SK11622003A3

SK11622003A3 - Chinolínové, izochinolínové a ftalazínové deriváty ako antagonisty gonádoliberínu

Info

Publication number: SK11622003A3
Application number: SK1162-2003A
Authority: SK
Inventors: Peter Strehlke; Peter Droescher; Ulrich Buehmann; Norbert Schmees; Peter Peter Muhn; Holger Hess-Stumpp; Roland Kuehne; Eckhard Guenther; Emmanuel Polymeropoulos; Laak Antonius Marinus Ter
Original assignee: Zentaris Gmbh
Priority date: 2001-02-21
Filing date: 2002-02-21
Publication date: 2004-01-08
Also published as: NO20033698D0; PL367285A1; RU2280031C2; AU2002247737B2; CA2438709A1; CZ20032514A3; IL157303A0; BR0207451A; NZ527597A; JP2004528298A; MXPA03007348A; WO2002066437A1; CN1496354A; NO20033698L; NO325675B1; EP1362034A1; HUP0303219A2; BG108165A; RU2003128647A

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových chinolínových, izochinolínových a ftalazínových derivátov ako antagonistov gonádoliberinu.

Doterajší stav techniky

Gonádoliberín (GnRH) je hormón, ktorý je u cicavcov syntetizovaný najmä, ale nie výlučne, nervovými bunkami hypotalamu, je transportovaný do hypofýzy portálnou žilou a je uvoľňovaný riadene v gonádotropných bunkách. Interakciou so svojím receptorom, ktorý má 7 transmembránových domén, GnRH stimuluje produkciu a uvoľňovanie gonádotropných hormónov prostredníctvom druhého posla, ktorým je inozitol-1,4,5trisfosfát a Ca²⁺ ióny. Gonádotropný luteinizačný hormón (LH) a folikuly stimulujúci hormón (FSH) secernované GnRH stimulujú produkciu steroidov a zretie zárodočných buniek u oboch pohlaví. Okrem GnRH (tiež označovaného ako GnRHl) existujú tiež dve ďalšie formy GnRH, konkrétne GnRH2 a 3.

GnRH receptor je používaný ako farmakologický cieľ u veľa ochorení, ktoré sú závislé od fungujúcej produkcie pohlavných hormónov, napríklad pri karcinómu prostaty, premenopauzálnom karcinómu prsníka, endometrióze a fibroidov maternicových. U týchto ochorení môžu byť GnRH superagonisti alebo • ♦

01-1799-03-Če 2 superantagonisti použité úspešne. Kontrola plodnosti u mužov v kombinácii so substitučnými dávkami androgénov tvorí ďalšiu indikáciu.

Výhodou GnRH antagonistov v porovnaní so superagonistami je ich okamžitá účinnosť v blokovaní sekrécie gonádotropínu. Superagonisti najskôr spôsobia nadmernú stimuláciu hypofýzy, ktorá vedie ku zvýšenej sekrécŕi gonádotropínu a pohlavného steroidu. Táto hormonálna reakcia je zakončená po určitom čase nutnom k desenzibilizácii a zníženiu koncentrácií receptora pre GnHR. Preto je možné, že GnRH superagonisti, ako samostatne, tak v kombinácii s testosterónom, nemusia účinne premôcť produkciu spermií u mužov a nie sú teda vhodné pre kontrolu plodnosti u mužov. Naopak, peptidovi GnRH antagonisti, konkrétne v kombinácii so substitučnými dávkami androgénov, majú schopnosť vyvolať u mužov významnú oligozoospermiu.

Peptidovi Napríklad môžu mať a preto sa musia orálna biologická podávať injekčné, compliance. Okrem antagonistov v porovnaní s pracná a nákladná.

však vela nevýhod.

GnRH antagonisti majú významne nižšiu aktivitu ako superagonisti podávať vo významne vyšších dávkach. Ich dostupnosť je

Opakované toho tiež nízka, takže sa injekcie syntéza vedú k peptidových musia horšej

GnRH je výrobou nepeptidových zlúčenín

Chinolínové deriváty, ako nepeptidoví GnRH antagonisti, sú popísané, napríklad, vo W097/14682. Doposiaľ však sa nepeptidoví GnRH antagonisti neuviedli na trh.

01-1799-03-Če

Podstata vynálezu

Predmetom predkladaného vynálezu sú noví GnRH antagonisti, ktorí sú lepší ako známe peptidové zlúčeniny a predstavujú účinnú alternatívu k známym nepeptidovým zlúčeninám. Nový GnRH antagonisti by mali mať ako vysokú aktivitu, tak tiež vysokú orálnu biologickú dostupnosť. Ďalej by mala byť možná jednoduchá syntéza týchto zlúčenín a táto syntéza by tiež mala byť čo najlacnejšia.

Tohoto predmetu je docielené pomocou zlúčenín obecného vzorca (1):

kde

R¹ je (a) acylová skupina -CO-R¹¹ alebo CN, kde R¹¹ je nasýtený, nenasýtený, cyklický a/alebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétne lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov C, alebo fenylová, furánová alebo tiofénová

Ο Μ 799-03-Če skupina voliteľne substituovaná alkylovými skupinami alebo halogénmi, a (b) ester karboxylovej kyseliny -CO-OR¹² alebo karboxamidová skupina -CO-NR¹²NR¹³ alebo skupina -SOX R¹², kde X = 0, 1 alebo 2, alebo -SO2-NR¹²NR¹³, kde R¹² je nasýtený, nenasýtený, cyklický a/alebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétne lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov C, aralkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka, kde arylový radikál môže voliteľne byť substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénmi, alebo fenylový radikál voliteľne substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénmi a R¹³ môže byť atóm vodíka alebo lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka, alebo (c) skupina -A-NR¹⁴-CO-NR¹⁵R¹⁶, kde A je alkylénová skupina majúca 1-4 atómov uhlíka, konkrétne majúca 1 atóm uhlíka, voliteľne substituovaného Ci-Cg-alkylovou skupinou, karbonylovou skupinou, atómom kyslíka alebo skupinou -SO_X~, kde X = 0, 1 alebo 2, R¹⁴ a R¹⁵ sú nezávisle atóm vodíka alebo lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka, a R¹⁶ je lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka, cykĺoalkylová skupina majúca 3-10 atómov uhlíka, cykloalkylalkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka, aralkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka, . kde arylový radikál môže byť voliteľne substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami, fenylová skupina voliteľne substituovaná alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami, alebo heterocyklický kruh voliteľne substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami;

R² je skupina -CH(R²¹)R²², kde R²¹ je vodíkový atóm, Ci-Cio“ alkylová skupina alebo voliteľne substituovaný fenylový kruh a R²² je voliteľne substituovaný fenylový kruh alebo naftylový

01-1799-03-Če kruh, alebo skupina -CH₂CH (R²³) R²⁴, kde R²³ a R²⁴ sú voliteľne substituovaný fenylový kruh,

R³ a R⁴ sú nezávisle vodíkový atóm alebo alkylová skupina majúca 1-10 atómov uhlíka a R³ môže byť tiež halogénový atóm,

R⁵ je skupina naviazaná prostredníctvom radikálu Z,

kde G je -C=C-, -C=N-, -N=C~, atóm kyslíka alebo síry, Z je priama väzba, atóm kyslíka alebo síry, skupina CH-R⁵² alebo -CHR⁵²-CH-R⁵³-, kde R⁵² a R⁵³ sú nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina a n je číslo 1 alebo 2, alebo -CsC- je trojitá väzba alebo skupina -CR⁵²=CR⁵³- alebo C=CR⁵²R⁵³ majúca E alebo Z konfiguráciu, kde R⁵² a R⁵³ sú nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina, L je CH₂ alebo NH skupina, Q je karbonylová alebo -SO_X skupina, kde X = 0, 1 alebo 2 a R⁵¹ je amino skupina voliteľne substituovaná alkylovou skupinou, alebo lineárna alebo rozvetvená alkylová skupina voliteľne substituovaná atómami halogénu, hydroxylovými alebo alkoxy skupinami, alebo cykloalkylovú skupina majúca 3-7 prvkov v kruhu, voliteľne substituovaný atómami halogénu, hydroxylovými alebo alkoxy skupinami,

R⁶ je skupina CH₂-N (R⁶¹) R⁶², kde R⁵¹ je nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina a R⁶² je alkylová skupina alebo voliteľne substituovaná aralkylová skupina alebo heteroarylalkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka a môžu byť skupiny

01-1799-03-Če

v akejkoľvek orientácii, a ďalej všetky stereoizoméry uvedeného vzorca a všetky soli týchto zlúčenín s fyziologicky tolerovateľnými kyselinami alebo bázami.

