SA516370751B1 - تركيبات تشمل مجموعات متغايرة من بروتينات xa لعامل تخثر آدمي تخليقي - Google Patents
تركيبات تشمل مجموعات متغايرة من بروتينات xa لعامل تخثر آدمي تخليقي Download PDFInfo
- Publication number
- SA516370751B1 SA516370751B1 SA516370751A SA516370751A SA516370751B1 SA 516370751 B1 SA516370751 B1 SA 516370751B1 SA 516370751 A SA516370751 A SA 516370751A SA 516370751 A SA516370751 A SA 516370751A SA 516370751 B1 SA516370751 B1 SA 516370751B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- protein
- fxa
- clotting factor
- light chain
- factor
- Prior art date
Links
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 title claims abstract description 115
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 title claims abstract description 115
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 title claims abstract description 114
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 58
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 441
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 427
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 272
- UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N gamma-carboxy-L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 118
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 claims description 42
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 claims description 42
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 claims description 35
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 28
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 22
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 20
- 101001030665 Dictyostelium discoideum GDP-L-fucose synthase Proteins 0.000 claims description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 16
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 16
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 15
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 14
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 11
- 230000035602 clotting Effects 0.000 claims description 11
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 10
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 claims description 9
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims description 8
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 claims description 8
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 claims description 8
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 102100033400 4F2 cell-surface antigen heavy chain Human genes 0.000 claims 2
- 101000800023 Homo sapiens 4F2 cell-surface antigen heavy chain Proteins 0.000 claims 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims 2
- 230000002947 procoagulating effect Effects 0.000 claims 2
- HJMIIBXYFPJZBP-UHFFFAOYSA-N 10-(2,3,4,5-tetrahydroxypentyl)-1h-pyrimido[4,5-b]quinoline-2,4,8-trione Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1N(CC(O)C(O)C(O)CO)C1=CC(=O)C=CC1=C2 HJMIIBXYFPJZBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010055167 CD59 Antigens Proteins 0.000 claims 1
- 102100022002 CD59 glycoprotein Human genes 0.000 claims 1
- 241000252095 Congridae Species 0.000 claims 1
- 101100216047 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gla-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 241001537210 Perna Species 0.000 claims 1
- 208000009989 Posterior Leukoencephalopathy Syndrome Diseases 0.000 claims 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 1
- 108090001015 cancer procoagulant Proteins 0.000 claims 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 claims 1
- 238000000675 plasmon resonance energy transfer Methods 0.000 claims 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 abstract description 57
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 abstract description 21
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 abstract description 21
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 abstract description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 273
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 155
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 155
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 64
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 61
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 43
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 description 38
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 102100035233 Furin Human genes 0.000 description 36
- 241000894007 species Species 0.000 description 32
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 31
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 31
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 30
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 30
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 description 28
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 27
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 25
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 16
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 15
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 14
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 14
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 14
- VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- ZWQVYZXPYSYPJD-RYUDHWBXSA-N Glu-Gly-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZWQVYZXPYSYPJD-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 13
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 12
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 12
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- 101100512078 Caenorhabditis elegans lys-1 gene Proteins 0.000 description 11
- NHMRJKKAVMENKJ-WDCWCFNPSA-N Gln-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NHMRJKKAVMENKJ-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 11
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 11
- FSNVAJOPUDVQAR-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-amino-2-[[2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NC(N)=NCCCC(N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O FSNVAJOPUDVQAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- FXKNPWNXPQZLES-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FXKNPWNXPQZLES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 10
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 10
- ZZZWQALDSQQBEW-STQMWFEESA-N Arg-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZZZWQALDSQQBEW-STQMWFEESA-N 0.000 description 9
- OEUQMKNNOWJREN-AVGNSLFASA-N Asp-Gln-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N OEUQMKNNOWJREN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 9
- CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CUQDCPXNZPDYFQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 9
- QADHATDBZXHRCA-ACZMJKKPSA-N Cys-Gln-Asn Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N QADHATDBZXHRCA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 9
- DZSICRGTVPDCRN-YUMQZZPRSA-N Cys-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)N DZSICRGTVPDCRN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 9
- KPENUVBHAKRDQR-GUBZILKMSA-N Cys-His-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KPENUVBHAKRDQR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 9
- POSRGGKLRWCUBE-CIUDSAMLSA-N Cys-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N POSRGGKLRWCUBE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 9
- IPHGBVYWRKCGKG-FXQIFTODSA-N Gln-Cys-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IPHGBVYWRKCGKG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 9
- XSBGUANSZDGULP-IUCAKERBSA-N Gln-Gly-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O XSBGUANSZDGULP-IUCAKERBSA-N 0.000 description 9
- WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N Glu-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 9
- SOEPMWQCTJITPZ-SRVKXCTJSA-N Glu-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N SOEPMWQCTJITPZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 9
- LWYUQLZOIORFFJ-XKBZYTNZSA-N Glu-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O LWYUQLZOIORFFJ-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 9
- AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N Leu-Val-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 9
- AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N Lys-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 9
- KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N Phe-Leu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 9
- IALSFJSONJZBKB-HRCADAONSA-N Pro-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N3CCC[C@@H]3C(=O)O IALSFJSONJZBKB-HRCADAONSA-N 0.000 description 9
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 9
- QYBRQMLZDDJBSW-AVGNSLFASA-N Ser-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QYBRQMLZDDJBSW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 9
- BVOVIGCHYNFJBZ-JXUBOQSCSA-N Thr-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BVOVIGCHYNFJBZ-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 9
- VUXIQSUQQYNLJP-XAVMHZPKSA-N Thr-Ser-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O VUXIQSUQQYNLJP-XAVMHZPKSA-N 0.000 description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 9
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 9
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 9
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- IICZCLFBILYRCU-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IICZCLFBILYRCU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N Asn-Lys-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 8
- GWTLRDMPMJCNMH-WHFBIAKZSA-N Asp-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O GWTLRDMPMJCNMH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N Cys-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 8
- BCWIFCLVCRAIQK-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ser-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O BCWIFCLVCRAIQK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 8
- FHPXTPQBODWBIY-CIUDSAMLSA-N Glu-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FHPXTPQBODWBIY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 8
- ALCAUWPAMLVUDB-FXQIFTODSA-N Glu-Gln-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ALCAUWPAMLVUDB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 8
- KRGZZKWSBGPLKL-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N KRGZZKWSBGPLKL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 8
- YUXIEONARHPUTK-JBACZVJFSA-N Glu-Phe-Trp Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N YUXIEONARHPUTK-JBACZVJFSA-N 0.000 description 8
- FVGOGEGGQLNZGH-DZKIICNBSA-N Glu-Val-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 FVGOGEGGQLNZGH-DZKIICNBSA-N 0.000 description 8
- KTNGVMMGIQWIDV-OSUNSFLBSA-N Ile-Pro-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KTNGVMMGIQWIDV-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 8
- RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N Leu-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 8
- KGCLIYGPQXUNLO-IUCAKERBSA-N Leu-Gly-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O KGCLIYGPQXUNLO-IUCAKERBSA-N 0.000 description 8
- VHFFQUSNFFIZBT-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N VHFFQUSNFFIZBT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 8
- UETQMSASAVBGJY-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 UETQMSASAVBGJY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 8
- PINHPJWGVBKQII-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N PINHPJWGVBKQII-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 8
- CUHGAUZONORRIC-HJGDQZAQSA-N Lys-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O CUHGAUZONORRIC-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 8
- LTAWNJXSRUCFAN-UNQGMJICSA-N Phe-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O LTAWNJXSRUCFAN-UNQGMJICSA-N 0.000 description 8
- NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 8
- HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N Ser-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(O)=O HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 8
- ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N Thr-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ASJDFGOPDCVXTG-KATARQTJSA-N 0.000 description 8
- QFHRUCJIRVILCK-YJRXYDGGSA-N Tyr-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O QFHRUCJIRVILCK-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 8
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 108010045397 lysyl-tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 8
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 8
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 8
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 8
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 8
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 8
- KTSZUNRRYXPZTK-BQBZGAKWSA-N Gly-Gln-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KTSZUNRRYXPZTK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 7
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 7
- 239000011022 opal Substances 0.000 description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 7
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 102400000069 Activation peptide Human genes 0.000 description 6
- 101800001401 Activation peptide Proteins 0.000 description 6
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- QQLBPVKLJBAXBS-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QQLBPVKLJBAXBS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- COVXELOAORHTND-LSJOCFKGSA-N Gly-Ile-Val Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O COVXELOAORHTND-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 6
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 6
- -1 Hexose hexose Chemical class 0.000 description 6
- QZAFGJNKLMNDEM-DCAQKATOSA-N His-Asn-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 QZAFGJNKLMNDEM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- USLNHQZCDQJBOV-ZPFDUUQYSA-N Leu-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O USLNHQZCDQJBOV-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 6
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 6
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 6
- 108010064997 VPY tripeptide Proteins 0.000 description 6
- ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N Val-Ala-Pro Natural products CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- SDUBQHUJJWQTEU-XUXIUFHCSA-N Val-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N SDUBQHUJJWQTEU-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 6
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 6
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 6
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 6
- 238000001437 electrospray ionisation time-of-flight quadrupole detection Methods 0.000 description 6
- 108010080575 glutamyl-aspartyl-alanine Proteins 0.000 description 6
- 108010037389 glutamyl-cysteinyl-lysine Proteins 0.000 description 6
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 6
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- ZXJZGWOMAFPSJH-DCAQKATOSA-N (2S)-1-[2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZXJZGWOMAFPSJH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 5
- FRFDXQWNDZMREB-ACZMJKKPSA-N Ala-Cys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FRFDXQWNDZMREB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 5
- KZXPVYVSHUJCEO-ULQDDVLXSA-N Arg-Phe-Lys Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KZXPVYVSHUJCEO-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 5
- VYZBPPBKFCHCIS-WPRPVWTQSA-N Arg-Val-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VYZBPPBKFCHCIS-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 5
- RLHANKIRBONJBK-IHRRRGAJSA-N Asn-Met-Phe Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N RLHANKIRBONJBK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 5
- KYQJHBWHRASMKG-ZLUOBGJFSA-N Asn-Ser-Cys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O KYQJHBWHRASMKG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 5
- QHAJMRDEWNAIBQ-FXQIFTODSA-N Asp-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QHAJMRDEWNAIBQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 5
- AEJSNWMRPXAKCW-WHFBIAKZSA-N Cys-Ala-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O AEJSNWMRPXAKCW-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- DZLQXIFVQFTFJY-BYPYZUCNSA-N Cys-Gly-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O DZLQXIFVQFTFJY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- CGVWDTRDPLOMHZ-FXQIFTODSA-N Gln-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CGVWDTRDPLOMHZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N Glu-Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 5
- MOJKRXIRAZPZLW-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MOJKRXIRAZPZLW-WDSKDSINSA-N 0.000 description 5
- BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 5
- GBMSSORHVHAYLU-QTKMDUPCSA-N His-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N)O GBMSSORHVHAYLU-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 5
- NAFIFZNBSPWYOO-RWRJDSDZSA-N Ile-Thr-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N NAFIFZNBSPWYOO-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- YRRCOJOXAJNSAX-IHRRRGAJSA-N Leu-Pro-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YRRCOJOXAJNSAX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 5
- HGAJNEWOUHDUMZ-SRVKXCTJSA-N Met-Leu-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O HGAJNEWOUHDUMZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- GNFHQWNCSSPOBT-ULQDDVLXSA-N Pro-Trp-Gln Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O GNFHQWNCSSPOBT-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 5
- TWLMXDWFVNEFFK-FJXKBIBVSA-N Thr-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O TWLMXDWFVNEFFK-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 5
- GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N Thr-Glu-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 5
- FNWGDMZVYBVAGJ-XEGUGMAKSA-N Tyr-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N FNWGDMZVYBVAGJ-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 5
- CLEGSEJVGBYZBJ-MEYUZBJRSA-N Tyr-Thr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CLEGSEJVGBYZBJ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 5
- XQVRMLRMTAGSFJ-QXEWZRGKSA-N Val-Asp-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N XQVRMLRMTAGSFJ-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 5
- UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N Val-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N 0.000 description 5
- RHYOAUJXSRWVJT-GVXVVHGQSA-N Val-His-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N RHYOAUJXSRWVJT-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 5
- QWCZXKIFPWPQHR-JYJNAYRXSA-N Val-Pro-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QWCZXKIFPWPQHR-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 5
- CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N Val-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 5
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 5
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 5
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 5
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 5
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 5
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 238000012510 peptide mapping method Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 5
- 108010031491 threonyl-lysyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 5
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 5
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BEXGZLUHRXTZCC-CIUDSAMLSA-N Arg-Gln-Ser Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)CN=C(N)N BEXGZLUHRXTZCC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- FSNVAJOPUDVQAR-AVGNSLFASA-N Arg-Lys-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FSNVAJOPUDVQAR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- KSHJMDSNSKDJPU-QTKMDUPCSA-N Arg-Thr-His Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 KSHJMDSNSKDJPU-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 4
- CBWCQCANJSGUOH-ZKWXMUAHSA-N Asn-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CBWCQCANJSGUOH-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- XOASPVGNFAMYBD-WFBYXXMGSA-N Asp-Trp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XOASPVGNFAMYBD-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 4
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 4
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 4
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 4
- CELXWPDNIGWCJN-WDCWCFNPSA-N Gln-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CELXWPDNIGWCJN-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 4
- OCJRHJZKGGSPRW-IUCAKERBSA-N Glu-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O OCJRHJZKGGSPRW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- JWNZHMSRZXXGTM-XKBZYTNZSA-N Glu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JWNZHMSRZXXGTM-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N Gly-Phe-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- VLPMGIJPAWENQB-SRVKXCTJSA-N His-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VLPMGIJPAWENQB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 4
- UMYZBHKAVTXWIW-GMOBBJLQSA-N Ile-Asp-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N UMYZBHKAVTXWIW-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 4
- JZBVBOKASHNXAD-NAKRPEOUSA-N Ile-Val-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N JZBVBOKASHNXAD-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N L-isoleucyl-L-alanine Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OVZLLFONXILPDZ-VOAKCMCISA-N Leu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OVZLLFONXILPDZ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 4
- FIICHHJDINDXKG-IHPCNDPISA-N Leu-Lys-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O FIICHHJDINDXKG-IHPCNDPISA-N 0.000 description 4
- JVTYXRRFZCEPPK-RHYQMDGZSA-N Leu-Met-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O JVTYXRRFZCEPPK-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- VULJUQZPSOASBZ-SRVKXCTJSA-N Leu-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VULJUQZPSOASBZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 4
- WRODMZBHNNPRLN-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WRODMZBHNNPRLN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N 0.000 description 4
- PLNHHOXNVSYKOB-JYJNAYRXSA-N Phe-Arg-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N PLNHHOXNVSYKOB-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- IUVYJBMTHARMIP-PCBIJLKTSA-N Phe-Asp-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IUVYJBMTHARMIP-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 4
- OQTDZEJJWWAGJT-KKUMJFAQSA-N Phe-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OQTDZEJJWWAGJT-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- ALJGSKMBIUEJOB-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ALJGSKMBIUEJOB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- KLSOMAFWRISSNI-OSUNSFLBSA-N Pro-Ile-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 KLSOMAFWRISSNI-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- DSGYZICNAMEJOC-AVGNSLFASA-N Ser-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O DSGYZICNAMEJOC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N Ser-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- KZPRPBLHYMZIMH-MXAVVETBSA-N Ser-Phe-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O KZPRPBLHYMZIMH-MXAVVETBSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N Thr-Ala-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 4
- VFEHSAJCWWHDBH-RHYQMDGZSA-N Thr-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VFEHSAJCWWHDBH-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- ADPHPKGWVDHWML-PPCPHDFISA-N Thr-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N ADPHPKGWVDHWML-PPCPHDFISA-N 0.000 description 4
- SCSVNSNWUTYSFO-WDCWCFNPSA-N Thr-Lys-Glu Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SCSVNSNWUTYSFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 4
- BZTSQFWJNJYZSX-JRQIVUDYSA-N Thr-Tyr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BZTSQFWJNJYZSX-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 4
- XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N Thr-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 4
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 4
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 4
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 4
- DZIKVMCFXIIETR-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DZIKVMCFXIIETR-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 4
- MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N Tyr-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 4
- QHEGAOPHISYNDF-XDTLVQLUSA-N Tyr-Gln-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QHEGAOPHISYNDF-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 4
- HVPPEXXUDXAPOM-MGHWNKPDSA-N Tyr-Ile-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HVPPEXXUDXAPOM-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 4
- OTJMMKPMLUNTQT-AVGNSLFASA-N Val-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N OTJMMKPMLUNTQT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N Val-Thr-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N 0.000 description 4
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 4
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 4
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 description 4
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 239000012500 ion exchange media Substances 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 3
- AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N Cys-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101001052793 Homo sapiens GDP-L-fucose synthase Proteins 0.000 description 3
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 3
- 230000003281 allosteric effect Effects 0.000 description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000007820 coagulation assay Methods 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 102000050085 human TSTA3 Human genes 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 229940024790 prothrombin complex concentrate Drugs 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- PUBLUECXJRHTBK-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PUBLUECXJRHTBK-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- ANGAOPNEPIDLPO-XVYDVKMFSA-N Ala-His-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N ANGAOPNEPIDLPO-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 2
- IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N Ala-Pro-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- ASQYTJJWAMDISW-BPUTZDHNSA-N Arg-Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N ASQYTJJWAMDISW-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 2
- JQHASVQBAKRJKD-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JQHASVQBAKRJKD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- WOPJVEMFXYHZEE-SRVKXCTJSA-N Asp-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WOPJVEMFXYHZEE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- JDDYEZGPYBBPBN-JRQIVUDYSA-N Asp-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JDDYEZGPYBBPBN-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 101100289888 Caenorhabditis elegans lys-5 gene Proteins 0.000 description 2
- HBHMVBGGHDMPBF-GARJFASQSA-N Cys-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N HBHMVBGGHDMPBF-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 2
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 2
- 239000012541 Fractogel® Substances 0.000 description 2
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 description 2
- VHPVBPCCWVDGJL-IRIUXVKKSA-N Glu-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VHPVBPCCWVDGJL-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 2
- RQZGFWKQLPJOEQ-YUMQZZPRSA-N Gly-Arg-Gln Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)CN)CN=C(N)N RQZGFWKQLPJOEQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- MKWSZEHGHSLNPF-NAKRPEOUSA-N Ile-Ala-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N MKWSZEHGHSLNPF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- QUAAUWNLWMLERT-IHRRRGAJSA-N Leu-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QUAAUWNLWMLERT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- VHTIZYYHIUHMCA-JYJNAYRXSA-N Leu-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O VHTIZYYHIUHMCA-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- LKDXINHHSWFFJC-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)N LKDXINHHSWFFJC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 101001018085 Lysobacter enzymogenes Lysyl endopeptidase Proteins 0.000 description 2
- 241000252067 Megalops atlanticus Species 0.000 description 2
- OHMKUHXCDSCOMT-QXEWZRGKSA-N Met-Asn-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OHMKUHXCDSCOMT-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRBSWBVUCLLRLU-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LRBSWBVUCLLRLU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- PTDAGKJHZBGDKD-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O PTDAGKJHZBGDKD-OEAJRASXSA-N 0.000 description 2
- MWQXFDIQXIXPMS-UNQGMJICSA-N Phe-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O MWQXFDIQXIXPMS-UNQGMJICSA-N 0.000 description 2
- 102000018779 Replication Protein C Human genes 0.000 description 2
- 108010027647 Replication Protein C Proteins 0.000 description 2
- CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N Ser-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 2
- RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N Ser-Thr-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N Ser-Trp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(O)=O BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 2
- LAFLAXHTDVNVEL-WDCWCFNPSA-N Thr-Gln-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O LAFLAXHTDVNVEL-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- IMULJHHGAUZZFE-MBLNEYKQSA-N Thr-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IMULJHHGAUZZFE-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 2
- FIFDDJFLNVAVMS-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O FIFDDJFLNVAVMS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- WRQLCVIALDUQEQ-UNQGMJICSA-N Thr-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WRQLCVIALDUQEQ-UNQGMJICSA-N 0.000 description 2
- VTMGKRABARCZAX-OSUNSFLBSA-N Thr-Pro-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O VTMGKRABARCZAX-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 2
- HLDFBNPSURDYEN-VHWLVUOQSA-N Trp-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N HLDFBNPSURDYEN-VHWLVUOQSA-N 0.000 description 2
- APQIVBCUIUDSMB-OSUNSFLBSA-N Val-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N APQIVBCUIUDSMB-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010011559 alanylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- 125000000291 glutamic acid group Chemical class N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- SXTAYKAGBXMACB-UHFFFAOYSA-N methionine sulfoximine Chemical compound CS(=N)(=O)CCC(N)C(O)=O SXTAYKAGBXMACB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012434 mixed-mode chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 2
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N (+)-Norgestrel Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](CC)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N 0.000 description 1
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 1
- ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N (2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUSGYEMSJUFFHT-UWABRSFTSA-N 2-[(4R,7S,10S,13S,19S,22S,25S,28S,31S,34R)-34-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-[[(2S,3S)-1-amino-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]-methylcarbamoyl]-25-(3-amino-3-oxopropyl)-7-(3-carbamimidamidopropyl)-10-(1H-imidazol-5-ylmethyl)-19-(1H-indol-3-ylmethyl)-13,17-dimethyl-28-[(1-methylindol-3-yl)methyl]-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-decaoxo-31-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-decazacyclopentatriacont-22-yl]acetic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](N)Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](Cc2cnc[nH]2)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN(C)C(=O)[C@H](Cc2c[nH]c3ccccc23)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](Cc2cn(C)c3ccccc23)NC(=O)[C@@H](NC1=O)C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N)=O MUSGYEMSJUFFHT-UWABRSFTSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 3,4,5,6-tetrahydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N Ala-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NJIFPLAJSVUQOZ-JBDRJPRFSA-N Ala-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)N NJIFPLAJSVUQOZ-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- CLOMBHBBUKAUBP-LSJOCFKGSA-N Ala-Val-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N CLOMBHBBUKAUBP-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- HJVGMOYJDDXLMI-AVGNSLFASA-N Arg-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N HJVGMOYJDDXLMI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- IIABBYGHLYWVOS-FXQIFTODSA-N Arg-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O IIABBYGHLYWVOS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZTKHZAXGTFXUDD-VEVYYDQMSA-N Arg-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZTKHZAXGTFXUDD-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- JQFZHHSQMKZLRU-IUCAKERBSA-N Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N JQFZHHSQMKZLRU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- NGTYEHIRESTSRX-UWVGGRQHSA-N Arg-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NGTYEHIRESTSRX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LUVODTFFSXVOAG-ACZMJKKPSA-N Asn-Cys-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LUVODTFFSXVOAG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WBDWQKRLTVCDSY-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WBDWQKRLTVCDSY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- VIRHEUMYXXLCBF-WDSKDSINSA-N Asp-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VIRHEUMYXXLCBF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- QCVXMEHGFUMKCO-YUMQZZPRSA-N Asp-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O QCVXMEHGFUMKCO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NAAAPCLFJPURAM-HJGDQZAQSA-N Asp-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O NAAAPCLFJPURAM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 101100505076 Caenorhabditis elegans gly-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100228200 Caenorhabditis elegans gly-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100315624 Caenorhabditis elegans tyr-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 206010067787 Coagulation factor deficiency Diseases 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- KEBJBKIASQVRJS-WDSKDSINSA-N Cys-Gln-Gly Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KEBJBKIASQVRJS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- XLLSMEFANRROJE-GUBZILKMSA-N Cys-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N XLLSMEFANRROJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- IDFVDSBJNMPBSX-SRVKXCTJSA-N Cys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IDFVDSBJNMPBSX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DTFJUSWYECELTM-BPUTZDHNSA-N Cys-Pro-Trp Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CS)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O DTFJUSWYECELTM-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010074105 Factor Va Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N Gln-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KWLMLNHADZIJIS-CIUDSAMLSA-N Gln-Asn-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N KWLMLNHADZIJIS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RMOCFPBLHAOTDU-ACZMJKKPSA-N Gln-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RMOCFPBLHAOTDU-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- CGYDXNKRIMJMLV-GUBZILKMSA-N Glu-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CGYDXNKRIMJMLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- RDPOETHPAQEGDP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RDPOETHPAQEGDP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- XHUCVVHRLNPZSZ-CIUDSAMLSA-N Glu-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XHUCVVHRLNPZSZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LYCDZGLXQBPNQU-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O LYCDZGLXQBPNQU-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- MIIGESVJEBDJMP-FHWLQOOXSA-N Glu-Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MIIGESVJEBDJMP-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- LZEUDRYSAZAJIO-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LZEUDRYSAZAJIO-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- FGGKGJHCVMYGCD-UKJIMTQDSA-N Glu-Val-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGGKGJHCVMYGCD-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- RMWAOBGCZZSJHE-UMNHJUIQSA-N Glu-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N RMWAOBGCZZSJHE-UMNHJUIQSA-N 0.000 description 1
- DTPOVRRYXPJJAZ-FJXKBIBVSA-N Gly-Arg-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N DTPOVRRYXPJJAZ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- SUDUYJOBLHQAMI-WHFBIAKZSA-N Gly-Asp-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O SUDUYJOBLHQAMI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- GVVKYKCOFMMTKZ-WHFBIAKZSA-N Gly-Cys-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)CN GVVKYKCOFMMTKZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- CUYLIWAAAYJKJH-RYUDHWBXSA-N Gly-Glu-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CUYLIWAAAYJKJH-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N Gly-Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- FSPVILZGHUJOHS-QWRGUYRKSA-N Gly-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CNC=N1 FSPVILZGHUJOHS-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N Gly-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- QVDGHDFFYHKJPN-QWRGUYRKSA-N Gly-Phe-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O QVDGHDFFYHKJPN-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- WZSHYFGOLPXPLL-RYUDHWBXSA-N Gly-Phe-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WZSHYFGOLPXPLL-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- ZZJVYSAQQMDIRD-UWVGGRQHSA-N Gly-Pro-His Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O ZZJVYSAQQMDIRD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N Gly-Tyr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTZKFIYQMHJWSQ-INTQDDNPSA-N His-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N HTZKFIYQMHJWSQ-INTQDDNPSA-N 0.000 description 1
- JCOSMKPAOYDKRO-AVGNSLFASA-N His-Glu-Lys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N JCOSMKPAOYDKRO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 101000619708 Homo sapiens Peroxiredoxin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000651439 Homo sapiens Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 101000691614 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase PLK3 Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXNGDPAKKCEKGY-QPHKQPEJSA-N Ile-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N AXNGDPAKKCEKGY-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 1
- GVKKVHNRTUFCCE-BJDJZHNGSA-N Ile-Leu-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N GVKKVHNRTUFCCE-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N Ile-Leu-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- WCNWGAUZWWSYDG-SVSWQMSJSA-N Ile-Thr-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N WCNWGAUZWWSYDG-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- NGKPIPCGMLWHBX-WZLNRYEVSA-N Ile-Tyr-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N NGKPIPCGMLWHBX-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 1
- 208000025814 Inflammatory myopathy with abundant macrophages Diseases 0.000 description 1
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 1
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PNUCWVAGVNLUMW-CIUDSAMLSA-N Leu-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PNUCWVAGVNLUMW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YWKNKRAKOCLOLH-OEAJRASXSA-N Leu-Phe-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YWKNKRAKOCLOLH-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- JIHDFWWRYHSAQB-GUBZILKMSA-N Leu-Ser-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JIHDFWWRYHSAQB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZJZNLRVCZWUONM-JXUBOQSCSA-N Leu-Thr-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZJZNLRVCZWUONM-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 1
- 101100384798 Lupinus albus Cgamma gene Proteins 0.000 description 1
- VSTNAUBHKQPVJX-IHRRRGAJSA-N Lys-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VSTNAUBHKQPVJX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- TVHCDSBMFQYPNA-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O TVHCDSBMFQYPNA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- RQILLQOQXLZTCK-KBPBESRZSA-N Lys-Tyr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(O)=O RQILLQOQXLZTCK-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- OHXUUQDOBQKSNB-AVGNSLFASA-N Lys-Val-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OHXUUQDOBQKSNB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- RIPJMCFGQHGHNP-RHYQMDGZSA-N Lys-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O RIPJMCFGQHGHNP-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000286819 Malo Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- HAQLBBVZAGMESV-IHRRRGAJSA-N Met-Lys-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O HAQLBBVZAGMESV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical compound CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100022239 Peroxiredoxin-6 Human genes 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- UEHNWRNADDPYNK-DLOVCJGASA-N Phe-Cys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N UEHNWRNADDPYNK-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- RFEXGCASCQGGHZ-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RFEXGCASCQGGHZ-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- NJONQBYLTANINY-IHPCNDPISA-N Phe-Trp-Asn Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJONQBYLTANINY-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- MMPBPRXOFJNCCN-ZEWNOJEFSA-N Phe-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O MMPBPRXOFJNCCN-ZEWNOJEFSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPEVBAUSTBWQHN-NHCYSSNCSA-N Pro-Glu-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VPEVBAUSTBWQHN-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- MRYUJHGPZQNOAD-IHRRRGAJSA-N Pro-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MRYUJHGPZQNOAD-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N Pro-Thr-Gly Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- 101710180319 Protease 1 Proteins 0.000 description 1
- 241001044454 Ptilophora ala Species 0.000 description 1
- 239000012564 Q sepharose fast flow resin Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 102220501226 Scaffold attachment factor B1_I16L_mutation Human genes 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- KCFKKAQKRZBWJB-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KCFKKAQKRZBWJB-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N Ser-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- FYUIFUJFNCLUIX-XVYDVKMFSA-N Ser-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FYUIFUJFNCLUIX-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- FKYWFUYPVKLJLP-DCAQKATOSA-N Ser-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CO FKYWFUYPVKLJLP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026209 Serine/threonine-protein kinase PLK3 Human genes 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 102000003673 Symporters Human genes 0.000 description 1
- 108090000088 Symporters Proteins 0.000 description 1
- 101710137710 Thioesterase 1/protease 1/lysophospholipase L1 Proteins 0.000 description 1
- QGXCWPNQVCYJEL-NUMRIWBASA-N Thr-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QGXCWPNQVCYJEL-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- UZJDBCHMIQXLOQ-HEIBUPTGSA-N Thr-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N)O UZJDBCHMIQXLOQ-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- WPSDXXQRIVKBAY-NKIYYHGXSA-N Thr-His-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N)O WPSDXXQRIVKBAY-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N Thr-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- UGPMCIBIHRSCBV-XNBOLLIBSA-N Thymosin beta 4 Chemical compound N([C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(C)=O UGPMCIBIHRSCBV-XNBOLLIBSA-N 0.000 description 1
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N Tyr-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- DJEVQCWNMQOABE-RCOVLWMOSA-N Val-Gly-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N DJEVQCWNMQOABE-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- YLRAFVVWZRSZQC-DZKIICNBSA-N Val-Phe-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N YLRAFVVWZRSZQC-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- UGFMVXRXULGLNO-XPUUQOCRSA-N Val-Ser-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O UGFMVXRXULGLNO-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N Val-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 241000271897 Viperidae Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 201000000839 Vitamin K Deficiency Bleeding Diseases 0.000 description 1
- 206010047634 Vitamin K deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical group [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 108091005588 alkylated proteins Proteins 0.000 description 1
- KWRGRUMGKJGCKH-OXQOHEQNSA-N allad Chemical compound C1=CC=C2C3=C[C@@H](C(=O)N(CC)CC)CN(CC=C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 KWRGRUMGKJGCKH-OXQOHEQNSA-N 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 108010018823 anti-inhibitor coagulant complex Proteins 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 1
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013019 capto adhere Substances 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011098 chromatofocusing Methods 0.000 description 1
- 239000012501 chromatography medium Substances 0.000 description 1
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 208000014763 coagulation protein disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 238000001425 electrospray ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000005966 endogenous activation Effects 0.000 description 1
- 230000001973 epigenetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 229940105776 factor viii inhibitor bypassing activity Drugs 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000006251 gamma-carboxylation Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 108010051307 glycyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 150000002373 hemiacetals Chemical class 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940039715 human prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000004969 ion scattering spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010053062 lysyl-arginyl-phenylalanyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 210000004216 mammary stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000013264 metal-organic assembly Substances 0.000 description 1
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- RUZLIIJDZBWWSA-INIZCTEOSA-N methyl 2-[[(1s)-1-(7-methyl-2-morpholin-4-yl-4-oxopyrido[1,2-a]pyrimidin-9-yl)ethyl]amino]benzoate Chemical group COC(=O)C1=CC=CC=C1N[C@@H](C)C1=CC(C)=CN2C(=O)C=C(N3CCOCC3)N=C12 RUZLIIJDZBWWSA-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000012433 multimodal chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000003805 procoagulant Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 1
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 108010079996 thymosin beta(4) Proteins 0.000 description 1
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000003563 vegetarian diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000011100 viral filtration Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 208000016794 vitamin K deficiency hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 238000004804 winding Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
- A61K38/4846—Factor VII (3.4.21.21); Factor IX (3.4.21.22); Factor Xa (3.4.21.6); Factor XI (3.4.21.27); Factor XII (3.4.21.38)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6432—Coagulation factor Xa (3.4.21.6)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Toxicology (AREA)
Abstract
تتوافر تركيبات تشمل أشكال متباينة تخليقية من عامل factor Xa (FXa) التخثر الآدمي. تتضمن تلك التركيبات تشكيلة واسعة من الأشكال المماثلة والتعديلات اللاحقة للترجمة لأجل FXa وتكون نافعة لعلاج كائنات بحاجة لوقف النزف الدموي.
