CZ20032514A3

CZ20032514A3 - ChinolinovéŹ isochinolinové a ftalazinové deriváty jako antagonisté gonadoliberinu

Info

Publication number: CZ20032514A3
Application number: CZ20032514A
Authority: CZ
Inventors: Strehlkeápeter; Droescherápeter; Buehmannáulrich; Schmeesánorbert; Muhnápeter; Hess@Stumppáholger; Kuehneároland; Guentheráeckhard; Polymeropoulosáemmanuel; Terálaakáantoniusámarinus
Original assignee: Zentariságmbh
Priority date: 2001-02-21
Filing date: 2002-02-21
Publication date: 2004-05-12
Also published as: NO20033698D0; SK11622003A3; PL367285A1; RU2280031C2; AU2002247737B2; CA2438709A1; IL157303A0; BR0207451A; NZ527597A; JP2004528298A; MXPA03007348A; WO2002066437A1; CN1496354A; NO20033698L; NO325675B1; EP1362034A1; HUP0303219A2; BG108165A; RU2003128647A

Description

Oblast techniky

Vynález se týká nových chinolinových, isochinolinových a ftalazinových derivátů jako antagonistů gonadoliberinu.

Dosavadní stav techniky

Gonadoliberin (GnRH) je hormon, který je u savců syntetizován zejména, ale ne výlučně, nervovými buňkami hypothalamu, je transportován do hypofýzy portální žílou a je uvolňován řízené v gonadotropních bňkách. Interakcí se svým receptorem, který má 7 transmembránových domén, GnRH stimuluje produkci a uvolňování gonadotropních hormonů prostřednictvím druhého posla, kterým je inositol-1,4,5trisfosfát a Ca²⁺ ionty. Gonadotropiny luteinizační hormon (LH) a folikuly stimulující hormon (FSH) secernované GnRH stimulují produkci steroidů a zrání zárodečných buněk u obou pohlaví. Kromě GnRH (též označovaného jako GnRHl) existují také dvě další formy GnRH, konkrétně GnRH2 a 3.

GnRH receptor je používán jako farmakologický cíl u mnoha onemocnění, která jsou závislá na fungující produkci pohlavních hormonů, například při karcinomu prostaty, premenopauzálním karcinomu prsu, endometriose a fibroidů děložních. U těchto onemocnění mohou být GnRH superagonisté nebo superantagonisté použity úspěšně. Kontrola plodnosti u mužů v kombinaci se substitučními dávkami androgenů tvoří další indikaci.

Výhodou GnRH antagonistů ve srovnání se superagonisty je jejich okamžitá účinnost v blokování sekrece gonadotropinu.

\

Superagonisté nejprve způsobí nadměrnou stimulaci hypofýzy, která vede ke zvýšené sekreci gonadotropinu a pohlavního steroidu. Tato hormonální reakce je zakončena po určité době nutné k desenzibilizaci a snížení koncentrací receptoru pro GnHR. Proto je možné, že GnRH superagonisté, jako samostatně, tak v kombinaci s testosteronem, nemusí účinně potlačit produkci spermií u mužů a nejsou tedy vhodné pro kontrolu plodnosti u mužů. Naopak, peptidový GnRH antagonisté, konkrétně v kombinaci se substitučními dávkami androgenů, jsou schopni vyvolat u mužů významnou oligozoospermii.

Peptidový GnRH antagonisté mají však mnoho nevýhod. Například mohou mít významně nižší aktivitu než superagonisté a proto musí být podávány ve významně vyšších dávkách. Jejich orální biologická dostupnost je také nízká, takže musí být podávány injekčně. Opakované injekce vedou k horší „compliance. Kromě toho je syntéza peptidových GnRH antagonistů ve srovnání s výrobou nepeptidových sloučenin pracná a nákladná.

Chinolinové deriváty jako nepeptidový GnRH antagonisté jsou popsané, například, ve W097/14682. Dosud však nebyly nepeptidový GnRH antagonisté uvedeny na trh.

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezu jsou nový GnRH antagonisté, kteří jsou lepší než známé peptidové sloučeniny a představují účinnou alternativu ke známým nepeptidovým sloučeninám. Nový GnRH antagonisté by měly mít jak vysokou aktivitu, tak také vysokou orální biologickou dostupnost. Dále by měla být možná jednoduchá syntéza těchto sloučenin a tato syntéza by též měla být co nej levnější.

Tohoto předmětu je dosaženo pomocí sloučenin obecného vzorce (1):

kde

R¹ je (a) acylová skupina -C0-R11 nebo CN, kde Rll je nasycený, nenasycený, cyklický a/nebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétně lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů C, nebo fenylová, furanová nebo thiofenová skupina volitelně substituovaná alkylovými skupinami nebo halogeny, a (b) ester karboxylové kyseliny -CO-OR12 nebo karboxamidová skupina -CO-NR12NR13 nebo skupina -SO_X-R12, kde X = 0, 1 nebo 2, nebo -SO₂-NR12NR13, kde R12 je nasycený, nenasycený, cyklický a/nebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétně lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající

1-10 atomů C, aralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku, kde arylový radikál může volitelně být substituovaný alkylovými skupinami nebo halogeny, nebo fenylový radikál volitelně substituovaný alkylovými skupinami nebo halogeny a R13 může být atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, nebo (c) skupina -A-NR14-CO-NR15R16, kde A je alkylenová skupina mající 1-4 atomů uhlíku, konkrétně mající 1 atom uhlíku, volitelně substituovaný Ci-C6~alkylovou skupinou, karbonylovou skupinou, atomem kyslíku nebo skupinou -SO_X-, kde X = O, 1 nebo 2, R14 a R15 jsou nezávisle atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, a R16 je lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina mající 3-10 atomů uhlíku, cykloalkylalkylová skupina mající

7-20 atomů uhlíku, aralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku, kde arylový radikál může volitelně být substituovaný alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, fenylová skupina volitelně substituovaná alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, nebo heterocyklický kruh volitelně substituovaný alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy;

R2 je skupina -CH(R21)R22, kde R21 je vodíkový atom, Ci-Cio-alkylová skupina nebo volitelně substituovaný fenylový kruh a R22 je volitelně substituovaný fenylový kruh nebo naftylový kruh, nebo skupina -CH2CH (R23)R24, kde R23 a R24 jsou volitelně substituovaný fenylový kruh,

R3 a R4 jsou nezávisle vodíkový atom nebo alkylová skupina mající 1-10 atomů uhlíku a R3 může být také halogenový atom,

R5 je skupina vázaná prostřednictvím radikálu Z,

kde G je -C=C-, -C=N-, -N=C-, atom kyslíku nebo síry, Z je přímá vazba, atom kyslíku nebo síry, skupina CH-R52 nebo -CHR52-CH-R53-, kde R52 a R53 jsou nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina a n je číslo 1 a 2, -C=C- je trojná vazba nebo skupina -CR52=CR53- nebo C=CR52R53 mající E nebo Z konfiguraci, kde R52 a R53 jsou nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina, L je 0H₂ nebo NH skupina, Q je karbonylová nebo -SO_X skupina, kde X = 0, 1 nebo 2 a R51 je amino skupina volitelně substituovaná alkylovou skupinou, nebo lineární nebo rozvětvená alkylová skupina volitelně substituovaná atomy halogenu, hydroxylovou nebo alkoxy c ······

J ····· ·«··· skupinou, nebo cykloalkylová skupina mající 3-7 atomů v kruhu, volitelně substituovaná atomy halogenu, hydroxylovou nebo alkoxy skupinou;

R6 je skupina CH₂-N (R61) R62, kde R61 je nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina a R62 je alkylová skupina nebo volitelně substituovaná aralkylová skupina nebo heteroarylalkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku a

-HAPV— mohou být skupiny “Π’Γ τπ^- v jakékoliv orientaci, a dále všechny stereoizomery uvedeného vzorce a všechny soli těchto sloučenin s fyziologicky tolerovatelnými kyselinami nebo bázemi.

