -50’C a ďalej miešaná 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1. Výsledkom bolo získanie 29,7 mg (23%) požadovaného produktu vo forme lyofilizátu. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C29H45N9°8' 647,3; zmeraná molekulová hmotnost, 648,5 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, R^. = 10,432 minút, čistota « 91%.
Preparatívna HPLC, metóda č. 1
Prístroj:
Kolóna:
Detektor:
Prietoková rýchlost Teplota kolóny: Mobilná fáza:
Rainin Rabbit; Software Dynamax Vydac C18 (21,2 mm x 25 cm)
Knauer VWM ml/min
Izbová teplota
A: 0,1% TFA vo vode
B: 0,1% TFA v zmesi ACN/voda (9:1) ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · · ··· • · · · · · · · ·· · • · · · ··· · · ·· ·· ·· ···· ·· ·
- 103
Čas (min) % A % B
16 63,2 36,8
Gradient B: 18 0 100
28 0 100
30 98 2
Časť C: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val}
Sol cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl)-Val} s kyselinou trifluóroctovou (0,020 g, 0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (9,5 μΐ, 0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2—[[[5— [[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0121 g, 0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 7 dní a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 8, 9 mg (37%) produktu vo forme lyofilizovanéj pevné látky (sol s TFA). HRMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C42H54N12O12S +H, 951,3783; zmeraná molekulová hmotnosť, 951,3767. Analytická HPLC, metóda č. IB,
Rt = 14,317 minút, čistota = 95%.
Príklad 2
Syntéza cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-18-amino-14aza-4,7,10-oxy-15-oxo-oktadekoyl)-3-aminopropyl)-Val} • · • · · • ·
- 104 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · • · · ·· ···· • · · ·· ···
Časť A: Príprava kyseliny 3-(N-(3-(2-(2-(3-((terc-butyloxy)karbonylamino)propyloxy)etoxy)etoxy)propyl)karbamoyl)-propánovej
Do DMF (15 ml) bol pridaný N-(3-(2-(2-(3-aminopropyloxy)etoxy)etoxy)propyl)(terc-butyloxy)formamid (1,5 g, 4,68 mmol). K tomuto roztoku bol pridaný pyridín (15 ml), anhydrid kyseliny jantárovej (0,47 g, 4,68 mmol) a následne potom dimetylaminopyridín (62 ml, 0,468 μπιοί). Reakčná zmes bola miešaná cez noc pri 100’C. Reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení bol rozpustený vo vode, pomocou IM HCI okyslený na pH 2,5 a extrahovaný etylacetátom (3x). Spojené extrakty organickej fázy boli vysušené prídavkom MgSO4 a sfiltrované. Filtrát bol skoncentrovaný vo vákuu a získaných bolo 1,24 g produktu vo forme oleja (63%). Tento produkt bol použitý bez ďalšej purlfikácie. 1H NMR (CDC13) 3,67-3,45 (m, 11H), 3,41-3,28 (m, 2H), 3,21-3,09 (m, 2H) , 2,95-2,82 (m, 2H), 2,80-2,35 (m, 3H), 1,81-1,68 (m, 4H) , 1,50-1,35 (s, 9H); ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C19H36N2O8, 420,2471; zmeraná molekulová hmotnosť, 419,3 [M-H]-l.
·· ·· • · · • ·
- 105 • · · · • · ·· • · · · • · · ·· ·· ·· ·· • · · · • 4 · • · · ·· ····
Časť B: Príprava sukcínimid esteru kyseliny 3—(N—(3-(2-(2(3-( (terc-butyloxy)-karbonylamino)propyloxy)etoxy)etoxy)propyl)karbamoyl)propánovej
K roztoku kyseliny 3-(N-(3-(2-(2-(3-((terc-butyloxy)karbony lamino) propyloxy) etoxy) etoxy) propyl) karbamoyl) propánovej (1,12 g, 2,66 mmol), N-hydroxysukcínimidu (0,40 g,
3,46 mmol) a Ν,Ν-dimetylformamidu (40 ml) bol pridaný l-(3dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid (0,67 g, 3,46 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pri izbovej teplote počas 48 hodín. Reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení bol rozpustený v 0,lM HCl a extrahovaný etylacetátom (3x). Spojené extrakty organickej fázy boli premyté vodou (2x), nasýtené chloridom sodným, vysušené prídavkom MgSO4 a sfiltrované. Filtrát bol skoncentrovaný vo vákuu a bol získaný 1,0 g produktu vo forme oleja (73%). Tento produkt bol použitý bez ďalšej purifikácie. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre ^23Η39Ν3°10' 517,2635; zmeraná molekulová hmotnost, 518,2 [M+H]+l.
Časť C: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2(3-((terc-butyloxy)-karbonylamino)propyloxy)etoxy)etoxy)propyl)karbamoyl)-propánamido)propyl)-Val} • · ·· • · · · • · *
106 ·· • · ·· ···· • · ·· ·
TFAHaN
NH O
II II ^nz^zV'nzV°
nh-Boc
Sol cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl)-Val} s TFA (0,040 g, 0,0457 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml). Najskôr bol pridaný trietylamín (19,1 μΐ, 0,137 mmol) a po 5 minútach miešania potom sukcínimid ester kyseliny 3-(N-(3-(2-(2-(3((terc-butyloxy) -karbonylamino) propyloxy) etoxy) etoxy) propyl) karbamoyl)propánovej (0,0284 g, 0,0548 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pod atmosférou dusíka počas 48 hodín a následne skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte, získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý etylacetátom a vysušený vo vysokom vákuu. Surový produkt bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 7,4 mg (14%) požadovaného produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C48H79N11°15' 1049,58; zmeraná molekulová hmotnost, 1050,5 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^. = 20,417 minút, čistota = 100%.
Časť D; Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2(3-(amino)propyloxy)etoxy)etoxy)propyl)karbamoyl)propánamido) propyl)-Val}
Cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(( terc-butyloxy) karbonylamino) propyloxy) etoxy) etoxy) propyl) karbamoyl) propánamido) propyl)-Val} (6,0 mg, 0,00515 mmol) bol rozpustený v metylénchloride (l ml) a k tomuto roztoku bola pridaná kyse·· • · · • ·
- 107 • · • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · ·· • · · ·· ···· • · ·· · lina trifluóroctová (1 ml). Roztok bol miešaný počas 2 hodin a následne skoncentrovaný vo vysokom vákuu do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v dietylétere, získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom a vysušený vo vysokom vákuu, čím bolo získaných 6,0 mg (98%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c43H7iNn°i3, 949,52; zmeraná molekulová hmotnosť, 950,6 [M+Hj+1. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^. = 14,821 minút, čistota = 73%.
Časť E: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-[2-[[[5-[karbonyl ]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]18-amino-14-aza-4,7,10-oxy-15-oxo-oktadekoyl) -3-aminopropyl) Val}
Cyklo {Arg-Gly-Asp-D-Tyr (3- (3- (N- (3- (2- (2- (3- (amino) propyloxy) etoxy) etoxy) propyl) karbamoyl) propánamido) propyl) Val} (5,0 mg, 0,00424 mmol) bol rozpustený v dimetylformamide (1 ml). Bol pridaný trietylamín (1,8 μΐ, 0,0127 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[[[5—[[(2,5-dioxo-l -pyrolidinyl) oxy ] karbonyl ] -2-pyridinyl ] hydrazono ] metyl ] benzénsulfónovej (2,2 mg, 0,00509 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 24 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 2,2 mg (38%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (sol s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C56H80N14O17S, 1252,6; zmeraná molekulová hmotnosť, 1253,7 (M+H+). Analytická HPLC, metóda č. IB, R^. =
17,328 minút, čistota = 100%.
Príklad 3
Syntéza [ 2—[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulf ónová kyselina ] -Glu(cyklo {D-Tyr (3-aminopropyl) -Val-Arg-GlyAsp})-cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp} • · ··
108 ·· ·· • · · · • · · • · ·· ···· ··
ο ο
Časť A: Príprava Boc-Glu(cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-ArgGly-Asp)) -cyklo {D-Tyr (3-aminopropyl) -Val-Arg-Gly-Asp}
Cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp} (0,040 g, 0,0457 mmol) bol rozpustený v dimetylformamide (2 ml). Bol pridaný trietylamín (19,1 μΐ, 0,137 mmol) a reakčná zmes bola miešana počas 5 minút. Následne bol pridaný Boc-Glu(OSu)-OSu (0,0101 g, 0,0229 mmol) a reakčná zmes bola miešaná pod dusíkem počas 18 hodín. Reakčná zmes bola následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleje. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte, získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý etylacetátom a vysušený vo vysokom vákuu, čím bolo získaných 38,0 mg (55%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c68Hio3N19°2O' 1505»76; zm®raná molekulová hmotnosť, 1504, 9 [M-H]-l. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 19,797 minút, čistota = 73%.
Časť B: Príprava soli Glu(cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-ArgGly-Asp) -cyklo { D-Tyr (3-aminopropyl) -Val-Arg-Gly-Asp} s kyselinou TFA
NH
TFA
o o ··
109 ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· I · ··· • · · · · · · · ·· · • · · · · « · · · ·· ·· ·· ···· ·· ·
Boc-Glu(cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp})cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp} (0,035 g, 0,0232 mmol) bol rozpustený v metylénchloride (1 ml). Bola pridaná kyselina trifluóroctová (1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 2 hodín, vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja a triturovaná éterom. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom a vysušený vo vysokom vákuu, čím bolo získaných
30,7 mg (76%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C63H95N19°18' 1405,71? zmeraná molekulová hmotnosť, 1404,7 [M-H]-l. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^ =
15, 907 minút, čistota = 77%.
Časť C: Príprava [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp))-cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-ValArg-Gly-Asp)
K roztoku Glu(cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp))cyklo{D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp) (0,025 g, 0,0143 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (6,0 μΐ, 0,0429 mmol) a reakčná zmes bola miešaná počas 5 minút.
Bola pridaná sodná soí kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0076 g, 0,0172 mmol), reakčná zmes bola miešaná počas 5 dní a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 12, 0 mg (43%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c76H104N22°22S' 1708» 7» zmeraná molekulová hmotnosť, 1710,1 (M+H+). Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 17,218 minút, čistota = 94%.
110 ·· · • · · · • · ·· • · · · • · · · • · · · ·· ·· • · · · • · · • · ·· ···· • · ··
Príklad 4
Syntéza cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys( [ 2—[ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydraz}ono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])
Časť A: Príprava cyklo{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(Bzl)Lys(Cbz)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp(OBzl)-D-Tyr(Bzl)-Lys(Z)-Arg(Tos)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2Cl2).
Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,8711 g, 0,44 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (47, 1 μΐ, 0,823 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 60 *C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu. Výsledkom bolo 653,7 mg požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C56H65N9°1S· 1087 f45' zmeraná molekulová hmotnost, 1088,7 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 17, 559 minút, čistota = 82%.
··
111 • · • ··
Čast B: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys}
TFAH2N
H
OH
TFA-H2N
Cyklo{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(Bzl)-Lys(Cbz)} (0,200 g, 0,184 mmol) bol rozpustený v kyseline trif luóroctove j (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná 1 hodinu. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1. Výsledkom bolo získanie 15,2 mg (10%) požadovaného produktu vo forme lyofilizátu. HRMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C27H41N9°8 +H' 620,3156; zmeraná molekulová hmotnosť, 620,3145. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 8,179 minút, čistota = 100%.
Čast C: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys([ 2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
Sol cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys) s kyselinou trifluóroctovou (0,010 g, 0,0118 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml).
Bol pridaný trietylamín (5,0 μΐ, 0,0354 mmol) a po 5 minútach miešania sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy ]karbonyl]-2-pyridinyl ]hydrazono] metyl] -benzénsulf ónovej (0,0062 g, 0,0142 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 20 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja.
·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· • · ·· · · ··· • · · ··· · · ·· · ···· ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
112
Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 6,2 mg (46%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. HRMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c40h50n12°12s +h' 923,3470; zmeraná molekulová hmotnosť, 923,3486. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 11,954 minút, čistota = 100%.
Príklad 5
Syntéza cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2—[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazo no]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
Časť A: Príprava cyklo(Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe-Lys(Cbz)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp(OBzl)-D-Phe-Lys(Z)-Arg(Tos)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CHgC^)· Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,7053 g, 0,44 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (43,0 μΐ, 0,750 mmol) a re_ akčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 60°C.
φ φ φ • φ
113
ΦΦ ·· • · · · • · ·· • φ φ · • · · · ·· ·· • Φ φφ • φ φ φ • · · φφ φ φ φφ φ
Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu. Výsledkom bolo 510,3 mg požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre , 981, 40; zmeraná molekulová hmotnosť, 982,6 [M+HJ+1. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 15,574 minút, čistota = 89%.
Časť B: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)
Cyklo{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe-Lys(Cbz)} (0,200 g, 0,204 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10°C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -50“C a pri tejto teplote miešaná 1 hodinu. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý diétyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1. Výsledkom bolo získanie 121,1 mg (71%) požadovaného produktu vo forme lyofilizátu. HRMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C27H41N9°7 +H, 604,3207; zmeraná molekulová hmotnosť, 604,3206. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 11,197 minút, čistota = 100%.
• ·
114 • · ·
9 99 ·9 • · · · ·· ·· ··
Čaši C: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
Sol cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys} s kyselinou trifluóroctovou (0,040 g, 0,0481 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml).
Bol pridaný trietylamín (20,1 μΐ, 0,144 mmol) a po 5 minútach miešania sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0254 g, 0,0577 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 20 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja.
Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výiažkom 38,2 mg (78%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. HRMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre c40h50n12°11s +H' 907,3521; zmeraná molekulová hmotnost, 907,3534. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 14,122 minút, čistota = 91%.
Príklad 6
Syntéza [2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
HO
OH
HN.
Čast A: Príprava Boc-Glu(0Su)-0su
SuO.
NH-Boc .OSu *i
O ·· ·· ·· ·· ·· · • ·· · · ·· · · ··· ···· · · · · · • ·· ··· · · ·· · · ···· ··· ·· · ·· ·· ·· ···· ·· ··
115
K roztoku Boc-GluOH (8,0 g, 32,25 mmol), N-hydroxysukcínimidu (8,94 g, 77,64 mmol) a DMF (120 ml) bol pridaný l-(3dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid (14,88 g, 77,64 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pri izbovej teplote počas 48 hodín. Reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení bol rozpustený v O,1M HCl a extrahovaný etylacetátom (3x). Spojené extrakty organickej fázy boli premyté vodou, nasýtené hydrogénuhličitanom sodným, nasýtené chloridom sodným, vysušené prídavkom MgSO^ a sfiltrované. Filtrát bol skoncentrovaný vo vákuu a purifikovaný HPLC s kolónou s obrátenou fázou (kolóna Vydac C18, 18 až 90% gradient acetonitrilu obsahujúci 0,1% TFA, R^. = 9,413 minút) s výťažkom 8,5 g (60%) požadovaného produktu vo forme bieleho prášku. ^H NMR (CDC13): 2,98-2,70 (m, 11H), 2,65-2,25 (m, 2H), 1,55-1,40 (s, 9H);
ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre Ci8H23N3°10' 441,1383; zmeraná molekulová hmotnosť, 459,2 [M+NH4]+1.
Časť B; Príprava Boc-Glu(cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
K roztoku cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe) (0,050 g, 0,0601 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (25,1 μΐ, 0,183 mmol). Po 5 minútach miešaní bol pridaný Boc-Glu(OSu)-OSu (0,0133 g, 0,0301 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pod atmosférou dusíka počas 20 hodín, skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja a tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý etylacetátom a vysušený vo vysokom vákuu s výťažkom 43,7 mg (44%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C64H95N19°18' 1417»71 * zmeraná molekulová hmotnosť, 1418,8 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 19,524 minút, čistota = 73%.
Časť C: Príprava soli Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe) s kyselinou trifluóroctovou • · • · • 9
- 116 ·· ·· ·· • · · · • · ·· • · · φ · · · ·· ·· • · · ·· ··· v--ä·
NH ΝΗ Ο γΛνΗ/ΓΗΑ TFA.HaNzU'N‘^z><'N^Y£ ο ο κ °γ%Η Υΐ“ ν'-----νΝ-Ν+Ο °
Η 1 Η Η * Η
NHa-TFA \__
K roztoku Boc-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe) (0,040 g, 0,0243 mmol) v metylénchloride (1 ml) bola pridaná kyselina trif luóroctová (1 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 2 hodín, skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja a tento olej bol triturovaný v dietylétere. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom a vysušený vo vysokom vákuu s výťažkom 39,9 mg (100%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre c59H87Nig°i6» 1317,66; zmeraná molekulová hmotnost,
1318,9 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 15,410 minút, čistota = 73%.
Časť D: Príprava [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-AspD-Phe))-cyklo{PLys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
K roztoku Glu(cyklo {Lys-Arg-Gly-Asp—D-Phe})-cyklo {LysArg-Gly-Asp-D-Phe} (0,030 g, 0,0183 mmol) v dimetylformamide (3 ml) bol pridaný trietylamín (7,6 μΐ, 0,0549 mmol) a reakčná zmes bola miešaná počas 5 minút. Bola pridaná sodná sol kyseliny 2-[ [ C5— [ [ (2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0096 g, 0,0220 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 11,0 mg (32%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C72Hg6N22O2QS, 1620,7; zmeraná molekulová hmotnosť, 1620,1 (M-H+). Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 16,753 minút, čistota = 91%.
·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· • · · · ·· · ·· • ·· ··· · · ·· · • · · · ··· · · ·· ·· ······ ··
117
Príklad 7
Syntézy C2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulf ónová kyselina]-Phe-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
Časť A: Príprava Phe-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe)
Roztok Glu(cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))-cyklo{Lys-Arg-GlyAsp-D-Phe) (23,4 mg, 0,014 mmol) a trietylamínu (7, 8 μΐ, 0,56 mmol) v DMF (2 ml) bol miešaný počas 5 minút. K tomuto roztoku bol pridaný Boc-Phe-OSu (5,1 mg, 0,014 mmol) a reakčná zmes bola miešaná cez noc pod atmosférou dusíka pri izbovej teplote. DMF bol odstránený vo vákuu a zvyšok po odparení bol rozpustený • ·
118 ·· ·· ·· ·· ·· • · · ·· ·· ···· ·· v TFA (1,5 ml) a metylénchloridu (1,5 ml). Získaný roztok bol miešaný počas 2 hodín a skoncentrovaný vo vákuu s výťažkom 31 mg požadovaného produktu vo forme soli s TFA. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C68Hg6N20017, 1464,7; zmeraná molekulová hmotnosť, 1465,6 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 15,48 minút, čistota = 95%.
Časť B: Príprava [ 2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl] benzénsulfónová kyselina]-Phe-Glu(cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
K roztoku Phe-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe) (0,030 g, 0,016 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (9 μΐ, 0,064 mmol) a reakčná zmes bola miešaná počas 5 minút. Bola pridaná sodná soí kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0099 g,
0,0220 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná. Zvyšok po odparení bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 7 mg (22%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (soí s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c8iHi05N23°21S/ 1767,8; zmeraná molekulová hmotnosť, 1768,8 (M-H+). Analytická HPLC, metóda č. IB, R^ = 17,68 minút, čistota = 99%.
Príklad 8
Syntéza cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2—[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
NH
119 ·· ·· • · · • · ·· ·· ·· • · · · • · · ·· ·· • · ·· ···· ··
Časť A: Príprava cyklo {Arg (Mtr)-Gly-Asp(otBu)-D-Nal-Lys( Boe)}
N-Mlr
Boc-NH
Peptid Asp(OtBu)-D-Nal-Lys(Boc)-Arg(Mtr)-Gly bol pripravený automatizovanou syntézou peptidov na pevnej fáze s využitím Fmoc chémie. Do 100 ml banky s kruhovým dnom bolo vložené HBTU (349 mg, 0,92 mmol) a DMF (10 ml). Tento roztok bol miešaný pri 60“c počas 5 minút. K tomuto roztoku bol pridaný Asp(OtBut)-D-Nal-Lys(Boc)-Arg(Mtr)-Gly (0,648 g) a Huningova báza (0,34 ml, 1, 97 mmol) v DMF (10 ml) a získaná zmes bola miešaná pod dusíkom 4 hodiny pri teplote 60’C. Rozpúšťadlo bolo následne odstránené vo vákuu, a zvyšok po odparení bol triturovaný v etylacetáte. Získaná pevná látky bola sfiltrovaná, premytá etylacetátom (3 x 5 ml) a vysušená vo vákuu s výťažkom 520 mg (86%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C50H71N9O12S, 1021,5? zmeraná molekulová hmotnosť, 1022,5 [M+H)+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 15,91 minút, čistota = 99%.
Časť B: Príprava soli cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys s TFA)
120 e· ·· ·· ·· «· · • · · · · ·· · · ··· ···· · · · · · · • · · ··· · · ·· · · • · · · · · · · · · ·· ·· ·· ···· ·· ···
Roztok cyklo{Arg(Mtr)-Gly-Asp(OtBut)-D-Nal-Lys(Boc)} (500 mg, 0,49 mmol), TFA (7 ml), triizopropylsilánu (0,25 ml) a vody (0,25 ml) bol pri izbovej teplote miešaný 18 hodín pod atmosférou dusíka. Rozpúšťadlá boli odstránené vo vákuu (cez 3 hodiny), zvyšok po odparení bol triturovaný v dietylétere s výťažkom 426 mg (98%) požadovaného produktu vo forme soli s TFA. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C31H43N9°7' 653,3; zmeraná molekulová hmotnosť, 654,3 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, R^ = 13,30 minút, čistota = 97%.
Časť C: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazo}no]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
Soľ cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys) s TFA (0,056 g, 0,064 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml). Bol pridaný trietylamín (27 μΐ, 0,19 mmol) a po 5 minútach miešania bola pridaná sodná soľ kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,039 g, 0,089 mmol). Reakčná zmes bola miešaná cez noc pod dusíkom a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 49, 3 mg (72%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (soľ s TFA). ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C44H52N12°11S' 956f4' zmeraná molekulová hmotnosť, 957,5 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 16,19 minút, čistota = 99%.
