KR930702942A - 재조합 고양이 코로나바이러스 에스 단백질 - Google Patents

재조합 고양이 코로나바이러스 에스 단백질

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KR930702942A
KR930702942A KR1019930701447A KR930701447A KR930702942A KR 930702942 A KR930702942 A KR 930702942A KR 1019930701447 A KR1019930701447 A KR 1019930701447A KR 930701447 A KR930701447 A KR 930701447A KR 930702942 A KR930702942 A KR 930702942A
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Abstract

본 발명은 신규한 갈락토키나제/FIPV 에스 융합단백질, 백신성분, 치료제 및 진단제로서의 그들의 용도, 및 이들의 제조방법을 제공한다.

Description

재조합 고양이 코로나바이러스 에스 단백질
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 pOTSKF33 세균발현벡터의 도식적 다이아그램이다. 제2도는 pOTSKF33의XmaI -StuI 부위내로 클로닝된 PCR-증폭된 단편을 함유한 플라스미드를 도해한 것이다.

Claims (51)

  1. 선택된 융합파트너 단백질 또는 이의 일부를 암호화한 유전자 열에 프레임내로 임의 융합된 코로나바이러스 스트레인의 에스 유전자로 부터의 선택된 서열을 포함한, 코로나바이러스 또는 관련된 바이러스에 의해 유발된 질병의 진단, 치료, 또는 예방에 유용한 펩타이드 또는 단백질.
  2. 제1항에 있어서, 에스 유전자가 고양이 코로나바이러스인 고양이 감염성 복막염 바이러스(Feline Infectious Peritonitis Virus)로 부터 수록된 단백질.
  3. 제1항에 있어서, 코로나바이러스가 WT FIPV DF2, WT FIPV WSU 1146, TS FIPV, WT FIPV UCD-2, WT FIPV TN406, WT FIPV UCD-1, FIPV DF2-HP 및 FIPV TS-BP로 이루어진 그룹중에서 선택되는 단백질.
  4. 제1항에 있어서, 에스 유전자가 고양이 코로나바이러스인 FECV로 부터 수득된 단백질.
  5. 제1항에 있어서, 선택된 에스 유전자서열이 에스단백질의 아미노산 1-1454번에 상동성인 서열을 포함한 펩타이드 또는 이의 단편을 암호화한 단백질.
  6. 제5항에 있어서, 선택된 에스 유전자가 에스 단백질의 아미노산 1-748번에 상동성인 서열을 포함한 펩타이드 또는 이의 단편을 암호화한 단백질.
  7. 제1항에 있어서, 선택된 에스 유전자서열이 에스 단백질의 아미노산 94-223번을 포함한 펩타이드를 암호화한 단백질.
  8. 제1항에 있어서, FECV로 부터의 아미노산 18-26번[서열동정번호 :36 ], 46-53번[서열동정번호 :38 ], 73-78번[서열동정번호 :40 ], 124-174번, 145-150번[서열동정번호 :42 ], 138-159번[서열동정번호 :44 ], 143-150번[서열동정번호 :46 ], 200-205번[서열동정번호 :48 ], 및 529-536번[서열동정번호 :50 ], FIPV의 상응하는 펩타이드, 컨센서스 서열의 상응하는 펩타이드, 및 이들의 단편으로 이루어진 그룹중에서 선택되고 FIPV 스트레인과 FECV를 구별할 수 있는 펩타이드를 포함한 단백질.
  9. 제1항에 있어서, 선택된 융합파트너 단백질이 갈락토키나제, β-갈락토시다제, 유비퀴틴, α교배인자 및 인플루엔자 NS-1 또는 이들의 일부로 이루어진 그룹중에서 선택되는 단백질.
  10. 제9항에 있어서, 선택된 융합파트너 단백질이 갈락토키나제의 N-말단 52개 아미노산을 포함하는 단백질.
  11. 갈라토키나제 유전자 또는 이의 N말단 52개 아미노산 유전자에 프레임내로 임의 융합된 고양이 코로나 바이러스 스트레인의 에스 유전자로 부터의 선택된 서열의 포함함, 고양이 감염성 복막염 바이러스의 진단, 치료 또는 예방에 유용한 펩타이드 또는 단백질.
  12. 제3도 서열동정번호 :20 , 제4도 서열동정번호 :22 및 24 , 제5도 서열동정번호 :26 및 28 , 제6도 서열동정번호 :30 , 제7도 서열동정번호 : 32, 제8도 서열동정번호 :54 및 제9도 서열동정번호 :34의 아미노산 서열로 이루어진 그룹중에서 선택된 아미노산서열의 전부 또는 일부를 포함한 펩타이드 또는 단백질.
