HUT76831A - Dammara-steroids, their prodution, pharmaceutical compositions containing them and use thereof - Google Patents
Dammara-steroids, their prodution, pharmaceutical compositions containing them and use thereof Download PDFInfo
- Publication number
- HUT76831A HUT76831A HU9700246A HU9700246A HUT76831A HU T76831 A HUT76831 A HU T76831A HU 9700246 A HU9700246 A HU 9700246A HU 9700246 A HU9700246 A HU 9700246A HU T76831 A HUT76831 A HU T76831A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- compound
- dammara
- compounds
- dammar
- formula
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 274
- 229920002871 Dammar gum Polymers 0.000 claims description 48
- 240000000972 Agathis dammara Species 0.000 claims description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 15
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 13
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 8
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 5
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 150000002641 lithium Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 56
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Natural products OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 19
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- -1 ethyl acetate Chemical class 0.000 description 13
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 10
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 10
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 10
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 9
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 9
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 9
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 9
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 238000007799 mixed lymphocyte reaction assay Methods 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 7
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 6
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 6
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 6
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 244000208235 Borassus flabellifer Species 0.000 description 5
- 235000006520 Borassus flabellifer Nutrition 0.000 description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 5
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 4
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- DOBRDRYODQBAMW-UHFFFAOYSA-N copper(i) cyanide Chemical compound [Cu+].N#[C-] DOBRDRYODQBAMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 201000006512 mast cell neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 208000006971 mastocytoma Diseases 0.000 description 4
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- PIILXFBHQILWPS-UHFFFAOYSA-N tributyltin Chemical compound CCCC[Sn](CCCC)CCCC PIILXFBHQILWPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001339 alkali metal compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 3
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 3
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 3
- DIOHEXPTUTVCNX-UHFFFAOYSA-N 1,1,1-trifluoro-n-phenyl-n-(trifluoromethylsulfonyl)methanesulfonamide Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)N(S(=O)(=O)C(F)(F)F)C1=CC=CC=C1 DIOHEXPTUTVCNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XPDWGBQVDMORPB-UHFFFAOYSA-N Fluoroform Chemical compound FC(F)F XPDWGBQVDMORPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical group [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 2
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000000947 anti-immunosuppressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisilazane Chemical compound C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 150000002642 lithium compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 2
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 125000003808 silyl group Chemical group [H][Si]([H])([H])[*] 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002827 triflate group Chemical group FC(S(=O)(=O)O*)(F)F 0.000 description 2
- 125000002861 (C1-C4) alkanoyl group Chemical group 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRHLYCYJQPPOEI-UHFFFAOYSA-N 3-ethenyl-2,2-dimethyloxirane Chemical compound CC1(C)OC1C=C NRHLYCYJQPPOEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 1
- 238000011749 CBA mouse Methods 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N Dioxetane Chemical compound C1COO1 BVTJGGGYKAMDBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060742 Endocrine ophthalmopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018612 Gonorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 239000007818 Grignard reagent Substances 0.000 description 1
- 208000023661 Haematological disease Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 1
- 241000134253 Lanka Species 0.000 description 1
- 206010050551 Lupus-like syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- DPAALDSYEKDHKM-UHFFFAOYSA-N NN.C(C)(C)C1=C(C(=CC(=C1)C(C)C)C(C)C)S(=O)(=O)O Chemical compound NN.C(C)(C)C1=C(C(=CC(=C1)C(C)C)C(C)C)S(=O)(=O)O DPAALDSYEKDHKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- JZFPYUNJRRFVQU-UHFFFAOYSA-N Niflumic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 JZFPYUNJRRFVQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091002531 OF-1 protein Proteins 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 238000006619 Stille reaction Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000016807 X-linked intellectual disability-macrocephaly-macroorchidism syndrome Diseases 0.000 description 1
- FYJKEHKQUPSJDH-UHFFFAOYSA-N [dimethyl-(trimethylsilylamino)silyl]methane;potassium Chemical compound [K].C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FYJKEHKQUPSJDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000230 acceptable toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- JHRWWRDRBPCWTF-OLQVQODUSA-N captafol Chemical compound C1C=CC[C@H]2C(=O)N(SC(Cl)(Cl)C(Cl)Cl)C(=O)[C@H]21 JHRWWRDRBPCWTF-OLQVQODUSA-N 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- OORMXZNMRWBSTK-LGFJJATJSA-N dammarane Chemical compound C1CCC(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C OORMXZNMRWBSTK-LGFJJATJSA-N 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-DYCDLGHISA-N deuterium hydrogen oxide Chemical compound [2H]O XLYOFNOQVPJJNP-DYCDLGHISA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000002027 dichloromethane extract Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N disiloxane Chemical compound [SiH3]O[SiH3] KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000007336 electrophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- VDDXQSUSMHZCLS-UHFFFAOYSA-N ethenyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)OC=C VDDXQSUSMHZCLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hydrate Chemical compound O.CCOCC DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- UGWBARXDYRKUDV-UHFFFAOYSA-N fluoro(fluoromethylsulfonyl)methane Chemical group FCS(=O)(=O)CF UGWBARXDYRKUDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021189 garnishes Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229940107131 ginseng root Drugs 0.000 description 1
- 208000001786 gonorrhea Diseases 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 1
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- IHLVCKWPAMTVTG-UHFFFAOYSA-N lithium;carbanide Chemical group [Li+].[CH3-] IHLVCKWPAMTVTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DVSDBMFJEQPWNO-UHFFFAOYSA-N methyllithium Chemical compound C[Li] DVSDBMFJEQPWNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000002884 skin cream Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 125000001981 tert-butyldimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([H])(C([H])([H])[H])[*]C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- AEXDMFVPDVVSQJ-UHFFFAOYSA-N trifluoro(trifluoromethylsulfonyl)methane Chemical group FC(F)(F)S(=O)(=O)C(F)(F)F AEXDMFVPDVVSQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PPPHYGCRGMTZNA-UHFFFAOYSA-M trifluoromethyl sulfate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)OC(F)(F)F PPPHYGCRGMTZNA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
- C07J1/0003—Androstane derivatives
- C07J1/0014—Androstane derivatives substituted in position 17 alfa, not substituted in position 17 beta
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J7/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms
- C07J7/0005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21
- C07J7/001—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group
- C07J7/0015—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group not substituted in position 17 alfa
- C07J7/002—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group not substituted in position 17 alfa not substituted in position 16
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
A találmány dammara-vegyületekre és azok gyógyászati felhasználásaira vonatkozik. A dammara-vegyületek a triterpének osztályának egy ismert vegyületcsoportját foglalják magukban, és az (I) képletű tetraciklusos magszerkezet jellemző rájuk.
Az ilyen magszerkezetű ismert dammara-vegyületek általában szubsztituálva vannak, rendszerint monoszubsztituáltak a 3-as helyzetben, például egy hidroxilcsoporttal (dammar-3olok) vagy egy oxocsoporttal (dammar-3-onok) . A dammara-vegyületek rendszerint szintén szubsztituálva vannak, általában monoszubsztituáltak a 17-es helyzetben, például a dammarének esetében, amelyek a ginzeng-gyökérben és egyéb növényi anyagokban találhatók, és amelyekben a 17-es helyzetben rendszerint egy olyan hidrokarbilcsoport van, amely egy vágytöbb, péládul 1- vagy 2-alkén- kötést (-C=C-) tartalmaz. A dammarének esetében a legjellemzőbb, hogy a 17-hidrokarbil szubsztituens egy Cg-alkenil- vagy -alkadienil-csoportot hordoz, amely tovább lehet szubsztituálva például egy vagy több hidroxilcsoporttal. A dammara-vegyületek egy vagy több további szubsztituenst is hordozhatnak, rendszerint hidroxilcsoportokat a magszerkezet egyéb helyzeteiben, vagy pedig egy vagy több telítetlen kötést, például kettős kötést tartalmazhatnak a magszerkezeten belül. A dammara-vegyületekben azonban a gyűrűs szerkezet, a sztereokémiái konfiguráció, valamint a metilcsoportok eloszlása az (I) képleten bemutatott 4-es, 10-es, 8-as és 14-es helyzetekben változatlan marad.
A találmány szerint azt találtuk, hogy a dammara-ve• *
- 3 gyületek kívánatos gyógyászati, különösen immunszupresszív és gyulladásgátló tulajdonsággal rendelkeznek.
A találmány ennek megfelelően az alábbi területekre terjed ki:
a1) gyógyszerként használható dammara-vegyületekre, például immunszupresszáns és gyulladásgátló anyagokként felhasználható vegyületekre;
a2) immunszupresszáns vagy gyulladásgátló anyagként felhasználható gyógyszerek előállítására alkalmas dammaravegyületekre és/vagy a3) immunszupresszív vagy gyulladásgátló kezelésre szoruló egyének kezelési módszerére, amely abban áll, hogy az említett egyéneknek a dammara-vegyületből hatásos mennyiséget adunk.
A fentebbi a1) - a3) szerinti meghatározások körébe tartozó sajátos immunszupresszív és/vagy gyulladásgátló indikációk vagy állapotok különösen azok, amelyeket az alábbiakban külön meg fogunk említeni.
Az itt használt dammara-vegyület kifejezésen olyan vegyületet értünk, amely a fentebb bemutatott (I) képletű jellegzetes magszerkezettel rendelkezik, vagyis az (I) képleten bemutatott sajátos magszerkezetet, sztereokémiái konfigurációt és metil-szubsztituens elosztást mutatja. Annak megfelelően, hogy az (I) képleten bemutatott sztereokémiái konfiguráció változatlan marad, a fenti kifejezést úgy kell érteni, hogy az olyan vegyületeket foglal magában, amelyekben az (I) képletnek megfelelő magszerkezet egy vagy több további szubsztituenst is hordoz, különösen a 3-as és/vagy a • ·
- 4 17-es helyzetben, továbbá olyan vegyületeket, amelyekben a magszerkezetet alkotó szén-szén-kötések közül egy vagy több telítetlen, például etilénesen telítetlen. A fentebbi kifejezést így úgy kell érteni, hogy az felöleli például mind a dammar-3-olokat, mind a dammar-3-onokat.
Az itt használt dammara-vegyület kifejezés különösen úgy értendő, hogy az felöleli a 17C-dammara-vegyületeket, vagyis azokat a dammara-vegyületeket, amelyek a 17-es helyzetben egy olyan csoporttal vannak szubsztituálva, amely egy szénatomon keresztül kapcsolódik a 17-es helyzethez. Az ilyen l7C-dammara-vegyületek mono- vagy diszubsztituáltak lehetnek, előnyösen monoszubsztituáltak a 17-es helyzetben.
A találmány szerinti előnyös dammara-vegyületek dammar-3-olok és azok fiziológiailag hidrolizálható és elfogadható észterei, valamint dammar-3-onok és különösen 17C-dammaravegyületek. Különösen előnyös vegyületek a találmány szerinti felhasználás céljára, így a 17C-dammar-3-olok és azok fiziológiailag hidrolizálható és elfogadható észterei és a 17C-dammar-3-onok, például az (IA) általános képletű vegyületek, amelyekben a jelentése >CH-OR^ csoport, ahol jelentése hidrogénatom vagy fiziológilag lehasítható és elfogadható acilcsoport, vagy pedig >C=0 képletű csoport, továbbá R jelentése egy olyan csoport, amely a 17-es helyzetű szénatomhoz egy szénatomon keresztül kapcsolódik.
A fiziológiailag hidrolizálható és elfogadható észter kifejezés alatt olyan észtert értünk, amely fiziológiai körülmények között lehasítható, és így olyan savat szolgáltat, amely önmagában fiziológiailag elviselhető az adagolandó dó5 zisokban. A kifejezés tehát a szakmában ismert elővegyületformákra (pro-drug forms) vonatkozik, például acetátokra és hasonlókra. A fentebb meghatározott dammar-3-olokra alkalmazva a kifejezés olyan vegyületeket jelöl, amelyekben a 3as helyzetű hidroxilcsoportot egy 3-as helyzetű aciloxicsoport helyettesíti, amelyben az acilcsoport fiziológiailag lehasítható és elfogadható, vagyis fiziológiai körülmények között lehasítható, és a szabad dammar-3-olt és egy olyan savat szolgáltat, amely az adagolandó dózisok mellett fiziológiailag elviselhető. Itt meg kell említenünk, hogy a dammara-vegyületekben a 3-astól eltérő helyzetekben levő hidroxilcsoportok szintén észterezve lehetnek, aminek következtében az ilyen észterek is a találmány oltalmi körébe tartoznak .