Príklad 9
Syntéza [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal))cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}
121
·· ·· • · ·· ··
• • • · • • • · • · • ·
• • ·· • • • • ·
•
• ·· • • · • · • ·· • • ···· • · ·· ··
Časť A: Príprava Boc-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal))cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}
K roztoku cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal) (0,052 g,
0,059 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (25 μΐ). Po 5 minútach miešania bol pridaný Boc-Glu(OSu)-OSu (0,013 g, 0,029 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pod atmosférou dusíka počas 20 hodín, skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja a tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý etylacetátom a vysušený vo vysokom vákuu s výťažkom 35,2 mg požadovaného surového produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c72h99n19°18' i517/7» zmeraná molekulová hmotnosť, 760,1 [M+2H]+2. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^. = 21,07 minút, čistota = 65%.
Časť B: Príprava Glu( cyklo (Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal} )-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}
HOOC
YhV' /--...NH HN ľ ^=°
O^NH HN—< ~
O
H'
NH ‘N^nH2 H *
122 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· ···· ·· · · e • ·· ··· · · ·· · ·· ·· ·· ···· ·· ···
K roztoku Boc-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal))cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal} (35, 2 mg) v metylénchloride (1,5 ml) bola pridaná kyselina trifluóroctová (1,5 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 2 hodín, skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja a tento olej bol triturovaný v dietylétere. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom a vysušený vo vysokom vákuu s výťažkom 34,9 mg požadovaného surového produktu vo forme soli s TFA. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre Cg7HgiNigo16, 1417,69? zmeraná molekulová hmotnosť, 1418,7 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^ = 19, 1 minút, čistota = 62%.
Časť C: Príprava [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl ] -benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-DNal})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}
K roztoku Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-cyklo(LysArg-Gly-Asp-D-Nal} (34,9 mg) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (10 μΐ, 0,074 mmol) a reakčná zmes bola miešaná počas 5 minút. Bola pridaná sodná sol kyseliny 2[[[5—[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (15,2 mg, 0,0344 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 3 mg produktu vo forme soli s TFA. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre csohioon22°2Os· 1720»7» zmeraná molekulová hmotnosť, 1722,6 (M+H)+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, R*. = 19, 78 minút, čistota = 92%.
Príklad 10
Syntéza cyklo {Arg-Gly-Asp-Lys( [ 2— [ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] )-D-Val}
9 9
9
123
99
9 9 9
9 9 • · ·· ····
NH
O
Časť A: Príprava cyklo{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Lys(Cbz)-D-Val)
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie Boc-Asp(OBzl)-Lys(Z)-D-Val-Arg(Tos)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12)· Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,3229 g, 0,44 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (10 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (33,3 μΐ, 0,582 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 65”C. Potom bola živice sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom, vysušená vo vysokom vákuu a purifikovaná preparatívnou HPLC, metóda č. 2, s výťažkom 93,0 mg požadovaného produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C45H5gNgo11s, 933,41; zmeraná molekulová hmotnosť, 934,5 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 14,078 minút, čistota = 85%.
124
·· ·· ·· ·· ·· ·
• • • · • • • · • · • ·
• • ·· • • • • ·
•
• • • * • • • • ·
·· ·· ·· • ··· ·· • ·
Preparatívna HPLC, metóda č. 2
Prístroj:
Kolóna:
Detektor:
Prietoková rýchlosť Teplota kolóny: Mobilná fáza:
Rainin Rabbit; Software Dynamax Vydac C18 (21,2 mm x 25 cm)
Knauer VWM ml/min
Izbová teplota
A: 0,1% TFA vo vode
B: 0,1% TFA v zmesi ACN/voda (9:1)
Čas (min) % A % B
0 80 20
Gradient 20 0 100
30 0 100
31 80 20
Časť B: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-Lys-D-Val}
Cyklo(Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Lys(Cbz)-D-Val} (0,080 g, 0,0856 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10ec. K tomuto roztoku bola pri teplote -10“C po kvapkách pridávaná kyselina trifluôrmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml)
125
• · • • • • ·· • · ·· ·· • • ·· • · · ·· ·
• • • • • ·
• •
•
• • • · • • • • •
·· ·· ·· ···· • · • ·
a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C.
Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý éterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1. Výsledkom bolo získanie 44,2 mg (66%) požadovaného produktu vo forme lyofilizátu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c23H41N9°7f 555,31; zmeraná molekulová hmotnosť, 556,3 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 8, 959 minút, čistota = 92%.
Časť C: Príprava cyklo{Arg-Gly-Asp-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Val}
K roztoku cyklo{Arg-Gly-Asp-Lys-D-Val} (0,036 g, 0,0459 mmol) v dimetylformamide (3 ml) bol pridaný trietylamín (19, μΐ, 0,0138 mmol) a po 5 minútach miešania potom najskôr metylsulfoxid (0,7 ml) a následne sodná sol kyseliny 2—[[[5— [[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0243 g, 0,0551 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 20 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1 s výťažkom 13,9 mg (31%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. HRMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C36H5oNi2°llS 859,3443; zmeraná molekulová hmotnosť, 859,3503. Analytická HPLC, metóda č. 1B,
Rt = 13,479 minút, čistota = 92%.
Príklad 11
Syntéza [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo(Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}
126 ·· ο
ο ·· ··
Η,Ν Ν ’ Η
Časť A: Príprava Boc-Glu(cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}
K roztoku cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp} (0,400 g, 0,51 mmol) v dimetylformamide (7 ml) bol pridaný trietylamín (0,21 ml, 1,53 mmol). Po 5 minútach miešania bol pridaný Boc-Glu(OSu)-OSu (115 mg, 0,26 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pod atmosférou dusíka počas 20 hodín a skoncentrovaná do formy oleja. Získaný produkt bol čiastočne purifikovaný preparatívnou RP-HPLC s výťažkom 124 mg. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c56H95Nig°i8' 1321»71· zmeraná molekulová hmotnosť, 1322,6 [M+H]+l.
Časť B: Príprava Glu(cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp)
K roztoku Boc-Glu (cyklo {Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-cyklo (Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp) (0,124 g) v metylénchloride (5 ml)
127 ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ·· ···· ·· ··· • · · · · · · · ·· · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· bola pridaná kyselina trifluóroctová (5 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 2 hodín, skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja a tento olej bol triturovaný v dietylétere. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom a vysušený vo vysokom vákuu s výťažkom 16,2 mg požadovaného produktu (vo forme soli s TFA) po RP-HPLC. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C51H87N19O16, 1221,66; zmeraná molekulová hmotnost,
1222.6 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 11,43 minút, čistota = 93%.
Čast C: Príprava [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-D-Val-ArgGly-Asp })-cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}
K roztoku Glu(cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp))-cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp) (0,016 g, 0,01 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (4,2 μΐ) a reakčná zmes bola miešaná počas 5 minút. Bola pridaná sodná soí kyseliny 2-[ [ C5— [ [ (2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0063 g, 0,014 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC, metóda č. 1, a získaný bol požadovaný produkt vo forme soli s TFA. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C64Hg6N22020s' 1524,7; zmeraná molekulová hmotnost,
1525.7 (M+H)+l. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 13,20 minút, čistota = 99%.
Príklad 12
Syntéza {cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridiny1]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina)-3-aminopropyl )-D-Asp-Gly} ·· ·· ·· ·· • * · · ···· ··· • · ·· · · ··· • · · ··· · · ·· · • · · · ··· · · ·· ·· ·· ···· ·· ·
128 ··
Čast A: Príprava cyklo{Arg(Tos)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocArg (Tos)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Glyoxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (50% TFA v CH2C12)· Po ôsmich premytiach DCM bola živica neutrálizovaná 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a cez noc vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,08 g, 0,36 mmol/g) bola následne suspendovaná v N,N-dimetylformamide (12 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (67 ml, 1,16 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 55°c. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (3 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola purifikovaná HPLC na obrátenej fáze (kolóna Vydac C18, až 90% gradient acetónitrilu obsahujúci 0,1% TFA, Rj. = 15,243 minút) s výťažkom 101 mg požadovaného produktu vo forme bieleho prášku (30%). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c44H57N0°12s' 935z3847» zmeraná molekulová hmotnosť, 936,5 [M+H]+l.
Časť B: Príprava cyklo{Arg-D-Val-D-Tyr(3-aminopropyl)-D-AspGly} • · • · • ·
129 ·· ·· ·· • · · ·· ·· • · ·· ···· ·· cf3co2h Nh 5 |
Η2ΝΛΝζΧ/γ
OH
Chránený cyklický peptid cyklo(Arg(Tos)-D-Val-D-Tyr(NCbz-3-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly} (90 mg, 0,0961 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,95 ml) a roztok bol ochladený na -10’C v kúpeli suchý lad/acetón. K tomuto roztoku bola pridaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,16 mmol) a následne anizol (190 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -16’C. Kúpe! suchý íad/acetón bola následne ochladená na -35C a bol pridaný vychladený éter (40 ml). Reakčná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote -35*C, potom ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, rozpustený v zmesi voda/acetonitril (1:1), lyofilizovaný a purifikovaný HPLC na obrátenej fáze (kolóna Vydac C18, 1,8 až 90% gradient acetonitrilu obsahujúci 0,1% TFA, R^. = 13,383 minút) s výťažkom 17 mg uvedeného produktu (27%). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C29H45N9°8' 647,3391; zmeraná molekulová hmotnosť, 648,2 [M+H]+l.
Časť C: Príprava (cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina)-3aminopropy1)-D-Asp-Gly}
K roztoku cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(3-aminopropyl)-D-Asp-Gly) (14 mg, 0,0216 mmol) v N, N-dimetylformamidu (2 ml) bol pridaný trietylamín (15 ml, 0,108 mmol) a roztok bol miešaný počas 10 minút pri izbovej teplote. Bola pridaná sodná soí kyseliny 2-[[[5—[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]φ φ
- 130 • · φ φ · φ • φ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ · · φ φ φφ φφφφ φ φ φφ hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (11 mg, 0,0260 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín. Táto reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení bol purifikovaný HPLC na obrátenej fázi (kolóna Vydac C18, 1,8 až 90% gradient acetonitrilu obsahujúci 0,1% TFA, Rt = 16,264 minút) s výťažkom 10 mg požadovaného produktu vo forme bieleho prášku (49%). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C42H54N12O12S, 950,3705; zmeraná molekulová hmotnosť, 951,3 [M+H)+l.
Príklad 13
Syntéza cyklo{D-Lys( C 2—[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg} o
OH
Časť A: Príprava cyklo{D-Lys(Cbz)-D-Phe-D-Asp(OBzl)-Gly-Arg(Tos)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocArg(Tos)-D-Lys(Cbz)-D-Phe-D-Asp(OBzl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,93 g, 0,44 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ľadová kyselina octová (77 μΐ) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 60'C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom • · • · · · • · ·
- 131 • · • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · · ·· ···· vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom, vysušená vo vysokom vákuu a purifikovaná preparatívnou RP-HPLC (výťažok = 252 mg). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C^gHggNgO^S, 981,40; zmeraná molekulová hmotnosť, 982,3 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 14,577 minút.
Časť B: Príprava soli cyklo(D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg) s TFA
Cyklo{D-Lys(Cbz)-D-Phe-D-Asp(OBzl)-Gly-Arg(Tos)} (0,152 g, 0,155 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctove j (1,55 ml) a roztok bol ochladený na -16’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -16’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (1,86 ml). Následne bol pridaný anizol (0,31 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -16’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35C a pri tejto teplote miešaná 20 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý éterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 69 mg (53%) požadovaného produktu vo forme lyofilizátu (sol s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C27H41N9°7 +H' 604»3207; zmeraná molekulová hmotnosť, 604,4. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 10,35 minút, čistota = 93%.
časť C: Príprava soli cyklo{D-Lys([2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Phe-DAsp-Gly-Arg) s TFA
- 132 ·· ·· ·· • · · · ···· ·· * · ♦· · · ··· • · · ··· · · ·· · • · · · · · · ·· ·· ·· ·· ···· ··
Soí cyklo(D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg} s TFA (0,056 g,
0,0673 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml). Bol pridaný trietylamín (28 μΐ, 0,202 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná soí kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,029 g, 0,0673 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 70 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleje. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 14 mg (78%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (soí s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c4oH5ON12°lls +H, 907,3521? zmeraná molekulová hmotnosť, 907,3. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^ = 14,17 minút, čistota = 99%.
Príklad 14
Syntéza [ 2—[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulf ónová kyselina ]-Glu( cyklo (D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-cyklo {D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}
Časť A: Príprava Boc-Glu( cyklo (D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg) )cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg} • e • · • ·
133 «· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · « ·· ·· ·· ·· • · · · • · I • · · ·· ····
K roztoku cyklo(D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg) (0,190 g,
0,228 mmol) v dimetylformamide (5 ml) bol pridaný trietylamín (95 μΐ, 0,684 mmol). Po 5 minútach miešania bol pridaný Boc-Glu(OSu)-OSu (0,050 g, 0,114 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pod atmosférou dusíka počas 20 hodín, skoncentrovaná vo vysokom vákuu do formy oleja a tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý etylacetátom a vysušený vo vysokom vákuu s výťažkom 172 mg požadovaného surového produktu. ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre c64H95Ni9°i8· 1417,71; zmeraná molekulová hmotnosť, 1418,7 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 16,8 minút.
časť B: Príprava Glu(cyklo(D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg} )-cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}
•NH HN O
O '—COOH
K roztoku surového Boc-Glu(cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-GlyArg}) cyklo {D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg} (0,172 g) v metylénchloride (4,5 ml) bola pridaná kyselina trifluóroctová (4,5 ml). Reakčná zmes bola miešaná 2 hodiny, vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja a tento olej bol triturovaný v dietylétere. Získaný produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný RP-HPLC s výťažkom 38 mg požadovaného produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (soľ s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre • ·
- 134 ·· ·· ·· ·· • ·· · · ·· v • · ·· » · ·
9 9 9 9 9 9 9 9 ·· ·· ·· ···· ·· C59H87N19°16' 1317»66· zmeraná molekulová hmotnosť, 1318,9 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 13,06 minút, čistota = 93%.
Čast C: Príprava [2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl ]-benzénsulfónová kyselina ]-Glu(cyklo{D-Lys-D-Phe-D-AspGly-Arg}) -cyklo {D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}
NH
E
N NH2 H
K roztoku Glu(cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg) )-cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg} (0,025 g, 0,015 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (6,3 μΐ, 0,045 mmol) a reakčná zmes bola miešaná počas 5 minút. Bola pridaná sodná sol kyseliny 2-[ [ [5-[ [ (2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]2-pyridinyl]hydrazonoJmetyl]-benzénsulfónovej (0,0092 g,
0,0210 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC, metóda č. 1 s výťažkom
12,5 mg produktu vo forme soli s TFA. ESMS; Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c72H96N22°20s' 1620,7; zmeraná molekulová hmotnosť, 1622,5 (M+H)+l. Analytická HPLC, metóda č. IB,
Rt = 14,62 minút, čistota = 96%.
··
- 135 ·· ·· • ·· · · ·· · • · · · · · • ·· ··· · · • · · · · · · ·· ·· ·· ···· • · ··
Príklad 15
Syntéza cyklo{D-Phe-D-Lys([2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Asp-Gly-Arg}
OH
Čast A: Príprava cyklo{D-Phe-D-Lys(Cbz)-D-Asp(OBzl)-GlyArg(Tos)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocArg(Tos)-D-Phe-D-Lys(Cbz)-D-Asp(OBzl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2Cl2). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,5 g, 0,44 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (12 ml). Bola pridaná ľadová kyselina octová (61 μΐ) a reakčná zmes bola 72 hodín zahrievaná na teplotu 60'C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu s výťažkom 370 mg požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C49Hg9NgOjjS, 981,40; zmeraná molekulová hmotnosť, 982,4 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt « 14,32 minút, čistota = 60%.
• · ·· • ·
136 • ·· ·· ·· • · · • · · · • · · · ·· ·· ··
Časť B: Príprava soli cyklo(D-Phe-D-Lys-D-Asp-Gly-Arg) s TFA
OH
Surový cyklo{D-Phe-D-Lys(Cbz)-D-Asp(OBz1)-Gly-Arg(Tos)} (0,146 g) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (1,5 ml) a roztok bol ochladený na -16’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -16C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (1,8 ml). Následne bol pridaný anizol (0,3 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -16’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35’C a pri tejto teplote miešaná 20 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 100 mg požadovaného produktu vo forme lyofilizátu (soí s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C27H41N9O7 +H, 604,3; zmeraná molekulová hmotnosť, 604,3. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 10,25 minút, čistota = 90%.
Časť C; Príprava cyklo{D-Phe-D-Lys([2-[[[5-[karbonyl] -2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-DAsp-Gly-Arg)
Sol cyklo{D-Phe-D-Lys-D-Asp-Gly-Arg) s TFA (0,090 g,
0,108 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml). Bol pridaný trietylamín (45 μΐ, 0,324 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná soí kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]~ karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,048 g, 0,108 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 70 hodín a následne
137 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · • · · ·· ···· vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleje. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 10 mg produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (soí s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C40H50N12°llS +H'
907,4; zmeraná molekulová hmotnosť, 907,3. Analytická HPLC, metóda č. 1B, Rt = 13,47 minút, čistota = 89%.
Príklad 16
Syntéza cyklo{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys-([2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
Časť A: Príprava cyklo{N-Me-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-ATA-D-Lys(Cbz)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp(OBzl)-ATA-D-Lys(Z)-N-Me-Arg(Tos)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (50% TFA v CH2C12).
Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a cez noc vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,24 g, 0,39 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (12 ml). Bola pridaná íadová kyselina octová (67 ml, 1,16 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (3 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do ·· ·· • · · · • · ·· ·· • · · • ·
138 • · · · • · · · ·· ·· • · ·· formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola purifikovaná HPLC na obrátenej fáze (kolóna Vydac C18, 18 až 90% gradient acetonitrilu obsahujúci 0,1% TFA, Rt = 14,129 minút) s výťažkom 42 mg (9%) požadovaného produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C46H56N10°llS2' 988 r3571» zmeraná molekulová hmotnosť, 989,4 [M+H]+i.
Časť B: Príprava cyklo(N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys)
NH
Cyklo{N-Me-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBz1)-ATA-D-Lys(Cbz)) (36 mg, 0,0364 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,364 ml) a roztok bol ochladený na -10’C v kúpeli suchý iad/acetón. K tomuto roztoku bola pridaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,437 mmol) a následne anizol (70 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C. Kúpeľ suchý iad/acetón bola následne ochladená na -35’C a bol pridaný vychladený éter (40 ml). Reakčná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote -35’C, potom ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, rozpustený v zmesi voda/acetonitril (1:1) a lyofilizovaný s výťažkom 35 mg uvedeného produktu (100%). ESMS: Molekulová hmotnost vyrátaná pre C24H38N10O7S, 610,2646; zmeraná molekulová hmotnosť, 611,4 [M+Hj+1.
Časť C: Príprava cyklo{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys-([2-[[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] )) ·· ·· ·· ·· »· • · · · ···· ··· • · ·· ·· · *· • · · ··· · « φ· φ ···· ··· « · ·· ·· ·· ···· ·· ·
139
K roztoku cyklo(N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys) (31 mg, 0,051 mmol) v DMF (2 ml) bol pridaný trietylamín (28 ml, 0,204 mmol) a reakčná zmes bola miešaná pri izbovej teplote počas 10 minút. Bola pridaná sodná sol kyseliny 2—[[[5— [ [ (2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (27 mg, 0,0612 mmol), reakčná zmes bola miešaná 18 hodín a potom skoncentrovaná vo vysokom vákuu. Zvyšok po odparení bol purifikovaný HPLC na obrátenej fáze (kolóna Shandon HS-BDS, 3 až 10% gradient acetonitrilu, R^ = 13,735 minút) s výťažkom 4 mg (8,8%) požadovaného produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C37H47N13O11S2, 913,2959; zmeraná molekulová hmotnosť, 914,5 [M+H]+l.
Príklad 17
Syntéza cyklo(Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl] hydrazono ]metyl]-benzénsulf ónová kyselina])}
Časť A: Príprava cyklo{cit-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boe)}
Peptid Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)-Cit-Gly bol pripravený automatizovanou syntézou peptidov na pevnej fáze s využitím Fmoc chémie (pozri všeobecné metódy). Do 100 ml banky s kruhovým dnom bolo umiestnené HBTU (271 mg, 0,71 mmol) a DMF (10 ml). Tento roztok bol miešaný pri 60’C počas 5 minút.
K tomuto roztoku bol pridaný Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)-Cit-Gly (0,456 g) a Huningova báza (0,27 ml, 1,53 mmol) v DMF (10 ml) ·· ·· • · · • · • · · • ·
- 140 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · · ·· ···· ·· · a získaná zmes bola miešaná pod dusíkom 4 hodiny pri teplote 60*C. Rozpúšťadlo bolo následne odstránené vo vákuu a zvyšok po odparení bol triturovaný v etylacetáte. Získaná pevná látka bola sfiltrovaná, premytá etylacetátom (3 x 6 ml) a vysušená vo vákuu s výťažkom 305 mg (78%) požadovaného produktu. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C36H56N8O10, 760,4; zmeraná molekulová hmotnosť, 761,4 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IA, Rt = 11,8 minút, čistota = 99%.
Časť B: Príprava soli cyklo{Cit-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boe)} s TFA
Roztok cyklo(Cit-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boe)} (287 mg, 0,38 mmol), TFA (6 ml), triizopropylsilánu (0,25 ml) a vody (0,25 ml) bol pri izbovej teplote miešaný 4 hodiny pod atmosférou dusíka. Rozpúšťadlá boli odstránené vo vákuu (cez 3 hodiny), zvyšok po odparení bol triturovaný v dietylétere, sfiltrovaný a premytý dietyléterom s výťažkom 315 mg požadovaného produktu vo forme soli s TFA. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c27H40N8°8' 604,3; zmeraná molekulová hmotnosť,
605,4 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 9,6 minút, čistota = 97%.
