SK11897A3 - 17alpha-dammara compounds, preparation method thereof, pharmaceutical compositions containing them and their use - Google Patents
17alpha-dammara compounds, preparation method thereof, pharmaceutical compositions containing them and their use Download PDFInfo
- Publication number
- SK11897A3 SK11897A3 SK118-97A SK11897A SK11897A3 SK 11897 A3 SK11897 A3 SK 11897A3 SK 11897 A SK11897 A SK 11897A SK 11897 A3 SK11897 A3 SK 11897A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- compound
- damar
- compounds
- formula
- group
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 267
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 240000008548 Shorea javanica Species 0.000 claims description 50
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 16
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 12
- 230000006870 function Effects 0.000 claims description 10
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 9
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 claims description 8
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 7
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001340 alkali metals Chemical group 0.000 claims description 6
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 3
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 claims description 2
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 claims 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 abstract description 10
- 244000208235 Borassus flabellifer Species 0.000 abstract description 6
- 235000006520 Borassus flabellifer Nutrition 0.000 abstract description 6
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 abstract description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 abstract description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 56
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 37
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Natural products OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 19
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 10
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 10
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 10
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 10
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 10
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 9
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 5
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 5
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 201000006512 mast cell neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 208000006971 mastocytoma Diseases 0.000 description 5
- 238000007799 mixed lymphocyte reaction assay Methods 0.000 description 5
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 5
- -1 silyl hydroxy protecting group Chemical group 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920002871 Dammar gum Polymers 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 241001330988 Palmyra Species 0.000 description 4
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 150000001339 alkali metal compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 4
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- DOBRDRYODQBAMW-UHFFFAOYSA-N copper(i) cyanide Chemical compound [Cu+].N#[C-] DOBRDRYODQBAMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- DIOHEXPTUTVCNX-UHFFFAOYSA-N 1,1,1-trifluoro-n-phenyl-n-(trifluoromethylsulfonyl)methanesulfonamide Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)N(S(=O)(=O)C(F)(F)F)C1=CC=CC=C1 DIOHEXPTUTVCNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000000972 Agathis dammara Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 2
- ZGLXUQQMLLIKAN-UHFFFAOYSA-N Deoxypicropodophyllin Natural products COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3CC3C2C(OC3)=O)=C1 ZGLXUQQMLLIKAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007818 Grignard reagent Substances 0.000 description 2
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 2
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 230000003872 anastomosis Effects 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N compound E Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@@H]1C(N(C)C2=CC=CC=C2C(C=2C=CC=CC=2)=N1)=O)C(=O)CC1=CC(F)=CC(F)=C1 JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- ZGLXUQQMLLIKAN-SVIJTADQSA-N deoxypodophyllotoxin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3C[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 ZGLXUQQMLLIKAN-SVIJTADQSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000007336 electrophilic substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 2
- VDDXQSUSMHZCLS-UHFFFAOYSA-N ethenyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)OC=C VDDXQSUSMHZCLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000005678 ethenylene group Chemical class [H]C([*:1])=C([H])[*:2] 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 2
- FVIZARNDLVOMSU-UHFFFAOYSA-N ginsenoside K Natural products C1CC(C2(CCC3C(C)(C)C(O)CCC3(C)C2CC2O)C)(C)C2C1C(C)(CCC=C(C)C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O FVIZARNDLVOMSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 2
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 150000002642 lithium compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 description 2
- DVSDBMFJEQPWNO-UHFFFAOYSA-N methyllithium Chemical compound C[Li] DVSDBMFJEQPWNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 2
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 2
- OKHUDYOUNFDWEI-BGERDNNASA-N (2s)-2-amino-1-(2-diphenoxyphosphorylpyrrolidin-1-yl)-3-(1h-imidazol-5-yl)propan-1-one Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1C(CCC1)P(=O)(OC=1C=CC=CC=1)OC=1C=CC=CC=1)C1=CN=CN1 OKHUDYOUNFDWEI-BGERDNNASA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- UGRVYFQFDZRNMQ-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tri(propan-2-yl)benzenesulfonohydrazide Chemical compound CC(C)C1=CC(C(C)C)=C(S(=O)(=O)NN)C(C(C)C)=C1 UGRVYFQFDZRNMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRHLYCYJQPPOEI-UHFFFAOYSA-N 3-ethenyl-2,2-dimethyloxirane Chemical compound CC1(C)OC1C=C NRHLYCYJQPPOEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 1
- 238000011749 CBA mouse Methods 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N Dioxetane Chemical compound C1COO1 BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 1
- 206010060742 Endocrine ophthalmopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 1
- 241000134253 Lanka Species 0.000 description 1
- 208000004883 Lipoid Nephrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010024715 Liver transplant rejection Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 1
- 235000002789 Panax ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 208000016807 X-linked intellectual disability-macrocephaly-macroorchidism syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000947 anti-immunosuppressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 239000002027 dichloromethane extract Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N disiloxane Chemical compound [SiH3]O[SiH3] KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 150000002085 enols Chemical class 0.000 description 1
- 238000007824 enzymatic assay Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hydrate Chemical compound O.CCOCC DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 150000004795 grignard reagents Chemical class 0.000 description 1
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 208000016036 idiopathic nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 150000002641 lithium Chemical group 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 238000013059 nephrectomy Methods 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940046781 other immunosuppressants in atc Drugs 0.000 description 1
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- IUBQJLUDMLPAGT-UHFFFAOYSA-N potassium bis(trimethylsilyl)amide Chemical compound C[Si](C)(C)N([K])[Si](C)(C)C IUBQJLUDMLPAGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001012 protector Effects 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000002884 skin cream Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 125000001981 tert-butyldimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([H])(C([H])([H])[H])[*]C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 125000004665 trialkylsilyl group Chemical group 0.000 description 1
- PIILXFBHQILWPS-UHFFFAOYSA-N tributyltin Chemical compound CCCC[Sn](CCCC)CCCC PIILXFBHQILWPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
- C07J1/0003—Androstane derivatives
- C07J1/0014—Androstane derivatives substituted in position 17 alfa, not substituted in position 17 beta
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J7/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms
- C07J7/0005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21
- C07J7/001—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group
- C07J7/0015—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group not substituted in position 17 alfa
- C07J7/002—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group not substituted in position 17 alfa not substituted in position 16
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
17^-damarové zlúčeniny, spôsob ich prípravy, farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú, a ich použitie.
Oblasť techniky
Vynález sa týka damarových zlúčenín a ich farmaceutických použití, vrátane spôsobu ich prípravy a farmaceutických prostriedkov, ktoré ich obsahujú.
Doterajší stav techniky
Damarové zlúčeniny predstavujú uznávanú skupinu zlúčenín, ktoré patria medzi triterpény a vyznačujú sa základnou tetracyklickou štruktúrou všeobecného vzorca I
V známych damarových zlúčeninách je táto základná štruktúra bežne substituovaná, obvykle hydroxyskupinou alebo oxoskupinou sú tiež bežne
3, napríklad o damar-3-oly) rové zlúčeniny monosubstituovaná, v polohe (v tomto prípade ide (ide o damar-3-óny). Damasubstituované, obvykle monosubstituované, v polohe 17, ako napríklad v prípade damarénov, ktoré sa nachádzajú v koreňoch ženšenu (Panax ginseng) a v inom rastlinnom materiáli a ktoré v polohe 17 bežne nesú uhľovodíkový zvyšok s obsahom jednej alebo viac, napríklad jednej alebo dvoch, alkénových väzieb (-C=C~). Najtypickejšie je v prípade damarénov uhľovodíkovým substituentom v polohe 17 alkenylový alebo alkadienylový zvyšok s obsahom 8 atómov uhlíka, ktorý môže byť ďalej substituovaný, napríklad jednou alebo viac hydroxyskupinami. Damarové zlúčeniny môžu tiež niesť jeden alebo viac ďalších substituentov, bežne hydroxyskupín, v iných polohách základnej štruktúry alebo môžu v základnej štruktúre obsahovať jednu alebo viac nenasýtených väzieb, napríklad dvojitých väzieb. V damarových zlúčeninách však zostáva nezmenená cyklická štruktúra, stereochemická konfigurácia ako aj rozmiestnenie metylových skupín v polohách 4, 10, 8 a 14, ako je to znázornené vo všeobecnom vzorci I.
Podstata vynálezu
V súlade s vynálezom sa teraz zistilo, že damarové zlúčeniny vykazujú potrebné farmaceutické vlastnosti, predovšetkým imunosupresívne a protizápalové vlastnosti.
V súlade s tým opisuje prvé uskutočnenie vynálezu:
a1) damarovú zlúčeninu na použitie ako liečivo, napríklad na použitie ako imunosupresívum alebo protizápalové činidlo;
a2) damarovú zlúčeninu na prípravu liečiva na terapeutické použitie ako imunosupresívum alebo protizápalové činidlo; alebo/a a3) spôsob liečenia pacienta, ktorý potrebuje imunosupresívnu alebo protizápalovú terapiu, pri ktorom sa tomuto pacientovi podá účinné množstvo damarovéj zlúčeniny.
Medzi konkrétne imunosupresívne alebo/a protizápalové indikácie a stavy zahrnuté vo vyššie uvedených definíciách a1) až a3) patria predovšetkým ľubovoľné z indikácií a stavov konkrétne uvedených ďalej.
Termínom damarová zlúčenina”, ako sa tu používa, sa rozumie zlúčenina, ktorá obsahuje charakteristickú základnú štruktúru všeobecného vzorca I ako je uvedená vyššie, t.j. zlúčenina, ktorá má konkrétnu cyklickú štruktúru, stereochemickú konfiguráciu a rozmiestnenie metylových substituentov, ako je znázornené vo všeobecnom vzorci I. Ak zostáva stereochemická konfigurácia znázornená vo všeobecnom vzorci I nezmenená, rozumie sa, že tento termín zahŕňa zlúčeniny, v ktorých základná štruktúra všeobecného vzorca I nesie jeden alebo viac ďalších substituentov, predovšetkým v polohe 3 alebo/a polohe 17, ako aj zlúčeniny, v ktorých je jedna alebo viac väzieb uhlík-uhlík obsiahnutých v základnej štruktúre nenasýtených, napríklad etylénicky nenasýtených. Rozumie sa teda, že tento termín zahŕňa napríklad ako damar-3-oly tak damar-3-óny.
Rozumie sa predovšetkým, že termín damarové zlúčeniny ako sa tu používa, zahŕňa 17C-damarové zlúčeniny, t.j. damarové zlúčeniny, ktoré sú substituované v polohe 17 skupinou naviazanou na polohu 17 cez atóm uhlíka. Také 17C-damarové zlúčeniny môžu byť mono- alebo disubstituované, bežnejšie monosubstituované, v polohe 17.
Výhodnými damarovými zlúčeninami na použitie podľa vynálezu sú damar-3-oly a ich fyziologicky hydrolyzovateľné a prijateľné estery a damar-3-óny a predovšetkým 17C-damarové zlúčeniny. Predovšetkým výhodnými zlúčeninami na. použitie podľa vynálezu sú teda 17C-damar-3-oly a ich fyziologicky hydrolyzovateľné a prijateľné estery a 17C-damar-3-óny, napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca IA
v ktorom a predstavuje skupinu >CH-ORX, kde R1 predstavuje atóm vodíka alebo fyziologicky odštiepiteľný a prijateľný acylový zvyšok, alebo skupinu >C=0 a
R predstavuje skupinu naviazanú na atóm uhlíka v polohe 17 cez atóm uhlíka.
Termínom fyziologicky hydrolyzovateľný a prijateľný ester, ako sa tu používa, sa rozumie akýkoľvek ester, ktorý sa môže štiepiť za fyziologických podmienok za vzniku kyseliny, ktorá je samotná fyziologicky tolerovateľná v dávkach, ktoré sa majú podávať. Tento termín teda označuje prekurzorové formy ako sú v odbore známe, napríklad acetáty a podobne. Pri aplikácii na damar-3-oly, ako sú definované vyššie, označuje tento termín zlúčeniny, v ktorých je hydroxyskupina v polohe 3 nahradená acyloxyskupinou v polohe 3, v ktorej je acylový zvyšok fyziologicky odštiepiteľný a prijateľný, to znamená, že je odštiepiteľný za fyziologických podmienok za vzniku voľného damar-3-olu a kyseliny, ktorá je fyziologicky tolerovateľná v dávkach, ktoré sa majú podávať. Je potrebné vziať do úvahy, že hydroxyskupiny prítomné v damarových zlúčeninách v iných polohách ako v polohe 3 môžu byť podobne esterifikované, pričom sa rozumie, že takéto estery sú tiež zahrnuté vo vynáleze.
