JPH10503191A

JPH10503191A - テトラサイクリックトリテルペン

Info

Publication number: JPH10503191A
Application number: JP8505467A
Authority: JP
Inventors: ヒースタント，ペーター; ネーフ，レト; ネーゲリ，ハンス−ウルリッヒ; オーベラー，ルーカス; レヴェズ，ラズロ; ロート，ハンス−イェルク
Original assignee: サンド・リミテッド
Priority date: 1994-07-27
Filing date: 1995-07-24
Publication date: 1998-03-24
Also published as: NZ290430A; TR199500905A2; FI970320A0; CZ23497A3; EP0801653A2; US5852005A; WO1996003419A1; EP0801653A3; NO970329L; CA2192789A1; GB9415161D0; PL318145A1; PE35596A1; AU704929B2; SK11897A3; AU3116695A; IL114723A0; NO970329D0; MX9700554A; BR9508344A

Abstract

(57)【要約】ダンマラ化合物は、免疫抑制および抗炎症活性を有し、医薬、特に免疫抑制剤および抗炎症剤として有用である。１７α−ダンマラ化合物は、新規であり、それ自体、例えば、式ＩＣ[(１７α)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール］

Description

【発明の詳細な説明】テトラサイクリックトリテルペン本発明は、ダンマラ化合物およびその薬学的使用に関する。ダンマラ化合物は、トリテルペンクラスの認められた化合物群から成り、式Ｉで示される四環状中心構造により特徴付けられる。既知のダンマラ化合物において、この中心構造は、通常３位を、例えばヒドロキシ(ダンマル−３−オール)またはオキソ(ダンマル−３−オン)で置換され、一般にモノ置換されている。ダンマラ化合物は、また、通常１７位が置換され、一般にモノ置換されている。例えば、ダンマレンは、チョウセンニンジン(Ｇinsen g)の根および他の植物材料に見られ、１７位が通常１個またはそれ以上の、例えば１または２のアルケン(−Ｃ＝Ｃ−)結合を含有するヒドロキシカルビル残基を有する。ダンマレンの場合、最も典型的に、１７−ヒドロカルビル置換基はＣ₈ −アルケニルまたは−アルカジエニル残基を有し、それは更に、例えば１個またはそれ以上のヒドロキシ基で置換され得る。ダンマラ化合物は、また、１個またはそれ以上の更なる置換基、一般にヒドロキシ基を、中心構造の他の位置に有し得るかまたは１個またはそれ以上の不飽和結合、例えば二重結合を中心構造内に含み得る。しかしながら、ダンマラ化合物において、式Ｉに示す環状構造、立体化学的配置および４、１０、８および１４位のメチル基の分布は未変化のまま残る。本発明により、ダンマラ化合物は望ましい薬学的、特に免疫抑制および抗炎症特性を有することが判明した。従って本発明は、第一の態様において：ａ¹）医薬として使用する、例えば、免疫抑制剤または抗炎症剤として使用する、ダンマラ化合物；ａ²）免疫抑制剤または抗炎症剤として治療的適用するための医薬の製造のためのダンマラ化合物；ａ³）有効量のダンマラ化合物を患者に投与することを含む、免疫抑制または抗炎症治療を必要とする患者の処置法を提供する。上記定義ａ¹）からａ³）に含まれる具体的免疫抑制および／または抗炎症指示または状態は、特に、下記に具体的に記載するものを含む。本明細書で使用の“ダンマラ化合物”なる用語は、上記で図説の式Ｉで示される特徴的中心構造を含む、即ち式Ｉで示す特別の環状構造、立体化学的配置およびメチル置換基の分布を有する化合物を意味する。本用語は、式Ｉで示される立体化学的配置は未変化であって、式Ｉ中心構造が特に３および／または１７位に１個またはそれ以上の付加置換基を有する化合物、および中心構造に含まれる１個またはそれ以上の炭素−炭素結合が不飽和、例えばエチレン様不飽和である化合物を含むと理解される。従って、本用語は、例えばダンマル−３−オールおよびダンマル−３−オンの両方を含むと理解されるべきである。本明細書で記載のダンマラ化合物なる用語は、特に、１７Ｃ−ダンマラ化合物、即ち炭素原子を経由して１７位に結合している基により１７位が置換されているダンマラ化合物を含むと理解されるべきである。このような１７Ｃ−ダンマラ化合物は、モノ−またはジ−置換、より通常的には１７位でモノ−置換され得る。本発明で使用するための好ましいダンマラ化合物は、ダンマル−３−オールおよびその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステルおよびダンマル−３ −オンおよび、特に１７Ｃ−ダンマラ化合物である。従って、本発明で使用するのに特に好ましい化合物は、１７Ｃ−ダンマル−３−オールおよびその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステルおよび１７Ｃ−ダンマル−３−オン、例えば、式ＩＡ〔式中、ａは＞ＣＨ−ＯＲ₁(ここで、Ｒ₁は水素または生理学的に開裂可能および許容可能なアシル残基)または＞Ｃ＝ＯおよびＲは炭素原子により１７位の炭素原子に結合している基である〕で示される化合物である。本明細書で使用の“生理学的に加水分解可能および許容可能なエステル”なる用語は、生理学的条件下で開裂可能であり、それ自体、投与すべき量で生理学的に耐性である酸を産生するエステルを意味する。従って、本用語は、当分野で既知のプロドラッグ形、例えばアセテート等を意味する。上記で定義のようにダンマル−３−オールにあてはめると、本用語は、アシル残基が生理学的に開裂可能および許容可能である３−アシルオキシによって、３−ヒドロキシ基が置換された化合物を意味し、この化合物は、生理学的条件で分解されて遊離ダンマル−３ −オールおよび投与すべき量で生理学的に耐性な酸を産生する。認められるように、ダンマラ化合物に３位以外に存在するヒドロキシ基は、同様にエステル化し得、それによりこのようなエステルもまた本発明に包含されると理解されるべきである。１７Ｃ−ダンマラ化合物は、一般に１７位に不斉炭素原子を含む。従って、このような化合物はジアステレオマー形で存在する。例えば、１７Ｃ−ダンマル− ３−オールの場合、更なる不斉炭素原子が３位に存在し、更なる立体異性変位体をもたらす。このような異性体が存在する場合、本発明はジアステレオマー混合物および個々のエピマーの両方の使用を含むと理解されるべきである。一般に、純粋または実質的に純粋な形、例えば純粋または実質的に純粋な単一エピマーの形、例えば少なくとも９０％、例えば少なくとも９５％純粋化合物／エピマー( 即ち、１０％またはそれ以下、好ましくは５％またはそれ以下の他のダンマラ化合物またはエピマー不純物)での使用が好ましい。ダンマル−３−オールおよびそのエステルの場合、３位のヒドロキシまたはエステル基は好適にはβ−配位を有する。先に示唆したように、種々のダンマラ化合物が既知であり、文献に記載されている。既知のダンマラ化合物の場合、１７位の置換基は特徴としてβ−配位である。１７位の置換基がα−配位であるダンマラ化合物は新規であり、それ自体本発明の範囲内に含まれる。１７αダンマラ化合物は、対応する１７βダンマラ化合物より良好な特性、例えば改善されたin vivo安定性および高められた整理活性、特にin vivo活性を有利に示す。本発明の更なる態様は、また：ｂ）１７α−ダンマラ化合物、例えば１７αＣ−ダンマラ化合物：およびｃ）上記ａ¹）で開示のような使用のための、上記ａ²）に開示のような医薬の製造のためのまたは上記ａ³）で開示のような処置法で使用するための１７α−ダンマラ化合物、例えば１７αＣ−ダンマラ化合物を提供する。本発明の好ましい１７α−ダンマラ化合物は、１７α−ダンマル−３−オールおよびその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステルおよび１７α−ダンマル−３−オン、例えば１７αＣ−ダンマル−３−オールおよびその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステルおよび１７αＣ−ダンマル−３−オンである。