SE446301B - Medicin innehallande para-aminobensoesyra-n-d-xylosid sasom aktiv bestandsdel - Google Patents

Description

7904485-5 terade av ovanstående formel (I) har ett antal fysiologiska egen- skaper såsom blodsockersänkande effekt, antihypertensiv effekt, blodfettsänkande effekt, antiinflammatorisk effekt och central nervhämmande effekt förutom den tumörhämmande effekten. Även om ovannämnda p-aminobensoesyra-N-D-xylosid är en känd före- ning har man ej funnit någon rapport avseende föreningens fysio- logiska effekter.

Syftet med föreliggande uppfinning är följaktligen att åstadkomma en medicin med tumörhämmande effekt, blodsockersänkande effekt, antihypertensiv effekt, blodfettsänkande effekt, antiinflammato- risk effekt och central nervhämmande effekt, baserad på upptäck- ten av den nya medicinska användbarheten av de kemiska föreningar som representeras av ovanstående formel (I).

Föreliggande uppfinning kommer att beskrivas detaljerat i det följande.

De bifogade figurerna l och 2 visar var för sig infraröda ab- sorptionsspektra för de respektive föreningarna l och 2 i tabell l. Den aktiva beståndsdelen i medicinen enligt föreliggande upp- finning har en karboxylgrupp i para-ställning i förhållande till den substituerade aminogruppen på bensenrinqen. R2 i ovanstående formel (I) betecknar en väteatom, en alkalimetall som kan vara vilken som helst förutsatt att den är tillåten för medicinskt bruk, l/2 Ca, l/2 Mg eller l/3 Al, och företrädesvis Na, K, l/2 Mg, l/2 Ca eller l/3 Al, i synnerhet Na. Sockerdelen i den aktiva beståndsdelen har strukturen av en pyranosring.

Sättet att framställa den aktiva föreningen enligt föreliggande uppfinning är som följer: En blandning av 4,5 - 5 g p-aminobensoesyra, 5 - 6 9 D-Xylos den 0,1 - 0,5 g anmonimloria värmas i 40 - 90 m1 ss-iooa-ig etanol eller ren metanol under återflöde för att åstadkomma kon- densation. Efter avslutad reaktion får reaktionsblandningen stå vid rumstemperatur eller på sval plats, och de_utfällda kristal- lerna uppsamlas genom filtrering av reaktionslösningen. Kristal- 7904485-5 'lerna tvättas med vatten, etanol eller etyleter och omkristalli- seras sedan ur en vattenlösning av metanol eller etanol.

För att byta ut väteatomen i karboxylgruppen hos den sålunda fram ställda föreningen mot en bas tillämpar man företrädesvis den kän- da metoden. Föreningen, para-aminobensoesyra-N-D-xylosid, löses i en vattenhaltig etanollösning och ett oorganiskt salt sättes till lösningen för att åstadkomma substitutionen.

De fysikaliska egenskaperna hos föreningarna (den aktiva be- ståndsdelen i medicinen enligt föreliggande uppfinning) fram- ställda på ovan beskrivet sätt framgâr av tabell 1, och deras respektive infraröda absorptionsspektra framgår av fig. l och 2.

Tabell l Fysikaliska egenskaper hos de aktiva föreningarna Smältgunkt Specifik Elementar- Ultraviolett ( C) rotation analys(@) absorption n . ~ 20 ° maximum Forenlng (ak)D (millikron) C : H : N 1. p-aminobensoesyra- 172 +6l,l 53.4: 5.6: 5.3 287 N-D-xylosid i 94% (53.5: 5.6: 5.2) etanol 2. Natrium-p-aminobensoat-149- 0 49.3: 4.9: 4.8 274 N-D-xylosid 158 i vatten (49.5: 4.8: 4.8) Anm: ( : : ) = teoretiska värden för C, H och N (%} Metoderna för bestämning av de fysikaliska egenskaperna var föl- jande: (l) Smältpunkt: bestämdes med hjälp av en mikro-smältpunktsbe- stämningsapparat tillverkad av Yanagimoto Works, Japan. (2) §p§gi§i§wrotatigg¿ bestämdes med användning av en direktav~ läsbar polarimeter Model OR-50 tillverkad av Yanagimoto Works, Japan, på prover med en längd av 50 mm och bestående av en vatten- haltig etanollösning av den sura aktiva föreningen och av en vat- 7904485-5 tenlösning av natriumsaltet av den sura aktiva föreningen. (3) Molekylsammansättninq: elementaranalys utfördes med hjälp av en OHN-Coder Model MT-2 tillverkad av Yanauimoto Works, Ja- pan. (4) Ultraviolett absorptionsspektrum: bestämdes med hjälp av en självregistrerande spektrofotometer Model PS-3T tillverkad av Hitachi Works, Japan, på en vattenhaltig etanollösning av den sura aktiva föreningen och på en vattenlösninq av natriumsaltet av den sura aktiva beståndsdelen i medicinen. (5) Infrarött absorptionsspektrum: bestämdes medelst KBr-metoden med hjälp av en infraröd-absorptionsspektrometer Model DS-70lG tillverkad av Nippon Bunko Co,. Ltd., Japan. Numret på figurerna i spektrogrammet överensstämmer med numret på den aktiva bestånds- delen i medicinen.

