SE423933B - Testremsa med mikrokapslar inneslutet reagens jemte forfarande for dess framstellning - Google Patents
Testremsa med mikrokapslar inneslutet reagens jemte forfarande for dess framstellningInfo
- Publication number
- SE423933B SE423933B SE8000353A SE8000353A SE423933B SE 423933 B SE423933 B SE 423933B SE 8000353 A SE8000353 A SE 8000353A SE 8000353 A SE8000353 A SE 8000353A SE 423933 B SE423933 B SE 423933B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- reagents
- solution
- water
- droplets
- polymer
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/521—Single-layer analytical elements
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
- Y10T436/144444—Glucose
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Description
l0
l5
40
soooscss-e 2
reagensen ofta innehåller föroreningar, vilka kan interferera med färgutvecklingen
och vidare är dess provtagningskapacitet för den lösning som skall analyseras
inte riktigt konstant från försök till försök på grund av oundvikliga olikheter i
de fiberaktiga material,som användes för framställningen av remsorna; metoden är
således enbart kvalitativ. En annan nackdel är att inkapslingen utföres med hjälp
av ett kolloidalt ämne som t.ex. gelatin, gummi arabicum eller karboxi-vinylpoly-
merer, som producerar mycket sköra, tunnväggiga kapslar med tvivelaktig mekanisk
och lagringsstabilitet. Ytterligare en nackdel är att färgen utvecklas inuti själva
det vattenabsorberande materialet, vilket ofta är opakt och inte homogent, varvid
tillkommer ytterligare felkällor vid utvärderingen av färgen.
US patentskriften 3.926.732 anger användningen av testremsor för färgbestäm-
ning av katalas i mjölk. Metoden är baserad på den katalasberoende inhiberingen av
den färgreaktion som uppstår vid oxidationen av ett leuko-färgämne (o-tolidin) av
väteperoxid i närvaro av peroxidas. I ett utförande av nämnda referens, innefattar
remsorna ett inert, fast, absorptions- och diffusionsmedel, i vilket är inbäddat
fysikaliskt separerade, fristående mikrokapslar. Mikrokapslarna är av den "semi-
permeabla vattenhaltiga" typen (se Can. J. Physiol. Pharmacol. 44 (1966), ll5)
och medlet utgöres av cellulosafibrer. När remsan doppas i den lösning som skall
analyseras, kommer den väteperoxid som alstras av reagensen i en första typ av
mikrokapslar att vandra genom medlet, varvid den delvis kommer att inhiberas i
proportion till den mängd katalas som skall analyseras och slutligen reagera med den
färg som diffunderat ut frân mikrokapslar av en andra typ. Färgen kommer då att ut-
vecklas inom diffusionsmedlet med påföljande nackdelar såsom nämnts ovan. Även vid
denna metod är det mycket svårt att hålla remsans provtagningskapacitet per ytenhet
konstant och metoden är inte exakt. En ytterligare nackdel med att använda remsor
innefattandelager av fiberhaltiga, absorberande medel är det faktum att sådana medel
har en kraftigt öppnad struktur, vilken inte tillräckligt filtrerar bort oönskade
färgade ämnen, vilka kan vara närvarande i vätskan som skall analyseras och vilka
kan interferera med den önskade färgreaktionen. Detta har delvis avhjälpts genom
användningen av remsor omfattande ett lager av medel med en låg porositet, i vilket
reagenset är dispergerade eller upplösta. Sådana typer av remsor anges t.ex. i den
amerikanska patentskriften US 3.630.957, men de har den nackdelen att de inte äger
någon oedelbar provtagningskapacitet för den vätska som skall analyseras. Utan då
sådana remsor doppas ned i nämnda vätska, kommer denna vätska sakta att penetrera
in i porerna av medlet (inom området av 0,1 - lvLm) och de föreningar som skall
analyseras diffunderar mot reagensen, utelämnande de tänkbara, interfererande ämnena.
Men denna process tar många minuter eller mera och det är inte möjligt att exakt
säga vid vilken tid processen är verkligen effektiv och när färgen är tillräckligt
utvecklad. Därför är testet långsamt och enbart kvalitativt. Vissa av ovan nända
olägenheter kan undanröjas genom att en droppe av den vätska som skall analyseras
placeras på remsan. Men även detta är en långsam process och det finns inga garanti-
40
8000353-6
er för att droppen alltid absorberas av en viss given yta av remsan; således är
även detta test enbart kvalitativt.
Ovan nämnda nackdelar har delvis undanröjts genom användningen av de remsor
som anges i det franska patentet nr 2.303.290. Dessa remsor omfattar som diffusions-
medel en syntetisk polymer, vilken erhållits enligt fällningstekniken med fasinver-
sion. Enligt denna teknik, tillredes en lösning av polymer i en blandning av två
lösningsmedel, där det ena lösningsmedlet är ett svagare lösningsmedel för denna
polymer och mindre flyktig än det andra. Då den erhållna lösningen låtes torka,
uppnås en punkt då det starka lösningsmedlet har avdunstat tillräckligt för att
polymeren sakta skall kunna falla ut, vilket efter avslutad torkning resulterar i
en öppen, porös, gelformig, vattenabsorberande struktur som påminner om cellulosa-
fibrer och har gynnsamma provtagningsegenskaper för den vätska som skall analyseras.
De reagens som är nödvändiga för att utveckla den analytiska färgreaktionen hos
remsorna kan införlivas i den ursprungliga polymerlösningen antingen genom impreg-
nering eller genom upplösning. Detta är fördelaktigt då, i det fall då man har tvâ
inbördes oförenliga reagens, kan den ena placeras inuti själva polymerstommen medan
den andra sugas in i den öppna, porösa strukturen, varvid kontakt mellan dessa nämnda
reagens i torkat tillstånd under lagring minimeras. Dessa remsor har många fördelar
men den inre strukturen och porositeten av matrisen är starkt beroende av berednings-
förhållandena och reproducerbarheten av detaljerna är svår att bibehålla från sats
till sats. Dessutom kan detta materialet, på grund av dess ganska fiberaktiga natur,
införa differentiella diffusionseffekter i lösningen vilken skall analyseras; en käl-
la av effekter, vilka kan vara oförenliga med färgframkallningen. Vidare utveck-
las färgen inuti hela kroppen av absorberande medel, vilket kan, på grund av ljus-
difiraktionsproblem relaterade till dess struktur, i vissa fall begränsa känsligheten.
US-patentskriften 3.993.451 anger testremsor varav ett utförande omfattar en
remsa av hydrofilt papper, vilket på ena sidan är klätt med ett enhetligt lager av
en homogen blandning av tvâ typer av partiklar. Dessa partiklar utgöres av agglomerat
av hydrofila adsorberande material, som t.ex. pulverformig cellulosa, aluminiumoxid,
kiselgel, m.m. och är impregnerade med reagenslösningarna och därefter torkade.
Den ena typen av partiklar innehåller ett första reagens och den andra typen av par-
tiklar innehåller ett andra reagens, där de två reagensen icke är förenliga med var-
andra och därför lagras skilda från varandra. När dessa remsor doppas i den lösning
smiskall analyseras, uppsamlas en del av nämnda lösning av de absorberande materialen
och reagensen komnær i kontakt ned det ämne som skall fästas. varvid färgreaktionen
erhålles. Detta färgtest är således mycket snabbt men själva uppsamlingen är ganska
oregelbunden på grund av den pulveraktiga naturen av det absorberande materialet och
den okontrollerade storleken av agglomeraten, innehållande reagensen.
Ett ändamål med föreliggande uppfinning är att så långt som möjligt undanröja
ovan diskuterade nackdelar. Kortfattat skulle en ideal testremsa uppfylla följande
40
3ÛÜ0353-6
krav och inneha följande egenskaper:
a) Exakt uppsamla en given mängd av den lösning som skall analyseras per yt-
enhet av remsan.
b) Uppnå en sådan uppsamling omedelbart under loppet av en enda åtgärd: ned-
doppning och borttagning.
c) Tillåta nära kontakt mellan ämnena som skall analyseras och reagensen,
samt filtrera bort oönskade beståndsdelari lösningen, vilka kan interferera med den
önskade analytiska reaktionen.
d) Medföra en snabb och reproducerbar färgutveckling med god känslighet och
god mätbarhet (visuell) eller spektrofotometrisk).
e) Medföra god separation under lagring av reagensen, då de är inbördes oför-
enliga.
f) Vara lämplig för reagens av olika förenlighet, t.ex vattenlösliga reagens
och fettlösliga reagens.
g) Så mycket som möjligt undvika s,k "inerta" medel, vilka kan maskera eller
_ interferera med färgreaktionen.
h) Erbjuda enkla och ekonomiska tillverkningsvägar.
i) Vara tillräckligt mekaniskt stark för att emotstä tillfälligt missbruk
(brott genom avskalning).
j) Ha lång hållbarhet, dvs reagensen skall vara väl skyddade och bevarade
från avdunstning och nedbrytning.
Enligt föreliggande uppfinning tillhandahâlles en testremsa för halvkvanti-
tativt eller kvalitativt påvisande av vattenlösliga föreningar bl.a biologiska vätskor
genom färgreaktion med reagens inneslutna i sfäriska polymera mikrokapslar (beads)
eller droppar, varvid de företrädesvis genomskinliga och sermipermeabla mikrokapslar-
na, som innesluter reagensen tillsammans eller i skilda mikrokapslar beroende på om
de är kompatibla eller ej och som är tillverkade av hydrofilt material, vilket till-
låter diffusionen av reaktanterna för bildning av en färgreaktion inom mikrokapslar-
na, är anbringade som en kontinuerlig vidhäftande beläggning på en inert, icke-absor-
berande bärande basremsa, varigenom utrymmet mellan de hydrofila mikrokapslarna kom-
mer att utfyllas med avsedd mängd provlösning. Basmaterialet eller basremsan kan ut-
göras av t.ex ett ark eller en remsa av plast eller ett metallark, t.ex ett ark av
aluminium eller glas. Dropparna är enkelt anbringade med hjälp av adhesion till den
bärande remsan åtminstone på ena sidan utan någon form av dispersiv eller absorberan-
de matris för inbäddning av dropparna, som i remsor enligt tidigare känd teknik, där
nämnda matris vanligtvis tjänar som uppsamlingsmedel för de lösningar som skall tes-
tas och även som framkallningsmedel för den önskade, färgade, analytiska reaktionen.
Föreliggande remsa uppvisar, trots avsaknaden av absorptionsmedel, en mycket exakt
uppsamlingskapacitet. I detta sammanhang bör nämnas att absorptionskraften hos själva
dropparna (eller hellre hos de hydrofila polymerer som utgör dropparna) inte har
någon speciell inverkan, då det är avståndet mellan dropparna som är inrättat för
att uppnå en prov-
l0
l5
40
8000353-6
tagningsreaktion i lösningen som skall analyseras. Detta är möjligt då dropparna
består av en hydrofil polymer, vilken vätes av nämnda lösning då remsan doppas ned
däri och vilken därför omedelbart undandrar en konstant del av vätska per ytenhet
tack vare kapilläreffekter. Således kan beroende på vätningsegenskaperna hos poly-
meren som användes och beroende pá dropparnas medeldiameter, mängden uppsamlad
vätska per ytenhet bestämmas och hållas under kontroll. Av denna anledning har
dropparna företrädesvis en enhetlig medeldiameter och anbringas på remsan på ett
enhetligt sätt, t.ex. som ett monoskikt. I ett sådant fall är avståndet mellan
dropparna ett resultat av att dropparna placeras pà remsan huvudsakligen nära i
förhållande till varandra för att mellan dropparna på remsan erhålla regelbundet
fördelade tomrum. Summan av dessa tomrum utgör en konstant volym per ytenhet, vilken
fylles av lösningen som skall analyseras då remsan doppas däri. Dropparna fästes pa
remsan företrädesvis med hjälp av ett lim,men andra sätt som t.ex. att värmeuppmjuka
ytan av bärarplasten just så mycket att dropparna direkt fäster på plasten är också
tänkbara. Det bör här noteras att principen att placera droppar, sida vid sida på
en remsa, för att uppnå en provsamlingsverkan i en vätska inte är ny i sig. Den har
bl.a. angetts i det franska patentet med nr 2.l9l.734, vilket hänför sig till en
remsa för detektering och uppskattning av föreningar genom att placera en droppe
av en lösning med den aktuella föreningen på remsan och spektrofotometriskt bestämma
färgutvecklingen vilken erhållits genom någon reaktion mellan reagens på remsan
och föreningarna som skall analyseras. Remsan enligt detta franska patent består av
åtminstone tre lager, vilka har oberoende funktioner: ett av lagren tjänar som
stödjande medium för reagenset, det andra lagret tjänar som filter och det tredje
yttre lagret tjänar som ett fördelningsmedium, för att jämnt sprida vätskan som
skall analyseras över ytan av remsan. Denna effekt erhålles genom användningen av
sfäriska droppar av glas eller polymerharts placerade sida vid sida som ett spri-
dande lager och klädda på ytan med hjälp av ett lim. Men inte på något ställe i
referensen nämnes att dylika droppar även kan innehålla de analytiska reagensen av
remsan, såsom enligt föreliggande uppfinning.
Företrädesvis, enligt föreliggande uppfinning väljes storleken av dropparna
och den kemiska naturen av polymererna så att den uppsamlade vätskan tränger genom
dropparna med en hastighet som är tillräcklig för att en observerbar färg skall
utvecklas inom en eller nägra minuter. Polymerenimâste således ha en lämplig
struktur (semipermeabilitet) och under dessa förhållanden kommer de oönskade
ämnen som möjligtvis finns närvarande i lösningen att filtreras bort, då polymeren
är anpassad att tillåta de ämnena som skall analyseras att diffundera in i dropparna,
samt att blockera andra ämnen med större molekylvikt (proteiner eller röda celler,
vilka är beståndsdelar i blod). Nedan anges vissa data avseende placeringen av rea-
gensen inuti dropparna.
Dropparna kan alla vara av samma slag och innehålla reagensen, samtliga
40
sooossa-6 . 6
blandade tillsammans om de är inbördes förenliga, eller separerade från varandra
om nödvändigt; förfarandet för att uppnå denna separation kommer att beskrivas
' senare. Alternativt kan dropparna vara av olika slag, dvs. ett slag innehåller en
av reagensen och ett annat slag innehåller ett annat reagens, där reagensen even-
tuellt inte är förenliga med varandra. I detta fall kommer färgen att utvecklas
endast i en sort av dropparna, vilket dock inte har någon betydelse eftersom
dropparna kan göras tillräckligt små (ca 20-- 200 m) för att den färgade ytan
skall framstå såsom enhetlig.
Normalt är, för erhâllandet av en god färgobservation, den polymer som an-
vändes för dropparna företrädesvis genomskinliga och i ett Sådant fal] kan det för
dropparna stödjande plastarket göras opakt, för att erhålla bättre reflektionsför-
måga, t.ex. med titandioxid eller något annat opakt fyllmedel (BaC03, CaSO4, belägg-
ningspigment för papper etc.). överraskande nog har man funnit att Ti02 även kan
införlivas inuti kropparna, om så önskas, vilket är möjligt då reaktiongiäget 1
dropparna, vilket är det allra viktigaste för utvecklingen av färg, befinner sig
nära periferin av dropparna, dvs. närvaron av det vita pigmentet i dropparna har
ingen förstörande effekt på detektionen av färgen utan snarare ökar kontrasterna.
Polymeren i dropparna i föreliggande remsor kan väljas av flertalet vattenolös-
liga hydrofila polymerer, förutsatt att de kan lösas upp i icke-blandbara organiska
lösningsmedel av orsaker för vilka kommer att redogöras närmare nedan. Som sådana,
kan produkter från cellulosa, hydroxiakrylpolymerer, polyalkylen-oxipolymerer och
polyamider användas. Inom cellulosagruppen, kan cellulošaestrar och-etrar såsom
metylcellulosa, etylcellulosa, butylcellulosa, cellulosaacetat, -propionat och
-butyrat användas. Mängden reagens som kan införlivas i dropparna är oerhört varie-
rande och beror naturligtvis på det speciella reagensets löslighet, den känslighet
varmed testet önskas utföras och andra krav, som kommer att framgå för fackmannen
från fall till fall. I exemplifierande syfte beskrives nedan föredragna utförings-
former av uppfinningen.
Förfarandet för framställning av dropparna är framtagen ur kända förfaranden
och mera speciellt från följande referens: T.M.S. Chang: "Microencapsulation of
Enzymes and Biologicals", ur "METHDDS IN ENZYMÛLOGY", Vol. 44 (l976), sid. 2l0.
Den metod som användes är beroende av den speciella produkt som önskas. I ett spe-
ciellt utförande av uppfinningen, framställdes en testremsa för bestämning av glukos
i urin. De kemiska reaktioner som var inblandade var den klassiska oxidationen av
glukos i närvaro av ett glukosoxidas och detektionen av väteperoxid, vilken fri-
gjorts med hjälp av o-tolidin i närvaro av peroxidas. För framställning av dropparna,
valdes en ester av cellulosa och den upplöstes i ät vattenolösligt organiskt lös-
ningsmedel innehållande o-tolidin. Därefter emulgerades en buffrad vattenfas, inne-
hållande enzymet, i denna organiska lösning, varvid små droppar av vattenfasen
bildades inuti den organiska lösningen. Därefter dispergerades denna emulsion ånyo
l0
l5
40
8000353-6
i en andra vattenfas, vilket resulterade i bildningen av droppar av polymer lösning
i denna andra vattenfas, där varje droppe fortfarande innehöll, suspenderat däri,
de små dropparna av den första vattenfasen. Därefter utsattes suspensionen för en
avdunstning, varvid det organiska lösningsmedlet avlägsnades och g hårda cellulosa-
esterdroppar, innehållande små vakuoler fyllda med vattenlösningen med enzymen er-
hölls. 0-tolidin stannade kvar upplöst i själva polymerhartset och hölls således
borta från att blandas med enzymet. Dropparna filtrerades, torkades och kalibrerades
med lämplig masktäthetsstorlek, varvid dropparna inom området kring l00_mm valdes ut.
Därefter anbringades dropparna, såsom ett kontinuerligt monolager, på en bärarremsa
av plast, med användning av ett bindemedel. Samtliga vanliga bindemedel i flytande
form kan användas, t.ex. lösningar av karboximetylcellulosa (KMC), polyvinylalkohol
(PVA), gummi arabicum, butadien-styrengummi (3M), m.fl. I syfte att binda dropparna
till plastremsan, kan ett mycket tunt lager av bindemedelslösningen sprayas, eller
på annat sätt anbringas, på remsan och dropparna fästes regelbundet därpå med an-
vändning av måttligt tryck och en utjämnande slät yta. I detta fallet anbringades
dropparna såsom ett monolager, där dropparna huvudsakligen rörde vid varandra på ett
kontinuerligt sätt. Alternativt kan dropparna vätas med en utspädd lösning av binde-
medlet och anbringas på plastremsan med en avskrapare eller något liknande verktyg.
I detta fallet är tjockare lager av droppar (dubbel- eller trippellager) tänkbara.
Vid användningen doppas remsorna ner i lösningen innehållande glukos och
tages omedelbart ut ur lösningen igen. Därefter får remsan vila en viss given tid,
tillräckligt lång för att tillåta den lösning som är instängd i omrâdet mellan
dropparna, att tränga in i själva dropparna och nä vakuolerna, vilka innehåller
enzymerna. Där sker så reaktionen och det syre, som frigöres då peroxidas verkar pä
H202, vilken erhållits genom oxidationen av glykos, kommer att omvandla den o-tolidin,
som finns i närheten av vakuolerna, till den önskade blåa färgen. För att färgen
skall kunna utvecklas inom en, praktiskt sett, skälig tid, säg l min., bör det djup,
till vilket föreningen som skall analyseras måste tränga in i polymeren för att
huvudsakligen nä reagensen i dropparna, vara en bråkdel av ljum till l_um. Således
bör tjockleken av det halvgenomträngliga membranet som skyddar vakuolerna, vilka
är placerade inom räckhåll utifrân, företrädesvis hälla sig inom omrâdet kring 0,l/um
till l /um.
I ett annat utförande framställdes en remsa under användandet av tvâ sinsemellan
oförenliga, fettlösliga reagens. I detta fallet framställdes ett första slag av
droppar genom att en polymer och ett första reagens upplöstes i ett lämpligt icke-
vattenlösligt lösningsmedel. Denna lösning dispergerades i en vattenfas och utsattes
därefter för indunstning, vilket gav en vattendispersion av polymerdroppar av huvud-
sakligen enhetlig storlek (ca 60/um), vilka droppar innehöll det första reagenset i
ett upplöst tillstånd. Detta första slags droppar filtrerades därefter, torkades och
kalibrerades. Det andra slaget av droppar framställdes på identiskt vis, men i dessa
l0
l5
40
isooosss-6 D8
införlivades det andra reagenset. Efter torkning, blandades båda sorterna av droppar
i sådana proportioner att lämpliga mängder av reagens var närvarande i blandningen,
varefter denna användes för att bereda testremsorna såsom beskrivits ovan enligt det
första utförandet. Användningsområdet för remsorna enligt dessa bägge utföranden
kommer nedan att beskrivas mera detaljerat.
Vid framställningen av dropparna enligt ovan, kan många lösningsmedel, vilka
är olösliga i vatten men har god upplösningsförmâga för de valda hydrofila polymer-
erna användas; exempelvis kan klorinerade lösningsmedel som metylenklorid, kloroform
och trikloreten användas, såväl som estrar och etrar såsom etylacetat, butylacetat,
dietyleter m.fl. I allmänhet måste dylika lösningsmedel vara tillräckligt flyktiga
för att kunna avlägsnas genom indunstning under mild uppvärmning och luftgenom-
blåsning eller genom sänkning av trycket. _
För utförande av emulsions- och dispersionsstegen enligt ovan rekommenderas
starkt användningen av ett emulgeringsmedel. Lämpliga är de mest vanliga, kommer-
siellt tillgängliga, emulgeringsmedlen med neutrala egenskaper, t.ex. natriumlauryl-
sulfat, "Tween 20" (tillverkad av ICI), m.fl.
Av ovan gjorda-beskrivning framgår att syftena med föreliggande uppfinning
huvudsakligen uppfylles med hjälp av komponenterna i föreliggande remsa. Således,
tack vare närvaron av hydrofila droppar, vilka arrangeras regelbundet på en icke
porös, vattenogenomtränglig, bärande plastfilm, erhålles en korrekt och snabb upp-
samling av den vätska som skall analyseras. Dessutom komner reagensen, tack vare
den intima polymerstrukturen vilken är ett resultat av framställningsförfarandet,
att under lagringen vara effektivt avskilda och skyddade (detta är Spefilßllt Vlkïlgt
då en hydroperoxidoch en oxiderbar indikator lagras tillsammans) trots att dropparna
tillåter nära kontakt mellan föreningarna som skall analyseras och reagensen i
dropparna och samtidigt utesluter oönskade ämnen. Vidare är koncentrationen av reagen-
sen nära ytan av dropparna tillräcklig för erhàllandet av en användbar färgutveck-
ling, med ett inträngningsdjup av den lösning som skall analyseras som endast är
en liten bråkdel av den totala tjockleken av dropparna. Det bör noteras att även
med avseende på ytkontaktförhâllanden, föreligger en väsentlig skillnad mellan
tidigare känd teknik och föreliggande uppfinning. I tidigare känd teknik är den
observerbara, reagensinnehållande ytan en slät yta, vars absorptionskraft och
reflektivitet har samband med dess plana dimensioner. I föreliggande uppfinning,
är ytan inte slät utan består av på varandra följande sfäriska droppar, vars totala
yta är lika med 4 nr? (där r är dropparnas radie). Det kan enkelt räknas ut att
förhållandet mellan ytan av dropparna och den yta som stödjer dropparna är
n, dvs. den tillgängliga ytan är mer än 3 ggr så stor som den yta som är tillgänglig
i remsorna enligt tidigare känd teknik. Ur färgobservationssynpunkt erhålles också
att den observerbara ytan från en grupp av droppar på en slät yta, vilken är synlig
utifrån, är ca l,4 ggr större än själva den släta ytan; således ökas den observer-
l0
l5
40
aoonssz-6
bara färgdensiteten och känsligheten i jämförelse med remsorna enligt tidigare
känd teknik.
Det bör också noteras att i de flesta testremsutföranden enligt tidigare
känd teknik, måste det fuktighetsabsorberande materialet som användes för uppsamling
av den lösning som skall analyseras, samtidigt hysa föreningen som skall detekteras,
färgämnet och de andra reagensen. Vidare har sådana material en stor inre kontakt-
yta och saknar i allmänhet homogenitet då de inte kan förena två motstäende egen-
skaper särskilt väl: en hög absorptionskapacitet för vätskan som skall analyseras
och en utjämnande verkan pä de olika inblandade kemikaliernas migrationshastigheter
(inga kromatografiska effekter). Alla sådana nackdelar har eliminerats med föreliggan-
de uppfinning. Dessutom, enligt uppfinningen, är reproducerbarheten i färgutveck-
lingen god på grund av de relativt koncentrerade, med litet mellanrum, färgade
ställena och undvikande av diffusion av färgen på utsidan av dropparna. Ett ytter-
ligare gynnsamt drag är_att den fiberhaltiga, inbäddade matrisen i remsor enligt
tidigare känd teknik fullständigt undertryckes, varvid undvikes de differentiella
diffusionseffekterna vilka hänför sig till dylika fiberhaltiga materials kromato-
grafiska egenskaper. Slutligen kan remsorna enligt föreliggande uppfinning till-
verkas mycket enkelt och ekonomiskt eftersom de endast omfattar två uppbyggande
delar, dvs. dropparna och de bärande remsorna, där dropparha är utförda i en stark
och motstândskraftig struktur jämfört med de bräckliga mikrokapslarna enligt tidi-
gare känd teknik. I dropparna enligt föreliggande uppfinning, är reagensen väl
skyddade utifrån och föreliggande remsor har mycket lång livslängd utan att därvid
deras analytiska egenskaper förändras.
Följande exempel illustrerar uppfinningen.
Exempel l
2 g cellulosatriacetat och 0,25 g o-tolidin upplöstes i 50 ml CH2Cl2 med 0,l g
av ett ytaktivt medel ("Tween 20" från ICI = polyoxieten~sorbitanmonolaurat) för
att bilda en polymer lösning (lösning A).
En vattenlösning framställdes genom att blanda samman 3,5 ml av en glukosoxi-
daslösning med l000 I.U./ml, 60 mg peroxidas (60 I.U./mg) och l85 mg av en citrat-
buffert (pH 4,7). Detta gav lösningen B.
Lösning B emulgerades därefter i lösning A under följande förhållanden:
temperatur: rumstemperatur, omrörning: 2000 varv/min, tid: 20 min. Emulsionen bestod
av små droppar av lösning B (l-5,um) suspenderad i den polymera, organiska lösningen.
Därefter dispergerades denna emulsion i en andra vattenfas, vilken bestod av 460 mg
av natrium-laurylsulfat i 800 ml av en 0,l M vattenhaltig acetatbuffert, varvid
omrördes på så sätt att erhâllandet av alltför små partiklar undveks. Denna disper-
sion bestod sáledes av droppar av den organiska lösningen A suspenderade i den andra
fasen, varvid varje droppe innehöll, jämnt fördelade, små droppar av lösningen B.
Dispersionen upphettades under omrörning till 35°C under 30 min., medan luft
40
Éaooozsá-en
blåstes mot ytan. CH2Cl2 drevs fortlöpande av, vilket resulterade i bildningen av
fasta polymerdroppar innehållande o-tolidin och lösning B med enzymerna, såsom
små vakuoler instängda i den mikroporösa stomen av dropparna. Därefter avlägsnades
CH¿Cl2 fullständigt (vilket kan säkerställas genom lukten av lösningsmedlet), droppar-
na iöltrerades och torkades. De undersöktes under mikroskop och visade sig ha diamet-
rar i omrâdet kring ca 40 till l00/mn, med vakuolerna placerade nära omkretsen fullt
jsynliga, varvid det membran som separerade dessa yttre vakuolerna från utsidan
endast hade en tjocklek av en bråkdel av en mm. Detta illustreras av bifogade foto-
egrafier som tagits med ett svepelektronmikroskop och där:
Fig. l visar dropparna vid 200 ggr förstoring och ger dess storleksfördelning.
Fig. 2 är en förstoring av en av dropparna i fig, l.
Fig. 3 är en förstoring av en del av en av dropparna i fig. l och visar när-
varon av vakuolerna vilka normalt är fyllda med lösningen B. Naturligtvis har de fles-
* ta vakuolerna, vilka visas i figurerna, kollapsat på grund av det tryck som ut-
vecklas på dess insida när de utsättes för vakuumet i elektronmikroskopet.
Dropparna kalibrerades med en masktäthet för att utvälja dropparna med en
diameter i området av 100/tm. Därefter anbringades de utvalda dropparna enhetligt
a som ett kontinuerligt monolager (där varje droppe huvudsakligen rörde vid sina
grannar) på en självhäftande plastremsa (av typ "EGAFIX" tillverkad av R. Burkhart,
Luzern, Schweiz) för att erhålla en remsa enligt uppfinningen.
De så erhållna remsorna doppades under l sek i lösningar av glukos av olika
koncentrationer (visas nedan) och färgen tilläts utvecklas under l min, varefter en
färgavläsning gjordes. Färgen erhölls på grund av oxidationen av o-tolidin genom den
peroxidaskatalyserade verkan av HZOZ, vilken frigjorts genom den glukosoxidaskata-
lyserade oxidationen av glukos, varvid frambringades en blå indikatorfärg. Resultaten
visas nedan:
Glukoslösningar Remsornas färg
(koncentration g/l)
l mycket svagt blå
2,5 ljusblå
medelblått
kraftigt blå
Det är viktigt att notera att för att erhålla reproducerbara resultat,
måste färgavläsningarna göras vid vissa givna intervall, efter det att remsorna
ahdoppats ned, eftersom vid tiden för avläsningen är reaktionen ännu inte avslutad
och en del av glukosen har fortfarande inte förbrukats.
Ovan beskrivna remsor var mycket stabila när de lagrades under normala torra
förhållanden. Den membranaktiga väggen av vakuolerna som var halvgenomtränglig,
gjorde att enzymerna effektivt instängdes däri på grund av asin molekylvikt, vilken
40
Hemoglobin konc. (mg/l)
8000353-6
ll
var alltför hög för att enzymerna skulle kunna filtreras ut genom nämnda halv-
genomträngliga membran.
Exempel 2
Droppar framställdes såsom beskrivits i exempel l men o-tolidin uteslöts
i polymerlösningen. Denna indikator tillsattes efteråt till de torkade dropparna
genom impregnering av dropparna med en lösning av o-tolidin i toluen och påföljande
torkning. Därefter behandlades testremsorna med dropparna såsom beskrivits i exempel
l och de uppförde sig på identiskt vis under användningen i fält.
Exempel 3
Förfarandet enligt exempel l upprepas med följande variationer: lösning A
av polymeren gjordes av 4 g cellulosatriacetat, 0,5 g "Tween 20", l g Ti02 och 50 ml
CH2Cl2. Dropparna framställdes och användes för att tillverka testremsorna exakt
såsom i exempel l. När remsorna testades med glukoslösningar gav de lika goda resul-
tat men med en ökad färgkontrast.
Exempel 4
En första organisk lösning framställdes genom att blanda samman: CH2Cl2 25 ml;
natriumlaurylsulfat 0,5 g; cellulosatriacetat 2 g; kumen-hydroperoxid 0,5 g;
6-metoxikinolin 0,l6 g; etylenglykol (stabilisator) 0,5 g.
Denna lösning emulgerades i 400 ml 0,l M acetatbuffert (pH 5,8) innehållande
0,5 g natrium-laurylsulfat; därefter indunstades lösningen såsom beskrivits i
exempel l för att ge droppar av en första typ (C), vilka filtrerades och torkades.
En andra typ av droppar (D) framställdes på samma sätt, förutom att som den
organiska lösningen användes följande blandning:
CHZCIZ 25 ml; cellulosatriacetat l g; natriumlaurylsulfat 0,5 g; o-tolidin
0,25 g. Den vattenhaltiga dispersionsfasen var samma som ovan.
Därefter framställdes remsor såsom beskrivits i exempel l med användandet av
en l/l-blandning (viktsförhàllanden) av dropparna C och D. De så framställda test-
remsorna testades för att bestämma spår av blod i vattenlösningar. Testmekanismen
är samma som den som beskrivits i samband med US patentskriften 3.092.463 och
baseras på förmågan hos vissa av blodets komponenter (hemoglobinbeståndsdelar) att
katalysera överförandet av syre från peroxiden till o-tolidin med följande bildning
av den blåa färgen. Följande resultat erhölls:
Remsans färg
(Efter l min.)
0,923 svagt blå
6,l6 blå
Exempden ovan är inte begränsande eftersom många andra typer av remsor kan
framställas för mätning av andra biologiskt producerande ämnen såsom galaktos,
kolestorol, ketonföreningar och bilirubin. Vidare kan remsorna användas inom många
andra områden där en snabb test av vattenlösningar är viktig, t.ex. kemiska synteser,
40
.aooosss-6 0 a
plätering, ytbearbetning m.m. g
Remsor med en typ av droppar på ena sidan och en annan typ på den andra sidan
för selektiv mätning av tvâ olika föreningar i en lösning kan också enkelt fram-
ställas.
En faktor är mycket viktig och bör alltid noggrant beaktas vid framställning
av droppar, lämpliga för användning enligt föreliggande uppfinning, i det fall
då dropparna innehåller en vattenlösning av en vattenlöslig förening. För att vara
inom snabbt räckhåll för den lösning som skall analyseras, måste vakuolerna som
innehåller nämnda vattenlösning vara mycket nära dropparnas yta, men inte alltför
nära eftersom då kan inte vakuolerna stå mot en tillfällig bristning. Med andra
ord måste den vägg somfseparerar vakuolerna från det yttre vara så stark att den
lever upp till de uppställda krav för mekanisk styrka som krävs för dropparna enligt
föreliggande uppfinning, men tillräckligt tunn för att tillåta diffusion av de för-
eningar som skall analyseras inonien skälig tid. En sådan väggtjocklek kan faktiskt
kontrolleras genom en korrekt justering av de osmotiska faktorerna hos a) lösningen
som skall införlivas i dropparna och b) den vattenfas som tjänar som slutlig dis-
persionsfas vid framställningen av dropparna. Dessa osmotiska faktorer ligger inom
acceptabla gränser då förhållandet mellan molkoncentrationen av ingredienserna av
den första vattenfasen och molkoncentrationen av ingredienserna av den andra vatten-
fasen är mellan ca l/5:5/l.
Under den lägsta gränsen, kan inneslutningsutbytet bli för lågt och vakuolerna
vara fördelade alldeles för långt från dropparnas omkrets, vilket kan resultera i att
färgreaktionen utvecklas alldeles för långsamt för att vara praktisk. Då, å andra
sidan, den övre gränsen överskrides, är det risk att den yttre väggen av vakuolerna
blir alldeles för tunn (det yttre vattnet tenderar att tränga in i dropparna för att
späda ut den instängda lösningen) och vakuolerna kan praktiskt taget brista under
framställning eller under lagring med påföljande förlust av en del av de inkapslade
produkterna.
Exempel 5
En organisk lösning (0) av cellulosatriacetat framställdes genom upplösning,
under omrörning, av 2 g av den granulerade polymeren i 25 ml CH¿Cl¿ innehållande
0,2 g "Tween 20" och 0,25 g o-tolidin. Därefter bereddes en första vattenfas Wl
genom uppmätning och successiv inblandning av 3,5 ml glukosoxidaslösning (1000
Internationella Enheter/ml), 60 mg peroxidas, l33,8 mg trinatriumcitrat och 5l,4.mg
citronsyra, där de tvâ sistnämnda ingredienserna först blandades tillsammans i torrt
tillstånd, innan de upplöstes. Därefter emulgerades den första vattenfasen Wl i
den organiska lösningen vid rumstemperatur, meahög hastighet tills en jämn emulsion
Wl/0 erhölls (droppar av vattenfasen, ca l - 5/nn, dispergerade i den organiska
lösningen). Under detta steg kan kylning vara nödvändigt för att undvika upphettning
och eventuell denaturering av enzymen.
m
40
8000353-6
l3
Under tiden framställdes de tre följande andra vattenfaslösningarna (W2a,
N+b och W2c) genom upplösning av följande ingredienser i 350 ml av destillerat
vatten.
Ingredienser Egg Egg Egg
Trinatriumcitrat 6,69 g l3,38 g (0,l3M) 26,76 g
Citronsyra 2,8 g 5,4 g (0,07M) l0,8 g
(NH4)2so4 2,31 g 4,62 g (oensn) 9,24 g
Natriumlaurylsulfat 202 mg 202 mg 202 mg
Vatten till 350 ml 350 ml 350 ml
Därefter dispergerades emulsionen Wl/0 i W2b genom sakta tillsats av wl/0,
och snabb omrörning, till w2b.
Efter avslutad tillsättning, fortsattes omrörningen och temperaturen höjdes
gradvis till 40°C, alltmedan en ström av kväve läts passera över ytan av den omrörda
dispersionen tills metylenkloriden avdunstats. Den erhållna suspensionen av polymer-
droppar filtrerades och torkades och den avfiltrerade vattenfasen analyserades på
kvarvarande icke-inneslutet enzym (glukosoxidas) på vanligt sätt. Man fann att
endast 3 % av den ursprungliga glukosoxidasen inte inneslutits i dropparna, vilket
betecknas som hög inneslutningseffektivtet.
Ovan nämnda dispersionssteg upprepades med nya mängder Wl/0-emulsioner och
vattenfaserna W2a och W2c. I dessa fall var inkapslingsutbytena för enzymerna 72 %
resp. 82 %. Detta tyder på att bäst resultat erhålles dä buffertkoncentrationerna
i den första och den andra vattenfasen är ungefär lika.
Exempel 6
Framställning av en testremsa för bestämning av närvaron av katalas i komjölk
Närvaron av katalas i mjölk från idisslare är ett tecken på sjukdom och en
enkel metod för detektion av enzymet kan hjälpa till att upptäcka sådana sjukdomar
i ett tidigt, lättbotat stadium. De reaktioner som är inblandade i föreliggande
remsa är följande: splittring av mjölkens laktos till galaktos med galaktosidas.
Oxidation av galaktos vid katalytisk närvaro av galaktosoxidas, varvid erhålles
väteperoxid. Nedbrytning av H202 till vatten och 02 av den katalas som eventuellt
är närvarande. Bestämning av återstående H202 genom dess verkan på o-tolidin i när-
varo av peroxidas (samma färgreaktion som i föregående exempel).
4 g cellulosatriacetat och 0,02 g o-tolidin upplöstes i 50 ml CH2Cl2 med
0,4 g “Tween 20". Lösningen uppdelades i tvâ lika delar om vardera 25 ml, kallade
El och E2.
Därefter bereddes en första vattenfas (Fl) genom upplösning av l0 I.U. kata-
lasfri ß-galaktosidas och l50 I.U. galaktasfri ß-galaktosoxidas i 3,5 ml 0,l M fos-
fatbuffert (pH 7,5) innehållande en liten mängd magnesiumklorid (0,003 M MgCl2).
En annan vattenfas (FZ) bereddes,identiskt,med l00 I.U. peroxidas i 3,5 ml
av samma fosfat-MgCl2-buffert. Därefter emulgerades Fl med El under samma förhållanden
l5
eoøfissß-6 14
som beskrivits i exempel l vid emulgering av B i A; och FZ emulgerades på identiskt
vis med E2.
Därefter blandades Fl/El och F2/E2 milt tillsammans (för att undvika att
mikrodroppar av El kollapsar med de av E2) och blandningen dispergerades i en tredje
vattenfas G, vilken framställdes genom upplösning.av följande ingredienser:
Natriumlaurylsulfat 0,2; ammoniumsulfat 4,6 g; 0,l M fosfatbuffert (pH 7,5)
~350 ml. Den erhållna dispersionen utsattes för indunstning med kvävgas såsom be-
skrivits i exempel 4, varefter polymerdropparaerhölls (50 - l2O m), innehållande
:små vakuoler (l - 5 nm) av två slag. Det första slaget innehöll den första vatten-
fasen fl och det andra slaget innehöll den andra vattenfasen F2. Vakuolerna av de
tvâ slagen var homogent och statistiskt fördelade i omkretsen av dropparna.
Därefter kalibrerades dropparna och anbringades på ytan av en vidhäftande
remsa såsom i föregående exempel.
När remsorna användes för att testa mjölk av friska eller infekterade djur,
tilläts den laktos som är upplöst i mjölken att reagera med«enzymerna i Fl, varvid
H202 frigjordes. Därefter vandrade lösningen innehållande katalas och H202 från den
första typen av vakuoler till den andra typen där den H202, som ännu inte förstörts
av katalas, oxiderade tolidin, på grund av närvaron av katalas. Eärgutvecklingen
efter l min. var således omvänt proportionell mot den ursprungliga koncentrationen
av katalas i den infekterade mjölken. För de friska korna, var färgen mycket kraftigt
blå. För kor med kraftig mastitis, förblev remsorna färglösa eller mycket svagt blå.
Claims (6)
- l. Testremsa för halvkvantitativt eller kvalitativt pâvisande av vattenlösliga föreningar bl.a. biologiska vätskor genom färgreaktion med reagens inneslutna i sfäriska polymera mikrokapslar (beads) k ä n n e t e c k n a d av att de företrädes- vis genomskinliga och sermipermeabla mikrokapslarna, som innesluter reagensen till- sammans eller i skilda mikrokapslar beroende på om de är kompatibla eller ej och som är tillverkade av hydrofilt material, vilket tillåter diffusionen av reaktan- terna för bildning av en färgreaktion inom mikrokapslarna, är anbringade som en kontinuerlig, vidhäftande beläggning på en inert, icke-absorberande bärande bas- remsa, varigenom utrymmet mellan de hydrofila mikrokapslarna kommer att utfyllas med avsedd mängd provlösning.
- 2. Testremsa enligt krav l, omfattande reagens varav minst ett är vattenlös- ligt och varav ett är icke-vattenlösligt, k ä n n e t e c k n a d av att de vatten- förenliga reagensen inneslutes i mikrokapslarna med känd teknik så att det bildas mikrovakuoler fyllda med lösningen av vattenlösliga reagens, medan de icke-vatten- lösliga reagensen är närvarande i upplöst form i själva polymeren.
- 3. Testremsa enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att mikrovakuolerna är separerade från den yttre omgivningen med hjälp av ett yttre membran av 0,l - l}¿m tjocklek.
- 4. Testremsa enligt krav l, k ä n n e t e c k n a d av att polynmren i mikro- kapslarna är genomskinlig.
- 5. Förfarande för framställning av en testremsa enligt krav 2, där kapslarna bildas med hjälp av den dubbla emulsionstekniken, omfattande _ a) emulgering av en första vattenlösning av de vattenförenliga reagensen i en lösning innefattande en polymer, och ett icke-vattenlösligt, organiskt lösningsmedel, b) dispergering av den erhållna emulsionen i en andra vattenfas, varvid er- hâlles kapslar av den första emulsionen dispergerade i den andra vattenfasen, c) utsättande dispersionen för indunstningsförhållanden för att indunsta lös- ningsmedlet i den organiska lösningen, varvid erhålles en dispersion i den andra vattenfasen av polymerkapslar innehållande mikrovakuoler, vilka är fyllda med den första lösningen av vattenlösliga reagens, d) filtrering och torkning av kapslarna, k ä n n e t e c k n a d av att kapslarna anbringas som en kontinuerlig beläggning på en plastremsa med hjälp av ett bindemedel, där de icke-vattenlösliga reagensen upplöses i polymeren i kapslarna antingen genom tillsats av reagensen till polymer- lösningen i steg a) eller genom att låta kapslarna komma i kontakt med reagensen innan eller efter det att de anbringas på plastremsan.
- 6. Förfarande enligt krav 5, k ä n n e t e c k n a t av att förhållandet mellan den totala molkoncentrationen av ingredienserna i den första vattenfasen lig- ger inom omrâdet mellan l:5 till 5:l.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CH533478 | 1978-05-17 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SE8000353L SE8000353L (sv) | 1980-01-16 |
SE423933B true SE423933B (sv) | 1982-06-14 |
Family
ID=4291840
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SE8000353A SE423933B (sv) | 1978-05-17 | 1980-01-16 | Testremsa med mikrokapslar inneslutet reagens jemte forfarande for dess framstellning |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4438067A (sv) |
JP (1) | JPS6161348B2 (sv) |
AR (1) | AR220388A1 (sv) |
AT (1) | AT362886B (sv) |
BE (1) | BE876328A (sv) |
BR (1) | BR7908678A (sv) |
CA (1) | CA1125633A (sv) |
CH (1) | CH640947A5 (sv) |
DE (1) | DE2950501C1 (sv) |
DK (1) | DK18280A (sv) |
ES (1) | ES480656A1 (sv) |
FR (1) | FR2435713A1 (sv) |
GB (1) | GB2036965B (sv) |
IT (1) | IT1114235B (sv) |
NL (1) | NL184440C (sv) |
SE (1) | SE423933B (sv) |
WO (1) | WO1979001081A1 (sv) |
Families Citing this family (50)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5599720A (en) * | 1982-08-27 | 1997-02-04 | Multilyte Limited | Measurement of analyte concentration |
US4557900A (en) * | 1982-09-28 | 1985-12-10 | Cardiovascular Devices, Inc. | Optical sensor with beads |
CA1226796A (en) * | 1983-11-07 | 1987-09-15 | Anand Kumar | Reflective particle-containing analytical element |
US4810633A (en) * | 1984-06-04 | 1989-03-07 | Miles Inc. | Enzymatic ethanol test |
CA1260387A (en) * | 1984-07-17 | 1989-09-26 | Technicon Instruments Corporation | Polymeric single layer analytical element |
DE3433563A1 (de) * | 1984-09-13 | 1986-03-20 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Vorrichtung aus polymeren mit membranstruktur und eingelagerten feststoffpartikeln |
DE3434822A1 (de) * | 1984-09-22 | 1986-04-03 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Membran fuer reagenztraegerschichten, verfahren zu deren herstellung, sowie deren verwendung in analytischen mitteln und analysenverfahren |
JPS61245057A (ja) * | 1985-04-23 | 1986-10-31 | Fuji Photo Film Co Ltd | 一体型多層分析要素 |
US4752572A (en) * | 1985-08-30 | 1988-06-21 | Eastman Kodak Company | Lipid vesicles containing labeled species and their analytical uses |
DE3618049A1 (de) * | 1986-05-28 | 1987-12-03 | Miles Lab | Verfahren zur herstellung von reagenzschichten die hydrophobe reagenzien enthalten |
US4853186A (en) * | 1986-05-30 | 1989-08-01 | Eastman Kodak Company | Water-compatible reducible compounds and their use in analytical compositions and methods |
US4959307A (en) * | 1986-09-05 | 1990-09-25 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Immunoseparating strip |
US4963468A (en) * | 1986-09-05 | 1990-10-16 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Immunoseparating strip |
US5085988A (en) * | 1986-09-05 | 1992-02-04 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Immunoseparating strip |
US5030558A (en) * | 1986-11-07 | 1991-07-09 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Qualitative immunochromatographic method and device |
US4806487A (en) * | 1987-05-29 | 1989-02-21 | Analytical Innovations, Inc. | Basic drug detection method |
US4816415A (en) * | 1987-05-29 | 1989-03-28 | Analytical Innovations, Inc. | Cannabinoid detection method |
DE3729290C1 (de) * | 1987-09-02 | 1989-02-02 | Draegerwerk Ag | Pruefelement zur Bestimmung von Bestandteilen einer insbesondere gasfoermigen Probe und Verfahren zu seiner Herstellung |
EP0322669B1 (en) * | 1987-12-18 | 1993-08-11 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Dry liquid analysis element |
JPH03501681A (ja) * | 1988-01-11 | 1991-04-18 | ボーリンガー・マンハイム・コーポレイション | 乾燥粉末診断剤及びその適用 |
WO1989007643A1 (en) * | 1988-02-16 | 1989-08-24 | Boehringer Mannheim Corporation | Analytical element which avoids premature reaction |
DE3809523A1 (de) * | 1988-03-22 | 1989-10-12 | Miles Inc | Verfahren zur herstellung von poroesen membranen, die damit hergestellten membranen und deren verwendung als traegermatrices in teststreifen |
US5039607A (en) * | 1988-05-17 | 1991-08-13 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method for immunochromatographic analysis |
US5334513A (en) * | 1988-05-17 | 1994-08-02 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method for immunochromatographic analysis |
US4994238A (en) * | 1988-06-09 | 1991-02-19 | Daffern George M | Constant volume chemical analysis test device |
US4904605A (en) * | 1988-06-20 | 1990-02-27 | Cuno, Inc. | Method and apparatus for residential water test kit |
US5124129A (en) * | 1988-07-29 | 1992-06-23 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Carbon dioxide indicator |
US5268054A (en) * | 1990-01-31 | 1993-12-07 | Bakhos Youssef G | Mounted micro-samples of powdered solids and method of preparing the same |
US5096833A (en) * | 1990-05-29 | 1992-03-17 | Miles Inc. | Method and device for determining protein using carrier matrix composed of urethane, water insouble inorganic compound and insoluble organic compound and method of making the device |
US5212065A (en) * | 1990-10-25 | 1993-05-18 | International Diagnostic Systems, Corp. | Rapid assay device |
US6905653B1 (en) * | 1996-10-31 | 2005-06-14 | Yoshihiko Higuchi | Ion activity measuring device and method for producing the same |
US6583722B2 (en) | 2000-12-12 | 2003-06-24 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wetness signaling device |
US6603403B2 (en) | 2000-12-12 | 2003-08-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Remote, wetness signaling system |
US20040016702A1 (en) * | 2002-07-26 | 2004-01-29 | Applera Corporation | Device and method for purification of nucleic acids |
CA2590944C (en) * | 2004-12-13 | 2016-02-02 | Bayer Healthcare Llc | Size self-limiting compositions and test devices for measuring analytes in biological fluids |
US8062221B2 (en) | 2005-09-30 | 2011-11-22 | Nellcor Puritan Bennett Llc | Sensor for tissue gas detection and technique for using the same |
US20070083094A1 (en) * | 2005-10-11 | 2007-04-12 | Colburn Joel C | Medical sensor and technique for using the same |
US20070106134A1 (en) | 2005-11-10 | 2007-05-10 | O'neil Michael P | Medical sensor and technique for using the same |
PL1982182T3 (pl) | 2006-01-19 | 2012-09-28 | Lattec I/S | Nowa konstrukcja przyrządu w postaci suchego paska oraz sposób oznaczania analitu w próbce przy użyciu przyrządu w postaci suchego paska |
US8449834B2 (en) * | 2006-09-25 | 2013-05-28 | Covidien Lp | Carbon dioxide detector having borosilicate substrate |
US8431087B2 (en) * | 2006-09-25 | 2013-04-30 | Covidien Lp | Carbon dioxide detector having borosilicate substrate |
US8420405B2 (en) * | 2006-09-25 | 2013-04-16 | Covidien Lp | Carbon dioxide detector having borosilicate substrate |
US8454526B2 (en) * | 2006-09-25 | 2013-06-04 | Covidien Lp | Carbon dioxide-sensing airway products and technique for using the same |
US8431088B2 (en) * | 2006-09-25 | 2013-04-30 | Covidien Lp | Carbon dioxide detector having borosilicate substrate |
US8396524B2 (en) * | 2006-09-27 | 2013-03-12 | Covidien Lp | Medical sensor and technique for using the same |
US20090165801A1 (en) * | 2007-12-31 | 2009-07-02 | Nellcor Puritan Bennett Llc | Carbon dioxide detector having an acrylic based substrate |
US20090246797A1 (en) * | 2008-03-28 | 2009-10-01 | Nellcor Puritan Bennett Llc | Medical device for the assessment of internal organ tissue and technique for using the same |
US9291570B2 (en) * | 2013-06-26 | 2016-03-22 | Eastman Kodak Company | Reactive indicator compositions and articles containing same |
US9289528B2 (en) * | 2013-06-26 | 2016-03-22 | Eastman Kodak Company | Methods for using indicator compositions |
WO2019073588A1 (ja) * | 2017-10-13 | 2019-04-18 | 佳則 山口 | 検査用ピペットチップ及びその検査用ピペットチップを用いるピペット型検査装置 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3092463A (en) * | 1959-11-02 | 1963-06-04 | Miles Lab | Stable blood detecting composition |
DE1598153C3 (de) * | 1966-11-22 | 1973-11-22 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Diagnostisches Mittel zum Nach weis der Inhaltsstoffe von Korperflus sigkeiten |
US3639306A (en) | 1968-08-08 | 1972-02-01 | Amicon Corp | Encapsulating particles and process for making same |
BE744162A (fr) | 1969-01-16 | 1970-06-15 | Fuji Photo Film Co Ltd | Procede d'encapsulage |
US3993451A (en) * | 1970-07-28 | 1976-11-23 | Miles Laboratories, Inc. | Test for a given constituent in a liquid |
DE2332760C3 (de) * | 1972-06-30 | 1982-03-04 | Eastman Kodak Co., 14650 Rochester, N.Y. | Material für die quantitative spektrophotometrische Analyse einer Flüssigkeit |
US3926732A (en) * | 1973-02-16 | 1975-12-16 | Alfa Laval Ab | Method for assaying catalase in milk and other liquids |
ZA76261B (en) * | 1975-01-28 | 1977-01-26 | Miles Lab | Test device and method for its preparation and use |
USRE30267E (en) | 1975-06-20 | 1980-05-06 | Eastman Kodak Company | Multilayer analytical element |
US4046514A (en) | 1976-11-24 | 1977-09-06 | Miles Laboratories, Inc. | Test device and method for determining a component in a sample |
US4258001A (en) | 1978-12-27 | 1981-03-24 | Eastman Kodak Company | Element, structure and method for the analysis or transport of liquids |
-
1979
- 1979-05-14 NL NLAANVRAGE7903767,A patent/NL184440C/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-05-15 FR FR7912338A patent/FR2435713A1/fr active Granted
- 1979-05-15 AR AR276526A patent/AR220388A1/es active
- 1979-05-16 CH CH43280A patent/CH640947A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-05-16 GB GB8001196A patent/GB2036965B/en not_active Expired
- 1979-05-16 BR BR7908678A patent/BR7908678A/pt unknown
- 1979-05-16 DE DE2950501A patent/DE2950501C1/de not_active Expired
- 1979-05-16 AT AT0900379A patent/AT362886B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-05-16 JP JP54500835A patent/JPS6161348B2/ja not_active Expired
- 1979-05-16 WO PCT/EP1979/000035 patent/WO1979001081A1/de unknown
- 1979-05-16 IT IT22719/79A patent/IT1114235B/it active
- 1979-05-16 CA CA327,738A patent/CA1125633A/en not_active Expired
- 1979-05-17 ES ES480656A patent/ES480656A1/es not_active Expired
- 1979-05-17 BE BE0/195221A patent/BE876328A/xx unknown
-
1980
- 1980-01-16 SE SE8000353A patent/SE423933B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-01-16 DK DK18280A patent/DK18280A/da not_active Application Discontinuation
-
1982
- 1982-04-28 US US06/372,796 patent/US4438067A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BE876328A (fr) | 1979-11-19 |
NL184440C (nl) | 1989-07-17 |
GB2036965A (en) | 1980-07-02 |
AT362886B (de) | 1981-06-25 |
US4438067A (en) | 1984-03-20 |
IT1114235B (it) | 1986-01-27 |
IT7922719A0 (it) | 1979-05-16 |
SE8000353L (sv) | 1980-01-16 |
CA1125633A (en) | 1982-06-15 |
GB2036965B (en) | 1983-01-12 |
NL184440B (nl) | 1989-02-16 |
FR2435713B1 (sv) | 1984-11-16 |
FR2435713A1 (fr) | 1980-04-04 |
CH640947A5 (fr) | 1984-01-31 |
DE2950501C1 (de) | 1983-07-07 |
JPS6161348B2 (sv) | 1986-12-25 |
NL7903767A (nl) | 1979-11-20 |
WO1979001081A1 (fr) | 1979-12-13 |
ES480656A1 (es) | 1980-08-16 |
DK18280A (da) | 1980-01-16 |
JPS55500294A (sv) | 1980-05-15 |
ATA900379A (de) | 1980-11-15 |
BR7908678A (pt) | 1980-04-22 |
AR220388A1 (es) | 1980-10-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SE423933B (sv) | Testremsa med mikrokapslar inneslutet reagens jemte forfarande for dess framstellning | |
AU668353B2 (en) | Support medium | |
US4548906A (en) | Integral multilayer analytical element for the analysis of ammonia or an ammonia forming substrate and a method for the detection thereof using the same | |
US4356149A (en) | Multi-layer chemical analytical materials | |
DE3883189T2 (de) | Trocken-flüssiges analytisches Element. | |
US4256693A (en) | Multilayered integral chemical analysis element for the blood | |
US4774192A (en) | A dry reagent delivery system with membrane having porosity gradient | |
JPH0623745B2 (ja) | 液体試料の成分検出用の試験装置及び方法 | |
JPS5818628B2 (ja) | イツタイケイエキタイブンセキヨウソ | |
US4594224A (en) | Analytical element | |
JPH0219907B2 (sv) | ||
JPS6217706B2 (sv) | ||
JPS584555B2 (ja) | アスコルビン酸の検出組成物、検出方法及び検出素子 | |
US5160436A (en) | Asymmetric sandwich membrane system having reduced ascorbate interference | |
JPH03130662A (ja) | 血液から血漿を分離するための装置と方法および血液中の分析対象物の測定法 | |
US4108727A (en) | Method, composition and device for determining the specific gravity or osmolality of a liquid | |
JPH0580049A (ja) | 乾式分析要素を用いた測定方法及び乾式分析要素 | |
EP0207392A2 (en) | Multilayer ion test means | |
JP4493535B2 (ja) | 試験紙 | |
CN100569348C (zh) | 涂布膜的方法 | |
JP3147560B2 (ja) | 多項目分析方法 | |
JPH0829416A (ja) | 多項目測定用乾式分析要素 | |
JPS6371653A (ja) | 全血希釈液 | |
JP3584255B2 (ja) | 全血分析用要素 | |
DE2950501T5 (de) | Test strips for analysing dissolved substances |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8000353-6 Effective date: 19900518 Format of ref document f/p: F |