SE444682B

SE444682B - Nya 7alfa-metoxicefalosporiner

Info

Publication number: SE444682B
Application number: SE7808066A
Authority: SE
Inventors: I Saikawa; S Takano; H Imaizumi; I Takakura; H Ochiai; T Yasuda; H Taki; M Tai; Y Kodama
Original assignee: Toyama Chemical Co Ltd
Priority date: 1977-07-23
Filing date: 1978-07-21
Publication date: 1986-04-28
Also published as: US4321265A; SE8004979L; DK164169B; SE446188B; DK326778A; IL55174A0; NL180511C; FI782294A; DE2831568A1; FR2398071B1; FI71744C; US4395412A; FR2468612A1; FR2398071A1; IL55174A; CH646976A5; AU511994B2; GB2009161A; AU3815178A; SE7808066L

Description

'7808066-0 O 0 W A-N NëCOHH~CH-CO- I B (Rön vari R3, n, A och B har den i det följande angivna betydelsen och salter av föreningarna icke uppvisar någon av de nämnda olägenheterna.

Det är ett ändamål med uppfinningen att tillhandahålla nya 7&rmetoxicefalosporiner vilka i sin molekyl uppvisar en 2,3- dioxo~l-piperazinkarbonylamidogrupp och en grupp B.

Det är ett annat ändamål med uppfinningen att tillhandahålla nya 7urmetoxicefalosporiner med ett brett antibakteriellt spektrum.

Det är ett ytterligare ändamål att tillhandahålla nya 7u-metoxi- cefalosporiner med hög resistens mot 5-laktamas producerad av bakterier.

Det är ett ytterligare ändamål enligt uppfinningen att till- handahâlla nya 7armetoxicefalosporiner med en effektiv anti- bakteriell aktivitet mot kliniska isolat av bakterier.

Det är ett ytterligare ändamål enligt uppfinningen att till~ handahålla ett förfarande för framställning av de nya 7d- metoxicefalosporinerna.

Andra ändamål och fördelar med uppfinningen framgår av den följande beskrivningen. 7808066-0 Föreningen enligt uppfinningen omfattar en 7 -metoxicefalo~ sporin med den allmänna formeln Ü O O S l-N N-couH-cH-oouﬂ f Ä 7 s f \__'/ B 1 1 . 1 0 C303? vari Rl betecknar en väteatom eller en difenylmetylgrupp, R2 betecknar en Cl_l0 acyln pyridazinyltiß; tiadia20lY1ti07 tïí“ azolyltio-eller tetrazolyltiogrupp som kan vara substituerad med en cl_5 aikyiv karboxi-cl_5 alkylv karbamoyl-Cl_5 alkylﬂ hydroxi-Cl_5 alkyk, hydroxiv C2_5 alkenyly hydroxiimino-Cl_5 alkyly Cl_l0 acyl-Cl_5 alkyly N-hydroxikarbamoyl-Cl5_-alkylﬂ di-C alkylamino-C alkyl-eller amino-C _, alkylgrupp, 1-S 1-5 1 » A betecknar en väteatom eller en Cl_l4 alkylgrupp och B betecknar tiazolyl, tienyl, furylf C5_6 CYk10alkadïenY1 eller C 4 alkyl, som kan vara substituerad med en halogenatom eller l...

Cl-5 alkoxi-, hydroxi-, Cl_l0 äCylOXi': @t0XíStYl'- 2“t@tfa' hydropyranyloxi-, amino-, skyddad amino-, imino- eller skyddad iminogrupp.

Uttrycket "alkyl" avser häri en rak eller grenad alkylgrupp med l-14 kolatomer, såsom metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, pentyl, hexyl, heptyl, oktyl, dodecyl och liknande; uttrycket "alkoxi" avser häri en envärd ~O-alkylgrupp, vari den ovan definierade alkyldelen är bunden till syre, nämligen en rak eller grenad alkoxigrupp med l-l4 kolatomer; uttrycket “lägre alkyl" avser häri en rak alkylgrupp med l~5 kolatomer, såsom metyl, etyl, propyl, butyl eller pentyl; uttrycket "lägre alkoxi" avser häri en envärd -O~lägre alkylgrupp, vari den ovan definie- rade lägre alkylgruppen är bunden vid syre, nämligen en rak alkoxigrupp med l-5 kolatomer; uttrycket "acyl" avser häri en acylgrupp med l-lO kolatomer, såsom acetyl, propionyl, butyryl, røogymmﬁifrïj, fgfr-fw» » ya. 7808066-0 bensoyl, naftoyl, pentankarbonyl, cyklohexankarbonyl, furoyl, tcnoyl eller liknande; och uttrycket "atyloxi" avser häri en envärd -O-acylgrupp vari den ovan definierade acyldelen är bunden vid syre, nämligen en acyloxigrupp med l~lO kolatomer.

Varje grupp representerad med B inkluderar ställningsisomerer (således inkluderar exempelvis tienylgruppen 2-tienyl och 3- tienyl).

När tautomerism är känd för att existera i någon av de grupper som representeras av B, inkluderas tautomererna inom ramen för uppfinningen. Således existerar exempelvis 2-(substituerad)- aminotiazolylgruppen i tautomera former, vilka föreligger i jämnvikt, såsom visas av följande jämviktsformler: N _' ---è HH : »S <-- få" RA, 115 vari R4 är en amino eller en skyddad aminogrupp och R5 är en imino eller skyddad iminogrupp.

Salter av 74-metoxicefalosporin enligt uppfinningen represen- terade av den allmänna formeln (I) inkluderar sådana som bildas vid den sura gruppen och sådana som bildas vid den basiska gruppen, vilka samtliga är kända inom penicillin- och cefalo- sporinkemin. Av salterna är de farmaceutiskt godtagbara salterna särskilt lämpliga. De salter som bildas vid den sura gruppen inkluderar salter med alkalimetaller, såsom natrium, kalium och liknande; jordalkalimetaller, såsom kalcium, magnesium och liknande; ammonium; och kvävehaltiga organiska baser, så- 'som prokain, dibensylamin, N-bensyl-ß-fenetylamin, l~efenamin, 7808066-0 N,N-dibensyletylendiamin, trimetylamin, trietylamin, tributyl- amin, pyridin, dimetylanilin, N-metylpiperidin, N-metylmorfo- lin, dietylamin och dicyklohexylamin.

De salter som bildas vid den basiska gruppen inkluderar salter med mineralsyror, såsom saltsyra, svavelsyra och liknande; organiska karbonsyror, såsom oxalsyra, myrsyra, triklorättik- syra, trifluorättiksyra och liknande; och organiska sulfonsyror, såsom metansulfonsyra, toluensulfonsyra, naftalensulfonsyra och liknande.

Alla optiska isomerer och racemiska föreningar och alla kristall- former och hydrater av 7Grmetoxicefalosporin representerad av den allmänna formeln (I) och salter därav inkluderas inom ramen för uppfinningen.

Föreningarna representerade av den allmänna formeln (I) eller salter därav framställes enligt kända metoder, såsom enligt sådana som beskrives i det följande.

Framställningsmetod (1): En metod varvid en förening med den allmänna formeln fmHö 6 ~ f, É S R -rrH-cfa-corm I L ir ca f? B / 12* O COOR (II) vari R6 är en väteatom, en organisk silylgrupp eller en orga- nisk fosforhaltig grupp och Rl, R2 och B har den ovan angivna betydelsen, omsättes med ett reaktionsbenäget derivat i karboxi- gruppen av en förening med den allmänna formeln yífšíbR OUÄIÉFL' r 7808066-0 0 Q “\ { A-H NÄCOOH (III) vari A har den ovan angivna betydelsen.

Framställningsmetod (2): En metod varvid en förening med den allmänna formeln 9% Rim : S 2 N I C323 (IV) 0 coon? vari Rl, R2 och R6 har den angivna betydelsen, omsättos med en förening med den allmänna formeln °\ P \ I (v) A-N nacomﬂ-en-coon \__/ I B vari A och B har den ovan angivna betydelsen, eller ett _. >~.»¿»...=LA..¿a.. ' 7808066-0 reaktionsbenäget derivat vid karboxigruppen av nämnda före- ning (V).

Framställningsmetod (3): En metod varvid ett cefalosporin med den allmänna formeln O O \§"J( 3 A-H HLCONH~CH-CONE -1-Tjï;1__“ 2 \-/ ﬂ #1/ “fila (VI) B / I' b? l 0 COOR vari Rl, R2, A och B har den angivna betydelsen, omsättes i närvaro av metanol med ett alkalimetallmetylat med den allmänna formeln ]_+ M 'ocH (VII) 3 vari M1 är en alkalimetall, och därefter omsättes med ett halogeneringsmedel.

Framställningsmetod (4): En metod varvid ett 7drmetoxicefalosporin med den allmänna formeln 7808066-0 8 o o \l\ /( Sms A-zr n-conra-cH-corm f S 7 (VIII) *'- å N 05211 o 000111 vari R7 är en grupp som med lätthet kan ersättas med ett nukleofilt medel och Rl, n, A och B har den ovan angivna betydelsen, omsättes med en förening med den allmänna formeln R M” (IX) vari M2 är väte, en alkalimetall eller en jordalkalimetall och R2 har den angivna betydelsen.

De organiska silylgrupperna och de organiska fosforhaltiga grupperna representerade av R6 i nämnda allmänna formler- inkluderar sådana grupper som konventionellt användes såsom amino- eller karboxiskyddande grupp inom penicillin- och cefalo- sporinsynteskemin, såsom 0\ 0\ (gﬂsßgiﬁ (øa3)2si<, Eo/ P-, <0, och (C2H5)2P-, vilka med lätthet avlägsnas genom behandling med exempelvis vatten eller en alkohol.

P-, (c2H5o)2P-, Grupperna representerade av R7, vilka med lätthet kan ersättas med ett nukleofilt medel, inkluderar halogenatomer, såsom klor, brom och liknande; lägre alkanoyloxigrupper, såsom for- myloxi, acetoxi, propionyloxi, butyryloxi, pivaloyloxi och liknande; arylkarbonyloxigrupper, såsom bensoyloxi, naftoyloxi och liknande; aryltiokarbonyloxigrupper, såsom tiobensoyloxi, tionaftoyloxi och liknande; arylkarbonyltiogrupper, såsom .bensoyltio, naftoyltio och liknande; aryltiokarbonyltio- grupper, såsom tiobensoyltio, tionaftoyltio och liknande; 7808066-0 9 karbamoyloxi; tiokarbamoyloxi; pyridin-N-oxid-2-yl; och pyri- dazin-N-oxid-6-yl. Dessa grupper representerade av R kan vidare innehålla substituenter, såsom exempelvis halogen, nitro, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, acyl eller liknande.

Den förening som representeras av formeln (V) erhålles med lätt- het genom omsättning mellan ett alkalimetallsalt, ett jordalkali- metallsalt eller ett organiskt bas-salt av en förening med den allmänna formeln när-en-coon (X) B vari B har den angivna betydelsen, och ett reaktionsbenäget derivat vid karboxigruppen av en förening med den allmänna formeln (III) i närvaro av syrabindande medel i ett inert lösningsmedel.

Föreningarna med de allmänna formlerna (II) och (IV) kan synte- tiseras på i och för sig känt sätt, exempelvis enligt Journal of Synthetic Organic Chemistry, Japan, vol. 35, 568-574 (1977).

De praktiska detaljerna vid förfarandena (1), (2), (3) och (4) beskrives i det följande.

Metoderna (l) och (2) kan utföras under nästa samma betingel- ser. Föreningen (II) eller (IV) löses eller suspenderas i ett inert lösningsmedel, såsom vatten, aceton, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, dimetylformamid, dimetylacetamid, meta- nol, etanol, metoxietanol, dietyleter, diisopropyleter, bensen, toluen, metylenklorid, kloroform, etylacetat eller metyliso- butylketon, vardera separat eller i blandning av två eller flera.

Den erhållna lösningen eller suspensionen försättes med ett reaktionsbenäget derivat i karboxigruppen av föreningen (III) eller föreningen (V) eller ett reaktionsbenäget derivat i karboxigruppen eller föreningen (V). Blandningen får reagera i närvaro eller frånvaro av en bas vid en temperatur mellan -eo och so°c, företrädesvis -4o° till 3o°c. En reaktionstia :eller ...e-- Qimhniï' , ...._...-.....»_....-...-- 7808066-0 10 av 5 minuter till 5 timmar är vanligen tillräcklig.

De vid nämnda reaktion använda baserna inkluderar oorganiska baser, såsom alkalimetallhydroxider, alkalimetallvätekarbonater, alkalimetallkarbonater och alkalimetallacetater; tertiär aminer, såsom trimetylamin, trietylamin, tributylamin, pyridin, N-metyl- piperidin, N-metylmorfolin, lutidin, kollidin och liknande; och sekundära aminer, såsom dicyklohexylamin, dietylamin och liknande.

När föreningen (V) eller ett salt därav användes vid metod (2) såsom utgângsmaterial, kan reaktionen utföres i närvaro av ett dehydratiserande kondensationsmedel, såsom N,N'-dicyklo- hexylkarbodiimid, N-cyklohexyl-N'-morfolinoetylkarbodiimid, N,N'-dietylkarbodiimid, N,N'-karbonyl-bis(2-metylimidazol), trialkylfosfit, etylpolyfosfat, fosforoxiklorid, fosfortri- klorid, 2-klor-1,3,2-dioxafosfolan, oxazolylklorid, dimetyl- klorforminiumklorid och dimetyletoxiforminiumklorid.

Metoden (3) utföres på följande sätt: Ett cefalosporin med formeln (VI) erhållet på känt sätt (japanska patentpublika- tionerna 70.788/76 och ll3.890/76) löses eller suspenderas i ett inert lösningsmedel, såsom tetrahydrofuran, dioxan, etylen- glykoldimetyleter, metylenklorid, kloroform, dimetylformamid, dimetylacetamid, acetonitril, metanol eller liknande eller en blandning av två eller flera av dessa lösningsmedel. Den er- hållna lösningen eller suspensionen försättes med ett alkali- metallmetylat (VII) tillsammans med metanol. Den erhållna bland- ningen underkastas reaktion och reaktionsblandningen omsättes därefter med ett halogeneringsmedel. Vid denna reaktion användes metanol i överskott och den använda mängden alkalimetallmetylat (VII) är företrädesvis 2-6 ekvivalenter per ekvivalent av det använda cefalosporinet (VI). Uttrycket "i överskott" avser en n-mängd som är störra än l ekvivalent per ekvivalent av cefalo- sporinet (VI). Samtliga nämnda reaktioner utföres vid en tem- peratur mellan -l20° och -lO°C, företrädesvis mellan -lOO° och -50°C. En reaktionstid av 5-30 minuter är tillräcklig och reaktionen avslutas genom surgöring av reaktionssystemet.

W _.. ._ ......._.._...._._._w-___....._._ H. . ,. 7808066-0 ll Det vid denna metod använda halogeneringsmedlet är vanligen känt för att vara en källa för en positiv halogenatom, såsom Cl+, Br+ eller I+. Exempel på sådana halogeneringsmedel inklu- derar halogener, såsom klor, brom och liknande; N-halogenimider, såsom N-klorsuccinimid, N~bromsuccinimid och liknande; N-halo- genamider, såsom N-kloracetamid, N-bromacetamid och liknande; N-halogensulfonamider, såsom N-klorbensensulfonamid, N-klor-p- toluensulfonamid och liknande; l-halogenbensotriazoler; l~ halogentriaziner; organiskt hypohalogenit, såsom tert.-butyl- hypoklorit, tert.-butylhypojodid och liknande; halogenhydantoiner, såsom N,N-dibromhydantoin och liknande. Av dessa halogenerings- medel är tert.-butylhypoklorit särskilt lämpligt. Halogenerings- medlet användes i en mängd tillräcklig för att tillhandahålla en positiv halogen i en mängd ekvivalent med den av cefalospo- rinet med den allmänna formeln (VI).

Lämpliga syror för avbrytande av reaktionen är sådana syror som vid tillsats till en kall reaktionsblandning icke föror- sakar stelning av reaktionsblandningen eller frysning av reaktionsblandningen till en tung viskös blandning. Exempel på lämpliga syror är 98%~ig myrsyra, isättika, triklorättiksyra och metansulfonsyra.

Efter avslutad reaktion kan överskottet halogeneringsmedel avlägsnas genom behandling med ett reduktionsmedel, såsom trialkylfosfit, natriumtiosulfat eller liknande.

För att utföra produktionsmetoden (4) när en förening med formeln (VIII) användes annan än den förening vari gruppen R är en heterocyklisk aromatisk amin-N-oxidtiogrupp med en tio- grupp på den kolatom som föreligger i grannställning till N~oxidgruppen omsättes nämnda förening med en förening med formeln (IX) i ett inert lösningsmedel, såsom vatten, metanol, etanol, propanol, isopropanol, butanol, aceton, metyletylketon, metylisobutylketon, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, etylacetat, 2-metoxietanol, dimetoxietan, dimetylformamid, dimetylsulfoxid, dimetylacetamid, dikloretan, kloroform, diklormetan och liknande, separat eller en blandning av två eller flera. 7808066-0 12 Nämnda reaktion utföres företrädesvis i ett kraftigt polärt lösningsmedel, såsom vatten. Det är fördelaktigt att upprätt- hålla pH i reaktionslösningsmedlet vid 2-l0, företrädesvis 4-8.

Reaktionen utföres efter tillsats av en buffert, såsom natrium- fosfat, för inställning av pH på det önskade värdet. Ehuru reak- tionsbetingelserna icke är kritiska, utföres reaktionen i all- mänhet vid O-l0O°C under flera timmar till flera tiotals timmar.

När en förening med den allmänna formeln (VIII), vari gruppen R7 är en heterocyklisk aromatisk amin-N-oxidtiogrupp med en tiogrupp på den kolatom som föreligger i grannställning till N-oxidgruppen användes omsättes föreningen med den allmänna formeln (VIII) och en förening med den allmänna formeln (IX) med varandra i det nämnda inerta lösningsmedlet i närvaro av en tvâvärd kopparförening. Denna procedur är särskilt lämplig när föreningen med formeln (IX) är en alkohol, såsom metyl- alkohol, etylalkohol, propylalkohol, isopropylalkohol, n-butyl- alkohol, bensylalkohol, etylenglykol eller liknande. I detta fall förlöper reaktionen elegant vid användning av ett över- skott av alkoholen i egenskap av lösningsmedel. De vid denna procedur använda tvâvärda kopparföreningarna är oorganiska eller organiska tvåvärda kopparföreningar“ såsom koppar(II)- klorid, koppar(II)bromid, koppar(II)fluorid, koppar(II)nitrat, koppar(II)sulfat, koppar(II)borat, koppar(II)fosfat, koppar(II)- cyanid, koppar(II)formiat, koppar(II)acetat, koppar(II)propio- nat, koppar(II)citrat, koppar(II)tartrat, koppar(II)bensoat och koppar(II)salicylat. Den använda mängden tvåvärd koppar- förening är företrädesvis 0,5 mol eller däröver per mol av föreningen med formeln (VIII). Ehuru beroende av karaktären av föreningen med formeln (VIII), den tvåvärda kopparföreningen och föreningen med formeln (IX) använder man i allmänhet en reaktionstemperatur av 0-l0O°C och reaktionstiden ligger från flera minuter till flera dagar. överföring av en förening med formeln (I), vari Rl är en karboxiskyddande grupp, till en förening med formeln (I), vari Rl är en väteatom, eller ett salt av den sistnämnda föreningen, överföring av en förening med formeln (I), vari Rl är väte, 7808066-0 13 till ett salt eller till en förening med formeln (I), vari Rl är en karboxiskyddande grupp, eller överföring från ett salt av en förening med formeln (I) till dess fria syra kan utföras på konventionellt sätt.

