SA517382002B1 - أجسام مضادة لترانس ثيرتين - Google Patents

أجسام مضادة لترانس ثيرتين Download PDF

Info

Publication number
SA517382002B1
SA517382002B1 SA517382002A SA517382002A SA517382002B1 SA 517382002 B1 SA517382002 B1 SA 517382002B1 SA 517382002 A SA517382002 A SA 517382002A SA 517382002 A SA517382002 A SA 517382002A SA 517382002 B1 SA517382002 B1 SA 517382002B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
ttr
antibody
antibodies
heavy chain
sequence
Prior art date
Application number
SA517382002A
Other languages
English (en)
Inventor
أس نيجار تارلوشان
أفيجيت تشاكرابارتي،
ان. هيجاكي جيفري
يوي ليو،
Original Assignee
بروثينا بايوسينسيس ليمتد
يونيفيرستي هيلث نتوورك
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by بروثينا بايوسينسيس ليمتد, يونيفيرستي هيلث نتوورك filed Critical بروثينا بايوسينسيس ليمتد
Publication of SA517382002B1 publication Critical patent/SA517382002B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

أجسام مضادة لترانس ثيرتين ANTI-TRANSTHYRETIN ANTIBODIES الملخـــص يتعلق الاختراع الحالي بتوفير أجسام مضادة antibodies ترتبط بشكل خاص بترانس ثيرتين transthyretin (TTR). يمكن استخدام الأجسام المضادة antibodies لعلاج أو تفعيل الوقاية effecting prophylaxis من الأمراض diseases أو الاضطرابات disorders المصحوبة بتراكم TTR TTR accumulation أو تراكم رواسب TTR accumulation of TTR deposits (على سبيل المثال، الداء النشواني amyloidosis الناتج عن TTR). يمكن أيضًا استخدام الأجسام المضادة antibodies لتشخيص الداء النشواني amyloidosis الناتج عن TTR وتثبيط أو خفض تَكَدُّس TTR reducing aggregation of TTR، من بين تطبيقات أخرى. الشكل 1أ.1

