SI9300267A - Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplasticnih bolezni - Google Patents

Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplasticnih bolezni Download PDF

Info

Publication number
SI9300267A
SI9300267A SI9300267A SI9300267A SI9300267A SI 9300267 A SI9300267 A SI 9300267A SI 9300267 A SI9300267 A SI 9300267A SI 9300267 A SI9300267 A SI 9300267A SI 9300267 A SI9300267 A SI 9300267A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
pro
val
xan
alkyl
alkoxy
Prior art date
Application number
SI9300267A
Other languages
English (en)
Inventor
Andreas Haupt
Franz Emling
Cynthia Romerdahl
Original Assignee
Basf Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Ag filed Critical Basf Ag
Publication of SI9300267A publication Critical patent/SI9300267A/sl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

BASF AKTIENGESELLSCHAFT
Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplastičnih bolezni
Pri predloženem izumu gre za nove peptide in njihove derivate, ki nudijo potencialno izboljšane terapevtske uporabe za zdravljenje neoplastičnih bolezni v primerjavi z Dolastatinom-10 in -15 (US patent št. 4,879,278, 7. nov. 1989; US patent št. 4,816,444, 28. marec 1989). Nadalje lahko spojine v smislu predloženega izuma s pridom sintetiziramo, kot je podrobno opisano spodaj, za razliko od Dolastatina-10 in -15, ki ju je treba z velikim trudom čistiti iz revnih naravnih virov. Poleg tega je Dolastatin-10 nestabilen za kisline. Opisano je bilo, da celo manjše spremembe v strukturi lahko povzročijo popolno izgubo aktivnosti (Biochemical Pharmacology, vol. 40, št. 8,1859-64,1990).
Spojine v smislu predloženega izuma vključujejo nove peptide s formulo I
R1.
N - CH
- CO - A - B - (D)t - (E)u (F)v “ (G)
R2 kjer je
R1 alkoksi, prednostno C14; alkil, prednostno C17; cikloalkil, prednostno C3 6;
alkilsulfonil, prednostno Cj 6; fluoroalkil, prednostno fluoroetil, difluoroetil, trifluoroetil, fluoroizopropil, trifluoroizopropil; trifluoroacetil; amidino; ureil;
piperidinosulfonil; morfolinosulfonil; benziloksikarbonil; alkiloksikarbonil;
prednostno C14; aminosulfonil, ki je lahko substituiran z alkilom, prednostno Cj 5; hidroksi; arilsulfonil; kije lahko substituiran z enim ali več substituenti, ki jih neodvisno izberemo izmed alkila (prednostno C^), -N(CH3)2, nitro, halogena in CF3; benzil, ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi izmed alkila (prednostno CH), alkoksi (prednostno Cw), nitro, halogena in CF3; ali NR3R4, kjer sta lahko R3 in R4 vsak bodisi vodik ali alkil, prednostno Cw;
R2 je vodik; alkil, prednostno C^; fluoroalkil, prednostno fluoroetil, difluoroetil, trifluoroetil, fluoroizopropil, trifluoroizopropil; cikloalkil, prednostno C3 7; acil, prednostno C18; benzoil ali benzil, od katerih sta lahko oba substituirana z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi izmed nitro, halogena, CF3, alkila (prednostno CM) in alkoksi (prednostno CM)
Rx-N-R2 so lahko skupaj ftalimido, 5- ali 6-členski heterocikel, ki je lahko nesubstituiran ali substituiran z 1 ali več substituenti, neodvisno izbranimi izmed fenila, benzila, alkila (prednostno Cw), N(CH3)2, nitro, tienila, CONH2 in COOEt;
A je valilni, izolevcilni, levcilni, allo-izolevcilni, a-aminoizobutanoilni,
3-terc.butilalanilni, 2-terc.butilglicilni, 3-cikloheksilalanilni, 2,4-diaminobutanoilni, ornitilni, lizilni, 2-etilglicilni, 2-cikloheksilglicilni, lizilni ali arginilni ostanek;
B je N-alkil-valilni, -levcilni, -izolevcilni, -2-terc.butilglicilni, -3terc.butilalanilni, -3-cikloheksilalanilni, -fenilalanilni, -2-etilglicilni, -norlevcilni ali -2-cikloheksilglicilni ostanek, kjer je N-alkil prednostno N-metil ali N-etil;
D,E,F in G neodvisno izberemo iz skupine, v kateri so prolilni, homo-prolilni, hidroksiprolilni, tiazolidinil-4-karbonilni, 1-aminopentil-l-karbonilni, valilni,
2- terc.butilglicilni, izolevcilni, levcilni, 3-cikloheksilalanilni, fenilalanilni, N-metilfenilalanilni, tetrahidroizokinolil-2-karbonilni, 3-tiazolilalanilni,
3- tienilalanilni, histidilni, 1-aminoindil-l-karbonilni, 2,4-diaminobutanoilni, arginilni, 3-piridilalanilni, 3-terc.butilalanilni, 2-cikloheksilglicilni, lizilni, norlevcilni in 3-naftilalanilni ostanek
X je vodik, alkil (prednostno raven ali razvejen C15), cikloalkil (prednostno cikloheksil), -CH2-cikloheksil ali arilalkil (prednostno benzil ali fenetil); sta lahko A in B skupaj, F in G skupaj, R1R2N-CHX-CO in A skupaj, E in F skupaj, bodisi sami ali v parih,
(prednostno CJ5); n je 1, 2 ali 3; V je kisik ali žveplo; M je vodik, nižji alkil (prednostno CM), arilalkil (prednostno benzil ali fenetil), cikloheksil ali -CH2cikloheksil; Q je vodik; R je vodik ali nižji alkil (prednostno C13); ali R in Q lahko skupaj tvorita vez; U je vodik, nižji alkil (prednostno CM), fenil ali cikloalkil (prednostno cikloheksil); in je W vodik, nižji alkil (prednostno C14) ali fenil;
t,u,v in w so neodvisno 0 ali 1; in je
K hidroksi, alkoksi (prednostno C14), fenoksi, benziloksi ali substituiran ali nesubstituiran amino delež;
pod pogojem, da K ni hidroksi, alkoksi, benzoksi ali fenoksi delež, kadar so t, u, v in w 0; in nadalje pod pogojem, da K ni hidroksi ali alkoksi delež, kadar so t, u in v 0; in njihove soli s fiziološko prenesljivimi kislinami.
Pri izumu gre tudi za postopke za pripravo spojin s formulo I, za farmacevtske sestavke, ki vsebujejo take spojine skupaj s farmacevtsko sprejemljivim nosilcem, in za postopke za njihovo uporabo za zdravljenje raka pri sesalcih.
En podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje spojine s formulo I, kjer je R1-N-R2 ftalimido ali 5- ali 6-členski heterocikel s formulo
-N
\^N lili n o o o o *1 \-;N ki je lahko nesubstituiran ali substituiran z 1 ali več substituenti, ki jih lahko neodvisno izberemo izmed fenila, benzila, alkila, (prednostno C14), N(CH3)2, nitro, tienila, okso, CONH2 in COOEt.
Drug podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje spojine s formulo I, kjer je K amino delež s formulo R5-N-R6, kjer je
R5 vodik ali hidroksi ali Cx 7-alkoksi ali benziloksi ali C17alkil, ki je lahko substituiran z 1 ali več atomi fluora, ali C3 7cikloalkil ali benzil, ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, C17alkilsulfonil, C^alkoksi, fenoksi, benzoksi, halogen ali C^alkil;
R6 je vodik ali Cx 7alkil, kije lahko substituiran z 1 ali več atomi fluora, ali C3 7cikloalkil ali fenil (kije lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, ClJt-alkil, ki lahko tvori ciklični sistem, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkils ulfonil) ali benzil (kije lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, ki lahko tvori ciklični sistem, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali C17-alkilsulfonil) ali naftil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C^-alkil, CM-alkoksi, benzoksi, fenoksi ali C1?-alkilsulfonil) ali benzhidril (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C^-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali bifenil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali trifenilmetil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno
CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C^-alkil, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali C1 7-alkilsulfonil) ali benzhidriletil (ki je lahko substituiran z do 2 substuentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkil-sulfonil) ali benzhidrilmetil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2 C14-alkil, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali 7-alkilsulfonil) ali naftilmetil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C] 4-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali acenaftil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CJ4-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali acenaftilmetil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali ali C17-alkilsulfonil) ali piridil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C4 7-alkilsulfonil) ali pikolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali benzotiazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali C17-alkilsulfonil) ali benzizotiazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali benzopirazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C] 4alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali benzoksazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali fluorenil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali aminofluorenil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali Cx 7-alkilsulfonil) ali pirimidil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, COOEt, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, ki lahko tvori ciklični sistem, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali Cx 7-alkilsulfonil) ali C1^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali
5-členski heteroaril (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, halogenska, ciano, COOMe, COOEt, tiometilna, tioetilna, tiofenilna, pikolilna, acetilna, -CH2-COOEt, CONH2, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkilna, C3^-cikloalkilna, C3 4-alkilenska skupina, ki tvori bicikličen sistem s heterociklom, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi, fenil (ki je lahko substituiran z do 4 substituenti, ki so lahko neodvisno nitro, CF3, halogen ali C14-alkil), benzil (ki je lahko substituiran z do 4 substituenti, ki so lahko neodvisno nitro, CF3, halogen, C14-alkil, naftil, C17-alkilsulfonil, fenilsulfonil ali C^-dialkilamino)] ali
-CHR7-5-členski heteroaril (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, COOMe, COOEt, COOCH(CH3)2, CONH2, COOBzl, C14-alkil, C[ 4-alkoksi, fenoksi, benzoksi, fenil, benzil, naftil ali C4 7-alkilsulfonil [R7 = vodik, raven ali razvejen Cj 5-alkil, benzil; ali R7 in R5 skupaj tvorita skupino -(CH2)3- ali -(CH^J).
Ta podrazred vključuje spojine s formulo I, kjer so t, u, v in w neodvisno 0 ali 1; R1, R2 in X so nižji alkil, A in F sta nižji alkilamino kislini, B je N-nižje alkilirana nižja alkilamino kislina; D, E, G in K so, kot je preje definirano. Ob upoštevanju gornjega lahko tako eno serijo takih spojin prikažemo z naslednjo formulo II:
RXR2N—CXH-CO-A-B-Pro-Pro-(F)v-(G)w-K II in drugo z naslednjo formulo III
R1R2N-CXH-CO-A-B-Pro-(F)v-(G)w-K. III
V drugem podrazredu spojin v smislu predloženega izuma lahko R5-N-R6 skupaj tvorijo strukture, izbrane iz skupine, v kateri so /
ki so lahko nesubstituirane ali substituirane z enim ali več substituenti, neodvisno izbranimi iz skupine, v kateri so CF3, nitro, halogenska, okso, ciano, N,Ndimetilamino, CONHBzl, CON(Bzl)2, C^-alkilna, C3^-cikloalkilna, CM-alkilenska skupina, ki tvori bicikličen sistem s heterociklom, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi, naftil, pirimidil, COOEt, COOBzl, C^-cikloalkil, pirolidinil, piperidinil, tienil, pirolil, -(^-CO-NCHtCH^, -CH2-CO-N(CH2)4, -CH2-CO-N(CH2)4O, benzil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi iz skupine, v kateri so nitro, halogen, CF3, tiometil ali ustrezen sulfoksid ali sulfon, tioetil ali ustrezen sulfoksid ali sulfon, C14-alkil in C^-alkoksi) in fenil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi iz skupine, v kateri so nitro, halogen, CF3, tiometil, tioetil, C14alkil in C14-alkoksi).