17C-damarové zlúčeniny vo všeobecnosti obsahujú asymetrický atóm vodíka v polohe 17. Takéto zlúčeniny teda existujú v diastereomérnej forme. V prípade napríklad 17C-damar-3-olov je v polohe 3 prítomný ďalší asymetrický atóm uhlíka, v dôsledku čoho vznikajú ďalšie stereomérne varianty. Kde takéto izoméry existujú, rozumie sa, že vynález zahŕňa použitie ako diastereomérnych zmesí tak aj jednotlivých epimérov. Vo všeobecnosti je výhodné použitie damarových zlúčenín v čistej alebo v podstate čistej forme, napríklad vo forme čistého alebo v podstate čistého jediného epiméru, pričom táto forma napríklad obsahuje aspoň 90 %, napríklad aspoň 95 % čistej zlúčeniny alebo čistého epiméru (t.j. obsahuje 10 % alebo menej, s výhodou 5 % alebo menej, iných damarových zlúčenín alebo kontaminujúcich epimérov). V prípade damar-3-olov a ich esterov je hydroxyskupina alebo esterová skupina v polohe 3 s výhodou v β-konfigurácii.
Ako je uvedené vyššie, sú rôzne damarové zlúčeniny známe a opísané v literatúre. V prípade známych damarových zlúčenín je substituent v polohe 17 charakteristicky v β-konfigurácii. Damarové zlúčeniny, v ktorých je substituent v polohe 17 v α-konfigurácii, sú nové a sú zahrnuté v rozsahu vynálezu ako také. 17a-damarové zlúčeniny s výhodou vykazujú lepšie vlastnosti ako zodpovedajúce 17B-damarové zlúčeniny, napríklad zlepšenú stabilitu in vivo a zvýšenú biologickú účinnosť, predovšetkým in vivo.
Podľa svojho ďalšieho uskutočnenia vynález teda tiež opisuje :
b) 17a-damarové zlúčeniny, napríklad 17aC-damarové zlúčeniny, ako aj
c) 17a-damarové zlúčeniny, napríklad 17aC-dainarové zlúčeniny, na použitie ako je uvedené vyššie v bode ax), na prípravu liečiva ako je uvedené vyššie v bode a2) alebo na použitie v spôsobe liečenia, ako je uvedené vyššie v bode a3)·
Výhodnými 17a-damarovými zlúčeninami podľa vynálezu sú 17a-daraar-3-oly a ich fyziologicky hydrolyzovateľné a prijateľné estery a 17a-damar-3-óny, napríklad 17aC-damar-3-oly a ich fyziologicky hydrolyzovateľné a prijateľné estery a 17aC-damar-3-óny.
Medzi konkrétne skupiny 17a-damarových zlúčenín podľa vynálezu patria:
- 17aBH-damarové zlúčeniny (t.j. damarové zlúčeniny, v ktorých je 17a-substituent jediným substituentom v polohe 17);
- 17a,12BH-damarové zlúčeniny (t.j. damarové zlúčeniny, v ktorých je akýkoľvek substituent v polohe 12 v a-konfigurácii);
- 17α,12HH-damarové zlúčeniny (t.j. damarové zlúčeniny, v ktorých je poloha 12 nesubstituovaná) a
- 17a-damarové zlúčeniny, ktoré sú substituované len v polohe 17 a prípadne v polohe 3;
predovšetkým akákoľvek zodpovedajúca 17aC-damarová zlúčenina, -damar-3-ol alebo jeho fyziologicky hydrolyzovateľný a prijateľný ester alebo -damar-3-όη, ako aj ľubovoľné kombinácie takých skupín, napríklad 17αβΗ, 12BH-damarovej zlúčeniny, -damar-3-oly atď.
Konkrétna skupina 17a-damarových zlúčenín podľa vynálezu zahŕňa zlúčeniny všeobecného vzorca IB
v ktorom majú symboly a a R významy uvedené v prípade všeobecného vzorca IA.
17C-substituenty 17C-damarových zlúčenín na použitie podľa vynálezu, ako aj 17aC-damarových zlúčenín podľa vynálezu, napríklad skupiny R vo všeobecných vzorcoch IA a IB sú s výhodou uhľovodíkové skupiny, predovšetkým alifatické uhľovodíkové skupiny. Tieto alifatické skupiny môžu byť s rozvetveným alebo priamym reťazcom, môžu byť nasýtené alebo nenasýtené a môžu niesť jeden alebo viac ďalších substituentov, predovšetkým jednu alebo viac hydroxyskupín. Výhodnými alifatickými skupinami sú nesubstituované alebo hydroxysubstituované alifatické skupiny, predovšetkým alkenylové alebo alkadienylové skupiny. Tieto vyššie uvedené alifatické skupiny vhodne obsahujú do 8 atómov uhlíka. Symbol R teda vhodne predstavuje alifatickú skupinu s obsahom 8 atómov uhlíka, ktorá prípadne obsahuje 1 alebo 2 dvojité väzby a je prípadne substituovaná aspoň jednou hydroxyskupinou.
Rozumie sa, že vynález zahŕňa ako jednotlivé epiméry 17a-damarových zlúčenín tak aj ich diastereomérne zmesi, napríklad v prípade 17a-damar-3-olov. Vo všeobecnosti sú napríklad na farmaceutické použitie podľa vynálezu výhodné 17a-damarové zlúčeniny v čistej alebo v podstate čistej forme (t. j. bez alebo v podstate bez kontaminujúcich 17B-damarových zlúčenín), ktoré napríklad obsahujú aspoň 90 %, napríklad aspoň 95 % 17a-damarovej zlúčeniny (t.j. obsahujú menej ako 10 %, napríkad menej ako 5 % kontaminujúcich 17B-damarových zlúčenín). Ak samotná 17a-damarová zlúčenina existuje vo viac ako jednej epimérnej forme, je výhodné použitie čistých alebo v podstate čistých jednotlivých epimérov, napríklad produktov, ktoré obsahujú aspoň 90 %, napríklad aspoň 95 % čistého epiméru (napríklad, ktoré obsahujú menej ako 10 %, s výhodou menej ako 5 % iných kontaminujúcich epimérov). V prípade 17a-damar-3-olov a ich esterov je hydroxyskupina alebo esterová skupina v polohe 3 vhodne v β-konfigurácii.
Výhodnou zlúčeninou podľa vynálezu je zlúčenina vzorca IC ((17a)-23-(E)-damara-20,23-dién-3B,25-diol) vo voľnej forme alebo vo forme fyziologicky hydrolyzovateľného a prijateľného esteru.
Podľa vynálezu sa nová zlúčenina všeobecného vzorca IC izolovala z múky z výhonkov palmy Borassus flabellifer L.
(palmyry). Palmyra je široko rozšírená v tropických oblastiach ázijského kontinentu a v niektorých krajinách tvorí hlavnú zložku každodennej stravy. Na Srí Lanke sa vonkajšia časť mladých výhonkov, miestne nazývaná Kottakilangu, používa buď ako zelenina alebo sa suší a melie na múku. Táto múka je vhodným zdrojom na izoláciu zlúčeniny vzorca IC. Izolácia a charakterizácia zlúčeniny IC je podrobnejšie opísaná v príklade 1.
V súlade s tým vynález tiež zahŕňa spôsob prípravy zlúčeniny vzorca IC, ktorý zahŕňa izoláciu tejto zlúčeniny z rastlinného materiálu, napríklad z palmyry, Borassus flabellifer L..
Výhodne zahŕňa izolačný postup extrakciu organickým esterom, napríklad etylacetátom, po ktorej nasleduje jeden alebo viac stupňov chromatografického čistenia.
Je známych veľa damarových zlúčenín, v ktorých je substituent v polohe 17 v β-konfigurácii, napríklad damarény a môžu sa získať ako prírodné produkty, napríklad ako extrakty z rastlinných zdrojov. Veľa 17B-damarových zlúčenín sa môže získať napríklad z damarovej živice (ktorú dodáva firma Fluka AG, CH-9470 Buchs, Švajčiarsko) a iných rastlinných zdrojov (viď napríklad Dictionary of Steroids, editori: Hill, Kirk, Makin a Murphy, vydal Chapman and Halí, prvé vydanie, 1991, str. 218 až 222 a 536). Damarové zlúčeniny sa môžu tiež produkovať synteticky, napríklad vhodnou derivatizáciou a modifikáciou damarénov, ktoré sa vyskytujú v prírode. Nižšie sú znázornené schémy, ktoré sú vo všeobecnosti použiteľné na syntézu ako 17a- tak 17B-damarových zlúčenín.
Stupeň 1 t
Stupeň 2
Stupeň 3
Stupeň 4
Stupeň 5
Chromatografické rozdelenie diastereoizomérov i
Stupeň 6
elektrofilné činidlo, napríklad
Stupeň 7
Stupeň 8
(IC)
Vo vyššie uvedenej schéme sú stupeň 5 a nasledujúce stupne uvádzané pre 17ot-epimér. Tieto stupne sú samozrejme rovnako použiteľné ak ide o 17B-epimér.
V stupni 1 sa zavedie chrániaca skupina hydroxyskupiny, skupina Y. Y môže byť ľubovoľnou chrániacou skupinou hydroxyskupiny, ktorá je kompatibilná s nasledujúcimi reakčnými stupňami, napríklad je pri nich stabilná. Vhodne je skupinou Y silylová chrániaca skupina hydroxyskupiny, napríklad trialkylsilylová skupina s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka v každej alkylovej časti, napríklad terc-butyldimetylsilylová skupina. Chrániaca skupina hydroxyskupiny Y sa môže zaviesť pomocou akéhokoľvek zo spôsobov bežne používaných v odbore, napríklad reak ciou zlúčeniny vzorca II s terc-butyldimetylsilylchloridom (TBDMSC) v imidazole.
Zlúčenina všeobecného vzorca III sa podrobí epimerizácii v stupňoch 2 až 4.
V stupni 2 sa zavedie acylová alebo silylová chrániaca skupina W. Vhodnými acylovými alebo silylovými chrániacimi skupinami môžu byť ľubovoľné zo skupín, o ktorých je v odbore známe, že sú citlivé na enolové štiepenie, napríklad s použitím organickej zlúčeniny lítia alebo alkylového Grignardovho činidla. Účelne je skupinou W acylová skupina, napríklad acetylová skupina, zavedená napríklad reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca III s acetánhydridom v prítomnosti p-toluénsulfónovej kyseliny.
V stupni 3 sa zlúčenina všeobecného vzorca IV podrobí reakcii s organickou zlúčeninou lítia, napríklad metyllítiom, alebo Grignardovým činidlom, za vzniku zodpovedajúceho enolátu kovu, pričom M vo všeobecnom vzorci V predstavuje vhodne horčík alebo s výhodou lítium.
V stupni 4 sa uskutoční protonácia zlúčeniny všeobecného vzorca V za vzniku diastereomérnej zmesi zlúčenín všeobecných vzorcov III a VI. Reakcia sa môže uskutočniť s použitím ľubovoľného vhodného protonačného činidla, napríklad alkylamóniumchloridu alebo metylsalicylátu. Odborník berie do úvahy, že zmenou parametrov, napríklad výberom protonačného činidla a reakčných podmienok sa môže stupeň 4 meniť kvôli uprednostneniu produkcie napríklad epiméru všeobecného vzorca VI.
Diastereomérne zmesi získané zo stupňa 4 sa vhodne rozdelia chromatograficky podľa stupňa 4, ako je uvedený v schéme A.
V stupni 5 sa uskutoční triflácia (trifluórmetánsulfonácia) zlúčeniny všeobecného vzorca VI, pričom skratka Tf vo všeobecnom vzorci VII predstavuje skupinu CF3-SO2-. Triflácia sa vhodne uskutoční napríklad reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca VI s kálium-hexametyldisylazánom (KHMDSA) a N-fenyl-bis(trifluórmetánsulfónimidom).
V stupni 6 sa podrobí reakcii zlúčenina všeobecného vzorca VII s organickým sulfátom kovu, napríklad trialkylstanniumkuprátom, napríklad tributylstanniumkuprátom, pričom symbol Zx vo všeobecnom vzorci VII predstavuje napríklad tributylstannioskupinu. Tributylstanniumkuprát sa vhodne tvorí in situ, napríklad ako je opísané nižšie v príklade 2.
V stupni 7 sa uskutoční Stillova reakcia zlúčeniny všeobecného vzorca VIII s vhodným elektrofilným činidlom, napríklad v prítomnosti Pd(CH3CN)2C12. V schéme A je elektrofilné činidlo zvolené tak, že sa získa konkrétny konečný produkt vzorca IC.