Description

أجسام مضادة لترائنس ثيرتين ‎ANTI-TRANSTHYRETIN ANTIBODIES‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع الإسناد المرجعي إلى الطلبات ذات الصلة يتعلق هذا الطلب بطلب البراءة الأمريكي المؤقت رقم 109.002/62 الذي تم إيداعه بتاريخ 28 يناير؛ 2015 وطلب البراءة الأمريكي المؤقت رقم 2000-2 الذي تم إيداعه بتاريخ 11 ديسمبر « 2015 والذين تم ‎Legian‏ بأكملها كمرجع . الإشارة إلى قائمة المتواليات يتضمن هذا الطلب قائمة متواليات إلكترونية في ملف باسم ‎(473373_SEQLST.TXT‏ تم إنشاؤه بتاريخ 28 ‎plu‏ ¢ 2016« ومحتوي على 135.083 بايت؛ والذي تم تضمينه هنا كمرجع بأكمله لكل الأغراض.
0 يُعتقد أن العديد من الأمراض تنتج بواسطة ‎all‏ ولتَكَّس الشاذين للبروتينات الخاصة بالمرض. يمكن أن تتراكم هذه البروتينات في تراكمات تشخيصية مسببة للمرض» المعروفة باعتبارها تراكمات نشوانية ‎amyloids‏ تتم ‎egy‏ بواسطة سلالات ‎ale‏ أنسجة معينة. يُعتقد أن التراكمات النشوانية تستثير استجابات التهابية ويكون لها عواقب سلبية متعددة للأنسجة المتضمنة. بالإضافة إلى ذلك؛ قد توجد تكدسات صغيرة من بروتين مطوي على نحو شاذ وتُفرز تأثيرات سامة للخلايا .
يعتبر ترانس ثيرتين ‎(TTR) transthyretin‏ واحدًا من العديد من البروتينات التي تكون معروفة بالطي الخاطئ ‎misfold‏ والتكدّس ‎Je) aggregate‏ سبيل ‎(JOD‏ تخضع للتخليق النشواني ‎(undergo amyloidogenesis‏ تشتمل الأمراض النشوانية ذات الصلة بترانس ثيرتين ‎transthyretin-related amyloidosis‏ على اثنتين من صور المرض: مرض عائلي المنشاً ‎Lan‏ من الطي الخاطئ ل ‎TTR‏ مُطفر أو صورة مغايرة منهك؛ ومرض غير جيني ‎Leah‏ ناتج بواسطة ‎ga‏
الخاطئ ل ‎TTR‏ من النوع غير المعالج. يمكن أن تتسبب عملية التخليق النشواني ل ‎TTR‏ في سبب مرضي في الجهاز العصبي و/أو القلب؛ إضافة إلى في الأنسجة الأخرى. الوصف العام للاختراع يوفر الاختراع أجسامًا مضادة ترتبط بترانس ثيرتين وتشتمل على ثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ثقيلة وثلاث ‎CDRs 5‏ بسلسلة خفيفة إلى حدٍ كبير من الجسم المضاد 1408. تشتمل بعض من الأجسام المضادة على ثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ‎Kabat‏ ثقيلة وثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ‎Kabat‏ خفيفة خاصة بالجسم المضاد 1468 ‎Lad‏ عدا أنه يمكن أن يكون كل من موضعي 1152 و126 عبارة عن ‎IN‏ 5. تشتمل بعض من الأجسام المضادة على ثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ‎Kabat‏ ثقيلة وثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ‎Kabat‏ خفيفة خاصة بالجسم المضاد 1468. اختياريًاء يكون 008-111 عبارة عن ‎CDR‏ مُزكبة 10 من نوع ‎Kabat-Chothia‏ خاصة بالجسم المضاد 14068. تشتمل بعض من الأجسام المضادة على ثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ‎Kabat‏ ثقيلة خاصة بالجسم المضاد 905. ‎«Glial‏ يكون ‎CDR-H1‏ عبارة عن ‎CDR‏ مُرْكبة من نوع ‎Kabat-Chothia‏ خاصة بالجسم المضاد 905. ترتبط بعض من الأجسام المضادة بنفس القمة اللاصقة ‎epitope‏ على ترانس ثيرتين باعتباره 905 أو 1468 وتشتمل على ثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة خفيفة وثلاث ‎CDRs‏ بسلسلة ‎(ALi‏ حيث: (أ) تشتمل كل ‎CDR‏ على تطابق متوالية بنسلة 9690 على الأقل مع ‎CDR‏ مناظرة من المناطق المتغيرة ذات السلاسل الثقيلة والخفيفة الخاصة ب 905؛ أو (ب) تشتمل كل ‎CDR‏ على تطابق متوالية بنسلة 0 على الأقل مع ‎CDR‏ مناظرة من المناطق المتغيرة ذات السلاسل الثقيلة والخفيفة الخاصة ب1468؛ ‎Lad‏ عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 126 ‎Ble‏ عن ‎N‏ أو 8. تشتمل بعض من الأجسام المضادة على: (أ) الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة والثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الخفيفة 0 الخاصة ب 905؛ أو (ب) الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة والثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب 1468,؛ فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 126 عبارة عن 1 أو 58. في بعض من الأجسام المضادة؛ تكون الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة والثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب 905 هي المتواليات أرقام: 15-13 و26-24؛ على التوالي. في بعض من الأجسام المضادة؛ تكون الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة والثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب 1408هي المتواليات 5 أرقام: 69-67 79-775( على التوالي؛ ‎Lad‏ عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 126 عبارة عن ‎N‏ ‏أو 5.
يمكن أن يكون أي من الأجسام المضادة السابقة عبارة عن جسم مضاد أحادي النسيلة ‎-monoclonal antibody‏ يمكن أن يكون أي من الأجسام المضادة السابقة عبارة عن جسم مضاد ‎chimeric (Spas‏ متوافق مع البشر ‎chumanized‏ مُموّدِ ‎veneered‏ بشري. يمكن أن يحتوي أي من الأجسام المضادة السابقة على نمط مماثل 1801 بشري؛ نمط مماثل 1802 بشري؛ أو نمط مماثل
4 بشري.
يوفر الاختراع بشكل إضافي أجسامًا مضادة متوافقة مع البشر أو خيمرية من الجسم المضاد ‎DW‏ ‏الذي يرتبط على نحو خاص بترانس ثيرتين» حيث يتم تمييز الجسم المضاد الخاص بالفأر بواسطة
منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ خاصة بالمتوالية ‎tad)‏ ‏61 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain variable region‏ خاصة بالمتوالية 0 رقم: 70 فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 1152 ‎Ble‏ عن 8 أو 87 يمكن أن يكون الموضع 9 عبارة عن ‎F‏ أو ‎<I‏ يمكن أن يكون الموضع 126 عبارة عن 8 أو 7 وتكون ‎R‏ عند الموضع 7 اختيارية. اختياريًاء تكون الأجسام المضادة عبارة عن جسم مضاد متوافق مع البشر أو خيمري 905 أو 1468 يرتبط على نحو خاص بترانس ثيرتين» حيث 905 يكون ‎Ble‏ عن جسم
مضاد لفأر يتميز بمنطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 1 ومنطقة متغيرة
5 بسلسلة خفيفة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 16 و1468 يكون ‎Ble‏ عن جسم مضاد لفأر يتميز بمنطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 61 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 70. اختياريًا؛ تشتمل الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر على: (أ) منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة متوافقة مع البشر تشتمل على الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة ب 5 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة متوافقة مع البشر تشتمل على الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة
0 الخفيفة الخاصة ب 905؛ أو (ب) منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة متوافقة مع البشر تشتمل على الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة ب 1468 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة متوافقة مع
البشر تشتمل على الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب ‎Lad (14G8‏ عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 126 عبارة عن 17 أو 8. اختياريًا؛ تكون الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة والثلاث ‎CDRs‏ ‏بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب 905 هي المتواليات أرقام: 15-13 و26-24؛ على التوالي. اختياريًا؛ 5 تكون الثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الثقيلة والثلاث ‎CDRs‏ بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب 1468هي المتواليات أرقام: 69-67 79-775( على التوالي؛ فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 126 عبارة عن ‎N‏ أو 5. ‎(Glas)‏ أية اختلافات في ‎CDRs‏ خاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة
الناضجة والمنطقة المتغيرة ذات السلسلة الخفيفة الناضجة من المتواليات أرقام: 1 و16؛ على ‎sil‏ ¢ تكمن في المواضع 1160-1165. ‎(Glas)‏ أية اختلافات في ‎CDRs‏ خاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة النتاضجة والمنطقة المتغيرة ذات السلسلة الخفيفة الناضجة من المتواليات أرقام: 61 و70؛ على التوالي؛ تكمن في المواضع 1160-1165 ‎Lad‏ عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 126 عبارة عن ‎SIN‏ 5. اختيارتًا؛ يشتمل الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎humanized antibody‏ على منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة متوافقة مع ‎humanized mature heavy chain variable region dull‏ بها متوالية حمض أميني ‎amino acid sequence‏ مطابقة بنسبة 9690 على الأقل لأي من المتواليات أرقام: 12-5 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة متوافقة مع البشر بها متوالية حمض أميني 0 مطابقة بنسبة 9690 على الأقل لأي من المتواليات أرقام: 23-19 فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 1119 عبارة عن “ا أو ‎K‏ يمكن أن يكون الموضع ‎HAD‏ عبارة عن م أو 7؛ يمكن أن يكون الموضع 1144 عبارة عن 6 أو 8 يمكن أن يكون الموضع 1149 عبارة عن 8 أو ‎eA‏ يمكن أن يكون الموضع 1177 ‎le‏ عن 8 أو 7؛ يمكن أن يكون الموضع 11828 عبارة عن ‎N‏ أو 5؛ يمكن أن يكون الموضع 1183 عبارة عن ‎SIR‏ ا ‎(Sa‏ أن يكون الموضع 1184 عبارة عن له أو ‎(Sas 5 5‏ أن يكون الموضع 1189 عبارة عن 7 أو ‎DM‏ اختياريًا» يتم ‎dad‏ واحد على ‎BY)‏ من المواضع التالية بواسطة الحمض الأميني كما هو محدد: يتم شغل الموضع 1142 بواسطة 85 يتم شغل الموضع ‎HAT‏ بواسطة .1؛ يتم ‎Jad‏ الموضع 1169 بواسطة ‎«F‏ يتم ‎Jad‏ الموضع 1182 بواسطة 5؛ يتم شغل الموضع 11826 بواسطة .آ؛ يتم شغل الموضع 11108 بواسطة .آ؛ يتم ‎Jad‏ ‏الموضع 1.8 بواسطة م؛ يتم شغل الموضع 19 بواسطة ©؛ يتم ‎Jad‏ الموضع 118 بواسطة 5؛ يتم 0 شغل الموضع 119 بواسطة ‎«V‏ يتم ‎Jad‏ الموضع 136 بواسطة ‎F‏ يتم ‎Jad‏ الموضع 139 بواسطة ‎(R‏ يتم ‎Jad‏ الموضع 1.60 بواسطة 8؛ يتم ‎Jad‏ الموضع 170 بواسطة ‎«A‏ ويتم ‎Jad‏ ‏الموضع 174 بواسطة . اختياريًاء يتم شغل المواضع 1147 1169 و1182 بواسطة بآ 7 و5؛ على التوالي. اختياريًا؛ يتم ‎Jad‏ المواضع ‎H82by 1182 »1169 (HAT‏ بواسطة ‎(Ly «S «F «L‏ على التوالي. اختياريًا؛ يتم ‎Jad‏ المواضع 1142 1147» و11108 بواسطة ‎(Ly LE‏ على التوالي. 5 اختياربًاء يتم ‎Jad‏ المواضع ‎H82b gy »1182 (HOY‏ بواسطة ‎(Lg «SF‏ على التوالي. اختياريًا؛ يتم شغل كل من الموضعين 1147 و11108 بواسطة .1. اختياريًا؛ يتم شغل الموضعين 1182 5 ‎H82b‏ ‏بواسطة 5 ‎Ly‏ على التوالي. اختياريًا؛ يتم ‎Jad‏ المواضع ‎H82by HAT (H42‏ بواسطة ‎«LE‏
وآ» على التوالي. اختياريًا؛ يتم شغل الموضع 136 بواسطة 7. اختياريًا؛ يتم شغل الموضع 1.60 بواسطة 5. اختيارتًا؛ يتم ‎Jad‏ المواضع 18 ‎¢L36 ¢L19 <LI‏ 139» 1.60 170؛ ‎L749‏ بواسطة ‎SR FV P(A‏ هه ‎Ry‏ على التوالي. اختياريًاء يتم شغل المواضع 1.8 ‎(L18 ¢L9‏ 1,19؛ ‎L74 5 <L70 <L60 139 »6‏ بواسطة ‎¢S (RF «VS (PA‏ هه وخا على التوالي. اختياريًاء يشتمل الجسم المضاد المتوافق مع البشر على منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9695 مع أي من المتواليات أرقام: 12-5 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9695 مع أي من المتواليات أرقام: 23-19 ‎Lad‏ عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 1119 عبارة عن ‎KSI‏ يمكن أن يكون الموضع 1140 عبارة عن ‎A‏ أو 7؛ يمكن أن يكون الموضع 1144 عبارة عن 6 أو ‎R‏ يمكن أن 0 يكون الموضع 1149 عبارة عن 8 أو ‎(Sa A‏ أن يكون الموضع ‎HTT‏ عبارة عن 5 أو 7؛ يمكن أن يكون الموضع 11828 عبارة عن ‎N‏ أو 58؛ يمكن أن يكون الموضع 1183 عبارة عن أو ‎(K‏ ‏يمكن أن يكون الموضع 1184 عبارة عن ‎A‏ أو 5؛ ‎(Sag‏ أن يكون الموضع 1189 عبارة عن ‎١7‏ أو 1. اختياريًاء يشتمل الجسم المضاد المتوافق مع البشر على منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9698 مع أي من المتواليات أرقام: 12-5 ومنطقة 5 متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9698 مع أي من المتواليات أرقام: 23-19؛ ‎Lad‏ عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 1119 عبارة عن ‎Kol R‏ يمكن أن يكون الموضع ‎HAO‏ عبارة عن ‎A‏ أو ‎(KT‏ أن يكون الموضع ‎HAM‏ عبارة عن 6 أو ‎R‏ ‏يمكن أن يكون الموضع 1149 عبارة عن 8 أو ‎eA‏ يمكن أن يكون الموضع ‎HTT‏ عبارة عن 5 أو 7 يمكن أن يكون الموضع 11828 عبارة عن ‎N‏ أو 5؛ يمكن أن يكون الموضع 1183 عبارة عن ‎R‏ ‏0 أو ءا يمكن أن يكون الموضع 1184 عبارة عن ‎A‏ أو 58؛ ويمكن أن يكون الموضع 1189 عبارة عن 7 أو ‎(GEM‏ تحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بأية واحدة من المتوالية رقم: 12-5 وتحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بأية واحدة من المتوالية رقم: 23-19. في بعض من الأجسام المضادة؛ تحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة على متوالية حمض أميني 5 خاصة بالمتوالية رقم: 11 وتحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بالمتوالية رقم: 19.
‎(Glos‏ يشتمل الجسم المضاد المتوافق مع البشر على منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة متوافقة مع البشر بها متوالية حمض أميني مطابقة بنسبة 9690 على الأقل لأي من المتواليات أرقام: 66-64 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة متوافقة مع البشر بها متوالية حمض أميني مطابقة بنسبة 9690 على الأقل لأي من المتواليات أرقام: 76-74( فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 11828 عبارة عن ‎N‏ أو 5؛ يمكن أن يكون الموضع 1183 عبارة عن # أو ‎K‏ يمكن أن يكون الموضع 1184 عبارة عن ‎A‏ أو 5؛ يمكن أن يكون الموضع 1189 عبارة عن 7 أو ‎M‏ ‏ويمكن أن يكون الموضع ‎LIS‏ عبارة عن 8 أو ©. ‎Gaal‏ يتم شغل واحد على الأقل من المواضع التالية بواسطة الحمض الأميني كما هو محدد: يتم شغل الموضع 111 بواسطة © يتم شغل الموضع ‎HAT‏ بواسطة ‎(L‏ ويتم ‎Jad‏ الموضع 136 بواسطة ‎LF‏ اختياريًا؛ يتم ‎Jad‏ الموضعين 0 !1121 و1147 بواسطة ‎(Ly E‏ على التوالي. اختياريًا؛ يتم شغل الموضع 136 بواسطة ‎(Glas) WF‏ يتم شغل واحد على الأقل من المواضع التالية بواسطة الحمض الأميني كما هو محدد: يتم شغل الموضع ‎H3‏ بواسطة 16؛ يتم ‎Jad‏ الموضع 11105 بواسطة 1 يتم ‎Jad‏ الموضع ‎L8‏ بوامسطةقلم؛ يتم شغل الموضع 19 بواسطة ©؛ يتم شغل الموضع 119 بواسطة 7؛ يتم شغل الموضع 126 بواسطة 8؛ يتم ‎Jad‏ الموضع 160 بواسطة 58؛ ويتم شغل الموضع 170 بواسطة ‎(Glad) LA‏ يتم 5 شغل الموضعين 113 و11105 بواسطة ‎K‏ و1؛ على التوالي. اختياريًا؛ يتم شغل المواضع 1.8 19؛ ‎L705 9‏ بواسطة ‎Ay VP (A‏ على التوالي. اختياريًا؛ يتم ‎dad‏ كل من الموضعين 126
‏5 160 بواسطة 5. اختياريًا؛ يشتمل الجسم المضاد المتوافق مع البشر على منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9695 مع أي من المتواليات أرقام: 66-64 ومنطقة متغيرة 0 بسلسلة خفيفة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9695 مع أي من المتواليات أرقام: 76-74( فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 11828 عبارة عن 17 أو 5؛ يمكن أن يكون الموضع 1183 عبارة عن ‎R‏ أو كا يمكن أن يكون الموضع 1184 عبارة عن م أو 8 يمكن أن يكون الموضع 1189 عبارة عن 7 أو 04 ‎(Sas‏ أن يكون الموضع 118 عبارة عن 5 أو ‎P‏ ‏اختياريًا؛ يشتمل الجسم المضاد المتوافق مع البشر على منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة بها 5 متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9698 مع أي من المتواليات أرقام: 66-64 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة بها متوالية حمض أميني عند تطابق بنسبة 9698 مع أي من المتواليات أرقام: 76-74( فيما عدا أنه يمكن أن يكون الموضع 11828 عبارة عن 17 أو 5؛ يمكن أن يكون
الموضع 1183 عبارة عن ‎R‏ أو كا يمكن أن يكون الموضع 1184 عبارة عن م أو 8 يمكن أن يكون الموضع 1189 عبارة عن 7 أو 04 ‎(Sas‏ أن يكون الموضع 118 عبارة عن 5 أو ‎P‏ ‎(Glas‏ تحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بأية واحدة من المتواليات أرقام: 66-64؛ وتحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بأية واحدة من المتواليات أرقام: 76-74. في بعض من الأجسام المضادة؛ تحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بالمتوالية رقم: 65 وتحتوي المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة على متوالية حمض أميني خاصة بالمتوالية رقم: 76. يمكن أن يكون أي من الأجسام المضادة السابقة عبارة عن جسم مضاد ‎intact antibody‏ ¢ 0 شظية ربط ‎binding fragment‏ جسم مضاد بسلسلة فرديةبووط0ثاضة ‎«Fab + single-chain‏ أو شظية 2002. في أي من الأجسام المضادة السابقة؛ يمكن دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة مع منطقة ثابتة بسلسلة خفيفة ويمكن دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة مع منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة. ‎(Bylo)‏ تكون المنطقة الثابتة بالسلسلة الثقيلة عبارة عن صورة طفرة من منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة لإنسان طبيعي أدت إلى خفض الارتباط بمستقبل ‎Foy‏ بالنسبة إلى 5 المنطقة الثابتة بالسلسلة الثقيلة للإنسان الطبيعي. اختياريًاء تكون المنطقة الثابتة بالسلسلة الثقيلة خاصة بنمط مماثل ‎IgGl‏ اختياريًاء يتم دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة مع منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة بها المتوالية الخاصة بالمتوالية رقم: 103 و/أو يتم دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة مع منطقة ثابتة بسلسلة خفيفة بها المتوالية الخاصة بالمتوالية رقم: 104 أو 105. 0 يوفر الاختراع بشكل إضافي تركيبات صيدلية تشتمل على أي من الأجسام المضادة السابقة ومادة حاملة مقبولة صيدليًا. يوفر الاختراع بشكل إضافي أحماضًا نووية تقوم بتشفير السلسلة الثقيلة و/أو السلسلة الخفيفة الخاصة بأي من الأجسام ‎salad)‏ السابقة؛ ‎Jie‏ أية واحدة من المتواليات أرقام: 40 42 44- 6م 89 96-91 و108-106.
يوفر الاختراع بشكل إضافي ناقل تعبير وراثي ناتج عن عودة الاتحاد الجيني ‎recombinant‏ ‎expression vector‏ يشتمل على حمض نووي ‎nucleic acid‏ كما هو موصوف ‎Lad‏ سبق؛ وخلية
عائلة ‎host cell‏ تم تحويلها باستخدام ناقل التعبير الوراثي الناتج عن عودة الاتحاد الجيني. يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتوافق جسم مضاد مع البشرء تشتمل الطريقة على: () اختيار واحد أو أكثر من الأجسام المضادة الخاصة لمستقبل؛ (ب) تحديد الوحدات البنائية للحمض الأميني للجسم المضاد الخاص بالفأر التي سيتم احتجازها؛ (ج) تخليق حمض نووي يقوم بتشفير سلسلة ثقيلة متوافقة مع البشر تشتمل على ‎CDRs‏ للسلسلة الثقيلة من الجسم المضاد الخاص ‎JUL‏ وحمض نووي يقوم بتشفير سلسلة خفيفة متوافقة مع البشر تشتمل على ‎CDRs‏ للسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الخاص ‎lL‏ و(د) التعبير وراثيًا عن الأحماض النووية في خلية
‎die 0‏ لإنتاج جسم مضاد متوافق مع البشر؛ حيث يكون الجسم المضاد الخاص بالفأر ‎Ble‏ عن 5 أو 14068 حيث يتم تمييز 905 بواسطة منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 1 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 16« وبتم تمييز 14068 بواسطة منطقة متغيرة بسلسلة تقيلة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 61 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة خاصة بالمتوالية رقم: 70.
‏5 يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لإنتاج جسم مضاد متوافق مع البشرء خيميري؛ أو ‎pan‏ ‏تشتمل الطريقة على: )( استنبات ‎Algal WAY‏ ذات الأحماض النووية التي تقوم بتشفير السلاسل الثقيلة والخفيفة الخاصة بالجسم المضاد؛ بحيث تفرز الخلايا الجسم المضاد؛ و(ب) تنقية الجسم المضاد من أوساط مزرعة الخلايا؛ حيث يكون الجسم المضاد عبارة عن صورة متوافقة مع البشرء خيمرية؛ أو مُموّهة من 905 أو 1468.
‏20 يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لإنتاج سلالة خلية منتجة لجسم مضاد متوافق مع البشرء خيميري؛ أو مُموه؛ تشتمل الطريقة على: (أ) إدخال ناقل يقوم بتشفير سلاسل ثقيلة وخفيفة خاصة بجسم مضاد ومرقم قابل للاختيار في الخلايا؛ (ب) نشر الخلايا في في ظل شروط لاختيار الخلايا المحتوية على رقم نسخة متزايد خاص بالناقل؛ (ج) ‎Jie‏ الخلايا الفردية عن الخلايا المختارة؛ و(د) ‎Lis‏ الخلايا المستنسخة من خلية فردية مختارة اعتمادًا على حصيلة الجسم
‏5 المضاد؛ ‎Cua‏ يكون الجسم المضاد عبارة عن صورة متوافقة مع ‎idl‏ خيمرية؛ أو ‎dagen‏ من 5 أو 1468. اختياريًاء تشتمل الطريقة بشكل إضافي على نشر الخلايا في ظل ظروف ‎ale)‏
— 1 0 —
وفحص سلالات الخلايا التي تعبر ‎Why‏ على نحو طبيعي عن وتفرز على الأقل 100
مجم/لتر/10 © خلايا/24 ساعة.
يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتثبيط أو خفض ‎(aK‏ ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج يعاني
من أو مُعرْض ‎hal‏ تنامي داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين ‎transthyretin-mediated‏
‎amyloidosis 5‏ ؛ تشتمل على إعطاء الخاضع للعلاج نظام فعال من أي من الأجسام المضادة
‏السابقة؛ ويالتالي تثبيط أو خفض ‎iE‏ ترانس ثيرتين في الخاضع للعلاج.
‏يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتثبيط أو خفض التكوين اللييفي للترانس ثيرتين ‎transthyretin‏
‎fibril formation‏ في خاضع للعلاج يعاني من أو مُعرّض لخطر تنامي ‎ely‏ نشواني ناتج عن
‏ترانس ثيرتين» تشتمل على إعطاء الخاضع للعلاج نظام فعال من أي من الأجسام المضادة 0 السابقة؛ وبالتالي تثبيط أو خفض تراكم ترانس ثيرتين ‎accumulation‏ 0805016110 في الخاضع
‏للعلاج.
‏يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لخفض رواسب ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج يعاني من أو
‏مُعرْض لخطر تنامي ‎ela‏ نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين» تشتمل على إعطاء الخاضع للعلاج نظام
‏فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة؛ وبالتالي خفض رواسب ترانس ثيرتين ‎transthyretin‏ ‎deposits 5‏ في الخاضع للعلاج.
‏يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لإزالة ترانس ثيرتين المكدس ‎aggregated transthyretin‏
‏خاضع للعلاج يعاني من أو مُعرّرض لخطر تنامي داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين» تشتمل على
‏إعطاء الخاضع للعلاج نظام فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة؛ وبالتالي إزالة ترانس
‏ثيرتين المكدس من الخاضع للعلاج بالنسبة إلى خاضع للعلاج يعاني من أو مُعرّض لخطر تنامي 0 داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين لم يتلق الجسم المضاد.
‏يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتثبيت هيئة غير سامة من ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج
‏يعاني من أو مُعرّض لخطر تنامي داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين؛ تشتمل على إعطاء
‏الخاضع للعلاج نظام فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة؛ وبالتالي تثبيت هيئة غير سامة
يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لعلاج أو تفعيل الوقاية ‎prophylaxis‏ من داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج؛ تشتمل على إعطاء الخاضع للعلاج نظام فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة. يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتأخير بداية داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج؛ تشتمل على إعطاء الخاضع للعلاج نظام فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة. يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتشخيص داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج؛ تشتمل على تلامس عينة بيولوجية من الخاضع للعلاج مع مقدار فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة. اختياريًاء تشتمل الطريقة بشكل إضافي على الكشف عن ربط الجسم المضاد بترانس ثيرتين» حيث يوضح وجود الجسم المضاد المرتبط أن الخاضع للعلاج يعاني من 0 داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين. اختياريًاء تشتمل الطريقة بشكل إضافي على مقارنة ربط الجسم المضاد بالعينة البيولوجية مع ربط الجسم المضاد بعينة مقارنة؛ وفقًا لذلك يوضح ‎Jal)‏ المتزايد للجسم المضاد بالعينة البيولوجية بالنسبة إلى عينة المقارنة أن الخاضع للعلاج يعاني من داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين. ‎(ASAT‏ تشتمل العينة البيولوجية وعينة ‎Ld‏ على خلايا من نفس ‎Lane‏ النسيج. اختياريًاء تكون العينة البيولوجية و/أو عينة المقارنة عبارة عن دم مصل ‎serum‏ ‏5 + بلازما ‎plasma‏ أو نسيج صلب ‎solid tissue‏ اختياريًا؛ يكون النسيج الصلب من القلب؛ الجهاز العصبي الطرفي ‎«peripheral nervous system‏ الجهاز العصبي المستقل» ‎autonomic KI‏ ‎nervous system‏ » العيون» أو القناة المعدية المعوية ‎gastrointestinal tract‏ في أي من الطرق السابقة؛ يمكن أن يكون الداء النشواني الناتج عن ترانس ثيرتين اختياريًا ‎Ble‏ ‏عن داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين عائلي المنشاً ‎familial transthyretin amyloidosis‏ أو داء ‎Sleds 20‏ ناتج عن ترانس ثيرتين ‎transthyretin amyloidosis (sab‏ 008016 . اختيارتًاء؛ يكون الداء النشواني الناتج عن ترانس ثيرتين العائلي ‎ple Lindl‏ عن اعتلال عضلة القلب النشواني عائلي ‎(FAC) familial amyloid cardiomyopathy Lal‏ اعتلال الأعصاب النشواني ‎lle‏ ‏المنشاً ‎«(FAP) familial amyloid polyneuropathy‏ أو الداء النشواني الانتقائي للجهاز العصبي المركزي ‎((CNSA) central nervous system selective amyloidosis‏ اختيارتًاء يكون الداء 5 النشواني الناتج عن ترانس ثيرتين القُرَادِيٌ عبارة عن داء نشواني مجموعي شَبِخُوخِيَ ‎senile‏ ‎(SSA) systemic amyloidosis‏ أو ‎ela‏ نشواني قلبي شَيِخُوخِيٌ ‎senile cardiac amyloidosis‏
— 2 1 — ‎(SCA)‏ أي من الطرق السابقة؛ يمكن أن يكون الداء النشواني ‎amyloid accumulation‏ الناتج عن ترانس ثيرتين مصحويًا اختياربًا بتراكم نشواني في القلب؛ الجهاز العصبي الطرفي؛ الجهاز العصبي المستقل؛ الكُلى؛ العيون؛ أو القناة المعدية المعوية للخاضع للعلاج. يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة للكشف عن وجود أو عدم وجود رواسب ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج؛ تشتمل على تلامس عينة بيولوجية من الخاضع للعلاج هناك شك فى اشتمالها على التراكم النشواني مع مقدار فعال من أي من الأجسام المضادة السابقة. ‎(Gilad)‏ تشتمل الطريقة بشكل إضافي على الكشف عن ربط الجسم المضاد بترانس ثيرتين» حيث يوضح الكشف عن الجسم المضاد المرتبط وجود رواسب ترانس ثيرتين. اختياريًا؛ تشتمل الطريقة بشكل إضافي على مقارنة ربط الجسم المضاد بالعينة البيولوجية مع ربط الجسم المضاد بعينة مقارنة؛ وفقًا لذلك
0 يوضح الربط المتزايد للجسم المضاد بالعينة البيولوجية بالنسبة إلى عينة المقارنة أن الخاضع للعلاج يعاني من داء نشواني ناتج عن ترانس ثيرتين. اختيارتًا؛ تشتمل العينة البيولوجية وعينة المقارنة على ‎WIA‏ من نفس ‎Lite‏ النسيج. ‎(LRN‏ تكون العينة البيولوجية و/أو ‎due‏ المقارنة ‎Ble‏ عن دم؛ ‎(dian‏ بلازماء أو نسيج صلب. اختياريًا؛ يكون النسيج الصلب من القلب؛ الجهاز العصبى الطرفى؛ الجهاز العصبى المستقل الكُلى؛ العيون؛ أو القناة المعدية المعوية.
يوفر الاختراع بشكل إضافي طريقة لتحديد مستوى رواسب ترانس ثيرتين في خاضع للعلاج؛ تشتمل على إعطاء أي من الأجسام المضادة السابقة والكشف عن وجود الجسم المضاد المرتبط في الخاضع للعلاج. اختياريًاء يتم تحديد وجود الجسم المضاد المرتبط بواسطة ‎Sigil‏ المَمُطِعِيُ بالإضدار الْبُوزِيِثْرُونِي ‎(PET) positron emission tomography‏ شرح مختصر للرسومات
0 شكل 11 يوضح محاذاة مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة خاصة بالجسم المضاد الفأري 905؛ أجسام مضادة لنموذج فأرء أجسام مضادة لمستقبل بشري؛ والأنواع المتوافق مع البشر من الجسم المضاد 5. يتم تضمين ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مريعات؛ ‎Lad‏ عدا أن المريع المطّؤق الأول يكون مركبًا من 0018-11 ‎«Kabat CDR-H1 5 Chothia‏ مع 008-111 ‎Kabat‏ تحتها خط ‎hada‏ سميك .
— 1 3 —
‎JSS‏ 1ب يوضح محاذاة مناطق متغيرة بسلسلة خفيفة خاصة بالجسم المضاد الفأري ‎OD5‏ جسم
‏مضاد لنموذج ‎Gl‏ جسم مضاد لمستقبل بشري؛ والأنواع المتوافق مع البشر من الجسم المضاد
‏5. يتم تضمين ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مريعات.
‏شكل 2 يوضح محاذاة مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة خاصة بالجسم المضاد الفأري ‎(14G8‏ جسم مضاد لنموذج فأرء أجسام مضادة لمستقبل بشري؛ والأنواع المتوافق مع البشر من الجسم المضاد
‏8. يتم تضمين ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مريعات؛ ‎Led‏ عدا أن المريع
‏المطوّق الأول يكون ‎US‏ من 016-111 ‎Chothia‏ و ‎«Kabat CDR-H1‏ مع 006-111 ‎Kabat‏
‏تحتها خط ويخط سميك.
‏شكل 2ب يوضح محاذاة مناطق متغيرة بسلسلة خفيفة خاصة بالجسم المضاد الفأري 1408 جسم
‏0 مضاد لنموذج فأرء أجسام مضادة لمستقبل بشري؛ والأنواع المتوافق مع البشر من الجسم المضاد ‎.14GS8‏ يتم تضمين ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مريعات . شكلا 13 و3ب: شكل 3 يوضح منحنيات ربط الأجسام المضادة الفأرية ‎D5 601 SAT‏ و1468 ب ‎TTR‏ المعالج الذي له الرقم الهيدروجيني 4. شكل 3ب يوضح ‎clinic‏ ربط الأجسام المضادة الفأرية ‎«ODS 621 SAT‏ و1468 ب ‎TTR‏ الطبيعي.
‏5 الشكل 4 ب و4ج: شكل ‎WM‏ يوضح تثبيط التكوين اللييفي ل 7118-7781 بواسطة الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. شكل 4ب يوضح تثبيط التكوين ‎nll‏ ل 1118-71221 للمقارنة. شكلا 15 و5ب: شكل 15 يوضح تحليل قياس شدة الضوء الخاص بتحليل لطخة ويسترن لعينات
‏0 البلازما من المرضى المُثبت لديهم ‎ATTR‏ 73011 (العينة رقم 21 رقم 22 رقم 23 رقم 24 رقم 25 رقم 27( والعينات من الخاضعين للعلاج الطبيعيين (العينة رقم 11 رقم 2 رقم 15« رقم 18( رقم 19؛ رقم 20) باستخدام الجسم المضاد 905 ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. شكل 5ب يوضح تحليل قياس شدة الضوء الخاص بتحليل لطخة ويسترن لنفس العينات باستخدام الجسم المضاد 581 ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ.
— 4 1 — ‎JS‏ 6 يوضح تجرية طبق ‎MesoScale Discovery (MSD)‏ خاص بعينات البلازما من المرضى المثبت لديهم ‎V30M ATTR‏ (رقم 21 رقم 22 رقم 23 رقم 24 رقم 25 رقم 27( والعينات من الخاضعين للعلاج الطبيعيين (العينة رقم 11 رقم 2 رقم 15 رقم 18« رقم 19 رقم 20( باستخدام الجسم المضاد 601. شكلا 77 و7ب: شكل 17 يوضح تأثير الجسم المضاد 1468 عند امتصاص 18711/1110841 ‎TTR‏ بواسطة خلايا 71117-1. شكل 7ب يوضح تأثير كل من الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ عند امتصاص ‎V30M TTR‏ بواسطة خلايا 1110-1. المتوالية رقم: 1 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من 0 الجسم المضاد الفأري 905. المتوالية رقم: 2 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بقالب تركيبة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة لفأر 11 1580. المتوالية رقم: 3 توضح متوالية الحمض الأميني للمستقبل المتغير بالسلسلة الثقيلة ‎ACCH‏ ‎.BAC02114‏ ‏15 المتوالية رقم: 4 توضح_متوالية الحمض الأميني للمستقبل المتغير بالسلسلة الثقيلة ‎.ACCHAAX82494.1‏ ‏المتوالية رقم: 5 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من النوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHV1)‏ 905. المتوالية رقم: 6 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من 0 انوع 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (10905171172) 905. المتوالية رقم: 7 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من النوع ‎2b‏ من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎-9D5 (Hu9D5VHV2b)‏
— 5 1 — المتوالية رقم: 8 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من النوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (10905171173) 905. المتوالية رقم: 9 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من النوع ‎3b‏ من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎-9D5 (Hu9D5VHV3b)‏ المتوالية رقم: 10 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 4 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHV4)‏ 905. المتوالية رقم: 11 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع ‎4b‏ من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHv4b)‏ 905. المتوالية رقم: 12 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 0 5 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (10905171175) 905. المتوالية رقم: 13 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-HI‏ للجسم المضاد الفأري 905. المتوالية رقم: 14 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-H2‏ للجسم المضاد الفأري 905. 5 المتوالية رقم: 15 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-H3‏ للجسم المضاد الفأري 905. المتوالية رقم: 16 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الفأري 905. المتوالية رقم: 17 توضح متوالية الحمض الأميني لقالب تركيب المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة 0 لأر ‎JAMIU_L‏ ‏المتوالية رقم: 18 توضح متوالية الحمض الأميني لمستقبل المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة لفأر ‎.ACC# ABC66952‏
— 6 1 — المتوالية رقم: 19 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLy1)‏ 905. المتوالية رقم: 20 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLY2)‏ 905. المتوالية رقم: 21 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLV3)‏ 905. المتوالية رقم: 22 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 4 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (109051714) 905. المتوالية رقم: 23 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 5 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (109051715) 905. المتوالية رقم: 24 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-L1‏ للجسم المضاد الفأري 905. المتوالية رقم: 25 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-L2‏ للجسم المضاد الفأري 905. 5 المتوالية رقم: 26 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-L3‏ الخاصة بالجسم المضاد الفأري 905. المتوالية رقم: 27 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 1 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 28 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 2 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر ‎OD5‏ ‏المتوالية رقم: 29 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع ‎2b‏ من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 905.
— 7 1 — المتوالية رقم: 30 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 3 من السلسلة ‎ALE‏ المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 31 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع ‎3b‏ من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 32 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 4 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر ‎OD5‏ ‏المتوالية رقم: 33 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع ‎4b‏ من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 34 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 5 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر ‎OD5‏ ‏المتوالية رقم: 35 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 1 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 36 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 2 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر ‎OD5‏ ‏5 المتوالية رقم: 37 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 3 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر ‎OD5‏ ‏المتوالية رقم: 38 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 4 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 39 توضح متوالية الحمض النووي ‎nucleic acid sequence‏ الخاصة بالنوع 5 من 0 السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر 905. المتوالية رقم: 40 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للجسم المضاد الفأري 5 مع ببتيد إشارة ‎.signal peptide‏
— 8 1 — المتوالية رقم: 41 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من الجسم المضاد الفأري 905 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 42 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الفأري 905 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 43 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الفأري 905 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 44 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (905171171ن11) 905. المتوالية رقم: 45 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 0 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHV2)‏ 905. المتوالية رقم: 46 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع ‎2b‏ من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHV2b)‏ 905. المتوالية رقم: 47 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (905171173ن11) 905. 5 المتوالية رقم: 48 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع ‎3b‏ من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D35VHV3b)‏ 905. المتوالية رقم: 49 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 4 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHV4)‏ 905. المتوالية رقم: 50 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 0 49 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VHv4b)‏ 905. المتوالية رقم: 51 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 5 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر (905171175ن11) 905.
— 9 1 — المتوالية رقم: 52 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLv1)‏ 905. المتوالية رقم: 53 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLV2)‏ 905. المتوالية رقم: 54 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLV3)‏ 905. المتوالية رقم: 55 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 4 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLv4)‏ 905. المتوالية رقم: 56 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 0 5 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hu9D5VLV5)‏ 905. المتوالية رقم: 57 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفية 905 لفأر. المتوالية رقم: 58 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة 905 لفأر. 5 المتوالية رقم: 59 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة 905 لفأر. المتوالية رقم: 60 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة 905 لفأر. المتوالية رقم: 61 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من 0 الجسم المضاد الفأري 1408. المتوالية رقم: 62 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بقالب تركيبة المنطقة المتغيرة بالسلسلة التقيلة ‎lal‏ 11 114016.
— 0 2 — المتوالية رقم: 63 توضح متوالية الحمض الأميني للمستقبل المتغير بالسلسلة الثقيلة ‎ACCH‏ ‎.AAD30410.1‏ ‏المتوالية رقم: 64 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VHV1)‏ 1468. المتوالية رقم: 65 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 2من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VHV2)‏ 14068. المتوالية رقم: 66 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع ‎(Hul4G8VHV3) ill‏ 1468. المتوالية رقم: 67 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-HI‏ للجسم المضاد ‎wll 0‏ 1468. المتوالية رقم: 68 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-H2‏ للجسم المضاد الفأري 1468. المتوالية رقم: 69 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-H3‏ للجسم المضاد الفأري 1408. 5 المتوالية رقم: 70 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الفأري 1408. المتوالية رقم: 71 توضح متوالية الحمض الأميني لقالب تركيب المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة لفأر آ_[111[1. المتوالية رقم: 72 توضح متوالية الحمض الأميني لمستقبل المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة لفأر ‎.ACC# ABA71374.1 0‏ المتوالية رقم: 73 توضح متوالية الحمض الأميني لمستقبل المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة لفأر ‎.ACC# ABC66952.1‏
— 1 2 — المتوالية رقم: 74 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV1)‏ 1468. المتوالية رقم: 75 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV2)‏ 1468. المتوالية رقم: 76 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV3)‏ 1468. المتوالية رقم: 77 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-L1‏ للجسم المضاد الفأري 1408. المتوالية رقم: 78 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-L2‏ للجسم المضاد 0 الفأري 1468. المتوالية رقم: 79 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب 0018-13 ‎Kabat‏ الخاصة بالجسم المضاد الفأري 1468. المتوالية رقم: 80 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Kabat CDR-L1‏ للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV3)‏ 1468. 5 المتوالية رقم: 81 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 1 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 1408. المتوالية رقم: 82 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 2 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 1408. المتوالية رقم: 83 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 3 من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر 1468. المتوالية رقم: 84 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 1 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر 1408.
— 2 2 — المتوالية رقم: 85 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 2 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر 1408. المتوالية رقم: 86 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالنوع 3 من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر 1408. المتوالية رقم: 87 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للجسم المضاد الفأري 1408 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 88 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من الجسم المضاد الفأري 1408 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 89 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من 0 الجسم المضاد الفأري 14068 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 90 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الفأري 1408 مع ببتيد إشارة. المتوالية رقم: 91 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VHV1)‏ 1468. 5 المتوالية رقم: 92 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VHV2)‏ 1468. المتوالية رقم: 93 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع ‎(Hul4G8VHV3) ill‏ 1468. المتوالية رقم: 94 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 0 1 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV1)‏ 1468. المتوالية رقم: 95 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 2 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV2)‏ 1468.
— 3 2 — المتوالية رقم: 96 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بالمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة للنوع 3 من الجسم المضاد المتوافق مع البشر ‎(Hul4G8VLV3)‏ 1468. المتوالية رقم: 97 توضح متوالية الحمض الأميني لببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة لفأر 1468. المتوالية رقم: 98 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة لببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة لفأر 1468. المتوالية رقم: 99 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة لببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة لفأر 1468. المتوالية رقم: 100 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة لببتيد إشارة المنطقة المتغيرة بالسلسلة 0 الخفيفة لفأر 1468. المتوالية رقم: 101 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة ل ‎IgGl‏ ‏بشري توضيحية. المتوالية رقم: 102 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة ل ‎IgGl‏ ‏بشري توضيحية من ‎Gaal bl)‏ 01-3 1501. 5 المتوالية رقم: 103 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة ل ‎IgGl‏ ‏بشري توضيحية من ‎Lidl)‏ الخَيْفِيُ 6103 ‎TgG1‏ ‏المتوالية رقم: 104 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة خفيفة من نوع ‎LIS‏ بشرية توضيحية بها أرجنين عند طرف ‎N‏ ‏المتوالية رقم: 105 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة خفيفة من نوع 0 كابا بشرية توضيحية بدون أرجنين عند طرف ‎N‏ ‏المتوالية رقم: 106 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة توضيحية من ‎aa hall‏ 01013.
— 2 4 —
المتوالية رقم : 107 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة توضيحية بها أرجنين عند طرف ‎N‏ ‏المتوالية رقم : 108 توضح متوالية الحمض النووي الخاصة بمنطقة ثابتة بسلسلة خفيفة توضيحية بدون أرجنين عند طرف ‎N‏
المتوالية رقم: 109 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالترانس ثيرتين البشري الموضح برقم الوصول ‎.P02766.1 (UniProt)‏ المتوالية رقم: 110 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالترانس ثيرتين البشري الموضح برقم الوصول ‎.AAB35639.1 (GenBank)‏ المتوالية رقم: 111 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالترانس ثيرتين البشري الموضح برقم
0 الوصول ‎.AAB35640.1 (GenBank)‏ المتوالية رقم: 112 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالترانس ثيرتين البشري الموضح برقم الوصول ‎.ABI63351.1 (GenBank)‏ المتوالية رقم: 113 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بالوحدات البنائية 97-89 من ترانس ثيرتين بشري.
5 المتوالية رقم: 114 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمولد مناعي محتمل من ترانس المتوالية رقم: 115 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمولد مناعي محتمل من ترانس المتوالية رقم: 116 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة بمولد مناعي محتمل من ترانس
0 ثرتين. المتوالية رقم: 117 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Chothia-Kabat CDR-H1‏ المركبة للجسم المضاد الفأري 905.
— 2 5 —
المتوالية رقم: 118 توضح متوالية الحمض الأميني الخاصة ب ‎Chothia-Kabat CDR-H1‏
المركبة للجسم المضاد الفأري ‎14G8‏ ‏| لأجسام المضادة أحادية النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ أو الوحدات البيولوجية ‎GAY)‏ يتم ‎Gha 5‏ توفير في صورة معزولة. يعني هذا أن جسم مضاد أو وحدة بيولوجية أخرى يكون/تكون بشكل نمطى تقيًا/نقية بنسبة على الأقل 9650 وزن/وزن من البروتينات المتداخلة والملوثات الأخرى الناشئة من إنتاجه/إنتاجها أو تنقيته/تنقيتها إلا أن الأمر لا يستبعد إمكانية أن يتم دمج الجسم المضاد أحادي النسيلة مع قدر زائد من مادة (مواد) حاملة مقبولة صيدليًا أو مادة ناقلة ‎gal‏ مخصصة لتيسير استخدامه. في بعض الأحيان تكون الأجسام المضادة أحادية النسيلة نقية
0 بنسبة على الأقل 9660 9670 9680 9690؛ 9695 أو %99 وزن/وزن_ من البروتينات المتداخلة والملوثات من الإنتاج أو التنقية. ‎Ge‏ ما يكون جسم مضاد أحادي النسيلة معزول أو تكون وحدة بيولوجية أخرى عبارة عن الأنواع الجزيئية الكبيرة السائدة المتبقية بعد تنقيته/تنقيتها. يعني الارتباط النوعي لجسم مضاد بمولد ضد المستهدف الخاص به ألفة تبلغ على الأقل ‎C10‏ ‏0 » 10 * 10 "؛ أو 10 0 201. يكون الارتباط النوعي أعلى على قابل للكشف عنه في
السعة والقابلية للتميز عن الارتباط غير النوعى الحادث لهدف غير ذي ‎dla‏ واحد على الأقل. يمكن أن يكون الارتباط ‎esl)‏ هو نتاج تكوين روابط فيما بين مجموعات وظيفية معينة أو ملاءمة حيزية معينة (على سبيل المثال» من نوع قفل ومفتاح) بينما ‎Bile‏ ما يكون الارتباط غير النوعي هو نتاج قوى فان ير فالس ‎van der Waals forces‏ بالرغم من ذلك؛ ليس بالضرورة أن يلمح الارتباط النوعي إلى أن جسمًا مضادًا يرتبط بهدف واحد فقط لا غير.
0 تكون الوحدة البنائية الأساسية للجسم المضاد عبارة عن تترامر من وحدات فرعية. يتضمن كل تترامر اثنين من الأزواج المتطابقة من سلاسل بولي ‎chains ain‏ ع0010©0110» يحتوي كل زوج على سلسلة "خفيفة' واحدة (25كيلو دالتون) وسلسلة ‎"ald‏ واحدة )70-50 كيلو دالتون). يتضمن جزء الطرف الأميني من كل سلسلة منطقة متغيرة تبلغ من 100 إلى 110 أو أكثر من الأحماض الأمينية المسئولة بشكل أساسي عن التعّزف على مولد الضد. يتم ربط المنطقة المتغيرة هذه على
5 نحو معبر ‎Why die‏ بشكل أولي بببتيد إشارة قابل للانشطار. تتم في بعض الأحيان الإشارة إلى المنطقة المتغيرة بدون ببتيد الإشارة باعتبارها منطقة متغيرة ناضجة. ومن ثم على سبيل المثال»
تعني منطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة منطقة متغيرة بسلسلة خفيفة بدون ببتيد الإشارة بالسلسلة الخفيفة. يحدد ‎gia‏ الطرف كريوكسي ‎carboxy-terminal portion‏ من كل سلسلة منطقة ثابتة مسئولة بشكل رئيسي عن وظيفة مؤثر. يتم تصنيف السلاسل الخفيفة باعتبارها إما ‎kappa LS‏ أو لامدا 1000000 يتم تصنيف السلاسل الثقيلة باعتبارها جاما ‎emu (gamma‏ ألفا ‎calpha‏ دلتا ‎cdelta‏ أو إيبسيلون ‎epsilon‏ وتحدد النمط ‎Jalal!‏ للجسم المضاد باعتباره 186 ‎dgA dgM‏ 180 و185؛ على التوالي. داخل السلاسل الخفيفة والثقيلة» يتم ربط المناطق المتغيرة والثابتة بواسطة منطقة "7" تبلغ 12 أو أكثر من الأحماض الأمينية؛ مع تضمن السلسلة الثقيلة أيضًا منطقة "0" تبلغ 10 أو أكثر من الأحماض الأمينية. انظر بصفة عامة ‎Fundamental Immunology, Paul, W., ed., 2nd ed.
Raven‏ ‎Press, N.Y, 1989,Ch.7 0‏ (المتضمن كمرجع بأكمله لكافة الأغراض). تتكون منطقة متغيرة بسلسلة خفيفة أو ثقيلة لجلوبولين مناعي (تتم ‎Lind‏ الإشارة إليها هنا باعتبارها 'نطاق متغير بسلسلة خفيفة ‎"light chain variable domain‏ ('نطاق ‎("VL‏ أو ‎Gla‏ متغير بسلسلة ‎"heavy chain variable domain Ld‏ (نطاق 711")» على التوالي) من منطقة "إطار" تتم مقاطعتها بواسطة ثلاث ‎(dhl‏ محددة ‎complementarity determining regionsdle€a‏ " أو ‎CDRs" 5‏ تعمل مناطق الإطار على محاذاة ‎CDRs‏ للارتباط النوعي بقمة لاصقة خاصة بمولد ضد. تتضمن ‎CDRs‏ الوحدات البنائية للحمض الأميني الخاصة بجسم مضاد التي تكون مسئولة بشكل رئيسي عن ارتباط مولد الضد. من الطرف الأميني إلى الطرف الكريوكسيلي؛ يشتمل كل من نطاقات ‎VL‏ ونطاق ‎VH‏ على الإطار التالي ‎(FR)‏ ومناطق ‎(FR2 «CDRI «FRI :CDR‏ ‎.FR4 5 «CDR3 (FR3 «CDR2‏ تتم أيضًا الإشارة إلى 1 ‎«CDRs‏ 352 من نطاق ‎VL‏ هناء على 0 اتوالي؛ باعتبارها ‎«CDR-L2 «CDR-L1‏ و08-13©؛ تتم أيضًا الإشارة إلى 1 ‎«CDRs‏ 2 و3 الخاصة بنطاق ‎VH‏ هناء على التوالي؛ باعتبارقا ‎.CDR-H3 3 «CDR-H2 «CDR-H1‏ يكون تعيين الأحماض الأمينية إلى كل نطاق ‎Wy VH VL‏ لأي تعريف تقليدي ‎.CDRs J‏ تتضمن التعريفات التقليدية؛ تعريف ‎Kabat (Kabat, Sequences of Proteins of Immunological‏ ‎«Interest (National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1987 and 1991)‏ تعريف ‎Chothia‏ ‎Nature 342:878-883, 5‏ مله ‎(Chothia & Lesk, J.
Mol.
Biol. 196:901-917, 1987; Chothia et‏ 1989(€ مركب من ‎Chothia Kabat CDR‏ حيث تكون 001-111 عبارة عن مركب من ‎CDRs‏ من
— 2 7 — نوعي ‎¢Kabat 9 Chothia‏ تعريف ‎ADM‏ المستخدم بواسطة برنامج قولبة الجسم المضاد الخاص ب ‎¢Oxford Molecular‏ و تعريف التلامس الخاص ب ‎Martin et al (bioinfo.org.uk/abs)‏ (انظر جدول 1). يوفر ‎Kabat‏ ميثاق ترقيم مستخدم على نحو واسع (ترقيم ‎(Kabat‏ حيث يتم تعيين نفس الرقم للوحدات البنائية المناظرة فيما بين السلاسل الثقيلة المختلفة أو فيما بين السلاسل الخفيفة المختلفة. عندما يقال أن جسم مضاد يشتمل على ‎CDRs‏ بتعريف معين ل ‎CDRs‏ (على ‎daw‏ ‏المثال» ‎(Kabat‏ يُحدد ذلك التعريف العدد الأدنى من الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ الموجودة في الجسم المضاد (أي « ‎CDRs‏ من نوع ‎(Kabat‏ وهو لا يستثني وجود أيضًا وحدات بنائية ‎Gal‏ واقعة في نطاق تعريف ‎CDR‏ تقليدي ‎AT‏ ولكنها واقعة خارج نطاق التعريف المحدد. على سبيل المثال؛ يتضمن جسم مضاد مشتمل على ‎CDRs‏ محددة بواسطة ‎Kabat‏ من بين الاحتمالات الأخرى؛ 0 جممًا مضادًا حيث تحتوي ‎CDRs‏ على الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ من نوع ‎Kabat‏ ولا تحتوي على وحدات البنائية ل ‎CDR‏ أخرى؛ وجسمًا مضادًا حيث ‎CDR HI‏ تمثل 111 ‎Chothia-Kabat CDR‏ مركبة وتحتوي ‎CDRs‏ الأخرى على الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ من نوع ‎Kabat‏ ولا تحتوي على وحدات بنائية إضافية ل ‎CDR‏ معتمدة على التعريفات الأخرى. جدول 1 التعربفات التقليدية ل ‎CDRs‏ باستخدام ترقيم ‎Kabat‏ ‏مركب من ‎Chothia‏ ‏مب لي .م الحلقة | ‎Chothia Kabat‏ 1 | التلامس
Kabat
L30--L36 | L24--L34 L24--1.34 L24--1.34 L24--1.34
L46--L55 | L50--L56 L50--L56 L50--L56 L50--L56
L89--L96 | L89--L97 L89--L97 L89--L97 L89--L97
٠ 2 8 ٠ 1 ‏جدول‎ ‎Kabat ‏باستخدام ترقيم‎ CDRs ‏التعربفات التقليدية ل‎
Chothia ‏مركب من‎ ‏التلامس‎ ١ ApM 3 Chothia Kabat | ‏الحلقة‎ ‎Kabat ‎H30-- H26--
H26--H35B | H26--H35B* H31--H35B | 1
H35B H34*..H32
H47--H58 | H50--H58 H50--H65 H52--H56 H50--H65
H93--
H95--H102 | 1195-2 H95--H102 | H95--H102 | 3
H101 ‏أو 1134 (اعتمادًا على طول‎ <H33 <H32 ‏عند‎ Chothia ‏بواسطة‎ CDR-HI ‏يمكن أن تنتهي‎ * 35A ‏يضع عمليات إدراج لوحدات بنائية إضافية عند‎ Kabat ‏الحلقة). يكون هذا لأن مخطط ترقيم‎ 11358 ‏عند 318 و315. إذا لم يوجد أي من 11358 أو‎ Chothia ‏و355؛ بينما يضعها ترقيم‎ ‏فقطء فإنها تنتهي عند‎ H35A ‏عند 1132. إذا وجد‎ Chothia CDR-HI ‏تنتهي حلقة‎ «(Kabat ‏(ترقيم‎ 1133. إذا وجد كل من 11358 5 ‎(H35B‏ فإنها تنتهي عند 1134. يتضمن المصطلح "جسم مضاد" أجسام مضادة سليمة وشظايا ربط منها. ‎«Gla‏ تتنافس الشظايا مع الجسم المضاد السليم الذي تم اشتقاقها منه للارتباط النوعي بالهدف متضمنة السلاسل الثقيلة المنفصلة؛ السلاسل الخفيفة ‎<Fab' «Fab‏ د(طة)» ع(طة)» ‎(Dabs‏ الأجسام بحجم النانو؛ وبمكن إنتاج شظايا ‎Fv.‏ بواسطة تقنيات ‎DNA‏ لناتج عودة الاتحاد الجينى؛ أو عن طريق الفصل ‎١‏ لإنزيمي 0 أو الكيميائي للجلويولينات المناعية السليمة ‎intact immunoglobulins‏ يتضمن ‎Wiad‏ المصطلح
"الجسم المضاد" ‎lass‏ مضادًا ثنائي النوعية و/أو جسمًا مضادًا متوافتًا مع البشر. يكون جسم مضاد ثنائي النوعية أو ثنائي الوظائف ‎Ble‏ عن جسم مضاد هجين صناعي به اثنين من أزواج سلسلة تثقيلة/خفيفة مختلفة واثنين من مواقع ‎dal‏ المختلفة (انظر » على سبيل المثال» ‎Songsivilai‏ ‎and Lachmann, Clin.
Exp.
Immunol., 79:315-321 (1990); Kostelny et al., J.
Immunol.,‏ (1992) 148:1547-53). في بعض من الأجسام المضادة ثنائية النوعية؛ يتضمن الاثنان من أزواج سلسلة ثقيلة/خفيفة مختلفة زوجًا من سلسلة ثقيلة/سلسلة خفيفة ل 905 متوافق مع البشر وزوجًا من سلسلة ثقيلة/سلسلة خفيفة نوعي لقمة لاصقة مختلفة على ترانس ثيرتين عن تلك المرتبطة بواسطة 5. في بعض من الأجسام المضادة ثنائية النوعية؛ يتضمن الاثنان من أزواج سلسلة ثقيلة/خفيفة مختلفة زوجًا من سلسلة ثقيلة/سلسلة خفيفة ل 1468 متوافق مع البشر وزوجًا من سلسلة 0 ثقيلة/سلسلة خفيفة نوعي لقمة لاصقة مختلفة على ترانس ثيرتين عن تلك المرتبطة بواسطة 1408. في بعض من الأجسام المضادة ثنائية النوعية؛ يكون زوج من سلسلة ثقيلة/سلسلة خفيفة واحد ‎Ble‏ عن جسم مضاد 905 أو 1408 متوافق مع البشر كما يتم الكشف ‎aie‏ بشكل إضافي ‎lad‏ ‏يلي ويكون الزوج من السلسلة الثقيلة/السلسلة الخفيفة الآخر من جسم مضاد يرتبط بمستقبل تم التعبير ‎Gilg‏ عنه على الحائلٌ ‎¢blood brain barrier ele (eyed)‏ مثل مستقبل أنسولين ‎insulin receptor 5‏ مستقبل ‎Jalal‏ نمو شبيه بالأنسولين ‎«(IGF) insulin-like growth factor‏ مستقبل لبتين ‎deptin receptor‏ أو مستقبل بروتين شحمي ‎ clipoprotein receptor‏ مستقبل ترانسفيرين ‎Friden et al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 88:4771-4775, ) transferrin receptor‏ ‎Friden et al., Science 259:373-377, 1993‏ :1991). يمكن نقل هذا الجسم المضاد ثنائي النوعية عبر الحائّل ‎eld fall‏ عن طريق النقل عبر الخلايا الناتج عن مستقبل. يمكن تعزيز امتصاص المخ للجسم المضاد ‎Su‏ النوعية عن طريق هندسة الجسم المضاد ثنائي النوعية لتقليل ألفته تجاه مستقبل ‎{ead lal)‏ اليّماغِئئ. أدت الألفة المخفضة للمستقبل إلى توزيع أشمل في المخ (انظر « على سبيل المثال» ‎Atwal et al., Sci.
Trans.
Med. 3, 84rad3, 2011; Yu et al.,‏ ‎(Sci.
Trans.
Med. 3, 84rad4, 2011‏ . يمكن ‎Wad‏ أن تكون الأجسام المضادة ثنائية النوعية التوضيحية عبارة عن: )1( جسم مضاد 5 بنطاق-متغير مزدوج ‎(DVD-Ig) dual-variable-domain antibody‏ ؛ حيث تحتوي كل سلسلة خفيفة وسلسلة_ثقيلة على اثنين من النطاقات المتغيرة ‎Galil‏ خلال رابط ببتيد قصير ‎Generation and Characterization of a Dual Variable Domain Immunoglobulin (DVD-)‏
‎¢(Ig™) Molecule, In: Antibody Engineering, Springer Berlin Heidelberg (2010)‏ )2( ‎(Tandab‏ الذي يمثل اندماجًا لاثنين من الأجسام المزدوجة ذات السلسة الفردية يؤدي إلى جسم مضاد ثنائي النوعية = التكافؤ يشتمل على اثنين من مواضع الريط لكل من مولدات الضد المستهدفة؛ (3) جسم ‎Jia (Ope‏ توليفة من 50175 مع جسم ثنائي تؤدي إلى جزيء متعدد التكافؤ؛ (4) ما يُطلق عليه جزيء "إرساء وقفل"» اعتمادًا على 'نطاق دايمرة والتحام” في بروتين كيناز ‎A‏ ‏الذي؛ عند تطبيقه على ‎Fabs‏ يمكن أن يؤدي إلى الحصول على بروتين ارتباط ثنائي النوعية ثلاثي التكافؤ يتكون من اثنتين من شظايا ‎Fab‏ المتطابقة المرتبطة بشظية ‎Fab‏ مختلفة؛ أو )5( ما يُطلق عليه جزيء ‎Scorpion‏ يشتمل؛ على سبيل ‎«Jal‏ على اثنين من 8-15 ملتحمين بكل من طرف يمنطقة ‎Fe‏ بشرية. تتضمن أمثلة على المنصات المفيدة لتحضير الأجسام المضادة ثنائية 0 النوعية ‎IgGl «<Mab2 (F-star) s Fcab (DART (MacroGenics) «BiTE (Micromet)‏ معدل
‏وراثيًا باستخدام ‎Fc (Xencor)‏ أو ‎DuoBody‏ (اعتمادًا على تبادل الذراع ‎.(Genmab «Fab‏ المصطلح ‎"deal Ad‏ يشير إلى موقع على مولد ضد يرتبط به جسم مضاد. يمكن تكوين قمة لاصقة من الأحماض الأمينية المتجاورة أو الأحماض الأمينية غير المتجاورة الموضوعة ‎Gis‏ إلى جنب عن طريق الطي الثلاثي لواحد أو أكثر من البروتينات. يتم نمطيًا احتجاز القمم اللاصقة 5 المتكونة من الأحماض الأمينية المتجاورة (المعروفة أيضًا باعتبارها ‎ad‏ لاصقة خطية) عند التعئض إلى ‎clude‏ مغيرة للصفات الطبيعية بينما يتم نمطيًا فقد القمم اللاصقة المتكونة عن طريق الطي ‎SOU‏ (المعروفة ‎Lia‏ باعتبارها قمم لاصقة تشكيلية) عند العلاج باستخدام مذيبات مغيرة للصفات الطبيعية. تتضمن ‎dad‏ لاصقة تمطيًا على الأقل 3 ‎dog‏ نحو ‎ine‏ بصورة أكبرء على الأقل 5 أو 10-8 من الأحماض الأمينية في تشكيل فراغي متميز. تتضمن طرق تحديد 0 التشكيل الفراغي للقمم اللاصقة؛ على سبيل ‎pest (JE‏ البِلوراتِ ‎xray And) ARYL‏ ‎crystallography‏ والرنين المغناطيسي النووي ثنائي الأبعاد ‎2-dimensional nuclear magnetic‏ ‎.resonance‏ انظرء على سبيل المثال؛ من ‎Epitope Mapping Protocols, in Methods‏ ‎«Molecular Biology, Vol. 66, Glenn E.
Morris, Ed. (1996)‏ يمكن أن تكون القمة اللاصقة خطية؛ مثل قمة لاصقة؛ على سبيل المثال. من 5-2 5-3 9-3 أو 9-5 من الأحماض 5 الأمينية المتجاورة من المتوالية رقم: 109. يمكن ‎Wad‏ أن تكون القمة اللاصقة عبارة عن قمة لاصقة تشكيلية متضمنة؛ على سبيل المثال؛ اثنين أو أكثر من المقاطع غير المتجاورة الخاصة
‏بالأحماض الأمينية داخل الوحدات البنائية 97-89 من المتوالية رقم: 109.
إذا ذُكر أن جسمًا مضادًا يرتبط بقمة لاصقة داخل الأحماض الأمينية 97-89 الخاصة بترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ على سبيل المثال؛ فإنه يُعنى أن القمة اللاصقة تكون واقعة في النطاق المذكور للأحماض الأمينية متضمنة تلك التي تحدد الحدود الخارجية الخاصة بالنطاق. ليس بالضرورة أن يعني ذلك أن كل حمض أميني في حدود النطاق يُشكل جزءًا من القمة اللاصقة. ومن ‎odd‏ على سبيل المثال؛ قد تتكون قمة لاصقة واقعة داخل الأحماض الأمينية 97-89 ل ‎TTR‏ من الأحماض الأمينية 97-89 96-89 96-90 96-91 96-92 96-93 96-94 96-89 89- 95 94-89 93-89 92-89 أو 93-89 من بين مقاطع خطية أخرى خاصة بالمتوالية رقم: 113 في حالة قمم لاصقة تشكيلية؛ المقاطع غير المتجاورة الخاصة بالأحماض الأمينية
للمتوالية رقم؛ 113.
0 يمكن تعريف الأجسام المضادة التي تتعرف على نفس القمم اللاصقة أو القمم اللاصقة المتراكبة في مقايسة مناعية بسيطة تُظهر قدرة جسم مضاد واحد للتنافس مع ارتباط جسم مضاد آخر بمولد ضد مستهدف. يمكن أيضًا ان تكون القمة اللاصقة الخاصة بجسم مضاد عبارة عن تضوير ‎Bad) 8250 cls‏ محدد للجسم المضاد المرتبط بمولد الضد الخاص به لتحديد وحدات التلامس البنائية. على نحو بديل؛ يكون لاثنين من الأجسام المضادة نفس القمة اللاصقة إذا قامت
5 كل طفرات الحمض الأميني في مولد الضد التي تقلل من أو تزيل ارتباط الجسم المضاد الواحد بتقليل أو إزالة ارتباط الآخر. يكون لاثنين من الأجسام المضادة قمم لاصقة متراكبة إذا قامت بعض من طفرات الحمض الأميني التي تقلل من أو تزيل ارتباط الجسم المضاد الواحد بتقليل أو ‎ally)‏ ارتباط الآخر. يتم تحديد التنافس فيما بين الأجسام المضادة بواسطة تجرية حيث يقوم جسم مضاد خاضع
‎lad 0‏ بتثبيط الارتباط النوعي لجسم مضاد مرجعي بمولد ضد مشترك ‎lil)‏ على سبيل المثال» 1990 ,50:1495 ‎(Junghans er al., Cancer Res.‏ يتنافس جسم مضاد خاص بالاختبار مع جسم مضاد مرجعي إذا قام قدر زائد من جسم مضاد خاص بالاختبار (على سبيل المثال» على الأقل 2 مرة» 5 مرة؛ 10 مرة؛ 20 مرة أو 100 مرة) بتثبيط ارتباط الجسم المضاد المرجعي بمقدار على الأقل 9650 كما هو مقاس في مقايسة ريط تنافسي. تقوم بعض من الأجسام المضادة
‏5 الخاصة بالاختبار بتثبيط ارتباط مرجعيات الأجسام المضادة بمقدار على الأقل 9675 9690 أو 9. تتضمن الأجسام المضادة المحددة بواسطة تجرية التنافس (الأجسام المضادة المتنافسة) الأجسام المضادة المرتبطة بنفس القمة اللاصقة مثل الجسم المضاد المرجعي والأجسام المضادة
— 3 2 —
المرتبطة ‎dais‏ لاصقة مجاورة قريبة ‎gan‏ كافى للقمة ‎daa]‏ المرتبطة بالجسم المضاد المرجعى
لحدوث الإعاقة الفراغية.
المصطلح "طبيعي" ‎Led‏ يتعلق بالترانس ثيرتين التركيبي ‎(TTR)‏ يشير إلى التركيب المطوي
الطبيعي الخاص ب ‎TTR‏ في الحالة الوظيفية الملائمة الخاصة بها (أي؛ تترامر ‎(TTR‏ عندما تكون ‎Ble TTR‏ عن تترامر في الصورة المطوية على نحو طبيعي لها؛ تتضمن الصور غير
الطبيعية من ‎(TTR‏ على سبيل ‎(JE‏ تترامرات ‎TTR‏ مطوية بشكل ‎hla‏ موتومرات ‎(TTR‏
الصور المكدسة من ‎«TTR‏ والصور اللييفية من ‎TTR‏ يمكن أن تتضمن الصور غير الطبيعية من
‎TTR‏ جزيئات تشتمل على متواليات الحمض الأميني أو الطفرات الخاصة ب ‎TTR‏ من النوع غير
‏المعالج.