Časť C: Príprava cyklo{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5[ karbonyl ] -2-pyridinyl ] hydra zono ] metyl ] -benzénsulf ónová kyselina])}
Sol cyklo{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys} s TFA (0,044 g) bola rozpustená v DMF (2 ml). Bol pridaný trietylamín (22 μΐ,
141 ·· ·· ·· ·· ·· ····
0,156 ήπιοί) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[ [ [5— [ [ (2,5-dioxo-l-pyrolidinyl) oxy] karbonyl ]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,032 g, 0,073 mmol). Reakčná zmes bola miešaná cez noc pod dusíkom a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná. Zvyšok po odparení bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 37 mg (70%) produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (sol s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C40H49Ni;LO12S, 907,3; zmeraná molekulová hmotnosť, 908,4 [M+H]+l. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^ = 14,15 minút, čistota = 99%.
Príklad 18A
Syntéza kyseliny tris (t-butyl )-1,4,7,10-tetraazacyklododekán1,4,7,10-tetraoctovej
ΗθγΆ_^0Ο2-ΐ-Βυ
Časť A: Príprava fenylmetyl 2-(l,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(((terc-butyl) oxykarbonyl) metyl) cyklododecyl) acetátu
Roztok terc-butyl (1,4,7,10-tetraaza-4,7-bis (((terc-butyl) oxykarbonyl)metyl)cyklododecyl)acetátu (0,922 g, 1,79 mmol),
TEA (1,8 ml) a benzylbrómacetátu (0,86 ml, 5,37 mmol) v bezvodom DMF (24 ml) bol počas 24 hodín miešaný pod dusíkom pri izbovej teplote. DMF bol odstránený vo vákuu a olejovitý zvyšok po odparení bol rozpustený v EtOAc (300 ml). Tento roztok bol najskôr premytý vodou (2 x 50 ml), potom saturovaným NaCI ·· ·· • · ·
- 142 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · ·· ···· • · ·· · (50 ml), vysušený (MgSO4) a skoncentrovaný s výťažkom 1,26 g uvedeného produktu vo forme amorfnej pevnej látky. MS: m/e
663,5 [M+H].
Čast B: Príprava kyseliny 2-(l,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(((terc-butyl)oxykarbonyl)metyl)cyklododecyl)octovej
Produkt pripravený v časti A (165 mg, 0,25 mmol) bol počas 24 hodín hydrogenolyzovaný na 10% Pd na aktívnom uhlí (50 mg) v EtOH (15 ml) pri tlaku xxx60psi. Katalyzátor bol odstránený filtráciou a premytý EtOH. Filtráty boli skoncentrované s výťažkom 134 mg (94%) uvedeného produktu vo forme amorfnej pevnej látky. MS: e/m 573,5 [M+H].
Príklad 18
Syntéza 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(karboxymetyl)-1cyklododecyl)acetyl-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
Čast A: Príprava 2-(l,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(t-butoxykarbonylmetyl)-1-cyklododecyl)acetyl-Glu(cyklo{Lys-Arg-GlyAsp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe} ·· ·· ·· ·· ·· · • ·· · · ·· · · ··· • · ·· ·· ···· • · · ··· · · · · · · ······· ···
- 143 - ·· ·· ·· ···· ·· ···
K roztoku kyseliny tris(t-butyl)-l,4,7,10-tetraazacyklododekán-l,4,7,10-tetraoctovej (28 mg, 0,046 mmol) a Huningovej bázy (14 μΐ) v DMF (2 ml) bol pridaný HBTU (17 mg, 0,0456 mmol) a táto zmes bola miešaná počas 5 minút. K tomuto roztoku bol pridaný Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-GlyAsp-D-Phe) (54,1 mg, 0,0326 mmol) v DMF (1 ml) a táto reakčná zmes bola miešaná pod dusíkom 4 hodiny pri izbovej teplote. Rozpúšťadlo bolo následne odstránené vo vákuu a zvyšok po odparení bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC s výťažkom 18,3 mg produktu vo forme lyofilizovanej pevnej látky (sol s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C87H137N23O23, 1872,0; zmeraná molekulová hmotnosť, 937,2 [M+2H]+2. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 19,98 minút, čistota = 99%.
Čast B: Príprava 2-(l,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(karboxymetyl)-1-cyklododecyl)acetyl-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-DPhe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}
Roztok 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(t-butoxykarbonylmetyl)-1-cyklododecyl)acetyl-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe} (18,30 mg, 8,71 mmol) v TFA (3 ml) bol pri izbovej teplote miešaný 5 hodín pod atmosférou dusíka. Roztok bol skoncentrovaný vo vákuu a zvyšok po odparení bol purifikovaný preparatívnou RP-HPLC s výťažkom 8 mg (45%) pro• · · · • · ·
144 ·« ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ···· duktu vo forme lyofílizovanej pevnej látky (sol s TFA). ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C75H113N23O23, 1703,8? zmeraná molekulová hmotnosť, 853,0 [M+2H]+2. Analytická HPLC, metóda Č. IB, Rt = 13,13 minút, čistota = 99%.
Príklad 19
Syntéza cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA)}
NH .OH
HO
K roztoku cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) (0,050 g, 0,0601 mmol) v DMF (2 ml) bol pridaný trietylamín (41,9 μΐ, 0,301 mmol). Tento roztok bol počas 4 hodín po kvapkách pridávaný do roztoku dianhydridu kyseliny dietyléntriaminopentánovej (0,1074 g, 0,301 mmol) v DMF (2 ml) a metylsulfoxidu (2 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 16 hodín, skoncentrovaná do formy oleja a purifikovaná preparatívnou HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 29,9 mg (46%) požadovaného produktu vo forme pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre c4iH62N12°16' 978,4; zmeraná molekulová hmotnosť, 977,5 [M-H+]. Analytická HPLC, metóda č. IB, R^. = 11,916 minút, čistota = 100%.
Príklad 20
Syntéza cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}2(DTPA) • · ···· ···· ··· ···· · · · · · • ·· · · · · · · · · ···· · · · · · ·· ·· ·· ···· ·· ·
- 145 ·· ··
COOH
Purif ikáciou preparatívnou HPLC, metóda č. 1, oleja získaného v príklade 19 bolo rovnako získaných 21,5 mg (21%) uvedeného produktu vo forme pevnej lyofilizovanéj látky. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre ^68Η101Ν21°22' 1563,7? zmeraná molekulová hmotnosť, 1562,8 [M-H+]. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 15,135 minút, čistota = 93%.
Príklad 21
Syntéza cyklo {Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA-3-aminopropyl) -Val}
K roztoku cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl)-Val} (0,050 g, 0,0571 mmol) v dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (39,8 μΐ, 0,286 mmol). Tento roztok bol počas 4 hodín po kvapkách pridávaný do roztoku dianhydridu kyseliny
146
ΦΦ φφ ·· φφ φφ φ • ·· · · ·· · φ ··· • φ φφ φφ φφφφ φ φφ φφφ φ φ φφ φ φ φφφφφφφ φφφ φφ φφ φφ φφφφ φφ φφφ dietyléntriaminopentánovej (0,1020 g, 0,286 mmol) v metylsulf oxide (2 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 18 hodín, vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja a preparatívnou HPLC, metóda č. 1, s výťažkom 41,9 mg (65%) požadovaného produktu vo forme pevnej látky. ESMS: Molekulová hmotnosť vyrátaná pre C43H66N12°17' 1022,5; zmeraná molekulová hmotnosť,
1021,4 [M-H+]. Analytická HPLC, metóda č. IB, Rt = 15,690 minút, čistota = 96%.
Príklad 22
Syntéza cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val}
Časť A: Príprava cyklo{0rn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-GlyAsp-(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp- (OBzl) -D-Tyr (N-Cbz-aminopropyl) -Val-Orn (d-N-l-Tos-2imidazolinyl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12)· Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octo• · · · · · · · ·· · ···· · · » · · ·· ·· ·· ···· ··
- 147 vá (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Časť B: Príprava soli cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-AspD-Tyr(3-aminopropy1)-Va1} s TFA
Cyklo{Orn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-(OBzl)-DTyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-Val) (0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35°C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola ďalej ochladená na -50°C a miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Čast C: Príprava cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-DTyr (N- [ 2 - [ [ [ 5- [ karbonyl ]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl ] -benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropy1)-Val}
Sol cyklo {Orn (d-N-2-imidazolinyl) -Gly-Asp-D-Tyr (3-aminopropyl)-Val} s TFA (0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy] karbonyl]-2-pyridinyl] hydrazono ]metyl]-benzénsulf ónovej (0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 1 až 2 dni a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Purifikáciou
148 ·· ·· • · · · • e ·· • · · · • · · · ·· ·· • a aa a a a · • a a • a · ·· ··aa aa a a aaa aaa • a · aaa aa aaa preparatívnou HPLC tohto oleja bol pripravený požadovaný produkt.
Príklad 23
Syntéza cyklo{Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-(karbonyl]-2-pyridiny1]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyse1ina]-3-aminopropy1)Val} h2n
0=(
Y- NH
--G HNb<VOH
HN^O °
/=κ H // so3h b
Časť A: Príprava cyklo{Lys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3aminopropyl)-Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp-(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-aminopropyl)-Val-Lys(Tfa)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ľadová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
e · · · • · · · ···· ··· ···· t t · é · • · · ® · · · · ·· · • · · · · · · » · ·· ·· ·· ···· ·· ·
- 149 ·«
Časť B: Príprava soli cyklo{Lys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl) -Val} s TFA
Cyklo{Lys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)Val} (0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35*C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola ďalej ochladená na -50’C a miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Časť C: Príprava cyklo(Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl ]-2-pyridinylJhydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]3-aminopropyl)-Val}
Sol cyklo(Lys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl)-Val} s TFA (0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 1 až 2 dni a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol vystavený pôsobeniu 20% piperidínu v DMF a získaný surový materiál bol purifikovaný preparatívnou HPLC, čím bol získaný požadovaný produkt.
Príklad 24
Syntéza cyklo(Cys(2-aminoetyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val}
150 «· « · · • * ·· • · «· ····
so3h
Časť A: Príprava cyklo{Cys(2-N-Tfa-aminoetyl)-Gly-Asp(0Bzl)D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp- (OBzl) -D-Tyr (N-Cbz-aminopropyl) -Val-Cys (2-N-Tf a-aminoetyl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živice sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Časť B: Príprava soli cyklo{Cys(2-N-Tfa-aminoetyl)-Gly-Asp-DTyr(3-aminopropyl)-Val) s TFA
Cyklo {Cys (2-N-Tf a-aminoetyl) -Gly-Asp (OBzl) -D-Tyr (N-Cbz3-aminopropyl)-Val} (0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10C.
- 151 ··» Μ *» .
• · • ·· · ·· ·· • · · · · · • · · « » β · · · · · · » · · · • · · · · · · · ·· ·· · ···· ··
K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodin pri teplote -10’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35’C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola ďalej ochladená na -50’C a miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Časť C: Príprava cyklo{Cys(2-aminoetyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2[ [ [ 5-[karbonyl ]-2-pyrid}inyl]hydrazono]metyl]-benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val}
Soí cyklo {Cys (2-N-Tfa-aminoetyl )-Gly-Asp-D-Tyr( 3-aminopropyl)-Val) s TFA (0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (9,5 μΐ, 0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná soí kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl) oxy ] karbonyl ]-2-pyridinyl ] hydrazono ]metyl ]-benzénsulf ó novej (0,0121 g, 0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 1 až 2 dni a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy olej Tento olej bol vystavený pôsobeniu 20% piperidínu v DMF a získaný surový materiál bol purifikovaný preparatívnou HPLC, čím sa získal požadovaný produkt.
Príklad 25
Syntéza cyklo{HomoLys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl ]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl )-Val}
• · · • ·
- 152 ·· β· ·· ·· ···· · · · · • · ·· · · · • · · ··· · · • · · · · · · ·· ·· <·····
Časť A: Príprava cyklo(HomoLys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz3-aminopropyl)-Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp-(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-aminopropyl)-Val-HomoLys(Tfa)-Glyoxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Časť B: Príprava soli cyklo(HomoLys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3aminopropyl)-Val} s TFA
Cyklo(HomoLys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-Val) (0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctove j (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10’C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35’C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola dalej ochladená na -50’C a miešaná dalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Časť C: Príprava cyklo(HomoLys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val} • · • · · • ·
- 153 · ·* ·· • · 9 9 9
9 9 99 99
Sol cyklo (HomoLys (Tfa) -Gly-Asp-D-Tyr (3-aminopropyl) -Val} s TFA (0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (9,5 μΐ, 0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy ] karbonyl ] -2-pyridinyl]hydrazono]metyl ] -benzénsulf ónovej (0,0121 g, 0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná l až 2 dni a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol vystavený pôsobeniu 20% piperidínu v DMF a získaný surový materiál bol purifikovaný preparatívnou HPLC, čím bol získaný požadovaný produkt.
Príklad 26
Syntéza cyklo[Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val}
Čast A: Príprava cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp(OBzl)D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp- (OBz 1) -D-Tyr (N-Cbz-aminopropy 1) -Val-Orn (d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola ·· ·· ·· · • · · · · · · · · ··· • · ·· · ♦ ····
154 — ······· ··· ·· ·· ·· ···· ·· ··· «· následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ľadová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Časť B: Príprava soli cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-AspD-Tyr(3-aminopropyl)-Val) s TFA
Cyklo {Orn (d-N-benzylkarbamoy 1) -Gly-Asp (OBz 1) -D-Tyr (NCbz-3-aminopropyl)-Val) (0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C.
K tomuto roztoku bola pri teplote -10C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35’C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola dalej ochladená na -50*C a miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Časť C: Príprava cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-DTyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val)
Soľ cyklo {Orn (d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-D-Tyr( 3-aminopropyl)-Val) s TFA (0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (9,5 μΐ, 0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná soľ kyseliny 2-[[[5—[[(2,5-dioxo-l-pyrolidiny 1) oxy ] karbonyl ]-2-pyridinyl ] hydrazono ] metyl ] -benzénsulfónovej (0,0121 g, 0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 1 až 2 dni a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy
155 ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · • · · · · ······ ·· · oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, čím bol získaný požadovaný produkt.
Príklad 27
Syntéza cyklo(Dap(b-(2-benzimidazolylacetyl) )-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val)
Časť A: Príprava cyklo{Dap(b-(l-Tos-2-benzimidazolylacetyl) )Gly-Asp (OBzl) -D-Tyr (N-Cbz-3-aminopropyl) -Val}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp- (OBzl) -D-Tyr (N-Cbz-aminopropyl) -Val-Dap (b- (l-Tos-2-benzimidazolylacetyl))-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2CI2). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná íadová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, • ·
156 ·· ·· ·· ·· • · · · · ·· · • · ·· · t · • · · · · · · · • · · · · · · ·· ·· ·· ««·· ·· • · ·· « premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Časť B: Príprava soli cyklo{Dap(b-(2-benzimidazolylacetyl))Gly-Asp-D-Tyr(3-aminopropyl)-Val} s TFA
Cyklo {Dap (b- (1-Tos-2-benzimidazolylacety 1)) -Gly-Asp(0Bzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-Val} (0,146 mmol) bol rozpustený v kyseline trif luóroctove j (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10°C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -35’C a pri tejto teplote miešaná 30 minút. Reakčná zmes bola ďalej ochladená na -50°C a miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Časť C: Príprava cyklo{Dap(b-(2-benzimidazolylacetyl))-GlyAsp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val}
Sol cyklo{Dap(b-(2-benzimidazolylacetyl) )-Gly-Asp-DTyr(3-aminopropyl)-Val} s TFA (0,0228 mmol) bola rozpustená v DMF (1 ml). Bol pridaný trietylamín (9,5 μΐ, 0,0648 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2—[[[5— [ [ (2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono ]metyl]-benzénsulf ónove j (0,0121 g, 0,0274 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 1 až 2 dni a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný spôsobom opísaným ďalej, čím bol získaný požadovaný produkt.
• · ·
9
- 157 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·» • · · · • · · ·· • · · ·· ···· ·
·· ·
Príklad 28
Syntéza cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N—[2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulf ónová kyselina])}
Čast A: Príprava cyklo{0rn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-GlyAsp (OBzl )-D-Phe-Lys(Cbz)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp-(OBzl)-D-Phe-Lys(Z)-Orn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-Glyoxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12)· Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živice sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleje. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto
- 158 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· • · ·· · · · · t β ······ · · · · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ··· ·· · získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Čast B: Príprava cyklo{0rn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-PheLys}
Cyklo(0rn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-Gly-Asp(0Bzl)-D-PheLys(Cbz)} (0,204 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctove j (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10C. K tomuto roztoku bola pri teplote -10’C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulf ónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10C.
Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná 1 hodinu. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý dietyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
Čast C: Príprava cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-PheLys(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])}
Sol cyklo(Orn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-Phe-Lys} s TFA (0,0481 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml). Bol pridaný trietylamín (20,1 μΐ, 0,144 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[[[5—[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy jkarbonyl ] -2-pyridinyl]hydrazono]metyl ] -benzénsulf ónove j (0,0254 g, 0,0577 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 20 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleje.
Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, čím sa získal požadovaný produkt.
Príklad 29
Syntéza cyklo(Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N[ 2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])} ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· • · ·· ·· ··· • ·· ··· · · · · · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ··
- 159
so3h
Časť A: Príprava cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp(OBzl)D-Phe-Lys(Cbz)}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocAsp(OBzl)-D-Phe-Lys(Z)-Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (25% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica vystavená pôsobeniu 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,75 g, 0,55 mmol/g) bola následne suspendovaná v dimetylformamide (15 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (55,0 μΐ, 0,961 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 50’C. Potom bola živice sfiltrovaná a premytá DMF (2 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola filtrovaná, premytá etylacetátom a vysušená vo vysokom vákuu za vzniku požadovaného produktu.
Časť B: Príprava cyklo(Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-DPhe-Lys}
Cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp(OBzl)-D-PheLys (Cbz)} (0,204 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,6 ml) a roztok bol ochladený na -10’C. K tomuto
160
·· ·· ·· ·· ·· ·
• • • · • • • · • · • ·
• • ·· • • • • t •
• · • · • • • • · •
·· ·· ·· ···· ·· e ··
roztoku bola pri teplote -10*C po kvapkách pridávaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,5 ml). Následne bol pridaný anizol (0,1 ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -10C. Po pridaní dietyléteru bola reakčná zmes ochladená na -50‘C a pri tejto teplote miešaná 1 hodinu. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, premytý diétyléterom, vysušený vo vysokom vákuu a purifikovaný preparatívnou HPLC.
časť C: Príprava cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-DPhe-Lys(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulfónová kyselina])}
Sol cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-D-Phe-Lys } s TFA (0,0481 mmol) bola rozpustená v DMF (2 ml). Bol pridaný trietylamín (20,1 μΐ, 0,144 mmol) a po 5 minútach miešania potom sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0254 g, 0,0577 mmol). Reakčná zmes bola miešaná 20 hodín a následne vo vysokom vákuu skoncentrovaná do formy oleja. Tento olej bol purifikovaný preparatívnou HPLC, čím bol získaný požadovaný produkt.
Príklad 30
Syntéza cyklo{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl ]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropy1)-D-Asp-Gly}
O
OH ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· ···· 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 ··· · ···· ··· ·· ·· ·· ·· ···· ··
- 161
Časť A: Príprava cyklo{Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-D-Asp(OBz1)-Gly}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocLys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-aminopropy1)-D-Asp(OBz1)-Glyoxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (50% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica neutralizovaná 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a cez noc vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,0 g, 0,36 mmol/g) bola následne suspendovaná v N,N-dimetylformamide (12 ml). Bola pridaná ladová kyselina octová (67 ml, 1,16 mmol) a reakčná zmes bola počas 72 hodín zahrievaná na teplotu 55’C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (3 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola purifikovaná HPLC na obrátenej fáze.
Časť B: Príprava soli cyklo{Lys-D-Val-D-Tyr(3-aminopropyl)-DAsp-Gly) s TFA
Chránený cyklický peptid cyklo(Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz3-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly) (0,10 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,95 ml) a roztok bol ochladený na -10C v kúpeli suchý íad/acetón. K tomuto roztoku bola pridaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,12 mmol) a následne anizol (190 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -16“C. Kúpe! suchý lad/acetón bol následne ochladený na -35’C a bol pridaný vychladený éter (40 ml). Reakčná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote -35’C, potom ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, rozpustený v zmesi voda/acetonitril (1:1), lyofilizovaný a purifikovaný HPLC na obrátenej fáze, čím bol získaný požadovaný produkt.
·· ·· ·· ·· 99 · • · · · · ·· · · ···
9 99 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 · · 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 ·· ·· ·· 9999 99 999
162
Časť C: Príprava cyklo{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl]hydrazono]metyl ]-benzénsulfónová kyselina) -3aminopropyl)-D-Asp-Gly}
K roztoku cyklo{Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(3-aminopropyl)-D-AspGly] (0,0216 mmol) v N,N-dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (15 ml, 0,108 mmol) a roztok bol miešaný počas 10 minút pri izbovej teplote. Bola pridaná sodná sol kyseliny 2—[[[5—[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0260 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín. Táto reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení vo forme oleja bol vystavený pôsobeniu 20% piperidínu v DMF a opäť skoncentrovaný vo vákuu. Zvyšok po odparení bol purifikovaný HPLC na obrátenej fáze, čím bol získaný požadovaný produkt.
Príklad 31
Syntéza cyklo {Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-D-Val-D-Tyr(N- [ 2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly}
Časť A: Príprava cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-D-Val-DTyr (N-Cbz - 3 -aminopropy 1) -D-Asp (OBz 1) -Gly}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie BocOrn( d-N-benzylkarbamoyl)-D-Val-D-Tyr (N-Cbz-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou
- 163 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · 9 · ··· • i·**· · · · · ♦ ···· · · · · S ·· ·· ·· ···· ·· · (50% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica neutralizovaná 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a cez noc vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,0 g, približne 0,36 mmol/g) bola následne suspendovaná v N,N-dimetylformamide (12 ml). Bola pridaná ľadová kyselina octová (67 ml, 1,16 mmol) a reakčná zmes bola 72 hodín zahrievaná na teplotu 55“C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (3 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola purifikovaná HPLC na obrátenej fáze.