V stupni 8 sa zo zlúčeniny všeobecného vzorca IX odstráni chrániaca skupina hydroxyskupiny Y. Odstránenie chrániacej skupiny sa môže uskutočniť pomocou ľubovoľného spôsobu známeho a bežne používaného v odbore, napríklad na odstránenie silylových chrániacich skupín reakciou s tetrabutylamóniumfluoridom (Bu^NF).
Ako je odborníkovi zrejmé, môže sa vyššie uvedená reakčná schéma upraviť, predovšetkým tak, že sa produkujú alternatívne 17a- alebo/a 17B-damarové zlúčeniny. Je teda potrebné vziať do úvahy, že konkrétny typ substituentu v polohe 17 konečného produktu sa môže meniť podľa potreby vhodným výberom elektrofilného činidla použitého v stupni 7 alebo nasledujúcou modifikáciou pôvodne získaného substituentu v polohe 17. Ďalšie damarové zlúčeniny sa môžu získať napríklad modifikáciou 3-hydroxyskupiny (napríklad na získanie zodpovedajúcich ketozlúčenín) alebo výberom východiskového materiálu vzorca II, v ktorom je napríklad acetylová skupina v polohe 17 nahradená alternatívnymi acylovými skupinami alebo reaktívnymi funkčnými ekvivalentami, alebo v ktorom je poloha 3 oxosubstituovaná a napríklad transformáciou oxoskupiny na chránenú skupinu, napríklad nereaktívny funkčný ekvivalent, na čas epimerizácie a elektrofilnej substitúcie. Diastereomérne produkty sa môžu rozdeliť napríklad po dokončení stupňa 7 namiesto po stupni 4 a 17B-epiméry sa môžu pripraviť počnúc od zlúčeniny vzorca
II postupom priamo cez stupeň 5 ďalej.
Podľa alternatívnej schémy B uvedenej nižšie sa môžu produkty zo stupňa 4 schémy A podrobiť elektrofilnej substitúcii pomocou Shapirovej reakcie.
Schéma B
Stupeň 9
Stupeň 10
V stupni 9 sa podrobí reakcii zlúčenina všeobecného vzorca III alebo všeobecného vzorca VI alebo ich zmes s trishydrazínhydrochloridom. Ak sa reakcia aplikuje na 17a-damarové zlúčeniny a ich syntézu, uskutočňuje sa reakcia výhodne za mierne kyslých podmienok, napríklad v prítomnosti pufračných činidiel. Po stupni 9 nasleduje reakcia zlúčenín všeobecných vzorcov Xa/Xb s organickou zlúčeninou alkalického kovu, napríklad alkyllítnou zlúčeninou, napríklad butyllítiom, v stupni 10, za vzniku zlúčenín všeobecných vzorcov Xla/XIb, kde Z2 predstavuje atóm alkalického kovu, napríklad lítia. Zlúčeniny všeobecných vzorcov Xla/XIb sa spracujú ďalej analogicky ako v stupňoch 7 a 8 opísaných vyššie v prípade reakčnej schémy A, najprv reakciou s CuCN na premenu zvyšku Z2 na komplex medi a alkalického kovu (napríklad medi a lítia) a potom reakciou s vybraným elektrofilným činidlom a odstránením chrániacej skupiny.
Obmeny vyššie uvedeného spôsobu, napríklad ako sú opísané vyššie, v prípade, že ide o schému A, sú samozrejme možné, predovšetkým sa môžu použiť alternatívne elektrofilné činidlá v stupni 10, ktoré vedú k alternatívnej substitúcii v polohe 17 konečného produktu a vybrať alternatívne východiskové materiály.
Ako vyplýva z vyššie uvedeného, vynález opisuje nový spôsob prípravy 17C-damarových zlúčenín, vrátane 17aC-, ako aj 17BC-damarových zlúčenín, ktorý, pri širokej aplikácii, zahŕňa reakciu 17-karbonyldamarovej zlúčeniny, napríklad
17-acyldamarovej zlúčeniny, v prípade potreby v chránenej forme, s elektrofilným činidlom, napríklad vhodným etylénovým peroxidom a, ak je to potrebné, odstránenie chrániacich skupín alebo funkcií, napríklad reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca XII
s elektrofilným činidlom všeobecného vzorca R3-H, kde a1 predstavuje skupinu vzorca >CH-OH alebo >C=O v chránenej forme a symboly R2 a R3 predstavujú uhľovodíkové zvyšky také, že súčet počtu atómov uhlíka vo zvyškoch R2 a R3 sa rovná celkovému počtu atómov uhlíka, ktorý obsahuje požadovaný substituent v polohe 17, odstránenie chrániacej skupiny alebo funkcie a v prípade potreby acyláciu získaného produktu vhodnou kyselinou za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca IA, ako je definovaná vyššie. Reakcia s elektrofilným činidlom sa môže uskutočňovať ľubovoľným vhodným spôsobom, aj keď pri použití postupov podľa reakčných schém A a B táto reakcia prebieha cez 17(organok.ovová skupina-C)damarovú zlúčeninu (t. j. 17C-damarovú zlúčeninu, v ktorej je atóm uhlíka 17C-substituentu, priamo naviazaný v polohe 17, substituovaný organokovovou sku17 pinou, napríklad trialkylstannioskupinou - porov. Z1 v zlúčenine všeobecného vzorca VIII v schéme A) alebo 17(alkalický kov-C)damarovú zlúčeninu (t.j. 17C-damarovú zlúčeninu, v ktorej je atóm uhlíka substituentu v polohe 17, priamo naviazaný v polohe 17, substituovaný atómom alkalického kovu, napríklad lítia - porov. zlúčeniny všeobecných vzorcov Xla a Xlb v schéme B), napríklad cez reaktívny medziprodukt všeobecného vzorca XIII
(XIII) v ktorom má symbol a1 význam uvedený v prípade všeobecného vzorca XII a Z predstavuje atóm alkalického kovu alebo organokovovú skupinu. S výhodou Z predstavuje atóm lítia alebo trialkylstannioskupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka v každej alkylovej časti. Tieto reaktívne medziprodukty sa môžu v určitom stupni postupu pripraviť ako také alebo sa môžu počas postupu vytvárať len prechodne.
17B-karbonyldamarové zlúčeniny, napríklad zlúčenina vzorca II uvedeného v schéme A, sú známe (viď napríklad Phytochemistry 26, (12), 3365 (1987) a Tetrahedron 29, 2105 (1973)) alebo sa môžu pripraviť analogicky k známym zlúčeninám alebo ich derivatizáciou. 17a-karbonyldamarové zlúčeniny, napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca IV uvedeného v schéme A, sú nové.
Ako je potrebné ďalej brať do úvahy, vynález tiež zahŕňa spôsob prípravy 17a-karbonyldamarových zlúčenín, pričom tento spôsob zahŕňa epimerizáciu zodpovedajúcej 17B-karbonyldamarovej zlúčeniny v chránenej forme, ak je to potrebné a, ak je to vhodné, odstránenie chrániacich skupín alebo funkcií, naprí18 klad epimerizáciou zlúčeniny všeobecného vzorca Xlla
(Xlla) v ktorom majú symboly a * a R2 významy uvedené v prípade všeobecného vzorca XII a, ak je to potrebné, odstránenie chrániacej skupiny alebo funkcie, na prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca Xllb
H
(Xllb) v ktorom a predstavuje skupinu vzorca >CH-OH alebo >C=0 vo voľnej alebo chránenej forme a R2 má význam uvedený v prípade všeobecného vzorca XII. Konkrétnymi spôsobmi na uskutočnenie epimerizácie sú spôsoby opísané vyššie v súvislosti so stupňami 1 až 4 v schéme A, s prípadným odstránením chrániacich skupín alebo funkcií podľa všeobecných postupov stupňa 8.
Ako sa už uviedlo, sú 17a-karbonyldamarové zlúčeniny, napríklad zlúčeniny všeobecných vzorcov Xllb a VI, nové. 17aC-damarové zlúčeniny, v ktorých je substituentom v polohe 17 niektorý zo substituentov uvedených vo vzorcoch IV, V, VII až IX, Xa, Xb, Xla a Xlb, sú tiež nové. Sú vhodné ako medziprodukty a rozumie sa tiež, že spadajú do rozsahu vynálezu. Z týchto zlúčenín sú predovšetkým zaujímavé, zvlášť ako me dziprodukty, 17a-karbonyldamarové zlúčeniny.
V súlade s tým ďalšie a špecifické uskutočnenie vynálezu zahŕňa:
d) 17a-karbonyldamarové zlúčeniny.
Výhodnými damarovými zlúčeninami, ktoré patria do bodu
d) sú 17a-acyldamarové zlúčeniny, napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca Xllb, napríklad 17a-acetyldamarové zlúčeniny, napríklad zlúčeniny predstavované všeobecným vzorcom VI.
17(organokovová skupina-C)- a 17(alkalický kov-C)-damarové zlúčeniny, vrátane ako 17B- tak predovšetkým 17a-(organokovová skupina C)- a -(alkalický kov-C)-damarových zlúčenín, sú tiež predovšetkým zaujímavé, zvlášť ako medziprodukty.
V súlade s tým ako ešte ďalšie a špecifické uskutočnenie vynález opisuje:
e) 17(organokovová skupina-C)- a 17(alkalický kov-C)-damarové zlúčeniny.
Výhodnými zlúčeninami, ktoré patria do bodu e) sú 17-(1-organokovovou skupinou substituovaný vinylén)a 17-(1-alkalickým kovom substituovaný vinylén)-damarové zlúčeniny, ktorých príkladom sú napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca XIII, napríklad 17-(1-organokovovou skupinou substituovaný vinyl)- a 17-(1-alkalickým kovom substituovaný vinyl)-damarové zlúčeniny, ktorých príkladom sú napríklad zlúčeniny všeobecných vzorcov VIII, Xla a Xlb.
Vhodnými organokovovými skupinami a atómami alkalických kovov sú skupiny a atómy opísané vyššie, pričom predovšetkým zaujímavé sú 17-(lítium-C)-, napríklad 17-(l-lítiumvinylén)-, napríklad 17-(1-lítiumvinyl)-damarové zlúčeniny.
Vzhľadom k výborným vlastnostiam konečných produktov, ktoré sa z nich môžu získať, sú výhodné 17a-damarové zlúčeniny ako sú definované v bode e).
Medzi konkrétne skupiny 17a-karbonyl-, 17-(organokovová skupina-C)- a 17-(alkalický kov-C)-damarových zlúčenín
d) a e), ktoré patria do rozsahu vynálezu, patria ľubovoľné zo skupín zlúčenín definovaných vyššie v súvislosti so 17a-damarovými zlúčeninami všeobecne, vrátane napríklad 17a-karbonyl-, 17-(organokovová skupina-C)- a 17-(alkalický kov-C)-damar-3-olov a damar-3-όηον, vždy vo voľnej forme alebo v chránenej forme, ako aj 17a-karbonyl,BH- a 17a,12BH-damarových zlúčenín atď.
Z vyššie uvedeného opisu spôsobu je zrejmé, že 17-(organokovová skupina-C)-damarové zlúčeniny sa môžu pripraviť napríklad trifláciou 17-karbonyldamarovej zlúčeniny, ktorou sa získa 17-(trifluórmetylsulfát-C)-damarová zlúčenina a podrobením tejto zlúčeniny reakcii s organickým kuprátom kovu, pričom sa východiskový materiál vhodným spôsobom chráni a po tomto postupe nasleduje prípadné odstránenie chrániacich skupín alebo funkcií, napríklad trifláciou (napríklad ako je opísaná vyššie v prípade stupňa 5 v reakčnej schéme A) zlúčeniny všeobecného vzorca XII, ako je definovaná vyššie, napríklad kde zvyšok R2-CO- predstavuje acylovú skupinu, napríklad acylovú skupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, napríklad acetylovú skupinu a podrobením získaného produktu reakcii s organickou zlúčeninou alkalického kovu (napríklad ako je opísané vyššie v prípade stupňa 6 v reakčnej schéme A) a prípadne odstránením chrániacich skupín alebo funkcií, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca XlIIa
Z (XlIIa) v ktorom má symbol a11 význam uvedený v prípade všeobecného vzorca Xllb a Z predstavuje organokovovú skupinu, napríklad trialkylstannioskupinu, napríklad tributylstannioskupinu.