‏0 المصطلح "مطوية على نحو خاطئ” فيما يتعلق ب ‎TTR‏ يشير إلى التركيب الثانوي أو الثلاثي الخاص ب مونومر أو متعدد الوحدات من بولي ببتيد ل ‎(TTR‏ ويوضح أن البولي ببتيد قد اتخذ تشكيلاً ليس طبيعيًا لذلك البروتين في الحالة الوظيفية الملائمة له. بالرغم من أن الطى الخاطئ ل ‎TTR‏ يمكن أن ينتج بواسطة طفرات في البروتين (على سبيل المثال؛ الحذف؛ الاستبدال» أو الإضافة)؛ يمكن ‎Waal‏ طي بروتينات ‎TTR‏ من النوع غير المعالج على نحو خطائ في الأمراض؛
‏15 مما يكشف القمم اللاصقة النوعية. المصطلح 'مقبول صيدليًا" يعني أن المادة الحاملة؛ ‎salad)‏ المخففة؛ ‎loud)‏ أو العامل المساعد تكون متوافقة/يكون ‎Wisi‏ مع المكونات الأخرى الخاصة بالصيغة وغير ضارة/ضار إلى حدٍ كبير بانسبة للمتلقى. المصطلح ‎"aye‏ يتضمن إنسان والكائنات الثديبة الأخرى التي تتلقى إما ‎le‏ وقائيًا أو دوائيًا.
‏0 يكون أحد الأفراد على خطر متزايد أن يعاني من مرض إذا الخاضع للعلاج يعاني من عامل واحد على الأقل من عوامل الخطر المعروفة (على سبيل المثال؛ جيني؛ بيولوجي كيميائي؛ تاريخ عائلي» وطريقو تعرّض ظرفية) اتي تضع الأفراد الذي لديهم عامل خطورة متزايد عند خطر أكبر من الناحية الإحصائية لظهور المرض مقارنة بالأفراد بدون عامل الخطر.
‏المصطلح ‎die’‏ بيولوجية" يشير إلى عينة من مادة بيولوجية داخل أو قابلة للحصول عليها من 5 مصدر بيولوجي؛ على سبيل المثال إنسان أو كائن ثديي. يمكن أن تكون هذه العينات عبارة عن
أعضاء؛ عُضَيَّات؛ أنسجة؛ قطاعات من أنسجة؛ موائع جسدية؛ دم محيطي؛ بلازما ‎taal)‏ مصل ‎pal‏ الخلاياء جزيئات ‎Jie‏ البروتينات والببتديات؛ ‎Aly‏ أجزاء أو توليفات مشتقة من ذلك. يمكن ايضًا أن يشتمل المصطلح عينة بيولوجية على أية مادة مشتقة عن طريق معالجة العينة. يمكن ان تتضمن المادة المشتقة الخلايا أو النسل الخاص بها. قد تنطوي معالجة العينة البيولوجية على واحدة أو أكثر من الترشيح؛ ‎ull‏ الاستخلاص» التركيز؛ التثبيت» إلغاء تنشيط المكونات
التداخلية؛ وما شابه. المصطلح ‎due”‏ مقارنة" يشير إلى ‎de‏ بيولوجية غير معروف أو ليس هناك شك في تضمنها صور مونومرية»؛ مطوية على نحو خاطئ؛ مكدسة؛ أو لييفية من ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ مثل في رواسب ‎TTR‏ النشوانية. يمكن الحصول على ‎cle‏ المقارنة من الأفراد غير المصابين بداء
‎sis 10‏ ناتج عن ‎TTR‏ أو نوع مختار تحديدًا من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ على نحو بديل؛ يمكن الحصول على عينات المقارنة من المرضى المصابين بالداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ أو نوع مختار تحديدًا من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ يمكن الحصول على هذه العينات في نفس الوقت مثل ‎die‏ بيولوجية يُعتقد أنها تشتمل على الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ أو في موقف مختلف. يمكن الحصول على كل من عينة بيولوجية وعينة مقارنة من نفس النسيج (على سبيل
‏5 المثال؛ قطاع نسيج محتوي على كل من رواسب ‎TTR‏ النشوانية والنسيج الطبيعي المحيط ). على نحو مفضل؛ تتكون عينات المقارنة بشكل أساسي أو بشكل تام من نسيج خالي من رواسب ‎TTR‏ ‏التشوانية ويمكن استخدامها في مقارنة مع عينة بيولوجية يُعتقد أن تشتمل على رواسب ‎TTR‏ ‏النشوانية. على نحو مفضل؛ يكون النسيج في عينة المقارنة هو نفس النوع ‎fie‏ النسيج في العينة البيولوجية ‎le)‏ سبيل المثال؛ الخلايا العضلية القلبية في القلب).
‏0 المصطلح "مرض” يشير إلى أية حالة شاذة تُعيق الوظيفة الفيزيولوجية. يتم استخدام المصطلح على نحو موسع ليشتمل على أي اضطراب؛ علة؛ شذوذء سبب مرضيء ‎(Piel‏ حالة؛ أو متلازمة حيث تتم إعاقة الوظيفة الفيزيولوجية؛ بغض النظر عن طبيعة الأسباب وراء ذلك. المصطلح ‎"gm!‏ يشير إلى دليل شخصاني على مرض؛ ‎dda Jie‏ متغيرة؛ كما يُدرك الخاضع للعلاج. "إشارة” يشير إلى دليل موضوعي على مرض كما هو ملاحظة بواسطة طبيب.
‏5 لأغراض تتعلق بتصنيف مجموعات استبدال الأحماض الأمينية باعتبارها محافظة أو غير محافظة؛ يتم تجميع الأحماض الأمينية في مجموعات كالتالي: المجموعة 1 (السلاسل الجانبية
— 4 3 — غير الآلفة للماء ‎tile cleu eval ¢ala «met (hydrophobic side chains‏ المجموعة 2 (السلاسل الجانبية الآلفة للماء المحايدة ‎thr eser cys :(neutral hydrophilic side chains‏ المجموعة 3 (السلاسل الجانبية الحمضية ‎flu asp :(acidic side chains‏ المجموعة 4 (السلاسل الجانبية القاعدية ‎casn :(basic side chains‏ صاع» ‎chis‏ #نراء ‎targ‏ المجموعة 5 (اتجاه السلسة المؤثر على الوحدات البناثية ‎«gly :(residues influencing chain orientation‏ 0:0؛ والمجموعة 6 (السلاسل الجانبية العطرية ‎tyr «trp :(aromatic side chains‏ عام. تنطوي مجموعات الاستبدال المحافظة على مجموعات استبدال فيما بين الأحماض الأمينية فى نفس الفئة. تُشكل مجموعات الاستبدال غير المحافظة تبادل عضو من واحدة من هذه الفئات بعضو أخر. يتم تحديد النسبة المئوية لتطابقات المتوالية باستخدام متواليات الجسم المضاد متحاذية على النحو 0 الأقصى بواسطة ميثاق ترقيم ‎(Kabat‏ بعد المحاذاة؛ إذا تمت مقارنة منطقة جسم مضاد خاصة بخاضع للعلاج (على سبيل المثال؛ المنطقة المتغيرة الناضجة بأكملها الخاصة بسلسلة ثقيلة أو مناطق الجسم المضاد الخاص بالخاضع للعلاج والجسم المضاد المرجعي عدد المواضع المشغولة بواسطة نفس الحمض الأميني في كل من منطقة الجسم المضاد الخاص بالخاضع للعلاج والجسم 5 المضاد المرجعي مقسومًا على إجمالي عدد المواضع المتحاذية الخاصة بالمنطقتين؛ مع عدم عد الفجوات» ‎Bg pine‏ في 100 للتحويل إلى النسبة المئوية. قد تتضمن التركيبات أو الطرق " تشتمل على" أو 'تتضمن” واحدًا أو أكثر من العناصر المذكورة عناصر أخرى غير مذكورة ‎Ian‏ ( خاص . على سبيل المثال قد تحتوي تركيبة ‎oe‏ تشتما ( على" أو 'تتضمن" جسمًا مضادًا على الجسم المضاد بمفرده أو في توليفة مع مكونات أخرى. 0 يتضمن تعيين نطاق من القيم كل الأعداد الصحيحة الواقعة داخل النطاق أو المحددة ‎cal‏ وكل النطاقات الفرعية المحددة بواسطة الأعداد الصحيحة الواقعة في النطاق. ما لم يتضح شيء بخلاف ذلك من السياق؛ المصطلح "حوالي” يشتمل على قيم في حدود هامش قياسي خطأ الملاحظة ‎Ae) standard margin of error of measurement‏ سبيل المثال» ‎(SEM‏ ‏لقيمة مذكورة. 5 تعني الدلالة الإحصائية ‎p‏ > 0.05.
— 3 5 —
تتضمن صور المفرد من الأدوات الإشارات إلى الجمع ما لم ‎das‏ السياق بوضوح أمرًا بخلاف ذلك. على سبيل المثال؛ يمكن أن يتضمن المصطلح "مركب" أو "مركب واحد على الأقل" عديدًا من المركبات؛ متضمنة خلائط منها.
الوصف التفصيلى:
1. عام
يوفر الاختراع أجسامًا مضادة ترتبط بشكل خاص بالوحدات ‎Asli‏ 97-89 من ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ يكون للأجسام المضادة القدرة على الارتباط بالصور المونومرية ‎monomeric‏ المطوية بشكل خاطئ. المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ يمكن استخدام الأجسام المضادة لعلاج أو تفعيل الوقاية من الأمراض أو الاضطرابات المصحوية بتراكم ‎TTR‏ أو تراكم رواسب ‎TTR‏ (على سبيل
0 المثال؛ الداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ يمكن أيضًا استخدام الأجسام المضادة لتشخيص الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ وتثبيط أو خفض تَكَدْس ‎(TTR‏ من بين تطبيقات أخرى.
2. الجزبئات المستهدفة يكون ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ عبارة عن 127 حمض ‎canal‏ مصل 55 كيلو دالتون ويروتين ناقل للسَائِن ‎peal fall)‏ مخلّق بشكل رئيسي بواسطة الكبد. لقد تمت الإشارة إليه ‎Load‏ باعتباره
‎bea 5‏ لألبومين متسب طلهع:م ‎(le‏ ألبومين رايط للثيروكسين ‎thyroxine binding prealbumin‏ ¢ 111 و15/8. في الحالة الحساسة ‎cal‏ يوجد ‎TTR‏ في صورة ‎tetramer jel ji‏ . في الزيجوث ‎chomozygotes JY Abas‏ تشتمل التترامرات على وحدات فرعية متطابقة غني ‎Aha‏ بيتا ل 7 حمض أميني ‎٠‏ في الزيجوث غير ‎IVA ABLE‏ » يتم إعداد تترامرات ‎TTR‏ من وحدات فرعية مغايرة و/أو من النوع غير المعالج؛ نمطيًا مدمجة بطريقة إحصائية.
‏0 تثثل الوظيفة الأساسية ل ‎TTR‏ في ‎pall‏ في نقل بروتين رابط للرّبتينول الكامل. بالرغم من أن ‎TTR‏ يعتبر الحامل الرئيسي ‎(Ts) thyroxine CaS g pill‏ في دم القوارض؛ باستخدام مواقع الريط التي تكون متعامدة على تلك المستخدمة للبروتين الرابط للريتينول الكامل ‎holo-retinol binding‏ ‎protein‏ «تكون مواقع ‎Ty dal‏ غير مشغولة على نحو فعال في ‎f‏ لإنسان .
يعتبر ‎TTR‏ واحدًا من ثلاثين بروتين بشري مختلف على الأقل يُعتقد أن الطي الخاطئ و/أو التجميع الخاطئ لها خارج الخلايا (التخليق النشواني) في طيف من البنى المكدسة يتسبب في أمراض تنكسية تتم الإشارة إليها باعتبارها أمراض نشوانية. يخضع ‎TTR‏ بتغيرات تشكيلية من أجل أن يصبح مؤلدًا للمادة النشوانية. يكشف فك ‎all‏ الجزئي تمددادت من الوحدات البنائية غير الآلفة للماء غير المتغيرة بشكل كبير في تشكيل ممتد تتجمع بشكل خاطئ على نحو كاف في تكدسات فراغية غير بنيوية بشكل كبير تخضع في نهاية الأمر إلى تحوّل في التشكيل إلى بنى نشوانية بصَحيفَةٌ بيتا متقاطعة. ما لم يتضح ‎lls‏ ما يخالف ذلك من السياق؛ تتضمن الإشارة إلى ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ أو الشظايا أو النطاقات الخاصة به متواليات الحمض الأميني البشرية الطبيعية متضمنة الصور 0 المماثلة؛ الطفرات؛ وصور الأليل المغايرة منها. يتم التدليل على متواليات بولي ببتيد ‎TTR‏ ‏التوضيحية بواسطة أرقام الوصول ‎(UniProt)‏ 02766.1ط ‎(AAB35639.1 (GenBank)‏ ‎ABI63351.1 (GenBank) 5 <AAB35640.1 (GenBank)‏ (المتواليات أرقام: 112-109 على التوالي). يتم ترقيم الوحدات البنائية ‎dy‏ ل ‎«Swiss Prot P02766.1‏ مع التدليل على الحمض الأميني الأول من البروتين الناضج (أي؛ غير المتضمن متوالية الإشارة من 20 حمض أميني) 5 باعتباره الوحدة البنائية 1. في أي بروتين ‎TTR‏ آخرء يتم ترقيم الوحدات البنائية وفقًا للوحدات البنائية المناظرة في 002766.1 على أقصى محاذاة. 3. الداء النشواني الناتج عن ترانس ثيرتين يكون الداء النشواني الناتج عن ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ عبارة عن اضطراب جهازي يتميز ب ‎TTR‏ ‏مطوي على نحو خاطئ مسبب للمرض والترسيب خارج الخلايا للييفات النشوانية المتكونة من ‎TTR 20‏ يحدث بصفة عامة الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ عن طريق إزالة ثبات صورة تترامر ‎TTR‏ الطبيعي (بسبب الظروف البيئية أو الجينية)؛ مما يؤدي إلى انفصال؛ طي خاطئ؛ ‎Sg‏ ل ‎TTR‏ إلى اللييفات النشوانية التي تتراكم في الأعضاء والأنسجة المتنوعة؛ مما يتسبب في خلل وظيفية متقدم. ‎hal‏ ¢ على سبيل المثال» 586:2891-2896 ‎Almeida and Saraiva, FEBS Letters‏ ‎Ando et al., Orphanet Journal of Rare Diseases 8:31 (2013)‏ :(2012). في الإنسان؛ يمكن أن ينفصل كل من تترامرات ‎TTR‏ من النوع غير المعالج والتترامرات المختلطة المكونة من طفرة ووحدات فرعية من نوع غير معالج؛ يتم طيه بشكل خاطئ؛ ويتكدس؛ إذ تؤدي
عملية التخليق النشواني إلى تنكس النسيج بعد ‎BEI‏ ومن ‎ed‏ تشتمل الأمراض النشوانية الناتجة عن ‎TTR‏ على الأمراض الحادثة بواسطة ‎TTR‏ المطوي على نحو خاطئ المسبب للمرض الناتج من طفرات في ‎TTR‏ أو الناتج من ‎TTR‏ مطوي على نحو خاطئ غير مُطفُر. على سبيل المثال؛ يعتبر الداء النشواني المجموعي ‎(SSA) Asal‏ والداء النشواني القلبي الشَيخُوخِيَ ‎(SCA)‏ هما أنواع مرتبطة بالسن من الداء النشواني تنتج من ترسيب ‎TTR‏ نشواني من النوع غير المعالج خارج وداخل الخلايا العضلية القلبية الخاصة بالقلب. يعتبر الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ هو ‎Lad‏ الصورة الأكثر شيوعًا من الداء النشواني الوراثي (العائلي)؛ الذي يحدث بواسطة ‎bib‏ تؤدي إلى إزالة تثبيت بروتين ‎TTR‏ تتضمن الأمراض النشوانية الناتجة عن ‎TTR‏ ‏المصحوبة بطفرات إلى نقطة معينة في جين ‎(TTR‏ اعتلال الأعصاب النشواني ‎Lad) ble‏ ‎«(FAP) 0‏ اعتلال عضلة القلب النشواني عاتلي المنشاً ‎(FAC)‏ والداء النشواني الانتقائي للجهاز العصبي المركزي النادر ‎L(ONSA)‏ في الأغلب الأعم يكون المرضى الذي يعانون من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ الوراثي ‎(ll)‏ متغايرو الزيجوت؛ مما يعني أنه يتم تكوين تترامرات ‎TTR‏ من طفرة و/أو وحدات فرعية ل ‎TTR‏ من النوع غير المعالج؛ موزعة إحصائيًا بصفة عامة. تكون الأنواع الرواثية (العائلية) من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ بصفة ‎dale‏ ذات صبغ جسدي 5 سائد وتكون نمطيًا أسبق من حيث الظهور مقارنة بالأمراض القْراِيّة ‎SSA)‏ وحه0؟). هناك أكثر من 100 طفرة في الجين الذي يقوم بتشفير ‎TTR‏ الذي قد تم تضمينه في الاضطرابات ذات الصبغ الجسدي السائد ‎«lil (FACS FAP‏ على سبيل ‎US «Jad‏ ‎Saraiva, Hum.
Mutat. 17(6):493-503 (2001); Damas and Saraiva, J. ¢2014/0056904‏ ‎Struct.
Biol. 130:290-299; Dwulet and Benson, Biochem.
Biophys.
Res.
Commun.‏ (1983) 114:657-662. يتم توزيع هذه الطفرات المسببة للنشوانية خلال جزيء ‎TTR‏ بأكمله. بصفة ‎dle‏ كلما زادت إزالة تثبيت الوحدات الفرعية للطفرة بالنسبة لبنية التترامر ‎TTR‏ كان ظهور المرض النشواني أبكر. يتم بصفة عامة تحديد الاحتمال المسبب للمرض الخاص بصورة مغايرة من ‎TTR‏ بواسطة توليفة من عدم ثباته وكفاءة الإفراز الخلوي له. ‎Lay‏ السبب المرضي الأولي الناتج بواسطة بعض من صور ‎TTR‏ مغايرة من تدميرها الانتقائي للنسيج القلبي؛ بينما ‎La‏ تلك 5 الناتجة من صور ‎TTR‏ مغايرة أخرى من تعريض الجهازين العصبيين الطرفي والمستقل للخطر. يبدو أن تلف النسيج الحادث بواسطة التخليق النشواني ل ‎TTR‏ ينشاً بشكل كبير من سُمية تكدسات ‎TTR‏ الصغيرة القابلة للانتشار» بالرغم من أن تراكم المادة النشوانية خارج ‎DIAN‏ قد يُسهم في وفي
الأغلب يؤدي إلى تعريض بنية العضو إلى الخطر في المراحل الأخيرة من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏يوجد الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ في العديد من الصور المختلفة؛ مع تنوع كبير في النمط الظاهري عبر الأفراد والمواقع الجغرافية. على سبيل ‎«JB‏ يمكن أن يوجد الداء النشواني الناتج عن ‎STIR‏ صورة اعتلال عصبي محوري مستقل حسي وحركي متقدم. يمكن أيضًا أن يوجد الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ في صورة اعتلال عضلي قلبي ارتشاحي. يتنوع السن عند ظهور الأعرارض ذات الصلة بالمرض فيما بين العقد الثاني والتاسع من ‎and)‏ ‏مع وجود تنوعات كبيرة عبر مجموعات السكان المختلفة. يعتبر تضمين نظم متعددة من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ مفتاحًا لتشخيصه. على سبيل المثال؛ يتم الأخذ في الاعتبار تشخيص 0 الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ عند وجود واحد أو العديد مما يلي: (1) تاريخ في العائلة لمرض اعتلال عصبي؛ ‎duals‏ المصاحب لقصور القلب؛ (2) الألم الناتج عن الاعتلال العصبي أو الاضطرابات الحسية المتقدمة مجهولة الأسباب المرضية؛ (3) مُتَلاَزِمَةٌ ‎GAN‏ الرُُسْغِي بدون سبب واضح؛ تحديدًا إذا كانت ثنائية الجانب وتتطلب إزالة الضغط جراحيًا؛ (4) اضطرابات حركة المعدة والأمعاء أو خلل وظيفة العصب المستقل مجهول الأسباب المرضية ‎le)‏ سبيل المثال» خلل ‎ai diel aly 5‏ صضَغْطِ ‎olay) WA‏ مثانة عصبية)؛ (5) مرض قلبي يتميز بجدران البطين السميكة في عدم وجود ضغط دم مفرط؛ (6) إحصار الأذين-البطين المتقدم غير معلوم ‎Lal‏ تحديدًا عندما يكون مصحويًا بقلب سميك؛ و(6) مشتملات الجسم الزجاجي من النوع القطني ‎٠.‏ انظر )2013( 8:31 ‎Journal of Rare Diseases‏ 0170/1011261. يمكن أن تتضمن الأعراض الأخرى؛ على سبيل ‎(Jad‏ اعتلال الأعصاب المتعدد؛ فقد ‎al) all‏ ضعف في الأطراف 0 السفلية؛ ‎CIA‏ 350( الإسهال؛ الإمساك؛ فقد الوزن وسلس/احتباس البول. يعتمد تشخيص الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ نمطيًا على خزعات من العضو المستهدف؛ متبوعة بالتلوين الهيستولوجي للنسيج المستأصل باستخدام صبغة خاصة بالمادة النشوانية» ‎Congo‏ ‎red‏ إذا تمت ملاحظة اختبار إيجابي للمادة النشوانية؛ يتم بعد ذلك إجراء التلوين الهيستولوجي الكيميائي المناعي ل ‎TTR‏ لضمان أن يكون بروتين المادة المنتجة المسئولة عن تكوين المادة 5 النشوانية هو بالفعل ‎TTR‏ بالنسبة للصور العائلية من الأمراض؛ تكون هناك حاجة لإيضاح وجود طفرة في الجين الذي يقوم بتشفير ‎TTR‏ قبل أن يتم عمل التشخيص. يمكن إتمام هذاء على سبيل
‎Jal‏ من خلال الاستشراد الكهربي ‎JUL‏ متساوي التكهرب؛ تفاعل سلسلة بوليمراز» أو التشريح بالليزر/استشراب سائل-قياس الطيف الكتلي الترادافي. انظرء على سبيل المثال؛ ‎US‏ ‎Ruberg and Berk, Circulation 126:1286-1300 (2012); Ando et al., ¢2014/0056904‏ ‎.Orphanet Journal of Rare Diseases 8:31 (2013)‏ 4. الأجسام المضادة
أ. نوعية الارتباط والخصائص الوظيفية يوفر الاختراع أجسامًا مضادة أحادية النسيلة مرتبطة ببروتين ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ بشكل أكثر تخصيصًاء بالقمم اللاصقة في الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89 (المتوالية رقم: 113) ل ‎TTR‏ يتم إخفاء هذه القمم اللاصقة في تترامر ‎TTR‏ الطبيعي وكشفها في الصور المونومرية؛
0 المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللبيفية من ‎TTR‏ ‏تكون الأجسام المضادة المحددة ب 9005 و1468 عبارة عن اثنين من هذه الأجسام المضادة لفأر التوضيحية. ما لم يتضح ‎Le Ula‏ يخالف ذلك من ‎clad)‏ ينبغي إدراك الإشارة إلى 905 أو 8 باحتبارها إشارة إلى أي من الصور الخاصة ‎la‏ الخيمرية؛ المُموّهة؛ المتوافقة مع البشر من هذه الأجسام المضادة. ترتبط هذه الأجسام المضادة بشكل نوعي في الوحدات البنائية للحمض
5 الأميني 97-89 (المتوالية رقم: 113) ل ‎TTR‏ يتم تمييز هذه الأجسام المضادة بشكل إضافي بواسطة قدرتها على الارتباط بالصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ. المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ وليس بصور التترامر الطبيعية من ‎TTR‏ بالإضافة إلى ذلك؛ يتم تمييز هذه الأجسام المضادة بواسطة تفاعلها المناعي على النسيج القلبي في حالة الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏وليس على النسيج القلبي السليم. قد يتم إيضاح القدرة على الارتباط بالبروتينات النوعية أو شظايا
منها باستخدام تنسيقات تجارب توضيحية متوفرة في الأمثلة. ترتبط بعض من الأجسام المضادة بنفس القمة اللاصقة أو قمة لاصقة متراكبة مثل جسم مضاد محدد ب 905 أو 1468. يتم التدليل على متواليات المناطق المتغيرة الناضجة بالسلسلة الثقيلة والسلسلة الخفيفة الخاصة بهذه الأجسام المضادة باعتبارها المتواليات أرقام: 1 و16 (905)؛ و61 و70 (1468)؛ على التوالي. يمكن إنتاج الأجسام المضادة ‎GAY)‏ المحتوية على نوعية
الارتباط هذه عن طريق التحصين المناعي للفئران باستخدام ‎TTR‏ أو جزءِ منه ‎Gace‏ القمة اللاصقة المطلوبة (على سبيل المثال؛ المتوالية رقم: 113)؛ وفحص الأجسام المضادة الناتجة للارتباط ب ‎TTR‏ مونومري أو ببتيد مشتمل على المتوالية رقم: 113( اختياريًا في منافسة مع جسم مضاد محتوي على المناطق المتغيرة الخاصة ‎ls‏ 9005 أو ‎(IgG1 kappa)‏ 1468. يمكن ربط شظايا من ‎TTR‏ متضمنة القمة اللاصقة المطلوية بمادة حاملة تساعد في إظهار استجابة جسم
مضاد إلى الشظية و/أو يمكن دمجها مع عامل مساعد يُساعد في إظهار هذه الاستجابة. يمكن فحص هذه الأجسام المضادة للارتباط التفاضلي بأنواع مونومرية غير معالجة من ‎TTR‏ أو شظبة منه ‎le)‏ سبيل المثال» المتوالية رقم: 113) مقارنة بالطفرات الخاصة بالوحدات البنائية المحددة. قد يحدد الفحص ضد هذه الطفرات بشكل أكثر دقة نوعية الارتباط للسماح بتحديد الأجسام
0 المضادة التي يتم تثبيط ارتباطها بواسطة توليد طفرات لوحدات بنائية بعينها واتي من المحتمل أن تتشارك في الخصائص الوظيفية للأجسام المضادة الأخرى الموضحة بأمثلة. يمكن أن تكون الطفرات عبارة عن عملية استبدال جهازية بألانين (أو سيرين إذا وجد ألانين بالفعل) لوحدة بنائية في المرة الواحدة؛ أو فواصل زمنية على نحو أكثر ‎Bugs‏ خلال الهدف أو خلال قطاع ‎die‏ حيث يكون وجود قمة لاصقة أمرًا معروفًا. إذا أدت نفس المجموعة من الطفرات إلى خفض ارتباط اثنين
5 من الأجسام المضادة إلى حدٍ ‎uf‏ يرتبط الاثنان من الأجسام المضادة بنفس القمة اللاصقة. يمكن ‎Lad‏ إنتاج الأجسام المضادة التي لها نوعية الارتباط الخاصة بجسم مضاد فأري منتقى (على سبيل المثال» 905 أو ‎(14G8‏ باستخدام صورة مغايرة من طريقة عرض الخلايا الملتهمة. انظر ‎WO 92/20791 Winter‏ تكون هذه الطريقة ملائمة تحديدًا لإنتاج الأجسام المضادة البشرية. في هذه الطريقة؛ يتم استخدام إما المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة أو المنطقة المتغيرة
0 بالسلسلة الخفيفة من الجسم المضاد الفأري المنتقى باعتبارها ‎sale‏ بادئة. إذاء على سبيل المثال؛ تم اختيار منطقة متغيرة بسلسلة خفيفة باعتبارها المادة ‎aL‏ يتم إنشاء مجموعة خلايا ملتهمة حيث يعرض الأعضاء نفس المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة (أي» المادة البادئة الفأرية) ومنطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة مختلفة. يمكن على سبيل المثال الحصول على المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من مجموعة من المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة البشرية المعاد ترتيبها. يتم اختيار خلية ملتهمة
5 تُظهر ارتباطًا ‎lo) Ugh lies‏ سبيل ‎Jill‏ على الأقل 10 8 وعلى نحو مفضل على الأقل 10
9 -/1) ل ‎TTR‏ مونومري أو شظية منه ‎Ao)‏ سبيل المثال؛ الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-9). بعد ذلك» تعمل المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة من هذه الخلية الملتهمة باعتبارها مادة بادئة لإنشاء مجموعة خلية ملتهمة إضافية. في هذه المجموعة؛ تعرض كل خلية ملتهمة نفس المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة (أي؛ المنطقة المحددة من مجموعة العرض الأولى) ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة مختلفة. يمكن الحصول على المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة على سبيل
المثال من مجموعة من المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة البشرية المعاد ترتيبها. مرة أخرى؛ يتم اختيار الخلية الملتهمة التي تُظهر ارتباطًا ‎legs‏ قويًا ل ‎TTR‏ مونومري أو شظية منه (على سبيل المثال؛ الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89). ‎Bale‏ ما تحتوي الأجسام المضادة الناتجة على نفس نوعية القمة اللاصقة أو نوعية ‎dad‏ لاصقة مشابهة ‎salad) Jie‏ البادئة الفأرية. يتم التدليل
0 على ‎Kabat CDRs‏ للسلسلة الثقيلة الخاصة ب 905 باعتبارها المتواليات أرقام: 15-13( على التوالي» ويتم التدليل على ‎Kabat CDRs‏ للسلسلة الخفيفة الخاصة ب 905 باعتبارها المتواليات أرقام: 26-24؛ على التوالي. يتم التدليل على ‎Chothia-Kabat CDR-H1‏ مركب خاص ب 5 باعتبارها المتوالية رقم: 117. يتم التدليل على ‎Kabat CDRs‏ للسلسلة الثقيلة الخاصة ب 8 باحتبارها المتواليات أرقام: 69-67؛ على التوالي؛ ويتم التدليل على ‎Kabat CDRs‏
5 ل لسلسلة الخفيفة الخاصة ب 1468 باعتبارها المتواليات أرقام: 79-77 على التوالي. يتم التدليل على ‎Chothia-Kabat CDR-H1‏ مركب خاص ب 1468 باعتبارها المتوالية رقم: 118. يتم التدليل على صورة مغايرة من ‎CDR-L1‏ الخاصة ب 1468 باحتبارها المتوالية رقم: 80. يمكن الحصول على الأجسام المضادة الأخرى عن طريق توليد طفرات ‎CDNA‏ تقوم بتشفير السلاسل الثقيلة والخفيفة الخاصة بجسم مضاد توضيحي؛ مثل 905 أو 1468. يتم أيضًا
0 تضمين الأجسام المضادة أحادية النسيلة التي تكون مطابقة بنسبة على الأقل 9670 9680؛ %90« 9695 9696 9697 9698 أو 9699 1 905 أو 1468 في متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة و/أو الخفيفة الناضجة والحفاظ على الخصائص الوظيفية ‎lel‏ و/أو التي تختلف عن الجسم المضاد ذي الصلة بواسطة عدد صغير من مجموعات استبدال الحمض الأميني غير المنطقية وظيفيًا (على سبيل ‎(Jal‏ مجموعات الاستبدال
5 المحافظة)؛ عمليات الحذف؛ أو عمليات الإدراج في الاختراع. يتم ‎Waal‏ تضمين الأجسام المضادة
أحادية النسيلة التي بها على الأقل واحدة من أو كل الست ‎CDR(S)‏ كما هو محدد بواسطة أي تعريف تقليدي؛ ولكن على نحو مفضل ‎(Kabat‏ التي تكون مطابقة بنسبة 9690 9695 %99 أو 96100 1 ‎CDRs‏ المناظرة الخاصة ب 905 أو 1468. يوفر الاختراع أيضًا أجسامًا مضادة بها بعض من أو كل (على سبيل المثال» 3 4 5؛ و6)
‎CDRs 5‏ بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من 905 أو 1468. يمكن أن تتضمن هذه الأجسام المضادة منطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة تشمل اثنتين على الأقل؛ وعادة كل ‎«dill‏ من ‎CDRs‏ بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة ‎J‏ 9005 أو 1468 و/أو منطقة متغيرة بسلسلة خفيفة بها على الأقل اثنتين» وعلادة كل الثلاث؛ من ‎CDRS‏ بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة من 905 أو 1468. يمكن أن تتضمن كلاً من السلإسل الثقيلة
‏0 والخفيفة. يكون ‎CDR‏ إلى حدٍ كبير من ‎CDR‏ مناظر ل 905 أو 1468 عندما تحتوي على ما لا يزيد عن 4؛ 3؛ 2؛ أو 1 من مجموعات ‎(Jain)‏ عمليات الإدراج؛ أو عمليات الحذف؛ فيما عدا أنه يمكن أن تحتوي ‎CDR-H2‏ (عند التعريف بواسطة ‎(Kabat‏ على ما لا يزيد عن 6؛ 5؛ 4 3 512 1 من مجموعات الاستبدال» عمليات الإدراج؛ أو عمليات الحذف. يمكن أن يكون لهذه الأجسام المضادة تطابكقًا بنسبة على الأقل 9670 9680 9690 9695 9696 9697 0698؛ أو 9699 مع 905 أو 1468 في متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة و/أو الخفيفة الناضجة والحفاظ على الخصائص الوظيفية لهاء و/أو تكون مختلفة عن 905 أو 1468 بواسطة عدد صغير من مجموعات استبدال الحمض الأميني غير المنطقية وظيفيًا (على سبيل المثال» مجموعات الاستبدال المحافظة)؛ عمليات الحذف؛ أو عمليات الإدراج. يمكن أن يرتبط بعض من الأجسام المضادة المحددة بواسطة هذه التجارب بالصور المونومرية؛ 0 المطوية بشكل خاطئ. المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ ولكن ليس بصور التترامر الطبيعية من ‎TTR‏ كما هو موصوف في الأمثلة أو بطريقة أخرى. ‎cially‏ تكون بعض من الأجسام المضادة متفاعلة مناعيًا على نسيج الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ولكن ليس على النسيج السليم. يمكن أن تقوم بعض من الأجسام المضادة بتثبيط أو تقليل ‎TTR (dE‏ بتثبيط أو تقليل التكوين ‎aul‏ ل ‎(TTR‏ تقليل أو إزالة رواسب ‎TTR‏ أو ‎TTR‏ المتكدس؛ أو تثبيت التشكيلات غير السامة 5 من 116 في نموذج حيوان أو تجرية إكلينيكية. يمكن أن تقوم بعض من الأجسام المضادة بعلاج؛
تفعيل الوقاية ‎ce‏ أو تأخير ظهور داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ كما هو معروض في نموذج حيوان أو تجربة إكلينيكية. تتضمن النماذج الحيوانية التوضيحية لاختبار النشاط ضد داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ تلك الموضوفة في 150(4):1497-1508 ‎Kohno et al., Am.
J.
Path.‏ ‎Teng et al., Laboratory Investigations 81:385-396 (2001);‏ ;)1997( ‎Wakasugi et al., Proc.
Japan Acad. 63B:344-347 (1987); Shimada et al., 5‏ ‎Mol.
Biol.
Med. 6:333-343 (1989); Nagata et al., J.
Biochem. 117:169-‏ ‎Sousa et al., Am.
J.
Path. 161:1935-1948 (2002);‏ ;)1995( 175 و ‎Santos‏ ‎.et al., Neurobiology of Aging 31:280-289 (2010)‏ ب. الأجسام المضادة غير البشرية 10 يمكن إتمام إنتاج أجسام مضادة غير بشرية أخرى؛ على سبيل المثال؛ فأرية؛ من خنزير غينيا؛ كائن رئيسي؛ أرنب أو جرذء؛ ضد ‎TTR‏ مونومري أو شظية منه ‎lo)‏ سبيل المثال؛ الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89) عن طريق»؛ على سبيل ‎(Jal‏ تحصين الحيوان ‎belie‏ ‏باستخدام ‎TTR‏ أو شظية منه. انظر ‎Harlow & Lane, Antibodies, A Laboratory‏ ‎Manual (CSHP NY, 1988)‏ (المتضمن كمرجع لكافة الأغراض). يمكن الحصول على هذا المؤلد المناعي من مصدر ‎(anh‏ عن طريق تخليق ‎cain‏ أو عن طريق التعبير ‎Shell‏ عن ناتج عودة الاتحاد الجيني. ‎(Gilad)‏ يمكن إعطاء المؤلد المناعي مدمجًا أو بطريقة أخرى ‎Vine‏ مع بروتين مادة حاملة. اختياريًا؛ يمكن إعطاء المؤّلد المناعي مع عامل مساعد. يمكن استخدام الأنواع المتعددة من العامل المساعد كما هو موصوف فيما يلي. يتم تفضيل عامل مساعد كامل ل ‎Freund‏ متبوعًا بعامل مساعد غير كامل لتحصين الحيوانات المعملية مناعيًا. يمكن نمطيًا 0 استخدام أرانب أو خنازير غينيا لإعداد أجسام مضادة متعددة النسائل. يمكن نمطيًا استخدام ‎Obi‏ ‏لإعداد الأجسام المضادة أحادية النسيلة. يتم فحص الأجسام المضادة للارتباط النوعي ب ‎TTR‏ ‏مونومري أو ‎dad‏ لاصقة واقعة داخل ‎TTR‏ (على سبيل المثال» ‎dad‏ لاصقة تشتمل على واحدة أو أكثر من الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89). يمكن إتمام هذا الفحص عن طريق تحديد ارتباط جسم مضاد بمجموعة من الصور المغايرة من ‎TTR‏ مونومري؛ مثل صور ‎TTR‏ مغايرة 5 محتوية على الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89 أو طفرات داخل هذه الوحدات البنائية؛
وتحديد أية صور ‎TTR‏ مغايرة ترتبط بالجسم المضاد. يمكن تقييم الارتباطء على سبيل المثال؛ بواسطة لطخة وسترنء؛ ‎FACS‏ أى ‎ELISA‏ ‏ج. الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر يكون جسم مضاد متوافق مع البشر ‎humanized antibody‏ عبارة عن جسم مضاد معدل ‎Gl) 5‏ حيث يتم تطعيم ‎CDRS‏ من جسم مضاد 'واهب" غير بشري في متواليات جسم لمضاد 'مستقبل" بشري ‎Jail)‏ ¢ على سبيل المثال» ‎«Queen‏ 5,530,101 5لا و ;5,585,089 ‎Winter, US 5,225,539; Carter, US 6,407,213; Adair, US 5,859,205;‏ ‎(Foote, US 6,881,557 5‏ يمكن أن تكون متواليات الجسم المضاد المستقبل؛ على سبيل المثال؛ متوالية جسم مضاد بشري ناضجة؛ مركب من هذه المتواليات؛ متوالية متفق عليها من 10 متواليات الجسم المضاد البشري؛ أو متوالية منطقة السلالة الجرثومية. ومن ‎cad‏ يكون جسم مضاد متوافق مع البشر ‎Ble‏ عن جسم مضاد محتوي على على الأقل ثلاث؛ أريع؛ خمس أو كل 045 بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من جسم مضاد واهب ومتواليات إطار لمنطقة متغيرة ومناطق ثابتة؛ إن وجدت؛ بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من متواليات الجسم المضاد البشري. بالمثل تشمل سلسلة ثقيلة متوافقة مع البشر على الأقل واحدة؛ اثنتين وعادة كل ‎CDRs‏ الثلاثة بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من جسم مضاد واهب السلسلة الثقيلة؛ ومتوالية إطار لمنطقة متغيرة بسلسلة ثقيلة ومنطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة؛ إن وجدت؛ إلى حدٍ كبير من إطار منطقة متغيرة بسلسلة ‎ALE‏ بشرية ومتواليات منطقة ثابتة. بالمثل تشمل سلسلة خفيفة متوافقة مع البشر على الأقل واحدة؛ اثنتين» وعادة كل 045 الثلاثة بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من سلسلة خفيفة لجسم مضاد ‎carly‏ ومتواليى إطار منطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ومنطقة ثابتة بسلسلة خفيفة؛ إن وجدت؛ إلى حدٍ كبير من إطار منطقة 0 متغيرة بسلسلة خفيفة بشرية ومتواليات منطقة ثابتة. بخلاف الأجسام بحجم النانو و0/55؛ يشتمل جسم مضاد متوافق مع البشر على سلسلة ثقيلة متوافقة مع البشر وسلسلة خفيفة متوافقة مع البشر. تكون ‎CDR‏ في جسم مضاد متوافق مع البشر إلى حدٍ كبير من ‎CDR‏ مناظرة في جسم مضاد غير بشري عندما تكون على الأقل 9685 9690 9695 أو 96100 من الوحدات البنائية المناظرة (كما هو محدد بواسطة أي تعريف تقليدي ولكن يُفضل أن يتم تعريفه بواسطة ‎(Kabat‏ ‏5 متطابقة ‎lad‏ بين ‎CDRS‏ ذات الصلة. تكون متواليات إطار المنطقة المتغيرة الخاصة بسلسلة جسم
مضاد أو المنطقة الثابتة الخاصة بسلسلة جسم مضاد إلى حدٍ كبير من متوالية إطار منطقة متغيرة بشرية أو منطقة ثابتة بشرية على التوالي عندما تكون على الأقل 9685 9690 1695 أو 0 من الوحدات البنائية المناظرة التي تم تعريفها بواسطة أي تعريف تقليدي ولكن يُفضل أن يتم تعريفه بواسطة ‎Kabat‏ متطابقة. بالرغم من أنه غالبًا ما تشتمل الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر على كل ‎CDRs‏ الست (المحددة بواسطة أي تعريف تقليدي ولكن على نحو مفضل كما هو محدد بواسطة ‎(Kabat‏ من جسم مضاد ‎ol‏ يمكن أيضًا إعدادها باستخدام ما هو ‎Jil‏ من ‎CDRs‏ كلها (على سبيل ‎(Jud‏ ‏على الأقل 3؛ 4 أو 5 ‎(CDRs‏ من جسم مضاد لفأر (على سبيل المثال ‎J.
Immunol.‏ ‎Vajdos et al., J. of Mol.
Biol., 320: 415-428, 2002;‏ :2002 ,169:3076 ‎Iwahashi et al., Mol.
Immunol. 36:1079-1091, 1999; Tamura et al, J. 0‏ ‎.(Immunol., 164:1432-1441, 2000‏ في بعض من الأجسام المضادة تكون هناك ‎dala‏ لجزء فقط من ‎(CDRS‏ تحديدًا المجموعة الفرعية من الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ المطلوية للارتباط التي يُطلق عليها ‎(SDRs‏ للحفاظ على الارتباط في جسم مضاد متوافق مع البشر. يمكن تحديد الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ غير المتلامسة 5 مع مولد الضد وغير المتوفرة في ‎SDRs‏ اعتمادًا على الدراسات السابقة (على سبيل ‎Ge (Jaa)‏ ما تكون الوحدات ‎dll)‏ 1160-1165 في ‎CDR H2‏ غير مطلوية)؛ من مناطق ‎Kabat‏ ‎CDRs‏ ممتدة خارج حلقات ‎Chothia‏ فائقة التغير ,196:901 ‎(Chothia, J.
Mol.
Biol.‏ )1987( عن طريق القولبة الجزيئية و/أو على نحو تجريبي؛ أو كما هو موصوف في ‎Mol.‏ ‎Immunol. 41: 863, 2004‏ في هذه الأجسام المضادة المتوافقة مع البشرعند المواضع حيث 0 تكون واحدة أو أكثر من الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ الواهبة غير موجودة أو حيث يتم ‎CDR Gada‏ واهبة بأكملها؛ يمكن أن يكون الحمض الأميني الذي يشغل الموضع ‎Ble‏ عن حمض أميني يشغل الموضع المناظر (بواسطة ترقيم ‎(Kabat‏ في متوالية الجسم المضاد للمستقبل. يعكس عدد مجموعات الاستبدال هذه الخاصة بالمستقبل للأحماض الأمينية الواهبة في ‎CDRs‏ توزانًا للاعتبارات التنافسية. من المحتمل أن تكون مجموعات الاستبدال هذه مفيدة في خفض عدد 5 الأحماض الأمينية الخاصة بفأر في جسم مضاد متوافق مع البشر وبالتالي خفض توليد المناعة
المحتمل. بالرغم من ذلك؛ يمكن أيضًا أن تتسبب مجموعات الاستبدال في تغيرات في الألفة؛ ‎ping‏ ‏على نحو مفضل تجنب الانخفاضات المؤثرة في الألفة. يمكن أيضًا اختيار المواضع للاستبدال داخل ‎CDRs‏ والأحماض الأمينية للاستبدال على نحو تجرببي. يمكن اختياريًا انتقاء متواليات الجسم المضاد المستقبل البشري من بين متواليات الجسم المضاد البشري المعروفة العديدة لتوفير درجة عالية من تطابق المتوالية (على سبيل المثال؛ تطابق بنسبة ‎Led )94685-65‏ بين إطارات منطقة متغيرة لمتوالية مستقبل بشري وإطارات منطقة متغيرة مناظرة خاصة بسلسلة جسم مضاد واهب. تكمن أمثلة على متواليات المستقبل للسلسلة الثقيلة في المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة البشرية بكودي الوصول ل ‎NCBI‏ رقمي 8/0602114 3 ‎AAX82494.1‏ (المتواليات أرقام: 3 0 و4) والمناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الخاصة بالمجموعة الفرعية 3 ‎Kabat‏ البشرية. يشترك 4 في نفس الصورة القياسية ‎Jie‏ السلسلة الثقيلة ل 905 لفأر. تكمن أمثلة أخرى على متواليات المستقبل للسلسلة الثقيلة في المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة البشرية بكودي الوصول ل ‎NCBI‏ رقمي ‎AAX82494.1 5 AAD30410.1‏ (المتواليات أرقام: 63 و4؛ على التوالي) والمناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الخاصة بالمجموعة الفرعية 1 ‎Kabat‏ البشرية. تتضمن ‎AAX82494.1 28030410.1 5‏ اثنتين من ‎CDRS‏ لهما نفس الصورة القياسية ‎Jie‏ السلسلة الثقيلة ل 1468 لفأر. تكمن أمثلة على متواليات المستقبل للسلسلة الخفيفة في المنطقة المتغيرة ذات السلسلة الخفيفة الناضجة البشرية بكود الوصول ‎NCBI‏ رقم 88666952 (المتوالية رقم: 18( ومناطق متغيرة بسلسلة خفيفة خاصة بمجموعة فرعية 3 ‎Kabat‏ بشرية. يتضمن 2 اتثنتين من ‎CDRs‏ لهما نفس الصورة القياسية ‎(ie‏ سلسلة خفيفة ل 905 خاص 0 بفار. تكمن أمثلة أخرى على متواليات المستقبل للسلسلة الخفيفة في المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة البشرية بكودي الوصول ل ‎NCBI‏ رقمي ‎ABAT1374.1‏ و ‎ABC66952.1‏ ‏(المتواليات أرقام: 73572( على التوالي) ومناطق متغيرة بسلسلة خفيفة خاصة بمجموعة فرعية 32 بشرية. يكون ل ‎ABC66952.1 5 ABAT1374.1‏ نفس الصورة القياسية ‎Jie‏ ‏السلسلة الخفيفة لذ 1468 لفأر.
إذا تم اختيار أكثر من متوالية جسم مضاد لمستقبل بشري واحدة؛ يمكن استخدام مركب أو هجين من تلك المستقبلات؛ ويمكن أخذ الأحماض الأمينية المستخدمة عند مواضع مختلفة في المناطق المتغيرة السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر من أي من متواليات الجسم المضاد المستقبل البشري المستخدمة. على سبيل المثال؛ تم استخدام المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة البشرية بكودي الوصول ل ‎NCBI‏ رقمي 88002114 ‎AAX82494.1 5s‏ (المتواليات
أرقام: 3 و4) باعتبارها متواليات المستقبل لإجراء توافق مع البشر للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ل 905. تتضمن أمثلة على المواضع ‎Cua‏ يختلف هذان المستقبلان المواضع 119 ‎R)‏ ‏أو ‎A) H40 «(K‏ أو 1) 144 ‎G)‏ أو ) ‎H49‏ (5 أو ‎(A‏ 177 (5 أو ‎SIN) 1828 (T‏ ‎R) H83 «(S‏ أو ‎A) 184 «(K‏ أو 5)؛ 5 ‎HBO‏ (/ أو ا). يمكن أن تتضمن الأنواع المتوافقة
0 مع البشر من المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة ل 9005 أي حمض أميني عند أي من هذه المواضع. بالمثل؛ تم استخدام المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة البشرية بكودي الوصول ل ‎NCBI‏ رقمي ‎AAD30410.1‏ و ‎AAX82494.1‏ (المتواليات أرقام: 63 و4؛ على التوالي) باعتبارها متواليات المستقبل لإجراء توافق مع البشر للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ل 8. تتضمن أمثلة على المواضع حيث يختلف هذان المستقبلان المواضع 1828 ‎N)‏ أو 5)؛
‎R) 183 5‏ أو ‎A) 184 (K‏ أو 5)؛ 5 ‎HB9‏ (/ أو ا). يمكن أن تتضمن الأنواع المتوافقة مع البشر من المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة ل 1468 أي حمض أميني عند أي من هذه المواضع. بالمثل؛ تم استخدام المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة البشرية بكودي الوصول ل ‎NCBI‏ ‏رقمي ‎ABC66952.1 5 ABAT1374.1‏ (المتواليات أرقام: 73572 على التوالي) باعتبارها متواليات المستقبل لإجراء توافق مع البشر للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة ل 1468.
‏0 يكمن مثال على موضع حيث يختلف هذان المستقبلان في الموضع 18 (5 أو ©). يمكن أن تتضمن الأنواع المتوافقة مع البشر من المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة ل 1468 أي حمض أميني عند هذا الموضع. يمكن اختيار أحماض أمينية معينة من الوحدات البنائية لإطار المنطقة المتغيرة البشرية للاستبدال اعتمادًا على تأثيرها المحتمل على تشكيل ‎CDR‏ و/أو الارتباط بمولد ضد. يتم التحقيق في هذه
— 8 4 — التأثيرات الممكنة عن طريق قولبة؛ فحص السمات المميزة الخاصة بالأحماض الأمينية عند مواقع بعينها؛ أو الملاحظة التجريبية لتأثيرات استبدال أو توليد طفرات لأحماض أمينية معينة. على سبيل المثال؛ عندما يختلف حمض أمينى فيما بين وحدة بنائية لإطار منطقة متغيرة فأرية ووحدة بنائية لإطار منطقة متغيرة بشرية مختارة؛ يمكن استبدال الحمض الأميني للإطار البشري بواسطة حمض أميني لإطار مكافئ من الجسم المضاد الخاص بفأر عندما يُتوقع على نحو مقبول أن الحمض الأميني: (1) يرتبط على نحو غير تساهمي بمولد ضد بشكل مباشر؛ )2( يكون مجاورًا لمنطقة ‎CDR‏ أو داخل ‎CDR‏ كما هو مُعرّف بواسطة ‎Chothia‏ وليس ‎«Kabat‏ ‏10 (3) بطريقة أخرى يتفاعل مع منطقة ‎CDR‏ (على سبيل المثال؛ في حدود 6 أنجستروم من منطقة ‎(CDR‏ (على سبيل المثال» نحدد بواسطة قولبة السلسلة الخفيفة أو الثقيلة على البنية المتحللة الخاصة بسلسلة جلويولين مناعي معروفة متجانسة) ¢ أو )4( يمثل وحدة بنائية تشارك في السطح البيني ‎VL-VH‏ ‏تتم الإشارة إلى الوحدات البنائية للإطار من الفئات من (1) حتى (3) كما هو محدد بواسطة ‎«Queen, US 5,530,101 5‏ في بعض الأحيان باعتبارها وحدات بنائية قياسية ومن نوع فيرنييه. تتم في بعض الأحيان الإشارة إلى الوحدات البنائية للإطار التي تساعد في تحديد تشكيل حلقة ‎CDR‏ باعتبارها وحدات بنائية قياسية 196:901-917 ‎(Chothia 4 Lesk, J.
Mol.
Biol.‏ ‎Thornton & Martin, J.
Mol.
Biol. 263:800-815 (1996))‏ :(1987). تتم في بعض الأحيان الإشارة إلى الوحدات البنائية للإطار التى تدعم تشكيلات حلقة الارتباط بمولد الضد وتلعب 0 دورًا في ضبط مواءمة جسم مضاد على مولد ضد باعتبارها وحدات بنائية من نوع فيرنييه ‎(Foote‏ ‎Winter, J.
Mol.
Biol 224:487-499 (1992))‏ &. تتمثل الوحدات البنائية الأخرى للإطار التى تكون مرشحة للإستبدال فى الوحدات البنائية التى تُكوْن موقع ‎dallas‏ بالجليكوزيل محتمل ‎potential glycosylation site‏ تكون الوحدات
المرشحة الأخرى للاستبدال هي أحماض أمينية لإطار بشري لمستقبل تكون غير معتادة لجلوبولين مناعي بشري ‎human immunoglobulin‏ عند ذلك الموضع. يمكن استبدال هذه الأحماض الأمينية بالأحماض الأمينية من الموضع المكافئ من الجسم المضاد الواهب لفأر أو من المواضع المكافئة الخاصة بالجلوبولين المناعي البشري الأكثر نمطية.
تكون الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر التوضيحية عبارة عن صور متوافقة مع البشر من الأجسام المضادة 905 أو 1468 لفأر ¢ محدده باعتبارها 110905 أو 101468 على التوالي. يشتمل الجسم المضاد الفأري ‎ODS‏ على مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة وخفيفة ناضجة بها متوالية حمض أميني تشتمل على المتوالية رقم: 1 والمتوالية رقم: 16( على التوالي. يوفر الاختراع ثمانية مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة متوافقة مع البشر توضيحية: ‎(HUODSVHV]‏
‎(HU9D5VHV3b (HU9DSVHV3 (HUODSVHV2b (HUODSVHV2 0‏ 5/1174طونالا ‎HUODSVHVS 5 905/0‏ (المتواليات أرقام: 12-5 على التوالي). يوفر الاختراع بشكل إضافي خمسة مناطق متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة بشرية توضيحية: ‎(HUODSVLV]‏ ‏2ن ‎HU9D5VLYS 5 ,109051/1/4 (HU9DS5VLV3‏ (المتواليات أرقام: 19- 3. على التوالي). يعرض شكل 1 عمليات محاذاة 9005؛ أجسام مضادة لنموذج ‎fi‏ ¢ أجسام
‏5 مضادة لمستقبل بشري؛ وأجسام مضادة متوافقة مع البشر متنوعة. يشتمل الجسم المضاد الفأري 1468 على مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة وخفيفة ناضجة بها متوالية حمض أميني تشتمل على المتوالية رقم: 61 والمتوالية رقم: 70( على التوالي. يوفر الاختراع ثلاثة مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة متوافقة مع البشر توضيحية: 14681/1171ن1؛ ‎HUI4G8VHV3 5 (HU14G8VHV2‏ (المتواليات أرقام: 66-64؛ على التوالي). يوفر الاختراع
‏0 بشكل إضافي ثلاثة مناطق متغيرة بسلسلة ثقيلة ناضجة بشرية توضيحية: ‎(HUT4GBVLV]‏ ‏14682نالاء 5 ‎HU14G8VLV3‏ (المتواليات أرقام: 76-74 على التوالي). يعرض شكل 2 عمليات محاذاة ‎(14G8‏ أجسام مضادة لنموذج ‎Hl‏ ¢ أجسام مضادة لمستقبل بشري؛ وأجسام مضادة متوافقة مع البشر متنوعة. لأسباب مثل التأثير المحتمل على تشكيل ‎COR‏ و/أو الارتباط بمولد الضد؛ التسبب في تفاعل
‏5 فيما بين السلاسل الثقيلة والخفيفة؛ التفاعل مع المنطقة الثابتة؛ كونه موقع لتعديل تالي للتحور
‎Jl‏ مطلوب أو غير مطلوب؛ كونه ‎ang‏ بنائية غير معتادة لموضعها في متوالية منطقة متغيرة بشرية وبالتالي يكون ‎Whe‏ للضد على نحو محتمل؛ الحصول على تكدس ‎caine‏ وأسباب أخرى؛ تم اعتبار مواضع الإطار 15 للمنطقة المتغيرة التالية بمثابة مواضع مرشحة لمجموعات الاستبدال في المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ل 110905 التوضيحية الثمانية والمناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة ل ‎HUODS‏ التوضيحية الخمسة؛ كما هو محدد بشكل إضافي في الأمثلة: ‎(W4TL) 142 (G42E)‏ 47ل ‎(I69F)‏ 69ل (11825) 182 ‎H82b‏ ‏نا(ط)582) ‎(PSA) 2108 (T108L)‏ قا ‎(L9P)‏ قا ‎L19 (A19V) (L18 (P18S)‏ ‎(K39R) (L36 (Y36F)‏ 39ا ‎(D70A) (L60 (D60S)‏ 70ا و ‎.L74 (KT4R)‏ بالمثل؛ تم اعتبار مواضع الإطار 11 للمنطقة المتغيرة التالية بمثابة مواضع مرشحة لمجموعات الاستبدال 0 في المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ل 1101468 التوضيحية الثلاثة والمناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة ل 101468 التوضيحية ‎ADU‏ كما هو محدد بشكل إضافي في الأمثلة: ‎(QE)‏ 1لا ‎(Q3K)‏ 3لا ‎(W47L)‏ 47لا ‎(P8A) 1105 (Q105T)‏ قا ها ‎(Y36F) 26 (N26S) 19 (A19V) (LSP)‏ 36ا ‎<L60 (D60S)‏ و(0705) ‎.L70‏ ‏هناء كما هو في موضع آخرء تكون الوحدة البنائية المذكورة الأولى هي الوحدة البنائية الخاصة 5 بجسم مضاد متوافق مع البشر متكون عن طريق تطعيم ‎Kabat CDRS‏ أو ‎Chothia—Kabat‏ ‎CDR‏ مركبة في حالة 005-141 في إطار مستقبل بشري (على سبيل المثال؛ إطار مستقبل بشري مركب أو هجين)؛ وتكون الوحدة البنائية المذكورة الثاني هي الوحدة البنائية التي يتم أخذها في الاعتبار لاستبدال هذه الوحدة البنائية. ومن ‎ed‏ في إطارات المنطقة المتغيرة؛ تكون الوحدة البنائية المذكورة الأولى بشرية؛ وداخل ‎«CDRs‏ تكون الوحدة البنائية المذكورة الأولى خاصة بفأر. 0 تتضمن الأجسام المضادة 10905 التوضيحية أية تباديل أو توليفات من المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة والخفيفة الناضجة التوضيحية (على سبيل المثال» ‎VHVI/VLV]‏ أو ‎(HILL‏ ‏11/1//12/ أو 1112 ‎VHV1/VLV3‏ أو 1113 ‎VHV1/VLv4‏ أو ‎(H1L4‏ ‎VHV1/VLV5‏ أو ‎HIL5‏ 11/2/1/1/1/ أو 1211 ‎VHV2/VLV2‏ أو ‎(H2L2‏ ‎VHV2/VLV3‏ أرى ‎(H2L5 of VHV2/VLV5 (H2L4 of VHV2/VLV4 (H2L3‏ ‎VHV2b/VLV2 (H2bL1 of VHV2b/VLV]l 5‏ أو ‎VHV2b/VLV3 (H2bL2‏ أو 12613
H3L1 ‏أو‎ VHV3/VLv1 (H2bL5 ‏أو‎ VHV2b/VLVS (H2bL4 ‏أو‎ VHV2b/VLv4 (H3L4 ‏أى‎ VHV3/VLv4 (H3L3 of VHV3/VLV3 H3L2 sf VHV3/VLV2
H3bL2 VHV3b/VLV2 13511 ‏أو‎ VHv3b/VLv1 H3L5 si VHV3/VLVS
H3bL5 oi VHV3b/VLV5 H3bL4 ‏أى‎ VHv3b/VLv4 (H3bL3 ‏أى‎ VHV3b/VLV3 (HAL3 ‏أو‎ VHVA/VLV3 (H4L2 of VHV4/VLV2 H4L1 ‏أرى‎ VHv4/VLVD 5
H4bL1 ‏أو‎ VHv4b/VLV1 H4L5 ‏أى‎ VHv4/VLVS H4L4 ‏أى‎ VHv4/VLv4
H4bL4 oi VHv4b/VLv4 (H4bL3 ‏أى‎ VHv4b/VLV3 (H4bL2 i VHv4b/VLV2 (H5L2 ‏أ‎ VHV5/VLV2 (H5L1 ‏أر‎ VHV5/VLV] (H4bL5 sf VHv4b/VLV5 (H5L5 of VHV5/VLV5 45 (H5L4 of VHV5/VLV4 (H5L3 ‏أر‎ VHV5/VLV3 0 يوفر الاختراع صورًا مغايرة من الأجسام المضادة 905 المتوافقة مع البشر حيث تُظهر المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة المتوافقة مع البشر تطابقًا بنسبة على الأقل 9690 9695؛ 6 9697 9698 أو 9699 مع ‎HUODSVHVAD‏ متوافق مع البشر (المتوالية رقم: 11) وتُظهر المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة المتوافقة مع تطابقًا بنسبة على الأقل 9690؛ %95 9696؛ 9697 9698 أو 9699 مع ‎HUIDSVLVL‏ (المتوالية رقم: 19). في بعض من هذه الأجسام المضادة؛ يتم الاحتفاظ بعدد على الأقل 1 2؛ أو كل 3 من الطفرات المنعكسة أو الطفرات الأخرى في 114511 ‎HUODS‏ يوفر الاختراع ‎Wad‏ صورًا مغايرة من الأجسام المضادة 5 المتوافقة مع البشر التوضيحية الأخرى. تحتوي هذه الصور المغايرة على مناطق متغيرة بسلسلة خفيفة وثقيلة ناضجة تُظهر تطابق المتوالية بنسبة على الأقل 9690 9695 9696 7 9698 أو 9699 مع المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة والثقيلة الناضجة الخاصة (HIL4 (HIL3 1112 1111 ‏بالأجسام المضادة 905 المتوافقة مع البشر التوضيحية‎ 0 (H2bL4 (H2bL3 (H2bL2 (H2bL1 (H2L5 (H2L4 (H2L3 (H2L2 H2L1 H1L5 «H3bL3 (Hb3L2 (H3bL1 H3L5 ‏عاقلا‎ H3L3 H3L2 H3L1 H2bL5 «H4bL2 (H4bL1 (H4L5 (H4L4 (H4L3 (H4L2 H4L1 H3bL5 ‏خم‎ ‎H5L5 ‏فاكلا أو‎ (H5L3 ‏لاقلا فاكلا‎ H4bL5 (H4bL4 (H4bL3
-2 5 — في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل موضع واحد على الأقل من المواضع 142 ‎HAT‏ ‎H69‏ 182 1825 و1108 فى المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ‎(E‏ اء ‎«SF‏ اء واء على التوالى. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل المواضع ‎H82 5 (HEY (HAT‏ في المنطقة ‎Vh‏ ‏بواسطة ‎FL‏ و5؛ على التوالى؛ كما فى ‎.HUSD5VHv1‏ فى بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغلل المواضع ‎H82b H82 (H69 (H47‏ فى المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ال ‎«S‏ واء على التوالي؛ كما في ‎HUIDSVHY2‏ في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل المواضع ‎(HA2‏ ‎H 108 H47‏ في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ‎L E‏ واء على التوالي؛ كما في ‎.HU9D5VHv2b‏ ‏في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل المواضع 1169 1182 5 ‎H82b‏ في المنطقة ‎Vh‏ ‏بواسطة حل 5؛ واء على التوالى؛ كما فى ‎.HU9D5VHV3‏ فى بعض من الأجسام المضادة؛ يتم 0 شغل كل من موضعي ‎H108 5 HAT‏ في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة اء كما في ‎Hu9D5VHV3b‏ ‎HuSD5Vhv4b‏ . في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم ‎Jad‏ مواضعي ‎H82b H82‏ في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة 5 واء على التوالي؛ كما في ‎HUIDSVHVA‏ في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل المواضع 2 47 ‎H82b‏ فى المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ‎E‏ ا واء على التوالي؛ كما في 109051/1175!. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم ‎Jad‏ موضع واحد على 5 الأقل من المواضع 8اء 9اء ‎L39 (L36 19 L18‏ 60اء 170 و74 في المنطقة ‎Vk‏ ‏بواسطة حل ل قي لات ال يي حل و على التوالى. فى بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل الموضع ‎L36‏ في المنطقة ‎VK‏ بواسطة ؛ كما في ‎HUODSVLV]‏ في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل الموضع ‎LOD‏ في المنطقة ‎VK‏ بواسطة 5؛ كما في 1109051/173. في بعض من الأجسام المضادةء يتم شغل المواضع ‎(L8‏ قا ‎(L19‏ 36ا 39ا ‎L60‏ 270ل 0 و74 فى المنطقة ‎VK‏ بواسطة حل ‎(Rg AS (RF VP‏ على التوالى؛ كما فى ‎.Hu9D5VLv4‏ فى بعض من الأجسام المضادة؛ يتم ‎Jad‏ المواضع قا قا 18ا 19ا ‎L60 L39 +6‏ 70 و74 فى المنطقة ‎VK‏ براسطة ‎(Ry AS (RF VS PA‏ على التوالى» كما في ‎[HUODSVLYS‏ يمكن أن تكون مناطق ‎CDR‏ الخاصة بهذه الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر متطابقة أو متطابقة إلى حدٍ كبير مع مناطق ‎CDR‏ الخاصة بالجسم 5 المضاد 905 للفأر الواهب أو أي من الأجسام المضادة 905 المتوافقة مع البشر الموضحة فيما
سبق. يمكن تعريف مناطق ‎CDR‏ بواسطة أي تعريف تقليدي ‎le)‏ سبيل المثال» ‎«Chothia‏ أو مركب من ‎(Kabat 5 Chothia‏ ولكن يُفضل أن تكون كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ ‏تكون مواضع إطار المناطق المتغيرة وفقًا لترقيم ‎Kabat‏ ما لم يُذكر شيء بخلاف ذلك. تختلف هذه الصور المغايرة الأخرى نمطيًا عن متواليات السلاإسل الثقيلة والخفيفة ل ‎HUODS‏ التوضيحية بواسطة عدد صغير (على سبيل ‎(Jia)‏ نمطيًا ما لا يزيد عن ‎cl‏ 2؛ 3؛ 5؛ 10؛ أو 15) من عمليات الاستبدال» عمليات الحذف أو عمليات الإدراج. ‎Bale‏ ما تكون هذه الاختلافات في الإطار ولكن يمكن أيضًا أن تحدث في ‎.CDRs‏ ‏تتضمن الأجسام المضادة 101468 التوضيحية أية تباديل أو توليفات من المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة والخفيفة الناضجة التوضيحية (على سبيل المثال» ‎VHVI/VLV]‏ أو ‎(HILL‏ ‎VHVI/VLV2 0‏ أو 1112 ‎VHVI/VLV3‏ أو 1113 ‎VHV2/VLV]‏ أو ‎(H2L1‏ ‎VHV2/VLV2‏ أو 1212 ‎VHV2/VLV3‏ أو 1213 ‎VHV3/VLV1‏ أو ‎(H3L1‏ ‎VHv3/VLv2‏ أو ‎VHV3/VLV3 4 (H3L2‏ أو 3ا13). يوفر الاختراع صورًا مغايرة من الأجسام المضادة 1468 المتوافقة مع البشر حيث تُظهر المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة المتوافقة مع البشر تطابقًا بنسبة على الأقل 9690 9695؛ 5 %96« 9697 %98( أو 9699 مع ‎HUI4GBVHV2 (HU14G8 H2)‏ (المتوالية رقم: 65( وتُظهر المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة المتوافقة مع تطابقًا بنسبة على الأقل 9690؛ %95« 9696 9697 9698,؛ أو 9699 مع ‎HUI4GBVLV3 (HU14G8 L3)‏ (المتوالية ‎ad)‏ ‏6). في بعض من هذه الأجسام المضادة؛ يتم الحفاظ على عدد على الأقل ‎ed 3 .2 ١1‏ أو كل 5 من الطفرات المنعكسة أو الطفرات الأخرى في 11213 ‎HULI4G8‏ يوفر الاختراع ‎Load‏ صورًً 0 مغايرة من الأجسام المضادة 1468 المتوافقة مع البشر الأخرى التوضيحية. تحتوي هذه الصور المغايرة على مناطق متغيرة بسلسلة خفيفة وثقيلة ناضجة تُظهر تطابق المتوالية بنسبة على الأقل 0. 9695 9696 9697 9698, أو 9699 مع المناطق المتغيرة بالسلسلة الخفيفة والثقيلة الناضجة الخاصة بالأجسام المضادة 1468 المتوافقة مع البشر التوضيحية 11111 ‎(HIL2‏ ‎(H3L2 (H3L1 1213 (H2L2 (H2L1 H1L3‏ أو 1313 الأجسام المضادة.
في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل موضع واحد على الأقل من المواضع ‎HAT 5 ١11‏ في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ‎BE‏ واء على التوالي. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل موضعي ‎H47 5 1‏ في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ‎E‏ واء على التوالي؛ كما في ‎Hul4G8VHV2‏ ‏و11014681/1173. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل موضع واحد على الأقل من موضعي ‎H3‏ و1105 في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ‎K‏ و1 على التوالي. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل موضعي ‎H3‏ و1105 في المنطقة ‎Vh‏ بواسطة ا وآ؛ على التوالي؛ كما في 1 . في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل الموضع 36 في المنطقة ‎Vk‏ ‏بواسطة ‎(F‏ كما في ‎HUT4GBVLV2‏ 3 بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل موضع واحد على الأقل من المواضع 8اء ‎L60 L26 L19 (LO‏ و70 في المنطقة ‎VK‏ بواسطة ‎PA‏ ‎SV 0‏ 5؛ وه؛ على التوالي. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل المواضع ‎(L8‏ 9ا؛ ‎L19‏ و70 في المنطقة ‎Vk‏ بواسطة ‎AsV P(A‏ على التوالي؛ كما في ‎HUT4G8VLV]‏ ‏في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم شغل كل من موضعي ‎L605 L26‏ في المنطقة ‎Vk‏ بواسطة 5م كما في 11014681/17/3. يمكن أن تكون مناطق ‎CDR‏ الخاصة بهذه الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر متطابقة أو متطابقة إلى حدٍ كبير مع مناطق ‎CDR‏ الخاصة بالجسم المضاد 5 1468 الخاص بفأر الواهب. يمكن تعريف مناطق ‎CDR‏ بواسطة أي تعريف تقليدي (على سبيل المثال» ‎«Chothia‏ أو مركب من ‎(Kabat y Chothia‏ ولكن يُفضل أن تكون كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ ‏تكون مواضع إطار المناطق المتغيرة وفقًا لترقيم ‎Kabat‏ ما لم يُذكر شيء بخلاف ذلك. تختلف هذه الصور المغايرة الأخرى نمطيًا عن متواليات السلاسل الثقيلة والخفيفة ل 1101468 التوضيحية 0 بواسطة عدد صغير (على سبيل ‎(Jia‏ نمطيًا ما لا يزيد عن ‎cl‏ 2؛ 3؛ 5؛ 10؛ أو 15( من عمليات الاستبدال» عمليات الحذف أو عمليات الإدراج. ‎Bale‏ ما تكون هذه الاختلافات في الإطار ولكن يمكن أيضًا أن تحدث في ‎.CDRs‏ ‏تتمثل إمكانية لوجود تنوع إضافي في الصورة المغايرة من 905 أو 1468 المتوافقة مع البشر في طفرات منعكسة إضافية في إطارات المنطقة المتغيرة. يمكن أن تتواءم العديد من الوحدات 5 البنائية للإطار غير المتلامسة مع ‎CDRS‏ في ‎MAD‏ المتوافق مع البشر مع مجموعات الاستبدال
— 5 5 — الخاصة بالأحماض الأمينية من المواضع المناظرة الخاصة ب ‎MAD‏ الواهب الخاص بفأر أو الأجسام المضادة الخاصة بفأر أو البشرية الأخرى؛ وتكون أيضًا العديد من الوحدات البنائية المتلامسة مع ‎CDR‏ مُعرّضة للاستبدال. قد يتم تغيير الأحماض الأمينية الموجودة في ‎CDRs‏ ‎(Lad‏ على سبيل المثال؛ بوحدات بنائية موجودة عند الموضع المناظر الخاص بمتوالية المستقبل البشري المستخدم للإمداد بإطارات المنطقة المتغيرة. بالإضافة إلى ذلك؛ يمكن استخدام متواليات المستقبل البشري ‎cabin‏ على سبيل ‎(JE‏ للسلسلة الثقيلة و/أو الخفيفة. إذا تم استخدام متواليات مستقبل مختلفة؛ قد لا يتم تنفيذ واحدة أو أكثر من الطفرات المنعكسة الموصى بها فيما سبق لأن الوحدات البنائية الواهبة والخاصة بالمستقبل المناظرة تكون بالفعل مماثلة بدون طفرات منعكسة. على نحو مفضل؛ لا يكون لعمليات الاستبدال أو الطفرات المنعكسة فى الصورة المغايرة من 0 905 أو 1468 المتوافقة مع البشر (سواء كانت محافظة أم لا) أي تأثير كبير على ألفة الارتباط أو فعالية ‎MAD‏ المتوافق مع البشرء ‎(gl‏ قدرته على الارتباط ب ‎TTR‏ مونومري (على سبيل ‎(JU)‏ تكون الفعالية فى بعض من أو كل التجارب الموصوفة في الأمثلة الحالية على الجسم المضاد المغاير 905 أو 1468 المتوافق مع البشر بشكل أساسي متماثلة؛ أي؛ في حدود الخطأ التجريبي؛ مثل تلك الخاصة بالجسم المضاد 905 أو 1468 الفأري). 5 د. الأجسام المضادة الخيمربة والممّهة يوفر الاختراع بشكل إضافي صورًا خيمرية أو مُمؤهة من الأجسام المضادة غير البشرية؛ تحديدًا الأجسام المضادة 905 أو 1468 الخاصة بالأمثلة. يكون جسم مضاد خيمري عبارة عن جسم مضاد حيث يتم دمج المناطق المتغيرة الناضجة بالسلاسل الخفيفة والثقيلة الخاصة بجسم مضاد غير بشري (على سبيل ‎(Jud)‏ فأر) مع المناطق 0 الثابتة بالسلاسل الخفيفة والثقيلة البشرية. تحافظ هذه الأجسام المضادة إلى حدٍ كبير أو بشكل تام على نوعية الارتباط للجسم المضاد الخاص بالفأر؛ وتمثل ثلثي المتوالية البشرية. يعتبر جسم مضاد ‎hak‏ نوعًا من الجسم المضاد المتوافق مع البشر الذي يحافظ على بعض من ‎Sale‏ كل ‎CDRs‏ وبعض من الوحدات البنائية لإطار المنطقة المتغيرة غير البشرية الخاصة بجسم مضاد غير بشري ولكنه يستبدل الوحدات البنائية لإطار المنطقة المتغيرة الأخرى التي قد تُسهم في
القمم اللاصقة للخلية 8- أو 7-؛ على سبيل المثال الوحدات البنائية المكشوفة ‎(Padlan, Mol.‏ )1991 ,28:489 .1700001 بالوحدات البنائية من المواضع المناظرة الخاصة بمتوالية جسم مضاد بشري. تتمثل النتيجة في جسم مضاد حيث تكون ‎CDRs‏ بشكل تام أو إلى حدٍ كبير من جسم مضاد غير بشري وبتم جعل إطارات المنطقة المتغيرة الخاصة بالجسم المضاد غير البشري أكثر ‎Gud 5‏ بالبشرية بواسطة مجموعات الاستبدال. يتم تضمين الصور المُمؤهة من الجسم المضاد 905 أو 1468 في الاختراع. ه. الأجسام المضادة البشربة يتم توفير الأجسام المضادة البشرية ضد ‎TTR‏ مونومري أو شظية ‎aie‏ (على سبيل المثال؛ الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89 (المتوالية رقم: 113) ل ‎(TTR‏ بواسطة ‎de sane‏ متنوعة 10 من التقنيات الموصوفة ‎Led‏ يلي. يتم اختيار بعض من الأجسام المضادة البشرية بواسطة تجارب ربط تنافسية؛ بواسطة طريقة عرض الخلايا الملتهمة الخاصة ب ‎Lad (Winter‏ سبق؛ أو بطريقة أخرى؛ ليكون لها نفس نوعية القمة اللاصقة مثل جسم مضاد بعينه خاص بفأر؛ ‎Jie‏ واحد من الأجسام المضادة أحادية النسيلة الخاصة بفأر الموصوفة في الأمثلة. يمكن ‎Loa‏ فحص الأجسام المضادة البشرية لنوعية ‎dad‏ لاصقة بعينها عن طريق استخدام شظية فقط من ‎Jie «TTR‏ صورة مغايرة من ‎TTR‏ محتوية فقط على الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89 من ‎(TTR‏ باعتباره مولد الضد المستهدف؛ و/أو عن طريق فحص الأجسام المضادة ضد مجموعة من الصور المغايرة من ‎(TTR‏ مثل صور ‎TTR‏ مغايرة محتوية على طفرات متنوعة في الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89 من ‎TTR‏ ‏تتضمن طرق إنتاج الأجسام المضادة البشرية طريقة ‎trioma‏ الخاصة ب ‎«Oestberg ef al.‏ ‎<Oestberg ¢Hybridoma 2:361-367 )1983( 00‏ البراءة الأمريكية رقم 44,634,664؛ و ‎Engleman er‏ ‎sell) cal.‏ الأمريكية 4,634,666 استخدام ‎li‏ محوّرة ‎ly‏ متضمنة جينات الجلوبولين المناعي البشري (انظرء على سبيل المثال» )1993( ‎US ¢US 5,877,397 ¢Lonberg et al., W093/12227‏ ‎US ¢US 5,661,016 ¢US 5,770,429 ¢US 5,789,650 ¢US 5,814,318 ¢5,874,299‏ ‎Neuberger, Nat.
Biotechnol. $US 5,545,806 $US 5,569,825 ¢US 5,625,126 5‏ ‎(Kucherlapati, WO 91/10741 (1991) ¢14:826 (1996) 5‏ وطرق عرض الخلايا الملتهمة (انظرء ‎Ae‏ سبيل المثال» 91/17271 ‎US McCafferty et al, WO 92/01047 fWO‏
‎<US 5,837,242 ¢US 5,858,657 $US 5,871,907 8‏ 5,733,743 05؛ ‎US‏ ‏5.565.332( ‏و. اختيار المنطقة الثابتة يمكن ربط المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة والخفيفة الخاصة بالأجسام المضادة الخيمرية؛ المُموّهة؛ أو المتوافقة مع البشر ‎gan‏ على الأقل من منطقة ثابتة بشرية. يعتمد اختيار منطقة ثابتة» ‎(Ua‏ على ما إذا كانت الشمية الخلوية الناتجة بواسطة خلية المعتمدة على الجسم المضاد؛ الالتهام الخلوي المعتمد على الجسم المضاد و/أو الشمية الخلوية المعتمدة على مكمل مطلوية. على سبيل المثال؛ يكون للنظائر البشرية 1861 و1503 ‎dad‏ خلوية معتمدة على مكمل ولا يكون للأنماط المماثلة البشرية 1802 و1804 تلك ‎ask ddd)‏ 1801 و1503 البشريان ‎Wad‏ بالحث 0 على وظائف مؤثر ناتجة عن خلية ‎fl‏ من 1802 و1204 البشريين. يمكن أن تكون المناطق الثابتة بالسلسلة الخفيفة هي لامدا أو كابا. قد يكون واحد أو العديد من الأحماض الأمينية عند الطرف الأميني أو طرف الكريوكسي من السلسلة الخفيفة و/أو السلسلة الثقيلة؛. مثل الليزين عند الطرف © من السلسلة الثقيلة؛ مفقودًا أو مشتقًا في نسبة من أو كل الجزيئات. يمكن إعداد مجموعات الاستبدال في المناطق الثابتة لتقليل 5 أو زيادة وظيفة المؤثر مثل الشمية الخلوية الناتجة عن مُكمل ‎complement-mediated‏ ‎cytotoxicity‏ أو ‎ADCC‏ (انظرء على سبيل المثال» ‎«Winter er al.‏ البراءة الأمريكية رقم 1 .له اه ‎«Tso‏ البراءة الأمريكية رقم 5,834,597؛ 5 ‎Proc.
Natl.
Acad. «Lazar et al.‏ ‎(Sci USA 103:4005, 2006‏ أو ‎ALY‏ فترة العمر النصفي في الإنسان (انظرء على سبيل المثال» ‎(J.
Biol.
Chem. 279:6213, 2004 «Hinton et al.‏ تتضمن مجموعات الاستبدال 0 التوضيحية ‎Gln‏ عند الموضع 250 و/أو ‎Leu‏ عند الموضع 428 (يتم استخدام ترقيم ‎EU‏ في هذه الفقرة للمنطقة الثابتة) لزيادة فترة العمر النصفي لجسم مضاد. يؤدي الاستبدال عند أي من أو كل المووضع 234 235 236 و/أو 237 إلى تقليل الألفة تجاه مستقبلات ‎(Foy‏ تحديدًا مستقبل ‎lal) FeyRI‏ على سبيل ‎(US 6,624,821 «Jbl‏ يمكن استخدام الاستبدال بألانين عند المووضع 234 235 و237 من 1501 البشري لخفض وظائف المؤثر. قد تشتمل بعض من 5 الأجسام المضادة على استبدال بألانين ‎alanine‏ عند المواضع 234 235 و237 من 1501 بشري لخفض وظائف المؤثر. ‎(Glas)‏ يتم استبدال المواضع 234 236 و/أو 237 في 1802
البشري بألانين والموضع 235 بجلوتامين ‎Ohl) glutamine‏ على سبيل المثال» ‎US‏ ‏1م,؟). في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم استخدام طفرة عند واحد أو أكثر من المواضع 241 264 265 270 296 297 322 329 و 331 بواسطة ترقيم ‎EU‏ الخاص ب 1801 بشري. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم استخدام طفرة عند واحد أو أكثر من المواضع 318 320,؛ و322 بواسطة ترقيم ‎BU‏ الخاص ب ‎IgGl‏ بشري. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم استبدال المواضع 234 و/أو 235 بألانين و/أو يتم استبدال الموضع 329 بجليسين. في بعض من الأجسام المضادة؛ يتم استبدال المواضع 234 و235 بألانين» ‎Jie‏ في المتوالية رقم: 102. في بعض من الأجسام المضادة؛ يكون النمط المماثئل هو 1802 أو 1804 بشري. تشتمل منطقة ثابتة كابا بسلسلة خفيفة بشرية توضيحية على متوالية الحمض الأميني الخاصة 0 بالمتوالية رقم: 104. يمكن حذف الأرجنين عند الطرف 33 من المتوالية رقم: 104؛ في هذه الحالة تشتمل المنطقة الثابتة كابا بالسلسلة الخفيفة على متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمتوالية رقم: 5. تشتمل منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة ل 1801 بشري توضيحية على متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمتوالية رقم: 101 (مع أو بدون ليزين عند الطرف 6). يمكن التعبير ‎Gig‏ عن الأجسام المضادة باعتبارها تترامرات محتوية على اثنتين من السلاسل الخفيفة واثنتين من السلاسل ‎ALE‏ ‏15 مثل السلاسل الثقيلة المنفصلة؛ السلاسل الخفيفة؛ ‎«Fab' Fab Jie‏ 0072)؛» و أو مثل الأجسام المضادة بالسلسلة الفردية حيث يتم ربط النطاقات المتغيرة الناضجة بالسلسلة الثقيلة والسلسلة الخفيفة من خلال مباعد. تُظهر المناطق الثابتة البشرية تغيرًا من النَّمَطُ ‎BAN‏ وتغيرًا في محدد النمط الإسوي ‎Lad‏ بين الأفراد المختلفين» أي؛ يمكن ان تختلف المناطق الثابتة في الأفراد المختلفين عند واحد أو أكثر من 0 المواضع متعددة الأشكال. تختلف محددات النمط الإسوي عن الأنماط ‎LEAN‏ من حيث أن الأمصال التي تتعرف على محدد نمط إسوي ترتبط بمنطقة غير متععدة الأشكال من واحد أو أكثر من الأنماط المماثلة الأخرى. ومن ثَم؛ على سبيل ‎(JE‏ تكون منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة أخرى من ‎Gad hall‏ 6183 1801 وتشتمل على متوالية الحمض الأميني الخاصة بالمتوالية رقم: 3. تشتمل منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة ‎gal‏ من النَّمَطُ ‎IgGl Glm3 GEA)‏ على متوالية 5 الحمض الأميني الخاصة بالمتوالية رقم: 102 (مع أو بدون ليزين عند الطرف ©). تتضمن ‎slay)‏ إلى منطقة ثابتة بشرية منطقة ثابتة ‎fil Sd any ol‏ طبيعي أو أي تبديل للوحدات البنائية التي تشغل المواضع في الأنماط ‎BAY‏ طبيعية.