De fysiologiska egenskaperna hos den aktiva beståndsdelen i me- dicinen enligt föreligqande uppfinning är följande och beskrives nedan såsom (l) akut toxicitet, (2) antimikrobeffekt, (3) muta- genicitet, (4) fördröjd intrakutanreaktion och (5) antikroppsbil- dande effekt. _(l) Akut toxicitet Den akuta toxiciteten hos den aktiva föreningen undersöktes ge- nom intraperitoneal respektive oral (tvångsmatning) administrering till ICR-JCL-möss. För intraperitoneal administrering löstes för- eningen i fysiologisk saltlösning, och för oral administrering löstes den i destillerat vatten.

Symptomen registrerades fram till den 7:e dagen efter administre- ringen, och LD50 för föreningen erhölls från den sammanlagda död- ligheten fram till den 7:e dagen, i enlighet med den grafiska me- toden enligt Litchfield-Wilcoxon. Resultaten visas i tabell 2; H Som framgår av tabell 2 är LD50 för föreningen större än ll g/kg oavsett administreringssättet, och den visar också att den aktiva 7904485-5 beståndsdelen i ifrågavarande medicin är en ordinär medicin med låg toxicitet, höggradiqt säker.

Tabell_g Akut toxicitet hos den aktiva föreningen (LD30 i g/kg) Förenind Administrerin¶ssätt_ Intraperitonealt Oralt Natrium-p~aminobensoat-N-D-xylosid ll,04 11,75 (2) Antimikrobeffekt Den aktiva föreningen löstes i destillerat vatten i en serie byggd på ett tvåfaldigt utspädningssystem. Dessa utspädda lös- ningar blandades med agarmedium i 9-faldig volym, och blandning- en hälldes i en petri-skål. Hjärtinfusion-agarmedium användes för bakterier, och Sabourauds agarmedium användes för funqi. Efter be~ strykning med förkulturen inokulerades plattorna vid 370C under 20-24 timmar för bakterier och vid 2500 under 3-7 dagar för fungi, och därefter undersöktes tillväxten. Följande mikroorganismer an~ vändes vid bestämningen av antimikrobeffekten: Pseudomonas aeruginosa IAM 1514 Escherchia coli IFO 12734 Staghvlococcus agreus 209 P Bacillus subtilis IAM 1069 Saccharomyces cerevisiae IAM 4207 gandida albicans ATCC 752 Trichophyton mentagrophytes IFO 6124 Asoergillus níaer IAM 3001 Som resultat av ovanstående försök visade det sig att den aktiva föreningen ej hade tillväxthämmande effekt på någon av mikroorga~ nismerna vid en koncentration av l mg/ml. (3) gutagenicitet Som första steg testades den aktiva föreningen vid ett rekombina~ 7904485"5 tionsförsök (i) och som andra steg testades den vid ett åter- förings försök (ii) . (i) En stam av Bacillus subtilis M 45 med bristfällig rekombine- rande reparationsprocess och en vild stam av Bacillus subtilis H 17 med rekombinerande reparationsprocess inokulerades för att bilda egna ej korsande band på en B-2 agar kulturplatta (fram- I' ställd genom att lösa 10 g köttextrakt, l0 g polypepton, J q nat- riumklorid och 15 g agar i l0O0 ml destillerat vatten vid ett pH av 7,0).