17-(alkalický kov-C)-damarové zlúčeniny sa môžu pripraviť reakciou 17-karbonyldamarovej zlúčeniny s trishydrazínhydrochloridom a reakciou získaného produktu s organickou zlúčeninou alkalického kovu, napríklad butyllítiom, pričom sa východiskový materiál vhodným spôsobom chráni a po tomto postupe nasleduje prípadné odstránenie chrániacich skupín alebo funkcií, napríklad reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca XII, ako je definovaná vyššie, napríklad kde zvyšok R2-CO- predstavuje acylovú skupinu, napríklad acylovú skupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, napríklad acetylovú skupinu, s trishydrazínhydrochloridom a reakciou získaného produktu s organickou zlúčeninou alkalického kovu, napríklad ako je opísané vyššie a prípadne odstránením chrániacich skupín alebo funkcií zo získaného produktu, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca XlIIa ako je uvedený vyššie, kde má symbol a význam uvedený v prípade všeobecného vzorca Xllb a Z predstavuje atóm alkalického kovu, napríklad lítia.
Je potrebné vziať do úvahy, že damarové zlúčeniny na farmaceutické použitie podľa vynálezu budú predovšetkým fyziologicky tolerovateľné alebo farmaceutický prijateľné, napríklad budú netoxické alebo v podstate netoxické v dávkach, ktoré sa majú podávať, alebo budú vykazovať takú toxicitu, ktorá je prijateľná v dávkach, ktoré sa majú podávať, napríklad s ohľadom na ošetrovanú chorobu alebo poruchu. Výber vhodnej damarovej zlúčeniny na farmaceutické použitie sa môže uskutočniť s použitím postupov známych a bežne používaných vo farmaceutickom odbore.
Damarové zlúčeniny, predovšetkým 17a-damarové zlúčeniny ako sú uvedené vyššie, napríklad zlúčeniny vzorcov I, ΙΑ, IB alebo IC, nachádzajú farmaceutické využitie, ako demonštrujú napríklad nasledovné testy.
1. Proliferatívna odpoveď lymfocytov na allogénnu stimuláciu
Obojsmerná MLR, (myšia zmesná lymfocytná reakcia, murine mixed lymphocyte reaction)
0,5 x 10e slezinných buniek zo samice myši Balb/c vo veku 8 až 10 týždňov sa inkubuje počas 5 dní spoločne s 0,5 x 10e slezinných buniek zo samice myši CBA vo veku 8 až 10 týždňov. Allogénne bunky vyvolajú proliferatívnu odpoveď v populácii slezinných buniek zodpovedajúceho organizmu, ktorá sa meria začlenením značeného prekurzora do DNA. Testované zlúčeniny sa pridávajú na začiatku inkubácie v rôznych koncentráciách a proliferatívna odpoveď sa porovnáva s neošetrenými kontrolami. Damarové zlúčeniny v tomto teste typicky vykazujú hodnoty ICso od približne 100 do približne 10 nM alebo nižšie (v porovnaní s ICso približne 2 nM v prípade cyklosporínu A).
Literárny odkaz: T. Meo (1979) The MLR in the mouse, v Immunological Methods, editori L. Lefkovits a B. Pernis, Academic Press, N. Y. str. 227 až 239.
2. Cytotoxická a cytostatická účinnost s použitím línie transformovaných T-buniek človeka (Jurkat) x 104 buniek Jurkat sa pestuje v konečnom objeme 0,2 ml počas 72 hodín a potom sa spočíta počet buniek pomocou enzymatického testu s použitím p-nitrofenyl-N-acetyl-B-D-glukosaminidu ako substrátu. Testované zlúčeniny sa pridávajú v rôznych koncentráciách na začiatku kultivácie a cytotoxicita sa porovnáva s neošetrenými kontrolami. Zistí sa, že damarové zlúčeniny sú neúčinné pri koncentráciách do 5 pM, čo svedčí o tom, že imunosupresívna účinnosť je špecifická.
3. Cytotoxická a cytostatická účinnosť in vitro s použitím línie mastocytomových buniek P-815.
Doska (Costar) s 96 jamkami sa naplní médiom (100 pl na jamku), zlúčeniny, ktoré sa majú testovať, sa pridajú do hor23 neho radu jamiek ako vzorky s objemom 25 μΐ, 25 μΐ obsahu každej jamky sa oddelí a pridá sa do zodpovedajúcej jamky v nasledujúcom nižšom rade. Pridanie média, miešanie a prenos 25 μΐ do nasledujúceho nižšieho radu sa opakuje, až sa príde na koniec dosky. Posledných 25 μΐ jamky pridá 100 μΐ bunkovej P-815, 30000 buniek na jamku) inkubácia pri teplote 37 °C s 5 až 7 % oxidu uhličitého.
sa odstráni. Potom sa do každej suspenzie (mastocytomové bunky a počas 48 hodín sa uskutočňuje vo zvlhčenej atmosfére vzduchu Proliferácia buniek sa stanoví s použitím zariadenia, ktoré počíta bunky, alebo pomocou enzymatického kolorimetrického testu: dosky sa centrifúgujú počas 10 minút pri 3000 otáčkach za minútu (EC Centra-7R). Supernatant sa opatrne odstráni, bunky sa raz premyjú PBS (fyziologický roztok pufrovaný fosfátovým pufrom, od firmy Dulbecco, bez vápnika a horčíka), pridá sa 50 μΐ na jamku 0,5 % roztoku prípravku Triton-X 100 (získaného 0,5 ml prípravku Triton X-100 v 99,5 ml vody) a doska sa dôkladne trepe počas 5 až 10 minút pri teplote miestnosti. Pridá sa 50 μΐ na jamku substrátu (p-nitrofenyl-N-acetyl-B-D-glukosaminidu) a potom sa uskutočňuje inkubácia počas 60 minút pri teplote 37 C. Potom sa pridá 150 μΐ pufra 2 a dosky sa merajú pri vlnovej dĺžke 405 nm. Testované zlúčeniny sa pridávajú v rôznych koncentráciách na začiatku inkubácie a proliferácia buniek sa porovná s neošetrenými kontrolami. Zistí sa, že damarové zlúčeniny neovplyvňujú proliferáciu pri koncenntráciách do 5 μΜ, čo svedčí o tom, že imunosupresívna účinnosť je špecifická.
Literárny odkaz: H. Staehelin (1962) A simple quantitative test for cytostatic agents using non-adhering cells in vitro, Med. exp. 7: 92 až 102.
4. Lokalizovaná reakcia štepenec versus hostiteľ (graft versus host, GvH, reaction) u krýs (ford a kol., TRANSPL. PROC. 10 (1979) 258) x 10v slezinných buniek zo 6 týždňov starých samíc krýs Wistar/Furth (WF) sa injikuje subkutánne v deň 0 do ľavej zadnej labky samíc krýs (F344 x WF)Fx s hmotnosťou približne
100 g. Zvieratá sa liečia počas 4 nasledujúcich dní a podkolenné lymfatické uzliny sa odstránia a zvážia na 7. deň. Rozdiel v hmotnosti medzi dvomi lymfatickými uzlinami sa berie ako parameter na zhodnotenie reakcie. Testované zlúčeniny sa podávajú denne počas 4 dní v rôznych dávkach perorálne a inhibícia sa porovná s neošetrenými kontrolami. Damarové zlúčeniny sú účinné (inhibujú GvH reakciu) v tomto testovacom modeli pri dávkach rádovo od 10 pg do 10 mg na kg a deň perorálne. Zistí sa, že 17a-damarové zlúčeniny (napríklad zlúčenina vzorca IC) sú až približne 100-krát účinnejšie ako zodpovedajúce 17B-epiméry.
5. Obličková aloštepová reakcia u krýs
Jedna oblička zo samice krysy Fisher 344 sa transplantuje na renálnu cievu jednostranne (ľavá strana) nefrektomizovaného WF krysieho príjemcu s použitím anastomózy koniec ku koncu. Uretrická anastomóza je tiež koniec ku koncu. Liečba testovanou zlúčeninou v rôznych dávkach perorálne sa začne v deň transplantácie a pokračuje počas 14 dní. Druhostranná nefrektómia sa uskutoční siedmy deň po transplantácii, čím je príjemca závislý na činnosti darovanej obličky. Prežitie štepenca v porovnaní s kontrolou sa berie ako parameter pre funkčný štepenec. Damarové zlúčeniny predlžujú prežitie štepenca v tomto testovacom modeli rádovo od 10 pg do 10 mg na kg a deň perorálne. Zistí sa, že 17a-damarové zlúčeniny sú podstatne účinnejšie (až približne 100-krát až 1000-krát) ako zodpovedajúce 17B-damarové zlúčeniny.
6. Experimentálne vyvolaná alergická encefalomyelitída (EAE) u krýs (Levine a kol., AM. J. PATH. 47 (1965) 61; McFarlin a kol., J. IMMUNOL. 113 (1974) 712; Borel, TRANSPLANT and CLIN. IMMUNOL. 13 (1981) 3)
Samcom krýs Wistar sa injikuje do zadnej labky zmes hovädzej miechy a kompletného Freundovho adjuvans. Symptómy choroby (paralýza chvosta a oboch zadných končatín) sa obvykle vyvinú počas 16 dní. Zaznamená sa počet chorých zvierat ako aj čas nástupu choroby. Testovaná zlúčenina sa podáva perorálne v rôznych dávkach počas 12 dní počnúc v čase senzitizácie. Damarové zlúčeniny inhibujú nástup choroby v tomto testovacom modeli v dávkach rádovo od 10 pg do 10 mg na kg a deň perorálne. Zistí sa, že 17a-damarové zlúčeniny sú podstatne účinnejšie (približne 100-krát až 1000-krát) ako 17B-damarové zlúčeniny.
7. Artritída indukovaná Freundovým adjuvans (Winter a Nuss, ARTHRITIDIS AND RHEUMATISM 9 (1966) 394; Billingham a Davies, HANDBOOK OF EXPERIMENTAL PHARMACOL (editori Vane a Ferreira, Springer Verlag, Berlín), 50/11, (1979) 108 až 144)
Samcom alebo samiciam krýs OFA a Wistar s telesnou hmotnosťou 150 g sa injikuje intrakutánne ku koreňu chvosta alebo zadnej labky 0,1 ml minerálneho oleja s obsahom 0,6 mg lyofilizovaného tepelne usmrteného Mycobacterium smegmatis. V modeli rozvíjajúcej sa artritídy sa liečba testovanou zlúčeninou začne bezprostredne po injekcii adjuvans (dni 1 až 18); v modeli rozvinutej artritídy sa liečba začína 14. deň, keď je sekundárny zápal dobre vyvinutý (dni 14 až 20). Na konci experimentu sa meria zdurenie kĺbov pomocou mikrokaliperu. Damarové zlúčeniny inhibujú postup choroby v modeli rozvíjajúcej sa artritídy alebo v modeli rozvinutej artritídy v denných dávkach rádovo od 10 μg do 10 mg na kg. Zistí sa, že 17a-damarové zlúčeniny sú podstatne účinnejšie ako 17B-damarové zlúčeniny.
8. Primárna humorálna imunitná odpoveď na červené krvinky oviec (MD, Mishell-Dutton) x 10v myších slezinných buniek (OF 1, samice vo veku 8 až 10 týždňov) sa kultivuje spoločne s 3 x 10v erytrocytov ovce (sheep red blood cells, SRBC) počas 3 dní v konečnom objeme 1 ml v doskách s 24 jamkami. Lymfocyty sa izolujú, premyjú a nanesú v hustote 1 x 10® buniek na mäkký agar s čerstvým antigénom (SRBC). Po inkubačnom čase 60 až 90 minút sa pridá komplement (sérum morčaťa), v inkubácii sa pokračuje počas ďalších 60 minút a potom sa test vyhodnotí spočítaním plakov pod mikroskopom. Počas trojdennej inkubácie sa lymfocyty senzitizujú na antigén (SRBC). Pri novej inkubácii s antigénom vylučujú B-lymfocyty špecifickú protilátku, ktorá sa viaže na antigén v blízkosti sekrétujúceho lymfocytu. Pridanie komplementu spôsobí lýzu erytrocytov potiahnutých protilátkou za vzniku plaku. Každý plak reprezentuje jednu bunku, ktorá produkuje protilátku. Testovaná zlúčenina sa pridáva na začiatku inkubácie v rôznych koncentráciách. Damarové zlúčeniny inhibujú tvorbu plakov v tomto testovacom modeli v koncentráciách rádovo od 10 do 100 nM.
Literárne odkazy: R. I. Mishell a R. W. Dutton (1966) Immunization of normál mouse spleen celí suspensions in vitro.
Science 153: 1004 až 1006 a R. I. Mishell a R. W. Dutton (1967) Immunization of dissociated spleen celí cultures from normál mice. J. Exp. Med. 126: 423 až 442.