ز. التعبير الوراثي عن الأجسام المضادة الخاصة بناتج عودة الاتحاد الجيني تكون عدد من الطرق معروفة لإنتاج الأجسام المضادة الخيمرية والمتوافقة مع البشر باستخدام سلالة خلية تعبر وراثيًا عن جسم مضاد ‎Ae) antibody-expressing cell line‏ سبيل المثال» ورم ‎(hybridoma (psa‏ على سبيل المثال؛ ‎(Sa‏ استنساخ المناطق المتغيرة للجلوبولين المناعي الخاصة بالأجسام المضادة ووضعها في متواليات باستخدام الطرق المعروفة جيدًا. في إحدى الطرق»؛ يتم استنساخ المنطقة المتغيرة ‎VH‏ بالسلسلة الثقيلة بواسطة ‎RT-PCR‏ باستخدام ‎MRNA‏ تم تحضيره من خلايا ورم هجين. يتم استخدام المشرعات المتفق عليها على الببتيد الرئيسي للمنطقة 1 المشتمل على رامزة بدء التحوّر الوراثي مثل المشرع 5' والمشرع 3 الخاص بالمناطق الثابتة 0. يتم وصف المشرعات التوضيحية في طلب البراءة الأمريكي 2005/0009150 ‎US‏ باسم ‎.Schenk er al 0‏ (لاحفًا في هذا الطلب ©ل58060"). يمكن مقارنة المتواليات من النسائل المتعددة المشتقة على نحو مستقل لضمان عدم إدخال تغييرات أثناء التضخيم. يمكن تحديد المتوالية الخاصة بالمنطقة ‎VH‏ أو تأكيدها بواسطة عمل متواليات من شظية ‎VH‏ تم الحصول ‎lle‏ ‏بواسطة المنهج ‎RACE RT-PCR‏ 5 والمشرع الخاص ب 820 3. يمكن استنساخ المنطقة ‎VE‏ المتغيرة بالسلسلة الخفيفة بطريقة مناظرة. في إحدى ‎hall‏ يتم 5 تصميم مجموعة مشرع مُتفق عليها لتضخيم مناطق ‎VL‏ باستخدام مشرع 5' مصمم للتهجين للمنطقة ‎VI‏ المشتملة على رامزة بدء التحوّر الوراثي ومشرع 3' المخصص للمنطقة ‎Ck‏ بعد منطقة ‎VA] Lal‏ في طريقة ثانية؛ يتم استخدام المنهج ‎RACE RT-PCR‏ 5 لاستنساخ ‎VL‏ تقوم بتشفير ‎cDNA‏ يتم وصف المشرعات التوضيحية في 5800601؛ المشار إليه فيما سبق. يتم بعد ذلك دمج المتواليات المستنسخة مع متواليات تقوم بتشفير المناطق الثابتة البشرية (أو الأنواع غير البشرية 0 الأخرى). تتضمن المتواليات التوضيحية التي تقوم بتشفير المناطق الثابتة البشرية المتوالية رقم: ‎A) 106‏ تقوم بتشفير منطقة ثابتة ل 1801 بشري (المتوالية رقم: 103)؛ والمتواليات أرقام: 107 و108؛ التي تقوم بتشفير المناطق الثابتة بالسلسلة الخفيفة ‎WS‏ البشرية (المتواليات أرقام: 104 105 على التوالي). في إحدى الطرق؛ تتم ‎sale]‏ تعديل المناطق المتغيرة بالسلسلة الثقيلة والسلسلة الخفيفة وراثيًا لتشغير متواليات واهبة للجدل تالية للموصلات ‎VDI‏ أو ‎VI‏ ذات الصلة ويتم استنساخها في ناقل تعبير ‎Shs‏ ثديي؛ مثل ‎pCMV-hO1‏ للسلسلة الثقيلة 5 ‎pCMV-Mecl‏ للسلسلة الخفيفة. تقوم هذه النواقل
بتشفير المناطق الثابتة 101 و66 البشرية باعتبارها شظايا إكسون بعد مجموعة المنطقة المتغيرة المدرجة. بعد التحقق من المتوالية؛ يمكن نقل العدوى إلى نواقل التعبير الوراثي عن السلسلة الثقيلة والسلسلة الخفيفة على نحو مشترك في ‎CHO WA‏ لإنتاج أجسام مضادة خيمرية. يتم تجميع الأوساط المهيأة بعد 48 ساعة من نقل العدوى وتجبتها بواسطة تحليل لطخة ويسترن لإنتاج الجسم المضاد أو ‎ELISA‏ للارتباط بمولد الضد. يتم جعل الأجسام المضادة الخيمرية متوافقة مع البشر
كما هو موصوف فيما سبق. يتم نمطيًا إنتاج الأجسام المضادة الخيمرية؛ المُموّهة؛ المتوافقة مع ‎dll‏ والبشرية عن ‎Gob‏ ‏التعبير الوراثي عن ناتج عودة الاتحاد الجيني. تتضمن البنيات المنشأة من بولي نوكليوتيد ناتج عودة الاتحاد الجيني نمطيًا متوالية للتحكم في التعبير الوراثي مرتبطة على نحو قابل للعمل
0 بمتواليات التشفير الخاصة بسلاسل الجسم ‎liad)‏ متضمنة عناصر التحكم في التعبير الوراثي المصاحبة على نحو طبيعي أو غير المتجانسة؛ مثل معزز. يمكن أن تكون متوالية التحكم في التعبير ‎hell‏ عبارة عن نظم معزز في النواقل القادرة على تحويل أو تقل العدوى إلى خلايا العائل حقيقة النواة أو بدائية النواة. بمجرد أن يتم تضمين الناقل في العائل الملائم؛ يتم الحفاظ على العائل في ظل ظروف ملائمة للتعبير الوراثي عالي المستوى عن متواليات النوكليوتيد وتجميع
5 وتنقية الأجسام المضادة المتفاعلة على نحو متصالب. تكون نواقل التعبير الوراثي هذه نمطيًا قابلة للتكرار في الكائنات العائلة إما في صورة إيبسومات أو كجزء متكامل من ‎DNA‏ الكروموسومي للعائل. على نحو ‎caine‏ تحتوي نواقل التعبير الوراثي على علامات ترميز ‎Lud‏ على سبيل المثال؛ مقاومة الأمبيسيلين أو مقاومة الهيجروميسين؛ للسماح بالكشف عن هذه الخلايا المحوّلة باستخدام متواليات ‎DNA‏ المطلوية.
0 تعتبر إشرشيا كولاي عائلاً بدائي النواة مفيدًا للتعبير وراثيًا عن الأجسام المضادة؛ تحديدًا شظايا الجسم المضاد. تكون الميكرويات؛ مثل الخميرة؛ أيضًا مفيدة للتعبير الوراثي. تعتبر السُكَيْراء عائلاً للخميرة بنواقل ملائمة بها متواليات للتحكم في التعبير الوراثي؛ ‎Lane‏ للتكرار؛ متواليات إنهاء؛ وما شابه حسبما يكون مطلويًا. تتضمن المعززات النمطية 3- فوسفو جليسرات كيناز وإنزيمات ‎Als‏ ‎Sul‏ أخرى. تتضمن معززات الخميرة القابلة ‎call‏ من بين أخرى؛ معززات من كحول
5 هيدروجيناز أيزو سيتوكروم ©؛ والإنزيمات المسئولة عن استخدام المالتوز والجالاكتوز.
‎(Se‏ استخدام الخلايا الثديية للتعبير ‎Gh‏ عن مقاطع النوكليوتيد التي تقوم بتشفير الجلويولينات المناعية أو شظايا منها. ‎«Winnacker ail‏ من ‎From Genes to Clones, (VCH Publishers,‏ ‎NY, 1987)‏ لقد تم تطوير عدد من سلالات خلايا العائل الملائمة القادرة على إفراز بروتينات غير متجانسة سليمة؛ وتتضمن سلالات ‎«CHO WA‏ سلالات ‎COS Wa‏ المتنوعة؛ خلايا ‎(HeLa 5‏ خلايا ‎(HEK293‏ خلايا ‎(L‏ والأورام النخاعية غير المنتجة للجسم المضاد متضمنة 502/0 و1050. يمكن أن تكون الخلايا غير بشرية. يمكن أن تتضمن نواقل التعبير الوراثي لهذه الخلايا متواليات للتحكم في التعبير الوراثي؛ ‎Jie‏ منشاً للتكرار» معزز » مُحسّن ) ‎Queen ef al., Immunol.‏ ‎¢(Rev. 89:49 (1986)‏ ومواقع معلومات المعالجة الضرورية» مثل مواقع ريط الريبوسوم؛ مواقع ‎(RNA Jaa‏ مواقع ‎Jul‏ بِعَدِيدٍ الأدينيلات؛ ومتواليات إنهاء النسخ. يمكن أن تتضمن متواليات 0 التحكم في التعبير الوراثي معززات مشتقة من جينات داخلية ‎agp lana)‏ مُضَخُمْ ‎CORN‏ ‏0 فيروس غدي؛ فيروس ‎asl‏ الحُليمِيَ البقري؛ وما شابه. انظر 148:1149 ‎J.
Immunol.‏ (1992). على نحو بديل؛ يمكن تضمين المتواليات المشفرة للجسم المضاد في جينات ناقلة للإدخال في مجموعة العوامل الوراثية الخاصة بحيوان محوّر ‎Wily‏ والتعبير الوراثي اللاحق في اللبن الخاص بالحيوان المحوّر ‎Gly‏ (انظرء على سبيل ‎(Jill‏ البراءة الأمريكية رقم 5,741,957؛ البراءة الأمريكية رقم 5,304,489؛ والبراءة الأمريكية رقم 5,849,992). تتضمن الجينات الناقلة الملائمة متواليات تشفير للسلاسل الخفيفة و/أو السلاسل الثقيلة مرتبطة على نحو قابل للعمل مع معزز ومُحسّن من جين خاص بغدة ثديية؛ مثل كازين أو بيتا ‎SY‏ جلوبولين. يمكن نقل النواقل المحتوية على مقاطع ‎DNA‏ محل الاهتمام إلى الخلية العائلة بواسطة الطرق 0 المعتمدة على نوع العائل الخلوي. على سبيل المثال؛ يتم على نحو شائع استخدام نقل العدوى باستخدام كالسيوم كلوريد للخلايا بدائية ‎lll‏ بينما يمكن استخدام العلاج بكالسيوم فوسفات؛ التثقيب الكهريائي؛ نقل العدوى بالاعتماد على الشحم؛ أساليب القصف؛ أو ‎Ja‏ العدوى بالاعتماد على الفيروس للعوائل الخلوية الأخرى. تتضمن الطرق الأخرى المستخدمة لتحويل الخلايا الثديية ‎alas‏ بولي برين؛ اندماج البروتوبلاست؛ الجسيمات الشحمية؛ التثقيب الكهربائي؛ والحقن 5 المجهري. لإنتاج حيوانات محوّرة ‎hy‏ يمكن حقن مجهريًا جينات ناقلة في الخلايا البيضية المخصبة أو يمكن تضمينها في مجموعة العوامل الوراثية الخاصة بالخلايا الجذعية الجنينية؛ ونقل نوى هذه الخلايا إلى الخلايا البيضية مستأصلة النواة.
عند إدخال ‎Jib‏ (نواقل) تشفير السلاسل الثقيلة والخفيفة الخاصة بالجسم المضاد في مزرعة ‎(WDA‏ يمكن فحص الأجزاء المجمعة من الخلايا لإنتاجية النمو وجودة المنتج في الأوساط الخالية من المصل. يمكن بعد ذلك تعريض الأجزاء المجمعة من الخلايا الأعلى إنتاجًا إلى استنساخ خلية فردية معتمد على ‎FACS‏ لتوليد سلالات أحادية النسيلة. يمكن استخدام قيم إنتاجية معينة أعلى من 50 بيكو جرام أو 100 بيكو جرام لكل خلية في اليوم؛ تناظر معايير المنتج الأعلى من 7.5 جم/لتر من المزرعة. يمكن أيضًا اختبار الأجسام المضادة المنتجة بواسطة مستعمرات ‎WIA‏ فردية ‎Sail‏ ¢ خصائص الترشيح» ‎(JEF (PAGE‏ المسح بالأشعة فوق البنفسجية؛ ‎(HP-SEC‏ تخطيط كريوهيدرات-أوليجو سكاريد؛ قياس الطيف الكتلي؛ ومقايسة الربطء مثل ‎ELISA‏ أو 8:260:8. ثم يمكن حفظ مستعمرة مختارة في العديد من القنينات وتخزينها مجمدة للاستخدام لاحفاً. بمجرد التعبير ‎Why‏ عنهاء ‎(Sa‏ تنقية الأجسام المضادة ‎Gy‏ للإجراءات القياسية في المجال؛ متضمنة احتجاز بروتين ‎(A‏ تنقية ‎(HPLC‏ استشراب عمود ‎column chromatography‏ » الفصل الكهربي للهلام ‎Ly gel electrophoresis‏ شابه (انظر بصفة ‎Scopes, Protein dale‏ ‎-((Purification (Springer-Verlag, NY, 1982‏ يمكن استخدام المناهج المُتبعة للإنتاج التجاري للأجسام المضادة؛ متضنة الوصول بالرامزة إلى 5 المستوى الأمثل؛ اختيار معززات؛ اختيار عناصر نسخ؛ اختيار عوامل إنهاء؛ استنساخ الخلية الفردية الخالية من المصل؛ حفظ الخلية؛ استخدام علامات ترميز للاختيار لتضخيم رقم النسخة؛ عامل إنهاء ‎«CHO‏ أو تحسين معايير البروتين (انظر؛ على سبيل المثال» 5,786,464 05؛ ‎US‏ ‎US 6,063,598 8‏ 7,569,339 05؛ 11702004/050884؛ ‏ 11702008/012142؛ ‎£W02005/019442 £W02008/012142‏ 1702008/107388؛ ‎¢W02009/027471‏ و ‎US‏ ‏0 5.888.809( ح. تجارب فحص الجسم المضاد يمكن تعريض الأجسام المضادة إلى العديد من عمليات الفحص متضمنة مقايسات ‎all‏ ‏عمليات الفحص الوظيفي؛ عمليات الفحص في النماذج الحيوانية من الأمراض المصحوبة برواسب ‎«TTR‏ والتجارب الإكلينيكية. اختبار مقايسات الريط للارتباط النوعي و» اختياريًا؛ ألفة ونوعية قمة 5 الاصقة تجاه ‎TTR‏ مونومري أو شظية منه. على سبيل ‎oJ‏ يمكن فحص مقايسات الريط للأجسام المضادة التي ترتبط بالوحدات البنائية للحمض الأميني 97-89 (المتوالية رقم: 113) ل
‎(TTR‏ التي تعتبر ‎dad‏ لاصقة تم إخفاؤها في تترامر ‎TTR‏ الطبيعي وكشفها في الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ. المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ يمكن ‎Lad‏ فحص الأجسام المضادة للقدرة على الارتباط بتشكيلات ما قبل اللْتِفِيّة غير الطبيعية من ‎TTR‏ واللبيفات النشوانية ‎TTR‏ ولكن ليس تشكيلات ‎TTR‏ الطبيعية. على سبيل ‎(Jd)‏ يمكن فحص الأجسام المضادة للقدرة على الارتباط بالصور المونومرية من ‎TTR‏ المتكونة عن طريق انفصال أو ‎pa)‏ ‏صورة التترامر الطبيعية من 111؛ ويمكن فحصها بالتباين ضد صورة التترامر الطبيعية من ‎(TTR‏ ‏كما هو موصوف في الأمثلة أو بطريقة أخرى. بالمثل؛ يمكن ‎Lal‏ فحص الأجسام المضادة لتفاعلها المناعي على نسيج الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ولكن ليس على النسيج السليم. يتم في بعض الأحيان ‎shal‏ عمليات الفحص هذه في منافسة مع جسم مضاد توضيحي؛ مثل جسم مضاد 0 محتوي على المناطق المتغيرة الخاصة ب 905 أو 1468 (النمط المماثل كابا من 1801). اختياربًا؛ يتم تثبيت إما الجسم المضاد أو ‎TTR‏ المستهدف في هذه التجرية. ‎Sa‏ إجراء التجارب الوظيفية في نماذج خلوية متضمنة الخلايا المعبرة ‎Why‏ بصورة طبيعية عن ‎TTR‏ أو المنقول إليها عدوى باستخدام ‎TTR 2d) DNA‏ أو شظية منه. تتضمن الخلايا الملائمة خلايا مشتقة من النسيج القلبي أو الأنسجة الأخرى المصابة بالعدوى بواسطة التخليق النشواني ل 5 11. يمكن فحص الخلايا للمستويات المنخفضة الخاصة بالصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ (على سبيل ‎(Jia‏ عن طريق استخدام لطخة ويسترن أو الترسيب المناعي لنواتج استخلاص الخلايا أو الأجزاء الطافية) أو السمية المنخفضة التي تُعزى إلى الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ. المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ على سبيل المثال» يمكن اختبار الأجسام المضادة للقدرة على تثبيط أو تقليل ‎(TTR (XS‏ تثبيط أو تقليل 0 اتكوين اللييفي ل ‎TTR‏ تقليل رواسب ‎TTR‏ إزالة ‎TTR‏ المتكدس؛ أو تثبيت التشكيلات غير السامة من ‎TTR‏ ‏يمكن إجراء التجارب الوظيفية الأخرى في محلول؛ ‎Jie‏ اختبار ما إذا كان جسم مضاد قادرًا على تمزيق أو خفض التكوين اللييفي ل ‎TTR‏ عندما يتم تلامس مركبات وسيطة من ‎TTR‏ مونومري أو ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ في محلول مع الجسم المضاد. يمكن التحقق من مدى التكوين اللييفي 5 بواسطة قياسات ‎yl‏ على سبيل ‎JU‏ عند 400 نانو متر على مقياس طيف بالأشعة فوق البنفسجية المرئية مزوّد بوحدة تحكم في درجة الحرارة. يمكن أيضًا استخدام ثيوفلافين-7 لتقييم مدى التكوين اللييفي النشواني. على سبيل ‎(JE‏ يمكن إضافة قدر زائد مولاري يبلغ خمسة
أضعاف من ثيوفلاقين -7 إلى عينات ‎TTR‏ وتركها عند درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة قبل أن يتم أخذ القياسات. يمكن ملاحظة التألق الفلوري ل ثيوفلافين-7 باستخدام مقياس فلورة طيفي. انظر
‎.US 2014/0056904‏ تختبر عمليات فحص النموذج الحيواني قدرة الجسم المضاد على العلاج الدوائي أو الوقائي للعلامات أو الأعراض في نموذج حيوان يحاكي مرض بشري مصحوب بتراكم ‎TTR‏ أو رواسب 8. تتضمن هذه الأمراض أنواع الداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ مثل الداء النشواني المجموعي الشَّيخُوخِيَ (558)؛ الداء النشواني القلبي الشَِّخُوخِيَ ‎(SCA)‏ اعتلال الأعصاب النشواني ‎Sle‏ ‎(FAP) Lidl‏ اعتلال عضلة القلب النشواني عائلي المنشاً ‎(FAC)‏ والداء النشواني الانتقائي للجهاز العصبي المركزي ‎(CNSA)‏ تتضمن العلامات أو الأعراض الملائمة التي يمكن ملاحظتها 0 وجود ومدى الرواسب النشوانية في الأنسجة المتنوعة؛ مثل القناة المعدية المعوية أو القلب. يمكن تحديد مدى انخفاض الرواسب النشوانية عن طريق المقارنة مع ‎pale‏ مقارنة ‎Grime (ae‏ رواسب ‎TTR‏ النشوانية تلك في الحيوانات الخاصة بالمقارنة التي قد تلقت جسمًا مضادًا للمقارنة (على سبيل المثال؛ جسم مضاد للمقارنة متوافق مع نمط مماثل)؛ دواء إرضائي؛ أو لم تتلق علاجًا على الإطلاق. يتمثل نموذج حيواني توضيحي لاختبار النشاط ضد داء نشواني ناتج عن 111 في 5 تموذج حاص بفأر لا يحمل طفرة عند موقع 777 داخلي المنشاً في ‎SW‏ وجين ‎TTR‏ للطفرة البشرية المشتمل على طفرة ‎VOM‏ التي تكون مصحوية باعتلال الأعصاب المتعدد النشواني عائلي المنشاً. انظرء على سبيل المثال» ;)1997( 150(4):1497-1508 ‎Kohno et al., Am.
J.
Path.‏ ‎Cardoso and Saraiva, FASEB J 20(2):234-239 (2006)‏ توجد أيضًا نماذج مشابهة؛ متضمنة نماذج أخرى للأنواع عائلية ‎Lindl)‏ من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ونماذج للأنواع الفُراديّة من 0 الداء_النشواني الناتج عن 111. انظرء؛ على سبيل المثال؛ :)81(3 ‎Teng ef al., Lab.
Invest.‏ ‎Ito and Maeda, Mouse Models of Transthyretin Amyloidosis, in Recent‏ ;)2001( 385-396 ‎Advances in Transthyretin Evolution, Structure, and Biological Functions, pp. 261-280‏ ‎(Springer Berlin Heidelberg)‏ )2009( يمكن أن تتضمن الحيوانات المحوّرة ‎Gilg‏ جين ناقل ‎TTR‏ بشري؛ مثل جين ناقل ‎TTR‏ بطفرة مصحوية بداء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ أو جين ناقل ‎TTR 5‏ من النوع غير المعالج. لتيسير الاختبار في النماذج الحيوانية؛ يمكن استخدام أجسام مضادة خيمرية بها منطقة ثابتة ملائمة لنموذج الحيوان (على سبيل ‎(JE‏ يمكن استخدام أجسامن مضادة خيمرية لفأر-جرذ لاختبار الأجسام المضادة في الجرذان). يمكن استنتاج أن ‎Glia Bg‏ مع
— 5 6 — البشر من جسم مضاد سيكون فعالاً إذا كان الجسم المضاد الخاص بالفأر المناظر أو الجسم المضاد الخيمري فعالاً في نموذج حيواني ملائم ويكون للجسم المضاد المتوافق مع البشر ألفة ارتباط مشابهة (على سبيل المثال؛ في حدود ‎all‏ التجرببي؛ مثل بمعامل يبلغ 021.5 أو 3 . تقوم التجارب الإكلينيكية باختبار الأمان والفعالية في إنسان يعاني من مرض مصاحب للداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏ط. الأحماض النووبة يوفر الاختراع بشكل إضافي أحماضًا نووية تقوم بتشفير أي من السلاسل ‎ALB‏ والخفيفة الموصوفة فيما سبق (على سبيل المثال؛ المتواليات أرقام: 40 42« 56-44 87 89« 91- 96 و108-06). اختياريًاء تقوم هذه الأحماض النووية بشكل إضافي بتشفير ببتيد إشارة ويمكن 0 التتعبير ‎ie Why‏ باستخدام ببتيد الإشارة المرتبط بالمنطقة الثابتة (على سبيل المثال؛ ببتيدات الإشارة ‎all‏ لها متواليات حمض أميني خاصة بالمتواليات أرقام: 41 و88 (السلسلة الثقيلة) و43 و90 (السلسلة الخفيفة) التي يمكن تشفيرها بواسطة المتواليات أرقام: 40 و87؛ على التوالي ‎(bal lulu)‏ و42 و89؛ على التوالي (السلسلة الخفيفة)). يمكن ربط متواليات تشفير الأحماض النووية على نحو قابل للعمل بمتواليات منظمة لضمان التعبير الوراثى عن متواليات التشغير » مثل معزز؛ ‎(Haak‏ موقع ربط ردبوسوم»؛ إشارة إنهاء نسخ؛ وما شابه. يمكن أن تحدث الأحماض النووية المشفرة للسلاسل الثقيلة والخفيفة فى صورة معزولة أو يمكن استنساخها فى واحد أو أكثر من النواقل. يمكن تخليق الأحماض النووية ‎(Sa‏ تخليق بواسطة؛ على سبيل المثال؛ التخليق في الحالة الصلبة أو ‎PCR‏ للأوليجو نوكليوتيدات المتراكبة. يمكن أن تكون الأحماض النووية التي تقوم بتشفير السلاسل الثقيلة والخفيفة مرتبطة باعتبارها حمض نووي متجاور واحد؛ على سبيل المثال» داخل تاقل تعبير وراثي؛ أو يمكن أن تكون منفصلة؛ على سبيل المثال 6 يتم استنساخ ‎JS‏ في ناقل التعبير الوراثي الخاص به. ي. الأجسام المضادة المترافقة تكون الأجسام المضادة المترافقة التي ترتبط بشكل خاص بمولدات الضد مكشوفة في الصور المسبب للأمراض الخاصة ب ‎TTR‏ ولكن ليس في صور التترامر الطبيعية من ‎Jie (TTR‏ الوحدات البنائية للحمض الأميني 97-9 (المتوالية رقم : 13 1( ‎«TTR J‏ مفيدة في ‎asst‏ عن وجود
الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من 1711؛ ملاحظة وتقييم فعالية العوامل العلاجية التي يتم استخدامها لعلاج المرضى الذين تم تشخيص إصابتهم بداء نشواني ناتج عن ‎¢TTR‏ تثبيط أو خفض 35( ‎¢TTR‏ تثبيط أو خفض التكوين اللييفي ل 7718؛ خفض أو إزالة رواسب ‎(TTR‏ تثبيت تشكيلات غير سامة من ‎(TTR‏ أو علاج أو تفعيل الوقاية من داء نشواني ناتج عن 118 في مريض. على سبيل ‎(Jl)‏ يمكن ان تكون هذه الأجسام المضادة مترافقة مع أشطار علاجية ‎(gal‏ بروتينات ‎(gal‏ أجسام مضادة أخرى؛ و/أو ملصقات قابلة للإنفصال. انظر 03/057838 ‎US 8,455,622 WO‏ يمكن أن تكون الأشطار العلاجية المترافقة عبارة عن أي عامل يمكن استخدامه لعلاج؛ مكافحة؛ تخفيف؛ منع؛ أو تحسين حالة غير مطلوية أو مرض غير مطلوب في مريض» مثل داء نشواني 0 ناتج عن ‎TTR‏ يمكن أن تتضمن الأشطار العلاجية؛ على سبيل ‎(JU‏ معدلات مناعية أو ‎af‏ ‏عوامل نشطة بيولوجيًا ‎ped‏ من أو تُحسّن نشاط الجسم المضاد. يمكن أن يكون معدل مناعي عبارة عن أي عامل يقوم بالحص على أو تثبيط تطوّر أو مداومة استجابة مناعية. إذا تم إقران هذه الأشطار العلاجية بجسم مضاد حاص بالصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ مثل الأجسام المضادة الموصوفة هناء سيكون للأشطار العلاجية المقترنة 5 أآلفة نوعية للصور غير الطبيعية المسببة للأمراض من ‎TTR‏ مقارنة بصور التترامر الطبيعية من ‎TTR‏ بناءً على ذلك؛ يستهدف إعطاء الأجسام المضادة المترافقة بشكل مباشر أنسجة تشتمل على الصور المسببة للأمراض من ‎TTR‏ بأدنى ضرر للنسيج المحيط الطبيعي السليم. يمكن أن يكون هذا مفيدًا تحديدًا للأشطار العلاجية التي تكون سامة للغاية ‎aad‏ يصعب إعطائها بمفردها. بالإضافة إلى ذلك؛ يمكن استخدام مقادير صغيرة من الأشطار العلاجية. 0 تتضمن أمثلة على الأشطار العلاجية الملائمة العقاقير التي تقلل من مستويات ‎(TTR‏ تثبت بنية التترامر الطبيعية من ‎(TTR‏ تثبط 35( ‎(TTR‏ تمزق التكوين اللييفي أو النشواني ل ‎TTR‏ أو تبطل الشمية الخلوية. ‎«pail‏ على سبيل ‎Almeida and Saraiva, FEBS Letters «Jud‏ ‎Ando er al., ‘Saraiva, FEBS Letters 498:201-203 (2001) ¢586:2891-2896 (2012)‏ ‎Ruberg and Berk, Circulation ¢Orphanet Journal of Rare Diseases 8:31 (2013)‏ ‎Johnson et al, J.
Mol.
Biol. 421(2-3):185-203 (2012) 5 ¢126:1286-1300 (2012) 5‏ . على سبيل المثال» يمكن أن تكون الأجسام المضادة مترافقة مع ‎(Tafamidis‏ ديفلونيزال ‎ALN-‏ ‎ISIS-TTRRx 611111802 ¢TTROI‏ دوكسي سيكلين (دوكسي)؛ حمض تورورسو ديوكسي
— 7 6 — كوليك ‎Doxy-TUDCA «(TUDCA)‏ إبيجالوكاتيكين جالات ‎(EGCG)‏ كُرْكمين» أو رسفيراترول )3 5» 4-تراي هيدروكسي ستيلبين). تتضمن الأشطار العلاجية النموذجية الأخرى عوامل أخرى معروف أنها مفيدة لعلاج؛ التعامل ‎cae‏ أو تحسين داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ أو ‎abel‏ داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ انظرء على سبيل ‎Ando et al., Orphanet Journal of Rare «Jill‏ ‎Diseases 8:31 (2013) 5‏ للأعراض الإكلينيكية الشائعة الخاصة بالداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏والعوامل النمطية المستخدمة لعلاج تلك الأعرارض. يمكن أيضًا إقران الأجسام المضادة ببروتينات أخرى. على سبيل ‎(JE)‏ يمكن إقران الأجسام المضادة ب ‎-Fynomers‏ تكون ‎Fynomers‏ عبارة عن بروتينات ريط صغيرة ‎Ae)‏ سبيل ‎«JB‏ 7 كيلو دالتون) مشتقة من نطاق 5113 ‎Fyn‏ البشري. يمكن أن تكون ثابتة وقابلة للذوبان» وبمكن أن 0 تنتقر إلى الوحدات البنائية من السِيسُتئين وروابط داي سلفيد. ‎(Ser‏ تعديل ‎Ul Fynomers‏ للارتباط بالجزيئات المستهدفة بنفس الألفة والنوعية ‎Jie‏ الأجسام المضادة. وهي تكون ملائمة لتكوين بروتينات اندماج متعددة النوعية اعتمادًا على الأجسام المضادة. على سبيل المثال» يمكن ‎Fynomers gz Lol‏ مع الطرف ‎N‏ و/أو الطرف © من ‎١‏ لأجسام المضادة لتكوين ‎FynomAbs‏ ثنائية وثلاثية ‎Le gl)‏ ببنيات مختلفة. يمكن اختيار ‎Fynomers‏ باستخدام مجموعات ‎Fynomer‏ من خلال تقنيات الفحص باستخدام ‎Biacore (FACS‏ والتجارب التي أساسها الخلية التي تسمح باختيار كفء ل ‎Fynomers‏ بالخصائص ‎٠ JY)‏ يتم الكشف عن أمثلة على ‎Fynomers‏ في ‎Grabulovski‏ ‎Bertschinger et al., Protein Eng.
Des.
Sel. ‘tet al., J.
Biol.
Chem. 282:3196-3204 (2007)‏ ‎MAbs. 4:497-508 (2011) ¢20:57-68 (2007)‏ .له ‎Acta. ‘¢Schlatter et‏ اه ‎Banner er‏ ‎¢Crystallogr.
D.
Biol.
Crystallogr. 69(Pt6):1124-1137 (2013)‏ و ‎Brack et al., Mol.‏ ‎Cancer Ther. 13:2030-2039 (2014) 0‏ يمكن أيضًا أن تكون الأجسام المضادة التي تم الكشف عنها هنا مقترنة ب أو مترافقة مع واحد أو أكثر من الأجسام المضادة الأخرى (على سبيل المثال؛ لتكوين المترافقات غير المتجانسة للجسم المضاد). يمكن أن ترتبط هذه الأجسام المضادة الأخرى بقمم لاصقة مختلفة ‎TTR Jah‏ أو ‎gy‏ ‏منه أو يمكن أن ترتبط بمولد ضد مستهدف مختلف. يمكن ‎Wad‏ إقران الأجسام المضادة بملصق قابل للانفصال. يمكن استخدام هذه الأجسام المضادة؛ على سبيل المثال؛ لتشخيص ‎ely‏ نشوانى ناتج عن ‎(TTR‏ لملاحظة تفاقم داء نشوانى
ناتج عن ‎(TTR‏ و/أو لتقييم فعالية علاج. تكون هذه الأجسام المضادة مفيدة تحديدًا لإجراء عمليات التحديد هذه في الخاضعين للعلاج الذين يعانون من أو هناك شك في أن يعانوا من داء نشواني ناتج عن ‎(TTR‏ أو في عينات بيولوجية ملائمة تم الحصول عليها من هؤلاء الخاضعين للعلاج. تتضمن الملصقات القابلة للانفصال النموذجية التي قد يتم إقرانها أو ‎leh)‏ بجسم مضاد إنزيمات متنوعة؛ مثل إنزيم بروكسيداز الفجل الحار ‎chorseradish peroxidase‏ إنزيم فوسفاتاز القلوي ‎alkaline phosphatase‏ » إنزيم بيتا-جالاكتوزيداز ‎«beta-galactosidase‏ أو إنزيم أسيتيل كولينستيراز ‎acetylcholinesterase‏ ؛ مجموعات تعويضية0005:ع 005061 ‎Jie‏ ستريتافيدين ‎/streptavidin‏ بيوتين ‎biotin‏ وأفيدين «نلة»/بيوتين؛ المواد الفلورية ‎Jie «fluorescent materials‏ أومبيليفيرون ‎cumbelliferone‏ فلوريسئين ‎cfluorescein‏ فلورسئين أيزو ثيو سيانات ‎fluorescein‏ ‎isothiocyanate 10‏ رودامين ‎hodamine‏ داي كلورو ترايازينيل أمين فلوربسئين ‎ cdichlorotriazinylamine fluorescein‏ دانسِيل كلوريد ‎dansyl chloride‏ أو فيكوايريترين ‎¢phycoerythrin‏ المواد المضئية ‎Jie luminescent materials‏ لومينول ‎‘luminol‏ ‏مواد بيولوجية مضئية ‎Jia bioluminescent materials‏ لوسيفيراز ‎cluciferase‏ لوسيفرين ‎luciferin‏ ‏« وأيكورين ‎taequorin‏ المواد النشطة إشعاعيًاء مثل ‎aadiosilver-111 ¢(90Y) Paso)‏ ‎Bismuth? cradiosilver-199 5‏ اليود ‎BL IPT BI)‏ 211اء)؛ الكريون ‎(MC)‏ السفلر (75)؛ التريتيوم ‎BI Tn) assy) (CH)‏ متثناء ‎(Mn‏ التكنيشيوم ‎(Tc)‏ الثّاليوم ‎(°'Ti)‏ ‏لجاليوم ‎«(Ca Ga)‏ البالاديوم (0!")؛ ‎(Xe) C5550 «(Mo psa‏ الفلور ‎(TF)‏ ‎IFHo YB (La MPm !PGd Lu «Sm‏ وال موتك ‎JP JIBRe Re‏ ‎BGe OTRu «Rh‏ مات روتك ‎GP Sr‏ ووتتال ‎OVD‏ هك ‎Mn‏ وموك موتلا 0 و( !!؛ الفازات التي تصدر بوزيترون ‎positron emitting metals‏ باستخدام تقنيات تضويرٌ ‎Saat‏ بإضدار البوزيترون ‎various positron emission tomographiesde giie‏ ¢ أيونات فلز بارامغناطيسية غير نشطة ‎nonradioactive paramagnetic metal ionsbe lad)‏ ¢ وجزيئات تكون
مرقمة إشعاعيًا أو مترافقة مع نظائر مشعة معينة. قد يتم إجراء ارتباط النظائر المشعة بالأجسام المضادة باستخدام نواتج خلابية ثنائية الوظائف 5 تقليدية. ‎dually‏ لارتباط ‎cradiosilver-199 5 radiosilver-111‏ 8 يتم استخدام روابط أساسها السلفر. انظر )1994( 24-25:1-7 ‎ef al., Cell Biophys.‏ 2:8ه11. قد ينطوي ارتباط النظائر المشعة من الفضة على خفض الجلويولين المناعي باستخدام حمض أسكوربيك. بالنسبة للنظائر المشعة
— 9 6 — ‎Jia‏ م1111 و9057 ¢ يمكن استخدام إبربتوموماب تيوكسيتان وسوف تتفاعل مع هذه النظائر لتكوين 0 -إبريتوموماب تيوكسيتان و907-إبريتوموماب تيوكسيتان؛ على التوالي. انظر ‎Witzig,‏ ‎Cancer Chemother.
Pharmacol., 48 Suppl 1:591-595 (2001)‏ قد يتم إقران أو ترافق الأشطار العلاجية؛ البروتينات الأخرى؛ الأجسام المضادة الأخرى؛ و/أو الملصقات القابلة للانفصال؛ بشكل مباشر أو بشكل غير مباشر من خلال مركب وسيط (على سبيل المثتال؛ رابط) ؛ بجسم ‎alae‏ خاص بالاختراع. انظر على سبيل ‎Arnon ef al., «JG‏ ‎"Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy,” in‏ ‎Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld er al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R.‏ ‎Hellstrom ef al., "Antibodies For Drug Delivery," in Controlled Drug ¢Liss, Inc. 1985)‏ ‎¢tDelivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987) 0‏ ‎Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review," in‏ ‎Monoclonal Antibodies 84: Biological And Clinical Applications, Pinchera ef al. (eds.),‏ ‎"Analysis, Results, And Future Prospective Of The Therapeutic ¢pp. 475-506 (1985)‏ ‎Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy," in Monoclonal Antibodies For‏ ‎Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al. (eds.), pp. 303-16 (Academic Press 15‏ ‎Thorpe ef al., Immunol.
Rev., 62:119-58 (1982) 5 ¢1985)‏ تتضمن الروابط الملائمة؛ على سبيل المثال» الروابط القابلة وغير القابلة للانشطار. يمكن استخدام روابط مختلفة تُطلق الأشطار العلاجية؛ ‎coiling ull‏ الأجسام المضادة؛ و/أو الملصقات القابلة للانفصال المقترنة في ظل ظروف حمضية أو ظروف اختزال؛ عند التعرّض إلى إنزيمات بروتياز معينة؛ أو في ظل ظروف أخرى محددة. 5. التطبيقات العلاجية يمكن استخدام الأجسام المضادة السابقة لعلاج أو تفعيل الوقاية من مرض في يعاني من أو مُعرئّض لخطر أن يعاني من المرض الناتج ‎Wis‏ على الأقل بواسطة ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ ‏وتحديدًا بواسطة الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ ‏5 بالرغم من أن إدراك الآلية ليس مطلويًا للتطبيق؛ يُعتقد أن ‎GF‏ من أو كل الآليات التالية قد ‎aged‏ ‏في علاج الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ باستخدام الأجسام المضادة السابقة: تثبيط تكدس ‎TTR‏ ‏والتكوين اللييفي الناتج عن الجسم المضاد؛ تثبيت تشكيلات غير سامة من ‎TTR‏ الناتج عن الجسم المضاد (على سبيل ‎Jal‏ صور التترامر)؛ أو إزالة ‎TTR‏ المتكدس» ‎TTR‏ الأوليجومري؛ أو
‎TTR‏ المونومري الناتجة عن الجسم المضاد. يمكن ان يكون لنوانج ترافق الجسم المضاد-العقار
‏آليات تأثير إضافية يتم تحديدها بواسطة الشطر المترافق. يتم إعطاء الأجسام المضادة بنظام فعال الأمر الذي يعني ‎deja‏ طريقة الإعطاء وتكرار الإعطاء يؤخر الظهور؛ يقلل من الحدة؛ يثبط التدهور الإضافي؛ و/أو يُحسّن علامة واحدة على الأقل أو عرض واحد على الأقل لاضطراب يتم علاجه. إذا كان هناك مريض يعاني بالفعل من اضطراب؛ يمكن الإشارة إلى النظام باعتباره نظام فعال علاجيًا. إذا كان المريض على خطر ‎Je‏ لإصابة بالاضطراب بالنسبة إلى المجموعة العامة إلا أنه لا يعاني من أعراض ‎cam‏ يمكن الإشارة إلى النظام باعتباره نظام فعال وقائيًا. في بعض الحالات؛ ‎Sa‏ ملاحظة الفعالية العلاجية أو الوقائية في فرد مربض بالنسبة إلى مجموعات المقارنة التاريخية أو الخبرات السابقة في نفس المريض. في
‏0 حالات ‎egal‏ يمكن إظهار الفعالية العلاجية أو الوقائية في ‎pan‏ ما قبل الإكلينيكية أو تجربة إكلينيكية في مجموعة من المرضى المعالجين بالنسبة إلى مجموعة مقارنة من المرضى غير المعالجين. يعتمد تكرار الإعطاء على فترة العمر النصفي الخاصة بالجسم المضاد في الدورة الدموية؛ حالة المريض وطريقة الإعطاء من بين عوامل أخرى. ‎(Sar‏ أن يكون التكرار ‎legal lage‏ شهريًاء
‏5 على نحو ربع سنوي؛ أو على فترات فاصلة غير منتظمة استجابة إلى التغيرات في ‎dla‏ المريض أو تفاقم الاضطراب الذي يتم علاجه. يكون تكرار توضيحي للإعطاء داخل الوريد فيما بين أسبوعيًا وعلى نحو ربع سنوي على مدار سبب مستمر للعلاج؛ بالرغم من إمكانية وجود تكرار أكثر أو أقل للجرعة أيضًا. للإعطاء تحت ‎clad)‏ يكون تكرار جرعة توضيحي من الإعطاء ‎Gag‏ إلى شهريًاء؛ بالرغم من إمكانية وجود تكرار أكثر أو أقل للجرعة أيضًا.
‏0 يعتمد عدد الجرعات التي يتم إعطائها على ما إذا كان الاضطراب حادًا أو ‎Gaye‏ واستجابة الاضطراب إلى العلاج. للاضطرابات الحادة أو حالات الاستشراء الحادة لاضطراب ‎Be (ede‏ ما يكون فيما بين 1 و10 جرعات كافيًا. في بعض الأحيان تكون جرعة كبيرة فردية؛ اختياريًا في صورة مقسمة؛ كافية لاضطراب ‎als‏ أو استشراء حاد لاضطراب مزمن. يمكن تكرار العلاج لإعادة حدوث اضطراب ‎ala‏ أو استشراء حاد. للاضطرابات المزمنة؛ يمكن إعطاء جسم مضاد على فترات
فاصلة منتظمة؛ على سبيل المثال؛ أسبوعيًا؛ على نحو نصف شهري؛ ‎ied‏ على نحو ربع سنوي؛ كل ستة أشهر ‎saad‏ على الأقل 1 5 أو 10 أعوام» أو طوال فترة عمر المريض. 6. التركيبات الصيدلية وطرق استخدامها يتم هنا توفير العديد من الطرق الخاصة بتشخيص»؛ ملاحظة؛ علاج أو تفعيل الوقاية من الأمراض أو الحالات الناتجة ‎Wa‏ على الأقل بواسطة ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ وتحديدًا بواسطة الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ (على سبيل ‎(Jad‏ ‏الداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ تتضمن أمثلة على هذه الأمراض الأمراض النشوانية الناتجة عن ‎TTR‏ عائلي المنشاً؛ مثل اعتلال عضلة القلب النشواني عائلي المنشاأ ‎(FAC)‏ اعتلال الأعصاب النشواني عاتلي المنشاً ‎(FAP)‏ أو الداء النشواني ‎SEY)‏ للجهاز العصبي المركزي ‎((CNSA)‏ ‏0 والأمراض النشوانية الناتجة عن ‎TTR‏ فُرَادِيّ المنشاًء مثل داء نشواني مجموعي شَيخُوخِي ‎(SSA)‏ ‏أو داء نشواني قلبي شَيخُوخِيَ ‎(SCA)‏ يمكن تضمين الأجسام المضادة الموصوفة فيما سبق في تركيبة صيدلية للاستخدام في هذه الطرق. بصفة عامة؛ يتم إعطاء جسم مضاد أو تركيبة صيدلية محتوية على جسم مضاد إلى خاضع للعلاج في حاجة لذلك. يتضمن المرضى المعرزضين للعلاج أفرادًا معرضًا لخطر الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ إلا أنه لا يُظهر أعراضًاء إضافة إلى 5 المرضى الذين يُظهرون أعراضًا حاليًا. يمكن علاج بعض المرضى أثناء مرحلة البادرة الخاصة بالداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏يمكن إعطاء التركيبات الصيدلية على نحو وقائي إلى الأفراد الذين يعانون من خطر جيني معروف للإصابة بالداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ يتضمن ‎Via‏ الأفراد هؤلاء الذين لديهم أقارب قد عانوا من هذا ‎pall‏ وهؤلاء الذي يتم تحديد خطر تعرضهم إلى الإصابة بالمرض عن طريق 0 تتحليل العلامات الجينية أو البيولوجية الكيميائية (على سبيل المثال؛ الطفرات في ‎TTR‏ المصاحبة للداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ متضمنة استخدام الطرق التشخيصية المتوفرة هنا. على سبيل المثال» يوجد أكثر من 100 طفرة في الجين الذي يقوم بتشفير ‎TTR‏ قد تم تضمينها في الداء النشواني الناتج عن ‎«lil TTR‏ على سبيل المثال» 2014/0056904 5لا؛ ‎Saraiva,‏ ‎Hum.
Mutat. 17(6):493-503 (2001); Damas and Saraiva, J.
Struct.
Biol.‏
130:290-299; Dwulet and Benson, Biochem.
Biophys.
Res.
Commun.
)1983( 114:657-662. يمكن في بعض الأحيان التعرّف على الأفراد الذين يعانون من الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏من المظاهر الإكلينيكية الخاصة بالداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ متضمنة واحدًاً أو أكثر مما _يلي: (1) تاريخ في العائلة لمرض اعتلال عصبي؛ ‎duals‏ المصاحب لقصور القلب؛ (2) الألم الناتج عن الاعتلال العصبي أو الاضطرابات الحسية المتقدمة مجهولة الأسباب المرضية؛ (3) ‎EN dais‏ 305 بدون سبب واضح؛ تحديدًا إذا كانت ثنائية الجانب وتتطلب إزالة الضغط جراحيًا؛ (4) اضطرابات حركة المعدة والأمعاء أو خلل وظيفة العصب المستقل مجهول الأسباب المرضية (على سبيل المثال؛ خلل وظيفي ‎bia ait ciel‏ الدّم ‎lati)‏ مثانة عصبية)؛
0 (5) مرض قلبي يتميز بجدران البطين السميكة في عدم وجود ضغط دم مفرط؛ (6) إحصار الأذين-البطين المتقدم غير معلوم ‎lind)‏ تحديدًا عندما يكون مصحويًا بقلب سميك؛ و(6) مشتملات الجسم الزجاجي من النوع القطني. ‎Ando et al., Orphanet Journal of Lil‏ ‎(Rare Diseases 8:31 (2013)‏ يعتمد تشخيص الداء النشواني الدقيق الناتج عن ‎TTR‏ ‏بالرغم من ذلك؛ نمطيًا على خزعات من العضو المستهدف؛ متبوعة بالتلوين الهيستولوجي للنسيج
5 المستأصل باستخدام صبغة خاصة بالمادة النشوانية؛ ‎red‏ 00090. إذا تمت ملاحظة اختبار إيجابي للمادة النشوانية؛ يتم بعد ذلك إجراء التلوين الهيستولوجي الكيميائي المناعي ل ‎TTR‏ ‏لضمان أن يكون بروتين المادة المنتجة المسئولة عن تكوين المادة النشوانية هو بالفعل ‎TTR‏ ‎dually‏ للصور العائلية من الأمراض؛ تكون هناك حاجة لإيضاح وجود طفرة في الجين الذي ‎asi‏ ‏بتشفير ‎TTR‏ قبل أن يتم عمل تشخيص دقيق.
‎Se 0‏ أن يحدث تحديد الخاضع للعلاج في جلسة إكلينيكية؛ أو في مكان ‎AT‏ مثل في منزل الخاضع للعلاج؛ على سبيل المثال» من خلال استخدام الخاضع للعلاج بنفسه لطقم اختبار ذاتي. على سبيل ‎(Jia‏ يمكن تحديد الخاضع للعلاج اعتمادًا على أعراض متنوعة ‎Jie‏ الاعتلال العصبي الطرفي (الحسي والحركي)؛ الاعتلال العصبي المستقل؛ القصور المعوي المعدي؛ اعتلال عضلة القلب؛ اعتلال الكّلية؛ أو الترسيب العيني. انظر ‎Orphanet Journal of Rare‏
‎Diseases 8:31 )2013( 5‏ يمكن أيضًا تحديد الخاضع للعلاج بواسطة المستويات المتزايدة من
— 3 7 — كما تم الكشف عن ذلك في الأمثلة. كما هو مضمون عن طريق التاريخ العائلي؛ الاختبار الجيني؛ أو الفحص الدوائي للداء النشواني الناتج عن »1 يمكن أن يبدا العلاج عند أي سن (على سبيل ‎JEL‏ 20 30 40 50« 60« أو 70 ‎(ple‏ . يستلزم العلاج نمطيًا جرعات متعددة على مدار فترة زمنية ‎(Sag‏ ملاحظته عن طريق تجرية استجابات الجسم المضاد أو الخلية آ المنشطة أو الخلية 8 إلى عامل علاجي (على سبيل ‎(Jl)‏ صورة مشذبة من ‎TTR‏ تشتمل على الوحدات البنائية للحمض الأميني 89- 97( بمرور الوقت. إذا أخفقت الاستجابة؛ تتم الإشارة إلى جرعة معززة. في التطبيقات الوقائية؛ يتم إعطاء جسم مضاد أو تركيبة صيدلية منه إلى خاضع للعلاج عُرضة 0 إلىء أو بطريقة أخرى عُرضة لخطر مرض (على سبيل المثال؛ الداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ ‏بنظام (جرعة؛ تكرار وطريقة الإعطاء) فعال لتقليل ‎lal‏ خفض الحدة؛ أو تأجيل بداية إشارة واحدة أو عرض واحد على الأقل للمرض. في التطبيقات العلاجية؛ يتم إعطاء جسم مضاد أو ‎Mie‏ ‏مناعي للحث على جسم مضاد إلى خاضع للعلاج هناك شك في أنه يعاني؛ أو يعاني بالفعل من مرض (على سبيل المثال» الداء النشواني الناتج عن ‎(TTR‏ في نظام (جرعة؛ تكرار وطريقة 5 الإعطاء) فعال لتحسين أو على الأقل تثبيط التدهور الإضافي لإشارة واحدة أو عرض واحد على الأقل للمرض . يتم اعتبار نظام فعال علاجيًا أو ‎Willy‏ إذا حقق كائن معالج فردي نتيجة أكثر إيجابية من متوسط النتيجة فى مجموعة المقارنة المكونة من الكائنات القابلة للمقارنة غير المعالجة بواسطة الطرق التي تم الكشف عنها هناء أو إذا تم إظهار نتيجة أكثر إيجابية لنظام في الكائنات المعالجة في مقابل كائنات المقارنة في تجربة إكلينيكية يتم التحكم فيها (على سبيل ‎(JU‏ طور 2؛ الطور 3/2 أو تجرية ‎shall‏ 3) أو نموذج حيواني عند مستوىق ‎p‏ > 0.05 أو 0.01 أو حتى 0.001. يمكن استخدام نظام فعال من جسم مضاد؛ على سبيل المثال؛ لتثبيط أو خفض ككَدّس ‎TTR‏ في خاضع للعلاج يعاني من أو معرضًا لخطر أن يعاني من ‎Ala‏ مصحوية بتراكم ‎(TTR‏ تثبيط أو خفض التكوين اللييفي ل ‎TTR‏ في خاضع للعلاج يعاني من أو معرضًا لخطر ‎dla‏ مصحوية
بتراكم ‎«TTR‏ خفض أو إزالة رواسب ‎TTR‏ أو ‎TTR‏ المتكدس في خاضع للعلاج يعاني من أو معرضًا لخطر ‎Alla‏ مصحوية بتراكم ‎(TTR‏ تثبيت تشكيلات غير سامة من ‎TTR‏ في خاضع للعلاج يعاني من أو معرضًا لخطر حالة مصحوية بتراكم ‎(TTR‏ تثبيط التأثيرات السامة لتكدسات ‎(TTR‏ اللييفات أو الرواسب في خاضع للعلاج يعاني من أو معرضًا لخطر حالة مصحوية بتراكم 116؛ تشخيص وجود أو عدم وجود تراكم نشواني ‎TTR‏ في نسيج هناك شك في اشتماله على التراكم النشواني؛ تحديد مستوى رواسب ‎TTR‏ في خاضع للعلاج عن طريق الكشف عن وجود الجسم المضاد المرتبط في الخاضع للعلاج بعد إعطاء الجسم المضاد؛ الكشف عن وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللبيفية من ‎TTR‏ في خاضع للعلاج؛ ملاحظة وتقييم فعالية العوامل العلاجية التي يتم استخدامها لعلاج المرضى الذين تم تشخيص إصابتهم بداء
0 ششواني ناتج عن ‎(TTR‏ مما يحث على استجابة مناعية تشتمل على الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ ‏في خاضع للعلاج؛ تأخير بداية ‎Alls‏ مصحوية ب تراكم نشواني ‎TTR‏ في خاضع للعلاج؛ أو علاج أو تفعيل الوقاية من داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ في مريض. تتنوع الجرعات الفعالة اعتمادًا على العديد من العوامل المختلفة؛ ‎Jie‏ وسيلة الإعطاء؛ الموقع المستهدف»؛ الحالة الفسيولوجية للخاضع للعلاج؛ سواء أكان الخاضع للعلاج إنسان أو حيوان»
5 الأدوية الأخرى التي يتم إعطائها؛ وسواء أكان العلاج ‎Gly‏ أو علاجيًا. يمكن أن يكون ‎Gla‏ جرعة توضيحي للأجسام المضادة من 20-0.1؛ أو 5-0.5 مجم/كجم من وزن الجسم (على سبيل المثال» 0.5 1 2؛ 3 4 أو 5 مجم/كجم) أو 1500-10 مجم كجرعة ثابتة. تعتمد الجرعة على حالة المريض والاستجابة إلى العلاج السابق؛ إذا وجدء سواءً أكان العلاج وقائيًا أو علاجيًا وسواءً أكان الاضطراب حادًا أو ‎lade‏ من بين عوامل أخرى.
‎(Se 0‏ إعطاء الجسم المضاد بهذه الجرعات يوميّاء ‎Lp‏ بعد يوم؛ أسبوعيًا؛ على نحو نصف شهري؛ شهريًا؛ على نحو ربع سنوي؛ أو ‎Wy‏ لأي جدول آخر محدد بواسطة التحليل التجريبي. يستلزم علاج توضيحي الإعطاء بجرعات متعددة على مدار فترة مطلة؛ على سبيل المثال؛ تبلغ على الأقل ستة أشهر. تستلزم نظم العلاج التوضيحية الإضافية الإعطاء مرة كل أسبوعين أو مرة في الشهر أو مرة كل من 3 إلى 6 أشهر.
يمكن إعطاء الأجسام المضادة عبر طريقة محيطية. تتضمن طرق الإعطاء الإعطاء الموضعي؛ داخل الوريد؛ عن طريق الم تحت الجلد؛ داخل الشريان؛ داخل الجمجمة؛ داخل الغمد» داخل الغشاء البربتوني؛ داخل الأنف أو في العضل. يمكن أن تكون الطرق لإعطاء الأجسام المضادة داخل الوريد أو تحت الجلد. يمكن أن يكون الإعطاء داخل الوريد؛ على سبيل ‎(Jd‏ عن طريق التسريب على مدار فترة ‎die‏ 90-30 دقيقة. يتم في الأغلب تنفيذ هذا النوع من الحقن نمطيًا في عضلات الذراع أو الساق. في بعض ‎(hall‏ يتم حقن العوامل بشكل مباشر في نسيج معين حيث قد تراكمت الرواسب» على سبيل المثال الحقن داخل الجمجمة. يمكن أن تكون التركيبات الصيدلية للإعطاء عن طريق الحقن معقمة ومتساوية التوتر إلى حدٍ كبير )350-250 مللي أسمول/كجم من الماء) وتصنيعها في ظل ظروف ‎(GMP‏ يمكن توفير 0 التركيبات الصيدلية في صورة وحدة جرعة (أي؛ الجرعة لعملية إعطاء فردية). يمكن صياغة التركيبات الصيدلية باستخدام واحدة أو أكثر من المواد الحاملة المقبولة فيزيولوجيًا؛ المواد المخففة؛ السواغات أو المواد المساعدة. تعتمد الصيغة على طريقة الإعطاء المختارة. للحقن؛ يمكن صياغة الأجسام المضادة في محاليل مائية؛ على سبيل المثال» في محاليل منظمة متوافقة فيزيولوجيًا مثل محلول ‎(Hank‏ محلول ‎Ringer‏ أو محلول ملحي فيزيولوجي أو محلول منظم بأسيتات (لتقليل 5 الإنزعاج عند موضع الإعطاء). يمكن أن يحتوي المحلول على عوامل صياغة ‎(Glad else Jie‏ تثبيت و/أو تشتيت. على نحو بديل يمكن أن تكون الأجسام المضادة في صورة مجففة بالتجميد للتكوين باستخدام ‎sale‏ ناقلة ملائمة؛ على سبيل المثال؛ ماء معقم خالي من ‎alge‏ للحمى؛ قبل الاستخدام. يمكن إعطاء النظم في توليفة مع عامل آخر فعال في علاج أو الوقاية من المرض الذي يتم 0 علاجه. ‎(Sa‏ أن تتضمن هذه العوامل ‎SIRNA‏ لتثبيط التعبير ‎Shell‏ عن ‎TTR‏ أو ‎Vyndagel‏ ‏مُثبّت ل ‎TTR‏ في تكوين تترامر. بعد العلاج؛ يمكن تقييم حالة الخاضع للعلاج لتحديد تقدم أو فعالية هذا العلاج. تختبر هذه الطرق على نحو مفضل التغيرات في مستويات المادة النشوانية ل ‎TTR‏ أو مستويات الصور غير الطبيعية من ‎TTR‏ على سبيل المثال؛ قد يتم تقييم مستويات المادة النشوانية ل ‎TTR‏ لتحديد 5 التحسّن بالنسبة إلى مستويات المادة النشوانية ل ‎TTR‏ الخاصة بالخاضع للعلاج في ظل الظروف
القابلة للمقارنة قبل العلاج. يمكن ‎Wad‏ مقارنة مستويات المادة النشوانية ل ‎TTR‏ الخاصة بالخاضع للعلاج بمجموعات المقارنة في ظل الظروف القابلة للمقارنة. يمكن تكون مجموعات المقارنة كائنات غير معالجة مصابة بالمثل أو كائنات طبيعية غير معالجة (من بين ‎GUIS‏ ‏المقارنة الأخرى). يشير التحسّن بالنسبة إلى الكائنات غير المعالجة المصابة بالمثل أو مستويات تقترب من أو تصل إلى المستويات في الكائنات الطبيعية غير المعالجة إلى استجابة إيجابية للعلاج. يمكن قياس مستويات المادة النشوانية ل ‎TTR‏ بواسطة عدد من الطرق؛ بما في ذلك تقنيات التصوير. تتضمن أمثلة على تقنيات التصوير الملائمة مسح ‎PET‏ باستخدام ‎TTR‏ مرقم إشعاعيًا أو شظايا من ذلك؛ الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ أو شظايا من ذلك عوامل تصوير نشوانية أساسها ‎edie «58340 bad 0‏ على سبيل المثال» ‎(US 2011/0008255( PIB‏ ببتيد تصوير نشواني 1 (يرتبط التوزيع البيولوجي لببتيد التصوير النشواني» ‎(P31‏ بتحديد كم المادة النشوانية اعتمادًا على تلوّن النسيج بِحُمْرَةٌ الكُونعُو ‎Wall et al., Abstract No. 1573, 2011 ISNM‏ ‎«(Annual Meeting‏ ومرقمات ‎PET‏ الأخرى. يمنك قياس مستويات الصور غير الطبيعية من ‎(TTR‏ على سبيل المثال» عن طريق ‎A3LYSDS-PAGE chal‏ وبسترن أو تجارب بطبق ‎Meso Scale Discovery 5‏ باستخدام الأجسام المضادة التي تم الكشف عنها هنا على عينات البلازما أو عينات خزعة من خاضع للعلاج ومقارنتها بعينات المقارنة؛ كما هو موصوف في الأمثلة. أ. طرق التشخيص والملاحظة يتم ‎Lad‏ توفير طرق للكشف عن استجابة مناعية ضد 114 في مريض يعاني من أو ‎Lag‏ ‏0 إلى الأمراض المصحوية بترسيب ‎TTR‏ أو الصور المسببة للأمراض من ‎TTR‏ (على سبيل ‎(Jal‏ الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ يمكن استخدام الطرق لملاحظة مسار العلاج الدوائي والوقائي باستخدام العوامل التي تم توفيرها هنا. تُظهر مواصفة الجسم المضاد بعد التحصين المناعي الإيجابي نمطيًا قمة مباشرة في تركيز الجسم المضاد ‎Bote‏ بتضاؤل أسي. بدون جرعة إضافية؛ يقترب التضاؤل من مستويات ما قبل العلاج 5 في غضون فترة تبلغ من أيام إلى شهور اعتمادًا على فترة العمر النصفي الخاصة بالجسم المضاد
‎aed‏ على سبيل ‎Ja‏ تكون فترة العمر النصفي الخاصة ببعض من الأجسام المضادة البشرية بقيمة 20 يوم. في بعض الطرق؛ يتم إجراء قياس قيمة قاعدية للجسم المضاد إلى ‎TTR‏ في الخاضع للعلاج قبل الإعطاء» يتم إجراء عملية قياس ثانية على نحو سريع لاحقًا لتحديد مستوى الجسم المضاد الخاصة بالقمة؛ وبتم إتمام واحد أو أكثر من القياسات الإضافية عند فواصل لملاحظة تضاؤل مستويات الجسم المضاد. ‎Laie‏ يتراجع مستوى الجسم المضاد إلى القيمة القاعدية أو نسبة مئوية محددة مسبقًا للقمة أقل من القيمة القاعدية ‎lo)‏ سبيل ‎(Jud‏ 9650 9625 أو 9610)؛ يتم إعطاء إعطاء جرعة إضافية من الجسم المضاد. في بعض الطرق؛ تتم مقارنة مستويات القمة أو المستويات المقاسة لاحقًا الأقل من الخلفية بالمستويات المرجعية المحددة مسبقًا لتكوين نظام علاج 0 وقائي أو دوائي مفيد في الخاضعين للعلاج الآخرين. إذا كان مستوى الجسم المضاد المقاس أقل إلى حدٍ كبير من مستوى مرجعي ‎le)‏ سبيل المثال؛ أقل من المتوسط - 1 أو؛ على نحو مفضل؛ اثنين من الانحرافات القياسية للقيمة المرجعية في مجموعة من الخاضعين للعلاج المستفيدين من العلاج) تم الإشارة إلى إعطاء جرعة إضافية من الجسم المضاد. يتم ‎Lad‏ توفير طرق للكشف عن الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو 5 الييفية من ‎TTR‏ في خاضع للعلاج؛ على سبيل المثال» عن طريق قياس المادة النشوانية ل ‎TTR‏ ‏أو الصور المسببة للأمراض من ‎TTR‏ (على سبيل المثال؛ الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ,؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ في عينة من خاضع للعلاج أو عن طريق تصوير ‎TTR‏ ‏في جسم الكائن الحي في خاضع للعلاج. تكون هذه الطرق مفيدة لتشخيص أو تأكيد تشخيص الأمراض المصحوية بهذه الصور المسببة للأمراض من ‎TTR‏ (على سبيل المثال؛ الداء النشواني 0 الناتج عن ‎(TTR‏ أو القابلية لذلك. يمكن أيضًا استخدام الطرق على الخاضعين للعلاج الذين لا يُظهرون أعراضًا. يشير وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل ‎op lala‏ المتكدسة؛ أو اللييفية من إلى القابلية في المستقبل للتعرض إلى مرض يُظهر أعراضًا. تكون الطرق ‎Lad‏ مفيدة لملاحظة تفاقم المرض و/أو الاستجابة للعلاج في الخاضعين للعلاج الذين تم تشخيص إصابتهم بداء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ من قبل.
يمكن تلامس العينات البيولوجية التي تم الحصول عليها من خاضع للعلاج يعاني من؛ هناك شك في أنه يعاني من؛ أو معرض لخطر أن يعاني من داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ مع الأجسام المضادة التي تم الكشف عنها هنا لتقييم وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ على سبيل المثال؛ قد تتم مقارنة مستويات الصور المونومرية؛ المطوية بشكل ‎(bla‏ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ في هؤلاء الخاضعين للعلاج بتلك الموجودة في الخاضعين للعلاج الأصحاء. على نحو ‎chy‏ قد تتم مقارنة مستويات المادة النشوانية ل ‎TTR‏ ‏أو الصور المسببة للأمراض من ‎TTR‏ (على سبيل المثال؛ الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ في هؤلاء الخاضعين للعلاج الذي يتلقون العلاج للمرض بتلك الخاصة بالخاضعين للعلاج الذين لم يتم علاجهم لداء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ ينطوي بعض 0 -. من هذه الاختبارات على خزعة من النسيج الذي تم الحصول عليه من هؤلاء الخاضعين للعلاج. قد تكون تجارب ‎Lal ELISA‏ عبارة عن طرق مفيدة؛ على سبيل المثال؛ لتقييم مستويات الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ,؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ في عينات السائل. تنطوي بعض من هذه تجارب ‎ELISA‏ على أجسام مضادة ل ‎TTR‏ ترتبط على نحو مميز بالصور المونومرية؛ المطوية بشكل ‎cp hla‏ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ بالنسبة إلى صور التترامر 5 الطبيعية من ‎TTR‏ ‏يمكن أن تعمل طرق التصوير في جسم الكائن الحي عن طريق إعطاء مادة كاشفة؛ مثل الجسم المضاد الذي يرتبط بالصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ ‏في الخاضع للعلاج؛ ثم الكشف عن المادة الكاشفة بعد أن يتم ربطها. ترتبط هذه الأجسام المضادة نمطيًا بقمة لاصقة داخل الوحدات البنائية 97-89 من 11. إذا تطلب الأمرء يمكن تجنب 0 الاستجابة ‎dU‏ عن ‎Goh‏ استخدام شظايا الجسم المضاد التي تفتقر إلى منطقة ثابتة بطول كامل؛ ‎Fabs Jie‏ في بعض الطرق؛ يمكن أن يعمل نفس الجسم المضاد باعتباره علاج ومادة كاشفة تشخيصية. يمكن إعطاء المواد الكاشفة التشخيصية عن طريق الحقن داخل الوريد في جسم الخاضع للعلاج؛ أو عبر طرق أخرى تعتبر مقبولة. ينبغي أن تكون جرعة المادة الكاشفة في حدود نفس النطاقات 5 مثل طرق العلاج. ‎(Bhat‏ يتم ترقيم المادة الكاشفة؛ بالرغم من أنه في بعض الطرق؛ تكون المادة
الكاشفة الرئيسية ذات الألفة للصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ غير مرقمة ويتم استخدام عامل ترقيم ثانوي للارتباط بالمادة الكاشفة الرئيسية. يعتمد اختيار علامة الترقيم على وسيلة الكشف. على سبيل ‎(Jha)‏ تعتبر ‎Ade‏ ترقيم فلُورية ملائمة للكشف الضوئي. يعتبر استخدام علامات الترقيم البارامغناطيسية ملائمًا للكشف المقطعي بدون تدخل جراحي. يمكن ‎Lad‏ الكشف عن علامات الترقيم النشطة إشعاعيًا باستخدام ‎PET‏ أو ‎SPECT‏ ‏يتم تنفيذ التشخيص عن طريق مقارنة ‎cana cae‏ و/أو شدة الموقع المرقم بقيم خط القاعدة المناظرة. يمكن أن تمثل قيم خط القاعدة المستويات المتوسطة في مجموعة من الأفراد غير المصابين بمرض. يمكن أيضًا أن تمثل قيم خط القاعدة المستويات السابقة المحددة في نفس الخاضع للعلاج. على سبيل المثال؛ يمكن تحديد قيم خط القاعدة في خاضع للعلاج قبل بدء 0 العلاج؛ ومقارنة القيم المقاسة بعد ذلك بقيم خط القاعدة. يشير انخفاض في القيم بالنسبة إلى خط القاعدة بصفة عامة إلى استجابة إيجابية للعلاج. 9. الأطقم يوفر الاختراع بشكل إضافي أطقمًا ‎Jo)‏ سبيل المثال؛ حاويات) تشتمل على جسم مضاد تم الكشف ‎aie‏ هنا والمواد ذات الصلة؛ ‎Jie‏ التعليمات للاستخدام (على سبيل ‎(Jal‏ ملحق العبوة). 5 قد تحتوي تعليمات الاستخدام» على سبيل المثال؛ على تعليمات لإعطاء الجسم المضاد واختياريًا واحد أو أكثر من العوامل الإضافية. قد تكون الحاويات الخاصة بالجسم المضاد عبارة عن وحدات جرعة؛ عبوات كتلية (على سبيل ‎(Ji)‏ عبوات متعددة الجرعات)؛ أو وحدات الجرعة الفرعية. يشير ‎Gale‏ العبوة إلى التعليمات المتضمنة ‎fle‏ في العبوات التجارية الخاصة بالمنتجات العلاجية التي تحتوي على معلومات عن دواعي الاستعمال؛ الاستخدام؛ الجرعة؛ الإعطاء» موانع 0 الاستعمال و/أو التحذيرات ‎Lad‏ يتعلق باستخدام هذه المنتجات العلاجية. يمكن ‎Wad‏ أن تتضمن الأطقم حاوية ثانية تشتمل على محلول منظم مقبول ‎slo dio (Blane‏ كابح للبكتيريا للحقن (1ا7//ا8)»؛ محلول ملحي منظم بالفوسفات؛ محلول ‎Ringer‏ ومحلول ديكستروز. يمكن ‎Lad‏ أن تتضمن موادًا أخرى مطلوية من من وجهة نظر تجارية وخاصة بالمستخدم» متضمنة المحاليل المنظمة ‎(GAY‏ المواد المخففة؛ المرشحات؛ الإبرء والمحاقن.
0. التطبيقات الأخرى يمكن استخدام الأجسام المضادة للكشف عن الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ترانس ثيرتين ‎(TTR)‏ أو شظايا منه؛ في سياق التشخيص الإكلينيكي أو العلاج أو في البحث. على سبيل المثال؛ يمكن استخدام الأجسام المضادة للكشف عن وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ, المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ في عينة بيولوجية كدلالة على أن العينة البيولوجية تشتمل على رواسب ‎TTR‏ نشوانية. يمكن مقارنة ارتباط الأجسام المضادة بالعينة البيولوجية بارتباط الأجسام المضادة بعينة مقارنة. يمكن أن تشتمل عينة المقارنة والعينة البيولوجية على ‎WIA‏ من نفس ‎Lite‏ النسيج. يمكن الحصول على عينات المقارنة والعينات البيولوجية من نفس الفرد أو أفراد مختلفين وفي نفس المناسبة أو في مناسبات مختلفة. إذا تطلب 0 الأمرء يتم تقييم العديد من العينات البيولوجية والعديد من عينات المقارنة في العديد من المناسبات للحماية ضد التغير العشوائي المستقل عن الاختلافات فيما بين العينات. يمكن بعد ذلك إجراء مقارنة مباشرة فيما بين العينة (العينات) البيولوجية وعينة (عينات) المقارنة لتحديد ما إذا كان ارتباط الجسم المضاد (أي؛ وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل ‎(pala‏ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ بالعينة (العينات) البيولوجية تتم ‎cial)‏ خفضه» أو تركه كما هو بالنسبة إلى ارتباط 5 الجسم المضاد بعينة (عينات) المقارنة. يشير ارتباط الجسم المضاد المتزايد بالعينة (العينات) البيولوجية بالنسبة إلى ‎due‏ (عينات) المقارنة إلى وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ في العينة (العينات) البيولوجية. في بعض الحالات؛ يكون ‎Lbs)‏ الجسم المضاد المتزايد مؤثر إحصائيًا. ‎(Glan)‏ يكون ارتباط الجسم المضاد بالعينة البيولوجية ‎ef‏ بنسبة على الأقل 1.5 ‎ye‏ 2 مرة؛ 3 مرات» 4 مرات»؛ 5 مرات»؛ 10 ‎«lye‏ 20 0 مرزة؛ أو 100 مرة من جسم مضاد الارتباط بعينة المقارنة. بالإضافة إلى ذلك؛ يمكن استخدام الأجسام المضادة للكشف عن وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ في عينة بيولوجية لملاحظة وتقييم فعالية عامل علاجي يتم استخدامه لعلاج مريض تم تشخيص أنه يعاني من داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ ‏يتم تقييم عينة بيولوجية من مريض تم تشخيص أنه يعاني من داء نشواني ناتج عن ‎TTR‏ لتعيين 5 قيمة قاعدية لارتباط الأجسام المضادة بالعينة (أي؛ ‎dad‏ قاعدية لوجود الصور المونومرية؛
المطوية بشكل خاطئ,؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎TTR‏ في العينة) قبل بدء العلاج باستخدام العامل العلاجي. في بعض الحالات؛ يتم تقييم العديد من العينات البيولوجية من المريض في العديد من المناسبات لتعيين كل من قيمة قاعدية وقياس التغير العشوائي المستقل عن العلاج. ثم يتم إعطاء عامل علاجي في نظام. قد يتضمن النظام العديد من عمليات إعطاء العامل على مدار فترة زمنية. اختياريًاء يتم تقييم ارتباط الأجسام المضادة (أي؛ وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ,؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ في العديد من المناسبات في العديد من العينات البيولوجية من المريضء لتعيين كل من قياس التغير العشوائي ولإظهار ميل للاستجابة إلى العلاج المناعي. تتم بعد ذلك مقارنة عمليات التقييم المتنوعة الخاصة بارتباط الجسم المضاد بالعينات البيولوجية. إذا تم تنفيذ اثنتين فقط من عمليات التقييم؛ يمكن إجراء مقارنة مباشرة فيما بين الاثنتين 0 .من عمليات التقييم لتحديد ما إذا كان ارتباط الجسم المضاد (أي؛ وجود الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ قد تمت ‎canal)‏ خفضه؛ أو ظل كما هو ‎Las‏ بين عمليتي التقييم. إذا تم إجراء أكثر من اثنتين من عمليات ‎aul‏ يمكن تحليل القياسات في صورة مسار زمني يبداً قبل العلاج باستخدام العامل العلاجي ويستمر خلال دورة العلاج. في المرضى الذي قد تم خفض ارتباط الجسم المضاد بالعينات البيولوجية من أجلهم (أي؛ وجود 5 الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ يمكن استنتاج أن العامل العلاجي كان فعالاً في علاج الداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ في المريض. يمكن أن ‎Ose‏ ‏الانخفاض في ارتباط الجسم المضاد مؤثرًا إحصائيًا. اختياريًا؛ ينخفض الارتباط بنسبة على الأقل ‎Hl‏ %2 %3 4ت %5 %10 615 %20 9630 9640 9650 9660 9670 0 %90< أو 96100. يمكن ‎shal‏ تقييم ارتباط الجسم المضاد مع تقييم العلامات ‎sabe Vly‏
0 الأخرى الخاصة بالداء النشواني الناتج عن ‎TTR‏ ‏يمكن أيضًا استخدام الأجسام المضادة كمواد كاشفة للبحث من أجل البحث المعملي في الكشف عن الصور المونومرية؛ المطوية بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ أو ‎Lad‏ منه. في هذه الاستخدامات؛ يمكن ترقيم الأجسام المضادة باستخدام جزيئات فلورية؛ جزيئات مرقمة بالدوران» إنزيمات؛ أو نظائر إشعاعية؛ ‎(Sang‏ توفيرها في صورة طقم بكل المواد الكاشفة الضرورية لإجراء تجرية الكشف. يمكن ‎Wal‏ استخدام الأجسام المضادة لتنقية الصور المونومرية؛ المطوية
-7ع8- بشكل خاطئ؛ المتكدسة؛ أو اللييفية من ‎(TTR‏ أو شركاء الارتباط الخاصين بالصور المونومرية؛ المطوية بشكل ‎lala‏ المتكدسة؛ أو ‎Lendl)‏ من ‎TTR‏ على سبيل ‎(Jal‏ بواسطة استشراب الألفة. يمكن ‎Wad‏ استخدام الأجسام المضادة لتثبيط أو خفض تَكَدْس ‎(TTR‏ تثبيط أو خفض التكوين اللييفي ل ‎TTR‏ خفض أو إزالة رواسب ‎TTR‏ أو تكدسات ‎TTR‏ أو تثبيت تشكيلات غير ‎Lalu‏ ‏من ‎TTR‏ في عينة بيولوجية. يمكن أن تشتمل العينة البيولوجية؛ على سبيل المثال؛ على الدم؛ المصلء البلازماء أو النسيج (على سبيل ‎(JU‏ نسيج من القلب؛ الجهاز العصبي الطرفي؛ الجهاز العصبي المستقل. الكُلى؛ العيون؛ أو القناة المعدية المعوية). في بعض الحالات؛ يتم تثبيط تكدس ‎(TTR‏ التكوين اللييفي ل ‎TTR‏ أو رواسب ‎TTR‏ أو خفضه بنسبة على الأقل 9610؛ 0 9620؛ %25 9630 %40 9650؛ أو 9675؛ (على سبيل المثال» 9675-9610 أو 9630- 0). يتم وصف التجارب للكشف عن التكوين اللييفي في مكان آخر هنا. انظر ‎US Lif‏ 2014/0056904. يتم تضمين كل عمليات إيداع البراءات» مواقع الويب» المنشورات الأخرى؛ أرقام الوصول وما شابه المذكورة فيما سبق أو فيما يلي كمرجع بأكملها لكل الأغراض إلى نفس الحد كما لو أنه قد تم 5 إيضاح كل عنصر فردي بشكل خاص ومنفرد ليتم تضمينه كمرجع. إذا تم ريط إصدارات مختلفة من متوالية برقم وصول في أوقات مختلفة؛ فإنه يُقصد الإصدار المصحوب برقم وصول عند تاريخ الإيداع الفعلي لهذا الطلب. يعني تاريخ الإيداع الفعلي تاريخ الإيداع الأبكر من تاريخ الإيداع الحقيقي أو تاريخ الإيداع الخاص بطلب ذي أسبقية يشيرالى رقم الوصول إذا كان الأمر قابلاً للتطبيق. بالمثل إذا تم نشر إصدارات مختلفة من المنشور؛ موقع الويب أو ما شابه في أوقات 0 مختلفة؛ فإنه يُقصد الإصدار المنشور ‎Baas‏ عند تاريخ الإيداع الفعلي للطلب ما لم يتم إيضاح شيء بخلاف ذلك. يمكن استخدام أية سمة؛ ‎ghd‏ عنصر؛ تجسيد؛ أو جانب من الاختراع في توليفة مع أخرى ما لنم يتم إيضاح شيء بخلاف ذلك على نحو محدد. بالرغم من أنه قد تم وصف الاختراع الحالي ببعض من التفصيل على سبيل الإيضاح وإفراد أمثلة لأغراض تتعلق بالوضوح والإدراك» سيتضح أنه قد يتم تطبيق تغييرات وتعديلات معينة واقعة في نطاق عناصر الحماية 5 الملحقة.
الأمثلة
مثال 1. تحديد الأجسام المضادة أحادية النسيلة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ
تم توليد الأجسام المضادة أحادية النسيلة النوعية من حيث التشكيل ضد الصور المونومرية؛
المطوية بشكل ‎cp lala‏ اللييفية؛ أو المكدسة من ‎TTR) TTR‏ المطوي بشكل خاطئ)؛ فحصهاء
التعبير ‎Why‏ عنهاء وتنقيتها كما هو موصوف في ‎ein‏ المواد والطرق (أ-د). من أجل ‎Ag‏
الأجسام المضادة أحادية النسيلة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ؛ تم فحص البنية البلورية الخاصة
بصورة تترامر البشرية من ‎TTR‏ لإيجاد مناطق البروتين التي تم إخفائها في التترامر؛ ولكنه يتم
كشفها عند انفصال التترامر إلى الوحدات الفرعية المونومرية الخاصة به. كانت المنطقة المحددة
هي الوحدات البنائية 97-89 ‎(EHAEVVFTA)‏ (المتوالية رقم: 113) موضوعة داخل الجديلة 0 © من ‎TTR‏ وتنحية أيوناتها عند السطح البيني للدايمر للبروتين التترامري. لم يكشف بحث
1 الخاص بقاعدة بيانات البروتين عن أية بروتينات بشرية أخرى تعالج هذه المتوالية.
تم تخليق ببتيد مشتمل على هذه المتوالية (1/99169 181/1/7ا09) (المتوالية رقم: 114).
تمثل الأحرف الكبيرة الوحدات البنائية 97-89 من ‎TTR‏ تمثل الأحرف الصغيرة الوحدات البنائية
للرابط الإضافي المضاف ‎sal‏ القابلية للذويان الخاصة بالببتيد المؤلد للضد ولتعيين شظية من 9 5 أحماض أمينية كمتوالية داخلية. تم ربط هذا الببتيد بقلب شجري من بولي-ليزين؛ مما يؤلد ‎Moe‏
مناعي من ببتيد مولد للضد متعدد ‎(TTR-MAP)‏ مشتمل على قلب من الوحدات البنائية الخاصة
بالليزين مع تفرعات متعددة مرتبطة بالببتيد 89-97 ‎TTR‏ تم توليد الأجسام المضادة المدرجة في
جدول 2 ضد ‎TJTR-MAP‏
بالإضافة إلى هذا الببتيد المولد للضد المتعدد؛ تم توليد اثنين من المؤّلدات المناعية الأخرى 0 المحتوية على نفس شظية ‎TTR‏ عن طريق ربط ببتديات 89-97 ‎TTR‏ مشابهة على نحو
تساهمي (1/8 1821/1/7 ا20-099-أميد (المتوالية رقم: 115( 5 ‎—Ac-EHAEVVFTAcgg‏
© ‏والطرف‎ N= ‏(المتوالية رقم: 116)) عبر الوحدات البنائية للسِيستئين عند الطرف‎ aul
بهيموسيانين }3:5 ‎TTR89-97-N-KLH)‏ و41/ا-11"89-97-6).
— 8 4- بعد توليد الجسم المضادء فحصه؛ التعبير وراثيا عنه؛ وتنقيته؛ تم تحديد متغيرات حركية ا لارتباط التفصيلية (معدل الترابط ‎(ka)‏ معدل الانفصال ‎(kd)‏ وثابت ألفة الارتباط ‎(KD)‏ للأجسام
Surface Plasmon Resonance ‏المطوي بشكل خاطئ بواسطة‎ TTR ‏الرئيسية ل‎ salad) ‎(SPR)‏ د ‎TTR F8TM/L110M‏ البشري لناتج عودة الاتحاد الجيني؛ كما هو معروض في ‏5 جدول 2. تم تثبيت 96ا مضاد لفأر ‎(GE Healthcare)‏ على صَحيفَةٌ مستشعر 05 (تفتقر إلى ‏سلاسل دكستران) عبر إقران الأمين بإتباع التعليمات المتوفرة في الطقم المضاد لفأر ‎GE‏ ‎(Healthcare‏ وتم احتجاز ‎MAbs‏ ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ وصولاً إلى مستوى لضمان ‏أقصى ارتباط لناتج تحليل ‎RU‏ 30-50. تم تمرير تركيزات متنوعة لناتج التحليل ‎TTR)‏ ‎30 ‏البشري لناتج عودة الاتحاد الجيني) على المركب الترابطي المحتجز عند‎ F8TM/L110M 1 0-20 960.05 + HBS) ‏ميكرو لتر/دقيقة في المحلول المنظم المُستخدم في التجرية‎ 0 ‏مجم/ملليلتر ‎(BSA‏ في عملية تخفيف 3 مرات. لكل تركيز؛ استمر التفاعل لإطار زمني يسمح ‏بوصول تركيزات ناتج تحليل أعلى إلى التوازن أثناء الترابطء إضافة إلى تضاؤل على الأقل 9610 ‏من الإشارة أثناء الانفصال. تم استخدام تركيز واحد على الأقل (ليس الأعلى أو ‎(JN‏ مرتين. تم ‏اختيار نطاقات التركيز الخاصة بناتج التحليل اعتمادًا على التجربة التمهيدية لتشمل قيمة من على الأقل 10 مرات أعلى من ‎KD‏ إلى 10 مرات أقل من ‎KD‏ ‏يتم عرض نتائج تحليل ‎SPR‏ الخاص ب 017/805 الرئيسي ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ في جدول ‏2 فيما يلي. ‏جدول 2 ‏تحليل ‎SPR‏ الخاص بارتباط الأجسام المضادة الرئيسية ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ ب ‎TTR‏ ‏0 بشري (871//1-110040) ‎Rmax KD (M) ‏(1/ثانية)‎ kd ‏(1/مولار‎ | 8 mAb ‏ثانية)‎ ‎31.55 1.816E-8 4.930E-4 2.715E+4 905
— 5 8 — ‎1.861E-8 5.358E—4 2.880E+4 14G 8‏ 27.13 ‎7.684E-9 4.693E-4 6.107E+4 1‏ 30.98 ‎9.010E-9 4.151E-4 4.607E+4 601‏ 26.32 مثال 2. ارتباط الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ بمولد ضد ‎TTR J‏ تمت تجرية أربعة من 00/05 الرئيسية ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ (905» 1468 661؛ و581) بواسطة ‎ELISA‏ عند تركيزات تتراوح من 0.31 إلى 2.5 ميكرو جرام/ملليلتر باستخدام كل من ‎TTR‏ المعالج بالرقم الهيدروجيني 4 ‎TTR (PHA-TTR)‏ الطبيعي باعتباره مولد الضد المغلف. يتم وصف تحضير مولد الضد ل ‎TTR‏ ودروتوكولات ‎ELISA‏ في مكان ‎AT‏ في جزء المواد والطرق (ه - 5( يتم عرض منحنيات ا لارتباط الناتجة وقيم ‎Bmax Kd‏ المجدولة فى شكل 3 وجدول 3 فيما يلي. يتم تقديم النتائج في شكل 3 بالوحدة التقريبية (.8.1) على المحور لا. أظهرت كل ‎MAbs‏ ‏0 ارتباطًا مؤترًا ب ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 مع تراوح قيم ‎Kd‏ من 16 نانو متر ‎(6C1)‏ إلى 282 نانو ‎jie‏ (9105). تراوحت قيم ‎Bmax‏ للارتباط ب 1114 بالرقم الهيدروجيني 4 من قيمة منخفضة تبلغ 0.65 وحدة تقريبية (1468)إلى قيمة عالية تبلغ 2.02 (905). على النقيض من الارتباط ب ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4؛ لم يُظهر أي من الأجسام المضادة ‎tals)‏ مؤترًا ب 117 طبيعى؛ مما يشير إلى أن كل الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المتولدة كانت نوعية للصور غير الطبيعية من ‎JTR 5‏ جدول 3 تحليل ‎ELISA‏ لارتباط الأجسام المضادة الرئيسية ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ ب ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 ‎Kd mAb‏ (نانو مولار) * (وحدة تقريبية)