V zlúčeninách vzorca (1) majú uvedené výrazy nasledujúce významy:

V R¹:

lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec znamená metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-, izo-, terc.butyl, npentyl, 2,2-dimetylpropyl alebo 3-metylbutyl, n-hexyl, nheptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl. Metylová alebo etylová skupina je výhodná.

fenylová skupina voliteľne substituovaná alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami označuje fenyl, o-, m-, ρ-metyl-, etyl-, propyl-, izopropylfenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-,

2,6-, 3,4-, 3,5- dimetyl- alebo -dietylfenyl, o-, m-, p-fluór, chlór-, bróm-, jódfenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4-, 3,5-, difluór-, dichlór-, dibróm-, alebo dijódfenyl alebo naftyl. Fenylová skupina je výhodná.

voliteľne substituovaná furánová alebo tiofénová skupina označuje nesubstituovaný 2- alebo 3-tienyl alebo 2- alebo furyl alebo 3-metyl-, 3-etyl-, 3-fluór-, 3-chlór-, 3-bróm-,

33jód-2-furyl alebo

-2-tienyl, 4-metyl-,

4-etyl-,

4-fluór-,

4chlór-, 4-bróm-,

4-jód-2-furyl alebo

-2-tienyl skupina,

5metyl-, 5-etyl-,

5-fluór-, 5-chlór-,

5-bróm-,

5-jód-2-furyl alebo -2-tienyl,

2-metyl-, 2-etyl-,

2-fluór-,

2-chlór-, 201-1799-03-Če bróm-, 2-jód-3-furyl alebo -3-tienyl, 4-metyl-, 4-etyl-, 4fluór-, 4-chlór-, 4-bróm-, 4-jód-3-furyl alebo -3-tienyl, 5metyl-, 5-etyl-, 5-fluór-, 5-chlór-, 5-bróm-, 5-jód-3-furyl alebo -3-tienyl. Výhodné sú 2-tienylová alebo 2-furylová skupina.

aralkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka” je napríklad benzyl, 1-fenyletyl, -propyl, -butyl, -hexyl, -2metyletyl, -2-etyletyl, -2,2-di-metyletyl, o-, m-, p-metyl-, etyl-, propyl-, i zopropylbenzyl, 2’,3’-, 2’,4’-, 2',5'-, 2', 6’ , 3’, 4', 3’, 5’-dimetyl- alebo -dietylbenzyl, 2’-, 3’-, 4'-fluór-, chlór-, bróm-, jódbenzyl, 2',3'-, 2',4'-, 2',6'-, 3',4'-, 3',5'-, difluór-, dichlór-, dibróm-, alebo dijódbenzyl alebo 2- alebo 3-naftylmetyl, 2-fenyletyl, 3-fenylpropyl, 4fenylbutyl, 5-fenylpentyl.

Ci-C6-alkylová skupina je lineárny alebo rozvetvený alkyl majúci 1-6 atómov uhlíka, ako je metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-, izo-, terc.butyl, n-pentyl, 2,2-dimetylpropyl alebo 3-metylbutyl.

cykloalkylový radikál je cyklopropánový, cyklobutánový, cyklopentánový, cyklohexánový, cykloheptánový, dekahydronaftalénový radikál.

cykloalkylalkylový radikál je cyklopropyl-, cyklobutyl-, cyklopentyl-, cyklohexyl-, cykloheptylmetylový radikál, 1cyklo-propyl-, 1-cyklobutyl-, Ι-cyklopentyl-, 1-cyklohexyl-,

1- cykloheptyletylový radikál, 2-cyklopropyl-, 2-cyklobutyl-,

2- cyklopentyl-, 2-cyklohexyl-, 2-cykloheptyletylový radikál.

heterocyklický kruh je nesubstituovaný 2- alebo 3tienylová alebo 2- alebo 3-furylová skupina alebo 3-metyl-, 3etyl-, 3-fluór-, 3-chlór-, 3-bróm-, 3-jód-2-furylová alebo -2

01-1799-03-Če tienylová skupina, 4-metyl-, 4-etyl-, 4- fluór-, 4-chlór-_z 4bróm-, 4-jód-2-furylová alebo -2-tienylová skupina, 5-metyl-, 5-etyl-, 3-fluór-, 5-chlór-, 5-bróm-, 5-jód-2-furylová alebo 2-tienylová skupina, 2-metyl-, 2-etyl-, 2-fluór-, 2-chlór-, 2bróm-, 2-jód-3-furylová alebo -3-tienylová skupina, 4-metyl-,

4-etyl-, 4-fluór-, 4-chlór-, 4-bróm-, 4-jód-3-furylová alebo -

3-tienylová skupina, 5-metyl-, 5-etyl-, 5-fluór-, 5-chlór-, 5bróm-, 5-jód-3-furylová alebo -3-tienylová skupina, nesubstituovaná 2-, 3- alebo 4-pyridylová skupina alebo 3metyl-, 3-etyl-, 3-fluór-, 3-chlór-, 3-bróm-, 3-jód-2pyridylová skupina, 4-metyl-, 4-etyl-, 4-fluór-, 4-chlór-, 4bróm-, 4-jód-2-pyridylová,skupina, 5-metyl-, 5-etyl-, 5-fluór,

5-chlór-,

5-bróm-,

5-jód-2-pyridylová skupina, 2-metyl-, 2etyl-,

2-fluór-,

4-metyl-, skupina, jód-3-pyridylová skupina, 5-metyl-,

2-chlór-, 2-bromo-, 2-jód-3pyridylová

4-etyl-, 4-fluór-, 4-chlór-, 4-bróm-,

5-etyl-, 5-fluór-,

45chlór-, 5-bróm-, 5-jód-3-pyridylová

6pyrimidinylová alebo 2- alebo skupina, 2-, 4-, 5-,

6-pyridazinylová skupina 3-pyrazinylová skupina.

skupina, 3-, 4-, 5-,

V R²:

alkylová skupina znamená lineárnu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu majúcu 1-6 atómov uhlíka, ako je metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-, izo-, terc.butyl, n-pentyl, 2,2dimetylpropyl alebo 3-metylbutyl. Výhodný je atóm vodíka.

voliteľne substituovaný fenylový kruh alebo naftylový kruh je fenyl, o-, m-, ρ-métyl-, -etyl-, -propyl-, izopropylfenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4-, 3,5-dimetylalebo -dietylfenyl, o-, m-, ρ-fluór-, chlór-, bróm-, jódfenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4-, 3,5-difluór-, dichlór-, dibróm-, alebo dijódfenyl, o-, m-, p-trihalogénmetylfenyl, 2,3-, 2,4-,

2,5-, 2,6-, 3,4- alebo 3,5-ditrihalogénfenyl, o-, m-, p

01-1799-03-Če metoxy-, -etoxy-, -propoxy-, -izopropoxyfenyl alebo a naftyl. 2,5-difluórfenylová skupina je výhodná.

V R³ a R⁴:

V R⁵:

alkylová skupina znamená lineárnu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu majúcu 1-6 atómov uhlíka, ako je metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-, izo-, terc.butyl, n-pentyl, 2,2dimetylpropyl alebo 3-metylbutyl. Výhodný je atóm vodíku.

