SE437931B - Lekemedelspreparat med antitumorverkan innehallande fosfat av polyhexametylenguanidin med angiven formel - Google Patents

Description

8400453-0 en verksam substans och ett farmaceutiskt utspädningsmedel och utmärker sig av att det såsom verksam substans innehåller fos- fat av polyhexametylenguanidin med följande formel R - (CH fun - c - NH - (CH2)6~} n R' ) 2 6 |l NH där n = 2 till 5, R betecknar -NH2 eller NH2 - C - NH - , NH och R' betecknar ~NH2 eller HN2 - C - NH - .

NH Det enligt föreliggande uppfinning föreslagna läkemedels- preparatet kan tillhandahållas i olika läkemedelsformer (exempel- vis injektionslösningar, salvor och suppositorier). Läkemedels- preparatet användes företrädesvis i form av injektionslösningar, som innehåller 1,5 viktprocent verksam substans. Såsom farma- ceutiskt lösningsmedel innehåller preparatet enligt uppfinningen företrädesvis destillerat vatten eller en fysiologisk lösning.

Det enligt föreliggande uppfinning föreslagna preparatet är avsett för behandling av onkologiska sjukdomar i tarm- och magkanalen samt mjölkkörteln, och det verkar på tumörformer resis- tenta mot de kända preparaten av detta slag. Preparatet uppvisar kontaktmässig inverkan på kancerceller och kan användas för di- rekt behandling av såret efter avslutad operation av tumören.

Det enligt föreliggande uppfinning föreslagna läkemedels- preparatets anti-tumöraktivitet har undersökts på sex testsystem: lymfoid leukemi L-1210, Wakers karcinosarkom, adenokarcinom 755, sarkom 37, Louis' lungkarcinom, melanom B16. Lymfatisk (lymfoid) leukemi L- 1210 implanterades intraabdominalt i möss BDF av båda könen, varvid man implanterade 106celler per mus. Adenokarcinom 755 och melanom B16 ympades i honmöss BDF1 genom införande av 50 mg av en tumörsuspension per mus. Sarkom 37 implanterades intra- abdominalt i vita raslösa möss av båda könen genom implantering av 106 celler per mus. Louis-lungkarcinom ympades i möss BDF1 subkutant genom injicering av 50 mg av en tumörsuspension per mus.

Wakers karcinosarkom ympades subkutant i vita raslösa råttor av båda könen genom införande av 100 mg av en tumörsuspension per råtta. Preparatet infördes först 24 timmar efter implanteringen 8400453-0 av tumören eller leukosen ifråga. Föreningen löstes i destille- rat vatten extempore och infördes intraabdominalt eller intra- venöst en gång per dygn. Undersökningsresultaten för antitumör- effekten framgår av nedanstående tabell 1.

Tabell 1 Stam av tumör Engångsdos, Injicerings- Livslängds- Adminístreríngs- ng/kg dagar ökning eller injice- % ringssätt Lymfatisk leukemi 24,9 1 175 Intraabdominalt L - 1210 4,2 1,2,3,4,7 125 " Sarkom 37 3,2 1 85 “ Sarkom 37 1,8 1,2,3,4,7 48 " Sarkom 37 2 1,5,9 40 Intravenöst Stam av tumör Engångsdos, Injicerings- Procentuell Injiceringssätt ng/kg dagar hämning av tmmkens tillväxt Mhkers kar- cinosarkom 2,3 1,2,3,4,7 55 Intraabdominalt Adenokarcinmnx 1,2,3,4,7 68 “ Adenokarcinan 5 1,5,9 55 Intravenöst Melanom B16 3,4,5,6,7 53 Intrtufixlïninalt Louis' lung- karcinom 5 1,5,9 20 Intravenöst Det enligt föreliggande uppfinning föreslagna preparatets anti-tumöregenskaper har undersökts på modeller av subrenala iterotransplantat av människotumörer. Man har därvid använt följan- de kliniska material: mjölkkörtelskancer - 4 provföremal; mag- kancer - 2 provföremål; ändtarmskancer - 2 provföremål; lung- kancer - 2 provföremål, av vilka ett mikrofragment av 10 transplanterats under en njurkapsel hos möss BDF1. Preparatet in- 3 celler fördes på det andra, fjärde och sjätte dygnet efter transplante- ringvn av tumören i un engångsdos av 12 mg/kg.

Vid mjölkkörtel-, mag- och ändtarmkancer hämmades tumö- rernas tillväxt till 50-100% i tre fall av fyra, två fall av två respektive två fall av två. 8400453-0 Vid lungkancer hämmades tumörens tillväxt obetydligt.

Man har dessutom undersökt har tumörceller, som uttagits under operationen från 22 av lungkancer lidande patienter, är känsliga för preparatet enligt uppfinningen.

Efter inkubering av en suspension av tumörceller i när- varo av det enligt uppfinningen föreslagna preparatet i en dos, som motsvarar en för klinisk behandling rekommenderad engångsdos av 5 mg/kg, har man medelst en vätskescintillationsräknare och genom införande av märkt tymidin och urídin bestämt rubbningsgra- den för DNA- och RNA - syntesen i tumörceller jämfört med referen- sen.

Tumörcellernas känslighet i beroende av tumörens histo- logiska uppbyggnad visas i tabell 2.

Tabell 2 Histologisk form Totalt antal Antal för pre- Antal för pre- av kancer undersökta paratet känsliga paratet okänsliga provföremål provföremål provföremål Kancer med plana celler 14 9 Adenokarcinom 6 1 Svagt differentie- rad kancer 2 2 - Man undersökte det enligt uppfinningen föreslagna prepa- ratets totala toxicitet. Preparatets letala medeldos LD50 för möss är 70 mg/kg kroppsvikt.

Resultaten av det enligt föreliggande uppfinning före- slagna preparatets biokemiska inverkan på hybridmöss med ascitisk form av lymfoleukos L-5178y och lymfoleukos L - 1210 har visat, att en intraabdominal engångsinjektion av en terapeutisk dos (5 mg/kg) undertrycker DNA-, RNA- och äggvitebiosyntesen i tumör- celler i högre grad än i normala vävnadsceller hos lever, mjälte och tunntarmens Slêmhinna- Vid försök "in vitro" har man även kungat konstâtera, och 10 avsevärt (till 60% jämfört med referensen) hämmar DNA-, RNA- och att preparatet i koncentrationer av mellan 10- mol äggvitebiosyntesen i celler av Ehrlichs adenokarcinom och lymfo- leukos L - 1210, vilket visar sig genom rubbning i överföringen 8400453-0 av radioaktiva s.k. syntesföregàngare för makromolekyler till tumörcellerna.

Undersökningen av läkemedelspreparatets inverkan på celler av lymfoleukos L-5178 y har visat, att preparatet i en koncentration av 25 och 50 g/ml medverkar till att minska den negativa laddningen hos tumörcellers plasmamembran. Om prepara- tet användes i en koncentration av 75-500 g/kg, bidrar det till att omladda membranytorna.

I denna koncentration undantränges dessutom K+- och Na+-joner från cellen till en s.k. icke-cellvätska.

Nämnda undersökningar har visat, att det föreslagna anti- tumörpreparatets verkningsmekanism beror på att preparatet in- verkar på kancercellens membran.

Läkemedelsprepraratet enligt föreliggande uppfinning med- verkar till att reducera den negativa laddningen hos cellens plas- mamembran och alltså till att rubba överföringen av biosyntesföre- gångarna för makromolekyler till tumörcellen, under det att meka- nismen av de kända preparatens anti-tumörverkan beror pà att dessa kända preparat inverkar på DNA (dessa kända preparat utgöres antingen av analoger till substrat eller förenas med huvudkärnor i DNA och ändrar alltså dess symmetri).

Genom att det enligt föreliggande uppfinning föreslagna preparatet är verksamt enligt nämnda mekanism verkar det på tumör- former resistenta mot de kända preparaten av detta slag. Jämfört med de kända preparaten inverkar det kontaktmässigt på kancer- cellen, varvid preparatet enligt uppfinningen kan användas för direkt behandling av såret efter avslutad operation av tumören.

Preparatet enligt uppfinningen är avsett för intravenöst och intramuskulärt införande samt för behandling av operationssår.

Det kan tillhandahållas i form av lösningar, ínjektionslösningar, suppositoríer och salvor.

Såsom lösningsmedel eller salvbas kan man använda ett valfritt, farmaceutiskt lämpligt lösningsmedel respektive en val- fri, lämplig salvbas. Preparatet administreras företrädesvis i form av injektionslösningar som innehåller 1,5 viktprocent verk- sam substans. Lösningsmedlet utgöres företrädesvis av destillerat vatten eller en fysiologisk lösning. Det enligt uppfinningen föreslagna preparatets dygnsdos och totala behandlingsdos är 8400453-0 150 mg respektive 1500 mg.

Preparatet enligt uppfinningen framställes genom kända förfaranden.

Det föreslagna preparatets verksamma substans, dvs poly- hexametylenguanidinfosfatet, framställes på följande sätt.

Ekvimolära mängder av hexametylenguanidin och guanidin- hydroklorid polymeriseras vid en temperatur av 160-170°C under en tid av 23 timmar. Härigenom bildas polyhexametylenguanidin- hydroklorid i form av viskös massa, som hårdnar efter kylning.

Polyhexametylenguanidinhydrokloriden löses i etylalkohol, varefter den erhållna lösningen försättes med en alkohollösning av natrium- etylat i ett inbördes blandningsförhållande mellan polyhexametylen- guanidinhydroklorid och natriumetylat av 1:5. Den utfällda åter- stoden av natriumklorid frånfiltreras, varefter man till filtratet sätter fosforsyra i ett inbördes blandningsförhållande av 1:5.

Den utfällda vitfärgade återstoden av polyhexametylen- guanidinfosfat fränfiltreras, tvättas med eter och vakuumtorkas.

Produkten renas genom förnyad utfällning. Den tekniska produkten suspenderas i etanol, varefter man till den erhållna suspensionen droppvis sätter koncentrerad vattenhaltig ammoniak tills fäll- ningen lösts fullständigt. Lösningen filtreras, och slutprodukten utfälles på nytt genom surgörning medelst fosforsyra till ett pH- värde av 2. Slutprodukten frånfiltreras, tvättas med eter på filt- ret och vakuumtorkas. Utbytet av slutprodukten är 71,6% (räknat på polyhexametylenguanidinhydrokloridens vikt).

Det framställda polyhexametylenguanidinfosfatet utgöres av ett fast, finkristallint, vitfärgat och luktfritt ämne med en medelmolekylvikt av 1070-1130. Ämnet löses väl i vatten men löses icke i organiska lösningsmedel, och det är stabilt vid lagring och frystorkning av vattenlösningar därav.

Det enligt föreliggande uppfinning föreslagna preparatet är avsett för behandling av onkologiska sjukdomar i tarm-magkanalen och mjölkkörteln samt för behandling av sår efter radikaloperation av tumören. Eftersom preparatet enligt uppfinningen uppvisar en annan verkningsmekanism än de kända preparaten av detta slag, kan det användas för behandling av resistenta former av tumörer.

Claims (3)

8400453~0 Patentkrav

1. Läkemedelspreparat med antitumörverkan innehållande en verksam substans och ett farmaceutiskt utspädningsmedel. k ä n n e t e c k n a t a v att det såsom verksam substans innehåller fosfat av polyhexametylenguanidin med följande formel: R - (cn2)6 +NH ~ c ~ NH - (cH2)6&¿ R' NH där n är 2 till 5, R betecknar -NH2 eller NH2 ~ C - NH - , NH och R' betecknar -NH2 eller NH2 ~ C - NH - NH

2. Läkemedelspreparat enligt patentkravet 1 i form av in- jektionslösning, k ä n n e t e c k n a t a v att det innehåller 1,5 viktprocent verksam substans.

3. Preparat enligt patentkravet 1 eller 2, k ä n n e - t e c k n a t a v att det såsom farmaceutiskt utspädningsmedel innehåller ett lösningsmedel i form av destillerat vatten eller en fysiologisk lösning.