Vid omsättning av en förening, vari gruppen A, B eller R2 är reaktionsbenägen, kan den reaktionsbenägna gruppen skyddas med en skyddsgrupp vanligen använd för skydd av en karboxi-, amino- eller hydoxigrupp. Efter reaktionen kan en sådan skyddsgrupp avlägsnas på konventionellt sätt för regenerering av gruppen A, B eller R2.

Betingelserna för framställningen är icke begränsade till de ovan beskrivna, utan modifieras lämpligen i enhetlighet med den speciella typ av reaktionsmedel som användes.

Isolering av ett 7a-metoxicefalosporin (I) eller ett salt därav ur reaktionsblandningen kan utföras på konventionellt sätt.

Metoden för framställningen av ett 7a-metoxicefalosporin med formeln (I) och ett salt därav är icke begränsad till de ovan beskrivna metoderna. Dessa föreningar kan således produ- ceras även enligt andra kända metoder.

Det på så sätt erhållna 7armetoxicefalosporinet med formeln (I) och saltet därav är mycket användbart för terapi av human- och djursjukdomar på grund av deras antibakteriella bredspektrum mot grampositiva bakterier och gramnegativa bak- terier, deras utomordentliga antibakteriella aktivitet mot Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae och Proteus- arter, och deras stabilitet mot 5-laktamas.

Bland olika 7armetoxicefalosporiner enligt uppfinningen är sådana som har formeln (Ia) och salter därav särskilt lämp- liga: 7808066-0 14 o o o šš-z lcsï S A-N 'N-coxæ-ca-ccï-rﬁ ' 2 (Ia) \_._/ å N C323 o coon]- vari A är en väteatom eller en lägre alkylgruPPï B är en tienylgrUPP: en furylgruPPr N““:l_ eller dess tautomer SJ H4- HN-:;_ š}\S (R4 är en aminogrupp eller skyddad aminogrupp R och R5 är en iminogrupp eller skyddad iminogrupp), en C _4- alkylgrupp eller l,4-cyklohexadienylgrupp; och Rl och Rš har den ovan angivna betydelsen. Av de 7a-metoxicefalosporiner som har formeln (Ia) och salter därav är sådana särskilt lämpliga vari B är en tienylgrupp, en furylgrupp, eller ITÉH E11' /Ä\S eller dess tautomer /}\S¶ (R4 och R5 H4 RE har aan Qvan angivna betydelsen), särskilt sådana vari R2 är en acetoxigrupp, substituerad 5-(l,2,3,4-tetrazolyl)~tiogrupp eller 2-(l,3,4~tiadiazolyl)-tiogrupp.

Antibakteriella aktiviteter av de representativa föreningarna (Ib) av 7a-metoxicefalosporinerna¶enliåtﬂnppfinnïnqen-visas itabell I. i " ” O O / Éms g S cs CH -z-.f ir-cozm-ca-csl-m i (Ib) “3 2' \_/ 1 - Da - B _. n 0112.. 78Û8Û66-0 15 värdena angivna i tabell I representerar den minsta inhiberande koncentrationen (MIC i mikrogram/ml) för varje förening, som bestämdes enligt den metod som beskrives i “Chemotherapy" (Society of Chemotherapy, Japan), vol. 16, 98-99 (l968); en kultur erhållen genom odling av ett testbakterium i en hjärtinfusionsodlingsvätska (Eiken Kagaku Co.) ínföres i ett hjärtinfusionsagarmedium (Eiken Kagaku Co.). Efter 20 timmars inkubering vid 37°C undersöktes tillväxten av bakterien för bestämning av den minsta inhiberande koncentrationen (MIC i mikrogram/ml). Ympningsintensiteten av bakterien var lO4 celler/platta (lO6 celler/ml). (l) Minsta inhiberande koncentration (MIC i mikrogram/ml). ._ -_.._....___ ,_....._.._._ PÜÛR Qšïêïešïl . ".'i.-1II~u-~+..__---~ 7808066-0 16 Tabell I enhet: mikrogram/ml \ Förening i [I \ (Ib) cs-lrïo B I *S (kontroll H __ N N __ H ». : 'J 4' 32 -Q-Lirn -s JLÉVï de), öﬁzcooa Bakterie 1 å- aureua F-l9 (Penicillinaspro- 1-55 5-15 5-25 ducerande bakterie) ä. CJli FÛEJ 0.39 í- O-l _; 0.1. g. nneLLnoníae Y-SO 0.59 0.59 6.25 IT01:. Vlüzrêlriﬁ G-IT-'Iš 3.15 0.2 0.79 .gä- >2QQ 12 r f- Bo-sw e 'J 45 Ser. max-css ens ï'I-8 3=~2OO 25 50 Acinetc! acw:- M 50 12-5 25 Q. freüïldii GIT-ÉÅ-ß _ (cefalosporinas- å; ZÜÜ 25 50 producerande bakterie) cynacs-.e 131977 gzoo 25 f 25 ciwobgcﬁer :r-'r 25 0.75 i 1.56 S. , --~_ ._ e\ .. _. ,..

-I-š62 9.1; o. .fe 0.78 mehsiella sm. Y-'fz - 12.5 6.25 25 Ser. marcescensïí4§5 100 06.25 IOO _P_:._. aeruráinosa Sl-GB _2200 _ 12.5 50 ' o V , .q _. ._ :C35 S II -ÄT Anm.: CS-ll7O betyder LTCCHZøCHZLOLH-l-l/ | u f-:r czgs -ÅLIÄ 0 'OOH Cq” D 78Ü8066-Û 17 \ ¿-_ H-sr ~r-n ~ ' N 1 ¿ ~ .

-Ucocsï -Q-«\3,. -Q_l\H,H -L J,É-c¶2sa2§(ﬂE3)2 l \ æšumë èäæëmi 6.25 3 11 3 15 6 26 \ §;o.1 \ gr 0.; ¿; 0.1 §;o.1 1 1.56] 0.39 0.39 0.72 \ 1.56] 0.:: 0.59 5.13 \ 50 \ 12.5 12.5 so I .oo \ 25 50 so 25 \ 6.25 6.25 25 loo \ 12.5 25 50 \ 12 = 25 \ 25 T~*s.1st 5 _: 1 se \ s 15 3.15 o ° ø.a o 2 (_ s.2s\ 1.5, 1.56 50 | 1:.e 1: 5 F30 \ 125 12 5 7808066-0 18 å.. ï-r-N ïfï_ïf ï,“f_ïf l l .cﬂzcßzﬁív-.ïâšg 02-.022 0220521522 6.25 6.25 3.15 6.25 _0.1 ¿0.1 901 410.1 0-78 0.59 0.59 0.78 1.56 0.70 0.76 0.70 50 25 25 12.5 50 25 25 50 12.5 12.5 12.5 12.5 25' 100 12.5 25 25 100 25 50 6.25 12.5 5.15 5.15 0.59 0.78 o.- 0.2 12.5 1. _, 6.25 5.15 50 12.5 12.5 6.25 .25 25 12.5 12.5 78U8066~0 19 s, F- ¿, F iï:"'¥ i N-1: H-ii -S Hfh - Nå H j; éfL~c=¿1czx I I =s caococﬂaï crkçccmoa a V * * i z 1 1! k 3 13 \ 6.25 25 1 1 » ' \ gon. I g. 0-1 .éﬂ-l i 1 o.7s { 0.39 l-36 ' vr' o.7a i 0 78 0-78 1 i sø 1 50 100 Ä ' ä l2_5 ä 25' 1,56 å '50 \ 2§ àZOO \ 25 I 50 200 \ 5,25 6.25 50 | O_2 Q 2 0.73 ä 6.25 6.26 100 j 25' 295 200 i 12 5 26 25 \ voggﬁëšíïåïfšfïš. s. _;.-... . .u 7808066-0 20 'N- 31 fr- :f IN-:lr H-rï ' I I l ll -s-JWIA: f-:Åynr -s-åwn -s-LNJ I I | n m5 cﬁgcoïmz afﬁzcﬁzox: cs=ca2 6.25 6.25 5 25 3.23 9.1 | gm. go.1 gm. 0.2 I 0.2 o. 0.2 of/a 1.56 1.56 ,.13 | 12.5 12.5 12. 25 lco | 12.5 25 25 } 25 25 25 ﬁ gul g 0.1 g 0.1 á 0.1 I 6.25 | 12.5 25 I 21 7808066-Û H21 s N~n :-1 H_N ßivü-ßïš www 4l,Mm *F 15' ”f S *> csï cH-ooNH° 3.135 5.15 5.25 6.25 1; o.1 g; o.1 g 0.1 1 gg o.1 25 12.5 25 25 ßø 25 1.56 :g o.1 §_ o.1 0.59 o.59 1.55 6.25 25 -~»-~ V-__--___..._.....__._.__._______... ._ - w” ï ,_ .a/'wl “7 du gär-Ü vann-w? ,_.. »mv ïfí-f~>í» :<¿1-11”r1~1 .u 78Û8Û66-Û 22 (2) Stabiliteten mot G-laktamas Stabiliteten mot ß-laktamas undersöktes med jodometri vid BOOC enligt Perret (Perret, C.J., “Iødometric assay of penicillinase", Nature, lig, lOl2-1013 (1954)) med undantaq för att en O,lM fosfatbuffertlösning (pH 7,0) användes i stället för O,2M fosfatbuffertlösning (pH 6,5). Stabiliteten av Varje förening visas i tabell II uttryckt i relativ hydrolysgrad, varviå man antager att stabiliteten av cefaloridin (CER) mot cefalospori~ nas är 100 och stabiliteten för penicillin G (PC-G) och peni- cillinas är 100. 7808066-Û 23 l Tabell l Enhet: mikrogram/ml' Förening (Ib) B C53- lg1çg2_ cs-117o l N _ bl: i bi - b; (kontroll. à I /I R _ Iíl/N _o\¿|\[ I CH3 CH3 Bak¿eri@ A c2H5- t czns- 5. C011 NIHJ 0,39 50,1 | ¿o,1 ﬁl. Eneumoniae Y-50' 0,39 0,39 I 0,2 êês- mëzgëësåae W~35 100 25 I 12,5 âaz-_mezss§sse§ IID620 3,13 0,78 0,39 ägg. morgggil T-216 12,5 6,25 6,25 Aci. calcoaceticus A-6 50 _ 50 _ 50 c9_11_ T1<~3 » f Üenicillinas-alstrande. 1,56 - 072 0,39 bakterie) Kl. onegponiae Y-Ä , - r (Penicillinas-alstrande- 1150 1156 1156! bakterie) - - Klebsiella sno. Y-72 12,5 ' 6,25 ~ 6,25 ._ I Egg. vuleaglå GN-76. @efalosporinas-alstran= 3113 3113 lasa de bakterie) Seg. marcescens W~8 (CaFalosporinasulstrdn->2ÛÛ ' ÛÛÛ " 50 de bakterie) Ent. cloacae IID97? >200 200 100 / g. ggli GN-5uS2 _ _ ßefalosporinas~alstran- 50 25 _ 12,5 de bakterie) ' l" e ~~“~ .- 'éf I: »x 3~ V l »A ta; m ..-v- 7808066-Ü 24 Tabeli l,(forts.) (s) (s) I cs ca- ca_cH- en CH- 00125» * 3| 13 3; s, oa 'ﬁ 00 02 *T " 1* i* 1 N -j 023 0202200 CZH5- c2H5- . 0205- c2H5~ I ._<0,1 I «0,1 ;o,1 I 0,2 §0,1 I 0,2 0,2 I 0,2 6,25 I 6,25 6,25 50 0,2 I 0,2 0,2 1,56 1,56 I 3,13 3,13 12,5 12,5 I 50 50 50 30,1 0,2 0,39 0,39 0,39 0,39 0,78 0,78 0,39 0,18 1,56 12,5 1,56 1 56 3,13 3,13 50 50 100 200 50 50 100 200 6,25 6,25 12,5 12,5 78S8Û66 25 Tabell ly/(fortrsJ _ (S) (R) L u__ j __ jš'__ c¿3?“ no on en N _ N N - N y ~ N í H -_/J :I J! M “J \ï/N __S \ïI_/N ﬁs/*xlïl/N- H3 CH3 CH3 I n~cuH9- c2H5- czhs- š ¿o,1 o,2 ;o,1 É 0,2 -0,39 0,2 ; 6,25 25_ I 6,25 § 0,39 1,56 § 0,78 S 3,13 12,5 | 3,13 25 50 I 12,5 50,1 0,78 u,39 0,78 0,78 _ 3,13 6,25 0,78 3,13 3,13 6,25 12,5 zoo, 100 50 50 5ø 3,13. 25 _ 'vàøsoes-0 Tabell .l/(førtsﬁ (S2 '(3) cH3?n- Chšïn- OCH3 CHO N - mf N _ N I H /k\ H -S w/N _S ' CH3 CH3 CZHS- C2H5~ ;0,1 0,2 0,2 ¿o,'1 3,13 3,13 0,39 | ;o,1 12,5 1,56 so I so 50,1 §0,l 0,78 0,39 0,78 § 1,56 3,1; 1,56 25 25 25 25 6,25. 6,25 78Û8Û66~Ü 27 må ﬁcou - - r o T w ä ..í\ __ _ \|./ . .. »gigs :LÉIT waovamﬂweëgcc: ...Mxummwmr äëﬁmš 33:e ï, c __. cﬁﬂoumwmu umwæwmn Nmu ".Ec4 med m E. så Ewhufaw Jﬁimﬂvlnﬁ. .w and» ß. i m5 Tw .w-wzáäfäwﬂﬂ “häﬂﬁwﬁøﬁﬁﬂom moøóv .ü mi” Qä mama .Éwæ .m med .å så ä. mi, ...mnmëﬂwﬂwå .m ..._ .1 mmcﬁuomwoamwwu ñov nä.. QS NN S ëåë »Jmwm .m . . . 1 wﬁnwuxmn mﬂﬂmnmuøﬂoum wnemià »HD ﬂﬂo wløﬁ Jimmøﬁﬁﬁﬂﬂﬂcwﬁ nwaﬂm ïmmüﬂnommoﬁmmwü MMEMHMMHIÉ HOS» PÜMHHHQÜHW "HH HHÜQGH.

QUÅLïTár «-®--~---~ n, 7808066-0 28 (3) Inhiberande dos mot p-laktamas Den inhiberande dosen (ID50) av T-1414 mot ß-laktamas visas i tabell III, vilken fastställts enligt den jodometriska meto- den av Perret med användning av cefazolin såsom substrat.

Tabell III Inhiberande dos mot 6-laktamas Cefalosporinas- ID 0 1 producerande bakterie 50 (pb/mt) E. coli GNë5482 0.82 §_. marcescens ';I~8 0.54 Q. freundií GHë546 1.7 (4) Infektionsskyddande aktivitet Fyra veckor gamla hanmöss av ICR-stammen i grupper, varvid varje grupp bestod av 5 möss, ympades intraperitonealt med en förutbestämd mängd av en patogen bakterier suspenderad i 5%-ig mucin. Efter en timme från ympningen administrerades subkutant till mössen testpreparatet för bestämning av den infektionsskyddande aktiviteten. De erhållna resultaten visas i tabell IV. värdena i tabell IV avser skyddsaktiviteten uttryckt i EDSO. 7808966-0 .HH ﬁﬂwﬂmu ﬂ Eom wmﬁwwævwﬂ mšëmm mms «HvH|B .H Hﬂmmmu ﬂ Eom mmawwwuwn mšﬁmm mms Oßﬁﬁsmu ".EQ< 9 2 ooﬁ m~_w mod _ _ mmlz H ma «w o oo~ m.- woﬁ moﬁ x m.~ wcmuwmouma .w ^Ha\Hw~Hwu, .HÜAPHUHVWNQ oﬁﬁH;wu wﬁwﬁxa oßﬁﬁuwu Qﬁwﬂlß mamma» wmnmz ^m5E\wEv ^m5E\nm%%mM@ WOW .

Aucmusxnäwv Omom ^HE\EmHmOuxﬁEv UHE cﬁmﬂm ump«>Hux@ øUcm®U%xmmcOHuMwuGH I >H Hﬁmßmﬁ ___ _ _-.- ._,.._-.-.----~ hå u, i ,, ,,.¿..,¿,.T ï j x 1 !¿'IL\Ä , 1 \ _ )__v,_,_> . _A~»uw_n 1 -_ _ I... .-< A JL' 1".) wwíj. 1:; ziäån->""^'á""'-b 7808066-0 30 7a-metoxicefalosporinerna enligt uppfinningen uppvisar ringa toxicitet. Således uppvisade T-1414 ett LDSO av 5 g/kg eller däröver (möss av ICR-stammen; intravenöst). 71-metoxicefalosporinerna enligt uppfinningen med den allmänna formeln (I) och salter därav administrerade till människa och djur i form av den fria syran eller ett farmaceutiskt godtag- bart salt resp. ester därav. Föreningen beredes i olika dose- ringsformer, vilka är sedvanliga beträffande penicillin- eller cefalosporinpreparat, såsom kapslar, sirupar och injektions- lösningar, och administreras antingen oralt eller parenteralt.

Uppfinningen åskådliggöres närmare medelst följande exempel, vari de angivna temperaturerna avser Celsius-grader och samt- liga procenttal hänför sig till vikten, såvida icke annat anges. gxempel 1. (1) I en blandning av 20 ml vattenfri kloroform och 5 ml vattenfri tetrahydrofuran löstes 0,80 g difenylmetyl-7ß-{D(-)- -ar(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(2-tienyl)-acet- amido]-3-[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-4?-cefem-4- karboxylat. Lösningen kyldes till -700 och medan denna tempera- tur upprätthölls försattes lösningen med 3,5 ml av en metanol- lösning av 1,425 mmol/ml litiummetoxid. Den erhållna bland- ningen omrördes 3 minuter och försattes med 0,18 ml tert.-butyl- hypoklorit och omrördes 15 minuter vid samma temperatur, var- efter 0,29 ml ättiksyra och O,l ml trietylfosfit tillsattes i nämnda ordningsföljd. Temperaturen i reaktionssystemet höjdes därefter till rumstemperatur. Reaktionsblandningen nedfördes i 25 ml av en citratbuffertlösning (pH 7,0). Det organiska skiktet separerades, tvättades med vatten, torkades över magne- _siumsulfat och befriades från lösningsmedel genom destillation _ under reducerat tryck. Återstoden renades genom pelarkromato- grafering (stationär fas: silikagel; eluent: en l:l-blandning av bensen och etylacetat) för bildning av 0,50 g difenylmetyl- -7f-[D(-)-3-(4~etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-e-(2- -tienyl)-acetamido]-7a-metoxi-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl- tiometyl]-_¿?-cefem-4-karboxylat, utbyte 60,2 %.. 7808066-0 31 IR (mar) cnflqïc = o 1775, 1705, 1675 NMR (cnclyå-värden: 1,09 (an, t, 41113), 3,2o-3,e5 (en, m, /wno x s), 3,46 (an, s, -cn3), res-rss (211, m,;cn,), 3.75 (311, s, -cn,), 4,31 (211, Aßqyïnﬁ), 4,97 (ln, s, -“-\cH), 5,88 (111, d, 9GB), 6,30- ¿_ / 7,47 (1411, -cöns x 2, _ H _>CH), , 8,12 (111, guy-ni), S 1 >==\ H H 9,72 (m, a, pm). (2) I 2,0 ml anisol löstes 0,3 g difenyl-7@-[D(-)-a-(4-etyl- ~2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ur(2~tienyl)-acetamido)~ -7armetoxi-3-{5~(l-metyll,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]]-¿:3-cefem- -4-karboxylat. Lösningen försattes under iskylning med 2,0 ml trifluorättiksyra och blandningen omrördes 30 minuter vid sanna temperatur. Efter fullbordad reaktion avlägsnades lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden försattes med 5 ml etylacetat och 5 ml vatten och pH i lösningen 1nställ~ des på 7,0 med en natriumvätekarbonatvattenlösninc. Vatten~ skiktet separerades och blandades med lO ml färsk metylacetat, varefter pH däri inställdes på 2,0 med 2N saltsyra. Det orga- niska skiktet avskildes, tvättades med vatten, torkades över magnesiumsulfat och befriades från lösningsmedlet genom destilla- tion under reducerat tryck. Återstoden tvättades med dietyl- eter för bildning av 0,20 g vit 7ß~[D(~)-c-(4-etyl-2,3-dioxo- el-piperazinkarboxamido)-c-(2-tienyl)-acetamido]-7a-metoxi- 3-[5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiomety1]- A}-cefem-4~karbon- syra, utbyte 83,3 %.