Ve sloučeninách vzorce (1) mají uvedené výrazy následující významy:

V Rl:

„lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec znamená methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, η-, iso-, terc.butyl, npentyl, 2,2-dimethylpropyl nebo 3-methylbutyl, n-hexyl, nheptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl. Methylová nebo ethylová skupina je výhodná.

„fenylová skupina volitelně substituovaná alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy označuje fenyl, o-, m-, ρ-methyl-, ethyl-, propyl-, isopropylfenyl, 2,3—, 2,4—,

2,5—, 2,6—, 3,4—, 3,5— dimethyl- nebo -diethylfenyl, o-, m-, ρ-fluor-, chlor-, brom-, jodfenyl, 2,3—, 2,4—, 2,5—, 2,6—,

3,4—, 3,5—, difluor—, dichlor-, dibrom-, nebo dijodfenyl nebo naftyl. Fenylová skupina je výhodná.

„volitelně skupina označuje nebo 3-furyl nebo substituovaná furanová nebo thiofenová nesubstituovaný 2- nebo 3-thienyl nebo 23-methyl-, 3-ethyl-, 3-fluor-, 3-chlor-,

3- brom-, 3-jod-2-furyl nebo -2-thienyl, 4-methyl-, 4-ethyl-,

4- fluor-, 4-chlor-, 4-brom-, 4-jod-2-furyl nebo -2-thienyl skupina, 5-methyl-, 5-ethyl-, 5-fluor-, 5-chlor-, 5-brom-,

5- jod-2-furyl nebo -2-thienyl, 2-methyl-, 2-ethyl-,

2-fluor-_z 2-chlor-, 2-brom-, 2-jod-3-furyl nebo -3-thienyl,

4-methyl-, 4-ethyl-, 4-fluor-, 4-chlor-, 4-brom-, 4-jod-3furyl nebo -3-thienyl, 5-methyl-, 5-ethyl-, 5-fluor-, 5chlor-, 5-brom-, 5-jod-3-furyl nebo -3-thienyl. Výhodné jsou

2- thienylová nebo 2-furylová skupina.

„aralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku je například benzyl, 1-fenylethyl, -propyl, -butyl, -hexyl, -2methylethyl, -2-ethylethyl, -2,2-di-methylethyl, o-, m-, pmethyl-, ethyl-, propyl-, isopropylbenzyl, 2', 3'—, 2', 4'—,

2', 5'—, 2', 6', 3', 4', 3', 5'-dimethyl- nebo -diethylbenzyl,

2'-, 3'-, 4'-fluor-, chlor-, brom-, jodbenzyl, 2',3'—,

2',4'—, 2', 6'—, 3', 4'-, 3',5'-, difluor-, dichlor-, dibrom-, nebo dijodbenzyl nebo 2- nebo 3-nafthylmethyl, 2-fenylethyl,

3- fenylpropyl, 4-fenylbutyl, 5-fenylpentyl.

„Ci-C6~alkylová skupina je lineární nebo rozvětvený alkyl mající 1-6 atomů uhlíku, jako je methyl, ethyl, npropyl, isopropyl, ,η-, iso-, terč.butyl, n-pentyl, 2,2dimethylpropyl nebo 3-methylbutyl.

„cykloalkylový radikál je cyklopropanový, cyklobutanový, cyklopentanový, cyklohexanový, cykloheptanový, dekahydronaftalenový radikál.

„cykloalkylalkylový radikál je cyklopropyl-, cyklobutyl-, cyklopentyl·-, cyklohexyl·-, cykloheptylmethylový radikál, 1-cyklo-propyl-, Ι-cyklobutyl-, 1-cyklopentyl-, Ι-cyklohexyl-, 1-cykloheptylethylový radikál,

2-cyklopropyl-, 2-cyklobutyl-, 2-cyklopentyl-,

2-cyklohexyl-, 2-cykloheptylethylový radikál.

„heterocyklický kruh je nesubstituovaný

2- nebo 3-thienylová nebo 2- nebo 3-furylová skupina nebo

3- methyl-, 3-ethyl-, 3-fluor-, 3-chlor-, 3-brom-, 3-jod-2furylová nebo -2-thienylová skupina, 4-methyl-, 4-ethyl-, 4fluor-, 4-chlor-, 4-brom-, 4-jod-2-furylová nebo -2thienylová skupina, 5-methyl-, 5-ethyl-, 3-fluor-, 5-chlor-,

5-brom-, 5-jod-2-furylová nebo -2-thienylová skupina, 2methyl-, 2-ethyl-, 2-fluor-, 2-chlor-, 2-brom-, 2-jod-3furylová nebo -3-thienylová skupina, 4-methyl-, 4-ethyl-, 4— fluor-, 4-chlor-, 4-brom-, 4-jod-3-furylová nebo -3thienylová skupina, 5-methyl-, 5-ethyl-, 5-fluor-, 5-chlor-, 5-brom-, 5-jod-3-furylová nebo -3-thienylová skupina, nesubstituovaná 2-, 3- nebo 4-pyridylová skupina nebo 3methyl-, 3-ethyl-, 3-fluor-, 3-chlor-, 3-brom-, 3-jod-2pyridylová skupina, 4-methyl-, 4-ethyl-, 4-fluor—, 4-chlor-,

4- brom-, 4—jod-2-pyridylová skupina, 5-methyl-, 5-ethyl-,

5- fluor-, 5-chlor-, 5-brom-, 5-jod-2-pyridylová skupina, 2methyl-, 2-ethyl-, 2-fluor-, 2-chlor-, 2—bromo-, 2-jod-3pyridylová skupina, 4-methyl-, 4-ethyl-, 4-fluor-, 4-chlor-,

4- brom-, 4-jod-3-pyridylová skupina, 5-methyl-, 5-ethyl-,

5- fluor-, 5-chlor-_z 5-brom-, 5-jod-3-pyridylová skupina, 2-,

4-, 5-, 6-pyrimidinylová skupina, 3-, 4-, 5-, 6pyridazinylová skupina nebo 2- nebo 3-pyrazinylová skupina.

V R2:

„alkylová skupina znamená lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu mající 1-6 atomů uhlíku, jako je methyl,

ethyl, n-propyl, isopropyl, η—, iso-, terc.butyl, n-pentyl,

2,2-dimethylpropyl nebo 3-methylbutyl. Výhodný je atom vodíku.

„volitelně substituovaný fenylový kruh nebo naftylovýkruh je fenyl, o-, m-, ρ-methyl-, -ethyl-, -propyl-, -isopropylfenyl, 2,3—, 2,4—, 2,5—, 2,6—, 3,4—, 3,5— dimethyl- nebo -diethylfenyl, o-, m-, ρ-fluor-, chlor-, brom-, jodfenyl, 2,3—, 2,4—, 2,5—, 2,6—, 3,4—, 3,5—difluor—, dichlor-, dibrom-, nebo dijodfenyl, o-, m-, ptrihalogenmethylfenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- nebo

3,5—ditrihalogenfenyl, o-, m-, ρ-methoxy-, -ethoxy-, -propoxy-, -isopropoxyfenyl nebo a naftyl. 2,5difluorfenylová skupina je výhodná.