A 17C-dammara-vegyületek általában egy aszimmetrikus szénatomot tartalmaznak a 17-es helyzetben. így az ilyen vegyületek diasztereomer formában léteznek. Például a 17C-dammar-3-olok esetében egy további aszimmetrikus szénatom van jelen a 3-as helyzetben, ami további sztereoizomer változatokra ad lehetőséget. Ahol ilyen izomerek léteznek, a találmány felöleli mind a diasztereomer keverékek, mind az egyes epimerek felhasználását is. Általában előnyös a dammara-vegyületeket tiszta vagy lényegileg tiszta formában alkalmazni, például tiszta vagy lényegileg tiszta egyes epimerek alakjában, például olyan vegyületek alakjában, amelyek legalább 90%-ban, például legalább 95%-ban tiszta vegyületet/epimert tartalmaznak (vagyis amelyek 10% vagy kevesebb, előnyösen 5% vagy kevesebb mennyiségben tartalmaznak egyéb • ·
- 6 dammara-vegyületeket vagy epimer szennyezőket). A dammar-3-olok és azok észterei esetében a 3-as helyzetű hidroxilcsoport vagy észtercsoport előnyösen β-konfigurációjű.
Miként fentebb jeleztük, a szakirodalom különböző dammara-vegyületeket ismertet és ír le. Az ismert dammara-vegyületek esetében a 17-es helyzetű szubsztituens jellegzetesen β-konfigurációjű. Azok a dammara-vegyületek, amelyekben a 17-es helyzetű szubsztituens a-konfigurációjű, újak és önmagukban is a találmány oltalmi körébe tartoznak. A 17o!-dammara-vegyületek előnyösen kedvezőbb tulajdonságokat mutatnak, mint a 17B-dammara-vegyületek, például megjavult in vivő stabilitással és megnövekedett biológiai aktivitással rendelkeznek, különösen in vivő.
A találmány oltalmi köre így kiterjed:
b) 17a-dammara-vegyületekre, például a 17aC-dammara-vegyületekre, valamint
c) olyan 17a-dammara-vegyületekre, például 17aC-dammara-vegyületekre, amelyeket felhasználunk a fentebbel a3-) területen, a fentebbel a2) pontban megadott gyógyszerek előállítására, vagy a fentebbi a3) pontban megadott kezelési módszerben való felhasználásra.
A találmány szerinti előnyös 17a-dammara-vegyületek a 17a-dammar-3-olok és azok fiziológiailag lehasítható és elfogadható észterei, valamint a 17a-dammar-3-onok, például a 17aC-dammar-3-olok és azok fiziológiailag hidrolizálható és elfogadható észterei, valamint a 17aC-dammar-3-onok.
A 17a-dammara-vegyületek sajátos csoportjaiba tartoznak a találmány értelmében:
. . . · · ··: : ··: : .
·· ··· ·· ·
- a 17aBH-dammara-vegyületek (például azok a dammaravegyületek, amelyekben a 17a szubsztituens az egyetlen szubsztituens a 17-es helyzetben) ;
- a 17a,12SH-dammara-vegyületek (például azok a dammara-vegyületek, amelyekben a 12-es helyzetű szubsztituens α-konfigurációjú);
- a 17a,12HH-dammara-vegyületek (vagyis azok a dammaravegyületek, amelyekben a 12-es helyzet szubsztituálatlan);
- a 17a-dammara-vegyületek, amelyek a 17-es helyzetben adott esetben csak a 3-as helyzetben vannak szubsztituálva;
különösen a megfelelő 17aC-dammara-vegyületek, -dammar-3-ol-vegyületek vagy azok fiziológiailag hidrolizálható és elfogadható észterei, vagy a -dammar-3-οη vegyületek, valamint az ilyen csoportok bármilyen kombinációja, például 17aSH,12SH-dammara-vegyületek, -dammara-3-olok és így tovább .
A találmány szerinti 17a-dammara-vegyületek egy sajátos csoportja az (IB) általános képletű vegyületeket foglalja magában, ahol a és R jelentése megegyezik a fentebb az (IA) általános képletű vegyületekkel kapcsolatban adott meghatározás szerintivel.
A találmány szerinti 17C-dammara-vegyületek, valamint 17aC-dammara-vegyületek 17C-szubsztituensei, például az (IA) és (IB) általános képletű vegyületekben az R csoportok előnyösen hidrokarbilcsoportok, különösen alifás hidrokarbilcsoportok. Az ilyen alifás csoportok egyenes vagy elágazó • · · · ·
- 8 szénlácúak, telítettek vagy telítetlenek lehetnek, és egy vagy több szubsztituenst viselhetnek, különösen egy vagy több hidroxilcsoportot. Előnyös alifás csoportok a szubsztituálatlan vagy hidroxi-szubsztituált alifás csoportok, különösen az alkenil- vagy alkadienilcsoportok. A most említett alifás csoportok előnyösen 8 szénatomosak lehetnek. R ennek megfelelően előnyösen egy olyan Cg-alifás csoport, amely adott esetben 1 vagy 2 kettős kötést tartalmaz és adott esetben legalább egy hidroxilcsoporttal van szubsztituálva.
A találmány oltalmi körébe tartoznak mind a 17a-dammara-vegyületek különálló epimerjei, valamint diasztereomer keverékei, például a 17a-dammar-3-olok. Általában a találmány szerinti gyógyászati felhasználás céljára előnyösek a 17a-dammara-vegyületek tiszta vagy lényegileg tiszta alakban (például a 17S-dammara-vegyülettől mint szennyezőtől mentes vagy lényegileg mentes alakban), például azok, amelyek legalább 90%-ban, például legalább 95%-ban tartalmaznak 17a-dammara-vegyületet (vagyis amelyek 10%-nál kevesebb, például 5%-nál kevesebb 17S-dammara-vegyület szennyezőt tartalmaznak) . Amikor maga a 17a-dammara-vegyület egynél több epimer formában létezik, előnyösek a tiszta vagy lényegileg tiszta egyes epimerek, például a legalább 90%, így 95% epimert tartalmazó vegyületek (például a 10%-nál kevesebb, előnyösen 5%-nál kevesebb egyéb epimer szennyezőt tartalmazó vegyületek) használata. A 17a-dammar-olok és azok észtereinek esetében a 3-as helyzetű hidroxilcsoport vagy észtercsoport célszerűen β-konfigurációjú.
A találmány szerinti előnyös vegyületek közül kiemeljük
- 9 az (IC) képletű [(17a)-23-(E)-dammara-20,23-dién-3S,25-diol] -t szabad vagy fiziológiailag hidrolizálható és elfogadható észter alakjában.
A találmány értelmében az (I) képletű új vegyületeket a palmirapálma (Borassus flabellifer L.) hajtásainak lisztjéből különítettük el. A palmirapálma általánosan elterjedt növény az ázsiai kontinens trópusi vidékein, és egyes országokban a napi étkezés fő részét képezi. Sri Lankán a fiatal hajtás külső részét - amelyet ott kottakilangu-nak neveznek - használják főzelékként, vagy pedig megszárítva és lisztté őrölve. Ez a liszt szolgáltat megfelelő forrást az (IC) képletű vegyület elkülönítéséhez. Az (IC) képletű vegyület elkülönítését és jellemzését részletesen az 1. példában írjuk le.
Ennek megfelelően a találmány arra az eljárásra is vonatkozik, amelynek a segítségével a (IC) képletű vegyületet állítjuk elő. Ez az eljárás abban áll, hogy a vegyületet elkülönítjük a növényi anyagból, például a palmirapálmából (Borassus flabellifer L.).
Az elkülönítési eljárás előnyösen szerves észterekkel, például etil-acetáttal végzett extrahálásból áll, amit egy vagy több kromatográfiás tisztítási lépés követ.
Számos olyan dammara-vegyület ismert, amelyben a 17-es helyzetű szubsztituens β-konfigurációjú. Ilyenek például a dammarének, amelyeket természetes termékekként, például növényi forrásokból végzett extrakcióval lehet előállítani, például a 17S-dammara-vegyületeket dammárgyantából (szállítja a Fluka AG, Buchs, Svájc) és egyéb növényi forrásokból· • · szótára), Chapman &
- 10 [lásd például: Dictionary of Steroids, (Szteroidok kiadó: Hill, Kirk, Makin & Murphy, publikálta a
Hall, 1. kiadás, 1991, 218.-222. és 536. oldalak] lehet előállítani. A dammara-vegyületeket szintetikusan is eló lehet állítani, például a természetben előforduló dammarének megfelelő kezelésével és módosításával. A 17a- és a 17S-dammara-vegyületek szintéziséhez általánosan alkalmazható reakcióvázlatokat a csatolt rajzon látható A)reakcióvázlaton mutatunk be.
Ezen a reakcióvázlaton az 5. lépés a 17a-epimer előállítását mutatja be. Ezek a lépések természetesen hasonló módon alkalmazhatók a 17S-epimer esetében is.
Az 1. lépésben a hidroxilcsoport védőcsoportjaként szolgáló Y csoport bevitelét mutatjuk be. Az Y csoport bármilyen hidroxil-védő csoport lehet, amely összeegyeztethető a további reakciólépésekkel, például stabil ezekben a reakciólépésekben. Megfelelő Y csoport a szililcsoport, például a tri(C3__4 alkil)-szilil-csoport, például a terc-butil-dimetil-szilil-csoport. Hidroxil-védő Y csoportokat a szakmában általánosan alkalmazott bármilyen módon be lehet vinni, például olyan módon, hogy a (II) képletű vegyületet terc-butil-dimetil-szilil-kloriddal (TBDMSC) reagáltatjuk imidazolban.
A (III) általános képletű vegyületet az 2.-4. lépéseken keresztül epimerizációnak vetjük alá.
A 2. lépésben egy W acil- vagy szilil-védőcsoportot viszünk be. Megfelelő acil- vagy szilil-védőcsoportok a szakmában ilyen célra általánosan használtak lehetnek, amelyek alkalmasak enol-hasításra; például alkalmazhatunk szerves lítium-vegyületet vagy alkil-Grignard-reagenst. W célszerűen egy acilcsoport, például egy acetilcsoport, amelyet például úgy viszünk be, hogy a (III) általános képletű vegyületet ecetsavanhidriddel reagáltatjuk p-toluolszulfonsav jelenlétében .
A 3. lépésben a (IV) általános képletű vegyületet egy szerves lítiumvegyülettel, például metil-lítiummal vagy egy Grignard-vegyülettel reagáltatjuk, aminek révén a megfelelő fém-enolátot kapjuk, ahol az (V) általános képletben M jelentése magnézium vagy előnyösen lítium.
A 4. lépésben az (V) általános képletű vegyületbe protont viszünk be, és így a (III) és a (VI) általános képletű vegyületek diasztereomer elegyét kapjuk. A reakciót bármilyen megfelelő protonozószerrel, például alkil-ammónium-kloriddal vagy metil-szaliciláttal lefolytathatjuk. A paraméterek változtatásával, például a protonozószer és a reakciófeltételek megválasztásával a 4. lépést úgy változtathatjuk meg, hogy az kedvezzen a kívánt reakciónak, például a (VI) általános képletű epimer előállításának.
A 4. lépésben kapott diasztereomer elegyeket előnyösen a 4. lépés után végzett kromatografálással különíthetjük el, miként ezt az A) reakcióvázlaton is feltüntentjük.
Az 5. lépésben a (VI) általános képletű vegyületbe triflátcsoportot viszünk be, aminek révén a CF3-SO2-csoportot tartalmazó (VII) általános képletű vegyületet kapjuk. A triflátcsoport bevezetését célszerűen úgy végezzük, hogy például a (VI) általános képletű vegyületet kálium-hexametil-diszilazánnal (KHMDSA) és N-fenil-bisz(trifluor-metán• ·
- 12 szulfon-imiddel (PhNTf2) reagáltatjuk.
A 6. lépésben a (VII) általános képletű vegyületet egy fémorganikus szulfáttal, például trialkil-ón-kupráttal, így tributil-ón-kupráttal reagáltatjuk, ahol Z2 a (VII) általános képletű vegyületben például tributil-ón-csoportot jelent. A tributil-ón-kuprátot célszerűen in situ képezzük, például olyan módon, ahogyan azt az alábbi 2. példában leírjuk .
A 7. lépésben a (VIII) általános képletű vegyületet Stille-kapcsolásnak vetjük alá megfelelő elektrofil vegyülettel, például Pd(CH3CN2)2CI2 jelenlétében. Az A) reakcióvázlaton az elektrofil vegyületet úgy választottuk meg, hogy az (IC) általános képletű végtermékhez vezessen.
A 8. lépésben a (IX) általános képletű vegyület Y védőcsoportját távolítjuk el a hidroxilcsoportról. A védőcsoport eltávolítását a szakmában általánosan alkalmazott ismert módszerek bármelyikével végezhetjük, például olyan módon, hogy a szilil védőcsoportot tetrabutil-ammónium-fluoriddal (Bu4NF) végzett kezeléssel távolítjuk el.