Časť B: Príprava soli cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-D-ValD-Tyr(3-aminopropyl)-D-Asp-Gly) s TFA
Chránený cyklický peptid cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly} (0,10 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,95 ml) a roztok bol ochladený na -10’C v kúpeli suchý ľad/acetón. K tomuto roztoku bola pridaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,12 mmol) a následne anizol (190 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -16°C. Kúpeľ suchý ľad/acetón bol následne ochladený na -35’C a bol pridaný vychladený éter (40 ml). Reakčná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote -35’C, potom ochladená na -50’C a pri tejto teplote miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, rozpustený v zmesi voda/acetonitril (1:1), lyofilizovaný a purifikovaný HPLC na obrátenej fáze, čím bol získaný požadovaný produkt.
Časť C: Príprava cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-D-Val-DTyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono ] metyl ] benzénsulfónová kyselina)-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly)
K roztoku cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-D-Val-D-Tyr(3-aminopropyl)-D-Asp-Gly) (0,0216 mmol) v N,N-dimetylform164
44 • · ·· 44 44 • 4 4
• s 44 • 4 4 4 · 4
44 44 • 4 4444 44 4 4 4
amide (2 ml) bol pridaný trietylamín (15 ml, 0,108 mmol) a roztok bol miešaný počas 10 minút pri izbovej teplote. Bola pridaná sodná sol kyseliny 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónovej (0,0260 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín. Táto reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení bol purifikovaný HPLC na obrátenej fáze, čím bol získaný požadovaný produkt.
Príklad 32
Syntéza cyklo{Orn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-D-Val-D-Tyr(N[2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly}
Časť A: Príprava cyklo{0rn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-D-ValD-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly}
N-koncová chrániaca skupina peptidovej sekvencie Boc0rn(d-N-2-imidazolinyl )-D-Val-D-Tyr( N-Cbz-aminopropyl )-D-Asp(OBzl)-Gly-oxímová živica bola odstránená štandardnou reakciou (50% TFA v CH2C12). Po ôsmich premytiach DCM bola živica neutralizovaná 10% DIEA/DCM (2 x 10 minút). Živica bola následne premytá DCM (5x) a cez noc vysušená vo vysokom vákuu. Táto živica (1,0 g, približne 0,36 mmol/g) bola následne suspendovaná v N,N-dimetylformamide (12 ml). Bola pridaná ľadová kyselina octová (67 ml, 1,16 mmol) a reakčná zmes bola 72 ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ··· ···· ·· ··· • ·· ··· · · ·· · ···· ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
165 hodín zahrievaná na teplotu 55’C. Potom bola živica sfiltrovaná a premytá DMF (3 x 10 ml). Filtrát bol vo vysokom vákuu skoncentrovaný do formy oleja. Tento olej bol triturovaný v etylacetáte. Takto získaná pevná látka bola purifikovaná HPLC na obrátenej fáze.
Čast B: Príprava soli cyklo{0rn(d-N-2-imidazolinyl)-D-ValD-Tyr(3-aminopropyl)-D-Asp-Gly) s TFA
Chránený cyklický peptid cyklo{Orn(d-N-l-Tos-2-imidazolinyl)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-aminopropyl)-D-Asp(OBzl)-Gly} (0,10 mmol) bol rozpustený v kyseline trifluóroctovej (0,95 ml) a roztok bol ochladený na -10’C v kúpeli suchý lad/acetón. K tomuto roztoku bola pridaná kyselina trifluórmetánsulfónová (0,12 mmol) a následne anizol (190 ml). Reakčná zmes bola miešaná počas 3 hodín pri teplote -16’C. Kúpe! suchý lad/acetón bol následne ochladený na -35’C a bol pridaný vychladený éter (40 ml). Reakčná zmes bola miešaná 30 minút pri teplote -35”C, potom ochladená na -50'C a pri tejto teplote miešaná ďalších 30 minút. Získaný surový produkt bol sfiltrovaný, rozpustený v zmesi voda/acetonitril (1:1), lyofilizovaný a purifikovaný HPLC na obrátenej fáze, čím bol získaný požadovaný produkt.
čast C: Príprava cyklo(0rn(d-N-2-imidazolinyl,-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina)-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly}
K roztoku cyklo(Orn(d-N-2-imidazolinyl)-D-Val-D-Tyr(3aminopropyl)-D-Asp-Gly) (0,0216 mmol) v N,N-dimetylformamide (2 ml) bol pridaný trietylamín (15 ml, 0,108 mmol) a roztok bol miešaný počas 10 minút. Bola pridaná sodná soí kyseliny 2-[[[5—[[(2,5-dioxo-l-pyrolidinyl)oxy]karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl)-benzénsulfónovej (0,0260 mmol) a reakčná zmes bola miešaná 18 hodín. Táto reakčná zmes bola skoncentrovaná vo vysokom vákuu a zvyšok po odparení bol purifikovaný HPLC na obrátenej fáze, čím bol získaný požadovaný produkt.
- 166 ·· ·· ·· ·· • ·· · ·· · • · ·· · · · • ·· · · · · • · · · · · · •a ·· ·· ···· a · a a a a a a a a a a a a
Príklady rádiofarmak
Nasledujúce postupy (A, B) opisujú syntézu rádiofarmak podlá vynálezu opísané vzorcom 99mTc(VnA)(tricín)(fosfín), kde (VnA) reprezentuje antagonistickú zlúčeninu receptoru pre vitronektín, ktorá je k Tc viazaná prostredníctvom diazenidovej (-N=N-) alebo hydrazidovej (=N-NH-) skupiny. Vznik diazenidovej alebo hydrazidovej skupiny je dôsledkom reakcie hydrazinonikotínamidovej skupiny, existujúcej vo volnej forme ako hydrazín alebo chránenej ako hydrazón, s Tc-99m. Ďalšími dvoma ligandami v koordinačnej sfére Tc sú tricín a fosfín.
Postup A
Syntéza komplexov Tc-99m a antagonistov receptoru pre vitronektín opísaných vzorcom 99mTc(VnA)(tricín)(fosfín) s využitím redukujúcich zlúčenín obsahujúcich cínaté ióny
V ampulke s objemom 10 ml bolo zmiešaných: 10 až 30 μς (0,2 až 0,4 ml) látky podlá vynálezu rozpustenej vo fyziologickom roztoku alebo 50% vodnom roztoku etanolu, 40 mg (0,4 ml) tricínu vo vode, 1 až 7 mg (0,10 až 0,30 ml) fosfínu rozpusteného vo vode alebo etanolu, 25 μg (25 μΐ) SnCl2.2H2O rozpusteného v 0,1 M HCl, 0 až 0,25 ml etanolu a 50 až 150 mCi 99mrco4 - vo fyziologickom roztoku. Táto zmes bola počas 10 až 20 minút zahrievaná na vodnom kúpeli na teplotu 100°C a následne bolo 50 μΐ vzorky analyzovaných HPLC, metóda č. 3. Keď to bolo nezbytné, bol celý komplex purif ikovaný HPLC (nastriekanie 300 až 400 μΐ) a jednotlivé frakcie boli zberané do tienených flaštičiek. Zberané frakcie boli odparené do sucha, rozpustené vo fyziologickom roztoku obsahujúcom 0 až 5% objemových percent Tweenu 80, a opäť analyzované HPLC, metóda č.
3.
·· ·· ·· ·· ·· « • · · · · ·· · · ··· • · ·· · · ···· • ·· ··· · · · · · · ······· ··· ·· ·· ·· ···· ®· ···
167
Postup B
Syntéza komplexov Tc-99m a antagonistov receptoru pre vitronektín opísaných vzorcom 99mTc(VnA)(tricín)(TPPTS) bez využitia redukujúcich zlúčenín obsahujúcich cínaté ióny
Do lyofilizačnej fľaštičky obsahujúcej 4,84 mg TPPTS,
6,3 mg tricínu, 40 mg manitolu a 0,25 mmol sukcinátového tlmivého roztoku, pH 4,8, bolo pridaných 0,2 až 0,4 ml (20 až 40 μg) látky podlá vynálezu rozpustenej vo fyziologickom roztoku alebo 50% vodnom roztoku etanolu, 50 až 100 mCi 99mTcO4” vo fyziologickom roztoku a ďalší fyziologický roztok na výsledný objem 1,3 až 1,5 ml. Táto zmes bola počas 10 až 15 minút zahrievaná na vodnom kúpeli na teplotu 100’C a následne bolo 50 μΐ vzorky analyzovaných HPLC, metóda č.
3. Keď to bolo nezbytné, bol celý komplex purifikovaný HPLC (nastriekanie 300 až 400 μΐ) a jednotlivé frakcie boli zberané do tienených fľaštičiek. Zberané frakcie boli odparené do sucha, rozpustené vo fyziologickom roztoku obsahujúcom 0 až 5% objemových percent Tweenu 80, a opäť analyzované HPLC, metóda č. 3.
Tabuľka 1. Analytické údaje a výťažky pre komplexy 99mTc(VnA)(tricín)(fosfin)
Komplex z príkladu č. Zlúčenina z príkladu č. Fosfin Výťažok (%) Retenčný čas (min)
33 1 TPPTS 88 8,2
34 2 TPPTS 96 19,5
35 3 TPPTS 91 33,7
36 4 TPPTS 92 21,7
37 5 TPPTS 65 25,1
38 6 TPPTS 91 41,7
39 7 TPPTS 89 20,4
·· · · · · ·· · · • · · · « · · · ··· • · ·· ·· ··· • · · ··· · · ·· · • · · · · · · ··
- 168 - ·· ·· .........
40 8 TPPTS 93 16,4
41 9 TPPTS 90 13,4
42 10 TPPTS 93 12,9
43 12 TPPMS 94 23,5
44 12 TPPDS 93 18,1
45 12 TPPTS 93 13,6
46 13 TPPTS 93 11,2
47 14 TPPTS 79 11,0
48 15 TPPTS 94 11,2
49 16 TPPTS 81 9,2
50 17 TPPTS 97 10,4
Nasledujúci príklad opisuje syntézu rádiofarmak podlá vynálezu opísané vzorcom 99mTc(VnA)(tricín)(L), kde L = heterocyklus obsahujúci dusík vo forme imínu, a kde (VnA) reprezentuje antagonistickú zlúčeninu receptoru pre vitronektín, ktorá je k Tc viazaná prostredníctvom diazenidovej (-N=N-) alebo hydrazidovéj (=N-NH-) skupiny. Ďalšími dvoma ligandami v koordinačnej sfére Tc sú tricín a heterocyklus obsahujúci dusík vo forme imínu.
Príklad 51
Syntéza komplexu Tc-99m a antagonistov receptoru pre vitronektín opísaného vzorcom 99mTc(VnA)(tricín)(1,2,4-triazol) μg látky z príkladu 1 (0,30 ml, 50:50 EtOH/H2O), 40 mg tricínu (0,25 ml/H20), 8 mg 1,2,4-triazolu (0,25 ml/H20), 25 μg Snci2 (25 μ1/0,1 M HC1), 0,50 ml vody a 0,20 ml 50±5 mCi 99mTcO4 bolo zmiešaných v tienenej ampulke s objemom 10 ml a táto zmes bola zahrievaná počas 10 minút na 100’C. 50 μΐ obsahu ampulky bolo analyzovaných HPLC postupom opísaným ďalej. Rádiochemická čistota produktu eluovaného v retenčnom čase 8,33 minút bola 88,1%· ·· ·· • · ···· ···· ·· • < ·· ·· ··· • · · ··· · · ·· · • · · · ··· ··
- 169 - ............
··
Látky podía vynálezu obsahujúce bud DOTA (príklad 18),
DTPA monoamid (príklady 19 a 20) alebo DTPA bisamid (príklad 21) vytvárajú velmi lahko komplexy s iónmi kovov prvkov 31,
39, 49 a 58 až 71. Nasledujúce príklady demonštrujú syntézu komplexov s 153Sm, 177Lu a 90Y (izotopy emitujúce beta častice, používané pri rádiofarmaceutickej terapii) a 11:LIn (izotop emitujúci žiarenie gama, používané v rádiofarmaceutických zobrazovacích prípravkoch). V obidvoch typoch komplexov je ión kovu naviazaný k chelátotvornej časti zlúčeniny tvorenej DOTA, DTPA monoamidom alebo DTPA bisamidom.
Príklady 52 a 53
Syntéza komplexov antagonistov receptoru pre vitronektín obsahujúcich DOTA a Y-90 alebo Lu-177
Do čistej ampulky s objemom 10 ml sa pridalo 0,5 ml látky z príkladu 18 (200 μg/ml v 0,25 M octanu amónnom, pH 7,0) 0,05 až 0,1 ml roztoku kyseliny gentisovej (sodná sol, mg/ml v 0,25 M octanu amónnom, pH 7,0), 0,3 ml 0,25 M octanu amónnom (pH 7,0) a 0,05 ml roztoku 177LuC13 alebo 9OYC13 (100 až 200 mCi/ml) v 0,05 M HCI. Takto pripravená zmes bola počas 35 minút zahrievaná na 100’C. Po ochladení na izbovú teplotu bola vzorka tohto roztoku analyzovaná rádio-HPLC a ITLC. Komplex z príkladu 53 bol analyzovaný hmotnostnou spektroskopiou (molekulová hmotnosť vyrátaná pre C75H100N23023Lu, 1875,8; zmeraná molekulová hmotnosť, 1877,6 [M+H+]), čím bola potvrdená identita tejto zlúčeniny.
Príklad 54
Syntéza komplexu antagonisty receptoru pre vitronektín obsahujúceho 111In DOTA
Do liekovky pre automatický dávkovač s objemom 300 μΐ tienenej vrstvou olova bolo vpravených 50 μΐ kyseliny genti·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· ···· · · ··· • · · ··· · · ·· · • · · · ··· ··
- 170 - .............
·· sovej (10 mg/ml v 0,1 M octanu amónnom, pH 6,75), následne potom 100 μΐ zlúčeniny z príkladu 18 (200 μg/ml v 0,2 M octanu amónnom, pH 5,0) a 50 μΐ roztoku L^1InCl3 (10 mCi/ml) v 0,04N HCI. Hodnota pH tejto reakčnej zmesi bola približne 4,0. Tento roztok bol počas 25 minút zahrievaný na teplotu 100“C. Vzorka tohto roztoku bola analyzovaná rádio-HPLC a ITLC.
Tabuľka IA: Analytické údaje a výťažky pre komplexy Y-90, In-111 a Lu-177 s antagonistami receptoru pre vitronektín konjugovanými s DOTA.
Komplex z príkladu č. Zlúčenina z príkladu č. Izotop Výťažok (%) Retenčný čas pri HPLC (min)
52 18 Y-90 96 16,5
53 18 Lu-177 96 16,5
54 18 In-111 95 16,5
Príklady 55 a 56
Syntéza komplexov antagonistov receptoru pre vitronektín obsahujúcich DTPA-monoamid alebo DTPA-bisamid a In-111
V ampulke s objemom 10 ml bolo zmiešaných 0,2 ml 111InCl3 (1,7 mCi) v 0,1 M HCI, 0,2 ml 1,0 M octanu amónneho, pH 6,9, a 0,1 ml zlúčeniny podľa vynálezu rozpustenej vo vode a táto zmes bola ponechaná reagovať 30 minút pri izbovej teplote. Získaná zmes bola analyzovaná HPLC, metóda č. 3.
171
99 • 9 99 9 9
• 99 9 9 • 9 9
• • · • · 9 9 • 9 • 9999 9 9 99 9 9
Tabulka 2: Analytické údaje a výťažky pre komplexy 111In.
Komplex z príkladu č. Zlúčenina z príkladu č. Výťažok (%) Retenčný čas pri HPLC (min)
55 19 86 11,1
56 20 96 18,8
Príklady 57 až 59
Syntéza komplexov antagonistov receptoru pre vitronektín obsahujúcich Sm-153
V ampulke s objemom 10 ml bolo zmiešaných 0,25 ml 153SmCl3 (54 mCi/gmol Sm, 40 mCi/ml) v 0,1 M HCl a zlúčenina podlá vynálezu (50 násobný molárny prebytok) rozpustená v 1,0 M octane amónnom. Reakcia prebiehala približne 30 minút pri izbovej teplote a reakčná zmes bola následne analyzovaná ITLC a HPLC (metóda č. 3). Ked to bolo nezbytné, bol celý komplex purifikovaný HPLC (nastriekanie 300 až 400 μΐ) a jednotlivé frakcie boli zberané do tienených flaštičiek. Zberané frakcie boli odparené do sucha, rozpustené vo fyziologickom roztoku a opäť analyzované HPLC, metóda č. 3.
Tabulka 3: Analytické údaje a výťažky pre komplexy 153Sm
Komplex z príkladu č. Zlúčenina z príkladu č. Výťažok (%) Retenčný čas pri HPLC (min)
57 19 91 11,7
58 20 84 13,1
59 21 96 16,9
172 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· • · 99 · · ··· • ·· ··· · · ·· · • · · · · 9 · ·· ·· ·· ······ ··
Analóg rádiofarmaka podlá príkladu 59 obsahujúci nerádioaktívne (prirodzene sa vyskytujúce) samárium bol pripravený zmiešaním 3,3 mg (2,9 μπιοί) zlúčeniny z príkladu 21 rozpustené v 2 ml 1,0 M octanu amónneho, pH 7,0, a 0,29 ml 0,01 M roztoku SmCl3 v 0,1 M HCI. Reakcia prebiehala približne 5 hodín pri izbovej teplote a reakčný produkt bol následne izolovaný HPLC, metóda 3. Prchavé látky boli odstránené lyofilizáciou. Identita získaného komplexu bola potvrdená hmotnostnou spektroskopiou. (ΑΡΙ-ESMS: molekulová hmotnosť vyrátaná pre C43H64N12O17Sm, 1172,9; zmeraná molekulová hmotnosť, 1172,4 [M+2H+]). Bol pripravený rezervný roztok tohto komplexu vo vode a koncentrácia bola stanovená ICP analýzou. Tento roztok bol použitý na stanovenie väzbovej afinity uvedeného komplexu k receptoru pre vitronektín ανβ3·
Štruktúry reprezentujúce rádiofarmaka podía vynálezu obsahujúce In-111 (príklad 56), Y-90 (príklad 52) a Sm-153 (príklad 59) sú znázornené ďalej.
173
·· • · ·· ·· ·· ·
• • • · • • • · • · • ·
• • ·· • • • • ·
•
• • • · • • • • ·
• · • · ·· ···· ·· • ·
ΟγΝΗ · ηΛοοη
οη2
Príklady 60 až 62
Syntéza komplexov antagonistov receptoru pre vitronektín obsahujúcich Lu-177 x IO“9 mol zlúčeniny podľa vynálezu bolo rozpustených v 1,0 ml O,1M octanového tlmivého roztoku, pH 6,8. Bolo pridaných 1 x IO“9 mol Lu-177 (40 μΐ, 3 mCi) rozpusteného v 0,1 M HCl a reakcia prebiehala 30 až 45 minút pri izbovej teplote. Reakčné zmesi boli analyzované HPLC, metóda č. 3.
Tabuľka 4: Analytické údaje a výťažky pre komplexy 177Lu
Komplex z príkladu č. Zlúčenina z príkladu č. Výťažok (%) Retenčný čas pri HPLC (min)
60 19 98 11,0
61 20 98 15,6
62 21 98 11,7
·· ·· ·· ··
174 ·· ·· ·· ····
Príklad 63
Komplex zlúčeniny z príkladu 21 s gadolíniom bol pripravený nasledujúcim postupom. V 2 ml 1 M octanu amónneho, pH 7,0, bolo rozpustených 3 až 3,5 mg uvedenej zlúčeniny a k tomuto roztoku bol pridaný jeden ekvivalent roztoku Gd(NO3)3 (0,02 M vo vode). Reakčná zmes bola ponechaná 3 až 5 hodín pri izbovej teplote a získaný produkt bol izolovaný HPLC, metóda č. 4. Frakcie obsahujúce požadovaný komplex boli lyofilizované a rozpustené v 1 ml H20 s výslednou koncentráciou 2 mM Gd (stanovené 1CP analýzou). Identita získaného komplexu bola potvrdená hmotnostnou spektroskopiou. (ΑΡΙ-ESMS: molekulová hmotnosť vyrátaná pre c43H64Ni2°i7G^» 1176,9; zmeraná molekulová hmotnosť, 1176,2 [M+2H+]).
Nasledujúce príklady opisujú prípravu kontrastných látok podlá vynálezu pre ultrazvuk, obsahujúcich smerujúce časti pre neovaskulutúru nádorov, kde týmito smerujúcimi skupinami sú antagonisty receptoru ανβ3.
Príklad 64
Časť A: Syntéza zlúčeniny 1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3f osf oetanolamino )-12-( cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) -dodekán1,12-dion
NH h2n-?
hi
COOH o
·· ·· ·· ·· ·· · • ·· · · · · · · · · · • · ·· · · ···· ······· ···· · • · · · ··· ·· · ·· ·· ·· ···· ·· ···
Roztok disukcínimidyl dodekán-1,12-dioátu (0,424 g, 1 mmol), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamínu (1,489 g, 1 mmol) a TFA soli cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) (0,831 g, 1 mmol) v 25 ml chloroformu bol miešaný počas 5 minút. Boli pridané uhličitan sodný (1 mmol) a síran sodný (1 mmol) a roztok bol 18 hodín miešaný pod atmosférou dusíka pri izbovej teplote. DMF bol odstránený vo vákuu a surovým produkt bol purifikovaný, čím bol získaný produkt uvedený v záhlaví.
Časť B: Formulácia prípravku kontrastnej látky
Syntetizovaný 1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino )-12-( cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) -dodekán-1,12-dion bol zmiešaný s tromi inými lipidmi - kyselinou 1,2-dipalmitoyl-snglycero-3-f osf atidovou, 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-f osf atidylcholínom a N-(metoxypolyetylén glykol 5000 karbamoyl)-l,2dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidyletanolamínom - v relatívnych množstvách 1:6:54:41 (hmotnostné percentá). Následne bol pri pH 6 až 7 v sklenenej ampulke s objemom 2 ml pripravený vodný roztok tejto lipidovej zmesi (1 mg/ml), chloridu sodného (7 mg/ml), glycerolu (0,1 ml/ml) a propylénglykolu (0,1 ml/ml). Vzduch z ampulky bol vyčerpaný, nahradený perfluórpropánom a ampulka bola zatavená. Prípravok kontrastnej látky pre ultrazvuk je skompletovaný umiestnením zatavenej ampulky do amalgamátoru na 30 až 45 sekúnd, čím dôjde k vytvoreniu mliečne bieleho roztoku.