V R⁶:

alkylová skupina znamená lineárnu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu majúcu 1-6 atómov uhlíka, ako je metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-, izo-, terc.butyl, n-pentyl, 2,2dimetylpropyl alebo 3-metylbutyl. Výhodná je metylová skupina.

aralkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka je benzylová skupina, a 1-fenyletyl, -propyl, -butyl, -hexyl, -2metyletyl, -2-etyl-etyl, -2,2-dimetyletylová skupina, o-, m-, ρ-metyl-, etyl-, - propyl-, izopropylbenzylová skupina, a -2’3’-, 2', 4’-, 2’, 5’-, 2’, 6'-, 3’, 4'-, 3’, 5'- dimetyl- alebo -dietylbenzylová skupina, 2'-, 3'-, 4’-fluór-, chlór-, bróm-, jódbenzylová skupina, 2’,3’-, 2’,4’-, 2’,5', 2',6', 3', 4’ 3’,5’-, difluór-, dichlór-, dibróm-, alebo dijódbenzylová skupina alebo 2- alebo 3-naftylmetylová skupina, 2-fenyletyl, 3-fenylpropyl, 4-fenylbutyl, 5-fenylpentylová skupina.

01-1799-03-Če heteroaralkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka je 2, 3-, alebo 4-pyridylmetyl, -etyl, alebo -propylová skupina, 2alebo 3-furylmetyl, -etyl, alebo propylová skupina, a 2- alebo 3-tienylmetyl, -etyl, alebo -propylová skupina, a 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, alebo 7-indolylmetyl, -etyl alebo -propylová skupina. Benzylová skupina je výhodná.

Výhodné zlúčeniny vzorca (1) sú tie, kde

C—C G ““N—N vF>ŕY t * | || je skupina Π alebo

Keď je R¹ skupina -CO-R¹¹, tak je R¹¹ výhodne metyl, etyl, i-propyl, fenyl, 2-tienyl a 2-furyl. Keď je R¹ -CO-OR¹², tak R¹²môže byť metyl, etyl alebo i-propyl.

Ďalej sú výhodné zlúčeniny, kde R² je aromatická skupina substituovaná na aromatickom kruhu jedným alebo viacej halogénovými atómami, konkrétne atómami fluóru, napr. benzylová skupina, napríklad a 2’,6'-difluórbenzylová skupina. Tiež sú výhodné zlúčeniny, kde aspoň jeden z R³ a R⁴, lepšie obidvaja, sú atómy vodíka.

Výhodným významom pre Z je priama väzba alebo atóm kyslíka, zatial čo G je výhodne skupina -C=C-. L je výhodne Mi skupina, zatial čo Q je výhodne karbonylová skupina a R⁵¹ je Ci-C6-alkylová skupina. R⁶¹ je skupina výhodne s atómami vodíka alebo Ci-C3~alkylovými skupinami, konkrétne metylovými skupinami, a R⁶² je výhodne aralkylový radikál, napríklad benzylová skupina.

01-1799-03-Če

Zlúčeniny vzorca (1) sa výhodne pripravia (a) reakciou zlúčeniny obecného vzorca (2)

kde R⁷ je odštiepitelná skupina, napríklad halogénový atóm alebo alkyl-, perfluóralkyl- alebo arylsulfonylová skupina a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (3)

R⁸-N(R⁶¹)R⁶² (3) kde R⁸ je atóm vodíka alebo atóm kovu, ako je, napríklad, atóm lítia, sodíka, draslíka, cézia, vápnika alebo bária a R⁶¹a R⁶² majú významy uvedené u zlúčeniny (1) , (b) reakciou zlúčeniny obecného vzorca (4)

kde R⁹ je skupina -OSO2C_nF2n+ir halogénový atóm, konkrétne atóm brómu alebo jódu alebo iná odštiepitelná skupina, a všetky

01-1799-03-Če ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (5)

kde R¹⁰ je skupina obsahujúca kov, ako je trialkylcínová skupina, halogénhorečnatá skupina alebo skupina obsahujúca nekov, ako je skupina obsahujúca bór, kremík a podobne, skupina obsahujúca dialkoxybór alebo dihydroxybór, hydroxylová alebo merkapto skupina voliteľne konvertovaná na soľ kovu, ako je, napríklad, soľ lítia, sodíka, draslíka, cézia, vápnika, bária, striebra alebo medi, skupina -C=C-R³¹ alebo skupina -CR⁵²=CR⁵³R³¹ alebo -CR³¹=CR⁵²R⁵³ majúca E alebo Z konfiguráciu, kde R³¹ je skupina obsahujúca kov alebo nekov, ako je bór, kremík a podobne, ako je trialkylcínová skupina, halogénhorečnatá skupina, dialkoxybórová skupina alebo dihydroxybórová, a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), s alebo bez prítomnosti katalyzátora, ako je, napríklad, meď, nikel paládium, platina alebo organické deriváty uvedených kovov;

(c) keď je Y v zlúčenine (1) atóm dusíka, tak reakciou zlúčeniny obecného vzorca (6) kde R³² je

atóm vodíka alebo atóm kovu,

ako je, napríklad, atóm lítia, sodíka, cézia, vápnika, bária, striebra alebo medi, a

01-1799-03-Če všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1) , so zlúčeninou obecného vzorca (7)

R³³R² (7) kde R³³ je odštiepitelná skupina, napríklad halogénový atóm alebo alkyl-, perfluóralkyl- alebo arylsulfonylová skupina, a R² má významy uvedené u zlúčeniny (1), alebo (d) keď je W v zlúčenine (1) atóm dusíka, reakciou zlúčeniny obecného vzorca (8)

R3 kde R³² je atóm vodíka alebo atóm kovu, ako je, napríklad, atóm lítia, sodíka, cézia, vápnika, bária, striebra alebo medi, a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (9)

R³³-R¹ (9) kde R³³ je odštiepitelná skupina, napríklad halogénový atóm alebo alkyl-, perfluóralkyl- alebo arylsulfonylová skupina, a R¹ má významy uvedené u zlúčeniny (1).

Zlúčeniny vzorca (1) podľa predkladaného vynálezu môžu byť použité ako antagonisti gonádoliberínu, napríklad za účelom kontroly plodnosti u mužov, pre hormonálnu terapiu, pre liečbu

01-1799-03-Če sub- a infertility u žien, pre antikoncepciu u žien a pre liečbu nádorov.

Pri kontrole plodnosti u mužov sa zlúčeniny podlá predkladaného vynálezu podávajú pre zníženie spermatogenézy. Výhodne sa používa kombinované podávanie s androgénmi, napríklad testosterónom alebo testosterónovými derivátmi, ako sú, napríklad, estery testosterónu. Podávanie testosterónových derivátov môže byť uskutočňované, napríklad, injekčné, napríklad intramuskulárnou depotnou injekciou.

Pri hormonálnej terapii, napríklad pri liečbe endometriózy, maternicových leiomyómov a maternicových fibroidov, môžu byť zlúčeniny (1) tiež použité v kombinácii s ďalšími hormónmi, napríklad estrogény a/alebo progestíny. Kombinácia GnRH antagonistov podlá predkladaného vynálezu a tkanivovo selektívnych čiastočných agonistov estrogénu, ako je Raloxifene®, je najmä výhodná. Ďalej, zlúčeniny (1) podlá predkladaného vynálezu môžu byť použité pre zvýšenie plodnosti u žien, napríklad tým, že indukujú ovuláciu, a ďalej môžu byť použité pre liečbu sterility.