— 8 6 —
2.02 282 905
0.65 108 14G 8
1.07 16 601
1.61 23 51
مثال 3. تحليل الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ بواسطة ‎SDS-PAGE‏
‎PAGE‏ طبيعي
‏تم تحليل 905 و1468 بواسطة ‎SDS-PAGE/Western‏ لإيضاح نوعية الارتباط تجاه
‏5 الصور المونومرية/متغيرة الصفات الطبيعية من ‎TTR‏ في مقابل ‎TTR‏ الطبيعيى غير متغير
‏الصفات الطبيعية ‎٠‏ يتم وصف بروتوكولات ‎PAGE (SDS-PAGE‏ الطبيعى»؛ ولطخة ‎Og‏ فى
‏مكان آخر في جزءٍ الطرق والمواد (ح - ي).
‏تم استخدام ‎TTR‏ غير متغير الصفات الطبيعية أو 114 بالرقم الهيدروجيني 4 على هلام
‎Gis SDS-PAGE‏ إلى جنب مع ‎TTR‏ متغير الصفات الطبيعية بالحرارة ‎TTR‏ بالرقم 10 الهيدروجيني 4 متغير الصفات الطبيعية بالحرارة ‎٠.‏ بعد ا لاستشراد الكهربي ‘ تم استخدام لطخة
‏ويسترن على الهلام على نيترو سيليلوز وصباغته باستخدام 905 ‎٠. 14G8 TTR mAbs‏ لقد
‎jas‏ كل من الأجسام المضادة على ‎TTR‏ فقط ‎Lovie‏ تمت معالجته عند الرقم الهيدروجيني 4 أو
‏عندما تم تغيير الصفات الطبيعية ل ‎TTR‏ أو ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 بالحرارة قبل -505
‎PAGE‏ ومن ثم يُظهر 9005 و1468 هذه نوعية ل موائمات ‎TTR‏ المتولدة إما عن طريق تغيير الصفات الطبيعية ل ‎TTR‏ أو عن طريق علاج ‎TTR‏ عند الرقم الهيدروجيني 4.
‏تم أيضًا تخليق 601 و 581 مع إجمالي ‎TTR mAbs‏ (767؛ ‎(8C3‏ والجسم المضاد متعدد
‏النسائل ‎Sigma‏ المتاح تجاريًا بواسطة ‎.SDS-PAGE/Western‏ احتوت كل لطخة على
‏علامات بوزن جزيثي ملونة؛ ‎TTR‏ غير متغير الصفات الطبيعية؛ ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجينى 4
أظهر هلام ‎SDS-PAGE‏ الملون أن النوع الرئيسي الموجود في ‎TTR die‏ غير متغير الصفات الطبيعية كان دايمر حوالي 38 كيلو دالتون. على ‎pall‏ تم استخدام المكون الرئيسي الموجود في ‎TTR die‏ بالرقم الهيدروجيني 4 باعتباره دايمر حوالي 35 كيلو دالتون مع مقدار صغير من دايمر من مونومر حوالي 15 كيلو دالتون. تم استخدام هذا الدايمر باعتباره بروتين أصغر نوعًا ما من الدايمر الموجود في ‎TTR die‏ غير متغير الصفات الطبيعية؛ مما يوضح
وجود اختلاف تشكيلي فيما بين هذين النوعين من دايمر ‎TTR‏ ‏أظهرت لطخ ويسترن الخاصة ب ‎TTR TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 باستخدام الأجسام المضادة الأربعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ أن هذه ‎MADS‏ لا تتعرف على ‎TTR‏ غير متغير الصفات الطبيعية؛ إلا أنها ترتبط بالفعل بكل من المونومر متغير الصفات الطبيعية والدايمر الموجود في
0 عينة ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4. ومن ثَم؛ تُظهر 0085 الأربعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ ‎«6C1 1468 ODS)‏ و581) قيم نوعية مشابهة للتشكيلات غير الطبيعية الخاصة ب ‎TTR‏ ‏عند التحليل بواسطة ‎SDS-PAGE /Westerns‏ على النقيض من 0055 الأريعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ؛ تعرّف ‎WY)‏ من 0055 ل ‎TTR‏ الخاصة ‎«lady‏ 767 و8063؛ الذين تم توليدهما من خلال التحصين المناعي للفئران
5 باستخدام ‎TTR‏ سليم على كل أنواع ‎TTR‏ الموجودة في عينات ‎TTR clues TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4؛ متضمنة أنواع ‎TTR‏ التترامري. ومن ‎ald cf‏ على العكس من 0/55 ل ‎TTR‏ ‏المطوي بشكل ‎(hala‏ ترتبط ‎MAbs‏ الخاصة بالمقارنة هذه ب ‎TTR‏ ولكن بدون ‎deg‏ تشكيلية. كان للجسم المضاد متعدد النسائل ‎Sigma‏ سلوكًا ‎Slee‏ ل ‎MAbs‏ الخاصة بالمقارنة 767 و803.
0 "تم ‎Wad‏ استخدام ‎TTR, TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 على هلام طبيعي لمشاهدة ما إذا كانت ‎mAbs‏ الأربعة ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ قادرة على إظهار نوعية تشكيلية في ظل ظروف هلام غير متغير الصفات الطبيعية. على هلام ‎PAGE‏ طبيعي ملوّن؛ تم استخدام ‎TTR‏ باعتباره دايمر طبيعي حوالي 35 كيلو دالتون مع مقدار صغير من تترامر. على النقيض»؛ تم استخدام ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 بشكل رئيسي باعتباره مسحة عالية الوزن الجزيئي بمقدار ضئيل من
5 الدايمر حوالي 35 كيلو دالتون. تعرّف الجسم المضاد متعدد النسائل ‎Sigma‏ غير النوعي على
كل أنواع ‎TTR‏ الموجودة في كل من ‎TTR due‏ وعينة ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4. على النقيض؛ تعرّف 905 فقط على نوع ‎TTR‏ ذي الوزن الجزيئي ‎Mall‏ الموجود في ‎TTR die‏ بالرقم الهيدروجيني 4. كما هو ملاحظ في دراسة 5105-0/8651/1//8651607؛ لم يتعئف 9105 على أي من أنواع ‎TTR‏ الطبيعي. "تم بعد ذلك تحليل كل ‎mAbs‏ الأربعة 1 ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ بواسطة ‎PAGE‏ ‏الطبيعي/لطخة وبسترن. كما هو متوقع ‎log‏ نحو مشابه ل 905,؛ ارتبطت ‎MAbs‏ الأخرى ل ‎shall TTR‏ بشكل ‎SAL, 6C1 1468 hla‏ نوعيًا بالصور غير الطبيعية من ‎TTR‏ ‏ذات الوزن الجزيئي العالي الموجودة في ‎TTR due‏ بالرقم الهيدروجيني 4. لم يتعرّف أي من هذه الأجسام المضادة على دايمر ‎TTR‏ الطبيعي حوالي 35 كيلو دالتون. توضح هذه النتائج أن ‎mAbs 0‏ الأربعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ تتخذ سلوكًا مماثلاً ‎(ajay‏ فقط على الأنواع غير الطبيعية من ‎TTR‏ المميزة ‎GLEE‏ عن ‎TTR‏ الطبيعي. مثال 4. تثبيط التكوين اللييفي ل ‎TTR‏ بواسطة الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ يعتبر ]114-778 صورة مغايرة من ‎TTR‏ محتوية على طفرة إلى نقطة معينة عند الموضع 8 في متوالية البروتين التي تزيل ثبات تترامر ‎(TTR‏ بمرور الوقت وفي ظل ظروف حمضية 5 على نحو معتدل؛ ‎(aii‏ هذه الصورة المغايرة من ‎TTR‏ إلى الوحدات الفرعية المونومرية الخاصة به التي يمكن أن تستمر لتتكدس وتْكوّن ‎BL‏ قادرة على الارتباط بثيوفلافين-1. ومن ثَم؛ يمكن ملاحظة مدى تكوّن الألياف عن طريق قياس التألق الفلُوري ل ثيوفلافين-آ عند 480 نانو متر. سيؤدي إدخال جسم مضاد ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ نوعي لمونومرات ‎TTR‏ المنفصلة أو نواتج التكدس إلى منع تجميع ألياف ‎TTR‏ مما يؤدي إلى انخفاض في التألق ‎old‏ ل ثيوفلافين- ‎١ 0‏ بالنسبة إلى تفاعل مقارنة بدون جسم مضاد. يتم وصف البروتوكولات الخاصة بفحص تثبيط التكوين اللييفي ل 114 في مكان آخر في جزءٍ المواد والطرق (ك). قامت كل الأجسام المضادة الأريعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ على نحو قوي بتثبيط تكوين ألياف ]114-778 المتفاعلة من نوع ثيوفلافين-1 بالنسبة إلى نوع المقارنة بالنمط المماثل. يتم عرض النتائج في شكل ا ويتم تقديمها بالوحدة التقريبية (.8.01) على المحور لا. قام الجسم
— 9 8 — المضاد 5/81 ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ بشكل تام بتثبيط تكوين الألياف. تكون هذه النتائج متوافقة مع الاعتقاد بأن الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ ترتبط بالصور المونومرية و/أو الصور المكدسة من +1 وبالتالى تمنع تكوين ألياف ‎JTR‏ ‏جدول 4 يُلْخص ‎lily‏ التمييز التي تم الحصول عليها للمجموعة المتكونة من الأجسام المضادة الأربعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ (905» 1468 601؛ و581) ‎all‏ أظهرت انتقائية تشكيلية جيدة للصور غير الطبيعية من ‎TTR‏ لهذه الأجسام المضادة قيم ألفة ‎(KD)‏ ل ‎TTR‏ ‏بالرقم الهيدروجيني 4 تتراوح من 14.5 نانو ‎(6C1) jie‏ إلى 257 نانو متر (905) وقيم 7 تتراوح من 0.65 وحدة تقريبية (1468) إلى 2.02 (905). لم يتعزف أي من هذه الأجسام المضادة على ‎TTR‏ الطبيعي؛ إلا أنها ارتبطت ب ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجينيى 4 على ‎«ly TTR «lau, SDS-PAGE/Western 0‏ الوزن ‎Jul unl‏ على ‎PAGE‏ ‎\Western/ abl‏ قامت هذه الأجسام المضادة أيضًا بتثبيط تكوين ‎TTR‏ اللييفات في تجرية التكوين ‎andl‏ باستخدام 1110-1 باعتباره القراءة. جدول 4 جدول ملخص تمييز 000 ل 114-7781 المطوي بشكل خاطئ ‎Sandwich ELISA‏ ‎TTR)‏ بالرقم الهيدروجيني ألطخة ويسترن 4( 6 لتثبيط قم النسيلة ‎SDS-PAGE Bmax‏ اللييفات الطبيعي ‎(Thio-T)| 00450( KD‏ ‎TTR)‏ بالرقم ‎(HMW~- ِ i.‏ (نانو مولار) بالوحدة ‎(TTR)‏ الهيدروجيني ا ~ ‎TTR)|‏ ‏التقريبية) 8 ) 0
— 0 9 — ‎B‏ ‎B‏ ‎BE‏ ‏يمثل 221 ‎TTR-V1‏ صورة مغايرة من ‎TTR‏ محتوية على طفرة إلى نقطة معينة فردية عند الموضع 122 تزيل ثبات التترامر. كان التكوين اللييفي مصحويًا بزيادة في فلورة ‎ThT‏ أدت زيادة تركيزات ‎mAb‏ 1468 إلى انخفاض رتيب في فلورة 151 مما يشير إلى تثبيط متكافئ العناصر لتكوين لييفات ‎IC50) TTR‏ = 0.009£0.028 مجم/ملليلتر؛ ‎=n‏ 3؛ شكل 4ب وجدول 4أ). لم
يتسبب ‎MAb‏ للمقارنة بالنمط المماثل في تثبيط تكوين لييفات ‎TTR‏ (شكل 4ج)؛ وبالتالي يُظهر نوعية التثبيط الناتج عن 1468. اقترحت قيم 1050 شبه متكافئ العناصر القابلة للمقارنة المحددة ل ‎SAT‏ و6©1 (جدول 4أ) آليات مناظرة لتثبيط اللبيفات لكل من هذه ‎mAbs‏ ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. على النقيض» أخفض
0 على نحو غيرمتوقع في تثبيط التكوين اللييفي ل 11182-1771221؛ بالرغم من إظهار نوعية ‎dilly‏ تجاه ‎TTR‏ غير الطبيعى. يتبقى استكشاف ما إذا كان 905 أكثر حساسية تجاه ظروف التجرية المستخدمة. جدول جا جدول ملخص تمييز ‎mAb‏ 1112-171221 المطوي بشكل خاطئ الجسم المضاد ‎IC50 + SD‏ (مجم/ملليلتر) 905 لا يوجد تثبيط ‎14G 8‏ 8 + 0.009 601 0.048 + 059.0
— 1 9 — ‎5A1‏ 0.015 £ 0.02 ‎EG 1‏ لا يوجد تثبيط مثال 5. التمييز الهيستولوجي الكيميائي المناعي ‎(THC)‏ ل نسيج ‎ATTR‏ باستخدام ‎mAbs‏ ل ‎TTR‏ ‏تم اختبار ‎MAbs‏ الرئيسية ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ التي تم رفعها إلى الشظية -89 ‎TTR‏ ‏5 97 الخاصة ببروتين ترانس ثيرتين على نحو هيستولوجي كيميائي مناعي على نسيج جديد مجمد ومعالج بالبارافين من من مرضى تم تأكيد إصابتهم بالداء النشواني القلبي ‎TTR‏ يتم توفير البروتوكولات لتحضير والحصول على عينات النسيج القلبي؛ الكيمياء الهيستولوجية المناعية ‎(THC) immunohistochemistry‏ وتحليل الصور؛ في مكان آخر في جزءِ المواد والطرق (ل- س). يتم وصف الأجسام المضادة المستخدمة ل ‎HC‏ في جدول 5. 0 جدول 5 الأجسام المضادة المستخدمة للتمييز الهيستولوجي الكيميائي المناعي نوع الجسم النسيج القلبي الجسم المضاد المؤّرد التركيز المضاد الملون ‎TTR L4G 8‏ مطوي ‎i Prothena‏ 5 ميكرو شكل خاطئ ‎AL fala pa Biosciences‏ حو ‎TTR‏ مطوي ‎i Prothena‏ 5 ميكرو شكل خاطئ ‎fala pa Biosciences‏ للا ‎TTR 0‏ مطوي ‎i Prothena‏ 5 ميكرو شكل خاطئ ‎fala pa Biosciences‏ للا
— 2 9 — ‎TTR‏ مطوي ‎Prothena‏ 5 ميكرو ‎5A1‏ :ّ م نعم ‎Ka‏ خاطئ ‎Jala Biosciences‏ لليلة ‎i Prothena TTR 1G7‏ 5 ميكرو م نعم ‎all Jala Biosciences‏ 010 مقارنة بنمط ‎y Prothena‏ 5 ميكرو ‎F‏ م ممائل ‎Jala Biosciences‏ لليلة ‎Ble‏ الالبومين ‎Dako North‏ 1 و ‎America TTR‏ نعم ‎(A0002)‏ 20.000:1 السلاسل الخفيفة ‎y Dako North LC.
Lis‏ 8.1 ‎America‏ ‎(AO 191 )‏ السلاسل الخفيفة لامدا ‎y Dako North LC.‏ 8.1 ‎America‏ ‎(AO 193 )‏ المادة النشوانية ‎Dako North AA A‏ لا 8.1 ‎America‏ ‎(M0759)‏ ‏تم الحصول على عينات النسيج القلبي من المرضى الذين أكد التشخيص إصابتهم بطفرات 11.. كانت صور التركيبة السكانية للحالات التي تم فحصها على نحو هيستولوجي كيميائي مناعي كالتالي ويتم تلخيصها في جدول 6: ‎FAC‏ = اعتلال عضلة القلب النشواني عائلي ‎Land)‏
— 3 9 — ‎familial amyloidotic cardiomyopathy‏ ؛ ‎FAP‏ = اعتلال الأعصاب المتعدد النشواني عائلي المنشأ ‎AL ¢ familial amyloidotic polyneuropathy‏ 10 = الداء النشواني بالسلسلة الخفيفة ‎ATTR light-chain amyloidosis‏ = الداء النشواني الناتج عن ترانس ثيرتين ‎Unk ¢ transthyretin-mediated amyloidosis‏ = غير معلوم ‎Unknown‏ ‏5 جدول 6
التلوين الهيستولوجي الكيميائي المناعي لعينات النسيج القلبي التي بها الأجسام المضادة ‎TTR J‏ المطوي بشكل خاطئ
هل تم التلوين الحالة ‎f‏ لتشخيص طفرات ‎TTR‏ ا لنسق بأجسام مضادة ل
‘TTR
— 9 4 — . Senile ١
تم اختبار الأجسام المضادة أحادية النسيلة لفأر ‎mAbs)‏ ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ) التي تم رفعها إلى الشظية 97-89 من بروتين ترانس ثيرتين على نحو هيستولوجي كيميائي مناعي على نسيج جديد مجمد ومعالج بالبارافين من مرضى تم تأكيد إصابتهم بالداء النشواني القلبي ‎TTR‏ ‏5 أظهر كل جسم مضاد ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ ‎BLE‏ مَناحِبَّة قوية على نسيج ‎ATTR‏ ‏القلبى. تمت ملاحظة تلون بلون داكن فى الرواسب خلال عضلة القلب ومجموعة الأوعية. عند مقارنة التفاعلية المناعية بالتلوين باستخدام ‎pd‏ الكُونْعُو الخاصة بثيوفلاقين-7. أظهرت غالبية التفاعلية المناعية في النسيج تطابقًا عاليًا مع الانكسار المزدوج ‎BAL‏ الكُونعُو ‎stills‏ الإيجابي ب ثيوفلافين ‎WT‏ يؤكد هذا طبيعة الصَحيقَةٌ المَطُوِية من البيتا الخاصة بالمادة النشوانية ل ‎TTR‏ ‏0 المترسبة في هذا النسيج. كشفت 1468 905؛ 601؛ و581 أيضًا عن ‎TTR‏ السابق للمادة النشوانية الموجود فى مساحات من عضلة القلب كانت موجبة مناعيًا ل ‎TTR‏ ولكن سالبة ‎Baal‏ ‏5236 أو ثيوفلافين -1. كان قطاعي الانبعاث لكل من الجسم المضاد الخاصة بالمقارنة بالنوع ‎ileal‏ 96 والجسم المضاد الرئيسي سالبين للتلوين عبر كافة الأنسجة المختبرة. كانت الأجسام المضادة المتفاعلة تجاه البروتينات المؤلدة للمادة النشوانية الأخرى (السلاسل الخفيفة لامدا وكابا أو المادة النشوانية ‎(A‏ غير متفاعلة تجاه النسيج ‎lal‏ ل ‎ATTR‏ المستخدم في هذا التحليل» مما
يوضح أن الرواسب كانت تحديدًا ‎TTR‏ بطبيعتها. تمت مقارنة نماذج التلوين الخاصة بالأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ بتلك التي تم الحصول عليها باستخدام جسم مضاد ‎Lange‏ ل ‎TTR‏ تجاري مميز جيدًا ‎Bl)‏ الألبومين؛ 2 ؛ م026ا؛ ‎(Carpinteria‏ /0). لون الجسم المضاد المرجعي ‎dime DAKO‏ القلب
— 5 9 — المصابة بالمرض في نفس المساحات مثل الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل ‎hla‏ إلا أنه أنتج نموذج تلوين أكثر انتشارًا. لم يلون الجسم المضاد المرجعي ‎DAKO‏ رواسب المادة النشوانية ل ‎TTR‏ الآلفة لحْمْرَةٌ الكُونْعُو الموجودة على مجموعة الأوعية بنفس القوة ‎Jie‏ الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. الم تلون الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ النسيج الطبيعي غير المريض. علاوة على ذلك؛ كما هو متوقع؛ كان أيضًا التلوين باستخدام جسم مضاد للمقارنة بنمط مماثل» 6510؛ سالبًا. من أجل تحديد إذا كانت تفاعلية الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ نوعية لرواسب ‎(TTR‏ تم فحص التفاعلية المتصالبة لهذه الأجسام المضادة تجاه النسيج القلبي المأخوذ من 0 المرضى الذين تم تشخيص إصابتهم بالداء النشواني ‎AL‏ الرئيسي. كما هو متوقع؛ لم تتم ملاحظة أي تلوّن للنسيج النشواني ‎AL‏ مما يؤكد أن الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ تتفاعل نوعيًا مع النسيج المصاب بمرض ‎ATTR‏ ‏تلوؤن ‎Ladd‏ النسيج القلبي من المرضى الذين أكد التشخيص إصابتهم بداء نشواني مجموعي شَيِخُوخِيَ أو من المرضى المشتمل بشكل مؤكد على ‎FAC‏ أو ‎FAP‏ الناتج بواسطة طفرات إلى 5 ثقطة معينة في جين ‎TTR‏ بشكل إيجابي باستخدام ‎«6C1 ODS (14G8‏ واحدذ. توضح هذه النتائج أن الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ لها القدرة على ‎pall‏ على رواسب ‎TTR‏ في النسيج ‎lal)‏ بغض النظر عن التركيب الوراثي ل ‎ATTR‏ ‏تم أيضًا فحص الأنسجة غير القلبية الأخرى المعروفة بالتعبير وراثيًا عن ‎TTR‏ للتلوين بواسطة الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ ومقارنتها بالتلوؤن الذي تم الحصول عليه باستخدام 0 الجسم المضاد المرجعي ‎DAKO‏ كما هو متوقع؛ تلون ‎Akl‏ البنكرياس والضَفيرَةٌ المَشِيْمَونَة جميعًا إيجابيًا ل ‎TTR‏ باستخدام الجسم المضاد المرجعي ‎DAKO‏ على النقيض» أدى 1468 إلى تلوّن خلايا ألفا البنكرياسية فقط الموجودة في جُزَيراتُ لانجرهانس والضصَفيرَةُ المَشِيْمَوَِّة» مما يوحي بأن بعضًا من ‎TTR‏ المتمركزة على هذه الأعضاء تكون متميزة تشكيليًا عن ‎TTR‏ الذي يتم التعبير وراثيًا ‎die‏ فى الكبد. يشير الافتقار إلى التفاعلية المناعية ‎MAD J‏ الخاصة ‎TTR‏ مطوي
بشكل خاطئ في الكبد إلى أن القدر الكبير من ‎TTR‏ يعبر وراثيًا ‎die‏ وجود ‎TTR‏ تترامري طبيعي شكل رئيسي ولا يشتمل على القمة اللاصقة المكشوفة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. تم الحصول على النتائج المشابهة عندما تم تلوين نفس الأنسجة باستخدام 905 ‎6C1‏ و581. مثال 6. ‎ATTR diss‏ في مقابل البلازما البشرية الطبيعية بواسطة ‎43LISDS-PAGE‏
Meso Scale Discovery (MSD) Plate ‏وسترن وبواسطة تجرية‎ 5 تم الحصول على ست عينات بلازما من المرضى المثبت لديهم ‎VOM ATTR‏ (العينة رقم 21 رقم 22 رقم 23؛ رقم 24؛ رقم 25 رقم 27) و6 ‎lie‏ من الخاضعين للعلاج الطبيعيين (العينة رقم 11 رقم 12؛ رقم 15»؛ رقم 18؛ رقم 19؛ رقم 20( من ‎M. Saraiva (Porto‏ ‎University, Portugal)‏ كانت العينة رقم ‎CO‏ عبارة عن عينة مصل بشري طبيعي تم الحصول 10 عليها من مصدر تجاري ‎(BioreclamationIVT)‏ تم تحليل العينات بواسطة ‎SDS-PAGE‏ ‏ولطخة وبسترن» أو بواسطة تجرية ‎.MesoScale Discovery (MSD)‏ يتم وصف ‏البروتوكولات لهذه التجارب في مكان آخر في ‎gia‏ المواد والطرق (ع-ص). تم الحصول على ‏منحنى قياسي لتجرية ‎MSD Plate‏ باستخدام 601. ‏في لطخات وبسترن الناتجة باستخدام 905 و0005 581 ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ؛ يمكن الكشف عن الاختلافات في نماذج النطاق ‎Led‏ بين عينات البلازما الطبيعية والمصابة ب ‎TTR‏ ‏17. احتوت كل عينات البلازما على نطاق ‎TTR‏ يبلغ حوالي 14 كيلو دالتون انتقل بشكل ‏مشترك مع مونومر ‎TTR‏ غير الطبيعي الموجود في العينة المرجعية ل ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني ‏4 بصفة عامة؛ اشتملت عينات البلازما المأخوذة من مرضى ‎TTR-V30M‏ (رقم 21؛ 22؛ ‏3. 24؛ 25؛ و27) على المزيد من هذا النوع المونومري من ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. 0 بالإضافة إلى ذلك؛ احتوت ‎Waal‏ عينات البلازما المأخوذة من مرضى ‎VOM‏ على نطاق حوالي ‏0 كيلو دالتون انتقل على نحو مشترك مع دايمر ‎TTR‏ غير الطبيعي الموجود في العينة ‏المرجعية ل ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4. باستثناء العينة رقم 12 ورقم 18؛ اشتملت عينات ‏البلازما المأخوذة من الأفراد الطبيعيين على قدر أقل من هذا النوع من الدايمر.
تم فحص لطخات وبسترن السابقة بالمسح وتم تخطيط قيم الشدة الخاصة بنطاقات المونتومر والدايمر ل ‎TTR‏ المتفاعل الخاص ب 905 أو 5/81 لكل عينة. يتم عرض النتائج في شكل 5أ ‎(9DS)‏ وكب (5281) ‎aug‏ تقديمها بالوحدة التقريبية (.8.0) على المحور لا. باستثناء عينات البلازما رقمي 15 و18؛ احتوت عينات البلازما المأخوذة من الأفراد الطبيعيين (11؛ 12 19؛ و20) على قدر أقل من أنواع المونومر والدايمر المتفاعلة الخاصة ب 905 5 ‎5A1‏ عن العينات المأخوذة من مرضى ‎V30M‏ (25-21 و27). تم أيضًا تحليل 12 من عينات المصل التي تم تحليلها بواسطة لطخة ويسترن ل 9005 ‎5A15‏ ‏بواسطة ‎Loja‏ طبق ‎MSD‏ باستخدام 601 باعتباره الجسم المضاد لاحتجاز ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ والجسم المضاد ‎Dako-SulfoTag‏ باعتباره الجسم المضاد الخاص بالكشف. يتم عرض 0 تتائج ‎MSD las‏ هذه في شكل 6 وبتم تقديمها بالوحدة التقريبية (.8.11) على المحور لا. تمثل العينات 11« 12 15؛ 18؛ ¢19 و20 البلازما الطبيعية. ‎(ia‏ العينات 25-21 و27 البلازما المصابة ب ‎V30M‏ ‏باستثناء عينات البلازما رقم 15 ورقم 18؛ كان مقدار ‎TTR‏ التفاعلي ل 601 الموجود في عينات البلازما المأخوذة من الأفراد الطبيعيين أقل من ذلك الملاحظ في البلازما من الأفرا المرضى 5 ب 4ا114-1/30. ارتبطت مستويات تفاعلية 601 المقاسة بواسطة تجرية ‎MSD‏ بصورة جيدة بمقدار الدايمر التفاعلي ل 905 والمونومر الملاحظ فيما سبق بواسطة -505 ‎.PAGE Western‏ من أجل تحديد تركيز نوع ‎TTR‏ التفاعلي الموجود في عينات البلازماء تمت إعادة تجرية نفس العينات باستخدام 601 باعتباره الجسم المضاد المحتجز ‎8C3-SulfoTags‏ باعتباره الجسم 0 المضاد الخاص بالكشف. تم تحويل إشارات ‎MSD‏ إلى تركيزات بالنانو جرام/ملليلتر من أنواع ‎TTR‏ التفاعلية باستخدام المنحنى القياسي ‎TTR FTM/LIIOM‏ المتولد فيما سبق. اعتمادًا على هذا التحليل» بلغ متوسط تركيز ‎TTR‏ التفاعلي ل 601 الموجود في عينات المقارنة 271 +/- 185 نانو جرام/ملليلتر. على النقيض؛ كان متوسط تركيز ‎TTR‏ التفاعلي الموجود في عينات البلازما المصابة ب ‎(lel VOM‏ عند 331 +/- 95 نانو جرام/ملليلتر. معّاء تشير نتائج ©1050 هذه إلى أن الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ تكون قادرة على التمييز فيما
بين البلازما لمرض 877 في مقابل البلازما الطبيعية. يضمن هذا تقدمًا إضافيًا للأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ للاستخدام في تجارب تشخيص مرض ‎ATTR‏ ‏مثال 7. تصميم الأجسام المضادة 905 المتوافقة مع البشر تمثلت نقطة البدء أو الجسم المضاد الواهب للتوافق مع البشر في الجسم المضاد الخاص بالفأر 905. يتم توفير متوالية الحمض الأميني للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الخاصة ب 009005 ناضج باعتبارها المتوالية رقم: 1. يتم توفير متوالية الحمض الأميني للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب ‎MODS‏ ناضج باعتبارها المتوالية رقم: 16. يتم توفير متواليات الحمض الأميني للسلسلة الثقيلة ‎CDR3 5 «CDR2 CDR]‏ باعتبارها المتواليات أرقام: 15-13 على التوالي ‎WS)‏ هو محدد بواسطة 68681)). يتم توفير ‎CDR-H1‏ من نوع ‎Chothia-Kabat‏ ‏0 مركب باعتبارها المتوالية رقم: 117. يتم توفير متواليات الحمض الأميني للسلسلة الخفيفة ‎«CDR2 (CDR1‏ و0043 باعتبارها المتواليات أرقام: 26-24 على التوالي ‎WS)‏ هو محدد بواسطة ‎(Kabat‏ يتم استخدام ترقيم ‎Kabat‏ خلال هذا المثال. تنتمي ‎LIS‏ للمنطقة المتغيرة ‎(VK) variable kappa‏ الخاصة ب 0019105 إلى المجموعة الفرعية ‎«lil Kabat 2‏ التي تناظر المجموعة الفرعية 3 ‎Kabat‏ البشرية. تنتمي السلسلة الثقيلة للمنطقة 5 المتغيرة ‎(Vh) variable heavy‏ الخاصة ب ‎MODS‏ إلى المجموعة الفرعية ‎Kabat 3d‏ لفأرء التي تناظر المجموعة الفرعية 3 ‎.Kabat‏ انظر ‎Kabat et al.
Sequences of Proteins of‏ ‎Immunological Interest, Fifth Edition.
NIH Publication No. 91-3242, 1991‏ تنتمي 0004-11 المكونة من 16وحدة بنائية إلى الفئة القياسية 4؛ تنتمي 004-12 المكونة من 7 وحدات بنائية إلى الفئة القياسية 1؛ وتنتمي ‎CDR-L3‏ المكونة من 9 وحدات بنائية إلى الفئة 0 القياسية 1 في ‎.Martin & Thornton, J.
Mol.
Biol. 263:800-15, 1996 kil .Vk‏ تنتمي ‎CDR-HI‏ من نوع ‎Chothia-Kabat‏ المركب المكونة من 10 وحدات بنائية إلى الفئة القياسية 1؛ وتنتمي ‎CDR-H2‏ المكونة من 17 وحدة بنائية إلى الفئة القياسية 1. انظر ‎Martin‏ ‎Thornton, J Mol.
Biol. 263:800-15 1996‏ 8. لا تشتمل ‎CDR-H3‏ على أية فئات قياسية.
تكون الوحدات البنائية عند السطح البيني ‎lad‏ بين نطاقي ‎VH VK‏ هي تلك التي توجد على نحو شاتع؛ ‎Lad‏ عدا أنه ‎Leu‏ تكون عند الموضع 47 في السلسلة الثقيلة؛ بينما ‎Tyr‏ نمطيًا تكون هذا الموضع. يكون هذا الموضع مرشحًا للطفرة المنعكسة. تم إجراء بحث على متواليات البروتين في قاعدة البيانات ‎Deshpande et al., ) PDB‏ ‎(Nucleic Acids Res. 33: 0233-7, 2005 5‏ لإيجاد البنى التي توفر نموذج بنية خشنة ل 5. تم استخدام_ ‎dull‏ البلورية الخاصة بالجسم المضاد ‎fab‏ (كود لال/ا1 ‎(pdb‏ ‎(Ruzheinikov et al., J.
Mol.
Biol. 332(2):423-435, 2003)‏ للبنية ‎Vk‏ حيث إن لها دقة وضوح جيدة )1.22 ‎(A‏ وإجمالي تشابه متوالية مع ‎ODS VK‏ مع الحفاظ على نفس البنية القياسية للحلقة باعتبارها ‎ODS‏ تم استخدام جسم مضاد مونومري بكود ‎pdb 1SEQ‏ ‎(Covaceuszach et al., Acta Crystallogr.
D Biol.
Crystallogr. 57 (PT 9), 0‏ )2001 ,1307-1309 للبنية ‎Vh‏ حيث إن له تشابه متوالية ودقة وضوح جيدين )2.0 ‎(A‏ ‏ويكون له نفس البنى القياسية ل 4-111ا00) 3 ‎CDR-H2‏ مثل تلك الخاصة ب ‎VH‏ 9105. لقد تم وضع نموذج السلسلة 1/5 ل 905 باستخدام البنية ‎(Lia IMQK‏ حيث إن لها دقة وضوح أفضل تبلغ 1.28 )1995 ,21)1(:74-77 ‎A (Ostermeier et al., Proteins‏ تم استخدام برنامج ‎BioLuminate 5‏ (المرخص من ‎(Schrodinger Inc.‏ لوضع نموذج لبنية خشنة ل 9105. سمح بحث خاص بقاعدة بيانات متوالية البروتين غير المسهبة من ‎NCBI‏ باختيار إطارات بشرية ملائمة يتم فيها تطعيم ‎CDRs‏ الفأرية. ل ‎Vh‏ تم اختيار السلسلة الثقيلة 88002114 ل وا البشري )21670209 ‎(Gl:‏ (المتوالية رقم: 3( ‎(Akahori et al., Construction and‏ ‎characterization of antibody libraries: isolation of therapeutic human‏ ‎antibodies and application to functional genomics, Direct Submission, July 0‏ )2001 ,25. وهي تشترك في الصور القياسية الخاصة ب ‎ODS‏ تعتبر عضوًا من المجموعة الفرعية للسلسلة الثقيلة البشرية 1 ‎(Kabat‏ تشتمل ‎ODS Vh‏ على بعض من إطار الوحدة البنائية المميزة ‎gly‏ مستقبل إطار بشري لم يُظهر ‎We Lalas‏ للغاية. لهذاء تم استخدام إطار ثان؛ ‎AAX82494 (Gl: 62421461)‏ (المتوالية رقم: 4( ‎(Lundquist et al., Infect.
Immun.‏ )2006 ,3222-3231 ,)74(6 أيضًا لإعداد إطار مستقبل هجين. ل ‎VK‏ تم اختيار سلسلة
‎(Shriner et al., Vaccine 24(49-50):7159-7166, 2006(‏ (لمتوالية رقم: 18). يكون لها نفس الفئات القياسية ل ‎CDR-L1‏ و2 ‎Jie‏ تلك الخاصة ب ‎VK‏ الرئيسية. وتعتبر عضوًا من الوحدة الفرعية كابا البشرية من نوع 2 ‎Kabat‏ ‏5 تم تكوين ثمانية من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر وخمسة من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر محتوية على تباديل مختلفة من مجموعات الاستبدال ‎«db «4 3b 3 2b (2 «HU9DSVHVI)‏ و5 (المتواليات أرقام: 12-5؛ على التوالي) ‎HUODSVLVI-5,‏ (المتواليات أرقام: 23-19 على التوالي)) (جدولي 7 85( يتم عرض تصميمي 1/9 ‎VK‏ المتوافقين مع البشر التوضيحيين؛ بالطفرات 0 المنعكسة والطفرات الأخرى اعتمادًا على الإطارات البشرية ‎pind)‏ فى جدولى 7 و8؛ على التوالي. توضح المساحات المظللة الرمادية في العمود الأول في جدولي 7 و8 ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎«Chothia‏ وتوضح المساحات المظللة الرمادية في الأعمدة المتبقية في جدولي 7 و8 ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ تحتوي المتواليات أرقام: 12-5 و23-19 على الطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى كما هو معروض في جدول 9. يتم إدراج الأحماض الأمينية عند المواضع 0142 ‎H82(b) <H82 1169 <H47‏ 1108ل قل قل ‎<L19 <L18‏ 136 39ا ‎«L60‏ ‎L745 <L70‏ في 1 ك ‎«4b «4 3b 3 2b‏ و5 ‎Hu9D5VLv1-55‏ في جدولي 11510 جدول 7 مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر
‎an 2 = = =‏ 3 3 — اجا = 8 ‎a)‏ 3 = ص ‎|Z ١‏ د ىا ىا 212 ‎zz‏ ‎I EE |‏ 1“ ذا »| نذا >| نذا <ا ‎|Z‏ > ‎A FF ١3‏ عا ذا صا ص 2 صا 2 صا 2 صا ا ا ا 0 | © 21 جد 5 585 )!2525 ‎oN = oN = oN = = 2 = SN = “1 “1‏ = < = : ٍ ب ‎an = an = an = an an <r‏ 8 | 2 |« لذ | وا ‎2a‏ ا ‎|Z‏ ا ‎|Z | 2 |Z‏ ~= ‎T3333 E121a] 28‏ ‎ES ENE EEN 35) 3) 9 3 202 |Z‏ ا 4 ا #| يجا ا ا 3 + 3 + 3 + ‎hr‏ به = * - - 5 ! - 5 ) - 5 ) - ب < & ‎A QL A QL A QL A A‏ ما ‎Xo)‏ ص ‎o‏ 03 ذا ما ما 92 اج 5 ‎SE EE EN‏
‎2 |Z
‎3 |3
‏قد ا ‎NR‏ ‏اله اق اق ا قث ات اق اق ا اث تق ‎REE‏ أ أ ل ل ل أ أ أ نل
جدول 7 مناطق 1/7 ل 905 المتوافق مع البشر ‎N — : : an 2‏ = 8 ص 3 = ص ‎zlgldl4d|5 5 ١ |7‏ لات نا ا ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E |> |E‏ <ا ‎|Z‏ > 3 3 أ 313 ‎A‏ ذا ىذا صا ‎wv‏ 2 حا 2 حا 2 حا ا ا ا 0 | © 2 جد 5 95585 !)2585 - - = 3 = 2 = = 3 = 3 = 3 = ‎an = an = an = an an he —_ in : = <‏ ‎as) orp an Pomp an ong = Q a J 4 8 =‏ ~~ = < 3 = ~~ ~~ ~~ = © 4 4 3 4 3 4 3 4 8 )+ 333353354335136 3 ‎QL‏ | ىا 4ا ا ا دا ىا ذا جا دا + ‎A | =‏ = ذا ‎REN‏ جا ذا جا ذا ‎ESA‏ - ‎Q . jo)‏ ن كان كان 5 كان 5 كان 5 ‎vq‏ ‎A QL A QL A QL A An Z < 1‏ ما ب ص ‎o‏ 03 =| | ما ا 9 جا ذا »22ت ‎Z| E‏ 3 4 - وا
جدول 7 مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر ب ب ب 2 ‎a) la) [ — 3 3 T‏ هك ار هك ما ا 2=|>| ا ‎224d‏ عا ا اف ا اا ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E |> |E‏ <ا ‎|Z‏ > 3 3 أ 313 ‎A‏ ذا ىذا صا ‎wv‏ 2 ما 2 ما 2 ما ا ا ا 0 | © 2 جد 5 95585 !)2585 ‎oN = oN = oN = = 2 = SN = 3 3‏ 5 ا 3 1 ذا ‎|g‏ 5 2 3 ا 32 5252| 2 ‎an orp an Pomp as) ong = Q a J 34 2 =‏ ~~ = < 3 = ~~ ~~ ~~ 2 | 22 29 ا ا و5 4 3 ‎A154‏ ‏4 —_ —_ 3[ _ 3[ _ 3[ _ ‎wl ©‏ .3 = = جا 3 3 3 3 3 3 3 ‎A | =‏ = ذا ‎REN‏ جا ذا جا ذا ‎ESA‏ - ‎Q ap)‏ ن كان كان 5 كان 5 كان 5 ‎vq‏ ‎A QL A QL A QL A A Z < 1‏ ‎wv‏ تا ‎(q\] oO oo‏ ‎zz |=‏ ا ‎Sz (2 le |% |e |Z‏ 3 3 4 - ‎|e‏ > ‎Den‏ ماااإاواماة”ماوواولىساة<اجال] ‏ [ولومل> صصوهغ“دا ]”ج<_+<”ؤئئ” ‏ و #ؤآظ
جدول 7 مناطق 1/7 ل 905 المتوافق مع البشر ‎wv Ka) <r ia) on i=) [& — 3 3 an) 2‏ ا ا “ذا جا 021244 9 5 )5 )2 ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E |> |E‏ <ا ‎|Z‏ > 3 3 )3 8# #2 ضقاقاة# )#2)|ءاة# :)ا ءا ء ا ا ا 0 | 9 21 21 5 595 5 2 2 2 ‎Poi = “1 -‏ = = = = نت = 9 = 9 = = | = : ا ا © ا ا ‎TZ |Z ELE‏ ‎a 3 8 = =‏ 9 | ححا = | ~ | ~ | ~ ‎v < =‏ = ~~ ~~ ~~ ‎le]‏ © > > 3 > 3 > ا + 8 )+ 333353354335136 3 ‎mn |S -‏ < ا ا آدا ا 5 ‎|F‏ دا 7 = ا ‎NE 5 | Slo lx |B‏ | 5 3 ا 85| 8| ا ها ما +ا دا ها ما > ‎dL‏ < ب ‎A QL A QL A QL A A‏ وا تا 0 ب 6-03 با سما ا ا حا 7 وا ‎cS zc‏ ‎|Z‏ 2 ‎|Z‏ 3 4 - ‎|e‏ > م ا ا اح ا ا ا ا ا ست ا ل ا ل ل ا ا ا ا ‎I 7) 1 1 10 1 GET 0 33 33133‏ ]9 اب ابا اط اا أ اي ا اي أي اي اي ا أي ‎١١ 34 34 4‏ “ا ‎MM MIM M M ١١ M‏ ل ‎FF 1‏ اليد 35 ا 5 لا ‎S|‏ 9 )5 )5 03 5 }5 0,0
جدول 7 مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر 2 ب 1 1 — 3 ‎Na‏ = ص 3 ص ص ا ا ا 5 << فق ا قا ىا ا قا 9 ‎Elz‏ ‏| | دا 9 2 >| >| نذا >[ ذا <ا ‎|Z‏ > 3 # اا ا يا 5/5 ا ا ا 0 | © 2 جد 5 95585 !)2585 1“ 1“ = 23 = 2 = = 2 = 2 = 3 = ‎an = an = an = an an =A — in ١ = =<‏ = = 4 ل ‎as) orp an Pomp an ong = Q a‏ ~~ = < 3 = ~~ ~~ ~~ ‎ES 3 ES 3 ES 3 ES ES © =‏ 8 )+ 333353354335136 3 ‎QL‏ | ىا 4ا ا ا دا ىا ذا جا دا + ‎A | =‏ = ذا ‎REN‏ جا ذا جا ذا ‎ESA‏ - ‎Q 3 rap‏ ا ا ‎A‏ ا ‎A‏ ا ‎hy‏ ‏1 < ب به ‎A QL A QL A QL‏ را ‎(q\] (an) oo \O‏ =| | ينا ‎Sle Te TT‏ ات ‎|Z‏ 2 7 3 4 - ماع ‎EEEEEEREEREEEEE‏ ‏ا ‎bbb ad al al ORI‏ ل ال ل ل
جدول 7 مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر ‎a) 2) = 304 — 3 3 an 2‏ 3 = ص ‎zlgldl4d|5 5 ١ |7‏ لات نا ا دا 9 2 >| >| نذا >[ ذا <ا ‎|Z‏ > ‎SERENE)‏ كا ذا &| صا صا ‎|Z‏ صا ‎[Ze |Z‏ - ا ا ا 0 | © 2 جد 5 95585 !)2585 ‎oN = oN = aN = = 2 = SN = = 3‏ = = = : ِ' هما ‎an = an = an = an an A‏ = 8 4 ل ‎as) orp an Pomp an ong = Q a‏ ~~ = < 3 = ~~ ~~ ~~ ‎ES 3 ES 3 ES 3 ES ES © =‏ 8 5 + ,33344535535353 3 ‎QL‏ | ىا 4ا ا ا دا ىا ذا جا دا + ‎A | =‏ = ذا ‎REN‏ جا ذا جا ذا ‎ESA‏ - ‎Q ap)‏ ن كان كان 5 كان 5 كان 5 ‎vq‏ ‎A QL A QL A QL A An Z < 1‏ ما ‎I o 00 Xo)‏ با نذا ا اجا 7 اذ ‎Sz‏ ‎|Z‏ يي 3 4 - ماع ارس اام اط أ لأ ار ‎al‏ ار أ ار أ ار ارا ‎TTT =‏ ف ا ‎EE EE EE EE a‏ ‎Si 51 Si 5 Si 5 95 TS an 32) 52) 52)‏ ]5 ‎nnn EEE EE‏ هو اه ‎mT‏ 5 * " 8 2 "!اق 0 ا ا ا 53 53 34 ا 5 )8 ‎GI‏ 5 851 5 5 5 3 51 ااا ااا ااا لد 54 )54 35 من ‎Gl 69 GI 6) 98 GI G| 80 G|‏ 1 ‎bs sn] 56 55 55‏ أه اه ‎blob]‏ ‏ا ا ا ل ا ]56 56 37 ا !ل 10 173 11010 1 1 1 ا ‎aa‏ ل ل ا ل ل ل ل ل ل 7 |37 58 ال 7 ا 7 ل ‎tlre‏ ]9
جدول 7 مناطق ‎1Vh‏ 905 المتوافق مع البشر ‎EEE EERE 3 3 = 2‏ دا +| ذا 0 ‎z |Z |2|2|2 |g |glald |Z |Z 4 7‏ ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E‏ ا ‎|Z |= |E‏ > 3 3 )3 8# #2 ضقاقاة# )#2)|ءاة# :)ا ءا ء ا ا ا 0 | 9 21 21 5 595 5 2 2 2 ‎fii = “1 -‏ = = = 5 3 = 3 = 3 5 3 = : إل =| | با ذا 2 = | 2 = | 2 ‎an‏ ‏= ع | . 3 | 2 حا حا لا ا | ا ‎|Z‏ ~ ‎v < =‏ = ~~ ~~ ~~ ‎o‏ © > > 3 + 3 + 3 + 8 )+ 333353354335136 3 4 ا 2 ىا ا ا ذا ا ذا + د = ا ‎NE 5 | NE Slo lx |B‏ 3 ا 85| 8| ا ها ما +ا دا ها ما > ‎dL‏ < ب ‎QL SL QL SL QL SL An‏ ب ما ‎\O‏ 90 ب 6-03 ما ذا | دا 7ا ا ذا يدا ا 3 33 4 - تا © را لل اا ااا ا ‎aw‏ 0 إن *# ام لير ام ام ام ام ام ام اما 08 الل للا انم اج ا ام ال ان أت أي ام أن ام أي أن ا !6 }162 3 2 ا ا ا ‎Di D|‏ ا ‎Di‏ ا( ‎bi Di‏ 1 |8 8 نر © 0 © © 0 © © ‎PIP‏ ‎YY tT aw‏ ‎Es EE EE SE I FP‏ ‎EEE EE Ee‏ ‎aT‏ صم
جدول 7 مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر ب ب ب 2 .» 3 3 — اذى ‎a) <6 a)‏ كك ‎a)‏ ما وا دا وا ذا < 1ا 31 ىا ذا ذا ذا 2 اذ 5 دا 9 2 >| >| نذا >[ ذا <ا ‎|Z‏ > 3 # اا ا يا 5/5 ا ا ا 0 | © 2 جد 5 95585 !)2585 1“ 1“ = 23 = 2 = = 2 = 2 = 3 = ‎an = an = an = an an =A — in ١ = 3‏ = 8 4 ل ‎as) orp an Pomp an ong = Q a‏ ~~ = < 3 = ~~ ~~ ~~ ‎ES 3 ES 3 ES 3 ES ES © =‏ 8 )+ 333353354335136 3 ‎QL‏ | ىا 4ا ا ا دا ىا ذا جا دا + ‎A | =‏ = ذا ‎REN‏ جا ذا جا ذا ‎ESA‏ - ‎Q 3 rap‏ ا ا ‎A‏ ا ‎A‏ ا ‎hy‏ ‏1 < ب به ‎A QL A QL A QL‏ را ‎(q\] (an) oo \O‏ =| | ينا ‎Sle Te TT‏ ات ‎|Z‏ 2 7 3 4 - ماع تة أ أ ةن ا ‎EEE‏ نه 0
7 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر‎ ‏دا‎ TF [2 TO [2 | ‏كل‎ | 3 3 as 2 2) 5 2 5) ‏ا ا ا ذا <ا قا و ةا يا‎ > |Z ‏<ا‎ |E |> |E |> ‏ديا ذا ا 2 2 ا‎ 5/5 ‏اا ا يا‎ # 3 2585)! 95585 5 ‏ا ا ا 0 | © 2 جد‎ = 3 = 3 = 3 = = 2 = 23 = “1 “1 as) 5 as) ‏با | ل‎ =] as) 5 EA ‏إلى با‎ ١ = = ~~ an orp an Pomp as) ong = Q a J 4 8 = ~~ ~~ ~~ = v < =
ES 3 ES 3 ES 3 ES ES ©) = 3 333353354335136 +) 8 + ‏.ا © ا جا )| ا يج ا + ا‎ a - ESA ‏جا ذا جا ذا‎ REN ‏ذا‎ = A | = hy JA) hy 5 hy JA] | 2 3 sp
A QL A QL A QL A A Z < 1 6-03 ‏تا 0 بح‎ wv cz Sle 7 TT | | |= 2 |Z 3 |3 - 4 > ‏دوا‎ ‏»ا ااا ا ل لاا‎ « 7 ‏وي قا ةا‎ 2 82
N S N S N S N| N S N S Fr3 | 84
A A
82 | 82
L S L S L S L S S S S Fr3 | 85
B B
جدول 7 مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر ب ب ب 2 .» 3 3 — اذى ‎a) <6 a)‏ كك ‎a)‏ ما وا دا وا ذا < 1ا 31 ىا ذا ذا ذا 2 اذ 5 دا 9 2 >| >| نذا >[ ذا <ا ‎|Z‏ > 3 # اا ا يا 5/5 ا ا ا 0 | © 2 جد 5 95585 !)2585 1“ 1“ = 23 = 2 = = 2 = 3 = 3 = ‎an = an = an = an an =A — in : = 3‏ ‎E‏ | & ا . ‎Re‏ ع | © =| حا | ا | ~=| ‎|Z‏ ~= = < 3 = ~~ ~~ ~~ 0 5 © لم 3 3 ا 3 ا 3 33 3 م 5 3 5# )333133 33 3 ‎QL‏ | ىا 4ا ا ا دا ىا ذا جا دا + ‎A | =‏ = ذا ‎REN‏ جا ذا جا ذا ‎ESA‏ - ‎Q 3 rap‏ ا ا ‎A‏ ا ‎hy hy JA]‏ ‎A QL A QL A QL A An Z < 1‏ را ‎(q\] (an) oo \O‏ =| | ينا ‎Sle Te TT‏ ات ‎|Z‏ 2 3 3 4 - ماع 82 | 82 ‎L L L L L L L L L L L Fr3‏ ‎C C‏ ‎EEEEEEREEEEEEEEE‏ ‎EEEENEEEENEEREEE‏ ‎EEE‏ ةا
جدول 7 مناطق 0 905 المتوافق مع البشر 2 = 3 3 — اذى = ‎a) = ASH = on‏ ا 4 ا ‎zlzldld|Z|E‏ ا 5 1222 ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E |> |E‏ <ا ‎|Z‏ > 3 3 )3 8# #2 ضقاقاة# )#2)|ءاة# :)ا ءا ء ا ا ا 0 | 9 21 21 5 595 5 2 2 2 ‎AN = ON = ON = = oi = “1 -‏ = ‎in} : - ~‏ =| ا ‎|Z‏ ا 2| ‎|Z |B |Z‏ 53لا ‎T‏ ‎ong = ong = ong = = | = IN a J 5 = =‏ ‎v < =‏ = ~~ ~~ ~~ ‎oO‏ > > = > = > = > 8 )+ 333353354335136 3 ‎a |S -‏ < ا ا أدا ‎FEF‏ =| 7 = ا ‎NE 5 | Slo lx |B‏ | 5 3 ا 85| 8| ا ها ما +ا دا ها ما > ‎dL‏ < ب & به ‎QL‏ به ‎QL‏ به ‎QL‏ به ‎(q\| (an) 00 \O wv‏ با با ذا نذا د ا ا ها ذا دا ‎Z|‏ ‏%| 3 4 - ‎|e‏ > ‎EEEEEEREEEEEEEE‏ ‎Cp pe epR Eb‏ ‎LF FF LL Lag]‏ ‎ep == = =‏ = ‎to 96 965‏ آلا ‎YD‏ ا الا الا إلا الا إلا إلا الا لل لل للا لل لاا ‎BARRA‏ د كي ل ل 0 ‎IRE BISON‏ ال التي م الم م الح ل مه ال ا ال ل ل ل ا ا ال ا اه ل ا ا 927 97 | الى آلا 0 ا ‎YL YL‏ الا ا الا 3 إلا ال ل ]1 لل ل ا ا اا ا ااا ‎me 9# 8‏ * 89 08 !ا *# !ا * 2" د »)7
جدول 7 مناطق 1/7 ل 905 المتوافق مع البشر ‎EEE EERE 3 3 = 2‏ دا +| ذا 0 ‎z |Z |2|2|2 |g |glald |Z |Z 4 7‏ ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E‏ ا ‎|Z |= |E‏ > 3 3 )3 8# #2 ضقاقاة# )#2)|ءاة# :)ا ءا ء ا ا ا 0 | 9 21 21 5 595 5 2 2 2 ‎fii = “1 -‏ = = = 5 3 = 3 = 3 5 ‎S‏ = : إل =| | با ذا 2 = | 2 = | 2 ‎an‏ ‏= ع | . 3 | 2 =| =| ‎|Z || |= |F‏ ~ نب < ‎fon B‏ = = = ‎o‏ © > > 33 > 33 > 33 > 8 )+ 333353354335136 3 - 3 ا يا ؟) + ىذ _ ؟) ىذ +3 + = ا ‎NE 5 | NE Slo lx |B‏ 3 ا 85| 8| ا ها ما +ا دا ها ما > ‎dL‏ < ب ‎QL SL QL SL QL SL An‏ ب ما ‎\O‏ 90 ب 043 =| با برا 7 79ج مايا5 ‎cz‏ ‏ا 3 33 4 - تا © ل ل ل ا ا ا 1 ا ا ا ااا ااا ‎G | 99) 99]‏ ا5 ‎GE 0 02 02 6 0 GY YI‏ 0 اق ا الأ !ا |9 مام و اي ام ام ام ام ام امام اما الم ا لال ‎Gl © 0 0 0 0 0 0 R| RI G‏ © 0 4 ا ا ل ل 0 9 اطق ام ا اي الى الم لمم لم ان م أ اا لبن ‎YI GF‏ الا 0 © 0 0 ‎GL 0 GI‏ ا م م ا ا اا ااا ‎TTT Jee]‏ أي اام أ أ ند أ ا اين الا ا 2“ الا الا الا 7 لا ‎yy‏ ل 8# ااا 0 10 10 اه نمأم ام م اا دا ا الى |0 الا ‎GE GL OF © GF 0 0 BE‏ ا كد 6 7 الا اا ااا
جدول 7 مناطق ‎Vh‏ ل ‎ODS‏ المتوافق مع البشر ‎Nao 2‏ ؟ 3 | 9[ 2[ ‎TO‏ دا ىا دغ لا ا ا “-3ا << 4 ذا تا ةا )يا )جا ا ة ديا ذا ا 2 2 ا >| ‎|E |> |E‏ <ا ‎|Z‏ > 3 3 )3 8# #2 ضقاقاة# )#2)|ءاة# :)ا ءا ء ا ا ا 0 | 9 21 21 5 595 5 2 2 2 ‎fii = “1 -‏ = 5 3 = 3 = 3 5 < = : ىا ا 9 ذا ذا 25 ا ذا 53 ا 5 5 ا 25 ‎iN 2 EE‏ وا =| =| ا حا 2% ‎|Z‏ = = 2 : = = = = ا + 3 12 )3 413124 ‎A141‏ ‎a 3. wl ©)‏ ا “ها ا دا يا دا يا دا + = ا ‎NE 5 | Slo lx |B‏ | 5 3 ا 85| 8| ا ها ما +ا دا ها ما > ‎dL‏ < ب ‎QL SL QL SL QL SL An‏ ب ‎\O wv‏ 90 نس 6-03 ‎TT iz IE |=‏ 7 اذا ‎Tz‏ ‎|Z‏ 2 ‎|Z‏ 5 4 - تا © 0 ]18 10 اوم ا اد ا إلى وبر |0 اا - 0 ‎G)‏ 0 0 0 0 )6 0 0 صم اع اقل ا 0 10 10 ايوم ‎Ll‏ ان اا ا ا اا ‎inl Soll‏ « » » « « « “ عن عن و ا ا اليم ا )0 ال © 1 ‎Fl‏ ال | ‎FI‏ © ل ‎FI‏ ا عن ‎ve‏ ‎Ce 10 0‏ لل ام ابل اع اع اع ج اع اع اع اع 06 06 )1 لاا ‎TT TT Tt tt [lnm‏ ا ‎DI by BL Bi DL BLD} DDI DDE‏ ‎ee 1‏ اا ‎BE BE BB EE LS‏ ‎vy vl usu] 0‏ 7 "الا الا "ا "ال ‎YY‏
7 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر‎ ‏ص 3 ص ص‎ = Na ‏اا‎ — 1 1 as 2 ‏لات نا ا‎ zlgldl4d|5 5 ١ |7 > |Z ‏<ا‎ |E |> |E |> ‏ديا ذا ا 2 2 ا‎ 5/5 ‏اا ا يا‎ # 3 2585)! 95585 5 ‏ا ا ا 0 | © 2 جد‎ = oN = oN = aN = = 2 = SN = = 3 an = an = an = as) as) SA — : ١ = = ~~ as) orp an Pomp an ong = Q a ‏ل‎ 4 8 = ~~ ~~ ~~ = 3 < =
ES 3 ES 3 ES 3 ES ES © = 3 333353354335136 +) 8 + ‏ىا 4ا ا ا دا ىا ذا جا دا‎ | QL - ESA ‏جا ذا جا ذا‎ REN ‏ذا‎ = A | = hy hy A ‏ا‎ A ‏ا ا‎ Q 3 rap
A QL A QL A QL A An Z < 1 (q\] (an) oo \O ‏را‎ ‏ات‎ Sle Te TT ‏ينا‎ | |= 2 |Z 3 7 - 4 ‏ماع‎ ‎11 10| 10
WI WI W| ‏نأ‎ W| ‏نأ‎ | W|I W| W| W| W Fr4 4 3 3 11 10| 10
G G G G G G G G G G G Fr4 4 4 11 10| 10
T Frd 6 5 5 11 10| 10
G G G G G G G G G G G Fr4 7 6 6 11 10| 10
T T T T T T T T T T T Frd 8 7 7
7 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 905 المتوافق مع البشر‎
I's) ‏ص 3 ص‎ = Na 3 — 1 1 as 2 ‏لات نا ا‎ zlgldl4d|5 5 ١ |7 > |Z ‏دا 9 2 >| >| نذا >[ ذا <ا‎ ‏5و‎ 55 AEA PEPE 3 3 2585)! 95585 5 ‏ا ا ا 0 | © 2 جد‎ = oN = oN = aN = = 2 = SN = = 3 an = an = an = an an SA — : ١ = = =~ |Z |=~ |Z |=~ |Z |=~ |= Ql Re . ‏ا‎ & | E ~~ ~~ ~~ = 3 < = 4 3 4 3 4 3 4 4 © = 3 333353354335136 +) 8 + ‏.ا © ا ا 3 دا | ذا جا د‎ a - ESA ‏جا ذا جا ذا‎ REN ‏ذا‎ = A | = hy hy A ‏ا‎ A ‏ا ا‎ Q 3 rap
A QL A QL A QL A An Z < 1 (q\] (an) oo \O ‏را‎ ‎cz ‏با برا 7 79ج مايا5‎ |= ‏يي‎ |Z 3+ - 4 ‏ماع‎ ‎11 10| 10
T L T L T L T T| M T T Frd 9 8 8 12 10 10
Vv 7 AY 7 AY 7 AY 7 AY 7 AY Fr4 0 9 9 12] 11] 11
T T T T T T T T T T T Frd 1 0 0 12] 11] 11
Vv 7 AY 7 AY 7 AY 7 AY 7 AY Fr4 2 1 1 12] 11] 11
S S S S S S S S S S S Fr4 3 2 2
جدول 7 مناطق ‎Vh‏ ل ‎ODS‏ المتوافق مع البشر ب ب ب 2 ‎T‏ 3 3 — لج ‎RQ) Ka‏ 0 الا ‎a) Ea)‏ وا اا ا <ا 4 ا ىا ما ذا ىا ‎Zl‏ ‏دا ذا ذا 2121212 <ا <ا 2 <ا 2 > ‎IZ‏ > ا 33 2 ا ا © ‎A A‏ صا ‎A‏ صا ‎A‏ صا ‎A‏ ‏| ها ل ‎Oo‏ 12 | ذا ا جا © جا ا ‎alz‏ > - 1“ = ,3~ = = = = 3 = 3 = 3 = ‎s | =‏ : | با | ذا ذا 3 ذا 32 ذا 3ق 2 ‎FEE‏ ا 8( 2| حا حا 2 حا 2 ا 2 << ‎o‏ كح ‎ES 3 ES 3 ES 3 ES [3 pee © 3 a‏ ‎SERRE 222212] |2|%)8‏ ‎<Q‏ ا ‎I‏ 4| ا = . ‎RE RE‏ 3 = ا ‎NE 5 | Slo lx |B‏ | 5 3 ا 85| 8| ا ها ما +ا دا ها ما > ‎dL‏ < ب ‎QL SL QL SL QL An An‏ ب ‎\O wh‏ 0 ب الى ‎IT‏ | بدا ا ا دا 7 اذا ‎Tz‏ ‏اي ‏?| 3 4 - تا > جدول 8 مناطق ‎Vk‏ ل ‎ODS‏ المتوافق مع البشر 3 3 ب 2 © ‎SQ) QA — I‏ < م و | 4 ا ‎EE‏ ذا < 2 4 3 | 53 | 2 ا 3[ ‎J‏ ‎a a wo i‏ 8 2 > > > > > ‎S158 88858 |2 58 13) 3‏ ‎N ¥ 3‏ ]© - < 3 3 = 2 لم 5 5 5 5 5 ‎SI 0 4 =z | =‏ ا ا ‎|Z | BE‏ 2 ‎SENESCENT BEEN‏ ‎“la |‏ ا 3 ا ا | ‎I=‏ = ‎D‏ د :3 ‎D D D D D‏ ‎KS KS KS KS KS pA oq 1‏ ‎le‏ 2| قا ‎a 1a |g‏ با ‎[oo]‏
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر 3“ 3“ 3“ م ‎on [& — 3 al‏ لك ‎a)‏ ‏1 1 1 ا | < & 4 3 | 3 | 5 ا 5 ا ‎a‏ ‏| ذا ‎lz‏ 1212 8 5 | <ا <ا <ا < ‎E& 2 | a 3 3 3‏ | 8| 8| 8| 8| 8 3 3 3 © . < )@[ )@[ )@[ )@[ )@[ ‎EN — “1 “1‏ + ل = = = = = ا 112 ا 5% | 2 )2 2 ‎Z |Z‏ 4 ا 01 3322 3( 113 7 1 3 3 3 3 3 3 3 5 ّّ اه 2 ‎oT e oT e oT e oT + n‏ ّّ 1 له | * | | ا »0 ‎CU‏
§g ‏قا‎ |g ‏قا قا‎ role
بك 2
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر ‎OO 2 “3 “3 “3‏ 3 — اذى فى ‎ASH‏ را ‎FE 1 1 1‏ | > 4 2 2 2 2 2 دا ا ا ‎iS‏ - 28 > > > > > 4 ا ذا ا اخ خا ا ا 2 ‎ps‏ 3 3 © . < 0 0 0 0 0 ‎Si = - 3‏ لم = = = = = = | 5 4 ا 5% | 2 ‎EZ |Z |Z |E‏ ا 13 1333322 7 1 3 3 3 3 3 3 3 5 ّّ اه 2 ‎oT e oT e oT e oT + n‏ ّّ ‎cE | 4 | | 4 | SAR 1‏
Q a 5 5 2 ‏ب‎ 0
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر 3“ 3“ 3“ م ‎al <r on [& — 3 al‏ 1 1 1 ب | < & 1 3 | 53 ا 2[ 3ق ا ‎a‏ ‎JS 212 lz zz‏ <ا|ا <ا| <ا 5 | > ‎BER 2 | a 3 3 3‏ | 8| 8| 8 | 8 | 2 3 3 3 © . < )@[ )@[ )@[ )@[ )@[ ‎EN = “1 “1‏ + ل = = = = = ا 112 ا 5% | 2 )2 2 ‎Z |Z‏ ‎|3]d 8‏ 4( 3&2 3|3| 13 7 1 3 3 3 3 3 3 3 5 ّّ اه 2 ‎oT e oT e oT e oT + n‏ ّّ 2 | + | | ا + »> ‎Q 5 5 8 2 3 ©‏ ‎aah‏ ا الا ل ‎Cb bE‏ ا ‎—t————t——t‏ ‏25 25 3 ا ‎SES‏ 05 الا 3 ا ا ال اي ا ابض ال ا ا اا 0 261 26 ا 5 ‎SE NE‏ 05 |05 3د ا صا سل ال ‎CC‏ الال اح اه ال ا اا اا اا ااا ا ا ا ا ل ل ل ل ل ا ا ا ا ل ل ل ل ل ا بت ا ا ا ال ا اا اا اا ااا ‎Eee‏
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر 3“ 3“ 3“ م ‎al <r on [& — 3 al‏ 1 1 1 ب | < & 1 3 | 53 ا 2[ 3ق ا ‎a‏ ‎JS 212 lz zz‏ <ا|ا <ا| <ا 5 | > ‎BER 2 | a 3 3 3‏ | 8| 8| 8 | 8 | 2 3 3 3 © . < )@[ )@[ )@[ )@[ )@[ ‎EN = “1 “1‏ + ل = = = = = ا 112 ا 5% | 2 )2 2 ‎Z |Z‏ ‎ENCE NNT RENE NEN‏ 7 1 3 3 3 3 3 3 3 ‎A)‏ اه 2 ‎ra)‏ يك يك يك يك ‎CU + I | | + | 2‏ ‎Q 5 5 8 2 3 ©‏ ا ل ا ا ا ل ل الل ال ل ل ا ا ات لد ‎mf‏ كد "ات إن ا ا ا ا اد سل ال ال اا الال اا اا
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر ‎OO 2 “3 “3 “3‏ 3 — اذى فى ‎ASH‏ را ‎FE 1 1 1‏ | > 4 2 2 2 2 2 دا ا ا ‎iS‏ - 28 > > > > > 4 ا ذا ا اخ خا ا ا 2 ‎ps‏ 3 3 © . < 0 0 0 0 0 ‎Si = - 3‏ لم = = = = = = | 5 4 ا 5% | 2 ‎EZ |Z |Z |E‏ ا 13 1333322 7 1 3 3 3 3 3 3 3 ‎A)‏ اه 2 ‎ra)‏ يك يك يك يك ‎cE | 4 | | 4 | * | + 1‏
0 ب 2 5 5 ‎Q a‏ ‎Eh‏ ا ل ا ‎so] 0‏ |55 ل ع ‎s|‏ | ل ل له لع ال ‎Cb‏ الل ا ا
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر 3“ 3“ 3“ م ‎al <r on [& — 3 al‏ 1 1 1 ب | < & 1 3 | 53 ا 2[ 3ق ا ‎a‏ ‎JS 212 lz zz‏ <ا|ا <ا| <ا 5 | > ‎BER 2 | a 3 3 3‏ | 8| 8| 8 | 8 | 2 3 3 3 © . < )@[ )@[ )@[ )@[ )@[ ‎EN = “1 “1‏ + ل = = = = = ا 112 ا 5% | 2 )2 2 ‎Z |Z‏ ‎|3]d 8‏ 4( 3&2 3|3| 13 7 1 3 3 3 3 3 3 3 ‎A)‏ اه 2 ‎ra)‏ يك يك يك يك ‎CU + I | | + | 2‏
‎Q 5 5 8 2 3 ©‏ ‎a‏ ال ل ل الل ال ل ل ‎CPR 536 51} 5]‏ | ال 0 ‎VE VE‏ ل ‎ME VE‏ لل ا اا الا ‎RS Se Se‏ ا 53327 574 ا ال ‎SE aS‏ ل 9 د د ا لا ل اللا ال أ اه ابض ا ل ا ا اا 53 5337 038 ا ل ‎NE‏ - 2ل ل #7 ال ا ال مال ل ال ا ”تم ‎RS‏ ‎S541 4‏ 0539 ا ]د | ل اا اباد ال ا الل اح أ ا ألا ال ا ا ا ام أ ‎da al‏ له ا له أي الها ‎S| ss) S|, 9 38 8‏ 8 3
8 ‏جدول‎ ‏ل 905 المتوافق مع البشر‎ VK ‏مناطق‎ ‎al <r on [& — 3 al ‏م‎ “3 “3 “3 a ‏ب | < & 1 3 | 53 ا 2[ 3ق ا‎ 1 1 1 > | 5 ‏<ا|ا <ا| <ا‎ JS 212 lz zz 2 | 8 | 8 |8 |8 | BER 2 | a 3 3 3 [@) [@) [@) [@) [@) < . © 3 3 3 = = = = = ‏ل‎ + EN = “1 “1
Z |Z 2 2) 2 | 5% ‏ا 112 ا‎ 13 |3|3 3&2 (4 |3]d 8 3 3 3 3 3 3 3 1 7 5 ّّ oT e oT e oT e oT + n 2 ‏اه‎ ّّ 5 >» + ‏ا‎ | | + | 2 ‎Q 5 5 8 2 3 ©‏ تت تم ا 6 ا أ اك تاك ذه نك لت ام ا 6 ا أ أ نا ا سا قا ات اق قة م ا 6م ا أ أ نا 3 أت ا لقنم نك ةك نك اك اه
8 ‏جدول‎ ‏ل 905 المتوافق مع البشر‎ VK ‏مناطق‎ ‎al <r on [& — 3 al ‏م‎ “3 “3 “3 a ‏ب | < & 1 3 | 53 ا 2[ 3ق ا‎ 1 1 1 > | 5 ‏<ا|ا <ا| <ا‎ JS 212 lz zz 2 | 8 | 8 |8 |8 | BER 2 | a 3 3 3 [@) [@) [@) [@) [@) < . © 3 3 3 = = = = = ‏ل‎ + EN = “1 “1
Z |Z 2 2) 2 | 5% ‏ا 112 ا‎
ENCE NNT RENE NEN
3 3 3 3 3 3 3 1 7 5 ّّ oT e oT e oT e oT + n 2 ‏اه‎ ّّ 5 >» + ‏ا‎ | | + | 2 ‎Q 5 5 8 2 3 ©‏ ‎EERE‏ نا أ كن الا م نت تنم نك 6 ةم ةك اك سا اك اس ا اث ات ا ات اق
جدول 8 مناطق ‎VK‏ ل 905 المتوافق مع البشر 3“ 3“ 3“ م ‎al <r on [& — 3 A‏ 4 | 14 | 4 ب | < ‎a‏ 4 3 | 53 ا 2[ 3ق ا ‎a‏ ‎JS 212 lz zz‏ <ا|ا <ا| <ا 5 | > ‎BER 2 | a 3 3 3‏ | 8| 8| 8 | 8 | 2 3 3 % © . < )@[ )@[ )@[ )@[ )@[ ‎EN = “1 “1‏ + ل = = = = = ‎Z| 2 | BE | BE | 24 > 9 oy 4 zs | 2‏ ‎|3]d 8‏ 4( 3&2 3|3| 13 7 1 3 3 3 3 3 3 3 ‎A)‏ اه 2 ‎ra)‏ يك يك يك يك ‎CU + I | | + | 2‏ ‎Q a 5 8 2 KE ©‏ ‎EEE‏ قا يه ات اق 3 نت م نه ةك أ ا قات 3 تت تم له 6 ل أ ا تاه اا لالز ا لا اا ‎M EDR 941 89 59‏ ا ل ‎ .‏ لا 72لا 2لا 2 ‎M‏ ال اا الم ألم ايم ال اا 90 0و 95 0 0 85900 00 0 ‎0١‏ 00 ا 0 ا ‎PB) 920 9‏ ون ااه ‎Sf‏ ل ل ا م او ‎nn‏ 96و "ل" ان ‎nl ul nl wl al‏ ال ‎ebb RSE‏ ا ‎ew‏ ‏دو ادو وو ‎a‏ ‏ا ‎tr‏ ‎of El, 9 9 *‏ #8 #8 8 8
جدول 8 مناطق ‎Vk‏ ل 905 المتوافق مع البشر و ‎AN‏ 3 — ا ‎Ta) <r on‏ 7007 ذا <ا 43 ا 5 ا 5 ا ‎Ala la‏ ذا ا ‎lz‏ 212 52 > | <ا > | > | > ‎A A A A A ER = 2 3 3 3‏ ‎oN 2 oN 2 < . 'S) + + x‏ 2 ‎EN — “1 “1‏ + ل = = = = = ‎Z |Z |Z |E |Z | 5% 5 4 5 | =‏ ‎a 5‏ 3 = 5 5 5 5 5 3 5 3| 22 | 3[ ا 13 303 ا + 3 3 ا ‎I=‏ | + = 7 5 3 ا ا ا ا ا ‎A 1‏ | | ا » © به 2 5 34 5 ‎Q‏ ‎Ye‏ ‎owl |) 8 Lian] 95 95‏ مه يم 8" ‎0١"‏ ‎FF‏ لل ا ا أ ا ‎owl 1 Lint] 96| 96‏ ل ا ا ل ال ا الا ا ا ا ا ‎١‏ اه[ ا ‎3b 120 1 17:0 12 Lan] 97 97‏ 1 1 لل ل هافنم قا ا ا نا ا نا م أن تك أ أ أ ا ال
8 ‏جدول‎ ‏المتوافق مع البشر‎ ODS ‏ل‎ VK ‏مناطق‎ ‎wy <tr on [«] — 3 6 2 “3 “3 “3
A A A A A EN < | ‏ذا‎ 1 1 1 > | > ‏دا ذا ىا 2 | 2 52د > | > | <ا‎
A #2 ‏ا‎ # | 8# | A ER 2 | 2 3 3 3 aN aN aN aN aN < . © 3 3 ps = = = = = ‏ل‎ + EN — “1 “1
ZT <2 |E |E |E | 5% 32 4 z |= 30313 (3 322 [3] 34) 3 3 [3 | 3 | 3 4 ‏يا + ا‎ 2 ّّ oT e oT e oT e oT + n 2 ‏اه‎ ّّ 5 k= 1 k= 1 k= pA ‏ا‎ 71 a 1a |g |8 ‏ذا‎ role 2 ‏ب‎ ‎9 ‏جدول‎ ‎VL «VH ‏الطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى ل‎ 711 J ‏متوالية مستقبل إكسون‎ VH ‏الصورة المغايرة‎ ‏الوحدات البنائية لإطار واهب‎ : : ‏أو آلا‎ VL ‏أو‎ ‎NCBI ‏أكواد الوصول‎ Hu9D5VHv1 11582 1169 <H47
AAX82494 ‏(المتوالية رقم: 5) 4 رو‎
(المتواليات رقمي :443 على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎AAXS82494 s 24 Hu9D5VHv2‏ ‎H82b 1182 H69 +7‏ (المتوالية رقم: 6) (المتواليات رقمي: 3 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎Hu9D5VHv2b‏ 4 ر ‎AAX82494‏ ‎H108 «H47 +2‏ (المتوالية رقم: 7) (المتواليات رقمى: 3 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎AAX82494 s 24 Hu9D5VHv3‏ ‎H82 +9‏ 11520 (المتوالية رقم: 8( (المتواليات رقمي: 3 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‏109157113 4 رو ‎AAXS82494‏ ‎H108 «H47‏ (المتوالية رقم: 9) (المتواليات رقمي: 3 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎AAXS82494 s 24 Hu9D5VHv4‏ 2+ 1182 (المتوالية رقم: 10( | (المتواليات رقمى: 3 و4؛ على التوالي)
أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎Hu9D5VHv4b‏ 4 و ‎AAX82494‏ ‏ل 7 ‎H108‏ ‏(المتوالية ‎aga | (Hed‏ رقمى: 3 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎Hu9DSVHV5‏ 4 ر ‎AAX82494‏ ‏آٍّ 2 ‎H47‏ 11826 (المتوالية رقم: 12 | ‎algal‏ رقمى: 3 و4؛ على التوالي) كود الوصول ‎NCBI‏ ‏190571 ‎L36 ABC66952‏ (المتوالية رقم: 19( (المتوالية رقم: 8 0 كود الوصول ‎NCBI‏ ‎Hu9D5VLv2‏ ‏82م لا يوجد (المتوالية رقم: 20( (المتوالية رقم: 8 0 كود الوصول ‎NCBI‏ ‎Hu9D5VLv3‏ ‎L60 ABC66952‏ (المتوالية رقم: 21( (المتوالية رقم: 8 0 كود الوصول ‎NCBI‏ ‎Hu9D5VLv4‏ ‎L8 ABE‏ هك ‎«L70 <L60 139 16 <L19‏ (المتوالية رقم: 22( ‎L74‏ ‏(المتوالية رقم: 8 0 9055م كود الوصول ‎NCBI‏ قل قل ‎<L18‏ قال 136 9ل ‎(L60‏
(المتوالية رقم: 23) | 8066952م 0 ‎L74‏ ‏(المتوالية رقم :18 ( جدول 10 ترقيم ‎Kabat‏ الخاص بالوحدات البنائية لإطار للطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى في مناطق ‎Vh‏ الخاصة بالأجسام المضادة 905 المتوافقة مع البشر ‎le] — I’) “3‏ اه ‎a) 0 Ni Q‏ ‎on > cl > > a)‏ > 4+ > ‎T > T > T > T T 2 ] ] 4‏ ‎|°F hs‏ وا <ا >| يا >| ا <ا ‎|Z‏ > 82 813 ما =| 8 ‎|v‏ ما ‎Sle‏ ‎SS‏ 3 3 ا ا ‎|g‏ جا وا ‎a | |a‏ ‎|S |2 |2 |2 | |% |Z 3 |=‏ 2 با ب 1 1 2 | ‎tT‏ ‎al (a‏ بج 0 ‎O‏ ‏3 4 ‎m‏ ‏ا 8 ‎I I‏ نتن فت انلا ثلا ثلا عل :للا انا ثلا ‎Ed‏ ‏ان ال نا نا نل نت اا نلا نا نذا لقلا نلا نأضلا فا لغ ثلا ‎ld dc‏ 0 8 ٍّ جدول 11 ترقيم ‎Kabat‏ الخاص بالوحدات البنائية لإطار للطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى في مناطق ‎VK‏ الخاصة بالأجسام المضادة 905 المتوافقة مع
البشر البنائية | ‎ABC66952‏ لفأر ‎VLv4 VLv3 VLv2 VLvl‏ دمر ا أ الا الا ل ل ل ‎A) I‏ ل ل ال ‎I‏ ‏و ا أ ال ا ل ل ل اا ا أن لا لا ألا الا ‎I‏ ‎A) I I‏ لا أ ل ل ال ‎Nd) I‏ !+ ا ‎I 8 0| I I)‏ اق يتم عرض محاذاة متوالية ‎VH‏ ل 905 فأري (المتوالية رقم: 1) مع متواليات نموذج الفأر ‎1SEQ_H)‏ و1ا_174016؛ المتواليات أرقام: 2 و62؛ على التوالي)؛ متواليات المستقبل البشري ‎tAAX82494 5 BAC02114)‏ المتواليات رقمي: 3 و4؛ على التوالي)؛ والمتواليات ‎<Hu9D5VHv3 <Hu9D5VHv2b <Hu9D5SVHv2 1‏ 1109105171130 ‎HU9DSVHYS 5 <Hu9DSVHv4b 11090571184 5‏ (المتواليات أرقام: 12-5( على ‎(Js)‏ ‏شكل 1أ. يتم تضمين ‎CDRS‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مربعات؛ فيما عدا أن المريع المطؤق الأول يكون مركبًا من ‎Chothia CDR-HI1‏ و ‎(Kabat CDR-H1‏ مع ‎Kabat‏ ‎CDR-H]‏ تحتها خط ويخط سميك. تكون المواضع التي عندها تختلف الوحدات البنائية القياسية؛ من نوع فيرنييه؛ أو الخاصة بالسطح البيني ‎Lad‏ بين متواليات مستقبل الفأر والمستقبل البشري 0 عبارة عن مواضع مرشحة للاستبدال. تتضمن أمثلة على الوحدات البنائية لتأسيس 0004/من نوع فيرنييه الوحدات ‎alll‏ 2 49« 69« 71 75« 580 94 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 7. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية قياسية/متفاعلة مع ‎CDR‏ الوحدات البنائية 24 48؛ و73 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 7. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية للسطح البيني/الحشو
‎(VHHVL)‏ الوحدات البنائية 37( 39 44 47« 91 103593 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول ‎JT‏ ‏يتم عرض محاذاة متوالية ‎VK‏ 905 الفأري (المتوالية رقم: 16) مع متوالية نموذج الفأر ‎¢1MJIU_L)‏ المتوالية رقم: 17( متوالية المستقبل البشري (85066952؛ المتوالية رقم: 18)؛ والمتواتيات 90511 ‎Hu9D5VLvV5 5 ¢Hu9D5VLv4 (Hu9D5VLv3 ¢Hu9D5SVLV2‏ (المتواليات أرقام: 23-19 على التوالي)؛ في شكل 1ب. يتم تضمين ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مربعات؛ فيما عدا أن المريع المطوّق الأول يكون مركبًا من -001 ‎Chothia‏ ‎«Kabat CDR-H15 HI‏ مع ‎Kabat CDR-HI‏ تحتها خط وبخط سميك. تكون المواضع التي عندها تختلف الوحدات البنائية القياسية؛ من نوع فيرنييه؛ أو الخاصة بالسطح البيني فيما بين 0 متواليات مستقبل الفأر والمستقبل البشري عبارة عن مواضع مرشحة للإستبدال. تتضمن أمثلة على الوحدات البنائية لتأسيس 4ا000/من نوع فيرنييه الوحدات البنائية 4 35( 46 49« 66 68؛ و69 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 8. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية قياسية/متفاعلة مع ‎CDR‏ الوحدات البنائية 2« 48 64« و71 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 8. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية للسطح البينى/الحشو ‎(VH+VL)‏ الوحدات البنائية 36 36 44 7ك 87 5 و98 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 8. تكون الأسس المنطقية لاختيار المواضع الموضحة في جدولي 9 و11 في المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة كمواضع مرشحة للاستبدال كالتالي. ‎PSA‏ ؛ يعرض النموذ ‎z‏ التواء فى الحلقة عند هذا الموضع » لذا تمت تجرية طفرة منعكسة ل ‎A‏ ‏لتخفيف 3 ‎LOP 20‏ ؛ يعرض النموذج التواء فى الحلقة عند هذا الموضع؛ لذا تمت تجرية طفرة منعكسة ل ‎P‏ ‏لتخفيف 3 5 : تكون © عند هذا الموضع أقل تكرارًا. تمت تجرية الطفرة ل 5 لتخفيف تشوه الحلقة. /191: يكون ‎Vg A‏ عند هذا الموضع متساوبين في التكرار. تمت تجرية الطفرة ل ‎١/‏ لتخفيف تشوه الحلقة.
736 : تمثل هذه وحدة بنائية لسطح بينى ‘ ونمطيًا 7 أو ‎.F‏ تشتمل 7 على مجموعة هيدروكسي إضافية يمكن على نحو محتمل أن تؤثر على حشو ‎LC + HC‏ يمكن أن تتداخل قطبية 736 على نحو محتمل مع وضع الوحدة البنائية ‎HO5‏ للسلسلة الثقيلة 080-113. يُظهر نموذج التجانس أن 7 عند هذا الموضع ستُكوّن رابطة ‎H‏ 06-0070 مع ‎F100(g)‏ في 13 قد تؤدي إلى تقييد حركة ‎H3‏ تم استخدام كل من ] و7 في أنواع منفصلة. ‎R (5385 :K39R‏ روابط ‎—H‏ مع الوحدات البنائية المجاورة في هذه الحلقة مقارنة ب كا. لاستبعاد أية تأثيرات على ثبات الحلقة؛ تمت تجرية الطفرة ل . 5 يُظهر وجود ‎D‏ عند هذه الوحدة البنائية تعرضًا لتحلل البروتين عالي. في بعض الأنواع تم استبدالها ب 5؛ وحدة بنائية ‎AST‏ تكرارًا في سلالة جرثومية بشرية عند هذا الموضع. يتم توقع 0 هذا لتحسين الثبات. ‎:DT70A‏ تشتمل نا على تحلل للبروتين محتمل؛ لذا تمت تجرية طفرة ل . ‎:KT4R‏ يبدو أن ‎R‏ تثبت الحلقة مقارنة ب >ا عند هذا الموضع, لذا تمت تجرية طفرة منعكسة ل ‎.R‏ ‏الأسس المنطقية لاختيار المواضع الموضحة في جدولي 9 و10 في المنطقة المتغيرة بالسلسلة ‎ALE 5‏ كمواضع مرشحة للاستبدال تكون كالتالي. ‎:G42E‏ تقوم ‎E‏ بتفاعلات أيونية مع ‎R‏ عند الموضع 44. لاستبعاد أي تأثير قد يكون لهذه التفاعلات؛ تم اختبار طفرة منعكسة ل ‎AE‏ بعض الأنواع. 47//: تمثل هذه وحدة بنائية لسطح بيني؛ نمطيًا //ا. في السلسلة الثقيلة ل 905 فأري؛ تكون عبارة عن اء بينما في إطار المستقبل البشري يوجد //ا عند هذا الموضع. بالرغم من أن ‎WL‏ ‏0 تكونا كلاهما غير قطبتين» ستؤثر الحلقة الفينولية فى ‎W‏ على حشو السلسلة الخفيفة:السلسلة الثقيلة. تم تضمين //ا وا في أنواع منفصلة. ‎:I69F‏ تمثل وحدة بنائية من نوع فيرنييه» جزءِ من أساس 00]4-112. ‎Gg‏ لنموذج التجانس» تؤدي الحلقة العطرية ل ] في المتواليات الفأرية إلى رصة دائرية مع الحلقة العطرية للوحدة البنائية
‎.CRD-H2 9‏ تقوم وحدة بنائية | عند هذا الموضع بتوزيع تلك الرصة. تم تضمين ‎Fol‏ ‏فى أنواع منفصلة. 85: تكون ألا عند هذا الموضع نادرة للغاية في الإطارات البشرية. يعتبر الأكثر شيوعًا هما ‎.N STA‏ قد يؤدي تغيير الوحدة البنائية إلى 5 الأكثر شيوعًا إلى تقليل ‎lg‏ المناعة التي قد تكون مصاحبة ل ‎M‏ النادرة عند هذا الموضع. اعتمادًا على الملاحظات الخاصة بالنموذج؛ هناك إمكانية
أن تتفاعل ‎M‏ مع 160/80 التي تعتبر وحدة بنائية لنطاق فيرنييه. تم تضمين اا و5 في أنواع ‎x‏ منفصلة.
‎:S82(b)L‏ توجد 5 عند هذا الموضع في كل من متواليات الإطار الفأري والبشري؛ ولكن 5 عند هذا الموضع تكون أقل تكرارًا. عند الحكم من الموضع حيث تتواجد هذه الوحدة البنائية في
‏0 النموذج؛ يكون من المحتمل أن تتلامس مع مولد الضد. تكون الوحدات البنائية في منطقة الإطار 3 الخاصة بالسلسلة الثقيلة معروفة بأنها تُسهم ‎Glial‏ في اتجاه الريط. تم تضمين 5 وا في أنواع
‏ا1108: ا تعتبر الوحدة البنائية الأكثر تكرارًا في الإطارات البشرية عند هذا الموضع؛ لذا تمت تجربة ‎(SL‏ بعض الأنواع.
‏15 لأنه تم استخدام اثنين من إطارات المستقبل البشري ‎AAX82494.15 BACO2114)‏ (المتواليات رقمي: 3 و4)) لإجراء توافق مع البشر للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة ل ‎ODS‏ توجد مواضع إطار معينة بها أحماض أمينية مختلفة في الاثنين من إطارات المستقبل. يمكن أن تتضمن الأنواع المتوافقة مع البشر من المنطقة المتغيرة بالسلسلة ‎J ALE‏ 9005 أي حمض أميني عند هذه الوحدات البنائية. تتضمن أمثلة على الوحدات البنائية حيث يختلف هذان المستقبلان المواضع
‎)١ 51S) 77 «(A ‏ار‎ 5( H49 (R sl G) 44 (T 4 A) H40 «(K ‏أر‎ © 119 0 ‏بواسطة ترقيم‎ (M51 V) H89 45 ((S ‏أو‎ A) H84 «(K ‏أو‎ R) H83 «(S ‏أو‎ N) H82a ‏تكون الأسس المنطقية لاختيار حمض أميني واحد أو آخر عند هذه المواضع كالتالي.‎ Kabat
‎R) 9‏ أو »ا): توجد ‎R‏ وكا في الإطارين المعتبرين؛ لذا تمت تجربة كل وحدة ‎Aly‏ في أنواع
‎A) 0‏ أو 1): توجد ‎A‏ و1 في الإطارين المعتبرين؛ لذا تمت تجرية كل وحدة بنائية في أنواع ‎x‏ منفصلة. 4 (6 أو ): توجد ‎AR 5G‏ الإطارين المعتبرين؛ لذا تمت تجربة كل وحدة ‎Aly‏ في أنواع 149 (5 أو 8): تعتبر وحدة بنائية من نوع فيرنييه تقوم بالحشو تحت ‎.CDR-H2‏ في المتوالية الفأرية؛ تكون ‎Ble‏ عن ‎A‏ يمكن أن يؤدي الاختلاف الطفيف في الحجم والطبيعة الآلفة للماء الخاصتين ب 5 على نحو محتمل إلى حدوث اضطراب في أساس ‎CDR‏ تضمين 5 وظ في 7 (5 أو 1): توجد 5 و1 في الاثنين من إطارات المستقبل البشري المعتبرة؛ لذا تمت تجرية 0 كل في أنواع منفصلة. ‎N) 8‏ أو 5): تكون ‎١!‏ عند هذا الموضع أقل تكرارًا بشكل كبير من 5. علاوة على ذلك؛ تبدو 5 مساهمة في الارتباط بمولد الضد. تمت تجرية الطفرة ل 5 في بعض الأنواع. ‎IR) 53‏ كا): تكون >ا في منطقة الإطار 3 أقرب إلى المساحة السطحية لارتبط ‎.CDR‏ قد يؤدي استبدالها ب > التي تكون أكثر كتلة من >ا؛ إلى إعاقة وضع مولد الضد. ‎Roa‏ هي 5 الأكثر تكرارًا وتعتبر >ا هي الثالثة في التكرار في الإطارات البشرية عند هذا الموضع. تم تضمين ‎R‏ وها في أنواع منفصلة. ‎SIA) 4‏ 5): توجد 5 وه في الإطارين المعتبرين؛ لذا تمت تجربة كل وحدة ‎Aly‏ في أنواع ‎V) 9‏ أو /1): توجد ‎(EMV‏ الإطارين المعتبرين» لذا تمت تجرية ‎JS‏ في أنواع منفصلة. تكون الخمس من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر والخمس من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر كالتالي: النوع 1 من ‎HUODSVL‏ (استبدال )736 بالأحرف الصغيرة):
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSKSLLHSNGNTYLYW{LQKPGQSPQLLIYRV
SNLASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTKLE
IK
(1 9: ‏(المتوالية رقم‎ النوع 2 من 95/1 (بدون مجموعات الاستبدال) : ‎DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSKSLLHSNGNTYLYWYLQKPGQSPQLLIYR‏ ‎VSNLASGVPDRESGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTK‏
LEIK
(20 : ‏(المتوالية رقم‎ 0 النوع 3 من ‎HUODSVL‏ (استبدال 0605 بالأحرف الصغيرة): ‎DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSKSLLHSNGNTYLYWYLQKPGQSPQLLIYR‏ ‎VSNLASGVPsRFESGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTKL‏
EIK
(21 ‏(المتوالية رقم:‎ «K39R 36 (A19V (LOP (P8A ‏الاستبدال‎ ile gana) Hu9D5VL ‏النوع 4 من‎ 15 ‏بالأحرف الصغيرة):‎ K74R ‏70ل‎ D60S
DIVMTQSapSLPVTPGEPvSISCRSSKSLLHSNGNTYLYWI{LQrPGQSPQLLIYRVS
NLASGVPsRESGSGSGTaFTLrIISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTKLEIK (22 : ‏(المتوالية رقم‎
JY36F (A19V 01865 ‏طعا‎ (PSA ‏النوع 5 من 95/1 (مجموعات الاستبدال‎ 20 ‏بالأحرف الصغيرة):‎ K74R «DT70A D60S (K39R
DIVMTQSapSLPVTPGEsvSISCRSSKSLLHSNGNTYLYWI({LQrPGQSPQLLIYRVS
NLASGVPsRESGSGSGTaFTLrISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTKLEIK (23 : ‏(المتوالية رقم‎ 5 النوع 1 من ‎HUIDSVH‏ (مجموعات الاستبدال 471//ا» ‎M82S 5 (I69F‏ بالأحرف الصغيرة):
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYTMSW VRQAPGKGLEIVAEISNS
GDTTYYPDTVKGRFTfSRDNAKNSLYLQsNSLKAEDTAVYYCARHYYYGGGY
GGWFFDVWGQGTTVTVSS
(5 H ‏(المتوالية رقم‎
S82(b)L 5 ‏(مجموعات الاستبدال ا0/47 697ل 1825ل‎ HUODSVH ‏النوع 2 من‎ 5 : ‏بالأحرف الصغيرة)‎
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYTMSWVRQAPGKGLEIVAEISNS
GDTTYYPDTVKGRFTfSRDNAKNSLYLQsNILRAEDTAVYYCARHYYYGGGYG
GWFFDVWGQGTTVTVSS
(6 H ‏(المتوالية رقم‎ 1 0 ‏وا1108 بالأحرف‎ 10/471 (G42E ‏من 109051/11! (مجموعات الاستبدال‎ 2b ‏النوع‎ ‎: ‏الصغيرة)‎ ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSW VRQTPeKRLEIVAEISNSG
DTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYYCARHYYYGGGYG
GWFFDVWGQGTIVTVSS 5 (7 H ‏(المتوالية رقم‎ ‏بالأحرف‎ S82(b)L 5 (MB2S ١6957 ‏(مجموعات الاستبدال‎ HUIDSVH ‏النوع 3 من‎ : ‏الصغيرة)‎ ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYTMSWVRQAPGKGLEW VSEISN
SGDTTYYPDTVKGRFTfSRDNAKNSLYLQsNILRAEDTAVYYCARHYYYGGGY 0
GGWFFDVWGQGTTVTVSS
(8 H ‏(المتوالية رقم‎ ‏من 109051/11! (مجموعتي الاستبدال ا47//ا و ا1108 بالأحرف الصغيرة):‎ 3b ‏النوع‎ ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSWVRQTPGKRLEIVAEISNS ‎GDTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYYCARHYYYGGGY 5
GGWFFDVWGQGTIVTVSS
(المتوالية رقم ‎H‏ 9 النوع 4 من ‎HUODSVH‏ (مجموعتي الاستبدال 1/1825 وا(582)0 بالأحرف الصغيرة): ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYTMSWVRQAPGKGLEW VSEISN‏ ‎SGDTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNSLYLQsNILRAEDTAVYYCARHYYYGGGY‏ ‎GGWFFDVWGQGTTVTVSS 5‏ (المتوالية رقم : 0 1( النوع ‎4b‏ من 109051/11! (مجموعتي الاستبدال ا47//ا و ا1108 بالأحرف الصغيرة): ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSW VRQAPGKRLEIVAEISNS‏ ‎GDTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYYCARHY YYGGGY‏ ‎GGWFFDVWGQGTIVTVSS 0‏ (المتوالية رقم : 11 ( النوع 5 من 109051/11! (مجموعات الاستبدال ‎(WATL (G42E‏ وا(582)5 بالأحرف الصغيرة) : ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYTMSW VRQTPeKRLEIVAEISNSG‏ ‎DTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNILRAEDTAVYYCARHYYYGGGYG 5‏ ‎GWFFDVWGQGTTVTVSS‏ ‏(المتوالية رقم :2 1( أظهر تحليل جودة البروتين مع عمليات تحليل إمكانية التكدس عدم وجود مجموعات من الوحدات البنائية المعرضة للتكدس الموجودة في مناطق الإطار أو ‎CDRs‏ السلسلة الخفيفة أو السلسلة 0 الثقيلة ل )2009 ,1)3(:254-267 ‎(Wang et al., mAbs‏ 905. مثال 8. تحليل حركية الارتباط للأجسام المضادة 905 المتوافقة مع البشر تم تمييز حركيات الارتباط الخاصة بارتباط كل الصور المغايرة من 905 المتوافق مع البشرء الفأري ؛ و9005 الخيمري ب ‎TTR F8TM/LI10M‏ البشري لناتج ‎sage‏ الاتحاد الجيني بواسطة ‎(Biacore‏ كما هو معروض في جدول 12. تم تثبيت المضاد للبشر ‎(GE‏ ‎Healthcare) 5‏ على رقاقة مستشعر 65 (تفتقر إلى سلاسل دكستران) عبر إقران الأمين بإتباع
التعليمات المتوفرة في الطقم المضاد للبشر ‎«GE Healthcare‏ وتم احتجاز ‎mAbs‏ وصولاً إلى مستوى لضمان أقصى ارتباط لناتج تحليل ‎RU‏ 30-50. تم تمرير تركيزات متنوعة لناتج التحليل ‎TTR F8TM/L110M)‏ البشري لناتج ‎sage‏ الاتحاد الجيني) على المركب الترابطي المحتجز عند 0 ميكرو لتر/دقيقة في المحلول المنظم المُستخدم في التجرية ‎HBS)‏ + 960.05 0-20 1 مجم/ملليلتر ‎(BSA‏ في عملية تخفيف 3 مرات . لكل تركيز استمر ‎Je lal)‏ لإطار زمني يسمح بوصول تركيزات ناتج تحليل أعلى إلى التوازن أثناء الترابطء إضافة إلى تضاؤل على الأقل 9610 من الإشارة أثناء الانفصال. تم استخدام تركيز واحد على الأقل (ليس الأعلى أو الأقل) مرتين. تم اختيار نطاقات التركيز الخاصة بناتج التحليل اعتمادًا على ‎Lyall‏ التمهيدية لتشمل قيمة من على الأقل 10 مرات أعلى من ‎KD‏ إلى 10 مرات أقل من ‎KD‏ 0 جدول 12 يُلخص معدل الترابط ‎(ka) Biacore‏ معدل الانفصال ‎dissociation rate‏ (0»)؛ وثابت ألفة الارتباط ‎(KD) binding affinity constant‏ للصور المغايرة الفأرية 6 :»؛ الخيمرية؛ والمتوافقة مع البشر من 905 ل ‎TTR FSTM/L110M‏ البشري لناتج عودة الاتحاد الجيني. جدول 12 ألفة ارتباط ‎alge‏ الضد الخاص بالأجسام المضادة 95 ب7118 بشري ‎(F87TM/L110M)‏ 31.55 826-081 93E-04.4 T2E+04.2 47.05| 35E-091 SOE-04.3 SOE-+05.2 84E-09.6 85E-04.7 ISE+05.1 1109105 H2L5 54.93 32E-09.4 57E-04.6 52E+04.1 1109105 H3L1 43.91 09E-09.2 33E-04.5 54E+05.2 Hu9DS5 H4L1
TTR-F8TM/L110M 1 ‏توضح هذه النتائج أنه قد طرأ تحسن طفيف على ألفة 905 الفأري‎
‎(1.82E-08M = KD)‏ في الصورة المغايرة الخيمرية من 905 ‎(1.35E-09M = KD)‏ علاوة على ذلك؛ يكون لكل الصور المغايرة من 905 المتوافق بشكل تام مع البشر نفس قيم الألفة في نطاق النانو مولار المتخفض. يكون لذ ‎HUODS HALL‏ الألفة الأقوى ‎(2.09E-09= KD)‏ للصور المغايرة التي تم اختبارها من 9105 المتوافق مع البشر. مثال 9. تصميم الأجسام المضادة 1468 المتوافقة مع البشر تمثلت نقطة البدء أو الجسم المضاد الواهب للتوافق مع البشر في الجسم المضاد الخاص بالفأر 8. يتم توفير متوالية الحمض الأميني للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الخاصة ب 011468 ناضج باعتبارها المتوالية رقم: 61. يتم توفير متوالية الحمض الأميني للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الخاصة ب 0014658 ‎mali‏ باعتبارها المتوالية رقم: 70. يتم توفير متواليات الحمض 0 الأميني للسلسلة الثقيلة 001 ‎«CDR2‏ و0043 باعتبارها المتواليات أرقام: 69-67؛ على التوالي ‎WS)‏ هو محدد بواسطة 68681)). يتم توفير ‎CDR-H1‏ من نوع ‎Chothia-Kabat‏ ‏مركب باعتبارها المتوالية رقم: 118. يتم توفير متواليات الحمض الأميني للسلسلة الخفيفة ‎«CDR2 (CDR1‏ و0043 باعتبارها المتواليات أرقام: 79-7 على التوالي ‎WS)‏ هو محدد بواسطة ‎(Kabat‏ يتم توفير صورة مغايرة من 01041 باعتبارها المتوالية رقم: 80. يتم استخدام 5 ترقيم ‎Kabat‏ خلال هذا المثال. تنتمي كابا للمنطقة المتغيرة ‎(VK)‏ الخاصة ب 001468 إلى المجموعة الفرعية 2 ‎Kabat‏ لفأر؛ التي تناظر المجموعة الفرعية 2 ‎Kabat‏ البشرية. تنتمي السلسلة الثقيلة للمنطقة المتغيرة ‎(Vh)‏ ‏الخاصة ب 001468 إلى المجموعة الفرعية ‎«ll Kabat 3d‏ التي تناظر المجموعة الفرعية ‎.Kabat 1‏ انظر ‎Kabat et al.
Sequences of Proteins of Immunological‏ ‎Interest, Fifth Edition.
NIH Publication No. 91-3242, 1991 20‏ تنتمي ‎CDR-L1‏ ‏المكونة من 16وحدة بنائية إلى الفئة القياسية 3؛ تنتمي ‎CDR-L2‏ المكونة من 7 وحدات بنائية إلى الفئة القياسية 1؛ وتنتمي 608-13 المكونة من 9 وحدات بنائية إلى الفئة القياسية 1 في ‎.Martin & Thornton, J.
Mol.
Biol. 263:800-15, 1996 kil .Vk‏ تنتمي ‎CDR-‏ ‏1 من نوع ‎Chothia—-Kabat‏ المركب المكونة من 10 وحدات بنائية إلى الفئة القياسية 1؛ 5 وتنتمي 004-112 المكونة من 17 وحدة بنائية إلى الفئة القياسية 1. انظر 8 ‎Martin‏
‎J Mol.
Biol. 263:800-15 1996‏ ,10000100. لا تشتمل ‎CDR-H3‏ على أية فئات قياسية؛ ولكن من المحتمل أن يكون للحلقة المكونة من 15 وحدة بنائية قاعدة ملتوية ‎Gg‏ لقواعد
‎.Shirai et al., FEBS Lett. 455:188-97 (1999)‏ تكون الوحدات البنائية عند السطح البيني فيما بين نطاقي ‎VH VK‏ هي تلك التي توجد على
‏5 نحو شائع ‎Lad‏ عدا 47ا؛ عند هذا الموضع ‎Bale‏ ما يكون الحمض الأميني الرئيسي هو /0ا.
‏تم إجراء بحث على متواليات البروتين في قاعدة البيانات ‎Deshpande et al., ) PDB‏ ‎(Nucleic Acids Res. 33: 0233-7, 5‏ لإيجاد البنى التي توفر نموذج بنية خشنة ل 8. تم استخدام البنية البلورية الخاصة ب 85 بنشاط إستراز ‎(pdb IMJU)‏ باعتبارها النموذج للبنية ‎VK‏ تم تحليلها عند دقة وضوح تبلغ 1.22 ‎A‏ وتحتوي على نفس البنى القياسية ل
‎«CDR-H2, CDR-H1 0‏ وتحتوي أيضًا على نفس الطول ل ‎CDR-H3‏ مع قاعدة ملتوية. تم استخدام شظية 77 2 لجسم مضاد © أكسيداز مضاد للسيتوكروم (كود ‎(pdb IMQK H‏ للبنية ‎WH‏ يكون لها دقة وضوح تبلغ 1.28 ‎A‏ وتحافظ على نفس البنية القياسية للحلقات ‎Jie‏ ‏8. تم استخدام برنامج ‎BioLuminate‏ (المرخص من ‎(Schrodinger Inc.‏ لوضع نموذج لبنية خشنة ل 1468.
‏15 سمح بحث خاص بقاعدة بيانات متوالية البروتين غير المسهبة من ‎NCBI‏ باختيار إطارات بشرية ملائمة يتم فيها تطعيم ‎CDRs‏ الفأرية. ل ‎Vh‏ تم اختيار السلاسل الثقيلة ل ‎1g‏ البشري بأكواد الوصول ل ‎NCBI‏ أرقام ‎AAD30410.1‏ و00482494.1. وهي تشترك في الصور القياسية الخاصة ب ‎(H2 5 1468 CDR-H1‏ وتكون ‎H3‏ ل ‎AAD30410.1‏ بطول 15 وحدة بنائية بقاعدة ملتوية ‎Lite‏ بها. ل ‎VK‏ تم اختيار الاثنتين من السلاسل الخفيفة ‎LIS‏ بأكواد الوصول ل
‎NCBI 0‏ أرقام ‎ABAT1374.1‏ و5066952.1م. يكون لها الفئات القياسية ل ‎LCDRs‏ ‏تم تكوين ثلاث من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر وثلاث من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر محتوية على تباديل مختلفة من مجموعات الاستبدال ‎HUITAGBVHVI-3)‏ (المتواليات أرقام: 66-64؛ على التوالي) ‎HU14G8VLV1-3‏ (المتواليات أرقام: 76-74؛ على التوالي)) (جدولي 13 و14). يتم عرض
تصميمي ‎Vh‏ و6ا/ا المتوافقين مع البشر التوضيحيين»؛ بالطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى اعتمادًا على الإطارات البشرية المختارة؛ فى جدولى 13 و14؛ على التوالى. تشير المساحات المظللة الرمادية فى العمود الأول فى جدولى 13 و14 إلى ‎CDRs‏ كما هو محدد بواسطة ‎«Chothia‏ وتشير المساحات المظللة الرمادية فى الأعمدة المتبقية فى جدولى 13 و14 إلى ‎CDRs 5‏ كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ تحتوي المتواليات أرقام: 66-4 و76-74 على الطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى كما هو معروض في جدول 15. يتم إدراج الأحماض الأمينية عند المواضع 111 13 ‎<«L8 1105 ¢H47‏ ق9آء ‎L705 160 136 «L26 <L19‏ في 1101408171113 و11:146817711-3 في جدولي 16 و17. جدول 13 مناطق 1/09 ل 1468 المتوافق مع البشر ‎T N‏ ب 3 ب 3 ب ك0 ص 222[ 255 4ج 4 جا ‎iQ‏ 0 م ين ا ب 0 26 . ‎١ 5 = = =‏ + 9 > > > ‎S J J J‏ > | 0 - 3 دا 0 ‎O O‏ — 4 4 4 1 - إن ‎pS‏ ++ ++ ب ب لدبا ‎١ © 5‏ 3 = اج 8 5 5 5 2 3 = ا ‎dK‏ > = = = 2 كا | 2 4 7 ج31 ج 4 3 3 ‎a 0‏ )= > ع > 2 2 و ‎T 7‏ | داه دا 7+ ‎J J‏ ‎an) 4‏ . ا .. ‎T‏ 3 3 3 م 4+ ‎Ks Ks Ks‏ ‎\O‏ ~ 8 © | 8 | 8 نم نت أن نا نر نكن نه ان ‎BERR EEE EE‏
13 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 1468 المتوافق مع البشر‎ 2 2 ‏ا اخ »ا جا‎ 7 +7 .ّ 0 .ّ ‏و ب‎ hr a a a > > > pa ‏ب‎ - 9 _ — —
O O Q - 0 9 2 3) J 3 J < +4 <r < = = 1 ‏ب‎ — — + > |¥ < = 1 — 5 5 Q 19 = 2 © ©
T T T ‏ب 3 ا‎ 3 Ps 3 ‏وص وص وص‎ 4 4 — + © ° 4 4 4 FE 3 F| 3 Q | ‏كا‎ 2 ‏د داع - = بكم و‎ =} a 0
INF ١ FE oak ‏م | 1 3 اه‎ _ _ _ T .. ‏ا‎ . san) 4 4 4 4 NU ‏ص‎ 1 ~ \O 5 |e | © ©
جدول 13 مناطق 1/9 ل 1468 المتوافق مع البشر + | © | 5ه : + ]= ‎Ss J 1d‏ ب 4 | 07 5 | 2 قا 4 | 2 | 2 ‎hi hi hi‏ . = 2ه 2 > > > ‎O O Q - 0 9 2 3) J 3 J‏ 1 1 = و 3 ++ ++ 3 3 3 © ب : + |= 25 8 5 5 5 ‎Ps ' o I=‏ 3 ب 3 ا ‎T T T‏ ° © + — 4 4 _— _— _— 2 كا | ‎FE 3 F| 3 Q‏ 4 4 4 ‎a 0‏ }= ف > ؟؛ > = = و ‎E a 2 2| 1 =‏ 3 3 3 + ا 2 < ++ 0 2 ‎O —‏ ب ‎|e | © ©‏ 5 كك أن نا أ ف ا
13 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 1468 المتوافق مع البشر‎ ‏[ا ىه [ا 5 ه‎ | + 3 | + | +
HEE 4343505 17 1 1 <I 4 — — — 00 00 00 i 2 i = 2 ِ 23 23 23 3) ‏>[ؤ] 3023 ؟ ؟9‎ "9 | 3 ١ — — — I ‏إن > ا‎ = 1 : |: [2 BER 23 1 3 |g ‏اص اص اص‎ < ES < ES ‏اص‎ 4 © =
El 3 4 I FI = ES 2D 7 8 = 3 5 5 =) Tt aD Oo
J J J 2 a 2 = 3 1 = 4 4 4 ‏.ع ع‎ 4 5 | 8 | © 0
13 ‏جدول‎ ‏المتوافق مع البشر‎ 1468 1Vh ‏مناطق‎ ‎< = 1 — [3 = L : 7 7 7 + | 2 ‏ا 0027 تا فا 4 ةا‎ | 4 > > > 2 2) 5 = = =
O O Q - 0 9 2 3) J 3 J < +4 <r x IZ (١ = = 1 5 55 #8 LB | ++ : ‏بد‎ © = —_ [0] ‏مف‎ ‎T T T ‏ل ب ا‎ : o I= ‏وص اص اص‎ ES ES = E © = ١ Tr = + ES Pa x Q 1033 ‏ج‎ 7 7 3 2 | 2 ic I | EE ‏ا‎ 7 | 2 2 ~ ~ T ST . Pa 4 4 4 - ‏ب‎ 1 ‏ب‎ O — 5 | 8 | © © ‏اك اا ا ات ات ا‎
13 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 1468 المتوافق مع البشر‎ = ‏[ا‎ 1] =] + 0 3 3 3
T T >< 4d gE S| 2 ho 4 4 4 > > > 2 ‏2ه‎ = . hi hi hi
O O Q - 0 9 2 3) J 3 J 3 3 3 ++ ++ 3 ‏و‎ = 1 1 5 5 5 8 25 =| + : ‏ب‎ ©
T T T ‏ب 3 ا‎ 3 Ps ' o I= —_ —_ —_ 4 4 — + © ° 4 4 4 FE 3 F| 3 Q | ‏كا‎ 2 ‏نت = }= ىا > كع > = ب و‎
JF JF JF 5 Qs ‏له‎ 3 a) _ _ _ T .. ‏ا‎ . san) 4
KS 4 4 NJ on 1 5 |e | © © ay seen mom) ® gy gq ‏ان‎ um ou] m qh x qs wesw wm 8 * qh mq q wesw wm Em a ‏كل‎ oy ‏لاس‎ BB ge 58 8 som wm 8 [a] oy os] 5] oes wm mW
Bl =| gq] qe yew wm m| m ay yen mon) ® x x yy yen mm =m ‏أ سسا‎ xq qx] yesm ww =
جدول 13 مناطق 1/0 ل 1468 المتوافق مع البشر 7+ 7 ا اخ »ا جا 2 2 ‎hr a a a‏ و ب ّ. 0 ّ. — — _ 9 - ب ‎pa‏ > > > ‎O O Q - 0 9 2 3) J 3 J‏ ‎<r < = = 1‏ 4+ < — 1 = < ¥| > + — — ب ‎Q 19 = 2 © ©‏ 5 5 5 ‎Ps 3‏ 3 ب 3 ا ‎T T T‏ ° © + — 4 4 وص وص وص 2 كا | ‎FE 3 F| 3 Q‏ 4 4 4 ‎a 0‏ }= د داع - = بكم و م | 1 3 اه ‎INF ١ FE oak‏ ‎san) 4‏ . ا .. ‎T‏ _ _ _ 1 ص ‎NU‏ 4 4 4 ‎\O‏ ~ ‎|e | © ©‏ 5 = كه »8 ‎dew‏ | 8 8 8#" 4 نتن تن م 0 نا نم نس ‎EERE EEE‏
13 ‏جدول‎ ‏المتوافق مع البشر‎ 1468 1Vh ‏مناطق‎ ‎5 > 1 — [1 — L : “dy “dy “dy + | 2 | 2 4 $d 23> ‏ا‎ 14 | 14 > > > <r ‏ل 9 © ب‎ _
S |S |S DL | A 5 ‏ا‎ 5 5 So LE Z| 3 : + ©
T T I 2 312 5| 2 : 3 f=
F F F T 3, T EY 4 2 ‏ب‎ J 3 3 3 Ss Is 4| 1 - O 3 3 3 E 2 E 2 3 4 Q 4 4 4 ‏.ع ع‎ 4 ‏ب‎ O — 5 | 8 | © 0 ‏نا نم نا‎ EERE ‏هت نت‎ ‏ل ا‎ EEE
جدول 13 مناطق ‎1Vh‏ 1468 المتوافق مع البشر ‎L a “dy “dy “dy‏ يب | 3[ — ‎Ne = i‏ ‎T T >< 4d gE S| 2 w 4 4 4‏ _ _ ل 9 ص ب له > > > ‎O O Q - 0 9 2 3) J 3 J‏ 3 3 م ‎I‏ 4 4 4 - = < ¥| > + — ب — 8 © 4 5 = 8|~= 8 5 5 5 ‎I I I : Oo c‏ ‎ES < ES — : 2‏ < = = = 2 كا | ‎FE 3 F| 3 Q‏ 4 4 4 ‎wm > =} a 0‏ > = بكم و 2 3 ا ‎Ea‏ | 77 4 .ع ع 4 4 4 © © | 8 | 5 كاتنت 0ه أ أ ا لت تم م 0 أ ا أ وى ات تتم م ‎EEE‏ ‏وان نت تم ننم نا أنه أن نا نس
13 ‏جدول‎ ‏ل 1468 المتوافق مع البشر‎ Vh ‏مناطق‎ ‎2 2 ‏ا اخ »ا جا‎ 7 +7 . 26 0 ‏تت 10 م ين اب ب‎ > > > 2 a a = = =
O O Q - 0 9 2 3) J 3 J <r <r <r >< — — — — ‏ب‎ — — + > |¥ < = 1 — > > 8 =|8 = 3 © 8
I I I < ES < ES = i eo) a —_ —_ —_ 4 4 — + © ° 4 4 4 FE 3 F| 3 Q | ‏كا‎ 2 ‏د داع - = بكم و‎ =} a 0 3 3 TE QE | A + | ‏م‎ ‎_ _ _ T .. | 0 ‏اك‎ 4 4 4 4 NU on 1 ~ \O 8 |8 | 8 8
BREE ‏سم لت قن ان نا‎ ‏سن م قن ا ا أ أ ا ا أ‎ fd He] ee ee mo] oa]
TR marae
Le of] ‏تت‎ ml Te 8] #8 #8 x] «| slows | fe ol 5 8 ‏ا‎ a] ‏ع‎ 104] 100] 100
13 ‏جدول‎ ‏مناطق 1/0 ل 1468 المتوافق مع البشر‎ 8 > ‏[ا- [ا‎ =] Z 0 3 3 3 + | 2 ‏فاج 4 ةا‎ 23> |& 141 | 4 | 4 > > > 9 | 9 = = z
O O Q - 0 9 2 3) J 3 J ‏لها لها‎ 3 3+ + < - = 1 1 5 5 8 25 =| + : ‏ب‎ ©
T T T ‏ا‎ 1 3 Pu : ps < = = = 3 +d = ¥ © re} 4 4 4 FE 3 F| 3 Q | ‏كا‎ 2 le ‏ىد > > = و‎ =} oD 0
Ex Ex Ex 2 = 2 ‏لات‎ 3 1 Q 4 4 4 ‏.ع ع‎ 4 ‏ب‎ O — eS | 8 | © =) sl 5] sl x] a] clemis 1] al a
EEE ‏عسات‎ ‏ساس رس لاسا أن‎ RE ‏ل"‎ " " - | vem 109 100E| 1008
EE ‏ع عن انيد‎
En ‏اا 0ا ثلا‎ ‏ا و ل ل‎ eel wl ww
13 ‏جدول‎ ‏المتوافق مع البشر‎ 1468 1Vh ‏مناطق‎ ‎5 > 1 — [1 — L : 7 7 7 2 | 2 | 4 ‏قا‎ 2 | 5 07 | 4 > > > 2 ‏م م م 2 = 2ه‎ 0 0 Q - 0 9 2 3) J 3 J < +4 <r < = = 1 — — ‏ب 0 29 <> + < ++ لها‎ 5 5 Q = |Q =~ R © ©
T T T 2 2 0 4 . o c —_ —_ —_ < ES < ES fom} + © = 4 4 4 FE 3 F| 3 Q | ‏كا‎ 2 = = = > ‏ىا > كع‎ = oD ‏نت‎ ‎3 3 3 E 2 E 2 3 4 Q 2 0 ++ < 2 ‏ا‎ + © + = | = © © © © 14 ‏جدول‎
‏ل 14658 المتوافق مع البشر‎ Vk ‏مناطق‎ ‎or ‏ل ب \ ب \ ب‎ 0 > > 3 ‏ا‎ ald FS i 7 | 4 | 7 > > > JS 3 ‏ا 3 ا‎ = = cz 2k BE s|8 |g [22 83 < < = © 900 FI 5 + J J — — — * > [B® < | i 2 ‏ب‎ ‎25 | 2 02 [8 £8 =| 4 ‏؟‎ | © = = = < ES < ES = ‏ك بٍِ عله‎
ES ES ES ‏ال‎ Flu HF ES Ja XY 2 ‏ب ب ب‎ > J > 3 ‏سيم‎ 4 7 © 3+ Ex J 5 ‏مانن = داه‎ 2 3 3 3 I Rag .e wap) ‏مان‎ ‎KE 4 4 ‏ان ب‎ x \O ‏ما‎ <t Li ‏اجا‎ o
Li Li Li Li
14 ‏جدول‎ ‏ل 14658 المتوافق مع البشر‎ Vk ‏مناطق‎ ‎= 1] = 1] =] 2 0 3 3 3 > > 3535 4 ald S| 2 ‏لا‎ 4 4 4 > > > ٠ ‏م 3 ا‎ ١ To = = = © |e 2 kk Be S(8 |x | 232 |3 ‏امج 9 7 = الا الا‎ - Oo + 3 3 5 SOB BA : ‏ب‎ ‎2 4 2 8 8 =| @ 4 5 o = = = < ES < ES = a < £
ES ES ES 4 Flu FH ES Pa X 2 i. = ‏ا 5 هه‎ FD ‏ه‎ Py 5 ‏ل‎ 3+ Ex 5 ‏5اه‎ 7 4 ~ a) a) a) I 1 I .e oq ‏ك4‎ ‎KS KS KS 2 ‏وه‎ ‎\O ‏اجا ا ما‎ o ‏ا ا ا ا‎
14 ‏جدول‎ ‏لذ 1468 المتوافق مع البشر‎ Vk ‏مناطق‎ ‏هه‎ = i — 3 — < 0 “4 7 7 2 2 5 ld ald + | 2 LL 1 4 1 > 2 ‏2ج‎ D828 ee | ‏ا ا قا د‎ cle le kg 2 58 |g |3 03 |3 ‏امج 9 7 = الا الا‎ - Oo + J J 5 59 ‏؟‎ LB LR : = pe
T 4 2 18 28 =| @ 4 5 o = = = < ES < ES = a < £
ES ES ES 4 Flu FH ES Pa X 2 front front front > J > 3 prom 4 7 © ‏ل‎ 3+ Ex 5-5 DEQ 3 i a) a) a) I 1 I .e oq ‏ك4‎ ‎KS KS KS 2 ‏وه‎ ‎\O ‏ما‎ <t La ‏اجا‎ o
La La La La
14 ‏جدول‎ ‏لذ 1468 المتوافق مع البشر‎ Vk ‏مناطق‎ ‏نب‎ = i — 3 — <! . “4 7 7 2 2 5 ‏ا‎ dd S| 2 LL 1 1 1 > > > ٠ ‏م 3 ا‎ ١ To = = = cle lz kd s|8 |g | 32 83 ‏امج 9 7 = الا الا‎ - Oo + J J 5 59 ‏؟‎ LB LR : = - z 2 2 8 8 =| @ 4 5 o = = = < ES < ES = a < £ 1213833 2 5 ‏ا‎ ‎front front front > J > J prom 4 7 © ‏ل‎ 3+ Ex 5-5 DEQ 3 i a) a) a) I 1 I .e oq ‏ك4‎ ‎KS KS KS cv \O ‏ما‎ <t La ‏اجا‎ o
La La La Cc ii
Gi
Gigi
EERE ‏ة ا ا‎ EEE
14 ‏جدول‎ ‏مناطق »ا/ا ل 1468 المتوافق مع البشر‎ ‏نب‎ = i — 3 — <! . 7 “dy “dy 2 2 5 ‏ا‎ dd S| 2 LL 1 1 1 > > > ٠ ‏م 3 ا‎ ١ To = = = cle |e kes 8 |g 3 03 83 ‏امج 9 7 = الا الا‎ - Oo + 3 3 5 SOB LB | A : ‏ب‎ ‎2 2 2 8 8 =| @ 4 5 o = = = < ES < ES = a < £
ES ES ES 4 Flu FH ES Pa X 2 front front front > J > 3 prom 4 0 7 © ‏ل‎ 3+ Ex 5-5 DEQ 3 A a) a) a) I 1 I .e oq ‏ك4‎ ‎KS KS KS cv \O ‏ما‎ <t Li ‏اجا‎ o
La La La La
14 ‏جدول‎ ‏ل 14658 المتوافق مع البشر‎ Vk ‏مناطق‎ ‎or ‏ل ب 3 ب 3 ب‎ 0 > > > ‏ا‎ ald 31 3 oo 71 7 | 7 > > > ٠ ‏م 3 ا‎ ١ To = = = > le |x gw Ee 28 |x |Z 33 ‏امج 9 7 = الا الا‎ - Oo + J J 5 5 ‏؟‎ LB LR : =
T # 2 18 28 =| @ 4 5 © = = = < ES < ES = a < £
ES ES ES 4 Flu FH ES Pa X 2 i. = ‏ا 5 هه‎ FD ‏ه‎ Py 5 ‏ل‎ 3+ Ex 5 ‏5اه‎ 7 4 ~ a) a) a) I 1 I .e oq ‏ك4‎ ‎KS KS KS 2 ‏وه‎ ‎\O ‏اجا ع ما‎ o ‏ا ا ا ا‎ vv] ‏لق‎ 8s ‏ف‎ ‎| 5] 3] 5] 7] 5) seen v yy vy ven qo ys 8 ven a a a a a sem
To] so] es) sem
جدول 14 مناطق ‎Vk‏ لذ 1468 المتوافق مع البشر 0 ل ب 3 ب 3 ب ‎or‏ ‎i 7 | 4 |‏ < ا+ ‎ld ald‏ > > > ‎١ To = = =‏ م 3 ا ‎٠‏ > > > ‎Q oc 3 3 3‏ نمم جا 9 ج ص ص ص ‎BSE EZ 58 ٠3 ٠3 |3‏ 9| ؟ ؟ - - 2 | ب * ‎og‏ * = = = ‎E E 2 8 28 =| 9 4 g ©‏ ‎ES < ES = a < £‏ < = = = ‎ES ES ES 4 Flu FH ES Pa X 2‏ ‎Py 5‏ ه ‎FD‏ ا 5 هه = ‎i.‏ ‎Ex 5 QE 7 4 ~‏ +3 ل ك4 ‎I SE .e sap)‏ 7 7 7 1 8 .ع 1 1 4 ‎o‏ اجا ‎<t La‏ ما ‎\O‏ ‎La La La La‏ ‎EEE‏ ا أ أ أ ا طن لتك أت أ ا أ أ أ أ ةا تن تك ا أ ا أ أ أ أ أ ‎EEE‏ ا أ أ أ أ أ ‎BEER‏
جدول 14 مناطق ‎Vk‏ ل 14658 المتوافق مع البشر 3 3 3 0 2 ]= ]1 = ]1 = 4 4 4 لا 2 ‎ald S|‏ 4 3535 > > ‎١ To = = =‏ م 3 ا ‎٠‏ > > > ‎|e 2 kk Be S(8 |x | 232 |3‏ © ‎Oo 3 3 3‏ - امج 9 7 = الا الا 17 |2 *2 * ذا ا > ‎o‏ 5 4 @ |= 8 8 2 4 2 ‎ES < ES = a < £‏ < = = = ‎ES ES ES 4 Flu FH ES Pa X 2‏ ‎Py 5‏ ه ‎FD‏ ا 5 هه = ‎i.‏ ‏~ 4 7 5اه 5 ‎Ex‏ +3 ل ك4 ‎a) a) a) I 1 I .e oq‏ وه 2 ‎KS KS KS‏ ‎o‏ اجا ا ما ‎\O‏ ‏ا ا ا ا لق أ أ ا ا أ أ ا أ تش اك تك أ أ أ أ زم أن ل تش تسد تك أ ا أ أ أ أ ةا تت تت تك ا ا ا أ ا أ ةا
14 ‏جدول‎ ‏المتوافق مع البشر‎ 1468 1 Vk ‏مناطق‎ ‎or ‏ل ب 3 ب 3 ب‎ 0
I ICR = EP ‏ذا < ا‎ I A 014 > | 2 | = S80 Be | | 2 | 2 * |” |= lt El 28 |< 3313 °c |g |g FEE E28 3 3# |3 — — — ++ ++ ‏اب الب زيف‎ 5 5 5 8 XB ‏ا‎ 4 = © = = =< ik 3] = ‏م‎ 8 c
ES ES ES 4 Flu FH ES Pa V4 2 front front front > J > 3 prom 4 7 © 3+ Ex J ‏داه 5د‎ ١ ‏مانن ل‎ ~ 1 1 ‏لاس‎ ‎= = = I ST . a \O ‏ما‎ Tc ‏اط‎ o
Tc Tc Tc Tc
EERE EERE EE
CY ‏م لتك ل أن نك‎
CY] ‏نك ا‎ me] ‏م كم‎ ‏ل‎ vy vy ‏ل‎ ume fl of of oof emi
Huw a a wom ff tH eq x] poss 7 ol gv of gem
YY vq Hv
14 ‏جدول‎ ‏ل 1468 المتوافق مع البشر‎ VK ‏مناطق‎ ‏ل ب 3 ب 3 ب ص‎ 0
S03 |Z ‏وده ا‎ S| ‏ا ا ذا‎ 4 | + > > > : ‏اج قا‎ oo a= a 2 4 oO ‏ب — ب‎ cle lz gk s|l8 |g ‏ق3|‎ 3 83 34 34 34 20 Q 2 — Oo + 3 3 — — — * og BE > Ih - ~ 2 | 2 | 2 3 23 59 118 | ‏ع‎ ‎= = = < ES < ES = a < S 10313 2 3633 3 | EE ie 2 a << Fp 4| 2 1 7 5 ‏ا 3 ام دام دا 3 +3 ل‎ ّ wo wa a ‏ا‎ RAE Ke = QL 1 1 1 2 cr |S \O ‏ما‎ Tc ‏اط‎ o
Tc Tc Tc Tc ‏ل 4 قافا‎ i dW ‏نا ا ا ل‎ ee ‏تك‎ 3
BEER EEE EEE
جدول 14 مناطق ‎VK‏ 1468 المتوافق مع البشر ‎Zl Zs 0 7 7 7‏ 43 > < ‎gd 4 2 5 1 1 1‏ 4 2 2 2 = = - 35 م | © 5 2 > > ‎ls 333‏ 201863633 7 7 3 5 ~ ا مج ‎[TQ‏ = < < ‎ha ha‏ ص ]9 < +3 < +3 ب ب ب ‎oN = ©‏ = 10_= )&( 5 5 = ‎I I IT C HF 0 5H Pe 3 ks 2‏ ‎ES < ES = : re =‏ <|[ = = = ‎F 39 31 + 5 |‏ 133 ‎a << Fp 4| 2 T 5‏ = = ~ 4 7 5اه 5 ‎Ex‏ +3 ل ‎SC + a “LL‏ = م ‎wa) a)‏ ‎KS KS KS A cr |‏ و ‎T|‏ حا 34 ما 0 ا ا ا ا جدول 15 ‎VL «VH‏ طفرات منعكسة والطفرات الأخرى الصورة المغايرة ‎VH‏ | متوالية مستقبل إكسون ل | الوحدات البنائية الوحدات البنائية ل أو ‎VL‏ 1 أو ‎VL‏ لإطار واهب ‎Kabat CDR‏ أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‏1 1146 ‎«H47 13 )1 AAD30410.1‏ (المتوالية رقم: 64( | ‎H103 AAX82494.15‏ (المتواليات أرقام: 63 و4؛
على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎AAD30410.1‏ ‎Hul4G 8VHv2‏ 30410 ‎H47 «H1 AAXB2494.15‏ (المتوالية رقم : 65( (المتواليات أرقام: 63 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎AAD30410.1‏ ‎Hul4G 8VHv3‏ 30410 ‎H47 «H1 AAXB2494.15‏ (المتوالية رقم : 66( (المتواليات أرقام: 63 و4؛ على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎ABA71374.1‏ ‎8VLvl‏ 110146 8» قل 19 ‎ABC66952.15‏ ‏(المتوالية رقم: 74( ‎L70 <L36‏ (المتواليات رقمي: 72 و73 على التوالي) أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‎ABA71374.1‏ ‎Hul4G 8VLv2‏ ‎L36 ABC66952.1‏ (المتوالية رقم : 75( (المتواليات رقمي: 72 و73 على التوالي)
أكواد الوصول ‎NCBI‏ ‏1م ‏3 1101406 (المتوالية رقم : 76( (المتواليات رقمي: 72 و73» على التوالي) جدول 16 ترقيم ‎Kabat‏ الخاص ‎jal‏ والوحدات البنائية ل ‎Kabat CDR‏ للطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى في مناطق ‎VH‏ للجسم المضاد 1468 المتوافق مع البشر الوحدة | السلسلة ‎gig‏ | السلسلة الثقيلة | 8 140 | ‎HuldG 8 | Hul4G 8 | HulaGg‏ البنائية | ‎AAD30410.1‏ |2494.1ميجمم ‎OW‏ لاا 2 | ‎VHV3‏ ‏نكن لا ‎I I‏ ان ال ‎I‏ ‏لش ل أ أ ال ل أ ننه نان لا ا ‎I I‏ نكا ‎I‏ ‏جدول 17 ترقيم ‎Kabat‏ الخاص بإطار والوحدات البنائية ل ‎Kabat CDR‏ للطفرات المنعكسة والطفرات الأخرى في مناطق ‎VL‏ للجسم المضاد 1468 المتوافق مع البشر الوحذة | السلسلة الخفيفة | السلسلة الخفيفة ‎HuldG 8 | Hul4G 8 | Hul4G 8 | 146 ١‏ ‎ABA7I374.1| ast‏ (9521م06عم | ‎VLvI| JW8‏ |2ماا ا ‎VLv3‏
P P A A P P LS
I EE I I
I I 5! 0008000008 ‏ال‎ نت ا ا أن لا الا ا يتم عرض محاذاة متوالية ‎Vh‏ ل 1468 الفأري (المتوالية رقم: 61) مع متوالية نموذج الفأر ‎¢IMQK_H)‏ المتوالية رقم: 62)؛ متواليات المستقبل البشري ‎¢1.AAX82494 5 AAD30410.1)‏ المتواليات أرقام: 63 و4؛ على ‎(sll‏ والمتواليات 110146817111 1101408177112 ‎Hul4G8VHV3s 5‏ (المتواليات أرقام: 66-64؛ على التوالي)؛ في شكل 12 يتم تضمين ‎CDRs‏ ‏كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مريعات؛ ‎Lad‏ عدا أن المريع المطوق الأول يكون مركبًا من ‎«Kabat CDR-H1 5 Chothia CDR-H1‏ مع 11ا-0018 ‎Kabat‏ تحتها خط وبخط سميك. ‏تكون المواضع التي عندها تختلف الوحدات البنائية القياسية؛ من نوع فيرنييه؛ أو الخاصة بالسطح البيني ‎Lad‏ بين متواليات مستقبل الفأر والمستقبل البشري عبارة عن مواضع مرشحة للاستبدال. ‏0 تتضمن أمثلة على الوحدات البنائية لتأسيس 6004/من نوع فيرنييه الوحدات البنائية 2 49« 69؛ 1 75« 80؛ و94 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 13. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية قياسية/متفاعلة مع ‎CDR‏ الوحدات البنائية 24« ¢48 و73 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 13. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية للسطح البيني/الحشو (11+1/1/) الوحدات البنائية 37( 39 ‏4 7. 91 93؛ و103 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 13. ‏5 يتم عرض محاذاة 1468 ‎VK‏ 905 الفأري (المتوالية رقم: 70) مع متوالية نموذج الفأر ‎¢1MJU_L)‏ المتوالية رقم: 71)؛ متواليات المستقبل البشري ‎tABC66952.15 ABA71374.1)‏ المتواليات رقمي: 72 و73 على ‎(Mg)‏ والمتواليات 110146817101 11014081712 3 (لمتواليات أرقام: 76-74؛ على التوالي)؛ في شكل 2ب. يتم تضمين ‎CDRs‏
كما هو محدد بواسطة ‎Kabat‏ في مربعات؛ ‎Lad‏ عدا أن المريع المطوّق الأول يكون مركبًا من ‎«Kabat CDR-H1 5 Chothia 08-1‏ مع 001-111 ‎Kabat‏ تحتها خط ويخط سميك. تكون المواضع التي عندها تختلف الوحدات البنائية القياسية؛ من نوع فيرنييه؛ أو الخاصة بالسطح البيني فيما بين متواليات مستقبل الفأر والمستقبل البشري عبارة عن مواضع مرشحة للاستبدال. تتضمن أمثلة على الوحدات البنائية لتأسيس 4ا000/من نوع فيرنييه الوحدات البنائية 4 35 46 49 66 68« و69 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 14. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية قياسية/متفاعلة مع ‎CDR‏ الوحدات البنائية 2 48 64« و71 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 4. تتضمن أمثلة على وحدات بنائية للسطح البيني/الحشو ‎(VHHAVL)‏ الوحدات البنائية 36؛ 38( 44 47« 87« 5 98 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ في جدول 14. الأسس المنطقية لاختيار المواضع الموضحة في جدولي 15 و17 في المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة كمواضع مرشحة للاستبدال تكون كالتالي. ‎tPA‏ يعتبر البرولين ‎lage‏ لتشكيل البنية؛ وقد يؤثر فقد أو اكتساب البرولين على البنية. تم تصميم الطفرات المنعكسة لتجنب "اكتساب البرولين”. بالرغم من ذلك حيث إن 8 عند هذا الموضع تكون نادرة في إطارات 06 البشرية؛ تم تضمين © في بعض الأنواع. 5 | 960ا: يكون البرولين مهما لتشكيل البنية؛ وقد يؤثر فقد أو اكتساب البرولين على البنية. تم تصميم الطفرات المنعكسة لتجنب 'فقد البرولين.” بالرغم من ذلك؛ حيث إن © عند هذا الموضع تكون نادرة في إطارات ‎19G‏ البشرية؛ تم تضمين ‎AL‏ بعض الأنواع. /897: يكون ‎Vg Ad‏ تكرارات متشابهة في الإطارات البشرية. تم تضمين كل من الوحدات البنائية في أنواع منفصلة. ‎:N26S | 0‏ تمثل ‎L26‏ موقع ‎dallas‏ ب ل١-جليكوزيل‏ في السلسلة الخفيفة 00)41. تقلل الطفرة ل 5 من المعالجة ب ١١-جليكوزيل‏ وتؤدي إلى الحصول على منتج غير متجانس بصورة أكبر. 36©5؟: تمثل هذه وحدة بنائية لسطح بيني. تم عمل استبدال في بعض الأنواع للحفاظ على الوحدة البنائية الفأرية في هذه الوحدة البنائية الخاصة بالسطح البيني.
: تكون ‎D‏ و5 متشابهتين في التكرار في إطارات 196 البشرية. يتم تطبيق 5 بواسطة الأجسام المضادة العلاجية الأكثر إتاحة على الصعيد التجاري؛ لذا تم استبدال 0 ب 5 في بعض لأنواع . 0708 : تكون 0 أكثر تكرارًا بشكل كبير من ‎(BA‏ إطارات 196 البشرية. بالرغم من ذلك؛ 5 متُكوْن ‎D‏ رابطة أيونية مع ‎R24‏ في السلسلة الخفيفة ‎«CDR1‏ لذا تم تضمين كلا / و( في أنواع ‎x‏ منفصلة ‎٠‏ ‏تكون الأسس المنطقية لاختيار المواضع الموضحة في جدولي 15 و16 في المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة كمواضع مرشحة للاستبدال كالتالي. 16: يحدث تحوّل الجلوتامات ‎(M(B)‏ بيروجلوتامات ‎(PE)‏ بصورة أكثر بطءًا من الجلوتامين 0 (©). بسبب فقد أمين رئيسي في عملية تحوّل الجلوتامين إلى ‎PE‏ تصبح الأجسام المضادة أكثر حمضية. ينتج التحوّل غير التام عدم تجانس في الجسم المضاد يمكن ملاحظته في صورة العديد من القمم باستخدام طرق تحليلية معتمدة على الشحنة. قد تشير اختلافات عدم التجانس إلى افتقار إلى وجود عملية تحكم. 1: تكون © أكثر تكرارًا في إطارات 96 البشرية. تكون ا أقل تكرارًا إلا أنها ليس نادرة. تم 5 تضمين كل من الوحدات البنائية في أنواع منفصلة. ا47//: تمثل هذه وحدة بنائية لسطح بيني. تم عمل استبدال في بعض الأنواع للحفاظ على الوحدة البنائية الفأرية في هذه الوحدة البنائية الخاصة بالسطح البيني. 71 قد تُكوْن 1 رابطة هيدروجين مع 63> لذا تم تضمين آ في بعض الأنواع للحفاظ على البنية التشكيلية ل ‎VH‏ ‏20 لأنه تم استخدام اثنين من إطارات المستقبل البشري ‎ABC66952.1 5 ABAT1374.1)‏ (المتواليات رقمي: ‎T3572‏ على التوالي)) لإجراء توافق مع البشر للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة ل 8 توجد مواضع إطار معينة بها أحماض أمينية مختلفة في الاثنين من إطارات المستقبل. يمكن أن تتضمن الأنواع المتوافقة مع البشر من المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة لذ 1468 أي
حمض أميني عند هذه الوحدات البنائية. يكمن مثال على وحدة بنائية حيث يختلف هذان المستقبلان في الموضع 18 (5 أو ©) بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ تكون الأسس المنطقية لاختيار حمض أميني واحد أو آخر عند هذا الموضع كالتالي. ‎S) 8‏ أو ©): تكون © عند هذا الموضع أقل تكرارًا. تمت تجربة الطفرة ل 5 لتخفيف تشوه الحلقة. لأنه تم أيضًا استخدام اثنين من إطارات المستقبل البشري ‎AAX82494.15 AAD30410.1)‏ (المتواليات أرقام: 63 و4؛ على التوالي)) باعتبارها متواليات المستقبل لإجراء توافق مع البشر للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ل 1468؛ توجد مواضع إطار معينة بها أحماض أمينية مختلفة في الاثنين من إطارات المستقبل. يمكن أن تتضمن الأنواع المتوافقة مع البشر من المنطقة 0 المتغيرة بالسلسلة الثقيلة ل 1468 أي حمض أميني عند هذه الوحدات البنائية. تتضمن أمثلة على الوحدات البنائية حيث يختلف هذان المستقبلان المواضع 1828 ‎N)‏ أو 5) 183 ‎R)‏ أو ‎«(K‏ ‎A) 4‏ أو 5)؛ 5 ‎H89‏ (/1 أو ا) بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ تكون الأسس المنطقية لاختيار حمض أميني واحد أو آخر عند هذه المواضع كالتالي. 98 (لح أو 5): يكون ل لا و5 تكرار مشابه على 828. تكون ‎Wal‏ عبارة عن وحدات بنائية 5 بشرية في اثنين من قوالب ‎VH‏ البشرية. تم تضمين 5 ولا في أنواع منفصلة. ‎R) 3‏ أو >ا): تكون >ا في منطقة الإطار 3 مقارية للمساحة السطحية لارتبط ‎.CDR‏ قد يعيق استبدالها ب ا وضع ‎alge‏ ضد. تكون ‎R‏ هي الأكثر تكرارًا وتكون >ا هي الثالثة في التكرار في الإطارات البشرية عند هذا الموضع. تم تضمين > و>ا في أنواع منفصلة. ‎SIA) 4‏ 5): توجد 5 وه في الإطارين المعتبرين؛ لذا تمت تجربة كل وحدة ‎Aly‏ في أنواع منفصلة. 9 (/ أو ا): توجد ‎AMV‏ الإطارين المعتبرين؛ لذا تمت تجرية كلٍ في أنواع منفصلة. تكون الثلاث من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر والثلاث من الصور المغايرة للمنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر كالتالي:
النوع 1 من ‎HuldG8VL‏ (مجموعات الاستبدال ‎¢Y36F 81917 (LIP PSA‏ 0708 بالأحرف الصغيرة) : ‎DIVMTQSapSLPVTPGESVSISCRSNKSLLHSNGNTYLYWfLQKPGQSPQLLIYRV‏ ‎SNLASGVPDRFSGSGSGTaFTLKISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTKLEI‏ ‎KR 5‏ (المتوالية رقم : 74( النوع 2 من ‎HuldG8VL‏ (استبدال 1361 بالأحرف الصغيرة): ‎DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSNKSLLHSNGNTYLYWfLQKPGQSPQLLIYR‏ ‎VSNLASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPLTFGQGTK‏ ‎LEIKR 0‏ (المتوالية رقم : 75( النوع 3 من 1014681/1! (مجموعات الاستبدال ‎(L36F (N26S‏ و0605 بالأحرف الصغيرة) : ‎DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSsKSLLHSNGNTYLYWfLQKPGQSPQLLIYRV‏ ‎SNLASGVPsRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVY YCMQHLEYPLTFGQGTKLEI ~~ 15‏ ‎KR‏ ‏(المتوالية رقم : 76( النوع 1 من ‎Hul4G8VH‏ (مجموعات الاستبدال ‎(W47L «Q3K «QIE‏ و01057 بالأحرف الصغيرة) : ‎eVKLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSWVRQTPEKRLEIVAEINNSG ~~ 0‏ ‎DTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYYCARHYYYGGGYG‏ ‎GWFFDVWGIGTLVTVSS‏ ‏(المتوالية رقم : 64( النوع 2 من ‎HUITAGBVH‏ (مجموعتي الاستبدال ]91 وا47//ا بالأحرف الصغيرة):
‎eVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSWVRQTPEKRLEIVAEINNS‏ ‎GDTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLKSEDTAMYYCARHYYYGGGY‏ ‎GGWFFDVWGQGTLVTVSS‏ ‏(المتوالية رقم : 65( النوع 3 من ‎Hul4G8VH‏ (مجموعتي الاستبدال 011 و, 117471 بالأحرف الصغيرة): eVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSSYTMSWVRQTPEKRLEIVAEINNS
GDTTYYPDTVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHYYYGGGY
GGWFFDVWGQGTLVTVSS
(66 : ‏(المتوالية رقم‎ 0 مثال 10. تحليل حركيات الارتباط للأجسام المضادة 1468 المتوافقة مع البشر تم تمييز حركيات الارتباط الخاصة بالصور المغايرة الثلاثة من 1468 المتوافق مع البشر و1468 الفأري ب/ا870//1-110 ‎TTR‏ البشري لناتج ‎sage‏ الاتحاد الجيني بواسطة 63 كما هو معروض في جدول 18. تم تثبيت المضاد للبشر ‎(GE Healthcare)‏ على رقاقة مستشعر 05 (تفتقر إلى سلاسل دكستران) عبر إقران الأمين بإتباع التعليمات المتوفرة في 5 الطقم المضاد للبشر ‎«GE Healthcare‏ وتم احتجاز ‎MADS‏ وصولاً إلى مستوى لضمان أقصى ارتباط لناتج تحليل ‎RU‏ 30-50. تم تمرير تركيزات متنوعة لناتج التحليل ‎TTR)‏ ‏871/14 البشري لناتج عودة الاتحاد الجيني) على المركب الترابطي المحتجز عند 50 ميكرو لتر/دقيقة في المحلول المنظم المُستخدم في التجرية ‎HBS)‏ + 960.05 0-20 1 مجم/ملليلتر ‎(BSA‏ في عملية تخفيف 3 مرات. لكل تركيز؛ استمر التفاعل لإطار زمني يسمح 0 بوصول تركيزات ناتج تحليل أعلى إلى التوازن أثناء الترابط إضافة إلى تضاؤل على الأقل 9610 من الإشارة أثناء الانفصال. تم استخدام تركيز واحد على الأقل (ليس الأعلى أو الأقل) مرتين. تم اختيار نطاقات التركيز الخاصة بناتج التحليل اعتمادًا على التجرية التمهيدية لتشمل قيمة من على الأقل 10 مرات أعلى من ‎KD‏ إلى 10 مرات أقل من ‎KD‏ ‏يلخص جدول 18 معدل الترابط ‎(ka)‏ معدل الانفصال (0»))» وثابت ألفة الارتباط ‎(KD)‏ ل 5 1468 الخاص بفأر؛ 1468 الخيمريء ‎«Hul4G8 H2L1‏ 11212 101468 101406811213
و1131.1 1101468 ل 18711/111014 ‎TTR‏ البشري لناتج عودة الاتحاد الجيني. كما هو معروض في جدول ¢18 يكون للأجسام المضادة 101468 و1468 لفأر نفس قيم ألفة ارتباط ‎TTR‏ ‏جدول 18 ألفة ارتباط ‎alge‏ الضد الخاصة بالأجسام المضادة 1468 ‎TTR‏ البشري ‎(FSTM/L110M)‏ ‎ka‏ (1/مولار الجسم المضاد ‎kd‏ إثانية) ‎KD (M)‏ اجمسع ثانية) 8 فأري 88+72 ‎ 86E-08.1 36E-04.5‏ 13.27 8 خيمري ‎ 38E-09.1 4686-3 51E+05.2‏ 06.51 ‎26E-09.2 93E-04.6 07E+05.3 Hul4G 8 H2L1‏ 03.42 ‎ 10E-09.2 83E-04.6 26E+05.3 Hul4G 8 2‏ 43.51 ‎24E-09.1 18E-04.3 52E+05.2 Hul4G 8 H2L3‏ 41.42 ‎ 76E-09.1 7786-6 86+53 Hul4G 8 H3L1‏ 05.44 أظهرت أنواع 1468 الفأري» ‎(pad) 14G8‏ والأخرى المتوافقة مع البشر من 1468 غير المحتوية على تغيرات في 100141 سلاسل خفيفة إضافية عند الاستخدام على 515-0801 في
ظل ظروف اختزال. كشف تحليل المتوالية أنه يوجد موقع المعالجة ب ل١١-جليكوزيل‏ في 1.0011 عند الوحدة البنائية 26 بواسطة ترقيم ‎Kabat‏ قد يتسبب موقع المعالجة ب لا١-جليكوزيل‏ هذا في مشكلات محتملة تتعلق بعدم التجانس أثناء التصنيع. يؤدي تطفير لا عند الوحدة البناثية 126 في 2 إلى الحصول على 11:1468171«73. تُظهر الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر
0 التي لها 14681713ن11 سلسلة خفيفة واحدة فقط عند الاستخدام على ‎SDS-PAGE‏ في ظل ظروف ‎(fal‏ وبالتالي يتم التخلص من المشكلة المحتملة المتعلقة بعدم التجانس. تكون ألفة
ارتباط مولد الضد الخاصة ب ‎H2L3‏ 101468 مشابهة لتلك الخاصة بالجسم المضاد الرئيسي الفأري والجسم المضاد الخيمري. مثال 11. الطرق والمواد أ. بروتوكول توليد الجسم المضاد
تم تحصين فتران مناعيًا أسبوعيًا باستخدام ببتديات مولدة للضد ‎(TTR-MAP‏ -1189-97 ‎N-KLH‏ أو ‎TTR89-97-C-KLH‏ في العامل المساعد ‎RIBI‏ أو شهريًا في العامل المساعد ‎TiterMax‏ من ثلاثة إلى أريعة أيام قبل الاندماج؛ تم إعطاء ‎Of‏ منقاة جرعة معززة أخيرة عبر الوريد باستخدام ‎alge‏ مناعي في محلول ملحي. تم تجانس الطحال لتحضير خلايا الطحال واندماجها مع خلايا ورم نخاعي 502/0 باستخدام بروتوكول اندماج كهربي قياسي. تم وضع
0 الخلايا المندمجة في أوساط الاختيار في أطباق مكونة من 96 عين وفحصها بعد 10-7 أيام. ب. بروتوكول فحص الجسم المضاد كان اختيار الورم الهجين معتمدًا على فحص ‎ELISA‏ التالي: تم طلاء أطباق ‎ELISA‏ مكونة من 6 عين باستخدام مضاد-115! من دجاج؛ 1 ميكرو جرام/ملليلتر ‎PBS‏ وإجراء حضانة لمدة 1 ساعة. تم إغلاق الأطباق باستخدام محلول 961 ‎(BSA/PBS‏ 200 ميكرو لتر/عين لمدة 15
5 دقيقة ثم تمت إضافة 0.5 ميكرو جرام/ملليلتر ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4؛ 50 ميكرو لتر/عين وإجراء حضانة ‎sad‏ 1 ساعة. يكون ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 عبارة عن ‎TTR‏ قد تم تعريضه إلى رقم هيدروجيني منخفض (50 ‎le‏ مولار صوديوم أسيتات؛ الرقم الهيدروجيني 4) من أجل فصل/تكدس ‎(TTR‏ مما يكشف القمة اللاصقة 11489-97. تم غسيل الأطباق مرتين باستخدام ‎TBS-T‏ تمت إضافة المادة الطافية من أطباق الاندماج» 50 ميكرو لتر/عين وإجراء حضانة
0 المدة 1 ساعة. تم غسيل الأطباق مرتين باستخدام 185-1. تمت إضافة الجسم المضاد الخاص بالكشف؛ ‎HRP‏ مضاد لفأر من ماعز (961ا؛ 28؛ ‎2b‏ ثلاثي النوعية) مخفف بنسبة 1: 0 في 960.5 858/085/185-1؛ 50 ميكرو لتر/عين وإجراء حضانة لمدة 1 ساعة. ‎al‏ تم غسيل الأطباق خمس مرات باستخدام ‎TBS-T‏ وتمت إضافة ركيزة ‎(TMB‏ 100 ميكرو لتر/عين. بعد 15 دقيقة؛ تم إيقاف تطوّر الركيزة باستخدام حمض سلفربك 2 عياري؛ 50 ميكرو
لتر/عين. تمت قراءة الأطباق عند 450 نانو متر. تم اختيار العيون التي لها قطر خارجي يبلغ > 0 وتم تقل الخلايا إلى طبق مكون من 24 عين. بعد 3 ‎all‏ من النموء تم فحص النسائل بالتباين باستخدام التجرية السابقة لتأكيد الارتباط واستبدال ‎TTR‏ الطبيعي ب 114 بالرقم الهيدروجينى 4 كفحص سلبى بالتباين ¢ مما يسمح باختيار نسائل منتجة ل ‎TTR mAbs‏ نوعى ‎z‏ . بروتوكولات التعبير ‎hs‏ عن الجسم المضاد تم نقل عدوى إلى السلسلة الخفيفة المحفزة ب ‎CMV‏ وبلازميدات السلسلة الثقيلة التى تحمل متواليات الجسم المضاد أحادي النسيلة المتوافق مع البشر في ‎(Life Wa‏ 0110-51 (:160000108. تم تطبيق اختيار مزدوج لإعداد مجموعة مختارة. تمت تجرية الأوساط المهيأة
0 للعيار القياسي؛» الارتباط وتحليلها بواسطة ‎43LYSDS-PAGE‏ ويسترن. تم استخدام المجموعات المختارة للحصول على نسيلة باستخدام نظام ‎(Molecular Devices)‏ «0100(01. تم تصنيف النسائل اعتمادًا على عيار الجسم المضاد. تم تمديد النسائل المختارة وحفظها. تم تمديد النسيلة الأعلى إنتاجًا في قوارير الرج وتم استخدام المزرعة لتطعيم 25-10 لتر من مزارع ‎Wave bag‏ تم استخدام خليط من أوساط التعبير الوراثي عن 865016-0110 ‎CD‏
‎FreeStyle F175 OptiCHO 5‏ المكملة باستخدام ‎Glutamax‏ (أوساط ‎Glutamaxs‏ من ‎Life‏ ‎(Technology‏ لقارورة الرج إضافة إلى مزارع ‎Wave bag‏ تم إعداد مَزْرَحَةٌ ‎Lang‏ باستخدام ‎(GE Healthcare) Wave Bioreactor‏ عند 37 درجة مثوية؛ 967 002 تحت التقليب المستمر. تم سحب العينات دوربًا لملاحظة عدد ‎(LAY‏ القدرة على البقاء على قيد الحياة وإنتاج الجسم المضاد. تم إجراء تكملة باستخدام ‎Cell Boost (HyClone)‏ إذا دعت الحاجة. تم حصاد
‏0 المَزْرَعَةٌ الوَجيبِيّة عند بدء قدرة الخلية على البقاء على قيد الحياة في التراجع إلى ما دون 9690 (5 -7 أيام) ‎٠‏ ‏د. بروتوكول تثقية الجسم المضاد تم حصاد مزرعة الخلايا بعد السماح أولاً بترسيب الخلايا في المعلق إلى قاع ‎Wave bag‏ عبر الجاذبية عند 4 درجات مئوية. تمت تنقية الأوساط التي تم حصادها من خلال مرشح على عمق
‎Pod COHC, Millipore)‏ علهاونلا1)؛ تركيزها 10 مرات عن طريق ترشيح التدفق المماسي ‎(Pelicon 2PLC 30K, Millipore)‏ وترشيحها على نحو معقم من خلال مرشح 0.2 ميكرو متر ‎(Opticap XL, Millipore)‏ + ثم تم تحميل الأوساط المهيأة المركزة على عمود 6 ‎Protein‏ ‎Sepharose Fast Flow (GE Lifesciences)‏ تم توازنه مسبقًا في ‎PBS‏ مركز مرة واحدة»؛ الرقم الهيدروجيني 7.4 باستخدام ‎WFPLC (Akta Avant, GE Lifesciences)‏ تم غسيل البروتينات من العمود باستخدام 10-5 أحجام عمود من 085 مركز مرة واحدة؛ الرقم الهيدروجيني 7.4 حتى وصل 00280 إلى القيمة القاعدية. تمت تصفية الجسم المضاد المرتبط ‎Gals‏ من العمود باستخدام 2 من أحجام عمود من ‎Elution Buffer (Thermo Scientific)‏ 6ع1. تم تجميع أجزاء التصفية التتابعية ومعادلة الرقم الهيدروجيني باستخدام ‎THiS‏ 2 ميلارء الرقم الهيدروجيني 9.0 )60 0 ميكرو لتر لكل 2 ملليلتر من التصفية التتابعية). تم تجميع وديلزة الأجزاء المحتوية على الجسم المضاد طوال الليل عند 4 درجات مثوية ضد 5 مركز ‎Bre‏ واحدة؛ الرقم الهيدروجيني 7.4. ثم تم تعقيم العينة التي تمت ديلزتها عن طريق الترشيح الفائق من خلال مرشح ‎PES‏ 0.2 ميكرو ‎jie‏ وتخزينها عند 4 درجات مثوية. تم تحديد تركيز البروتين النهائي بواسطة حمض باي سيتكونينيك ‎(BCA)‏ باستخدام جاما-جلوبولين بقري 5 باعتباره المعيار القياسي للبروتين ‎«(Thermo Scientific)‏ ه. بروتوكولات تنقية والتعبير ‎Sl‏ عن ‎TTR‏ لناتج عودة الاتحاد الجيني تم تحويل ‎LIA‏ إشرشيا كولاي (8121-81) باستخدام بلازميد ‎PET21a(+)‏ محتوي على ‎ga‏ ‏مدرج من ‎TTR(Met-hTTR-(His)6‏ أو صورة مغايرة من ‎TTR‏ محتوية على ‎Hh‏ مزدوجة ‎.F8TM/L110M‏ تم استزراع الخلايا في مرق 271 محتوي على 100 ميكرو جرام/ملليلتر 0 الأمبيسيلين. تم الحث على التعبير الوراثي عن ‎TTR‏ طوال الليل عند 20 درجة مئوية في وجود 1 مللي مولار ‎IPTG‏ 5 %005 أرابينوز. تم تجميع الخلايا بواسطة الطرد المركزي عند 4000 ‎x‏ عجلة الجاذبية الأرضية لمدة 10 دقائق وتخزينها عند -80 درجة مئوية حتى الاستخدام. تمت إذابة 15-10 جم من كربات الخلية وتحليلها في محلول ‎A‏ منظم 50 ملليلتر ‎PBS)‏ مركز مرة واحدة محتوي على 500 ‎Ae‏ مولار
‎Ale 20 «NaCl‏ مولار إيميدازول) عن طريق المعالجة من خلال معالج ‎Je LV-1‏ القص ‎a3. (Microfluidics, Inc.)‏ إجراء طرد مركزي للخلايا المتحللة عند 12.000 ‎dae‏ الجاذبية الأرضية لمدة 15 دقيقة؛ ترشيحها من خلال مرشح ‎PES‏ 0.2 ميكرو ‎jie‏ قبل التنقية على عمود ‎(GE Lifesciences) His—Trap HP‏ بعد التحميل؛ تم غسيل العمود باستخدام 10 أحجام للعمود من ‎Buffer A‏ وتصفيته تتابعيًا باستخدام 3[ ‎PBS) Buffer‏ مركز مرة واحدة باستخدام 500 مللي مولار ‎Ale 500 NaCl‏ مولار إيميدازول). تم تجميع أجزاء القمة المناظرة ل ‎TTR‏ ديلزتها في مقابل ‎PBS‏ مركز مرة واحدة وتخزينها عند 80-7 درجة مئوية حتى الاستخدام. و. تحضير مولد الضد ‎TTR J‏ تم تحضير مولد الضد ل ‎TTR‏ الطبيعي عن طريق تخفيف خام مركز من ناتج عودة الاتحاد 0 الجيني ‎TTR-6His‏ وصولاً إلى تركيز نهائي يبلغ 2.5 ميكرو جرام/ملليلتر في ‎PBS‏ مركز ‎Sy‏ ‏واحدة. تم توليد ‎TTR‏ المهالج الرقم الهيدروجيني 4 عن طريق إجراء حضانة لناتج عودة الاتحاد الجيني ‎TTR‏ عند تركيز يبلغ 0.2 مجم/ملليلتر في 50 ‎Me‏ مولار صوديوم أسيتات؛ الرقم الهيدروجيني 3.95 لمدة 72 ساعة عند درجة حرارة الغرفة. في ظل هذه ‎ig yall‏ ينفصل ‎TTR‏ ‏إلى خليط من مونومرات ‎TTR‏ وصور مكدسة تكون مميزة بنائيًا عن ‎TTR‏ الطبيعي. ثم تم تخفيف ‎TTR 5‏ بالرقم الهيدروجيني 4 وصولاً إلى تركيز نهائي يبلغ 2.5 ميكرو جرام/ملليلتر في ‎PBS‏ ‏مركز مرة واحدة مباشرة قبل الاستخدام في التجرية. تم طلاء أطباق مكونة من 96 عين ‎(Costar‏ ‏)#3690 عند درجة حرارة الغرفة باستخدام 50 ميكرو لتر لكل عين من 1.0 ميكرو جرام/ملليلتر جسم مضاد أحادي النسيلة ‎His—aliae‏ من دجاج ‎(Abcam #Ab9107)‏ في ‎PBS‏ مركز مرة واحدة لمدة 1 ساعة. تم التخلص من محلول الطلاء وتم إغلاق الطبق باستخدام حجم 250 ميكرو 0 لتر لكل عين من محلول إغلاق محتوي على ‎BSA‏ مركز مرة واحدة مخفف في ‎PBS‏ مركز مرة واحدة )#786-193 ‎(G-Biosciences‏ لمدة 1 ساعة. ز. بروتوكول ‎ELISA‏ ‏تمت معالجة الأطباق المطلية والمغلقة المكونة من 96 عين باستخدام 50 ميكرو لتر لكل عين من 2.5 ميكرو جرام/ملليلتر مولد الضد ل ‎TTR‏ (إما ‎TTR‏ الطبيعي أو ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني
4) لمدة 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة. ثم تم غسيل الأطباق مرتين باستخدام 250 ميكرو لتر لكل عين من محلول منظم للغسيل (محلول ملحي منظم ‎Tris‏ مركز مرة واحدة محتوي على ‎(Tween-20 %0.05‏ ثم تمت معالجة الأطباق التي تم غسيلها باستخدام 50 ميكرو لتر لكل عين من الجسم المضاد أحادي النسيلة المضاد ل ‎TTR‏ الملائم عند تركيزات تتراوح من 0.31 إلى 2.5 ميكرو جرام/ملليلتر؛ ‎sad‏ 1 ساعة.
تم غسيل الأطباق المعالجة 3 مرات باستخدام 250 ميكرو لتر لكل عين من محلول منظم للغسيل. بعد الغسيل؛ تمت معالجة الأطباق لمدة 1 ساعة باستخدام 50 ميكرو لتر لكل عين من الجسم المضاد الخاص بالكشف المشتمل على تخفيف بنسبة 5.000:1 لمضاد لفأر من ماعز مترافق مع بيروكسيد )#115-035-164 ‎(Jackson ImmunoResearch‏ في ‎PBS‏ مركز مرة واحدة.
ثم تم غسيل الطبق 3 مرات قبل إضافة 100 ميكرو لتر لكل عين من ركيزة ‎(Rockland)‏ 1118. تم السماح بتواصل تفاعل ‎HRP‏ عند درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة قبل الإخماد باستخدام حجم 0 ميكرو لتر لكل عين من 112504 1 عياري. تم قياس الامتصاص بالقياس الطيفي عند طول موجة يبلغ 450 نانو متر. ح. ‎SDS-PAGE‏
5 "تم إجراء استشراد كهربي على أنواع هلام 505-بولي أكريلاميد كالتالي. تم تحميل 1-0.1 ميكرو جرام ‎TTR‏ أو ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 في محلول منظم لعينة ‎LDS‏ تم تركيزه مرة واحدة ‎(Life‏ ‎Technologies)‏ على 70610 هلام 1000/01 بيس- تريس وتعريضه إلى الاستشراد الكهربي في محلول ‎MES‏ منظم عند ثابت 90 فولط لمدة 105 دقيقة. بعد الاستشراد الكهربي ؛ تم إما تلوين الهلام في ‎Instant Blue (Expedeon)‏ أو نقله إلى مرشحات من نيترو سيليلوز لتحليل لطخة
0 وسترن. ط. ‎PAGE‏ الطبيعى تم إجراء استشراد كهربي على أنواع هلام ‎Tris‏ -جليسين طبيعية كالتالي. تم تحميل 1-0.1 ميكرو جرام ‎TTR‏ أو ‎TTR‏ بالرقم الهيدروجيني 4 في محلول منظم لعينة ‎Tris‏ -جليسين تم تركيزه مرة واحدة ‎(Life Technologies)‏ على 9620-10 هلام 1115 -جليسين وتعريضه إلى الاستشراد
الكهربي في محلول منظم من 1718 -جليسين طبيعي تم تركيزه مرة واحدة مُستخدم عند ثابت 120 فولط لمدة 105 دقيقة. بعد الاستشراد الكهربي؛ تم ‎Lal‏ تلوين الهلام في ‎Instant Blue‏ ‎(Expedeon)‏ أو نقله إلى مرشحات من نيترو سيليلوز لتحليل لطخة وسترن. 3 . لطخة ويسترن تم وضع لطخات من أنواع هلام ‎SDS‏ أو ‎PAGE‏ طبيعية على ورقة مرشح من نيترو سيليلوز
‎(iBlot, P7 Program)‏ وإغلاقها باستخدام محلول إغلاق منظم ‎(Licor)‏ لمدة 30 دقيقة. ثم تم إجراء حضانة للمرشحات في 0.5 ميكرو جرام/ملليلتر من الجسم المضاد الرئيسي في محلول إغلاق منظم ‎sad‏ 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة (أو طوال الليل عند 4 درجات مثوية)؛ متبوعة ‎ED,‏ عمليات غسيل لمدة 10 دقائق باستخدام ‎TBS‏ تم تركيزه مرة واحدة. تم وضع المرشحات
‏0 في مضاد لفأر من ماعز مترافق مع 80001777 ‎IRDye‏ ثانوي مخفف بنسبة 20.000:1 في محلول إغلاق منظم ‎٠.‏ بعد إجراء حضانة للمرشحات في محلول جسم مضاد ثانويي لمدة [ ‎dela‏ ‏عند درجة حرارة الغرفة؛ تم غسيل المرشحات وتصويرها على وسيلة تصوير بالأشعة تحت الحمراء ‎.(Licor) Odyssey CLx‏ ك. بروتوكول تجربة التكوين اللييفي ل ‎TTR‏
‏5 تتم إجراء حضانة لمحلول من 3.6 ميكرو متر (0.2مجم/ملليلتر) 114-778 في 50 مللي مولار صوديوم أسيتات 3 الرقم الهيدروجيني 4.8 ‎xe‏ 37 درجة مثوية لمدة 72 ساعة في وجود 4 ميكرو متر (0.2مجم/ملليلتر) جسم مضاد ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ أو مقارنة بنمط مماثل. بعد إجراء الحضانة؛ تمت إضافة مقدار مولاري زائد 5 أضعاف من ثيوفلاقين-1 إلى الخليط والسماح بالريط لمدة 30 دقيقة. تم قياس القياسات الفلورية عند طول موجة انبعاث يبلغ
‏0 480 نانو متر مع طول موجة استثارة عند 440 نانو متر. تم ضبط نسبة صفر % من التثبيط باعتبارها شدة الفلورة في وجود جسم مضاد للمقارنة بنمط ممائل )83 وحدة تقريبية) وتم ضبط نقطة 00 1 % تثبيط باعتبارها الفلورة فى عدم وجود بروتين ‎TTR-Y78F‏ (35 وحدة تقريبية) . تم تخفيف محلول خام من ‎Gy) TTR-VI22I‏ 5 مجم/ملليلتر) في محلول منظم بتركيزات نهائية تبلغ 2 . 0 مجم/ملليلتر ‎TTR‏ ¢ 0 3 مللي مولار صوديوم أسيتات ¢ 5 مللي مولار صوديوم
فوسفات « 100 مللي مولار ‎(KCI‏ 1 مللي مولار ‎EDTA‏ « 02 960 صوديوم أزيد 3 وتنوع تركيزات الجسم المضاد أحادي النسيلة عند الرقم الهيدروجيني 7.2. تمت ديلزة هذه العينة ضد نفس المحلول المنظم عند الرقم الهيدروجيني 4.5 لمدة 3 ساعات عند درجة حرارة الغرفة. ثم تم إجراء حضانة للعينات عند 37 درجة مثئوية لمدة 72 ساعة. بعد الحضانة تمت إضافة مقدار مولاري زائد 5 أضعاف من ثيوفلافين-آ إلى تمت إضافة إلى الخليط والسماح بالربط لمدة 30 دقيقة.
تمت ملاحظة التألق الفلُوري ل ثيوفلافين-آ باستخدام تمت ملاحظة باستخدام مقياس الطيف الفلوري ‎Photon Technology International C60‏ تم تنوّع كسب المُضَّخُمٌ ‎(Ayal‏ وتم ضبط قيم عرض شق الاستثارة والانبعاث على 4-2 ‎sil‏ متر ‎sabi‏ الإشارة إلى الضوضاء إلى الحد الأقصى. تم إجراء قياسات الفلورة باستخدام 430 نانو متر و480 نانو متر كأطوال موجات
0 استثارة وانبعاث؛ على التوالى. ل. عينات النسيج القلبى تم الحصول على الكتل الحديثة المجمدة والمعالجة بالبارافين من النسيج القلبي بالتشخيص المؤكد لوجود طفرات ‎ATTR‏ من ‎Dr.
Merrill Benson at Indiana University‏ تضمنت العينات ثمانية
5 -من العينات الحديثة المجمدة وست من عينات ‎FFPE‏ وتم تشخيص احتواء كل عينة ‎Wl‏ على ‎ATTR‏ أو داء نشواني قلبي آخر. تم بشكل إضافي تأكيد تشخيص النسيج عند ‎Prothena‏ عبر التلؤن ب ‎IHC‏ باستخدام الأجسام المضادة للسلاسل الخفيفة كابا ولامدا والمادة النشوانية ‎A‏ قبل التمييز باستخدام الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ ‏م. الكيمياء الهيستولوجية المناعية
تم إجراء الكيمياء الهيستولوجية المناعية على مقاطع نسيجي مثلج على شريحة 10 ميكرو جرام مثبتة في بارا فورمالديهيد على نحو خفيف وعلى 5 ميكرو متر مقاطع بارافين. كانت طريقة البيروكسيداز المناعي هي نظام الكشف الأساسي؛ الذي تم تتفيذه على ‎Leica Bond Rx (Leica‏ ‎Biosystems, Buffalo Grove, IL)‏ باستخدام ,05980) ‎Bond Polymer Refine Detection Kit‏ ‎«Leica Biosystems)‏ تم إجراء حضائنة للأجسام المضادة الرئيسية لمدة ساعة واحدة (وففًا
للتركيزات في جدول 2( متبوعًا بحضانة باستخدام مترافقات الجسم المضاد بالرابط ‎HRP‏ البوليمري الذي يكون مضادًا ‎lal‏ ومضادًا لأرنب. تمت رؤية التلوين باستخدام مُوَلِدُ لون ‎(DAB‏ أنتج راسب بني اللون. تم تلوين الشرائح بالتباين باستخدام هيماثوكسيلين؛ إزالة الماء منها بتسلسل تصاعدي للمركبات الكحولية؛ تصفيتها في مركبات ‎(abl)‏ وتغطية الشرائح باستخدام 60 ‎CytoSeal‏ ‎(Richard Allen Scientific; Kalamazoo, MI) 5‏ تكونت مجموعات المقارنة السلبية من تنفيذ الإجراء الهيستولوجي الكيميائي المناعي بأكمله على قطاعات مجاورة باستخدام نوع مقارنة بنمط مماثل من 196 غير ‎elie‏ أو حذف الجسم المضاد الرئيسى. ن. إيضاح المادة النشوانية: التلوين ‎Bad‏ الكُونْعُو وثيوفلافين ‎T‏ ‏تم إجراء التلوين ‎Bids‏ الكُونْعُو لإيضاح المادة النشوانية ل ‎TTR‏ في النسيج باستخدام طقم من ‎American MasterTech (Lodi, California) 0‏ . تم إجراء التلوين ‎Wy‏ لإجراء المصنْع. تم تلوين الشرائح في محلول ‎Bd‏ الكُونْعُو لمدة 1 ساعة متبوعًا بالتمايز في 961 صوديوم هيدروكسيد لمدة تقريبًا 15 ثانية. ثم تم شطف الشرائح بالماء الجاري؛ تجفيفها من خلال كحول بسلسلة من التركيزات المتزايدة؛ وتصغيتها من خلال ثلاث تغييرات لمركبات الزايلين؛ وتغطية الشرائح باستخدام ‎.CytoSeal 60‏ 5 .تتم استخدام بروتوكول تلوين باستخدام ثيوفلاقين ‎T‏ معدل ).1995 ‎(Schmidt et al‏ لتحديد وجود المادة النشوانية ل ‎TTR‏ في النسيج. بإيجاز؛ تم تلوين الشرائح على نحو متباين باستخدام هيماثُوكُسيلين ‎(Mayers‏ شطفها بالماء ‎lad)‏ وصباغتها باستخدام محلول مرّشح من 0.015 % ثيوفلاقين ‎AT (T3516-25G; Sigma-Aldrich, St.
Louis, MO)‏ %50 إيثانول لمدة عشر دقائق . ثم تم شطف الشرائح بالماء الجاري وتمايزها في 961 (حجم/حجم) حمض أسيتيك لمدة 10 0 دقائق وشطفها ثلاث مرات بالماء . تم السماح بتجفيف الشرائح بالهواء قبل تغطية الشرائح باستخدام ‎.ProLong Gold (Life Technologies)‏ س. تحليل الصور
تم تصوير الشرائح باستخدام إما مجهر ‎«Olympus BX61‏ ماسح شريحة رقمي ‎Hamamatsu‏ ‎«Nanozoomer 2.0HT‏ أو نظام ‎Al‏ طيفي ‎Leica SPE‏ تم تجميع الصور وتخزينها في صورة ملفات ‎TIFF‏ ‏ع. تحليل عينات البلازما البشرية بواسطة ‎SDS-PAGE[Western‏
تتم الحصول على ست عينات بلازما من المرضى المُثبت لديهم ‎ATTR‏ /30/ (العينة رقم 21 رقم 22 رقم 23 رقم 24؛ رقم 25؛ رقم 27) و6 عينات (العينة رقم 11 رقم 12؛ رقم 15؛ رقم 8 رقم 19؛ رقم 20) من الخاضعين للعلاج الطبيعيين من ‎M.
Saraiva (Porto University,‏ ‎Portugal)‏ كانت العينة رقم ‎C6‏ عبارة عن عينة مصل بشري طبيعي تم الحصول عليها من مصدر تجاري ‎a3. (BioreclamationIVT)‏ فصل عينات البلازما هذه بواسطة ‎SDS-PAGE‏
0 واستخدام لطخة ويسترن عليها باستخدام 905 أو 581 كالتالي. تم تخفيف حجم 1.4 ميكرو لتر من البلازما بنسبة 8:1 في محلول منظم لعينة ‎LDS‏ تم تركيزه مرة واحدة في عدم وجود عامل اختزال ‎(Life Technologies)‏ تم تعريض العينات إلى عملية فصل 505-1861 واستخدام لطخة ويسترن عليها باستخدام 0.5 ميكرو جرام/ملليلتر 905 أو 581 كما هو موصوف فيما سبق.
ف. ‎Judas‏ عينات البلازما البشرية بواسطة تجرية ‎MesoScale Discovery (MSD)‏
تم طلاء أطباق ‎MSD‏ مكونة من 96 عين باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة 601 عند تركيز يبلغ 4 ميكرو جرام/ملليلتر في ‎PBS‏ وإجراء حضانة لها لمدة 2 ساعة عند درجة حرارة الغرفة مع الرج؛ أو طوال الليل عند 4 درجات مئوية. تم غسيل الأطباق ثلاث مرات باستخدام ‎TBST‏ 23 تركيزه مرة واحدة قبل قبل إغلاقها باستخدام 963 محلول م ‎«MSD Blocker‏ 150
0 ميكرو لتر لكل عين لمدة 1 ساعة من الرج. تمت إضافة حجم 30 ميكرو لتر لكل عين من عينات البلازما البشرية المخففة بنسبة 10:1 في محلول منظم لعينة تكوّن من 160.6 ألبومين مصل بقري خالي من الجلوبولين» 1.5 مللي مولار صوديوم فوسفات أحادي القاعدة؛ 8 مللي مولار صوديوم فوسفات ثنائي القواعد؛ 145 مللي مولار صوديوم كلوريد» 9060.05 ‎Triton X=‏ 5 5 %0.05 ثيثيروسال إلى أطباق ‎MSD‏ التي تم إغلاقها لمدة 1 ساعة. تم غسيل الأطباق
3 مرات باستخدام 1851 تم تركيزه مرة واحدة. تمت إضافة حجم 50 ميكرو لتر لكل عين من 1 ميكرو جرام/ملليلتر جسم مضاد خاص بالكشف مرمز بسلفو (إما 803 إجمالي الجسم المضاد ل ‎TTR‏ الخاص بالجسم المضاد متعدد النسائل ‎(Dako‏ في المحلول منظم لعينة لمدة 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة مع الرج. تم غسيل الأطباق ثلاث مرات باستخدام ‎TBST‏ تم تركيزه مرة واحدة متبوعًا بإضافة 150 ميكرو لتر لكل ‎(pe‏ من محلول ‎Read Buffer T‏ تم تركيزه مرة واحدة ‎a3. (Meso Scale Discovery)‏ تمت قراءة الأطباق في وسيلة التصوير ‎MSD Sector‏ ص. توليد منحنى ‎MSD‏ قياسي من أجل تحديد مقدار ‎TTR‏ التفاعلي غير الطبيعي لبروتين 601 الموجود في عينات البلازما البشرية؛ تم توليد منحنى ‎MSD‏ قياسي باستخدام ‎TTR-FTM/LIIOM‏ لناتج ‎sage‏ الاتحاد 0 الجيني باعتباره ‎TTR‏ قياسي تفاعلي ل 601. تحتوي هذه الصورة المغايرة من ‎TTR‏ على اثنتين من مجموعات استبدال حمض أميني التي تمنع تكوين تترامر وتحافظ على البروتين في ‎Als‏ ‏المونومر (11442-11452 ,40 ‎«(Jiang et al. (2001) Biochemistry‏ بهذه الكيفية؛ يتم التعزف على هذه الصورة المغايرة من ‎TTR‏ بواسطة كل وداه ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ وعلى هذا تكون ملائمة بصورة جيدة للاستخدام كمعيار قياسي مرجعي في ‎MSD dad‏ لتوليد المنحنى القياسي؛ تم طلاء أطباق ‎MSD‏ مكونة من 96 عين باستخدام جسم مضاد ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ 601 عند تركيز يبلغ 4 ميكرو جرام/ملليلتر في ‎PBS‏ وإجراء حضانة لها لمدة 2 ساعة عند درجة حرارة الغرفة مع ‎zl)‏ أو طوال الليل عند 4 درجات مئوية. تم غسيل الأطباق ثلاث مرات باستخدام ‎TBST‏ تم تركيزه مرة واحدة قبل قبل إغلاقها باستخدام 963 محلول ‎Blocker A‏ 150 150 ميكرو لتر لكل عين لمدة 1 ساعة من الرج. ثم تمت معالجة الأطباق 0 المغلقة لمدة 1 ساعة باستخدام 50 ميكرو لتر لكل عين من 25 ميكرو جرام/ملليلتر ‎TTR-‏ ‏741 مخفف على نحو متسلسل 5:1 على أن تكون ‎AT‏ مرة تخفيف خالية من المحلول المنظم. تم غسيل الأطباق 3 مرات باستخدام ‎TBST‏ تم تركيزه مرة واحدة قبل إضافة ‎aaa‏ ‏0 ميكرو لتر لكل عين من 1ميكرو جرام/ملليلتر جسم مضاد خاص بالكشف مرمز بسلفو ‎8C3—SulfoTag)‏ أو ‎(Dako pAb—SulfoTag‏ لمدة 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة مع الرج. تم 5 إقران كل من الجسم المضاد ‎mAb‏ 803 والجسم المضاد ‎Dako‏ بعلامة الترميز ‎SulfoTag‏ وبمكن
استخدامهما عند الجسم المضاد الخاص بالكشف حيث إنهما يرتبطا بإجمالي ‎TTR‏ ولم يكونا
نوعيين من حيث التشكيل.
بعد العلاج باستخدام الجسم المضاد الخاص بالكشف؛ تم غسيل الأطباق ثلاث مرات باستخدام
حجم 150 ميكرو لتر لكل عين من ‎TBST‏ تم تركيزه مرة واحدة؛ متبوعًا بإضافة 150 ميكرو لتر
لكل عين من ‎Read Buffer T‏ تم تركيزه مرة واحدة ‎(MSD)‏ تمت قراءة الأطباق في وسيلة
التصوير ‎MSD Sector‏ وتم توليد منحنى معايرة ‎F8TM/L110M‏ ل ‎TTR‏ الناتج.
ق. تجرية توليد الخلايا الملتهمة
تم إقران عينة 1 مجم/ملليلتر من ‎TTR (TTR-FSTM/LIIOM‏ الطبيعي أو ‎TTR‏ بالرقم
الهيدروجيني المنحفض المتكدس-730141 مع أمين باستخدام صبغة 0116000 لمدة 15 دقيقة عند 0 37 درجة ‎Logie‏ بنسبة بروتين:صبغة تبلغ حوالي 4:15 ‎Gg‏ ل مواصفات المُصنّع ‎(Thermo‏
‎Scientific)‏ تمت ‎dll)‏ علامة الترقيم ‎pHrodo‏ الزائدة عن طريق عملية ترشيح بأغشية فائقة
‏الترشيح في وسيلة تركيز بالدوران بمادة مذابة لها أقل وزن جزيثي يبلغ ‎K (Pierce Thermo)10‏
‏وتمت إعادة تعليق +11:000-111م في ‎PBS‏ تم تركيزه مرة واحدة.
‏تم استنبات الخلايا أحادية النواة البشرية 1110-1 في أوساط مزرعة خلايا ‎(RMPI)‏ 9610 مصل ‎IgG 5‏ منخفض» م0/:08م). تم إجراء حضانة مسبقة على نحو منفصل لجزءٍ متساوي 20 ميكرو
‏جرام/ملليلتر من ‎TTR‏ مرقم ب ‎pHrodo‏ باستخدام 40 ميكرو جرام/ملليلتر الجسم المضاد عند 37
‏درجة مئوية في أوساط مزرعة خلايا لمدة 30 دقيقة قبل إضافة ‎WIA‏ 1110-1 58+04 بنسبة
‏حجمية 1:1. بعد إجراء حضانة لمزرعة النسيج )3 ساعات)؛ تم غسيل الخلايا باستخدام أوساط
‏مزرعة خلايا ثلاث مرات؛ تم إجراء حضانة لها في الأوساط لمدة 10 دقائق؛ ثم غسيلها مرتين 0 باستخدام وإعادة تعليقها في المحلول المنظم ‎FBS 961( FACS‏ في ‎(PBS‏ تم الكشف عن فلورة
‎Red pHrodo‏ باستخدام مرشحات بقنوات ‎.Texas Red‏ تم إجراء قياس مجهري للفلورة المشعة
‏بطريقة مشابهة. بعد تحليل ‎(FACS‏ تم نقل الخلايا المتبقية إلى شرائح زجاجية مقسمة إلى حجرات
‏وتصويرها بواسطة الفحص المجهري المقلوب. تم حساب متوسط قيم شدة الفلورة ‎WL‏ عن طريق
‏أخذ متوسط قيم الشد النسبية للفلورة لكل خلية فردية.
مثال 12. امتصاص ‎TTR‏ المعتمد على الجسم المضاد بواسطة خلايا 7117-1 تم ترقيم ‎TTR-F8TM/L110M‏ على نحو تساهمي باستخدام صبغة فلورية حساسة للرقم الهيدروجيني 011:000. يكون لعلامة الترميز ‎pHrodo‏ فلورة دنيا في ظل الرقم الهيدروجيني الفيزيولوجي؛ ولكن يتم تحسين الفلورة عند الابتلاع إلى البيئات ذات الرقم الهيدروجيني المنخفض الخاصة بِالخُوَيصِلاَتُ الالْتقامِيّة وبالتالي تعمل على تمييز الامتصاص الخلوي للجسيمات المرمزة. تمت إضافة الخلايا أحادية النواة 1117-1 إلى ‎TTR‏ المرمز ب ‎TTR-F87M/L110M) pHrodo‏ طبيعي أو غير طبيعي) بعد العلاج إما باستخدام الجسم المضاد 1408 أو الجسم المضاد نوع المقارنة بالنمط المماثل. تمت ملاحظة مستويات منخفضة من الفلورة إما باستخدام الجسم المضاد الذي تم إجراء حضانة له باستخدام 111 الطبيعي؛ ويعد إجراء حضانة للجسم المضاد الخاص 0 بالمقارنة باستخدام ‎TTR‏ غير الطبيعي. تمت زيادة الفلورة؛ بالرغم من ذلك؛ بعد إجراء حضانة ل 8 باستخدام ‎TTR‏ غير الطبيعي (شكل 17( مما يشير إلى أنه لا تتم بلعمة ‎TTR‏ غير الطبيعي بكفاءة في ظل ظروف قاعدية؛ بالرغم من ذلك تُظهر إضافة الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ ‏المطوي بشكل خاطئ على نحو نوعي بلعمة ‎TTR‏ غير الطبيعي. تم ‎Load‏ إيضاح البلعمة المعتمدة على الجرعة لجسيمات ‎TTR‏ المرقمة ب ‎pHrodo‏ اللبيفية 5 المتكدسة الكبيرة لكل من ‎mAbs‏ ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ (شكل 7ب). كان أقصى امتصاص معتمد على الجسم المضاد متنوعًا لكل ‎mAb‏ ل ‎TTR‏ مطوي بشكل خاطئ ‎5A1)‏ <1468 601<952)؛ مما يصل إلى مستوى مستقر عند تركيزات ‎mAb‏ فيما بين 10-5 ميكرو جرام/ملليلتر. قد تعكس قيم فعالية الجسم المضاد المتنوعة اختلافات في النمط المماثل والتغيرات المصاحبة في وظيفة المؤثر بين ‎mAbs‏ الأربعة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ. لم 0 توضح مجموعات المقارنة؛ متضمنة الخلايا غير المعالجة أو تلك المعالجة باستخدام نوع مقارن بنمط مماثل من 1801 فلورة يمكن الكشف عنها أو تحسينهاء على التوالي. مثال 13. تقييم الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ في نموذج فأر محوّر ‎Gly‏ ‏يتم إجراء الدراسات التي تتم في جسم الكائن الحي في نموذج ‎Jl‏ محوّر ‎Wily‏ متوافق مع البشر ‎V30M hTTR (Inoue et al., (2008) Specific pathogen free conditions prevent‏
‎transthyretin amyloidosis in mouse models.
Transgenic Research 17:8 17-826)‏ لتقييم فعالية الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ في الارتباط ب وإزالة 1111 المتكدس. يتم استيلاد ‎hi‏ محوّرة وراثيًا باستخدام الإجراءات القياسية وبتم تقييم مستويات ‎hTTR‏ )530 الخاصة بها بواسطة ‎ELISA‏ يتم استخدام ‎fal‏ التي لها مستوى مصل يبلغ 400-200 ميكرو جرام/ملليلتر من 11118 لدراسات فعالية لاحقة. تقوم المجموعة الأولى من الدراسات بفحص الترسيب الطبيعي ل 111118 في الفئران المحورة وراثيًا. يبدأ الكشف عن رواسب ‎hTTR‏ عند عمر 2 شهر وبتم التكرار كل 6-3 شهور بعد ذلك. بمجرد مشاهدة مستوى مقبول من التكدسات في الفئران المحورة وراثيًا؛ يتم بدء دراسات الفعالية. يتم تقسيم الحيوانات إلى ثلاث مجموعات علاج ‎/10=n)‏ المجموعة) ومعالجتها أسبوعيًا لمدة أربعة أسابيع باستخدام جرعة عبر البريتون من المادة 0 الناقلة؛ الجسم المضاد الخاص بالمقارنة (مقارنة بنمط مماثل» 10 مجم/كجم) أو جسم مضاد يكون مضادًا ل 1118 (10 مجم/كجم). بعد أسبوع واحد من آخر مرة علاج يتم قتل الفئران بأسلوب القتل الرحيم؛ تم تجميع الأنسجة ومعالجتهاء؛ ثم تلوينها لتقييم عدد وحجم رواسب ‎TTR‏ المتبقية. يتم استخدام طرق تحديد الكم والإحصائيات لتحديد درجة التصفية المشاهدة فيما بين المجموعات. في أسلوب بديل؛ يتم تحضير تكدسات 17718 معمليًا ثم حقنها في كُلى فئران محوّرة ‎Gy‏ لوضع 5 بذور ترسيب تكدسات جديدة. لقد حدد مقدم الطلب أن حقن هذه المستحضرات يمكن أن يُعجل من ترسيب تكدسات جديدة بطريقة يمكن التنبؤ بها. اعتمادًا على هذه الاستنتاجات؛ يتم تسكين الألم لدى الحيوانات؛ كشف ‎KY‏ اليُسرى وحقن مادة 11711 المكدسة مسبقًا في قشرة الكُلى. بعد فترة استشفاء ملائمة؛ تم تقسيم الفئران إلى ثلاث مجموعات علاج («-10/ المجموعة) وعلاجها أسبوعيًا لمدة من أربعة إلى ثمانية أسابيع باستخدام جرعة عبر البربتون من المادة الناقلة؛ الجسم 0 المضاد الخاص بالمقارنة (مقارنة بنمط مماثل» 10 مجم/كجم) أو جسم مضاد يكون مضادًا ل 118 )10 مجم/كجم). بعد أسبوع واحد من آخر مرة علاج يتم قتل الفئران بأسلوب القتل الرحيم؛ تجميع الكُلى ومعالجتهاء ثم تلوينها لتقييم عدد وحجم رواسب ‎TTR‏ يتم استخدام طرق تحديد الكم والإحصائيات لتحديد درجة التغير المشاهدة فيما بين المجموعات. مثال 14. تقييم الأجسام المضادة ل ‎TTR‏ المطوي بشكل خاطئ في نموذج غرس ‎Matrigel‏
لقد حدد مقدم الطلب أنه يمكن تعليق 1111# المكدس مسبقًا في ‎Matrigel (BD Bioscience,‏ ‎Cat #354263)‏ السماح له بالتصلب ثم وضعه في فتران تحت الجلد. عند أريعة أسابيع بعد الغرس؛ حافظ الغرس ‎Matrigel‏ على بنيته وكان 1111 المكدس لايزال موجودذًا في الغرس. علاوة على ذلك؛ تم احتمال الغرس بصورة جيدة بواسطة الفئران وكانت الأجسام المضادة ل ‎hTTR‏ قادرة على اختراق والارتباط بالتكدسات المعلقة في ‎(Matrigel‏ اعتمادًا على هذه الاستنتاجات؛ يتم ‎shal‏ ‏دراسة فعالية الجسم المضاد. يتم تسكين الألم لدى الحيوانات ووضع غرس محتوي على ‎hTTR‏ ‏مكدس مسبقًا معلق في ‎Matrigel‏ في فتئران تحت الجلد. بعد فترة استشفاء ملائمة؛ تم تقسيم الفئران إلى ثلاث مجموعات علاج ‎[107n)‏ المجموعة) وعلاجها أسبوعيًا؛ لمدة من اثنين إلى أريعة أسابيع باستخدام جرعة عبر البربتون من المادة ‎(ABU‏ الجسم المضاد الخاص بالمقارنة (مقارنة 0 بنمط مماثل؛ 10 مجم/كجم) أو جسم مضاد يكون مضادًا ل ‎hTRR‏ )10 مجم/كجم). بعد آخر مرة علاج؛ يتم قتل الفئران بأسلوب القتل الرحيم؛ تجميع الجلد المحتوي على الغرس ومعالجته؛ ثم تقييم ‎hie‏ رواسب ‎TTR‏ المتبقية باستخدام الطرق الهيستولوجية والبيوكيميائية. يتم استخدام تحليل
تحديد الكم والإحصائيات لتحديد درجة التصفية المشاهدة فيما بين المجموعات.

Claims (1)

  1. عناصر الحماية 1- جسم مضاد متوافق مع البشر ‎humanized antibody‏ يرتبط بترانس ثيرتين ‎transthyretin‏ يتضمن منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة بمتوالية رقم: 11 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة بمتوالية رقم 19( أو منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة بمتوالية رقم: 65 ومنطقة متغيرة بسلسلة خفيفة ناضجة بمتوالية رقم 76
    2- الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقًا لعنصر الحماية 1 حيث يحتوي على نوع مشابه من النوع ‎IgGl‏ ‏البشري ‎.human IgG1 isotype‏ 3- الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقًا لعنصر الحماية 1 حيث يحتوي على نوع مشابه من النوع 1802 0 البشري أو 1804 البشري. 4- الجسم المضاد وفقًا لعنصر الحماية 1؛ حيث يكون عبارة عن شظية ربط اختيارياً حيث تكون شظية الريط ‎binding fragment‏ عبارة عن جسم مضاد بسلسلة فردية ‎«Fab «single-chain antibody‏ أو شظية ‎Fab’2‏ ‏15 ‏5- الجسم المضاد وفقًا لعنصر الحماية 1 حيث يتم دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة ‎mature light chain variable region‏ مع منطقة ثابتة بسلسلة خفيفة ويتم دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ مع منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة. 0 6- الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقًا لعنصر الحماية 5 حيث تكون المنطقة الثابتة بالسلسلة الثقيلة عبارة عن صورة طفرة من منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة لإنسان طبيعى أدت إلى خفض الارتباط بمستقبل ‎Foy‏ بالنسبة إلى المنطقة الثابتة بالسلسلة الثقيلة للإنسان الطبيعى. 7- الجسم المضاد ‎Ws antibody‏ لعنصر الحماية 5» حيث تكون المنطقة الثابتة بالسلسلة الثقيلة 5 خاصة ‎gall‏ المشابه 01ع1» ‎Cua Glad)‏ يتم دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الثقيلة الناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ مع منطقة ثابتة بسلسلة ثقيلة بها المتوالية الخاصة بالمتوالية
    رقم : 103 مع أو بدون الليسين الموجود على الطرف ‎Ss ssl‏ يتم دمج المنطقة المتغيرة بالسلسلة الخفيفة الناضجة ‎mature light chain variable region‏ مع منطقة ثابتة بسلسلة خفيفة بها بيان التتابع الخاصة ببيان التتابع رقم: 104 أو 105. 8- تركيبة صيدلية ‎pharmaceutical composition‏ تشتمل على الجسم المضاد ‎Wy antibody‏ لعنصر الحماية 1 ومادة ‎dala‏ مقبولة ‎.pharmaceutically acceptable carrier Wasa‏ 9- حمض نووي ‎nucleic acid‏ أو أحماض نووية ‎nucleic acids‏ يقوم بتشفير السلسلة الثقيلة ‎encoding the heavy chain‏ والسلسلة الخفيفة الخاصة بجسم مضاد ‎light chain of an antibody‏ كما هو موصوف في عنصر الحماية 1؛ اختياريا به تتابع تشتمل على أية واحدة من المتواليات أرقام: 50 52 92 و 96 60- ناقل تعبير وراثي ناتج عن ‎sage‏ الاتحاد الجيني ‎recombinant expression vector‏ مشتمل على الحمض النووي ‎nucleic acid‏ وفقًا لعنصر الحماية 9 أو نواقل تعبير وراثي ناتج عن عودة 5 1 الاتحاد الجيني ‎(aida recombinant expression vector‏ على أحماض نووية ‎nucleic acids‏ 4 لعنصر الحماية 9. 1- خلية عائلة ‎host cell‏ تم تحويلها باستخدام ناقل التعبير الوراثي الناتج عن عودة الاتحاد الجيني ‎Gy recombinant expression vector‏ لعنصر الحماية 10.
    2- طريقة لإنتاج جسم مضاد ‎Wy method of producing an antibody‏ لعنصر الحماية 1؛ تشتمل الطريقة على: (أ) استنبات الخلايا ‎culturing cells‏ المحوّلة ذات الأحماض النووية ‎nucleic acids‏ يقوم بتشفير السلسلة الثقيلة ‎encoding the heavy chain‏ والسلسلة الخفيفة الخاصة بجسم ‎light chain of alias‏ ‎can antibody 25‏ بحيث تفرز الخلايا الجسم المضاد ‎cells secrete the antibody‏ (ب) تنقية الجسم المضاد ‎antibody‏ من أوساط مزرعة ‎.cell culture media WAY‏
    مسبم ا ا لم سسبسس. 40 30 20 180
    ف خط( 1 4 ‎RS AAA AAA Mi‏ ا 2 للعو و5 ‎hi‏ ب 1 0955977 ‎TNEWAROTPE 42‏ ا د ا ا ا ا | 8 13555 42 جوع و توااع ‎GES LELSCAASETTPS‏ و 127055 نكو ‎SY EMENVROARS 42‏ 03575 770753370730375 با ‎BRACOZ114‏ ‎Sond SUGLONREEELYEPUGRLELE CARS FSS Ta ROUROEFD 42‏ خوج تعفقة 42 #عم و53 120017536607093 3351 ‎BUDLVESGEGLVEPIGSLELSCARSERIPSSUINSHVROARS 42‏ 95 ‎igi ks PESTIMINVROTEE 43‏ ل ‎HushSYHeZh‏ ‏42 ا ‎SI‏ دكن ب 0 8 ل ل ل قي 55قد3 ‎VRP GOST IL SORASG PTS SYTHEWVRQTRS 42‏ 0 12093051733 2 ممعمموع 757 10 5254 ‎TE ai G 42‏ ل ا ل 2705 229254 ‎HuIDSVEYS BVQLVESCEGLVOPAGSIALEN MASSER TFS SYTHENVROTEE 3‏
    EV QLVESCOGLYOPAGSLALS CAASEE TFS SY TUBHVROTPE
    80 70 880 50 4 زا ا 1 3 ‎BEG 8 0: 1 10077 TERGGOGRTYYEDTYRGREFTISHDNARNTLYLOME 4‏ 1 ‎MOK B® § RRLEWVAS TENCGERPYYRDTVELGENPISRDNARUTLYL.OME Bd‏ 1 وج لأمسصوروز باج ضعي ال لب وبق مح 7 1155357 مدي ‎ro‏ 44م ‎TY 75030 4‏ لا وا للق امت لين دتمم 84“ لوجم وح جح ا اخ رطضا انوج بارج تقر تتمتق 335 ‎RusSnavey2 HOLELUAR TENE P TY YRDTURCRPTPREDBANNSLYLOSN 4‏ ‎YLOME Bd‏ مت ‎HuiDavevibh ERLELIAR IENSCETTYYPRTVRSRFTISR‏ ‎ISHSGDTTYYRPDTURGHE TRSRDNAKNSLYLOSN 4‏ ل اد ا د ‎RDTVESREPISRDNB ENTLY LOOMS 84‏ بدو وو 751155 ال لخت متتل ‎HOS DSuReik‏ ‎PST VRGRITISRONARNSLYLOSN 4‏ ومو 201557732739 4 5ف ‎ERLELVAE TENSEI TYYPOTVRGRITISEDNSRNTLYLOMS 4‏ حال لوب قت لي ‎ERLELVAR TENSGETTYIYRDTVEGRITISRINAKNTLULOMN 4‏ 3057 شكل ‎yy‏
    108 118 129
    ‎Fl 3‏ 6 ا ‎tye ei‏ نجي ليه لمجا اج راج لج ا : مسو ب سح أت م جيب 3 3 فيد ‎MITSYH FLESEDTARVYCARRYYROCOVASWRTOVNOPRTIVIVEE‏ و 3 "0 133 جار عمق بم و يجبي .كيه ل 855577 1550-81 ‎OVS TAR OF FJ‏ موا 1ر ...اب ا ‎IMO HE 1 SLESEDTAMEVCVRHEY‏ ‎YCARBEQUSRY VY YYOMDUNGQUTIVIVES 0 4 r £3‏ لهات ‎us‏ 125002114 ‎ARKRI484 and SLESELTAMY YOARLY YOYR EY Fw won DYHUEDRTMVTVES 120 85 1‏ بج ‎i>‏ 4 5# لا > لجعو 0 وجول اال 315177 2905 دج 6 0-4 تاد فاضا تبثت الات ا 15 ‎Huns EYED BLREEDTAMYYCARNYY YOGOYROHEFDVIGOETPLUTVEE 4 oF)‏ ‎HuSDSVHY LIRABRTAVY VCAREY VYRGCYROWFFINMGOATIVIVES 4 nF)‏ ) 3 1{ 4 808 ياي ممم موت الاعف الث 8555 11490513 رج ‎LLRAEDDAVYVCARNYYYGROYSGWIFDVHGRGTIVEVSS 12a {vv‏ 4 3 رج ‎HuSDSVHY LR SIESENTANYYCARRYYYRGGUAOWFTDUMNGUGTILVIVES 128 ov‏ زج ‎or‏ ل4قة ‎HaInSVHYS LORABDYAVY YCARNYYYORAYCONPEDVROQOYIVIVES‏
    ‎g § 1: ‏ل‎ &
    ‏ششل ‎١‏ ؟
    ال ع ل ا ل 30 20 3 ‎MINE STMT GAAP STEVE PO REVS TCHS SHEE HSRENFTIW 40‏ ‎INU DIVHPOARSEVEVIPLREVS ISCRESRSLLESRENT RIN 40‏ ‎LY SNGYRYIUN 40‏ ونه 37 012111057872777 با ‎ABCEEND‏ ‎HuSDSVIN] DIVMPOSELEIPVIPCHPASTSCRSSHOLLESHORT YL 40‏ ‎OME PLATT PG 528556 ELAN 48‏ 3895572 44 5210511818285 3 د38 ‎ISCRSSRSLLNSNOWTILYN 40‏ اوسا ورج عمو 1ت ‎HusDEVIUY‏ ‏40 011035195737833 209055 0700111067لاللانانالالانلت اناا ‎A CH‏ 88 70 880 58 ‎MODEL | LORE GCE POLL I TRVER IASC VE DRPS OS GS OTAT TIRE 80‏ ‎TMI I FLONFGUS POLL YEMEN IASGVPDRFSGOGSATARTIRE BO‏ ‎wd LOE EGOS ROLL T HS GSNRASGVE DRPSGSCEGTDE 0‏ 250565952 80 اع ي_ وو ومو و7 مل لجالا رتو ع قمع وا 81 ‎SOS FOLLI YRVSNLASCVP DEF SCS GSETDETLET 80‏ ا 305 وق ‎SRESGEGSATDRTLRY‏ اجا لات الا س0 710105 333 88 اعم عوج ع اج اج اال لوو لوا 954 80 اج لع ا ممه م عع بعت قتي لاشو لقو فقوا كدت فو مد م ل ‎SAAN‏ ا ال ا ست 100 95 )8 405 122 لس اا 5 ربج ,0 112 6 كاي رباع لعن برد اجن 8 ا 5544542 ال زج 44 112 سدع مومه فويس ب لوانت سا2 با 258055952 زم © 132 لاس ت_ جوج ضع 58575 0305 ا ‎i‏ 112 5577704709 2750 وج ‎SRVEREDVOGVYYOMOHLEYPLOFGOSTRLEIR 112 OY‏ قط ‎Hud‏ ‏رم © تدجس تت جا و الا وا مارو ممع دمج ‎&r‏ 112 2827377007600 م8 > ا
    بود ايا ا اه ااا ‎J‏ لاما الات الما ل ااا ‎it 28 3 44‏ 42 ا ا ا ا ا ا ا ا 42 و5 0935037777 0 0 ‎AMEVROTER 47‏ 5777 21350535 با 88530430 42 17650 لجو مام مات سمج قار ال ماما ب اا لأا با 5553824934 42 ج07 775170357657775 الا ا ‎Hud‏ ‏42 17770 روات فضا ‎EVILVESGOOLVQEFGEELILE‏ 3 2 42 كه وج وو ضيه وست 27009000 20143 ا ا ا د ا ل 89 730 £4 50 ل ل ل ا لم 4 لا ‎iL AGEVH FRLEGVARTRERERTITY ROTOR TI‏ ‎HOE By ERLEWYAS INNGGORTY YFDTVEGRFTISROUARIITLYLONS 4‏ ‎B84‏ 70773013 179275371 ب 82030415 4 نض 57590575770 4م 84 ا اا ا ل ات يا لاطت ا دا ‎RRERLC AG RRLEL VAR TRNSEDTIY YPRTVEGRPTISRDRARNTL LING #4‏ ‎Rul4ERVHYI ERLELVARINRSCDTTY YPDIVKERFT TERUNARNTLYLONY 84‏ مااع جاه الأ اجا ‎EN‏ ‏120 2130 100 8 لجن سي د م باحس حل طح > ‎RA ERA AA‏ ا ا خا ل ل 0 © 124 61700707772738 33 51373 8 23 ‎IMOR BY SUBEROTAMEYOVRARRY Towns So TENDYHROGYTYIVES 118 YE}‏ ‎we STRAEDTAVYYCRARDREIDATAOVARFDEMCOOTIVIVER 124 OF 32‏ 82030410 ع ‎fb‏ 120 86 موق رح . <> عر احمالاي ا ‎SLESEDTAMYYLARLY‏ 4 ولتق 0 دا 1234 5051770107755 1 24 0 م 124 31701000177005 3323لا ‎SLESEDTAMVECARHY‏ 2012 رج جم 144 ‎SLAABDTAVY YCMEYY YOCOYCORTFINMGHGTIVIVIS‏ 3 شكل ‎iv‏
    18 2p 30 40 043377 DIVHTOAAPSVPVIPEESVS ISCRONKSLIHSNGNTILIN 40 IMI ‏ب‎ DIVMPOARPSVPVIPRESVEISURSSKSLLASHENTYLIN 40 22571374 ‏يه‎ DIVMIQIPLSLPVIPOESAS IECRESNSLRNYSSYTYION 40 380568952 ‏امعد عه 021705755303005 ب‎ 40 3 101170553505755 40 142 571117058217705 7505115677 40 0143 DIVHTOSPLELPVIPREPASISCRIDKSLLUSHENTYLIN 40 a et She a oa at 88 70 88 014 ‏ل ا ل‎ 88 IM Ld FLORPOQSPLLLIYRMSNLASOVPDRISHECSGTARDLRY 80 25271374 ¥LORPEUSPOVLIYLOSHRASGVPDRISESGEGTRITLRY 0 25055952 YLORPEDSPOLLI YBESNRASEVPDRFSASAIGTORTLET 80 HuldGBVLvL FLOKPGOSPOLLIVRVSRLASEVFDRFSESGSEDANTIRY 82 ‏ان‎ 110157731155170 53353970757 40 Hil ‏ل ا موادا‎ PALL ‏ل ال ا‎ SRES SS ‏ا‎ 88
    ‎it 0‏ 140 38 لخ 0 كرد ج77 تق تله 3 0( 113 سدس عمو رسع بس اوس ا لوج نظت ‎Xd‏ 30 ‎OY)‏ 113 اا تتا عو فقوي اا ث5 با 2571374 رج © }11 مس000 موي اباي رتل3 ا ‎ARCEEISD‏ ‏رخ ‎SRYSARDVSUYFOMORIEYPLIFGOOTRIATIRR 113 (vv‏ يي ‎HUl4GEYLY2 SRVEABOVOVYYOMQHIEYPLIFGOOTREEINR 113 (ve di‏ بج ‎SRVBARDVEVYPOMORIEBYPLIFEQETHRIEIRR 112 (iv‏ 2014687 i ¥ p Foul 2 ‏إْ ذا ان ل ااا‎ ‏ؤ‎ ‎ٍ ٍ Ww | 5 {8 AEE a.
    Ty Pe Baal i BF : AE 0 PAV ENE ‏8ه‎ ‎١ >> 60 ‏اال‎ ٍ 2 ِْ # 2 7 1 0 8 4 % SN # } 0 ‏#ن‎ "© ٍ JO ‏س‎ )' ‏رخ‎ i EE 2 - il ® i ‏التمتظلي‎ Ear ‏بست ا اتيس وني مم وييين موسي وو ا‎ ‏ا‎ w¥ ERR + eo hx 5 % You ARE £3 ‏شكل ؟أ‎ 0 8 hea ‘ eps y meet : ً vd ! ; Co ! i Cm =o (AGE 8 ‏آ ا‎ Cees ‏حي : لحم‎ 0 5 3 | ro : | ad 205 0 3 ‏إ ا قب‎ 1 ‏ا‎ ‎shea Le eet onl wee SS REE 3 Ya LER el ‏شكل “أب‎ ry : YS
    ب ‎CO TE (a‏ 0 1 ٍ 0 ا ٍ 0 0 ‎i‏ 0 ‎at : i‏ ‎a bo‏ ‎i i‏ ‎or‏ ب" ‎Ya i‏ ‎fe‏ ; 3 الجا ا ‎Fe‏ 5 ا ال ‎Le ARSE‏ ‎i SE‏ ‎Pa‏ ; ‎i Pn‏ ‎ERS oT Ea‏ ا 2 + ‎|e A fad‏ ‎An PLE‏ اميتي ‎Ff tet‏ ‎A Be‏ 2 ا ‎pnd Ay‏ & م ‎I | PE EE‏ حك ‎Bd fee &‏ لسع الس اس ال ‎VE A ee +‏ مس ماس ااا اللا ل ل ‎RY] 5‏ اد ‎RT EF‏ ‎abs GE 801 | 4 i.‏ شكل ‎fg‏ ‎LS‏ 0 ‎$d ny !‏ ! : 5 3 3 ‎N i & LI‏ ال ا ‎Ea oft‏ * 3 4 ‎ae P 3 PRE 8‏ ‎i 0 +4 5 oF 3 & 1‏ 5 % ل ‎Fp‏ ‏| 1 ٍ , 0 3 : ‎EIR LJ & = 1‏ ‎i 1 1‏ 1 1 5 1 0 1 ا برذ : ا ‎W 2 5 3 NC‏ ‎io [IOSIRROE ne 1‏ 8 ا متم ‎i‏ ‎aa doubt Sani i r 3 a !‏ لج ‎B‏ 2 ‎oo Jha >‏ امس واوا يا دا اناا ا امس امسن ‎A‏ ‎AR ay SE REPL TIN‏ كيد #غرء ‎SR‏ ‏* ‎a‏ ا 1 ‎x‏ 4 ! = = شك “ ‎T‏
    'ٍ ًْ : مممسسسسسستسس تب يقي ‎RR‏ ‏|8 و فى ‎y N ١‏ كا لله 3 م أ 0 الوا لأسي 8 1 ‎i \ 1 HE‏ ‎Si SEEN‏ 0 ‎Fo 4 NAD ST “EN SNE‏ بحا 5 ‎LIN‏ ا لزج اااي 0 ا ‎uf Me, 0 1 i‏ * الاي ا ا : ‎B ] H “4 : fe ge‏ 3 8 1 1 1 ‎iN 1 ] [ 2 1 Ae NS 4 1 x N $e‏ 2 ل 0 "0 مل د ‎Ara goe ae SINGIN‏ قوط الى 5 اال اد 2 ‎Wiz‏ حت 8 0 022 ‎YS TY‏ وجو وو في مجحب اليد د ا ل ا د ‎z‏ ج 0 | سس ا ‎h‏ ‏شكل يا شكل ‎jo‏ ‎wd ¥‏ ‎o Ba‏
    § ‏ان‎ ‎2 Yer we 4 oy H HF ‏ل"‎ : 2 RS I~ rd % ‏مع‎ ‏لا‎ i [- SY 4 ‏ا ِ 4 ب‎ i J 0 eli) | 8 NINN 8 as 22 Ld AFAR LINER EW iN PEAY ‏كي‎ Ya Th vy ERE Yo uy fond r- ¥ 8 5 ‏شكل‎
    ‏ا‎ ٍ ‏ا‎ ‏8ن‎ ‎9: ‏اخ‎ ‎1 0 | : ES 1 H 1 ¥ . | > 3 ‏د‎ ‎ْ ‏الح‎ ‎i : RES ! 3 np me 1 8 uy png H wn } } 1 Lo 1 > 3 7 ‏ب 1 ل‎ ; 2 GE | ‏أ ل ا سرض يل“‎ I LA ‏ال‎ HA i TIR TIR-FE7ML OM I T-Sh. i { ‏ا م‎ ‏سس‎ ews ‏ل‎ eee) ip 14GE Tod EB | om GAT mye dl J SE — a APR RT 801 : a CT tr 7 | == oF Bes I TE ‏يب امس‎ JN San ‏صفر‎ * £ +4 A You oo Fy « - ‏شكل لاب‎ & ٠ ‏شكل‎
    لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا ‎Sued Authority for intallentual Property‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § 8 ‎Ss o‏ + < م ‎SNE‏ اج > عي كي الج ‎TE I UN BE Ca‏ ‎a‏ ةا ‎ww‏ جيثة > ‎Ld Ed H Ed - 2 Ld‏ وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. ‎Ad‏ ‏صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ v=‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA517382002A 2015-01-28 2017-07-27 أجسام مضادة لترانس ثيرتين SA517382002B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562109002P 2015-01-28 2015-01-28
US201562266556P 2015-12-11 2015-12-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA517382002B1 true SA517382002B1 (ar) 2021-11-25