Príklad 65
Časť A: Syntéza (oJ-amino-PEG3400-a-karbonyl)-cyklo (Arg-GlyAsp-D-Phe-Lys) ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· ···· · · ·«·
176 • · · · ··· · · ·· ·· ·· ···· ··
NH
HjN—4*
Do roztoku N-Boc-to)-amino-PEG3400-a-karboxylát sukcínimidyl esteru (1 mmol) a cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) (1 mmol) v DMF (25 ml) bol pridaný trietylamín (3 mmol). Táto reakčná zmes bola miešaná pod dusíkom cez noc pri izbovej teplote a rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Surový produkt bol rozpustený v zmesi 50% kyselina trifluóroctová/dichlórmetán a miešaný počas 4 hodín. Prchavé zložky boli odstránené a trituráciou v dietylétere bol izolovaný požadovaný produkt vo forme soli s TFA.
Časť B: Príprava l-( 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino )-12-( (u>-amino-PEG3400-a-karbonyl) -cyklo (Arg-Gly-Asp-DPhe-Lys))-dodekán-1,12-dionu
Roztok disukcínimidyl dodekanoátu (1 mmol), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamínu (l mmol) a TFA soli (t«>-amino-PEG3400-a-karbonyl) -cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) (1 mmol) v 25 ml chloroformu bol miešaný počas 5 minút. Boli pridané uhličitan sodný (l mmol) a síran sodný (l mmol) a • · • · • · m
·· • · · ·· ···· ·· roztok bol 18 hodín miešaný pod atmosférou dusíka pri izbovej teplote. DMF bol odstránený vo vákuu a surovým produkt bol purifikovaný, čím bol získaný produkt uvedený v záhlaví.
Časť C: Formulácia prípravku kontrastnej látky
1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12-( (ωamino-PEG3400-a-karbonyl)-cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))-dodekán 1,12-dion bol zmiešaný sa tromi inými lipidmi - kyselinou 1,2dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidovou, 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidylcholínom a N-(metoxypolyetylén glykol 5000 karbamoyl)-l,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidyletanolamínom - v relatívnych množstvách 1:6:54:41 (hmotnostné percentá). Následne bol pri pH 6 až 7 v sklenenej ampulke s objemom 2 ml pripravený vodný roztok tejto lipidovej zmesi (1 mg/ml), chloridu sodného (7 mg/ml), glycerolu (0,1 ml/ml) a propylénglykolu (0,1 ml/ml). Vzduch z ampulky bol vyčerpaný, nahradený perfluórpropánom a ampulka bola zatavená. Prípravok kontrastnej látky pre ultrazvuk je skompletovaný umiestnením zatavenej ampulky do amalgamátoru na 30 až 45 sekúnd, čím dôjde k vytvoreniu mliečne bieleho roztoku.
Príklad 66
Časť A: Syntéza (o)-amino-PEG340Q-a-karbonyl)-Glu-(cyklo(ArgGly-Asp-D-Phe-Lys))2
NH h2n^
O
COOH
NH ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ··· ···· ·· · · · • ·· ··· · · ·· · ···· · · · · · ·· ·· ·· ···· ·· ·
178
Do roztoku N-Boc-64-amino-PEG3400-a-karboxylát sukcínimidyl esteru (1 mmol) a Glu-(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))2 (1 mmol) v DMF (25 ml) bol pridaný trietylamín (3 mmol). Táto reakčná zmes bola miešaná pod dusíkom cez noc pri izbovej teplote a rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Surový produkt bol rozpustený v zmesi 50% kyselina trifluóroctová/dichlórmetán a miešaný počas 4 hodín. Prchavé zložky boli odstránené a trituráciou v dietylétere bol izolovaný požadovaný produkt vo forme soli s TFA.
Časť B: Príprava 1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino )-12-( (<*)-amino-PEG3400-a-karbonyl) -Glu- (cyklo(Arg-GlyAsp-D-Phe-Lys))2)-dodekán-l,12-dionu
HjN—< NH
Roztok disukcínimidyl dodekanoátu (1 mmol), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamínu (1 mmol) a TFA soli (ωamino-PEG3400-a-karbonyl) -Glu- (cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)) 2 (1 mmol) v 25 ml chloroformu bol miešaný počas 5 minút. Boli pridané uhličitan sodný (1 mmol) a síran sodný (1 mmol) a roztok bol 18 hodín miešaný pod atmosférou dusíka pri izbovej teplote. DMF bol odstránený vo vákuu a surovým produkt bol purifikovaný, čím bol získaný produkt uvedený v záhlaví.
·· • · • · · · • · ·
- 179 • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · · ·· ····
Časť C: Formulácia prípravku kontrastnej látky
1-(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12((tí-amino-PEG3400-a-karbonyl) -Glu- (cyklo (Arg-Gly-Asp-D-PheLys))2)-dodekán-l,l2-dion bol zmiešaný sa tromi inými lipidmi - kyselinou l,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidovou, 1,2dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidylcholínom a N-(metoxypolyetylén glykol 5000 karbamoyl)-l,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3fosfatidyletanolamínom - v relatívnych množstvách 1:6:54:41 (hmotnostné percentá). Následne bol pri pH 6 až 7 v sklenenej ampulke s objemom 2 ml pripravený vodný roztok tejto lipidovej zmesi (1 mg/ml), chloridu sodného (7 mg/ml), glycerolu (0,1 ml/ml) a propylénglykolu (0,1 ml/ml). Vzduch z ampulky bol vyčerpaný, nahradený perfluórpropánom a ampulka bola zatavená. Prípravok kontrastnej látky pre ultrazvuk je skompletovaný umiestnením zatavenej ampulky do amalgamátoru na 30 až 45 sekúnd, čím dôjde k vytvoreniu mliečne bieleho roztoku.
Analytické metódy
HPLC, metóda č. 3
Kolóna: Zorbax C18, 25 cm x 4,6 mm alebo Vydac C18, 25 cm x 4,6 mm
Teplota: izbová
Prietok: 1,0 ml/minúta
Fáza A: 10 mM fosforečnan sodný, pH 6
Fáza B: 100% acetonitril
Detektor: rádiometrické činidlo jodidu sodného (Nal) alebo detektor beta žiarenia
Gradient A (príklady 33, 51) t (min) 0 20 30 31 % B 0 75 75 0
180
Gradient B (príklady 39, 40, 43, 44, 45, 46, 48, 50) t (min) 0 20 30 31 35 36 40 % B 0 25 25 75 75 0 0
Gradient C (príklady 34, 35, 36, 37, 38, 42) t (min) 0 40 41 46 47 55 % B 0 35 75 75 0 0
Gradient D (príklad 49)
t (min) % B 0 20 0 25 30 25 31 0 40 0
Gradient E (príklady 55, 56)
t (min) 0 20 21 30 31 40
% B 0 20 50 50 0 0
Gradient F (príklady 57, 58)
t (min) 0 15 16 25 26 35
% B 0 20 75 75 0 0
Gradient G (príklad 59)
t (min) 0 20 21 30 31 40
% B 0 20 75 75 0 0
• · ·· ·· ··· • ·· ··· · · ·· · ···· ··· ··
Gradient H (príklad 60, 61 a 62)
t (min) 0 15 16 21 22 40
% B 0 20 50 50 0 0
Gradient I (príklady 52, 53, 54)
t (min) 0 20 21 30 31 40
% B 5 20 60 60 0 0
Gradient J (príklad 41) t (min) 0 20 30 % B O 50 50
O
O
Gradient K (príklad 47) t (min) O % B 10
21 30
60 60
40
10
HPLC, metóda č. 4
Kolóna: Zorbax C18, 25 cm x 4,6 mm Prietok: 1,0 ml/minúta Fáza A: 10 mM octan amónny Fáza B: 100% metanol Detekcia UV
Gradient
100
100 t (min) % B • · ·· ·· ·· ···· ···· ··· ···· ·· · · · • ·· · · · · · ·· ·
Metóda ITLC
Prúžky ITLC-SG, Gelman (2 cm x 7,5 cm)
Systém rozpúšťadiel: 1:1 acetón:fyziologický roztok
Detekcia s využitím systému Bioscan 200
Priemyselná vvužiteínosť
Farmaceutické zlúčeniny podlá vynálezu sú použitelné na zobrazovanie angiogénnej vaskulatúry nádorov a liečbu rakoviny v organizme pacientov. Rádiofarmaka podlá vynálezu obsahujúce dajaký izotop emitujúci gama žiarení sú použitelné pri diagnostike patologických procesov, pri ktorých dochádza k tvorbe angiogénnej vaskulatúry, vrátane rakoviny, diabetickej retinopatie, degenerácie makuly, restenózy ciev po angioplastike a hojení poranení. Diagnostická využiteľnosť rovnako zahŕňa zobrazovanie nestability vencových tepien (napríklad povlaky nestabilných koronárnych tepien). Rádiofarmaka podlá vynálezu obsahujúce dajaký izotop emitujúci beta žiarenie, alfa žiarenie alebo Augerove elektróny sú použitelné pri liečbe patologických procesov, pri ktorých dochádza k tvorbe angiogénnej vaskulatúry tým, že do miesta angiogénnej vaskulatúry vnášajú cytotoxickú dávku radiácie. Liečba rakoviny je uskutočňovaná systemickou aplikáciou rádiofarmak, ktorej dôsledkom je prísun cytotoxickej dávky radiácie do nádorov.
Zlúčeniny podlá vynálezu obsahujúce jeden alebo viac iónov paramagnetických kovov vybraných zo skupiny zahŕňajúcej gadolínium, dysprózium, železo a mangán sú použitelné ako kontrastné látky pre nukleárnu magnetickú rezonanciu (MRI) pri zobrazovaní patologických procesov, pri ktorých dochádza k tvorbe angiogénnej vaskulatúry.
Zlúčeniny podlá vynálezu obsahujúce jeden alebo viac atómov ťažkých kovov s atómovým číslom vyšším ako 20 sú použitelné ako kontrastné látky pre rôntgenové žiarenie pri ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ·· • · ·· ·· ··· • · · · · · · · ·· · • · · 9 9 9 9 9 9
99 99 9999 99
- 183 zobrazovaní patologických procesov, pri ktorých dochádza k tvorbe angiogénnej vaskulatúry.
Zlúčeniny podľa vynálezu obsahujúce echogénny plyn v mikročasticiach dajakej povrchovo aktívnej látky použiteľné ako kontrastné látky pre sonografiu pri zobrazovaní patologických procesov, pri ktorých dochádza k tvorbe angiogénnej vaskulatúry.
Reprezentatívne zlúčeniny podľa vynálezu boli testované in vitro a in vivo pri stanoveniach a na modeloch opísaných v ďalšom texte a v týchto experimentoch bolo zistené, že sú aktívne.
Stanovenie využívajúce imobilizovaný receptor ανβ3 z ľudskej placenty.
Podmienky stanovenia boli vyvinuté a ich využiteľnosť overená pomocou [1-125]vitronektínu. Pri overení použiteľnosti stanovenia bola uplatnená analýza Scatchardovho formátu (n=3), pri ktorej boli stanovované počet receptorov (Bmax) a Kd (afinita). Stanovenie sa vykonáva tak, že pred vlastným určením IC50 sú zlúčeniny najskôr testované pri výsledných koncentráciách 10 a 100 mM. Hodnota IC50 bola stanovovaná pre tri štandardné (vitronektín, protilátku LM609 proti αγβ3 a protilátku P1F6 proti αγβ5) a päť referenčných peptidov. Stručne zhrnuté, pri tomto stanovení boli izolované receptory imobilizované na 96 jamkovej doštičke a inkubované cez noc. Receptory boli izolované z normálnej, čerstvej a neinfekčnej (bez HIV, hepatitídy B a C, syfilidy a HTLV) ľudskej placenty. Tkanivo bolo lyzované a nelyzované časti tkaniva boli odstránené centrifugáciou. Lyzát bol sfiltrovaný a receptory boli izolované afinitnou chromatografiou s využitím imobilizovanéj protilátky proti ανβ3· Doštičky boli následne 3x premyté premývacím tlmivým roztokom. Bol pridaný blokujúci tlmivý roztok a doštičky boli inkubované 120 minút pri izbovej teplote.
·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· ···· ·· · I · • ·· ··· · · ·· · • · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
184
V tomto čase boli testované zlúčeniny a [1-125]vitronektín predmiešaný v rezervnej doštičke. Blokujúci tlmivý roztok bol odstránený a na doštičku s imobilizovanými receptormi boli napipetované roztoky testovaných zlúčenín. Reakcia prebiehala 60 minút pri izbovej teplote. Následne bol nenaviazaný materiál odstránený a jamky boli oddelené a aktivita stanovená meraním gama žiarenia.
Stanovenie využívajúce väzbu na iné receptory
Experimenty využívajúce na stanovenie väzbovú afinitu farmaceutických látok podlá vynálezu k receptorom VEGF, Flk-l/KDR a Flt-1 celej bunky sú opísané v publikáciách Ortega a ďalší, Amer. J. Patol., 151:1215 až 1224, 1997 a Dougher a ďalší, Growth Factors, 14:257 až 268, 1997. In vitro stanovenie použitelné na určenie afinity farmaceutických látok podlá vynálezu k receptoru bFGF je opísané v publikácii Yayon a ďalší, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:10643 až 10647, 1993. Gho a ďalší (Cancer Research, 57:3733 až 3740, 1997) opisujú stanovenie pre peptidy viažuce receptor pre angiogenín. Segner a ďalší (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:13612 až 13617, 1997) opisujú stanovenie použitelné pre antagonisty integrínov alBl a a2Bl. Prihláška US 5536814 opisuje stanovenie použitelné pre zlúčeniny, ktoré sa viažu na integrín a5Bl.
Zobrazovanie s využitím modelu OncomouseR
V tejto štúdii sú využívané myši c-Neu OncomouseR a ako kontrola myši FVB. V narkóze vyvolanej pentobarbitalom sodným bolo myšiam injekčné aplikované približne 0,5 mCi rádiofarp maka. Pred touto aplikáciou bolo pri každej myši Oncomouse^ zaznamenané umiestnenie nádorov a ich velikosč stanovená pomocou kaliperu. Pokusné zvieratá boli umiestnené pred objektív kamery tak, aby bolo možné pozoroval zadnú a prednú čas£ tela týchto živočíchov. Na matrici 256 x 256 a pri dvojnásobnom zväčšení boli počas 2 hodín v 5 minútových intervaloch snímané ··
- 185 ·· • · ® · • · ·· • · · · · • · · · ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · • · · · • · · · · obrázky. Po ukončení experimentu boli získané obrázky vyhodnotené tým, že bola stanovená veľkosť nádoru a okolitej oblasti na krku pod slinnými žľazami pri krčnici. Tento model môže byť rovnako použitý na určenie účinnosti rádiofarmak podľa vynálezu, ktoré obsahujú dajaký izotop emitujúci alfa žiarenie, beta žiarenie alebo Augerove elektróny. Rádiofarmaka podľa vynálezu sú aplikované vo vhodných množstvách a ich kumulácia v nádoroch môže byt kvantifikovaná buď neinvazívne, zobrazením týchto izotopov s využitím detekcie súčasne produkovaného merateľného gama žiarenia, alebo vyrezaním nádorov a detekciou rádioaktivity pri využitím štandardných metód. Terapeutický účinok rádiofarmak podľa vynálezu môže byť stanovený monitorovaním rýchlosti rastu nádorov pri kontrolnej skupine myší a pri myšiach, ktorým sú podávané rádiofarmaka podľa vynálezu.
Tento model môže byť rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podľa vynálezu obsahujúcich paramagnetické kovy ako kontrastných látok pre MRI. Po aplikácii vhodného množstva paramagnetickej zlúčeniny podľa vynálezu môže byť živočích umiestnený do komerčne dostupného prístroja pre MRI a tak môže byť zobrazený nádor. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byt ľahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Tento model môže byt rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podľa vynálezu obsahujúcich ťažké kovy ako kontrastných látok pre rôntgenové žiarenie. Po aplikácii vhodného množstva zlúčeniny absorbujúcej rôntgenové žiarenie môže byť živočích umiestnený do komerčne dostupného prístroja na detekciu rôntgenového žiarenia a tak môže byť zobrazený nádor. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byť ľahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
186 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· ·· · · ι • ·· · · · · · ·· · ···· ··· · I ·· ·· ·· ···· ·· ·
Tento model môže byt rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podía vynálezu zahŕňajúcich mikročastice povrchovo aktívnej látky obsahujúcej dajaký echogénny plyn ako kontrastných látok pre ultrazvuk. Po aplikácii vhodného množstva echogénnej zlúčeniny môžu byt nádory v tele živočícha zobrazené s využitím ultrazvukovej sondy umiestnenej v blízkosti nádorov. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byť íahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Králičí model využívajúci Matrigel
Tento model bol upravený na základe modelu používaného na štúdium angiogenézy u myší. Matrigel (Becton & Dickinson, USA) je bazálna membrána bohatá na laminín, kolagén IV, entaktín, HSPG a ďalšie rastové faktory. Po zmiešaní s rastovými faktormi ako napríklad bFGF (500 ng/ml) alebo VEGF (2 μg/ml) a následnej subkutánnej injekčnej aplikácii do oblasti brucha myší, táto látka stuhne do formy gélu a v rozmedzí 4 až 8 dní stimuluje v mieste aplikácie angiogenézu. Pri použitom králičom modele bolo králikom New Zealand White (2,5 až 3,0 kg) injekčné aplikovaných 2,0 ml matrigelu spolu s 1 ug bFGF a 4 μg VEGF. Po siedmich dňoch boli injekčné aplikované rádiofarmaka podía vynálezu a získané obrazy.
Tento model môže byt rovnako použiť na určenie účinnosti rádiofarmak podía vynálezu, ktoré obsahujú dajaký izotop emitujúci alfa žiarenie, beta žiarenie alebo Augerove elektróny. Rádiofarmaka podía vynálezu sú aplikované vo vhodných množstvách a ich kumulácia v miestach angiogenézy môže byť kvantifikovaná buď neinvazívne, zobrazením týchto izotopov s využitím detekcie súčasne produkovaného merateíného gama žiarenia, alebo vyrezaním oblastí angiogenézy a detekciou rádioaktivity s využitím štandardných metód. Terapeutický účinok rádiofarmak podía vynálezu môže byť stanovený monitorovaním rýchlosti rozširovania oblastí angiogenézy pri kontrolnej sku187 ·· 99 99 99 99 · • · 9 9 · · · · 9 9 99 • · 99 9 9 9 9 9 9
99 999 9 9 99 9 9
9999 9·· 99 9
99 99 9999 99 999 pine králikov a pri králikoch, ktorým sú podávané rádiofarmaka podlá vynálezu.
Tento model môže byť rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podlá vynálezu obsahujúcich paramagnetické kovy ako kontrastných látok pre MRI. Po aplikácii vhodného množstva paramagnetickej zlúčeniny podlá vynálezu môže byť živočích umiestnený do komerčne dostupného prístroja pre MRI a tak môžu byť zobrazené oblasti angiogenézy. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byt lahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Tento model môže byt rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podlá vynálezu obsahujúcich ťažké kovy ako kontrastných látok pre róntgenové žiarenie. Po aplikácii vhodného množstva zlúčeniny absorbujúcej róntgenové žiarenie môže byt živočích umiestnený do komerčne dostupného prístroja na detekciu róntgenového žiarenia a tak môžu byť zobrazené oblasti angiogenézy. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byť lahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Tento model môže byť rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podlá vynálezu zahŕňajúcich mikročastice povrchovo aktívnej látky obsahujúcich dajaký echogénny plyn ako kontrastných látok pre ultrazvuk. Po aplikácii vhodného množstva echogénnej zlúčeniny môžu byť oblasti angiogenézy v tele živočícha zobrazené s využitím ultrazvukovej sondy umiestnenej v blízkosti nádorov. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byt lahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
·· ·· ·· ·· ·« • · · · · · · · ·· ···· i · ··· • · · ··· · · ·· · • · · · ··· ·· ·· ·· ·· ···· ··
188
Psí model spontánnej tvorby nádorov
Dospelým psom so spontánne vytvorenými nádormi mliečnych žliaz bola aplikovaná zmes xylazín (20 mg/kg)/atropin (1 ml/kg). Celková anestéza bolo následne dosiahnutá intubáciou zmesou ketamín (5 mg/kg)/diazepam (0,25 mg/kg). Narkóza bola udržovaná aplikáciou zmesi ketamín (3 mg/kg)/xylazín (6 mg/kg). Ked to bolo žiadúce, bolo počas experimentu dýchanie udržované pomocou endotracheálnej trubice (12 cyklov/ minúta, 25 ml/kg). Do periférnych ciev boli zavedené dva katétre 20G; jeden slúžil k infúzii zlúčeniny podlá vynálezu, zatial čo druhým boli odoberané vzorky krvi. Srdcová frekvencia a EKG boli monitorované kardiotachometrom (Biotech, Grass Quincy, MA, spúšťaným elektrokardiogramom generovaným končatinovými zvodmi. Vzorky krvi boli zvyčajne odoberané v 10 minúte (kontrola), po ukončení infúzie (1 minúta), v 15, 30, 60, 90 a 120 minúte, v týchto vzorkách bol stanovovaný celkový počet krviniek a rádioaktivita. Dávka 300 gci/kg rádiofarmaka bola aplikovaná naraz intravenózne a potom nasledovalo prepláchnutie fyziologickým roztokom. Merané hodnoty boli zaznamenávané kontinuálne na detektore (Grass, model 7E) s rýchlosťou posunu papieru 10 mm/minúta alebo 10 mm/sekunda.