Na druhú stranu sú zlúčeniny vzorca (1) tiež vhodné pre antikoncepciu u žien. Tak môže byť GnRH antagonista podaný v dňoch 1-15 cyklu, spoločne s estrogénom, výhodne s veľmi nízkymi dávkami estrogénu. V dňoch 16 až 21 cyklu sa ku kombinácii estrogén-GnRH antagonista pridá progestagén. GnRH antagonista môže byť podávaný kontinuálne v priebehu celého cyklu. Týmto spôsobom môže byť dosiahnuté zníženia dávok hormónov a tak zníženia vedľajších účinkov nefyziologických hladín hormónov. Ďalej, výhodných účinkov môže byť dosiahnuté u žien trpiacich syndrómom polycystických ovárií a ochoreniami závislými od androgénov, ako je akné, seborea a hirsutizmus. Tiež sa predpokladá dosiahnutie lepšej kontroly cyklu v

01-1799-03-Če porovnaní s predchádzajúcimi metódami. Ďalšími indikáciami je benígna hyperplázia prostaty, ochrana gonád počas chemoterapie, použitie v riadenej ovariálnej stimulácii/technikách umelého oplodnenia, časnej detskej vývojovej poruchy, napríklad pubertas praecox a polycystického vaječníka.

Konečne, GnRH agonisti podlá predkladaného vynálezu sa môžu tiež použiť pre liečbu hormonálne dependentných nádorových ochorení, ako je karcinóm prsníka v premenopauze, karcinóm prostaty, karcinóm ovárií a karcinóm endometria, pretože potlačujú produkciu endogénnych sexuálnych steroidných hormónov.

Zlúčeniny vzorca (1) podía predkladaného vynálezu sú vhodné ako GnRH antagonisti pre aplikáciu u človeka, ale tiež pre veterinárne medicínske podanie, napríklad u domácich a produkčných zvierat, ale tiež u divokých zvierat.

Podanie môže byť uskutočnené rôznymi spôsobmi, napríklad orálne, lokálne, rektálne, intravaginálne, nazálne alebo injekčné. Orálne podanie je najvýhodnejšie. Zlúčeniny vzorca (1) sa pripravia vo forme vhodnej pre podanie a voliteľne sa zmiešajú s farmaceuticky prijateľnými vehikulami a/alebo riedidlami. Orálne podanie môže byť uskutočnené, napríklad, vo forme tabliet, kapsúl, poťahovaných tabliet alebo práškov, ale tiež vo forme roztokov určených k pitiu. Iné ako orálne podanie môže byť uskutočnené napríklad intravenóznou, podkožnou alebo intramuskulárnou injekciou alebo za použitia mastí, krémov alebo čapikov. Voliteľne je tiež možné realizovať podanie vo forme prostriedku so spomaleným uvoľňovaním. Dávka sa líši podľa indikácie, závažnosti ochorenia, veku, pohlavia, telesnej hmotnosti a senzitivity subjektu, ktorý je liečený. Výhodne sa použijú dávky 0,01 až

01-1799-03-Če mg, lepšie 0,1 až 3 mg a najlepšie 0,1 až 1 mg na kilogram telesnej hmotnosti a deň. Podanie môže byť realizované v jednej dávke alebo vo viacej samostatných dávkach.

Najvýhodnejšie zlúčeniny vzorca (1) sú uvedené ďalej:

Najmä výhodné zlúčeniny:

2-propyl-6-(4-acetamidofenyl)-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl)-1-(2',6’-difluórbenzyl)-1, 4oxochinolin-3-karboxylát dihydro-4-

etyl-6-(4-acetamidofenyl)-5-(N-benzyl-N-metylaminometyl)1-(2’,6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolin-3-karboxylát

6-(4-acetamidofenyl)-3-izobutyryl-5-(N-benzyl-N metylaminometyl) -1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolín

01-1799-03-Če

izopropyl-6-(2-acetamido-5-pyridyl)-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl)-1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát

2-propyl-6-(3-acetamido-6-pyridyl)-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl)-1-(2',6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolín-3-karboxylát

2-propyl-6-(5-acetamido-2-tienyl)-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl)-1-(2’,6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát • ·

01-1799-03-Če

etyl-6-[1-(4- acetamidofenyl)vinyl]-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl) -1-(2’, 6*-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolín-3-karboxylát

etyl R- 6-[1-(4-acetamidofenyl)etyl]-5-(Nbenzyl-N-metylaminometyl)-1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro4-oxochinolín-3-karboxylát

etyl-5-(N-benzyl-N-metylaminometyl) -1-(2',6’difluórbenzyl) -1,4-dihydro-6- (4-metánsulfonyl-amidofenoxy) -4oxochinolín-3-karboxylát

01-1799-03-Če etyl-6- (3-acetamidofenoxy) -5- (N-benzyl-N-metylaminometyl) 1-(2 ’ _t 6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolin-3-karboxylát

etyl-6-(2-acetamido-5-pyridyloxy)-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl) -1-(2’_t 6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát

etyl-β- (2-metylaminokarbonyl-5-pyridyloxy) -5- (N-benzyl-Nmetylaminometyl) -1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1, 4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát

1- [ 6-(4-acetamidofenoxy)- 5-(N-benzyl-N-metylaminometyl)1-(2¹,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolin-3-yl)metyl]3-pyridin-2-ylmočovina

01-1799-03-Če

1- [ 6- (4-acetamidofenoxy) -5- (N-benzyl-N-metylaminometyl) -1(2’,6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-yl)oxy]-3pyridin-2-ylmočovina

etyl-β-(4-hydroxyacetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N metylaminometyl) -1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4 oxochinolín-3-karboxylát

etyl-6-(acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-metylaminometyl)-1[bis(2-fluórfenyl)metyl]-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-

difenylmetyl-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-karboxylát

01-1799-03-Če

Vynález bude teraz ilustrovaný na nasledujúcich príkladoch.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-metylaminometyl)-1(2'_f 6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-karboxylát

mg etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(chlórmetyl)-1-(26’difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-karboxylátu_zrozpusteného v 3 ml dimetylformamidu, reaguje pri teplote 0 °C s 84 μΐ N-metylbenzylamínu a 84 μΐ N,N-diizopropyletylamínu a zmes sa mieša pri izbovej teplote po dobu 20 hodín. Po pridaní 20 ml vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného sa zrazenina odfiltruje nasiatím, premyje sa vodou a potom n-hexánom a suší * · • ·

				• r r r r
01-1799-03-Če	22	r	r - .	r <
sa pri izbovej	teplote vo vákuu. Získa sa	70	mg	titulnej
zlúčeniny.
NMR: 1,3 (t; 3M;	CH₃) ; 1,9 (s; 3M; NCH₃) ; 2,05	(s;	3H;	CH₃); 3,
55 (5; 2H; NCH₂)	; 4, 27 (q; 2H; OCH₂) ; 4, 91	(s;	2H	; NCH₂) ;

5,68 (s; 2H; NCH₂) ; 6,85 (d; 2H; ArCH); 7,1-7,22 (m; 7H; ArCH);

7,26 (d; 1H; ArCH); 7,42-7,6 (m; 4H; ArCH); 8,72 (s; 1H; NCR);

9,9 (5; 1H; NH)

MS:FAB: M ^Λ + 1 = 526 [M = 525]

Východzí materiál, etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(chlórmetyl)1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3karboxylát, sa získa nasledujúcim spôsobom:

a. Etyl-1,4-dihydro-6-fluór-5-nitro-4-oxochinolín-3 karboxylát

g 4-fluór-3-nitroanilínu a 69 g dietyletoxymetylénmalonátu sa zohrieva pri teplote 120 °C po dobu 3 hodín. Zmes sa pridá do n-hexánu, mieša sa po dobu 2 hodín a kryštalický materiál sa odfiltruje nasiatím a suší sa vo vákuu pri izbovej teplote. Získa sa 93 g dietyl-N-(4-fluór3-nitrofenyl)aminometylénmalonátu. V troch podieloch po 31 g sa tento materiál pridá do 150 ml zmesi 26,5% difenylu a 73,5% difenyléteru (DOWTHERM A®), ktorá sa vopred zohreje na 260°C, a zmes sa mieša pri tejto teplote po dobu 30 minút. Po ochladení sa zmes nariedi 500 ml n-hexánu a zrazenina sa odfiltruje nasiatím. Získa sa napospol 64 g zmesi etyl-1,401-1799-03-Če dihydro-6-fluór-5-nitro-4-oxochinolín-3-karboxylátu a etyl

1,4-dihydro-6-fluór-7-nitro-4-oxochinolín-3-karboxylátu.