Szakemberek számára nyilvánvaló, hogy az 1. reakcióvázlatot módosíthatjuk, különösen annak érdekében, hogy másmilyen 17a- és/vagy 17S-dammara-vegyületeket állítsunk elő. így például a végterméke 17-es helyzetében levő szubsztituens jellegét a kívánt módon változtathatjuk a 7. lépésben használt elektrofil vegyület megfelelő megválasztásával vagy a kezdetben kapott 17-es helyzetű szubsztituens ezt követő módosításával. További dammara-vegyületeket kaphatunk például olyan módon, hogy módosítjuk a 3-as helyzetű hidroxilcso- 13 portot (például a megfelelő keto-vegyületek előállítása céljából) , vagy pedig a (II) képletű kiindulási vegyületek megfelelő megválasztásával, amelyekben például a 17-es helyzetű acetilcsoportot acilcsoportokkal vagy azokkal egyenértékű reakcióképes funkcionális csoportokkal helyettesítjük, vagy pedig olyan kiindulási vegyületeket használunk, amelyekben a 3-as helyzet oxocsoporttal van szubsztituálva, és például az oxocsoportot védett csoporttá, például nem reakcióképes funkcionális ekvivalenssé alakítjuk át az epimerizáció és az elektrofil szubsztitúció lefolytatásához. A diasztereomer termékeket elkülöníthetjük, például inkább a 7. lépés befejezése után, mint a 4. lépés után, és 17S-epimereket állíthatunk elő (II) képletű vegyületből úgy, hogy közvetlenül az
5. lépéstől folytatjuk a reakciót.
A B) reakcióvázlat szerint az A) reakcióvázlat 4. lépésének termékeit a Shapiro-féle kapcsolási eljárással elektrofil szubsztitúciónak vetjük alá.
A 9. lépésben a (III) vagy (VI) általános képletű vegyületet vagy azok elegyét trisz-hidrazin-hidrokloriddal reagáltatjuk. Amikor ezt a reakciót 17a-dammara-vegyületekkel végezzük azok szintézise céljából, előnyös a reakciót enyhén savas körülmények között, például pufferanyagok jelenlétében lefolytatni. A 9. lépést olyan reakció követi, amelyben a (Xa/Xb) általános képletű vegyületet egy szerves alkálifémvegyülettel reagáltatjuk, például egy alkil-lítium-vegyülettel, például bútil-lítiummal a 10. lépésben, aminek eredményeként a (Xla/XIb) általános képletű vegyületet kapjuk, ahol Z2 jelentése alkálifématom, például lítiumatom. A • ·
- 14 (Xla/XIb) általános képletű vegyületeket olyan további reakciónak vetjük alá, amilyet az A) reakcióvázlat kapcsán a 7. és a 8. lépésben írtunk le, vagyis először réz-cianiddal reagáltatjuk annak érdekében, hogy a Z2 csoportot réz/alkálifém (például réz/lítium) komplexszé alakítsuk, amit a kiválasztott elektrofil vegyülettel való reagáltatás és a védőcsoport eltávolítása követ.
A fentebbi eljárást természetesen lehet változtatni, például az A reakcióvázlat kapcsán leírt módon, különösen úgy, hogy a 10. lépésben másmilyen elektrofil vegyületeket használunk, aminek révén a végtermék 17-es helyzetében másmilyen szubsztituenst kapunk, de a kiindulási vegyületeket is másképp választhatjuk meg.
Az előzményekből kitűnik, hogy a találmány új eljárást szolgáltat 17C-dammara-vegyületek előállításához, ide értve a 17aC- és a 176C-dammara-vegyületeket. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy egy 17-karbonil-dammara-vegyületet, például egy 17-acil-dammara-vegyületet a kívánt módon védett alakban kapcsolunk egy elektrofil vegyülettel, például egy megfelelő etilén-peroxiddal, és kívánt esetben eltávolítjuk a védőcsoportokat és funkciókat, például olyan módon, hogy egy (XII) általános képletű vegyületet egy R3-H általános képletű elektrofil vegyülettel kapcsolunk, ahol a' jelentése >CH-OH vagy >C=O csoport védett alakban, továbbá R2 és R3 hidrokarbilcsoport azzal a megkötéssel, hogy a szénatomok számának összege R2-ben és R3~ban megegyezik a 17-es helyzetű kívánt szubsztituensben levő szénatomok számával, majd eltávolítjuk a védőcsoportot vagy a funkciós
csoportot, és kívánt esetben a kapott terméket megfelelő savval acilezzük, aminek révén a fentebb meghatározott (IA) általános képletű vegyületet kapjuk. A kapcsolást bármilyen megfelelő módon elvégezhetjük, bár az Á, és a B) reakcióvázlatok szerinti eljárások a 17-(szerves fém-C)-dammara-vegyületen keresztül [vagyis olyan 17C-dammara-vegyületen keresztül, amelyben a 17-es helyzetben követlenül kapcsolódó 17Cszubsztituens szénatomja szubsztituálva van egy szerves fémcsoporttal, például egy trialkil-ón-csoporttal - vö. az a) reakcióvázlaton a (VIII) általános képletű vegyület Z^ csoportját] vagy egy 17-(alkálifém-C)-dammara-vegyületen keresztül [vagyis olyan 17C-dammara-vegyületen keresztül, amelyben a 17-es helyzethez közvetlenül kapcsolódó 17-es szubsztituens szénatomja szubsztituálva van egy alkálifématommal, például egy lítium-atommal - vö. a B;reakciovazlat (Xla) és (Xlb) általános képletű vegyületeit] , például egy (XIII) általános képletű reakcióképes közbenső terméken keresztül megy végbe, ahol a' jelentése megegyezik a (XII) általános képletű vegyülettel kapcsolatban adott meghatározás szerintivel, és Z jelentése alkálifématom vagy szerves fémcsoport. Z jelentése előnyösen Li vagy tri-C]__4-alkil-ón. A reakcióképes közbenső vegyületeket a kapcsolási eljárásban külön lépésben lehet előállítani, vagy pedig azok átmenetileg állíthatók elő a kapcsolási eljárásban.
A 17E-karbonil-dammara-vegyületek, például az A reakcióvázlatban bemutatott, (II) képletű vegyület ismertek [lásd például Phytochemistry 26, (12), 3365 (1987) és
Tetrahedron 29, 2105 (1973)], vagy pedig az ismert vegyüle16 tek vagy azok származékainak előállítási eljárásához hasonlóan állíthatók elő. A 17a-karbonil-dammara-vegyületek, például az Á) reakcióvázlaton bemutatott (IV) általános képletű vegyületek újak.
A találmány oltalmi köre kiterjed a 17a-karbonil-dammara-vegyületek olyan előállítási eljárására is, amelyben egy megfelelő l7S-karbonil-dammara-vegyületet a kívánt védett formában epimerizálunk, és kívánt esetben eltávolítjuk a védőcsoportokat és funkciókat, például egy (Xlla) általános képletű vegyületet epimerizálunk, ahol a' és R2 jelentése megegyezik a (XII) általános képlettel kapcsolatban adott meghatározás szerintivel, és kívánt esetben eltávolítjuk a védőcsoportot vagy funkciót, aminek révén egy (Xllb) általános képletű vegyületet kapunk, ahol a jelentése >CH-OH vagy >C=0 csoport szabad vagy védett alakban, és R2 jelentése megegyezik a (XII) általános képletű vegyület kapcsán megadottal. Az epimerizáció megvalósítására szolgáló sajátos eljárások megegyeznek az A; reakcióvázlat 1.-4. lépéseivel kapcsolatban megadottakkal, ahol adott esetben a 8. lépés általános eljárásával összhangban végezhetünk védőcsoporteltávolítást.
Miként már jeleztük, a 17a-karbonil-dammara-vegyületek, például a (Xllb) és a (VI) általános képletű vegyületek újak. Az olyan 17aC-dammara-vegyületek, amelyekben a 17-es helyzetű szubsztituens ugyanolyan, mint a (IV), (V) , (VII) (IX) , (Xa/b) és (Xla/b) képletekben, szintén újak. Ezek a vegyületek hasznosak mint közbenső vegyületek, és szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak. E vegyületek közül külö• ·
- 17 nősen érdekesek a 17a-karbonil-dammara-vegyületek, különösen mint közbenső termékek.
A fentieknek megfelelően a találmány oltalmi köre még kiterjed
d) a 17a-karbonil-dammara-vegyületekre.
Alcsoportba tartozó előnyös láj—Vzeriűti dammara-vegyületek a 17a-acil-dammara-vegyületek, például a (Xllb) általános képletű vegyületek, így a 17a-acetil-dammara-vegyületek, például a (VI) általános képletű vegyületek.
Szintén különösen érdekesek a 17-(organo-fém-C)- és a 17-(alkálifém-C)-dammara-vegyületek, ide értve mind al7S- és különösen a 17a-(organofém-C)- és -(alkálifém-C)-dammara-vegyületeket, különösen mint közbenső termékeket.
A találmányi oltalmi köre kiterjed még
e) a 17- (organo-fém-C)- vagy 17-(alkálifém-C)-dammaravegyületekre .
Az e) csoportba tartozó előnyös vegyületek a 17-(1-organo-fém-vinilén)- és a 17-(1-alkálifém-vinilén)-dammara-vegyületek, így például a (XIII) általános képletű vegyületek, például a 17-(1-organo-fém-vinil)- és a 17-(1-alkálifém-vinil)-dammara-vegyületek, amelyek példáiként megemlítjük a (VIII), (Xla) és (Xlb) általános képletű vegyületeket.
Megfelelő fémorganikus csoportok és alkálifématomok a fentebb leírtak, igy különösen érdekesek a 17-(lítium-C)-, például a 17-(1-lítium-vinilén)-, pl. a 17-(1-lítium-vinil)dammara-vegyületek.
Tekintettel a belőlük kapható végtermékek előnyös voltára, előnyösek a 17a-dammara-vegyületek, amelyeket fentebb
e) alatt definiáltunk.
A találmány oltalmi körébe tartozó, d) és e) csoportbeli 17a-karbonil-, 17-(organo-fém-C)- és 17-(alkálifém-C)-dammara-vegyületek előnyös csoportjába tartoznak a 17a-dammara-vegyületekkel kapcsolatban meghatározott vegyületek, ide értve például a 17a-karbonil-, a 17-(organo-fém-C)- és a 17- (alkálifém-C)-dammar-3-olokat és -dammar-3-onokat, mindegyiket szabad vagy védett alakban, továbbá a 17a-karbonil,SH- és a 17a,12SH-dammara-vegyületeket és így tovább.
A fentiekből kitűnik, hogy a 17-(organo-fém-C)-dammaravegyületeket olyan módon állíthatjuk elő, hogy például trifluor-metilszulfon-csoportot viszünk be egy 17-karbonil-dammara-vegyületbe, aminek révén egy 17-(trifluor-metilszulfát-C)-dammara-vegyületet kapunk, amelyet azután egy fémorganikus kupráttal reagáltatunk, aminek révén a kiindulási vegyületet a kívánt módon védjük. Ezután adott esetben védőcsoportmentesítünk, például eltávolítjuk a védőcsoportokat vagy a funkciós csoportokat, például fluor-metilszulfon-csoportot viszünk be £pl. az A) reakcióvázlat 5. lépése kapcsán leírt módon| egy (XII) általános képletű vegyületbe, például olyan vegyületbe, amelyben az R2-CO- csoport egy acilcsoport, pl. XCj_4 acil-csoport, pl. acetilcsoport, majd az így kapott terméket egy alkálifém-szerves vegyülettel<Jpl. egy olyan vegyülettel, amelyet az Á' reakcióvázlat x 6. lépésében írtunk lej χ reagáltatjuk, és adott esetben a termék védőcsoporbját eltávolítjuk, például eltávolítjuk a védőcsoportokat vagy a funkciós csoportokat, aminek révén egy (XlIIa) általános képletű vegyületet kapunk, ahol a je19 lentése megegyezik a (Xllb) általános képletű vegyület kapcsán adott meghatározás szerintivel, és Z jelentése organo-fém-csoport, például trialkil-ón-csoport, pl. tributil-óncsoport.
A 17-(alkálifém-C)-dammara-vegyületeket olyan módon állíthatjuk eló, hogy egy 17-karbonil-dammara-vegyületet trisz-hidrazin-HCl-lel reagáltatunk, majd a kapott terméket alkálifémvegyülettel, például butil-lítiummal reagáltatjuk, aminek révén a kiindulási vegyület a kívánt módon védve van. Az eljárást ezután adott esetben a védőcsoportmentesítéssel, például védőcsoportok vagy funkciós csoportok eltávolításával folytatjuk, például olyan módon, hogy egy (XII) általános képletű vegyületet, amelyben például az RgCO- csoport egy acilcsoport, például egy C]__4 acil-csoport, pl. egy acetilcsoport, trisz-hidrazin-HCl-lel reagáltatunk, majd az így kapott terméket egy szerves alkálifém-vegyülettel reagáltatjuk például a fentebb leírt módon, és adott esetben a terméket védőcsoportmentesítjük, például eltávolítjuk a védőcsoportokat vagy a funkciós csoportokat, és így egy (XlIIa) általános képletű vegyületet kapunk, amelyben a jelentése megegyezik a (Xllb) általános képletű vegyülettel kapcsolatban adott meghatározás szerintivel, míg Z jelentése alkálifématom, például lítiumatom.
A találmány szerinti dammara-vegyületek gyógyászati célra fiziológiailag elviselhetek vagy gyógyászatilag elfogadhatók, például adagolt dózisok esetén nem-toxikusak vagy lényegileg nem-toxikusak, vagy elfogadható toxieitásúak az adagolt dózisok szintjén, figyelembe véve a kezelendő beteg20 séget vagy állapotot. A gyógyászati célra szolgáló megfelelő dammara-vegyületek kiválasztását a gyógyászati gyakorlatban ismert és általánosan alkalmazott módszerekkel végezhetjük.
A dammara-vegyületek, különösen a 17a-dammar-vegyületek, például a fentebb ismertetett, (I) , (IA) , (IB) vagy (IC) általános képletű vegyületek gyógyászati hatékonysággal rendelkeznek, amit az alábbi vizsgálati módszerekkel bizonyítunk .
1. Limfociták proliferatív válasza allogén stimulálásra
Kétutas MLR (vegyes murin limfocita-reakció)
8-10 hetes nőstény Balb/c egerek lépsejtjeit (0,5xl06) együtt inkubáljuk 5 napon keresztül 8-10 hetes nőstény CBA egerek lépsejtjeivel (0,5xl06), Az allogén sejtek proliferációs választ váltanak ki a reszponder lépsejt populációban, amit olyan módon mérünk, hogy jelzett prekurzort inkorporálunk a DNS-be. Vizsgált vegyületeket adunk az inkubálás kezdetekor különböző koncentrációkban az inkubált sejtekhez, és a proliferációs választ összehasonlítjuk a kezeletlen kontrolokkal. A dammara-vegyületek jellegzetesen közelítőleg 100 nM-től közelítőleg 10 nM-ig terjedő vagy még kisebb IC5Q értéket mutatnak ebben a próbában (szemben a körülbelül 1 nM IC50 értékkel ciklosporin A esetén).
Hivatkozás: T. Meo (1979): The MLR in the mouse (Az MLR egérben). Immunological Methods (Immunológiai módszerek), Kiadók: L. Lefkovits és B. Pernis, Academic Press, N.Y.,
227.-239. oldalak.
·· · * ·<
- 21 2. Citotoxikus és citosztatikus aktivitás transzformált humán T-sejtvonal (Jurkat) használata esetén
5xl04 Jurkat-sej tét tenyésztünk 0,2 ml végtérfogatban 72 órán keresztül, majd a sejtszámot enzimpróbával meghatározzuk, szubsztrátumként p-nitro-fenil-N-acetil-E-D-glukózamidint használva. A vizsgált vegyületeket eltérő koncentrációkban adjuk a tenyésztés kezdetén, és a citotoxicitást összehasonlítjuk a kezeletlen kontrollokéval. A dammara-vegyületek inaktívak 5 μπιοί koncentrációkig, ami azt mutatja, hogy immunszupresszív hatékonyságuk specifikus.
3. Citotoxikus és citosztatikus in vitro aktivitás
P-815 masztocitoma sejtvonal használata mellett
Egy 96 mélyedéses Costar-lemezt feltöltünk közeggel (100 μΐ/mélyedés). A vizsgálandó vegyületeket a felső sorhoz 15 μΐ alikvotokként adjuk, elegyítjük, minden mélyedésből eltávolítunk 25 μΐ alikvotot, és hozzáadjuk a következő sor megfelelő mélyedéséhez. A közeg hozzáadását, a keverést és 25 μΐ átvitelét a következő alsóbb sorhoz mindaddig ismételjük, amíg el nem jutunk a lemez végéig. Az utolsó 25 μΐ-t elöntjük. Ezután 10 μΐ sejtszuszpenziót (P-815 masztocitoma sejtek, 30 000 sejt/mélyedés) adunk minden egyes mélyedéshez, és inkubálást végzünk 4 8 órán át 3 7 °C hőmérsékleten, nedvesített levegőatmoszférában, amely 5-7% szén-dioxidot tartalmaz. A sejtszaporodást sejtszámláló használatával vagy enzimatikus kolorimetrikus próbával határozzuk meg: a lemezeket 10 percen át centrifugáljuk 3000 percenkénti fordulattal (EC Centra-7R). A felülúszót gondosan elöntjük, a • · · · · · · • · · · · · ··· · ···« · • · · · · ·· ··· ♦· « sejteket egyszer mossuk PBS-sel (Dulbecco, kalcium és magnézium nélkül), és mélyedésenként 50 μΐ 0,5%-os Triton-X 100oldatot (0,5 ml Triton X-100 99,5 ml vízben) adunk hozzá, majd a lemezeket 5-10 percen át szobahőmérsékleten jól rázzuk. Mélyedésenként 50 μΐ szubsztrátumot (p-nitro-fenil-N-acetil-S-D-glukóz-amidin) adunk hozzá, majd 60 percen át 37 °C hőmérsékleten inkubáljuk. Ezután 150 μΐ 2-es puffért adunk hozzá, és a lemezeket 405 nrn-en leolvassuk. A vizsgálandó vegyületeket az inkubálás kezdetekor eltérő koncentrációkban adjuk hozzá, és a sejtszaporodást összehasonlítjuk a kezeletlen kontrollokkal. Azt találtuk, hogy a dammara-vegyületek nem befolyásolják a sejtszaporodást 5 μΜ koncentrációig, ami azt mutatja, hogy immunszupressziv hatékonyságuk specifikus.
Referencia.: H. Staehelin: A simple quantitative test fór cytostatic agents using non-adhering cells in vitro (Egyszerű kvantitatív próba citosztatikus hatóanyagokra, nem-tapadó sejteket használva in vitro), Med. Exp. 7, 92-102 (1962).
4. Az átültetett szövet lokalizált reakciója a befogadó szervezettel szemben (GvH) reakció patkányban [Ford. et al. , Transpl. Proc. 10, 258 (1979)]
6-hetes nőstény Wistar/Furth (WF) patkányok lépsejtjeit (1x10^) szubkután befecskendezzük a 0. napon nőstény (F344xWF)F]_ patkányok bal hátsó mancsába; a patkányok kb. 100 g súlyúak. Az állatokat 4 egymást követő napon keresztül kezeljük, és a térdhajlat alatti nyirokcsomókat a 7. napon • ·
- 23 eltávolítjuk és súlyukat megmérjük. A két nyirokcsomó közötti súlykülönbséget a reakció kiértékelésének paramétereként tekintjük. A vizsgálati vegyületeket naponta adjuk különböző dózisokban 4 napon keresztül p.o., és a gátlást összehasonlítjuk a kezeletlen kontroliokéval. A dammara-vegyületek aktívak ebben a vizsgálatban (gátolják a GvH reakciót) 10 gg100 mg/kg/nap p.o. dózisokban. Azt találtuk, hogy a 17adammara-vegyületek [például az (IC) képletű vegyület] mintegy százszor hatékonyabb, mint a megfelelő 17S-epimerek.
5. Allograft vesereakció patkányban
Egy nőstény Fisher 344 patkány egyik veséjét átültetjük egy olyan WF recipiens patkány vesevezetékébe, amelynek a baloldali veséjét műtéti úton korábban már eltávolítottuk, és műtéti úton összeköttetést létesítünk a két szerv között.
A húgycsöveket is műtéti úton kötjük össze. Az átültetés napján különböző dózisokkal kezdjük meg a vizsgálati vegyületekkel való kezelést, és ezt 14 napon át folytatjuk. Az átültetés után 7 nappal az ellenkező oldalon levő vesét eltávolítjuk, és így a recipiens állatot a donor vese teljesítményére utaljuk. Az átültetett vesének a túlélését a kontrolihoz viszonyítva az átültetett vese működőképességének paramétereként tekintjük. A dammara-vegyületek ebben a próbában meghosszabbítják a beültetett vese túlélését 10 ggA--'z‘ tói 10 mg/kg/nap nagyságrendű adagok esetén, p.o. adagolás mellett. Azt találtuk, hogy a 17a-dammara-vegyületek lényegesen hatékonyabbak (közelítőleg 100-1000-szer hatékonyabbak) , mint a 17S-dammara-vegyületek.
6. Kísérletileg indukált allergiás agyvelőgyulladás (EAE) patkányban [Levine et al.: Am. J. Path. 47, 61 (1965); McFarlin et al: J. Immunoi. 113, 712 (1974); Boréi: Transplant & CLin. Immunoi. 13, 3 (1981)]
Hím Wistar patkányok hátsó mancsába borjúgerincagy és teljes Freund-adjuváns elegyét fecskendezzük be. A betegség (a farok és mindkét hátsó láb bénulása) szimptómiái rendszerint 16 napon belül kifejlődnek. Feljegyezzük a megbetegedett állatok számát, valamint a betegség beálltának időpontját. A kísérleti vegyületeket eltérő dózisokban p.o. adagoljuk 12 napon keresztül, az adagolást az érzékennyé válástól kezdve. A dammara-vegyületek ebben a kísérleti modellben 10 μg - 10 mg/kg/nap nagyságrendű adagok esetén gátolják a betegség jelentkezését. A 17a-dammara-vegyületeket lényegesebben (kb. 100-1000-szer) hatékonyabbnak találtuk, mint a 17β-dammara-vegyületeket.
7. Freund-adjuváns által előidézett izületi gyulladás [Winter & Nuss: Arthritis and Rheumatism 9, 394 (1966); Billingham & Davies: Handbook of Experimental Pharmacol (Vane & Ferreira Eds., Springer Verlag, Berlin) 50/11, 108-144 (1979)]
150 g testsúlyú hím vagy nőstény OFA és Wistar patkányoknak fároktövébe vagy a hátsó'mancsaba í.c. injektáltunk 0,1 ml olyan ásványolajat, amely hő által megölt és liofilizált 0,6 mg Mycobacterium smegmatis-t tartalmazott. A kifejlődő izületi gyulladás modellen a vizsgálandó vegyülettel való kezelést közvetlenül az adjuváns befecskendezése után kezdtük meg (1.-18. nap); a kialakult izületi gyulladás modellen a kezelést a 14. napon kezdtük meg; ekkor már jól kifejlődött a másodlagos gyulladás (14.-20. nap) . A kísérlet végén az ízületek duzzanatát mikrokaliberrel mértük. A dammár-vegyületek gátolják a betegség előrehaladását a fejlődő vagy kialakult kísérleti modelleken testsúlykilogrammonként 10 ^g-100 mg nagyságrendű napi dózisok mellett. Azt találtuk, hogy a 17a-dammara-vegyületek lényegesen hatékonyabbak, mint a 17S-dammara-vegyületek.
8. Elsődleges humorális immunválasz juh vörösövérsejtekre (MD, Mishell-Dutton)
8-10-hetes nőstény OF 1 egér lépsejteket (lxlO7) egy 24 mélyedést tartalmazó lemezen együtt tenyésztettünk juh vörösvérsejtekkel (SRBC, 3xl07) 3 napon keresztül 1 ml végtérfogatban. A nyiroksejteket kinyertük, mostuk és lágyagar-lemezre felvittük 1x10^ sejtsűrűségben friss antigénnel (SRBC). 60-90 perc inkubálási időtartam után tengerimalacszérum komplementumot adtunk hozzá, és az inkubálást további 60 percen át folytattuk. Ezután a kísérletet kiértékeltük olyan módon, hogy mikroszkópon megszámoltuk a plakkokat. A 3 napig tartó inkubálás alatt a nyiroksejtek érzékennyé válnak az antigénre (SRBC). Amikor ismét antigénnel inkubáljuk őket, a B-limfociták fajlagos antitestet választanak ki, amelyek a kiválasztó limfociták szomszédságában kötődnek az antigénhez. Komplementum hozzáadása az antitesttel bevont vörös vértestek feloldódását okozza, ami plakkot eredményez.
Minden egyes plakk 1-1 antitestet termelő sejtet képvisel. A kísérleti vegyületet az inkubáció kezdetekor különböző koncentrációkban adjuk a rendszerhez. A dammara-vegyületek ebben a kísérleti modellben gátolják a plakk-képződést 10100 nM nagyságrendű koncentrációk mellett.
Referenciák: R.I. Mishell & R.W. Dutton (1966): Immunization of normál mouse spleen cell suspensions in vitro (Normális egér lépsejtszuszpenziók immunizálása in vitro] Science 153 1004-1006; R.I. Mishell & R.W. Dutton: Immunization of dissociated spleen cell cultures from normál mice (Normál egerek disszociált lépsejtkultúráinak immunizálása) J. Exp. Med. 126 423-442 (1967) .
9. SRBC-Tjj sejtek által előidézett DTH (közvetett típusú túlérzékenység)
Tjj (juh vörös vérsejt) sejtklón (2x10^) és 10%-os juh vörös vérsejt (SRBC) 1:1 térfogatarányú elegyéből készített 50 ml szuszpenziót s.c. injektálunk 6-12 hetes nőstény C57 BL/6 egerek jobb hátsó talpába. 50 μΐ SRBC sejtszuszpenziót (1:1 térfogatarányban hígítva PBS-sel) injektálunk s.c. a bal hátsó talpába (hogy mérjük az injektálási eljárás következtében a talpon fellépő nem-specifikus duzzadást). A jobb és a bal hátsó talp vastagságát mérjük 24 órával később. A kísérleti vegyületeket p.o. adagoljuk különböző dózisokban 24 órával és 2 órával korábban. A kísérlet végén százalékosan kiszámítjuk a jobb hátsó talp vastagságának növekedését a bal hátsó talphoz viszonyítva. [A jobb talp vastagság = x; a bal talp vastagsága = y; fajlagos növekedés százalékban = • · ·
- 27 ζ; ζ=[(x-y)/y] .100] . A 17a-dammara-vegyületek gátolják a DTH-reakciót ebben a kísérleti modellben testsűlykilogrammonként 1-100 gg nagyságrendű p.o. dózisokban. A 17E-dammara-vegyületek a DTH-reakciót 1-100 mg/kg nagyságrendű dózisokban gátolják.
Referenciák: A.T.J. Bianchi, H. Hooijkaas, R. Brenner, R. Tees, A.A. Nordin & M.H. Schreier: Clones of helper T-cells mediate antigén specific, H-2 restricted DTH (Segítő T-sejtek kiónjai közvetítik az antigén-specifikus, H-2 korlátozott DTH-t), Natúré, 290, 62-63 (1981); P. Herrmann, M.H. Schreier, J. F. Boréi & C. Feurer: Mást cell degranulation as a major event in the effector phase of delayed-type hypersensitivity induced by cloned helper T cells (Emlősejtek degranulálódása mint a klónozott segítő T-sejtek által indukált, késleltetett típusú túlérzékenység effektor fázisának fő eseménye), Int. Archs. Allergy appl. Immun. 86,
102-105 (1988) .
10. Szisztémás lupus erythematosus (SLE) egérben (NZB/NZW)
Nőstény fekete/fehér űj-zélandi (NZB/NZW) FI egereken spontán kifejlődnek olyan jellegzetes vonások, amelyek a szisztémás lupus erythematosus-ra emlékeztetnek. 2-3 hónap elteltével antinukleáris antitesteket fejlesztenek ki, 5-6 hónap elteltével pedig szisztémás immun vesegyulladás és fehér jevizelés fejlődik ki az ilyen egerekben, és 8-9 hónapos korukban előre megjósolható krónikus renális mortalitás lép fel. A kezelés 24 hetes korukban kezdődik meg, amikor az ál28 latok fehérjevizelést mutatnak. A vegyületeket p.o. adagoljuk hetenként 3 alkalommal, összesen 12 héten keresztül. Az állatok állapotát minden második héten meghatározzuk, és a kísérlet befejeztével az állatokat szövettani kiértékelésre küldjük. Csoportonként tíz egeret használunk fel. A 17a-dammara-vegyületek hatékonyak a fenti kísérleti modell esetén a betegség kialakulásának meggátlásában, ha minden második napon p.o. 5-100 Mg/kg dózisokat adagolunk. A 17S-dammaravegyületek hasonlóan hatékonyak, ha minden második napon 1100 m/kg dózisokat adagolunk p.o.
Referencia: B.S. Andrews, R.A. Eisenberg, A.N. Theofilopoulos, S. ízűi, C.B. Wilson, P.J. Mc J.B. Roth & F.J. Dixon: Spontaneous murine lupus-like syndroms: clinical a manifestation in several strains (Bőrfarkasszerű szindrómák spontán kialakulása egérben: klinikai megjelenés különböző törzsekben) , J. Exp. Med. 148, 1198 (1978) .
A dammara-vegyületek, például a fentebb ismertetett 17a-dammara-vegyületek, például az (I), (ΙΑ), (IB) vagy (IC) általános képletű vegyületek ennek megfelelően hasznos gyógyszerek, például mint immunszupressziv és gyulladásgátló szerek.
Immunszupressziv anyagokként a vegyületek különösen előnyösek akut és/vagy krónikus szerv vagy szövetátültetés kivetési reakcióinak megelőzésére, például szív, tüdő, egyesített szív-tüdő, máj, vese, hasnyálmirigy, bőr vagy szaruhártya átültetések utáni kezelés céljára. A vegyületek alkalmazása javallott az átültetett szövetnek a befogadó szervezettel szembeni reakciói (gráft-versus-host) esetén, így
- 29 például a csontszövetátültetések után.
Immunszupressziv és gyulladásgátló anyagokként előnyösen felhasználhatók autoimmun betegségek és gyulladásos állapotok kezelésére is, különösen olyan gyulladásos állapotok kezelésére, amelyek kóroktanában autoimmun komponens is szerepet játszik, így izületi gyulladás (például reumatoid izületi gyulladás, arthritis chronica progrediente és arthritis deformans) és reumás betegségek esetén. Sajátos autoimmun betegségek, amelyek kezelésére a dammara-vegyületek felhasználhatók, a következők: autoimmun hematológiai rendellenességek (ide értve például a hemolitikus vérszegénységet, az aplasztikus vérszegénységet, a vörös vérsejtes vérszegénységet és a vérlemezkék számának ismeretlen okra visszavezethető csökkenését), a szisztémás lupus erythematosus, a polychondritis, a csecsemőbőr vizenyős megvastagodása, a Wegener-féle granulomatózis, a borizomgyu11adás (dermatomyositis), a krónikus aktív májgyulladás, a súlyos izomgyengeség, a pikkelysömör, a Steven-Johnson-szindróma, az ismeretlen eredetű sprú, az autoimmun gyulladásos bélbetegségek (ide értve például a fekélyes vastagbélyulladást és a Crohnféle betegséget), az endokrin oftalmopátia, a Graves-féle betegség, a szarkoidózis, a szklerózis multiplex, az elsődleges máj-cirrhózis, a fiatalkori cukorbetegség (I. típűsű diabetes mellitus), a szemgolyó első és hátsó részének gyulladása, a szaruhártya és a kötőhártya száraz gyulladása és tavaszi gyulladása, tüdő szövet közötti rostos elfajulása, pikkelysömörös izületi gyulladás és a vesék kétoldali gyulladása (nefrotikus szindrómával vagy a nélkül, például ide értve az elsődleges nefrotikus szindrómát vagy a minimális változó nefropátiát).
A fentebb leírt dammara-vegyületek, például a 17a-dammara-vegyületek felhasználhatók továbbá kopaszság kezelésére, valamint a hajnövekedés előmozdítására, továbbá asztma kezelésére, például belélegzéses kezelés útján.
A fentebb leírt dammara-vegyületek, például a 17a-dammara-vegyületek olyan állapotok kezelésére is felhasználhatók, amelyekben kortikoszteroidokat lehet felhasználni.
A fentebbi javallatok esetén a megfelelő adag természetesen számos tényezőtől, így például a kezelendő személytől, az adagolás módjától, a kezelendő állapot természetétől és súlyosságától és a kívánt hatástól is függ. Általában azonban kielégítő eredményeket kapunk állatokban, ha a napi dózis testsúlykilogrammonként közelítőleg 0,001-10 mg p.o. adagolás esetén. Nagyobb emlősökben, például emberekben a napi dózis közelítőleg 0,05 mg-tól közelítőleg 500 mg-ig terjed orális adagolás esetén, de előnyösebb a napi adagot 2-4 részre osztani, ahol a megkívánt dózisok 17a-damm.ara-vegyületek esetén a megadott tartomány felső részébe, míg a
17S-dammara-vegyületek dózisai az alsó tartományba esnek.
*
Szervátültetések esetén emberekben a vegyületből 0,0510 mg/kg egyetlen kezdeti dózist célszerű orálisan adagolni a műtét előtt 4-12 órával, majd a műtét után egy-két héten keresztül ezt a napi dózist kell tartani, s ezt követően fokozatosan kell csökkenteni a vérszintnek megfelelően mindaddig, amíg el nem érünk egy közelítőleg 0,02-2 mg/kg fenntartó dózist. Amikor a találmány szerinti vegyületeket egyéb immunszupresszáns anyagokkal együtt adagoljuk, például egy háromszoros vagy négyszeres gyógyszerterápia keretében, az alsó dózisokat (például 0,01 mg/kg/nap i.v.; kezdetben 0,011 mg/kg/nap orálisan) lehet alkalmazni.
A fentebb leírt dammara-vegyületeket, például a 17a-dammara-vegyületeket bármilyen szokásos úton lehet adagolni, különösen enterálisan, pl. orálisan, például ívóoldatok, tabletták vagy kapszullák alakjában, vagy parenterálisan, például injektálható oldatok vagy szuszpenziók alakjában. Rendszeres adagolás céljára rendes körülmények között az orális adagolási formák előnyösek, bár bizonyos körülmények között, így például májátültetések esetén a kilökődés megelőzésére intravénásán injektált alak is kívánatos lehet. A vegyületeket helyileg vagy dermálisan is adagolhatjuk, például dermális krém, gél vagy hasonló készítmény alakjában, vagy a szemen való alkalmazás céljára szemkrém, szemgél vagy szemcsepp alakjában. Megfelő egységdózis-alakokat is alkalmazhatunk orális adagolás céljára, például 0,05-10 mg vagy 12,5 mg vegyületet tartalmazó egységdózisokat.
A fentebb leírt dammara-vegyületek, például a 17a-dammara-vegyületek adagolására szolgáló gyógyászati készítményeket a galenikus gyógyszerkészítésben általánosan alkalmazott bármilyen ismert módszerrel készíthetünk, például olyan módon, hogy a vegyületet bensőleg elegyítjük gyógyászatilag elfogadható megfelelő hígítószerekkel vagy hordozószerekkel, ide értve a gyógyszerészeti tisztaságú vagy injektálható vizet. Miképpen korábban már jeleztük, a dammara-vegyületeket, például a 17a-dammara-vegyületeket tartalmazó gyógyászati • ·
- 32 készítmények tiszta vagy lényegileg tiszta alakban, például tiszta vagy lényegileg tiszta egyetlen epimer alakjában tartalmazzák a dammara-vegyületet.
A fentiekkel összhangban a találmány oltalmi körébe tartoznak
f) a fentebb leírt dammara-vegyületeket, például a 17a-dammara-vegyületeket tartalamzó gyógyászati készítmények, például az (I), (IA), (IB) vagy (IC) általános képletű vegyületeket gyógyászatilag elfogadható hígítószerekkel vagy hordozóanyagokkal együtt tartalmazó gyógyászati készítmények .
A találmányt a továbbiakban az alábbi kiviteli példákkal részletesebben szemléltetjük, a mellékelt rajzokra hivatkozva :
Az 1. ábra palmira-liszt extraktum mintákkal és kontroli-mintákkal lefolytatott, késleltetett típúsú túlérzékenység (DTH) vizsgálatok eredményeit mutatja grafikus ábrázolással, ahol a kísérleteket 10 g palmira-liszt 200 ml extraktumával végeztük egereken p.o., Tjj- sejtklónokkal.
A 2. ábra az 1. példában elkülönített vegyület protonNMR-spektrumát mutatja.
A 3. ábra az 1. példában elkülönített vegyület 1;3C-NMRspektrumát mutatja.
PÉLDÁK
1. példa
Az (IC) általános képletű vegyület elkülönítése és j ellemzése
Előtanulmányok
Friss palmirahajtásból (Borassus flabellifer L.) készített lisztből 4 alikvotrészt - ahol mindegyik rész 10 g extrahálunk 200 ml alábbi oldószerrel:
- etil-acetát (A)
- petroleum-éter (B)
- metanol (C)
- víz (D) alikvotrészt (600 g) extrahálunk Soxhlet-készülékben hexánnal (forráspont: 60-70 °C) 16 órán keresztül, majd diklór-metánnal forraljuk 16 órán át. Ez az eljárás vákuumban végzett bepárlás után 1,1639 g hexán-extraktumot (E) és 0,335 g diklór-metán-extraktumot (F) szolgáltat.
A frakciókat etanolban feloldjuk és a Mishell-Duttonpróbával (elsődleges humorális immun-válasz SRBC-re in vitro, MD) vizsgáljuk vegyes limfocita-reakcióra (MLR) és P815 mastocitoma sejtvonalon citotoxicitásra.
A kutatási extraktumok eredményei
Az A) , B) és E) extraktumok gátló aktivitást mutatnak aktivált limfocitákon in vitro (fentebbi 8. MD próba), ahol az A) extraktum a leghatékonyabb (IC5Q közelítőleg l:4000-es hígításnál kisebb koncentráció mellett). Az aktív frakciók közül legkevésbé aktív az E) extraktum (IC5Q körülbelül l:200-es hígításnál). A legkevésbé toxikus P-815 masztocitoma sejtvonalon (fentebbi 3. próba) a B) extraktum. A legjobb aktivitás:toxicitás arányt azonban az A) extraktum esetében találtuk, amely a leghatékonyabb a vegyes limfocita-reakció (a fentebbi 1. próba) gátlásában. A kapott eredményeket az alábbi 1., 2. és 3. táblázatokban mutatjuk be.
1. táblázat
Elsődleges humorális immunválasz (MD)
| Extraktum | Koncentráció | Gátlás, % |
| A) | 1:40 | 100 |
| 1:400 | 10 0 | |
| 1:4000 | 76 | |
| B) | 1:40 | 100 |
| 1:400 | SO | |
| 1:4000 | 52 | |
| C) | 1:40 | 10 0 |
| 1:400 | 20 | |
| 1:4000 |
| 2. táblázat | ||
| Vegyes limf ocita-reakció | ||
| Extraktum | Koncentráció | Gátlás, % |
| A) | 1:500 | 100 |
| 1:2500 | 70 | |
| 1:12500 | -50 stimulálás | |
| B) | 1 : 500 | 10C |
| 1 :2500 | -40 | |
| 1:12500 | -42 | |
| E) | 1 : 500 | -40 |
| 1:2500 | -30 | |
| 1:12500 | -29 |
3. táblázat
| P-815 | másztocitorna | (citoxicitás-próba) |
| Extraktum | Koncentráció Gátlás, % | |
| A) | 1:50 | 100 |
| 1:250 | 100 | |
| 1:1250 | 38 | |
| B) | 1:50 | 100 |
| 1:250 | 90 | |
| 1:1250 | -2 | |
| C) | 1:50 | 100 |
| 1:250 | 65 | |
| 1:1250 | 10 |
A különböző extraktumokat is alávetettük in vivő késleltetett típúsú túlérzékenységi reakciónak (a fentebbi 9. próba), hogy további tájékoztatást kapjunk annak eldöntéséhez: melyik extraktumot használjuk fel nagyüzemi extrakcióhoz. Erre a célra azonos alikvotokat (10 g lisztből készített extraktumok) orálisan adagolunk egy alkalommal öt egérnek az antigén-adagolást megelőzően egy órával. A reakciót az antigén-befecskendezés után 24 órával olvassuk le. Pozitív kontrollként ciklosporin A-t használunk. Az eredményeket az 1. ábrán adjuk meg. Csupán az A/B extraktum [az A) és^B) extraktumok kombinációja] mutat észrevehető gátló aktivitást in vivő.
Az A) extraktum (etil-acetát) mutatja a legtöbbet ígérő hatásokat in vitro és in vivő, és ezt választjuk ki nagyüzemi extraháláshoz.
Az (IC) általános képletű vegyület elkülönítése és jellemzése kg palmira-lisztet (Borassus flabellifer L.) 5x10 kg-os részekre osztunk, és mindegyik részt 20 1 etil-acetát-
« · · ·« ·
- 36 tál extraháljuk szobahőmérsékleten, majd 1 óra eltelte után az extraktumokat szűrjük. Ezt az eljárást 15 1 etil-acetáttal megismételjük. Az egyesített szürleteket (175 1) vákuumban betöményítjük. így 95,5 g barna, olaj szerű maradékot kapunk, amelyet azután háromszor megosztunk 500 ml 90%-os vizes metanolból és 1 1 hexánból álló oldószerrendszerben. Az alsó fázis vákummban való bepárlás után 19,8 g nyers, szilárd anyagot ad. Ezt felvisszük egy 8x35 cm-es olyan oszlopra, amely 2 kg 60-as szilikagélt tartalmaz, és kromatografálást végzünk metil-terc-butil-éter és metanol elegyével, ahol a metanol-tartalmat lépésenként növeljünk 2%-ról 50%ra. Az 1-es, 2-es és 3-as frakciókat (mindegyiknek a térfogata 450 ml), melyek főleg az MLR-próbán mutatnak aktivitást, elkülönítjük.
A 2-es és a 3-as frakciót (1,92 g) rávisszük egy 5,5x36 cm-es szilikagéloszlopra, amelyet hexán és aceton elegyével
X eluálunk olyan módon, hogy az oldószerelegyben az aceton tartalmat 20%-ról lépésenként 50%-ra növeljük. Az oszlopról 22 frakciót (1,19 g) vékonyréteg-kromatografálással és bioaktivitás alapján azonosítunk, és ezeket a frakciókat egyesítjük az előző kromatográfiás lépés 1-es számú (0,28 g) MLR-aktív frakciójával. A következő tisztítási lépést 5x85 cm-es Sephadex LH-20-oszlopon végezzük, eluálószerként diklór-metán és metanol 1:1 térfogatarányú elegyét használva, 220 nm-en végzett UV-ellenőrzéssel. így 6 bioaktiv frakciót kapunk, amelyek 809 mg terméket szolgáltatnak. Ezt a terméket további feldolgozásnak vetjük alá Spherisorb ODS-2 RP18 (5μιη) töltetű, 20x250 mm-es oszlopon végzett háromszori azo» ·· · * * ··· · ««< · · « · · * » «· ·*» ·· f nos nagynyomású preparativ folyadékkromatografálással. Acetonitril és metil-terc-butil-éter 9:1 térfogatarányú elegyével vízben végzett lineáris gradiens (70% —> 100%) alkalmazása után a frakciókat kinyerjük, 220 nm-en végzett UV-ellenőrzés mellett.
MLR-aktív frakciót (32 mg) különítünk el ugyanazon a nagynyomású folyadék-kromatográfiás oszlopon, mint amilyet fentebb alkalmaztunk, bár az eluálást metanol, víz és metilterc-butil-éter 7:2:1 térfogatarányú izokratikus elegyével végezzük, az ellenőrzést 220 nm-en végezve. így összesen 9,3 mg tömegű 7 aktív frakciót kapunk. Ezt a lépést ugyanazon a nagynyomású kromatográfiás oszlopon megismételjük, az eluálást 87:13 térfogatarányű izokratikus acetonitril-víz elegyyel és az ellenőrzést 220 nm-en végezve. így négy (4) aktiv frakciót (1,3 mg) találunk. Végül egy 100 ^g-nyi alikvot részt különítünk el egy 4x250 ml-es, LiChrosfer RP18 (5μπι) töltetű nagynyomású folyadék-kromatográfiás oszlopon, az eluálást 1,5 ml/perc acetonitrillel végezve. A frakciókat egyidejűleg 220 nm-en és 240 nm-en dióda-elrendezésű UV-detektálással különítjük el. Megállapítottuk, hogy MLR-aktivitás egy olyan frakcióban van jelen, amelynek egyetlen és tiszta HPLC-csúcsa számos hullámhosszon van, és amelynek a retenciós ideje közelítőleg 11,6 perc. Az előző lépésből megmaradó aktivitást (1,1 mg) 100 μg tömegű 11 alikvotban ugyanilyen úton dolgozzuk fel, és az egyetlen tiszta csúcsot mutató frakciók összegyűjtés és betör-.ényítés után 0,5 mg fehér, amorf vegyületet adtak. E vegyület tulajdonságait és fizikai jellemzőit az alábbi 4. táblázatban adjuk meg.
• · • · · · · · · •·· · ···· • · · · · · ·
- 38 4. táblázat
Tulaj donságok
1. Megjelenés: színtelen por
2. Tömegspektrum (FAB) m/e = 443 (MH+)
3. Összegképlet: c30H50°2
4. UV spektrum (MeOH): végabszorpció
5. Proton NMR 500 MHz-en CDCl3-ban: lásd a 2. ábrát
CHCI3 mint belső standard
6. I-^c-nmr 125,7 MHz-en CDCl3-ban: lásd a 3. ábrát
CDCI3 mint belső standard
7. Oldhatóság: oldható kloroformban és metanolban, oldhatatlan vízben
8. HPLCa (retenció): 11,6 perc a magyarázata: Merck LiChrospher 100 RP-18 (5/xm) 4x250 mm;
1,5 my'/perc'\acet.onitril; detektálás 210 nm-en, Waters 996 fotodióda elrendezésű detektorral
Mérjük az elkülönített vegyület aktivitását a vegyes egér-limfocita reakcióban (MLR) (1. próba) és a Jurkat és P-815 citotoxikus/citosztatikus aktivitást (3. próba) és összehasonlítjuk ciklosporin A és szilicikolin aktivitásával ugyanezekben a próbákban. A kapott eredményeket az alábbi 5. táblázatban adjuk meg.
5. táblázat
Az elkülönített vegyület biológiai aktivitásai in vitro, ciklosporin A és szilicikolin aktivitásához viszonyítva
IC50 (ng/ml)
| MLR | Jurkat | P-815 | |
| Ciklosporin A | 4 | >5000 | >5000 |
| Szilicikolin | 2 | 2,5 | 4 |
| (IC) általános képletű | |||
| veqvület | 10,5 és 11,0 | >5000 | >5000 |
A ciklosporin A-t mint immunszupressziv referenciaanyagot használtuk.
A szilicikolint mint összehasonlító citosztatikus anyagot használtuk.
2. példa (17a)-23- (E)-Dammara-20,23-dién-3S,25-diol [(IC) általános képletű vegyület] szintézise
a) A) reakcióvázlat, 1. lépés
3β-tere-Butil-dimetil-sziloxi-17a-acetil-hexanordammarán [la) reakcióvázlat]
12,0 g (A) képletű vegyületet (Phytochemistry, loc. cit.) és 13,6 g imidazolt 450 ml dimetil - f ormamidban kezelünk argonatmoszférában 25,0 g terc-butil-dimetil-klór-szilánnal. A reakcióelegyet éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük, dietil-éterrel hígítjuk, majd vizes 5%-os nátriumhidrogén-karbonát-oldattal és konyhasóoldattal mossuk. A szerves réteget nátrium-szulfát fölött szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Szilikagélen kroma- 40 tografálunk, eluálószerként hexán és etil-acetát elegyét használva. így a (B) képletű vegyületet fehér hab alakjában kapjuk.
Rf (szilikagélen): 0,53 (hexán/etil-acetát 9:1 térfogatarányú elegyével) fH-NMR (CDC13) jellegzetes jelek: 3,15 [1H, dd, J = 5/12,
H-C(3)], 2,65-2,45 [1H, m, H-C(17)], 2,10 (3H, s, H3, CCO).
b) A) reakcióvázlat, 2. eljárási lépés
3β-tere-Bútil-dimetil-sziloxi-17-acetil-hexanor-dammarán-enol-acetát [l.b) reakcióvázlat]
1,0 g p-toluolszulfonsav-hidrát 200 ml ecetsavanhidriddel készített oldatát 140 °C hőmérsékleten 30 percen át hevítjük, majd szobahőmérsékleten 3,0 g (B) képletű vegyületet adunk hozzá, és a reakcióelegyet 3 órán át 140 °C-on hevítjük. A reakció alatt lassan ecetsav desztillál el. Ezután a reakcióelegyet csökkentett nyomáson mintegy 100 ml térfogatra betöményítjük, dietil-éterrel hígítjuk és hideg vizes 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal extraháljuk. A szerves réteget nátrium-szulfát fölött szárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Szilikagélen flash-kromatografálást végzünk, eluálószerként hexán és etil-acetát 95:5 térfogatarányú elegyét használva. így a (C) képletű, cím szerinti vegyületet fehér, szilárd anyagként kapjuk (két diasztereomer enol-acetát elegye)
Rf (szilikagélen): 0,41 (hexán és etil-acetát 95:5 térfogatarányú elegyével) ^H-NMR (CDCI3) jellegzetes jelek: 3,15 [1H, dd, J =
5/12,
H-C(3)], 2,50-2,00 [3H, m, H-C(13), H2-C(16)], 2,07 és 2,06 (3H, s, diasztereomer H3CCOO).
c) A) reakcióvázlat, 3. és 4. lépés
3β-tere-Butil-dimetil-sziloxi-17fi-acetil-hexanor-dammarán [l.c) reakcióvázlat]
445 mg (C) képletű vegyület 10 ml abszolút dietil-éterrel készített oldatát argonatmoszférában metil-lítium 3,75 ml 1,6 M dietil-éteres oldatával kezeljük 0 °C hőmérsékleten. A reakcióelegyet 1 órán át ugyanezen a hőmérsékleten keverjük, majd lehűtjük -78 °C-ra, és ezt követően 150 mg metil-szaliciláttal kezeljük. A reakcióelegyet 30 percen át -78 °C-on keverjük, majd vízzel kezeljük és dietil-éterrel extraháljuk. A szerves réteget nátrium-szulfát fölött szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Az anyagot szilikagélen végzett kromatografálással tisztítjuk, az eluálást hexán és etil-acetát 4:1 térfogatarányú elegyével végezzük. így a cím szerinti (D) képletű vegyületet fehér hab alakjában kapjuk.
Rf (szilikagélen): 0,34 alfa-keton, 0,26 béta-keton (hexán és etil-acetát 95:5 térfogatarányú elegyével) l-H-NMR (CDCI3) jellegzetes jelek: 3,15 [1H, dd, J = 5/12, HC(3)], 3,00-2,94 [1H, m, H-C(17)], 2,11 (3H, s, H3CCO).
d) A) reakcióvázlat, 5. reakciólépés
3β-tere-Butil-dimetil-sziloxi-20-trifluor-metán-szülfoniloxi-17a-hexanor-dammar-20-én [l.d) reakcióvázlat]
Kálium-bisz(trimetil-szilil)-amin 4,0 ml 15%-os toluolos oldatát argonatmoszférában, -78 °C hőmérsékleten hozzáadjuk 236 mg (D) képletű vegyület 25 ml tetrahidrofuránnal • · ·
- 42 készített oldatához. A reakcióelegyet 5 °C-ra felmelegítjük, fél órán ezen a hőmérsékleten keverjük, majd -30 °C-ra lehűtjük. Ezután gyorsan hozzáadjuk 1,25 g N-fenil-trifluormetánszulfon-imid 10 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát. A reakcióelegyet 0 °C-ra felmelegítjük, ezen a hőmérsékleten 5 percen át keverjük, 7-es pH-jú pufferre öntjük és dietil-éterrel háromszor extraháljuk. Az egyesített dietiléteres fázisokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk, szárazra pároljuk és szilikagélen végzett kromatografálással tisztítjuk, eluálószerként dietil-éter és hexán 3:97 térfogatarányú elegyét használva. így 203 mg (67%) cím szerinti (H) képletű vegyületet kapunk színtelen kristályok alakjában.
!h-NMR (360 MHz, CDCI3) jellegzetes jelek: 2,85-2,94 (bq, 1H, SH-C(17); 3,20 [dd, 1H, aH-C(3)]; 5,12 [bd, 1H, J = 4,
Ha-C(21); 5,20 (d, 1H, J = 4Hz, Hb-C(21).
e) A) reakcióvázlat, 6. reakciólépés
3E-tere-Butil-dimetil-sziloxi-20-tri-n-butil-sztannil-17a-hexanor-dammar-20-én [l.e) reakcióvázlat] n-Butil-lítium 1,6 N hexános oldatából 44 ml-t adunk
-78 °C hőmérsékleten, argonatmoszférában 3,15 g réz-cianid (CuCN) 200 ml tetrahidrofuránnal készített szuszpenziójához. A kapott zöld oldatot -50 °C hőmérsékleten 10 percen át végzett keverés után -78 °C-on 18,6 ml n-tributil-n-hidriddel (η-ΒυβδηΗ) kezeljük. 10 perc eltelte után 30 ml tetrahidrofuránban 2,14 g vinil-triflátót adunk hozzá, majd a reakcióelegyet -78 °C hőmérsékleten 10 percen át keverjük, és élénk keverés közben 25%-os vizes ammóniumklorid/hexán (0,75 1/0,5 1) oldathoz öntjük. A csapadékot leszűrjük és hexánnal há• ·
- 43 romszor mossuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk, szárazra pároljuk és szilikagélen végzett kromatografálással tisztítjuk, eluálószerként hexánt használva. Ilyen módon a (J) képletű cím szerinti vegyületet színtelen, viszkózus olajként kapjuk 53%-os kitermeléssel. 1H-NMR (360 MHz, CDC13) jellegzetes jelek: 2,82-2,92 [bq, 1H, EH-C(17)]; 3,14 [dd, 1H, aH-C(3)]; 5,18 [bs, 1H, HC(21)]; 5,80 [bs, 1H, H-C(21)].
f) A) reakcióvázlat, 7. lépés
3E-terc-Butil-dimetil-sziloxi-17oí-23- (E) -dammara-20,23-dién-25-ol [l.f) reakcióvázlat] mg Pd(CH3CN)2CI2 0,3 ml vízzel és 12 ml dimetilformamiddal készített oldatát hozzáadjuk 0,4 g 2,2-dimetil-3-vinil-oxirán [Tetrahedron 45, 979 (1989)] és 1,36 g (J) képletű vegyület 12 ml tetrahidrofuránnal készített szobahőmérsékletű oldatához. A reakcióelegyet éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük. A kissé zavaros sárga oldatot vízre öntjük és dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. így a (K) képletű cím szerinti vegyületet sárga, viaszos ) szilárd anyagként kapjuk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő lépésben.
g) A) reakcióvázlat, 8. lépés (1 7oí) - 23 - (E) -Dammara-20,23-dión-3S, 25-diói [l.g) reakcióvázlat]
1,45 g (K) képletű vegyület 60 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát 100 ml tetrabutil-ammónium-fluoriddal (1M oldat tetrahidrofuránban) kezeljük 60 °C hőmérsékleten 1,5
órán át. A reakcióelegyet 1 1 félig telített vizes nátriumhidrogén-karbonát -oldatra öntjük és dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-szulfát fölött megszárítjuk, majd szárazra pároljuk és szilikagélen végzett ktomatografálással tisztítjuk, eluáló oldószerként aceton, dietil-éter és hexán 5:40:55 térfogatarányú elegyét használva. Ilyen módon 670 mg (L) képletű dammara-dién-diolt kapunk (a két lépésben 83%-os hozam) színtelen kristályok alakjában. Egy mintát dietil-éter és hexán elegyéből átkristályosítva az olvadáspont 90,6-91,4 °C.
[a]589 25 = -7,45°. [<*] 30225 = -119,2°. [a] 29625 = -109,5°.
[a]28025 = -38,7°; (etanol, c = 1,06).
A szintetikus anyag l-H-NMR spektruma azonos a palmiralisztből (Borassus flabellifer L.) elkülönített természetes vegyületével.
1H-NMR (360 MHz, CDC13): ppm 0,73 [bd, 1H, J = 12,5 és 1,3; H-C(5)] ; 0,78 [s, 3H, H-C(28)]; 0,85 [s, 3H, H-C(19)]; 0,90 [s, 3H, H-C(30)]; 0,95 [s, 3H, H-C(18)]; 0,98 [s, 3H,
H-C(29)]; 1,33 [s, 6H, H-C(26,27)]; 1,19-1,74 [m, 15H,
H-C(1,2,6,7,9,11,12,15)]; 1,75-1,84 [m, 2H, H-C(16)]; 1,98-2,05 [m, 1H, H-C(13)]; 2,59-2,64 [m, 1H, SH-C(17)];
2,66 [bd, 1H, J = 6,3 Hz, H-C(22)]; 2,79 (bs), 2,82 [dd, 1H, H-C(22)]; 3,18-3,23 [m, 1H, aH-C(3)]; 4,88 [s, 1H, H-C(21)];
4,95 (s, 1H, H-C(21); 5,59-5,62 [m, 2H, H-C(23,24)].
2' példa
A 17β)-23E-dammara-20,23-dién-3β,25-diói vegyületet előállíthatjuk hasonló módon az A) képletű vegyületből kiin45 dúlva, és a 2. példa a) és d) - g) lépései szerint. A termék fizikai adatait az alábbi 3. példában adjuk meg.
3. példa (17β)-23E-Dammara-20,23-dién-3E,25-diol [az (IC) képletű vegyület β-epimerje]
a) B) reakcióvázlat, 9. eljárási lépés
3β-tere-Butil-dimetil-sziloxi-17fi-acetil-hexanor-dammarán-triszil-hidrazon
1,6 g (B) képletű vegyület [előállítva a 2a) példa szerint] és 3,3 g 2,4,6-triizopropil-benzolszulfonsav-hidrazin 50 ml acetonitrillel készített szuszpenzióját 150 μΐ tömény sósavval kezeljük szobahőmérsékleten. A szuszpenziót 30 percen át keverjük szobahőmérsékleten, majd dietil-éterrel hígítjuk és vizes 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk. A szerves réteget nátrium-szulfát fölött szárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Szilikagélen kromatografálást végzünk, eluáló oldószerként hexán és etil-acetát 4:1 térfogatarányú elegyét használva. így a cím szerinti (E) képletű vegyületet fehér, amorf hab alakjában kapjuk (az e és a z diasztereomerek elegye).
Rf (szilikagélen): 0,61 (hexán és etil-acetát 4:1 térfogatarányú elegyében) ^H-NMR (CDCI3) jellegzetes jelek: 7,24 és 7,12 [3H, s, H-
| C(aromás)], | 4,22-4,08 | [2H, m, H-C-C(aromás)], 3,15-3,05 [1H, |
| m, H-C(3)], | 2,92-2,78 | [1H, m, H-C-C(aromás)], 2,35-2,22 [1H, |
| m, H-C(17)] | , 1,67 (1H, | S, H3CCN). |
··· · · · · · · • * · · · ·· ··· ·· ·
- 46 b) 10. B) reakcióvázlat, 10. + 7. reakciólépés
3E-terc-Butil-dimetil-sziloxi-17S-23-(E)-dammara-20,23-dién-25-ol [3.b) reakcióvázlat]
161 mg (E) képletű vegyület 5 ml abszolút dietil-éterrel készített oldatát -78 °C-on kezeljük argonatmoszférában 0,5 ml 1,6 M hexános butil-1ítium-oldattal. A sárgásbarna oldatot -20 °C hőmérsékleten keverjük mindaddig, amíg a gázfejlődés be nem fejeződik. 15 mg réz (I)-cianid -78 °C-on végzett hozzáadása után 160 μΐ 1,l-dimetil-2-vinil-epoxidot adunk a reakcióelegyhez, majd -20 °C-on két órán át keverjük. Ezután a reakcióelegyet dietil-éterrel hígítjuk és vizes telített ammónium-klorid-oldattal (pH=9) kezeljük. A szerves réteget nátrium-szulfát fölött szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. így 190 mg amorf, szilárd anyagot kapunk, amelyet közvetlenül, további tisztítás nélkül használunk fel a szilil védőcsoport eltávolításához .
c) B) reakcióvázlat, 8. lépés (17S)-23-(E)-Dammara-20,23-dién-3S,25-diol [3.c) reakcióvázlat]
190 mg (F) képletű szilil-éter 5 ml abszolút tetrahidrofuránnal készített oldatát argonatmoszférában tetrabutil-ammónium-fluorid 1M tetrahidrofurános oldatával kezeljük. A reakcióelegyet 12 órán át keverjük 50 °C hőmérsékleten, majd dietil-éterrel hígítjuk és vizes nátrium-hidrogén-karbonátoldattal extraháljuk. Az oldószer eltávolítása után szilikagélen kromatografálást végzünk, oldószerként hexán és etil- 47 acetát 4:1 térfogatarányú elegyét használva. így 35 mg cím szerinti vegyületet kapunk fehér, kristályos termékként. 1H-NMR (CDCI3) jellegzetes jelek: 5,60-5,50 [2H, m, H-C(23+24)], 4,70 [1H, s, H-C(21)], 4,62 [1H, s, H-C(21)],
3,13 [1H, dd, J = 5/12, H-C(3)], 2,65-2,55 [2H, m, H-C(22)],
2,18-2,12 [1H, m, H-C(17)].
3’ példa
A (17a)-23E-dammara-20,23-dién-3S,25-diol vegyületet előállíthatjuk hasonló módon a 2c) példa (D) képletű vegyületéből kiindulva és a 3. példa a) - c) lépéseiben leírthoz hasonló módon, vagyis az alábbi közbenső termékeken keresztül :
- 3δ-terc-butil-dimetil-sziloxi-17a-acetil-hexanor-dammarán-triszhidrazon; és
- 3fi-terc-butil-dimetil-sziloxi-17a-23-(E)-dammara-20,23-dién-25-ol.
A 2. példában leírt vegyület fizikai adatai
Miként fentebb jeleztük, a találmány szerint felhasználható dammara-vegyületek dózisai több tényezőtől, így például az adagolási úttól, a kezelendő állapottól és különösen a felhasznált dammara-vegyülettől függenek. Az (IC) vegyület és a vegyület 17ü-epimerjenek [(17β)-23-(E)-dammara-20,23-dién-3B,25-diol] ED50 értékei a fentebb leírt 9. és 10. vizsgálat szerint az alábbi táblázatban találhatók, az ismert gyulladásgátló és immunszupressziv ciklosporin A hasonló adataival együtt.
| 9. vizsgálat (DTH) [ED50] | 10. vizsgálat (SLE) [ED50] | |
| (IC) képlet | 4,0 ug/kg p.o. | 10 ug/kg p.o. |
| Az (IC) képletű vegyü- | ||
| let β-epimerje | 10 mg/kg p.o. | 10 mq/kg p.o. |
| Ciklosporin A | 45-50 mg/kg p.o. | 75-100 mq/kg p.o. |
A javasolt dózisok gyulladásgátló és immunszupressziv felhasználás, például autoimmun betegség gyógyítása esetén:
- az (IC) képletű vegyület esetében a ciklosporin A terápia kapcsán jelzett mennyiségek egy ezredrészétől egy tízezred részéig, vagyis körülbelül 0,4 vagy 0,5 μg/kg/nap adagtól 4,0 vagy 5,0 μg/kg/nap adagig;
- az (IC) képletű vegyület 17S-epimerjének esetében a ciklosporin a terápia kapcsán javallt dózisok egynegyedegytized része, vagyis körülbelül 0,4 vagy 0,5 mg/kg/nap dózistól 1,0 vagy 1,25 mg/kg/nap dózisokig.
Claims (17)
- Szabadalmi igénypontok1. Dammara-vegyület gyógyászati felhasználás céljára.
- 2. Gyógyászati készítmény, amely egy dammara-vegyületet egy gyógyászatilag felhasználható hígítószerrel vagy hordozóanyaggal együtt tartalamz.
- 3. Dammara-vegyületek felhasználása immunszupresszív vagy gyulladásgátló célra szolgáló gyógyászati készítmény előállítására.
- 4. Immunszupresszív és gyulladásgátló gyógyászati készítmény, azzal jellemezve, hogy egy dammara-vegyület immunszupressziv vagy gyulladásgátló hatás szempontjából hatásos mennyiségét tartalmazza.
- 5. Az 1. igénypont szerinti vegyület, a 2. igénypont szerinti kompozció, a 3. igénypont szerinti felhasználás vagy a 4. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol a dammara-vegyület (IA) képletű vegyület - a képletben a jelentése >CH-OR]_, ahol jelentése hidrogénatom vagy egy fiziológiailag lehasíthtó és elfogadható savmaradék vagy >C=0, és R jelentése egy 8 szénatomos alifás csoport, amely adott esetben egy vagy két kettős kötést tartalmaz és adott esetben legalább egy hidroxilcsoporttal van szubsztituálva.
- 6. Egy 17a-dammara-vegyület.
- 7. (IB) általános képletű vegyület, amelyben a és R jelentése megegyezik az 5. igénypontban adott meghatározás szerintivel.
- 8. (IC) képletű (17a)-23 -(E)-dammara-20,23-dién-3S,25-diol vegyület vagy annak fiziológiailag lehasítható és • * · · ·*« · · elfogadható észtere.
- 9. Olyan vegyület, amelynek NMR spektruma megegyezik a2. ábrán vagy a 3. ábrán bemutatott NMR spektrum jellemzőivel .
- 10. Az 1. igénypont szerinti vegyület, a 2. igénypont szerinti kompozíció, a 3. igénypont szerinti alkalmazás vagy a 4. igénypont szerinti gyógyászati kompozíció, ahol a dammara-vegyület a 6-8. igénypontok bármelyike szerinti vegyület .
- 11. Egy 17a-karbonil-dammara-vegyület.
- 12. Egy 11. igénypont szerinti, (Xllb) általános képletű vegyület, amelyben a jelentése >CH-0H vagy >C=0 szabad vagy védett alakban, és a 17-es helyzetű R2CO- szubsztituens egy acilcsoport.
- 13. Egy 17-(organo-fém-C)- vagy 17-(alkálifém-C)-dammara-vegyület.
- 14. Egy 13. igénypont szerinti, (XHIa) általános képletű vegyület, amelyben a jelentése megegyezik a 11. igénypontban adott meghatározás szerintivel, és Z jelentése alkálifématom vagy egy organo-fém-csoport.
- 15. Egy 13. igénypont szerinti vegyület, amelyben Z jelentése lítiumatom vagy trialkil-ón-csoport.
- 16. Eljárás 17o;-dammara-vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy a) epimerizálunk egy 17S-karbonil-dammaravegyületet, és az így kapott 17a-karbonil-dammara-vegyületet b) további átalakításnak vetjük alá, a fentebb leírt módszereket és eljárásokat használva.
- 17. Eljárás 17C-dammara-vegyületek előállítására, azzal » ·· «· ·· « « · · « ««· · · » · · * ··· ·· jellemezve, hogy egy 17-karbonil-dammara-vegyületet a kívánt védett formában egy elektrofil vegyülettel kapcsolunk, és kívánt esetben eltávolítjuk a védocsoportokat és a funkciós csoportokat.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9415161A GB9415161D0 (en) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | Organic compounds |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT76831A true HUT76831A (en) | 1997-11-28 |
Family
ID=10758967
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9700246A HUT76831A (en) | 1994-07-27 | 1995-07-24 | Dammara-steroids, their prodution, pharmaceutical compositions containing them and use thereof |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5852005A (hu) |
| EP (1) | EP0801653A2 (hu) |
| JP (1) | JPH10503191A (hu) |
| AU (1) | AU704929B2 (hu) |
| BR (1) | BR9508344A (hu) |
| CA (1) | CA2192789A1 (hu) |
| CZ (1) | CZ23497A3 (hu) |
| FI (1) | FI970320A0 (hu) |
| GB (1) | GB9415161D0 (hu) |
| HU (1) | HUT76831A (hu) |
| IL (1) | IL114723A0 (hu) |
| MX (1) | MX9700554A (hu) |
| NO (1) | NO970329L (hu) |
| NZ (1) | NZ290430A (hu) |
| PE (1) | PE35596A1 (hu) |
| PL (1) | PL318145A1 (hu) |
| SK (1) | SK11897A3 (hu) |
| TR (1) | TR199500905A2 (hu) |
| WO (1) | WO1996003419A1 (hu) |
| ZA (1) | ZA956279B (hu) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6124362A (en) * | 1998-07-17 | 2000-09-26 | The Procter & Gamble Company | Method for regulating hair growth |
| US6450168B1 (en) | 2001-04-17 | 2002-09-17 | Kellie I. Nguyen | Infant sleeping blanket/garment for use with medical devices |
| US20110104186A1 (en) | 2004-06-24 | 2011-05-05 | Nicholas Valiante | Small molecule immunopotentiators and assays for their detection |
| CN109985052A (zh) * | 2017-12-29 | 2019-07-09 | 上海蓝木化工有限公司 | 三萜类化合物的新用途 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3644421A (en) * | 1968-12-02 | 1972-02-22 | Syntex Corp | 4-oxa-3-keto-delta**1-pregnene derivatives |
| US3868453A (en) * | 1970-03-04 | 1975-02-25 | Philips Corp | 16-Methylene-9/beta, 10alpha-steroid compounds, pharmaceutical preparations which contain the novel compounds as active ingredients and methods of producing the said compounds and preparations |
| US4057543A (en) * | 1976-07-01 | 1977-11-08 | G. D. Searle & Co. | Process for the preparation of 17β-hydroxy-3-oxo-17α-pregn-4-ene-21-carboxylic acid γ-lactone |
| US4636496A (en) * | 1984-03-20 | 1987-01-13 | Wayne State University | Compositions inhibiting murine MXT ductal carcinoma |
| US4755504A (en) * | 1985-10-03 | 1988-07-05 | Yaguang Liu | Pharmaceutical composition from Tienchi |
| JPH04243833A (ja) * | 1991-01-28 | 1992-08-31 | Tsumura & Co | １１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤 |
-
1994
- 1994-07-27 GB GB9415161A patent/GB9415161D0/en active Pending
-
1995
- 1995-07-17 ZA ZA956279A patent/ZA956279B/xx unknown
- 1995-07-24 CA CA002192789A patent/CA2192789A1/en not_active Abandoned
- 1995-07-24 BR BR9508344A patent/BR9508344A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-07-24 MX MX9700554A patent/MX9700554A/es unknown
- 1995-07-24 NZ NZ290430A patent/NZ290430A/en unknown
- 1995-07-24 CZ CZ97234A patent/CZ23497A3/cs unknown
- 1995-07-24 HU HU9700246A patent/HUT76831A/hu unknown
- 1995-07-24 AU AU31166/95A patent/AU704929B2/en not_active Ceased
- 1995-07-24 JP JP8505467A patent/JPH10503191A/ja active Pending
- 1995-07-24 EP EP95926974A patent/EP0801653A2/en not_active Withdrawn
- 1995-07-24 WO PCT/EP1995/002913 patent/WO1996003419A1/en not_active Application Discontinuation
- 1995-07-24 PL PL95318145A patent/PL318145A1/xx unknown
- 1995-07-24 SK SK118-97A patent/SK11897A3/sk unknown
- 1995-07-24 US US08/776,442 patent/US5852005A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-25 IL IL11472395A patent/IL114723A0/xx unknown
- 1995-07-26 PE PE1995274759A patent/PE35596A1/es not_active Application Discontinuation
- 1995-07-27 TR TR95/00905A patent/TR199500905A2/xx unknown
-
1997
- 1997-01-24 FI FI970320A patent/FI970320A0/fi unknown
- 1997-01-24 NO NO970329A patent/NO970329L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB9415161D0 (en) | 1994-09-14 |
| NO970329L (no) | 1997-03-25 |
| FI970320A (fi) | 1997-01-24 |
| TR199500905A2 (tr) | 1996-06-21 |
| AU704929B2 (en) | 1999-05-06 |
| EP0801653A2 (en) | 1997-10-22 |
| EP0801653A3 (hu) | 1997-10-29 |
| MX9700554A (es) | 1997-05-31 |
| CZ23497A3 (en) | 1997-07-16 |
| AU3116695A (en) | 1996-02-22 |
| CA2192789A1 (en) | 1996-02-08 |
| IL114723A0 (en) | 1995-11-27 |
| JPH10503191A (ja) | 1998-03-24 |
| ZA956279B (en) | 1997-01-27 |
| FI970320A0 (fi) | 1997-01-24 |
| US5852005A (en) | 1998-12-22 |
| NZ290430A (en) | 1998-01-26 |
| WO1996003419A1 (en) | 1996-02-08 |
| NO970329D0 (no) | 1997-01-24 |
| PL318145A1 (en) | 1997-05-12 |
| PE35596A1 (es) | 1996-09-04 |
| BR9508344A (pt) | 1998-07-14 |
| SK11897A3 (en) | 1997-08-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3292928B2 (ja) | 新規なプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン−１６，１７−アセタール−２１−エステル、その製法および抗炎症用医薬組成物 | |
| US4235893A (en) | Ester derivatives of 4-hydroxy-4-androstene-3,17-dione and a method for inhibiting estrogen biosynthesis | |
| Claeson et al. | T-cadinol: A pharmacologically active constituent of scented myrrh: Introductory pharmacological characterization and high field 1H-and 13C-NMR data | |
| HUT61557A (en) | Process for producing 42-oxorapamycin | |
| US4921848A (en) | Biliary acid derivatives, processes for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them | |
| JPS6119640B2 (hu) | ||
| GB1599863A (en) | Pharmaceutical compositions for use in the inhibition of the biosynthesis of mevalonic acid | |
| WO2002014343A1 (en) | Bufadienolide derivatives and use as immunosuppressive, antiinflammatory and analgesic agents | |
| CZ286157B6 (cs) | Tetrahydropyranové deriváty, způsob jejich přípravy a farmaceutické kompozice tyto deriváty obsahující | |
| WO1995010527A1 (en) | 3,17-dihydroxy-3,7,16 and/or 17-methyl-androst-5-ene compounds, derivatives thereof, and their use | |
| FI57114B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya vid cancerterapi anvaendbara terapeutiskt vaerdefulla enolestrar av steroider | |
| HUT76831A (en) | Dammara-steroids, their prodution, pharmaceutical compositions containing them and use thereof | |
| US5093505A (en) | Novel heterocyclic compound, carcinostatic agent, and carcinoma controlling method | |
| US5866558A (en) | 6-alkynyl steroids | |
| JPH02275884A (ja) | 置換アザトリシクロ誘導体および代謝物、それらの製法並びに医薬組成物 | |
| NO168481B (no) | 14,17beta-ethano-14beta-oestratrienderivater, befruktningshindrende middel, og anvendelse derav for befruktningskontroll hos kvinner. | |
| HU217868B (hu) | Eljárás redukált rapamicin-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására | |
| GB2127827A (en) | Pregnane compounds | |
| US5681950A (en) | Withajardins | |
| JP3366639B2 (ja) | コンティグナステロール化合物を含んで成る医薬組成物 | |
| JPH0782151A (ja) | 抗プロゲステロン活性をもつビタミンｄ化合物 | |
| KR101594425B1 (ko) | 백선피 추출물과 이로부터 분리된 신규 글래브레탈-타입 트리테르페노이드 및 이의 용도 | |
| AU662077B2 (en) | Androst-4-eno(4,5-b)pyrrole derivatives and process for their preparation | |
| El Masry et al. | Synthesis and biological action of two glucocorticoid alkylating agents | |
| US20220145335A1 (en) | Bio-catalyzed Synthesis of Potent Anti-inflammatory Agents from Medroxyprogesterone Acetate |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFD9 | Temporary protection cancelled due to non-payment of fee |