Drugi podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje npr. spojine s formulo I, kjer so t, u, v in w 0 in K ni hidroksi, benzoksi, fenoksi ali alkoksi delež.
Drugi podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje npr. spojine s formulo
I, kjer so t, u, in v 0 in K ni hidroksi ali alkoksi delež.
Še drugi podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje npr. spojine s formulo I, kjer so t, u, v in w 1 in K hidroksi, alkoksi, fenoksi ali benziloksi delež.
Še drugi podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje npr. spojine s formulo I, kjer so t, u in v 1, w je 0 in K hidroksi, alkoksi, fenoksi ali benziloksi delež.
Drugi podrazred spojin v smislu predloženega izuma vključuje npr. spojine s formulo I, kjer sta t in u 1, v in w sta 0 in Kje hidroksi, alkoksi, fenoksi ali benziloksi delež.
Prednostne so spojine s formulo I, kjer imajo substituenti naslednje pomene:
R1 je etil, metil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, 2-fluoroizopropil, trifluoroizopropil, izopropil, propil, butil, pentil, ciklopropil, ciklopentil, ureil, mezil, tožil, naftilsulfonil, fenilsulfonil, 2,4,6-trimetilsulfonil, benziloksikarbonil, terc.butiloksikarbonil, metiloksikarbonil, morfolinosulfonil, terc.butilaminosulfonil, metilaminosulfonil, laktil, trifluoroacetil, NH2, N(CH3)2, N(CH2CH3)2, N[CH(CH3)2]2, amidino, CH3O- ali eden od ostankov
och3 och3
R2 je vodik, metil, etil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, 2-fluoroizopropil, ’ triflnoroizopropil, izopropil, propil, butil, ciklopropil, formil, acetil, propionil, (CH3)2CHCO-, pivaloil, benzoil ali eden od ostankov ch2 ch2
ch2 ch2 ch2
V
CH(CH3)2
och3
OCH
'och3 och3 ali je Rx-N-R2 skupaj eden od naslednjih ostankov:
o
A, B, D, E, F, G in X imajo zgoraj opisane pomene; t, u, v in w so neodvisno 0 ali 1;
A in B sta skupaj
-N
H
O
CH3 >CH3
— HN
ch3
CH3 — HN co 16
F in G sta skupaj
ch3
— HN
co 19
'N
R1R2N-CHX-CO in A sta skupaj
C(CH3)3 f/
CO ch3
R5 je vodik, metil, etil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, trifluoroizopropil, propil, izopropil ali
R6 je vodik, metil, etil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, trifluoroetil, trifluoroizopropil, propil, izopropil, terc.butil ali
N “CH-Ί
COOEt
CH(CH3)2
COOMe
COOBzl
CONH2
CON(CH3)2
CH(CH3)2
CONHBzl
CON(Bz1)2 CH(CH3)2
COOEt
CH(CH3)2
CH(CH3)2
^CH2 XCH2
'—( ''—(
COOEt COOMe
xch2 ^ch2
S^N S^N
CONHBzl CONH2
COOBzl
'tl s COOCH3 o COOCH3
\\ h ci.
NO2
COOCH3
ch3
- (CH2)
och3
och3
ch3
och3
och3
R5-N-CHR7-5-členski heteroaril so
R5-N-R6 so skupaj
-oc
-o
C(CH3)3
ch3
ch3
Ο ό Ο Ο Ο ΰ 1 I
CH(CH3)2 COOEt C(CH3)3 CHO
v
HN CH3
CH,
C(CH3)3
K je hidroksi, alkoksi (prednostno CM), fenoksi ali benzoksi delež.
Bolj prednostne so spojine, kjer imajo substituenti naslednje pomene.
R1 je etil, metil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, 2-fluoroizopropil, trifluoroizopropil, izopropil, propil, ciklopropil, benziloksikarbonil, metiloksikarbonil, laktil, metilaminosulfonil, tožil, ureil, mezil, N(CH3)2, amidino, metoksi, benzil, 4-fenoksibenzil, 4-benziloksibenzil ali 3,4,5-trimetoksibenzil
R2 je vodik, metil, etil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, izopropil, propil, butil, ciklopropil, formil, acetil, propionil, pivaloil, benzoil ali benzil,
R1-N-R2 sta skupaj
A, B, D, E, F, G in X imajo pomene, kot so opisani zgoraj; t, u, v in w so neodvisno 0 ali 1;
A in B sta skupaj
— ΗΝ
COCH3
F in G sta skupaj
C(CH3)3
C(CH3)3
C(CH3)3
CH3
C(CH3)3
-HN
coch3
E in F sta skupaj
R^N-CHK-CO in A sta skupaj
C(CH3)3
K je hidroksi, C^alkoksi ali benziloksi delež;
R5 je vodik, metil, etil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, propil, izopropil, ciklopropil, ciklopentil, cikloheksil, benzil, 4-fenoksibenzil, 4-benziloksibenzil ali 3,4,5trimetoksibenzil
R6 je vodik, metil, etil, 2-fluoroetil, 2,2-trifluoroetil, propil, izopropil, terc.butil, ciklopropil, ciklopentil, cikloheksil, benzil, 4-fenoksibenzil, 4-benziloksibenzil,
3,4,5-trimetoksibenzil, fenil, 4-fenoksifenil, 4-benziloksifenil, 3,4,5trimetoksifenil ali
N CF3
R5-N-CHR7-5-členski heteroaril je
R5-N-R6 skupaj so
Ti primeri ilustrirajo, vendar ne omejujejo obsega predloženega izuma.
Peptidi s formulo I so sestavljeni prednostno iz L-aminokislin, lahko pa vsebujejo eno ali več D-aminokislin.
Nove spojine so lahko prisotne kot soli s fiziološko sprejemljivimi kislinami, kot so klorovodikova, citronska, vinska, mlečna, fosforjeva, metansulfonska, ocetna, mravljinčna, maleinska, fumarna, jabolčna, jantarna, malonska, žveplova, L-glutaminska, L-aspartinska, pirogrozdova, sluzna, benzojska, glukuronska, oksalna, askorbinska kislina in acetilglicin.
Nove spojine lahko pripravimo po znanih postopkih peptidne kemije. Tako lahko peptide združimo zaporedoma iz amino kislin ali s povezovanjem ustreznih majhnih peptidnih fragmentov. Pri sekvenčnem združevanju, začenši pri C terminusu, raztegujemo peptidno verigo postopoma vsakokrat za eno amino kislino. Pri pripajanju fragmentov je mogoče, da skupaj povežemo fragmente različnih dolžin, po drugi strani pa lahko fragmente dobimo s sekvenčnim združevanjem iz amino kislin ali njih same s pripajanjem fragmentov.
Tako v sekvenčnem združevanju kot tudi v pripajanju fragmentov je potrebno, da povežemo enote s tvorbo amidne vezave. Za to so primerne encimatske in kemične metode.
Kemične metode za tvorbo amidne vezave so podrobno opisane v Muller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/2, str. 1 do 364, Thieme Verlag, Stuttbart, 1974; Stewart, Young, Solid Phase Peptide Synthesis, str. 31 do 34, 71 do 82, Pierce Chemical Company, Rockford, 1984; Bodanszky, Klausner, Ondetti, Peptide Synthesis, str. 85 do 128, John Wiley & Sons, New York, 1976, in drugih standardnih delih peptidne kemije. Posebno prednostna je azidna metoda, metoda simetričnih in mešanih anhidridov, in situ nastali ali predhodno nastali aktivni estri, uporaba uretansko zaščitenih N-karboksianhidridov amino kislin in tvorba amidne vezave ob uporabi pripajalnih sredstev (aktivatorji), zlasti kot so dicikloheksilkarbodiimid (DCC), diizopropilkarbodiimid (DIC), l-etoksikarbonil-2-etoksi-l,2-dihidrokinolin (EEDQ), l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid-hidroklorid (EDCI), n-propanfosfonski anhidrid (PPA), N,N-bis(2-okso-3-oksazolidinil)-midofosforilklorid (BOP-C1), bromo-tris-pirolidinofosfonijev heksa-fluorofosfat (PyBrop), difenilfosforilazid (DPPA), Castrov reagent (BOP, PyBop), O-benzotriazolil-N,N,N’,N’54 tetrametiluronijeve soli (HBTU), dietilfosforilcianid (DEPCN), 2,5-difenil-2,3dihidro-3-okso-4-hidroksitiofen-dioksid (Steglichov reagent;: HOTDO) in 1,1’karbonildiimidazol (CDI). Pripajalna sredstva lahko uporabimo sama ali v kombinaciji z dodatki, kot so N,N-dimetil-4-aminopiridin (DMAP), N-hidroksibenzotriazol (HOBt), N-hidroksibenzotriazin (HOOBt), N-hidroksisukcinimid (HOSu) ali 2-hidroksipiridin.
Normalno je mogoče, da ne potrebujemo zaščitnih skupin v encimatski peptidni sintezi, reverzibilna zaščita reaktivnih skupin, ki niso vpletene v tvorbo amidne povezave, pa je potrebna za oba reaktanta v kemični sintezi. Za kemično peptidno sintezo so prednostne tri običajne tehnike zaščitnih skupin: benziloksi karbonilna (Z), t-butoksikarbonilna (Boc) in 9-fluorenilmetoksikarbonilna (Fmoc) tehnika. V vsakem primeru je identificirana zaščitna skupina na α-amino skupini enote, ki razteguje verigo. Podroben pregled zaščitnih skupin za amino kisline je podan v Muller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/1, str. 20 do 906, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974. Enote, uporabljene za združevanje peptidne verige, lahko reagirajo v raztopini, suspenziji ali po metodi, ki je podobna metodi opisani v Merrifield v J. Amer. Chem. Soc. 85 (1963) 2149. Posebno prednostne metode so tiste, v katerih so peptidi združeni sekvenčno ali s fragmentnim pripajanjem ob uporabi tehnike Z Boc ali Fmoc zaščitne skupine, pri čemer je eden od reaktantov pri tej Merrifieldovi tehniki vezan na netopen polimerni nosilec (v nadaljevanju imenovan tudi smola). To tipično povzroči, da se peptid združi sekvenčno na polimernem nosilcu ob uporabi tehnike Boc ali Fmoc zaščitne skupine, pri čemer je rastoča peptidna veriga kovalentno vezana pri C terminusu na netopne smolne delce (prim. sl. 1 in 2). Ta postopek omogoča, da odstranimo reagente in stranske produkte s filtriranjem in tako ni potrebna prekristalizacija intermediatov.
Zaščitene amino kisline lahko vežemo na katerekoli primerne polimere, ki morajo biti samo netopni v uporabljenih topilih in imeti stabilno fizikalno obliko, ki naredi filtracijo lahko. Polimer mora vsebovati funkcionalno skupino, na katero se lahko prva zaščitena amino kislina trdno veže s kovalentno vezjo. Za ta namen so primerni zelo številni polimeri, npr. celuloza, polivinilalkohol, polimetakrilat, sulfoniran polistiren, klorometiliran stirenski/divinilbenzenski kopolimer (Merrifieldova smola), 4-metilbenzhidrilaminska smola (MBHA-smola), fenilacetamidometil-smola (Pamsmola), p-benziloksi-benzil-alkohol-smola, benzhidril-amin-smola (BHA-smola), 4-(hidroksimetil)benzoiloksi-metil-smola, smola Breipohla et al. (Tetrahedron Letters 28 (1987) 565; dobavlja BACHEM), 4-(2,4-dimetoksifenilaminometil)fenoksi55 smola (dobavlja Novabiochem) ali o-klorotritil-smola (dobavlja Biohellas).
Za peptidno sintezo v raztopini so primerna vsa topila, ki so inertna ob reakcijskih pogojih, zlasti voda, Ν,Ν-dimetilformamid (DMF), dimetilsulfoksid (DMSO), acetonitril, diklorometan (DCM), 1,4-dioksan, tetrahidrofuran (THF), N-metil-2pirolidon (NMP) in zmesi teh topil. Peptidno sintezo na polimernem nosilcu lahko izvedemo v vseh organskih topilih, v katerih so uporabljeni amino kislinski derivati topni; vendar imajo prednostna topila dodatno lastnosti nabrekanja smole, kot je DMF, DCM, NMP, acetonitril in DMSO in zmesi teh topil. Po končani sintezi peptid odcepimo od polimernega nosilca. Pogoji, pod katerimi je možna odcepitev različnih smolnih tipov, so opisani v literaturi. Najbolj uporabljane cepitvene reakcije so kislinsko in s paladijem katalizirane reakcije, zlasti cepitev v tekočem brezvodnem hidrogen fluoridu, v brezvodni trifluorometansulfonski kislini, v razredčeni ali koncentrirani trifluorocetni kislini, s paladijem katalizirana cepitev v THF ali zmeseh THF-DCM v prisotnosti šibke baze, kot morfolina, ali cepitev v zmeseh ocetne kisline/diklorometana/trifluoroetanola. Glede na izbrane zaščitne skupine le-te lahko zadržimo ali prav tako odcepimo ob pogojih cepitve. Delna deprotekcija peptida se lahko tudi splača, kadar je treba izvesti nekatere derivirne reakcije. Peptide, dialkilirane pri N-terminusu, lahko pripravimo bodisi s pripajanjem na primerne Ν,Ν-dialkilamino kisline v raztopini ali na polimeren nosilec ali z reduktivnim alkiliranjem smolno vezanega peptida v DMF/1 % ocetni kislini z NaCNBH3 in primernimi aldehidi. Različne amino kisline, ki ne nastopajo v naravi, kot tudi različne ne-amino kislinske dele, ki so opisani tukaj, lahko dobimo iz tržnih virov ali sintetiziramo iz tržno dostopnih materialov ob uporabi znanih postopkov. Npr. bloke, ki tvorijo amino kisline, z deli R1 in R2, lahko pripravimo po E. Wunsch, Houben Weyl, Meth. d. Org. Chemie, Bd. XV, 1, str. 306 in dalje, Thieme Verlag Stuttgart 1974, in v tam citirani literaturi. Peptide z γ- ali S-laktamskimi mostovi lahko pripravimo z vdelavo ustrezno laktamsko premoščenih dipeptidnih enot (R. Freidinger, J. Org. Chem. (1982) 104-109) v peptidno verigo. Peptide z bloki, ki gradijo tiazol, oksazol, tiazolin ali oksazolin vsebujoči dipeptid, lahko pripravimo z vdelavo ustreznih dipeptidnih enot. (P. Jouin et al., Tetrahedron Letters (1992), 2807-2810; P. Wipf et al., Tetrahedron Letters (1992), 907-910; W.R. Tully, J. Med. Chem. (1991), 2065; Synthesis (1987), 235) v peptidno verigo.