Description
١ لعامل تخثر آدمي تخليقي XA تركيبات تشمل مجموعات متغايرة من بروتينات
Compositions comprising heterogeneous populations of recombinant human clotting factor xa proteins الوصف الكامل خلفية الاختراع هناك حاجة لعلاجات فعالة للتحكم في النزف المستفحل في نطاق الحالات الإكلينيكية حيث لا يمكن التحكم في النزف بدرجة كافية بالتدخل الطبي أو الجراحي. تلك الحاجة غير المُلباة «(hemophilia بعد تكون شائكة تحديدا في المرضى المصابين بالهيموفيليا (النزعة الوراثية للنزف الذين فيهم يصبح علاج استبدال عامل أقل فعالية نتيجة لإنتاج أجسام مضادة لمثبط. oY خاصة © موضع مركزي في (FXa) activated clotting factor X يشغل عامل التخثر المنشط المرتبط بالغشا » في FXa تسلسل التجلط عند تقارب مسارات التجلط الداخلية والخارجية. يعمل مما thrombin إلى prothrombin على تحويل «(FVa) factor Va وجود عامله المساعد العامل لتشكيل خثرات. مبدئيا؛ العلاج الاستبدالي fibrin إلى fibrinogen ينشط الصفائح الدموية ويحول تكون محدودة؛ مع هذاء FXa مباشرةٍ يمكنه تلافي النزف. الاحتمالية العلاجية لأجل FXa بإعطاء ٠ نتيجة لعمر النصف الخاص به القصير في البلازما واحتمالية حث تجلط مستفحل نتيجة لتنشيط عوامل تجلط أخرى. leucine فيه يحل (I16L متباين (الشكل المتباين FXa يحدد العمل في وقت سابق شكل من النوع البري (الموضع 16 في FXa عند الأطراف الأمينية للسلسلة الثقيلة isoleucine محل متباين مع خصائص تشبه مولد الإنزيم. FXa الاستبدال ينتج شكل (chymotrypsin برنامج ترقيم VO يتسبب بصورة protease Als إلى X التبديل التهايؤئي من مولد إنزيم العامل «Toso, R., et al -prothrombinase غير مباشرة في إظهار موقع ارتباط ثانوي ومجمع
J. Biol. Chem. 283, 18627-18635 (2008); Ivancm L., et al, A zymogen-lke factor Xa variant corrects the coagulation defect in hemophilia. Nat. Biotechnol. 29:1028-33 (2011). 0 لا «(FVa) Va مع عامله المساعد العامل prothrombinase عند عدم الدمج في معقد نشاط حفزي وتتم حمايته بصورة أفضل من الإخماد بواسطة FXa 1161, يكون للشكل المتباين نوع بري. كنتيجة لهذا يكون للشكل المتباين عمر FXa مصل مقارنة مع protease مثبطات SAYA
ب نصف في المصل أطول مقارنة مع FXa من النوع البري. الارتباط مع FVa في ©0:0000085؛ مع هذاء يتسبب في تحول الشكل المتباين من الحالة المشابهة Asal الإنزيم إلى الهيئة النشطة؛ بذلك تتم استعادة قدرة الشكل المتباين على تحفيز تحويل prothrombin إلى chrombin وبالتالي نشاطه السابق للتجلط. في نماذج فأر مصابة بالهيموفيليا A والهيموفيليا B © إعطاء الشكل المتباين .1161 FXa قبل الإصابة يخفض فقد الدم بعد قص الذيل بأسلوب يعتمد على الجرعة. تقترح نتائج هذه التجارب أن الشكل المتباين .1161 FXa قد يكون نافعا لعلاج Call غير المتحكم فيه في آدميين مصابين بالهيموفيليا. يصنع الشكل المتباين ,1161 FXa المستخدم في دراسات سابقة؛ مع هذاء بكميات صغيرة من خلايا 293 HEK منقول إليها حامل الجين من العائل بصورة ثابتة يليها تنشيط بروتين FX ٠ باستخدام protease زعاف الأفعى Russell المسمى «Toso, R., et al .RVVX التبديل التهايئي من alse إنزيم العامل X إلى protease Ala يتسبب بصورة غير مباشرة في إظهار موقع ارتباط ثانوي ومجمع -prothrombinase J.
Biol Chem. 283, 18627-18635 (2008). بينما يكون نافعا للدراسات صغيرة النطاق؛ يكون هذا الأسلوب غير مناسب لإنتاج كميات كبيرة من V0 البروتين المتباين 7760 المنقى المطلوب لدراسات إكلينيكية وأخيرا يورد إلى المرضى. طبقا لهذاء هناك حاجة في الفن لمستحضرات من البروتين المتباين .1161 FXa المصنع بهذه الكمية والنقاء قد يتم اختبارها في تجارب إكلينيكية؛ وبمجرد اعتمادها؛ يتم إعطائها لكائنات بحاجة إلى وقف النزف الدموي. الوصف العام للاختراع ف يتعلق الكشف الحالي بالحاجة غير الملباة في الفن الموصوفة أعلاه بتوفير تركيبات من البروتينات المتباينة FXa المنتجة بنقاء وكمية كافيين يمكن توريدهم إلى كائنات بحاجة إلى وقف النزف الدموي. في تجسيدات متنوعة؛ تشتمل تلك التركيبات على أشكال مماثلة مختلفة وتعديلات لاحقة للترجمة لبروتينات FXa المتباينة. في أحد التجسيدات؛ تشتمل التركيبات على شكل beta لبروتين FXA متباين فيها تتكون Yo ترتيبات البروتين للسلسلة الخفيفة والثقيلة على التوالي من أحماض أمينية من ١ إلى VET SITY SAYA
(FAT) أحماض أمينية من ١ إلى PAE VET ١660 أحماض أمينية ١ إلى VET ee إلى FAT أحماض أمينية ١ إلى VEY و١ إلى 84؛ أحماض أمينية ١ إلى VET ١69 إلى FAT أحماض أمينية ١ إلى VEY و١ إلى 84؛ أحماض أمينية ١ إلى ١67 و6١ إلى FAT أحماض أمينية ١ إلى VEY و7١ إلى PAE وأحماض أمينية ١ إلى ١67 و6١ © إلى 87؟؛ كل ترتيبات الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيد آخرء تشتمل التركيبات على شكل alpha من بروتين FXa المتباين فيها تتكون ترتيبات البروتين للسلسلة الخفيفة والثقيلة على التوالي من أحماض أمينية من ١ إلى ١9 و476١ (FAA) أحماض أمينية من ١ إلى ١660 و7١ إلى FAA أحماض أمينية ١ إلى VET ee إلى 99 أحماض أمينية ١ إلى VEY و١ إلى FAA أحماض أمينية ١ إلى VET EY ٠ إلى Fad أحماض أمينية ١ إلى VET VEY إلى FAA أحماض أمينية ١ إلى ١67 و6١ إلى 949؛ كل ترتيبات الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في أي واحد أو أكثر من تجسيدات الشكل المماثل beta أو alpha لبروتينات FXa المتباينة الموصوفة code يمكن تعديل السلاسل الخفيفة للبروتينات لتتضمن «B-hydroxy Asp®® hexose متصل مع 450( ٠١ او ١١ متخلف م01. في تجسيدات أخرى؛ توجد ٠١ متخلفات .G ٠5 وفي تجسيدات أخرى أيضاء يوجد ١١ متخلف Gla في أي واحد أو أكثر من تجسيدات الشكل المماثل beta للبروتينات المتباينة FXa الموصوفة أعلاه؛ يمكن تعديل السلاسل الثقيلة لتتضمن واحد أو اثنين من لعس-ه core-1 مصدعراع. في بعض التجسيدات؛ قد يكون الأول فقط؛ الثاني cai أو كل من core-1 O-linked glycans غير sialylated أحادي sialylated أو ثنائي sialylated طبقا لبعض التجسيدات؛ لا Yo توجد مجموعات sialic acid في تجسيدات (al توجد مجموعة sialic acid واحدة. في تجسيدات أخرى أيضاء توجد مجموعتين sialic acid في تجسيدات إضافية؛ توجد ثلاثة sialic ile sane 0. وفي تجسيدات إضافية أيضاء يوجد إجمالي ؛ مجموعات sialic acid طبقا لبعض التجسيدات؛ تتضمن تركيبات البروتين المتباين FXa نوع بروتين FXa متباين واحد مذكور في جدول 7 من الكشف. في تجسيدات أخرى؛ تشمل تركيبات من الكشف على الأقل Yo © على الأقل ١٠؛ على الأقل Vo على الأقل ١٠؛ على الأقل Yo على الأقل oF على الأقل (Yo على الأقل 60؛ على الأقل 45؛ على الأقل ٠0 5؛ على الأقل Joo على الأقل ٠١ من مدر
Com .١ المذكور في جدول FXa نوع البروتين المتباين
FXa على الأقل بروتين FXa طبقا لتجسيدات أخرى؛ تتضمن تركيبات البروتين المتباين الخفيفة هي نوع مذكور في جدول © من الكشف. وفي تجسيدات أخرى ALL متباين واحد فيه متباين واحد على الأقل فيه تكون FXa المتباين بروتين FXa أيضاء تتضمن تركيبات بروتين السلسلة الثقيلة نوع مذكور في جدول ؛ من الكشف. © المتباينة من الكشف في FXa في بعض التجسيدات؛ قد يوجد واحد أو أكثر من بروتينات تركيبة بوفرة متوسطة تتنوع بالنسبة لأنواع أخرى قد تكون موجودة. على سبيل المثال؛ قد يوجد نوع أو بصورة نادرة مقارنة مع الأنواع الأخرى الموجودة. بصورة بديلة؛ قد يوجد ALB محدد بوفرة كبيرة» نوع حدد بوفرة عالية؛ وفرة متوسطة؛ وفرة منخفضة؛ أو وفرة منخفضة جدا مقارنة مع أنواع أخرى موجودة. ٠ الكشف الحالي يوفر أيضا أحماض نووية؛ نواقل؛ خلايا عائل وطرق صنع وتنقية المتباينة. FXa بروتينات المتباينة تتضمن FXa توجد؛ على سبيل المثال؛ ترتيبات حمض نووي تشفر بروتين (PACE الأصلي مع موقع معالجة (AP) (Activation Peptide) استبدال ترتيب ببتيد التنشيط داخليا AP بذلك يتاح التنشيط داخل الخلايا لعامل التخثر. في بعض التجسيدات؛ يزال ترتيب ١ طبقا لبعض التجسيدات؛ يتوافر ترتيب LArg-Lys-Arg ويستبدل مع ترتيب الحمض الأميني المتباين بواسطة ترتيب الحمض النووي FX يشفر بروتين (deoxyribonucleic (حمض cDNA ويتوافر ترتيب الحمض الأميني المشفر بذلك بواسطة ترتيب الحمض of من تعريف الترتيب رقم: المتباين بإنماء FXa لصنع بروتين Alia تتوافر طرق ذات .١ الأميني من تعريف الترتيب رقم: متباين؛ وبعدئذ ينقى FX مشابه) وبروتين protease بصورة مشتركة (أو PACE عائل تظهر WAY. المتباين المنتج؛ المعالج والمفرز بواسطة خلايا العائل. يتم الكشف أيضا عن FXa بروتين متباينة منتجة طبقا لتلك الطرق. في بعض تجسيدات هذه الطرق؛ تكون خلايا FXa بروتينات CHO WA هي Jl) المتباينة بواسطة تحليل كروماتوجرافي؛ يتضمن مرور محلول FXa يمكن تنقية بروتينات mixed mode chromatography يشمل البروتينات خلال عمود كروماتوجرافي بنسق مختلط Yo يليه الغسل والتصفية؛ ثم مرور ((Capto MMC (على سبيل المثال؛ باستخدام أوساط (MMO)
SAYA
البروتينات خلال عمود كروماتوجرافي لتبادل أيون أول (على سبيل المثال؛ باستخدام أوساط Q- (Sepharose Fast Flow يليه الغسل والتصفية؛ وبعدئذ مرور البروتينات خلال عمود كروماتوجرافي لتبادل أيون مختلف ثاني (على سبيل المثال؛ باستخدام أوساط 50 «(Fractogel يليه الغسل والتصفية. يمكن أيضا إجراء طرق أخرى لتنقية بروتينات FXa المتباينة.
° طرق التنقية قد تتضمن اختياريا خطوة للإخماد الفيروسي؛ بالإضافة إلى خطوات الترشيح الفائق والترشيح الثنائي. بعد تنقية بروتينات FXa المتباينة؛ وفي بعض الحالات (SH يمكن تخفيفها في مادة تخفيف مقبولة دوائيا تحتوي اختياريا على مقومات أخرى مثل مثبتات أس هيدروجيني أو مواد مسوغة.
أيضا يوفر الكشف طرق لعلاج LEIS بحاجة لوقف النزف الدموي بإعطاء كمية فعالة ٠ ا لإيقاف النزف من تركيبة تشمل واحد أو أكثر من بروتينات FXa المتباينة من الكشف. في تجسيدات أخرى؛ تعطى الكائنات كمية فعالة لإيقاف النزف من تركيبة تشمل واحد أو أكثر من بروتينات FXa المتباينة من الكشف قبل حدوث النزف لمنع النزف غير المتحكم فيه وقائيا في كائن عرضة له. في بعض التجسيدات؛ يعالج الكائن من الهيموفيليا ه. في تجسيدات أخرى؛ يعالج الكائن من الهيموفيليا B 85( تجسيدات أخرى أيضاء يعالج الكائن من إصابة رضحية أو ٠ أنواع أخرى من النزف غير المتحكم فيه. شرح مختصر للرسومات يوفر شكل (I) ترتيب الحمض الأميني (تعريف الترتيب رقم: )١ لبروتين FX متباين ناضج فيه يستبدل متخلف isoleucine النوع البري عند الموضع VET مع leucine الموضح ببنط أسود عريض. الموضع VET يقابل الموضع ١١ في نظام ترقيم aa g.chymotrypsin خط تحت ٠٠ متخلفات (Gla) y-carboxyglutamic acid وتكت بخط مائل. توضح روابط disulfide بين السلاسل أو داخل السلاسل المتوقعة بخطوط مرسومة بين cysteines المتصلة. يحاط موقع B- hydroxylation المتوقع بإطار ذو خطوط مصمتة. يحاط موقع انشقاق وإدراك PACE المعالج هندسيا لاستبدال ببتيد التنشيط بإطار بخطوط متكسرة. يحاط lysine المشكل للحمض الأميني ذو طرف carboxy من الشكل beta للسلسلة الثقيلة (Lys™®%) بواسطة شكل بيضاوي مع خطوط YO مصمتة. شكل ١(ب) يوفر ترتيب الحمض الأميني المتوقع (تعريف الترتيب رقم: (Y لسلسلة خفيفة SAYA
ل لبروتين FX متباين ناضج. يوفر شكل ١ (ج) ترتيب الحمض الأميني المتوقع (تعريف الترتيب رقم: *) والسلسلة الثقيلة لبروتين FXa المتباين. شكل ١(د) يوفر ترتيب النيكلوتيد (nucleotide) (تعريف الترتيب رقم: 4؛) لأجل cDNA يشفر بروتين FX متباين؛ يتضمن ترتيب إشارة وببتيد أولي.
يوفر شكل ؟ طيف الكتلة لببتيدات ناتجة من اختزال» الكلة calkylation وهفضم محلل للبروتين مع Lys-C لمستحضر منقى لبروتين FXa سليم. تستخدم تحديدات ذروة اعتمادا على طيف الكتلة بعد تحليل RP-HPLC/ESI-QTOF MS للببتيدات للتأكد من ترتيب الحمض الأميني للبروتين ولتحديد تعديلات لاحقة للترجمة معينة موصوفة في جدول ١ وفي أي مكان آخر هنا. تعليم الذروة يكون كما يلي. الحرف ”7“ يليه رقم يشير إلى ببتيد محدد مشتق من السلسلة الخفيفة.