  13. 고양이 코로나바이러스 스트레인의 유전자로부터의 선택된 뉴클레오타이드 서열을 포함한, 크로나바이러스 또는 관련된 바이러스에 의해 유발된 질병의 진단, 치료 또는 예방에 유용한 DNA서열.
  14. 제13항에 있어서, 에스 유전자가 고양이 코로나바이러스인 고양이 감염성 복막염 바이러스(Feline Infectious Peritonitis Virus)로 부터 수득된 DNA 서열.
  15. 제13항에 있어서, 코로나바이러스가 WT FIPV DF2, WT FIPV WSU 1146, TS FIPV, WT FIPV UCD-2, WT FIPV TN406, WT FIPV UCD-1, FIPV DF2-HP 및 FIPV TS-BP로 이루어진 그룹중에서 선택되는 DNA 서열.
  16. 제13항에 있어서, 에스 유전자가 고양이 코로나바이러스인 FECV로 부터 수득된 DNA서열.
  17. 제13항에 있어서, 에스 유전자의 뉴클레오타이드 1내지 약 4365번에 상당하는 서열 또는 이의 단편을 포함한 DNA 서열.
  18. 제17항에 있어서, 에스 유전자의 뉴클레오타이드 1내지 약 2246번에 상당하는 서열 또는 이의 단편을 포함한 DNA 서열.
  19. 제17항에 있어서, 에스 유전자의 뉴클레오타이드 1내지 약 370번에 상당하는 서열 또는 이의 단편을 포함한 DNA 서열.
  20. 제13항에 있어서, FECV 뉴클레오타이드 52-78번[서열동정번호 : 35], 136-159번[서열동정번호 : 37], 214-231번[서열동정번호 :39 ], 370-519번[서열동정번호 :41 ],433-450번[서열동정번호 :43 ], 412-477번[서열동정번호 : 45], 427-450번[서열동정번호 :47 ], 598-615번[서열동정번호 :49 ] 및 1585-1608번[서열동정번호 : 51], FIPV의 사용하는 서열, 컨센서스 서열의 상응하는 서열, 및 이들의 단편으로 이루어진 그룹중에서 선택되고 FIPV 스트레인과 FECV를 구별할 수 있는 DNA 서열.
  21. 갈락토키나제 유전자 또는 이의 N말단 52개 아미노산을 암호화한 DNA 서열에 프레임내로 임의 융합된 고양이 코로나 바이러스 스트레인의 에스 유전자로 부터의 선택된 서열의 포함함, 고양이 감염성 복막염 바이러스의 진단, 치료 또는 예방에 유용한 DNA 서열.
  22. 제3도 서열동정번호 :10, 제4도 서열동정번호 :21 및 23 , 제5도 서열동정번호 :25 및 27 , 제6도 서열동정번호 :29 , 제7도 서열동정번호 : 31, 제8도 서열동정번호 :53 및 제9도 서열동정번호 :33의 아미노산 서열로 이루어진 그룹중에서 선택된 뉴클레오타이드 서열의 전부 또는 일부를 포함한 DNA 서열.
  23. 단백질의 발현을 조절할 수 있는 조절서열과 작동적으로 연결되어, 선택된 융합파트어의 암호화 유전자 서열에 프레임내로 임의 융합된 고양이 코로나바이러스 스트레인의 에스 유전자로부터의 선택된 서열을 암호화한 DNA 서열에 의해 형질전환된 선택된 숙주세포를 배양시켜, 고양이 코로나바이러스에 의해 유발된 질병의 진단, 치료 또는 예방에 유용한 재조합 단백질을 제조하는 방법.
  24. 제23항에 있어서, 융합파트너 단백질이 갈락토키나제, β-갈락토시다제, 유비퀴틴, α교배인자 및 인플루엔자 NS-1 또는 이들의 일부로 이루어진 그룹중에서 선택되는 방법.
  25. 제23항에 있어서, 고양이 코로나바이러스가 고양이 감염성 복막염 바이러스인 방법.
  26. 제23항에 있어서, 고양이 코로나 바이러스가 FECV인 방법.
  27. 제23항에 있어서, 선택된 서열이 FECV로 부터의 아미노산 18-26번[서열동정번호 :36 ], 46-53번[서열동정번호 :38 ], 73-781번[서열동정번호 :40 ], 124-174번, 145-150번[서열동정번호 :42 ], 138-159번[서열동정번호 :44 ], 143-150번[서열동정번호 :46 ], 200-205번[서열동정번호 :48 ], 및 529-536번[서열동정번호 :50 ], FIPV의 상응하는 펩타이드, 컨센서스 서열의 상응하는 펩타이드, 및 이들의 단편으로 이루어진 그룹중에서 선택되고 FIPV 스트레인과 FECV를 구별할 수 있는 펩타이드를 포함한 방법.
  28. 제23항에 있어서, 세포가 세균세포인 방법.
  29. 제23항에 있어서, 세포가 이. 콜라이세포인 방법.
  30. 제23항에 있어서, 융합파트너 단백질 또는 이의 일부에 대한 모노클로날항체를 사용하여 친화성 크로마토그래피에 의해 코로나바이러스 에스융합 단백질을 분리함을 추가로 포함하는 방법.