NMR:	δ = 1,31	(t;	311;	CH₃) ; 4,25 (q;	2H; OCH₂) ;	7,88	(s;	1H;
ArCH;	izomér	A) ;	7, 92	(s;	1H; ArCH;	izomér	A) ;	8,1	(d;	IN;
ArCH;	izomér	B) ;	8,45	(d;	1H; ArCH;	izomér	B) ;	8,59	+	8, 69
(2s;	každý 1H;	NCH	; a +	B)

MS: EI: M^Ä = 280 [M = 28071

b. Etyl-1-(2’,6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-6-fluór-5-nitro-4oxochinolín-3-karboxylát

g zmesi popísanej vyššie sa mieša pri izbovej teplote po dobu 5 hodín s 16 g uhličitanu draselného a 23,7 g 2,6difluórbenzylbromidu v 500 ml dimetylformamidu. Reakčná zmes sa pridá do 1 1 vodného roztoku chloridu amónneho a extrahuje sa trikrát etylacetátom. Po sušení so síranom sodným a odparení vo vákuu sa pridá 500 ml n-hexánu a zmes sa mieša po dobu 15 minút. Po dekantovaní hexánovej fázy sa zvyšok rekryštalizuje z etylacetátu. Získa sa 10,4 g titulnej zlúčeniny.

NMR: δ = 1,3 (t; 3H; CH₃) ; 4,25 (q; 2H; OCH₂) ; 5,84 (s; 2H;

NCH₂); 7,15-7,25 (m; 2H; ArCH); 7,45-7,55 (m; 1H; ArCH) ; 7,92 (dd; 1H; ArCH); 8,04-8,14 (m; 1H; ArCH); 8,96 (s; 1H; NCH); NS: EI: M^Ä = 406 [M = 406]

01-1799-03-Če

c. Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2',6'-difluórbenzyl)-1,4- dihydro-5-nitro-4-oxochinolin-3-karboxylát

3,74 g 4-acetamidofenolu v 40 ml dimetylformamidu reaguje s 733 mg hydridu sodného (80% v minerálnom oleji) a zmes sa mieša pri izbovej teplote po dobu 15 minút. Tento roztok sa potom pridá k 5 g zlúčeniny popísanej vyššie, rozpustenej v 40 ml dimetylformamidu. Po 5 hodinách pri izbovej teplote sa zmes pridá do ľadovej vody a zrazenina sa odfiltruje preosiatím. Po chromatografii na silikagéle (eluent dichlórmetán/2-propanol 95:5) sa získa 5,17 g titulnej zlúčeniny.

NMR: δ = 1,3 (t; 3H; CH₃) ; 2,03 (s; 3H; CH₃) ; 4,27 (q; 2H;

OCH₂); 5,79 (s; 2H; NCH₂) ; 7,01 (d; 2H; ArCH) ; 7,13 -7,23 (m; 2H; ArCH); 7,43 - 7,56 (m; 2H; ArCH); 7,61 (d; 2H; ArCH); 7,8 (d; 1H; ArCH); 8,93 (s; 1H; NCH); 9,97 (1H; S: NCH) MS: EI: M^Ä = 537 [M = 537]

d. Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-amino-l-(2',6'-difluórbenzyl)

1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-karboxylát

01-1799-03-Če

5,1 g vyššie uvedenej zlúčeniny sa hydrogenuje za použitia 510 mg paládia na uhlíku (10%) v 650 ml metanolu. Po odfiltrovaní katalyzátora preosiatím a odparením sa získa 4,55 g titulnej zlúčeniny.

NMR: δ = 1,29 (t; 3M; CH₃) ; 2,02 (s; 3H; CH₃) ; 3,25 (s) 2H;

NH₂) : 4,25 (q; 2H; OCH₂) ; 5,55 (s; 2H; NCH₂) ; 6,55 (d; 1H; ArCH); 6,86 (d; 2H; ArCH); 7,07 (d; 1H; ArCH); 7,1 - 7,22 (m;

2H; ArCH); 7,4 - 7,55 (m; 3M; ArCH); 8,71 (s; 1H; NCR) ;

9,8 (s; 1H; NH) ;

MS: EI: M^Ä 507 [M = 507]

e. Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2’,6,-diflórbenzyl )-1,4- dihydro-5-jód-4-oxochinolín-3-karboxylát

g zlúčeniny uvedenej vyššie sa rozpustí v zmesi 24 ml koncentrovanej kyseliny sírovej a 12 ml vody a zmes reaguje s 325 mg dusitanu sodného v 4 ml vody pri teplote 0 °C. Po 15 minútach sa pH zmesi upraví na pH 3, za použitia roztoku hydrogenuhličitanu sodného a pridá sa 100 mg močoviny. Potom sa pridá 723 mg jodidu draselného v 0,5 ml vody a zmes sa mieša pri izbovej teplote po dobu jednej hodiny. Po extrakcii dichlórmetánom/metanolom (95:5, obj./obj.) sa organická fáza premyje vodným roztokom tiosíranu sodného, suší sa a odparí sa. Po chromatografii na silikagéle (eluent dichlórmetán

01-1799-03-Če obsahujúci 0-15% izopropanolu) sa získa 697 mg titulnej zlúčeniny.

NMR: δ = 1,3 (t; 3M; CH₃) ; 2,02 (s; 3H; CH₃) ; 4,25 (q; 2H; OCH₂);-5,71 (s; 2H-; NCH₂) ; 6,83 (d; 2H; ArCH); 7,1 - 7,2 (2H;

m; ArCH); 7,3 (d; 1H; ArCH); 7,41 - 7,63 (m; 4H; ArCH); 8,83 (s; 1H; N-CH); 9,95 (s; 1H; NH)

MS: es: M* + 1 = 493 [M = 492]

f. Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2’,6’-difluór-benzyl)-1,4dihydro-4-oxo-5-styrylchinolín-3-karboxylát

550 mg vyššie uvedenej jódovej zlúčeniny, 198 mg kyseliny styrylboritej, 55 mg 10 tetrakistrifenyl-fosfínpaládia(0), 1,1 ml 2 molárneho roztoku uhličitanu sodného, 2,2 ml etanolu a 22 ml toluénu sa mieša pri teplote 80 °C po dobu 6 hodín. Potom sa pridá voda, zmes sa extrahuje dichlórmetánom a organická fáza sa premyje roztokom chloridu sodného, suší sa a odparí sa. Zvyšok sa prečistí chromatografiou na silikagéle (eluent dichlórmetán obsahujúci 0-10% izopropanol). Získa sa 902 mg titulnej zlúčeniny;

NMR: δ = 1,28 (t; 3H; CH₃) ; 2,0 (s; 3H; CH₃) ; 4,24 (q; 2H; OCH₂) ; 5,7 (s; 2H; N-CH₂) ; 6, 75 - 6, 85 (m; 3H; ArCH; CH=CH) ;

01-1799-03-Če

7, 08-7,28 (m; 3H; ArCH); 7,3 - 7,68 (m; 9H; ArCH); 7,86 (d;

1H; CHCH}; 8,75 (s; 1H; NCH) ; 9,72 (m; S; NH) .