VR3 a R4:

„alkylová skupina znamená lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu mající 1-6 atomů uhlíku, jako je methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, η—, iso-, terc.butyl, n-pentyl,

2,2-dimethylpropyl nebo 3-methylbutyl. Výhodný je atom vodíku.

V R5:

2,2-dimethylpropyl nebo 3-methylbutyl. Výhodný je atom vodíku.

V R6:

„alkylová skupina znamená lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu mající 1-6 atomů uhlíku, jako je methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, η—, iso-, terc.butyl, n-pentyl, • · ··*· · · · · I • · * · · · a ~ ····♦···· ··*···.

····· ··· ··

2,2-dimethylpropyl nebo 3-methylbutyl. Výhodná je methylová skupina.

„aralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku je benzylová skupina, a 1-fenylethyl, -propyl, -butyl, -hexyl, -2-methylethyl, -2-ethyl-ethyl, -2,2-dimethylethylová skupina, o-, m-, ρ-methyl-, ethyl-, - propyl-, isopropylbenzylová skupina, a -2', 3', 2', 4'—, 2', 5'-, 2', 6'—, 3', 4'-, 3', 5'- dimethyl- nebo -diethylbenzylová skupina,

2'-, 3'-, 4'-fluor-, chlor-, brom-, jodbenzylová skupina,

2', 3'-, 2', 4'—, 2', 5'-, 2', 6'-, 3', 4'-, 3', 5'-, difluor-, dichlor-, dibrom-, nebo dijodbenzylová skupina nebo 2- nebo

3-naftylmethylová skupina, 2-fenylethyl, 3-feňylpropyl, 4fenylbutyl, 5-fenylpentylová skupina.

„heteroaralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku je

2-, 3-, nebo 4-pyridylmethyl, -ethyl, nebo -propylová skupina, 2- nebo 3-furylmethyl, -ethyl, nebo —propylová skupina, a 2- nebo 3-thienylmethyl, -ethyl, nebo -propylová skupina, a 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, nebo 7-indolylmethyl, -ethyl nebo -propylová skupina. Benzylová skupina je výhodná.

Výhodné sloučeniny vzorce (1) jsou ty, kde

Y N-C-C ! C— N-N je skupina I | nebo _; | |

Když je R1 skupina -CO-R11, tak je Rll výhodně methyl, ethyl, i-propyl, fenyl, 2-thienyl a 2-furyl. Když je R1 -CO0R12, tak R12 může být methyl, ethyl nebo i-propyl.

Dále jsou výhodné sloučeniny, kde R2 je aromatická skupina substituovaná na aromatickém kruhu jedním nebo více halogenovými atomy, konkrétně atomy fluoru, např. benzylová • · skupina, například a 2',6'-difluorbenzylová skupina. Také jsou výhodné sloučeniny, kde alespoň jeden z R³ a R⁴, lépe oba, jsou atomy vodíku.

Výhodným významem pro Z je přímá vazba nebo atom kyslíku, zatímco G je výhodně skupina -C=C-. L je výhodně NH skupina, zatímco Q je výhodně karbonylová skupina a R51 je Ci-Cg-alkylová skupina. R61 je výhodně atomy vodíku nebo CiC3~alkylové skupiny, konkrétně methylové skupiny, a R62 je výhodně aralkylový radikál, například benzylová skupina.

Sloučeniny vzorce (1) se výhodně připraví (a) reakcí sloučeniny obecného vzorce (2)

kde R7 je odštěpitelná skupina, například halogenový atom nebo alkyl-, perfluoralkyl— nebo arylsulfonylová skupina a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (3)

R8-N(R61)R62 (3) kde R8 je atom vodíku nebo atom kovu, jako je, například, atom lithia, sodíku, draslíku, cesia, vápníku nebo baria a R61 a R62 mají významy uvedené u sloučeniny (1), (b) reakcí sloučeniny obecného vzorce (4) • · · ·

(4) kde R9 je skupina -OSO₂C_nF_2n+i, halogenový atom, konkrétně atom bromu nebo jodu nebo jiná odštěpítelná skupina, a a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (5) (5) kde R10 je skupina obsahující kov, jako je trialkylcínová skupina, halogenhořečnatá skupina nebo skupina obsahující nekov, jako je skupina obsahující bór, křemík a podobně, skupina obsahující dialkoxybór nebo dihydroxybór, hydroxylová nebo merkapto skupina volitelně konvertovaná na sůl kovu, jako je, například, sůl lithia, sodíku, draslíku, cesia, vápníku, baria, stříbra nebo mědi, skupina -C=C-R31 nebo skupina -CR52=CR53R31 nebo —CR31=CR52R53 mající E nebo Z konfiguraci, kde R31 je skupina obsahující kov nebo nekov, jako je bór, křemík a podobně, jako je trialkylcínová skupina, halogenhořečnatá skupina, dialkoxybórová skupina nebo dihydroxybórová, a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), s nebo bez přítomnosti katalyzátoru, jako je, například, měď, nikl, palladium, platina nebo organické deriváty uvedených kovů;

(c) když je Y ve sloučenině (1) atom dusíku, tak reakcí sloučeniny obecného vzorce (6)

R32 kde R32 je atom. vodíku nebo atom kovu, jako je, například, atom lithia, sodíku, cesia, vápníku, baria, stříbra nebo mědi, a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (7)

R33R2 (7) kde R33 je odštěpitelná skupina, například halogenový atom nebo alkyl-, perfluoralkyl- nebo arylsulfonylová skupina, a R2 má významy uvedené u sloučeniny (1), nebo (d) když je W ve sloučenině (1) atom dusíku, reakcí sloučeniny obecného vzorce (8)

kde R32 je atom vodíku nebo nebo atom kovu, jako je, například, atom lithia, sodíku, cesia, vápníku, baria, stříbra nebo mědi, a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (9)

R33-R1 (9) kde R33 je odštěpítelná skupina, například halogenový atom nebo alkyl-, perfluoralkyl- nebo arylsulfonylová skupina, a

R1 má významy uvedené u sloučeniny (1).

Sloučeniny vzorce (1) podle předkládaného vynálezu mohou být použity jako antagonisté gonadoliberinu, například za účelem kontroly plodnosti u mužů, pro hormonální terapii, pro léčbu sub- a infertility u žen, pro antikoncepci u žen a pro léčbu nádorů.

Při kontrole plodnosti u mužů se sloučeniny podle předkládaného vynálezu podávají pro snížení spermatogenese. Výhodně se používá kombinované podávání s androgeny, například testosteronem nebo testosteronovými deriváty, jako jsou, například, estery testosteronu. Podávání testosteronových derivátů může být prováděno, například, injekčně, například intramuskulární depotní injekcí.

Při hormonální terapii, například při léčbě endometriosy, děložních leiomyomů a děložních fibroidů, mohou být sloučeniny (1) také použity v kombinaci s dalšími hormony, například estrogeny a/nebo progestiny. Kombinace GnRH antagonistů podle předkládaného vynálezu a tkáňově selektivních částečných agonistů estrogenu, jako je Raloxifene®, je zejména výhodná. Dále, sloučeniny (1) podle předkládaného vynálezu mohou být použity pro zvýšení plodnosti u žen, například tím, že indukují ovulaci, a dále mohou být použity pro léčbu sterility.

Na druhou stranu jsou sloučeniny vzorce (1) také vhodné pro antikoncepci u žen. Tak může být GnRH antagonista podáván ve dny 1-15 cyklu, společně s estrogenem, výhodně s velmi nízkými dávkami estrogenu. Ve dny 16 až 21 cyklu se ke kombinaci estrogen-GnRH antagonista přidá progestagen.

• · • · · ·

GnRH antagonista může být podáván kontinuálně v průběhu celého cyklu. Tímto způsobem může být dosaženo snížení dávek hormonů a tak snížení vedlejších účinků nefyziologických hladin hormonů. Dále, výhodných účinků může být dosaženo u žen trpících syndromem polycystických ovarií a onemocněními závislými na androgenech, jako je akné, seborhoea a hirsutismus. Také se předpokládá dosažení lepší kontroly cyklu ve srovnání s předchozími metodami. Dalšími indikacemi je benigní hyperplasie prostaty, ochrana gonád během chemoterapie, použití v řízené ovariální stimulaci/technikách umělého oplodnění, časné dětské vývojové poruchy, například pubertas praecox a polycystická ovaria.

Konečně, GnRH agonisté podle předkládaného vynálezu mohou být také použity pro léčbu hormonálně dependentních nádorových onemocnění, jako je karcinom prsu v premenopauze, karcinom prostaty, karcinom ovarií a karcinom endometria, protože potlačují produkci endogenních sexuálních steroidních hormonů.

Sloučeniny vzorce (1) podle předkládaného vynálezu jsou vhodné jako GnRH antagonisté pro aplikaci u člověka, ale též pro veterinární medicínské podání, například u domácích a produkčních zvířat, ale též u divokých zvířat.

Podání může být provedeno různými způsoby, například orálně, lokálně, rektálně, intravaginálně, nasálně nebo injekčně. Orální podání je nejvýhodnější. Sloučeniny vzorce (1) se připraví ve formě vhodné pro podání a volitelně se smísí s farmaceuticky přijatelnými vehikuly a/nebo ředidly. Orální podání může být provedeno, například, ve formě tablet, kapslí, potahovaných tablet nebo prášků, ale také ve formě roztoků určených k pití. Jiné než orální podání může • · • · • · být provedeno například intravenosní, podkožní nebo intramuskulární injekcí nebo za použití mastí, krémů nebo čípků. Volitelně je také možné provést podání ve formě prostředku se zpomaleným uvolňováním. Dávka se liší podle indikace, závažnosti onemocnění, věku, pohlaví, tělesné hmotnosti a sensitivity subjektu, který je léčen. Výhodně se použijí dávky 0,01 až 30 mg, lépe 0,1 až 3 mg a nejlépe 0,1 až 1 mg na kilogram tělesné hmotnosti a den. Podání může být provedeno v jedné dávce nebo ve více samostatných dávkách.

Nejvýhodnějsi sloučeniny vzorce (1) jsou uvedeny dále:

• · * «

- 16 Zejména výhodné sloučeniny:

.Q,	/ S 0 o T	2-propyl-6-(4-acetamidofenyl)-5-(N-benzyl-Nmethylaminomethyl)-1-(2^r, 6'difluorbenzyl)-1,4dihydro-4-oxochinolin-3karboxylát
o
Ύ 0	,Q,	ethyl-6-(4-acetamidofenyl)5-(N-benzyl-N-
TI	>00	methylaminomethyl)-1-(2',6'-
	ocV'⁰!	difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4'oxochinolin-3-karboxylát

	o		6-(4-acetamidofenyl)-3-iso-
% 0 0	butyryl-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)—1—(2^r,6'-
			;difluorbenzyl)-1, 4-dihydro-4-
0		CCT i P 1 i	oxochinolin
		SrS

V o·	Q_,		jisopropyl-6-(2-acetamido-5pyridyl)-5-(N-benzyl-N-
	Ί o o	i methylaminomethyl)-1-(2', 6'-
		'difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4-
	X	'T	oxochinolin-3-karboxylát

v n	Q,		2-propyÍ-6-(3-acetamido6-pyridýl)-5-(N-benzyl-N-
Ά	] 2 2	methylaminomethyl)-1-(2’, 6'-
^N fí^	xyM F	difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4-
	0	oxoch inolin-3-karboxy1át
		T

• * · · · · · · · • · · · · · ·

hQ/ ΆΥΤί	0 o >5	2-propyl-6-(5-acetamido2-thienyl)-5-(N-benzyl-Nmethylaminomethyl)-1-(2',6'difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát
0	^s II
	Qv		ethyl-6—[l—( 4— acetamidofenyl)vinyl]-5-(N-benzyl-N-
		ϊ o o	methylaminomethyl)-1-(2', 6' -
0		O-^	difluorbenzyl)—1,4-dihydro-4-
í j T	T J	oxochinolin-3-karboxylát
^λη		^Si F	- ------- -- --
	Q_,		ethyl R- a S- a R, S 6-[l—(4— acetamidofenyl)ethyl]-5-(N-
	Ί Q o	benzyl-N-methylaminomethyl)-1-
o		li! ^0_/	(2', 6’-difluorbenzyl)-1,4-di-
Λί		F	hydro-4-oxochinolin-3-karboxylát
	>5
	O		ethyl-5-(N-benzyl-N-
	—\ z Mí ~ ~	methylaminomethyl)-1-(2', 6'
	o	1Π ,	idifluorbenzyl)-1,4-dihydro-6-(4-
_ZSO₂	P¹	wt	methansulfonyl-amidofenoxy)-4oxochinolin-3-karboxylát
	>5	i .—
	Q,		ethyl-6-(3-acetamidofenoxy)-5(N-benzyl-N-methylaminomethyl) -
		O 0	1-(2', 6'-difluorbenzyl)-1, 4-
			dihydro-4-oxochinolin-3-
	J T3	karboxylát
		ΙΨ F
V o	x>
	Q_,	1 1	ethyl-6-(2-acetamido-5pyridyloxy)-5-(N-benzyl-N-
	rr°í	O 0 ; M tl i	methylaminomethyl)-1-(2',6'
o	WV Ί	difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4-
	Ví ; _f5ó	oxochinolin-3-karboxylát

Q-ν' η ο ο χ-	1 ¹ ethyl-6-(2-methylaminokarbonyl5-pyridyloxy)-5-(N-benzyl-Nmethylaminomethyl) -1-(2',6'difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát
Q, V- ν . »	1-[6-(4-acetamidofenoxy)- 5-(N-benzyl-N- methylaminomethyl)-1-(2', 6'difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-yl)methyl]-3iDvridin-2-ylmočovina ' 1
q_n, 2 mbóyir^ χ»	1 1-[6-(4-acetamidofenoxy)5-(N-benzyl-Nmethylaminomethyl)1-(2',6'-difluorbenzyl)-1, 4dihydro-4-oxochinolin-3-yl)ioxy]-3-pyridin-2-ylmočovina Γ
Q„- _{ο ο}. X	ethyl-6-(4-hydroxyacetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)-1-(2',6'idifluorbenzyl)-l,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát - — _Λ - —
Q,/ ο ο CCÓ	i ethyl-6-(acetamidofenoxy)5-(N-benzyl-N- ; methylaminomethyl)-1-[bis (2fluorfenyl)methyl]-1,4-dihydro- , 4-oxochinolin-3-karboxylát »
	ethyl-6-(acetamidofenoxy)-5-(n ; benzyl-N-methylaminomethyl)-1í difenylmethyl-1,4-dihydro-4- oxochinolin-3-karboxylát

Vynález bude nyní ilustrován na následujících příkladech.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)-1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát

mg ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(chlormethyl) 1-(2',6' -difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolin-3karboxylátu, rozpuštěného ve 3 ml dimethylformamidu, reaguje při teplotě 0 °C s 84 μΐ N-methylbenzylaminu a 84 μΐ N,Ndiisopropylethylaminu a směs se mísí při teplotě místnosti po dobu 20 hodin. Po přidání 20 ml vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného se sraženina odfiltruje nasátím, promyje se vodou a potom n-hexanem a suší se při teplotě místnosti ve vakuu. Získá se 70 mg titulní sloučeniny.

NMR: 1,3 (t; 3M; CH₃) ; 1,9 (s; 3M; NCH₃) ; 2,05 (s; 3H; CH₃) ;

3,55 (5; 2H; NCH₂) ; 4,27 (q; 2H; OCH₂) ; 4,91 (s; 2H; NCH₂) ; 5,68 (s; 2H; NCH₂) ; 6,85 (d; 2H; ArCH); 7,1-7,22 (m; 7H; ArCH); 7,26 (d; 1H; ArCH); 7,42-7,6 (m; 4H; ArCH); 8,72 (s; 1H; NCR); 9,9 (s; 1H; NH)

MS:FAB: Μ® + 1 = 526 [M = 525] • · · ·

Výchozí materiál, ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)5-(chlormethyl)-1-(2', 6'-difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát, se získá následujícím způsobem:

a. Ethyl-1,4-dihydro-6-fluor-5-nitro-4-oxochinolin-3karboxylát • · · · · · · • · · · · · • ······

g 4-fluor-3-nitroanilinu a 69 g diethylethoxymethylenmalonátu se zahřívá při teplotě 120 °C po dobu 3 hodin. Směs se přidá do n-hexanu, mísí se po dobu 2 hodin a krystalický materiál se odfiltruje nasátím a suší se ve vakuu při teplotě místnosti. Získá se 93 g diethyl-N(4-fluor-3-nitrofenyl)aminomethylenmalonátu. Ve třech podílech po 31 g se tento materiál přidá do 150 ml směsi 26,5% difenylu a 73,5% difenyletheru (DOWTHERM A®), která se předem zahřeje na 260°C, a směs se mísí při této teplotě po dobu 30 minut. Po ochlazení se směs naředí 500 ml n-hexanu a sraženina se odfiltruje nasátím. Získá se celkem 64 g směsi ethyl-1,4-dihydro-6-fluor-5-nitro-4-oxochinolin-3karboxylátu a ethyl-1,4-dihydro-6-fluor-7-nitro-4oxochinolin-3-karboxylátu.

NMR: δ = 1,31 (t; 311; CH₃) ; 4,25 (q; 2H; OCH₂) ; 7,88 (s;

1H; ArCH; izomer A); 7,92 (s; 1H; ArCH; izomer A); 8,1 (d;

iN; ArCH; izomer B); 8,45 (d; 1H; ArCH; izomer B); 8,59 +

8,69 (2s; každý 1H; NCH; A + B)

MS: El: M® = 280 [M = 28071 • · · ·

b. Ethyl-1-(2', 6' -difluorbenzyl)-1,4-dihydro-6-fluor-5nitro-4-oxochinolin-3-karboxylát

g směsi popsané výše se mísí při teplotě místnosti po dobu 5 hodin s 16 g uhličitanu draselného a 23,7 g 2,6difluorbenzylbromidu v 500 ml dimethylformamidu. Reakční směs se přidá do 1 1 vodného roztoku chloridu amonného a extrahuje se třikrát ethylacetátem. Po sušení se síranem sodným a odpaření ve vakuu se přidá 500 ml n-hexanu a směs se mísí po dobu 15 minut. Po dekantování hexanové fáze se zbytek rekrystalizuje z ethylacetátu. Získá se 10,4 g titulní sloučeniny.

NMR: δ = 1,3 (t; 3H; CH₃) ; 4,25 (q; 2H; OCH₂) ; 5,84 (s;

2H; NCH₂); 7,15-7,25 (m; 2H; ArCH); 7,45-7,55 (m; 1H; ArCH);

7,92 (dd; 1H; ArCH); 8,04-8,14 (m; 1H; ArCH); 8,96 (s; 1H; NCH) ;

NS: El: M® = 406 [M = 406]

c. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2',6'-difluorbenzyl) -1,4-dihydro-5-nitro-4-oxochinolin-3-karboxylát

• · · ·

3,74 g 4-acetamidofenolu ve 40 ml dimethylformamidu reaguje s 733 mg hydridu sodného (80% v minerálním oleji) a směs se mísí při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Tento roztok se potom přidá k 5 g sloučeniny popsané výše, rozpuštěné ve 40 ml dimethylformamidu. Po 5 hodinách při teplotě místnosti se směs přidá do ledové vody a sraženina se odfiltruje odsátím. Po chromatografií na silikagelu (eluens dichlormethan/2-propanol 95:5) se získá 5,17 g titulní sloučeniny.

NMR:	δ =	1,3	(t; 3H; CH₃) ; 2,03	(s;	3H;	CH₃); 4,27	(q;
2H;	OCH₂)	; 5,	79 (s; 2H; NCH₂); 7	,01	(d;	2H; ArCH);	7,13 -
7,23	(m;	2H;	ArCH); 7,43-7,56	(m;	2H;	ArCH); 7,	61 (d; 2H;

ArCH); 7,8 (d; 1H; ArCH); 8,93 (s; 1H; NCH); 9,97 (1H; S; NCH)

MS: El: M® = 537 [M - 537]

d. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-amino-l-(2', 6' difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolin-3-karboxylát

5,1 g výše uvedené sloučeniny se hydrogenuje za použití 510 mg palladia na uhlíku (10%) v 650 ml methanolu. Po odfiltrování katalyzátoru odsátím a odpaření se získá 4,55 g titulní sloučeniny.

NMR: δ = 1,29 (t; 3M; CH₃) ; 2,02 (s; 3H; CH₃); 3,25 (s; 2H; NH₂); 4,25 (q; 2H; OCH₂) ; 5,55 (s; 2H; NCH₂) ; 6,55 (d; 1H; ArCH); 6,86 (d; 2H; ArCH); 7,07 (d; 1H; ArCH); 7,1 - 7,22

(m; 2H; ArCH); 7,4 - 7,55 (m; 3M; ArCH); 8,71 (s; 1H; NCR);

9,8 (s; 1H; NH) ;

MS: El: M® 507 [M = 507]

e. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-{2',6'-difluorbenzyl)-1,4dihydro-5-jod-4-oxochinolin-3-karboxylát

g sloučeniny uvedené výše se rozpustí ve směsi 24 ml koncentrované kyseliny sírové a 12 ml vody a směs reaguje s 325 mg dusitanu sodného ve 4 ml vody při teplotě 0 °C. Po 15 minutách se pH směsi upraví na pH 3, za použití roztoku hydrogenuhličitanu sodného a přidá se 100 mg močoviny. Potom se přidá 723 mg jodidu draselného v 0,5 ml vody a směs se mísí při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny. Po extrakci dichlormethanem/methanolem (95:5, obj./obj.) se organická fáze promyje vodným roztokem thiosíranu sodného, suší se a odpaří se. Po chromatografií na silikagelu (eluens dichlormethan obsahující 0-15% isopropanolu) se získá 697 mg titulní sloučeniny.

NMR: δ = 1,3 (t; 3M; CH₃) ; 2,02 (s; 3H; CH₃) ; 4,25 (q; 2H;

OCH₂);-5,71 (s; 2H-; NCH₂) ; 6,83 (d; 2H; ArCH); 7,1 - 7,2 (2H; m; ArCH); 7,3 (d; 1H; ArCH); 7,41 - 7,63 (m; 4H; ArCH);

8,83 (s; 1H; N-CH); 9,95 (s; 1H; NH)

MS: es: Μ® + 1 = 493 [M = 492] • · • ·

f. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2',6'-difluor-benzyl)-1,4dihydro-4-oxo-5-styrylchinolin-3-karboxylát

0·^

550 mg výše uvedené jódové sloučeniny, 198 mg kyseliny styrylborité, 55 mg 10 tetrakistrifenyl-fosfinpalladia(0),

1,1 ml 2 molárního roztoku uhličitanu sodného, 2,2 ml ethanolu a 22 ml toluenu se mísí při teplotě 80 °C po dobu 6 hodin. Potom se přidá voda, směs se extrahuje dichlormethanem a organická fáze se promyje roztokem chloridu sodného, suší se a odpaří se. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelu (eluens dichlormethan obsahující 0-10% Isopropanol). Získá se 902 mg titulní sloučeniny.

NMR: δ = 1,28 (t; 3H; CH₃) ; 2,0 (s; 3H; CH₃) ; 4,24 (q; 2H; OCH₂) ; 5,7 (s; 2H; N-CH₂) ; 6,75 - 6,85 (m; 3H; ArCH; CH=CH) ; 7,08-7,28 (m; 3H; ArCH); 7,3 - 7,68 (m; 9H; ArCH); 7,86 (d;

ÍH; CHCH); 8,75 (s; ÍH; NCH); 9,72 (m; S; NH).

MS: es: Μ® + 1 = 595 [M = 594]

g. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4dihydro-5-formyl-4-oxochinolin-3-karboxylát

O

450 mg výše uvedené styrylové sloučeniny se rozpustí v 25 ml tetrahydrofuranu a 7 ml vody a směs reaguje s 0,11 ml 2,5% roztoku oxidu osmičelého v terč.butanolu. Po míšení při teplotě místnosti po dobu 15 minut se přidá 482 mg, po 20 a 22 hodinách 100 mg a po 24 hodinách dalších 100 mg jodistanu sodného. Po 26 hodinách se směs naředí vodou a extrahuje se ethylacetátem. Po sušení organické fáze za použití síranu sodného se směs odpaří. Získá se 352 mg titulní sloučeniny.

NMR: δ = 1,29 (t; 3H; CH₃) ; 2,01 (s; 3H; CH₃) ; 4,27 (q; 2M; OCH₂); 5,71 (s; NCH₂); 7,12 - 7,22 (m; 2H; ArCH); 7,4 (d; 1H; ArCH); 7,43-7,64 (m; 3H; ArCH); 7,72 (d; 1H; ArCH); 9,0 (d; 1H; NCH); 9,97(s; 1H; NH); 10,44 (s; 1H; CHO).

MS: FAB: Μ® + 1 = 521 [M = 520]

h. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4dihydro-5-hydroxymethyl-4-oxo-chinolin-3-karboxylát

300 mg výše uvedeného aldehydu se rozpustí v 13,8 ml kyseliny octové a reaguje s 3 podíly (10 mg) borohydridu sodného v intervalu 10 minut. Po naředění vodou se směs extrahuje ethylacetátem a organická fáze se promyje neutrálním roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Po sušení se síranem sodným se směs odpaří. Chromatografií na silikagelu (eluens dichlormethan obsahující 0-10% isopropanol) se získá 129 mg titulní sloučeniny ve formě pěny.

NMR: δ = 1,31 (t; 3M; CH₃) ; 2,02 (s; 3M; CH₃) ; 4,27 (q; 2H; OCH₂) ; 4,86 (d; 2H; OCH₂) ; 5,12 (t; IH; OH); 5,8 (s; 2H; NCH₂) ; 6,85 (d; 2H; ArCH); 7,12- 7,22 (m; 2H; ArCH) ; 7,38 (d; IH; ArCH); 7,42-7,59 (m; 3M; ArCH); 7,63 (d; IH; ArCH);

8,94 (s; IH; NCH); 9,5 (s; IH; NH)

MS: FAB: Μ® + 1 = 523 [M = 522]

i. Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-chlormethyl-l-(2',6'difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4-oxo-chinolin-3-karboxylát

mg výše uvedeného alkoholu se rozpustí v 2 ml dichlormethanu a reaguje s 0,1 ml thionylchloridu. Po 20 minutách při teplotě místnosti se přidá voda a směs se extrahuje dichlormethanem a organická fáze se promyje roztokem chloridu sodného. Po sušení se síranem sodným se směs odpaří. Získá se 80 mg titulní sloučeniny ve formě pěny.

NMR: δ = 1,33 (t; 3H; CH₃) ; 2,07 (s; 3H; CH₃) ; 4,3 (q; 2H; OCH₂) ; 5,66 (s; 2H; CH₂C1) ; 5,75 (s; 2H; NCH₂) ; 6,98 (d; 2H; ArCH); 7,13 - 7,25 (m; 2H; ArCH); 7,3 (d; IH; ArCH); 7,53 (t; IH; ArCH); 7,61 (d; 2H; ArCH); 7,68 (d; IH; ArCH); 8,82 (s; IH; NCR); 9,98 (s; IH; NH).

MS: es: M® + 1= 541/543 [M = 540/542]

Příklad 2 • · · ·

2-propyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl) -1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát

Tato sloučenina se připraví z ethyl-6-(4~acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)-1-(2', 6'-difluorbenzyl) -1,4-dihydro-4-oxochinolin-3-karboxylátu zahříváním s tetraisopropoxidem titanu v isopropanolu.

Příklad 3

Ethyl-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)-1-(2',6'-difluorbenzyl) -1, 4-dihydro-6-(4-isobutyramidofenoxy)-4oxochinolin-3-karboxylát

Tato sloučenina se připraví analogicky s příkladem 1 z ethyl-5-(chlormethyl)-1-(2',6'-difluorbenzyl)—1,4— dihydro-6-(4-isobutyramidofenoxy)-4-oxochinolin-3karboxylátu a N-methylbenzylamidu, ve formě pěny.

a. Ethyl-5-(chlormethyl)-1-(2', 6'-difluorbenzyl)-1,4dihydro-6-(4-isobutyramidofenoxy)-4-oxo-chinolin-3karboxylát

Tato sloučenina se získá tehdy, když se 4isobutyramidofenol použije místo 4-acetamidofenolu v příkladu 1/c a další reakce probíhají stejně jako v příkladu ld až příkladu 1/i.

Příklad 4

3-acetyl-6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-(N-benzyl-Nmethylaminomethyl)ftalazin-4-on

Titulní sloučenina se získá reakcí 6-(4-acetamidofenyl)l-benzyl-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)ftalazin-4-onu s acetylchloridem nebo anhydridem kyseliny octové za přítomnosti baze, jako je uhličitan sodný nebo hydroxid sodný.

.....

6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)ftalazin-4-on se získá následujícím způsobem:

a. 6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-jodftalazin-4-on

l-benzyl-5,6-dijodftalazin-4-on (Indián J. Chem. 16B, 1978, 301-304) reaguje s 1 ekvivalentem kyseliny 4acetamidofenylborité, analogicky s příkladem 1/f. Titulní sloučenina se získá přečištěním chromatografií na silikagelu.

b. 6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-chlormethyl-ftalazin-4-on

6-(4-acetamidofenyl)-l-benzyl-5-jodftalazin-4-on reaguje dále podle příkladu 1/f—i za zisku titulní sloučeniny.