9. DTH (hypersenzitivita oneskoreného typu, delayed-type hypersensitivity) indukovaná bunkami SRBC-T^.
μΐ zmesi v pomere 1 : 1 (objem : objem) kl.onu buniek Th (senzibilizovaných červených krviniek ovce) (2 x 106) a 10 % suspenzie červených krviniek ovce (SRBC) sa injikuje subkutánne do pravej zadnej labky samice myši C57 BL/6 vo veku 6 až 12 týždňov. 50 μΐ suspenzie buniek SRBC nariedenej v pomere 1 : 1 (objem : objem) PBS sa injikuje subkutánne do ľavej zadnej labky, na meranie nešpecifického zdurenia labky v dôsledku injekcie. O 24 hodín neskôr sa zmeria hrúbka pravej a ľavej zadnej labky. Testované zlúčeniny sa podávajú 24 hodín a 2 hodiny pred injekciou v rôznych dávkach perorálne. Na konci experimentu sa vypočíta percento zvýšenia hrúbky pravej labky v porovnaní s ľavou labkou [hrúbka pravej labky = x; hrúbka ľavej labky = y; percento špecifického zvýšenia = z; z = ((x-y)/y.lOOJ. 17a-damarové zlúčeniny inhibujú reakciu
DTH v tomto testovacom modeli v dávkach rádovo 1 až 100 μg / kg perorálne. 17B-damarové zlúčeniny inhibujú reakciu DTH v dávkach rádovo 1 až 100 mg / kg.
Literárne odkazy: A. T. J. Bianchi, H. Hooijkaas, R. Brenner, R. Tees, A. A. Nordin a M. H. Schreier (1981) Clones of helper T-cells mediate antigén specific, H-2 restricted DTH. Náture 290: 62 až 63 a P. Hermann, M. H. Schreier,
J.-F. Borel a C. Feurer (1988) Mast celí degranulation as a major event in the effector phase of delayed-type hypersensitivity induced by cloned helper T cells. Int. Archs Allergy appl. Immun. 86: 102 až 105.
10. Systémový lupus erythematosus (SLE) u myší (NZB/NZW)
U samíc novozélandskej čierno/bielej myši (NZB/NZW)F1 sa spontánne vyvíjajú charakteristiky, ktoré pripomínajú systémový lupus erythematosus. V 2 až 3 mesiacoch sa u nich vyvíjajú antinukleárne protilátky, v 5 až 6 mesiacoch sa vyvíja systémová imunitná nefritída a proteinúria a môže sa u nich predpovedať sklon k chronickej renálnej mortalite vo veku 8 až 9 mesiacov. S liečením sa začne vo veku 24 týždňov, keď zvieratá vykazujú proteinúriu. Zlúčeniny sa podávajú perorálne trikrát týždenne počas 12 týždňov. Každý druhý týždeň sa určuje stav zvierat a po skončení experimentu sa zvieratá pošlú na histologický rozbor. V každej skupine sa použije 10 myší. 17a-dammarové zlúčeniny sú účinné pri prevencii nástupu choroby vo vyššie uvedenom testovacom modeli pri podávaní každý druhý deň v dávkach 5 až 100 μς / kg perorálne. 17B-damarové zlúčeniny sú podobne účinné pri podávaní každý druhý deň v dávkach 1 až 100 mg / kg perorálne.
Literárny odkaz: B. S. Andrews, R. A. Eisenberg, A. N. Theofilopoulos, S. Izui, C. B. Wilson, P. J. Mc J. B. Roth a F.
J. Dixon (1978) Spontaneous murine lupus-like. syndroms: clinical a manifestation in several strains. J. Exp. Med. 148: 1198.
Damarové zlúčeniny, napríklad 17a-damarové zlúčeniny, ako sú opísané vyššie, napríklad zlúčeniny vzorcov I, IA, IB alebo IC, sú v súlade s tým vhodné ako liečivá, napríklad ako imunosupresívne ako aj protizápalové činidlá.
Ako imunosupresívne činidlá sú tieto zlúčeniny vhodné predovšetkým na prevenciu akútnej alebo/a chronickej orgánovej alebo tkanivovej rejekcie, napríklad na liečenie príjemcov transplantátov srdca, pľúc, kombinácie srdce-pl’úca, pečene, obličky, slinivky brušnej, kože alebo rohovky. Indikujú sa tiež na prevenciu ochorení štepenec versus hostiteľ (graft-versus-host disease), ako je ochorenie, ktoré nasleduje po transplantácii kostnej drene.
Ako imunosupresívne a protizápalové činidlá sú tieto zlúčeniny tiež vhodné na liečenie autoimúnnych ochorení a zápalových stavov, predovšetkým zápalových stavov s etiológiou, ktorá zahŕňa autoimúnny komponent ako je artritída (napríklad reumatoidná artritída, chronická progresívna artritída a arthritis deformans) a reumatické ochorenia. Medzi špecifické autoimunitné ochorenia, pri ktorých sa môžu damarové zlúčeniny použiť, patria autoimúnne hematologické poruchy (vrátane napríklad hemolytickej anémie, aplastickej anémie, anémie chudobných červených krviniek a idiopatickej trombocytopénie), systémový lupus erythematosus, polychondritída, skleredom, Wegenerová granulomatóza, dermatomyositída, chronická aktívna hepatitída, myasthenia gravis, psoriáza, Steven-Johnsonov syndróm, idiopatická sprua, autoimunitné zápalové črevné ochorenia (vrátane napríklad ulceratívnej kolitídy a Krohnovej choroby) , endokrinná oftalmopatia, Gravesova choroba, sarkoidóza, roztrúsená skleróza, primárna biliárna cirhóza, juvenilný diabetes (diabetes mellitus typu I), uveitída (predná aj zadná), suchá keratokonjuktivitída a jarná keratokonjuktivitída, intersticiálna fibróza pľúc, psoriatická artritída a glomerulonefritída (s alebo bez nefrotického syndrómu, napríklad vrátane idiopatického nefrotického syndrómu alebo nefropatie minimálnej výmeny (minimal change nephropathy)).
Damarové zlúčeniny, napríklad 17a-damarové zlúčeniny, ako sú opísané vyššie, sa ďalej indikujú na použitie na liečenie plešatosti a na podporu rastu vlasov a na liečenie astmy, napríklad inhalačným podaním.
Damarové zlúčeniny, napríklad 17a-damarové zlúčeniny, ako sú opísané vyššie, sa tiež indikujú na použitie v prípade stavov, pri ktorých sa môžu použiť kortikosteroidy.
Pre vyššie uvedené indikácie sa bude vhodné dávkovanie samozrejme líšiť v závislosti napríklad na konkrétnom ošetrovanom pacientovi, spôsobe podania, povahe a závažnosti ošetrovaného stavu a požadovanom účinku. Vo všeobecnosti sa však uspokojivé výsledky u zvierat dosiahnu pri denných dávkach od približne 0,001 do 10 mg na kg a deň perorálne. U väčších cicavcov, napríklad človeka, leží indikovaná denná dávka v rozsahu od približne 0,05 do približne 500 mg zlúčeniny podávanej orálne naraz alebo vhodnejšie v delených dávkach dvakrát až štyrikrát denne, pričom dávky nutné pri použití 17a-damarových zlúčenín budú na hornom konci tohto rozsahu a dávky pri použití 17B-damarových zlúčenín budú na spodnom konci.
Pri transplantáciách orgánov u človeka zahŕňa indikovaný dávkovací režim počiatočnú jedinú orálnu dávku 0,05 až 10 mg / kg zlúčeniny 4 až 12 hodín pred operáciou, potom sa rovnaká dávka udržiava ako denná dávka počas jedného alebo dvoch týždňov po operácii a potom sa postupne znižuje podľa hladiny v krvi až sa dosiahne udržiavacia dávka približne 0,02 až 2 mg na kg a deň. Ak sa táto zlúčenina podáva spoločne s inými imunosupresívami, napríklad ako súčasť terapie tromi alebo štyrmi liečivami, môže sa použiť nižšia dávka (napríklad 0,01 mg na kg a deň intravenózne; 0,01 až 1 mg na kg a deň orálne ako počiatočnú dávka).
Damarové zlúčeniny, napríklad 17a-damarové zlúčeniny, ako sú opísané vyššie, sa môžu podávať ľubovoľným bežným spôsobom, predovšetkým enterálne, napríklad orálne, napríklad vo forme roztokov na pitie, tabliet alebo kapsúl, alebo parenterálne, napríklad vo forme injikovateľných roztokov alebo suspenzií. Obvykle sú pre systémové podania výhodné orálne dávkovacie formy, aj keď je v niektorých prípadoch, napríklad pri prevencii odmietnutia transplantátu pečene, potrebná intravenózne injikovateľná forma. Zlúčenina sa môže tiež podávať miestne alebo dermálne, napríklad vo forme dermálneho krému alebo gélu alebo podobného prípravku, alebo na aplikáciu do oka, vo forme očného krému, gélu alebo očných kvapiek. Vhodné jednotkové dávkovacie formy na orálne podanie obsahujú napríklad od 0,05 do 10 mg alebo 12,5 mg zlúčeniny na dávku.
Farmaceutické prostriedky na podanie damarových zlúčenín, napríklad 17a-damarových zlúčenín, ako sú opísané vyššie, sa môžu pripraviť ľubovoľným spôsobom známym alebo bežne používaným v odbore, napríklad dôkladným zmiešaním s vhodnými farmaceutický prijateľnými riedidlami alebo nosičmi vrátane vody v čistote vhodnej na použitie v liečivách alebo injekciách. Ako je uvedené vyššie, budú farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú damarové zlúčeniny, napríklad 17a-damarovú zlúčeninu, s výhodou obsahovať damarovú zlúčeninu v čistej alebo v podstate čistej forme, napríklad vo forme čistého alebo v podstate čistého jediného epiméru.
V súlade s tým, čo bolo uvedené vyššie, vynález tiež zahŕňa:
f) farmaceutický prostriedok, ktorý obsahuje damarovú zlúčeninu, napríklad 17a-damarovú zlúčeninu, ako sú opísané vyššie, napríklad zlúčeninu vzorca I, ΙΑ, IB alebo IC, v kombinácii s farmaceutický prijateľným riedidlom alebo nosičom.
Vynález je podrobnejšie opísaný, avšak len na ilustráciu, v nasledujúcich príkladoch, ktoré majú vzťah k pripojeným obrázkom.
Opis obrázkov na výkresoch
Na obr. 1 je znázornený graf, ktorý predstavuje výsledky DTH-testu (DTH = hypersenzitivita oneskoreného typu, delayed-type hypersensitivity) uskutočňovaného so vzorkami extraktov palmyrovej múky a kontrolnými vzorkami. Test sa uskutočňoval na myšiach s použitím klonu buniek T . Použili sa extrakty s objemom 200 ml z 10 g palmyrovej múky, aplikácia sa uskutočňovala perorálne. Na pozdĺžnej osi sú vynesené jednotlivé typy extraktov, pričom symbol k znamená kontrola”. Na zvislej osi je znázornené zvýšenie hrúbky labky v stotinách mm. Symbol x znamená ”80 mg / kg perorálne”.
Obr. 2 predstavuje protónové NMR-spektrum zlúčeniny izolovanej v príklade 1.
Obr. 3 predstavuje 13C-NMR-spektrum zlúčeniny izolovanej v príklade 1.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Izolácia a charakterizácia zlúčeniny vzorca IC
Predbežné štúdie vzorky múky v výhonkov palmyry (Borassus flabellifer L.), každý s hmotnosťou 10 g, sa extrahujú 200 ml nasledujúcich rozpúšťadiel, na zabezpečenie vhodného extrakčného postupu:
| - etylacetátom | (A) |
| - petroléterom | (B) |
| - metanolom | (C) |
| - vodou | (D) |
vzorka s hmotnosťou 600 g sa extrahuje s použitím Soxhletovho extraktora hexánom s teplotou varu 60 až 70 ’C počas 16 hodín a potom vriacim dichlórmetánom počas 16 hodín. Týmto postupom sa získa po odparení vo vákuu 1,1639 g hexánového extraktu (E) a 0,335 g dichlórmetánového extraktu (F).
Frakcie sa rozpustia v etanole a testujú sa pomocou
Mishell-Duttonovho testu (testu primárnej humorálnej imunitnej odpovede na červené krvinky oviec (SRBC) in vitro, MD-testu) a testu zmesnej lymfocytnej reakcie, mixed lymphocyte reaction, MLR-test) a ich cytotoxicita sa testuje na línii mastocytomových buniek P-815.