Zobrazovanie laterálnych častí tela pokusných živočíchov bolo vykonávané počas 2 hodín na matrici 256 x 256, bez zväčšenia pri frekvencii snímania jeden obrázok za päť minút. Kumulácia zlúčeniny podlá vynálezu v oblasti záujmu bola stanovovaná umiestnením známeho zdroja žiarenia (20 až 90 gCi) do detekčnej oblasti. Za účelom sledovania zadržovania zlúčeniny podlá vynálezu v nádore boli rovnako zhotovené obrázky 24 hodín po aplikácii tejto zlúčeniny. Kumulácia zlúčeniny podlá vynálezu je stanovovaná ako pomer impulzov v oblasti záujmu a celkového počtu impulzov pozorovanej oblasti a vynásobením známou hodnotou μΰί. Výsledkom je hodnota μσί v oblasti zájmu.
·· • · · • ·
- 189 ·· ·· ·· • ·· · · · · · • · ·· · · · • ·· · · · « · • · · · · · · ·· ·· ·· ····
Tento model môže byť rovnako použitý na určenie účinnosti rádiofarmak podľa vynálezu, ktoré obsahujú dajaký izotop emitujúci alfa žiarenie, beta žiarenie alebo Augerove elektróny. Rádiofarmaka podľa vynálezu sú aplikované vo vhodných množstvách a ich kumulácia v nádoroch môže byt kvantifikovaná buď neinvazívne, zobrazením týchto izotopov s využitím detekcie súčasne produkovaného merateľného gama žiarenia, alebo vyrezaním nádorov a detekciou rádioaktivity s využitím štandardných metód. Terapeutický účinok rádiofarmak podľa vynálezu môže byt stanovený monitorovaním rýchlosti rastu nádorov v čase.
Tento model môže byt rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podľa vynálezu obsahujúcich paramagnetické kovy ako kontrastných látok pre MRI. Po aplikácii vhodného množstva paramagnetickej zlúčeniny podľa vynálezu môže byť živočích umiestnený do komerčne dostupného prístroja pre MRI a tak môže byť zobrazený nádor. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byt ľahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Tento model môže byt rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podľa vynálezu obsahujúcich ťažké kovy ako kontrastných látok pre róntgenové žiarenie. Po aplikácii vhodného množstva zlúčeniny absorbujúcíej róntgenové žiarenie môže byt živočích umiestnený do komerčne dostupného prístroja na detekciu róntgenového žiarenia a tak môže byť zobrazený nádor. Účinnosť použitých kontrastných látok môže byť ľahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Tento model môže byt rovnako použitý na posúdenie vhodnosti použitia zlúčenín podľa vynálezu zahŕňajúcich mikročastice povrchovo aktívnej látky obsahujúcej dajaký echogénny plyn ako kontrastných látok pre ultrazvuk. Po aplikácii vhodného množstva echogénnej zlúčeniny môžu byť nádory v tele ži-- 190 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· • · ·· · · ··· • · · ··· · 9 · 9 9 • · · · 9 9 9 ·· ·· ·· ·· ···· ·· · vočícha zobrazené s využitím ultrazvukovej sondy umiestnenej v blízkosti nádorov. Účinnost použitých kontrastných látok môže byt lahko stanovená porovnaním s obrazmi získanými z živočíchov, ktorým nebola táto kontrastná látka aplikovaná.
Je zrejmé, že pri využití hore uvedeným údajov, môže byt uskutočnené množstvo modifikácií a obmien tohto vynálezu. Je preto jasné, že uskutočnenie vynálezu, ako je definované pripojenými patentovými nárokmi, sa môže líšit od uskutočnení opísaných v tejto prihláške.

Claims (51)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Zlúčenina zahŕňajúca smerujúcu časť a chelátotvorné činidlo, vyznačujúca sa tým, že uvedená smerujúca časť spojená s chelátotvorným činidlom je peptid alebo peptidomimetikum viažuce sa na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, a v tejto zlúčenine sú medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom 0 až 1 spojujúce skupiny.
  2. 2. Zlúčenina podlá nároku l,vyznačujúca sa tým, že uvedenou smerujúcou časťou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcíej EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, «νβ3, αγβ5, α4β3, a α2β2 a medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
  3. 3. Zlúčenina podlá nároku 2,vyznačujúca sa tým, že uvedeným receptorom je integrín αγβ3 a daná zlúčenina opísaná vzorcom:
    (Q)ä“Ln-alebo (Q)d-Ln-(Ch)d kde Q je peptid nezávisle vybraný zo skupiny:
    K je dajaká L-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν-2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l, 2-diaminopropánovú?
    192 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · · e · · • · · ··· · ® ·· * • · · · ··· ·· ·· · · ·· ···· ·· ·
    K' je dajaká D-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, S-N-2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
    L je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-alanín a D-alanín;
    M je kyselina L-asparágová;
    M' je kyselina D-asparágová;
    R1 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, 1-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1, 2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín a metionín;
    R2 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín, metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4octovú;
    - 193 ·· ·· • · · · • 4 44
  4. 4 4 4 4
    4 4 4 4
    44 44 ··
    4 4 4
    44 4444
    R3 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l, 2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín a D-metionín;
    R4 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín, D-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    R5 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, kyselinu L-2-aminohexánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-lnaftylalanín, L-lyzín, L-serín, L-ornitín, kyselinu L-l,2diaminobutánovú, kyselinu L-l, 2-diaminopropánovú, L-cysteín, L-penicilamín, L-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú?
    za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1, R2, R3, R4 alebo R5 substituovaný väzbou k Ln, a dalej za predpokladu, že ked R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je
    N-metylarginín, dalej za predpokladu, že ked R4 je kyselina
    2-aminotiazol-4-octová, potom K a K' sú N-metylarginín a dalej ·· ·· ·· ·« ·· • · · · · · · · ··· • · ·· · · · · · • · · · · · · t · · ·
    194 · ·· ·· ···· ·· · za predpokladu, že keóf R5 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K' je N-metylarginín;
    d je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;
    Ln je spojujúca skupina opísaná vzorcom: (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g,-(Z)k-(W)h,-(CR8R9)gH-(W)h„-(CR8aR9a)gu za predpokladu, že g+h+g'+k+h'+g+h+g’ sa nerovná nule;
    W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=0)NH, SO2, (OCH2CH2)S, (CH2CH2O)S,, (OCH2CH2CH2)s«, (CH2CH2CH2O)t a (aa)t,;
    aa je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená aminokyselina;
    Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 3 R10, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci l až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R10;
    R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, COOH, SO3H, PO3H, Cj až C5 alkyl substituovaný 0 až 3 R10, aryl substituovaný 0 až 3 R10, benzyl substituovaný 0 až 3 R10 a C^ až Cg alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 3 R10, NHC(=O)R1X, C(=0)NHR1X, NHC(=O)NHR1X, NHR11, R11 a väzbu k Ch;
    R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k C^, COOR11, OH, NHR11, SO3H, PO3H, aryl substituovaný 0 až 1 R11, Cy až C5 alkyl substituovaný 0 až 1 R12, Cj až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou
    195 ·· ·· ·· ·· ·* • · · · ···· ··· • 9 99 9 9 9 9 9
    9 · 9 ··· · * ·· · • · ··· ·· «· ·· ·· ···· «· «
    O až 1 RX2 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R11;
    R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný 0 až 1 R12, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 1 R12, C3_1Q cykloalkyl substituovaný 0 až l R12, polyalkylénglykol substituovaný 0 až 1 R12, karbohydrát substituovaný 0 až 1 R12, cyklodextrin substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanou 0 až 1 R12, polykarboxyalkyl substituovaný 0 až 1 R12, polyazaalkyl substituovaný 0 až 1 R12, peptid substituovaný 0 až 1 R12, kde uvedený peptid obsahuje 2 až 10 aminokyselín a väzbu k C^;
    R12 je väzba k Ch;
    k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
    h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
    h' je číslo vybrané z nasledujúcich: o, 1, 2, 3, 4 a 5;
    h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: o, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10?
    g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    196 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ·· • B ·· · · ··· • · · · · · · · ·· · • · · · · · ·· g’ je číslo vybrané z nasledujúcich: o, l, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
    7, 8, 9 a 10;
    s* je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    t je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
    7, 8, 9 a 10;
    ť je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    Cje čast viažuca kov opísaná vzorcom vybraným zo skupiny:
    • 9
    9 9 9
    9 9
    - 197
    99 ·· • · · · • · ·· • · · 9 • · · 9 ·· 99
    9 9
    99 9999
    A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 a A8 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: N, NR13, NR13R14, S, SH, S(Pg), O, OH, PR13, PR13R14, P(O)R15R16 a väzbu k Ln?
    E je dajaká väzba, CH alebo spojujúca skupina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: Cj až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný 0 až 3 R17, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17, heterocyklo-Cj^Q alkyl substituovaný 0 až 3 R17, kde uvedenou heterocyklickou skupinou je 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N,
    S a O, C6_10 aryl-C-i^Q alkyl- substituovaný 0 až 3 R17,
    Ο1-10 alkyl-C6_10 aryl- substituovaný 0 až 3 R17 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3
    R13 a R14 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, atóm vodíka, C·^ až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný 0 až 3 R17, ci_iq cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R , heterocyklo-C^_1Q alkyl substituovaný 0 až 3 R17, kde uvedenou heterocyklickou skupinou je 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O, Cg_10 aryl-C1_10 alkyl- substituovaný 0 až 3 R17, ci-io alkyl-Cg_10 arY1-· substituovaný 0 až
    3 R17, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až
    4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R17a elektrón za predpokladu, že ked bud R13 alebo R14 je elektrón, potom druhý z tejto dvojice je rovnako elektrón;
    alebo R13 a R14 spoločne vytvárajú =C(R20)(R21);
    R15 a R16 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, -OH, Cj až C1Q alkyl substituovaný 0 až 3 R17, • · • · · φ · • · · · • « φ
    198 ·· ·· • · · ·· ···· • · ·· · aryl substituovaný 0 až 3 R17, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17, heterocyklo-C1_1Q alkyi substituovaný 0 až 3 R17, kde uvedenou heterocyklickou skupinou je 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O, C6_10 aryl-C1_10 alkyi- substituovaný 0 až 3 R17, C1-10 alkyl-Cg_10 aryl- substituovaný 0 až
    3 R17 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až
    4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R17;
    R17 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3,
    -CN, -co2r18, -c(=o)r18, -c(=o)n(r18)2, -cho, -ch2or18, -OC(=O)R18, -0C(=0)0R18a, -OR18, -OC(=O)N(R18)2, -NR19C(=0)R18, -NR19C(=O,OR18a, -NR19C(=O)N(R18)2, -NR19SO2N(R18)2, -NR19SO2R18a, -SO3H, -SO2R18a, -SR18, -S(=O)R18a, -SO2N(R18)2, -n(r18)2, -NHC(=S)NHR18, =NOR18, no2, -C(=0)NH0R18, -C(=O)NHNR18R18a, -OCH2CO2H, 2-(1-morfolino)etoxy, alkyi, C2-C4 alkenyl, C3-C6 cykloalkyl, C3-C6 cykloalkylmetyl, c2-c6 alkyioxyalky1» aryl substituovaný 0 až 2 R18 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O;
    R18, R18a a R19 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, H, ^-Cg alkyi, fenyl, benzyl, Cj-Cg alkyloxy, halid, nitro, kyano a trifluórmetyl;
    Pg je chrániaca skupina tiolu;
    R20 a R21 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
    H, C-l až C1Q alkyi, -CN, -CO2R25, -C(=0)R25, -C(=O)N(R25)2, c2~c10 1_alkén substituovaný 0 až 3 R23, C2-c10 1-alkín substituovaný 0 až 3 R23, aryl substituovaný 0 až 3 R23, nesaturovaný 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substi·· • · · • ·
    - 199 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· • · · · • · · • · · ·· ···· • · ·· · tuovaný 0 až 3 R23 a nesaturovaný C3_^q karbocyklus substituovaný 0 až 3 R23;
    alternatívne vytvárajú R20 a R21 spolu s divalentným uhlíkovým radikálom, ku ktorému sú pripojené, štruktúru:
    R22 a R23 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
    H, R14, ci_cio alkyl substituovaný 0 až 3 R24, C2“c10 alkenyl substituovaný 0 až 3 R24, C2-C10 alkinyl substituovaný 0 až 3 R24, aryl substituovaný 0 až 3 R24, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituovaný 0 až 3 R24 a C3_10 karbocyklus substituovaný 0 až 3 R24;
    alternatívne vytvárajú R22 a R23 kondenzovaný aromatický alebo 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O;
    a a b označujú pozície možného výskytu dvojných väzieb a n je 0 alebo 1;
    R24 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -C02R25, -C(=O)R25, -C(=O)N(R25)2, -N(R25)3+, -CH2OR25, -OC(=O)R25, -OC(=O)OR25a, -OR25, -OC(=O)N(R25)2, -NR26C(=O)R25, -NR26C(=O)OR25a, -NR26C(=O)N(R25)2, -NR26SO2N(R25)2, -NR26SO2R25a, -SO3H, -SO2R25a, -SR25, -S(=O)R25a,
    -so2n(r25)2, -n(r25)2, =nor25, -c(=o)nhor25, -och2co2h a 2-(l-morfolino)etoxy; a ·· ·· • · · • ·
    - 200 ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · · ·· ···· ·· ·
    R2\ R2^a a r26 s£ v jcaž<3.Om jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: atóm vodíka a až Cg alkyl; a dajakú jej farmaceutický prijatelnú sol.
    4. Zlúčenina podlá nároku 3,vyznačujúca sa tým, že:
    L je glycín;
    R1 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, tyrozín, fenylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, lyzín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú a kyselinu 1,2-diaminopropánovú;
    R2 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    R3 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, D-tyrozín, D-fenylalanin, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2-diaminobutánovú a kyselinu D-l,2-diaminopropánovú;
    R4 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo sku201 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · · 9 9 9 • · · ··· · · · e ·
    9 9 9 9 9 9 9 9 9 •9 ·· 99 9999 99 9 piny zahŕňajúcej: D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-l-naftylalanín, D-lyzín, D-ornitín, kyselinu D-l,2-diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú?
    R5 je dajaká aminokyselina volitelne substituovaná väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-l-naftylalanín, L-lyzín, L-ornitín, kyselinu L-l,2-diaminobutánovú, kyselinu L-l,2-diaminopropánovú a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    d je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2 a 3;
    W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: 0, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=0), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=0)NH, S02, (OCH2CH2)S, (CH2CH2O)S,, (OCH2CH2CH2)s„ a (CH2CH2CH2O)t;
    Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 1 R10, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci l až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 1
    R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, COOH, SO3H, CT až C5 alkyl substituovaný 0 až 1 R10, aryl substituovaný 0 až 1 R10, benzyl substituovaný 0 až 1 R10 a Cj^ až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 1 R10, NHCÍ-OJR11, C(=O)NHR1:L, NHCÍ^OJNHR11, NHR11, R11 a väzbu k ch;
    ·· ·· ·· 99
    9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
    9 9 99 9 9 9 9 9
    - 202 v · · ·· ····
    R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle skupiny zahŕňajúcej: COOR11, OH, NHR11, SO3H, aryl vaný 0 až l R11, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 1 R11, až Cg alkyl substituovaný 0 až 1 R12, C1 až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k Ch;
    R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný 0 až 1 R12, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 1 R12, polyalkylénglykol substituovaný 0 až 1 R12, karbohydrát substituovaný 0 až 1 R12, cyklodextrín substituovaný 0 až l R12, aminokyselinu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k C^;
    k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0 alebo 1;
    h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0 alebo 1;
    h* je číslo vybrané z nasledujúcich: 0 alebo 1;
    zvolené zo substituos je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    s* je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    t je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 a A8 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: NR13, NR13R14,
    S, SH, S(Pg), OH a väzbu k Ln;
    ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· ·· ··· ···· ··· · · ·· ·· ·· ···· ·· ·
    - 203
    E je dajaká väzba, CH alebo spojujúca skupina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: Cx až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný 0 až 3 R17, c3_iq cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R17 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované o až 3
    R13 a R14 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, atóm vodíka, Cx až C10 alkyl substituovaný 0 až 3 R17, aryl substituovaný 0 až 3 R17, 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R17a elektrón za predpokladu, že keď buď R13 alebo R14 je elektrón, potom druhý z tejto dvojice je rovnako elektrón;
    alternatívne R13 a R14 spoločne vytvárajú =C(R20)(R21);
    R17 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -co2r18, -c(=o)r18, -c(=o)n(r18)2, -ch2or18, -OC(=O)R18, -OC(=O)OR18a, -OR18, -OC(=O)N(R18)2, -NR19C(=0)R18,
    -NR19C(=0)0R18a, -NR19C(=0)N(R18)2, -NR19S02N(R18)2 ,
    NR19SO2R18a, -SO3H, -SO2R18a, -S(=O)R18a, -SO2N(R18)2,
    -N(R18)2, -NHC(=S)NHR18, =N0R18, -C(=0)NHNR18R18a, -OCH2CO2H a 2-(l-morfolino)etoxy;
    R18, R18a a R19 sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Ln, H a 0χ-06 alkyl;
    R20 a R21 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
    H, Cx až C5 alkyl, -CO2R25, C2-C5 1-alkén substituovaný 0 až 3 R23, C2-C5 1-alkín substituovaný 0 až 3 R23, aryl substituovaný 0 až 3 R23 a nesaturovaný 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N,
    S a O a substituovaný 0 až 3 R23;
    204 ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· ·· • · ·· · β · I · • · · ··· · · ·· · • · · · ··· · · ·· ·· ·· ···· ·· alternatívne vytvárajú R20 a R21 spolu s divalentným uhlíkovým radikálom, ku ktorému sú pripojené, štruktúru:
    R22 a R23 sú nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej:
    H a R24;
    alternatívne vytvárajú R22 a R23 kondenzovaný aromatický alebo 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O;
    R24 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: -CO2R25, -C(=O)N(R25)2,-CH2OR25, -OC(=O)R -OR25, -SO3H, -N(R25)2 a -OCH2CO2H; a
    R25 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: atóm vodíka a až C3 alkyl.
  5. 5. Zlúčenina podlá nároku 4,vyznačujúca sa tým, že:
    Q je peptid vybraný zo skupiny:
    205 • · • · · • ·· • · · • · · • · ··
    R1 je L-valín, D-valín, D-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln alebo L-lyzín voliteľne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln;
    R2 je L-fenylalanín, D-fenylalanín, D-l-naftylalanín, kyselina 2-aminotiazol-4-octová, L-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln alebo tyrozín volitelne substituovaný na hydroxyskupine väzbou k Ln;
    R3 je D-valín, D-fenylalanín alebo L-lyzín volitelne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln;
    R4 je D-fenylalanín, D-tyrozín substituovaný na hydroxyskupine väzbou k Ln alebo L-lyzín voliteľne substituovaný na e aminoskupine väzbou k Ln;
    za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1 alebo R2 substituovaný väzbou k Ln, a dalej za predpokladu, že ked R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylarginín;
    d je 1 alebo 2;
    W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej; NHC(=O), C(=O)NH, C(=O), (CH2CH2O)si a (CH2CH2CH2O)t;
    R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej; H, NHC(=O)R11 a väzbu k Ch;
    k je 0;
    h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2 a 3;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    206 ·· ·· • · • ·· ·· g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, l, 2, 3, 4 a 5;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    g' je číslo vybrané z nasledujúcich: o, 1, 2, 3, 4 a 5;
    s* je 1 alebo 2;
    t je 1 alebo 2;
    A1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: OH a väzbu k Ln; A2, A4 a A6 sú N;
    A3, A5 a A8 sú OH;
    A7 je väzba k Ln alebo NH-väzba k Ln;
    E je dajaký C2 alkyl substituovaný 0 až 1 R17;
    R·*·7 je =0;
    alternatívne, je A
    A1 je NH2 alebo N=C(R20)(R21);
    E je dajaká väzba;
    A2 je NHR13;
    207 ·· ·· ·· ·· ·· · • 9 · · · · · · · *·· • · ·· · · ···· ŕ· ··· · 9 »9 a a k··· ·»· · · s ·· * 99 9999 99 999
    R13 je heterocyklus substituovaný R17, kde tento heterocyklus je bud pyridín alebo pyrimidín;
    R17 bud väzba k Ln, C(=O)NHR18 alebo C(=O)R18;
    R18 je väzba k Ln;
    R24 je zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: -CO2R25, -OR25, -SO3H a -N(R25)2;
    r25 je v kag(iom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: atóm vodík a metyl;
    alternatívne, je
    \
    A1, A2, A3 a Ä4 sú N;
    A5, A6 a A8 sú OH;
    A7 je väzba k Ln;
    E je C2 alkyl substituovaný 0 až 1 R·1·7; a r!7 je =0.