本発明の１７α−ダンマラ化合物の具体的グループは： −１７αβＨ−ダンマラ化合物(即ち、１７α置換基が１７位で唯一の置換基であるダンマラ化合物)； −１７α,１２βＨ−ダンマラ化合物(即ち、１２位の置換基がα立体配置であるダンマラ化合物)； −１７α,１２ＨＨ−ダンマラ化合物(即ち、１２位が非置換であるダンマラ化合物)； −１７位および所望により３位のみ置換されている１７α−ダンマラ化合物；特に対応する１７αＣ−ダンマラ化合物、−ダンマル−３−オールまたはその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステル、または−ダンマル−３−オンおよびこのようなグループの任意の組み合わせ、例えば１７αβＨ,１２βＨ− ダンマラ化合物、−ダンマラ−３−オール等を含む。本発明の１７α−ダンマラ化合物の具体的グループは、式ＩＢ〔式中、Ｒは式ＩＡで記載の意味を有する〕で示される化合物を含む。本発明で使用の１７Ｃ−ダンマラ化合物および本発明の１７αＣ−ダンマラ化合物の１７Ｃ−置換基、例えば式ＩＡおよびＩＢの基Ｒは、好適にはヒドロカルビル基、特に脂肪族ヒドロカルビル基である。このような脂肪族基は、分枝鎖または直鎖、飽和または不飽和であり得、１個またはそれ以上の置換基、特に１個またはそれ以上のヒドロキシ基を有し得る。好ましい脂肪族基は、非置換またはヒドロキシ置換脂肪族基、特にアルケニルまたはアルカジエニル基である。このような脂肪族基は、前記のように好ましくは８個までの炭素原子を含む。従って、Ｒは、好ましくは所望により１または２個の二重結合を含み、所望により少なくとも１ヒドロキシ基で置換されているＣ₈−脂肪族基である。本発明は、１７α−ダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマル−３−オールの個々のエピマーおよびそのジアステレオマー混合物の両方を含むと理解されるべきである。一般に、例えば本発明の薬学的使用のために、純粋または実質的に純粋な(即ち、１７β−ダンマラ化合物不純物が無いか実質的に無い)、例えば少なくとも９０％、例えば少なくとも９５％１７α−ダンマラ化合物を含む(即ち、１０％またはそれ以下、好ましくは５％またはそれ以下の１７β−ダンマラ化合物不純物を含む)１７α−ダンマラ化合物が好ましい。１７α−ダンマラ化合物自体が１個以上のエピマー形で存在する場合、純粋または実質的に純粋な単一エピマー、例えば少なくとも９０％、例えば少なくとも９５％純粋エピマー(例えば、１０％以下、好ましくは５％以下の他のエピマー不純物を含む)を含む生産物の使用が好ましい。１７α−ダンマル−オールおよびそのエステルの場合、３位のヒドロキシまたエステル基は好適にはβ−配位を有する。本発明の好ましい化合物は、遊離形または生理学的に加水分解可能および許容可能なエステル形の式ＩＣで示される化合物、((１７α)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール)である。本発明により、式ＩＣの新規化合物がオウギヤシ、ボラッサス・フラベリファー・エル(Ｂorassus flabellifer Ｌ.)の新芽の粉末から単離できる。オウギヤシは、アジア大陸の熱帯地方に広く分布し、ある国では毎日の食事の主食である。スリランカでは、新芽の外側、現地ではコッタキラング(Ｋottakilangu)と呼ぶ、を野菜として、または乾燥し、挽いて粉を得るための両方に使用する。この粉は、式ＩＣで示される化合物の単離のための簡便な原料である。式ＩＣで示される化合物の単離および特徴付は、実施例１で詳述する。従って、本発明は植物材料、例えばオウギヤシ、ボラッサス・フラベリファー・エルから化合物を単離することを含む、式Ｉで示される化合物の製造法をまた含む。好ましくは、単離工程は、有機エステル、例えば酢酸エチルでの抽出、続く１種またはそれ以上のグロマトグラフィー精製工程を含む。１７位の置換基がβ−配位である多くのダンマラ化合物、例えばダンマレンが知られており、天然産物として、例えば植物原料からの抽出物として得られ得る。例えば、多くの１７β−ダンマラ化合物は、ダンマル樹脂(Ｆluka ＡＧ，ＣＨ -9470 Ｂuchs，Ｓwitzerland供給)および他の植物原料(例えば、Ｄictionary of Ｓteroids、編集者：Ｈill，Ｋirk，Ｍakin & Ｍurphy、Ｃhapman & Ｈall出版、第１版、１９９１、２１８−２２２頁および５３６頁参照)から入手可能である。ダンマラ化合物は、また、例えば、天然発生ダンマレンの好適な誘導体化および修飾により、合成的に製造し得る。１７α−および１７β−ダンマラ化合物に一般に適用できるスキームを下記に図式的に示す。上記スキームにおいて、工程５以降は、１７α−エピマーに関するものを示す。これらの工程は、もちろん１７β−エピマーに関しても適用できる。工程１はヒドロキシ保護基Ｙの挿入から成る。Ｙは、続く反応工程に適合可能な、例えば安定なヒドロキシ保護基であり得る。好適なＹは、シリルヒドロキシ保護基、例えばトリ(Ｃ_1-4アルキル)シリル、例えば、ｔ−ブチルジメチルシリルである。ヒドロキシ保護基Ｙは、当分野の既知の実施されている方法、例えば、イミダゾール中のIIとＴＢＤＭＳＣ(ｔ−ブチルジメチルシリルクロライド)の反応で挿入し得る。化合物IIIは、工程２から４を経由したエピマー化の対象である。工程２は、アシルまたはシリル保護基Ｗの挿入から成る。好適なアシルまたはシリル保護基は、例えば、リチウム有機化合物またはアルキルグリニヤード試薬を使用したエノール開裂に感受性の当分野で既知のものであり得る。簡便には、Ｗは、ｐ−トルエンスルホン酸の存在下、IIIと無水酢酸の反応により挿入される、アシル基、例えばアセチル基である。工程３は、IVとリチウム有機化合物、例えばメチルリチウムまたはグリニヤード試薬の反応から成り、対応する金属エノレートを得、ＶのＭは好適にはマグネシウム、または好ましくはリチウムである。工程４は、Ｖのプロトン化から成り、ジアステレオマー混合物III＋VIを産生する。反応は、好適なプロトン化試薬、例えばアルキルアンモニウムクロライドまたはサリチル酸メチルを使用して行い得る。認識されるように、パラメーター、例えばプロトン化試薬および反応条件の選択を変えることにより、工程４は、例えばエピマーVIの製造に好適に変化し得る。工程４で得たジアステレオマー混合物は、好適にはスキームＡに示唆するように工程４に続きクロマトグラフィーで分離する。工程５は、VIのトリフラート化から成り、VIIのＴｆはＣＦ₃−ＳＯ₂−である。トリフラート化は、VIとＫＨＭＤＳＡ(カリウムヘキサメチルジシラザン)およびＰｈＮＴｆ₂[Ｎ−フェニル−ビス(トリフルオロメタンスルホンイミド)]の反応により好適に行われる。工程６は、VIIと金属有機硫酸、例えばトリアルキルスズクプレート、例えばトリブチルスズクプレートとの反応から成り、VIIのＺ₁は、例えばトリブチルスズを示す。トリブチルスズクプレートは、それ自体、例えば以下に添付の実施例２の記載のように好適に製造される。工程７は、例えばＰｄ(ＣＨ₃ＣＮ)₂Ｃｌ₂存在下での、VIIと好適な求電子のスティル(Stille)結合から成る。スキームＡにおいて、求電子は式Ｉの特異的最終生産物を提供するように選択する。工程８は、ヒドロキシ保護基Ｙを除去するためのIXの脱保護から成る。脱保護は、当分野で既知および通常使用されている手段、例えばＢｕ₄ＮＦ(テトラブチルアンモニウムフロリド)との処理によるシリル保護基の除去により行い得る。当業者には認識されるように、上記反応スキームは、特に二者択一で１７α− および／または１７β−ダンマラ化合物の製造に適合することを条件とし得る。従って、最終生産物の１７位の置換基の的確な性質は、工程７で使用する求電子の好適な選択または最初に得た１７位置換基の続く修飾により、所望のように変化し得る。更に、ダンマラ化合物は、例えば、(例えば対応するケト化合物を得るための)３−ヒドロキシ基の修飾または、例えば１７位のアセチル基が別のアシル基または反応性官能相同物に代わっているもしくは３位がオキソ置換され、例えばエピマー化および求電子置換の進行のためにオキソ基を保護種、例えば非反応性官能相同物に転移した、出発物質IIの選択により得られ得る。ジアステレオマー生産物を、例えば、工程４よりむしろ７の完了後、分離し得、１７β−エピマーをIIから出発して製造し得、直接に工程５から先へ進行する。下記に示す別のスキームＢにより、スキームＡの工程４の生産物を、シャピロ (Ｓhapiro)結合工程を経由した求電子置換に付し得る。工程９は、IIIまたはIVまたはそれらの混合物とトリスヒドラジン塩酸塩の反応から成る。反応を１７α−ダンマラ化合物およびその合成に適用した場合、緩和な酸性条件下、例えば緩衝剤の存在下に行うのが好ましい。工程９に続いて、工程１０において、Ｘａ／Ｘｂとアルカリ金属有機化合物、例えばアルカリリチウム化合物、例えばブチルリチウムとの反応がなされ、Ｚ₂がアルカリ金属、例えばリチウム原子であるXIａ／XIｂを産生する。XIａ／XIｂは、前記スキームＡで述べた工程７および８と同様に、最初にＣｕＣＮと反応し、Ｚ₂を銅／アルカリ金属(例えば、銅／リチウム)錯体形に変換し、続いて選択した求電子と反応させ、脱保護して更に処理する。例えば、スキームＡで前記したような、上記工程の変形が、特に、最終産物の１７位に別の置換基を導入する工程１０における別の求電子の使用により、および別の出発物質の選択により、もちろん可能である。前記から認識されるように、本発明は、１７αＣ−および１７βＣ−ダンマラ化合物を含む１７Ｃ−ダンマラ化合物の新規製造法を提供するものであり、それは、広い適用において、必要により保護形の１７カルボニル−ダンマラ化合物、例えば１７アシル−ダンマラ化合物と求電子、例えば好適なエチレニックペルオキシドとの反応および所望により保護基または官能基の除去を含み、例えば、式 XII で示される化合物を、求電子Ｒ₃−Ｈ〔式中、ａ'は保護形の＞ＣＨ−ＯＨまたは＞Ｃ＝ＯおよびＲ₂およびＲ₃は、Ｒ₂ およびＲ₃の炭素原子の合計が１７位の所望の置換基の全炭素原子数と同じに成るようなヒドロカルビル残基である〕と結合させ、保護基または官能基を除去し、必要な場合、得られた生産物を好適な酸でアシル化し、上記の式ＩＡで示される化合物を得ることを含む。結合は、反応スキームＡおよびＢの工程により、好適な手段で行い得るが、１７(有機金属−Ｃ)−ダンマラ化合物(すなわち、１７位に直接結合している１７Ｃ−置換基の炭素原子が有機金属基、例えばトリアルキルスズ基で置換されている１７Ｃ− ダンマラ化合物、スキームＡの化合物VIII参照)または１７(アルカリ金属−Ｃ) −ダンマラ化合物(すなわち、１７位に直接結合している１７−置換基がアルカリ金属、例えばチリウム原子で置換されている、スキームＢのXIａおよびXIｂ参照)、例えば、式XIII 〔式中、ａ'は、式XIIで定義の意味およびＺはアルカリ金属原子または有機金属基〕で示される反応性中間体を経由する。好ましくは、ＺはＬｉまたはトリ−Ｃ_1-4 アルキル−スズである。反応性中間体は、それ自体結合工程中に製造し得るか、または結合工程中に一時的にのみ形成し得る。１７β−カルボニル−ダンマラ化合物、スキームＡの例えば式IIで示される化合物は既知である[例えば、Ｐhytochemistry 26，(12)，3365(1987)およびＴetr ahedron 29，2105(1973)参照]か、または既知の化合物と同様に、あるいはその誘導体化により製造される。１７α−カルボニル−ダンマラ化合物、例えば、スキームＡ、式IVで示される化合物は新規である。更に認識されるように、本発明はまた必要により保護形である対応する１７β −カルボニル−ダンマラ化合物をエピマー化し、所望により保護基または官能基を除去することを含む、例えば式XIIａ〔式中、ａ'およびＲ₂は式XIIで定義の意味〕をエピマー化し、所望により保護基または官能基を除去し、式XIIｂ〔式中、ａ"は遊離形または保護形の＞ＣＨ−ＯＨまたは＞Ｃ＝ＯおよびＲ₂は式 XIIで定義の意味〕で示される化合物を産生することを含む、工程も提供する。エピマー化を行う具体的方法は、スキームＡの工程１から４で、工程８の一般的方法で任意の脱保護と共に記載した。既に言及しているように、例えば、式XIIｂおよびVIの１７αカルボニル−ダンマラ化合物は新規である。１７位の置換基がそれぞれ式IV、Ｖ、VIIからIX、Ｘａ／ｂおよびXIａ／ｂで示すようなものである１７αＣ−ダンマラ化合物もまた新規である。それらは中間体として有用であり、本発明の範囲内であるとまた理解されるべきである。これらの化合物で、１７αカルボニル−ダンマラ化合物は、特に中間体として、特に興味深い。したがって、更なるおよび具体的態様において本発明は：ｄ）１７αカルボニル−ダンマラ化合物を提供する。好ましいダンマラ化合物ｄ）は、１７αアシル−ダンマラ化合物、例えば式XI Iｂの化合物、例えば、例えば式VIで示される化合物により代表される、１７α アセチル−ダンマラ化合物である。１７βおよび特に１７α−(有機金属−Ｃ)−および(アルカリ金属−Ｃ)−ダンマラ化合物の両方を含む１７(有機金属−Ｃ)−および１７(アルカリ金属−Ｃ)− ダンマラ化合物はまた特に中間体として特に興味深い。したがって、更に別のおよび具体的態様において本発明は：ｅ）１７(有機金属−Ｃ)−および１７(アルカリ金属−Ｃ)−ダンマラ化合物を提供する。好ましい化合物ｅ）は、式XIIIで例示されているような１７(１−有機金属− ビニレン)−および１７(１−アルカリ金属−ビニレン)−ダンマラ化合物、例えば、例えば式VIII、XIａおよびXIｂに例示されているような１７(１−有機金属 −ビニル)−および１７(１−アルカリ金属−ビニル)−ダンマラ化合物である。好適な有機金属基およびアルカリ金属原子は、前記のようなものであり、１７ (リチウム−Ｃ)−、例えば１７(１−リチウム−ビニレン)−、例えば１７(１− リチウム−ビニル)−ダンマラ化合物が特に興味深い。それらから得られる最終生産物の優秀さの点から、ｅ）で定義の１７α−ダンマラ化合物が好ましい。本発明の範囲内の１７αカルボニル−、１７(有機金属−Ｃ)−および１７(アルカリ金属−Ｃ)−ダンマラ化合物ｄ）およびｅ）の具体的なグループは、一般に、例えば、遊離形または保護形のいずれかの１７α−カルボニル、１７−(有機金属−Ｃ)−および１７(アルカリ金属−Ｃ)−ダンマル−３−オールおよび− ダンマル−３−オンならびに１７αカルボニル,βＨ−および１７α,１２βＨ− ダンマラ化合物等を含む１７α−ダンマラ化合物に関して前記で定義されたものを含む。上記の方法から認められるように、１７(有機金属−Ｃ)−ダンマラ化合物は、例えば、１７カルボニル−ダンマラ化合物をトリフラート化し、１７(トリフルオロメチルスルフェート−Ｃ)−ダンマラ化合物を得、これを有機金属クプレートと反応させ、それにより出発物質を好適に保護し、続いて任意の脱保護、例えば保護基または官能基の除去により製造し得る。例えば、式XIIの化合物を前記のようにトリフラート化(例えば、スキームＡ、工程５で前記のように)し、所望により、例えば保護基または官能基の除去により生産物を脱保護して、式XIIIa 〔式中、ａ"は式XIIｂでの定義と同じ意味およびＺは有機金属基、例えばトリアルキルスズ、例えばトリブチルスズ基〕で示される化合物を得る。１７(アルキル金属−Ｃ)−ダンマラ化合物は、１７−カルボニル−ダンマラ化合物をトリスヒドラジンＨＣｌと反応させ、得られた生産物をアルカリ金属有機化合物、例えばブチルリチウムと反応させ、それにより出発物質を好適に保護し、続いて、所望により脱保護、例えば保護基または官能基の除去により製造し得る。例えば、前記で定義の、例えばＲ₂−ＣＯ−がアシル、例えばＣ_1-4アシル、例えばアセチル基である式XIIで示される化合物をトリスヒドラジンＨＣｌと反応させ、得られた生産物をアルカリ金属有機化合物、例えば、前記のものと反応させ、所望により生産物を脱保護、例えば保護金属または官能基を除去し、上記に図説したような式XIIIａ(ここで、ａ"は式XIIｂでの定義の同じ意味およびＺはアルカリ金属、例えばリチウム原子)で示される化合物を得る。認識されるように、本発明の薬学的使用のためのダンマラ化合物は、例えば、処置すべき疾病または状態に関して、特に生理学的に耐性または薬学的に許容可能、例えば投与すべき量で無毒かまたは実質的に無毒で、投与すべき量で許容可能な毒性レベルを有するものでなければならない。薬学的使用のためのダンマラ化合物の好適な使用は、薬学の分野で既知で通常使用されている技術を使用して行い得る。ダンマラ化合物、特に前記の１７α−ダンマラ化合物、例えば式Ｉ、ＩＡ、ＩＢ、ＩＣで示される化合物は、下記の試験法で証明されるような薬学的実用性を有する。１．同種異系刺激に対するリンパ球の増殖応答二路ＭＬＲ(マウス混合リンパ球反応)：Ｂalb/cマウス(雌、８−１０週)の脾細胞(０.５×１０⁶)を５日間、ＣＢＡマウス(雌、８−１０週)の脾細胞０.５×１０⁶と共にインキュベートする。同種異系細胞は応答者脾臓細胞集団において増殖応答を誘発し、ＤＮＡへの標識前駆体取り込みにより測定する。試験化合物を種々の濃度でインキュベーションの開始時に添加し、未処理対照と増殖応答を比較する。ダンマラ化合物は、典型的に、 (シクロスポリンＡの約２nＭのＩＣ₅₀と比較して)約１００から約１０nＭまたはそれ以下のＩＣ₅₀を有する。参考：Ｔ．Ｍeo(1979)Ｔhe MLR in the mouse：“Ｉmmunological Ｍethods”，Ｌ．ＬefkovitsおよびＢ．Ｐernis編、Ａcademic Ｐress，ＮＹ，pp.227-239 ２．形質転換ヒトＴ−細胞系(Ｊurkat)を使用した細胞毒性および細胞増殖の抑制活性Ｊurkat細胞５×１０⁴を最終量０.２ml中で７２時間成育させ、その後、細胞数をｐ−ニトロフェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニドを基質として使用した酵素検定を使用して数える。試験化合物を、培養の開始時に種々の濃度で添加し、細胞毒性を未処理対照と比較する。ダンマラ化合物は、５μＭまでの濃度で非活性であり、免疫抑制活性が特異的であることを示唆する。３．Ｐ−８１５肥満細胞腫細胞系を使用したin vitro細胞毒性および細胞増殖の抑制活性Ｃostar９６−ウェルプレートを溶媒(１００μl／ウェル)で満たし、試験すべき化合物を２５μlのアリコートで最上列に添加し、混合し、各ウェルについて２５μlアリコートを除去し、すぐ下の対応する列に添加する。培地添加、混合および２５μlのすぐ下の層への移動をプレートの一番下に到達するまで繰り返す。最後の２５μlを廃棄する。次いで、細胞懸濁液(Ｐ−８１５肥満細胞腫瘍細胞、３０,０００細胞／ウェル)１００μlを各ウェルに添加し、インキュベーションを４８時間、３７℃で＋５−７％ＣＯ₂の湿った雰囲気中で行う。細胞増殖を細胞カウンターまたは酵素色素計測検定を使用して評価する：プレートを１０分、３０００rpm(ＥＣＣentra−７Ｒ)で遠心する。上清を注意深く捨て、細胞を一回ＰＢＳ(Ｄulbecco、カルシウムおよびマグネシウム無し)で洗浄し、０.５％トリトン−Ｘ１００溶液(水９９.５ml中にトリトンＸ−１０００.５mｌ) ５０μl／ウェルを添加し、プレートを室温で５−１０分良く振る。基質(ｐ−ニトロフェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニド、５０μl／ウェル)をインキュベーションの６０分前に３７℃で添加する。次いで、緩衝液２１５０μ lを添加し、プレートを４０５nmで読む。試験化合物を、インキュベーションの開始時に種々の濃度で添加し、細胞増殖を未処理対照と比較する。ダンマラ化合物は、５μＭまでの濃度で増殖に影響を及ぼさず、免疫抑制活性が特異的であることを示唆する。参考：Ｈ．Ｓtaehelin(1962)Ａ simple quantitative test for cytostatic age nts using non-adhering cells in vitro．Ｍed．exp．7:92-102 ４．ラットにおける局所移植片対宿主(ＧｖＨ)反応 [Ｆord et al.，TRANSPL．PROC．10(1979)258] ６週令の雌Ｗister／Ｆurth(ＷＦ)ラットの脾臓細胞(１×１０⁷)を、体重約１００ｇの雌(Ｆ３４４×ＷＦ)Ｆ₁ラットの左後足に皮下注射する。動物を連続４日間処理し、７日目に膝窩リンパ節を除去し秤量する。２つの膝窩リンパ節の間の重量の差を反応評価のパラメーターとして取る。化合物を４日目に種々の量で p.o.で投与し、未処理対照と阻害を比較する。ダンマラ化合物は、１０μgから１０mg／kg／日p.o.の範囲で活性である(ＧｖＨ反応を阻害)。１７α−ダンマラ化合物(例えば、式ＩＣで示される化合物)は、対応する１７β−エピマーより約１００×まで活性であることが判明した。５．ラットにおける腎臓同種移植片反応雌Ｆisherラット由来の１つの腎臓を片側腎臓(左側)腎摘出ＷＦ受容ラットの腎臓血管に、端々吻合を使用して移植する。尿道吻合もまた端々である。種々の濃度のp.o.での処置は、移植の日に開始し、１４日まで続ける。反対側の腎摘出を移植後７日に行い、受容者が、供給者の腎臓の性能のみ頼るようにする。対照と比較した移植片の生存を機能移植片のパラメーターとして取る。ダンマラ化合物は、本試験モデルで、１０μgから１０mg／kg／日p.o.の範囲で移植片生存を延長する。１７α−ダンマラ化合物は、１７β−ダンマラ化合物より実質的により有効(約１００から１０００×まで)であることが判明した。６．ラットにおける実験的誘発アレルギー性脳脊髄炎(ＥＡＥ) [Ｌevine et al.，AM．J．PATH．47(1965)61；ＭcＦarlin et al.，J．IMMUNOL ．113(1974)712；Borel，TRANSPLANT&CLIN．IMMUNOL．13(1981)3] 雄ウィスターラットの後足に、ウシ脊髄および完全フロインドアジュバントの混合物を注射する。疾病の症状(尾および両後足の麻痺)は通常１６日以内に発症する。疾病の動物数および疾病の発症時間を記録する。試験化合物を種々の用量で、感作時から開始して１２日間投与する。ダンマラ化合物は、本試験モデルで疾病の発症を１０μgから１０mg／kg／日p.o.の範囲で阻害する。１７α−ダンマラ化合物は、１７β−ダンマラ化合物より実質的により有効(約１００から１０００×)であることが判明した。７．フロインドアジュバント−誘発関節炎 [Ｗinter＆Ｎuss，ARTHRITIS AND RHEUMATISM 9(1966)394；Ｂillingham＆Ｄavi es，HANDBOOK OF EXPERIMENTAL PHARMACOL(Ｖane＆Ｆerreira編，Ｓpringer Ｖe rlag，Ｂerlin)50/II，(1979)108-144] ＯＦＡおよびウィスターラット(雄または雌、体重１５０ｇ)に、尾の付け根または後足に、凍結乾燥加熱殺菌恥垢菌(Mycobacterium smegmatis)０.６mg含有鉱物油０.１mlをi.c.注射する。関節炎モデルの発展において、試験化合物での処置をアジュバント注射直後に開始する(１−１８日)；確立された関節炎モデルにおいて、処置を二次炎症が十分発症した(１４−２０日)場合の１４日目に開始する。実験の最後、関節の腫張をマイクロカリパーの手段で測定する。ダンマル化合物は、開発したまたは確立された試験モデルで疾病の発症を一日量１０μgから１０mg／kgの範囲で阻害する。１７α−ダンマラ化合物は、１７β−ダンマラ化合物より実質的により有効であることが判明した。８．ヒツジ赤血球細胞に対する一次液性免疫応答(ＭＤ，Ｍishell-Ｄutton) マウス脾細胞(ＯＦＩ、雌、８−１０週令、１×１０⁷)をヒツジ赤血球(ＳＲＢＣ、３×１０⁷)と、３日間、２４ウェルプレート中で最終量１mlで共培養する。リンパ球を回収し、洗浄し、１×１０⁶細胞の密度で柔寒天に、新鮮抗原(ＳＲＢＣ)と共に平板培養する。補体(モルモット血清)を６０−９０分のインキュベーション期間の後に添加し、更に６０分インキュベーションを続け、その後、プラークを計数(顕微鏡)することにより本試験を評価する。３日間のインキュベーション中、リンパ球を抗原(ＳＲＢＣ)に対して感受性にする。再び抗原と共にインキュベートした場合、Ｂ−リンパ球が特異的抗体を分泌し、それは分泌性リンパ球の付近で抗原に結合する。補体の添加は、プラークを形成する抗体被覆赤血球の融解をもたらす。各プラークは単一抗体産生細胞を示す。試験化合物を種々の濃度でインキュベーションの最初に添加する。ダンマラ化合物は、本試験モデルで、プラーク形成を１０から１００nＭの範囲の濃度で阻害する。参考：Ｒ.Ｉ．Ｍishell＆Ｒ.Ｗ．Ｄutton(1966)Ｉmmunization of normal mouse spleen cell suspensions in vitro．Sience 153:1004-1006；およびR.I．Ｍis hell＆Ｒ.Ｗ．Ｄutton(1967)Ｉmmunization of dissociated spleen cell cultu res from normal mice．Ｊ．Ｅxp．Ｍed．126:423-442。９．ＳＲＢＣ−Ｔ_H細胞誘発ＤＴＨ(遅延型過敏症) Ｔ_H(ヒツジ赤血球細胞感作)細胞クローン(２×１０⁶)および１０％ヒツジ赤血球細胞(ＳＲＢＣ)の１：１(ｖ／ｖ)混合物５０マイクロリットルの懸濁液を、雌 C57 BL/6マウス(６−１２週令)の右後足にs.c.注射する。ＳＲＢＣ細胞懸濁液( ＰＢＳで１：１希釈)５０μlを左後足にs.c.注射する(注射のための足腫張の非特異的増加を測定するため)。右および左足の厚さを２４時間後に測定する。試験化合物を、種々の投与量のp.o.攻撃前２４時間および２時間に投与する。実験の最後に、左後足に対する右後足の厚さの増加割合を計算する[右後足の厚さ＝ｘ；左後足の厚さ＝ｙ；特異的増加％＝ｚ：ｚ＝((ｘ−ｙ)／ｙ).１００]。１７ α−ダンマラ化合物は、本試験モデルでＤＴＨ反応を１から１００μg／kg p.o .の投与量の範囲で阻害する。１７β−ダンマラ化合物は、ＤＴＨ反応を１から１００mg／kgの投与量の範囲で阻害する。参考：Ａ.Ｔ.Ｊ．Ｂianchi，Ｈ．Ｈoouijkaas，Ｒ．Ｔees，ＡＡ．Ｎordin＆Ｍ. Ｈ．Ｓchreier(1981)Ｃlones of helper Ｔ-cells mediate antigen specific，Ｈ-2 restricted ＤＴＨ．Ｎature 290:62-63；およびＰ．Ｈerrmann，Ｍ.Ｈ．Ｓchreier，Ｊ-Ｆ．Ｂorel＆Ｃ．Ｆeurer(1988)Ｍast cell degranulation as a majour event in the effector phase of delayed-type hypersensitivity indu ced by cloned helper Ｔ-cells．Ｉnt．Ａrchs Ａllergy appl．Ｉmmun．86:10 2-10。１０．マウス(ＮＺＢ／ＮＺＷ)における全身性エリテマトーデス(ＳＬＥ) 雌ニュージーランドブラック／ホワイト(ＮＺＢ／ＮＺＷ)Ｆ１マウスは、全身性エリテマトーデスに類似した特性を本質的に発症する。２から３カ月目に抗核抗体を発生し、５から６カ月目に全身性免疫性腎炎およびタンパク尿を発症し、８−９カ月令で慢性腎不全へと予測できるコースを取る。動物がタンパク尿を示した場合、処置を２４週令で開始する。化合物を全１２週間、１週間に３回、p. o.投与する。状態を２週間毎に測定し、動物を実験の最後に組織学的評価に付する。１０匹のマウスを一群当たりに使用する。１７α−ダンマラ化合物は、上記試験モデルで、２日毎に５から１００μg／kg p.o.の投与で疾病の発症の予防に活性である。１７β−ダンマラ化合物は、２日毎に１から１００mg／kg p.o. の投与で同様に活性である。参考：Ｂ.Ｓ．Ａndrews，Ｒ.Ａ．Ｅisenberg，Ａ.Ｎ．Ｔheofilopoulos，Ｓ．Ｉ zui，Ｃ.Ｂ．Ｗilson，Ｐ.Ｊ．Ｍc Ｊ.Ｂ．Ｒoth＆Ｆ.Ｊ．Ｄixon(1978)Ｓponta neous murine lupus-like syndroms：clinical a manifestatation in several strains．Ｊ．Ｅxp．Ｍed．148:1198。前記のようなダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物、例えば、式Ｉ、ＩＡ、ＩＢまたはＩＣで示される化合物は、従って、薬剤として、例えば免疫抑制剤および抗炎症剤として有用である。免疫抑制剤として、それらは、特に、急性および／または慢性臓器または組織移植拒絶反応の予防に、例えば、心臓、肺、複合心臓−肺、肝臓、腎臓、膵臓、皮膚または角膜移植片の受容者の処置に有用である。それらはまた、骨髄移植に続くような移植片対宿主病の処置もまた示唆される。免疫抑制剤および抗炎症剤として、それらはまた自己免疫疾患および炎症状態、特に、関節炎(例えば、関節リューマチ、慢性進行性関節炎および変形性関節炎)およびリウマチ疾患のような自己免疫要素を含む病因の炎症状態の処置に有用である。ダンマラ化合物を使用し得る具体的な自己免疫疾患は、自己免疫血液疾患(例えば、溶血性貧血、無形成性貧血、赤芽球癆および突発性血小板減少症を含む)、全身性エリテマトーデス、ポリコンドリティス(polychondritis)、スクレロドーマ(sclerodoma)、ウェゲナー肉腫、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、乾癬、スティーブン・ジョンソン症候群、突発性スプルー、自己免疫炎症性腸疾患(例えば、大腸潰瘍およびクローン病を含む)、内分泌性眼病、グレーブス病、サルコイドーシス、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、若年性糖尿病(Ｉ型糖尿病)、ぶどう膜炎(前部および後部)、乾性角結膜炎および春季角結膜炎、間質性肺線維症(interstitial lung fibrosis)、乾癬性関節炎および糸球体腎炎(例えば、突発性ネフローゼ症候群または微小変化ネフローゼ症候群を含むネフローゼ症候群ありまたはなし)を含む。前記のようなダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物は、無毛の処置／育毛の促進への使用および例えば吸入投与による喘息の処置もまた示唆される。前記のようなダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物は、コルチコステロイドを使用し得る病気への使用もまた示唆される。上記の示唆について、好適な用量は、もちろん、例えば処置すべき患者、投与経路および処置すべき病気の性質および重症度および所望の効果に依存して変化する。しかしながら、一般に、動物において十分な結果が、約０.００１から１０mg／kg／日p.o.の一日投与量で得られる。大型哺乳類、例えばヒトにおいて、示唆される一日量は、経口投与で一日一回または好適には２から４回／日に分割した用量で化合物約０.０５から約５００mgの範囲であり、１７α−ダンマラ化合物についての必要量はこの範囲の上の方であり、１７β−ダンマラ化合物については下の方である。ヒトの臓器移植において、示唆される投与量レジメは、０.０５−１０mg／kg 化合物の手術前４−１２時間の最初の一回経口投与および手術後１−２週間の一日投与量としてこれを維持し、その後、血中濃度が約０.０２−２mg／kg／日の維持量が到達されるまで、徐々に減少することを含む。化合物を、例えば３個または４個の医薬治療の一部として他の免疫抑制剤と共に投与する場合、低投与量 (例えば、最初に０.０１mg／kg／日i.v.；０.０１−１mg／kg／日経口)を使用し得る。前記のようなダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物は、任意の慣用の経路、特に経腸的に、例えば飲用溶液、錠剤またはカプセルの形で経口または例えば、注射可能溶液または懸濁液の形で非経口で投与し得る。ある状態、例えば、肝臓移植の拒絶反応の予防のために、静脈内注射可能形態が望ましいが、通常、全身投与のために、経口投与形態が好ましい。本化合物は、また、例えば皮膚クリーム、ジェル等の製剤の形で、または接眼クリーム、ジェルまたは点眼製剤の形で目に投与する目的で、局所または経皮投与し得る。経口投与の好適な用量は、例えば、投与量当たり、０.０５から１０mgまたは１２.５mgの化合物を含む。前記のようなダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物の投与のための医薬組成物は、ガレヌス分野で既知のまたは慣用手段により、例えば、注射可能水を含む好適な薬学的に許容可能な希釈剤または担体との徹底的な混和により製造し得る。先に示唆したように、ダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物を含む医薬組成物は、純粋または実質的に純粋な形、例えば、純粋または実質的に純粋な単一エピマーの形のダンマラ化合物を好適には含み得る。上記に従い、本発明はまた：ｆ）前記のようなダンマラ化合物、例えば１７α−ダンマラ化合物、例えば式Ｉ、ＩＡ、ＩＢまたはＩＣで示される化合物を薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共に含む医薬組成物を提供する。本発明を、添付の図面を参考にした以下の実施例により、説明のみの方法で更に記載する：その中で図１は、オウギヤシ粉末抽出物のサンプルおよび対照サンプルで行った遅延型過敏症(ＤＴＨ)試験の結果を示すグラフである；図２は実施例１で単離した化合物のプロトンＮＭＲスペクトル、および図３は実施例１で単離した化合物の¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルである。実施例実施例１式ＩＣで示される化合物の単離および特徴付予備研究 −オウギヤシ新芽粉末(ボラッサス・フラベリファー・エル)１０ｇの４つのアリコートをそれぞれ以下の溶媒で抽出し、好適な抽出工程を同定する。 −酢酸エチル(Ａ) −石油エーテル(Ｂ) −メタノール(Ｃ) −水(Ｄ) −６００ｇの１つのアリコートをソックスレーおよびヘキサン(沸点６０−７０ ℃)を使用して１６時間抽出し、続いてジクロロメタンを１６時間沸騰させる。この工程は、真空蒸発後、ヘキサン抽出物(Ｅ)１.１６３９ｇおよびジクロロメタン抽出物(Ｆ)０.３３５ｇを産生する。フラクションをエタノールに溶解し、Ｍishell-Ｄutton検定(ＳＲＢＣに対するインビトロ一次液性免疫応答)、混合リンパ球反応(ＭＬＲ)および細胞毒性のためのＰ−８１５肥満細胞腫細胞系で試験する。実験抽出物の結果：抽出物Ａ、ＢおよびＥはインビトロ活性化リンパ球において阻害活性を示し( 前記のＭＤ試験８)、抽出物Ａ）が最も活性である(１：４０００希釈より低い濃度でほぼＩＣ₅₀に近付く)。最も活性が低いのは抽出物Ｅである(約１：２００希釈でＩＣ₅₀)。Ｐ−８１５肥満細胞腫(前記の試験３)で最も毒性が低いのは抽出物Ｂである。しかしながら、最も良い活性対毒性比は抽出物Ａ）で見られ、混合リンパ球反応において最も活性である(前記試験１)。得られた結果は下記表１、２および３に示す。種々の抽出物をまたインビボ遅延型過敏症反応について評価し(前記試験９)、どの抽出物を大規模抽出に使用すべきかを決定するための更なる情報を得る。この目的において、同じアリコート(１０ｇ粉末からの抽出物)を抗原投与１時間前に１回５匹のマウスに経口投与する。反応を抗原注射後２４時間に読む。シクロスポリンＡを陽性対照として使用する。結果を図１に示す。抽出物Ａ／Ｂ(組み合わせた抽出物ＡとＢ)のみがインビボで明白な阻害活性を示す。抽出物Ａ(酢酸エチル)がインビボロおよびインビボで最も見込みある効果を示し、大規模抽出用に選択する。式ＩＣで示される化合物の単離および抽出オウギヤシ粉末(ボラッサス・フラバリファー・エル)５０kgを５×１０kgに分割し、それぞれ酢酸エチル２０ｌで室温で抽出し、１時間後濾過する。この工程を酢酸エチル１５ｌで繰り返す。合わせた濾液(１７５ｌ)を真空で濃縮し、９５ .５ｇの茶色油状残渣にし、それを次いで９０％水性メタノール(５００ml)およびヘキサン(１ｌ)の溶媒系で３×分配し、下の層から真空蒸発後粗固体１９.８ｇを得る。これをシリカゲル６０約２kgを含む８×３５cmのカラムにかけ、メチル−tert−ブチルエーテル／メタノールの混合物で、メタノールの含量を段階的に２％から５０％に上げてクロマトグラフィーを行う。主にＭＬＲ試験で活性の３つのフラクション番号１、２、３(各４５０ml)を回収する。フラクション番号２および３(１.９２ｇ)を更に５.５×３６cmシリカゲルカラムにかけ、それをヘキサン／アセトン混合物で、後者の含量を２０％から５０％に段階的に上げて溶出する。ＴＬＣおよび生物活性により同定されたこのカラム由来の２２フラクション(１.１９ｇ)を、先のクロマトグラフィー工程由来の残りのＭＬＲ活性フラクション番号１(０.２８ｇ)と合わせる。次ぎの精製工程を、Ｓephadex LH-20カラム(５×８５cm)でジクロロメタン／メタノール(１：１) 溶出および２２０nmのＵＶ追跡で行い、６つの生物活性フラクションを得、それは生産物８０９mgを産生する。この生産物を更にSpherisorb ODS-2 RP18(５μm) の２０×２５０mmカラムの分取ＨＰＬＣに３等量でかけて処理する。水中のアセトニトリル／メチル−tert.ブチル−エーテル(９：１)の直線(７０％→１００％ ) 勾配を使用し、フラクションを２２０nmのＵＶ追跡を使用して回収する。６つのＭＬＲ活性フラクション(３２mg)を回収し、上記と同じＨＰＬＣカラムで分離するが、メタノール／水／メチル−tert.ブチル−エーテル(７：２：１) のアイソクラティック混合物で溶出し、２２０nmで検出し、全９.３mgの７つの活性フラクションを得る。この工程を同じＨＰＬＣでアイソクラティックアセトニトリル／水(８７：１３)溶出で繰り返し、２２０nmで追跡する。４つの活性フラクション(１.３mg)を検出する。１００μgのアリコートを最後にＬiＣhrosphe r RP18(５μm)の４×２５０mm ＨＰＬＣカラムで１.５ml／分のアセトニトリル溶出分離する。フラクションを、同時に２２０および２４０nmの二極整列ＵＶ検出を基にして取る。ＭＬＲ活性は、幾つかの波長の単一および純粋ＨＰＬＣピークおよび約１１.６分の保持時間のフラクションに存在することが示される。前工程の残る活性(１.１mg)を１００μgの１ｌアリコートで同様に処理し、単一純粋ピークのフラクションは、回収および濃縮後、白色無定型化合物０.５mgを提供する。この化合物の性質および物理的特性は、下記表４に示す。マウス混合リンパ球反応(ＭＬＲ)、試験１ならびにＪurkatおよびＰ−８１５細胞毒性／細胞増殖抑制活性、試験３における単離化合物の活性を測定し、同じ検定のシクロスポリンＡおよびシリシコリン(silicicolin)の活性と比較する。結果を下記表５に示す。実施例２( １７α)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール( 式ＩＣで示される化合物)の製造ａ）スキームＡ、工程１３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−１７α−アセチル−ヘキサノール−ダンマランジメチルホルムアミド４５０mL中のＡ(Ｐhytochemistry、前掲)１２.０ｇおよびイミダゾール１３.６ｇの溶液をアルゴン下ｔ.−ブチルジメチルクロロシラン２５.０ｇで処理する。反応混合物を一晩室温で撹拌し、ジエチルエーテルで希釈し、水性５％炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下で除去する。シリカでのクロマトグラフイー( ヘキサン／酢酸エチル)により、標題化合物Ｂが白色泡状物として得られる。Ｒ_f(シリカ)：０.５３(ヘキサン／酢酸エチル９：１)¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)特徴的信号：３.１５(１Ｈ,dd,Ｊ=5/12,Ｈ−Ｃ(３))，２.６５−２.４５(１Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(１７)),２.１０(３Ｈ,ｓ,Ｈ₃ＣＣＯ)。ｂ）スキームＡ、工程２３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−１７−アセチル−ヘキサノール−ダンマラン−エノールアセテート無水酢酸２００mＬ中のｐ−トルエンスルホン酸１.０ｇの溶液を１４０℃で３０分加熱する。室温でＢ３.０ｇを添加し、反応混合物を３時間、１４０℃で加熱する。反応期間中に酢酸をゆっくり蒸留する。反応混合物を減圧下約１００m Ｌに濃縮し、ジエチルエーテルで希釈し、冷水性５％炭酸水素ナトリウムで抽出する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下除去する。シリカでのフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン／酢酸エチル、９５：５)により、白色固体として標題化合物Ｃを得る(二つのジアステレオマーエノールアセテートの混合物)。Ｒ_f(シリカ)：０.４１(ヘキサン／酢酸エチル、９５：５)¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)特徴的信号：３.１５(１Ｈ,dd,Ｊ＝5/12,Ｈ−Ｃ(３))，２.５０−２.００(３Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(１３),Ｈ₂−Ｃ(１６)),２.０７および２.０６(３Ｈ,ｓ,ジアステレオマーＨ₃ＣＣＯＯ)。ｃ）スキームＡ、工程３＋４３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−１７β−アセチル−ヘキサノール−ダンマラン無水ジエチルエーテル１０mL中のＣ４４５mgの溶液をアルゴン下メチルリチウムの１.６Ｍエーテル溶液３.７５mＬで０℃で処理する。反応混合物を１時間０ ℃で撹拌し、−７８℃に冷却し、サリチル酸メチル１５０mgで処理する。反応混合物を３０分、−７８℃で撹拌し、水で処理し、エチルエーテルで処理する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下除去する。シリカでのクロマトグラフィー精製(ヘキサン／酢酸エチル、４：１)により、標題化合物Ｄが白色泡状物として得られる。Ｒ_f(シリカ)：０.３４アルファーケトン、０.２６ベータ−ケトン(ヘキサン／酢酸エチル、９５：５)¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)特徴的信号：３.１５(１Ｈ,dd,Ｊ＝5/12,Ｈ−Ｃ(３))、３.００−２.９４(１Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(１７)),２.１１(３Ｈ,ｓ,Ｈ₃ＣＣＯ)。ｄ)スキームＡ、工程５３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−２０−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−１７α−ヘキサノール−ダンマル−２０−エンビス(トリメチルシリル)アミドカリウム(トルエン中１５％)４.０mＬの溶液を、ＴＨＦ(テトラヒドロフラン)２５mＬ中Ｄ(２３６mg)の溶液に−７８℃でアルゴン下添加する。反応混合物を５℃に暖め、その温度で０.５時間撹拌し、次いで−３０℃に冷却し、その後ＴＨＦ１０mＬ中のＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド１.２５ｇを急速に添加する。反応混合物を０℃に暖め、０℃ で５分撹拌し、緩衝液ｐＨ７に注ぎ、３回エチルエーテルで抽出する。合わせたエーテル相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発乾固し、シリカクロマトグラフィー( エーテル／ヘキサン３：９７）で精製し、標題化合物Ｈ(２０３mg；６７％)を無色結晶として得る。¹ Ｈ−ＮＭＲ(３６０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)；特徴的信号：２.８５−２.９４(bq,１Ｈ,βＨ−Ｃ(１７))；３.２０(dd,１Ｈ,αＨ−Ｃ(３))；５.１２(bd,１Ｈ,Ｊ＝４,Ｈ_a-Ｃ(２１))；５.２０(ｄ,１Ｈ,Ｊ＝４Ｈｚ,Ｈ_b-Ｃ(２１))。ｅ)スキームＡ、工程６３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−２０−トリ−ｎ−ブチルスタニル−１７α−ヘキサノール−ダンマル−２０−エンｎ−ＢｕＬｉ(ヘキサン中１.６Ｎ)の溶液４４mＬを、−７８℃でアルゴン下、ＴＨＦ２００mL中のＣｕＣＮ３.１５ｇの懸濁液に添加する。−５０℃で１０分撹拌後、このようにして得た緑色溶液を、−７８℃で、ｎ−Ｂｕ₃ＳｎＨ１８.６ mＬで処理する。１０分後、ＴＨＦ３０mＬ中のビニルトリフラート２.１４ｇを添加し、反応混合物を−７８℃で１０分撹拌し、２５％水性ＮＨ₄Ｃｌ／ヘキサン(０.７５ｌ／０.５ｌ)に激しく撹拌しながら注ぎ、沈殿を濾過し、３回ヘキサンで抽出する。合わせた有機相をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、蒸発乾固し、シリカのクロマトグラフィー(ヘキサン)で精製し、標題化合物Ｊ(５３％)を無色粘性油状物として得る。¹ Ｈ−ＮＭＲ(３６０ＭＨｚ,ＣＤＣｌ₃)；特徴的信号：２.８２−２.８２(bq,１Ｈ,βＨ−Ｃ(１７))；３.１４(dd,１Ｈ,αＨ−Ｃ(３))；５.１８(bs,１Ｈ,Ｈ− Ｃ(２１))；５.８０(bs,１Ｈ,Ｈ−Ｃ(２１))。ｆ)スキームＡ、工程７３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−１７α−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０, ２３−ジエン−２５−オールＨ₂Ｏ０.３mＬ中のＰｄ(ＣＨ₃ＣＮ)₂Ｃｌ₂２４mgの溶液およびＤＭＦ１２m Ｌを、ＴＨＦ１２mＬ中の２,２−ジメチル−３−ビニロキシラン(Ｔetrahedron ，1989，45，979)０.４ｇおよびＪ１.３６ｇの溶液に室温で添加する。反応混合物を一晩室温で撹拌する。僅かに濁った黄色溶液を水に注ぎ、エチル−エーテルで抽出する。合わせた有機相をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、蒸発乾固し、標題化合物Ｋを黄色蝋状固体を得、それを更に精製することなく次工程に使用する。ｇ）スキームＡ、工程８ ( １７α)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０，２３−ジエン−３β,２５−ジオールＴＨＦ６０mL中のＫ１.４５ｇの溶液をテトラブチルアンモニウムフロリド(ＴＨＦ中１Ｍ溶液)１００mＬで６０℃で１.５時間処理する。反応混合物を１ｌの半飽和水性ＮａＨＣＯ₃溶液に注ぎ、エーテルで抽出する。合わせた有機相をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、蒸発乾固し、シリカでのクロマトグラフィー(アセトン／エーテル／ヘキサン；５／４０／５５)で精製し、ダンマラジエンジオールＬ(２段階にわたり８３％)６７０mgを無色結晶として得る。サンプルをエーテル／ヘキサンから再結晶する。Ｍ.ｐ.：９０.６−９１.４℃。[α]₅₈₉ ²⁵＝−７.４５℃。 [α]₃₀₂ ²⁵＝−１１９.２°。[α]₂₉₆ ²⁵＝−１０９.５°。[α]₂₈₀ ²⁵＝−３８.７ °；(ＥｔＯＨ、ｃ＝１.０６)。合成物質の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、オウギヤシ粉末(ボラッサス・フラベリファー・エル)から単離された天然化合物と同一である。実施例２' (１７β)−２３Ｅ−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール化合物が、化合物Ａから出発して、実施例２の工程ａ）およびｄ）からｇ）と同様に処理して、同様に製造し得る。本生産物の物理的データは、下記実施例３に記載する。実施例３ ( １７β)−２３Ｅ−ダンマラ−２０，２３−ジエン−３β,２５−ジオール(式ＩＣの化合物のβ−エピマー)の製造ａ）スキームＢ、工程９３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−１７β−アセチル−ヘキサノール−ダンマラン−トリシルヒドラゾンアセトニトリル５０mL中のＢ(実施例２ａのように製造)１.６ｇおよび２,４, ６−トリイソプロピルベンゼンスルホン酸ヒドラジド３.３ｇの懸濁液を濃ＨＣｌ１５０μＬで室温で処理する。懸濁液を３０分室温で撹拌し、エチルエーテルで希釈し、水性５％炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下除去する。シリカでのクロマトグラフィー(ヘキサン／酢酸エチル、４：１)により、標題化合物Ｅを無色無定形泡状物として得る( ｅ／ｚジアステレオマーの混合物)。Ｒ_f(シリカ)：０.６１(ヘキサン／酢酸エチル、４：１)¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)特徴的信号：７.２４および７.１２(３Ｈ,ｓ,Ｈ−Ｃ(芳香族)),４.２２−４.０８(２Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ−Ｃ(芳香族)),３.１５−３.０５(１Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(３)),２.９２−２.７８(１Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ−Ｃ(芳香族)),２.３５− ２.２２(１Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(１７)),１.６７(１Ｈ,ｓ,Ｈ₃ＣＣＮ)。ｂ）スキームＢ、工程１０＋７３β−ｔ.−ブチル−ジメチルシロキシ−１７β−２３(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−２５−オール無水ジエチルエーテル５mＬ中のＥ１６１mgの溶液を−７８℃でアルゴン下、ヘキサン中の１.６Ｍブチルリチウム０.５mLの溶液で処理する。黄色／茶色溶液を−２０℃でガス発生が終わるまで撹拌する。シアン化銅１５mgの−７８℃での添加後、１,１−ジメチル−２−ビニルエポキシド１６０μＬを添加し、反応混合物を−２０℃で２時間撹拌する。反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水性飽和塩化アンモニウム(ｐＨ＝９)溶液で処理する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下除去し、無定形固体１９０mgを得る。この物質を更に精製することなく、シリル保護基除去に直接使用する。ｃ）スキームＢ、工程８ ( １７β)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール無水ＴＨＦ５mＬ中のシリルエーテルＦ１９０mgの溶液を、アルゴン下、ＴＨＦ中の１Ｍテトラブチルアンモニウムフロリド溶液１mＬで処理する。反応混合物を１２時間５０℃で撹拌し、ジエチルエーテルで希釈し、水性炭酸水素ナトリウム溶液で抽出する。溶媒の除去およびシリカのクロマトグラフィー(ヘキサン／酢酸エチル、４：１)により、結晶性白色生産物として標題化合物３５mgを得る。¹ Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)特徴的信号：５.６０−５.５０(２Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(２３＋２４)),４.７０(１Ｈ,ｓ,Ｈ−Ｃ(２１)),４.６２(１Ｈ,ｓ,Ｈ−Ｃ(２１)),３.１３(１Ｈ,dd,Ｊ＝5/12,Ｈ−Ｃ(３)),２.６５−２.５５(２Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(２２)), ２.１８−２.１２(１Ｈ,ｍ,Ｈ−Ｃ(１７))。実施例３' (１７α)−２３Ｅ−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール化合物は、実施例２ｃ）の化合物Ｄで出発して、実施例３の工程ａ）からｃ）と同様に処理して、すなわち下記の中間体： −３β−ｔ.ブチル−ジメチルシロキシ−１７α−アセチル−ヘキサノール−ダンマラン−ドリスヒドラゾン；および −３β−ｔ.ブチル−ジメチルシロキシ−１７α−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０, ２３−ジエン−オールを経由して同様に製造し得る。生産化合物の物理的データは、実施例２に前記してある通りである。先に示唆したように、本発明の使用のためのダンマラ化合物の用量は、例えば、投与経路、処置すべき病状および特に使用する具体的なダンマラ化合物によって変わる。前記試験９および１０に従い行った一つの試験での、式ＩＣの１７α −ダンマラ化合物およびその１７β−エピマー[(１７β)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール]について得たＥＤ₅₀値および既知の抗炎症剤／免疫抑制剤シクロスポリンＡの典型的結果は下記の通りである。抗炎症および免疫抑制使用、例えば、自己免疫疾患処置に使用するための示唆される経口投与量は、したがって： −式ＩＣの化合物の場合、シクロスポリンＡ治療を使用して示唆される量の１０００分の１から１００００分の１の範囲、例えば約０.４または０.５から４.０または５.０μg／kg／日 −式ＩＣの化合物の１７β−エピマーの場合、シクロスポリンＡ治療を使用して示唆される量の１／４から１／１０分の範囲、例えば約０.４または０.５から１ .０または１.２５mg／kg／日である。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年１０月７日【補正内容】請求の範囲１．１７α−ダンマラ化合物。２．医薬として使用するための、１７α−ダンマラ化合物または式ＩＡ〔式中、ａは＞ＣＨ−ＯＲ₁(ここで、Ｒ₁は水素または生理学的に開裂可能および許容可能なアシル残基)または＞Ｃ＝ＯおよびＲは所望により１または２個の二重結合を有し、所望により少なくとも１つのヒドロキシ基で置換されているＣ₈ 脂肪族基である〕で示されるダンマラ化合物。３．薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共に１７α−ダンマラ化合物または請求項２で定義の式ＩＡで示されるダンマラ化合物を含む医薬組成物。４．１７α−ダンマラ化合物または請求項２で定義の式ＩＡで示されるダンマラ化合物の、免疫抑制剤または抗炎症剤として治療的適用するための医薬の製造のための使用。５．有効量の１７α−ダンマラ化合物または請求項２で定義の式ＩＡで示されるダンマラ化合物を患者に投与すること含む、免疫抑制または抗炎症治療を必要とする患者の処置法。６．式ＩＢ〔式中、Ｒは請求項２で記載の意味を有する〕で示される化合物。７．式ＩＣ[(１７α)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール］で示される化合物、またはその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステルである、請求項１記載の化合物。８．図２または図３に示すＮＭＲと同じ特徴を有するＮＭＲを有する化合物。９．１７αカルボニル−ダンマラ化合物。１０．式XIIｂ〔式中、ａ"は遊離形または保護形の＞ＣＨ−ＯＨまたは＞Ｃ＝Ｏおよび１７位の置換基、Ｒ₂ＣＯ−はアシル基〕で示される化合物である、請求項９記載の化合物。１１．式XIIIａ〔式中、ａ"は請求項１０の定義と同じ意味およびＺはアルカリ金属原子または有機金属基〕で示される化合物。１２．Ｚがリチウムまたはトリアルキルスズである、請求項１１記載の化合物。１３．ａ）１７βカルボニル−ダンマラ化合物をエピマー化して１７αカルボニル−ダンマラ化合物を得、必要な場合、ｂ）更に上記１７αカルボニル−ダンマラ化合物を前記の任意の技術、方法または工程を使用して誘導体化することを含む、１７α−ダンマラ化合物の製造法。１４．必要に応じて保護形である１７カルボニル−ダンマラ化合物を求電子基と反応させ、所望により保護基および官能基を除去することを含む、１７Ｃ−ダンマラ化合物の製造法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ネーゲリ，ハンス−ウルリッヒスイス、ツェーハー−4144アルレシャイム、ブルークヴェーク22番 (72)発明者オーベラー，ルーカススイス、ツェーハー−4456テニケン、シュロスガッセ17番 (72)発明者レヴェズ，ラズロスイス、ツェーハー−4106テルヴィル、オップ・デム・フィヒテンライン７番 (72)発明者ロート，ハンス−イェルクスイス、ツェーハー−5264ジプフ−オーバーフリック、マルヴェンヴェーク６番

Claims

【特許請求の範囲】１．医薬として使用するダンマラ化合物。２．薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共にダンマラ化合物を含む医薬組成物。３．免疫抑制剤または抗炎症剤として治療的適用するための医薬の製造のためのダンマラ化合物の使用。４．有効量のダンマラ化合物を患者に投与することを含む、免疫抑制または抗炎症治療を必要とする患者の処置法。５．ダンマラ化合物が式ＩＡ〔式中、ａは＞ＣＨ−ＯＲ₁(ここで、Ｒ₁は水素または生理学的に開裂可能および許容可能なアシル残基)または＞Ｃ＝ＯおよびＲは所望により１または２個の二重結合を有し、所望により少なくとも１つのヒドロキシ基で置換されているＣ₈ 脂肪族基である〕で示される化合物である、請求項１記載の化合物、請求項２記載の組成物、請求項３記載の使用または請求項４記載の方法。６．１７α−ダンマラ化合物。７．式ＩＢ〔式中、Ｒは請求項５で記載の意味を有する〕で示される化合物。８．式ＩＣ[(１７α)−２３−(Ｅ)−ダンマラ−２０,２３−ジエン−３β,２５−ジオール］で示される化合物、またはその生理学的に加水分解可能および許容可能なエステル。９．図２または図３に示すＮＭＲと同じ特徴を有するＮＭＲを有する化合物。１０．ダンマラ化合物が請求項６から８のいずれかに定義のものである、請求項１記載の化合物、請求項２記載の組成物、請求項３記載の使用または請求項４記載の方法。１１．１７αカルボニル−ダンマラ化合物。１２．式XIIｂ〔式中、ａ"は遊離形または保護形の＞ＣＨ−ＯＨまたは＞Ｃ＝Ｏおよび１７位の置換基、Ｒ₂ＣＯ−はアシル基〕で示される化合物である、請求項１１記載の化合物。１３．１７(有機金属−Ｃ)−または１７(アルカリ金属−Ｃ)−ダンマラ化合物。１４．式XIIIａ〔式中、ａ"は請求項１１の定義と同じ意味およびＺはアルカリ金属原子または有機金属基〕で示される化合物である、請求項１３記載の化合物。１５．Ｚがリチウムまたはトリアルキルスズである、請求項１３記載の化合物。１６．ａ）１７βカルボニル−ダンマラ化合物をエピマー化して１７αカルボニル−ダンマラ化合物を得、必要な場合、ｂ）更に上記１７αカルボニル−ダンマラ化合物を前記の任意の技術、方法または工程を使用して誘導体化することを含む、１７α−ダンマラ化合物の製造法。１７．必要に応じて保護形である１７カルボニル−ダンマラ化合物を求電子基と反応させ、所望により保護基および官能基を除去することを含む、１７Ｃ−ダンマラ化合物の製造法。