Příklad 5:

Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)-1,4-dihydro-4-oxo-l-(2'-trifluormethylbenzyl ) chinolin-3-karboxylát « · · ·

130 mg (0,226 mmol) ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(chlormethyl)-1,4-dihydro-4-oxo-l-(2'-trifluormethylbenzyl)chinolin-3-karboxylátu rozpuštěného v 5 ml DMF reaguje se 125 μΐ Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 126 μΐ (0,97 mmol) N-benzylmethylaminu při teplotě -5 °C. Po zahřátí na teplotu místnosti se reakční směs mísí po dobu 20 hodin a potom se přidá do 50 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pevný materiál se odfiltruje nasátím, promyje se vodou a suší se ve vakuu. Další přečištění se provede chromatografií na silikagelu za použití eluens skládajícího se z 90 dílů dichlormethanu, 10 dílů ethanolu a 1 dílu koncentrovaného amoniaku.

(R_f 0,38).2

Získá se 45 mg titulní sloučeniny ve formě pěny.

MS/molární pík, M⁺ = 658

Výchozí materiál ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(chlormethyl) -1, 4-dihydro-4-oxo-l- (2'-trifluormethylbenzyl) chinolin-3-karboxylát se připraví analogicky se způsobem popsaným v příkladech la až li za použití 2'trifluormethylbenzylbromidu místo 2,6-difluormethylbenzylbromidu.

• · · ·

Příklad 6

Ethyl-6-(4-methylaminokarbonylfenoxy)-5-(N-benzyl-Nmethylaminomethyl)-1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát mg (0,061 mmol) ethyl-6-(4-methylaminokarbony1fenoxy)-5-(chlormethyl)-1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4-dihydro4- oxochinolin-3-karboxylátu, rozpuštěného v 1,3 μΐ DMF, reaguje s 35 μΐ N,N-diisopropylethylaminu a 35 μΐ (0,25 mmol) N-methylbenzylaminu při teplotě 0 °C. Po zahřátí na teplotu místnosti se reakční směs mísí po dobu 20 hodin a potom se přidá do 10 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pevný materiál se odfiltruje nasátím, promyje se vodou a hexanem a suší se přes oxid fosforečný ve vakuu.

Získá se 27 mg titulní sloučeniny ve formě pěny. '

MS (esi) M⁺+l = 626 [N = 625]

Výchozí materiál ethyl-6-(4-methylaminokarbonyl-fenoxy)5- (chlormethyl)-1-(2',6'-difluorbenzyl)-1,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylát se připraví analogicky se způsoby popsanými v příkladech la až li za použití 4-hydroxy-Nmethylbenzamidu místo 4-acetamidofenolu.

Příklad 7

Ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5-(N-benzyl-N-methylaminomethyl)-1-(1-naftylmethyl)-1,4-dihydro-4-oxo-chinolin-3karboxylát mg (0,081 mmol) ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(chlormethyl)-1-(1-naftylmethyl)-1,4-dihydro-4-oxo-chinolin3-karboxylátu rozpuštěného v 1,7 ml DMF reaguje s 46 μΐ N,N• · · ·

diisopropylethylamidu a 46 μΐ (0,33 mmol) Nmethylbenzylamidu při teplotě 0 °C. Po zahřátí na teplotu místnosti se reakční směs mísí po dobu 20 hodin a potom se přidá do 15 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pevný materiál se odfiltruje nasátím, promyje se vodou a hexanem a suší se přes oxid fosforečný ve vakuu. Získá se 32 mg titulní sloučeniny ve formě pěny.

MS (esi) M⁺+l = 639 [N = 638]

Výchozí materiál ethyl-6-(4-acetamidofenoxy)-5(chlormethyl)-1-(naftylmethyl)-1,4-dihydro-4-oxochinolin-3karboxylát se připraví analogicky s příklady la až li za použití 1-chlor-methylnaftalenu místo 2,6difluormethylbenzylbromidu.

Příklad 8

Průkaz antagonistického působení

a) Materiály

Buserelin se získal od Welding (Frankfurt/Main, Germany). Sloučenina se označila ¹²⁵I za použití chloramin T metody a Na¹²⁵I (4000 Ci/mmol; Amersham-Buchler, Brauflschweig, Germany). Označená substance se přečistila HPLC s reverzní fází na Spherisorb ODS II koloně (250 x 4 mm, velikost částic 3 pm) pomocí eluce 50% acetonitrilem/O,15%

Kyselinou trifluoroctovou, při průtoku 0,5 ml/min.

Specifická aktivita byla 2000 Ci/mmol.

Všechny další chemikálie byly získány z komerčních zdrojů a byly nejvyšší možné čistoty.

(b) Buněčná kultura

Alfa T3-1 buňky (Bilezikjian et al., Mel. Endocrinol 5 (1991), 347-355) se kultivovaly na plastových tkáňových kultivačních plotnách (Nunc, 245 x 245 x 20 mm) v DMEM mediu (Gibco-BRL, Eggenstein-Leopoldshafen, Germany), obsahujícím penicilín (100 I.U./ml), streptomycin (0,1 mg/ml) a glutamin (0,01 mol/1) a 10% fetální telecí sérum (FCS; PAA Laboratories, Coelbe, Germany). CHO-3 buňky (Schmid et al., J. Biol. Chem. 275 (2000), 9193-9200) se kultivovaly za stejných podmínek, s tou výjimkou, že se použilo Hamovo F12 medium (Gibco-BRL).

konfluentních buněčných kultivačních ploten se propláchlo dvakrát 50 ml fosfátem pufrovaného salinického roztoku (PBS). Buňky se odebíraly v ml PBS seškrábnutím gumovou škrabkou a sedimentovaly se odstředěním při 800 rpm během 10 minut v laboratorní odstředivce (Heraeus). Buněčná peleta se resuspendovala v 5 ml 0,25 mol/1 sacharosy/0,01 mol/1 triethanolaminu, pH 7,4. Buňky se lyžovaly třemi cykly zmražení v suchém ledu/ethanolu a rozmražením při teplotě místnosti, Lyzát se odstředil při 900 rpm během 10 minut a sediment se odstranil. Supernatant se odstředil při 18000 rpm na Sorvall SS34 odstředivce během 30 minut. Peleta (buněčné membrány) se suspendovaly ponořením do 5 ml testovacího pufru (0,25 mol/1 sacharosa, 0,01 mol/1 triethanolamin, pH 7,5, 1 mg/ml ovalbumin) a uskladnila se 20 °C ve 200 μΐ podílech. Stanovení proteinu se provedlo způsobem podle Bradforda (Anal. Biochem. 72 (1976), 248—254) • ·

c. Receptorový test

Stanovení vazby pro určení kompetičních křivek se provedly trojmo. Testovaný vzorek obsahoval 60 μΐ suspenze buněčné membrány (10 pg proteinu pro aT3-l buňky nebo 40 pg proteinu pro CHO3 buňky), 20 μΐ ¹²⁵I-značeného buserelinu (100000 Ipm na vzorek pro kompetiční křivky a mezi 1500 a 200000 Ipm pro saturační pokusy) a 20 μΐ testovacího pufru nebo roztoku testované sloučeniny. Testované sloučeniny se rozpustily v destilované vodě nebo v 50% ethanolu. Sériová ředění (5 x 10~⁶ mol/1 až 5 x 10“¹² mol/1) se připravila v testovacím pufru. Nespecifická vazba se určila za přítomnosti nadbytku neznačeného buserelinu (10“⁶ mol/1) . Testovaný vzorek se inkuboval při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Navázaný a volný ligand se separovaly filtrací (Whatman GF/C filtry, průměr 2,5 cm) za použití Amicon lOx přístroje pro odběr vzorků a promyly se dvakrát 5 ml 0,02 mol/1 tris/HCl, pH 7,4. Filtry se zvlhčily 0,3% polyethyleniminem (Serva; Heidelberg, Germany) během 30 min. za účelem redukce nespecifické vazby. Radioaktivita zachycená na filtrech se stanovila na 5 kanálovém gammačítači (Wallac LKB 1470 Wizard).