  6. 6. Zlúčenina podía nároku 3,vyznačujúca sa tým, že táto zlúčenina je vybraná zo skupiny zahŕňajúcej:
    ·· ·· ·· ···· ···· · · • · ·· · · ··· « · · · · · · · · · 4 • · · · · · · · · ·» ·» ·· ···· ··
    - 208 ·· (a) cyklo [Arg-Gly-Asp-D-Tyr (N-[ 2-[ [ [ 5-[karbonyl ] -2-pyridinyl ]hydrazono] metyl]-benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl) Val);
    (b) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr( (N— [2— [ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl ]hydrazono ]metyl ]-benzénsulfónová kyselina ]-18-amino-14aza-4,7,10-oxy-15-oxo-oktadekanoyl) -3-aminopropyl) -Val};
    (c) [ 2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo {D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-GlyAsp))-cyklo {D-Tyr (3-aminopropyl )-Val-Arg-Gly-Asp};
    (d) cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys([2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
    (e) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys( [2-[ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
    (f) [ 2-[ [[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzén· sulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe} )-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
    (g) [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzén sulfónová kyselina]-Phe-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo {Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
    (h) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys( [ 2— [ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
    (i) [2-[ [[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzén sulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal} )-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal};
    (j) cyklo{Arg-Gly-Asp-Lys( [2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyr idinyl ]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Val};
    (k) [2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzén sulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp} )-cyklo{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp};
    (l) cyklo {(Arg-D-Val-D-Tyr (N- [ 2-[ [ [ 5- [karbonyl ] -2-pyridinyl ]hydrazono ]metyl ] -benzénsulfónová kyselina] -3-aminopropy1)-D-Asp-Gly};
    (m) cyklo{D-Lys( [2-[ [[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg};
    209
    • · • • • • ·· • · • e ·· • • • · • · · • · • · • • • • • • • • • • · • • • e « ·· ·· ·· 99 ·· ·· 99
    (η) [2— C[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]benzénsulf ónová kyselina ] -Glu (cyklo {D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}) cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg};
    (o) cyklo{D-Phe-D-Lys([2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] )-D-Asp-Gly-Arg};
    (p) cyklo {N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys- ([ 2- [ [ [ 5- [ karbonyl ] 2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
    (q) cyklo{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys( [ 2— [ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
    (r) 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(karboxymetyl)-1cyklododecyl) acetyl-Glu (cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}) -cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
    (s) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA)};
    (t) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}2(DTPA);
    (u) cyklo{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA-3-aminopropyl)-Val};
    (v) cyklo {Orn(d-N-2-imidazolinyl) -Gly-Asp-D-Tyr (N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl] hydrazono] metyl]-benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
    (w) cyklo{Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3aminopropyl)-Val};
    (x) cyklo{Cys(2-aminoetyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[ 2-[ [ [5[ karbonyl ] -2-pyr idinyl ] hydrazono ] metyl ] -benzénsulf ónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
    (y) cyklo {HomoLys-Gly-Asp-D-Tyr (N- [ 2- [ [ [ 5- [ karbonyl ] 2-pyridinyl ]hydrazono]metyl ]-benzénsulfónová kyselina]-3aminopropyl)-Val};
    (z) cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
    (aa) cyklo{Dap(b-(benzimidazolylacetyl))-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-Val};
    (bb) cyklo(0rn(d-N-2-imidazolinyl)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[ 2-[ [ [ 5-[karbonyl ]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl ]-benzénsulf ónová kyselina])};
    ·· • 9 ·
    9 9 • í :
    ·· ·
    210 ·· ·· « · · · • · ·· • · · · · • · · · ·· ·· ·· 9·
    9 · · 9
    9 9 9 • 99 • · «r • · ·· ·· (cc) cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl) -Gly-Asp-D-Phe-Lys(N—[2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])};
    (dd) cyklo{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[karbonyl]-2pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] -3aminopropyl)-D-Asp-Gly}?
    (ee) cyklo{Orn(d-N-benzylkarbamoyl)-D-Val-D-Tyr(N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly); a (ff) cyklo{Orn(d-N-2-imidazolinyl)-D-Val-D-Tyr(N-[2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly);
    alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ.
  7. 7. Súprava (kit) vyznačujúca sa tým, že táto súprava zahŕňa zlúčeninu podľa nároku 3 alebo dajakú jej farmaceutický prijateľnú soľ a dajaký farmaceutický prijateľný nosič.
  8. 8. Súprava (kit) podľa nároku 7, vyznačuj úca sa t ý m, že táto súprava ďalej zahŕňa jeden alebo viac pomocných ligandov a dajakú redukujúcu látku.
  9. 9. Súprava (kit) podľa nároku 8, vyznačuj úca sa t ý m, že uvedenými pomocnými ligandami sú tricín a TPPTS.
  10. 10. Súprava (kit) podľa nároku 9,vyznačujúca sa t ý m, že redukujúcou látkou je cín(II).
  11. 11. Diagnostický alebo terapeutický metalofarmakon, vyznačujúci sa tým, že tento metalofarmakon zahŕňa: dajaký kov, chelátotvorné činidlo schopné chelátovat daný kov a smerujúcu čast, kde táto smerujúca čast naviazaná na uvedené chelátotvorné činidlo je peptid alebo peptidomime- 211 ·· ·· • · · • fr ·« i ::
    ·· «9 • · · ·· ···· • · ·· · tikum a viaže sa na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, a v tejto zlúčenine sú smerujúca časť a chelátotvorné činidlo spojené 0 až 1 spojujúcou skupinou.
  12. 12. Prípravok podľa nároku 11,vyznačujúci sa tým, že týmto prípravkom je diagnostický rádiofarmakon, uvedeným kovom je rádioizotop vybraný zo skupiny: 99mTc, 95Tc, 111In, 62Cu, 64Cu, 67Ga a 68Ga; smerujúcou časťou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-l, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, αγβ3, ανβ5, α5β1, “4^1' αιΡι a α2^2' a medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
  13. 13. Prípravok podľa nároku 12,vyznačujúci sa tým, že uvedenou smerujúcou čásťou je dajaký cyklický pentapeptid a receptorom je ανβ3.
  14. 14. Prípravok podľa nároku 13,vyznačujúci sa tým, že vedeným rádioizotopom 99mTc alebo 95Tc, a rádiofarmakon ďalej obsahuje dajaký prvý pomocný ligand a dajaký druhý pomocný ligand schopný tento rádiofarmakon stabilizovať.
  15. 15. Prípravok podľa nároku 14,vyznačujúci sa tým, že uvedeným rádioizotopom je 99mTc.
  16. 16. Prípravok podľa nároku 15,vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej :
    99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-Val));
    99mTc(tricín)(TPPMS)(cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly));
    9 9mTc(tricín)(TPPDS)(cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]dia zenido]-3-aminopropy1)-D-Asp-Gly));
    212 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · · ··· • » ·· ·· · t · • ·· ··· · · · » · • · · · · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· · 99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5-[karbonyl] 2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-D-Asp-Gly));
    99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N—[[5— [karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido])));
    99mTc(tricín)(TPPTS)([2—[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Phe-Glu(cyklo{LysArg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe});
    99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2—[[[5— [karbonyl]-2-pyridinyl)hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina] ))};
    99mTc(tricín)(TPPTS)([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl)hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{Lys-ArgGly-Asp-D-Nal } )-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal});
    99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-18-amino-14-aza-4,7,10-oxy15-oxo-oktadekoyl)-3-aminopropyl)-Val));
    99mTc(tricín)(TPPTS)(N-[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-Glu(O-cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))-O-cyklo(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe));
    99mTc(tricín)(TPPTS)(N-[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-Glu(O-cyklo(D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp))O-cyklo(D-Tyr(3-aminopropyl)-Val-Arg-Gly-Asp));
    99mTc(tricín) (TPPTS) (cyklo(Arg-Gly-Asp-Lys (N-[[5[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido])-D-Val));
    99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo{D-Lys([2-[[[5-[karbonyl]2-pyridinyl)hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-DPhe-D-Asp-Gly-Arg});
    99mTc(tricín)(TPPTS)([2-[[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]-Glu(cyklo{D-LysD-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-cyklo{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg});
    99inTc (tricín) (TPPTS) (cyklo {D-Phe-D-Lys ([ 2- [ [ [ 5[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina])-D-Asp-Gly-Arg});
    99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys(N-[[5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido])));
    - 213 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· · · • ·· a · a a· • · · · ♦ · · · ·· a a·*· ··· ·· • a ·· ·· ···· ·· 99mTc(tricín)(TPPTS)(cyklo(Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2[ [ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]hydrazono]metyl]-benzénsulfónová kyselina]))}; a 99mTc(tricín)(1,2,4-triazol)(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N[ [5-[karbonyl]-2-pyridinyl]diazenido]-3-aminopropyl)-Val)).
  17. 17. Prípravok podlá nároku 13,vyznačujúci sa tým, že uvedeným rádioizotopom je i:L1In.
  18. 18. Prípravok podlá nároku 17,vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej ;
    (DOTA-111In)-Glu (cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
    cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-111In)); a cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-111In).
  19. 19. Prípravok podlá nároku 11,vyznačujúci sa tým, že týmto prípravkom je terapeutický rádiofarmakon, uvedeným kovom je rádioizotop vybraný zo skupiny; 186Re, 188Re, 153Sm, 166Ho, 177Lu, 149Pm, 90Y, 212Bi, 103Pd, 109Pd, 159Gd, 140La, 198Au, 199Au, 169Yb, 175Yb, 165Dy, 166Dy, 67Cu, 105Rh, li:LAg, a 192Ir; smerujúcou časťou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej; EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-l/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, αγβ3, αγβ5, a50ľ a40ľ α1β1 a α2β2, a medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
  20. 20. Prípravok podlá nároku 19,vyznačujúci sa tým, že uvedenou smerujúcou časťou je dajaký cyklický pentapeptid a receptorom je ανβ3.
  21. 21. Prípravok podlá nároku 20,vyznačujúci sa tým, že uvedeným rádioizotopom je Sm.
    ·· ·· ·· · ·· ···· · · · · · · ···· ·· · · · • ·· · · · · · 9 · · ··»· ··· ·· ·· ·· ·· ···· ··
    214
  22. 22. Prípravok podľa nároku 21,vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej :
    cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-153Sm));
    cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-153Sm); a cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Tyr (N-DTPA( 153Sm) -3-aminopropyl) -Val)
  23. 23. Prípravok podľa nároku 20,vyznačujúci sa
    1 77 tým, že uvedeným rádioizotopom je Lu.
  24. 24. Prípravok podľa nároku 23,vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej :
    cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-177Lu));
    ( DOTA-1777Lu) -Glu(cyklo {Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}) -cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe};
    cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-177Lu); a cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Tyr (N-DTPA( 177Lu) - 3-aminopropyl) -Val)
  25. 25. Prípravok podľa nároku 20,vyznačujúci sa tým, že uvedeným rádioizotopom je 90 Y.
  26. 26. Prípravok podľa nároku 23,vyznačujúci sa tým, že týmto rádiofarmakonom je (DOTA-90Y)-Glu(cyklo{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-cyklo{LysArg-Gly-Asp-D-Phe};
  27. 27. Prípravok podľa nároku 11,vyznačujúci sa tým, že týmto metalofarmakom j kontrastná látka pre MRI, uve deným kovom je ión paramagnetického kovu vybraný zo skupiny: Gd(III), Dy(III), Fe(III) a Mn(II); smerujúcou časťou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDRZ Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, ανβ3, ανβ5, α5β1, α4βχ, αχβ1 a α2β2, a medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
    ·· • · ·· ·· • ·
    - 215 « · ·· • · · · • · · · • · ·* • · · ·· ··· • · ·· ·
  28. 28. Prípravok podlá nároku 27,vyznačujúci sa tým, že uvedenou smerujúcou časťou je dajaký cyklický pentapeptid a receptorom je αγβ3.
  29. 29. Prípravok podlá nároku 28,vyznačujúci sa tým, že uvedeným iónom kovu je Gd(III).
  30. 30. Prípravok podlá nároku 29,vyznačujúci sa tým, že uvedenou kontrastnou látkou je:
    cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Tyr (N-DTPA(Gd( III)) - 3-aminopropyl) Val).
  31. 31. Prípravok podlá nároku 11,vyznačujúci sa tým, že týmto metalofarmakom je kontrastná látka pre rôntgenové žiarenie, uvedený kov je vybraný zo skupiny: Re, Sm, Ho, Lu, Pm, Y, Bi, Pd, Gd, La, Au, Au, Yb, Dy, Cu, Rh, Ag a Ir; smerujúcou časťou je dajaký cyklický pentapeptid, uvedeným receptorom je αγβ3, a medzi smerujúcou časťou a chelátotvorným činidlom je umiestnená spojujúca skupina.
  32. 32. Prípravok podlá nároku 11,vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je použitý na liečbu reumatickej artritídy.
  33. 33. Prípravok podlá nároku 11,vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je použitý na liečbu rakoviny.
  34. 34. Prípravok podlá nároku 11,vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je použitý na diagnostické zobrazovanie tvorby nových ciev.
  35. 35. Prípravok podlá nároku 12,vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je použitý na diagnostické zobrazovanie rakoviny planárnou gama scintigrafiou alebo SPECT gama scintigrafiou alebo pozitrónovou emisnou tomografiou.
    216 ··
  36. 36. Prípravok podľa nároku 27, vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je použitý na diagnostické zobrazovanie rakoviny magnetickou rezonanciou.
  37. 37. Prípravok podľa nároku 31, vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je použitý na diagnostické zobrazovanie rakoviny rôntgenovou počítačovou tomografiou.
  38. 38. Zlúčenina zahŕňajúca smerujúcu časť a povrchovo aktívnu látku, vyznačujúca sa tým, že uvedená smerujúca časť spojená s povrchovo aktívnou látkou je peptid alebo peptidomimetikum viažuce sa na dajaký receptor, ktorého expresia je počas angiogenézy zvýšená, a v tejto zlúčenine sú medzi smerujúcou časťou a povrchovo aktívnou látkou 0 až 1 spojujúca skupina.
  39. 39. Zlúčenina podľa nároku 38,vyznačujúca sa tým, že uvedenou smerujúcou častou je dajaký peptid alebo peptidomimetikum a uvedený receptor je vybraný zo skupiny zahŕňajúcej: EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, Tie, neuropilin-1, endoglin, endosialin, Axl, ανβ3, ανβ5, α5β1, α^β^, a a me<^zi smerujúcou časťou a a povrchovo aktívnou látkou je umiestnená spojujúca skupina.
  40. 40. Zlúčenina podľa nároku 39,vyznačujúca sa tým, že uvedeným receptorom je integrín ανβ3 a daná zlúčenina je opísaná vzorcom:
    (Q)ri-Ln-S kde Q je cyklický pentapeptid nezávisle vybraný zo skupiny:
    L
    L
    R3-R
    217
    • 44 4 44 4 4 44 4 4 44 4 4 44 4 4 4 4 4 • 4 44 4 4 4 4 4 4 • • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 44 44 4444 44 4 4 4
    K je dajaká L-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l, 2-diaminopropánovú;
    K' je dajaká D-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l, 2-diaminopropánovú;
    L je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-alanín a D-alanín;
    M je kyselina L-asparágová;
    M' je kyselina D-asparágová;
    R1 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, 1-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1, 2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín a metionín;
    R2 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín,
    218
    99 e · 99 99 99 9 • • • · 9 9 9 9 9 9 9 9 • • • 9 9 9 9 9 9 • • • 9 9 9 9 9 9 9 99 99 99 99 99 99 9 9
    kyselinu 1, 2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín, metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4octovú;
    R3 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín a D-metionín;
    R4 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-l-naftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l, 2-diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín, D-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    R5 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, kyselinu L-2-aminohexánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-l-naftylalanín, L-lyzín, L-serín, L-ornitín, kyselinu L-l,2-diaminobutánovú, kyselinu L-l, 2-diaminopropánovú, L-cysteín, L-penicilamín, L-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1, R2, R3, R4 a R5 substituovaný väzbou k Ln, a dalej za predpokladu, že ked
    219
    aa aa • · ·· ·· • • • • ·· • · • • a • · • • • • • • • • • • • • · • • • • • a · • · aa ···· aa • ·
    R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylarginín, ďalej za predpokladu, že keď R4 je kyselina 2-aminotiazol4-octová, potom K a K’ sú N-metylarginín a ďalej za predpokladu, že keď R5 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K' je Nmetylarginín;
    d je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6,
    7, 8, 9 a 10;
    Sf je povrchovo aktívna látka, ktorá je buď lipidové j povahy alebo zlúčenina opísaná vzorcom:
    Έ'-Α10
    A9 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej OH a OR27;
    A10 je OR27;
    R27 je C(=O)C1_20 alkyl;
    E1 je C1_10 alkenyl substituovaný 1 až 3 R28;
    R28 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, -PO3H-R30, =0, -CO2R29, -C(=O)R29, -c(=o)n(r29)2, -ch2or29, -OR29, -N(R29)2, c-l až C5 alkyl a c2 až C4 alkenyl;
    OQ
    R je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, H, Cj až cg alkyl, fenyl, benzyl a trifluórmetyl;
    R38 je väzba k Ln;
    Ln je spojujúca skupina opísaná vzorcom: (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g,-(Z)k-(W)h,-(CR8R9)g„-(W)h„-(CR8aR9a)g.,, ,
    220
    ·· • • ·· • · ·· • • ·· • · • · • • • • · • • ·· • • • • • • • • • • · • • • • • • • · ·· • · ···· ·· • •e
    W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: 0, S, NH, NHC(=0), C(=0)NH, C(=O), C(=0)0, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, S02, (OCH2CH2)20_200, (CH2CH2O)20_2qq, (OCH2CH2CH2)20-200· lCH2CH2CH2°)20-200 a (aa)ti;
    aa je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená aminokyselina;
    Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 3 R10, C3_1Q cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R18;
    R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, COOH, SO3H, PO3H, Cj až Cg alkyl substituovaný 0 až 3 R18, aryl substituovaný 0 až 3 R18, benzyl substituovaný 0 až 3 R18 a Cj až Cg alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 3 R18, NHC(=O)R1]·, C(=O)NHRX1, NHC(=0)NHR1:L, NHR11, R11 a väzbu k Sf i
    R18 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Sf, COOR11, OH, NHR11, SO3H, POgH, aryl substituovaný 0 až 3 R11, Cj až Cg alkyl substituovaný 0 až 1 R12, C^ až Cg alkyloxy zlúčeninu substituovanú 0 až 1 R12 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované 0 až 3 R11;
    R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný 0 až 1 R12,
    5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a O a substituované ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· ·· · » · • ·· ··· · · ·· · ···· ··· ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
    221
    O až 1 R12, C3_10 cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k S^;
    R12 je väzba k S^;
    k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
    h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
    h' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    h” je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, Ί, 8, 9 a 10;
    g* je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;
    ť je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4, 5,
    6, 7, 8, 9 a 10;
    a dajaká jej farmaceutický prijateľná soľ.
  41. 41. Zlúčenina podľa nároku 40,vyznačujúca sa tým, že táto zlúčenina je opísaná vzorcom:
    Q-Ln-Sf kde Q je cyklický pentapeptid nezávisle vybraný zo skupiny:
    ·· ·· ·· ·· ·· ···· · · · · ··· ···· ·· · · • ·· · · · · · ·· · ···· · · · ·· ·· ·· ·· ···· ·· ·
    222 /L\ xL\ /r3\ /l\ \ f \ Ϊ \ T \ f
    R1-R2 R3 R4 L-M1 R3-R5
    K je dajaká L-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
    K' je dajaká D-aminokyselina v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: arginín, citrulín, N-metylarginín, lyzín, homolyzín, 2-aminoetylcysteín, δ-Ν2-imidazolinylornitín, δ-Ν-benzylkarbamoylornitín a kyselinu β-2-benzimidazolylacetyl-l,2-diaminopropánovú;
    L je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-alanín a D-alanín;
    M je kyselina L-asparágová;
    M' je kyselina D-asparágová;
    R1 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, D-valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, 1-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1,2-diaminobutánovú, kyselinu 1,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín a metionín;
    R2 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo sku223 ·· ·· ·· ·· ·· • · · · ···· ··· • · ·· · · 9 9 9 • · · ··· · · ·· · ···· · · · 9 9
    99 ·· ·· ···· ·· · piny zahŕňajúcej: glycín, valín, alanín, leucín, izoleucín, norleucín, kyselinu 2-aminobutánovú, kyselinu 2-aminohexánovú, tyrozín, L-fenylalanín, D-fenylalanín, tienylalanín, fenylglycín, bifenylglycín, cyklohexylalanín, homofenylalanín, L-l-naftylalanín, D-l-naftylalanín, lyzín, serín, ornitín, kyselinu 1, 2-diaminobutánovú, kyselinu l,2-diaminopropánovú, cysteín, penicilamín, metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4octovú;
    R3 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín,
    D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-lnaftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín a D-metionín;
    R4 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, D-valín, D-alanín, D-leucín, D-izoleucín, D-norleucín, kyselinu D-2-aminobutánovú, kyselinu D-2-aminohexánovú, D-tyrozín, D-fenylalanín, D-tienylalanín, D-fenylglycín, D-cyklohexylalanín, D-homofenylalanín, D-l-naftylalanín, D-lyzín, D-serín, D-ornitín, kyselinu D-l,2-diaminobutánovú, kyselinu D-l,2-diaminopropánovú, D-cysteín, D-penicilamín, D-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    R5 je dajaká aminokyselina substituovaná 0 až 1 väzbou k Ln, v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená zo skupiny zahŕňajúcej: glycín, L-valín, L-alanín, L-leucín, L-izoleucín, L-norleucín, kyselinu L-2-aminobutánovú, kyselinu L-2-aminohexánovú, L-tyrozín, L-fenylalanín, L-tienylalanín, L-fenylglycín, L-cyklohexylalanín, L-homofenylalanín, L-l-naftylalanín, L-lyzín, L-serín, L-ornitín, kyselinu L-l,2-diamino• · ·· • ·
    224 • · · · ··· ··· ·· ·· ·· ···· ·· ·»· butánovú, kyselinu L-l,2-diaminopropánovú, L-cystein, L-penicilamín, L-metionín a kyselinu 2-aminotiazol-4-octovú;
    za predpokladu, že v každom Q je jeden z R1, R2, R3, R4 a R5 substituovaný väzbou k Ln, a ďalej za predpokladu, že keď R2 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K je N-metylarginín, ďalej za predpokladu, že keď R4 je kyselina 2-aminotiazol4-octová, potom K a K' sú N-metylarginín a ďalej za predpokladu, že keď R5 je kyselina 2-aminotiazol-4-octová, potom K' je Nmetylarginín;
    Sf je povrchovo aktívna látka, ktorá je buď lipidovej povahy alebo zlúčenina opísaná vzorcom:
    A9
    A9 je OR27;
    A10 je OR27;
    R27 je C(=O)C1_25 alkyl;
    E1 je C1-4 alkylén substituovaný 1 až 3 R28;
    R28 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, -PO3H-R30, =0, -CO2R29, -C(=O)R29, -CH2OR29, -OR29, a C-l až C5 alkyl;
    R29 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: R30, H, Cj až Cg alkyl, fenyl a benzyl;
    R30 je väzba k Ln;
    Ln je spojujúca skupina opísaná vzorcom: (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g,-(Z)k-(W)h,-(CR8R9)gII-(W)h„-(CR8aR9a)g,.