MS: es: M® + 1 = 595 [M = 594]

g. Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2',6’-difluórbenzyl)-1,4- dihydro-5-forinyl-4-oxochinolín-3-karboxylát

450 mg vyššie uvedené styrylové zlúčeniny sa rozpustia v 25 ml tetrahydrofuránu a 7 ml vody a zmes reaguje s 0,11 ml 2,5% roztoku oxidu osmičelého v terc.butanole. Po miešaní pri izbovej teplote po dobu 15 minút sa pridá 482 mg, po 20 a 22 hodinách 100 mg a po 24 hodinách ďalších 100 mg jodistanu sodného. Po 2 6 hodinách sa zmes nariedi vodou a extrahuje sa etylacetátom. Po usušení organickej fázy za použitia síranu sodného sa zmes odparí. Získa sa 352 mg titulnej zlúčeniny.

NMR: δ = 1,	29 (t;	3H; CH₃) ; 2,01	(s;	3H;	CH₃); 4,27	(q;	2M;
OCH₂); 5,71	(s; NCH₂); 7,12 - 7,22	(m;	2H;	ArCH); 7,4	(d;	1H;
ArCH); 7,43	- 7, 64	(m; 3H; ArCH) ;	7, 72	(d;	1H; ArCH);	9,0	(d;

1H; NCH); 9,97(s; 1H; NH); 10,44 (s; 1H; CHO) .

MS: ľAB: M® + 1 = 521 [M = 520] dihydro-5-hydroxymetyl-4-oxo-chinolin-3-karboxylát

h. Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2’,6'-difluórbenzyl)-Ϊ,401-1799-03-Če

300 mg vyššie uvedeného aldehydu sa rozpustí v 13,8 ml kyseliny octovej a reaguje s 3 podielmi (10 mg) borohydridu sodného v intervale 10 minút. Po nariedení vodou sa zmes extrahuje etylacetátom a organická fáza sa premyje neutrálnym roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Po sušení so síranom sodným sa zmes odparí. Chromatografiou na silikagéle (eluent dichlórmetán obsahujúci 0-10% izopropanolu) sa získa 129 mg titulnej zlúčeniny vo forme peny.

NMR: δ = 1,31 (t; 3M; CH₃) ; 2,02 (s; 3M; CH₃); 4,27 (q; 2H; OCHz) ; 4,86 (d; 2H; OCH₂) ; 5,12 (t; 1H; OH); 5,8 (s; 2H; NCH₂) ; 6,85 (d; 2H; ArCH}; 7,12- 7,22 (m; 2H; ArCH) ; 7,38 (d; 1H; ArCH) ; 7,42-7,59 (m; 3M; ArCH); 7,63 (d; 1H; ArCH); 8,94 (s; 1H; NCH); 9,5 (s; 1H; NH)

MS: FAB: M^ä + 1 = 523 [M = 522]

Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-chlórmethyl-l-(2’,6’difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxo-chinolín-3-karboxylát

01-1799-03-Če

mg vyššie uvedeného alkoholu sa rozpustí dichlórmetánu a reaguje s 0,1 ml tionylchloridu minútach pri izbovej teplote sa pridá voda a zmes sa dichlórmetánom a organická fáza sa premyje roztokom sodného. Po sušení so síranom sodným sa zmes odparí. 80 mg titulnej zlúčeniny vo forme peny.

NMR: δ = 1,33 (t; 3H; CH₃) ; 2,07 (s; 3H; CH₃) ; 4,3

OCH₂) ; 5,66 (s; 2H; CH₂C1) ; 5,75 (s; 2H; NCH₂) ; 6,98

ArCH); 7,13 - 7,25 (m; 2H; ArCH); 7,3 (d; 1H; ArCH); 1H; ArCH); 7,61 (d; 2H; ArCH); 7,68 (d; 1H; ArCH);

1H; NCR); 9,98 (s; 1H; NH).

MS: es: M® + 1= 541/543 [M = 540/542] v 2 ml . Po 20 extrahuje chloridu Získa sa i (q; 2H; (d;, 2H;

7,53 (t; 8,82 (s;

Príklad 2

2-propyl-6~ (4-acetamidofenoxy) -5- (N-benzyl-N-metylaminometyl) 1-(2’, 6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3-karboxylát

01-1799-03-Če

Táto zlúčenina sa pripraví z etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(N-benzyl-N-metylaminometyl)-1-(2’,6'-difluórbenzyl)-1,4dihydro-4-oxochinolín-3-karboxylátu zohrievaním s tetraizopropoxidom titánu v izopropanole.

Príklad 3

Etyl-5-(N-benzyl-N-metylaminometyl)-1-(2’, 6'-difluórbenzyl)1,4-dihydro-6-(4-izobutyramidofenoxy)-4-oxochinolín-3karboxylát

Táto zlúčenina sa pripraví analogicky s príkladom 1 z etyl-5-(chlórmetyl)-1-(2’,6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-6-(4izobutyramidofenoxy)-4-oxochinolín-3-karboxylátu a Nmetylbenzylamidu, vo forme peny.

01-1799-03-Če a . Etyl-5-(chlórmetyl)-1-(2 ’, 6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-6(4-izobutyramidofenoxy)-4-oxo-chinolín-3-karboxylát

Táto zlúčenina sa získa vtedy, keď sa 4-isobutyramidofenol použije namiesto 4-acetamidofenolu v príklade 1/c a ďalšie reakcie prebiehajú rovnako ako v príklade ld až príklade 1/i.

Príklad 4

3-acetyl-6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-(N-benzyl-N -metylaminometyl)ftalazin-4-ón

Titulná zlúčenina sa získa reakciou 6-(4-acetamidofenyl) r r

01-1799-03-Če 32

-l-benzyl-5- (N-benzyl-N-metylaminometyl) ftalazín-4-ónu s acetylchloridom alebo anhydridom kyseliny octovej za prítomnosti bázy, ako je uhličitan sodný alebo hydroxid sodný.

6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-(N-benzyl-N-metyl -aminometyl)ftalazin-4-όη sa získa nasledujúcim spôsobom:

a. 6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-jódftalazin-4-ón

l-benzyl-5,6-dijódftalazin-4-ón (Indián J. Chem. 16B, 1978, 301-304) reaguje s 1 ekvivalentom kyseliny 4acetamidofenylboritej, analogicky s príkladom 1/f. Titulná zlúčenina sa získa prečistením chromatografiou na silikagéle.

b. 6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-chlórmetyl-ftalazin-4-ón

6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-jódftalazin-4-ón reaguje ďalej podlá príkladu 1/f-i za zisku titulnej zlúčeniny.

01-1799-03-Če

Príklad 5

Etyl-6- (4-acetamidofenoxy) -5- (N-benzyl-N-metylaminometyl) -1, 4dihydro-4-oxo-l-(2'-trifluórmetylbenzyl) chinolín-3-karboxylát

130 mg (0,226 mmol) etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(chlórmetyl)-1,4-dihydro-4-oxo-l-(2’-trifluórmetylbenzyl)chinolin-3-karboxylátu rozpusteného v 5 ml DMF reaguje s 125 μΐ Ν,Ν-diizopropyletylamínu a 126 μΐ (0,97 mmol) Nbenzylmetylaminu pri teplote -5 °C. Po zohriati na izbovú teplotu sa reakčná zmes mieša po dobu 20 hodín a potom sa pridá do 50 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pevný materiál sa odfiltruje nasiatím, premyje sa vodou a suší sa vo vákuu. Ďalšie prečistenie sa uskutoční chromatografiou na silikagéle za použitie eluenta skladajúceho sa z 90 dielov dichlórmetánu, 10 dielov etanolu a 1 dielu koncentrovaného amoniaku.

(Rf 0,38) .2

Získa sa 45 mg titulnej zlúčeniny vo forme peny.

MS/molárny pík, M⁺ = 658

Východzí materiál etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5

-(chlórmetyl)-1,4-dihydro-4-oxo-l-(2’-trifluórmetylbenzyl)

01-1799-03-Če

-chinolín-3-karboxylát sa pripraví analogicky so spôsobom popísaným v príkladoch la až li za použitia 2’ trifluórmetylbenzylbromidu namiesto 2,6-difluórmetylbenzyl bromidu.