الحرف CH يليه رقم يشير إلى ببتيد محدد مشتق من السلسلة الثقيلة. ”!1120: يحتوي الشكل alpha الطرفي © لسلسلة H تنتهي مع Lys™ على اثتين من .di-sialylated core-1 O-glycans ”11207: الشكل alpha الطرفي © لسلسلة H تنتهي مع Lys™ تحتوي على di-sialylated core-1 O-glycan واحد. ”11207": الشكل alpha الطرفي © لسلسلة 11 تنتهي مع Lew’ تحتوي على di- ممعراع-0 sialylated core-1 واحد. ”14199: ببتيد LALLA رقم ؛ يحتوي على متخلف y- carboxyglutamic acid ٠ واحد. ”*“1.109: ببتيد LALLY رقم ٠١ يحتوي على جلوكوز متصل مع O محتمل L129 (hexose) ببتيد السلسلة L رقم ١ مع متخلفين y-carboxyglutamic acid 2130780 ببتيد Lalli) رقم ؟ مع A JV متخلفات acid عتتقاناونو«دراتق-. 01 89.]»: ببتيد السلسلة L رقم A يحتوي على :“d” .B-hydroxy Asp إزالة “R” .amidation ذروة عامل كاشف؛ أي؛ منتجات متعلقة بالأس الهيدروجيني متوافقة مع نموذج العامل الكاشف. 8 ”*: ألكلة فائقة. شكل ؟ يوفر مخطط استشرابي HPLC لمستحضر منقى من بروتين FXa متباين سليم ويوضح وجود أشكال مماثلة لبروتين FXa متباين مختلفة. شكل ؛ يوفر مخطط استشرابي HPLC لمستحضر منقى من بروتين FXa متباين سليم ويوضح وجود أشكال مماثلة لبروتين FXa متباين مختلفة. يحلل المستحضر بواسطة مقياس طيف Ab Yo شكل © يوفر طيف الكتلة لبروتين FXa متباين سليم من مستحضر منقى. يؤكد طيف مدر
A
بالإضافة إلى تغاير كتلة كبيرة منسوب إلى cbetas alpha الكتلة وجود شكلين مماثلين رئيسيين» ووجود أنواع مختلفة للتعديل اللاحق للترجمة. تتحدد PACE الهضم المتغير عند موقع انشقاق الذروات الرئيسية في الشكل بواسطة كتلتهم الملحوظة بالدالتون. تستخدم تحديدات الذروة على للتأكد من ترتيب الحمض الأميني لأشكال RP-HPLC/ESI-QTOF MS طيف الكتلة بعد تحليل بروتين مماثلة ولتحديد تعديلات معينة لاحقة للترجمة كما هو موصوف في جدول وأيضا في أي ©
Gla في مجال سيطرة Gla متخلف ١١ مكان هنا. تدل الذروات المعلمة مع ”*“ على وجود للسلسلة الخفيفة. متباين بعد FXa لمستحضر منقى لبروتين HPLC شكل + يوفر مخطط استشرابي بين السلاسل disulfide الاختزال والألكلة لفصل السلاسل الثقيلة والخفيفة بالتخلص من روابط متباين مختلفة. FXa وداخل السلاسل. يوضح المخطط الاستشرابي وجود أشكال مماثلة لبروتين ٠
AES يحلل المستحضر أيضا بواسطة مقياس طيف متباين بعد اختزال وألكلة FXa يوفر طيف الكتلة لسلسلة خفيفة لبروتين (TY شكل مستحضر منقى من البروتين. يوضح طيف الكتلة تغاير كتلة كبيرة منسوب إلى الهضم المتغير ووجود أنواع مختلفة للتعديل اللاحق للترجمة. تتحدد الذروات الرئيسية PACE عند موقع انشقاق في الشكل بواسطة كتلتهم الملحوظة بالدالتون. تستخدم تحديدات الذروة على طيف الكتلة بعد Yo للتأكد من ترتيب الحمض الأميني لأشكال بروتين مماثلة RP-HPLC/ESI-QTOF MS تحليل ولتحديد تعديلات معينة لاحقة للترجمة كما هو موصوف في جدول ؟ وأيضا في أي مكان هنا. متباين بعد اختزال وألكلة FXa شكل 7١(ب) يوفر طيف الكتلة لسلسلة ثقيلة لبروتين مستحضر منقى من البروتين. يوضح طيف الكتلة تغاير كتلة كبيرة منسوب إلى وجود أنواع مختلفة للتعديل اللاحق للترجمة. تتحدد الذروات الرئيسية في الشكل بواسطة كتلتهم الملحوظة ٠
RP-HPLC/ESI-QTOF MS بالدالتون. تستخدم تحديدات الذروة على طيف الكتلة بعد تحليل للتأكد من ترتيب الحمض الأميني لأشكال بروتين مماثلة ولتحديد تعديلات معينة لاحقة للترجمة كما هو موصوف في جدول ؛ وأيضا في أي مكان هنا. تدل الذروات المعلمة مع ”*“ على الألكلة الفائقة للسلسلة الثقيلة. لتفصيلي: ١ الوصف Yo
SAYA
توصف هنا تركيبات تشمل بروتين FXa متباين منتج بنقاء وكمية كافيين ليتم اختبارها في تجارب إكلينيكية وتتوافر لكائنات بحاجة لوقف النزف الدموي. توصف أيضا طرق لصنع وتنقية بروتين FXa متباين. في تجسيدات معينة؛ العبارة "بروتين FX متباين FX variant protein 'بروتين FXa ¢'(FXa variant protein) (nlite © ومصطلحات مشابهة (مالم يتضح خلاف هذا من السياق) لعامل (FX) (Factor X) X )== أو عامل X منشط ((FXa) على التوالي؛ isoleucine Jasin Lead Tie) أو 1( مباشرة بعد ترتيب ببتيد التنشيط في السلسلة الثقثيلة مع Leu) leucine أو آ). اعتمادا على اصطفاف ترتيب بين السلسلة الثقيلة FXa ومجال السيطرة الحفزي لأجل «chymotrypsin يشار إلى هذا الاستبدال أيضا على أنه طفرةٍ استبدال ,1161 باستخدام برنامج ترقيم chymotrypsin) + هذا الموضع يقابل الحمض الأميني 7؟١ في تعريف الترتيب رقم: ١ والحمض الأميني ١ في تعريف الترتيب رقم: ؟. كما هو مناقش أعلاه؛ يكون FXa المتضمن هذه الطفرة له خصائص مولدة للجين تسمح بالدوران في الدم لفترات زمنية أطول مقارنة مع FXa من النوع البري؛ لكنه يكون قادر أيضا على اشتقاق prothrombin بمعدل عالي عند الدمج في معقد .prothrombinase Vo طبقا لتجسيدات cd يشير بروتين FX المتباين وبروتين FXa المتباين إلى FX أو FXa آدمي؛ على التوالي؛ فيه يستبدل الحمض الأميني المقابل للموضع ET )8 تعريف الترتيب رقم: ١ (الموضع ١6 في برنامج ترقيم (chymotrypsin مع (D) Phe (F) ديه 5 .Gly (G) طبقا لتجسيدات أخرى أيضاء يشير بروتين FX المتباين وبروتين FXa المتباين إلى FX أو FXa آدمي؛ على التوالي؛ فيه يستبدل Val) valine أو 7) المقابل للموضع ١١7 في تعريف الترتيب رقم: ١ ٠ (الموضع ١7 في برنامج ترقيم (chymotrypsin مع (L) نعل (A) عله أو (G) (ا6. و في تجسيدات «opal يشير بروتين FX المتباين وبروتين FXa المتباين إلى FX أو FXa آدمي؛ على التوالي» فيه يستبدل الحمض الأميني المقابل للموضع YY تعريف الترتيب رقم: ١ (الموضع 4 في برنامج ترقيم (chymotrypsin مع Asn (N) أرى .Glu (E) يدور العامل XO من النوع البري بصورة طبيعية في الدم بارتباط لمولد الإنزيم لسلسلتين معا YO بواسطة رابطة Wdisulphide يتشكل alse الإنزيم لسلسلتين من FX ناضج (أي؛ ببتيد وببتيد أولي يفتقر للإشارة) بعد الإزالة المحللة للبروتين للببتيد Arg-Lys-Arg الموجود في البروتين الناضج SAYA
“ye بواسطة (AP) هذاء يتطلب التنشيط إزالة ببتيد التنتشيط ae) EY=V £0 كالأحماض الأمينية
AP .RVVX ic أخرى proteases العامل 160 أو العامل 118 تمهيدا لتكوين خثرة»؛ أو بواسطة فردي السلسلة ناضج. في مولد للإنزيم له سلسلتين؛ FX في ٠١94-١ £7 يقابل الأحماض الأمينية للسلسلة الثقيلة. amino يوجد عند النهاية الطرفية
M. Hertzberg, Biochemistry of factor X, Blood Rev. 8(1):56-62 (1994). 5 في تجسيد تمثيلي؛ يعدل ترتيب بروتين العامل 3 المتباين بإزالة ببتيد التنشيط واستبداله مع في شفرة من حرف واحد) لخلق موقع إدراك RKR) Arg-Lys-Arg ترتيب الحمض الأميني
FXa يسمى أيضا (تة). بخلاف PACE) وانشقاق لإنزيم انشقاق حمض أميني قاعدي مزدوج المتباين عند FX بالتنشيط بين الخلايا لبروتين AP في خطوة منفصلة؛ يسمح استبدال Jap iil) المتباين FX عائل. هذا يلغي الحاجة إلى أولا تنقية LDA بصورة مشتركة في PACE إظهار ٠ ثم تنقية (RVVX (مثل protease ينشط بصورة منفصلة البروتين باستخدام (WAY المنتج بواسطة المتباين في شكل أنقى وبكميات FXa المتباين. بتجنب الخطوات الإضافية هذه؛ يمكن إنتاج FXa أكبر. (تعريف الترتيب )(١ المتباين الناضج في شكل X يصور ترتيب الحمض الأميني للعامل (ببنط عريض)؛ VET عند موضع الحمض الأميني 1161. leucine فيه يظهر استبدال )١ رقم: ٠ ويظهر موقع معالجة ١45-١67 لاستبدال ببتيد التنتشيط عند المواضع RKR يظهر ترتيب (إطار بخطوط متقطعة). الشكلين ١(ب) و١(ج) يصوران ١5-١50 عند المواضع PACE ) المتباين (تعريف الترتيب رقم: FXa ترتيب الحمض الأميني المتوقع للسلسلة الخفيفة لأجل
PACE على التوالي؛ بعد الانشقاق عند الموقع o(¥ والسلسلة الثقيلة (تعريف الترتيب رقم: متباين منتجة طبقا لطرق الكشف درجة FXa يوضح تحليل مستحضرات متعددة لبروتين AR غير متوقعة للتغاير بالنسبة لترتيب البروتين والتعديل اللاحق للترجمة مقارنة مع البناء المتوقع.
FXa على الرغم من هذاء تكون تلك التركيبات المشتملة على مجموعات متغايرة بنائيا لبروتينات المتباين قادرة على العمل كمواد تجلط أولية فعالة في اختبار معملية. كما هو موصوف إضافيا أدناه؛ يعزو التغاير إلى التباينات في ترتيب الحمض الأميني للسلسلة الخفيفة وللسلسلة الثقيلة والتعديلات اللاحقة للترجمة الموجودة في واحدة من السلسلتين؛ أو كلتاهما. Yo بدون الرغبة في التقيد بأية نظرية محددة للعملية؛ يعتقد نسب مصدر واحد للتغاير البنائي مدر
-١١-
للانشقاق المتباين عند موقع إدراك وانشقاق PACE/furin protease معالج هندسيا لاستبدال ببتيد التنشيط. في تجسيد غير محدد؛ يكون ترتيب الحمض الأميني للموقع PACE هو RKRRKR (في شفرة مكونة من حرف فردي) (تعريف الترتيب رقم: ©( معالج هندسيا في بروتين FX متباين باستبدال ترتيب الحمض الأميني AP الأصلي مع متخلفات RKR التي؛ بالاشتراك مع ثلاثة © متخلفات على الأقل للسلسلة الخفيفة؛ تشكل موقع الإدراك المحلل للبروتين RKRRKR (تعريف الترتيب رقم: 5). يمكن استخدام مواقع إدراك PACE أخرى بالإضافة إلى (على سبيل JU)
.PACE/furin بخلاف proteases Jay بمفرده)؛ مواقع إدراك وانشقاق RKR لإزالته بالكامل من PACE في بعض التجسيدات؛ ينشق بصورة محللة للبروتين الموقع (تعريف الترتيب (ANS... TLER'*/RKRRKR/) السلسلة الخفيفة بدون ترك أي متخلفات وراؤه ببتيد). في التجسيدات Rial رقم:1 وتعريف الترتيب رقم:5؛ على التوالي السلسلة الخفيفة ٠ تدل العلامات المائلة )97( على مواقع انشقاق yal السابقة والتالية الموصوفة في هذه ممكنة بين الأحماض الأمينية المجاورة والأرقام العلوية تدل على موقع الحمض الأميني للسلسلة الخفيفة بعد الانشقاق (اعتمادا على الشكل ١(أ)؛ تعريف الترتيب رقم: carboxy الطرفي بصورة محللة للبروتين تاركا متخلفه الأول عند PACE ينشق الموقع opal في تجسيدات .)١ وتعريف ١ (تعريف الترتيب رقم: (ANS.
TLERR'/KRRKR/) الطرف © من السلسلة الخفيفة Vo ينشق الموقع opal على التوالي السلسلة الخفيفة شدفة ببتيد). في تجسيدات oA الترتيب رقم: بصورة محللة للبروتين تاركا متخلفيه الأولين عند الطرف © من السلسلة الخفيفة PACE على التوالي Vv (تعريف الترتيب رقم: 9 وتعريف الترتيب رقم: (ANS... TLERRK'*'/RRKR/) بصورة محللة للبروتين PACE السلسلة الخفيفة وشدفة ببتيد). في تجسيدات أخرى. ينشق الموقع تاركا الثلاث متخلفات الأولى الخاصة به عند الطرف © من السلسلة الخفيفة ٠ ينشق الموقع (Hal في تجسيدات .)١١ (تعريف الترتيب رقم: (ANS.
TLERRKR'“2/RKR/) بصورة محللة للبروتين تاركا الأربع متخلفات الأولى الخاصة به عند الطرف © من PACE في تجسيدات .)١١ (تعريف الترتيب رقم: (ANS.
TLERRKRR'/KR/) السلسلة الخفيفة بصورة محللة للبروتين تاركا الخمس متخلفات الأولى الخاصة به عند PACE أخرى, ينشق الموقع وفي .)١١ (تعريف الترتيب رقم: (ANS.
TLERRKRRK'/R/) الطرف © من السلسلة الخفيفة Yo بصورة محللة للبروتين تاركا ترتيبه بالكامل عند PACE تجسيدات أخرى أيضاء ينشق الموقع
مدر
“yy (Yad) (تعريف الترتيب (ANS... TLERRKRRKR'/) الطرف © من السلسلة الخفيفة
Me قد يتضمن التغاير البنائي في السلسلة الخفيفة أيضا وجود (gyal في تجسيدات glitamic acid لمتخلفات y-carboxylation المعزوة لتغيرات في درجة Gla متغير من متخلفات (NY تتحدد في شكل .١١ أو ٠0 (4 Gla معينة. في تجسيدات معينة؛ يكون عدد متخلفات لتجسيدات Wl .618 في مجال السيطرة glutamic acid y-carboxylation المواقع المحتملة لأجل 0 أخرى؛ تتضمن مصادر محتملة إضافية للتغاير البنائي للسلسلة الخفيفة وجود أو غياب متخلف -م ووجود أو غياب )١ ؛ تعريف الترتيب رقم: 0 ١ (شكل Asp® عند hydroxylated aspartic acid المتصل مع 0 هو جلوكوز؛ لكن في hexose متصل مع 8.0 بعض التجسيدات؛ يكون hexose hexose 3 cketohexose عناعن» hemiacetal sl مختلف؛ aldohexose تجسيدات أخرى قد يكون . Alo متصل مع Vo قد تظهر السلسلة الثقيلة أيضا تغاير بنائي. طبقا لتجسيدات معينة قد يحدث تغير في alpha قد تكون بعض السلاسل الثقيلة عبارة عن شكل (JEN طول السلسلة الثقيلة. على سبيل (تعريف الترتيب رقم: 7( (الأرقام العلوية تشير إلى موضع KP المماثل الأطول المنتهي عند الثقيلة اعتمادا على شكل ١(أ)؛ تعريف الترتيب ALLL carboxy الحمض الأميني الطرفي لكن في حالات أخرى لا يوجد ع::»را الطرفي لذلك ينتهي البروتين عند “179 (تعريف ؛)١:مقر ٠ الأقصر beta تكون السلسلة الثقيلة عبارة عن شكل (opal الترتيب رقم:؛١). في تجسيدات (تعريف الترتيب رقم: £71 وتعريف الترتيب رقم: £0 على التوالي). KM KOO المنتهي عند .0 المتصلة مع glycosylation مصدر آخر للتغاير في السلاسل الثقيلة هو درجة Lad «oral في تجسيدات glycosylated هكذا في بعض التجسيدات؛ تكون السلاسل الثقيلة غير عبارة core-1 O-glycan 1-ع:ه». يكون O-glycans تتضمن السلاسل الثقيلة واحد أو اثنين من Yo threonine أو serine مع (GalNAc) N-acetylgalactosamine حيث يرتبط O-glycan عن GalNAc في بعض التجسيدات من الكشف يوجد سكر .GalNAc مع (Gal) galactose ويرتبط core-1 O-linked طبقا لتجسيدات أخرى أيضاء قد يكون كل اثنين من (Gal لكن يتم فقد سكر أو 10 0» بحيث قد تحوز mono-sialylated «dl adic بصورة sialylated غير glycans قد sialic acid إجمالا. عند وجود مجموعات sialic acid السلاسل الثقيلة صفر- 4 مجموعات Yo أو مع كلا السكرين. «Gal أو GalNAc ترتبط مع سواء
SAYA
س١ طبقا لتجسيدات أخرى؛ قد تكون عمليات التزاوج المختلفة للسلاسل الخفيفة والسلاسل الثقيلة ممكنة؛ بذلك تنتج مجموعة توافقية كبيرة من مولدات للإنزيم ذات سلسلتين مع أطوال سلسلة مختلفة وتعديلات لاحقة للترجمة. في تجسيدات (gyal قد تتنوع الأنواع المختلفة من بروتينات FXa المتباينة من ناحية © وفرتها النسبية. في أحد التجسيدات» يمكن اكتشاف وفرة الأنواع المتنوعة بمقارنة ارتفاعات الذروة في أطياف الكتلة لبروتينات FXa المتباينة السليمة. بصورة (Aly قد Had بصورة منفصلة وفرة السلاسل الخفيفة والثقيلة بواسطة مقياس طيف الكتلة بعد اختزال وألكلة بروتين سليم للتخلص من روابط disulfide بين السلاسل وداخل السلاسل. كما هو موصوف في الأمثلة؛ أدناه. يمكن تسجيل وفرة أنواع FXa المتباينة المختلفة كوفرة كبيرة» قليلة أو بصورة نادرة بالمقارنة مع الذروة الأعلى في ٠ أطياف الكتلة. مقارنة ارتفاع ذروة الكتلة. مع هذاء ليس فقط الطريقة الوحيدة لقياس الوفرة. تتوافر لمعرفة أصحاب المهارة العادية في الفن طرق أخرى لقياس الوفرة المطلقة أو النسبية لأنواع بنائية. في مثال غير محدد لطريقة أخرى لتصنيف الوفرة النسبية؛ يعتبر النوع عالي الوفرة إذا كان ارتفاع ذروة طيف الكتلة الخاص به بنسبة على الأقل حوالي ٠ 75 بالنسبة للنوع الأكثر وفرة ol) الذروة ١ الأعلى في طيف الكتلة). يعتبر النوع متوسط الوفرة إذا كانت ذروته بين حوالي 75-٠١ بالنسبة للنوع الأكثر وفرة. يكون النوع منخفض الوفرة إذا كانت ذروته بين حوالي 79٠0-7 بالنسبة للنوع الأكثر وفرة» ويكون منخفض الوفرة جدا إذا كانت ذروته أقل من حوالي 77 بالنسبة للنوع الأكثر وفرة. تكون الاصطلاحات الأخرى لمقارنة وفرة النوع النسبية ممكنه أيضا. توصف هنا أدناه تجسيدات خاصة غير محدودة للتغاير البنائي في السلاسل الخفيفة؛ ٠ السلاسل الثقيلة لبروتين FXa متباين واتحادات منهم. تتضمن تجسيدات الكشف بروتينات FXa متباينة فيها الطرف carboxy للسلسلة الخفيفة ينتهي عند أحماض أمينية مختلفة نتيجة للانشقاق المتغير عند الموقع PACE تتضمن التجسيدات ذات الصلة وجود أعداد متنوعة من متخلفات Gla والتعديلات اللاحقة للترجمة B- Jie hydroxylation لمتخلف hexose s aspartic acid متصل مع 0. يوصف أدناه بعض من تلك Yo التجسيدات. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون مدر
_— ¢ \ _ السلسلة الخفيفة من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١9 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 4 متخلفات Gla ٠ متخلفات (Gla أو ١١ متخلف 0618. في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على hexose «3-hydroxy Asp?’ متصل مع 0 أو كل التعديلات اللاحقة © للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VE حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١١ في ٠ تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ (Gh متخلفات Gla أو ١١ متخلف Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على -م hexose hydroxy Asp? متصل مع «O أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. yo في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VE) حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم:٠. في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 4 متخلفات ٠١ (Gla متخلفات Gla أو ١١ متخلف Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على -م hexose hydroxy Asp?’ متصل مع 0 أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات oe ٠ الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم:٠. في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 4 متخلفات ٠١ (Gla متخلفات Gla أو ١١ Yo متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على -م hexose hydroxy Asp?’ متصل مع «O أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات
SAYA yoo المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد FXa من الكشف على أي من البروتينات المتباينة الأخرى من الكشف. FXa مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات متباين فيه تتكون السلسلة FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات الكشف على بروتين في .١ حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VET إلى ١ الخفيفة من أو Gla متخلفات ٠١ (Gh تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات dla تجسيدات ذات ©
B- متخلف 018. في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على ١ متصل مع ©؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات hexose chydroxy Asp® المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد FXa من الكشف على أي من البروتينات المتباينة الأخرى من الكشف. FXa مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات للسلسلة الثقيلة carboxy متباينة فيها الطرف FXa تتضمن تجسيدات من الكشف بروتينات " glycans ينتهي عند أحماض أمينية مختلفة. التجسيدات ذات الصلة تتضمن ارقام متغايرة لأجل أدناه بعض من تلك التجسيدات. Coa giesialylation متصلة مع 0 تتضمن درجات متفاوتة من متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: 74-١67 السلسلة الثقيلة من من AY) المتباينة FXa قد تشتمل تركيبات من الكشف إضافيا على أي من بروتينات .١ Yo الكشف. متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين السلسلة الثقيلة من 77-1167 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: من AY) المتباينة FXa قد تشتمل تركيبات من الكشف إضافيا على أي من بروتينات .١ الكشف. ٠ متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين السلسلة الثقيلة من 94-1167 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: واحد؛ الذي قد core-1 glycan في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة إضافيا على .١ قد ccore-1 glycans من (pi) أو .di- sialylated أو «mono- sialylated «sialylated يكون غير قد تشتمل .disialylated أو emono-sialylated «sialylated يكون كل منهم على حدة غير YO بمفردها أو yal) المتباينة الموصوفة في هذه FXa تركيبات من الكشف على أي من البروتينات
SAYA
I. من AY) المتباينة FXa في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات الكشف. متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين السلسلة الثقيلة من 99-1167 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: واحد؛ الذي قد »0:8-1 glycan في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة إضافيا على .١ © قد ccore-1 glycans من (pi) أو .di- sialylated أو «mono- sialylated «sialylated يكون غير قد تشتمل .disialylated أو cmono-sialylated «sialylated يكون كل منهم على حدة غير بمفردها أو yal) المتباينة الموصوفة في هذه FXa تركيبات من الكشف على أي من البروتينات من AY) المتباينة FXa في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات الكشف. ٠ للسلسلة carboxy متباينة فيها الطرف FXa تتضمن تجسيدات من الكشف بروتينات والتي فيهما PACE الخفيفة ينتهي عند أحماض أمينية مختلفة نتيجة للانشقاق المتغير عند الموقع من السلسلة الثقيلة ينتهي أيضا عند أحماض أمينية مختلفة. التجسيدات ذات carboxy الطرف B- Jie والتعديلات اللاحقة للترجمة؛ Gla الصلة تتضمن أرقام متغايرة من متخلفات في السلاسل الخفيفة؛ وأرقام O متصل مع hexoses aspartic acid لمتخلف hydroxylation ٠ في السلاسل sialylation متضمنة درجات متنوعة من O المتصلة مع glycans متغايرة لأجل الثقيلة. يوصف أدناه بعض من ثلك التجسيدات. متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب ١4 إلى ١ السلسلة الخفيفة من حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من YAS إلى VET وتتكون السلسلة الثقيلة من ١ رقم: ٠ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات .١ تعريف الترتيب رقم: في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل .Gla متخلف ١١ أو (Gla متخلفات ٠١ «Gla متصل مع 0؛ أو كل التعديلات hexose «f-hydroxy Asp” السلسلة الخفيفة إضافيا على المتباينة الموصوفة FXa اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات Yo المتباينة الأخرى من الكشف. FXa
SAA
“yy
في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون ALLL) الخفيفة من ١ إلى ١4 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAT حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ (Gla © متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات
FXa المتباينة الأخرى من الكشف.
٠١ في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى ١4 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل
Vo السلسلة الخفيفة إضافيا على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة
٠ الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف.
في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون ALLL) الخفيفة من ١ إلى ١4 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب
Yo رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من VET 949 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات
SAYA
-١م-
٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans © قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع
بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف.
٠١ في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VE حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من ١76 إلى 744 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل
١ السلسلة الخفيفة إضافيا على "مي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف.
في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون
٠ السلسلة الخفيفة من ١ إلى VE حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAT حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات
Yo اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات
“va المتباينة الأخرى من الكشف. FXa
في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VE حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من 0 تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans ٠ قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع
بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. Vo في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VE حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من 76؟١ إلى YA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل ٠ السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة Yo الخفيفة مع كل Pla) ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع
Cy. المتباينة الأخرى من الكشف. FXa بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب VEY إلى ١ السلسلة الخفيفة من إلى 744 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من ١76 وتتكون السلسلة الثقيلة من ١ رقم: في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات .١ تعريف الترتيب رقم: 0 في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل .Gla متخلف ١١ أو (Gla متخلفات ٠١ «Gla متصل مع 0؛ أو كل التعديلات hexose «f-hydroxy على "كمي Lilia) السلسلة الخفيفة المتباينة الموصوفة FXa اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات المتباينة الأخرى من الكشف. FXa ٠ متباين فيه تتكون FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب VEY إلى ١ السلسلة الخفيفة من حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من FAT إلى ١76 الثقيلة من ALLL وتتكون ١ رقم: في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات .١ تعريف الترتيب رقم: في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل .Gla متخلف ١١ أو Gla متخلفات ٠١ Gla Vo متصل مع 0؛ أو كل التعديلات hexose «f-hydroxy على "كمي Lilia) السلسلة الخفيفة المتباينة الموصوفة FXa اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات
FXa المتباينة الأخرى من الكشف.
١ في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل
Yo السلسلة الخفيفة إضافيا على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan
SAYA yy
واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من © الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع
بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من YA VET حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من Ve تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة Lila) على 4 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على hexose «f-hydroxy Asp® متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1
٠ #ددعواع؛ قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف.
١ في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من ١76 إلى 744 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل
Yo السلسلة الخفيفة إضافيا على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة
SAYA
ا
في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات
FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب © رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من VET إلى FAT حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 4 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على hexose «f-hydroxy Asp” متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة ٠ في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات
FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من Vo تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة Lila) على 4 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans ٠ قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع
بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. Yo في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون ALLL) الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب SAYA
الوب
رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من 76؟١ إلى YA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على hexose «f-hydroxy Asp® متصل مع 0؛ أو كل التعديلات oo اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من ٠ الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع
بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون السلسلة الخفيفة من ١ إلى VET حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من ١76 إلى 744 حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من Vo تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة Lila) على 4 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات
٠ علا المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون ALLL) الخفيفة من ١ إلى VET حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAT حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 9 متخلفات ٠١ Gla Yo متخلفات Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات SAYA pio المتباينة الموصوفة FXa اللاحقة للترجمة. قد تشتمل تركيبات من الكشف على أي من البروتينات في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات المتباينة الأخرى من الكشف. FXa في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون © السلسلة الخفيفة من ١ إلى VEY حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون ALLL الثقيلة من ١76 إلى FAA حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على 4 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة إضافيا على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات ٠ اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 cglycans قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من Vo الكشف على أي من البروتينات FXa المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات FXa المتباينة الأخرى من الكشف. في تجسيدات معينة؛ تشتمل تركيبات من الكشف على بروتين FXa متباين فيه تتكون ALLL) الخفيفة من ١ إلى VET حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١ وتتكون السلسلة الثقيلة من YA VET حمض أميني من ترتيب الحمض الأميني من Ye تعريف الترتيب رقم: .١ في تجسيدات ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الخفيفة Lila) على 4 متخلفات ٠١ «Gla متخلفات (Gla أو ١١ متخلف .Gla في كل تجسيد من تلك التجسيدات؛ قد تشتمل السلسلة الخفيفة Lilia) على "كمي hexose «f-hydroxy متصل مع 0؛ أو كل التعديلات اللاحقة للترجمة. في تجسيدات أخرى ذات صلة؛ تشتمل السلسلة الثقيلة على core-1 glycan واحدء الذي قد يكون غير .disialylated cmono-sialylated sialylated أو اثنين من core-1 YO #ددعواع؛ قد يكون كل منهم على حدة غير «mono- sialylated sialylated أو 10 0. في تجسيدات ذات صلة أخرى أيضاء يتحد كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة
SAYA yoo الخفيفة مع كل إحلال ممكن للتعديلات اللاحقة للترجمة للسلسلة الثقيلة. قد تشتمل تركيبات من المتباينة الموصوفة في هذه الفقرة بمفردها أو في اتحاد مع FXa الكشف على أي من البروتينات المتباينة الأخرى من الكشف. FXa بروتينات أخرى موصوفة؛ وأيضا مع أي من بروتينات يوفر الكشف الحالي إضافيا أحماض نووية معزولة تشمل ترتيبات حمض نووي يشفر تكميلي DNA متباين. طبقا لتجسيد تمثيلي غير محدد؛ يتم الكشف عن ترتيب FX بروتين © كما سوف يدركه أصحاب LE متباين هنا على أنه تعريف الترتيب رقم: FX يشفر بروتين (cDNA) متباين ممكنة في ضوء FX المهارة العادية؛ قد تكون ترتيبات حمض نووي أخرى تشفر بروتين تحلل الشفرة الجينية. متباين مع ترتيب يشفر FX في بعض التجسيدات؛ قد يتوافر حمض نووي يشفر بروتين
FX إشارة و/أو ببتيد أولي (أي؛ ترتيبات دليلية) موضوع عند الطرف الأميني من بروتين ass ٠ الذي؛ من بين وظائف محتملة أخرى؛ يوجه بروتين مخلق حديثا إلى الحيز الإفرازي. المعالجة اللاحقة للترجمة بعدئذ تزيل الدليل قبل إفراز بروتين ناضج من الخلية. في بعض التجسيدات؛ تلك من Jie آدمي أصلي. يمكن استخدام ترتيبات دليلية غير أصلية؛ FX تشتق تلك الترتيبات من آدمي. أيضا يمكن استخدام ترتيبات دليلية من بروتينات أخرى (متضمنة أصل غير prothrombin يكون الترتيب الدليلي of آدمي). في تجسيد ترتيب الحمض النووي من تعريف الترتيب رقم: VO . آدمي prothrombin الطرفي الأميني من متباين للسماح FX طبقا لتجسيدات أخرى؛ يمكن تعديل حمض نووي يشفر بروتين متباينة. FXa بالتنشيط داخل الخلية لعامل التخثر لإنتاج بروتينات بصورة طبيعية كمولد إنزيم ذو سلسلتين فيه يوضع ببتيد FX كما هو ملاحظ أعلاه؛ يدور قادر FXa التنشيط لتشكيل (FX حمض أميني عند الطرف الأميني من السلسلة الثقيلة OF تنشيط ٠
AP يتطلب إزالة بتحلل البروتين لأجل prothrombinase على العمل كمادة تجلط أولية في معقد منشط أو 1 منشط. في دراسات FIX Jie من نظام تخثر داخلي وخارجي؛ proteases بواسطة ثم ينشط WDA المتباين في FX سابقة؛ تستخدم طرق مماثلة للتنشيط. بصفة خاصة؛ يظهر بروتين المتباين FXa بعدها ينقى بروتين (RVVX) Russells Viper في خطوة منفصلة بالمعالجة مع سم لتحليل لاحق. ve متباين منشط مبدئيا على نطاق صناعي FX على الرغم من إمكانية إنتاج بروتين
SAYA yr باستخدام طرق مشابهة؛ فإن هذا سوف يكون غير فعالة وباهظ الثمن. على سبيل المثال» سوف
AP متخلف. لتجنب تلك العيوب؛ قد يزال RVVX تكون هناك حاجة لتنقية قوية للتخلص من قادرة على الظهور والعمل داخل الخلية. بهذا proteases الأصلي ويستبدل مع مواقع إدراك وانشقاق متباين داخل الخلية بدون الحاجة إلى خطوات FX الأسلوب؛ قد يكون من الممكن تنشيط بروتين المتباينة المنشطة المفرزة بواسطة خلايا عائل في FX قد تنقى بروتينات Mae عملية إضافية. © وسط النمو. يتوافر في تعريف الترتيب رقم: ؛ مثال غير محدد لترتيب حمض نووي يشفر 116 متباين
FX يتوافر ترتيب البروتين لبروتين (PACE مع موقع إدراك وانشقاق AP فيه يستبدل ترتيب في هذه .١ تمثيلي في تعريف الترتيب رقم: cDNA والمتباين الناضج المشفر بواسطة ترتيب من ٠94 (VEY (الأحماض الأمينية AP التجسيدات؛ تستبدل الأحماض الأمينية المشكلة ٠ في شفرة من حرف واحد). هذا RKR) ArgLys-Arg نوع بري) مع الترتيب FX ترتيب بروتين الأحماض (RKR الترتيب؛ متحدا مع ثلاثة متخلفات على الأقل من ترتيب السلسلة الخفيفة (أيضا (RKRRKR يشكل موقع إدراك وانشقاق (أي؛ )١ من تعريف الترتيب رقم: ١47-146٠ الأمينية القابل PACE (تعريف الترتيب رقم: 0( لإنزيم انشقاق حمض أميني قاعدي مزدوج (0805. إنزيم المتباين المعدل FX اللذوبان الظاهر بصورة مشتركة في نفس خلايا العائل التي تظهر بروتين 5 يمكنه لذلك تنشيط عامل التخثر داخل الخلية. العائل بصورة أصلية إنزيم مع موقع إدراك مشابه WIA في بعض التجسيدات؛ حيث تظهر بصورة مشتركة. في Lana) خارجي protease قد يكون من غير الضروري إظهار (PACE مثل متباين ظاهر في الخلاياء بذلك يتم FX الأصلي كافي لتنشيط بروتين protease الواقع؛ قد يكون متباين منشط. FX إنتاج وإفراز بروتين ٠ «PACE تختلف عن proteases في تجسيدات أخرى؛ قد تستخدم مواقع إدراك وانشقاق قد تظهر تلك LAP لكنها قادرة على العمل داخل الخلاياء لاستبدال ترتيب الحمض الأميني متباين لتنشيط عامل التخثر المعدل. FX الإنزيمات بصورة مشتركة في نفس خلايا العاثل كبروتين إذا تم إنتاج إنزيمات أصلية قادرة على شق الموقع المعالج هندسيا بمستويات كافية في خلايا خارجية المنشأ بصورة مشتركة. proteases العائل» لا تكون هناك حاجة لإظهار Yo المتباينة من الكشف الحالي في FX قد تدمج ترتيبات الحمض النووي المشفرة لبروتينات
SAYA
ل نواقل باستخدام تقنيات معروفة جيدا لأصحاب المهارة العادية في الفن. النواقل؛ في تجسيدات معينة؛ تتضمن بلازميدات عامة؛ بلازميدات بكتيرية؛ يصبوغات حقيقية النواة» كروموسومات خميرة صناعية وجينومات فيروسية. الفيروسات التمثيلية غير المحددة تتضمن الفيروسات الارتجاعية؛ الفيروسات الغدية؛ الفيروسات المرتبطة بالفيروس الغدي adeno- (AAV) associated viruses © الفيروسات النباتية (Jie فيروس فسيفساء القرنبيط» وفيروس فسيفساء التبغ. تتاح أنواع أخرى للنواقل. في بعض التجسيدات؛ تكون النواقل قادرة على النسخ المستقل في عوائل مناسبة. في تجسيدات cg AT تظل النواقل في عوائل خارج الصبغيات أو قد تدمج في جينوم العائل تاركة الناقل لينسخ مع جينوم العائل. النواقل المشتملة على جين وترتيبات تنظيمية كافية للحفاظ على استنساخ وترجمة الجين تسمى نواقل إظهار. قد تنتقى أو تصمم النواقل طبقا للكشف ٠ الحالي؛ طبقا لمعرفة أصحاب المهارة العادية في الفن؛ لعمل في أي نوع خلية قادر على دعم إظهار بروتين FX متباين» متضمنة الخلايا البكتيرية» LOA بدائية النواة LDA (opal خميرة؛ خلايا فطرية WIA (gal نباتية؛ خلايا حيوانية؛ خلايا حشرية؛ خلايا ثديية؛ خلايا «CHO وخلايا آدمية؛ أو خلايا أخرى. قد تحتوي النواقل اختياريا على واحد أو أكثر من الترتيبات التنظيمية. تسمح ترتيبات Vo تنظيمية معينة بالاستنساخ؛ Sie أصول الاستنساخ. تقوم ترتيبات تنظيمية أخرى بالتحكم في أو تعديل الاستنساخ,؛ مثلا معززات؛ محثات؛ ومواقع إنهاء نسخ. أمثلة غير محدودة على المعزز أو المحثات هي تلك المشتقة فيروس ارتجاعي (LTRs الفيروس المضخم cytomegalovirus LAL Simian Virus 40 «(CMV) (5740)؛ فيروس غدي (على سبيل المثال؛ معزز متأخر رئيسي لفيروس غدي «(AdMLP) adenovirus major late promoter أو فيروس محدث للأورام ARN. Yo الإضافية تتضمن معززات ومحثات تخص نسيج؛ معززات ومحثات نشطة جوهرياء ومعززات ومحثات قابلة للحث. تتاح أيضا معززات ومحثات أخرى. أيضا توجد ترتيبات تنظيمية أخرى تتحكم في أو تعدل RNA dallas (حمض (ribonucleic النسخي اللاحق؛ مثل إشارات Jas polyadenylation s أو إشارات تزيد أو تخفض ثبات mRNA هناك ترتيبات تنظيمية أخرى تتحكم في أو تعدل ترجمة البروتين؛ مثل ترتيبات بدء الترجمة (على سبيل المثال؛ ترتيب توافق (Kozak Yo معالجة مترجمة لاحقة؛ أو ثبات بروتين. قد تتضمن النواقل جينات معلمة ALE للانتقاء؛ السماح بانتقاء خلايا عائل تمتص النواقل. مدر
CYA
للانتقاء تمنح نمط ظاهري مقاوم للعقار» مثل ALE الأمثلة غير المحدودة تتضمن جينات معلمة تسمح بالانتقاء DHFR (للاستخدام في خلايا عائل (DHFR) dihydrofolate reductase جين الجين الحديث (يسمح بالانتقاء مع 8 أو عقاقير مشابهة)؛ جين (methotrexate باستخدام (يسمح بالانتقاء مع glitamate synthetase (pay «(hygromycin 8 (يسمح بالانتقاء مع hph . (methionine sulfoximine © المتباينة من FX قد يتم إدخال النواقل المشتملة على ترتيبات حمض نووي تشفر بروتينات المتباين. تعرف FX الكشف في نوع واحد أو أكثر من خلايا عائل قادرة على دعم إظهار بروتين جيدا لأصحاب المهارة العادية في الفن طرق إدخال النواقل في خلايا عائل مناسبة. تتضمن الأمثلة غير المحدودة نقل حامل الجين من العائل العابر والثابت؛ التحولء التنبيغ والعدوى الفيروسية لخلايا عائل مستهدفة. أمثلة أخرى تتضمن نقل حامل الجين من العائل يتسبب فيه ٠ نقل حامل الجين من العائل يتسبب فيه ccaleium phosphat ترسيب «dextran بصورة غير مباشرة التحام الجبلة المجردة؛ التثقيب الكهربي؛ كبسلة عديد نيكلوتيد cpolybrene بصورة غير مباشرة (نيكلوتيدات) في الجسيمات الشحمية؛ وحقن مجهري مباشر لأجل 0178 في الأنوية. تعرف جيدا في الفن طرق تحويل الخلايا النباتية؛ الخلايا البكتيرية وخلايا خميرة. مع بروتينات أخرى لتحسين الإظهار أو Alia و7700 FX يمكن إظهار بروتينات Vo المتباينة. في مثال غير محدد؛ يمكن بصورة FXa أو FX المعالجة اللاحقة للترجمة لبروتينات الإيستقاناع -1 مع الناقل carboxylase مشتركة نقل حامل الجين من العائل نقال يتضمن جين يشفر في glutamic acids لأجل carboxylation العائل لزيادة LDA متباين في FX المشفر لبروتين وتكوين carboxylation هذاء يمكن زيادة مدى dda ule للسلسلة الخفيفة. Gla مجال السيطرة بذلك تتحسن إنتاجية عامل التخثر النشط المنتج بواسطة (Gla في مجال السيطرة Gla متخلفات ٠ المتباين FX موصوف أعلاه؛ قد يتم بصورة مشتركة إظهار بروتين HAT الخلايا. في تجسيد
PACE مع إنزيم PACE الأصلي مع موقع انشقاق AP المعدل لاستبدال ترتيب الحمض الأميني الظاهر بصورة مشتركة يمكنه بعدئذ العمل على PACE العائل. LDA قابل للذوبان في نفس متباين منشط الذي يفرز فيما بعد FX المتباين داخل الخلايا لتشكيل بروتين FX انشقاق بروتين المتباين BX الخلية. كما هو ملاحظ أعلاه؛ هذا الأسلوب يتجنب الحاجة إلى تنشيط بروتين Yo في خطوة منفصلة؛ التي تكون أيضا غير فعاله وعالية التكلفة. مدر
—y4— متباينة؛ وبروتينات أخرى نافعة لتحسين إظهار FX الخلايا القادرة على إظهار بروتينات متباين في شكل نشط؛ تتضمن خلايا ثديية. تعرف في الفن خطوط الخلية الثديية FX بروتين المناسبة كعوائل لإظهار بروتين؛ متضمنة تلك المشتقة من آدميين» جرذان؛ فثران وثدييات أخرى.
American Type الأمثلة غير المحددة التمثيلية تتضمن خطوط خلية خالدة معينة متاحة من
Chinese مبيض هامستر صيني LIA تتضمن «sal أو مصادر (ATCC) Culture Collection ©
LMA «(NIH-3T3 LMA (HEK-293T LA «SP2 خلايا (NSO LMA (CHO) hamster ovary خلايا كلية قرد أخضر أفريقي (BHK) baby hamster kidney خلايا كلية هامستر رضيع «HeLa خلايا كارسينوما خلايا كبدية آدمية (على (Vero أو CV-1 «COS (على سبيل المثال؛ خلايا «BHK21 خلايا .آ؛ خلايا (HeLa خلايا (A431 خلايا <A549 سبيل المثال؛ 02م116)؛ خلايا وخلايا أخرى. يمكن استخدام خلايا Jurkat خلايا (HaK خلايا (U937 خلايا (HL-60 خلايا ٠ ثديية أخرى كخلايا عائل لإظهار بروتين طبقا لمعرفة أصحاب المهارة العادية. قد تستخدم خطوط الخلية من الحشرات؛ النباتات؛ البكتيريا أو opal في تجسيدات التي تستخدم SRI الفطريات. الخلايا الحشرية غير المحدودة التمثيلية تتضمن خلايا 58 أو أحيانا في تقارن مع نظام إظهار عامل الفيروس العصوي. خلايا النبات غير المحددة التمثيلية الذرة؛ الدقيق؛ والبطاطس. ad الطحلب carabidopsis enicotiana تتضمن تلك من أنواع VO «Bacillus | subtilis «Escherichia | coli البكتيريا غير المحددة التمثيلة تتضمن سلالات الفطريات غير المحدودة التمثيلية تتضمن Streptomyces «Salmonella typhimurium سلالات خميرة «Pichia pastoris «Saccharomyces cerevisiae «Schizosaccharomyces pombe يمكن استخدام خلايا حشرية؛ نباتية؛ بكتيرية .Candida وسلالات خميرة (Kluyveromyces العادية في الفن. lea وفطرية أخرى كخلايا عائل لإظهار بروتين طبقا لمعرفة أصحاب ٠ توجد ضمن معرفة أصحاب المهارة العادية في الفن طرق؛ عوامل كاشفة وشروط لزراعة متباين منشط ولا تعتبر حصرية. في مثال غير محدد؛ يمكن إنتاج FX خلايا عائل لإنتاج بروتين
K لتر لوسط خالي من المصل مدعم مع فيتامين ٠٠0١٠ متباينة في مزارع بمقدار FXa بروتينات متباينة من الكشف على نطاق صناعي؛ FXa في مثال غير محدد آخرء يمكن إنتاج بروتينات لترء أو أحجام أكبر متساوية؛ تحت شروط Youu على سبيل المثال في خزانات تخمير سعة YO مصممة لتحسين الإظهار والاستعادة.
SAYA
ل بعد نمو خلايا العاثل تحت شروط زراعة تدعم الإظهار والتنشيط داخل الخلايا لبروتينات FX متباينة؛ يمكن معالجة وسط النمو الخلوي لعزل وتنقية بروتينات FXa المتباينة المفرزة أثناء نمو الخلية. في تجسيدات (gal تحديدا عند استخدام خلايا عائل Aud أخرى؛ يمكن إطلاق بروتين FXa المتباين المتبقي في (LDA على سبيل المثال؛ بانشطار الخلايا ميكانيكيا؛ إنزيميا؛ أو مع منظفات. يمكن طرد وسط مزرعة الخلية مركزيا و/أو تنقيته لإزالة خلايا والبقاياء على سبيل المثال بالترشيح العميق بمفرده ليله ترشيح غشاء؛ على سبيل المثال خلال مرشح غشاء مع مقاس مسام متوسط بمقدار 45 ميكرومتر؛ ١7 ميكرومتر؛ أو مقاس مسام آخر. بعد إزالة البقايا الخلوية بالطرد المركزي و/أو الترشيح؛ oa معالجة الوسط لتنقية بروتينات FXa المتباينة. اعتمادا على Yo خطوات التنقية اللاحقة؛ قد تكون هناك رغبة في تخفيف و/أو تبادل الأس الهيدروجيني للمادة الطافية المنقاة أو المادة المرشحة. تعرف جيدا في الفن طرق تنقية البروتين. الطرق غير المحدودة التمثيلية لتنقية البروتين تتضمن ترسيب الملح؛ تحليل كروماتوجرافي باستثناء المقاس؛ تحليل كروماتوجرافي بتبادل الأيون؛ وتحليل كروماتوجرافي بالانجذابية. على سبيل المثال يمكن تثبيت الأجسام المضاد المدركة بصفة Vo خاصة لبروتين FXa المتباين لأعمدة التنقية لالتقاط البروتين بصورة ALE للانعكاس من الوسط أو مثبت الأس الهيدروجيني المحيط. بعد غسل عمود الانجذابية لإزالة المواد الملوثة؛ فيما بعد يمكن تصفية بروتين FXa المتباين المرتبط. يمكن أن يخضع بروتين FXa المتباين المتقى جزئيا إلى خطوات معالجة طبقا لممارسة التصنيع الجيدة أو متطلبات تنظيمية تتضمن؛ على سبيل AY JB) أو إخماد الفيروسات. يمكن AG ٠ الفيروسات بالترشيح الفائق أو الإخماد بعلاج عينة مع كحول و/أو مادة تنظيف؛ طبقا لمعرفة أصحاب المهارة العادية في الفن. على سبيل (JU يمكن استخدام مرشحات الفيروس للعلامة التجارية ©1:ه17005؛ المتاحة من Sartorius Stedim Biotech تتاح أيضا طرق أخرى لإزالة أو إخماد الفيروسات. في بعض التجسيدات؛ يمكن استخدام تحليل كروماتوجرافي بنسق مختلط mixed mode (MMO) chromatography | Yo لتنقية بروتين FXa المتباين بمفرده؛ أو في اتحاد مع خطوات تنقية أخرى. (MMC المسمى أيضا تحليل كروماتوجرافي متعدد النمط؛ يشير إلى استخدام أوساط تحليل مدر
١ كروماتوجرافي توفر أكثر من نوع للتفاعل البيني بين المركب الترابطي ومكونات العينة. الأنواع التمثيلية للتفاعلات البينية تتضمن تفاعل بيني إلكتروستاتي (مبادل أنيوني أو كاتيوني)؛ كاره للماء؛ يمكن للتفاعلات البينية هذه .thiophilic ارتباط هيدروجين وتفاعل بيني opipi تفاعل بيني
Capto تتضمن MMC الاندماج أو العمل بصورة مستقلة. الأمثلة الخاصة؛ غير المحدودة لأوساط «Capto Core 700 مادم MMC ImpRes «Capto MMC «Capto adhere ImpRes ¢<adhere © توصف جميعها إضافيا في:
Multimodal Chromatography Handbook published by GE Healthcare Life Sciences (2013). كارهة للماء؛ ارتباط هيدروجين»؛ ¢thiophilic يوفر خصائص Capto MMC على سبيل المثال»
MMC خصائص الكتروستاتية لمبادل كاتيوني. يمكن أيضا استخدام أوساط Lady ٠ في بعض التجسيدات؛ يمكن استخدام تحليل كروماتوجرافي باستبدال الأيون لتنقية بروتين متباين بمفرده؛ أو في اتحاد مع خطوات تنقية أخرى. يشير التحليل الكروماتوجرافي باستبدال FXa الأيون إلى استخدام أوساط تحليل كروماتوجرافي تسمح بفصل الجزيئات على أساس الاختلافات في شحنات سطحها الصافية؛ التي قد تتنوع مع الأس الهيدروجيني؛ الملح وشروط أخرى. عند أس هيدروجيني أعلى نقطة التساوي الكهربي للبروتين؛ سوف يرتبط البروتين مع وسط مشحون بصورة ١ موجبة (مبادل أنيون)؛ حيث عند أس هيدروجيني أدنى نقطة تساويه الكهربي؛ سوف يرتبط نمع وسط مشحون بصورة سالبة (مبادل كاتيون). يمكن اختيار شروط أوساط تبادل الأيون ومثبت الأس الهيدروجيني (على سبيل المثال؛ تركيز الملح؛ الأس الهيدروجيني؛ إلخ) بحيث يرتبط المتباين) بصورة مفضلة مع الأوساط» مع FXa البروتين المراد تنقيته (على سبيل المثال؛ بروتين السماح بإزالة المواد الملوثة المرتبطة بدرجة أقل قوة تحت نفس الشروط بالغسل؛ بعدئذ يمكن ٠ تصفية البروتين محل الاهتمام من عمود التحليل الكروماتوجرافي. توصف معلومات إضافية عن التحليل الكروماتوجرافي بتبادل الأيون إضافيا في:
Ion Exchange Chromatography & Chromatofocusing Principles and Methods Handbook published by GE Healthcare (2010). يمكن تصنيف مبادلات الأيون حسب الضعف أو القوة؛ مما يدل على درجة بقائها Yo مشحونة حسب تغيرات الأس الهيدروجيني. تظل المبادلات القوية مشحونة عبر نطاق أس على المجموعات الوظيفية لمبادل A هيدروجيني واسع؛ بينما لا تفعل المبادلات الضعيفة.
SAYA
الخ الأنيون تتضمن أمونيوم رباعي (0)» الذي يكون قوياء 5 (DEAE) diethylaminoethyl (ANX) diethylaminopropyl الضعيفان. أمثلة على المجموعات الوظيفية لمبادل كاتيون (SP) sulfopropyl (meals و (S) methyl sulfonate يعتبر كلاهما قروياء carboxymethyl s (CM) الضعيف. 0 في أحد التجسيدات؛ يمكن تنقية بروتين FXa المتباين باستخدام خطوة تحليل كروماتوجرافي باستبدال الأنيون بمفردها؛ أو تليها خطوة تحليل كروماتوجرافي لتبادل الكاتيون. في تجسيد آخرء يمكن تنقية بروتين FXa المتباين باستخدام خطوة تحليل كروماتوجرافي بتبادل الكاتيون بمفردهاء أو تليها خطوة تحليل كروماتوجرافي بتبادل الأنيون. الأمثلة الخاصة؛ غير المحددة لأوساط تبادل الأيون تتضمن «Capto DEAE و Capto «Capto SP ImpRes <ImpRes ٠ 5 ماممث. و «Capto و15 «SOURCE 155 «SOURCE «Mini S PC «Mini Q PC «MacroCap Q <MacroCap SP «SOURCE 30S «SOURCE 30Q S PE «Mini Q PE نمال Mono «PC Mono S «PC Mono Q «HR Mono 5 <HR Mono Q «CM Sephadex C-50 «CM Sephadex C-25 (DEAE Sephacel «Mono S GL «Q GL Sephadex A-25 «DEAE Sephadex A-50 «DEAE Sephadex A-25 علطو QAE Sephadex ANX Sepharose 4 Fast Flow (High «SP Sephadex C-50 «SP Sephadex C-25 <A-50 ٠ CM «CM Sepharose Fast Flow ¢ANX Sepharose 4 Fast Flow (Low Sub) ¢Sub) «DEAE Sepharose Fast Flow «DEAE Sepharose CL-6B «¢Sepharose High Performance Sepharose High Performance <Q Sepharose Fast Flow <Q Sepharose Big Beads و Q SP «SP Sepharose Big Beads Food Grade «SP Sepharose Big Beads «Sepharose XL «SP Sepharose XL s «SP Sepharose Fast Flow <Sepharose High Performance Y + المتاحين جميعا من .GE Healthcare يمكن الحصول على أوساط تبادل أيون أخرى من Merck Millipore متضمنة؛ على سبيل المثال؛ تلك في سلسلة Fractogel® أو سلسلة Eshmuno® الأمثلة في سلسلة Fractogel® تتضمن «TMAE Medcap Resin <TMAE Hicap Resin <TMAE Resin Resiny «SE Hicap Resin 503 Resin «<DMAE Resin «DEAE Resin 00. الأمثلة في Yo سلسلة Eshmuno® تتضمن راتنجات ¢S «CPX © و110. يمكن أيضا استخدام أوساط تبادل أيون من مصادر أخرى. SAYA
الا _ بعد تنقية بروتين FXa المتباين بدرجة كافية؛ يمكن تركيز البروتين المنقى باستخدام الترشيح الفائق والترشيح الثنائي في مستحضر للتعبئة أو المعالجة الإضافية. في بعض التجسيدات»؛ يمكن تخفيف بروتينات 1760 المتباينة المركزة والمنقاة في محاليل مائية تحتوي على مثبتات أس هيدروجيني ومقومات أخرى مناسبة للإعطاء إلى كائنات؛ ثم تعبا 0 للتخزين طويل الأمد حتى التوصيل. يمكن استعمال خطوات معالجة إضافية. على سبيل (JB) يمكن تجفيد تركيبات تشمل بروتينات FXa متبايئة؛ مواد مسوغة؛ مثبتات أس هيدروجيني؛ ومقومات مقبولة دوائيا أخرى للتخزين طويل الأمد. يمكن تحليل بروتينات FXa المتباينة من الكشف؛ سواء تم إنتاجها طبقا للطرق الموصوفة في الأمثلة old أو بواسطة طرق (opal لتحديد وجود ودرجة التغاير البنائي باستخدام طرق ٠ مألوفة لأصحاب sled) العادية في الفن. على سبيل المثال؛ في بعض التجسيدات؛ يمكن تحليل أو بروتين سليم أو شدف محللة للبروتين محضرة منهاء؛ بواسطة ترتيب بروتين مباشر؛ على سبيل المثال؛ باستخدام انحلال Edman يمكن Lay تحليل بروتين أو ببتيدات بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل quid «(LC) chromatography متضمنا LC طور معكوس «(RP-LC) reverse phase LC وأيضا ٠5 مقياس طيف الكتلة؛ متضمنا مقياس طيف الكتلة لزمن طيران رباعي الاستقطاب للتأين بالرش الكهربي (ESI- electrospray ionization quadrupole time-of-flight mass spectrometry QTOF MS) للكشف عن تغير في ترتيب الحمض الأميني ووجود تعديلات لاحقة للترجمة محددة. إضافة لهذاء وجود المجموعات المشحونة؛ على سبيل (JU يمكن الكشف عن متخلفات y- (Gla) carboxylated glutamic acid باستخدام تحليل كروماتوجرافي سائل بتبادل الأنيون anion -(AEX-HPLC) exchange liquid chromatography | ٠ عندما يكون وجود أجزاء carbohydrate مشكوك فيه؛ يمكن التأكد من وجودهم بإزالتهم مع 015 خاصة. بعدثذ؛ يمكن sale) تحليل البروتين المعالج؛ الذي يجب خلوه من carbohydrate المزالة بواسطة cglycosidase على سبيل المثال؛ بواسطة مقياس طيف كتلة؛ للتأكد من هوية carbohydrate المفترض وجوده. Yo يمكن استخدام تقنيات تحليلية أخرى مألوفة لأصحاب المهارة العادية في الفن للكشف عن مدى وهوية التغاير البنائي في بروتينات FXa المتباينة. SAYA
دوس
يمكن اختبار تركيبات تشمل بروتينات FXa المتباينة من الكشف لتحديد نشاطها السابق للتجلط. في مثال غير محدد؛ يقاس نشاط التخثر مع اختبار تجلط من مرحلة واحدة باستخدام بلازما أدمية ناقصة Factor VIII كمادة خاضعة. يعرف هذا الاختبار كاختبار لزمن thromboplastin الجزئي المنشط ((APTT) activated partial thromboplastin time لكن قد © تستخدم اختبارات أخرى طبقا لمعرفة أصحاب المهارة العادية في الفن. يوصف اختباري APTT
بمزيد من التفصيل في: Kamal, AF., et al, How to iterpret and pursue an abnormal prothrombin time, activated partial thromboplastin time, and bleeding time in adults, Mayo Cln Proc. .)2007( 82(7):864-873 Yu في تجسيدات معينة؛ تتضمن تركيبات من الكشف "كمية therapeutically Ladle Allad "effective amount أو 'كمية فعالة وقائيا "prophylactically effective amount من بروتينات FX متباينة. تشير 'كمية فعالة علاجيا" إلى كمية فعالة؛ عند جرعات ولفترات زمنية ضرورية؛ لتحقيق النتيجة العلاجية؛ على سبيل المثال وقف النزف الدموي للنزف غير المتحكم فيه. قد تتنوع الكمية الفعالة علاجيا من FXa المتباين طبقا لعوامل مثل حالة المرض»؛ العمر؛ الجنس ووزن Vo الفرد؛ وقدرة FXa المتباين على إحداث الاستجابة المطلوبة في الفرد. كمية فعالة Ladle هي واحدة Le أي تأثيرات سامة أو ضارة لأجل FXa المتباين تفوقها التأثيرات النافعة علاجيا. تشير 'كمية فعالة وقائيا" إلى كمية فعالة؛ عند جرعات ولفترات زمنية ضرورية؛ لتحقيق النتيجة الوقائية المرغبة؛ على سبيل المثال؛ منع النزف غير المتحكم فيه في كائن معرض لهذا على سبيل (JU) قد تعطى جرعة قبل جراحة مخططة. أمثلة الكائنات المعرضين لهذا تتضمن هلاء ٠ المصابين بالهيموفيليا A أو B متضمنين تلك الكائنات المنتجة لأجسام مضادة تثبيطية لمنتجات
Dla العامل. يمكن إعطاء تركيبات من الكشف إلى (AIS يتضمن مريض آدمي؛ بحاجة لمعالجة أو منع أي حالة تتميز بالتجلط غير الكافي أو إفراط في النزف. AB غير محددة لتلك الحالات تتضمن هيموفيليا A هيموفيليا B هيموفيليا A أو 3[ تصاحبها أجسام مضادة تثبيطية؛ نقص Yo عامل تجلط؛ نقص 01 epoxide reductase لفيتامين K نقص ¢gamma-carboxylase نزف تصاحبه إصابة رضحية؛ إصابة؛ تخثرء 48 الصفيحات الدموية؛ صدمة؛ اعتلال تختثري؛ تجلط في الأوعية الدموية المنتشر disseminated intravascular coagulation (010» اضطرابات مدر
دم
معالجة مضادة للتجلط فائقة. عرض تعناتام5 ل:02ت8,؛ وهن الصفيحات الدموية «Glanzman ونقص جمعية الاختزان. يمكن أيضا إجراء معالجة أو منع لاضطرابات أخرى تتميز بتجلط غير
كافي أو نزف مفرط. يمكن ضبط أنظمة التجريع لتوفر الاستجابة المرغوبة BAN (على سبيل المثال؛ استجابة علاجية أو وقائية). على سبيل (JE يمكن إعطاء بلعة فردية؛ يمكن إعطاء جرعات مقسمة متعددة على فترات زمنية أو قد تخفض أو تزداد الجرعة نسبيا كما هو مشار إليه بمقتضيات الحالة العلاجية. طبقا لبعض التجسيدات؛ تصاغ تركيبات للإعطاء عن غير الطريق المعوي في شكل وحدة جرعة لتسهيل إعطاء وانتظام التجريع. يشير شكل وحدة الجرعة إلى وحدات متمايزة فيزيائيا للعمل كجرعات وحدوية للكائنات المراد علاجها؛ مع احتواء كل وحدة على كمية محددة مسبقا من
٠ مركب نشط محسوبة لحدوث التأثير العلاجي المرغوب بمصاحبة المادة الحاملة الملائمة دوائيا.