    225 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · • · · · • · · ·· ···· • · • · · • · • · ·· ·
    W je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO2, (OCH2CH2)20_200, (CH2CH2O)20-200' (°CH2CH2CH2^20-200' (CH2CH2CH2°)20-200 a (aa)t.;
    aa je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolená aminokyselina;
    Z je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej: aryl substituovaný 0 až 3 R10, C3_iq cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R10 a 5 až 10 členný heterocyklický systém obsahujúci 1 až 4 heteroatómy nezávisle zvolené zo skupiny N, S a 0 a substituované 0 až 3 R10;
    R6, R6a, R7, R7a, R8, R8a, R9 a R9a sú v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, =0, až C5 alkyl substituovaný 0 až 3 R10, a až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 3 R10 a väzbu k Sf;
    R10 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: väzbu k Sf, COOR11, OH, NHR11, C·^ až C5 alkyl substituovaný 0 až 1 R12 a Cj až C5 alkyloxy zlúčeninu substituovanou 0 až 1 R12;
    R11 je v každom jednotlivom prípade nezávisle zvolené zo skupiny zahŕňajúcej: H, aryl substituovaný o až 1 R12, C3_io cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R12, aminokyselinu substituovanú 0 až 1 R12 a väzbu k Sf;
    R12 je väzba k Sf;
    k je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
    h je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1 a 2;
    ·· ·· • · • · ·
    226 ·· ·« • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· • · ·· ···· h' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    h” je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5?, g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    g je číslo vybrané z nasledujúcich: o, 1, 2, 3, 4 a 5;
    g' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    s' je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    s je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    t je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4 a 5;
    ť je číslo vybrané z nasledujúcich: 0, 1, 2, 3, 4a5;
    a dajaká jej farmaceutický prijateľná sol.
  42. 42. Zlúčenina podlá nároku 41,vyznačujúca sa tým, že táto zlúčenina je vybraná zo skupiny zahŕňajúcej:
    1- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12(cyklo (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) -dodekán-1,12-dion;
    1- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12((ft)-amino-PEG3400-a-karbonyl)-cyklo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) )dodekán-1,12-dion;
    1- (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamino)-12((<Ú-amino-PEG3400-a-karbonyl)-Glu-(cyklo(Arg-Gly-Asp-D-PheLys))2)-dodekán-1,12-dion.
    - 227 ·· ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · • · · · · · • · · · · ·· ···· ·· ·
  43. 43. Prípravok obsahujúci kontrastnú látku pre ultrazvuk, vyznačujúci sa tým, že tento prípravok obsahuje:
    (a) zlúčeninu podía nároku 40 zahŕňajúcu: dajaký cyklický pentapeptid viažuci integrín 0^3, povrchovo aktívnu látku a spojujúcu skupinu medzi uvedeným cyklickým pentapeptidom a povrchovo aktívnou látkou;
    (b) nosič prijateíný pre parenterálnu aplikáciu; a (c) echogénny plyn.
  44. 44. Prípravok obsahujúci kontrastnú látku pre ultrazvuk, vyznačujúci sa tým, že tento prípravok čfalej obsahuje:
    kyselinu 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidovú,
    1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-fosfatidylcholín a
    N-(metoxypolyetylénglykol 5000 karbamoyl)-1,2-dipalmitoylsn-glycero-3-fosfatidyletnanolamín.
  45. 45. Prípravok obsahujúci kontrastnú látku pre ultrazvuk, vyznačujúci sa tým, že uvedeným echogénnym plynom je dajaký C2_5 perfluórkarbón.
  46. 46. Prípravok podía nároku 40,vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je používaný na diagnostické zobrazovanie rakoviny sonografiou.
  47. 47. Prípravok podía nároku 40,vyznačujúci sa tým, že tento prípravok je používaný na diagnostické zobrazovanie tvorby nových ciev sonografiou.
  48. 48. Terapeutický rádiofarmakon, vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon zahŕňa:
    (a) terapeutický rádiofarmakon podía vynálezu; a (b) nosič prijateíný pre parenterálnu aplikáciu.
    - 228 ·· ·· • · · · · • · ·· · • · · · · · • · · · · ·· ·· · ·· ·· • · · 9 • ···· ··
  49. 49. Diagnostický rádiofarmakon, vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon zahŕňa:
    (a) diagnostický rádiofarmakon, kontrastnú látku pre MRI alebo kontrastnú látku pre rôntgenové žiarenie podlá nároku 11; a (b) nosič prijateľný pre parenterálnu aplikáciu.
  50. 50. Terapeutický rádiofarmakon, vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon zahŕňa:
    rádioaktívne značenú smerujúcu časť, kde uvedenou smerujúcou čásťou je dajaká zlúčenina Q podľa nároku 3, a rádioaktívnou značkou je dajaký terapeuticky používaný izotop vybraný zo skupiny zahŕňajúcej 35S, 32P, 125I, 132i a 211At.
  51. 51. Terapeutický rádiofarmakon, vyznačujúci sa tým, že tento rádiofarmakon zahŕňa:
    rádioaktívne značenú smerujúcu časť, kde uvedenou smerujúcou časťou je dajaká zlúčenina Q podľa nároku 5, a rádioaktívnou značkou je dajaký terapeuticky používaný izotop, ktorým je 131I.
SK1395-2000A 1998-03-31 1999-03-29 Farmaceutické zlúčeniny na zobrazovanie porúch angiogenézy SK13952000A3 (sk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US8015098P 1998-03-31 1998-03-31
US11271598P 1998-12-18 1998-12-18
PCT/US1999/006826 WO1999058162A2 (en) 1998-03-31 1999-03-29 Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK13952000A3 true SK13952000A3 (sk) 2001-12-03

Family

ID=26763137

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1395-2000A SK13952000A3 (sk) 1998-03-31 1999-03-29 Farmaceutické zlúčeniny na zobrazovanie porúch angiogenézy

Country Status (20)

Country Link
US (2) US20020001566A1 (sk)
EP (1) EP1068224B1 (sk)
JP (1) JP4487019B2 (sk)
KR (1) KR20010042288A (sk)
CN (1) CN1295578A (sk)
AR (1) AR020586A1 (sk)
AT (1) ATE295369T1 (sk)
AU (1) AU5541799A (sk)
BR (1) BR9909420A (sk)
CA (1) CA2324555A1 (sk)
DE (1) DE69925262T2 (sk)
EA (1) EA200001007A1 (sk)
EE (1) EE200000574A (sk)
ES (1) ES2241313T3 (sk)
HU (1) HUP0101468A2 (sk)
IL (1) IL138093A0 (sk)
NO (1) NO20004917L (sk)
PL (1) PL343804A1 (sk)
SK (1) SK13952000A3 (sk)
WO (1) WO1999058162A2 (sk)

Families Citing this family (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5965132A (en) 1992-03-05 1999-10-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for targeting the vasculature of solid tumors
US6749853B1 (en) * 1992-03-05 2004-06-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Combined methods and compositions for coagulation and tumor treatment
US6537520B1 (en) 1998-03-31 2003-03-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders
US6794518B1 (en) 1998-12-18 2004-09-21 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6989139B2 (en) 2000-02-15 2006-01-24 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Matrix metalloproteinase inhibitors
EP1281068B1 (en) * 2000-05-08 2008-03-26 TTP LabTech Ltd Microphysiometer
US8263739B2 (en) 2000-06-02 2012-09-11 Bracco Suisse Sa Compounds for targeting endothelial cells, compositions containing the same and methods for their use
EP1289565B1 (en) 2000-06-02 2015-04-22 Bracco Suisse SA Compounds for targeting endothelial cells
EP1296678A2 (en) * 2000-06-21 2003-04-02 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals for use in combination therapy
CA2413328A1 (en) * 2000-06-21 2001-12-27 Milind Rajopadhye Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders for use in combination therapy
WO2002004030A2 (en) * 2000-07-06 2002-01-17 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Stable radiopharmaceutical compositions
EP1337278A2 (en) 2000-11-27 2003-08-27 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
US7271180B2 (en) * 2001-01-23 2007-09-18 Wyeth 1-Aryl-or 1-alkylsulfonylbenzazole derivatives as 5-hydroxytryptamine-6 ligands
TW593278B (en) 2001-01-23 2004-06-21 Wyeth Corp 1-aryl-or 1-alkylsulfonylbenzazole derivatives as 5-hydroxytryptamine-6 ligands
US7589061B2 (en) 2001-04-23 2009-09-15 Mallinckrodt Inc. Tc and Re labeler radioactive glycosylated octreotide derivatives
US7138104B2 (en) * 2001-08-08 2006-11-21 Bristol-Myers Squibb Company Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
CA2464472C (en) 2001-10-22 2014-01-07 The Scripps Research Institute Antibody targeting compounds
US7279150B2 (en) 2002-01-24 2007-10-09 Barnes-Jewish Hospital Chelating agents with lipophilic carriers
BR0307206A (pt) 2002-01-24 2004-12-21 Barnes Jewish Hospital Agentes de formação de imagem direcionados por integrina
US7985402B2 (en) 2002-03-01 2011-07-26 Bracco Suisse Sa Targeting vector-phospholipid conjugates
US7211240B2 (en) * 2002-03-01 2007-05-01 Bracco International B.V. Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications
US7794693B2 (en) 2002-03-01 2010-09-14 Bracco International B.V. Targeting vector-phospholipid conjugates
EP1572724A4 (en) * 2002-03-01 2007-03-14 Dyax Corp KDR AND VEGF / KDR BINDING SPEPTIDES AND THEIR USE IN DIAGNOSIS AND THERAPY
US20050250700A1 (en) * 2002-03-01 2005-11-10 Sato Aaron K KDR and VEGF/KDR binding peptides
US20050100963A1 (en) * 2002-03-01 2005-05-12 Dyax Corporation KDR and VEGF/KDR binding peptides and their use in diagnosis and therapy
US7261876B2 (en) 2002-03-01 2007-08-28 Bracco International Bv Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications
US8623822B2 (en) 2002-03-01 2014-01-07 Bracco Suisse Sa KDR and VEGF/KDR binding peptides and their use in diagnosis and therapy
US7666979B2 (en) 2002-03-01 2010-02-23 Bracco International B.V. Methods for preparing multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications and methods of preparing the same
AU2003235489A1 (en) * 2002-05-08 2003-11-11 Tom Mcneil High efficiency solid-state light source and methods of use and manufacture
US6961607B2 (en) * 2002-07-31 2005-11-01 Uzgiris Egidijus E Method for assessing myocardial angiogenesis
US20040224986A1 (en) 2002-08-16 2004-11-11 Bart De Corte Piperidinyl targeting compounds that selectively bind integrins
AU2003265898A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-29 Genentech, Inc. Infusion catheter having an integrated doppler transducer
US20040047917A1 (en) * 2002-09-06 2004-03-11 Stephen Wilson Drug delivery and targeting with vitamin B12 conjugates
US7531622B2 (en) * 2002-09-19 2009-05-12 Centre National De La Recherche Scientifique- Cnrs Synthesis and characterization of novel systems for guidance and vectorization of molecules of therapeutic interest towards target cells
WO2004069281A1 (en) * 2003-01-30 2004-08-19 The General Hospital Corporation Bifunctional molecules comprising at least one integrin-binding and their use in imaging and therapy of angiogenesis and related disorders
AU2004217894B2 (en) 2003-03-03 2010-07-15 Bracco International B.V. Peptides that specifically bind HGF receptor (cMet) and uses thereof
CA2525396A1 (en) * 2003-05-12 2004-11-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist compounds and their use in the preparation of radiopharmaceuticals
EP1651276A4 (en) * 2003-08-08 2009-05-06 Barnes Jewish Hospital EMULSION PARTICLES FOR IMAGING AND THERAPY AND USE METHOD THEREFOR
WO2005016387A2 (en) * 2003-08-12 2005-02-24 University Of Iowa Research Foundation Dna-dependent mri contrast agents
JP2007517874A (ja) * 2004-01-16 2007-07-05 バーンズ−ジューイッシュ ホスピタル 標的化アテローム性動脈硬化症治療法
EP1720887B1 (en) * 2004-02-23 2008-04-02 Dow Gloval Technologies Inc. Aqueous-based adhesive for bonding low surface energy substrates
AU2005253962A1 (en) 2004-06-09 2005-12-29 Kereos, Inc. Lipophilic derivatives of chelate monoamides
ATE359496T1 (de) * 2004-07-02 2007-05-15 Vivactis Nv Messung der wärme erzeugt durch einen chemischen oder biologischen prozess.
EP1861127A1 (en) * 2005-03-10 2007-12-05 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Chelators for radioactively labeled conjugates comprising a stabilizing sidechain
US20090131327A1 (en) * 2005-04-29 2009-05-21 Patrick Doherty Nogo receptor functional motifs and peptide mimetics related thereto and methods of using the same
US20070122408A1 (en) * 2005-10-20 2007-05-31 The Scripps Research Institute Fc Labeling for Immunostaining and Immunotargeting
US20070140973A1 (en) * 2005-12-15 2007-06-21 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Contrast agents for myocardium perfusion imaging
US20070258908A1 (en) * 2006-04-27 2007-11-08 Lanza Gregory M Detection and imaging of target tissue
EP2076120A1 (en) * 2006-09-29 2009-07-08 Washington University Combinations for treatment of neovasculature
WO2008073842A1 (en) * 2006-12-08 2008-06-19 Molecular Image Inc. Methods for diagnosis and monitoring of neurologic diseases using magnetic resonance methods
US8194963B2 (en) * 2008-03-10 2012-06-05 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Efficient estimator of pharmacokinetic parameters in breast MRI
CN102088991A (zh) 2008-05-13 2011-06-08 堪萨斯大学 金属提取肽标签和相关方法
US20100178245A1 (en) * 2009-01-13 2010-07-15 Arnsdorf Morton F Biocompatible Microbubbles to Deliver Radioactive Compounds to Tumors, Atherosclerotic Plaques, Joints and Other Targeted Sites
US8518927B2 (en) 2009-02-10 2013-08-27 The Scripps Research Institute Chemically programmed vaccination
CN101659694B (zh) * 2009-05-06 2012-12-12 河北科技大学 抗肿瘤环五肽化合物及其制备方法
WO2013181461A2 (en) 2012-06-01 2013-12-05 University Of Kansas Metal abstraction peptide with superoxide dismutase activity
CA2907506C (en) * 2013-03-27 2022-09-20 Theranos, Inc. Biological sample processing
EP3335721A1 (en) * 2013-04-12 2018-06-20 Evox Therapeutics Limited Therapeutic delivery vesicles
DE102013113156A1 (de) * 2013-11-28 2015-05-28 Freie Universität Berlin Verbindung und Verfahren zur selektiven Radiomarkierung von Polypeptiden mittels Festphasensynthese
KR102548998B1 (ko) * 2020-03-31 2023-06-29 재단법인 아산사회복지재단 혈전영상을 위한 방사성의약품 및 조성물

Family Cites Families (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4957939A (en) 1981-07-24 1990-09-18 Schering Aktiengesellschaft Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging
DE3360633D1 (en) 1982-02-12 1985-10-03 Unitika Ltd Anti-cancer device
US4472509A (en) 1982-06-07 1984-09-18 Gansow Otto A Metal chelate conjugated monoclonal antibodies
US5135736A (en) 1988-08-15 1992-08-04 Neorx Corporation Covalently-linked complexes and methods for enhanced cytotoxicity and imaging
IL91933A (en) 1988-10-11 1994-12-29 Univ Southern California Their immuno-bracelet and isophiles which are beneficial in increasing vascular permeability or blood supply to tumor or otherwise damaged tissue
EP0534944B1 (en) 1988-11-14 1996-09-11 Brigham And Women's Hospital Antibodies specific for elam-1 and the use thereof
US5376356A (en) 1989-03-14 1994-12-27 Neorx Corporation Imaging tissue sites of inflammation
EP0422186B1 (en) 1989-04-10 1998-12-09 Oncogen Limited Partnership Use of oncostatin m for suppressing mhc antigens
US5395609A (en) 1989-06-19 1995-03-07 Antisoma Limited Synthetic peptides for use in tumor detection
DE69018226T2 (de) 1989-07-20 1995-09-21 Sandoz Ag Markierte polypeptidderivate.
IN172208B (sk) 1990-04-02 1993-05-01 Sint Sa
WO1993008210A1 (en) 1991-10-18 1993-04-29 Beth Israel Hospital Association Vascular permeability factor targeted compounds
CA2452130A1 (en) 1992-03-05 1993-09-16 Francis J. Burrows Methods and compositions for targeting the vasculature of solid tumors
US5965132A (en) 1992-03-05 1999-10-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for targeting the vasculature of solid tumors
US5776427A (en) 1992-03-05 1998-07-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for targeting the vasculature of solid tumors
CN1173991C (zh) 1992-11-13 2004-11-03 马克斯普朗克科学促进协会 作为血管内皮生长因子受体的f1k-1
US5342757A (en) 1992-11-13 1994-08-30 Ludwig Institute For Cancer Research Monoclonal antibodies which specifically binds to endosialin, a 165 Kd glycoprotein found on tumor vascular endothelium, and uses thereof
DE4301871A1 (de) 1993-01-13 1994-07-14 Diagnostikforschung Inst Neue Mittel zur Diagnose von Gefäßerkrankungen
US5744120A (en) 1993-03-30 1998-04-28 The Dupont Merick Pharmaceutical Company Ternary radiopharmaceutical complexes
DE4311023C2 (de) 1993-03-31 1996-05-02 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner von Typ XN¶1¶S¶1¶O¶1¶ für radioaktive Isotope, deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel
WO1995003280A1 (en) 1993-07-19 1995-02-02 Resolution Pharmaceuticals Inc. Hydrazino-type radionuclide chelators having an n3s configuration
US5753230A (en) 1994-03-18 1998-05-19 The Scripps Research Institute Methods and compositions useful for inhibition of angiogenesis
EP0762882A4 (en) 1994-06-29 2002-09-11 Smithkline Beecham Corp Vibronectin Receptor Antagonists
PT771216E (pt) 1994-07-11 2001-07-31 Scripps Research Inst Metodos e composicoes para a coagulacao especifica da vasculatura tumoral
CA2230209A1 (en) 1995-08-30 1997-03-06 G.D. Searle & Co. Meta-guanidine, urea, thiourea or azacyclic amino benzoic acid derivatives as integrin antagonists
DE19536785A1 (de) 1995-09-21 1997-03-27 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ S¶2¶NY für radioaktive Isotope
DE19536781A1 (de) 1995-09-21 1997-03-27 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ XSNS für radioaktive Isotope
DE69628731T3 (de) * 1995-11-01 2012-09-20 Bracco Suisse S.A. Gezielte magnetisch markierte molekularmarkersysteme als nmr-bilderzeugungsmittel
BR9611563A (pt) 1995-11-14 1999-03-02 Du Pont Merck Pharma Composto composição farmacêutica método de tratamento de uma doença inflamatória e ensaio para detectar inibidores de agrecanase
US6331285B1 (en) * 1996-06-05 2001-12-18 Palatin Technologies, Inc. Structurally determined cyclic metallo-constructs and applications
ZA978758B (en) * 1996-10-02 1999-03-30 Du Pont Merck Pharma Technetium-99m-labeled chelator incorporated cyclic peptides that bind to the GPIIb/IIIa receptor as imaging agents
US6056973A (en) 1996-10-11 2000-05-02 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic liposome composition and method of preparation
AU4753997A (en) * 1996-10-16 1998-05-11 Burnham Institute, The Magnetic resonance imaging of thrombi
GB9708265D0 (en) 1997-04-24 1997-06-18 Nycomed Imaging As Contrast agents
WO1998018497A2 (en) 1996-10-28 1998-05-07 Nycomed Imaging As Contrast agents
DE19725368A1 (de) * 1997-06-16 1998-12-17 Merck Patent Gmbh Cyclische Adhäsionsinhibitoren und deren Verwendung für bildgebende Verfahren
EP1015884B1 (en) * 1997-09-10 2008-08-06 The Burnham Institute Methods of identifying molecules that home to angiogenic vasculature in tumors
AU757554B2 (en) * 1998-02-11 2003-02-27 Bracco International B.V. Angiogenesis targeting molecules
JP2002521450A (ja) 1998-07-29 2002-07-16 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド インテグリン受容体アンタゴニスト

Also Published As

Publication number Publication date
NO20004917L (no) 2000-11-02
CN1295578A (zh) 2001-05-16
US6322770B1 (en) 2001-11-27
EE200000574A (et) 2002-10-15
AU5541799A (en) 1999-11-29
AR020586A1 (es) 2002-05-22
DE69925262D1 (de) 2005-06-16
ES2241313T3 (es) 2005-10-16
EP1068224A2 (en) 2001-01-17
PL343804A1 (en) 2001-09-10
JP4487019B2 (ja) 2010-06-23
WO1999058162A3 (en) 2000-04-06
EA200001007A1 (ru) 2001-04-23
NO20004917D0 (no) 2000-09-29
US20020001566A1 (en) 2002-01-03
BR9909420A (pt) 2001-09-25
IL138093A0 (en) 2001-10-31
WO1999058162A2 (en) 1999-11-18
EP1068224B1 (en) 2005-05-11
ATE295369T1 (de) 2005-05-15
JP2002514611A (ja) 2002-05-21
KR20010042288A (ko) 2001-05-25
HUP0101468A2 (hu) 2001-08-28
CA2324555A1 (en) 1999-11-18
DE69925262T2 (de) 2006-02-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1068224B1 (en) Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders
US7052673B2 (en) Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders
AU2007201609A1 (en) Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
AU766822B2 (en) Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
WO2001097860A2 (en) Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders for use in combination therapy
US6524553B2 (en) Quinolone vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6558649B1 (en) Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6838074B2 (en) Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
US6548663B1 (en) Benzodiazepine vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
AU2002331042B2 (en) Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
US7090828B2 (en) Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6818659B2 (en) (2S)-2-amino-4-(2-amino-(3,4,5,6-tetrahydropyrimidin-4-yl) butanoyl and its use in cyclic and acyclic peptides
CZ20003353A3 (cs) Farmaceutické sloučeniny pro zobrazování poruch angiogeneze
AU2002243238A1 (en) Simultaneous imaging of cardiac perfusion and a vitronectin receptor targeted imaging agent
MXPA00009574A (en) Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders