SE446461B - Forfarande for utvinning av maltos-fosforylas eller/och beta-fosfoglukomutas och anvendning av dessa - Google Patents
Forfarande for utvinning av maltos-fosforylas eller/och beta-fosfoglukomutas och anvendning av dessaInfo
- Publication number
- SE446461B SE446461B SE7810143A SE7810143A SE446461B SE 446461 B SE446461 B SE 446461B SE 7810143 A SE7810143 A SE 7810143A SE 7810143 A SE7810143 A SE 7810143A SE 446461 B SE446461 B SE 446461B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- dsm
- enzymes
- ncib
- amylase
- phosphorylas
- Prior art date
Links
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 9
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 8
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 108010057899 Maltose phosphorylase Proteins 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 claims description 3
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 claims description 2
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims description 2
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 claims description 2
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 2
- 108090001003 Beta-phosphoglucomutases Proteins 0.000 claims 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 claims 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 claims 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 claims 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 18
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 18
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 4
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 3
- RWHOZGRAXYWRNX-VFUOTHLCSA-N alpha-D-glucose 1,6-bisphosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1O RWHOZGRAXYWRNX-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-N 6-Phospho-D-gluconate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229950010772 glucose-1-phosphate Drugs 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- NDVRKEKNSBMTAX-BTVCFUMJSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O NDVRKEKNSBMTAX-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 101100459440 Caenorhabditis elegans nac-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 101100298295 Drosophila melanogaster flfl gene Proteins 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000535428 Lactobacillus reuteri DSM 20016 Species 0.000 description 1
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N UNPD55895 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000019994 cava Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 102000010705 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040005050 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N malto-tetraose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N maltotetraose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/40—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving amylase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
15 20 25 30 35 H0 446 461 går till 6-fosfoglukonat. på amylasaktiviteten.
För kliniska tester med kombinerade enzymatiska reaktio- ner, i vilka alltså flera enzymer insättes, är det av avgörande vikt, att de erforderliga enzymerna är lätt tillgängliga och utan stor möda kan bringas till en för analysen lämpad form.
Detta enär priset pâ sådana enzymatiska bestämningar väsentligen bestämmas av priset på de härför använda enzymerna. Speciellt gynnsamt är det därvid, när av ett enda utgångsmaterial flera för en bestämd test använda enzymer samtidigt kan utvinnas.
Av de hittills kända utgângsmaterialen förekommer de båda ovan anförda enzymerna visserligen i Neisseria meningitidis ge- Så bildad NADH utgör därmed ett mått mensamt i en form, som tillåter deras användning i en d-amylas- test utan föregående separering. En avsevärd nackdel ligger dock däri, att det därvid rör sig om en ytterst farlig och viru- lent mikroorganism, som endast med största försiktighetsåtgärder kan användas som källa för industriellt användbara enzymer. Dess- utom är de funna aktiviteterna hos de nämnda enzymerna i denna mikroorganism otillfredsställande. Lactobacillus brevis ATCC 8287 innehåller dessutom d-glukosidas, ett för den avsedda an- vändningen störande enzym, varför här insättning av en renings- operation är oundgänglig.