Výsledky s pokusnými extraktami:
Extrakty A, B a E vykazujú inhibičnú účinnosť na aktivované lymfocyty in vitro (MD-test, vyššie opísaný ako test 8), pričom extrakt A je najúčinnejší (IC je približne pri koncentrácii menšej ako zriedenie 1 : 4000). Najmenej účinným z účinných frakcií je extrakt E (IC približne zriedenie 1 : 200). Najmenej toxický pre mastocytomové bunky P-815 (v teste opísanom vyššie ako test 3) je extrakt B. Najlepší pomer účinnosti k toxicite však vykazuje extrakt A, ktorý je najúčinnejší pri inhibícii zmesnej lymfocytnej reakcie (v teste opísanom vyššie ako test 1). Získané výsledky sú uvedené nižšie v tabuľkách 1, 2 a 3.
Tabuľka 1
Primárna humorálna imunitná odpoveď (MD-test)
| extrakt | koncentrácia | % inhibície |
| A | 1 : 40 | 100 |
| 1 : 400 | 100 | |
| 1 : 4000 | 76 | |
| B | 1 : 40 | 100 |
| 1 : 400 | 90 | |
| 1 : 4000 | 52 | |
| C | 1 : 40 | 100 |
| 1 : 400 | 20 | |
| 1 : 4000 | 5 |
Tabuľka 2
Zmesná lymfocytná reakcia
| extrakt | koncentrácia | % inhibície |
| A | 1 : 500 | 100 |
| 1 : 2500 | 70 | |
| 1 : 12500 | -50 stimulácia | |
| B | 1 : 500 | 100 |
| 1 : 2500 | -40 | |
| 1 : 12500 | -42 | |
| C | 1 : 500 | -40 |
| 1 : 2500 | -30 | |
| 1 : 12500 | -29 |
Tabuľka 3
Test s mastocytomovými bunkami P-815 (test cytotoxicity)
| extrakt | koncentrácia | % inhibície |
| A | 1 : 50 | 100 |
| 1 : 250 | 100 | |
| 1 : 1250 | 38 | |
| B | 1 : 50 | 100 |
| 1 : 250 | 90 | |
| 1 : 1250 | -2 | |
| C | 1 : 50 | 100 |
| 1 : 250 | 65 | |
| 1 : 1250 | 10 |
U rôznych extraktov sa tiež stanovuje in vivo hypersenzitívna reakcia oneskoreného typu (delayed-type hypersensitivity reaction, vyššie opísaný test 9), na získanie ďalšej informácie pre rozhodnutie, ktoré roztoky sa majú použiť na extrakciu vo veľkom rozsahu. Na tento účel sa piatim myšiam hodinu pred podaním antigénu jedenkrát orálne podajú rovnaké vzorky (extrakty z 10 g múky). Reakcia sa vyhodnotí 24 hodín po injekcii antigénu. Ako pozitívna kontrola sa použije cyklosporín A. Výsledky sú uvedené na obr. 1. Len extrakt A/B (extrakty A a B v kombinácii) vykazuje výraznú inhibičnú účinnosť in vivo .
Extrakt A (etylacetátový extrakt) vykazuje najsľubnejšie účinky in vitro a in vivo a vyberie sa na extrakciu vo veľkom rozsahu.
Izolácia a charakterizácia zlúčeniny vzorca IC kg palmyrovej múky (z Borassus flabellifer L.) sa rozdelí na päť častí po 10 kg. Každá z nich sa extrahuje 20 1 etylacetátu pri teplote miestnosti a po 1 hodine sa extrakt prefiltruje. Tento postup sa opakuje s 15 1 etylacetátu. Zmiešané filtráty s objemom 175 1 sa zahustia vo vákuu, čím sa získa hnedý olejovitý zvyšok s hmotnosťou 95,5 g, ktorý sa potom roztrepe trikrát v rozpúšťadlovom systéme tvorenom 500 ml 90 % vodného metanolu a 1 1 hexánu, pričom zo spodnej fázy sa po odparení vo vákuu získa 19,8 g surovej tuhej látky. Táto látka sa nanesie na stĺpec s rozmermi 8 x 35 cm, ktorý obsahuje približne 2 kg silikagélu 60 a chromatograficky sa spracuje s použitím zmesi metyl-terc-butyléteru a metanolu, v ktorom sa obsah metanolu postupne zvyšuje z 2 % na 50 %, ako elučného činidla. Odoberú sa tri frakcie č. 1, 2 a 3, každá s objemom 450 ml, účinné predovšetkým v MLR-teste.
Frakcie č. 2 a 3 (s hmotnosťou 1,92 g) sa znovu nanesú na stĺpec silikagélu s rozmermi 5,5 x 36 cm a stĺpec sa premýva zmesou hexánu a acetónu, v ktorej sa obsah acetónu postupne zvyšuje z 20 % na 50 %. 22 frakcií (s hmotnosťou 1,19 g) z tejto stĺpcovej chromatograf ie účinnosti sa chromatografie, na tenkej zmieša so vrstve v MLR-teste (s hmotnosťou zvyšnou
0,28 g) identifikovaných pomocou (TLC) a testu biologickej frakciou č. 1 účinnou z predchádzajúceho chromatograf ického stupňa. Nasledujúci purifikačný stupeň sa uskutoční na stĺpci Sephadex LH-20 s rozmermi 5 x 85 cm s použitím zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 1 : 1 ako elučného činidla, s monitorovaním UV-svetlom pri vlnovej dĺžke 220 nm, čím sa získa 6 biologicky účinných frakcií, ktoré poskytnú 809 mg produktu. Tento produkt sa ďalej spracuje po rozdelení na tri rovnaké vzorky pomocou preparatívnej vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC) na stĺpci Spherisorb ODS-2 RP18 (5 Mm) s rozmermi 20 x 250 mm. Použije sa gradientová elúcia s lineárnym gradientom (70 % až 100 %) zmesi acetonitrilu a metyl-terc-butyléteru v pomere 9 : 1 vo vode a frakcie sa izolujú s použitím monitorovania UV-svetlom pri 220 nm.
Izoluje sa 6 frakcií účinných v MLR-teste (32 mg) a separujú sa na rovnakom stĺpci pre HPLC ako je uvedený vyššie, ale s použitím elúcie izokratickou zmesou metanolu, vody a metyl-terc-butyléteru v pomere 7:2:1 a detekcie pri 220 nm, čím sa získa 7 účinných frakcií s celkovou hmotnosťou 9,3 mg. Tento stupeň sa opakuje na rovnakom stĺpci pre HPLC s použitím izokratickej elúcie zmesou acetonitrilu a vody v pomere 87 : 13 a monitorovania pri 220 nm. Detegujú sa štyri účinné frakcie (1,3 mg). Nakoniec sa na stĺpci pre HPLC LiChrospher RP18 (5/im) s rozmermi 4 x 250 mm separuje vzorka s hmotnosťou 100 μg s použitím elúcie acetonitrilom s prietokom 1,5 ml za minútu. Frakcie sa odoberajú na báze UV-detekcie s použitím sústavy diód súčasne pri 220 a 240 nm. Zistí sa, že látka účinná v MLR-teste je prítomná vo frakcii s jediným a čistým píkom pri HPLC pri rôznych vlnových dĺžkach, s retenčným časom približne 11,6 minúty. Zvyšná účinná zložka (1,1 mg) z predchádzajúceho stupňa sa spracuje ako 11 vzoriek po 100 μg presne rovnakým spôsobom a z frakcií s jediným čistým píkom sa po ich spojení a zahustení získa 0,5 mg bielej amorfnej zlúčeniny. Vlastnosti a fyzikálne charakteristiky tejto zlúčeniny sú zhrnuté nižšie v tabulke 4.
Zmeria sa účinnosť izolovanej zlúčeniny v teste 1 (myšej zmesnej lymfocytnej reakcie, murine mixed lymphocyte reaction) a jej cytotoxická a cytostatická účinnosť na bunky Jurkat a P-815 (test 3) a porovná sa s účinnosťami cyklosporínu A a silicicolínu v rovnakým testoch. Získané výsledky sú uvedené nižšie v tabuľke 5.
Tabuľka 4
Vlastnosti
1. vzhľad bezfarebný prášok
2. hmotnostné spektrum (FAB, ionizácia rýchlymi neutrálnymi časticami) m/e = 443 (ΜΗ*)
3. molekulový vzorec
4. UV-spektrum (metanol) koncová absorpcia
5. protónové NMR-sprektrum pri 500 MHz v deuterochloroforme, deuterochloroform ako vnútorný štandard viď obr. 2
6. X3C-NMR-spektrum pri 125,7 MHz v deuterochloroforme, deuterochloroform ako vnútorný štandard viď obr. 3
7. rozpustnosť rozpustná v chlorof orme, metano1e, nerozpustná vo vode
8. retenčný čas pri HPLC
11,6 min.
Legenda k tabuľke 4:
a na stĺpci Merck LiChrospher 100 RP-18 (5 μιη) s rozmermi x 250 mm, s acetonitrilom pri prietoku 1,5 ml za minútu, detekcia pri 210 nm s použitím detektora so sústavou fotodiód Waters 996
Tabuľka 5
Biologické účinnosti izolovanej zlúčeniny in vitro, v porovnaní s cyklosporínom A a silicicolínom; hodnoty ICso v ng / ml
| MLR-test | test na bunkách Jurkat | test na bunkách P-815 |
| cyklosporín A 4 | >5000 | >5000 |
| silicicolín 2 | 2,5 | 4 |
| zlúčenina 10,5 až 11,0 vzorca IC | >5000 | >5000 |
Cyklosporín A sa používa ako referenčné imunosupresívne činidlo.
Silicicolín sa používa ako referenčné cytostatické činidlo .
Príklad 2
Syntéza (17a)-23-(E)-damara-20,23-dién-3B,25-diolu (zlúčeniny vzorca IC)
a) Stupeň 1 postupu v schéme A
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17a-acetylhexanor-damarén
Δ
1) TBDMSQ ImidaZDl
K roztoku 12,0 g zlúčeniny A (Phytochemistry, citované vyššie) a 13,6 g imidazolu v 450 ml dimetylformamidu sa v atmosfére argónu pridá 25,0 g terc-butyldimetylchlórsilánu (TBDMSC1). Reakčná zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti, nariedi sa dietyléterom a premyje sa vodným 5 % roztokom hydrogénuhličitanu sodného a roztokom chloridu sodného. Organická vrstva sa vysuší síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku. Chromatografickým spracovaním na silikagéli s použitím zmesi hexánu a etylacetátu ako elučného činidla sa získa zlúčenina uvedená v názve (zlúčenina B) vo forme bielej peny.
R (na silikagéli): 0,53 (zmes hexánu a etylacetátu v pomere
9:1) XH-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 3,15 (1H, dd, J = 5/12, H-C(3)), 2,65 až 2,45 (1H, m,
H-C(17)), 2,10 (3H, s, HaCCO)
b) Stupeň 2 postupu v schéme A
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17-acetylhexanor-damarén-enolacetát
Roztok 1,0 g hydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej v 200 ml acetánhydridu sa zohrieva na teplotu 140 ’C počas 30 minút. Pri teplote miestnosti sa pridá 3,0 g zlúčeniny B a reakčná zmes sa zohrieva počas 3 hodín na teplotu 140 “C. Počas reakčného času sa pomaly oddestiluje kyselina octová. Reakčná zmes sa zahustí za zníženého tlaku na objem približne 100 ml, nariedi sa dietyléterom a extrahuje sa studeným vodným 5 % roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva sa vysuší síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku. Flash chromatografiou na silikagéli s použitím zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 95 : 5 sa získa zlúčenina uvedená v názve (zlúčenina C) vo forme bielej tuhej látky, pričom ide o zmes dvoch diastereomérnych enolacetátov.
R (na silikagéli): 0,41 (zmes hexánu a etylacetátu v pomere : 5) XH-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 3,15 (1H, dd, J = 5/12, H-C(3)), 2,50 až 2,00 (3H, m,
H-C(13), H2-C(16)), 2,07 a 2,06 (3H, s, diastereomérny
H CCOO)
c) Stupne 3 a 4 postupu v schéme A
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17B-acetylhexanor-damarén
K roztoku 445 mg zlúčeniny C v 10 ml absolútneho dietyléteru sa v atmosfére argónu pri teplote 0 ’C pridá 3,75 ml 1,6 M éterového roztoku metyllítia. Reakčná zmes sa mieša počas 1 hodiny pri teplote 0 ’C, ochladí sa na teplotu -78 ’C a pridá sa k nej 150 mg metylsalicylátu. Reakčná zmes sa mieša počas 30 minút pri teplote -78 ’C, pridá sa voda a zmes sa extrahuje etyléterom. Organická vrstva sa vysuší síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku. Chromatografickým vyčistením na silikagéli s použitím zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 4 : 1 ako elučného činidla sa získa zlúčenina uvedená v názve (zlúčenina D) vo forme bielej peny.