Family

ID=55299694

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA517382002A SA517382002B1 (ar) 2015-01-28 2017-07-27 أجسام مضادة لترانس ثيرتين

Country Status (31)

Country Link
US (1) US20160251418A1 (ar)
EP (2) EP3250592B1 (ar)
JP (2) JP6748086B2 (ar)
KR (2) KR102598180B1 (ar)
CN (1) CN107406499B (ar)
AU (1) AU2016210888C1 (ar)
CA (1) CA2974912A1 (ar)
CL (2) CL2017001924A1 (ar)
CO (1) CO2017008476A2 (ar)
CU (1) CU24480B1 (ar)
DK (1) DK3250592T3 (ar)
EA (1) EA036080B1 (ar)
ES (1) ES2934656T3 (ar)
FI (1) FI3250592T3 (ar)
HR (1) HRP20221538T1 (ar)
HU (1) HUE060878T2 (ar)
IL (1) IL253633B (ar)
LT (1) LT3250592T (ar)
MX (1) MX394170B (ar)
PE (1) PE20180217A1 (ar)
PH (1) PH12017501318B1 (ar)
PL (1) PL3250592T3 (ar)
PT (1) PT3250592T (ar)
RS (1) RS63906B1 (ar)
SA (1) SA517382002B1 (ar)
SG (2) SG11201706124VA (ar)
SI (1) SI3250592T1 (ar)
TW (2) TWI786505B (ar)
UA (1) UA122142C2 (ar)
WO (1) WO2016120810A1 (ar)
ZA (1) ZA201705663B (ar)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10633433B2 (en) 2015-01-28 2020-04-28 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
US9879080B2 (en) 2015-01-28 2018-01-30 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
US10464999B2 (en) 2015-01-28 2019-11-05 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
JP7076711B2 (ja) * 2016-07-02 2022-05-30 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
WO2019071206A1 (en) * 2017-10-06 2019-04-11 Prothena Biosciences Limited METHODS OF DETECTING TRANSTHYRETIN
MX2020003041A (es) 2017-10-06 2020-10-05 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos anti-transtiretina.
MX2020005433A (es) * 2017-11-29 2020-08-27 Prothena Biosciences Ltd Formulacion liofilizada de un anticuerpo monoclonal contra la transtirretina.
US20210400932A1 (en) 2018-11-09 2021-12-30 Neurimmune Ag Patient-derived amyloid xenograft non-human animal model
EP4121766A1 (en) 2020-03-18 2023-01-25 AL-S Pharma AG Misfolded sod1 assay
MX2022014223A (es) 2020-05-12 2023-04-14 Neurimmune Ag Terapia de combinacion para amiloidosis de la ttr.
US20230340089A1 (en) * 2020-05-14 2023-10-26 City Of Hope Smc1a antibodies and uses thereof
JP2023548005A (ja) * 2020-10-28 2023-11-15 ノヴォ ノルディスク アー／エス 抗トランスサイレチン抗体およびその使用方法
CN113845593B (zh) * 2021-10-27 2023-03-10 福州迈新生物技术开发有限公司 抗α-SMA蛋白单克隆抗体、细胞系及其应用
JP2024544924A (ja) * 2021-11-12 2024-12-05 エーディーアールエックス， インコーポレイテッド トランスサイレチン（ｔｔｒ）単量体結合抗体
CA3239708A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 Aubin MICHALON Novel potency assay for antibody-based drugs and useful means therefor
JP2026505138A (ja) * 2022-10-19 2026-02-12 アイバイオ， インク． ケモカイン受容体８（ｃｃｒ８）抗体
EP4619431A1 (en) 2022-11-15 2025-09-24 Neurimmune AG Methods for treating or preventing transthyretin-mediated amyloidosis
TW202440636A (zh) * 2023-03-21 2024-10-16 美商傳記５５有限公司 Ｃｄ１９／ｃｄ３８多特異性抗體
EP4713354A1 (en) 2023-05-19 2026-03-25 Neurimmune AG Novel immunotherapy for musculoskeletal disorders and conditions
WO2025104243A1 (en) 2023-11-15 2025-05-22 Neurimmune Ag Anti-transthyretin antibody, compositions comprising said antibody and methods for treating or preventing transthyretin-mediated amyloidosis
WO2025125544A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Novo Nordisk A/S Stable liquid formulations
WO2025238147A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Neurimmune Ag Maintenance treatment of cardiac ttr amyloidosis using anti-transthyretin antibodies

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH652145A5 (de) 1982-01-22 1985-10-31 Sandoz Ag Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen.
US4634666A (en) 1984-01-06 1987-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Human-murine hybridoma fusion partner
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
EP0832981A1 (en) 1987-02-17 1998-04-01 Pharming B.V. DNA sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion
AU600575B2 (en) 1987-03-18 1990-08-16 Sb2, Inc. Altered antibodies
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5633076A (en) 1989-12-01 1997-05-27 Pharming Bv Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
ES2087997T3 (es) 1990-01-12 1996-08-01 Cell Genesys Inc Generacion de anticuerpos xenogenicos.
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
JPH06508511A (ja) 1990-07-10 1994-09-29 ケンブリッジ　アンティボディー　テクノロジー　リミティド 特異的な結合ペアーの構成員の製造方法
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5858657A (en) 1992-05-15 1999-01-12 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
US5871907A (en) 1991-05-15 1999-02-16 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
EP0940468A1 (en) 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
EP0746609A4 (en) 1991-12-17 1997-12-17 Genpharm Int NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
DK0672142T3 (da) 1992-12-04 2001-06-18 Medical Res Council Multivalente og multispecifikke bindingsproteiner samt fremstilling og anvendelse af disse
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
US5914349A (en) 1994-01-10 1999-06-22 Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. Compositions containing and methods of using 1-aminoindan and derivatives thereof and process for preparing optically active 1-aminoindan derivatives
US5786464C1 (en) 1994-09-19 2012-04-24 Gen Hospital Corp Overexpression of mammalian and viral proteins
DE19539493A1 (de) 1995-10-24 1997-04-30 Thomae Gmbh Dr K Starker homologer Promotor aus Hamster
US5834597A (en) 1996-05-20 1998-11-10 Protein Design Labs, Inc. Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same
US6114148C1 (en) 1996-09-20 2012-05-01 Gen Hospital Corp High level expression of proteins
US5888809A (en) 1997-05-01 1999-03-30 Icos Corporation Hamster EF-1α transcriptional regulatory DNA
MXPA01007845A (es) 1999-02-05 2004-06-22 Samsung Electronics Co Ltd Metodo para la recuperacion de la textura de imagenes y aparato para el mismo.
PE20020574A1 (es) 2000-12-06 2002-07-02 Wyeth Corp Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta
IL166244A0 (en) 2001-07-12 2006-01-15 Jefferson Foote Super humanized antibodies
AU2002361886A1 (en) 2001-12-28 2003-07-24 Abgenix, Inc. Antibodies against the muc18 antigen
JP4344325B2 (ja) 2002-11-29 2009-10-14 ベーリンガー インゲルハイム ファルマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト 新規なネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子及び高生産組換え細胞の選抜方法
DE10338531A1 (de) 2003-08-19 2005-04-07 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Reklonierung von Produktionszellen
CA2578400C (en) 2004-11-10 2014-01-14 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Use of flow-cytometric analysis to optimize cell banking strategies for cho cells
WO2007124345A2 (en) 2006-04-21 2007-11-01 The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Beta-amyloid pet imaging agents
US20080124760A1 (en) 2006-07-26 2008-05-29 Barbara Enenkel Regulatory Nucleic Acid Elements
DK2099823T4 (da) 2006-12-01 2022-05-09 Seagen Inc Målbindingsmiddelvarianter og anvendelser deraf
SI2126093T1 (sl) 2007-03-02 2013-01-31 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Izboljšanje priprave proteinov
EP2031064A1 (de) 2007-08-29 2009-03-04 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG Verfahren zur Steigerung von Proteintitern
FI20115165A0 (fi) * 2011-02-21 2011-02-21 Polysackaridforskning I Uppsala Ab Terapeuttisia ja diagnostisia menetelmiä
US9534048B2 (en) * 2012-08-24 2017-01-03 University Health Network Antibodies to TTR and methods of use
EP2953970A4 (en) * 2013-02-08 2016-06-29 Misfolding Diagnostics Inc TRANSTYRETIN ANTIBODIES AND USES THEREOF
US20160168235A1 (en) * 2013-07-19 2016-06-16 Board Of Regents Of The University Of Texas System Transthyretin amyloid-selective and polyreactive catabodies
WO2019071206A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 Prothena Biosciences Limited METHODS OF DETECTING TRANSTHYRETIN

Also Published As

Publication number Publication date
CL2022003027A1 (es) 2023-06-09
EA201791712A1 (ru) 2017-12-29
JP7028923B2 (ja) 2022-03-02
CU24480B1 (es) 2020-03-04
PH12017501318A1 (en) 2018-02-05
KR102598180B1 (ko) 2023-11-03
AU2016210888A1 (en) 2017-08-10
SG10202101763VA (en) 2021-04-29
CO2017008476A2 (es) 2018-01-16
BR112017016330A2 (en) 2018-04-03
CN107406499A (zh) 2017-11-28
TWI718122B (zh) 2021-02-11
NZ733896A (en) 2024-11-29
CU20170097A7 (es) 2018-03-13
JP2018506277A (ja) 2018-03-08
KR20230156164A (ko) 2023-11-13
RS63906B1 (sr) 2023-02-28
PT3250592T (pt) 2022-12-28
TW202124436A (zh) 2021-07-01
IL253633B (en) 2021-06-30
US20160251418A1 (en) 2016-09-01
KR20170106469A (ko) 2017-09-20
AU2016210888B2 (en) 2021-11-04
UA122142C2 (uk) 2020-09-25
EP4134379A1 (en) 2023-02-15
ES2934656T3 (es) 2023-02-23
AU2016210888C1 (en) 2022-06-02
ZA201705663B (en) 2018-08-29
WO2016120810A1 (en) 2016-08-04
LT3250592T (lt) 2023-02-10
HUE060878T2 (hu) 2023-04-28
JP6748086B2 (ja) 2020-09-02
SG11201706124VA (en) 2017-08-30
TW201632554A (zh) 2016-09-16
PE20180217A1 (es) 2018-01-31
MX394170B (es) 2025-03-24
PH12017501318B1 (en) 2018-02-05
JP2020185009A (ja) 2020-11-19
CL2017001924A1 (es) 2018-04-27
MX2017009806A (es) 2018-08-15
EA036080B1 (ru) 2020-09-23
IL253633A0 (en) 2017-09-28
CA2974912A1 (en) 2016-08-04
KR102677203B1 (ko) 2024-06-20
EP3250592A1 (en) 2017-12-06
FI3250592T3 (fi) 2023-01-13
SI3250592T1 (sl) 2023-03-31
EP3250592B1 (en) 2022-10-05
DK3250592T3 (en) 2023-01-09
CN107406499B (zh) 2021-10-22
TWI786505B (zh) 2022-12-11
PL3250592T3 (pl) 2023-06-19
HRP20221538T1 (hr) 2023-03-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA517382002B1 (ar) أجسام مضادة لترانس ثيرتين
US11912759B2 (en) Anti-transthyretin antibodies
JP7219928B2 (ja) 抗トランスサイレチン抗体
EP3250593B1 (en) Anti-transthyretin antibodies
US10906967B2 (en) Anti-transthyretin antibodies
US11267878B2 (en) Anti-transthyretin antibodies
WO2018007922A2 (en) Anti-transthyretin antibodies
HK40086865A (en) Anti-transthyretin antibodies
HK1240248A1 (en) Anti-transthyretin antibodies
HK1240248B (en) Anti-transthyretin antibodies
HK1240249B (en) Anti-transthyretin antibodies
HK1240247A1 (en) Anti‐transthyretin antibodies
HK1240247B (en) Anti‐transthyretin antibodies