RU97100934A

RU97100934A - Нуклеотидные последовательности пестивирусных штаммов, полипептиды, закодированные этими последовательностями, и их использование для диагностики и профилактики пестивирусных инфекций

Info

Publication number: RU97100934A
Application number: RU97100934/13A
Authority: RU
Inventors: Якобус Мария Морманн Робертус; Антониус Ван Рейн Петрус
Original assignee: Инститют Вор Дирхаудерей эн Диргезондхейд
Priority date: 1994-06-17
Filing date: 1995-06-16
Publication date: 1999-02-27

Claims

1. Нуклеотидная последовательность, соответствующая геному вируса классической свиной лихорадки (CSFV) или его мутанту, характеризуемая тем, что по существу включает нуклеотидную последовательность C-штамма CSFV, показанную в SEQ ID N 1, или комплемент, или РНК-эквивалент такой нуклеотидной последовательности.

2. Нуклеотидная последовательность, соответствующая геному вируса классической свиной лихорадки, его части или мутанту, характеризуемая тем, что включает нуклеотидную последовательность, кодирующую по крайней мере последовательность аминокислот 268-494 в последовательности с идентификационным N 1, комплемент или РНК-эквивалент такой нуклеотидной последовательности.

3. Нуклеотидная последовательность по любому из пп. 1 и 2, имеющая мутацию в нуклеотидной последовательности, кодирующей аминокислоты 690-870.

4. Нуклеотидная последовательность по любому из пп. 1-3, в которой указанная мутация представляет собой замещение соответствующей частью генома другого пестивирусного штамма.

5. Нуклеотидная последовательность, кодирующая пестивирусный полипептид, соответствующий последовательности аминокислот 690-1063 в последовательности SEQ ID N 1 или ее части, характеризуемая тем, что имеет мутацию в одном из эпитопов в последовательностях аминокислот 691-750 или 785-870, которая изменяет указанный эпитоп.

6. Полипептид, кодируемый нуклеотидной последовательностью по любому одному из пп. 1-5.

7. Вакцинный штамм, геном которого получают из полноразмерной ДНК-копии и/или ее инфекционного транскрипта, нуклеотидной последовательности по любому из пунктов 1-5.

8. Вакцина, содержащая полинуклеотид, имеющий последовательность по любому из пп. 1-5, полипептид по п. 6, или вакцинный штамм по п. 7.

9. Диагностическая композиция, содержащая, по крайней мере, нуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-5, полипептид по п. 6, и/или антитело, индуцированное против полипептида по п. 6.

10. Нуклеотидная последовательность ТТТТСТТТТТТТТ в качестве маркера для последовательностей, выделенных из C-штамма вируса классической свиной лихорадки.

11. Диагностический метод для дифференцирования животных, зараженных пестивирусом, и животных, вакцинированных полипептидом или штаммов пестивируса, имеющим мутацию в последовательности аминокислот 268-494 или 690-1063 в последовательности с идентификационным N 1, который включает в себя контактирование тестируемого образца с пестивирусным антигеном, соответствующим последовательностям аминокислот 268-494 или 690-1063 либо их части, и с антителом, направленным против эпитопа указанного пестивирусного антигена, функционально отсутствующего в мутированном полипептиде или пестивирусном штамме, используемом для вакцинации, и измерение степени конкуренции между антителом в указанном образце и антителом, направленным против эпитопа пестивирусного антигена.

12. Метод по п. 11, в котором указанный пестивирусный антиген является димеризованным или мультимеризованным полипептидом и часть указанного антитела иммобилизована, а другая часть антитела мечена.

13. Метод по пп. 11 или 12, в котором указанные пестивирусный полипептид и антиген соответствуют последовательности аминокислот 690-1063, а указанный эпитоп находится между аминокислотами 785 и 870.

14. Метод определения присутствия в образце тестируемого вещества, способного специфически связываться с сайтом связывания связывающего партнера на основании конкуренции указанного тестируемого вещества с измеряемым количеством эталонного вещества, способного специфически связываться с тем же сайтом связывания указанного связывающего партнера, который включает в себя:
1) контактирование указанного образца с (а) связывающим партнером эталонного вещества, причем молекула связывающего партнера содержит, по крайней мере, два идентичных сайта связывания для эталонного вещества, (b) эталонным веществом, связанным с твердым носителем, и (c) меченым эталонным веществом:
2) измерение степени связывания указанной метки с носителем через связывающий партнер и эталонное вещество.

15. Метод по п. 14, в котором указанный связывающий партнер является димером или мультимером связывающего партнера эталонного вещества.

16. Метод определения присутствия с образца тестируемого вещества, имеющего, по крайней мере, два идентичных сайта связывания в молекуле, предназначенные для специфического связывания со связывающим партнером, который включает в себя:
1) контактирование указанного образца с (а) связывающим партнером, связанным с твердым носителем, и (b) меченым веществом связывающего партнера;
2) измерение степени связывания указанной метки с носителем через связывающий партнер и контрольное вещество.

17. Диагностический набор, содержащий: а) эталонное антитело, связанное с твердым носителем, b) эталонное антитело с введенной меткой; и необязательно с) антиген для указанного эталонного антитела, содержащий, по крайней мере, два идентичных сайта связывания для эталонного антитела; или комплекс компонентов (а), (b) и (с), а также другие компоненты, необходимые для выполнения конкурентного иммунологического анализа.