Spojine v smislu predloženega izuma lahko uporabimo za inhibiranje ali siceršnje tretiranje trdnih tumorjev (npr. tumorjev v pljučih, na prsih, v debelem črevesu, na prostati, v mehurju, v rektumu ali endometrijskih tumorjev) ali hematoloških malignosti (npr. kot so levkemije, limfomi) z dajanjem spojine sesalcu. Dajemo lahko na katerikoli način, ki je običajen za farmacevtska, prednostno onkološka sredstva, vključno oralni in parenteralni način, kot subkutano, intravensko, intramuskularno in intraperitonealno. Spojine lahko dajemo same ali v obliki farmacevtskih sestavkov, ki vsebujejo spojino s formulo I skupaj s farmacevtsko sprejemljivim nosilcem, primernim za želeni način dajanja. Taki farmacevtski sestavki so lahko kombinacijski produkti, t.j. lahko tudi vsebujejo druge terapevtsko aktivne sestavine.
Doziranje, ki ga naj dajemo sesalcu, bo vsebovalo učinkovito, tumor inhibirajočo količino aktivne sestavine, ki bo odvisna od običajnih faktorjev, ki vključujejo biološko aktivnost posamezne uporabljene spojine; način dajanja; starost, zdravje in telesno težo prejemnika; naravo in obseg simptomov, pogostnost tretiranja; dajanje drugih terapij; in želeni učinek. Tipična dnevna doza bo okoli 5 do 250 mg na kg telesne teže pri oralnem dajanju in okoli 1 do 100 mg na kg telesne teže pri parenteralnem dajanju.
Nove spojine lahko dajemo v običajnih trdnih ali tekočih farmacevtskih dajalnih oblikah, npr. nepreslojene ali s filmom preslojene tablete, kapsule, praške, granule, supozitorije ali raztopine. Izdelamo jih na običajen način. Aktivne snovi lahko za ta namen predelamo z običajnimi farmacevtskimi pomožnimi snovmi, kot so tabletna veziva, polnila, konzervirna sredstva, tabletna razpadna sredstva, regulatorji tečenja, mehčala, omočila, dispergima sredstva, emulgatoiji, topila, sestavki z upočasnjenim sproščanjem, antioksidanti in/ali poganjalni plini (prim. H. Sucker et al.: Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Dajalne oblike, dobljene na ta način, normalno vsebujejo 1-90 mas.% aktivne snovi.
Naslednji primeri so mišljeni za ilustracijo izuma. Proteinogene amino kisline so okrajšane v primerih ob uporabi znane kode s tremi črkami. Drugi pomeni so: TFA = trifluoroocetna kislina, Ac = ocetna kislina, Bu = butil, Et = etil, Me = metil, Bzl = benzil.
A. Splošni postopki
I. Peptide po zahtevku 1 bodisi sintetiziramo s klasično raztopinsko sintezo ob uporabi standardne Z- in Boc-metodologije, kot je opisano zgoraj, ali standardnimi metodami sinteze v trdni fazi na kompletno avtomatskem sintetizerju, model 431 A, ki ga dobavlja APPLIED BIOSYSTEMS. Aparat uporablja različne sintetske cikle za tehnike Boc in Fmoc zaščitne skupine.
a) Sintetični cikel za tehniko Boc zaščitne skupine
1.
2.
3.
4.
5.
6. 7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16. 17.
%-na trifluoroocetna kislina v DCM 50 %-na trifluoroocetna kislina v DCM DCM izpiranje %-ni diizopropiletilamin v DCM 5 %-ni diizopropiletilamin v NMP NMP izpiranje
Dodatek pred-aktivirane zaščitene amino kisline (aktiviranje z 1 ekvivalentom DCC in 1 ekvivalentom HOBt v NMP/DCM);
peptidno pripajanje (1 del)
Dodatek DMS k reakcijski zmesi, dokler ne vsebuje 20 vol.% DMSO peptidno pripajanje (2. del)
Dodatek 3,8 ekvivalentov diizopropiletilamina k reakcijski zmesi Peptidno pripajanje (3. del)
DCM izpiranje če je konverzija nepopolna, ponavljanje pripajanja (nazaj k 5.) %-ni acetanhidrid, %-ni diizopropiletilamin v DCM 10 %-ni acetanhidrid v DCM DCM izpiranje nazaj k 1.
1x3 min 1x1 min 5x1 min 1x1 min 1x1 min 5x1 min x 30 min x 16 min
1x7 min 3x1 min
1x2 min 1x4 min 4x1 min
ΒΟΡ-Cl in PyBrop uporabimo kot reagente za pripajanje amino kisline po N-metilamino kislinah. Reakcijski časi so bili ustrezno povečani. V raztopinski sintezi je uporaba bodisi Boc-zaščitenih amino kislinskih NCA (N-terc.butiloksikarbonil) amino kislinskih-N-karboksi anhidridov) ali Z-zaščitenih amino kislinskih NCA (Nbenziloksikarbonil-aminokislinskih-N-karboksianhidridov) najbolj prednostna za ta tip pripajanja.
b)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Ί.
8.
9.
10,
Sintetični cikel za tehniko Fmoc zaščitne skupine
DMF izpiranje 1x1 min %-ni piperidin v DMF 1x4 min %-ni piperidin v DMF 1 x 16 min
DMF izpiranje 5x1 min
Dodatek pred-aktivirane zaščitene amino kisline (aktivirane z 1 ekvivalentom TBTU in 1,5 ekvivalenti DIPEA v DMF); peptidno pripajanje 1 x 61 min
DMF izpiranje 3x1 min če je konverzija nepopolna, ponavljanje pripajanja (nazaj k 5.) %-ni acetanhidrid v DMF 1x8 min
DMF izpiranje 3x1 min nazaj k 2.
ΒΟΡ-Cl in PyBrop uporabimo kot reagenta za pripajanje na amino kislino po N-metilamino kislinah. Reakcijski časi so bili ustrezno povečani.
II. Reduktivno alkiliranje N-terminusa
Peptid-smolo, pripravljeno kot v Ala ali Alb, deprotektiramo pri N-terminusu (stopnje 2-4 v Alb ali 1-6 v Ala) in nato presnovimo s 3-kratnim molskim prebitkom aldehida ali ketona v DMF/1 %-ni ocetni kislini z dodatkom 3 ekvivalentov NaCNBH3. Po končani reakciji (negativni Kaiserjev test) smolo izperemo večkrat z vodo, izopropanolom, DMF in diklorometanom.
III. Obdelava peptida-smol, dobljenih kot v Ia in II
Peptid-smolo sušimo pod zmanjšanim tlakom in prenesemo v reakcijsko posodo TEFLON HF aparata (dobavlja PENINSULA). Po dodatku odstranjevalnega sredstva, prednostno anizola (1 mg/g smole) in v primeru triptofan vsebujočih peptidov tiola, da odstranimo indolno formilno skupino, prednostno etanditiola (0,5 ml/g smole), sledi kondenziranje v hidrogenfluoridu (10 ml/g smole) ob hlajenju s tekočim N2. Zmes pustimo segreti na 0 °C in mešamo pri tej temperaturi 45 minut. Hidrogenfluorid nato odstranimo pod zmanjšanim tlakom in ostanek izperemo z etil acetatom, da odstranimo preostalo odstranjevalno sredstvo. Peptid ekstrahiramo z ocetno kislino z jakostjo 30 % in filtriramo ter filtrat liofiliziramo.
IV. Obdelava peptida-smol, dobljenih kot v Ib in II.
Peptid-smolo posušimo pod zmanjšanim tlakom in nato podvržemo enemu od naslednjih postopkov cepitve glede na sestavo amino kisline (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melbourne 1985).
Pogoji cepitve
TFA Odstranjevalno sredstvo reakcijski čas
95% 5 % H2O 1,5 h
95% 5 % etanditiol/anizol (1:3) 1,5 h
Suspenzijo peptida-smole v primerni TFA zmesi mešamo pri sobni temperaturi navedeni čas, nato smolo odfiltriramo in izperemo s TFA in DCM. Filtrat in izpiralne tekočine koncentriramo in peptid oborimo z dodatkom dietil etra. Po ohlajenju na kopeli ledu oborino odfiltriramo, prevzamemo v 30 %-ni ocetni kislini in liofiliziramo.
V. Kadar uporabimo o-klorotritil-smolo (dobavlja Biohellas), mešamo suspenzijo peptida-smole v zmesi ocetne kisline/trifluoroetanola/diklorometana (1:1:3) pri sobni temperaturi 1 uro. Smolo nato odfiltriramo z odsesanjem in temeljito izperemo s cepitveno raztopino. Združene filtrate koncentriramo v vakuumu in obdelamo z vodo. Oborjeno trdno snov odstranimo s filtriranjem ali centrifugiranjem, izperemo z dietiletrom in posušimo pod zmanjšanim tlakom.
VI. Čiščenje in okarakteriziranje peptidov
Čiščenje izvedemo z gelno kromatografijo (SEPHADEX G-10, G-15/10 % HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH) z ali brez sledeče srednje tlačne kromatografije (stacionarna faza: HD-SIL C-18, 20-45 μ-m, 10 nm; mobilna faza: gradient z A = 0,1 % TFA/MeOH, B = 0,1 % TFA/H2O).
Čistoto dobljenih produktov določimo z analitsko HPLC (stacionarna faza: 100 2,1 mm VYDAC C-18, 5 1, 30 nm; mobilna faza: CH3CN/H2O gradient, zapufrano z 0,1 % TFA, 40 °C).
Karakterizirali smo z aminokislinsko analizo in masno spektroskopijo z bombardiranjem s hitrimi atomi.
B. Specifični postopki
PRIMER 1 (SEQ ID No: 1)
N,N-dimetil-Val-Val-N-metil-Val-Pro-Pro-Val-Phe-NH2
1,98 g Fmoc-RINK-smole (substitucija 0,46 mmolov g), ki ustreza velikosti šarže 0,84 mmolov, presnovimo kot v Alb z vsakokrat 1,26 mmoli
Fmoc-Phe-OH
Fmoc-Val-OH
Fmoc-Pro-OH
Fmoc-Pro-OH
Fmoc-N-metil-Val-OH
Fmoc-Val-OH
Fmoc-Val-OH
Amino kislino po N-metilamino kislini pripajamo s PyBrop kot pripajalnim reagentom. Po končanih iterativnih sintetičnih ciklih izvedemo pri peptidu-smoli N-terminalno odstranitev zaščite (stopnja 2-4 v Alb) in nadalje presnavljamo z vodno formaldehidno raztopino kot v Ali ter nato posušimo pod zmanjšanim tlakom. Dobljeno smolo podvržemo TFA cepitvi kot v AIV. Surov produkt (590 mg) čistimo z gelno filtracijo (SEPHADEX-LH-20). Dobitek je 295 mg.
PRIMER 2 (SEQ ID NO: 2)
N,N-dimetil-Val-Val-N-Me-Val-Pro
4,11 g Fmoc-Pro-p-alkoksibenzil-alkohola-smole (substitucija 0,73 mmolov/g), ki ustreza velikosti šarže 3 mmolov, presnovimo kot v Alb z vsakokrat 4,5 mmoli
Fmoc-N-Me V al-OH
Fmoc-Val-OH
Fmoc-Val-OH.
Amino kislino po N-metilamino kislini v tem primeru presnovimo z dvojnim pripajanjera ob uporabi PyBrop ali Βορ-Cl s povečanimi reakcijskimi časi. Po končani sintezi podvržemo peptid-smolo N-terminalni odstranitvi zaščite (stopnja 2-4 v Alb) in nadalje presnavljamo z vodno formaldehidno raztopino kot v AII ter nato posušimo pod zmanjšanim tlakom. Smolo, dobljeno na ta način, podvržemo TFA cepitvi kot v AIV. Surov produkt (750 mg) uporabimo direktno za naslednje pripajanje. 100 mg te spojine presnavljamo s 45 mg (S)-2-[l-amino-2-feniletil]tiazola in 230 mg PyBop z dodatkom 192 μλ DIPEA v DMF pri sobni temperaturi 2 dni. Reakcijsko zmes čistimo z gelno kromatografijo (Sephadex LH-20, metanol) in združimo produktne frakcije. Dobimo 83 mg produkta.
Naslednje spojine smo pripravili in jih lahko pripravimo po primerih 1 in 2:
3. Xaa Val Xan Pro Pro Val Phe 24. Xaa Xai Xan Pro Pro Val Phe-NH2
4. Xaa Val Xan Pro Pro Val xac 25. Xaa Leu Xan Pro Pro Val Phe-NH2
5. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xad 26. Xar Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
6. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xae 27. Xas Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
7. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xaf 28. Xat Val Xan Pro Pro val Phe-NH2
8. Xaa Val Xan Pro Pro Val His-NH2 29. Xau Val Xan Pro xal Val Phe-NH2
9. Xbo Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2 30. Xav Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
10. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xag-NH2 31. Xan Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
11. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xah
12 . Xaa Xbe Xan Pro Pro Val Trp-NH2
13. Xaa Val Xan Pro Pro xai Phe-NH2
14. Xae Val Xan Pro Pro Ile Phe-NH2
15. Xaa Val Xan Pro Xal Val Phe-NH2
16. Xaa Val Xan Pro Xak Val Phe-NH2
17. Xaa Val Xan Xak Pro Val Phe-NH2
18. Xaa Val Xan Xal Pro Val Phe-NH2
19. Xaa Val Xao Pro Pro Val Phe-NH2
20. Xaa Val Xam Pro Pro Val Phe-NH2
21. Xaa Xap Pro Pro Val Phe- -nh2
22. Xaa Xaq Pro Pro Val Phe- -nh2
23 . Xaa Ile Xan Pro Pro Val Phe-NH2
32 . Xaw Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
33 . Xax Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
34. Xaa Val Xan Pro Pro Phe Phe-NH2
35. Xaz Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