IR (Klar) mfl: Oczo 177o, 1705, 1695, 1675 NMR (DMSO-d6):$-värden: 1,12 (3H, t, ~CH3), 3,20-3,70 (6H, m, >CH2x 3), 3,46 (3H, s, ~CH3), 3,70-4,35 (4H, m, > CH2 X 2), 3,95 (3H, s, -CH3), 5,03 (111, s, ëcn), s,eo (111, d, äcn), e,9s-7,3o (za, m, E 7,4o-7,5s (111, m, ), 9,7o-9,9o s: 3, s H (2H, m, > NH x 2). H :Penn nnßmx wßut-s-wm. 7808066-0 32 Pâ liknande sätt framställdes följande föreningar: 76-[D(-)-a-(4-etyl-2,3~dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(2- tienyl)-acetamido]~7G-metoxi-3-[5-(1-karboximetyl-1,2,3,4- tetrazolyl)-tiometyl]-A3-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 6OOC (sönasrdslning) .

(IR (Kßr) cnfl; Vc=0 1770, 1705, 1570 NMR (Dnso-ds) = å-värdsn: 1,09 (311, t, -cH ), 3,11-3,72 (en, m, \ca x a), 3,41 (315, 3 / 2 s, -cH3), 3,76 - 4,60 (4H, m, )cH2 x 2), 5,04 (ln, s, .;CH), 5,26 (211, s, *CH ), 5,90 (111, a, 3011), 5,52 - 7,20 (211, m, H H / 2 ﬁf ), 7,39-7,5o (111, m, pgß-ﬂ), 9,6s-9,79 (zu, m, -NS/ )NH x 2). 7D-[D(-)~:-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(2- tienyl)-acetamido]-71-metoxi-3-acetoximetyl-¿Å3-cefem-4-kar- bonsyra, smältpunkt 150-l65° (sönderdelning).

:R (KBr) (sm-l: 17 c=o 1775, 1720, 1705, 1575 NMR (DMSO-d6): Ä-värden: 1,07 (3H, t, -CH3), 2,00 (3H, s, -CH3), 3,l9-3,72 (611, nn/*ciiz x 3), 3,42 (3H, s, -CH3), 3,74-4,12 (2H, nu )CH2), 4,75 (ZH, Aßq,)cnz), 5,10 (111, s, gen), 5,89 (ln, d,-;cn), 6,89~7,22 E H (ZH, m, Jï-ñï ), 7,40-7,51 (lH, m, lås Q H ), 9,65 S (115, a,)NH), 9,81 (in, s, pm).

Exemgel 2.

I 15 ml vatten suspenderades l g 7ß-[D(-)-c-(4-etyl-2,3-dioxo- -l-piperazinkarboxamido)-Gr(2-tienyl)-acetamido]-7;-metoxi~ -3-acetoximetyl-¿?-cefemf4-karbonsyra erhållen i exempel l och 0,34 g 5-merkapto-l-karbamoylmetyl-l,2,3,4-tetrazol. Sus- pensionen.försattes med 0,28 g natriumvätekarbonat under om- röring. Den bildade lösningen fick reagera 20 timmar vid 55- 600, medan pH i reaktionssystemet Lnställdes på 0,0-0,3.

¿,Efter avslutad reaktion sattes 20 ml metylacetat till reak- tionsblandningen och pH i lösningen inställdes på 2 genom droppvis tillsats av 2N saltsyra. Metylacetatskiktet avskildes och vattenskiket extraherades med 3 x 15 ml metylacetat.

Det organiska skikten kombinerades, torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och indunstades till torrhet. Äterstoden löstes i 20 ml aceton. Difenyldiazometan sattes droppvis under omröring till den bildade lösningen, tills färgen var permanent. Lös- ningen frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck och återstoden renades genom pelarkromatografe~ ring (stationär fas: silikagel; eluent: blandning 1:3 av bensen och etylacetat) för bildning av difenylmetyl-76-[D(-)-e-(4- -etyl~2,3-dioxo~l~piperazinkarboxamido)~a~(2-tienyl)~acetamido]- -7ﬁ~metoxi~3~[5-(1-karbamoylmetyl~l,2,3,4-tetrazolyl)~tiomeuyl]- ~ A3-cefem~4-karboxylat i form av ett blekgult pulver. Denna före- ning íörsattes under iskylning med 3 ml anisol och 3 nl trifluor~ ättiksyra. Blandningen fick reagera 60 minuter under iskylning.

Efter avslutad reaktion befriades reaktionsblandningen från lös- ningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden försattes med l0 ml etylacetat och de utfällda kristallerna till- varatogs genom filtrering för bildning av 0,32 g 7B~[D(-)-a-(4- ~ety1~2,3-dioxo-l~piperazinkarbamido)-a-(2-tienyl)-acetamido]- -7:-metoxi-3-[5-(l-karbamoylmetyl-l,2,3,4~tetrazolyl)-tiometyl]~ -,A3-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt l45-1500 (sönderdelning), utbyte 27,6 %.

IR (rer) cnfl: 9 c=o 1775, 1e7o-172o NMR (DMso-de) g-värden: 1,10 (3H, t, -CH3), 3,20~4,lO (BH, m,>CI-l2 x 4), 3,44 (3H, s, CHBO -), 4,34 (ZH, ABq,)CH2), 5,10 (ZH, s,>CH2), 5,19 (lH, s,-;CH), 5,95 (lH, d,;CH), 6,9l-7,88 (SH, m, E H -connqL 9,70 (in, dçmi), 9,85 (m, a,;Nfx). S På liknande sätt framställde man följande föreningar: 7ß~[D(-)-Q-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)~Qr(2~ tienyl)-acetamido]~7u-metoxi-3-[5-[l-(2~hydroxietyl)-l,2,3,4- -tetrazolyl]~tiometyl]- A?-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 125-1300 (sönderdelning).

IR (Kßr) cnfl: 9c=o 1770, 1720-1670 NMR (Dnso-de) j-värden: Poonf§gQUß.LxT V--~- -_..1...,_¿ 7808066-0 34 l,l2 (BH, t, -CH3), 3,20-4,50 (l5H, m,)CH2 x 7), 3,40 (SH, s, 01130- ), 5,00 (111, s,;cH), 5,85 (1H, d,7\cH), 6,85-7,60 (311, m, H\_ g ), 9,70 (111, d,;NH), 9,85 (111, 59101).

H |S| 79- [D (-) -a- (4-etyl-2 , 3-dioxo-l-piperazinlcarboxanaido) -o..- (2- tienyl)-acetamido]-7a-metoxi-3-[3~(6-hydroxipyridazinyl)-tio- metyl]- AP-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 155-1600 (sönderdel- ning) .

IR (mar) mfl; 9 c=0 1765, 1700, 1665 NMR (nMso-dñ) g-värden; 1,10 (BH, t, -CH3), 3,20-4,3O (lOH, rn,>Cu2 x 5), 3,41 (321, s, CH 0- ), 5,02 (lH, s,-)cH), 5,85 (111, 609011), 6,70-7,50 3 (SH, m, E H H H ), 9,70 (1H, CL >NH), 9,85 (lH, S, gris z , IT=rT )NH) . 7ß- [D (-) -u- (4-etyl-2 , 3-dioxo-l-piperazinkarboxamido) -a- (2- tienyl) -acetalnidﬂ -7çL-metoxi-3- [5- (Z-metyl-l , 2 , 3 , 4-tetrazolylj - -tiometyl]- A3-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 165-1740 (sön-- derdelning) .

IR (mar) cm"l=\>c=0 1770, 1710, 1670 NMR (DMSO-dö) 6 -värdenz 1,07 (3H, t, -CH3), 3,20-3,76 (GH, m, )CH2 x 3), 3,41 (SH, s, CH3O-), 3,76-4,2O (414, m, >CH2 x 2), 4,39 (3H, s, )N-CH3), 5,04 (111, s,-;c11), 5,90 (111, d,.;cﬂ), 6,s9-7,25 (211, m, P1 E), 7,35-7,4s m, JL SH H ), 9,6o-9,77 11101111 x 2). 7D- [D (-) -cu- (4-etyl-2 , 3-dioxo-l-piperazinkarb0xa1niólo.) -cL- (2- tienyl) -acetamido]-7c1-metoxi-3-[5- (l , 3 , 4-tiadiaz0lyl) -tio- metyl]- A3-cefem-4-karb0nsyran, smältpunkt l60-l75o (sönder- delning) .

IR (Kßr) mfl; 9c=o 1780, 1710, 1675 NMR (Dmso-dö) g-värden: 1,09 (311, t, -cH3), 3,21-3,75 (611,,_1n,;cn2 x 3), 3,43 (311, s, cH3o-), 3,75-4,10 (2H, m,/\cH2), 4,40 (211, Aßq,)cﬁz), 5,14 . 7' L' ,.---~< “__-Ja ﬂ. 2015. _.'-...'., 7808066~Û 35 Hx 3 (111, 5,; CH), 5,94 (111, dﬁecﬂ), 6,91-7,3 (211, m, I; '; ), /xxs/ g IF- IT 7,4o-7,53 (111, m, -LS/Älg >, 9,53(1H, s, _g(\S/(_ ), 9,65-9,84 (ZH, m,> NH x 2). 7B-[D(-)-of(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-m-(2- tienyl)-acetamido]~7?-metoxi-3-[5-(1-vinyl-1,2,3,4-tetrazolyl)- tiometyl]- A3~cefem-4~karbonsyra, smältpuhkt 150-1535 (sönder- delning).

:R (Ksr) crffl; Vc=o 1770, 1710, 17oo, 1665 NMR (DMSO-de) (S-värden: 1,10 (BH, t, -CH3), 3,20-3,7O (6H, m,>CH2 x 3), 3,43 (3H, s, -CH3), 3,80-4,55 (4H, ng 4>CH2 X 2), 5,10 (lH, S,-QCH), 5,46 (111, d, =cH~), 5,83 (111, d, :CH-L 5,94 (LH, d,;CH), 6,90- 7,52 (4H, m, 'H H , =CH-), 9,70 (lH, d,)NH), 9,86 (ll-I, S, / EJÄJ L) )NH) . 73-[D(-)-a-(4-etyl-2,3~dioxo-l-piperazinkarboxamido)-mr(2- tienyl)-acetamido]-7afmetoxi-3~[5~(l-(2~hydroxiiminopropyl)- -l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿E~cefem-4-karbonsyra, smält~ punkt 1e5-172° (sönderaelning).

IR (Kßr) cnfl= 9c=o 1775, 17o5, 1675 NMR (DMSO-d6) z S-värden: 1,09 (3H, t, -CH3), 1,58 (l,7I-l, s, -C}13), 1,76 (l,3H, s, -CH3), 3,18-3,69 (6H, nu }CH2 x 3), 3,49 (BH, S, -CH3), 3,77 -4,?0 (411, m,;cH2 x 2), 5,05 (sn, m,-)cH, )c112), 8,57 (1H, d,->cu), 6,s5-7,25 (211, m, H_ Jí ), 7,4o-7,44 (111, m, (I U >, i S 1- m D 9,60 (lH, d,)NI-I), 9,65 (lH, S,>NH). 7ß-[D(-)-1-(4-etyl-2,3-diøxo-l-piperazinkarboxamido)-Q-(2- tienyl) -acetamidol-7a-metoxi-3- [ 5- (l-acetylmetyl-l , 2 , 3 , 4-tet- razolyl)-tiometyl]-¿š-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 164-1759 (sönderdelning).

Fïwêåﬂëïïšekfšíïï _ J., lyra. ; 7808066-0 36 IR (mar) crrfl: 1>c=0 1775, 1720, 1705, 1575 NMR (DMSO-d6)$-värden: 1,10 (311, t, -cH3), 2,27 (311, s, -cH3), 3,10-3,70 (6H, m,)cﬁz x 3), 3,43 (an, s, -cH3), 3,75-4,20 (an, m,}cn2 x z), 4,40 (211, s,>cH2), 5,00 (111, s,«)cH). 5,45 (111, d,l;cH), 6,95-7,32 (2H, m, H ), 7,40-7,47 (lH, m, 1, 9,45-9,67 H I rssj-H ^s (Zl-I, m, )NH x 2). 73-[D(-)-of(4~etyl-2,3-dioxo~l-piperazinkarboxamido)-c-(2- tienyl)-acetamido]-7a-metoxi-3-[5-[1-(hydroxiaminokarbonylmetyl)- -l,2,3,4-tetrazolyl]-tiometyl]-¿š-cefem-4-karbonsyra, smält- punkt 160-170° (Sönderdennng).

IR (mar) cm"l=\7c=0 1770, 1710, 1700, 1665 NMR (DMSO-d6) ¿-värden: l,ll (3H, t, -CH3), 3,20-3,70 (6H, m,;:CH2 x 3), 3,40 (3H, s, -CH3), 3,80 ~ 4,65 (4H, m,>CH2 x 2), 5,07 (ll-I, s,->CH), 5,28 (ZH, s,/\CH2), 5,90 (lH, (L-FCH), 6,90-7,50 (BH, m, H H HU ), 9,67 (1H, d,;NH), 9,81 (111, S,;NH).

'S Exemgel 3.

I lO ml av en vattenlösning innehållande 0,27 g natriumväte- karbonat löstes l g 73-[D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxo~l-piperazin~ karboxamido)~af(2~tienyl)-acetamido]-7a~metoxi-3-acetoximetyl- -¿ë-cefem-4-karbonsyra och 0,17 g 5-merkapto-l,2,3,4-tetrazol.

När pH i lösningen inställts på 6,4, fick lösningen reagera 20 timmar vid 600. Reaktionsblandningen försattes med lO ml metylacetet och 5 ml etylacetat. När pH däri var inställt på 2,2 med 2N saltsyra tvättades det organiska skiktet med 2 x 10 ml vatten, torkades över magnesiumsulfat och befriades från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden renades genom pelarkromatografering (stationär fas: silikagel; eluent: en blandning 1:2 av bensen och etyl- acetat) för bildning av 0,39 g 7ß-[D(-)-u-(4¥etyl-2,3-dioxof -l-piperazinkarboxamido)-ar(2-tienyl)-acetamido]-7a-metoxiÄ -3-[5-(l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]- ¿§-cefem-4-karbonsyra, -- .«.-._ 1. 7808066-0 37 smäitpmmkt 1178-1630 (sönderaaming) , utbyte 36,421 IR (mar) cm'l= °c=o 1770, 1690, 1670 NMR (DMSO-dö) 5-värden: 1,08 (311, t, -c113), 3,1.s-3,70 (611, m, >c11¿,_ x 3), 3,40 (311, S, CH3O~), 3,70~4,lO (4H, m, ;'CH2 X 2), “,Ü7 (IH, s,;:CH), 5,89 (111, a,-)c11), 6,s7-7,zo (211, m, H, H ), 7,39-7,s0 (111, m, fån LS J . ), 9,65 (111, d, )N11), 9,81 (111, 331111).

Pâ liknande sätt framställdes följande förening: 7ß-[D(~)-uf(4-etyl~2,3-di0xo-l~piperazinkarboxamido)-a~(2- tienyl)~acetamido)~7armetoxi-3-[5-(l,2,3-triazolyl)-ti0metyl]- - L?-cefem-4~karbonsyra, smältpunkt l78-l90° (sönderdelning).

:R (Kax) cm'l=9c=o 1770, 1695, 16110 NMR (DMS0-d6)5-värden: l,l0 (BH, t, -CH3), 3,20-3,70 (6H, m, }CH x 3), 3,40 (3H, s, 2 c1130-), 3,ß0-4,20 (411, m, )c112 x 2), 5,10 (111, s,-;~c11), 5,91 (111, 613011), 6,sa~7,z0 (211, m, än H ), 7,37-7,s0 (111, m, i! l *IS/Li H ), 7,90 (111, s, ïí E ), 9,5s-9,74 (211, m, . W“~3T ;NH x 2). “ïV Exemgel 4.

I 10 ml av en vattenlösning innehållande 0,27 q natrlumväte- karbonat löstes 1 g 7B-[D(-)-Q-(4~etyl~2,3~dioxo-l-piperazin- karboxamido)-ur(2~tienyl)-acetamido]-7<-metoxi~3-acet0xi- metyl- 13-cefem-4-karbonsyra och 0,32 g av natriumsaltet av 1-(2-dimetylaminoetyl)-5-merkapto-l,2,3,4-tetrazol. Medan pH av 6,2-6,5 upprätthölls fick lösningen reagera 16 timmar vid 600. Reaktionsblandningen renades genom pelarkromatografe- ring (statinär fas: 220 g Amberlite XAD; eluerades med 100 ml vatten och sedan med 100 ml 50%-ig vattenlösning av meta- nol). Eluatet indunstades till torrhet för bildning av 0,32 g natrium-76-[D(-)-ar(4-etyl-2,3-dioxo-l~piperazinkarb0xamid0)- -a-(2-tienyl)-acetamido]«7«»metoxi-3-[5-fl-(2-dimetylaminoetyl)- -l,2,3,4-tetrazolyl]-tiometyl1-¿e~cefem-4-karboxylat i form .ïï9ïïlïlfíëïïëïflfïfïg 7808066-0 38 av ett vitt pulver, smältpunkt 166-1750 (sönderdelning), utbyte 26,17 %.

IR (1031) cm“l=')c=0 1760, 1705, 1670, 1610 NMR (DMSO-dö) S-värden: 1,10 (3H, t, -CH3), 2,20 (GH, m, -CHB x 2), 2,68 (2H, t,}CH2), 3,20-3,70 (GH, m, )CH2 x 3), 3,40 (3H, s, CH3O-), 3,72-4,3C (611, m,)c112 x 3), 5,05 (111, s,$c11), 5,91 (111, d,;c11), 6,90- 7,30 (211, m, E H ), 7,40-7,s1 (111, m, 11-1 ), I' f! '* ski ~”\ '1 D 9,6-9,75 (ZH, m,>NH x 2).