R£ (na silikagéli): 0,34 alfa-ketón, 0,26 beta-ketón (zmes hexánu a etylacetátu v pomere 95 : 5) XH-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 3,15 (1H, dd, J = 5/12, H-C(3)), 3,00 až 2,94 (1H, m,
H-C(17)), 2,11 (3H, s, H3CCO)
d) Stupeň 5 postupu v schéme A
3B-terc-butyldimetylsiloxy-20-trif luórmetánsulfonyloxy-17a-hexanor-damar-20-én
Q
1)
2) fenyltrifluórmetánsulfónimid
K roztoku 236 mg zlúčeniny D v 25 ml tetrahydrofuránu sa v atmosfére argónu pri teplote -78 ’C pridá roztok 4,0 ml kálium-bis(trimetylsilyl)amidu (15 % v toluéne). Reakčná zmes sa zohreje na teplotu 5 ’C, mieša sa počas 0,5 hodiny pri tejto teplote, potom sa ochladí na teplotu -30 ’C a rýchlo sa pridá 1,25 g N-fenyltrifluórmetánsulfónimidu v 10 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa zohreje na teplotu 0 ’C, mieša sa pri teplote 0 ’C počas 5 minút, vyleje sa do pufra s pH 7 a extrahuje sa trikrát etyléterom. Zmiešané éterové fázy sa vysušia sí41 ranom sodným, odparia do sucha a chromátograficky sa vyčistia na silikagéli s použitím zmesi éteru a hexánu 3 : 97 ako elučného činidla, čím sa získa 203 mg (67 %) zlúčeniny uvedenej v názve (zlúčenina H) vo forme bezfarebných kryštálov.
XH-NMR (360 MHz, deuterochloroform), charakteristické signály: 2,85 až 2,94 (široký q, 1H, BH-C(17)), 3,20 (dd, 1H, aH-C(3)), 5,12 (široký d, 1H, J = 4, Ha-C(21)), 5,20 (d, 1H, J = 4 Hz, Hte-C(21))
e) Stupeň 6 postupu v schéme A
3e-terc-butyldimetylsiloxy-20-tri-n-butylstannyl-17o!-hexanor-damar-20-én
tí
BujSnCuCNLí
K suspenzii 3,15 g CuCN v 200 ml tetrahydrofuránu sa v atmosfére argónu pri teplote -78 ’C pridá roztok 44 ml n-butyllítia (1,6N v hexáne). Zmes sa mieša pri teplote -50 ’C počas 10 minút a potom sa k takto získanému zelenému roztoku pri teplote -78 ’C pridá 18,6 ml n-(butyl)3SnH. Po uplynutí 10 minút sa pridá 2,14 g vinyl-triflátu (= vinyl-trifluórmetánsulfonátu) v 30 ml tetrahydrofuránu, reakčná zmes sa mieša pri teplote -78 ’C počas 10 minút, za intenzívneho miešania sa vyleje do zmesi 25 % vodného chloridu amónneho a hexánu v množstve 0,75 1 : 0,5 1, odfiltruje sa zrazenina a zmes sa extrahuje trikrát hexánom. Zmiešané organické fázy sa vysušia nad síranom sodným, odparia sa do sucha a chromátograficky sa vyčistia na silikagéli s použitím hexánu ako elučného činidla, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (zlúčenina J, 53 %) vo forme bezfarebného viskózneho oleja.
XH-NMR (360 MHz, deuterochloroform), charakteristické signály: 2,82 až 2,92 (široký q, 1H, BH-C(17)), 3,14 (dd, 1H, aH-C(3)), 5,18 (široký s, 1H, H-C(21)), 5,80 (široký s,
1H, H-C(21))
f) Stupeň 7 postupu v schéme A
3B-terc’-butyldimetylsiloxy-17a-23- (E) -damara-20,23-dién-25-ol
K roztoku 0,4 g 2,2-dimetyl-3-vinyloxiránu (Tetrahedron, 1989, 45, 979) a 1,36 g zlúčeniny J v 12 ml tetrahydrofuránu sa pri teplote miestnosti pridá roztok 24 mg Pd(CH3CN)aCl2 v 0,3 ml vody a 12 ml dimetylformamidu. Reakčná zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Ľahko zakalený žltý roztok sa vyleje do vody a extrahuje sa etyléterom. Zmiešané organické fázy sa vysušia nad síranom sodným a odparia sa do sucha, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve (zlúčenina K) vo forme žltej voskovitej tuhej látky, ktorá sa použije bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom stupni.
g) Stupeň 8 postupu v schéme A (17a)-23-(E)-damara-20,23-dién-3B,25-diol
Roztok 1,45 g zlúčeniny K v 60 ml tetrahydrofuránu sa pri teplote 60 ’C nechá počas 1,5 hodiny reagovať so 100 ml tetrabutylamónium-fluoridu (1 M roztokom v tetrahydrofuráne). Reakčná zmes sa vyleje do 1 1 polovičné nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a extrahuje sa éterom. Zmiešané organické fázy sa vysušia nad síranom sodným, odparia sa do sucha a chromatograficky sa vyčistia na silikagéli s použitím zmesi acetónu, éteru a hexánu v pomere 5 : 40 : 55 ako elučného činidla, čím sa získa 670 mg damaradiéndiolu L (83 % za dva stupne) vo forme bezfarebných kryštálov. Vzorka sa prekryštalizuje zo zmesi éteru a hexánu. Teplota topenia produktu je 90,6 až 91,4 ’C.
[a] 2S =-7,45’; [a] 2S = -119,2’; [a] 23 =-109,5’;
589 ' 302 296 ' [θ!]2ΘΟ 2Ξ ~ -38,7’ (etanol, koncentrácia = 1,06) XH-NMR-spektrum tohto syntetického materiálu je zhodné so spektrom zlúčeniny, ktorá sa vyskytuje v prírode, izolovanej z palmyrovej múky (z Borassus flabellifer L.) XH-NMR (360 MHz, deuterochloroform), ppm: 0,73 (široký d, 1H, J = 12,5 a 1,3, H-C(5)), 0,78 (s, 3H, H-C(28)), 0,85 (s, 3H, H-C(19)), 0,90 (s, 3H, H-C(30)), 0,95 (s, 3H, H-C(18)), 0,98 (s, 3H, H-C(29), 1,33 (s, 6H, H-C(26,27)), 1,19 až 1,74 (m, 15H, H-C(1,2,6,7,9,11,12, 15)), 1,75 až
1,84 (m, 2H, H-C(16)), 1,98 až 2,05 (m, 1H, H-C(13)),
2,59 až 2,64 (m, 1H, BH-C(17)), 2,66 (široký d, 1H, J = 6,3 Hz, H-C(22)), 2,79 (Široký S), 2,82 (dd, 1H, H-C(22)), 3,18 až 3,23 (m, 1H, aH-C(3)), 4,88 (s, 1H, H-C(21)), 4,95 (s, 1H, H-C(21)), 5,59 až 5,62 (m, 2H, H-C(23,24))
Príklad 2' (17B)-23E-damara-20,23-dién-3b,25-diol sa môže pripraviť analogicky počnúc od zlúčeniny A analogickým postupom ako je opísaný v stupňoch a) a d) až g) v príklade 2. Fyzikálne údaje tohto produktu sú rovnaké ako údaje opísané ďalej v príklade 3 .
Príklad 3
Syntéza (17B)-23E-damara-20,23-dién-3B,25-diol (B-epiméru zlúčeniny vzorca IC)
a) Stupeň 9 postupu v schéme B
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17B-acetyl-hexanor-damarén-trisylhydrazón
E
H
K suspenzii 1,6 g zlúčeniny B (pripravenej ako v príklade 2a) a 3,3 g hydrazidu kyseliny 2,4,6-triizopropylbenzénsulfónovej v 50 ml acetonitrilu sa pri teplote miestnosti pridá 150 μΐ koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej. Táto suspenzia sa mieša počas 30 minút pri teplote miestnosti, nariedi sa etyléterom a premyje sa vodným 5 % roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva sa vysuší nad síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku. Chromatografickým spracovaním na silikagéli s použitím zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 4 : 1 ako elučného činidla sa získa zlúčenina uvedená v názve (zlúčenina E) vo forme bielej amorfnej peny (zmes diastereomérov e/z).
R (na silikagéli): 0,61 (zmes hexánu a etylacetátu v pomere 4 : 1) XH-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 7,24 a 7,12 (3H, s, H-C(aromatický)), 4,22 až 4,08 (2H, m,
H-C-C(aromatický)), 3,15 až 3,05 (1H, m, H-C(3)), 2,92 až 2,78 (1H, m, H-C-C(aromatický)), 2,35 až 2,22 (1H, m,
H-C(17)), 1,67 (1H, s, H3CCN)
b) Stupne 10+7 postupu v schéme B
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17B-23-(E)-damara-20,23-dién-25-ol
£ E
K roztoku 161 mg zlúčeniny E v 5 ml absolútneho dietyléteru sa pri teplote -78 ‘C v atmosfére dusíka pridá 1,6 M roztok butyllítia v hexáne (0,5 ml). Žltohnedý roztok sa mieša pri teplote -20 ’C až sa prestane vyvíjať plyn. Po pridaní 15 mg kyanidu meďného pri teplote -78 ’C sa pridá 160 μΐ 1, l-dimetyl-2-vinylepoxidu a reakčná zmes sa mieša pri teplote -20 ’C počas 2 hodín. Reakčná zmes sa nariedi dietyléterom a pridá sa nasýtený vodný roztok chloridu amónneho (pH = 9). Organická vrstva sa vysuší síranom sodným a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku, čím sa získa 190 mg amorfnej tuhej látky. Tento materiál sa použije priamo bez ďalšieho čistenia na reakciu na odstránenie silylovej chrániacej skupiny.
c) Stupeň 8 postupu v schéme B
175-23-( E)-damara-20,23-dién-35,25-diol
n
K roztoku 190 mg silyléteru F v 5 ml absolútneho tetrahydrofuránu sa v atmosfére argónu pridá 1 ml 1 M roztoku tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne. Reakčná zmes sa mieša počas 12 hodín pri teplote 50 ’C, nariedi sa dietyléterom a extrahuje sa vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Odstránením rozpúšťadla a chromatografickým spracovaním na silikagéli s použitím zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 4 : 1 ako elučného činidla sa získa 35 mg zlúčeniny uvedenej v názve vo forme kryštalického bieleho produktu.
1H-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 5,60 až
M
5,50 (2H, m, H-C(23+24)), 4,70 (1H, s, H-C(21)), 4,62 (1H, s, H-C(21)), 3,13 (1H, dd, J = 5/12, H-C(3)), 2,65 až 2,55 (2H, m, H-C(22)), 2,18 až 2,12 (1H, m, H-C(17))
Príklad 3' (17a)-23E-damara-20,23-dién-3B,25-diol sa môže pripraviť analogicky počnúc od zlúčeniny D z príkladu 2c) analogickým postupom ako je opísaný v stupňoch a) až c) v príklade 3, napríklad cez nasledovné medziprodukty:
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17a-acetyl-hexanor-damarén-trishydrazón a
3B-terc-butyldimetylsiloxy-17a-23-(E)-damara-20,23-dién-25-01.
Fyzikálne údaje produktu sú rovnaké ako údaje uvedené vyššie v príklade 2.
Ako je uvedené vyššie, budú sa dávky damarových zlúčenín na použitie podľa vynálezu líšiť napríklad v závislosti na spôsobe podania, ošetrovanom stave alebo chorobe a predovšetkým na tom, aká konkrétna damarová zlúčenina sa použije. Hodnoty EDso získané pre 17a-damarovú zlúčeninu vzorca IC a jej 17B-epimér [17(B)-23-(E)-damara-20,23-dién-3B,25-diol] v jednom pokuse uskutočňovanom podľa vyššie opísaných testov 9 a 10, spolu s typickými výsledkami pre známe protizápalové a imunosupresívne činidlo cyklosporín A sú nasledovné:
test 9 (DTH-test) test 10 (SLE-test) [ED ] [ED ] L 5 O J L S O J zlúčenina vzorca IC B-epimér zlúčeniny vzorca IC cyklosporín A
4,0 Mg/kg perorálne mg/kg perorálne až 50 mg/kg perorálne
Mg/kg perorálne mg/kg perorálne až 100 mg/kg perorálne
Indikované orálne dávky na protizápalové a imunosupresívne použitie, napríklad na použitie pri liečení autoimunitných ochorení, teda budú:
- v prípade zlúčeniny vzorca IC, rádovo jedna tisícina až jedna desaťtisícina dávky indikovanej pri liečení s použitím cyklosporínu A, napríklad približne 0,4 alebo 0,5 až 4,0 alebo 5,0 pg na kg a deň;
- v prípade 17B-epiméru zlúčeniny vzorca IC, rádovo jedna štvrtina až jedna desatina dávky indikovanej pri liečení s použitím cyklosporínu A, napríklad približne 0,4 alebo 0,5 až 1,0 alebo 1,25 mg na kg a deň.