في تجسيدات معينة؛ تكون الكمية الفعالة Ladle أو وقائيا من بروتينات FXa المتباينة حوالي 000٠ إلى ٠٠ مجم/ كجم؛ حوالي ١.00٠ إلى ٠٠ مجم/ كجم؛ حوالي ١.00٠ إلى د fans كجم؛ حوالي ١001 إلى 0 مجم/ كجم؛ حوالي ١001 إلى 005 مجم/ كجم؛ حوالي 0 إلى © مجم/ كجم أو حوالي ١.0٠ إلى ١,5 مجم/ كجم. طبقا لتجسيدات ذات صلة؛ يكون
Foo المتباينة حوالي 0.0007 إلى FXa لبروتينات Lily تركيز المصل الفعال علاجيا أو ١ نانوجزيئي 5٠60 نانوجزيئي جرامي؛ حوالي 0.07 إلى 5٠٠0 نانوجزيئي جرامي؛ حوالي 007 إلى نانوجزيئي جرامي أو Yo نانوجزيئي جرامي؛ حوالي 0.07 إلى Ye جرامي؛ حوالي 0.007 إلى المتباين بواسطة طريقة FXa إلى ؟ نانوجزيئي جرامي. قد يقاس تركيز المصل لأجل ١,7 حوالي معروفة في الفن.
Sa Y. تحضير جرعات وحدة للتركيبات من الكشف لتسمح بشكل ملائم بإعطاء كميات فعالة Ladle أو وقائيا من بروتينات FXa متباينة لكائنات أو لتحقيق تركيز مصل مرغوب لتلك البروتينات في هذه الكائنات.
لأي كائن محدد؛ قد تضبط أنظمة أو نطاقات جرعة خاصة خلال فترة زمنية طبقا لحاجة الكائن المراد علاجه والتقدير المحترف للفرد المسؤول عن إعطاء أو الإشراف على إعطاء
5 التركيبات. طبقا لهذاء تكون أنظمة ونطاقات التجريع المذكورة هنا تمثيلية فقط ولا تعتبر حصرية لنطاق التركيبات من الكشف.
مدر
تتوافر إضافيا مجموعات تتضمن؛ على سبيل المثال؛ واحدة أو أكثر من جرعات الوحدة من تركيبة من الكشف. قد تكون جرعات الوحدة هذه في شكل سائل أو كمادة تجفيد. إذا تمت تعبئة التركيبة في شكل مجفد؛ قد تتضمن المجموعات إضافيا حاوية مملوءة بمادة تخفيف؛ مثلا ماء معقم أو محلول ale لإعادة تعليق الحبة المجففة. قد تتضمن المجموعات أيضا أدوات © تستخدم للإعطاء؛ تتضمن على سبيل المثال؛ محاقن تحت الجلد؛ أو مجموعة أنابيب pls مجنحة؛ إلخ. المجموعات قد تتضمن إضافيا تعليمات للاستخدام» ضمادات كحولية لتعقيم الجلد؛ أو مكونات أخرى. قد تعطى تركيبات تشمل بروتين FXa متباين مرة واحدة أو عدة مرات حتى توقف النزف أو يتحقق التجلط الملائم طبقا لمعرفة صاحب المهارة العادية. عند استخدام اعطاءات متعددة؛ قد ٠ ثثم كل ساعة؛ يومياء أسبوعيا أو على فواصل زمنية أخرى. قد تتم الإعطاءات بجدول زمني مثلا كل ٠١ دقائق» كل Vo دقيقة؛ كل ٠١ دقيقة؛ كل (dada ١ كل ساعة؛ كل ساعتين» على ثلاثة ساعات؛ كل أربعة ساعات؛ ثلاثة مرات يوميا؛ مرتين يومياء مرة واحدة يومياء مرة واحدة كل يومين» مرة واحدة كل ثلاثة oll ومرة واحدة أسبوعيا. قد يعطى FXa المتباين أيضا بصورة مستمرة؛ على سبيل المثال من خلال مضخة ميكرونية. قد يعطى FXa المتباين بواسطة طريقة VO عن غير الطريق المعوي (على سبيل المثال؛ في الوريد؛ تحت الجلد؛ في الغشاء البريتوني؛ أو في العضل). قد يعطى FXa المتباين spe واحدة؛ مرتين؛ أو أكثرء أو على الأقل للفترة الزمنية المطلوبة لتحقيق التجلط الفعال. في تجسيد آخرء قد تعطى بصورة مشتركة تركيبات تشمل بروتين FXa المتباين مع مادة تجلط أولية أخرى تتضمن FXa متباين مختلف le) سبيل المثال؛ واحد له استبدال Yo مختلف عند رقم حمض أميني 7 بخلاف «Factor Xla «Factor IX «(leucine ملل عمماعضل ¢Factor VIII ملا FEIBA «Factor أو مادة مركزة لمعقد prothrombin «(PCC) prothrombin complex concentrate إضافيا قد تشتمل التركيبات المشتملة على بروتينات FXa متباينة على مادة حاملة مقبولة دوائيا أو وسط ناقل؛ الذي قد يكون مذيبات؛ أوساط تشتيت؛ عوامل مضادة للبكتيريا أو مضادة Yo للفطريات؛ عوامل متساوية التوتر وعوامل لتأخير الامتصاص ومثيلاتها المتوافقة فسيولوجيا. بعض الأمثلة على المواد الحاملة المقبولة دوائيا على سبيل التوضيح dad هي ماء؛ محلول ملحي؛ مدر
الا محلول ملحي ثابت الأس الهيدروجيني مع فوسفات» cethanol «glycerol ¢dextrose إلخ؛ بالإضافة على اتحادات من هذا قد توجد أيضا في التركيبة Lind عوامل مساوية للتوترء على سبيل (JU) أملاح (على سبيل (sodium chloride «Jill مواد سكر (Ae) سبيل (JU) (sucrose » أو polyalcohols (مثلا؛ mannitol أو AE . (sorbitol إضافية للمواد المقبولة Laila 0 هي عوامل ترطيب؛ عوامل استحلاب؛ مواد حافظة أو مثبتات للأس الهيدروجيني؛ التي تعزز الثبات أو خصائص أخرى للتركيبات الحالية. قد تكون التركيبات المستخدمة طبقا للكشف في أي شكل مناسب للإعطاء إلى كائن» على سبيل المثال؛ كسائل للحقن أو للتشريب. يعتمد الشكل على النسق المقصود للإعطاء والتطبيق العلاجي.
"0 عادة تكون التركيبات العلاجية معقمة وثابتة تحت شروط التصنيع والتخزين. قد تصاغ التركيبة كمحلول؛ مستحلب ميكروني؛ تشتيت؛ جسيم شحميء أو بناء موصى به مناسب لتركيز عقار عالي. قد تحضر المحاليل القابلة للحقن المعقمة بدمج بروتينات FXa متباينة من الكشف بالكمية المطلوبة في مذيب ملائم مع مقوم واحد أو اتحاد من المقومات الموصوفة أعلاه؛ يليه التعقيم المرشح. فغي حالة المساحيق المعقمة لمستحضر من محاليل قابلة للحقن معقمة؛ تتضمن
Vo طرق التحضير التجفيف بالشفط أو التجفيف بالتجميد (التجفيد) الذي ينتج مسحوق من المقوم النشط زائد أي مقوم مرغوب إضافي من محلول مرشح معقم مسبقا من ذلك.
الأمثئلة التالية تكون لأغراض التوضيح فقط ولا يجب تفسيرها بأية طريقة كتحديد لنطاق عناصر الحماية أو اختراعات أخرى مبينة هنا. الأمثلة Yo مثال :١ إظهار وتنقية بروتين FXa متباين تخليقي باستخدام تفنيات وعوامل كاشفة حيوية جزيئية قياسية؛ يتولد cDNA يشفر بروتين FX متباين يتضمن طفرة TI6L فيه يستبدل ترتيب الحمض الأميني لتنشيط ببتيد Factor X الأصلي مع ترتيب الحمض الأميني RKR (شفرة من حرف واحد) od بالاشتراك مع ترتيب RKR عند الطرف © من السلسلة الخفيفة؛ يشكل موقع انشقاق محلل للبروتين PACE له ترتيب الحمض YO الأميني RKRRKR (تعريف الترتيب رقم: 5). يوصف ترتيب cDNA والبروتين الناضج المشفر بهذه الطريقة في شكل )9( (تعريف الترتيب رقم: ؛) وشكل ١لأ) (تعريف الترتيب رقم: ١)؛ على SAYA
م
التوالي. بهذه الطريقة؛ قد ينشط مصدر FX الأولي من FX المتباين بالانشقاق المحلل للبروتين داخل الخلية بواسطة إنزيمات PACE ظاهرة بصورة مشتركة مع عامل التجلط. بصورة إضافية؛ يستبدل ترتيب الإشارة الأصلي والببتيد الأولي لأجل FX آدمي مع تلك لأجل prothrombin آدمي. ينسخ فرعيا cDNA المشفر FX المتباين في ناقل إظهار تحت سيطرة معزز تأسيسي. © أيضا يظهر الناقل الجين المقاوم cneomycin سامحا بانتقاء مضاد حيوي من مواد ناقلة لحامل
الجين من Jil ثابتة. يصنع ناقل ثاني لإظهار الشكل القابل للذوبان من الإنزيم PACE تهياً خلايا العائل 161 CHO للنمو في معلق خالي من المصل وينقل إليها Jala الجين من العائل بصورة مشتركة بواسطة الحقن الدهني مع نواقل خطية لإظهار FXa متباين 5 PACE قابل للذوبان. تنتقى الخلايا المنقول إليها حامل الجين من العائل بالنمو في أوساط مدعمة مع مضاد ٠ حيوي 6418 و11 Vitamin تفحص النسخ المقاومة لتحديد إظهار ونشاط بروتين FXa متباين تخليقي. تهياً نسخ تبرز إظهار ونشاط بروتين FXa متباين تخلقي عالي نسبيا للنمو في مزرعة معلق خالي من المصل. تنتقى نسخة واحدة وتستخدم لترسيخ بنك خلية ما قبل الأساسية ثم بنك
خلية أساسية باستخدام وسط محدد كيميائيا خالي من المكونات المشتقة من حيوان أو آدمي. لإنتاج مادة عقار لدراسة إضافية؛ ينمو FXa متباين لإظهار الخلايا عند مقياس بمقدار lov Yo أو Youu لتر باستخدام أوساط محددة كيميائية. للبدء؛ تذوب؛ تزرع؛ وتتمدد تدريجيا قوارير للخلايا من بنك خلية بالنمو في أوعية لزيادة الحجم باستخدام تحديد (Alas وسط خالي من المكون لحيوان. بمجرد اكتمال التمدد؛ تحفظ المزارع في مفاعلات حيوية بها خزان مقلب صغيرة. للإنتاج؛ تستمر الزراعة في مفاعلات حيوية بمقاس 00 لتر أو 72086 لتر حتى الحصاد. للحصاد؛ يطرد وسط مزرعة الخلية مركزيا لإزالة الخلايا والبقايا. يصفى الوسط إضافيا
٠ بالترشيح القوي والترشيح خلال مرشح ١,7 ميكرومتر. بعدئذ يخفف الوسط المرشح مع مثبت للأس الهيدروجيني ويحمل على عمود تحليل كروماتوجرافي بنسق مختلط Healthcare Life Sciences) (MMC) Capto 68). بعد الغسل؛ يصفى المنتج من العمود. بعدئذ يخفف المنتج المنقى جزئيا في محلول منظف للإخماد الفيروسي. بعد الإخماد الفيرروسي؛ يحمل المنتج على عمود Q-Sepharose Fast Flow Chromatography «(GE Healthcare Life Sciences) Yo يغسل ويصفى من العمود. بعدئذ يخفف المنتج المصفى مع مثبت أس هيدروجيني ويحمل على عمود Chromatography و50 (Merck ~~ Fractogel SAYA
و Millipore) يغسل ويصفى من العمود. بعدئذ يرشح المنتج المصفى باستخدام Glade ALY (Sartorius Stedim Biotech) Virosart® CPV أي فيروس متخلف قد يكون متواجد. بعد الترشيح الفيروسي؛ يركز المنتج المنقى باستخدام الترشيح الفائق والترشيح الثنائي. بعدئذ تختبر sal العقار المنقاة لتمييز بروتين FXa المتباين المنتج بواسطة «CHO WA © مثال ؟: ترتيب حمض أميني طرفي يستخدم ترتيب طرفي أميني لأجل FXa بواسطة انحلال Edman للتأكد من أول عشرة متخلفات من كل من الطرف الأميني للسلسلة الخفيفة والطرف الأميني للسلسلة الثقيلة. يجرى التحليل بواسطة انحلال Edman أوتوماتي بعد تحلل FXa المتباين بواسطة SDS-PAGE تحت شروط عدم الاختزال والاختزال وتبقعه كهربيا على غشاء (PVDF) polyvinylidene difluoride ١ الترتيب الطرفي الأميني للسلسلة الخفيفة هو ANSFLOOGOMKK (شفرة من حرف فردي) (تعريف الترتيب رقم: .)١١ لا توجد إشارة عند المتخلفات ١ ولا (موضحة على أنها (X المتوافقة مع وجود متخلفات (Gla) gamma carboxyglutamic acid عند تلك المواضع. ترتيب الطرفي الأميني للسلسلة الثقيلة هو LVGGQEZKDG (تعريف الترتيب رقم: (V1 لا توجد إشارة عند المتخلف 7 (الموضع على أنه 2)؛ المتوافق مع وجود cysteine عند هذا الموضع. تؤكد Vo تلك النتائج على الترتيبات الطرفية الأمينية المتوقعة لكل من السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة مقارنة مع الترتيب النظري. مثال oY تخطيط ببتيد للتأكد من بناء أولي وتحديد التعديلات اللاحقة للترجمة لتأكيد ترتيب الحمض الأميني الأولي والكشف عن التعديلات اللاحقة للترجمة؛ يحلل بروتين FXa المتباين المنتج كما هو موصوف في مثال ١ بواسطة تخطيط ببتيد. بصفة خاصة؛ ٠ يختزل البروتين» يؤلكل» ويهضم مع (Achromobacter lyticus Lys-C lysyl endopeptidase protease 1) بعدئذ تحلل الشدف بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء طور معكوس/ مقياس طيف الكتلة لزمن طيران رباعي الاستقطاب للتأين بالرش الكهربي (RP-HPLC/ESI- .QTOF MS) يوضح مثال لهيئة مخطط الببتيد الناتج في شكل ؟ الذي فيه تعلم الببتيدات طبقا YO لمواضعها النسبية المستنتجة بالنسبة إلى الترتيب النظري ALLL الخفيفة الموضحة في شكل ١(ب) والسلسلة الثقيلة الموضحة في الشكل ١(ج). تدل الذروات المعلمة مع الحرف 17“ على SAYA
=« ¢ — ببتيد سلسلة خفيفة وتدل تلك المعلمة مع الحرف HY على ببتيد سلسلة ALE تعلم ذروات ثانوية we i - - ات م Ie ; - al 0 الأس الهيدرو. جيذ ٍ بالحرف SR” تعلم بالحرف 7“ وال (Cok AN على التوالي ذروات بمستوى ضئيل متنوعة تمثل ببتيدات مزالة deamidated amid (0) أو مؤلكلة بصورة فائقة. > توضح في جدول ١ ادناه الببتيدات المكتشفة بتخطيط ببتيد؛ كتتلها النظرية والملحوظة؛ وترتيبات الحمض الأميني. يعتمد ترقيم الحمض الأميني على شكل ١(ا) (تعريف الترتيب رقم: 1 جدول ١ الببتيد المتخلفات | الكتلة النظرية | الكتلة الملحوظة الترتيب المؤكد الملحوظات التجريبية (oy | 89( ANSFLEEMK = ¥ من متخلفات Gla am) ar? | 2776يف | 6م١١ ١ (تعريف الترتيب رقم: (VY ملحوظة A متخلفات Gla GHLERECMEETCSYEEAR | ملحوظة؛ ١ أو ل EVFEDSDK L348 YOAAY «A YOAA YX £ 71-1١ Gla متخلفات Gla ملحوظة (تعريف الترتيب رقم: (VA أيضا عند مستويات 0 خب 4 TNEFWNK 4 بنج 177 177,5 صفر نوع Gla رئيسي (تعريف الترتيب رقم: (V9 TNEFWNK 4+1 ١-ء م م ; احد اذ aa | Yon نوع 610 واحد ثانوي (تعريف الترتيب رقم: V4 ( 4 الشف DGDQCETSPCQNQGK 7١51 7١51 1 16 (تعريف الترتيب رقم: )٠١ AU ا اما مخف DGLGEYTCTCLEGFEGK 14+11 أحكلا 17 الففد ضحد (تعريف الترتيب رقم: (YY NCELFTRK 19 حلام بات ص YAY, 00 Y (تعريف الترتيب رقم: (YY ادر
الببتيد | المتخلفات | الكتلة النظرية | الكتلة الملحوظة الترتيب المؤكد الملحوظات التجريبية (دالتون) (دالتون) 1 SVVCSCARGYTLADNGK 110+ £vEo, AVE [VYY-AA |p اعد 4.)( (تعريف الترتيب رقم: (YT ACIPTGPYPCGK ave [LIL فد | oA ففدة لف افع (تعريف الترتيب رقم: (YE يلاحظ أيضا QTLERR (تعريف الترتيب (Yo) QTLER QTLERRK ) ا للف 2 مأ عا 179,521 177 3 ) و (تعريف الترتيب رقم: (Yo الترتيب رقم: (YY كأنواع ثانوية أو ضئيلة؛ على التوالي TVGGQECK Ad ENVY Ad ENVY ٠-١: 1 (تعريف الترتيب رقم: (YA DGECPWQALLINEENEGE CGGTILSEFYILTAAHCLY عا مين | Ay دحت | QAK $Y As (تعريف الترتيب رقم: (Y9 VRVGDRNTEQEEGGEAV HEVEVVIK Ha | احج | يا | اليو اب (تعريف الترتيب رقم: )٠١ TINRFTK AY, EY0 AY, EYE YYV-YYY | 65 (تعريف الترتيب (FY oy ETYDEDIAVLRLK 6 | ا حي | Yoav, Af. | حدما (تعريف الترتيب رقم: (TY TPITFRMNVAPACLPERD WAESTLM TQK 7 | محخ دع | امام عحج | FYIF,0AY (تعريف الترتيب رقم: (TF TGIVSGEGRTHEK YEAY,YYA | AFAY,YYY | YA-YRa | HS (تعريف الترتيب رقم: (TE 0051110 HO | موصي 92265١ م9:20 (تعريف الترتيب رقم: (Yo 0_4 م0 vev-Ya. | عل دح | YVIY ever (تعريف الترتيب رقم: 70( 4 1 نلعت | YVAY,44Y | YyAY,qay (تعريف الترتيب رقم: (TY SAYA
_— \ _ asin) | المتخلفات | الكتلة النظرية | الكتلة الملحوظة الترتيب المؤكد الملحوظات التجريبية لالتمن) | 059( QEDACQGDSGGPOVTRFK YAAA Ae YAAA Ae 7-77١ | 2 (تعريف الترتيب رقم: (YA DTYFVTGIVSWGEGCARK 3 | .5 حلام ٠١7 ٠١,57 (تعريف الترتيب رقم: 49 ) YGIYTK Ylo—Y1. | 15 مخ Vey, مخ Vey, (تعريف الترتيب رقم: £1( VTAFLK YYy\-yi1 ١ 6 اد عفد IRAE AT (تعريف الترتيب رقم: 41) WIDRSMK aye, eve aye, £14 YYA-YVY | 7 (تعريف الترتيب رقم: 47) TRGLPK TV, EY TY, ey YA¢—YVYa | 8 (تعريف الترتيب رقم: 47 ) EE ملحوظ مع ١ و أ di- «Ss ialy lated 0 -gly cans SHAPEVITSSPLK YYAY, 01 YYAY, 940A Y44a-YAY | H20 الشكل الرئيسى ينتهي مع (تعريف NAPE | 0 CER “رهم 1. الشكل نوي ينتهي مع Lys® تحسب الكتل النظرية مع (Genomic Solutions, Ann Arbor, MI) PAWS تحسب الكتل الملحوظة من الأيون المتعدد الشحنة الأكثر وفرة في طيف الكتلة. تتطابق كل الكتل الملحوظة مع الكتل النظرية خلال ٠١ جزء في المليون. تغطية الترتيب ضمن الببتيدات للسلسلة الخفيفة (light chain) (LC) والسلسلة الثقيلة (heavy chain) (HC) تكون حوالي 94 و7948 على © التوالي. لم يتم الكشف عن ثلاثة ببتيدات من السلسلة L (12؛ 5آء 17) واثنين من الببتيدات من السلسلة الثقيلة (H14) 1119). الاختلافات المحسوبة بين كتلة الببتيد النظرية والملحوظة تسمح باستنتاج وجود تعديلات لاحقة للترجمة معينة. يرمز إلى تلك المتخلفات المراد خضوعها للتعديل بوضع خط تحتها في العمود © من الجدول .١ يحتوي مجال سيطرة Gla الطرفي N في السلسلة الخفيفة على ما بين 9 و ١١ متخلف (Gla) gamma carboxylated glutamic acid ٠ إجمالا. أنواع السلسلة الخفيفة الرئيسية تحتوي على ٠ متخلفات (Gla على الرغم من كون الببتيد 1.1 دائما ccarboxylated يتم الكشف عن التغاير SAYA
سمج في ببتيدات 13 و14. بصفة خاصة؛ يلاحظ ببتيد 13 مع 1« 7ء أو A متخلفات Gla ويلاحظ ببتيد 14 بدون متخلفات أو متخلف Gla واحد. انظر جدول .١ ass, التغاير كما لأجل gamma-carboxylation باستخدام تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء لتبادل الأنيون (AEX-HPLC) لقياس تغاير الشحنة. يحتوي فصل AEX-HPLC لأشكال الممائلة المنحلة لبروتين FXa متباين على 4؛ ٠١ و١١ متخلفات gamma carboxyglutamic acid (ا6). التكرار النسبي لعدد متخلفات GLa في السلسلة الخفيفة لأجل FXa المتباين يتوافق خلال ١ مستحضرات لبروتين FXa المتباين المنقى مختبرة. تحديدا؛ اعتمادا على توزيعات الذروة النسبية؛ يتراوح تكرار وجود 4 متخلفات Gla من 79٠ إلى ZY (المتوسط = JY) الاتحراف المعياري = 77,5)؛ تكرار وجود ٠١ متخلفات Gla يتراوح من 4١ 7 إلى ٠ 2450 (المتوسط = 747 الانحراف المعياري = 71,8) وتكرار وجود ١١ متخلف Gla يتراوح من 7 إلى rev (المتوسط = JEN الانحراف المعياري - لف اتضح تساوي نشاط الأشكال المماثلة Gla ١٠و١١ المنقاة في اختبار تجلط يعتمد على (APTT حيث يكون للشكل المماثل نشاط منخفض (حوالي 77٠ من النشاط والأشكال المماثلة ٠١ Gla و١١ عندما تتعادل الكتلة). Yo يتم أيضا الكشف عن تعديلات لاحقة للترجمة للسلسلة الخفيفة. تحديداء يلاحظ توافق ABS ببتيد L8 مع وجود متخلف beta-hydroxylated aspartic acid عند الموضع 63 (Asp®) (تعريف الترتيب رقم: .)١ بالإضافة لذلك؛ يلتحظ ببتيد 110 مع اختلاف ABS يدل على إضافة hexose متصل مع 0. تخضع السلسلة الثقيلة أيضا إلى glycosylation متصلة مع 0. في مخطط الببتيد؛ YS يلاحظ أن الشكل الرئيسي للشكل المماثل alpha للسلسلة الثقيلة ينتهي عند الحمض الأميني 1398 ويلاحظ الشكل الثانوي من الطرف © ينتهي عند الحمض الأميني JK? يلاحظ أن كل الببتيدات تحتوي على واحد أو cp) من تدهعراع-0 1-ع:ه cdisialylated من الأنواع السائدة لكل الببتيدات المحتوية على dissialylated core-1 O-glycan واحد. في هيئة مخطط الببتيد؛ تقابل الذروة المعلمة مع ”7207 الببتيد 1120 المنتهي عند 13%( والذروة المعلمة مع ”11207 تقابل Yo الببتيد 1120 المنتهي عند (KP كل منهم يحتوي على glycan متصل مع O واحد. الذروة المعلمة مع “H20" تقابل الببتيد 1120 المنتهي عند KY والمحتوي على اثنين من glycans المتصلة مع مدر
ديه 0. يتم الكشف عن ببتيد 1120 ينتهي عند **17 له اثنين من glycans المتصلة مع 0 عند مستويات ضئيلة aly يعلم في شكل 7. توضع O-glycans في H20 لأجل 7294 ر Ser’ بواسطة عزل beta يليه تشديف MS مثال 4: تغاير بنائي محدد بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل Je الأداء 0 يستخدم تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء طور معكوس (RP-HPLC) لقياس التغاير البنائي في مستحضر واحد لبروتين FXa متباين منقى سليم. يحقن البروتين Aid) على عمود طور معكوس ويصفى مع مستوى متدرج من acetonitrile محمض. يتطابق مع الملئحظات من تحليل تخطيط الببتيد؛ FXa المتباين المحتوي على تغاير بنائي عند الطرف © من السلسلة الثقيلة المنتجة اثنين من الأشكال المماثلة البنائية الرئيسية؛ alpha (المنتهي عند betas (Lys™ (المنتهي ٠ عند (Lys? يلاحظ شكل مماثل ثانوي إضافي؛ يسمى cgamma نتيجة لجز السلسلة الثقيلة بعد Lys?! أو Arg? يوضح في شكل ¥ المخطط الاستشرابي HPLC من هذه التجارب. يتطابق التكرار النسبي للأشكال المماثلة البنائية الرئيسية في ١ مستحضرات لبروتين FXa المتباين المنقى المختبرة. تحديدا؛ اعتمادا على توزيعات 35500 النسبية؛ يتراوح تكرار وجود الشكل المماثل دراملة من 754 إلى 7974 (المتوسط = 711,4 الانحراف المعياري = (ZY تكرار وجود Vo الشكل المماثل beta يتراوح من 774 إلى 747 (المتوسط = 771,4 الانحراف المعياري = 77,0( وتكرار وجود الشكل المماثل gamma يتراوح من 7١ إلى 77 (المتوسط = Cala) AY المعياري = (A تنقى الأشكال المماثلة beta s alpha باستخدام HPLC باستثناء المقاس وتختبر في اختبار تجلط يعتمد على APTT قياسي. يوضح الشكل المماثل beta نشاط أدنى قليلا (7979) مقارنة مع ٠ الشكل المماثل alpha (متعادل كنسبة + )7( لم يختبر نشاط أنواع gamma الثانوية. مثال co التغاير البنائي لبروتين سليم محدد بواسطة فحص طيف الكتلة تحلل الكتلة الجزيئية (My) لشكل FXa متباين سليم من مستحضر واحد لبروتين منقى بواسطة RP-HPLC يليه فحص طيف كتلة باستخدام أداة تحليل كتلة زمن طيران رباعي الاستقطاب هجين MS) 0251-0701. تتحدد a ,14 من أطياف كتلة بشحنة صفر بعد إزالة فك Yo بيانات متعددة الشحنة مع برنامج حاسوب Waters MaxEnt-1 الأخطاء النسبية بين قيم الكتلة النظرية والملحوظة الرئيسية والثانوية تكون جميعها في حدود + 6١0 جزء في المليون؛ التي تتطابق SAYA
اج _ مع مواصفات أدا ء مقياس طيف الكتلة 0-101 saa gy.
Waters المخطط الاستشرابي HPLC في شكل ع يوضح في شكل 5 طيف الكتلة لبروتين FXa سليم متباين سليم 3 وتسجل في جدول Y أدناه تعيينات الذروة اعتمادا على طيف الكتلة. يعتمد ترقيم الحمض الأميني على شكل (NY (تعريف الترتيب رقم: "ANS.
LERP? .)١ يقابل تعريف الترتيب رقم: 7 26170 ...118ه! يقابل © تعريف الترتيب رقم: 7؛ !215...88164ها يقابل تعريف الترتيب رقم: 9؛ TANS.
RKRM™? يقابل تعريف الترتيب رقم: ١١؛ TANS.
KRR'™? يقابل تعريف الترتيب رقم: MOLVG.
LPK® VY يقابل تعريف الترتيب رقم: 45؛ MOLVG.
KAKO يقابل تعريف الترتيب رقم: 67 MOLVG.. SPL? يقابل تعريف الترتيب iad) ١؛ و0176...0116377"! يقابل تعريف الترتيب رقم: ¥ Ve جدول Y \ \ « ...+ السلسلة الثقيئة | رد M, : السلسلة الخفيفة | السلسلة الثقيلة يله | ركم TURE الوفرة sald | Gla O-glycan ا ض ١ ٠ . B) 1 140 * مالو ام pv | ANS ERR ونه | صقر كمية ثانوية ا ّ! ْ ّ! ْ مب )1 مب مب J ا | ْ ّ! ْ ّ! ْ 141 1 )® صفر cms gvoiT, ge ٠ ANS... RRK 10134 0 14670 كمية ثانوية صف 4 354547 ire SAYA
M Tr a FEELS 4 السلسلة الثقيلة رقم " الوفرة 1a 4 | السلسلة الخفيفة gala Gla| O-glycan or * * - Pa 4 7 7 Y Y 0 7 ١ ٠ صف ro B “Lv. Lr i | AN 5 0 RR * 0 - . - # 7 7 1 1 ١ ٠ صف * “mow EVAYY,E ٠ صفر * “mow EVAYY,E ٠ صفر or B “La. fr ’ i | A 5 0 "8 ْ ءات ZAR AN EIN صفر B) 1 143 كمية ضئيلة 14670 0 K AK 386 ANS... KRR vn ¢oyoY ١٠١١ 1+1NeuAc - (a) 1 140 كمية ثانوية Gal 146] VG. 1 0 ANS... ERR
SAYA
—ty-—
M Tr bd 2 4 الوفرة i السلسلة الثقيلة رقم - 15 0 0 - { 1 0 - iy va i - 0 sald) | Gla O-glycan مف* الوا ام 1 ٠١١ 1+1NeuAc - 0) 1 141 oer Gal “LVG. 0 SPL’ ١ ّ - i 08 or مف* الوا ام 1 ٠١١ 1+1NeuAc - 0) 1 140 oer Gal كم 0 PLK | 7 - i 08 3 " - toyor ١١ نس اا | مسي fo عدج (a) 1 140 دده ١ 1+1NeuvAc 1461 VG. 1 139 ANS... ERR كمية ثانوية ١ - oe م 4 5 1 4 5 0 9 ١ ٠ 0 oe B 2 ie “v6 | SPL’ ’ | mw 5 0 LER (a) 1 140 017 . 1 +2NeuAc 1461 VG. 0 18 ANS ...ERR كمية ثانوية - Pa 4 5 9 7 ١ 0 7 ١ ٠ اسل B 2 8 we ‘ ’ WG. | 5 PL’ ’ | A 5 0 - oe م 4 1 ٠ 1 ١ 0 1 ١ ٠ 0 لاا B 2 ie “v6, PL ’ 7 | AN 5 0
SAYA
—¢ A—
M, bd 2 “ الوفرة i هو 0 1 1 ب 0 0 ف م السلسلة الثقيلة رقم iy va i ا ا هو 0 sald) | Gla O-glycan “mw 117,5 YY 0
EXE مف Ly So ANS 08 RRR cee TALLARIEE 0 سكن ته لحم ان قد حك * “now 171611 ٠ م اح ااا re م الا * ¢ 1 Y q 7 0 ¢ ١ ٠ 0 للف en ie “Lv PL ’ 7 | AN i 08 ERR re م الا * ¢ 1 Y q 7 0 ¢ ١ ٠ 0 للف en ie “v6 | SPL’ ] | AN i 08 or 2+21 عضن 1 ve -_ 99 ! AN S ...RRK 141 !ّ ا | ا ا ّ! ا } كمية ثانوية * ٠ (a) 1 140 2+3NeuAc 146 399 ANS... ERR ض ً ّ } B كمية ثانوية * ٠ (a) 1 141 2+3NeuvAc 146 398 ANS... RRK ض ً 0 ٍ 0 كمية ثانوية (a) 1 141 ام بحت 1a 2+3NeuvAc 1461 VG. 0 PLK3% ANS... RRK كمية ثانوية ١ 7ر179 الا 1 0 مف امال | “Lv ١ | SPL’ ا | a i 3 FRR i
SAYA
q — ¢ — ا ..... السلسلة الثقيلة | رقم ١ .31 السلسلة الخفيفة | السلسلة الثقيلة | eal ثلة الوفرة sald) | Gla O-glycan (ot) 1 140 2+4NeuAc 146 399 ANS... ERR كمية ثانوية (ot) 1 141 2+4NeuAc 146 398 ANS... RRK كمية ثانوية Yo 0 ز اي د مالو ام ٠ الأرمت الا 0 يوضح HPLC مرة أخرى تغاير بنائي لبروتين FXa المتباين (شكل 4). الذروات المعلمة بالحرف A تقابل نوع -«دمع. الذروة المعلمة بالحرف 3 تقابل الشكل alpha للبروتين متضمنا Cp) من #صدوعواع-0. الذروة المعلمة بالحرف © تقابل الشكل alpha للبروتين متضمنا O-glycan واحد. الذروة المعلمة بالحرف © تقابل الشكل beta للبروتين الذي فيه السلسة الثقيلة تنتهي مع KO 5 الذروة المعلمة مع 5 تقابل الشكل beta للبروتين الذي فيه تنتهي السلسلة الثقيلة مع KPH تلاحظ ثلاثة مناطق في طيف الكتلة (الشكل ©#). الأولى؛ عند النهاية الدنيا لطيف الكتلة (الأيسر) مقابل بروتين FXa المتباين السليم المحتوي على الشكل المماثل beta للسلسلة الثقيلة. تحتوي تلك المنطقة أيضا على ما يسمى بالأنواع الرئيسية التي توجد بسيطرة أكثر مقارنة مع الأنواع الأخرى بالاعتماد على شدة الذروة النسبية. الأنواع الرئيسية تتضمن تلك المحتوية على ٠ الشكل beta من السلسلة الثقيلة المنتهية عند 12386 التي فيها يكون المتخلف الطرفي carboxy من السلسلة الخفيفة هو "الج 40ل (KMS ظاهريا نتيجة للانشقاق المتغير عند موقع انشقاق PACE الأنواع التي Led تنتهي السلسلة الخفيفة عند 814 التي تكون أيضا ظاهريا نتيجة SAYA
Coo للانشقاق المتغير؛ توجد أيضا كنوع ثانوي. من بين الأنواع الرئيسية والثانوية هذه؛ تتضمن السلسلة
Gla متخلف ١١ أو ٠١ Lado متصل مع hexose 5 B-hydroxy Asp® الخفيفة تظهر منطقتين بكتلة اكبر أيضا في طيف الكتلة؛ كلتاهما تقابلان أنواع ثانوية من بروتين (KP للسلسلة الثقيلة (ينتهي عند **17 أو alpha متباين سليم يحتوي على الشكل المماثل FXa فردي وإضافيا تتضمن مجموعة ثانية O-glycan مجموعة واحدة من تلك الأنواع تتضمن إضافيا © (منتصف وأيمن شكل 0 على التوالي). O-glycan اثنين من التعديلات اللاحقة للترجمة لأجل المتباين السليم التي فيها FXa التعيينات المذكورة بوضوح في شكل © تقابل أنواع بروتين وجلوكوز متصل مع 0. تمثل Bohydroxy Asp” «Gla متخلفات ٠١ السلسلة الخفيفة تحتيو على مما يزيد الكتلة Gla متخلف ١١ الذروات المتجاورة في الطيف المعلمة مع ”*“ أنواع تحتوي على بمقدار ؛؛ دالتون. Vo جدول ؟ يسجل الأنواع الرئيسية والثانوية المحددة من طيف الكتلة الموصوف أعلاه؛
OF بالإضافة إلى أنواع ثانوية وضئيلة أخرى متعددة محددة من بيانات طيف الكتلة. في جدول يرمز إلى الأنواع التي لها نفس قيمة ,14 الملحوظة التي قد لا تتمايز عن شكل مماثل متساوي الضغط مشابهة في الجدول بالرمز ”*“. يعتمد تعيين الوفرة الظاهرة للأنواع المختلفة على أنها رئيسية؛ ثانوية وضئيلة على شدات الذروة النسبية من بيانات طيف الكتلة. يسجل في العمود VO المتباينة المتنوعة FXa للسلسلة الثقيلة لأنواع البروتين glycosylation حالة “O-glycan” المعنون hexose هناء تحتوي السلسلة الخفيفة على HAT المحددة في الجدول. كما هو مناقش في مكان متصلة مع © في السلسلة glycans متصل مع 0. في الجدول؛ 'صفر” يشير إلى عدم وجود ¢aalgcore-1 mono-sialylated O-glycan يدل على عدم وجود “I+1NeuAc” الثقيلة؛ واحد فيه لا يوجد core-1 mono-sialylated O-glycan يدل على عدم وجود “1+1NeuAc - 6877 ٠ واحد؛ core-1 di-sialylated O-glycan يدل على وجود “1+2NeuAc” ¢(Gal) الطرفي galactose أو disialylated واحد منهما يكون core-1 O-glycans يدل على وجود اثنين من “2+2NeuAc” core-1 O-glycans من (pd) يدل على وجود “24+3NeuAc” ¢mono-sialylated يكون كلاهما تدل على وجود “2+4NeuAc” ¢di-sialylated ويكون الأخر mono-sialylated واحد منهما يكون .di-sialylated كل منهما يكون core-1 O-glycans اثنين من © مثال 1: تغاير بنائي لبروتين مختزل ومؤلكل محدد بواسطة مقياس طيف الكتلة مدر
Coy المتباين السليم المنقى FXa للتأكد من التحليل الموصوف أعلاه؛ يختزل ويؤلكل بروتين داخل السلاسل وبين السلاسل. بعدئذ تحلل السلاسل الخفيفة والثقيلة disulfide للتخلص من روابط
Ga لتحديد بناء الحمض الأميني لها والتعديل RP-HPLC/ESI-QTOF MS المنفصلة بواسطة للترجمة لها. يوضح في شكل ١ المخطط الاستشرابي HPLC الذي فيه تعلم السلاسل الخفيفة والثقيلة. تصفى أشكال betas alpha المماثلة للسلسلة الثقيلة كذروات كروماتوجرافية متعددة. تلاحظ المستويات الضئيلة لأنواع gamma (سلسلة ثقيلة beta مشذبة بعد الحمض الأميني "تمر أو (R? مصفاة مباشرة قبل ALLL) الثقيلة عند حوالي 50-48 دقيقة في المخطط الاستشرابي. توضح في شكل (أ) طيف الكتلة ذو الشحنة صفر للسلسلة الخفيفة وتسجل في جدول ؟ ٠ أدناه الأنواع المحددة من الطيف؛ متضمنا وفرتها النسبية كوفرة رئيسية؛ ثانوية أو ضئيلة. يعتمد ترقيم الحمض الأميني على شكل ))1( (تعريف الترتيب رقم: PANS. LER'™ .)١ يقابل تعريف الترتيب رقم: 6؛ TANS. BRRM يقابل تعريف الترتيب رقم: 7؛ 14 115...8816م! يقابل تعريف الترتيب رقم: 9؛ "ANS. RKR'™ يقابل تعريف الترتيب رقم: ١9؛ و115...1681873م! يقابل تعريف الترتيب رقم: AY ١ جدول ١ NES se As 'ANS.. RKR'* ose SAYA
اج كما نلاحظ مع بروتين FXa المتباين السليم؛ يلاحظ أن كل أنواع السلسلة الخفيفة تتضمن B-hydroxylation من تأيه 5 hexose متصل مع 0. Glutamic acid carboxylation في مجال السيطرة Gla وانشقاق PACE تكون ALE للتغير؛ مع هذاء تنتج أنواع سلسلة خفيفة ٠١ ae أو ١١ متخلف Gla وتغير طرفي carboxy ناتج بانشقاق ضعيف عند الموقع PACE ° يوضح في شكل ١(ب) طيف الكتلة ذو الشحنة صفر للسلسلة الثقيلة وتسجل في جدول ؛ أدناه الأنواع المتنوعة المحددة من الطيف؛ متضمنا وفرتها النسبية كوفرة رئيسية؛ ثانوية أو ضئيلة. يعتمد ترقيم الحمض الأميني على شكل ))( (تعريف الترتيب رقم: MOLVG. LPR .)١ يقابل تعريف الترتيب رقم: 45 ؛ 6816359... 176" يقابل تعريف الترتيب رقم: ¢£7 MOLVG.. SPL™® يقابل تعريف الترتيب رقم: 6١؛ و1.76...0116777""' يقابل تعريف الترتيب رقم: 3. dem 0٠ alpha s beta في طيف الكتلة؛ تلاحظ السلسلة الثقيلة كثلاثة مناطق سائدة تقابل أشكال المماثلة. ,14 الملحوظة للشكل المماثل للسلسلة الثقيلة الأكثر وفرة (7777,9 دالتون) تقارن على دالتون؛ 77144,7( beta للسلسلة الثقيلة (Sled) نحو جيد مع الكتلة النظرية للشكل التسعة المؤلكلة. تغاير الكتلة إضافيا يكون نتيجة cysteine مع كل متخلفات (M°LVG.. KAK?
SAYA
سجن للتغير في المتخلف الطرفي O-glycosylation s carboxy للأشكال المماثلة alpha بصفة خاصة تقابل ذروات معينة لأشكال مماثلة alpha تنتهي عند “139 أو 16399 بينما تقابل ذروات أخرى سلاسل ALE تحمل واحد أو اثنين من O-glycans 0:0-1» التي تكون بصورة متغيرة غير cmono-sialylated «sialylated أو 0ع1دارلة01-8. في شكل 7١(ب)؛ وجود العلامة ”*“ يدل على oo الألكلة الفائقة للسلسلة الثقيلة التي تتوافق مع ذروات ملحوظة بتخطيط ببتيد لبروتين FXa المتباين (انظر مثال (TF التغاير البنائي الملحوظ في السلاسل الثقيلة والخفيفة بعد الاختزال والألكلة يتوافق مع النتائج الملحوظة باستخدام بروتين FXa متباين سليم. تحسب الكتل النظرية مع برنامج حاسوب Genomic Solutions, PAWS ,2000.06.08( Ann Arbor, 110 | ٠ . تتحدد الكتل الملحوظة من طيف الكتلة ذو الشحنة صفر بعد فك البيانات متعددة الشحنة مع برنامج حاسوب Waters MaxEnt-1 الأخطاء النسبية بين قيم الكتلة النظرية والرئيسية والثانوية الملحوظة جميعها تكون J من Te جزء في المليون؛ مما يتوافق مع مواصفات أداء مقياس طيف الكتلة Waters Q-ToF لتحليل بروتين glycol سليم. تعتمد تعيينات الأنواع الرئيسية؛ الثانوية والضئيلة على شدات ذروة خاصة؛ التي تترابط مع وفرة الشكل المماثل. Vo مثال sv اختبار التخثر في المعمل يتحدد نشاط التخثر لسبعة مستحضرات مختلفة لبروتين FXa المتباين باستخدام اختبار تخثر من مرحلة واحدة باستخدام بلازما آدمية ناقصة 711 Factor كمادة خاضعة (اختبار 27ه. يتحدد نشاط خاص بقسمة نشاط التخثر (مجم/ ملليلتر) على تركيز البروتين (مجم/ ملليلتر). نشاط التجلط المتوسط في المستحضرات يكون ٠,57 مجم/ ملليلتر مع انحراف قياسي "٠ . بمقدار Le, 0d النشاط الخاص المتوسط يكون بمقدار 7109,7 مع انحراف قياسي بمقدار 5,9. لا يقتصر الكشف الحالي على نطاق التجسيدات الخاصة الموصوفة هنا. بالفعل؛ سوف تتضح لأصحاب المهارة في الفن تعديلات متنوعة للكشف بالإضافة على تلك الموصوفة هنا من الوصف السابق والأشكال المصاحبة. تعتبر تلك التعديلات واقعة في نطاق عناصر الحماية الملحقة. SX Yo هنا مراجع مختلفة؛ تتضمن طلبات براءة الاختراع» براءات الاختراع؛ والمنشورات التقنية. بذلك يندمج الكشف عن كل مرجع من هذه المراجع كمرجع بالكامل. مدر
— جم SAYA
قوائم التسلسل فايزر انك <110> 2 تركيبات تشمل مجموعات متغايرة من XA لعامل تخثر آدمي تخليقي <120> بروتينات 9 >130< US 61/881,834 ٠٠١ >150< 2013-09-24 >151< <1l60> 6 yo براءة اختراع الإصدار Y,o <170> 1 >210< 399 >211< PRT >212< Artificial Sequence ١ >213< <0 22> Modified human protein sequence >223< Yo 1 >400< Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu 10 5 1 Ye Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu 25 20 Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp Yo 40 35 Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 2 60 55 50 Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 80 75 70 65 ¢0 Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 95 90 85 On Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 110 105 100 Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly oo 125 120 115 SAYA
h — جم Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys Arg Arg Lys 140 135 130 Arg Leu Val Gly Gly Gln Glu Cys Lys Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gln 5 160 155 150 145 Ala Leu Leu Ile Asn Glu Glu Asn Glu Gly Phe Cys Gly Gly Thr Ile ٠٠١ 175 170 165 Leu Ser Glu Phe Tyr Ile Leu Thr Ala Ala His Cys Leu Tyr Gln Ala 190 185 180 Vo Lys Arg Phe Lys Val Arg Val Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gln Glu Glu 205 200 195 9ص Gly Gly Glu Ala Val His Glu Val Glu Val Val Ile Lys His Asn Arg 220 215 210 Phe Thr Lys Glu Thr Tyr Asp Phe Asp Ile Ala Val Leu Arg Leu Lys Yo 240 235 230 225 Thr Pro Ile Thr Phe Arg Met Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu Ye 255 250 245 Arg Asp Trp Ala Glu Ser Thr Leu Met Thr Gln Lys Thr Gly Ile Val 270 265 260 Yo Ser Gly Phe Gly Arg Thr His Glu Lys Gly Arg Gln Ser Thr Arg Leu 285 280 275 ra Lys Met Leu Glu Val Pro Tyr Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys Leu Ser 300 295 290 Ser Ser Phe Ile Ile Thr Gln Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr Asp Thr to 320 315 310 305 Lys Gln Glu Asp Ala Cys Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr On 335 330 325 Arg Phe Lys Asp Thr Tyr Phe Val Thr Gly Ile Val Ser Trp Gly Glu 350 345 340 00 Gly Cys Ala Arg Lys Gly Lys Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys Val Thr Ala 365 360 355 SAYA
— 7 جم Phe Leu Lys Trp Ile Asp Arg Ser Met Lys Thr Arg Gly Leu Pro Lys 380 375 370 lo} Ala Lys Ser His Ala Pro Glu Val Ile Thr Ser Ser Pro Leu Lys 395 390 385 ١١ 2 >210< 145 >211< PRT >212< Artificial Sequence >213< Vo >220< Modified human protein sequence >223< 2 >400< 9ص Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu 10 5 1 Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Yo 25 20 Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp IK 45 40 35 Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 60 55 50 Yo Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 80 75 70 65 ra Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 95 90 85 Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala to 110 105 100 Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly On 125 120 115 Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys Arg Arg Lys 140 135 130 00 Arg 145 SAYA
A — جم 3 >210< 254 >211< PRT © >212< Artificial Sequence >213< >220< Modified human protein sequence >223< ١١ 3 >400< Leu Val Gly Gly Gln Glu Cys Lys Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gln Ala 10 5 1 Vo Leu Leu Ile Asn Glu Glu Asn Glu Gly Phe Cys Gly Gly Thr Ile Leu 25 20 9ص Ser Glu Phe Tyr Ile Leu Thr Ala Ala His Cys Leu Tyr Gln Ala Lys 40 35 Arg Phe Lys Val Arg Val Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gln Glu Glu Gly Yo 60 55 50 Gly Glu Ala Val His Glu Val Glu Val Val Ile Lys His Asn Arg Phe Ye 80 75 70 65 Thr Lys Glu Thr Tyr Asp Phe Asp Ile Ala Val Leu Arg Leu Lys Thr 95 90 85 Yo Pro Ile Thr Phe Arg Met Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu Arg 110 105 100 ra Asp Trp Ala Glu Ser Thr Leu Met Thr Gln Lys Thr Gly Ile Val Ser 125 120 115 Gly Phe Gly Arg Thr His Glu Lys Gly Arg Gln Ser Thr Arg Leu Lys to 140 135 130 Met Leu Glu Val Pro Tyr Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys Leu Ser Ser On 160 155 150 145 Ser Phe Tle Ile Thr Gln Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr Asp Thr Lys 175 170 165 00 Gln Glu Asp Ala Cys Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr Arg 190 185 180 SAYA
q — جم Phe Lys Asp Thr Tyr Phe Val Thr Gly Ile Val Ser Trp Gly Glu Gly 205 200 195 lo} Cys Ala Arg Lys Gly Lys Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys Val Thr Ala Phe 220 215 210 ١١ Leu Lys Trp Ile Asp Arg Ser Met Lys Thr Arg Gly Leu Pro Lys Ala 240 235 230 225 Lys Ser His Ala Pro Glu Val Ile Thr Ser Ser Pro Leu Lys Yo 250 245 4 >210< Yo 1329 >211< DNA >212< Artificial Sequence >213< >220< Modified human DNA sequence Yo >223< 4 >400< atggcgcacg tccgaggctt gcagctgcecct ggctgcctgg ccctggctgce cctgtgtage 60 7.١ cttgtgcaca gccagcatgt gttcctggct cctcagcaag cacggtcgct gctccagcgg 120 gtccggcgag ccaattcctt tcttgaagag atgaagaaag gacacctcga aagagagtgce Yo 180 atggaagaga cctgctcata cgaagaggcc cgcgaggtct ttgaggacag cgacaagacg 240 aatgaattct ggaataaata caaagatggc gaccagtgtg agaccagtcc ttgccagaac 2 300 cagggcaaat gtaaagacgg cctcggggaa tacacctgca cctgtttaga aggattcgaa 360 $0 ggcaaaaact gtgaattatt cacacggaag ctctgcagcc tggacaacgg ggactgtgac 420 cagttctgcc acgaggaaca gaactctgtg gtgtgctcct gcgcccgcecgg gtacaccctg On 480 gctgacaacg gcaaggcctg cattcccaca gggccctacc cctgtgggaa acagaccctg 540 gaacgcagga agaggcgtaa gcgtctcgtg ggaggccagg aatgcaagga cggggagtgt oo 600 SAYA
— أ «= ccctggcagg ccctgctcat caatgaggaa aacgagggtt tctgtggtgg aactattctg 660 agcgagttct acatcctaac ggcagcccac tgtctctacc aagccaagag attcaaggtg 720 5 agggtaggtg accggaacac ggagcaggag gagggcggtg aggcggtgca cgaggtggag 780 gtggtcatca agcacaaccg gttcacaaag gagacctatg acttcgacat cgccgtgctce ٠١ 80 cggctcaaga cccccatcac cttccecgcatg aacgtggcgce ctgcctgecct ccceccgagcegt 900
Vo gactgggccg agtccacgct gatgacgcag aagacgggga ttgtgagcgg cttcgggcegce 960 acccacgaga agggccggca gtccaccagg ctcaagatgc tggaggtgcc ctacgtggac 1020 ١ cgcaacagct gcaagctgtc cagcagcttc atcatcaccc agaacatgtt ctgtgccggce 1080 tacgacacca agcaggagga tgcctgccag ggggacagcg ggggcccgca cgtcacccege Yo 1140 ttcaaggaca cctacttcgt gacaggcatc gtcagctggg gagagggctg tgcccgtaag 1200 7.١ gggaagtacg ggatctacac caaggtcacc gccttcctca agtggatcga caggtccatg 1260 aaaaccaggg gcttgcccaa ggccaagagc catgccccgg aggtcataac gtcecctctcca 1320 Yo ttaaagtga 1329 12 <210> 5 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence $0 <220> <223> PACE site <400> 5
On
Arg Lys Arg Arg Lys Arg 1 5 <210> 6 00 <211> 139 <212> PRT <213> Artificial Sequence
SAYA
_ h \ —_ <220> <223> Modified human protein sequence <400> © 0
Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu 1 5 10 15 ١١
Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu
Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp Yo
Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 60 ١
Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 65 70 75 80
Yo
Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 85 90 95 79١
Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 100 105 110
Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly Yo 115 120 125
Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg 130 135 2 <210> 7 <211> 140 <212> PRT ¢o <213> Artificial Sequence <220> <223> Modified human protein sequence
On <400> 7
Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu 1 5 10 15 00
Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu 20 25 30
SAYA
_ h \ —_
Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp lo}
Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 60 ١١
Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 65 70 75 80
Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys Yo 85 90 95
Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 100 105 110 ١
Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly 115 120 125
Yo
Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg 130 135 140
Ye <210> 8 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence
Yo <220> <223> Proteolytic fragment <400> 8 ra
Lys Arg Arg Lys Arg 1 5 <210> 9 ¢o <211> 141 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> On <223> Modified human protein sequence <400> 9
Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu oo 1 5 10 15
SAYA
_ h Ad —_
Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu
Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp 5
Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 60 ٠١
Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 65 70 75 80
Vo
Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 85 90 95 9ص Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 100 105 110
Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly Yo 115 120 125
Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys 130 135 140 IK <210> 10 <211> 4 <212> PRT Yo <213> Artificial Sequence <220> <223> Proteolytic fragment ra <400> 10
Arg Arg Lys Arg 1 ¢0 <210> 11 <211> 142 <212> PRT <213> Artificial Sequence On <220> <223> Modified human protein sequence <400> 11 ده Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu 1 5 10 15
SAYA
_ h ¢ —_
Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu lo}
Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp ١١
Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 60
Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn Yo 65 70 75 80
Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 85 90 95 ١
Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 100 105 110
Yo
Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly 115 120 125 79١
Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys Arg 130 135 140 <210> 12 Yo <211> 143 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ge <223> Modified human protein sequence <400> 12
Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu to 1 5 10 15
Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu 20 25 30 On
Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp 35 40 45 00
Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly 50 55 60
SAYA
— اج أ
Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 65 70 75 80 lo}
Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 85 90 95 ١١
Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 100 105 110
Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly Yo 115 120 125
Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys Arg Arg 130 135 140 ١ <210> 13 <211> 144 <212> PRT Yo <213> Artificial Sequence <220> <223> Modified human protein sequence v ٠ <400> 13
Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu 1 5 10 15
Yo
Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu ra
Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp
Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys Cys Lys Asp Gly to 60
Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn 65 70 75 80 On
Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys 85 90 95 00
Asp Gln Phe Cys His Glu Glu Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala 100 105 110
SAYA
_ h أ _
Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn Gly Lys Ala Cys Ile Pro Thr Gly 115 120 125 lo}
Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys Arg Arg Lys 130 135 140 ١١ <210> 4 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence
Vo <220> <223> Modified human protein sequence <400> 14 9ص Leu Val Gly Gly Gln Glu Cys Lys Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gln Ala 1 5 10 15
Leu Leu Ile Asn Glu Glu Asn Glu Gly Phe Cys Gly Gly Thr Ile Leu Yo
Ser Glu Phe Tyr Ile Leu Thr Ala Ala His Cys Leu Tyr Gln Ala Lys
IK
Arg Phe Lys Val Arg Val Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gln Glu Glu Gly 60
Yo
Gly Glu Ala Val His Glu Val Glu Val Val Ile Lys His Asn Arg Phe 65 70 75 80 ra
Thr Lys Glu Thr Tyr Asp Phe Asp Ile Ala Val Leu Arg Leu Lys Thr 85 90 95
Pro Ile Thr Phe Arg Met Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu Arg to 100 105 110
Asp Trp Ala Glu Ser Thr Leu Met Thr Gln Lys Thr Gly Ile Val Ser 115 120 125 On
Gly Phe Gly Arg Thr His Glu Lys Gly Arg Gln Ser Thr Arg Leu Lys 130 135 140 00
Met Leu Glu Val Pro Tyr Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys Leu Ser Ser 145 150 155 160
SAYA
_ h 7 _
Ser Phe Ile Ile Thr Gln Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr Asp Thr Lys 165 170 175 lo}
Gln Glu Asp Ala Cys Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr Arg 180 185 190 ١١
Phe Lys Asp Thr Tyr Phe Val Thr Gly Ile Val Ser Trp Gly Glu Gly 195 200 205
Cys Ala Arg Lys Gly Lys Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys Val Thr Ala Phe Yo 210 215 220
Leu Lys Trp Ile Asp Arg Ser Met Lys Thr Arg Gly Leu Pro Lys Ala 225 230 235 240 AKC
Lys Ser His Ala Pro Glu Val Ile Thr Ser Ser Pro Leu 245 250
Yo <210> 15 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence Ye <220> <223> Peptide fragment
Yo <220> <221> misc feature <222> (6) ..(7) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid ra <400> 15
Ala Asn Ser Phe Leu Xaa Xaa Met Lys Lys 1 5 10 $0 <210> 16 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence On <220> <223> Peptide fragment 00 <220> <221> misc feature <222> )7(..)7(
SAYA
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 6
Leu Val Gly Gly Gln Glu Xaa Lys Asp Gly 5 1 5 10 <210> 7 >211< 9 A <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment Vo <400> 17
Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met Lys 1 5 Yo <210> 18 <211> 26 <212> PRT Yo <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment
Ye <400> 18
Gly His Leu Glu Arg Glu Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr Glu Glu 1 5 10 15
Yo
Ala Arg Glu Val Phe Glu Asp Ser Asp Lys ra <210> 19 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence ¢0 <220> <223> Peptide fragment <400> 19
On
Thr Asn Glu Phe Trp Asn Lys 1 5 <210> 20 ده >211< 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence
SAYA
_ h q —_ <220> <223> Peptide fragment <400> 20 ©
Asp Gly Asp Gln Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Lys 1 5 10 15 ١١ <210> 1 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence
Vo <220> <223> Peptide fragment <400> 21 9ص Asp Gly Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys Leu Glu Gly Phe Glu Gly 1 5 10 15
Lys Yo <210> 22 <211> 8 7.١ <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment Yo <400> 22
Asn Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys 1 5 ra <210> 23 <211> 35 <212> PRT ¢o <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment
On <400> 23
Leu Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys Asp Gln Phe Cys His Glu Glu 1 5 10 15 00
Gln Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp
SAYA
_ 7 «=
Asn Gly Lys lo} <210> 24 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence ٠٠١ >22 0< <223> Peptide fragment <400> 24 Yo
Ala Cys Ile Pro Thr Gly Pro Tyr Pro Cys Gly Lys 1 5 10 9ص <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence
Yo <220> <223> Peptide fragment <400> 25
Ye
Gln Thr Leu Glu Arg Arg Lys 1 5 <210> 26 Yo <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ge <223> Peptide fragment <400> 26
Gln Thr Leu Glu Arg Arg to 1 5 <210> 27 <211> 5 On <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment oo <400> 27
SAYA
Gln Thr Leu Glu Arg 1 5 <210> 28 © <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ٠١ <223> Peptide fragment <400> 28
Leu Val Gly Gly Gln Glu Cys Lys Yo 1 5 <210> 29 <211> 40 9ص <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment Yo <400> 29
Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gln Ala Leu Leu Ile Asn Glu Glu Asn Glu 1 5 10 15 Ye
Gly Phe Cys Gly Gly Thr Ile Leu Ser Glu Phe Tyr Ile Leu Thr Ala
Yo
Ala His Cys Leu Tyr Gln Ala Lys ra <210> 30 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence $0 <220> <223> Peptide fragment <400> 30
On
Val Arg Val Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gln Glu Glu Gly Gly Glu Ala 1 5 10 15
Val His Glu Val Glu Val Val Ile Lys oo 20 25
SAYA
<210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence lo} <220> <223> Peptide fragment <400> 31 ١١
His Asn Arg Phe Thr Lys 1 5 <210> 32 Yo <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> Yo <223> Peptide fragment <400> 32
Glu Thr Tyr Asp Phe Asp Ile Ala Val Leu Arg Leu Lys Yo 1 5 10 <210> 33 <211> 28 ve <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment Yo <400> 33
Thr Pro Ile Thr Phe Arg Met Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu 1 5 10 15 2
Arg Asp Trp Ala Glu Ser Thr Leu Met Thr Gln Lys $0 <210> 34 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence On <220> <223> Peptide fragment <400> 34 ee
Thr Gly Ile Val Ser Gly Phe Gly Arg Thr His Glu Lys 1 5 10
SAYA
<210> 5 >211< 8 <212> PRT © <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment ١١ <400> 5
Gly Arg Gln Ser Thr Arg Leu Lys 1 5
Vo <210> 36 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence ١ >22 0< <223> Peptide fragment <400> 36 Yo
Met Leu Glu Val Pro Tyr Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys 1 5 10
Ye <210> 37 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence
Yo <220> <223> Peptide fragment <400> 37 ra
Leu Ser Ser Ser Phe Ile Ile Thr Gln Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr 1 5 10 15
Asp Thr Lys to <210> 38 <211> 18 Ou <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment oo <400> 38
SAYA
Gln Glu Asp Ala Cys Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr Arg 1 5 10 15
Phe Lys 5 <210> 9 <211> 8 ١١ <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment Vo <400> 39
Asp Thr Tyr Phe Val Thr Gly Ile Val Ser Trp Gly Glu Gly Cys Ala 1 5 10 15 ١
Arg Lys
Yo <210> 40 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence Ye <220> <223> Peptide fragment <400> 40 Yo
Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys 1 5 ra <210> 41 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence $0 <220> <223> Peptide fragment <400> 41
On
Val Thr Ala Phe Leu Lys 1 5 <210> 42 ده <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence
SAYA
— 7 اج >22 0< <223> Peptide fragment <400> 42 ©
Trp Ile Asp Arg Ser Met Lys 1 5 ١١ <210> 43 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence
Vo <220> <223> Peptide fragment <400> 43 9ص Thr Arg Gly Leu Pro Lys 1 5 <210> 44 Yo <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> Ye <223> Peptide fragment <400> 44
Ser His Ala Pro Glu Val Ile Thr Ser Ser Pro Leu Lys Yo 1 5 10 <210> 45 <211> 239 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Modified human protein sequence ¢o <400> 45
Leu Val Gly Gly Gln Glu Cys Lys Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gln Ala 1 5 10 15 On
Leu Leu Ile Asn Glu Glu Asn Glu Gly Phe Cys Gly Gly Thr Ile Leu 00
Ser Glu Phe Tyr Ile Leu Thr Ala Ala His Cys Leu Tyr Gln Ala Lys
SAYA
_ 7 h —_
Arg Phe Lys Val Arg Val Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gln Glu Glu Gly 60 lo}
Gly Glu Ala Val His Glu Val Glu Val Val Ile Lys His Asn Arg Phe 65 70 75 80 ١١
Thr Lys Glu Thr Tyr Asp Phe Asp Ile Ala Val Leu Arg Leu Lys Thr 85 90 95
Pro Ile Thr Phe Arg Met Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu Arg Yo 100 105 110
Asp Trp Ala Glu Ser Thr Leu Met Thr Gln Lys Thr Gly Ile Val Ser 115 120 125 ١
Gly Phe Gly Arg Thr His Glu Lys Gly Arg Gln Ser Thr Arg Leu Lys 130 135 140
Yo
Met Leu Glu Val Pro Tyr Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys Leu Ser Ser 145 150 155 160 79١
Ser Phe Ile Ile Thr Gln Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr Asp Thr Lys 165 170 175
Gln Glu Asp Ala Cys Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr Arg Yo 180 185 190
Phe Lys Asp Thr Tyr Phe Val Thr Gly Ile Val Ser Trp Gly Glu Gly 195 200 205 2
Cys Ala Arg Lys Gly Lys Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys Val Thr Ala Phe 210 215 220 $0
Leu Lys Trp Ile Asp Arg Ser Met Lys Thr Arg Gly Leu Pro Lys 225 230 235
On <210> 6 <211> 241 <212> PRT <213> Artificial Sequence 00 <220> <223> Modified human protein sequence
SAYA
_ 7 7 _ <400> 6
Leu Val Gly Gly Gln Glu Cys Lys Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gln Ala 1 5 10 15 lo}
Leu Leu Ile Asn Glu Glu Asn Glu Gly Phe Cys Gly Gly Thr Ile Leu ١١
Ser Glu Phe Tyr Ile Leu Thr Ala Ala His Cys Leu Tyr Gln Ala Lys
Arg Phe Lys Val Arg Val Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gln Glu Glu Gly Yo 60
Gly Glu Ala Val His Glu Val Glu Val Val Ile Lys His Asn Arg Phe 65 70 75 80 ١
Thr Lys Glu Thr Tyr Asp Phe Asp Ile Ala Val Leu Arg Leu Lys Thr 85 90 95
Yo
Pro Ile Thr Phe Arg Met Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu Arg 100 105 110 79١
Asp Trp Ala Glu Ser Thr Leu Met Thr Gln Lys Thr Gly Ile Val Ser 115 120 125
Gly Phe Gly Arg Thr His Glu Lys Gly Arg Gln Ser Thr Arg Leu Lys Yo 130 135 140
Met Leu Glu Val Pro Tyr Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys Leu Ser Ser 145 150 155 160 7
Ser Phe Ile Ile Thr Gln Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr Asp Thr Lys 165 170 175 $0
Gln Glu Asp Ala Cys Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr Arg 180 185 190
On
Phe Lys Asp Thr Tyr Phe Val Thr Gly Ile Val Ser Trp Gly Glu Gly 195 200 205
Cys Ala Arg Lys Gly Lys Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys Val Thr Ala Phe oo 210 215 220
SAYA
١ م Leu Lys Trp Ile Asp Arg Ser Met Lys Thr Arg Gly Leu Pro Lys Ala 225 230 235 240
Lys 5 مدر
Claims (1)
- -"١74- عناصر الحماية تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل -١ مخلق أول حيث تتكون FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تخثر منشط إلى ١ ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: FAT إلى ١115و VE ينتقى من (SB مخلق FXa activated clotting factor X وبروتين متباين عامل تخثر منشط © المجموعة المتكونة من: مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل )١( حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١9 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (V) AD حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١4١ إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (V) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: TAT إلى VETS VEY إلى ١ .من Vo مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (؛؟) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و VEY إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (9) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ٠ ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (1) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ١7و ١4١ إلى ١ من“Am مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (V) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١؛ و YAS إلى ١5و VEY إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (A) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية 0 .١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ؟؟١ و6١ إلى ١ من حيث يشتمل واحد على الأقل من بروتينات متباينة عامل ٠ التركيبة من عنصر الحماية -" «3—hydroxy Asp63 مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X منشط iis .0 متصل مع hexose التركيبة من عنصر الحماية ١؛ حيث تشتمل سلسلة خفيفة لواحد على الأقل من بروتينات -© ٠ ٠١ مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X منشط jas متباينة عامل Gla متخلفات ؛- التركيبة من عنصر الحماية ٠؛ حيث تشتمل سلسلة خفيفة لواحد على الأقل من بروتينات متخلف ١١ مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X متباينة عامل تخثز منشط Gla ٠ حيث تشتمل سلسلة خفيفة لواحد على الأقل من بروتينات ٠ د- التركيبة من عنصر الحماية مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X منشط jas متباينة عامل Gla متخلف ١١ متصل مع ©؛ و١٠ أو hexose (B-hydroxy Asp63 التركيبة من عنصر الحماية ١؛ حيث تشمل التركيبة المذكورة: -7 مخلق أول FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تخثر منشط (0) ٠ حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق ثاني FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تخثزر منشط )7( حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: TAT إلى ١7و ١4 إلى ١ .من YO“AY — (V) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق ثالث حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١4١ و516١ إلى TAT من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: mm o )£( بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق رابع حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى 7؟١ و6١ إلى VAT من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ -١ التركيبة من عنصر الحماية 6؛ حيث تشتمل سلسلة خفيفة لكل من بروتين متباين عامل تخثر FXa activated clotting factor X Lic مخلق «Js ثاني؛ ثالث؛ ورابع المذكور على hexose (3-hydroxy 05663 ٠ متصل مع O وعلى الأقل ٠١ متخلفات Gla 8- التركيبة من عنصر الحماية oF حيث تشتمل سلسلة خفيفة لكل من بروتين متباين عامل تخثر (ll «Js le FXa activated clotting factor X Li ورابع المذكور على hexose ([3-hydroxy Asp63 متصل مع 0 وعلى الأقل ١١ متخلف Gla 4- تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل VO بروتين متباين عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلق أول Cua تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة ALL, الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى VET VE إلى 948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١؛ وبروتين متباين عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلق (SB ينتقى من المجموعة المتكونة من: )١( ٠ بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١9 و7١ إلى FAA من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (V) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية YO .من ١ إلى ١4١ و7١ إلى TAA من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛م (V) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١4١ و7١ إلى 99" من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (؟) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى 7؛١ و7١ إلى 7948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ )9( بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١48 و147١ إلى 949 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: se) AD )1( بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى 7؟١ و6١ إلى 99؟ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ -٠ التركيبة من عنصر الحماية 9؛ حيث يشتمل واحد على الأقل من بروتينات المتباينة عامل تخثز منشط FXa activated clotting factor X مخلقة مذكورة على «3—hydroxy Asp63 hexose; Vo متصل مع 0. -١ التركيبة من عنصر الحماية 9؛ حيث تشتمل سلسلة خفيفة لواحد على الأقل من بروتينات متباينة عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلقة مذكورة على ٠١ متخلفات Gla -١ التركيبة من عنصر الحماية od حيث تشتمل سلسلة خفيفة لواحد على الأقل من بروتينات Yo متباينة عامل تخثز منشط FXa activated clotting factor X مخلقة مذكورة على ١١ متخلف.Gla -٠" التركيبة من عنصر الحماية od حيث تشتمل سلسلة خفيفة لواحد على الأقل من بروتينات متباينة عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلقة مذكورة على hexose (B-hydroxy Asp63 متصل مع ©؛ و١٠ أو ١١ متخلف Glaاسم -٠6 التركيبة من عنصر الحماية od حيث تشتمل سلسلة ثقيلة لواحد على الأقل من بروتينات متباينة عامل jas منشط FXa activated clotting factor X المذكورة على O- 0016-1 linked glycan واحد. -١ التركيبة من عنصر الحماية VE حيث يكون core—] O-linked glycan هو mono— sialylated © 7- التركيبة من عنصر الحماية VE حيث يكون core—1 O-linked glycan هو di-.sialylated -١" التركيبة من عنصر الحماية od حيث تشتمل سلسلة ثقيلة لواحد على الأقل من بروتينات متباينة عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مذكورة مخلقة على 0016-1 O-linked glycan | ٠ واحد. -١٠78 التركيبة من عنصر الحماية VY حيث يكون كلا O-linked glycan 0016-1 هما.mono-sialylated - التركيبة من عنصر الحماية VY حيث يكون كلا O-linked glycan 0016-1 هما.di-sialylated Yo .؟- التركيبة من عنصر الحماية VY حيث يكون واحد من core—] O-linked glycans المذكورة هو mono-sialylated والثاني من O-linked glycans 0058-1 المذكورة هو.di-sialylated -7١ تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل: )0( بروتين متباين عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلق أول ٠ حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١46 و7١ إلى 7948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (7) بروتين متباين عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلق ثاني حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١9 و7١ إلى FAA من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (V) Yo بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق ثالث حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض“AE من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: FAA إلى ١7و ١4١ إلى ١ الأمينية من mm مخلق رابع FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (£) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية .١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ١6و ١١ إلى ١ .من © حيث تشتمل سلسلة خفيفة لكل من بروتين متباين عامل oY) التركيبة من عنصر الحماية — YY ثاني؛ ثالث؛ ورابع مذكور على «Js مخلق FXa activated clotting factor X تخثر منشط Gla متخلفات ٠١ وعلى الأقل O متصل مع hexose ([3-hydroxy Asp63 حيث تشتمل سلسلة خفيفة لكل من بروتين متباين عامل (YY التركيبة من عنصر الحماية — VY ثالث؛ ورابع المذكور على SG «Js مخلق FXa activated clotting factor X تختر منشط ٠ Gla متخلف ١١ متصل مع 0 وعلى الأقل hexose ([3-hydroxy Asp63 لكل من بروتين متباين عامل ALE حيث تشتمل سلسلة 7١ التركيبة من عنصر الحماية —VE ثاني؛ ثالث ورابع المذكور على «JJ مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas واحد. core—] O-linked glycan هو 0016-1 O-linked glycan حيث يكون (VE التركيبة من عنصر الحماية —Yo ١ .di-sialylated تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل — VT مخلق أول حيث تتكون FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تخثر منشط إلى ١ الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ALL, ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة ؛١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: TAG إلى VETS ١149١ ٠ ينتقى من (SB مخلق FXa activated clotting factor X وبروتين متباين عامل تخثر منشط المجموعة المتكونة من: مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل )١( حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١؛ و YA إلى ١5و ١460 إلى ١ .من YO—Ao— مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas بروتين متباين عامل (V) حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية .١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAA إلى ١؟١ و6١ إلى ١ من حيث تشتمل سلسلة خفيفة لكل من بروتين متباين عامل (YT التركيبة من عنصر الحماية -١ مخلق أول وثاني المذكور على FXa activated clotting factor X Liaw jas © Gla متخلفات ٠١ وعلى الأقل O متصل مع hexose ([3-hydroxy Asp63 حيث تشتمل سلسلة خفيفة لكل من بروتين متباين عامل (YY التركيبة من عنصر الحماية — VA أول وثاني المذكور على le FXa activated clotting factor X تختر منشط Gla متصل مع ©؛ و١١ متخلف hexose (-hydroxy Asp63 حيث تشتمل سلسلة ثقيلة لكل من بروتين متباين عامل (V7 9؟- التركيبة من عنصر الحماية ٠ core— مخلق أول وثاني المذكور على اثنين FXa activated clotting factor X تخثر منشط .1 O-linked glycan هما 0016-1 O-linked glycans التركيبة من عنصر الحماية 749 حيث يكون كلا -٠ .di-sialylated X تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل اثنين أو أكثر بروتينات متباينة عامل تخثر منشط -*١ V0 مخلقة منتقاة من المجموعة المتكونة من: FXa activated clotting factor مخلق حيث FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تختثر منشط (0 ١ الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ALL تتكون ترتيبات بروتين ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١4 إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ب) بروتين متباين عامل ٠ حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ج) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١4١ إلى ١ .من YO“AY مخلق حيث FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تخثر منشط (9) ١ الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ALL تتكون ترتيبات بروتين ؛٠ إلى 747 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VET VEY إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ه) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية 5 ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و VEY إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (و) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ز) بروتين متباين عامل AD حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ١7و ١4١ إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ح) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ و PAE إلى ١5و ١7 إلى ١ .من VO مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ط) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية .١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAS إلى ؟؟١ و6١ إلى ١ من حيث تشتمل السلاسل الخفيفة لبروتينات متبايئة عامل oF) “؟- التركيبة من عنصر الحماية «3—hydroxy Asp63 مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X تختر منشط ٠٠ .0 متصل مع hexose التركيبة من عنصر الحماية ١7؛ حيث تشتمل السلاسل الخفيفة من بروتينات متباينة عامل FY «3—hydroxy Asp63 مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X تخثز منشط Gla متخلف ١١ متصل مع ©؛ و١٠ أو hexose أو كل 9 بروتينات متباينة AY 10 4؛ oF تشمل (FY) التركيبة من عنصر الحماية -FE Yo مخلقة منتقاة من بين 0 -(ط). FXa activated clotting factor X منشط jas عامل—AV- X تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل اثنين أو أكثر بروتينات متباينة عامل تخثر منشط —Vo مخلقة منتقاة من المجموعة المتكونة من: FXa activated clotting factor مخلق حيث FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تختثر منشط 0 ١ يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YAA إلى ١3و ١394 إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ب) بروتين متباين عامل حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ؛١ إلى 948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١7و ١546 إلى ١ مخلق FXa activated clotting factor X (ج) بروتين متباين عامل تخثز منشط حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ٠ ؛٠ إلى 948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١7و EY إلى ١ مخلق حيث FXa activated clotting factor X Lise (د) بروتين متباين عامل تخثر ١ يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ؛٠ إلى 7948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VET VEY إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ه) بروتين متباين عامل yo حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YA إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (و) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ و TA إلى ١7و ١١ إلى ١ .من ٠ مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ز) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية .١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YA إلى VETS ١؟7 إلى ١ من حيث تشتمل السلاسل الخفيفة من بروتينات متباينة عامل FO التركيبة من عنصر الحماية -© «3—hydroxy Asp63 مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X تختر منشط Yo .0 متصل مع hexose—AA— حيث تشتمل السلاسل الخفيفة من بروتينات متباينة عامل (FO التركيبة من عنصر الحماية — TY «3—hydroxy Asp63 مخلقة مذكورة على FXa activated clotting factor X منشط iis Gla متخلف ١١ متصل مع ©؛ و١٠ أو hexose حيث تشتمل السلاسل الثقيلة لبروتينات متباينة عامل تخثر (FO التركيبة من عنصر الحماية -©4 مخلقة مذكورة على واحد أو اثنين FXa activated clotting factor X منشط © .016-1 O-linked glycans core—1 O-linked حيث يكون واحد على الأقل من FA التركيبة من عنصر الحماية —T4 di-sialylated أو mono-sialylated المذكورة هو glycans تشمل 7 4؛ ©؛ 1 أو كل بروتينات متباينة عامل (Fo التركيبة من عنصر الحماية -6 مخلقة تنتقى من بين (أ)-(ز). FXa activated clotting factor X تخثر منشط ٠ تركيبة مع نشاط مُدعم للتخثر تشمل: -؟١ مخلق حيث FXa activated clotting factor X بروتين متباين عامل تختثر منشط 0 ١ الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ALL تتكون ترتيبات بروتين ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١4 إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ب) بروتين متباين عامل yo حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X (ج) بروتين متباين عامل تخثز منشط حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: FAT إلى VETS EY إلى ١ .من ١ مخلق حيث FXa activated clotting factor X Lise (د) بروتين متباين عامل تخثر ١ الثفيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ALLL, تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة ؛٠ إلى 747 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VET VEY إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ه) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية YO ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VAT إلى ١7و VEY إلى ١ من-04- (و) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١46 و7١ إلى YAS من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (ز) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١4١ و7١ إلى YAS من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (ح) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى 7؛١ و7١ إلى YAS من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ AD (ط) بروتين متباين عامل تخثز منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ؟؟١ و6١ إلى YAS من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ (ي) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ ١ إلى ١19 و7١ إلى 94 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠ (ك) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١546 و7١ إلى 948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١؛ (J) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق ٠ حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى EY و7١ إلى 948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (م) بروتين متباين عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى VET VEY إلى 7948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛(ن) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١46 و7١ إلى YA من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (س) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق 0 حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى VE) و7١ إلى 794 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١٠ و (ع) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى 7؟١ VETS إلى 99؟ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: .١ ٠ 47- التركيبة من عنصر الحماية )8 حيث تشتمل السلاسل الخفيفة من بروتينات متباينة عامل تخثز منشط FXa activated clotting factor X مخلقة مذكورة على «3—hydroxy Asp63 hexose متصل مع ©؛ و١٠ أو ١١ متخلف Gla - التركيبة من عنصر الحماية of) حيث تشتمل السلاسل الثقيلة لبروتينات متباينة عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلقة مذكورة على واحد أو اثنين.core—] O-linked glycans ١٠ ؛- التركيبة من عنصر الحماية 7؛؛ حيث يكون واحد على الأقل من core—1 O-linked glycans المذكور هو mono-sialylated أو di-sialylated 5- التركيبة من عنصر الحماية TY تشمل إضافيا اثنين أو أكثر من بروتينات متباينة عامل تخثر منشط FXa activated clotting factor X مخلقة تنتقى من المجموعة المتكونة من: ٠ 0 بروتين متباين عامل تختثر منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ إلى ١4 و7١ إلى YA من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠؛ (ب) بروتين متباين عامل jas منشط FXa activated clotting factor X مخلق حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ١ Yo إلى ١1460 و7١ إلى YAA من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ٠مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ج) بروتين متباين عامل حيث يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من ؛٠ إلى 948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١7و EY إلى ١ مخلق حيث FXa activated clotting factor X (د) بروتين متباين عامل تخثر منشط ١ يتكون ترتيب بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية من © ؛٠ إلى 7948 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: VET VEY إلى مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ه) بروتين متباين عامل حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية ؛٠ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YA إلى ١7و ١46 إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (و) بروتين متباين عامل AD حيث تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية و ١٠ إلى 794 من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: ١7و VE) إلى ١ من مخلق FXa activated clotting factor X منشط jas (ز) بروتين متباين عامل تتكون ترتيبات بروتين السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة على التوالي من الأحماض الأمينية Cua .١ من ترتيب الحمض الأميني من تعريف الترتيب رقم: YA إلى ١5و VEY إلى ١ .من 5)+ رم el (ريف Ae TX Sead أميني inn ترتيب ¥ to 3 AREFLEEMERECHLER FUN ERTURY REAR EVE EDETR لد RIGHT :و ااا اا الس م الس الس الس 1 | يع م مم مم a4 BPP CONGR CR ماع رمع امد TRRLE SLOSS > عجوم Sas لمبمسسسسسمس_مصسصة المسمسسسشتم#سسسسسسسسسسسسيا 1 RV AE MANN : 5 Yad HEBQNSVICSCARGYTLADNGRAC لاوا POGERVIE RR م وجوت ا ل EDGR HALL FE REPOST LRP TLE AARC LY QAR BFE VRS م مم اس Yor DRNTEQREGERAVHETEYY ع هه PRET Y DPD امك مم ta or 8 1 8 ا و الا 8 8 5 ات اا الت 3 8 - IER 8 8 0 vat ACL PERNA ST LTE TR LV SOF ORTH SHA ROS TR LEML EVE YVORNS Te ا Tay CRE RSE DONEC AY ROR DAC RCP EY PRE RIT PURE TSW va 3 5 Tad GECCARRERYRT ا الوا ا LER I DROME TRS LEK ARB HAPEVITS SPLE FRY fir شكل SAYAq Ad — — ترتيب الحمض الأميني المتوقع لسلسلة خفيفة لبروتين FNa مثباين (تعريف الترثيب رقم: 7(VANSPFLEEMEKEGHLERECHMERETYTCSYEEARREY YMNT FEDEDEKITNEFPWREKYEREDGRQQCETSPOQNLGGEK 1٠MICXKDPOSLEGEBEYTOCTICLEGCGFEGERKRNLOCELPITRELC 5#NN LDNGSGDOCRQFOHEEQNEVVOCISOCARGYTLADEN WY.17١ GRACIPTGPRPYPOSKQIYTLERRIXRRIKRER Vis)ب(١ شكل SAYA—4¢— ترثيب الحمض الأميني لسلسلة ثقيلة لبروتين FX متباين (تعريف انترتيب رقم: 7(VLVEGSQEBECXPDOCECPROALLINERBRREGFCSGT ٠ TW ILSEPYILTAARNCLYPAKRPFEKYRVIDRNTE +٠ VW ربج ” ددج > ي » »تج _ + » غم ب4د؟كدة_ » «» م بت لا الا © 1 8 0 NVLEBELIEXD?EF ITPFRBARVAPACLPERRWALR SD LM YrWY TQAETECIVESCFEGRITEERGROSTYRLENLEVEY 1 VY VDRANSCXKLSESFIITONMFPFTCAGYDTRGEDSA YA VY CRED SES PHY TRYVFRDDY FV IT REVSREGE ZITA TM REGEYQSIVYPEKVIAFLERIDREMNETDTRGLY Ka Vie YIP KS HEAPEVIT?SEPLEK voi (a شكل مدره40 cDNA يشفر بروتين FX متباين (تعريف الترتيب رقم: 4)ATBGCECACETCOGAGGCTTERABCTECOTCECTECCTEGRCCTEECTECCCTETETAGRCTTS TGCACAGCCAGCATETETTCCTGGCTCCTCAGCAAGCACGETCGCTGITCCAGCEGETCOGECG AGUCRATPCCTTTCTTGARAGAGATGAAGAAAGGACACCTCGARAAGAGAGCTGCATGGRAGAGACC PGCTCATACCAAGAGGCCCECEAGGTOTTTGAGGACAGCGACAAGACSAATGAATTCTGSAATA AATACAAAGATGECGACCAGTOTGAGACCAGTCOTTGCCAGARCCAGGGCARATCTARAGACGSE COTCEGOEARTACACCTIGCACC TE TT TAGARGCATICCAAGGCARAAACTOTCARTTATTCACA COGARGCTCTGCACCCTGRACAACGEECACTOTCACCAGTICT GCC ACCAGGAACAGAACTCTS TEETETCCTCCTGCGCCCECEEETACACCOTGECTEACAACEGOAAGGLCTCCATTCCCACAGS GCCCTACCCOTGTECGARACAGACCO TEGAACSCAGGAACAGGCETARGCOTOTCHTGOGAGES CAGGRAATGCARGGACEGGEAGTETCCOTERCAGGCCCTGUTCATCAATGAGEABARCGRGEETT POTGTGETECAACTATICTGAGC GAG TTC TACATCCTAACGECAGCCCACTE TUT CTACCAAGT CAAGAGATTCAAGETEAGGEGTACGTGACCGCGAACACGGAGCAGGAGRAGGGUGHETCAGGCGETE CACGAGETBCACGTERTCATCAAGCACAACCCATTCACARAGGAGARCTATCACTTCGACATCE CCETECTCOCROTCAAGACCCCCATCALCTTCOGCATCAACGTERCECCTRLCTACOTOCC CGA CLCTGACTECCCCEACTCCACCCTCATRACGCACAACACECCEATTETCAGLCECTTCEEE EE ACCCACGAGAAGGGCCEGCAGTCCACCAGGCTCAAGATEOTGRAGCTGCCCTACGTGGACCGTA ACAGCTGCAAGCTETCCAGCAGUPTCATCATCACCCAGAACATE TTCTETGCCGGOTACGACAC CABGCAGGAGGATGCOTECCAGGEEGACAGCEGRGHCCCECACGTCACCCGCTTLARGGACACC TACT TCGTGACAGGC AT CGTCAGCTGEGEAGAGEGCTETGLCCOTAAGGGCARGTACGGRATCT ACACCAAGGTCACCECCTTCCTCAAGTCBATCGACAGCTCLATGARAACCAGREGCTTGU CCARGCCCAAGAGCCATGCCCCGEAGCTCATAACGTCCTCTCCATTAAAGTGA(91 شكل SAYA—4 1- 2 YA LY "oe HY YY Hid = R 11 ax 1 ماي 14,19 1098 1 H2 3 » 4% : LL 0 8 ع ْ:ٍ ELI % H4 : ed n 7 on ? 0 0 5 وا م H10 dl | " at 16 HS is أ FB 8 | ْ ye A ~ 1 : J : 2 ٍّ ] Rj ra Cf 3 In Hille Si ا وال ءا الل نا RA id Ho i 118 = إ 18 0 سا 1 ازالب٠.” ا الأزثززة_انا {676 HP صغر Ye Y. Te 2 De Te ولا A qs Ya 14. VY VY. VE Yo 11x الوقت (بالدقائق) شكل ؟ SAYAبرا alpha 1 * ] ,© od i beta 1 - 3 إ 1 CTs | 3 gamma} || ] 1 - 7 مش han v Vi ١ YA vo 3 £4 Neu (بالدقائق) vo K © SAYA1 1 i i 1 ٍْ of \ 1 و 3 1 ا | I : أل | 1 2 i X 1 1 : 1 3 BIE i | \ \ م نا انما i ا i Sc e | I : ارمس ايد افر يط cr vi م va ا ب ا و 5 3 ; رن ماق | ٍ شل SAYAا & B- شكل اماد ا ANS ERR MBG ال ETVAT \ {TANS RR 4 5 0 ال م 48 م 7 الوا ا TANS.LER MEL ya, Kades Nop ' سا JR +1 أي إُ | : ¥ 4 ¥ Y Ed £ a EN : K 2 * 0 : Lo 1 AS RR ee eda ATHY 8 ASE ما ie 3 . : 2 و "م ge JSG 2 5 : 8 i 0 : . ¢ 01 اداح الاح “~ SE Y, Pe, : : | | | | I : | خخخ أ ع A ¢ الل“ x 1 Nu 1 | H 9 5 NHN ل ا 1 ل all Ul 0 0 i 3 i 1 i Rd 3 { i. 3% 58 : ul i نا 1 i 3 13863 BE EN 82 1 : £3. RE RH! ا rere RS ل السو وس J 2 Elon iia RNR HE BV ل هد اا 8 A Bhan EA I ATER واو الاج so شكل SAYA-١ ا RL vod ved ved yori WY 1 السلسلة الخفيفة 1 7 1 ١ i" 3 السلسلة الثقيلة ٍ VA IN - “+ SA 3 a LN i HT i 3, 1 | 1 er i v8 or>. Y ty A — ار — صفر [I I Y TY a Ys Ye Ya مضع Ta vs :؟؛ £5 ma de 1s Ts Ve علا As (بالدقائق) a gl + شكل SAYA-١١١- مق سس حر . YY, Sa vit.Lt Gla ١١ كب lg TANS.RRK141 TANS.ERR 3 إْ 1 ل Tits a 1 | en 2 ANS.LERTIS سم 10| Tos doe 1 | Let tans.KRIS I 1 i i 0 J 0 LUT ا STIR PRA VY.TY.Yaa Vida [05S شكل كلل SAYA_ \ ٠ \ —_ Gi dae Po SEE ; ضيف MARA i : 1 BE الست i ; 0 مطيرق FE ا PRES SSE i i foe Ee ب i 3 ا AY BAA Sh ; { ا يا ردق ترف 0 i ERR ENTE PAN i 5 2 { 1 وض H J Po H i ie 8 N ! { H BY Hew : 1 1 1 N SE CURE. الل الطلب ته اجاج اتن الس اج لاني ا أي لوجي مسج وه لوال ادن كس ساعن ةج اا ERATE} Ssh Ne. ١ ان ١ دقل ب مدرمدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب TAT الرياض 57؟؟١١ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: patents @kacst.edu.sa
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201361881834P | 2013-09-24 | 2013-09-24 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA516370751B1 true SA516370751B1 (ar) | 2018-04-05 |
Family
ID=51844797
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA516370751A SA516370751B1 (ar) | 2013-09-24 | 2016-03-17 | تركيبات تشمل مجموعات متغايرة من بروتينات xa لعامل تخثر آدمي تخليقي |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US9757434B2 (ar) |
| EP (1) | EP3049434A1 (ar) |
| JP (1) | JP6429885B2 (ar) |
| KR (1) | KR101988705B1 (ar) |
| CN (2) | CN105579468A (ar) |
| AR (1) | AR097732A1 (ar) |
| AU (1) | AU2014326257B2 (ar) |
| BR (1) | BR112016005899A8 (ar) |
| CA (1) | CA2924981C (ar) |
| HK (1) | HK1218760A1 (ar) |
| IL (2) | IL244258A0 (ar) |
| MX (1) | MX2016003871A (ar) |
| MY (1) | MY173548A (ar) |
| PE (1) | PE20160877A1 (ar) |
| RU (1) | RU2648144C2 (ar) |
| SA (1) | SA516370751B1 (ar) |
| SG (1) | SG11201601221XA (ar) |
| TW (1) | TWI631134B (ar) |
| WO (1) | WO2015044836A1 (ar) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6437458B2 (ja) | 2013-01-31 | 2018-12-12 | ファイザー・インク | 第Ｘａ因子の阻害を中和するための組成物および方法 |
| KR101988705B1 (ko) | 2013-09-24 | 2019-06-12 | 화이자 인코포레이티드 | 재조합 인간 응고 인자 Xa 단백질의 이질적 집단을 포함하는 조성물 |
| MX2018015873A (es) | 2016-06-17 | 2019-08-12 | Portola Pharm Inc | Preparacion de derivados del factor xa. |
| EP3722418A1 (en) * | 2019-04-08 | 2020-10-14 | AB Enzymes Oy | Solution stable enzyme composition |
Family Cites Families (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5597799A (en) | 1990-09-04 | 1997-01-28 | Cor Therapeutics, Inc. | Recombinant agents affecting thrombosis |
| AT405516B (de) | 1997-02-27 | 1999-09-27 | Immuno Ag | Faktor x-analoge mit modifizierter proteasespaltstelle |
| AT405517B (de) | 1997-02-27 | 1999-09-27 | Immuno Ag | Faktor x-deletionsmutanten und analoge davon |
| AT410216B (de) | 1999-08-10 | 2003-03-25 | Baxter Ag | Faktor x-analogon mit verbesserter aktivierbarkeit |
| US20040102388A1 (en) | 2000-03-22 | 2004-05-27 | High Katherine A. | Modified blood clotting factors and methods of use |
| FR2831170B1 (fr) | 2001-10-19 | 2004-03-19 | Inst Nat Sante Rech Med | Proteines c modifiees activables directement par la thrombine |
| FR2841904B1 (fr) | 2002-07-03 | 2004-08-20 | Inst Nat Sante Rech Med | Analogues de facteurs x clivables par la thrombine |
| DK1781782T3 (da) * | 2004-08-17 | 2010-08-23 | Csl Behring Gmbh | Modificerede vitamin K-afhængige polypeptider |
| EP1728798A1 (en) | 2005-06-01 | 2006-12-06 | ZLB Behring GmbH | Coagulation factor X polypeptides with modified activation properties |
| MX2008006313A (es) | 2005-11-15 | 2008-11-06 | Philadelphia Children Hospital | Metodos y composiciones para modular la hemostasia. |
| EP1820508A1 (en) | 2006-02-21 | 2007-08-22 | CSL Behring GmbH | Coagulation factor X polypeptides with modified activation properties |
| PT2193196T (pt) * | 2007-09-28 | 2016-10-24 | Portola Pharm Inc | Antídotos para inibidores do fator xa e métodos de utilização dos mesmos |
| CN102066417B (zh) | 2008-06-24 | 2015-11-25 | 奥克塔法马股份有限公司 | 提纯凝固因子viii的方法 |
| MX2011004907A (es) * | 2008-11-14 | 2011-07-29 | Portola Pharm Inc | Antidotos para inhibidores del factor xa y metodos para el uso de los mismos en combinacion con agentes de coagulacion de sangre. |
| US8436144B2 (en) | 2008-12-19 | 2013-05-07 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Serine protease derivatives and uses in the prevention or the treatment of blood coagulation disorders |
| ES2605801T3 (es) | 2009-07-15 | 2017-03-16 | Portola Pharmaceuticals, Inc. | Formulación de dosis unitaria de antídoto para inhibidores del factor Xa para su uso en la prevención de la hemorragia |
| TW201217526A (en) * | 2010-07-09 | 2012-05-01 | Biogen Idec Hemophilia Inc | Chimeric clotting factors |
| FR2972114B1 (fr) | 2011-03-01 | 2013-03-15 | Univ Grenoble 1 | Un nouveau leurre moleculaire procoagulant pour le traitement des hemophiles a ou b avec ou sans inhibiteur |
| EP2760887A4 (en) | 2011-09-30 | 2015-06-10 | Philadelphia Children Hospital | COMPOSITIONS AND METHODS OF HEMOSTASE MODULATION |
| WO2014018120A1 (en) | 2012-07-25 | 2014-01-30 | Catalyst Biosciences, Inc. | Modified factor x polypeptides and uses thereof |
| JP6437458B2 (ja) | 2013-01-31 | 2018-12-12 | ファイザー・インク | 第Ｘａ因子の阻害を中和するための組成物および方法 |
| KR101988705B1 (ko) | 2013-09-24 | 2019-06-12 | 화이자 인코포레이티드 | 재조합 인간 응고 인자 Xa 단백질의 이질적 집단을 포함하는 조성물 |
| CA2928762A1 (en) | 2013-11-01 | 2015-05-07 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Compositions and methods for increasing the half-life of factor xa |
| MX2016009665A (es) | 2014-01-24 | 2016-11-14 | Pfizer | Composiciones y metodos para el tratamiento de la hemorragia cerebral. |
-
2014
- 2014-09-16 KR KR1020167007373A patent/KR101988705B1/ko active IP Right Grant
- 2014-09-16 SG SG11201601221XA patent/SG11201601221XA/en unknown
- 2014-09-16 MY MYPI2016700985A patent/MY173548A/en unknown
- 2014-09-16 MX MX2016003871A patent/MX2016003871A/es active IP Right Grant
- 2014-09-16 PE PE2016000398A patent/PE20160877A1/es unknown
- 2014-09-16 CN CN201480052212.2A patent/CN105579468A/zh active Pending
- 2014-09-16 CA CA2924981A patent/CA2924981C/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-09-16 AU AU2014326257A patent/AU2014326257B2/en not_active Ceased
- 2014-09-16 JP JP2016543477A patent/JP6429885B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-09-16 BR BR112016005899A patent/BR112016005899A8/pt not_active IP Right Cessation
- 2014-09-16 CN CN202011112690.1A patent/CN112195169A/zh active Pending
- 2014-09-16 EP EP14792595.2A patent/EP3049434A1/en not_active Withdrawn
- 2014-09-16 WO PCT/IB2014/064564 patent/WO2015044836A1/en active Application Filing
- 2014-09-16 RU RU2016108608A patent/RU2648144C2/ru active
- 2014-09-23 AR ARP140103512A patent/AR097732A1/es unknown
- 2014-09-23 TW TW103132803A patent/TWI631134B/zh not_active IP Right Cessation
- 2014-09-24 US US14/495,478 patent/US9757434B2/en active Active
-
2016
- 2016-02-23 IL IL244258A patent/IL244258A0/en unknown
- 2016-03-17 SA SA516370751A patent/SA516370751B1/ar unknown
- 2016-06-10 HK HK16106674.2A patent/HK1218760A1/zh unknown
-
2017
- 2017-08-04 US US15/669,340 patent/US10660946B2/en active Active
-
2020
- 2020-05-25 US US16/882,598 patent/US20210106658A1/en not_active Abandoned
- 2020-12-13 IL IL279396A patent/IL279396A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP6429885B2 (ja) | 2018-11-28 |
| IL279396A (en) | 2021-01-31 |
| WO2015044836A1 (en) | 2015-04-02 |
| PE20160877A1 (es) | 2016-09-11 |
| US10660946B2 (en) | 2020-05-26 |
| JP2016535071A (ja) | 2016-11-10 |
| MX2016003871A (es) | 2016-08-04 |
| BR112016005899A2 (pt) | 2017-09-26 |
| CA2924981C (en) | 2020-03-31 |
| AU2014326257B2 (en) | 2017-08-10 |
| BR112016005899A8 (pt) | 2018-02-06 |
| TWI631134B (zh) | 2018-08-01 |
| HK1218760A1 (zh) | 2017-03-10 |
| IL244258A0 (en) | 2016-04-21 |
| US20150182604A1 (en) | 2015-07-02 |
| RU2016108608A (ru) | 2017-10-26 |
| KR20160044034A (ko) | 2016-04-22 |
| US20210106658A1 (en) | 2021-04-15 |
| RU2648144C2 (ru) | 2018-03-22 |
| EP3049434A1 (en) | 2016-08-03 |
| MY173548A (en) | 2020-02-04 |
| TW201524996A (zh) | 2015-07-01 |
| KR101988705B1 (ko) | 2019-06-12 |
| CN112195169A (zh) | 2021-01-08 |
| AR097732A1 (es) | 2016-04-13 |
| US9757434B2 (en) | 2017-09-12 |
| SG11201601221XA (en) | 2016-04-28 |
| CN105579468A (zh) | 2016-05-11 |
| US20170333535A1 (en) | 2017-11-23 |
| AU2014326257A1 (en) | 2016-03-10 |
| CA2924981A1 (en) | 2015-04-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Esmon et al. | Structure, assembly, and secretion of octameric invertase. | |
| RU2722374C1 (ru) | Высокогликозилированный слитый белок на основе фактора свертывания крови человека viii, способ его получения и его применение | |
| CN101605557B (zh) | 内切糖苷酶EndoS用于治疗免疫球蛋白G介导的疾病的用途 | |
| SA516370751B1 (ar) | تركيبات تشمل مجموعات متغايرة من بروتينات xa لعامل تخثر آدمي تخليقي | |
| ES2349112T3 (es) | Método de purificación de factor vii. | |
| EA012162B1 (ru) | Способ рефолдинга рекомбинантных антител | |
| Michelfelder et al. | Moss-produced, glycosylation-optimized human factor H for therapeutic application in complement disorders | |
| NO321096B1 (no) | Fremgangsmate for forbedring av in vivo-funksjonen av rekombinant faktor VIII SQ ved a skjerme utsatte mal pa polypeptidet | |
| CN106279436B (zh) | 活化的人凝血因子vii融合蛋白及其制备方法与用途 | |
| SG189790A1 (en) | Modified factor ix polypeptides and uses thereof | |
| AU2021261911B2 (en) | Polypeptides modulating SIGLEC dependent immune responses | |
| Rindisbacher et al. | Production of Human Secretory Component with Dimeric IgA Binding Capacity Using Viral Expression Systems∗ | |
| SA517380867B1 (ar) | عديد ببتيدات لعامل vii قصير التأثير | |
| Lee et al. | Affinity purification and characterization of a G-protein coupled receptor, Saccharomyces cerevisiae Ste2p | |
| CN103814137A (zh) | 处理凝血因子的方法 | |
| TW202346582A (zh) | 一種凝血因子ｘ啟動酶及其應用 | |
| JPH08163995A (ja) | 各種脳由来神経栄養因子の精製方法および各種脳由来神経栄養因子 |