36. Xba Val Xan Pro Pro Val Phe-NH2
37. xaa Val Xan Pro Pro Val-NH2
38. Xaa Val Xan Pro Xbb
39. Xaa Val Xan Pro Xbc
40. Xaa Val Xan Pro Pro Xbd
41. Xax Val Xan Pro Pro Val-NH2
42. Xaw Val Xan Pro Pro Val-NH2
43. Xat Val Xan Pro Pro Val-NH2
44 . Xaa Xai Xan Pro Pro Val-NH2
45. Xaa Val Xan Pro Pro Xai-NH2
46. Xaa Val Xan Xak Pro Val-NH2
47. Xaa Val Xan Pro Xak Val-NH2
48. Xaa Val Xan Pro Pro Val
49. Xav Val Xan Pro Pro Val-NH2
50. Xaa Val Xan Pro Pro-NH2
51. Xaa Val Xan Pro Pro
52. Xaa Val Xan Pro Xbf
53. Xaa Val Xan Xbb
54. Xaa Val Xan Xbc
55. Xaa Val Xan Xbg
56. Xaa Val Xan Xbh
57. Xaa Val Xan Xbi
58. Xaa Val Xan Xbk
59. Xaa Val Xan Xbl
60. Xaa Val Xan Xbm
61. Xaa Val Xan Xbn
62 . Xax Val Xan Pro Pro-NH2
63. Xaw Val Xan Pro Pro-NH2
64. Xbo Val Xan Pro Pro-NH2
65. Xat Val Xan Pro Pro-NH2
66. Xaa Xai Xan Pro Pro-NH2
67. Xat Xai Xan Pro Pro-NH2
68. Xaa Xap Pro Pro- -nh2
69. Xaa Xag Pro Pro- -nh2
70. Xav Val Xan Pro Pro-NH2
71. Xaa Xap Pro- -nh2
72 . Xaa Xaq Pro- -nh2
73 . Xaa Val Xan Pro
74. Xaa Val Xbp
75. Xaa Val Xbq
76. Xaa Val Xbr
77 . Xaa Val Xbs
78. Xaa Val Xan Xbf
79 . Xaa Val xbt
80. Xaa Val Xbu
81. Xaa Val Xbv
82. Xaa Val Xbw
83 . Xax Val Xan Pro- -nh2
84. Xbo Val Xan Pro- -nh2
85. Xav Val Xan Pro- -nh2
86. Xaa Val Xan Pro Xbn
87. Xaa Val Xan Pro Xbg
88. Xaa Val Xan Pro Xbi
89. Xaa Val Xan Pro Xbl
90. Xbo Val Xan Pro Xbg
91. Xbo Val Xan Pro Xbl
92. Xbo Xbe Xan Pro Xbg
93. Xaa val Xan Pro Xbx
94. Xaa Xbe Xan Pro Pro- -nh2
95. Xby Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
96. Xed Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
97. Xee Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
98. Xef Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
99. Xbz Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
100. Xeg Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
101. Xca Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
102. Xcb Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
103. Xcb Val Xao Pro Pro Val Phe nh2
104. Xcc val Xan Pro Pro Val Phe nh2
105. Xce val Xan Pro Pro Val Phe nh2
107. Xcg Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
108. Xch Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
109. Xci Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
110. Xck Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
111. Xcl Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
112. Xcm Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
113. Xcn Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
114. Xhn Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
115. Xho Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
116. Xhp val Xan Pro Pro Val Phe nh2
117. Xhq Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
118. Xby Val Xan Pro Pro Val nh2
119. Xed Val Xan Pro Pro Val nh2
120. Xee Val Xan Pro Pro Val nh2
121. Xef Val Xan Pro Pro Val nh2
122. Xbz Val Xan Pro Pro val nh2
123. Xeg Val Xan Pro Pro Val nh2
124. Xca Val Xan Pro Pro Val nh2
125. Xcb val Xan Pro Pro Val nh2
126. Xcc Val Xan Pro Pro Val nh2
127. Xce Val Xan Pro Pro Val nh2
12 8. Xcg Val Xan Pro Pro Val nh2
12 9. Xch Val Xan Pro Pro Val nh2
13 0. Xci Val Xan Pro Pro Val nh2
131. Xck Val Xan Pro Pro Val nh2
132. Xcl Val Xan Pro Pro Val nh2
133. Xcm Val Xan Pro Pro Val nh2
134. Xcn Val Xan Pro Pro Val nh2
13 5. Xhn Val Xan Pro Pro Val nh2
13 6. Xho Val Xan Pro Pro Val nh2
13 7. Xhp Val Xan Pro Pro Val nh2
13 8. Xhq Val Xan Pro Pro Val nh2
13 9. Xby Val Xan Pro Pro nh2
14 0. Xed Val Xan Pro Pro nh2
141. Xee Val Xan Pro Pro nh2
142. Xef Val Xan Pro Pro nh2
143. Xbz Val Xan Pro Pro nh2
144. Xeg Val Xan Pro Pro nh2
145. xca Val Xan Pro Pro nh2
146. Xcb Val Xan Pro Pro nh2
147. Xcc Val Xan Pro Pro nh2
148. Xce Val Xan Pro Pro nh2
149. Xcg Val Xan Pro Pro nh2
150. Xch Val Xan Pro Pro nh2
151. Xci Val Xan Pro Pro nh2
152. Xck Val Xan Pro Pro nh2
153. Xcl Val Xan Pro Pro nh2
154. Xcm Val Xan Pro Pro nh2
155. Xcn Val Xan Pro Pro nh2
156. Xhn Val Xan Pro Pro nh2
157. Xho Val Xan Pro Pro nh2
158. Xhp Val Xan Pro Pro nh2
159. Xhq Val Xan Pro Pro nh2
160. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xei
161. Xaa val Xan Pro Pro Val Xem
162. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xeo
163 . Xaa Val Xan Pro Pro Val Xep
164. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xeq
165. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xex
166. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xey
167. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xfb
168. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xfe
169. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xfh
170. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xfu
171. xaa Val Xan Pro Pro Val Xfv
172 . Xaa Val Xan Pro Pro Val Xf t
173. Xaa Val Xan Pro Pro Val xfw
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xfx
Xaa Val Xan Pro Pro Val xga
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgd
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgg
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgh
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgi
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgl
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgs
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xgv
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xhe
Xaa Val Xan Pro Pro Val xgy
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xhd
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xht>
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xhc
Xaa Val Xan Pro Pro Val Xhl
Xaa Val Xan Pro Pro Xeh
Xaa val Xan Pro Pro Xen
Xaa Val Xan Pro Pro Xeo
Xaa Val Xan Pro Pro Xep
Xaa Val Xan Pro Pro Xeg
Xaa Val Xan Pro Pro Xer
Xaa Val Xan Pro Pro Xet
Xaa Val Xan Pro Pro Xeu
Xaa Val Xan Pro Pro Xes
Xaa Val Xan Pro Pro Xew
Xaa Val Xan Pro Pro Xez
Xaa Val Xan Pro Pro Xfc
Xaa Val Xan Pro Pro Xff
Xaa Val Xan Pro Pro Xfi
Xaa Val Xan Pro Pro Xf S
Xaa Val Xan Pro Pro Xf z
Xaa Val Xan Pro Pro Xgc
Xaa Val Xan Pro Pro Xgf
Xaa Val Xan Pro Pro Xgm
Xaa Val Xan Pro Pro Xgr
Xaa Val Xan Pro Pro Xgu
Xaa Val Xan Pro Pro Xgs
Xaa Val Xan Pro Pro Xgx
Xaa Val Xan Pro Pro Xha
Xaa Val Xan Pro Pro Xhk
Xaa Val Xan Pro Xek
Xaa Val Xan Pro Xen
Xaa Val Xan Pro Xer
Xaa Val Xan Pro Xep
Xaa Val Xan Pro Xeq
Xaa Val Xan Pro Xer
Xaa Val Xan Pro Xet
221. Xaa Val Xan Pro Xeu
222. xaa Val Xan Pro Xes
223 . Xaa Val Xan Pro Xfa
224. Xaa Val Xan Pro Xfd
22 5. Xaa Val Xan Pro Xfg
226. Xaa Val Xan Pro Xfl
227. Xaa Val Xan Pro Xfk
22 8. Xaa Val Xan Pro Xfm
22 9. Xaa Val Xan Pro Xfn
23 0. Xaa Val Xan Pro Xfo
231. Xaa Val Xan Pro Xfp
232. Xaa Val Xan Pro Xfq
233 . Xaa val Xan Pro Xfr
234. Xaa Val Xan Pro Xfy
23 5. Xaa Val Xan Pro Xgb
23 6. Xaa Val Xan Pro Xge
237. Xaa Val Xan Pro Xgk
23 8. Xaa Val Xan Pro Xgn
239. Xaa Val Xan Pro Xhi
240. Xaa Val Xan Pro Xgo
241. Xaa Val Xan Pro xgp
242. Xaa Val Xan Pro xgq
243. Xaa Val Xan Pro Xgt
244. Xaa Val Xan Pro Xgw
245. Xaa Val Xan Pro Xgz
24 6. Xaa Val Xan Pro Xhm
247. Xaa XCO Pro Pro Val Phe nh2
24 8. Xaa Xcp Pro Pro Val Phe nh2
249. Xaa Xcq Pro Pro Val Phe nh2
250. Xaa Xcr Pro Pro Val Phe nh2
251. Xaa Xcs Pro Pro Val Phe nh2
252. Xaa Xct Pro Pro Val Phe nh2
253. Xaa Xcu Pro Pro Val Phe nh2
254. Xaa Xcw Pro Pro Val Phe nh2
255. Xaa Xcv Pro Pro Val Phe nh2
256. Xaa Xcx Pro Pro Val Phe nh2
257. Xaa Xcy Pro Pro Val Phe nh2
258. Xaa Xda Pro Pro Val Phe nh2
259. Xaa Xdb Pro Pro Val Phe nh2
260. Xaa Xdc Pro Pro Val Phe nh2
261. Xaa Xdd Pro Pro Val Phe nh2
262. Xaa Xdf Pro Pro Val Phe nh2
263. Xaa Xdg Pro Pre > Val Phe nh2
264. Xaa . Xdh . Pro Pre , Val Phe nh2
265. Xaa . Xco Pro Pre > Val nh2
266. Xaa . Xcp > Pro ' Pre > val nh2
267. Xaa . Xcq ; Pre ' Pre > val nh2
268. Xaa Xcr Pro Pro Val NH2
269.Xaa Xcs Pro Pro Val nh2
270. Xaa xct Pro Pro Val nh2
271. Xaa Xcu Pro Pro Val nh2
272. Xaa Xcw Pro Pro Val nh2
273. Xaa Xcv Pro Pro Val nh2
274. Xaa Xcx Pro Pro Val nh2
275. Xaa Xcy Pro Pro Val nh2
276.Xaa Xcz Pro Pro Val nh2
277. xaa Xda Pro Pro Val nh2
278. Xaa Xdb Pro Pro Val nh2
27 9. Xaa Xdc Pro Pro Val nh2
280. Xaa Xde Pro Pro Val nh2
281.Xaa Xdf Pro Pro Val nh2
282. Xaa Xdg Pro Pro Val nh2
283. Xaa Xdh Pro Pro Val nh2
284. Xaa Xco Pro Pro nh2
285.Xaa Xcp Pro Pro nh2
286. Xaa Xcq Pro Pro nh2
287. Xaa Xcr Pro Pro nh2
288. Xaa Xcs Pro Pro nh2
289. Xaa Xct Pro Pro nh2
290. Xaa Xcu Pro Pro nh2
291. Xaa Xcw Pro Pro nh2
292. Xaa Xcv Pro Pro nh2
293 . Xaa Xcx Pro Pro nh2
294. Xaa Xcy Pro Pro nh2
295.Xaa Xcz Pro Pro nh2
296.Xaa Xda Pro Pro nh2
297. Xaa Xdb Pro Pro nh2
298. Xaa Xdc Pro Pro nh2
299. Xaa Xdd Pro Pro nh2
300. Xaa xdf Pro Pro nh2
301. Xaa Xdg Pro Pro nh2
302.Xaa Xdh Pro Pro nh2
303. Xds Xan Pro Pro Val Phe nh2
304. Xdt Xan Pro Pro Val Phe nh2
305. Xdu Xan Pro Pro Val Phe nh2
306. Xdv Xan Pro Pro Val Phe nh2
3 07. Xdw Xan Pro Pro Val Phe nh2
308. Xdx Xan Pro Pro Val Phe nh2
3 09. Xdy Xan Pro Pro Val Phe nh2
310. Xdz Xan Pro Pro Val Phe nh2
311. Xea Xan Pro Pro Val Phe nh2
312.Xeb Xan Pro Pro Val Phe nh2
313. Xec Xan Pro Pro Val Phe nh2
314. Xds Xan Pro Pro Val nh2
315. Xdt Xan Pro Pro Val nh2
316. Xdu Xan Pro Pro Val nh2
317. Xdv Xan Pro Pro Val nh2
318. Xdw Xan Pro Pro Val nh2
319. Xdx Xan Pro Pro Val nh2
32 0. Xdy Xan Pro Pro Val nh2
321. Xdz Xan Pro Pro val nh2
322. Xea Xan Pro Pro val nh2
32 3. Xeb Xan Pro Pro Val nh2
324. Xec Xan Pro Pro Val nh2
32 5. Xds Xan Pro Pro nh2
32 6. Xdt Xan Pro Pro nh2
327. Xdu Xan Pro Pro nh2
32 8. Xdv Xan Pro Pro nh2
32 9. Xdw Xan Pro Pro nh2
33 0. Xdx Xan Pro Pro nh2
331. Xdy Xan Pro Pro nh2
332. Xdz Xan Pro Pro nh2
333. Xea Xan Pro Pro nh2
334. Xeb Xan Pro Pro nh2
335.Xec Xan Pro Pro nh2
33 6. Xds Val Pro Pro val Phe NH2
337.Xds Val Pro Pro nh2
33 8. Xdv Val Pro Pro nh2
9. Xds Xan Pro Xfy 340. Xdv Xan Pro Xfy
341.Xaa Val Xhf Pro Pro Val Phe nh2
342. Xaa Val Xhg Pro Pro Val Phe nh2
343. Xaa Val Xhh Pro Pro Val Phe nh2
344. Xaa Val Xhf Pro Pro Val nh2
34 5. Xaa Val Xhg Pro Pro Val nh2
34 6. Xaa Val Xhh Pro Pro Val NH2
347. Xaa Val Xhf Pro Pro nh2
348. Xaa Val Xhg Pro Pro nh2
349. Xaa Val Xhh Pro Pro nh2
350. Xaa Val Xhf Pro Xfy
351. Xaa Val Xhg Pro Xfy
352. Xaa Val Xhh Pro Xfy
353. Xaa Val Xhf Pro Xgb
354. Xaa Val Xhg Pro Xgb
355.Xaa Val Xhh Pro Xgb
356.Xed Val Xan Pro Xfy
357. Xby Val Xan Pro Xfy
358. Xby Val Xan Pro Xhi
359. Xef Val Xan Pro Xfy
360.Xef Val Xan Pro Xhi
361. Xca Val Xan Pro Xfy
362. Xca Val Xan Pro Xhi
363. Xaa Val Xan Pro xdp Phe nh2
364. Xaa Val Xan Pro Xdq Phe nh2
365. Xaa Val Xan Pro Xdr Phe nh2
366. Xaa Val Xan Pro Xdp nh2
367. Xaa Val Xan Pro Xdq nh2
368. Xaa Val Xan Pro Xdr nh2
369. Xaa Val Xan Pro Pro Xdi nh2
370. Xaa Val Xan Pro Pro xcs nh2
371. Xaa Val Xan Pro Pro XCt nh2
372. Xaa Val Xan Pro Pro Xcu nh2
373. Xaa Xcs Pro Pro Xdi nh2
374. Xaa Xct Pro Pro Xdi nh2
375. Xaa Xcs Pro Xdp Phe nh2
376. Xaa Xct Pro Xdp Phe nh2
377. Xaa Xcs Pro Xdp nh2
378. Xaa XCt Pro Xdp nh2
379. Xaa Xcs Pro Xdq nh2
380. Xaa xct Pro Xdq nh2
381. Xaa Xcs Pro Xdr nh2
382. Xaa xct Pro Xdr nh2
383. Xaa Val Xan Pro Pro Xdi nh2
384. Xaa Val Xan Pro Pro xdk nh2
385. Xaa Val Xan Pro Pro Xdl nh2
386. Xaa Val Xan Pro Pro xdm nh2
387. Xaa val Xan Pro Pro Xdn nh2
388. Xaa Val Xan Pro Pro Xdo nh2
389. Xca Val Xan Pro Pro Phe Phe nh2
390 . Xby Val Xan Pro Pro Phe Phe nh2
391. Xca Val Xan Pro Pro Phe Phe nh2
392 . Xef Val Xhf Pro Pro tLeu Phe NH2
393. Xef Val Xhf Pro Pro tLeu Aic nh2
394. Xef Val xhf Pro Pro tLeu Tic NH2
395. Xef Val Xan Pro Xfy
396. Xef Val Xan Pro Xbg
397. xef val Xan Pro Xbh
398. Xef Val Xan Pro Xgn
399. xca xct Pro xfy
400. Xaa tLeu Xan Pro Pro Val Phe NH2
401. Xaa Leu Xan Pro Pro val Phe NH2
402. Xaa Ile Xan Pro Pro Val Phe nh2
403. Xaa Val xan Pro Pro tLeu Phe NH2
404. xaa Val xan Pro Pro Leu Phe nh2
405. Xaa Val Xan Pro Pro Ile Phe nh2
406. Xaa Val Xan Pro Pro Val Dab nh2
407 . xaa Val Xan Pro Pro Val Ala nh2
408. Xaa Dab Xan Pro Pro Val Phe nh2
409. Xaa Dab Xan Pro Pro Val nh2
410. Xaa Dab Xan Pro Pro nh2
411. Xht Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
412 . Xhu Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
413 . Xht Val Xan Pro Pro Val nh2
413(a). Xhu Val Xan Pro Pro Val NH2
414. Xht Val Xan Pro Pro nh2
415. Xhu Val Xan Pro Pro nh2
416. Xaa Val Xhy Pro Pro Val Phe nh2
417. xaa Val Xhz Pro Pro Val Phe nh2
418. Xaa Val Xhy Pro Pro Val nh2
419. Xaa Val Xhz Pro Pro Val NH2
42 0. Xaa Val Xhy Pro Pro nh2
421. Xaa Leu Xhz Pro Pro nh2
422. Xaa Val Xhy Xfy
423. Xa Val Xhz Xfy
424. Xhv Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
42 5. Xhw Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
42 6. Xhx Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
427. Xhv Val Xan Pro Pro Val nh2
428. Xhw Val Xan Pro Pro Val nh2
42 9. Xhx Val Xan Pro Pro Val nh2
430. Xhv Val Xan Pro Pro NH2
431. Xhw Val Xan Pro Pro nh2
432. Xhx Val Xan Pro Pro nh2
433. Xaa Val Xan Pro Xia
434. Xaa Val Xan Pro Xib
435. Xaa Val Xan Pro Xic
43 6. Xaa Val Xan Pro Xid
437. Xaa Val Xan Pro Xie
438. Xby Val Xan Pro Xia
439. Xby Val Xan Pro Xib
44 0. Xby Val Xan Pro Xic
441. Xby Val Xan Pro Xid
442. Xby Val Xan Pro Xie
443. Xca Val Xan Pro Xia
444. Xca Val Xan Pro Xib
445. Xca Val Xan Pro Xic
446. Xca Val Xan Pro Xid
447 . Xca Val Xan Pro Xie
448. Xed Val Xan Pro Xia
449. Xed Val Xan Pro Xib
450. Xed Val Xan Pro Xic
451. Xed Val Xan Pro Xid
452. Xed Val Xan Pro Xie
453. Xby Leu Xan Pro Xia
454. Xby Leu Xan Pro Xib
455. Xby Ile Xan Pro Xic
456. Xby Ile Xan Pro Xid
457 . Xby Leu Xan Pro Xie
458. Xca Leu Xan Pro Xia
459. Xca Val Xao Pro Xib
460. Xca Val Xao Pro Xic
461. Xat Val Xhf Pro Xak Leu Phe
462. Xat Val xhf Pro Xhr Leu Phe
463. Xed Val xhf Pro Xak Leu Phe
464.Xed Val Xhf Pro Xhr Leu Phe
465. Xat Val Xhf Pro Xak Val NH2
466. Xat Val Xhf Pro Xhr Val NH2
467. Xed Val Xhf Pro Xak Val NH2
468.Xed Val Xhf Pro Xhr Val NH2
469. Xat Val Xhf Pro Xak nh2
470. Xat Val Xhf Pro Xhr nh2
471. Xed Val Xhf Pro Xak nh2
472. Xat Val xhf Pro Xia
47 3. Xat Val Xhf Pro Xib
474. Xed Val Xhf Pro Xic
47 5. Xed Val Xhf Pro Xid
476. Xat Val Xhf Pro Xie
477. Xat Val Xhf Pro Xhs nh2
478. Xed Val Xhf Pro Xhs nh2
479. Xat Val Xhf Pro Xak Xf z
480. Xat Val Xhf Pro Xhr Xf z
481. Xed Val Xhf Pro Xak Xf z
482. Xed Val Xhf Pro Xhr Xf z
483. Xat Val xhf Pro Xak Xbw
484. Xat Val Xhf Pro Xhr Xbw
485. Xed Val Xhf Pro Xak Xbw
486. Xed Val Xhf Pro Xhr Xbw
487. Xat Val Xhf Pro Xak Xer
488. Xat Val Xhf Pro Xhr Xer
489 . Xed Val Xhf Pro Xak Xer
490. Xed Val Xhf Pro Xhr Xer
491. Xat Val Xhf Pro Xak Xgi
492. Xat Val Xhf Pro Xhr Xgi
493. Xed Val Xhf Pro Xak Xgi
494. Xed Val Xhf Pro Xhr Xgi
495. Xat Val Xhf Pro Xak Xif
496. Xat Val Xhf Pro Xhr Xif
497. Xed . Val Xhf Pro Xak Xif
498. Xed . Val Xhf Pro Xhr Xif
499. Xat Val Xhf Prc i Xak . Xig
500. Xat . Val Xhf Prc > Xhr xig
501. Xed Val . Xhf Prc > Xak : Xig
nh2 nh2 nh2 nh2
502. Xed Val Xhf Pro Xhr Xig
503 . Xaa Val Xan Pro Pro Xif
504. Xaa Val Xan Pro Xig
505. Xca Val Xan Pro Pro Xif
506. Xca Val Xan Pro Xig
507. Xby Val Xan Pro Pro Xif
508. Xby Val Xan Pro Xig
509. Xed Val Xan Pro Pro Xif
510. Xed Val Xan Pro Xig
511. Xaa Leu Xan Pro Pro Xif
512. Xaa Leu Xan Pro Xig
513. Xca Leu Xan Pro Pro Xif
514. Xca Leu Xan Pro Xig
515. Xby Leu Xan Pro Pro Xif
516. Xby Leu Xan. Pro Xig
517. Xed Leu Xan Pro Pro xif
518. Xed Leu Xan Pro Xig
519. Xaa Lys Xan Pro Pro Val Phe nh2
52 0. Xaa Lys Xan Pro Pro Val nh2
521. Xaa Lys Xan Pro Pro nh2
522. Xaa Lys Xan Pro Xfy
523. xaa Chg Xan Pro Pro Val nh2
524. Xaa Chg Xan Pro Pro nh2
525. Xaa Chg Xan Pro Pro Val Phe nh2
52 6. Xaa Val Xii Pro Pro Val Phe nh2
527. Xaa Val Xii Pro Pro Val nh2
52 8. Xaa Val Xii Pro Pro nh2
52 9. Xaa Val Xan Pro Pro Val Lys nh2
53 0. Xaa Val Xan Pro Xik
531. Xaa Val Xan Pro Pro Xil nh2
532. Xaa Val Xbu
533. Xby Val Xbu
534. Xca Val Xbu
535. Xaa Val xbv
53 6. Xby Val Xbv
537. Xca Val Xbv
538. Xaa Val Xan Pro Pro Xab
53 9. Xaa Val Xan Xab
54 0. Xim Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
541. Xin Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
542 . Xio Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
543 . Xip Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
544. Xig Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
54 5. Xkd Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
54 6. Xim . Val Xan Pro Pro Val nh2
547 . Xin Val Xan Pro Pro Val nh2
548. Xio Val Xan Pro Pro Val nh2
54 9. Xip Val Xan Pro Pro Val nh2
550. Xiq Val Xan Pro Pro Val nh2
551. Xkd Val Xan Pro Pro Val nh2
552. Xim Val Xan Pro Pro nh2
553. Xin Val Xan Pro Pro nh2
554. Xio Val Xan Pro Pro nh2
555. Xip Val Xan Pro Pro nh2
556. Xiq Val Xan Pro Pro nh2
557. Xkd Val Xan Pro Pro nh2
558. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xir
559. Xaa val Xan Pro Pro Val Xis
560. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xit
561. Xaa Val Xan Pro Pro Val Xiu
562. Xaa Val Xan Pro Pro Xiv
563. Xaa Val Xan Pro Pro Xiw
564. Xaa Val Xan Pro Pro Xiy
565. Xaa Val Xan Pro Pro Xix
566. Xaa Val Xan Pro Xiz
567. Xaa Val Xan Pro Xka
568. Xaa Val Xan Pro Xkb
569. Xaa Val Xan Pro Xkc
570. Xke Val Xan Pro Pro val Phe nh2
571. Xkf Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
572. Xkg Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
573. Xkh Val Xan Pro Pro Val Phe nh2
574. Xke Val Xan Pro Pro Val nh2
575. Xkf Val Xan Pro Pro val NH2
576. Xkg Val Xan Pro Pro Val nh2
577. xkh Val Xan Pro Pro Val nh2
578. Xke Val Xan Pro Pro nh2
579. Xkf Val Xan Pro Pro nh2
580. Xkg Val Xan Pro Pro nh2
581. Xkh Val Xan Pro Pro nh2
582. Xaa Xcz Pro Pro Val Phe nh2
583. Xed Val Xhf Pro Xhr nh2
Primeri za MS-okarakteriziranje sintetiziranih novih spojin so podani v naslednji tabeli.
Primer št. MS analiza z bombardiranjem s hitrimi atomi mol. masa (izmerjena) Primer št. MS analiza z bom bardiranjem s hitrimi atomi mol. masa (izmerjena)
3 798 56 550
16 810 101 853
24 811 115 845
28 811 139 579
30 825 234 641
33 881 403 811
34 845 544 869
37 649
TABELA I - Sekvenčna identifikacija spojin, pripravljenih po primerih 1 in 2
Spojina št. Sekvenčno ID število
38, 39, 52, 86-91, 93, 214246, 350-362, 366-368, 395398, 433-452, 459, 460, 469478, 504, 506, 508, 510, 530, 566-569, 583 2
3, 9, 26-28, 30-33, 35, 36, 95-117, 341-343, 416, 417, 424-426, 526, 540-545, 570-573 3
4-7, 10, 11, 406, 558-561 4
8 5
12 6
13, 392, 403 7
14 8
15, 16, 29 9
17, 18 10
19, 20 11
21, 22, 247-264, 303-313, 582 12
23, 402 13
24, 400 14
25, 401 15
34 16
37, 118-138, 344-346 17
40, 45, 189-213, 369-372, 383388, 503, 505, 507, 509, 531, 538, 562-565 18
41-43, 48, 49, 527 19
44 20
46, 50, 51, 62-65, 70, 139159, 347-349, 414, 415, 420, 421, 430-432, 528, 552-557, 578-581 21
47 22
53-61, 78, 422, 423, 539 23
66, 67, 94, 410, 524 24
68, 69, 284-302, 325-335 25
76 nadaljevanje 73, 83-85 26
92 27
160-188 28
265-283, 314-324 29
336 30
337, 338 31
339, 340, 377-382, 399 32
363-365 33
373, 374 34
375, 376 35
389-391 36
393, 394 37
404 38
405 39
407 40 ...
408 41
409 42
411, 412, 418, 419, 427-429, 546-551, 574-577 43
413, 413(a), 453, 454, 457, 458, 512, 514, 516, 518 44
455, 456 45
465-468 46
461-464 47
479-502 48
515, 517 49
513 50
519 51
520 52
521 53
522 54
523 55
525 56
529 57
Simboli Xaa... v povzetku imajo naslednje pomene:
Xaa:
Xab:
Xac:
Xad:
Xae:
Xaf:
O
Xag:
Xah:
Xai:
Xak:
Xal:
Xam:
Xan:
Xao:
Xan:
Xao:
tetrahidroizokinolin-karboksilna kislina 1-aminoindan- 1-karboksilna kislina terc.levcin ali 2-terc.butilglicin homoprolin ali pipekolinska kislina 1-aminopentan-l-karboksilna kislina N-metilizolevcin
N-metilvalin
N-metillevcin
N-metilvalin
N-metillevcin
Xap:
N co
Xaq:
CH(CH3)2
O CH(CH3)2
Xar: N-N-dimetilizolevcin Xas: N,N-dimetillevcin Xat: N,N-dimetil-terc.levcin Xau: N,N-dimetil-3-terc.butilalanin Xav: N-acetil-N-metilvalin Xaw: N-metil-N-benzilvalin Xax: N,N-dibutilvalin
Xba: N-benzilvalin
Xbb:
O
HN
CH(CH3)j
Xbr:
Xbt:
Xbu:
Xbv:
Xbw:
Xbx:
Xby:
Xbz:
CH(CH3)2
N,N-dietilvalin
N,N-bis(2-fluoroetil)valin
Xca:
Xcb:
Xcc:
N,N-dipropilvalin
N-ciklopropilvalin
Xcd:
Xce:
CH(CH3)2
CH(CH3)2
CH(CH3)2
Xci:
Xck:
co— CH(CH3)2 ch3
Tv-coch3 I
CH(CH3)2
Xcl:
Xcm:
o· .N
Y^coCH(CH3)2
Xcn:
.N
Y^coCH(CH3)2
Xco:
Xcp:
C(CH3)3
Xdn:
Xdm:
Xdo:
Xdp:
Xdq:
Xdr:
Xds:
Xdt:
Xdu
Xdv:
Xdw:
Xdx:
Xdy:
C(CH3)3
Xed: N,N-dietil-terc.levcin Xee: N,N-ditrifluoroetil-terc.levcin Xef: N,N-dipropil-terc.levcin Xeg: N-ciklopropil-terc.levcin
CH(CH3)2
OCH3
Xen
Xeo
Xet: — HN
CH(CH3)2
COOEt
Xey:
Xez:
Xfa:
Xfb: O hnX
NH
N ch3
H f N Xfc:
100
101
102
Ο
Xhf: N-metil-2-terc.butilglicin Xhg: N-metil-3-terc.butilalanin Xhh: N-etilvalin
103
Xhi:
O
Xhk:
CH(CH3)2
Xhl:
Xhm:
Xhn:
Xho:
Xhp:
Xhq:
Xhr:
Xhs:
Xht:
Xhu:
N-ureil-valin
N,N-dimetilfenilalanin N,N-dietilfenilalanin N,N-dipropilfenilalanin hidroksiprolin 3-tienilalanin
N,N-dimetil-3-cikloheksilalanin
N,N-dietil-3-cikloheksilalanin
104
Xhv: N-metil-N-izopropil-terc.levcin Xhw: N-metil-N-izopropil-levcin Xhx: N-metil-N-izopropilizolevcin Xhy: N-metil-3-cikloheksilalanin Xhz: N-metil-fenilalanin
Xia:
Xib:
105
Xhi:
HO
CH(CH3)2
Xig:
Xih:
Xii:
2-cikloheksilglicin N-metil-2-cikloheksilglicin
Xik:
106
Xil:
C(CH3)3
Xim: N-metilaminosulfonil-valin
Xin: N-terc.butilaminosulfonil-valin
Xio: N-morfolinosulfonil-valin
Xip: N-benziloksikarbonil-valin
Xiq: N-terc.butiloksikarbonil-valin
Xir: fenilalanin-metilester
Xis: fenilalanin-etilester
Xit: fenilalanin-benzilester
Xiu: fenilalanin-terc.butilester
Xiv: valin-benzilester
Xiw: valin-metilester
Xix: valin-etilester
Xiy: valin-terc.butilester
Xiz: prolin-benzilester
Xka: prolin-metilester
Xkb: prolin-etilester
Xkc: prolin-terc.butilester
Xkd: N-laktil-valin
Xke: N-metilsulfonil-valin
Xkf: N-metil-N-metilsulfonil-valin
Xkg: N-tozil-valin
Xkh: N-ftalil-valin
Zaključni -NH2 ima pomen, daje C-terminalna amino kislina v svoji amidni obliki.
Spojine v smislu predloženega izuma lahko testiramo glede na aktivnost proti raku z običajnimi metodami, vključno npr. s spodaj opisanimi metodami.
107
A. Metodologija in vitro
Citotoksičnost lahko merimo ob uporabi standardne metodologije za adherentne celične linije, kot je tetrazolijev test za mikrokulture (MTT). Podrobnosti tega testa so bile objavljene (Alley, MC et al, Cancer Research 48:589-601, 1988). Za izdelavo mikrotitrskih ploščnih kultur uporabimo eksponencialno rastoče kulture tumorskih celic, kot je HT-29 karcinom debelega črevesa ali LX-1 pljučni tumor. Celice zasejemo pri 5000 do 20000 celic na vdolbino na plošče s 96 vdolbinami (v 150 μΐ medijev) in rastejo preko noči pri 37 °C. Dodamo testne spojine v 10-kratnih razredčenjih, ki variirajo od 104 M do 10'10 M. Celice nato inkubiramo 48 ur. Za določitev števila viabilnih celic v vsaki vdolbini dodamo MTT barvo (50 μΐ 3 mg/ml raztopine 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolijevega bromida v slanici). To zmes inkubiramo 5 ur pri 37 °C in nato v vsako vdolbino damo 50 μΐ 25 % SDS, pH2. Po inkubaciji preko noči odčitamo absorbanco vsake vdolbine pri 550 nm ob uporabi ELISA čitalnika. Izračunamo vrednosti za povprečne +/- SD podatkov iz repliciranih vdolbin ob uporabi formule % T/C (% obdelanih viabilnih celic/kontrola).
OD obdelanih celic x 100 = % T/C OD kontrolnih celic
Koncentracijo testne spojine, ki daje T/C 50 % inhibicije rasti, označimo kot IC50
B. Metodologija in vivo
Spojine v smislu predloženega izuma lahko nadalje testiramo v katerihkoli od različnih predkliničnih testov glede na aktivnost in vivo, ki so primerni za klinično uporabnost. Take teste izvajamo z golimi mišmi, v katere smo transplantirali (xenografted) tumorsko tkivo, prednostno človeškega izvora, kot je dobro znano na tem področju. Testne spojine ocenimo glede na njihovo antitumorsko učinkovitost po dajanju mišim, ki nosijo transplantate.
Natančneje humane tumorje, ki so zrasli pri atimičnih golih miših, transplantiramo v nove živali prejemnike ob uporabi tumorskih fragmentov z velikostjo okoli 50 mg.
Dan transplantacije je označen kot dan 0. 6 do 10 dni kasneje miši obdelamo s testnimi spojinami, ki smo jih dali kot intravensko ali intraperitonelno injekcijo, v skupinah 5 do 10 miši za vsako dozo. Spojine dajemo dnevno 5 dni, 10 dni ali 15 dni v
108 dozah od 10 do 100 mg/kg telesne teže. 2-krat dnevno merimo premere tumorjev in telesne teže. Volumne tumorjev izračunamo ob uporabi premerov, izmerjenih z Vernieijevimi šestili, in s formulo:
(dolžina x širina2)/2 = mg mase tumorja
Povprečne tumorske mase izračunamo za vsako obdelovano skupino in vrednosti T/C določimo za vsako skupino glede na neobdelane kontrolne tumorje.
Nove spojine v smislu predloženega izuma kažejo dobro aktivnost in vitro v zgoraj omenjenih testnih sistemih in tumorsko aktivnost v zgoraj omenjenem sistemu in vivo.
SEZNAM SEKVENC (1) SPLOŠNA INFORMACIJA (1) PRIJAVITELJ (A) BASF Aktiengesellschaft (B) CESTA: Carl-Bosch-Strasse 38 (C) MESTO: Ludwigshafen (E) DRŽAVA: ZR Nemčija (F) ZIP: W-6700 (G) TELEFON: 0621/6048526 (H) TELEFAKS: 0621/6043123 (I) TELEKS: 1762175170 (ii) NASLOV IZUMA: Novi peptidi, njihova priprava in uporaba (iii) ŠTEVILO SEKVENC: 57 (iv) RAČUNALNIŠKO BERLJIVA OBLIKA:
(A) TIP MEDIJA: disketa, 3,5 inče, 2 DD (B) RAČUNALNIK: IBM AT-kompatibilen, 80286 procesor (C) OPERACIJSKI SISTEM: MS-DOS verzija 5,0 (D) SOFTVER: WordPerfect verzija 5,1 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 1:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
109 (A) DOLŽINA: 9 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 1:
Xaa Val Val Xaa Val Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 2:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 2:
Xaa Val Xaa Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 3:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 3:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 4:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 4:
110
Xaa Val Xaa Pro Pro Val Xaa
5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 5:
(1) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 5:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val His 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 6:
(1) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 6:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro Val Trp
5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 7:
(1) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 7:
Xaa Val Xaa Pro Pro Xaa Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 8:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin
111 (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 8:
Xaa Val Xaa Pro Pro Ile Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 9:
(1) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 9:
Xaa Val Xaa Pro Xaa Val Phe
5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 10:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 10:
Xaa Val Xaa Xaa Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 11:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 11:
112
Xaa Val Xaa Pro Pro Val Phe
5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 12:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 12:
Xaa Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 13:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 13:
*aa He Xaa Pro Pro Val Phe 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 14:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 14:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro Val Phe
5
113 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 15:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 15:
Xaa Leu Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 16:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 16:
Xaa Val Xaa Pro Pro Phe Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 17:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 17:
114
Xaa Val Xaa Pro Pro Val (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 18:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 18:
Xaa Val Xaa Pro Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 19:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 19:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 20:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 20:
115
Xaa Xaa Xaa Pro Pro Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 21:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 21:
Xaa Val Xaa Xaa Pro Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 22:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 22:
Xaa Val Xaa Pro Xaa Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 23: (i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 4 amino kisline (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna
116 (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 23:
Xaa Val Xaa Xaa (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 24:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 24:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 25:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 4 amino kisline (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (») OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 25:
Xaa Xaa Pro Pro 1 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 26:
117 (i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 4 amino kisline (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 26:
Xaa Val Xaa Pro 1 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 27:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (ri) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 27:
Xaa Xaa Xaa Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 28:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (ri) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 28:
118
Xaa Val Xaa Pro Pro Val xaa x 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 29:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SFQ&> NO: 29:
Xaa Xaa Pro Pro Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 30:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 30:
Xaa Val Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 31:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 4 amino kisline (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid
119 (») OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 31:
Xaa Val Pro Pro 1 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 32:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 4 amino kisline (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 32:
Xaa Xaa Pro Xaa 1 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 33:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (») OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 33:
Xaa Val Xaa Pro Xaa Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 34: (i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin
120 (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 34:
Xaa Xaa Pro Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 35:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 35:
Xaa Xaa Pro Xaa Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 36:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 36:
Xaa Val Xaa Pro Pro Phe Phe 1 5
121 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 37:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 37:
Xaa Val Xaa Pro Pro Xaa Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 38:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 38:
Xaa Val Xaa Pro Pro Leu Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 39:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 39:
122
Xaa Val Xaa Pro Pro Ile Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 40:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 40:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val Ala 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 41:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 41:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 42: (i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna
123 (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 42:
xaa Xaa Xaa Pro Pro Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 43:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 43:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 44:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 44:
Aaa val Xaa Pro Pro Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 45:
124 (i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 45:
Xaa Ile Xaa Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 46:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 46:
Xaa Val Xaa Pro Xaa Val 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 47:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 47:
125
Xaa Val Xaa Pro Xaa Leu Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 48:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 48:
Xaa Val Xaa Pro Xaa Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 49:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 49:
Xaa Leu Xaa Pro Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 50: (i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
126 (A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 50:
Xaa Leu Xaa Pro Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 51:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 51:
Xaa Lys Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 52:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 52:
Xaa Lys Xaa Pro Pro Val 1 5
127 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 53:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 53:
Xaa Lys Xaa Pro Pro 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 54:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 5 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 54:
Xaa Lys Xaa Pro Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 55:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 6 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 55:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro Val 1 5
128 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 56:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid (xi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 56:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro Val Phe 1 5 (2) INFORMACIJA ZA SEQ ID NO: 57:
(i) KARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DOLŽINA: 7 amino kislin (B) TIP: amino kislina (D) TOPOLOGIJA: linearna (ii) TIP MOLEKULE: peptid fxi) OPIS SEKVENCE: SEQ ID NO: 57:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val Lys

Claims (2)

  1. PATENTNI ZAHTEVKI
    1. Peptid s formulo I (E)u - (F)v - (G)w - K I kjer je
    R1 alkoksi; alkil; cikloalkil; alkilsulfonil; fluoroalkil; trifluoroacetil; amidino; ureil; piperidinosulfonil; morfolinosulfonil; benziloksikarbonil; alkiloksikarbonil; aminosulfonil, kije lahko substituiran z alkilom; hidroksi; arilsulfonil, ki je lahko substituiran z enim ali več substituenti, ki jih neodvisno izberemo izmed alkila, -N(CH3)2, nitro, halogena in CF3; benzil, ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi izmed alkila, alkoksi, nitro, halogena in CF3; ali NR3R4, kjer sta lahko R3 in R4 vsak bodisi vodik ali alkil;
    R2 je vodik; alkil; fluoroalkil; cikloalkil; acil; benzoil ali benzil, od katerih sta lahko oba substituirana z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi izmed nitro, halogena, CF3, alkila in alkoksi
    R1-N-R2 so lahko skupaj ftalimido, 5- ali 6-členski heterocikel, ki je lahko nesubstituiran ali substituiran z 1 ali več substituenti, neodvisno izbranimi izmed fenila, benzila, alkila, N(CH3)2, nitro, tienila, CONH2 in COOEt;
    A je valilni, izolevcilni, levcilni, allo-izolevcilni, a-aminoizobutanoilni,
    3-terc.butilalanilni, 2-terc.butilglicilni, 3-cikloheksilalanilni, 2,4-diaminobutanoilni, ornitilni, lizilni, 2-etilglicilni, 2-cikloheksilglicilni, norlevcilni, norvalilni ali arginilni ostanek;
    B je N-alkil-valilni, -norvalilni, -levcilni, -izolevcilni, -2-terc.butilglicilni, -3terc.butilalanilni, -3-cikloheksilalanilni, -fenilalanilni ali -2-cikloheksilglicilni ostanek;
    D,E,F in G neodvisno izberemo iz skupine, v kateri so prolilni, homo-prolilni, hidroksiprolilni, tiazolidinil-4-karbonilni, 1-aminopentil-l-karbonilni, valilni,
    2-terc.butilglicilni, izolevcilni, levcilni, 3-cikloheksilalanilni, fenilalanilni,
    N-metilfenilalanilni, tetrahidroizokinolil-2-karboniIni, 3-tiazolilalanilni,
    130
    3-tienilalanilni, histidilni, 1-aminoindil-l-karbonilni, 2,4-diaminobutanoilni, arginilni, 3-piridilalanilni, 3-terc.butilalanilni, 2-cikloheksilglicilni, lizilni, norvalilni, norlevcilni in 3-naftilalanilni ostanek
    X je vodik, alkil, cikloalkil, -CH2-cikloheksil ali arilalkil;
    sta lahko A in B skupaj, F in G skupaj, R1R2N-CHX-CO in A skupaj, E in F skupaj,
    M je vodik, nižji alkil, arilalkil, cikloheksil ali -CH2cikloheksil; Q je vodik; R je vodik ali nižji alkil; ali R in Q lahko skupaj tvorita vez; U je vodik, nižji alkil, fenil ali cikloalkil; in je W vodik, nižji alkil ali fenil; t,u,v in w so neodvisno 0 ali 1; in je
    K hidroksi, alkoksi, fenoksi, benziloksi ali substituiran ali nesubstituiran amino delež;
    pod pogojem, da K ni hidroksi, alkoksi, benzoksi ali fenoksi delež, kadar so t, u, v in w 0; in nadalje pod pogojem, da K ni hidroksi ali alkoksi delež, kadar so t, u in v 0; in njegove soli s fiziološko prenesljivimi kislinami.
    2. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da je R*-N-R2 ftalimido ali 5ali 6-členski heterocikel s formulo
    131 ki je lahko nesubstituiran ali substituiran z 1 ali več substituenti, ki jih lahko neodvisno izberemo izmed fenila, benzila, alkila, N(CH3)2, nitro, tienila, okso, CONH2 in COOEt.
    3. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da je K amino delež s formulo R5-N-R6, kjer je
    R5 vodik ali hidroksi ali Cx 7-alkoksi ali benziloksi ali C17alkil ali fluoroalkil ali C3 ?cikloalkil ali benzil, ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, C17alkilsulfonil, C14alkoksi, fenoksi, benzoksi, halogen ali C14alkil;
    R6 je vodik ali C1 ?alkil ali C3 ?cikloalkil ali fluoroalkil ali fenil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, ki lahko tvori ciklični sistem, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C} 7-alkilsulfonil) ali benzil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, ki lahko tvori ciklični sistem, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali C17-alkilsulfonil) ali naftil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, CM-alkoksi, benzoksi, fenoksi, ali Cj 7-alkilsulfonil) ali benzhidril (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C3 7-alkilsulfonil) ali bifenil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno
    CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C7 7-alkilsulfonil) ali trifenilmetil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno
    132
    CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali C3 7-alkilsulfonil) ali benzhidriletil (ki je lahko substituiran z do 2 substuentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C^alkoksi, fenoksi, benzoksi ali CT 7-alkil-sulfonil) ali henzhidrilmetil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2 C14-alkil, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali naftilmetil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali C7 7-alkilsulfonil) ali acenaftil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali acenaftilmetil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali ali Cj 7-alkilsulfonil) ali piridil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C1_4-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali pikolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkiI, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C7 7-alkilsulfonil) ali benzotiazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C14-alkil, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi, ali Cj 7-alkilsulfonil) ali benzizotiazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, CM-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C3 7-alkilsulfonil) ali benzopirazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, C^alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C3 7-alkilsulfonil) ali benzoksazolil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali Cx 7-alkilsulfonil) ali fluorenil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C^-alkil, C14-alkoksi,
    133 fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali aminofluorenil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, C^-alkil, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali pirimidil (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, COOEt, CONHBzl, CON(Bzl)2, CM-alkil, ki lahko tvori ciklični sistem, C1_4-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali C1_4-alkoksi, fenoksi, benzoksi ali C17-alkilsulfonil) ali
    5-členski heteroaril (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, ki so lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, ciano, COOMe, COOEt, tiometil, tioetil, tiofenil, pikolil, acetil, -CH^COOEt, CONH2, CONHBzl, CON(Bzl)2, Cwalkil, ki lahko tvori cikličen sistem, C^-alkoksi, fenoksi, benzoksi, fenil (ki je lahko substituiran z do 4 substituenti, ki so lahko neodvisno nitro, CF3, halogen ali C^-alkil), benzil (kije lahko substituiran z do 4 substituenti, ki so lahko neodvisno nitro, CF3, halogen, C14-alkil, naftil, C17-alkilsulfonil, fenilsulfonil ali C^-dialkilamino)] ali
    -CHR7-5-členski heteroaril (ki je lahko substituiran z do 2 substituentoma, ki sta lahko neodvisno CF3, nitro, halogen, CONHBzl, CON(Bzl)2, COOMe, COOEt, COOCH(CH3)2, CONH2, COOBzl, CM-alkil, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi, fenil, benzil, naftil ali Q 7-alkilsulfonil [R7 = vodik, raven ali razvejen C15-alkil, benzil; ali R7 in R5 skupaj tvorita skupino -(CH2)3- ali -(ch2)4-]).
    4. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da je K R5-N-R6, ki lahko skupaj tvorijo strukture, izbrane iz skupine, v kateri so
    134 ki so lahko nesubstituirane ali substituirane z enim ali več substituenti, neodvisno izbranimi iz skupine, v kateri so CF3, nitro, halogenska, okso, ciano, N,Ndimetilamino, CONHBzl, CON(Bzl)2, Cl4.-alkilna, C3 4-alkilenska skupina, ki tvori aneliran obročni sistem, C14-alkoksi, fenoksi, benzoksi, naftil, pirimidil, COOEt, COOBzl, C3^-cikloalkil, pirolidinil, piperidinil, tienil, pirolil, -CH2-CO-NCH(CH3)2, -CH2-CO-N(CH2)4, -CH2-CO-N(CH2)4O, benzil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi iz skupine, v kateri so nitro, halogen, CF3, tiometil ali ustrezen sulfoksid ali sulfon, tioetil ali ustrezen sulfoksid ali sulfon, CM-alkil in C14alkoksi) in fenil (ki je lahko substituiran z do 3 substituenti, neodvisno izbranimi iz skupine, v kateri so nitro, halogen, CF3, tiometil, tioetil, C14-alkil in C14-alkoksi).
    5. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da so t, u, v in w 0 in K ni hidroksi, benzoksi, fenoksi ali alkoksi delež.
    135
    6. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da so t, u, in v 0 in K ni hidroksi ali alkoksi delež.
    7. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da so t, u, v in w 1 in K hidroksi, alkoksi, fenoksi ali benziloksi delež.
    8. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da so t, u in v 1, w je 0 in K hidroksi, alkoksi, fenoksi ali benziloksi delež.
    9. Spojine s formulo I po zahtevku 1, označene s tem, da sta t in u 1, v in w sta 0 in K je hidroksi, alkoksi, fenoksi ali benziloksi delež.
    10. Spojine s formulo I ali njihove soli za uporabo v medicini, zlasti za zdravljenje onkoloških bolezni.
    11. Farmacevtski sestavek označen s tem, da obsega farmacevtsko sprejemljiv nosilec in terapevtsko učinkovito količino spojine po zahtevku 1.
    12. Postopek za pripravo spojin s formulo I po zahtevku 1, označen s tem, da jih pripravimo po znanih postopkih peptidne kemije.
    Za
    BASF Aktiengesellschaft:
    22872-V-83/LŽ
    136
    7¾ Γ5 <' F
    POVZETEK
    Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplastičnih bolezni
    Opisani so novi peptidi s formulo
    N - CH - CO - A - B - (D)t - (E)u - (F)v - (G)W - K I kjer imajo R1, R2, A, B, D, E, F, G, K, X, t, u, v in w pomene, navedene v opisu, in njihova priprava. Nove spojine imajo antineoplastični učinek.
    1 5. 10. 93
    137
    Sl. 1: Tehnike Boc zaščitne skupine na polimernem nosilcu
    Boc-NH-CH-CO- smola
    I
    PG-R
    1) TFA
  2. 2) baza
    H2N-CH-CO-smola
    I
    PG-R
    Boc-NH-CH-COOH
    I
    PG-R aktivator
    Boc-NH-CH-CO-HN-CH-CO- smola
    I I
    PG-R PG-R
    HF
    HF X H2N-CH-CO-[-NH-CH-CO-]n-NH-CH-COOH
    R R R
    Boc = t-butiloksikarbonilna zaščitna skupina
    PG = zaščitna skupina stranske verige
    R = aminokislinska stranska veriga /
    138
    Sl. 2: Tehnika Fmoc zaščitne skupine na polimernem nosilcu
    Fmoc-NH-CH-CO· smola smola
    TFA X H2N-CH-CO-[-NH-CH-CO-]n-NH-CH-COOH
    R R R
    Fmoc = 9-fluorenilmetiloksikarbonilna zaščitna skupina PG = zaščitna skupina stranske verige
    R = aminokislinska stranska veriga
    PATENTNA pisarna
SI9300267A 1992-05-20 1993-05-20 Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplasticnih bolezni SI9300267A (sl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US88578892A 1992-05-20 1992-05-20
US98569692A 1992-11-25 1992-11-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SI9300267A true SI9300267A (sl) 1993-12-31

Family

ID=27128772

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI9300267A SI9300267A (sl) 1992-05-20 1993-05-20 Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplasticnih bolezni

Country Status (21)

Country Link
EP (1) EP0642530B1 (sl)
JP (2) JP3523253B2 (sl)
KR (1) KR100286242B1 (sl)
CN (1) CN1065874C (sl)
AT (1) ATE169637T1 (sl)
AU (1) AU669710B2 (sl)
CA (1) CA2136339C (sl)
CZ (1) CZ292612B6 (sl)
DE (1) DE69320339T2 (sl)
DK (1) DK0642530T3 (sl)
ES (1) ES2118955T3 (sl)
FI (1) FI120692B (sl)
HU (2) HUT71398A (sl)
IL (1) IL105651A (sl)
MX (1) MX9302927A (sl)
NO (1) NO310465B1 (sl)
NZ (1) NZ252147A (sl)
RU (1) RU2116312C1 (sl)
SI (1) SI9300267A (sl)
UA (1) UA45304C2 (sl)
WO (1) WO1993023424A1 (sl)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5831002A (en) * 1992-05-20 1998-11-03 Basf Aktiengesellschaft Antitumor peptides
DE4415997A1 (de) * 1994-05-06 1995-11-09 Basf Ag Neuer peptidischer Wirkstoff und dessen Herstellung
DE4415998A1 (de) * 1994-05-06 1995-11-09 Basf Ag Neue Tetrapeptide, ihre Herstellung Verwendung
DE19527574A1 (de) * 1995-07-28 1997-01-30 Basf Ag Verfahren zur Herstellung vona-(N,N-Dialkyl)-aminocaarbonsäureamiden
DE19527575A1 (de) * 1995-07-28 1997-01-30 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von peptidischer Wirkstoffe
US5807984A (en) * 1995-11-09 1998-09-15 Basf Aktienegesellschaft Oligopeptides, the preparation and use thereof
TW474946B (en) * 1995-12-15 2002-02-01 Basf Ag Novel compounds, the preparation and use thereof
AU775090B2 (en) * 1995-12-15 2004-07-15 Abbvie Deutschland Gmbh & Co Kg Antineoplastic peptides
US20010009901A1 (en) 1996-12-11 2001-07-26 Basf Aktiengesellschaft Germany Antineoplastic peptides
US5741892A (en) * 1996-07-30 1998-04-21 Basf Aktiengesellschaft Pentapeptides as antitumor agents
US5939527A (en) * 1996-07-30 1999-08-17 Basf Aktiengesellschaft Tetrapeptides as antitumor agents
US5965537A (en) * 1997-03-10 1999-10-12 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus
US6143721A (en) 1997-07-18 2000-11-07 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
WO1999015130A2 (en) * 1997-09-24 1999-04-01 ARIZONA BOARD OF REGENTS, actingon behalf of ARIZ ONA STATE UNIVERSITY Synthetic antineoplastic agents derived from dolastatin 15 and methods of making same
US6686445B1 (en) 1997-09-24 2004-02-03 Arizona Board Of Regents, Acting For And On Behalf Of Arizona State University Synthetic antineoplastic agents derived from dolastatin 15 and methods of making same
US5985837A (en) * 1998-07-08 1999-11-16 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
ATE415413T1 (de) 2002-07-15 2008-12-15 Univ Princeton Iap-bindende verbindungen
ATE412409T1 (de) 2003-11-24 2008-11-15 Teva Gyogyszergyar Zartkoeruee Verfahren zur reinigung von pravastatin
WO2023033129A1 (ja) 2021-09-03 2023-03-09 東レ株式会社 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4879278A (en) * 1989-05-16 1989-11-07 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15
ATE190983T1 (de) * 1991-08-09 2000-04-15 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd Neue tetrapeptidderivate

Also Published As

Publication number Publication date
KR100286242B1 (ko) 2001-04-16
IL105651A0 (en) 1993-09-22
HU211745A9 (en) 1995-12-28
NO944419D0 (no) 1994-11-18
CN1065874C (zh) 2001-05-16
RU94046434A (ru) 1996-10-27
FI945416A0 (fi) 1994-11-17
AU669710B2 (en) 1996-06-20
CZ284394A3 (en) 1995-05-17
DK0642530T3 (da) 1998-10-26
CN1085563A (zh) 1994-04-20
EP0642530B1 (en) 1998-08-12
JPH07506580A (ja) 1995-07-20
HUT71398A (en) 1995-11-28
RU2116312C1 (ru) 1998-07-27
IL105651A (en) 1998-07-15
WO1993023424A1 (en) 1993-11-25
CA2136339A1 (en) 1993-11-25
NO944419L (no) 1995-01-09
EP0642530A1 (en) 1995-03-15
JP3523253B2 (ja) 2004-04-26
DE69320339T2 (de) 1998-12-17
NZ252147A (en) 1996-10-28
NO310465B1 (no) 2001-07-09
CZ292612B6 (cs) 2003-11-12
MX9302927A (es) 1993-11-01
FI945416A (fi) 1994-11-17
ES2118955T3 (es) 1998-10-01
DE69320339D1 (de) 1998-09-17
UA45304C2 (uk) 2002-04-15
ATE169637T1 (de) 1998-08-15
AU4066293A (en) 1993-12-13
FI120692B (fi) 2010-01-29
JP2004149538A (ja) 2004-05-27
CA2136339C (en) 2008-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU679479B2 (en) Dolostatin analog
EP0832104B1 (en) Dolastatin derivatives, their preparation and use
SI9300267A (sl) Novi peptidi, njihova priprava in uporaba za zdravljenje neoplasticnih bolezni
IL166853A (en) Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof
PL178351B1 (pl) Nowe peptydy

Legal Events

Date Code Title Description
IF Valid on the event date