Príklad 6

Etyl-6-(4-metylaminokarbonylfenoxy)-5-(N-benzyl-Nmetylaminometyl)-1-(2',6’-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4 -oxochinolín-3-karboxylát mg (0,061 mmol) etyl-6-(4-metylaminokarbonyl

-fenoxy)-5-(chlórmetyl)-1-(2’,6'-difluórbenzyl) -1, 4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylátu, rozpusteného v 1,3 μΐ DMF, reaguje s 35 μΐ Ν,Ν-diizopropyletylamínu a 35 μΐ (0,25 mmol) Nmetylbenzylamínu pri teplote 0 °C. Po zohriatí na izbovú teplotu sa reakčná zmes mieša po dobu 20 hodín a potom sa pridá do 10 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pevný materiál sa odfiltruje nasiatím, premyje sa vodou a hexánom a suší sa cez oxid fosforečný vo vákuu.

Získa sa 27 mg titulnej zlúčeniny vo forme peny.

MS (esi) M⁺+l = 626 [N = 625]

Východzi materiál etyl-6- (4-metylaminokarbonyl-fenoxy) -5(chlórmetyl)-1-(2’,6'-difluórbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolín-3-karboxylát sa pripraví analogicky spôsobmi popísanými v príkladoch la až li za použitia 4-hydroxy-Nmetylbenzamidu namiesto 4-acetamidofenolu.

Príklad 7 • e - Λ r e r e ·· r _r - f e c t r , _{r f} .

01-1799-03-Če 35 — -- ' \

Etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-metylaminometyl)-1- .

(1-naftylmetyl)-1,4-dihydro-4-oxo-chinolin-3-karboxylát mg (0,081 mmol) etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(chlórmetyl)-1-(1-naftylmetyl)-1,4-dihydro-4-oxo-chinolín -3-karboxylátu rozpusteného v 1,7 ml DMF reaguje s 46 pl N,N diizopropyletylamidu a 46 μΐ (0,33 mmol) N-metylbenzylamidu pri teplote 0 °C. Po zohriatí na izbovú teplotu sa reakčná zmes mieša po dobu 20 hodín a potom sa pridá do 15 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pevný materiál sa odfiltruje nasiatim, premyje sa vodou a hexánom a suší sa cez oxid fosforečný vo vákuu. Získa sa 32 mg titulnej zlúčeniny vo forme peny.

MS (esi) M⁺+l = 639 [N = 638]

Východzí materiál etyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(chlórmetyl)-1-(naftylmetyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolín-3karboxylát sa pripraví analogicky s príkladmi la až li za použitia 1-chlór-metylnaftalénu namiesto 2,6di fluórmetylbenzylbromidu.

Príklad 8

Preukaz antagonistického pôsobenia

a) Materiály

Buserelín sa získal od Welding (Frankfurt/Main, Germany). Zlúčenina sa označila ¹²⁵I za použitia chlóramín T metódy a Na¹²⁵I (4000 Ci/mmol; Amersham-Buchler, Brauflschweig, Germany). Označená substancia sa prečistila HPLC s reverznou fázou na Spherisorb ODS II kolóne (250 x 4 mm, veľkosť častíc 3 pm) pomocou elúcie 50% acetonitrilom/0,15% kyselinou

01-1799-03-Če trifluóroctovou, pri prietoku 0,5 ml/min. Špecifická aktivita bola 2000 Ci/mmol.

Všetky ďalšie chemikálie boli získané z komerčných zdrojov a boli najvyššej možnej čistoty.

(b) Bunková kultúra

Alfa T3-1 bunky (Bilezikjian et al., Mel. Endocrinol 5 (1991), 347-355) sa kultivovali na plastových tkanivových kultivačných platniach (Nunc, 245 x 245 x 20 mm) v DMEM médiu (Gibco-BRL, Egqenstein-Leopoldshafen, Germany), obsahujúcom penicilín (100 I.U./ml), streptomycín (0,1 mg/ml) a glutamín (0,01 mol/1) a 10% fetálne teľacie sérum (FCS; PAA

Laboratories, Coelbe, Germany). CHO-3 bunky (Schmid et al., J. Biol. Chem. 275 (2000), 9193-9200) sa kultivovali pri rovnakých podmienkach, s tou výnimkou, že sa použilo Hamovo F12 médium (Gibco-BRL).

konfluentných bunkových kultivačných platní sa prepláchlo dvakrát 50 ml fosfátom pufrovaného salinického roztoku (PBS). Bunky sa odoberali v ml PBS zoškrabnutím gumovou škrabkou a sedimentovali sa odstredením pri 800 rpm počas 10 minút v laboratórnej odstredivke (Heraeus). Bunková peleta sa resuspendovala v 5 ml 0,25 mol/1 sacharózy/0,01 mol/1 trietanolamínu, pH 7,4. Bunky sa lyžovali tromi cyklami zmrazenia v suchom ľade/etanole a rozmrazením pri izbovej teplote. Lyzát sa odstredil pri 900 rpm počas 10 minút a sediment sa odstránil. Supernatant sa odstredil pri 18000 rpm na Sorvall SS34 odstredivke počas 30 minút. Peleta (bunkové membrány) sa suspendovali ponorením do 5 ml testovacieho pufra (0,25 mol/1 sacharóza, 0,01 mol/1 trietanolamín, pH 7,5, 1 mg/ml ovalbumín) a uskladnila sa -20 °C v 200 μΐ podieloch.

01-1799-03-Če

Stanovenie proteínu sa uskutočnilo spôsobom pódia Bradforda (Anál. Biochem. 72 (1976), 248-254)

c. Receptorový test

Stanovenie väzby pre určenie kompetičných kriviek sa realizovali trojmo. Testovaná vzorka obsahovala 60 μΐ suspenzie bunkovej membrány (10 pg proteínu pre aT3-l bunky alebo 40 pg proteínu pre CHO3 bunky) , 20 μΐ ¹²⁵I-označeného buserelínu (100000 Ipm na vzorku pre kompetičné krivky a medzi 1500 a 200000 Ipm pre saturačné pokusy) a 20 μΐ 1 testovacieho pufra alebo roztoku testovanej zlúčeniny. Testované zlúčeniny sa rozpustili v destilovanej vode alebo v 50% etanolu. Sériové riedenia (5 x 10^-6 mol/1 až 5 x 10^-12 mol/1) sa pripravili v testovacom pufri. Nešpecifická väzba sa určila za prítomnosti nadbytku neznačeného buserelínu (10~⁶ mol/1). Testovaná vzorka sa inkubovala pri izbovej teplote po dobu 30 minút. Naviazaný a volný ligand sa separovali filtráciou (Whatman GF/C filtre, priemer 2,5 cm) za použitia Amicon lOx prístroja pre odber vzoriek a premyli sa dvakrát 5 ml 0,02 mol/1 tris/HCl, pH 7,4. Filtre sa zvlhčili 0,3% polyetylénimínom (Serva; Heidelberg, Germany) počas 30 min. za účelom redukcie nešpecifickej väzby. Rádioaktivita zachytená na filtroch sa stanovila na 5 kanálovom gammačítači (Wallac LKB 1470 Wizard).

e *

N Á R O

01-1799-03-Če 38

PATENTOVÉ

i.