  31. 숙주세포내에서 발현을 통제할 수 있는 조절서열과 작동적으로 연결되어, 융합파트너 단백질의 선택된 일부의 암호화 DNA 서열에 프레임내로 임의 융합된, 고양이 코로나바이러스 에스 유전자의 선택된 일부를 암호화한 DNA서열을 포함한 제조한 DNA 분자.
  32. 제31항에 있어서, 선택된 융합파트너 단백질이 갈락토키나제, 이의 N-말단 52개 아미노산, β-갈락토시다제, 유비퀴틴, α교배인자 및 인플루엔자 NS-1 또는 이들의 일부 분자.
  33. 제31항에 있어서, FECV 뉴클레오타이드 52-78번[서열동정번호 : 35], 136-159번[서열동정번호 : 37], 214-231번[서열동정번호 :39 ], 370-519번[서열동정번호 :41 ],433-450번[서열동정번호 :43 ], 412-477번[서열동정번호 : 45], 427-450번[서열동정번호 :47 ], 598-615번[서열동정번호 :49 ] 및 1585-1608번[서열동정번호 : 51], FIPV의 사응하는 서열, 컨센서스 서열의 상응하는 서열, 및 이들의 단편으로 이루어진 그룹중에서 선택되고 FIPV 스트레인과 FECV를 구별할 수 있는 DNA 서열인 분자.
  34. 제13항에 있어서, pOTSKF33을 포함한 분자.
  35. 갈락토키나제-고양이 코로나바이러스 에스 융합단백질을 암호화 DNA 서열과 이 단밸질 암호서열의 세균세포내에서의 전사 및 해독을 통제할 수 있는 조절서열을 포함한, 갈락토키나제-고양이 코로나바이러스 에스 융합 단백질 유전자 발현 유니트.
  36. 선택된 융합파트너 단백질 또는 이의 일부를 암호화한 유전자 서열에 프레임내로 임의 융합된, 고양이 코로나바이러스 스트레인의 에스 유전자로부터의 선택된 서열을 포함한 고양이 코로나바이러스 단백질의 면역원량과 임의의 담체를 함유한 백신 조성물.
  37. 제36항에 있어서, 융합파트너가 갈락토키나제의 처음 52개 N-말단 아미노산을 포함하는 백신 조성물.
  38. 제36항에 있어서, ㎖당 적어도 1내지 10개 고양이 코로나바이러스 에스 융합단백질을 함유하는 백신조성물.
  39. 제36항에 있어서, 면역원량의 하나이상의 추가항원을 추가로 포함하는 백신조성물.
  40. 제39항에 있어서, 추가의 항원이 고양이 항원인 백신조성물.
  41. 제39항에 있어서, 고양이 항원이 코로나바이러스인 백신 조성물.
  42. 제37항에 있어서, 온도민감성 FIPV 항원을 추가로 함유하는 백신조성물.
  43. 제37항에 있어서, 선택된 융합파트너 단백질 또는 이의 일부를 암호화한 유전자서열에 프레임내로 임의 융합된 칼락토키나제-고양이 코로나바이러스 에스 단백질 면역원량 0.1㎍ 내지 100㎍/멸균용액㎖의 용량단위를 함유한 백신 조성물.
  44. 면역원량의 제1항의 단백질을 동물에 체내투여하여, 고양이 감염성 복막염 바이러스에 대해 동물을 면역화하는 방법.
  45. 제42항의 백신조성물을 동물에 체내투여하여, 고양이 감염성 복막염 바이러스에 대해 동물을 면역화하는 방법.
  46. 선택된 융합파트너 단백질 또는 이의 일부를 암호화한 유전자서열에 프레임내로 임의 융합된, 고양이 코로나 바이러스 스트레인의 에스 유전자로 부터의 선택된 서열을 포함한 고양이 코로나바이러스 단백질의 유효한 무독성량과 임의의 담체를 함유하는, 고양이 감염성 복막염 바이러스에 감염된 동물을 치료하기 위한 약제 조성물.
  47. 제1항의 단백질 또는 제13항의 DNA 서열을 함유하는, FIPV 노출과 면역화된 동물사이 및 FIPV-감염된 동물에서 일차와 이차 FIPV 노출 사이를 구별하기 위한 진단용 키트.
  48. 검출가능한 라벨과 임의 연결된, 제1항의 단백질, 표Ⅱ의 프라이머서열(서열동정번호 : 1내지 서열동정번호 : 18), 또는 제13항의 DNA 서열을 함유하고 생물학적 샘풀에서 선택된 코로나바이러스를 검출할 수 있는 진단제.
  49. 제1항의 단백질, 표Ⅱ의 프라이머서열(서열동정번호 : 1내지 서열동정번호 : 18), 또는 제13항의 DNA 서열을 사용하여, 한종의 코로나바이러스로 부터 다른종의 코로나바이러스를 구별하는 것을 포함하여 하나의 코로나바이러스를 다른 하나의 코로나바이러스와 구별하는 방법.
  50. FIPV 스트레인과 FECV를 구별할 수 있는 에피트로에 대해 유도될 수 있는 것으로서, 제1항의 펩타이드 또는 단백질에 대한 항체.
  51. 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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