En rund bit filterpapper, 8 mm i diameter, som absorberade 0,04 ml av en vattenlösning av den aktiva föreningen (sterilt vatten användes) lades sedan på ytan av agarplattan så att den täckte utgångspunkten för ovannämnda band av bakteriekulturer. Den ino- kukrade B-2 agarkulturen hölls vid 37°C under en natt och längden på det tillväxthämmade området mättes. Kanamycin användes som den negativa kontrollen och Mitomycin C som den positiva kontrollen.

Resultaten från rekombinationsförsöket visas i tabell 3. (ii) Stammarna TA 98 och TA 100 (båda histidinkrävande) av §al- monella tyghimurium användes vid återföringsförsöket. 2 ml av ett mjukt agarkulturmedium (vilket medium i sig bestod av 6 g natriuklorid och 6 g agar i 1000 ml destillerat vatten) till vilket man satt 0,1 volymdel av en vattenlösning av 0,5 mM biotin och 0,5 mM histidin, blandades med 0,1 ml av bakteriesus- pensionen och 0,1 ml av en vattenlösning av den aktiva förening- en och blandningen skiktades pâ minsta möjliga agarkulturmedium.

Efter 2 dagars inkubation vid 37°C räknades antalet återförda ko- lonier.

Furylfuramid (AF-2) användes som den positiva kontrollen. Resul- taten från âterföringsförsöken visas i tabell 4.

Som framgår av tabell 3 visade den aktiva föreningen ej ens nåv gon mutagenicitet vid en koncentration så hög som 5000/ug/platta. 7904485-5 Som framgår av tabell 4 förelåg ingen skillnad mellan mutations- graden orsakad av den aktiva beståndsdelen i medicinen enligt föreliggande uppfinning och den för kontrollprovet, till vilket ingen substans sattes, ej ens vid en koncentration så hög som 5000/ug/platta. Dessa resultat visar att den aktiva föreningen är säker med avseende på mutagenicitet.

Tabell 3 Resultat av rekombinationsförsök Förening Koncentration Tillväxthämmade Skillnadx /ng/platta zonens langd M 45 H 17 mm mm mm Natrium-p-aminobensoat- 500 0 0 N-D-xylosid 5000 O 0 0 Kanamycin 10 5 4 1 Mitomycin C 0,05 12 2 10 Anm: X Skillnad = längden på tillväxthämmade zonen för M45-minus längden på tillväxthämmade zonen för H17 Tabell 4 Resultat av återföringsförsök Förening Koncentration Antal återförda kolonier /ug/platta antal/platta TA 100 TA 98 Natrium-p-aminobensoat- 5000 58 4 N-D-xylosid Furylfuramid 0,1 911 167 Kontroll (ingen tillsats) ~- 149 13 7904485-5 (4) Fördröjd intrakutanreaktion För att få kännedom om den aktiva föreningens effekter på cell- immunitet utfördes reaktionsförsök på trampdynor med ICR-JCL- möss som försöksdjur och erytrocyter från får som antigen.

En mus primärsensibiliserades först genom injektion av 0,2 ml av en l0%-ig suspension av fårerytrocyter i fysiologisk saltlös- ning i kaudalvenen och efter 7 dagar från den första sensibili- seringen injicerades 0,05 ml av en 40%-ig suspension av fåreryt- rocyter i fysiologisk saltlösning i trampdynan såsom en andra sen- sibilisering. Trampdynans tjocklek mättes följande dag. Den aktiva beståndsdelen i medicinen enligt föreliggande uppfinning administre- rades i en dos av 250 mg/kg/dag l gång per dag under de följande 5 dagarna, räknat från den dag då den första sensibiliseringen ut- fördes.

Resultatet visade att det ej förelâg någon markant skillnad mellan ökningen av tjockleken på trampdynan hos den mus som administrerats med den aktiva föreningen jämfört med ökningen hos den grupp av möss som ej administrerats med den aktiva föreningen. (5) Antikroppbildande effekt För att få kännedom om den aktiva föreningens effekter på humoral- immunitet utfördes hemagglutinationsförsök med ICR-JCL-möss som sensibiliserats med fårerytrocyter.

En mus sensibiliserades genom injektion av 0,2 ml av en 10%-ig suspension av fårerytrocyter i fysiologisk saltlösning i kaudal- venen, och efter 7 dagars sensibilisering användes musens blod vid ett hemagglutinationsförsök för bestämning av den antikropp- bildande effekten. Den aktiva föreningen adminístrerades under 5 på varandra följande dagar efter sensibiliseringsdagen intra- peritonealt i en dos av 250 mg/kg/dag.