På liknande sätt framställdes följande föreningar: Natriumr7ß-[D(-)-af(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)- -c-(2-tienyl)-acetamido]-7ufmetoxi~3-[5-[2-(2-dimetylaminoetyl)~ -l,2,3,4~tetrazolyl]~tiometyl]-¿š-cefem~4-karboxylat, smält- punkt 175-1s3° (sönderaelning).

IR (mar) cnfl=°c=0 1760, 1705, 1670, 1615 NMR (DMSO-dö) S-värdenﬂ 1,11 (3H, t, -CH3), 2,24 (611, m, -CH3 x 2), 2,83,(2H, t,)CH2), 3,zo-3,7o (611, m, )c112 x 3), 3,42 (311, s, 0130-), 3,70-4,2o (411, m,;c11 x 2), 4,60 (211, t,>c112), 5,0 (111, s,7\c11), 5,92 z (111, a, _)c11>, 6,90-7,30 (211, m, H 3,1), 7,s7-7,4s (111, m, JLÄ L) .ii HH _ s ), 9,6-9,75 (211, m, ;N11 x 21.

Natrium-7ß-[D(~)-ar(4~etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)- -u-(2-tienyl)-acetamido]-%Qrmetoxi-3-[5-[l-(2-aminoetyl)- -l,2,3,4-tetrazolyl]-tiometyl]-¿§-cefem-4-karbøxylat, smält- punkt l80~l87° (sönderdelning).

IR (Kari cnfl: \>c=o 1765, 1705, 1670, 1600 111112 (DMso-d6) g-värden: l,lO (3H, t, -CH3), 3,23-3,74 (6H, m, >CF X 3), 3,45 (BH, s, *z 43113), 3,77-4,s7 (611, m,;c112 x 3), 4,81 (211, t,;c11§>, 5,707 (111, s,;c11), 5,45 (111, d,.;c11),6,95-7,25 (211, m, -_\ gi ), 7,40-7",52 (lH, mj-lsïlﬂ ), 9,6l-9,8O (ZH, m,>NH X 2). 7808066-0 39 ﬁxemgel 5. (1) En iskyld suspension av 2,55 g DL-owamino-2-furylättiksyra i 35 ml metylenklorid försattes med 4,81 ml trimetylklorsilan.

Den erhållna blandningen försattes droppvis med 5,04 ml triety1~ amin under en tidrymd av 10 minuter vid 5-100. Reaktions fick fortlöpa en timme vid 15-200. Reaktionsblandningen försattes under en period av 15 minuter vid 5-100 med 7,01 g av en bland- ning av 4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarbonylklorid och trietyl- aminhydroklorid, vilken blandning innehöll 58,02 % av den förra.

Reaktionen fick fortlöpa en timme vid 10-150. Efter tillsats av 20 ml vatten omrördes reaktionsblandningen en timme vid rumstemperatur och sedan 30 minuter vid 5-70. De utfällda kri- stallerna tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 5 ml metylenklorid och 5 ml vatten i denna ordningsföljd och torkades sedan för bildning av 4,75 g DL-ar(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-z-furylättiksyra, smältpunkt 179-1810 ning), utbyte 85,6 %.

IR (mar) cnfl: °c=o 1735, 1709, 1650 NMR (DMSO-dö) S -värden: 1,09 (3H, t, ~CH3), 3,18-3,71 (4H, nn )CH2 x 2), 3,78-4,09 (2H, m, )cn2>, 5,53 (in, a,-)cn), 6,44 (za, m, Hwfﬂ ), ko? (sönderde1- 7,61 (111, s, i OHH ), 9,69 (ln, ägna). (2) I 15 ml vattenfri metylenklorid suspenderades 0,94 g DL-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-2-furylättik- syra. Suspensionen försattes med 0,35 ml N-metylmorfolin under iskylning för bildning av en homogen lösning. Lösningen kyld till -200 försattes under 5 minuter droppvis med en lösning av 0,32 ml etylklorkarbonat i 2 ml vattenfri metylenklorid.

Blandningen kyldes 60 minuter vid -150. Den kyldes åter till -200 och försattes under 10 minuter droppvis med en lösning av 1,5 g difeny1metyl-7-amino-3-[5-(1-metyl-l,2,3,4~tetrazoly1)- tiometyl]-zš-cefem-4-karboxylat i 15 ml vattenfri metylenklo- rid. Blandningen omrördes ytterligare 90 minuter vid -100.

När temperaturen i reaktionsblandningen uppnått rumstempera- tur, hälldes blandningen i 10 ml vatten och det organiska skiktet avskildes och försattes med 10 ml färskt vatten, var- 7808066-0 40 efter pH däri inställdes på 6,5 med en vattenlösning av natriumvätekarbonat. Det organiska skiktet avskildes, tvättades med 10 ml vatten och 10 ml mättad natriumkloridlösning i denna ordningsföljd och torkades över magnesiumsulfat. Efter elimine- ring av lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck behandlades återstoden med dietyleter för bildning av 2,0 g av ett vitt pulver. Vid tunnskiktskromatografering (framkallare: en blandning 1:3 av bensen och etylacetat) visade det sig att denna förening omfattade två komponenter (Rf: 0,28 och 0,24).

Det vita pulvret underkastades eluering genom pelarkromatogra- fering (stationär fas: silikagel; eluent: en bensen/etylacetat- blandning 2:1) för isolering av den komponent som motsvarar komponenten i den övre zonen vid tunnskiktskromatograferingen och den komponent som motsvarar komponenten i den lägre zonen vid tunnskiktskromatograferingen, varvid mängden av de båda isolerade komponenterna var totalt l,l g.

Komponenten i den övre zonen (förmodligen difenylmetyl-7-[D-dr (4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-o:(2-furyl)»acet- amido]-3-[5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-ti0metyl}-¿š-cefem~4- karboxylat), smältpunkt 128-1380 (sönderdelning): :R (Kßr) cnfl: 9c=0 1800, 1705, 1680 NMR (CDCl3) $~värden: l,ll (3H, t, -CH3), 3,30-4,30 (lOH, nn >CH2 x 5), 3,76 (3H, s, -CH3), 4,91 (lH, d,-;CH), 5,72-5,93 (ZH, m,§;CH X 2), 6,25 (zn, m, H H ), 6,82 (in, s,;cn), 7,20-7,s3 (un, ïíß' ,c6H5 x 2, JL-o-(LH , , ';NH), 9,80 (111, d,>NH).

Komponenten i den lägre zonen (förmodligen difenylmetyl-7-[L- -ar(4~etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-af(2-fury1)- acetamido]-3-[5-(1-metyl~l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿š-cefem- -4-karboxylat), smältpunkt l28-l36° (sönderdelning): IR (Kßr) cnfl: \7c=o 1800, 1705, 1680 NMR (c0c13) á-väraen; 1,08 (3H, t, -CH3), 3,20-4,30 (lOH, m,_>CH2 x 5), 3,86 (3H, s, -CH3), 5,00 (lH, d,-šCH), 5,61-5,98 (2H, nu-§CH x 2), 6,31 (211, m, H H ), 6,83 (111, s, een), 7,29 (1111, m, 78Ü8Ü66-Ü 41 -ceas x z, LOÄH ), 7,94 (LH, d, Nm), 9,88 (in, egna). (3) I en blandning av l4 ml vattenfritt kloroform och 3,5 ml vattenfri tetrahydrofuran löstes 0,86 g av den enligt (2) erhållna komponenten i den övre zonen. Lösningen kyldes till -750 och försattes med 1,97 ml av en lösning av 1,948 mmol/ml litiummetoxid i metanol och den erhållna blandningen omrördes 3 minuter vid -75°. efter tillsats av o,2o m1 terL-butyinyaro- klorit omrördes blandningen 15 minuter vid -70 till -650. Efter tillsats av 0,20 ml ättiksyra höjdes temperaturen i reaktions- systemet till rumstemperatur. Reaktionsblandningen befriades från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck och återstoden löstes i en blandning av 10 ml etylacetat och 10 ml vatten. Det organiska skiktet avskildes och 10 ml vatten tillsattes, varefter pH däri inställdes pa 2,% med ZN saltsyra.

Det organiska skiktet separerades, tvättades med 2 x 10 ml mättad natriumkloridlösning, torkades över magnesiumsulfat och befriades från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden renades genom pelarkromatografering (stationär fas: l5 g silikagel; eluant: en blandning 2:1 av bensen och etylacetat) för bildning av 0,30 g av ett vitt pulver.

Det på så sätt erhållna vita pulvret löstes i 3,0 ml anisol och 3,0 g trifluorättiksyra sattes till lösningen under iskyl- ning. Den erhållna blandningen omrördes 30 minuter vid samma temperatur. Efter eliminering av lösningsmedlet genom destilla- tion under reducerat tryck sattes 5 ml etylacetat och 5 ml vatten till återstoden och en mättad natriumvätekarbonatlösning till- sattes under omröring för inställning av pH däri på 6,5, var- efter återstoden löstes. Vattenskiktet separerades och lO ml metylacetat tillsattes, varefter pH däri inställdes på 2,0 med 2N saltsyra och det organiska skiktet separerades. Vatten- skiktet extraherades ytterligare med 10 ml metylacetat och extraktet kombinerades med nämnda organiska skikt. Det kombi- nerade organiska skiktet tvättades med 2 x 10 ml mättad natriumkloridlösning, torkades över magnesiumsulfat och befria- des från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden behandlades med dietyleter för bildning av ___.__._.__,_...__._.__ _ llëfšršäﬁfiïii» -t ...___-_ _ ___-__”. 7808066-0 42 0,17 g 75-[D-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a- -(2-furyl)-acetamido]-7afmetoxi-3-[5-(l~metyl-l,2,3,4-tetrazo- lyl)-tiometyl]-rš-cefem-4-karbonsyra i form av ett vitt pulver, smältpunkt 130-1380 (sönderdelning), utbyte 70,8 %.

IR (mar) mfl: “7c=o 1770, 17oo, 1670 “NMR (DMSO-dö) 6-värden: 1,07 (3H, t, -CH3), 3,28-4,01 (8H,1n,>CH2 x 4), 3,38 (3H, s, -CH3), 3,88 (3H, s, -CH3), 4,10-4,45 (2H, nu )CH2), 5,03 (lH, s,.;cH), 5,73 un, a,-;cH), 6,39 (zu, m, B; H ), 7,54 <1H,bs, fia-ÄH ), 9,s1-9,7o (an, m, ;NH x 2).

På liknande sätt framställdes följande föreningar: 7B-[D-of(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ur(2-furyl)- ~acetamido]-7a-metoxi-3-[5-(l-karbamoylmetyl-l,2,3,4-tetrazo- lyl)-tiometyl]-23-cefemr4-karbonsyra. 76-[D-ar(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(2-furyl)- -acetamido]-7n-metoxi-3-[5-[l-(2-hydroxietyl)-l,2,3,4-tetrazo- lyl]-tiometyl]-¿É-cefem-4-karbonsyra. 7$-[D-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(2-furyl)- -acetamido]-71-metoxi-3-[5-(l-vinyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tio- metyl]- A3-cefem-4-karbonsyra.

Exempel 6. (l) En suspension av 2,5 g D(-)-Gramino-l,4-cyklohexadienyl- ättiksyra i 20 ml vatten försattes droppvis under iskylning med 2,3 ml trietylamin för bildning av en lösning. Lösningen försattes vid 5-l0° droppvis med 6,3 g 4-etyl-2,3-dioxo~l- piperazinkarbonylklorid (renhet 58,02 %) under en tidrymd av 30 minuter, medan pH inställdes på 6,5-8,0 med 2,5 ml trietyl- amin. Blandningen omrördes vid 10-l5° under ytterligare 30 minuter. Reaktionsblandningen tvättades med 20 ml etylacetat och 30 ml färskt etylacetat tillsattes, varefter pH däri in- ställdes på 2,2 med 6N saltsyra. Det organiska skiktet av- skildes och det avskilda vattenskiktet extraherades ytterligare 7808066-Û 43 med l5 ml etylacetat. Extrakten kombinerades med nämnda organiska skiktet, tvättades med 2 x 20 ml vatten och därefter med 20 ml mättad natriumkloridlösning i vatten. Det tvättade organiska skiktet torkades över magnesiumsulfat och frigjordes från lös- ningsmedlet genom destillation under reducerat tryck för bild- ning av 4,2 g D(-)-0-(4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)- -l,4-cyklohexadienylättiksyra i form av ett vitt pulver med smältpunkten 104-1080, utbyte 80,0 %.

IR (rar) cm'l= °c=o 1705, 1670 NMR (DMso-dö) S-värden: 1,10 (sn, t, -cH3), 2,61 (4u, m, >cH2 X 2), 3,1s~3,e9 (4H, m, >CH2 x 2), 3,70 - 4,13 (3H, m,)CH2,.;CH), 4,56 (lH, d,.;CH) , 5,60 (2H,1n,;CH x 2), 5,70 (lH, s,.;CH), 9,49 (lH, d, ;-NH). (2) En-lösning av 2,3 g D(-)-d-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-1,4-cyklohexadienylättiksyra i 20 ml vattenfri metylenklorid försattes vid -200 med 0,79 ml N-metylmorfolin.

Blandningen försattes droppvis med 0,75 ml etylklorkarbonat under en tidrymd av 5 minuter vid -20 till -l5O. Blandningen som omrörts ytterligare 60 minuter vid -200 till -l5O försattes droppvis under en period av 15 minuter vid -200 med en lösning av 3,0 g difenylmetyl-7-amino-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)- -tiometyl]-13-cefem-4-karboxylat i 30 ml vattenfri metylenklo- rid. Blandningen omrördes ytterligare 120 minuter vid -100.

Reaktionsblandningen hälldes i 50 ml vatten och det organiska skiktet avskildes. Det organiska skiktet försattes med 30 ml vatten och pH däri inställdes på 7,0 med mättad natriumväte- karbonatlösning i vatten. Det organiska skiktet avskildes, tvättades med 30 ml vatten och 30 ml mättad natriumkloridlös- ning i vatten i nämnda ordningsföljd, torkades över magnesium- sulfat och frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden försattes med 30 ml bensen och de utfällda kristallerna tillvaratogs genom filtrering för bildning av 3,9 g difenylmetyl-7ß-[D(-)-a:(4-etyl-2,3-dioxo- -l-piperazinkarbexamido)-ar(1,4-cyklohexadienyl)-acetamido]- -3-[5-(1-mety1-1,2,3,4-tetrazoiyi)~t10mety11-¿É-cefem-4-kar- boxy1at, smä1tpunkt 151-155°; utbyte so,7 %. 320,93 QQÅLIT-'í .~_v._...~.,__....__ _,,_....4_,ﬂ_ 7808066-0 44 in (mar) mfl: 9c=o 1770, 17oo, 1665 NMR (CDCl3) S-värden: 1,15 (an, t, -cH3>, 2,62 (an, nnycnz x 2), 3,23-3,7o (en, m, ycnz x 3), 3,71 (an, s, -cH3), 3,7<:--4,35 Hm, mqcf: 4,92-5,2s (an, meon x 2), 5,57 (za, m, _;cn x 2), (za, mgcn x 2), 6,78 (in, sgcn), 7,75 (1111, m, ~c pm), 9,57 (in, ägna). 6 (3) I en blandning av l5 ml vattenfri kloroform och 4 ml vattenfri tetrahydrofuran löstes 0,80 g difenylmetyl-7B~[D(-;- -1-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(l,4-cyklohexa- dienyl)-acetamido]-3,[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]- -Ae-cefem-4-karboxylat. Efter tillsats av 1,0 g molekyl 3A kyldes lösningen till -700. Lösningen försattes med 1,8 ml lös- ning av 1,948 mmol/ml litiummetoxid i metanol och blandningen om- rördes 3 minuter vid -700. Därefter tillsattes 0,18 ml text.- F J butylhypnklorit på en gång och blandningen omrördes I minuter vid -70 till -650 och 0,2 ml ättiksyra tillsattes, varefter temperaturen i blandningen höjdes till rumstemperatur. Efter avlägsnande av molekylsilen genom filtrering frigjordes reak- under ml etyl- tionsblandningen från lösningsmedlet genom destillation reducerat tryck. Återstoden löstes genom tillsats av 20 acetat och 10 ml vatten och pH i lösningen inställdes på 6,5 med mättad natriumvätekarbonatlösning i vatten. Det organiska skiktet avskildes och lO ml vatten tillsattes, varefter pH däri inställdes på 2,5 med 6N saltsyra. Det organiska skiktet sepa- rerades åter, tvättades med 10 ml vatten cch 10 ml mättad natriumkloridlösning i vatten i nämnda ordningsföljd och fri- gjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden renades genom pelarkromatografering (stationär fas: silikagel; eluent: bensen/etylacetatblandning 2:1). Efter eliminering av lösningsmedlet från eluatet genom destillation under reducerat tryck behandlades återstoden med dietyleter för bildning av 0,5 g difenylmetyl-7ß[D(-)-u-(4-etyl-2,3-dioxo- -l-piperazinkarboxamido)-G-(1,4-cyklohexadienyl)-acetamido]- -7u-metoxi-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿š-cefem- -4-karboxylat i form av ett vitt pulver, utbyte 60,3 %. 45 IR (KBr) cm"l=“*>c=0 1775, 1710, 1675 NMR (CDCl3) 5-värden: 1,17 (311, t, -c113), 2,75 (411,m,;c112 x z), 1,z9-3,6s (611, m, )c112 x 3), 3,47 (311, s, -c113), 3,77 (311, s, 43113), s,so-4,sr) (411, m,)c112 x 2), 4,99 (111, seen), 5,61. (211, m,_;c11 X 2), 5,95 (111, s,;c11), 6,87 (111, sugen), 7,2a-7,45 (1111, m, ~c6115 x 231111), 9,55 (111, a,;1111). (4) I 5 ml anisol löstes 0,4 g difenylmetyl-7ß~[D(-)-a-(4- -etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ur(l,4~cyklohexadienyl)- ~acetamido]-7u~metoxi-3-[5-(l-metyl~l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]- -¿§~cefem-4-karboxylat. Lösningen försattes med 5 ml trifluor~ ättiksyra under iskylning och blandningen omrördes 30 minuter vid samma temperatur. Efter eliminering av lösningsmedlet ur reaktionsblandningen sattes lO ml metylacetat och 10 ml vatten till återstoden och pH däri inställdes på 6,5 genom tillsats under omröring av mättad natriumvätekarbonatlösning i vatten.

Vattenskiktet avskildes och 5 ml metylacetat tillsattes, var- efter pH inställdes på 2,2 med 6N saltsyra och blandningen för- varades över natten i ett kylskåp. De utfällda kristallerna till~ varatogs genom filtrering, tvättades med 2 x 5 ml vatten och där- efter med 3 ml metylacetat och torkades för bildning av 0,2 g 7D-[D(-)-ar(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ar(l,4~ cyklohexadienyl)-acetamido]-7Qfmetoxi-3~[5-(l-metyl-l,2,3,4- tetrazolyl)-tiometyl]-¿E~cefem-4-karbonsyra, smältpunkt l77- 17s° (sönderaeining), utbyte 62,7 112 (mar) cm"1=)>c=o 1770, 1710, 1685 NMR (DMso-dö) S-värden: l,lO (3H, t, -CH3), 2,18 (4H, nn_>CH2 x 2), 3,34~3,73 (6H, m, )cn2 x 3), 3,41 (311, s, -CH3), 3,79-4,37 (411, m,>CH2 x 2), 3,93 (3H, s, -CH3), 4,97 (lH, d,.;CH), 5,06 (ll-I, s,-;CH), 5,61 (2H, m,.;CH x 2), 5,87 (lH, s, §;CH), 9,38 (lﬂ, d,_>NH), 9,53 (lH, s, )NH).