Claims

Patentové

005 nároky kde

R¹ je (a) acylová skupina -CO-Rh nebo CN, kde Rll je nasycený, nenasycený, cyklický a/nebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétně lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, nebo fenylová, furanová nebo thiofenová skupina volitelně substituovaná alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, a (b) ester karboxylové kyseliny —C0-0R12 nebo karboxamidová skupina -CO-NR12NR13 nebo skupina-SO_x-R12, kde X = O, 1 nebo 2, nebo -S0₂-NR12NR13, kde R12 je nasycený, nenasycený, cyklický a/nebo (hetero)aromatický organický radikál, konkrétně lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, aralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku, kde arylový radikál může případně být substituovaný alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, nebo fenylový radikál volitelně substituovaný alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, a R13 může být atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, nebo (c) skupina -A-NR14-CO-NR15R16, kde A je alkylenová skupina mající 1-4 atomů uhlíku, konkrétně mající 1 atom uhlíku, volitelně substituovaná C_x-C6-alkylovou skupinou, karbonylová skupina, atom kyslíku nebo skupina —S0_x-, kde

X = O, 1 nebo 2, R14 a R15 jsou nezávisle atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku a R16 je lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec mající 1-10 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina mající 3-10 atomů uhlíku, cykloalkylalkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku, aralkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku, kde arylový radikál může být volitelně substituovaný alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, fenylová skupina může být volitelně substituovaná alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy, nebo heterocyklický kruh může být volitelně substituovaný alkylovými skupinami nebo halogenovými atomy,

R2 je skupina -CH(R21)R22, kde R21 je atom vodíku, Ci—Cio~ alkylová skupina nebo volitelně substituovaný fenylový kruh, R22 je volitelně substituovaný fenylový kruh nebo naftylový kruh, nebo skupina -CH₂CH(R23)R24, kde R23 a R24 jsou nezávisle volitelně substituovaný fenylový kruh,

R3 a R4 jsou oba nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina mající 1-10 atomů uhlíku a R3 může také být halogenový atom,

R5 je skupina navázaná prostřednictvím radikálu Z, kde G je -C=C-,-C=N-,-N=C-, atom kyslíku nebo síry, Z je přímá vazba, atom kyslíku nebo síry, skupina CH-R52 nebo -CHR52-CH-R53-, kde R52 a R53 jsou nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina a n je 1 nebo 2, nebo -C=C- trojná vazba nebo skupina -CR52-CR53-nebo C=CR52R53 mající E nebo Z konfiguraci, kde R52 a R53 jsou nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina, L je CH₂ nebo NH skupina, Q je karbonylová nebo-SO_x- skupina, kde X - 0, 1 nebo 2, a R51 je amino skupina volitelně substituovaná alkylovou skupinou, nebo lineární nebo rozvětvená alkylová skupina volitelně substituovaná atomy halogenu, hydroxylovými nebo alkoxy skupinami nebo cykloalkylová skupina mající 3-7 prvků v kruhu, volitelně substituovaný atomy halogenu, hydroxylovými nebo alkoxy skupinami,

R6 je skupina CH₂-N(R61)R62, kde R61 je nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina a R62 je alkylová skupina nebo volitelně substituovaná aralkylová skupina nebo heteroarylalkylová skupina mající 7-20 atomů uhlíku a mohou být skupiny ' ~πτ -rrr -r=r v jakékoliv orientaci, a všechny další stereoizomery uvedených sloučenin, nebo jejich soli s fyziologicky tolerovatelnými kyselinami nebo bázemi.
2. Sloučenina podle nároku lvyznačující se tím, že je skupina

C-C nebo

C— Ν— N i i
3. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2vyznačuj ící se t í m, že RI je skupina -CO-R11.
4. Sloučenina podle nároku 3vyznačující se tím, že Rll je vybrán ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, i-propyl, fenyl, 2—thienyl a 2-furyl.
5. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2vyznačuj ící se t í m, že Rll je skupina -CO-OR12.
6. Sloučenina podle nároku 5vyznačující se tím, že R12 je vybrán ze skupiny zahrnující methyl, ethyl nebo i-propyl.
7. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 6 vyznačující se tím, že R2 je 2',5'dífluorbenzylová skupina.
8. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 7 vyznačující se tím, žeR3aR4 jsou atomy vodíku.
9. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 8 vyznačující se tím, žeZje přímá vazba nebo atom kyslíku.
10. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 9 vyznačující se tím, že G je —C=C-.
11. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 10 vyznačující se tím, že L je NH skupina.
12. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 11 vyznačující se tím, že Q je karbonylová skupina a R51 Ci-C₆-alkylová skupina.
13. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 12 • · vyznačující se tím, že R61 je atom vodíku nebo methylová skupina a/nebo R62 je benzylová skupina.
14. Použití sloučeniny podle jakéhokoliv z nároků 1 až 13 jako antagonisty gonadoliberinu (GnRH).
15. Použití podle nároku 14 pro kontrolu mužské plodnosti, pro hormonální terapii, pro léčbu sub- a infertility u žen, pro antikoncepci u žen a pro léčbu nádorů.
16. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (1) vyznačující se tím, že zahrnuje:

(a) reakci sloučeniny obecného vzorce (2) kde R7 je odštěpitelná skupina a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (3)

R8-N(R61)R62 (3) kde R8 je atom vodíku nebo atom kovu a R61 a R62 mají významy uvedené u sloučeniny (1), (b) reakci sloučeniny obecného vzorce (4)

R4' (4) kde R9 je skupina -OSO₂C_nF_2n+i, halogenový atom, konkrétně atom bromu nebo jodu nebo jiná odštěpitelná skupina, a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (5)

Q—R51 ^R10O-L <⁵>.

kde R10 je skupina obsahující kov nebo nekov, hydroxylová nebo merkapto skupina volitelně konvertovaná na sůl kovu, skupina -C=C-R31 nebo skupina -CR52=CR53R31 nebo -CR31=CR52R53 mající E nebo Z konfiguraci, kde R31 je skupina obsahující kov nebo nekov a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), s nebo bez přítomnosti katalyzátoru;

(c) když je Y ve sloučenině (1) atom dusíku, tak reakci sloučeniny obecného vzorce (6) kde R32 je atom vodíku nebo atom kovu a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (7)

R33R2 (7) • · kde R33 je odštěpitelná skupina a R2 má významy uvedené u sloučeniny (1), nebo (d) když je W ve sloučenině (1) atom dusíku, reakci sloučeniny obecného vzorce (8) (8) kde R32 je atom vodíku nebo atom kovu a všechny další radikály mají významy uvedené u sloučeniny (1), se sloučeninou obecného vzorce (9)

R33-R1 (9) kde R33 je odštěpitelná skupina a Rl má významy uvedené u sloučeniny (1).