Claims (14)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. 17a-damarová zlúčenina.
- 2. 17a-damarová zlúčenina alebo damarová zlúčenina všeobecného vzorca IA v ktorom a predstavuje skupinu >CH-ORX, kde Rx predstavuje atóm vodíka alebo fyziologicky odštiepiteľný a prijateľný acylový zvyšok, alebo skupinu >C=O aR predstavuje alifatickú skupinu s obsahom 8 atómov uhlíka, ktorá prípadne obsahuje jednu alebo dve dvojité väzby a ktorá je prípadne substituovaná aspoň jednou hydroxyskupinou, na použitie ako liečivo.
- 3. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje 17a-damarovú zlúčeninu alebo damarovú zlúčeninu všeobecného vzorca IA podľa nároku 2, v kombinácii s farmaceutický prijateľným riedidlom alebo nosičom.
- 4. Použitie 17a-damarovej zlúčeniny alebo damarovéj zlúčení ny všeobecného vzorca IA podľa nároku 2 na prípravu liečiva na terapeutické použitie ako imunosupresívneho alebo protizápalového činidla.
- 5. Spôsob liečenia pacienta, ktorý potrebuje imunosupresívnu alebo protizápalovú terapiu, vyznačujúci sa tým, že sa tomuto pacientovi podá účinné množstvo 17a-damarovej zlúčeniny alebo damarovej zlúčeniny všeobecného vzorca IA podľa nároku 2.
- 6. 17a-damarová zlúčenina podľa nároku 1 všeobecného vzorcaIB R v ktorom majú symboly a a R významy definované v nároku 2.
- 7. 17a-damarová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina vzorca IC, (17a)-23-(E)-damara-20,23-dién-3B,25-diol, alebo jej fyziologicky hydrolyzovateľný a prijateľný ester.
- 8. Zlúčenina, ktorá má NMR-spektrum s rovnakými charakteristikami, aké má NMR-spektrum znázornené na obr. 2 alebo obr. 3.
- 9. 17a-karbonyldamarová zlúčenina.
- 10. 17a-karbonyldamarová zlúčenina podľa nároku 9 všeobecného vzorca Xllb (Xllb) v ktorom a” predstavuje skupinu vzorca >CH-OH alebo >C=O vo voľnej alebo chránenej forme a substituentom v polohe 17, R2CO-, je acylová skupina.
- 11. Zlúčenina všeobecného vzorca XlIIa (XlIIa) v ktorom amá význam uvedený v nároku 10 aZ predstavuje atóm alkalického kovu alebo organokovovú skupinu.
- 12. Zlúčenina všeobecného vzorca XlIIa podľa nároku 11, v ktorej Z predstavuje atóm lítia alebo trialkylstannioskupinu.
- 13. Spôsob prípravy 17a-damarovej zlúčeniny, vyznačujúci sa t ý m, že saa) epimerizuje 17fi-karbonyldamarová zlúčenina s cieľom získať 17a-damarové zlúčeniny a v prípade potreby sab) táto 17a-karbonyldamarová zlúčenina ďalej derivatizuje s použitím ľuboboľnej z techník, spôsobov alebo postupov opísaných vyššie.
- 14. Spôsob prípravy 17C-damarovej zlúčeniny, vyznačujúci sa tým, že sa 17-karbonyldamarová zlúčenina, v prípade potreby v chránenej forme, podrobí reakcii s elektrofilným činidlom, a ak je to potrebné, odstránia sa chrániace skupiny a funkcie.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9415161A GB9415161D0 (en) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | Organic compounds |
| PCT/EP1995/002913 WO1996003419A1 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-24 | Tetracyclic triterpenes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK11897A3 true SK11897A3 (en) | 1997-08-06 |
Family
ID=10758967
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK118-97A SK11897A3 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-24 | 17alpha-dammara compounds, preparation method thereof, pharmaceutical compositions containing them and their use |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5852005A (sk) |
| EP (1) | EP0801653A2 (sk) |
| JP (1) | JPH10503191A (sk) |
| AU (1) | AU704929B2 (sk) |
| BR (1) | BR9508344A (sk) |
| CA (1) | CA2192789A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ23497A3 (sk) |
| FI (1) | FI970320A (sk) |
| GB (1) | GB9415161D0 (sk) |
| HU (1) | HUT76831A (sk) |
| IL (1) | IL114723A0 (sk) |
| MX (1) | MX9700554A (sk) |
| NO (1) | NO970329L (sk) |
| NZ (1) | NZ290430A (sk) |
| PE (1) | PE35596A1 (sk) |
| PL (1) | PL318145A1 (sk) |
| SK (1) | SK11897A3 (sk) |
| TR (1) | TR199500905A2 (sk) |
| WO (1) | WO1996003419A1 (sk) |
| ZA (1) | ZA956279B (sk) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6124362A (en) * | 1998-07-17 | 2000-09-26 | The Procter & Gamble Company | Method for regulating hair growth |
| US6450168B1 (en) | 2001-04-17 | 2002-09-17 | Kellie I. Nguyen | Infant sleeping blanket/garment for use with medical devices |
| WO2006115509A2 (en) | 2004-06-24 | 2006-11-02 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Small molecule immunopotentiators and assays for their detection |
| CN109985052A (zh) * | 2017-12-29 | 2019-07-09 | 上海蓝木化工有限公司 | 三萜类化合物的新用途 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3644421A (en) * | 1968-12-02 | 1972-02-22 | Syntex Corp | 4-oxa-3-keto-delta**1-pregnene derivatives |
| US3868453A (en) * | 1970-03-04 | 1975-02-25 | Philips Corp | 16-Methylene-9/beta, 10alpha-steroid compounds, pharmaceutical preparations which contain the novel compounds as active ingredients and methods of producing the said compounds and preparations |
| US4057543A (en) * | 1976-07-01 | 1977-11-08 | G. D. Searle & Co. | Process for the preparation of 17β-hydroxy-3-oxo-17α-pregn-4-ene-21-carboxylic acid γ-lactone |
| US4636496A (en) * | 1984-03-20 | 1987-01-13 | Wayne State University | Compositions inhibiting murine MXT ductal carcinoma |
| US4755504A (en) * | 1985-10-03 | 1988-07-05 | Yaguang Liu | Pharmaceutical composition from Tienchi |
| JPH04243833A (ja) * | 1991-01-28 | 1992-08-31 | Tsumura & Co | １１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤 |
-
1994
- 1994-07-27 GB GB9415161A patent/GB9415161D0/en active Pending
-
1995
- 1995-07-17 ZA ZA956279A patent/ZA956279B/xx unknown
- 1995-07-24 CA CA002192789A patent/CA2192789A1/en not_active Abandoned
- 1995-07-24 WO PCT/EP1995/002913 patent/WO1996003419A1/en not_active Application Discontinuation
- 1995-07-24 US US08/776,442 patent/US5852005A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-24 PL PL95318145A patent/PL318145A1/xx unknown
- 1995-07-24 EP EP95926974A patent/EP0801653A2/en not_active Withdrawn
- 1995-07-24 NZ NZ290430A patent/NZ290430A/en unknown
- 1995-07-24 CZ CZ97234A patent/CZ23497A3/cs unknown
- 1995-07-24 HU HU9700246A patent/HUT76831A/hu unknown
- 1995-07-24 AU AU31166/95A patent/AU704929B2/en not_active Ceased
- 1995-07-24 MX MX9700554A patent/MX9700554A/es unknown
- 1995-07-24 BR BR9508344A patent/BR9508344A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-07-24 JP JP8505467A patent/JPH10503191A/ja active Pending
- 1995-07-24 SK SK118-97A patent/SK11897A3/sk unknown
- 1995-07-25 IL IL11472395A patent/IL114723A0/xx unknown
- 1995-07-26 PE PE1995274759A patent/PE35596A1/es not_active Application Discontinuation
- 1995-07-27 TR TR95/00905A patent/TR199500905A2/xx unknown
-
1997
- 1997-01-24 NO NO970329A patent/NO970329L/no unknown
- 1997-01-24 FI FI970320A patent/FI970320A/fi unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NZ290430A (en) | 1998-01-26 |
| TR199500905A2 (tr) | 1996-06-21 |
| FI970320A0 (fi) | 1997-01-24 |
| CZ23497A3 (en) | 1997-07-16 |
| EP0801653A2 (en) | 1997-10-22 |
| US5852005A (en) | 1998-12-22 |
| JPH10503191A (ja) | 1998-03-24 |
| WO1996003419A1 (en) | 1996-02-08 |
| EP0801653A3 (sk) | 1997-10-29 |
| NO970329L (no) | 1997-03-25 |
| CA2192789A1 (en) | 1996-02-08 |
| GB9415161D0 (en) | 1994-09-14 |
| PL318145A1 (en) | 1997-05-12 |
| PE35596A1 (es) | 1996-09-04 |
| AU704929B2 (en) | 1999-05-06 |
| AU3116695A (en) | 1996-02-22 |
| IL114723A0 (en) | 1995-11-27 |
| NO970329D0 (no) | 1997-01-24 |
| MX9700554A (es) | 1997-05-31 |
| BR9508344A (pt) | 1998-07-14 |
| FI970320A (fi) | 1997-01-24 |
| ZA956279B (en) | 1997-01-27 |
| HUT76831A (en) | 1997-11-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4235893A (en) | Ester derivatives of 4-hydroxy-4-androstene-3,17-dione and a method for inhibiting estrogen biosynthesis | |
| IE861821L (en) | Androsta-1,4-diene-3,17-diones | |
| JP5184349B2 (ja) | 神経変性障害を治療するのに有用な化合物 | |
| SK498A3 (en) | Macrolides, a method for their preparation and a pharmaceutical composition containing the same | |
| AU2006350960A1 (en) | Compounds useful for treating neurodegenerative disorders | |
| EP2073638B1 (en) | Synthesis of compounds useful as modulators of amyloid-beta production | |
| AU607100B2 (en) | New androstane 17-carboxylic acid ester, process for their preparation and drugs containing them | |
| NO158508B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av antiinflammatorisk virksomme 4-pregnenderivater. | |
| GB1599863A (en) | Pharmaceutical compositions for use in the inhibition of the biosynthesis of mevalonic acid | |
| WO2002014343A1 (en) | Bufadienolide derivatives and use as immunosuppressive, antiinflammatory and analgesic agents | |
| US4588530A (en) | Anti-inflammatory prednisolone steroids | |
| SK11897A3 (en) | 17alpha-dammara compounds, preparation method thereof, pharmaceutical compositions containing them and their use | |
| EP0414606B1 (fr) | Nouveaux acides oméga-phénylamino alcanoiques substitués sur le noyau aromatique par un radical dérivé de 19-nor stéroides, leurs sels, leur procédé de préparation et les intermédiaires de ce procédé, leur application à titre de médicaments et les compositions les renfermant | |
| FI57114B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya vid cancerterapi anvaendbara terapeutiskt vaerdefulla enolestrar av steroider | |
| CA2044846A1 (en) | Antagonists of immunosuppressive macrolides | |
| JPH05504577A (ja) | 複素環式ステロイド化合物 | |
| US5877184A (en) | Macrolides having immunosuppressive activity | |
| JPH02275884A (ja) | 置換アザトリシクロ誘導体および代謝物、それらの製法並びに医薬組成物 | |
| PT512754E (pt) | Produtode reducao da rapamicina como agentes imunossupressores antiinflamatorios ou antifungicos | |
| KR100257445B1 (ko) | 스테롤 혼합물로부터 5,7-디엔작용기를 함유한 스테로이드를 분리하는 방법 | |
| JP3366639B2 (ja) | コンティグナステロール化合物を含んで成る医薬組成物 | |
| SI9620030A (sl) | 17-difluormetilen-estratrieni | |
| AU662077B2 (en) | Androst-4-eno(4,5-b)pyrrole derivatives and process for their preparation | |
| El Masry et al. | Synthesis and biological action of two glucocorticoid alkylating agents | |
| JP2640239B2 (ja) | プロトスタ−１３（１７）エン−３，１６−ジオン化合物 |