På liknande sätt framställdes följande föreningar: 7ß-[D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-c-(1,4- cyklohexadienyl)-acetamido]-7u-metoxi-3-acetoximetyl- ¿E-cefem- -4~karbonsyra. 7ß-[D{-)-d-(4-etyl-2,3-dioxo~l-piperazinkarboxamidc)-a-(l,4- f-f-:twf (v l _11 »MM . .6 »_._... .M _ .. U» 7808066-0' 46 -cyklohexadienyl)-acetamido]-7u~metcxi-3-[2-(5-metyl-l,3,4- tiadiazolyl)-tiometyl]-zê-cefem-4-karbonsyra.

ExemEel_Z¿_ gl) I 15 ml vattenfri metylenklorid löstes 2,0 g e-(4-etyl~ -2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)~ar(2-trikloretoxikarbonyl- amino~4-tiazolyl)-ättiksyra. Lösningen försattes vid ~20° med 0,43 ml N-metylmorfolin. Den erhållna blandningen försattes under en tidrymd av 5 minuter droppvis med en lösning av 0,41 ml etylklorkarbonat i 2 ml metylenklorid, medan temperaturen upprätthölls mellan -20 och -250. Reaktionen fick fortlöpa under l,5 timmar vid samma temperatur. Reaktionsblandningen för- sattes droppvis vid -15 till -200 under en period av 15 minuter med en lösning av 2,0 g difenylmetyl-7-amino-3-[5-(l-metyl- ~l,2,3,4~tetrazolyl)-tiometyl]-4?-cefem-4-karboxylat i 30 ml vattenfri metylenklorid. Reaktionen utfördes under 2 timmar vid -10 till -150. Efter det att temperaturen i reaktionsbland~ ningen höjts till rumstemperatur hälldes reaktionsblandningen i 30 ml vatten och pH däri inställdes på 6,5 med mättad natrium- vätekarbonat i vatten. Det organiska skiktet avskildes och 30 ml färskt vatten tillsattes, varefter pH däri inställdes på 2,0 med 6N saltsyra. Det organiska skiktet avskildes, tvättades med 30 ml vatten och 30 ml mättad vattenlösning av natriumklori* i nämnda ordningsföljd, torkades över magnesiumsulfat och iri- gjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck för bildning av 3,3 g vit skumartad återstod. Genom tunn- skiktskromatografering (framkallare: en blandning 1:3 av bensen och etylacetat) fann man att materialet innehöll tvâ komponenter.

Den vita skumartade återstoden underkastades eluering genom pelarkromatografering (stationär fas: silikagel; eluent: en blandning 3:2 av bensen och etylacetat) för bildning av l,3 g av ett vitt pulver_med smältpunkten 166-1790 (sönderdelninq), som motsvarade kdmponenten i den övre zonen vid tunnskikts- kromatografering och 1,4 g av ett vitt pulver med smältpunkten 180-1900 fsönderdelning), som motsvarade komponenten i den lägre zonen vid tunnskiktskromatografering.

Föreningen i den övre zonen: förmodligen difenylmetyl-7-[D-u- ~(2-trikloretoxikarbonylamino-4-tiazolyl)-af(4-etyl-2,3-dioxo~ 'w fame-dk 78Û8Ü66~Ü 47 ~l-piperazinkarboxamido)-acetamido]-3-[ä~(l-metyl-1,2,3,4- -tetrazolyl)-tiometyl]-A?-cefemr4-karboxylat.

IR (rer) cm-l; ﬂc=o 1780, 1710, 1685 NMR (CDCl3) S-värden: l,lZ (3H, t, -CH3), 2,90-3,87 (8H, m, )CH2 x 4), 3,47 (BH, , >N-CH3), 4,12, 4,20 (ZH, ABq, )CH2), 4,24, 4,90 (2H, ABq,';CH2), 5,04 (m, meon), 5,56 (1H, ängen), 5,98 (111, c, <1,.;~cH), 6,7 (lH, s,.;CH), 6,89 (lH, s,.;CH), 7,26 (llﬂ, m, --ERS x 2, )NH), 8,62 (lH, bs,)NH), 9,70 (lH, cLjhï-i). 'ñ Föreningen i den lägre zonen: förmedlingen difenylmetyl-7-íL- -a~(2-trikloretoxikarbonylamino-4-tiazolyl)-ur(4-ety1-2,3-dioxo- -l-piperazinkarboxamido)~acetamido]~3-{5~(l-metyl-l,2,3,4- -tetrazolyl)-tiometyl]~¿E-cefem~4-karboxylat.

IR (Kßr) cm-Åvc = o 1780, 1710, 1585 NM(CDCly 5~värden: 1,05 (3H, t, ~CH3), 3,12-4,10 (8H, m, >CH2 x 4), 3,81 (3H, s, -CH ), 4,16, 4,23 (ZH, ABq,)CH2), 4,84 (211, bss,>Cí-l2), 4,97 (lH, d,-;\CH), 5,67 (lH, d, d,-}CH), 6,12 (1H, d,-;CH), 6,75 (lH, s,-,>CH), 6,84 (lH, s,-?CH), 7,23 (1011, s, -CGHS x 2), 7,9o-8,3o (2H,m,)1~111x 2), 9,79 (ln, dvwm). (2) I en blandning av 15 ml vattenfri kloroform och 5 ml vatten- fri tetrahydrofuran löstes 1,2 g av den övre zon~komponenten erhållen i (l). Lösningen försattes vid -750 med 2,17 ml av en lösning av 1,948 mmol/ml litiummetoxid i metanol och den bildade blandningen omrördes 3 minuter vid ~75°. Blandningen försattes vid -750 med 0,22 ml tert.-butylhypoklorit på en gång och den erhållna blandningen omrördes 15 minuter vid -750. Efter till- sats av en lösning av 0,2 ml ättiksyra 1 2 ml kloroform höjdes temperaturen i reaktionssystemet till rumstemperatur. Reaktions- blandningen frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck och återstoden löstes genom tillsats av 20 ml etylacetat och 20 ml vatten och pH däri inställdes på 6,5 med mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat. Det orga~ niska skiktet avskildes och 20 ml vatten tillsattes, varefter pH däri inställdes på 2,0 med 2N saltsyra. Det organiska sk1ktet separerades åter, tvättades med 10 ml vatten och lo ml mättad 7808066-0 48 natriumkloridlösning i nämnda ordninqsföljd, torkades över magnesiumsulfat och frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Äterstoden renades genom pelarkromatografering (stationär fas: silikagel; eluent: en blandning 3:2 av bensen och etylacetat) för bildning av 0,45 g difenylmetyl-7ß-[D-a~(2-trikloretoxikarbonylamino~4-tiazolyl)- -of(4~etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-acetamido]-7a- metoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿E-cefem-4- karboxylat i form av ett vitt pulver, smältpunkt 155-l77° (sön- derdelning), utbyte 36,4 %.

IR (mar) mfl: 9c=o 1785, nio, less NMR (cncl3) 5 -värdem l,l0 (3H, t, ~CH3), 3,20-4,30 (l0H, nu )CH2 X 5), 3,41 (3H, s, -CH3), 3,73 (3H, s, -CH3), 4,73, 4,79 (2H, ABq,;:CH2), 4,92 (lH, spšCH), 5,74 (lH, d, 9GB), 6,74 (lH, s,_;CH), 7,04 (lH, s,-;CH), 7,20 (llH, m, -CGHS x 2, )NH), 8,34 (lH, bs,/\NH), 9,78 (lH, d, NH). (3) I 7 ml 85%-ig myrsyra löstes 0,4 g difenylmetyl~7ß-[D-a- (2-trikloretoxikarbonylamino-4-tiazolyl)-af(4-etyl-2,3-dioxo~ -l-piperazinkarboxamido)-acetamido]-7a:metoxi-3-[5-(l-metyl- -1,2,3,4~tetrazolyl)~tiometyl]-2?-cefem~4~karboxylat erhållet i (2). Lösningen försattes med 0,4 g zinkstoft under iskylning och blandningen omrördes 3 timmar vid samma temperatur. De olösliga beståndsdelarna avlägsnades genom filtrering och filt- ratet befriades från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden löstes genom tillsats av 7 ml metylenklorid, 3 ml aceton och 10 ml vatten och pH i lösningen inställdes på 7,0 med mättad vattenlösning av natriumväte- karbonat. Det organiska skiktet avskildes, tvättades med mättad vattenlösning av natriumklorid, torkades över magnesiumsulfat och frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck för bildning av 0,21 g av ett vitt pulver. Det vita pulvret löstes i 2 ml anisol och 2 ml trifluorättiksyra tillsattes under iskylning, varefter lösningen omrördes 30 minu- ter vid samma temperatur. De olösliga beståndsdelarna avlägsna- des genom filtrering och filtratet befriades från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden behandlades 7808066-0 49 med 5 ml etylacetat för bildning av 0,19 g av trifluorättik- syrasaltet av 7ß~[D-of(2~amino-4-tiazolyl)-ar(4~etyl-2,3- dioxo-l-piperazinkarboxamido)-acetamido]-7afmetoxi-3-[5-(1- -metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-43-ceíem-4-karbonsyra, smältpunkt 175-l90° (sönderdelning), utbyte 60,9 %.

IR (mar) cnfl= °c==o 1755, 17oo, 1675.

Pâ liknande sätt framställdes följande föreningar: Trifluorättiksyrasalt av 75-[D-af(2-amino-4~tiazolyl)~a-(4- etyl~2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-acetamido]-%a-metoxi- -3-[5-(l-karbamoylmetyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-Aå-cefem- -4-karbonsyra.

Trifluorättiksyrasalt av 75-[D-ar(2-amino-4-tiazolyl)-Q- (4- etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-acetamido]=7a=meto¥i- -3-acetoximetyl-13-cefem-4-karbonsyra.

Trifluorättiksyrasalt av 7ß-[D~c-(2-amino-4-tiazolyl)-a~(4- etyl-2,3-dioxo-lﬂpiperazinkarboxamido)-acetamido]~7armetoxi- -3~[2-(5-metyl-l,3,4-tiadiazolyl)-tiometyl]-¿å~cefem-4-karbon- syra. (4) I 3 ml vattenhaltig aceton löstes 0,16 g av trifluorättik- syrasaltet av 7ß-[D~ar(2-amino-4-tiazolyl)~a=(4~etyl-2,3-dioxo- -l-piperazinkarboxamido)~acetamido]-7afmetoxi-3-[5-(l-metyl- -l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿š~cefem-4-karbonsyra erhållet enligt (3) och 0,0l97 g (ekvimolär mängd) pyridin tillsattes, varefter lösningen befriades från lösningsmedlet genom destilla- tion under reducerat tryck. Vatten sattes till återstoden och kristallerna tillvaratogs genom filtrering för bildning av 73-[D-ar(2-amino-4-tiazolyl)-ar(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-acetamido]~7armetoxi~3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetra- zolyl)-tiometyl]- re-cefem-4-karbonsyra.

= Exemgel 8. (l) En suspension av 5,0 g D(-)-alanin i 50 ml metylenklorid försattes med 14,9 ml trimetylklorsilan. Blandningen försattes droppvis vid O-50 med 15,6 ml trietylamin. Temperaturen i den erhållna blandningen höjdes så småningom och reaktione fick fortlöpa 1,5 timmar vid 200, Reaktionsblandningen för- FWB Qïïëëiïïï- sun-___... 7808066-0 so sattes sedan vid 5-100 med 20 g av en blandning av 4-etyl- -2,3-dioxo-l-piperazinkarbonylklorid och trietylaminhydro- klorid (blandningen innehöll 58,02 % av den förstnämnda kompo- nenten). Efter 2 timmars reaktion vid 200 frigjordes reaktions- blandningen från lösningsmedlet genom destillation. Återstoden försattes med 50 ml vatten och pH i blandningen inställdes på 7,5 med natriumvätekarbonat, tvättades med 50 ml etylacetat och 50 ml acetonitril tillsattes, varefter pH inställdes på l,5 med 2N saltsyra. Acetonitrilskiktet avskildes och vatten- skiktet extraherades med 2 x 50 ml acetonitril. Acetonitril- skikten tvättades med mättad vattenlösning av natriumklorid och kombinerades sedan. Det kombinerade acetonitrilskiktet torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Åter- stoden omkristalliserades ur n-butanol för bildning av 10,8 g D(-)-af(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-propionsyra, smämpunkt 164-1ss°, utbyte 75 P6.

IR (KBr) cnfl: 9c=o 1710, 1660 NMR (nMso-dö) S-värden: 1,11 (an, f, -cH3), 1,39 (an, a, -cH3), 3,2-4,1 (GH, m, >cH2 x 3), 4,3 (lH, m,7\CH), 9,22 (lH, d,>NI-I). (2) En suspension av 1,5 g D(-)-ur(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-propionsyra i 15 ml metylenklorid försattes med 0,64 ml l-metylmorfolin för bildning av en lösning. Medan temperaturen upprätthölls mellan -15 och -200 sattes 0,58 ml etylklorkarbonat till lösningen och tilläts reagera under 1,5 timmar. Därefter sattes 2,88 g difenylmety1-7B-amino-3-[(l- metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-A?-cefem-4-karboxylat till lösningen och reaktionen fick fortlöpa en timme vid -15 :in -2ø° och sedan 1,5 timmar vid -1o till o°. Efter elimine- ring av lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck sattes 30 ml vatten och 30 ml etylacetat till återstoden och blandningen omrördes omsorgsfullt. De utfällda vita kri- stallerna tillvaratogs genom filtrering för bildning av 4,0 g difenylmetyl-7B-[D(-)-ar(4~etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbox- amido)-propionamido]-3-[(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]- -,A3-cefem-4-karboxylat, smältpunkt 150-1540 (sönderdelning), utbyte 93,6 %. 7808066-0 51 IR (Ksr) mfl; “>c=o 17so, 1720, 1680 NMR (cDc13) á-värden: l,O8 (3H, t. ~CH3), 1,36 (3H, d, ~CH3), 3,25-4,0 (8H,zn,>CH2 x 4), 3,8 (3H, s, ~CH3), 4,3 (ZH, q,_)CH2), 4,55 (lH, m,{>CH), 4,99 (lH, d,-)CH), 5,8 (lH, m,~>CH), 6,85 (lH, s,->CH), 7,2- 7,4 (lOH, s, ~C6H5 x 2), 7,7 (lH, s,§>CH), 9,3 (lH, s,a)NH).

I en blandning av 20 ml kloroform och 6 ml vattenfri tetrahydro- furan löstes 1,26 g difenylmetyl-7ß-[D(-)-af(4-etyl-2,3-dioxo- -l-piperazinkarboxamido)-propionamido]~3~[(l-metyl~l,2,3,4- tetrazolyl)~tiometyl]- A?-cefem-4~karboxylat. Medan temperaturen upprätthöim vid -7o° tiusaftea 2,75 m1 av en lösning av 2,184 mmol/ml litiummetoxid i metanol. Den bildade lösningen omrördes 3 minuter och 0,31 ml tert.-butylhypoklorit tillsattes och lös- ningen omrördes 15 minuter vid samma temperatur. Efter tillsats av 0,4 ml ättiksyra höjdes temperaturen i reaktionssystemet till rumstemperatur. Reaktionsblandningen hälldes i 30 ml citrat- buffertlösning (pH 7,0). Det organiska skiktet avskildes, tvätta- des med vatten och torkades över magnesiumsulfat samt frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Återstoden renades genom pelarkromatografering (stationär fas: silikgel; eluent: en blandning 1:3 av bensen och etylacetat) för bildning av 0,6 g difenylmetyl-7ß-[D(-)~ar(4-etyl-2,3-dioxo- -l-piperazinkarboxamido)-propionamido]~7ufmetoxi-3~[5-(l-metyl~ -l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-zš-cefem~4-karboxylat, utbyte 45,8 %; .

IR (Kßr) cnﬁl; '>c-=o 1770, 17oo, 1s7o NMR (CDCI3) S~värden: l,l (3H, t, -CH3), 1,5 (3H, d, ~CH3), 3,5 (3H, S, -CH3), 3,3-4,2 (BH, nu )CH2 X 4), 3,8 (3H, s, ~CH3), 4,35 (ZH, q, )cH2), 4,6 (111, m,.;cH), 5,03 (ln, spycn), 6,88 (lH, s, ->cH), 7,2-7,4 (lon, s, -c6H5 x 2). 8,0 (ln, s,,\NH), 9,25 (lH, d, \NH). (4) I 8 ml anisol löstes 1,2 g difenylmetyl-7ﬁ-[D(-)-a:(4- -etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-propionamido]-70: metoxi-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]- 43~cefem- -4-karboxylat och 5 ml trifluorättiksyra sattes till lösningen under iskylning. Lösningen omrördes 30 minuter vid samma tem- 31.005, Qïïåïälïïï 7808066-0 peratur. Efter avslutad reaktion avlägsnades lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck. Ãterstoden löstes genom tillsats av 30 ml etylacetat och 30 ml vatten och pH i lösningen inställdes på 7,0 med en vattenlösning av natriumväte~ karbonat. Vattenskiktet avskildes och 30 ml acetonitril till- sattes, varefter pH däri inställdes på 2,0 med 2N saltsyra.

Acetonitrilskiktet separerades och vattenskiktet extraherades med 2 x 30 ml acetonitril. Acetonitrilextraktskikten tvättades med mättad vattenlösning av natriumklorid och kombinerades sedan med nämnda acetonitrilskikt. Det kombinerade acetonitril- skiktet torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och frigjordes från lösningsmedlet genom destillation under reducerat tryck för bildning av 0,5 g 70-[D(~)-Q;(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-propionamido]-7urmetoxi-3-[5-(l~metyl-1,2,3,4- tetrazolyl)-tiometyl]-¿ë-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 1650 (sönderdelninQ), utbyte 53,2 %.

IR (xsr) cm'l= °c=o 1770, 1705, 1670, 1650 NMR (DMSO-d6) 5-värden: l,l2 (3H, t, -CH3), 1,40 (3H, d, -CH3), 3,44 (3H, s, -CH3), 3,4-4,2 (8H, m,j>CH2 x 4), 3,99 (3H, s, ~CH3), 4,3 (ZH, q, >cH2), 4,5 (lH, m,,\cH), 5,1 (lH, sg-CH), 9,13 (lH, d,/*NH), 9,40 (lH, s,)NH).

På liknande sätt framställdes följande föreningar: 7ß-[DL-af(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-u-(klor- metyl)-acetamido]-7urmetoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)~ tiometyll-;>3-cefem-4-karbonsyra, smältpunkt 143-1460 (sönder- IR (xßr) cm'l= °c=0 1775, 1730-1650 NMR (ansa-ds) .S-värden: l,l5 (3H, t, -CH3), 3,45 (3H, s, -OCH3), 3,97 (3H, s, -CH3), 3,30-4,10 (lOH, nn )CH2 x 5), 4,30 (2H, bs, )CH2), 4,95 (lH, m,-}CH), 5,05 (lH, s,;CH), 9,45 (lH, d, )NH), 9,60 (lH, s, ,\NH) . ' delning). 7ß-[DL~ar(4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-a:(hydroxí- ' metyl)-acetamido]-7d:metoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)~ -tiometyl]-¿š-cefem~4-karbonsyra, smältpunkt 108-ll0o (sönder- delning). 7808066-0 53 IR (KBr) cnfl; °c=o 1765, 1720-1650 7D-[DL-ar(2,3-dioxo-l~piperazinkarboxamido)-propionamido%- -%afmetoxi-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]~A-cefem- ~4-ka-bonsyra.