Till grund för uppfinningen ligger sålunda uppgiften, att åstadkomma ett förfarande för utvinning av MP och eventuellt även B-PGM, vilket undviker användning av den farliga Neisseria meningitidis och vilket möjliggör en enkel utvinning av enzymer- na ur ett lätt tillgängligt ofarligt utgångsmaterial. Det är isynnerhet ett föremål för uppfinningen, att åstadkomma ett för- farande av ovan anfört slag, vid vilket förfarande en mikroorga- nism användes, vars råextrakt direkt kan insättas för d-amylas- bestämningen, emedan det innehåller tillräckligt höga aktivite- ter av enzymerna MP och 8-PGM och icke erfordrar någon renings- operation. ' Denna uppgift löses enligt uppfinningen genom ett förfa- rande för utvinning av maltos-fosforylas eller/och s-fosfogluko- mutas ur mikroorganismer, vilket kännetecknas därav, att Lactobacillus brevis NCIB 8836, NCIB 8561, NCIB 8562 och DSM ZOOSU, Lactobacillus plantarum DSM 20174 och DSM 43, Lactobacillus reuteri DSM 20016, Lactobacillus fermentum DSM 20052, Streptococcus spec. DSM lll8, DSM lll9, DSM 1120 10 +5 20 25 50 35 H0 eller/och DSM 1121 användes. överraskande nog har det visat sig, att i de ovan anförda mikroorganismerna de båda ovan anförda enzymerna förefinnes med hög aktivitet och lätt kan utvinnas därur. Därvid är det möj- ligt att jämväl utvinna de båda enskilda enzymerna i separerad form, genom att man efter sedvanliga metoder för enzymanrikning isolerar dem ur extrakt av dessa-organismer och därpå renar en- zymerna, exempelvis genom avlägsnande av föroreningar medelst polyetyleniminfällning, fraktionerad fällning med salter, säsom ammoniumsulfat, behandling med adsorbentier och utbytarkromato- grafi, isynnerhet medelst svagt basiska utbytare på basis av tvärbindníngsbundet dextran eller av cellulosa.
För användning till d-amylasbestämning kan emellertid råextraktet av de anförda mikroorganismerna direkt användas.
Härför uppslutes mikroorganismerna genom sedvanliga fysikaliska metoder, exempelvis med ultraljud, genom högtrycksdispersion, rivning eller dylikt, olösliga fragment fränskiljes och den klara vätskeåterstoden insättes som sådan eller i frystorkad form för bestämning av 4-amylas. Alternativt kan dessa räextrakt även un- derkastas en ytterligare rening. Enär för användningen till d-amylasbestämning en separering av de båda enzymerna böruund- vikas, sker den fortsatta reningen företrädesvis under använd- ning av en test, vid vilken de båda enzymernas totalaktivitet be- stämmes efter varje reningssteg, genom att en lämplig buffert ävensom maltos, NADP och G6PDH tillsättes och bildningen av NADPH mätes. Företrädesvis aktiveras därvid enzymerna MP och 8-PGM genom tillsats av d-glukos-1,6-difosfat och Ena*-joner, exempelvis i form av mangansulfat eller ett annat oorganiskt eller organiskt mangansalt.
Ett ytterligare föremål för uppfinningen är sålunda an- vändningen av maltos-fosforylas eller/och 3-fosfoglukomutas, som erhållits medelst förfarandet enligt uppfinningen, som râextrakt eller i anríkad form för bestämning av d-amylas, eventuellt un- der tillsats av d-glukos-1,6-difosfat eller/och Mnz*-joner.
Uppfinningen möjliggör att utvinna de båda ovan anförda enzymerna på väsentligt enklare och billigare sätt, och närmare bestämt isynnernet i en form, i vilken de direkt utan föregåen- de separering kan insättas för bestämning av d-amylas. Genomfö- ringen av en sådan bestämning förenklas och underlättas därige- nom väsentligt . De därmed använda nxilcr-oorganisnmerna karakteriseras förutom av depositíonsnumren också av de i Tabell I angivna egenskaperna. 446 461 Am< :nuëonq + + IUII mm + ++ll mdñTOmflb I +'U++++ -I- + ++ll NRGIOWQE l +U$+++ + + ++ll m2 Awâqå 3 |+I3| + -l--I-ll inom Emm fiflnu wmàøzm cwwcflšuwumø. nanm Qumnmm han* Qåà -wšå 3 |+'|::| + ++lI måå måna 3 l+l3l + ++ll Qåuø -mäà l+l3l + ++ll cofifiämn :menn u u coflšmwn wm>m n .s ašššwoufiuamm mozfifimm 1 mofinwflms 1 Houfiëmz | mownofiflmo _. . _ mofinmå u :Smuwëa - Em wficmwwnmm :Vona 33 8 ma 33 u .Ãfle R Hce o + o Täumucëflwwosonv TøfiumvfiëwmO-Hmuwfl v "åßšßuwcmoäfiø Câumucëmmv "Emfionmumz :ofifiäšfimcwm mmfimpmx Aflgwš N šfimpfiêæmv u o .Sån wøcmfläsnmm .Hwnonw »åwfiåm :ofiüflflëænø Tflgmuw mswv ëwoflounoz w NmOON :WG j ÉQHMÜEHHÜ-fi m WSHHHOGD m :cava mfloom än. Émuswa _ mßflflfivmn 1963 ...nn Emo šwmpcmfim msfiuuoan :ouumq íaom :mo Éhmucmfia msflnflumn .A503 :moom Emm mfifgn msflunomn uopofl Nmmæ mHUz mfiönn mßfiflflomn 1033 fi .nflmnflu Hmmm mHUZ mfiömn mflfififlomn ...ouofi mmææ MHOZ mfiönn msfififlomn nouomn Morfologi Gramreaktíon Rörlighet Sporer Förhållande till 02: Katalas Bensidinreaktion Metobolism Glukosnedbrytning 446 461 Tabell I (forts.) Streptococcus spec.
DMS 118 DSM 1119 DSM 1120 . DSM 1121 sfärisk-ovoída i par eller kedjor + + ' + + fakultativt anaerob fermentativ homofermentativ 10 15 20 25 30 35 446 461 6 Följande exempel åskådliggör närmare uppfinningen.
Exempel 1. I efterföljande tabell angivna mikroorganismer odla- des i ett l procent maltos innehållande medium enligt Kamogawa (Agr. Biol. Chem. ål, 2813 (l973)] och uppslöts därpå genom högtrycksdispersion. Efter avcentrifugering av olösliga delar insattes det erhållna råextraktet direkt för d-amylasbestämning- en enligt följande schema: ' -am las stärkelse + H20 d maltos malfi0S + P03- -Egà glukos + 8-glukos-1-fosfat B-glukos-l-fosfat ågšfléä glukos-6-fosfat glukos-6-fosfat + NAD+ Eššgëv 6-fosfoglukonat + NADH + H* För fastställande av râextraktets lämplighet användes följande testsats: - 3,ü ml 0,1 M fosfatbuffert + d-glukos-1,6-difosfat (c = 0,05), pH 6,5 0,1 ml MnSO" l I 1,0 ml 0,2 H maltos (Merck, för biokemiska ändamål) 0,5 ml råextrakt Inkubax-.ioxu- lnvia 37°c Stopp: l ml prov - 3 min/l00°C; därpå centrifugering 0,25 ml vätskeåterstod insättas i följande bestäm- ning: modifierad u -glukos-S-fosfat-test: 2,SÄ ml 0,3 M TRA-buffert, pH 7,6 0,1 m1 0,1 M Mgclz 0,1 ml NADP (c = 10) 0,25 ml vätskeâterstod Start: 0,01 m1 062m: (e = 1) 'r = 25°; matning av Asjós Erhâllna resultat framgår av följande tabell: stam A E (NAnPml Lactobac. brevis NCIB 8836 0,850 Laotobac. plantarum DSM 20l7H 0,675 Lactobao. reuteri DSM 20016 0,252 Lactobac. brevis NCIB 8561 0,150 Lactobac. brevis RCIB 8562» 0,100 2 Lactobao. plantarum DSM H3 0,090 10 15 20 °s 30 7 446 4611 (tabell forts.) stam u: (Nnnmnl Streptococcus spec. DSM 1118 0,115 Streptococcus spec. DSM 1119 0,125 Streptococcus spec. DSM 1120 0,210 Streptococcus spec. DSM 1121 0,110 1 AE xorreierar direkt med MP/ß-Pen-aktiviteten Exemgel 2. Ett reagens användes, vilket hade följande sammansätt- ning: Fosfatbuffert 20 mM; pH 6,5 NAD 2 mM Maltotetraos 10 mM Löslig stärkelse - Glukos-1,6-difosfat spår Råextrakt av Lactobac. plantarum DSM 20174 av maltos-fosforylas 3 U/ml och 6-fosfoglukomutas 1 U/ml GGPDH (Leuconostoc mesenteroides) löst i vatten 9 U/ml Den erhållna lösningen inkuberades vid 30°C, försattes med provlöäníngen och i en fotometer mättes efter 5 min för- inkubering extinktionsdífferensen vid Hg 334 nm över 5 min.
För 2,0 ml reagens och 0,10 ml prov gäller följande beräknings- formel för d-amylasens aktivitet i provet: U/1 = AE/min x 2 1 X 1000 = AE/min X 1699 Vid insättning av fem olika humansera erhölls med ovan anförda reagens följande värden: Serum d-amylas 1 23,5 U/1 2 88 U/1 3 100 U/1 N 120 U/1 5 146 U/1
Claims (2)
1. Förfarande för utvinning av maltos-fosforylas eller/och B-fosfoglukomutas, som är väsentligen fria från a-glukofiidas. _ ur mikroorganismer, k ä n n e t e c k n a t därav, att Lacto- bacillus brevis DSM 200511, NcIB 8836; NcIB 8561 och NcIB 8562, Lactobacillus plantarum DSM 20174 och DSM 43, Lactobgcillus reuteri DSM 20016, Lactobacillus fermentum DSM 20052, Strepto- coccus spec. DSM 1118, DSM 1119, DsM 1120 enar/mh nsM 1121 aíwäzudes.
2. Användning av enligt krav 1 erhållen maltos-fosforylas och ßáfißfoglukomutas som råextrakt eller i anrikad form utan separering för bestämning av a-amylas.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2748036A DE2748036C2 (de) | 1977-10-26 | 1977-10-26 | Verfahren zur Gewinnung von Maltose-phosphorylase oder/und β-Phosphoglucose-mutase und Verwendung derselben |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE7810143L SE7810143L (sv) | 1979-04-27 |
| SE446461B true SE446461B (sv) | 1986-09-15 |
Family
ID=6022326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE7810143A SE446461B (sv) | 1977-10-26 | 1978-09-27 | Forfarande for utvinning av maltos-fosforylas eller/och beta-fosfoglukomutas och anvendning av dessa |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4237221A (sv) |
| JP (2) | JPS6054036B2 (sv) |
| BE (1) | BE871530A (sv) |
| CA (1) | CA1118379A (sv) |
| CH (1) | CH645669A5 (sv) |
| DE (1) | DE2748036C2 (sv) |
| DK (1) | DK147202C (sv) |
| FR (1) | FR2407263A1 (sv) |
| GB (1) | GB2006784B (sv) |
| IT (1) | IT1099048B (sv) |
| NL (1) | NL7808428A (sv) |
| SE (1) | SE446461B (sv) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT362526B (de) * | 1977-09-13 | 1981-05-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagens zur bestimmung von alpha- -amylase |
| US4932871A (en) * | 1987-11-20 | 1990-06-12 | Miles Inc. | Rapid method for preparing chromogenic alpha-amylase substrate compounds at high preparative yields |
| JP3691875B2 (ja) * | 1995-07-31 | 2005-09-07 | 昭和産業株式会社 | 耐熱性マルトースホスホリラーゼ、その製造方法、その製造に使用する菌、および該酵素の使用方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4097336A (en) * | 1976-02-13 | 1978-06-27 | Beckman Instruments, Inc. | Reagent system for beta-amylase assay |
| US4162194A (en) * | 1976-02-13 | 1979-07-24 | Beckman Instruments, Inc. | Kinetic assay for acid phosphotase and composition therefore |
| US4036697A (en) * | 1976-02-13 | 1977-07-19 | Beckman Instruments, Inc. | Kinetic assay for alpha-amylase |
-
1977
- 1977-10-26 DE DE2748036A patent/DE2748036C2/de not_active Expired
-
1978
- 1978-08-14 NL NL7808428A patent/NL7808428A/xx not_active Application Discontinuation
- 1978-08-15 CA CA000309348A patent/CA1118379A/en not_active Expired
- 1978-08-15 DK DK359878A patent/DK147202C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-09-06 IT IT27394/78A patent/IT1099048B/it active
- 1978-09-27 SE SE7810143A patent/SE446461B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-10-17 FR FR7829555A patent/FR2407263A1/fr active Granted
- 1978-10-20 US US05/953,723 patent/US4237221A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-10-23 CH CH1094978A patent/CH645669A5/de not_active IP Right Cessation
- 1978-10-25 BE BE191337A patent/BE871530A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-10-25 GB GB7841853A patent/GB2006784B/en not_active Expired
- 1978-10-26 JP JP53131079A patent/JPS6054036B2/ja not_active Expired
-
1985
- 1985-06-24 JP JP60136218A patent/JPS6178400A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6178400A (ja) | 1986-04-21 |
| DE2748036A1 (de) | 1979-05-10 |
| DK359878A (da) | 1979-04-27 |
| IT1099048B (it) | 1985-09-18 |
| NL7808428A (nl) | 1979-05-01 |
| DK147202C (da) | 1984-11-19 |
| JPS6054036B2 (ja) | 1985-11-28 |
| CH645669A5 (de) | 1984-10-15 |
| BE871530A (fr) | 1979-04-25 |
| DE2748036C2 (de) | 1986-08-21 |
| FR2407263A1 (fr) | 1979-05-25 |
| US4237221A (en) | 1980-12-02 |
| GB2006784A (en) | 1979-05-10 |
| GB2006784B (en) | 1982-01-27 |
| DK147202B (da) | 1984-05-14 |
| CA1118379A (en) | 1982-02-16 |
| IT7827394A0 (it) | 1978-09-06 |
| FR2407263B1 (sv) | 1984-10-19 |
| SE7810143L (sv) | 1979-04-27 |
| JPS5480488A (en) | 1979-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3806416A (en) | Creatine amidohydrolase and process for its preparation | |
| Pathak et al. | Isolation and characterization of salt stable protease producing archaea from marine solar saltern of Mulund, Mumbai | |
| Bonjour et al. | Bacillus tusciae, a new species of thermoacidophilic, facultatively chemolithoautotrophic hydrogen oxidizing sporeformer from a geothermal area | |
| SE446461B (sv) | Forfarande for utvinning av maltos-fosforylas eller/och beta-fosfoglukomutas och anvendning av dessa | |
| JPS61209587A (ja) | 耐熱性ビリルビン・オキシダーゼの製造法 | |
| TW486519B (en) | 1,5-anhydroglucitol by inhibition of enzyme activity | |
| JPS61268178A (ja) | フルクトシルアミノ酸オキシダーゼ | |
| JP3586684B1 (ja) | バリダマイシンをバリエナミンおよびバリダミンに変換する新規微生物 | |
| JP5022044B2 (ja) | 新規ウリカーゼの製造方法 | |
| JP2544094B2 (ja) | アルカリ性セルラ−ゼの製造法 | |
| Omran | Corrosive lesions at concrete infrastructures as promising source for isolating bioactive actinobacteria | |
| JPS6243671B2 (sv) | ||
| JP5010291B2 (ja) | 新規ウリカーゼの製造方法 | |
| Nobakht et al. | Effects of tamoxifen on morphological and ultrastructural aspects of developing hippocampus of rat | |
| JP2898022B2 (ja) | コラーゲン分解酵素の製造方法 | |
| JPH05236954A (ja) | 耐熱性アデノシン−５’−ホスホスルフェートキナーゼ及びその製造法 | |
| Sugita et al. | Purification and some properties of an α-amylase from an anaerobic bacterium isolated from coastal sediment | |
| JPS6112282A (ja) | アルカリ性セルラーゼ生産菌 | |
| JPH04211359A (ja) | 新規微生物 | |
| JPH04211369A (ja) | 好塩性アルカリアミラーゼおよびその製造方法 | |
| GB1571877A (en) | Microbial lipase and its preparation | |
| JPH09234065A (ja) | 新規なゲラン分解酵素とオリゴ糖 | |
| DE2659878A1 (de) | Verfahren zur herstellung von kreatinamidinohydrolase | |
| Verma et al. | Characterization of novel alkaline protease producing streptomyces from alkaline soil of Lucknow,(up), India | |
| JP2008167717A (ja) | 新規ウリカーゼの製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 7810143-3 Effective date: 19891003 Format of ref document f/p: F |