Zlúčenina obecného vzorca (1):

kde

R¹ je

(a) acylová skupina nenasýtený, cyklický radikál,

-CO-R¹¹ alebo CN, kde R¹¹ je a/alebo (hetero)aromatický nasýtený, organický konkrétne lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka, alebo fenylová, furánová alebo tiofénová skupina voliteľne substituovaná alebo halogénovými atómami, a alkýlovými skupinami (b) ester karboxylovej kyseliny -CO-OR¹² alebo karboxamidová skupina -CO-NR¹²NR¹³ alebo skupina -SO_X R¹², kde X = 0, 1 alebo 2, alebo -SO2-NR¹²NR¹³, kde R¹² je nasýtený, nenasýtený, cyklický a/alebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétne lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov C, aralkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka, kde arylový radikál môže prípadne byť substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami, alebo fenylový radikál voliteľne substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami a R¹³ môže byť atóm vodíka alebo lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka, alebo

01-1799-03-Če (c) skupina -A-NR¹⁴-CO-NR¹⁵R¹⁶, kde A je alkylénová skupina majúca 1-4 atómov uhlíka, konkrétne majúca 1 atóm uhlíka, voliteľne substituovaná Ci-Cô-alkylovou skupinou, karbonylová skupina, atóm kyslíka alebo skupina -S0_x~, kde X = 0, 1 alebo

2, R¹⁴ a R¹⁵ sú nezávisle atóm vodíka alebo lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka a R¹⁶ je lineárny alebo rozvetvený alkylový reťazec majúci 1-10 atómov uhlíka, cykloalkylová skupina majúca 3-10 atómov cykloalkylalkylová skupina aralkylová skupina majúca radikál môže byť voliteľne alebo halogénovými atómami, majúca 7-20 atómov

7-20 atómov uhlíka, kde uhlíka, uhlíka, substituovaný fenylová arylový alkylovými skupinami skupina voliteľne substituovaná alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami, alebo heterocyklický kruh voliteľne substituovaný alkylovými skupinami alebo halogénovými atómami;

R² je skupina -CH (R²¹) R²², kde R²¹ je vodíkový atóm, Ci-Cio“ alkylová skupina alebo voliteľne substituovaný fenylový kruh a R²² je voliteľne substituovaný fenylový kruh alebo naftylový kruh, alebo skupina -CH₂CH (R²³) R²⁴, kde R²³ a R²⁴ sú nezávisle voliteľne substituovaný fenylový kruh,

R⁵ je skupina viazaná prostredníctvom, radikálu Z,

kde G je -C=C-, -C=N-, -N=C-, atóm kyslíka alebo síry, Z je priama väzba, atóm kyslíka alebo síry, skupina CH-R⁵² alebo -CHR⁵²-CH-R5³-, kde R⁵² a R⁵³ sú nezávisle atóm vodíka alebo r ^Λ

01-1799-03-Če alkylová skupina a n je číslo 1 a 2, -C=C- je trojitá väzba alebo skupina -CR⁵²=CR⁵³- alebo C=CR⁵²R⁵³ majúca E alebo Z konfiguráciu, kde R⁵² a R⁵³ sú nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina, L je ΟΗ₂ alebo NH skupina, Q je karbonylová alebo -SO_X skupina, kde X = 0, 1 alebo 2 a R⁵¹ je okrem skupina volitelne substituovaná alkylovou skupinou, alebo lineárna alebo rozvetvená alkylová skupina volitelne substituovaná atómami halogénu, hydroxylovou alebo alkoxy skupinou, alebo cykloalkylová skupina majúca 3-7 atómov v kruhu, volitelne substituovaná atómmi halogénu, hydroxylovú alebo alkoxy skupinou:

R⁶ je skupina CH₂-N (R⁶¹) R⁶², kde R⁶¹ je nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina a R⁶² je alkylová skupina alebo volitelne substituovaná aralkylová skupina alebo heteroarylalkylová skupina majúca 7-20 atómov uhlíka a môžu byť skupiny

v akejkoľvek orientácii, a všetky ďalšie stereoizoméry uvedených zlúčenín, alebo ich soli s fyziologicky tolerovaťeľnými kyselinami alebo bázami.

tým,

Claims

Zlúčenina podľa nároku že

1, vyznačuj ú c a sa je skupina alebo

C-N-N I I
2.

i

01-1799-03-Če
3. Zlúčenina podlá nároku 1 alebo 2, vyznačuj úca tým, že R¹ je skupina -CO-R¹¹.
4. Zlúčenina podlá nároku 3, vyznačujúca sa tým, že R^{10 11} je vybraný zo skupiny zahrnujúcej metyl, etyl, i-propyl, fenyl, 2-tienyl a 2-furyl.
5. Zlúčenina podlá nároku 1 alebo 2, vyznačuj úca sa tým, že R¹¹ je skupina -CO-OR¹².
6. Zlúčenina podlá nároku 5, vyznačujúca sa tým, že R¹² je vybraný zo skupiny zahrnujúcej metyl, etyl alebo i-propyl.
7. Zlúčenina podľa akéhokoľvek z nárokov 1 až 6, vyznačujúca sa tým, že je 2',5'difluórbenzylová skupina.
8. Zlúčenina podľa akéhokoľvek z nárokov 1 až 7, vyznačujúca sa tým, že R³ a R⁴ sú atómy vodíka.
9. Zlúčenina podľa akéhokoľvek z nárokov 1 až 8, vyznačujúca sa tým, že Zje priama väzba alebo atóm kyslíka.
10. Zlúčenina podľa akéhokoľvek z nárokov 1 až 9 vyznačujúca sa tým, že G je -C=C-.

01-1799-03-Če
11. Zlúčenina podlá akéhokolvek z nárokov 1 až 10, vyznačujúca sa tým, že L je NH skupina.
12. Zlúčenina podlá akéhokolvek z nárokov 1 až 11, vyznačujúca sa tým, že Q je karbonylová skupina a R⁵¹ Ci~C6 - alkylová skupina.
13. Zlúčenina podlá akéhokolvek z nárokov 1 až 12, vyznačujúca sa tým, že R⁶¹ je atóm vodíka alebo metylová skupina a/alebo R⁵² je benzylová skupina.
14. Použitie zlúčeniny podlá akéhokolvek z nárokov 1 až 13, ako antagonistu gonádoliberínu (GnRH).
15. Použitie podlá nároku 14 pre kontrolu mužskej plodnosti, pre hormonálnu terapiu, pre liečbu suba infertility u žien, pre antikoncepciu u žien a pre liečbu nádorov.
16. Spôsob prípravy zlúčeniny obecného vzorca (1) vy značujúci sa tým, že zahrnuje :

(a) reakciu zlúčeniny obecného vzorca (2)

01-1799-03 -Če kde R⁷ je odštiepitelná skupina a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (3)

R⁸-N(R⁶¹)R⁶² (3) kde R⁸ je atóm vodíka alebo atóm kovu a R⁶¹ a R⁶² majú významy uvedené u zlúčeniny (1), (b) reakciu zlúčeniny obecného vzorca (4) (4) kde R⁹ je skupina -OSO2C_nF2n+iz halogénový atóm, konkrétne atóm brómu alebo jódu alebo iná odštiepitelná skupina, a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (5)

01-1799-03-Če (5) kde R¹⁰ je skupina obsahujúca kov alebo nekov, hydroxylová alebo merkapto skupina voliteľne konvertovaná na soľ kovu, skupina -C=C-R³¹ alebo skupina -CR⁵²=CR⁵³R³¹ alebo -CR³¹=CR⁵²R⁵³majúca E alebo Z konfiguráciu, kde R³¹ je skupina obsahujúca kov alebo nekov a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), s alebo bez prítomnosti katalyzátora;

(c) keď je Y v zlúčenine (1) atóm dusíka, tak reakciu zlúčeniny obecného vzorca (6) kde R³² je atóm vodíka alebo atóm kovu a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (7)

R³³R² (7) • kde R³³ je odštiepitelná skupina a R² má významy uvedené u zlúčeniny (1), alebo (d) keď je W v zlúčenine (1) atóm dusíka, reakciu zlúčeniny obecného vzorca (8)

01-1799-03-Če (8) kde R³² je atóm vodíka alebo atóm kovu a všetky ďalšie radikály majú významy uvedené u zlúčeniny (1), so zlúčeninou obecného vzorca (9)

R³³-R¹ (9) kde R³³ je odštiepitelná skupina a R¹ má významy uvedené u zlúčeniny (1).