Eëemgel 9.

Försöket enligt exempel l upprepades, varvid följande föreningar framställdes: 7ß-[D(«)-G»(2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-u~(2-tienyl)- -acetamido]-7afmetoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4~tetrazolyl)-tio- metyll-A?-cefem-4-karbonsyra. 7ß-[D(-)-ar(2,3~dioxo-1-piperazinkarboxamido)-c~(2~tienyl)~ acetamido]~7afmetoxi-3-acetoximetyl-¿3-cefem-4-karbonsyra.

Exemgel lgh (1) I 50 ml metylenklorid suspenderades 2,0 g D-treonin och 6,58 ml trimetylklorsilan sattes till den erhållna suspcnsionen varefter 7,01 ml trietylamjn tillsattes droppvis vid 0-5OC. Suspensionens temperatur ökades gradvis och reaktion skedde vid 200 i 1,5 timmar varefter 5,9 g av en blandning av 4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbonylklorid och trietylaminhydroklorid (halten 4-etyl-2,3-dioxo-l-pipera- zinkarbonylklorid var 58,55 %, beräknat på vikten) sattes till reaktionsblandningen. Den erhållna blandningen utsattes för reaktion vid 200 i l timma och destillerades däreíter under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet.

Till återstoden sattes 30 ml vatten och den erhållna bland- ningens pH justerades till 7,5 med natriumvätekarbonat varefter lösningen tvättades med 50 ml etylacetat och därefter tillsattes 70 ml acetonitril till lösningen. Den erhållna blandningens pH justerades till l,5 med 2 N salt- syra. Natriumklorid sattes till blandningen för att mätta denna och acetonitrilskiktet avskildes därefter.

Vattenskiktet utsattes för extraktion med fyra ¶Jnd pnﬁioner acetonitril och de fyra extraktacetonitrilskikten kombinera- des med det ovannämnda acetonitrilskiktet och de kombinerade acetonitrilskikten tvättades med mättad natriumkloridlösninq varefter acetonitrilskiktet torkades över vattenfritt . M lang. . v., K i -g-yfnš HQ-Mﬁi, lj-.ríf :m mn-“ahii- -~-V ' ^ _ ,..._.......... 78Û8066-0 54 magnesiumsulfat och destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Återstoden omkristal- liserades ur n-butanol för att ge 3,6 g (utbyte 75 %) D-ar(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazin-karboxamido)~ß~(S)- -hydroxibutyrsyra med smältpunkt 164-1660. _1 ," :R (rar) cm ' vC=O l7M0, 171%, løfﬁ NHR (cp S069 ) ppm-varen . 1,11 (3H, :, cs ), 3 3 1,13 (35, d, cﬂq), 3,25 - 3,75 '~H, IF., X 2); " m: 2 CH x 2). (2) I 15 ml metylenklorid suspenderades 1,0 g D-Mr(4-etyl- -2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxibutyrsyra och 0,38 ml l-metylmorfolin tillsattes för att överföra suspensionen i lösning. Till lösningen sattes 0,35 nl etylklorkarbonat vid -l5° till -ZOO och lösningen utsattes för reaktion vid samma temperatur i 1,5 timmar. Därefter tillsattes 1,67 g difenylmetyl-7ß~amino-3-f5-(l-metyl-l,2,3,4- -tetrazolyl)tiometyl]-13-cefem-4-karboxylat till reaktions- blandningen och den erhållna blandningen utsattes för reaktion vid samma temperatur i 1 timme och därefter via -1ø°ti11 o° i 1,5 timmar. Reaktionsblandingen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och till återstoden sattes 30 ml vatten och 30 ml etylacetat varefter den erhållna lösningen omrördes. De så utfällda vita kristallerna samlades genom filtrering och gav 2,5 g (utbyte 95 %) difenylmetyl 70~[D-0»(4-etyl-2,3-dioxo-l-pipera- zinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxibutanamido]-3-f5-(1-metyl-l,2,3, -1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-lå-cefem-4-karboxylat med smä1tpunkt.121-125° (sönaerae1ninqy;».gÉ 78Û8Û66-0 55 :R (kan carl; vczo 1785, 1120, lëšﬂ NER (gD3soca?) ppm~värden 1,00 (33, V, a, ca a .- ~ f; I Cr: 19:; CH '~' å), 3183 íïr-'a fr: C* 32 'Irl **'°"»' v,q5 tion, s, c 3, NH), 9,26 Ãlä, S, Edi- (3) I en blandning av 30 ml torkad metylenklorid och 2 ml torkad tetrahydrofuran upplöstes l,O g difenylmetyl-7p~ -[D-0:(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamid)-ß-(S)-hydroxi- butanamido]-3-[B-(l-metyl-1,2,3,4~tetrazolyl)tiometyl]-A?-ce- fem-4-karboxylat och den erhållna lösningen kyldes till -700.

Till den kylda lösningen sattes 3,55 ml (l,66 mM/ml) av en metanollösning av natriummetoxid vid samma temperatur och den erhållna blandningen omrördes i 3 minuter varefter 0,18 ml tert.-butylhypoklorid tillsattes. Den erhållna bland- ningen omrördes vid samma temperatur i 15 minuter varefter 0,39 ml ättiksyra sattes till den erhållna lösningen och lösningens temperatur höjdes till rumstemperatur. Lösningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna läs- ningsmedlet och till återstoden sattes 20 ml etylacetat och 20 ml vatten för att upplösa återstoden varefter den erhållna lösningens pH justerades till 6,5 med vatten~ haltig natriumbikarbonatlösning. Det organiska skiktet avskildes, tvättades med vatten och torkades över vatten- fritt magnesiumsulfat och destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Återstoden rengynﬂesgenom kolonnkromatografi Waki silikagel C-209; eluerades med en blandning av bensen och etylacetat (l : 2, beräknat på volymen) varvid 0,6 g (utbyte 40,8 %) difenylmetyl-7ß-[D-år(4-etyl-2,3-dioxo~l~piperazin- karboxamido)-ß-(S)-hydroxibutanamido]-7afmetoxi-3-[5~(l-metyl- -l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyﬂl-[Q-cefem-4-karboxylat erhölls.

-V._..._. 3-5 QQÉÃQÉF-ïfï-Tï 7808066-0 se Inrxßr) cm"1= vczo 1780, ivio, 1670 xna ;c:c13> p;:~väraen 1,2ß (zﬁ, :, C93), 1,25 13n, a, CH3), 3,5 (35, s, C53), 3.79 i3a, s, CH3), 3,2 - U,O (8E, m, CH2 x Ä), ¥,3 - H,6 (HH, m, csâ, cs X 2), \T1 C) 2 (lä, S, CH), 6,35 (lä, s, Nr), S,52(1H, s, wa>, §,s§ (4) I 5 ml anisol upplöstes 0,5 g difenylmetyl 7ﬂ~[D~Q~(é- -et3l-2,3~dioxo-l-piperazinkarboxamido)~ﬁ-(S)-hydroxibuta:ami- do-7m-metoxi-3-[É-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl:-i3- -cefem-4-karbox;iat och 5 ml trifluorättiksyya sattes till den erhållna lösningen under iskylning varefter den erhållna lösningen omrördes vid samma temperatur i 30 minuter.

Reaktionsblandningen avdestillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och till återstoden sattes 10 ml etylacetat och 10 ml vatten varefter mättad natriun- karbonatlösning tillsattes under omröring för att justera blandningens pH till 6,5 och därigenom upplösa återstoden.

Vattenskiktet avskildes och 10 ml metylacetat tillsattes.

Den erhållna blandningens pH justerades till 2,0 med 2 N saltsyra. Det organiska skiktet avskiljdes . VattensI-:iktet extraherades med 2 10-ml portioner metylacetat och de två skikten kombinerades med det ovannämnda organiska skiktet och de kombinerade organiska skikten tvättades med mättad vattenhaltig natriumkloridlösning.

Efter torkning över vattenfritt magnesiumsulfat avdestillera- des det organiska skiktet under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och återstoden behandlades med aietyleter och gav o,2s g (utbyte 63,3 %) 7ß-[n-a»<4-ety1- _-2;3-dioxo~l~piperazinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxibutanamidcI- f7ü>metoxi-3-[É-(l-met3í-1.2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Cê- n ~cefem-4-karboxylsyra med.en smältpunkt av 118 ~ 1200 (sönderdelning). 7808066-Û T fV=“ c:_l: ' -R \“--) »C=O nu: (csïsccø I ppm~väraen 1,16 (BE, 1, CH,>, .J J 3 1115 (EH, d; CH ): :Jlrgß (35: s: cHšïW 5.93 < H, 2, CH >, 3,5 - 2,0 ﬁßﬂ, I, U.) d, NH X 2)- På ovan angivet sätt erhölls följande föreningar: Vß-[D-0-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)ïß-(S)-hydro- xibutanamido]-7a-metoxi-3-[É~(l,3,4-tiadizolyl)tiometyl ~¿ê- -cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 108-ll2° (sönderdelning).

Ypzo 1780, 1720, 1680 EEE (CD SOC3 + D O) pp:-värden 1,02 - L,§9 (63, U) LU h) m, ca, x 2), 3,50 (39, s, CH ), 3,3 - J 3 ü,5 (lan, m, CHE x 5, CH x 2), 5,05 (JH, S, cH>, 9,:2 (LH, 2, cs). 7ß-fD~Q-(4-n-oktyl-2,3~dioxo-l-piperazinkarboxamido)~P~(S)- -hydroxibutanamido]-7&~metoxi~3-[5-(1-metyl-1,2,3,4~tetrazo- lyl)tiometyl]-LP-cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 113-ll5° (sönderdelning) _1 ,, ﬁﬂ á IR íäšr) cm ': v 1730, lcoO ~ l:2a c=ﬁ una (c:_ccc:_} ppm-värden: 0,80 - 1,6@ <13n, m, J 3 CH X á, x 2)) _ 2 3 m, CE2 x 5, Eíx2), 3,43 (33, S, C¿3), 3,95 (39, s, CHB), š,G3 (lH, s, CI), S, d: 7p~fD~u-(4-n-butyl~2,3-dioxo-l~píperazin-karboxamido)-ß-(S)- -hydroxibutanamido]-7Q-metoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetra- zolyl)tiometyl]-0É~cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 125-1330 (sönderdelning).

PQOY: Qšèäëïïfft.

V '_,P_F.¶.,-q...».-- 7808066-0 58 1755, 1710, lêâﬁ ) Ppï-värden C180 ' 1,63 (lCH, m, 33232, CH3x2), 3,3O--'-1,'-ï-3 _(12H, m, C32 I 5, CH x 2), 3,41 (Bä, S, Cä3}, S; CH3): (lä: s: 9,21 (ia, s, Na), 9,30 (LH, d, NH). 7P-[D-GP(4-etyl-2,3-dioxo~l-piperazin-karboxamido)-p~(R)- -hydroxibutanamiäo]-70fmetoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetra- zolyl)tiometyﬂ-Lê-cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 144-l50°C (sönderdelning).

IT30, 1735 - 1550 IR (ššr) cm UC=Û Eää (CDSCGCD3 :Cï3SCCD3 = H : l utüqækt ivolym pçmﬂﬁàden o,95 _ 1,37 (6%, m, C33 : 2), 3,3 - q,92 (128, T, CH2 A E. ÉL X 2), 2,5 (3H, s, sag), ﬂ,0ﬂ (BH, S, GH,>, 5,15 (lä, s, CH), 9,23 (lt, bs, Fr), g,ns iia, a, NH).

Exemgelll. (l) I 45 ml metylenklorid suspenderades 4,5 g D-är(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxi- smörsyra och 1,60 g N-metyl-morfolin sattes till den erhållna suspension för att överföra suspensïonen i lösning. Lös~ ningen kyldes till -200 och 1,78 g etylkarbonat tillsattes varefter den erhållna lösningen utsattes för reaktion vid -l3° till ~l6° i 1,5 timmar. Därefter sattes 6,50 g difenyl~ mety1-jp~amino-3-acetoximetyl-1?-cefem-4-karboxylat till reaktionsblandningen vid -30°,.Reaktionen skedde vid -lo till 159 iizo minuter och därefter vid -lo ri11 o° 1 30 minuter varefter reaktionsblandingen'avdestillerades _ ...._~.---._.. i-- 7808Û66~Û 59 under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet.

Till återstoden sattes 50 ml etylacetat, 50 ml metylacetat och 40 ml vatten för att upplösa återstoden. Det organiska skiktet separerades, tvättades över vattenfritt magnesium- sulfat och destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Återstoden renades genom kolonnkromatografi (wako sjlikagel C-200; eluerades red en blandning av kloroform och etanol (60 : 1 beräknat för volymen) och gav 8,2 g (utbyte 78,2 %) av ett vitt pulver av difenylmetyl-7p{D-d-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbox- amido-ß-(S)-hydroxibutanamido]-3-acetoximetyl-¿?-cefem-4- -karboxylat.

IR (xßr) cm7l= vC=o 1780, 1705, 1670 (2) I 80 ml metylenklorid upplöstes 8,0 g difenylf- metyl-7ß-[D-ﬂ-(4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazínkarboxamido)~P- -(S)-hydroxibutanamido]-3-acetoximetyl-Lä-cefem-4-karboxylat erhållen enligt (1) och till lösningen sattes 26 ml metanol- lösning av litiummetoxid (litiumpropoxidhalt, 1,51 mM/ml) vid -70°. Lösningen omröraes vid -65 tili -700 i 3 minuter och 1,60 g tert.-butylhypoklorit sattes därefter till lösningen varefter reaktion skedde vid samma temperatur i 15 minuter.

Till reaktionsblandningen sattes 3 ml ättiksyra och tempera- turen ökades gradvis till OO varefter blandningen destille- rades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet.

Till återstoden sattes 100 ml etylacetat och 50 ml vatten för att upplösa återstoden och det organiska skiktet avskildes, torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lös- ningsmedlet. Återstoden renades genom kolonnkromatografi (Wako silikagel C-200; eluerad med etylacetat) och gav 2,65 g (utbyte 31,8 %) av ett vitt pulver av difenylmetyl-7p- -[b-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxi- butanamidq]-7asmetoxi-3-acetoximetyl-E?-cefem-4-karboxylat.

IR (Kei) cm"l=4C=0 1780, 1740, 1710, 1680 7808066-0 60 (3) Till 2,65 g difenyimetylﬂß-[n-a-(4-ety1-2,3- -dioxo-l~piperazinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxibutanamido]-7&- -metoxi-3-acetoximetyl-Å?-cefem-4-karboxylat enligt ovan sattes 26 ml anisol och 26 ml trifluorättiksyra under iskylning och den erhållna blandningen fick reagera vid samma temperatur i 30 minuter varefter reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lös- ningsmedlet. Dietyleter sattes till återstoden för att tvätta den senare och gav därigenom 2,0 g (utbyte 97,6 %) av ett vitt pulver av 7ß-[D-4-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-ß-(S)-hydroxibutanamido]~7ﬂ~metoxi-3-acetoxi- metyl-LP-cefem-4-karboxylsyra med smältpunkt 142-1450 (sönderdelning). 1 :a (acer) cmfü »,,_ lass, 1705, 16:e wo z-.w-ïa(cn3cc-ca3 = ca3socD3 = 1! = 1 uttryckt i vølym) pen-värden 0,85 - l,ë5 (6H, m, CH x 2), 3 2,53 (BH, S, CH3), 3,15 - ¥,95 (123, m, C32 x 5, CH x 2), 3,35 (BE, S, I CH3), 5,05 (lä, s, CH), 3 55 (lä, S, NH), 9,3ë (lﬁ, d, NH).

Exemgel 12.

I 24 ml nitrometan upplöstes 0,71 g 7ﬁ{b-ß-@-etyl 2,3- ,-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-P-(S)-hydroxibutanamido]-7a- ,_-metoxi-3-acetoximetyl-Å?-cefem~4-karboxylsyra och 0,22 g l-(2-hydroxietyl)-5-merkapto-lH-tetrazol och den erhållna lösningen fick reagera vid 800 i 5 timmar varefter reak- tionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Till den erhållna återstoden sattes 20 ml etylacetat och 20 ml aceton för att upplösa .Håterstoden§'Till den erhållna lösningen sattes därefter 'difenyldiazometan tills en rödviolett färg kvarblev utan 7808066-Û 61 att försvinna och den erhållna blandningen destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösnings- medlet. Den erhållna återstoden renades genom kolonnkromato- grafi (vakuumsilikagel C-200, eluerad med en blandning av kloroform och etanol (20:l, beräknat på volymenë) för att ge ett ljusgult pulver. Till pulvret sattes 3,5 ml anisol och 3,5 ml trifluorättiksyra under iskylning och den erhållna blandningen utsattes för reaktion vid samma temperatur i 30 minuter varefter reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Etylacetat sattes till den erhållna återstoden för att tvätta den senare, varvid man erhöll 0,28 g (utbyte 34 %)av ett ljus- gult pulver av lß-[D-Gr&4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbox- amido)-ß-(S)-hydroxibutanamidq]~7armetoxi-3-{5-[l-(2-hydroxi- etyl)-l,2,3,4-tetrazolyl]-tionetylﬁ-¿š~cefem-4-karboxylsyra med smältpunkt 128-1350 (sönderdelning).

IR (KBT) cm-1; vczo 1769, 1712, 1575 NHR (CD3CCC 3 : CDBSOCDQ = H : lutmqækti,volym gmt Värden; Q,9 - 1714 72, CES; X 2), , - n- \ -\ r /'“ f” 3,47 (åh, s, oh ,, 3,23 - ë,aJ ålen, m, CH2 x T, CE X 2), 5,03 C15, 5, CH), 9,01 1113, S, NH), 9,31 WW, d, nn).

Samma förfarande upprepades förutom att l-metyl-5-merkapto- -lH-tetrazol användes i stället för l~(2-hydroxietyl)-5~mer- kapto-lH-tetrazolen vilket gav 7ﬂrfD-0=(4-etyl-2,3-dioxo-l- -piperazinkarboxamido]-b-(S)~hydroxibutanamido]-7Q-metoxi-3- -[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-03-cefem 4-karboxyl- syra.

Smältpunkt, IR-spektrum och NMR-spektrum för denna produkt var identiska med produkten i exempel l. 7808066-0 62 Exemgel 13- 1 7 ml vattenfri metylenklorid upplöstes 0,20 g D-0-(4-etyl- ~2,3-dioxo-1-piperazin-karboxamidd*ßf(S)-tert.-butoxismör- syra varefter O,l0 g oxalylklorid och en droppe dimetylform- amid sattes till den erhållna lösningen i ovan angiven ord- ning under iskylning och den erhållna blandningen utsattes för reaktion vid rumstemperatur i 30 minuter. Reaktionsbland- ningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Den erhållna återstoden upplöstes i S ml vattenfri metylenkloríd och den erhållna lösningen kyldes till -500. Till lösningen sattes 0,3 g difenylmetyl-ﬂQ-amino- -7a-metoxi-3-[5-(l-metyl-,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-19- -cefem-4-karboxylat och 0}l ml dimetylanilin i angiven ord- ning varefter den erhâllna blandningen fick reagera vid -200 över natten. Reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och den erhållna återstoden upplöstes i en blandning av 10 ml vatten och 15 ml etylacetat varefter etylacetatskiktet avskildes, tvättades noggrannt med vatten och destillerades därefter för att avlägsna lösningsmedlet. Den erhållna återstoden renades genom kolonnkromatografi (Wake-silikagel C-200; eluerad med en blandning av bensen och etylacetat (2 : l beräknat på volymen) och gav 0,31 g (utbyte 63 %) difenylmetyl-7P-[D-df(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbox~ amido)-P-(S)-tert.-butoxibutanamidol-7ürmetoxi-3?[S-(l-metyl~ -l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Eë-ceíem-4-karboxylat med smältpunkt lO9-ll5° (sönderdelning). 7808066-0 63 NNE (CDCI, .J ) ppm-värden: l,30 (9H, s, CH x 3), 1,93 - 1,55 (55, m, CH3 3,51 (SH, 5, C53), 3,T3 säg), 3,18 - 4,68 (129, m, cs; 1 5, CH X E), Ä,98 (15, S, CE), (h O\ /\ | .i 111 u (Il 1. (Ü 7-12' ~.» u < ~.