Resultatet visade att det ej förelåg någon markant skillnad i agg- lutinationstiter mellan gruppen som administrerats med den aktiva föreningen och kontrollgruppen. 7904485-5 Följande farmakologiska egenskaper hos den aktiva beståndsdelen i medicinen enligt föreliggande uppfinning beskrives nedan: (l) blodsockersänkande effekt, (2) antihypertensiv effekt, (3) tumörhämmande effekt, (4) analgetisk effekt, (5) antipyretisk ef- fekt, (6) antiinflammatorisk effekt och (7) blodfettsänkande ef- fekt. (l) Blodsockersänkande effekt Streptozotocin administrerades intraperitonealt till en grupp Wistar-råttor i en dos av 60 mg/kg, och sedan man fastställt po- sitiv sockerhalt i urinen från djuren på den 8:e dagen administre- rades dessutom vanligt insulin till råttorna för att minska sock- erhalten både i urin och blod. Av de så behandlade djuren använ- des de som verkligen visade ett högre urinsockervärde och även ett högre blodsockervärde (medelvärde 500 mg/dl) efter några få dagars insulinbehandling såsom typdjur för sådana behäftade med artificiell diabetes mellitus. Den aktiva föreningen administre- rades oralt till typdjuren i form av en lösning i destillerat vat- ten i en dos av 30 respektive 300 mg/kg. Blodprover togs 3 och 6 timmar efter administrerinqen, och bestämningen av glukos i pro- vet gjordes med hjälp av en RaBa~apparat (tillverkad av Chugai Pharmaceutical Co., Japan) i enlighet med enzymmetoden.

Resultaten visas i tabell 5. Som framgår av tabell 5 var skill- naden mellan blodsockervärdena före och efter administreringen av den aktiva föreningen (Å) -värdet) större än ÅS-värdet för kontrolldjuren, vilka endast gavs destillerat vatten. Éabellfiä Blodsockersänkande effekt Förening Dos Ändring av blodsockrets Å: -värde i mg/dl efter mg/kg 3 tim e tim Natrium-p-aminobensoat- 30 -105 -110 N-D-xylosid 300 _ 58 _ 63 Kontroll - - 36 - 39 7904485-5 10 (2) Antihygertensiv effekt En vattenlösning av den aktiva föreningen i destillerat vatten administrerades oralt till råttor med spontan hypertension i do- ser av 30 respektive 300 mg/kg, och deras blodtryck bestämdes 3 och 6 timmar efter administreringen medelst en sfygmomanome- ter (tillverkad av Ueda Works, Japan, Model USM-l05R). Skillna- den i blodtryck före och efter administreringen användes som värdering av den aktiva föreningens antihypertensiva effekt. Me- delvärdet för blodtrycket hos ovannämnda råttor vid spontan hy- pertension var 200 mm Hg.

Resultaten visas i tabell 6. Som framgår av tabell 6 hade den aktiva föreningen en tydlig antihypertensiv effekt.

Tabell 6 Antihypertensiv effekt Förening Dos Minskning av blodtrycket I mg/kg efter 3 tim 6 tim mm Hg Natrium-p-aminobensoat- 30 32 35 N-D-xylosid 300 26 25 Kontroll - -Zx 2 Anm: x Blodtrycket steg med 2 mm Hg (3) Tumörhämmande effekt Sarkom l80 transplanterades subkutant i högra axiullen på ICR- JCL-möss i en mängd av l x 106 celler/mus, och från och med 24 timmar efter transplantationen administrerades oralt varje dag en vattenlösning av den aktiva föreningen i steriliserad fysio- logisk saltlösning i en dos av 500 mg/kg, sammanlagt 10 gånger.

På den 25:e dagen efter transplantationen avlägsnades den knut- lformiga tumören (tumörerna) och vägdes. 7904485-5 ll Inhiberingseffekten (I.R.%) av den aktiva föreningen beräknades med hjälp av följande formel: (1 - T/C) X 100 = I.R.(%) vari T = medelvikt för tumören (tumörerna) hos den behandlade gruppen av möss C = medelvikt för tumören (tumörerna) hos kontrollgruppenx av möss Anm: X Transplanterade men ej administrerade möss Försöksresultatet visas i tabell 7. Som framgår av tabell 7 hade den aktiva föreningen tumörhämmande effekt.

Tabell 7 Tumörhämmande effekt mot Sarkom 180 Förening Inhiberinqsförmåga I.R.% Natrium-p-aminobensoat-N-D-xylosid 54,7 Anm: Den administrerade mängden var 10 x 500 mg/kg, oralt (4) Analqetisk effekt Essëëmainmueëelëëmllelsaai-slsieëniasëueëesklsfeaelztëëaêa: ërinsaëafzels Honmöss av ICR-typ med ett tröskelvärde för smärta av 50-80 mm Hg när basdelen på svansen utsattes för tryck med hjälp av en tryckalstrande apparat (tillverkad av Natsume Works, Japan) en- ligt Takagi och Kameyama valdes som försöksdjur, varvid varje grupp bestod av 10 djur.

Efter administrering av den aktiva föreningen fortgick försöket oavbrutet, och det anbringade trycket och tidsperioden fram till det att djuren visade en skenbar flyktreaktion registrerades för 7904485-5 12 värdering av den aktiva föreningens analgetiska effekt.

Resultatet visas i tabell 8. Såsom framgår av tabell 8 var trycket som djuren utsattes för när de uppvisade den skenbara flyktreaktionen högre hos de djur som fått dsxaktiva föreningen än hos icke administrerade djur, och tidsperioden från försökets början och fram till den punkt då djuren reagerade var längre för djur som fått den aktiva föreningen än för icke administre- rade djur. Den aktiva föreningens analgetiska effekt bekräftades sålunda. êssëëfflning medelstlsemisk rsëainqsmsæš- Den aktiva föreningen administrerades oralt till en grupp hon- råttor (10 djur) av ICR-typ, 5-6 veckor gamla, och 30 minuter efter administreringen injicerades mössen intraperitonealt med en 0,6%-ig vattenlösninq av ättiksyra i en dos av 0,1 ml/10 g kroppsvikt. Antalet smärtrörelser hos en mus, 10 minuter efter den intraperitoneala administreringen och under 10 minuter, no- terades. Den analqetiska effekten bedömdes med utgång från den smärtlindrande grad som erhölls med användning av följande for- mel: (1 - T/C) X 100 = smärtlindrande grad (%) ll medelantal smärtrörelser hos den administrerade gruppen medelantal smärtrörelser hos kontrollgruppen vari T O ll Resultatet visas i tabell 9. Som framgår av tabell 9 hade den ak- tmaæflàææmnimüflmnwhfifüflmfiwewfimmm analgetisk effekt.Vid ovannämnda förfarande följdes metoden en- ligt Kostet et al. (1959). 7904485-5 13 ïagel 8 Analgetisk effekt vid den mekaniska retningsmetoden Skenbar flyktreaktion Föreninq upptradde vid ett efter en tryck av tid av mm Hg sek Natrium~p-aminobensoat~N-D-xylosid 106 47 Kontroll i 70 33 Anm: Administrerad mängd var 1000 mg/kq, oralt Tabell 9 Analgetisk effekt vid den kemiska retningsmetoden Förening I.R.% Natrium-p-aminobensoat-N-D~xylosid 48,1 Anm: Administrerad mängd var 1000 mg/kg, oralt, (5) Antigïretisk effekt_ Metoden enligt Winter et al. (1961) följdes, varvid en 20%-ig suspension av öljäst subkutant injicerades i en grupp råttor (bestående av 6 djur), och efter 10 timmars fasta administrerades den aktiva föreningen oralt till råttorna och deras rektaltempe- ratur noterades.

Den antipyretiska effekten angavs som Graden av hämning av pyrexi orsakad av öljäst (I.R.%) vid den tidpunkt då den aktiva före- ningens antipyretiska effekt var maximal, och den beräknades med hjälp av följande formel: C Antipyretisk effekt = I.R.(%) = El _ C x 100 1 2 vari T = rektal medeltemperatur hos råttor till vilka den aktiva föreningen administrerats 7904485-5 14 Cl = rektal medeltemperatur hos råttor injicerade med öljäst, utan den aktiva föreningen C2 = rektal medeltemperatur hos obehandlade råttor (kontroll) Resultatet visas i tabell l0. Som framgår av tabell l0 hade den aktiva föreningen en avsevärd antipyretisk effekt.

Tabell 10 Antipyretisk effekt Förening Antipyretisk effekt (febersänkande) I.R.% 70,0 Natriumrp-aminobensoat-N-D-xylosid (6) Antiinflammatorisk effekt (a) ëëmfßsnës_sššslsë_eâ_ssrrssssaiazëêsæ Man följde metoden enligt Van Arman et al. (1963) och administre- rade den aktiva föreningen oralt genom tvångsmatning till varje råtta i en grupp bestående av 10 djur i en dos av 1000 mg/kg, och l timme efter administreringen injicerades 0,1 ml av en 1%-ig suspension av carrageenin i fysiologisk saltlösning i den högra trampdynan. Trampdynans volym mättes fortlöpande och den antiin- flammatoriska effekten angavs som den aktiva föreningens hämmande effekt på uppsvällningen av trampdynan orsakad av carrageenin, varvid användes det under l-4 timmar efter injektionen fastställda maximala värdet, och beräkningen skedde med hjälp av följande for- mel: H-TN)xw0=LK%)=mümflmmmfi%efi&t vari T = medelvolym för trampdynor hos administrerade djur medelvolym för trampdynor hos kontrolldjuren (ej administrerade men injicerade djur) C Resultatet visas i tabell ll. Som framgår av tabell ll hade före- ningen hämmande effekt på ödem orsakat av carrageenin. _.. -__-__._............__.._, V..- _ __... _._l. 7904485-'5 15 (D) §§aaul9mäëaaënëe_s§šet§ Man följde metoden enligt Winter et al. (1963) och implanterade 2 bomullskulor i nackskinnet på varje råtta i en grupp bestående av 6 djur på symmetriska ställen med medianlinjen som symmetri- axel, varvid varje kula hade en vikt av 30ï lmg. Oralt administ- rerades 1000 mg/kg/dag av den aktiva föreningen under eftenöl- jande 7 dagar. På den 8:e dagen avlägsnades det i råttorna bil- dade granulomet och vägdes efter torkning. Den granulomhämmande effekten angavs som hämning av tillväxten av granulom (I.R.%) och beräknades på samma sätt som i (6a). Resultatet visas i ta- bell ll. Som framgår av tabell ll hade den aktiva föreningen häm- mande effekt på granulomtillväxten. <0) Efëënériasëtëmæaa§s_effeët_ Man följde metoden enligt Baris et al (1965) och injicerade en luftvolym subkutant i ryggen på varje råtta i en grupp bestående av 6 djur så att en luftficka bildades, varefter 0,5 ml av en 1%-ig lösning av krotonolja i sesamolja injicerades i fickan. Oral administrering av 1000 mg/kg/dag av den aktiva föreningen påbör- jades därefter och fick fortgå under 5 dagar. På den 6:e dagen bestämdes mängden i fickan utsöndrad vätska och den utsöndrings- hämmande effekten, angiven som grad av utsöndringshämmande ef- fekt, beräknades på samma sätt som i (6a). Resultatet visas i ta- bell ll. Som framgår av tabell ll hade den aktiva föreningen ut- söndringshämmande effekt. (d) Artrithämmande effekt Man följde metoden enligt Fujiwara et al. (1971) och injicerade subkutant Mycobacterium tuberculosis suspenderat i flytande pa- raffin i högra trampdynan på varje råtta i en grupp bestående av flera än 6 råttor. 14 dagar efter injektionen utvaläs råttor med samma volym på trampdynorna för att bilda grupper (10 djur/grupp), och den aktiva föreningen administrerades oralt dagligen från den 15:e dagen och under efterföljande 7 dagar i en dos av 1000 mg/kg/ dag. volymen på råttornas trampdynor mättes, och den artrithäm- mande effekten av den aktiva föreningen beräknades som hämnings- .... ._..._...__.__.._...__......_._.....___.._.._. . 7904485-5 16 grad för uppsvällningen av trampdynan med hjälp av den i (6a} angivna formeln. Resultatet visas i tabell ll. Som framgår av tabell ll hade den aktiva föreningen artrithämmande effekt.

Tabell 11 Antiinfiemmeteriek effekt Förening Ödem Granulom Utsöndring Artrit Natrium-p-aminobensoat- 50,6 13,2 39,7 41,3 N-D-xylosid_ Anm: Administrerad mängd av den aktiva föreningen = 1000 mg/kg/dag (7) Blodfettsänkande effekt Japanska vita han-kaniner utfodrades under ca 3 månader med fast föda (CR-l) innehållande 1% kolesterol, och de djur hos vilka en ökad lipidhalt i blodserum konstaterades användes som typdjur för sådana behäftade ned experimentell arterioskleros.

En vattenlösning av den aktiva föreningen i destillerat vatten administrerades oralt till varje djur i doser av 30 respektive 300 mg/kg, och efter admínistreringen togs fortlöpande blodpro- ver frân öronvenen, och förändringen av total kolesterolhalt (bestämd enligt enzymmetoden), fosfolipidhalt (bestämd enligt enzymmetoden) och beta-lipoprotein (bestämd genom grumlingsmät- ning) i blodserum noterades.

Resultaten visas i tabell 12. I tabell l2 har värdena för serum- kolearol (medelvärde 550 mq/dl/, serumfosfolipid (medelvärde 320 mg/dl) och serum-beta-lipoprotein (medelvärde 2500 mg/kg) före administrering subtraherats från de respektive värdena 3 och 6 timmar efter administreringen, och endast de respektive skillnaderna anges. Sålunda anger minusvärdena minskningexoch plusvärdena ökningen av de respektive värdena på grund av admini- streringen. Som tydligt framgår av tabell 12 hade den aktiva före- ningen förmåga att nedbringa halten av lipidkomponenter vid jäm- förelse med kontrolldjuren. 7904485-5 17 w 1 w + m + o mH| o | Hfiouucom om: omfiz ßwfln mæfla mß 1 mm: com måmoHbTnTz mm: mß I wNH| mwfll wflfil mm! om |umomcwno:«Em|m1E5flnumz Eflu w Efiø m Eflu w Eau m EH» w Eflu m H@\we H@\@a H@\Us mx\@a Howwwmmfiom cflwuonmomflfilmvwß wfimflfiowmom mom mnficwnmm uxmmmw w@flmMSwmuumm©OHm NH Hflwnmm 7904485-5 18 Inblandningen av den aktiva föreningen för framställning av me- dicinen enligt föreliggande uppfinning beskrives nedan.

När medicinen skall användas som ett antiinflammatoriskt medel är det möjligt att insätta den i en form som är lämplig för att få den effekt som svarar mot sjukdomens art och symptom, och dessutom kan den aktiva föreningen insättas som sådan eller användas i bland- ningar i kombination med något annat för farmaceutiskt bruk till- låtet utspädningsmedel eller med andra mediciner.

Medicinen enligt föreliggande uppfinning administreras oralt el- ler parenteralt och kan följaktligen föreligga i varje form som är lämplig för oral eller parenteral administrering.

Medicinen enligt föreliggande uppfinning kan förekomma i form av enhetsdoser för administrering. Medicinen kan ha formen av pulver, granulat, tabletter, sockeröverdragna tabletter, kapslar, suppo- sitorier, suspensioner, lösningar, emulgerbara koncentrat, ampul- ler, injektioner etc. Som utspädningsmedel kan användas fasta äm- nen, vätskor och halvfasta substanser, t.ex. excipienter, binde- medel, vätmedel, upplösande medel, ytaktiva medel, lenande medel, dispergermedel, buffertmedel, parfymer, konserveringsmedel, upp- lösningshjälpmedel och lösningsmedel. Vidare kan ett eller flera av dessa tillsatsmedel användas i kombinationer eller i blandning- är.

Medicinen enligt föreliggande uppfinmng kan framställas på vilket som helst känt sätt, och mängden aktiv förening som ingår i kompo- sitionen (preparatet) är generellt mellan 0,01 och 100 vikt-%.

Medicinen enligt uppfinningen kan administreras oralt eller paren- teralt till människor och djur, men företrädesvis administreras den oralt. Sublingual administrering innefattas i oral administre- ring. Parenteral administrering inkluderar subkutan,intramuskulär och intravenös injektion och droppinjektion.

Doseringen av medicinen enligt uppfinningen beror på åldern,in- dividuella särdrag och sjukdomstillståndet samt om det gäller män- 7904485-5 19 niska eller djur, och följaktligen kan andra mängder än följande doser administreras: generellt är för människa den orala dosen 0,1 - 1000 mg/kg kroppsvikt/dag, företrädesvis 1 - 500 mg/kg/dag, och den parenterala dosen är 0,01 - 200 mq/kg/dag, företrädesvis 0,1 ~ 100 mg/kg/dag, uppdelat i l-4 delar, varvid 1 del admini- streras per gång.

I det följande ges en mer detaljerad beskrivning avseende samman- sättningen och framställningen av medicinen enligt uppfinningen i form av exempel.

Exempel l Preparat lO viktdelar natrium-p-aminobensoat-N~D-xylosid l5 viktdelar (tung) magnesiumoxid och 75 viktdelar laktos blandades homogent och bereddes till pulver eller qranulat. Pulv- ret fylldes i kapslar för att ge ett kapselformigt preparat.

Exempel 2 Preparat 45 viktdelar natrium-p-aminobensoat-N-D-xylosid 15 viktdelar stärkelse 16 viktdelar laktos 21 viktdelar kristallin cellulosa 3 viktdelar polyvinylalkohol och 30 viktdelar vatten blandades homogent, krossades och bereddes, varefter torkades och formades till qranulat.

Exempel 3 Preparat Granulat framställdes såsom i exempel 2, och en blandning av 96 viktdelar av detta granulat och 4 viktdelar kalciumstearat pres- sades till tabletter med en diameter av 10 mm.

Exempel 4 Preparat 94 viktdelar natrium-p-aminobensoat-N-D-xylosid 6 viktdelar polyvinylalkohol och 30 viktdelar vatten blandades, och blandningen upparbetades till qranulat såsom i exempel 2. Till 90 viktdelar av det så framställda granulatet 7904485-5 20 sattes 10 viktdelar kristallin cellulosa, och blandningen pres- sades till tabletter med en diameter av 8 mm. Tabletterna över- drogs med sirap, gelatin och utfällt kalciumkarbonat så att dragêer erhölls.

Exemgel 5 Preparat 0,6 viktdelar natrium-p-aminobensoat-N-D-xylosid 2,4 viktdelar icke-joniskt ytaktivt medel och 97 viktdelar fysiologisk saltlösning blandades under värmning, varefter blandningen steriliserades så att en injektionslösninq erhölls.

Exemgel 6 Framställning av p-aminobensoesyra-N-D-xylosid och natriumsaltet därav.

En blandning av 2,3 g p-aminobensoesyra, 2,5 g D-xylos och 0,05 g ammoniumklorid värmdes i 25 ml etanol under återflöde. Efter avslutad reaktion separerade kristaller ut när reaktionsbland- ningen fick stå i kylskåp. De så erhållna kristallerna filtrerades av och tvättades med vatten, vattenhaltig metanollösning och där- efter med en liten mämngd eter. Kristallerna, omkristalliserade ur 94%-ig etanol, utgjorde färglösa nålar. Utbytet var 73,7%. När ammoniumsulfat insattes i stället för ammoniumklorid erhölls sam- ma resultat.

Sålunda framställd p-aminobensoesyra-N-D-xylosid löstes långsamt i en 1%-ig vattenlösning av natriumhydroxid, totalt innehållande den beräknade mängden natriumhydroxid, och efter filtrering kon- denserades lösningen under reducerat tryck. Kristallerna som se- parerade ut vid tillsats av ett stort överskott aceton till kon- densatet, dehydratiserades och torkades. Färglösa kristaller av natriumsaltet erhölls i ett utbyte av l00%. Det totala utbytet räknat på p-aminobensoesyra var 73,7%. _ i l _ .._._....._.-.~.e__-P.___.-._....-__--

Claims (3)

21 7904485-5

1. PATENTKRAV i. Medicinsk komposition för behandling av hyperglykemi, hypertension, hyperlipemi, inflammatoriska sjukdomar, smärta, pyrexi eller tumör, k ä n n e- t c c k n a d av att den som aktiv beståndsdel innehåller en förening betecknad med den allmänna formeln: nl - Na -<=>\- cooR2 (I) vari R1 betecknar den restgrupp som bildas då OH i l(alfa)- eller l(beta)-ställning avlägsnas från xylos, och R2 betecknar H, Na, K, 1/2 Mg, 1/2 Ca eller 1/3 Al.

2. Medicinsk komposition enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgörs av p-aminobensoesyra-N-D-xylosid.

3. Medicinsk komposition enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgörs av natrium-p-aminobensoat-N-D-xylosíd. ..._ _. ...-.~.....~......-__._.~..-. .__