IL) FJ 'T ) 111 v ET' l J u ,7 f) xn gï 9,50 (15, a, NH).

Den ovan angivna produkten upplöstes i en blandning av 2 ml anisol och 2 ml trifluorättiksyra och den erhållna lösningen utsattes för reaktion vid rumstemperatur i 30 minuter. Reaktionsblandningen torkades under reducerat tryck till torrhet varefter 10 ml etylacetat sattes till återstoden och den erhållna blandningen omrördes i l timma.

De så utfällda kristallerna samlades genom filtrering och torkaaes och gav 0,21 g (utbyte 55,7 2) 7p-¿b-a~(4-ety1- -2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ß-(S)~hydroxibutanamido]- -Wd-metoxi-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-A3- -cefem-4-karboxylsyra. Smältpunkt (sönderdelning), IR-spekt- rum och NMR-spektrum för denna produkt var identiska med de för produkten erhållna i exempel l.

Exempel l4.

En blandning av 40 ml vattenfri metylenklorid och 20 ml vattenfri metanol upplöstes i l g 7ß-[D-ﬂ~(4-etyl-2,3-dioxo- -l-piperazin-karboxamido)-ß-(S)ihydroxibutanamidoï-3-[5-(1- -metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-lg-cefem-4-karboxylsyra och den erhållna lösningen kyldes till -75°. Till lösningen sattes droppvis 3,7 ml litiummetoxidlösning i metanol (9,2 mM litiummetoxid ingick däri och lösningen fick reagera vid -750 till -70° i 3 minuter varefter 0,22 ml tert.-butyl- hypoklorid tillsattes och den erhållna blandningen fick reagera i 15 minuter. Till reaktionsblandningen sattes 0,28 ml r-OQR Qëëïešïï.. 7808066-0 64' myrsyra och blandningens temperatur ökades till rumstempera- tur. Blandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och 4 ml vatten, 4 ml mättad vat- tenhaltig natriumkloridlösning och 20 ml acetonitril sattes till den erhållna återstoden för att upplösa denna. Till den erhållna lösningen sattes droppvis 6 N saltsyra för att justera blandningens pH till 1,2. Det organiska skiktet avskiljdes och torkades därefter över vattenfritt magnesium- sulfat och destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Till den erhållna åter- stoden sattes l4 ml aceton och blandningen omrördes. De så utfällda kristallerna samlades genom filtrering och gav 0,7l g av acetonaddukten av 7p-[D-ü-(4-metyl-2,3-dioxo-l- -piperazinkarboxamido)-P-(S)-hydroxibutanamido]~7Gëmetoxi- -3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿§-cefem-4- karboxylsyra.

Addukten suspenderades i 4,3 ml 20 %-ig vattenhaltig aceton och natriumvätekarbonat sattes till suspensionen för att justera dess pH till 5,0. Till suspensionen sattes 70 mg aktivt kol och blandningen omrördes i 3-4 minuter och filtre- rades därefter genom celit för att avlägsna det aktiva kolet.

Filtratets pH justerades till 1,5 med 6 N saltsyra. Filtra- tet omrördes därefter vid rumstemperatur i 30 minuter och därefter under iskylning i 3 timmar varefter de så utfällda kristallerna samlades genom filtrering och torkades därefter och gav 0,5 g (utbyte 45 %) 7ß-[D~0~(4~etyl-2,3-dioxo-1- -piperazinkarboxamido)-ß-(S)-hydroxibutanamidol-70~metoxi-3- -[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyll-¿§-cefem-4~karboxyl-6_ syradihydrat med smältpunkten l73-l75° (sönderdelning) du IR(KBr) cm_l: Q C=0 1775, 1710, 1675, 1660 NMR-spektrum för produkten var identisk med den för produkten i exempel l.

Exempel 15. - - _ ,I.20 ml vattenfri metylenklorid suspenderades l g 7ß-[b-ü- _ _V_..._- .__..___, .._~. 73Û8Û66-Û es -(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido1~ß~(S)-hydroxibutan- amido]~3~[5-(l-metyl-1,2,3,4~tetrazolyl)tíomety13-¿§-cefem~4- -karboxylsyra och till suspensionen sattes 0,8 ml vinyletyl- eter och 42 mg pyridinium-p-toluensulfonat och den erhållna blandningen fick reagera under âterflöde i 50 minuter och gav 7p-[D-Of(4~etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)~ß-(S)- l-(l- ~fl-(1-etoxietyl)oxi]-butanamido]~3-[5-(l~metyl-l,2,3,4-tetra- zolyl)-tiometyl]-lå-cefem-4-karboxylsyra. Reaktionsblandningen kyldes till -750 och 0,5 ml vattenfri metanol sattes därtill varefter 2,87 ml litiummetoxidlösning i metanol (7,52 mM litiummetoxid ingick) indroppades. Den erhållna blandningen fick reagera vid ~75 till -700 under 3 minuter varefter 3 ml vattenfri metylenklorid innehållande 0,25 ml tert.- -butylhypoklorit tillsattes droppvis under lO minuter. Den erhållna blandningen utsattes för reaktion vid samma tempera~ tur i ytterligare 5 minuter varefter 0,34 ml ättiksyra till~ sattes och temperaturen hos blandningen fick öka till OO.

Till reaktionsblandningen sattes 5 ml vatten och blandningen omrördes varefter det organiska skiktet avskildes och destil- lerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmed- let. Den erhållna återstoden (7P-{D-Of(4-etyl-2,3-dioxo-l- -piperazinkarboxamido)-ß-(S1-[l-(1-etoxietyl)oxi]butanamidoj- -7mrmetoxi-3-[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl3-1§- -cefem-4-karboxylsyra ingick däri) upplöstes i 15 ml aceton och 30 mg p-toluensulfonsyramonohydrat sattes till lösningen och lösningen omrördes vid rumstemperatur i 2 timmar och fick därefter stå i 5 timmar över natten. De så utfällda kristallerna samlades genom filtrering och tvättades därefter med vatten och gav 0,85 g acetonaddukt av ¶3~[D-G-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)~P-(S)-hydro- xi-butanamido]-7a-metoxi-3- 5-(l-metyl-l,2,3,4~tetrazolyl)- tiometyl]-1§~cefem-4-karboxylsyra.

Denna addukt suspenderades i 5 ml 20 %-ig vattenfri aceton och adduktens pH justerades till 5,0 genom tillsats av natriumvätekarbonat varefter 85 mg aktivt kol tillsattes och den erhållna blandningen omrördes vid 3-4 minuter och 7808066-0 66 filtrerades därefter genom celit för att avlägsna aktivt kol. Till filtratet sattes 6 N saltsyra för att justera filtratets pH till 1,5 varefter filtratet omrördes vid rumstemperatur i 30 minuter och därefter under iskylning i 3-timmar. De så utfällda kristallerna samlades genom filtre- ring och gav 0,66 g (utbyte 60 %) 7ß-[D-(L-(4-etyl-2,3-dioxo-l-pipe- razinkarboxamido)-5-(S)-hydroxibutanamidol~7aﬁnetoxi-3-[5~(l-metyl-l,2,3,4- tetrazolyl)tiometylIwﬂê-cefen-4-karboylsyradihydrat med snältpunkten 173-1750 ßömkxdehüngL IR(KBr)an'1=!/c=o 1775, 171o, 1675, 1660 Produktens NMR-spektrum var identisk med den för produkten i exempel 1.

Exempel 16. (l) I 50 ml vattenfri metylenklorid upplöstes 2,5 g difenylmetyl~D-GL(4-etyl-2,3-dioxo-l~piperazinkarbox- amido)-ß-(S -hydroxibutyrat, och till lösningen sattes vid -4o° bortrifiuoriaaietyleterkomplex (Bg-halm 47 vikt- procent) och 50 ml dietyleterlösning av diazometan (diazometanhalt: ungefär],4 g) i denna ordning. Blandningen fick reagera. Reaktionsblandningens temperatur ökades därefter till rumstemperatur och 20 ml vatten sattes till blandningen varefter det organiska skiktet avskildes;, tvättades med mättad vattenhaltig natriumkloridlösning, torkades över vattenfritt magnesiumsulfat och destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösnings- medlet. Den erhållna återstoden renades genom kolonnkromato~ grafi (Wako-silikagel C-200; eluerad med en blandning av bensen och etylacetat (5 : l, beräknat på volymen) och gav 0,68 g (utbyte 26,4 %) difenylmetyl-D-Of(4-ety1-2,3-dioxo~l- -piperazinkarboxamido)-Fr(S)-metoxibutyrat. (2) I en blandning av 5 ml anisol och 5 ml trifluorättiksyra upplöstes'0,6 g av difenylmetyl-D-Uf(4-etylf- '-2,3-dioxo-l-piperazin-karboxamido)-P-(S)-metoxibutyratet erhållen ovan i (1) och den erhållna lösningen fick reagera under iskylning i 30 minuter. Reaktíonsblandningen destillera- des under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmcdlet 7898066-0 67 och till återstoden sattes 10 ml dietyleter och lO ml diiso- propyleter och den erhållna blandningen omrördes i l timma.

De så utfälld kristallerna samlades genom filtrering och gav 0,37 g (utbyte 95,8 ä D-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin~ karboxamido)-ß~(S)-metoxismörsyra med smältpunkt l32-1330. (3) I 3 ml vattenfri metylenklorid suspenderades 0,18 g D-d>(4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-ß-(S)- -metoxismörsyra erhållen i (2) ovan och därtill sattes O,l g oxalylklorid. En droppe N,N-dimetylformamid sattes till suspensionen och suspensionens temperatur ökades till rumstemperatur varefter den fick reagera i l timma. Reak- tionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och den erhållna återstoden upplöstes i 5 ml vattenfri metylenklorid varefter till den erhållna lösningen sattes 0,28 g difenylmetyl-7p-amino-7Q- -metoxi-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Ä@~cefem- -LL-karboxylat via -3o°c till -4o°c och därefter o,ose g dimetylanilin. Den erhållna blandningen fick reagera vid -20 till -100 i 12 timmar och destillerades därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Den erhåll- na âterstoden upplöstes i en blandning av 5 ml vatten och lO ml etylacetat. Det organiska skiktet avskildes, tvättades med mättad vattenhaltig natriumkloridlösning och torkades därefter över vatteníritt magnesiumsulfat. Det organiska skiktet destilleracïes under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och den erhållna återstoden renades genom kolonnkromatografi (Waco-silikagel C-200; eluerad med en blandning av bensen och etylacetat l:l beräknat på volymen)) och gav 0,28 g (utbyte 57,8 %)difenylmetyl~7ß-[D-0f(4-etyl- -2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-P-(S)-metoxibutanamido)- -P-(S)-metoxibutanamido]-70Pmetoxi~3-[5-(l-metyl-l,2,3,4- -tetrazolyl)tiometyll-tå-cefem-4-karboxylat. (4) I en blandning av 2 ml anisol och 2 ml trifluor- ättiksyra upplöstes 0,18 g difenylmetyl-7ß-[D-a=(4-etyl-2,3- -dioxo-l-piperazin-karboxamido)-P-(S)-metoxibutanamido]-70= 7808066-0 68 -metoxi-3-[5-(l~metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-¿§-cefem- ~4-karboxylat och lösningen fick reagera i 30 minuter under iskylning. Reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och till den erhållna återstoden sattes 10 ml etylacetat varefter blandningen omrördes i 30 minuter. De så utfällda kristallerna samlades genom filtrering och gav 0,l g (utbyte 70 %) 7ß¶®-d=(4-etyl- -2,3-dioxotl-piperazinkarboxamido)-#-(S)-metoxibutanamido]- -7a>metoxi-3-[5-(l~metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]~Åë-ce- fem-4~karboxylsyra med smältpunkt 130-1360 (sönderdelning).

IB íïšr) cm_l: vpzo 1793, 1725 _ 1553 NHR <3; C555 2 c5_3gC@: = 2 ; 1 uttrwﬂüzi vohmü pgnﬁiüden 3 3 J J 1,1? (sä, t, Sw, 1,23 íïïï, ﬁïﬁš), J 3,33 (39, S, 5ﬂ3), 3,”5 (35, S, C57), S: " HJGO X 5, CE K 2), 5,05 (lH, s, CE), 8,97 (ln, s, NH), 9,31 (ln, d, NH).

På samma sätt som ovan erhölls följande föreningar: 7ﬁ-[D~0r(4-etyl~2,3-dioxo-l-piperazin-karboxamido)-ß-(S)- -etoxibutanamido]-70-metoxi-3-[S-(l~metyl-1,2,3,4~tetrazolyl- tiometrlj-iš-csfez~4-karboxvlsvra, smältnunkt 110-1190 (sönderdelning) IR (xsr) cm"1: vC=O 178o, 1720 _ 1670 NHR (cD3cocnQ = cDrsocD3 = u 1 1 urmnwkr iV°¥ﬂÛPP“*ë@5@“ _» J 1,10 - 1,35 (9H, m, sag X 3), “ gasÛ (3H: s: CH3)a (E71: S: C77; z u 3,30 - u,7o (inn, m, cH2 X 6 cs K 2), 5,03 (la, 3, CH), 8,95 (le, 2, Mä), 9,uo (ln, d, na). 78Û8Û66~Ü 69 7Fr[D-Or(4~etyl-2,3-dioxo~l~piperazinkarboxamido)-ß-(S)-tert.- -butoxibutanamido ~70rmetoxi~3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl%~ tiometyl]-Lä-cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 110-1190 (sönderdelning) IR(K,r) cm_': v¿=9 1780, lT3C ~ 1532 Ü , xma (cs coca ) ppm-värdena , :ar , ,,2° - h <5 ':_", ~, -w < 5, j) :- . v f' :a .f 2>,5,0l;(11-?,s,':'~ ,=,'~o de, 3, ﬁﬂ>, 9,40 (ln, d, NH) 7ß-[D-af(4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-Fr(S)-text.- -butoxibutanamido]-7armetoxi-3-[5-(l-metyl~l,2,3,4~tetrazolyl)- tiometyl]-19-cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt llO~ll5o (sönderdelning) Iaíïery Om -= v, , 1750, 1739 ~ 1520 :E x 2), 5,ou <1H, s, CH , 8,ﬂ8 (LH, S, NH), 9,ßo (13, a, nä) Exemnel 17. (l) Till 0,5 g D-G*(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamid-ß -(S)-hydroxismörsyra sattes 5 ml myrsyra och den erhållna blandningen fick reagera vid 500 i 2 timmar varefter reaktionsblandningen destilleras under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Till den erhållna Pøoxlltzlfuäuwï i 7808066-0 70 återstoden sattes 5 ml etylacetat och de så utfällda kristal- lerna samlades genom filtrering och gav 0,45 g (utbyte 82 %) Dad-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ê-(S)-formyloxi- smörsyra med smältpunkt 170-1750. -l IE (ïšr) cm _ vC=0 _1740 _ 1710, 1660 NMR (CD SOCD3) ppmﬂﬁkden: 1,15 (BH, Ü, C53), 3 1,35 (SH, d, CH ), 3,10 - 3,72 (ÄH, m, CH2 5,28 - 5,61; (11-2, m, CH), S,1E.í1.-, ä? s, c-H), 9,l:1 (lä, d, Nm". (2) I 5 ml vattenfri metylenklorid suspenderades o,3 g n-1-(4-etyl-2,3-aioxo-1-piperazinkarboxamido)-ß-(s)- -formyloxismörsyra och 0,14 g oxalylklorid sattes till suspensionen under omrörning varefter l droppe dimetylformamid sattes därtill. Suspensionens temperatur ökades till rums- temperatur och suspensionen fick reagera i 30 minuter.

Den så erhållna reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet. Den erhåll- na återstoden upplöstes i 5 ml vattenfri metylenklorid och lösningen kyldes till -400. Till lösningen sattes 0,45 g difenylmetyl-¶ß-amino-70-metoxi-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetra zolyl)tiometyll-iê-cefem-4-karboxylat, varefter 0,12 ml N,N-dimetylanilin sattes därtill. Den erhållna blandningen fick reagera vid -20° över natten. Reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lös- ningsmedlet och 10 ml vatten och 20 ml etylacetat sattes till den erhållna återstoden för att upplösa den senare varefter det organiska skiktet avskildes, tvättades med mättad vattenhaltig natriumkloridlösning och torkades därefter över vattenfritt magnesiumsulfat och destillerades 7808066-Û därefter under reducerat tryck för att avlägsna lösnings~ medlet. Den erhållna återstoden renades genom kclonnkromato- grafi [Waco-silikagel C-200; eluerad med en blandning av kloroform och aceton (10 : l) beräknat på vo1ymen)] cch gav 0,5 g rurbyte 64 2) aifenylmetyl-IB-In»w~<4-@ty1-2,3~ai0Xd- ~l~piperazinkarboxamido)-ß-(S)-formyloxibutanamido]-7&fmetoxi- -3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Å§-cefem-4- karboxylat. (3) I en blandning av 2 ml anisol och 2 ml trifluor- ättiksyra upplöstes 0,2 g aifenylmetyl-73-lb-GL(4-ety1-2,3- -dioxo-l-piperazinkarboxamido)¶ß~(S)-formyloxibutanamido]-7G? -metoxi~3-f5-(l-metyl~l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyﬂ}~;§-cefem- -4-karbozylat, och den erhållna lösningen fick reagera i 15 minuter under iskylning. Reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och 10 ml etylacetat sattes till den erhållna återstoden varefter den erhållna blandningen omrördes i 30 minuter. De så utfällda kristallerna samlades genom filtrering och gav 0,15 g (utbyte 94 %) 7p-[D-de(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbonW amido)-ßt(S)~formyloxibutanamido]-7K-metoxi-3-[5-(l-metyl- ~l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-¿ê~cefem-4-karboxylsyra med smältpunkt 147-1550 (sönaeraelning) Ia (Isf) @m'1= vC:9 1?8o, 172ø - 1680 una (cm socD3) ppm-värden: 0,90 - 1,35 (5H, m, 3 033 x 2), 3,20 - 3,80 <6H, m, CH¿ X 3), 3,uo (šn, S, cH3>, 3,80 - u,1o (ZH, m, CH2), 3,9M 3H, s, CH3), ü,2O - u,uo (2H, m, cnz), u,50 - 2,90 (1H, m, ca), 5,07 (ln, s, CH), 5,20 - 5,50 (in, m, CH), 3,20 (ln, s, S? c-H), 9,ﬂ3 (lä, S, NH), 9.5ﬂ (15, d, røønßßﬁhﬁfff. 4 . -b-»ﬂ *""“"' 7808Ü66-0 72 På samma sätt som ovan erhölls följande föreningar: 7ß-[D-G>(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ß~(S)~ -acetoxibutanamido]-7G>metoxi-3-[S-(1-metyl-1,2,3,4~tetra- zoly1)tiometyI]-LP-cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 136-1420 (sönderdelning).

M i _ . . ~ f--ffr - m-värﬁﬁ-ﬂ nns (CD ecco : cc s.cu - L _ 1 urvra~Kﬁ ~ V°+~“)fp 1,@5 _ 1.35 (sa, m, ca, x 2), 2.01 (3H, C S, CHB), S: am), 9.115 (lH, d, 131412- Exemgel 18.

I 10 ml 80 %-ig vattenhaltig tetrahydrofuran suspenderades 0,58 g 7,-(D-&-amino-p-(S)~hydroxibutanamid§)-7G>metoxi-3- -[5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometylf~¿.-cefem-4-karboxjl- syra, varefter trietylamin sattes till suspensionen för att justera dess pH till 7,0 till 7,5. Till den erhållna lös- ningen sattes O,48 g av en blandning av 4-etyl-2,3-dioxo-l~ -piperazinkarbonylklorid och trietylaminhydroklorid (58 %, beräknat på vikten 4-etyl-2,3~dioxo-l-piperazinkarbonylklorid ingick däri) vid 3 till 50 under tillsats av trietylamin för att justera pH till 7,0-7,5. Vid samma temperatur fick blandningen reagera i l timma varefter dess pH justerades till 5,5 med 6 N saltsyra. Reaktionsblandningen destillerades under reducerat tryck för att avlägsna lösningsmedlet och 4 ml 20 %-ig vattenfri aceton sattes till återstoden för att upplösa denna varefter lösningens pH justerades till 1,5 med 6 N saltsyra vid 3-50. Lösningen omrördes därefter i 5 timmar och de så utfällda kristallserna samlades genom filtrering och gav 0,54 g (utbyte 65,1 %) lß-[D-d%(4-ety1~ -2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-Fr(S)-hydroxibutanamido - -7K-metoxi-3-[5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-ﬂ§- -cefem-4-karboxylsyradihydrat med smältpunkt 173-1750 (sönderdelning). 7808066-0 73 :R (mer) mfl; Q 1775, 171o, 1657, 1seo c==o NMR-spektrum för produkten var identisk med den för produkten i exempel l.

.IÉPQÉIÉQUÅTH-*ïfš 7808066-0 74 .vﬁmuxmn owcmuumﬂmxmmcﬁämmoﬂmuuo. w.. mn om mn 9.. and.. E: en nr. om o: mw øswn :ÅA eva mi.. .mﬂäwoumﬁ .mlunu . _ åüﬂhüuš Nmsnßßmﬂßlmﬂﬁﬂhwnmmüﬂßwßn., DB G =~ D mn 0 => 0 en ﬂ mn Q =~.° =ﬁ.° :>.e =~.¶ =>.= ~.° sm nn n~ wﬁ zu wdummﬂmm .nn . . , .uﬂmﬁﬁn mucdﬁwﬂmlwmcﬂﬁaäuﬂ. u. ._ H =~ ß => 0 ”_ ~ nﬁ q um.H un d MH H um.ﬂ n~.~ nﬂ.n @n.ﬂ =@ om m ßﬁ <1» @-=mammmm .mm . . .fäuwñxdﬁ mmxäudmﬁmlmmﬁﬂﬂﬂuﬂcmm. m~.w nN.~ PH.. .ﬂ.ﬂ ﬂ.=« wm.H un.ﬁ ~.° ßn.@ m~.@ =~.° ﬁﬁ.ﬂ ﬁå @=ﬂ n ~,;_ .Hou .u å. . i _ II I» | I; _ |. f.. _ m.~d mﬁ.U m~.@ m.- m~ m,~H n.~_ m.~H m~ m.~ﬁ “N m.n« ﬂﬂ UN C w-< w=u«-uß0u-u .inc -.~ wm.H °m.H n~.n m.~H wm.~ uÜ.~ m~.u m~.w m~.@ °w.H @m.~ m~.u °°~ Qcﬂ ~|= mmﬂﬂuwmw .wa n~.w =>.° =>.= nH.n -.n =~.= =ﬁ.= nd." ~..~ ﬂH.n @n.ﬂ um.. .~H.~ um.. @m.H ﬂHA-a nqHmﬂm~_E .www =>.= ~.= n.= ß.° =n.= =_.° =>.° ß.= ~.° ~.° ,ﬂ.~ =~.@ =~.° m.~. =~.= °~°=HH w=@unuu.m§ .www vﬂ.° m~.° ß~.° @ﬁ.° =~.° wn.ﬁ um.¿ =~.° ß~.° =~.= mmH_o än .~.= n».° °ﬂ.° Om-» ~nM=°E=~=m .Än ..°w H.=w ~.°w ~.=w ~.°w ﬂ.°w ﬁ.°w H.=w ﬂ.°w «.=w H.°W ﬂ.=w ~.=w m~.° ~.°v »=~z qﬂou .m _ .Soﬂcﬁ .Suäcox ﬂouucﬂ ll wﬁämßvﬁmm ~°=<~|@ ﬁuwﬁlß @u°H|a =muH=a H=--§ m=w«f« =@@H-a A@ _. :mæwmwﬁ "uwnmuW då »a f P u.. n ømšäﬂwfwuäm Aﬂæcwﬂßnmv mnﬁcaﬂmmmø wﬂcnmmﬁﬂmu nømcﬂcxwmcmuømumm mxmcw>m ﬂmﬂﬂmﬁ umwu møcmnmw A unommmuwxmmumm mw :oo >|æmm mow ß .wxmmm mom ß Emm >m cmumuﬂßmwm M W 7808066-0 75 E... uwuxmš E: ...ä ä. ...ä 2 S... 3 E... ...än sh E. m.. E. E: 2 wvëäm.m..w«...z.uﬁmmo.mwwu. .la |W_l-l.ll-. . l lll... -.-i lzﬁ www. zU Mﬁvcnwuu ...ÜU AwCUUJWñ .e E... S... Sá .._.._,._ å.. E... ä.. i... ä... å... S... m4. wﬂñﬁmﬁmäšïﬁgvww. . _. -lf ...l ll. ll.- | .ll i |l. q Täwmuxmﬁ .o å... ..._ E... ...mv N... fr... å... å... ...á ...i ...ä N... å.. 3 mïmﬁwïlmnnﬂïwmﬁwm. m TV5 ﬁou .m ...:.. lllll l. lvll lill llll.. lllll, ll lill :ll l || . l ll. .f ä... E; E... S.. 2 n... __... ä... S.. S.. å... S... 2. .à wïfaæ... .ä lll l - M l l l l ...i f... 34 2; ..._ m... S.. ...ü _ ......... 2.. ...S S... å... S... m.. S 2.. 37.. 32.10.. .S ...vw ...ä ...ä E... å... En.. E... E... S. 2... å... E... ...á N.. ä.. S... ...mv 5.; .ü ll: Ei., vol... l l å... ...W E... m... w... ä.. 2... ä.. N... å... ä.. 2.... 10.... ...W E... E... E... .š E. æöumwuä... .äm lll ll lll l 2.. ...n Sá nä... 3... .s E... 3 mﬁw m... 2 2 ä... WN. ä mr... m... R-.. lﬁaulmwväw... .www . ~... ...w N... m... ä.. ~... ä.. 2.. ...vw w... å... ä... ~... N... E... E... ä... å-.. 31.02,2... å.

Hänëâ w«HUHm@ ...S75 ...ZIP N37... 32-... 32-... SSL» SSL... 33-? ...åxå 22-... .SSLF 25-... Sïfﬁ Såå 32-... âﬂå .S313 w msﬂcmußm _ AdåmQE ...mfnpwv .ﬁE\u.m.ﬁﬂ0O ng .ﬂm=mew.~m.æu. .mmm Now N won sno wlæmm mom w .mTNmm mom ß cmxßmzmvnmumm mxmawïm sno .mﬂﬂﬁnﬂwmmø mønmmmﬂamnæm vmﬂﬂcw mﬂummcﬂamnwu nmﬂﬂwš umwu wøcmumwšmﬁ cmﬂﬂmš ﬂwuøvﬂswwm N uuommmumxwmumm P OCR QUALITY 7808066-Û 76 T-l55l o \\ I / \ *(0) s CZHSN N-coNH-CHCONH r Iï-iï *J ;:%_/ w§+ÄWN O | cooH C113 OH Tl554 o Å 0 *(5) CZHSN N-coNH- ca coNH (S j, \-/ ﬁN / CH2ococH3 O Q O c coon 0 M T-1555 o \\ ” *(11) c2H5N N~coNH-cHcoNH ffs H___H \__/ I . §| r N // Cnzsïs/I o ° - cooH OH Föreningar enligt föreliggande uppfinning.

T-1414 o o \ çcn \ 0 *(D) t 3 c H N N-coNH-cHcoNH S N--N 2 5 u 5 __ 0 ëﬁñ COOH 1-0 p- 7808066-Û 77 T-1461 f-\ *m z s C H N N-coNH-CHCONH 2 5 \ f /1 I/ _ 3\É¶ N ,/ LH2COCH3 o ¶ “ cooH T~16sß o M *H3 C H N-coNH-CHCONH ' I/S H=-N 2 §\ / /J ik 2 N / CH2S :YST _ 0 ' "* coon CH2Cq“”* CH3 T-1689 OQ ao QCH3 ,r-\ *(D) ', s c H N N-comn-CHCONH H--N 2 5 \ f L.- x! ,/~ N // CH 5'\\¶«H S o 2 ? T-1701 Ow ao QCH3 *(D) ', / \ s _ c2H5N N-coNH-cHcoNH N--R ' || ““ N/'aaæåwﬂ | _ O ”J " CH CH NH COOH 2 2 2 !__ “_ .N .~, fm :V ;'{“Y z: a» f: ~..; w -wí 7808066-0 78 T-1658 o o ¶ \>_\” *m WH; C H N-coNH-cﬂcomn -' S y-*' 2 53 1 J f i å* _ N X cHzsdLçq-/EI .S _ o 7 COCH CHZCONHOH T-1659 c H N N~coNH-CHCONH ' S y;__H 2 I í Il _' /p-'N / CH2S q-/N S o T ' cooH CH2CooH T-1661 0% ao Qcﬂz *m -, ' S CZHSN N-coNH-cHcoNH - $__.¥ S v 0 f' coon CH2CH2N (C213) 2 T-1487 o o § 0 ÉCH3 c2H5N N-coNH-CHCONH Å-- S ﬁ=-N g M Q -~ --N / CH s-LÅ-x coon CE* 2 7898066-Ü 79 T~14s8 0 O cﬂ w 4 *(D) Q 3 c2H5N N-coNH:fHcoNH S*~ ¥--y 1 N / CH2S~i\ .fn _S __ O y-Ä ll” 'U 'f- T-1482 0 °>~< *m3 I S \ _: *_ CZHSN N-CONH-CHCONH f' f § \--/ S/lﬁ- N / cnzsﬂ WN . _ I Û ' _ m" coon CHBCOHH2 T-1462 Û Ü CH w 4 *(D) 3 3 q _w* C H N N-CONH-CHCONH “ N>-N 2 5 \ , , , ,l"¶ N .// CH s-i\ /L S 0 2 ,S coon f: 7808066-0 80 Tl-l029 ' * (D) I' 53 1\ rr czusN N-cïonrf-CHCONLI -~---~~ .II - oi. \___/ I IA '_ í' H S x /ïl cH2o1-I 0/ N / 2 *ñï l cooH T-1818 O* ”O ___-QCH3 *(D) ', S CZH5N N-CoNHfçHcoNH - -II | I :z -- CH s _ JT cnzcl 6/ N / 2 ä? coon ~ Tl-lozs o o* 0 * ocH3 f-\ (D) ', S C H N N-coNH-cﬂcoßïn -ír N-II f-N / cnzsÅïvm (s)* cHcH3 O ~¿- - ' os.

OH COOH ;_ T ~1o41 o o l \\ /r Qcna *(D) '. S c4H9N N-coNH-clzßconﬁ -íf CH Sí- (s)* OH COOH J 7808066-0 81 QCH3 /*'\ *(D) 1 c H N-coNH-cnconu \__/ C; 1 f , .

N ,/ cL2ococn3 (s)* ?HcH3 O OH COOH T~l559 O\\ /10 Qcﬂg r-x *un -_ Q f c2H,N N~coNH-CHCONH I/~ N__1; 3 \__./ l ik :I N / CHÛS WN @ O H CÛOH _ .J T-'l7llj *(D) i 3 CZHSN N-CONH-CHCONH .Ü *" \"_/ l N / CH?S N .N Û ° * COOH 011,, ') T-l7l9 O\\ /IO QCH3 /_\ *(1111) -, S c H N N-coNH-CHCONH ____. 2 5 \__/ I ;I::]' CH Ü ï ¶ O N / zu' I coon 01” 19 _.- .........-...~._._._..._ . _ PooR QUI>L1TY+ 78Û8Û66-0 82 T-l753 O\\ #0 QCH3 / \ *(DL) “, S .

CZHSN N-coNH-cﬁcoßïn 1: __ 1; \ / |l }'^ N / CHzS-Jl, _,N s 0 h; / COOH 51-1" HZN 9 T~l770 o* ”o HD) qïcu3 czﬂsr: Næomï-CHCONH ° ~- \_-/ | CH s¶. nu N / '2 N .m3 O í Coor: 011,, 'J Tl-l062 _ O\\ ”O QCH3 f_\ *(13) ï 5 C H N N-CONH-CHCONH :IL-__ 11' 2 5 \ , I H H I OH O H i C O CHZCHZOL Tl-l063 O O \ 0, QCH \ Hm -, 3 ' * S C H N N-CONH-CHCONH IT_IT 2 5 \_/ 1 =| n N / c212s-\S,~- (S) *ICHCH3 O OH (Joon 7808066-Ü 83 Tl-1052 o o \\ /r “rk-ﬂß FW *W 1 CZHSN N-coNH-cHcoNH *' N _ H \__/ I ___” / CH S, H "_ (RWCHCH 1' "z -N--N on 3 0 f coon Om T..-11.15 .L o 0 ocﬂ 3 \\ a * (D) _' C; CZHS N-coNH-cHcoNH LJ I CH s-- A .N (swoﬂocnoo N / 2 9 T l-1o53 o* ”o *m ocn3 c H N N-coNn-CHCONH ' (S ïï-ïï 2 5 \ 1 | l\ " (s)*cHocH N “/ CH2S_\\ï“N 1 30 ' coon - CH3 QHB 11.1-1982 O O \\ a QCH: r-\ * CZHSN N-coNH-ca coNH 37- 3: \-/ ' N // PH s" ü (s)*cHcH3 O ' 2 '““ﬂ* | | on coon CH 3

Claims

78080661-0 1 84 PÄEHHERNV l. If-metoxicefalosporin eller ett salt därav, k ä n n e - t e c k n a t därav, att det har den allmänna formeln oo en \\ø (f3 f"\ - s A-N N-coNH-cH-CONH 2 \__j g N / cﬂza O COORl vari Rl betecknar en väteatom eller en difenylmetylgrupp; R2 betecknar en Cl_l0-acyloxigrupp, en pyridazinyltiogrupp, som är substituerad med en hydroxylgrupp, en tiadiazolyltio- grupp, som kan vara substituerad med en Cl_5-alkylgrupp, en triazolyltiogrupp eller en tetrazolyltiogrupp, som kan vara substituerad med en Cl_5-alkyl-, karbonyl-Cl_5-alkyl-, karbamoyl-Cl_5-alkyl-, hydroxi-Cl_5~alkyl-, C2_5-alkenyl-, hydroxiimino-Cl_5-alkyl-, Cl_l0-acyl-Cl_5-alkyl-, N-hydroxi- karbamoyl-Cl_5-alkyl-, di-Cl_5-alkylamino-Cl_5-alkyl- eller amino-Cl_5-alkylgrupp; A betecknar väte eller en Cl_l4-alkyl- grupp; och B betecknar en tiazolylgrupp, som är substituerad med en amino- eller trikloretoxikarbonylaminogrupp, en tienyl- grupp, en furylgrupp, en cyklohexadienylgrupp, eller en Cl_4-alkylgrupp, som kan vara substituerad med en halogenatom eller en Cl¿5-alkoxi-, hydroxyl- eller Cl_l0-acyloxigrupp. 2. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av Iß-/D(-)-W-(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinka:boxamido)-N-(2-tíenyl)-acetamido/-7GPmetoxi-3-/5-

(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl/-¿§3fcefem-4-karboxylrI syra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 7808066-0 85 3. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av vß-/n(-)-o<-(2,3-aiox@-1-piperaz1n- karboxamido)«X-(2-tienyl)-acetamido/-WW-metoxi~3-/5-(l-metyl- 1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl/-.A3-cefem~4-karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 4. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av lå-/DL-då(4-etyl-2,3-dioxo-l-pipera- zinkarboxamido)-propionamido/-7K~metoxi-3-/5-(l-metyl- l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl/-¿>3-cefem-4-karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 5. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av ¶ß-/D(-)«N-(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)~ür(2-tienyl)-acetamido/-7K-metoxi-3-
/S-(1-karbamoylmetyl-1,2,3,4~tetrazolyl)tiometyll-¿Ä3-cefem- 4-karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav.i 6. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av Zß-/D(-)-K-(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)-«-(2~tienyl)~acetamido/-7K-metoxi-3- /s- (1- (z-nydroxietyi) -1,2 , 3,4-tetrazo1y1>tiomety1/- A3-cefem- 4-karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 7. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av Zß-/D4X-(4-etyl-2,3-dioxo-l-pipera- zinkarboxamido)-M-(2-furyl)-acetamido/-¶K-metoxi-3-15-(l- metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyll-¿S3-cefem-4~karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 8. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av Zß-/D-M-(2~amino-4-tiazolyl)-d-(4- etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-acetamido/-7M-metoxi- 3-/5- (i-metyl-Lz , 3 ﬁßtetrazoiyi) tiemetyu- A3-cefem-4- karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 9. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d , ef., -ﬂï " 1"” y-/scﬂfﬁfï f”. ' ' - ' -. .~,:|--1,*..* .ti ,,._,.,- _ 7808066-0 86 därav, att den utgöres av Iß-/D(-)«M-(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)-K-(1,4-cyklohexadienyl)-acetamido/-¶%- metoxi-3-/5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl/-¿L3-cefem- 4-karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 10. Ett 70kmetoxicefalosporin eller ett farmaceutiskt god- tagbart salt därav enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k - n a t därav, att A är en etylgrupp, B är en 2-tienylgrupp och R2 är en 5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiogrupp. ll. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av 1ß1D4X-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamiao) -ß- (s) -hyarøxibutanamiacv-va-metoxi-3- /s- (1- metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyll-:A3-cefem-4-karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 12. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av ¶ÅL/D-Mr(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)1Û-(S)-formyloxibutanamido/-¶M-metoxi-
3-/5-(l-metyl-l,2,3,
4-tetrazolyl)tiometyl/-¿Ä3-cefem-4- karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. 13. Förening enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av Zß-/D1M-(4-etyl-2,3~dioxo-l- piperazinkarboxamido)1ß-(S)-metoxibutanamido/-¶K-metoxi-3- /
5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl/-¿Ä3-cefem-4- karboxylsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav.