RU2748620C2

RU2748620C2 - Мультивалентные и мультиспецифические гибридные белки, связывающиеся с dr5

Info

Publication number: RU2748620C2
Application number: RU2018102803A
Authority: RU
Inventors: Джон К. ТИММЕР; Кайл С. ДЖОНС; Амир С. РАЗАИ; Абрахим ХУССЕЙН; Кетлин М. ВИЛЛИС; Куинн Деверо; Брендан П. ЭКЕЛЬМАН
Original assignee: Инхибркс, Инк.
Priority date: 2015-07-16
Filing date: 2016-07-18
Publication date: 2021-05-28
Also published as: JP6807606B2; CA2991634A1; SG10201912410TA; KR20180030518A; RU2021111382A; ZA201800238B; EP3322734B1; AU2016291701A1; CN107922491A; RU2018102803A3; EP3798232A1; HK1254433A1; EP3322734A4; AU2016291701B2; MX2018000523A; IL256772A; IL256772B; BR112018000584A2; US11117973B2; US20190309083A1

Abstract

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению полипептида, связывающемуся с рецептором смерти 5 (DR5), и может быть использовано в медицине. Полученный полипептид содержит множество DR5-связывающих доменов (DR5BD) представляющих собой VHH и может быть использован в эффективной терапии рака или для уменьшения числа регуляторных Т-клеток. 12 н. и 29 з.п. ф-лы, 4 пр., 9 ил.

Description

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Настоящая заявка испрашивает преимущество согласно предварительной заявке на патент США № 62/193,309, поданной 16 июля 2015 г., содержание которой полностью включено в настоящий документ путем ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0002] Раскрытие по существу относится к молекулам, которые специфическим образом взаимодействуют с рецептором смерти 5 (DR5), представителем суперсемейства рецепторов TNF (TNFRSF). Более конкретно, раскрытие относится к мультивалентным и мультиспецифическим молекулам, которые связываются по меньшей мере с DR5.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0003] Суперсемейство рецепторов фактора некроза опухоли состоит из нескольких структурно связанных рецепторов клеточной поверхности. Общей особенностью многих из этих рецепторов является активация мультимерными лигандами. Многие представители TNFRSF при надлежащей активации имеют терапевтическую эффективность в отношении многочисленных патологических состояний. Важно правильно агонистически влиять на это семейство рецепторов, что часто требует кластеризации более высокого порядка; обычные двухвалентные антитела не идеальны для этого. Таким образом, существует терапевтическая потребность в более эффективных молекулах-агонистах TNFRSF.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0004] В раскрытии предложены мультивалентные слитные полипептиды, которые связываются по меньшей мере с рецептором смерти 5 (DR5, также известным как рецептор 2 TRAIL (TRAILR2) или представителем 10B суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли (TNFRSF10B)). Эти слитные полипептиды, связывающиеся с DR5, в настоящем документе называются также молекулами, нацеленными на DR5. DR5 является представителем суперсемейства рецепторов TNF (TNFRSF) и рецептором клеточной поверхности суперсемейства рецепторов TNF, который связывается с TNF-зависимым лигандом, индуцирующим апоптоз (TRAIL). TRAIL эволюционировал и стал играть важную роль в развитии млекопитающих и защите хозяев посредством избирательного уничтожения нежелательных, инфицированных и злокачественных клеток в популяциях здоровых клеток. При связывании с представителями семейства TNF DR4 или DR5, TRAIL индуцирует клеточную смерть посредством каспаза-зависимого апоптоза. По-видимому, DR5 является основным рецептором опухолевых клеток, который облегчает наблюдаемую измененную опухолью активность пути TRAIL. DR5 активируется природным лигандом TRAIL, который приводит три рецептора DR5 в непосредственную близость, тем самым активируя внутриклеточную каспазу-8 и инициируя активацию других индуцирующих смерть каспаз, таких как каспазы-9 и каспазы-3. Таким образом, инициирование этого пути клеточной смерти требует кластеризации рецепторов DR5 для эффективной клеточной смерти.

[0005] Было продемонстрировано, что для достижения достаточной агонистической активности обычных антител, нацеленных на представителей суперсемейства рецепторов TNF (TNFRSF), требуется их экзогенное сшивание, о чем свидетельствует необходимость в наличии рецептора Fc-гамма (FcγR) для проявления активности антител в отношении DR4, DR5, GITR и OX40 (Ichikawa et al., 2001 г., Nat. Med. 7, 954-960, Li et al., 2008 г., Drug Dev. Res. 69, 69-82; Pukac et al., 2005 г., Br. J. Cancer 92, 1430-1441; Yanda et al., 2008 г., Ann. Oncol. 19, 1060-1067; Yang et al., 2007 г., Cancer Lett. 251:146-157; Bulliard et al., 2013, JEM 210(9): 1685 г.; Bulliard et al., 2014 г., Immunol and Cell Biol 92: 475-480). Было показано, что помимо сшивания через FcγR, другие экзогенные агенты, включая добавление олигомерных лигандов или компонентов, связывающихся с антителами (например, белок А и вторичные антитела), усиливают кластеризацию антител к TNFRSF и нисходящую сигнализацию. Например, агонистическая активность in vitro антитела к CD137, PF-05082566, требует сшивания через вторичное антитело (Fisher et al., Cancer Immunol Immunother, 2012, 61:1721-1733). Эти данные свидетельствуют о необходимости кластеризации TNFRSF за пределами димера.

[0006] Попытки клинического использования пути TRAIL для лечения рака основывались на рекомбинантной версии природного лиганда TRAIL и антител, специфичных к DR5. В доклинических экспериментах in vitro агонисты антител, нацеленные на DR5, нуждались в сшивающем агенте. Например, добавление лиганда TRAIL DR5 усиливало способность антитела AMG655 к DR5 индуцировать апоптоз (Graves et al., 2014 г., Cancer Cell 26: 177-189). Обычные антитела являются двухвалентными и способны кластеризировать только два рецептора DR5 (по одному на каждое FAB-плечо). Также как и для других представителей TNFRSF, кластеризация двух рецепторов DR5 недостаточна для опосредования сигнализации и активации пути клеточной смерти in vitro. В доклинических мышиных моделях человеческих видов рака неожиданно было обнаружено, что введение in vivo антител, нацеленных на DR5, продемонстрировало значительную активность при самых разных типах опухолей. Позднее было показано, что эта активность зависит от мышиных рецепторов Fc-гамма-R (FcγR). В клинических исследованиях с участием людей не удалось воспроизвести устойчивые ответы, наблюдаемые в этих доклинических мышиных моделях. Предполагается, что отсутствие активности у людей связано с недостаточной сшивкой антител. Это может быть связано с отличиями в сывороточных концентрациях IgG, FcγR и TRAIL у мышей с подавленным иммунитетом по сравнению с онкологическими пациентами-людьми.

[0007] В настоящем раскрытии предложены мультивалентные гибридные белки, нацеленные на DR5, способные оказывать мощное агонистическое воздействие на сигнализацию DR5, опосредуя прямую клеточную смерть. Гибридные белки настоящего раскрытия могут быть двухвалентными, трехвалентными, четырехвалентными, пятивалентными или шестивалентными. Важно, что гибридные белки настоящего раскрытия способны вызывать апоптоз клеток, экспрессирующих DR5, независимо от экзогенных сшивающих агентов.

[0008] В некоторых вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия включают в себя связывающий домен (DR5BD), который связывает DR5. В предпочтительных вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, не связывается с DR4, приманкой R1, приманкой R2, остеопонтином или любым другим представителем TNFRSF. В предпочтительных вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, связывается с DR5 человека и яванского макака. В некоторых вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, блокирует взаимодействие DR5 и его лиганда TRAIL. В других вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, не блокирует взаимодействие DR5 и его лиганда TRAIL. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок настоящего раскрытия включает в себя множество доменов DR5BD, связывающихся с DR5, которые распознают отдельные эпитопы на DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок настоящего раскрытия включает в себя множество доменов DR5BD, связывающихся с DR5, причем некоторые DR5BD блокируют взаимодействие DR5-TRAIL, а другие не блокируют взаимодействие DR5-TRAIL. В предпочтительных вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия, нацеленные на DR5, индуцируют прямую клеточную смерть опухолевых клеток. Гибридные белки настоящего раскрытия, нацеленные на DR5, пригодны для лечения опухолей, как гематологических, так и солидных по своей природе.

[0009] В настоящем раскрытии предложены мультивалентные гибридные белки, связывающиеся с DR5, которые содержат 2 или более DR5-связывающих доменов (DR5BD). В некоторых вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия пригодны для лечения новообразований. В некоторых вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия связываются с DR5, экспрессируемым на опухолевых клетках. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит два или более различных DR5BD, причем каждый из DR5BD связывается с DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит множество копий DR5BD, которые связываются с DR5. Например, в некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере две копии DR5BD, которые связываются с DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере три копии DR5BD, которые связываются с DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере четыре копии DR5BD, которые связываются с DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере пять копий DR5BD, которые связываются с DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере шесть копий DR5BD, которые связываются с DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит шесть или больше копий DR5BD, которые связываются с DR5.

[0010] Мультивалентные гибридные белки настоящего раскрытия, связывающиеся с DR5, способны индуцировать прямую клеточную смерть поврежденных, трансформированных, инфицированных вирусом или неопластических клеток без необходимости в экзогенных сшивающих агентах. Кроме того, гибридные белки настоящего раскрытия, связывающиеся с DR5, не индуцируют прямую клеточную смерть нормальных, нетрансформированных клеток, не инфицированных вирусом или не являющихся неопластическими. Важно, что DR5BD и гибридные белки, сформированные из него согласно настоящему раскрытию, имеют уменьшенное или устраненное распознавание уже существующими антителами, направленными на однодоменные антитела, присутствующие у некоторых субъектов-людей.

[0011] TAS266 представляет собой терапевтическое средство на основе четырехвалентного гуманизированного нанотела, нацеленного на DR5, которое демонстрирует превосходную способность индукции апоптоза по сравнению с двухвалентными антителами без необходимости дополнительного сшивания посредством FcγRs. (Huet, H.A., et al., Multivalent nanobodies targeting death receptor 5 elicit superior tumor cell killing through efficient caspase induction. mAbs Vol. 6, Iss. 6, 2014 г.).

[0012] Ранее было спрогнозировано, что приблизительно половина здоровых субъектов-людей уже имеет существующие антитела, распознающие человеческие однодоменные антитела, известные как человеческие аутоантитела к VH (HAVH), которые нацелены на эпитоп внутри доменов VH человека (Holland et al. J Clin Immunol (2013 г.) 33:1192-1203)). Таким образом, ожидается, что гуманизированные VHH, полученные от верблюдовых, также будут распознаваться аутоантителами HAVH, поскольку целевой эпитоп представляется криптическим и расположен в пределах каркасных областей зародышевой линии человека. Взаимодействие аутоантител HAVH (также называемых в настоящем документе антителами к лекарственному средству (ADA) или антителами к одиночному домену (ASDA)) может привести к усиленной кластеризации и активации. В соответствии с этой гипотезой в клиническом исследовании фазы I введение TAS266 индуцировало повышенные уровни АСТ (AST) и АЛТ (ALT), что свидетельствует о гепатотоксичности. Повышенные уровни ферментов наблюдались у 3 из 4 пациентов, что привело к прекращению исследования TAS266. Было отмечено, что у 3 пациентов с клиническими признаками гепатотоксичности уже имелись существующие антитела ADA, что привело исследователей к выводу, что токсичность вызывает индуцированная ADA гиперкластеризация рецептора DR5. Было отмечено, что у одного пациента без наличия ADA признаков токсичности не было (Isaacs R, Bilic S, Kentsch K, Huet HA, Hofmann M, Rasco D, Kundamal N, Tang Z, Cooksey J, Mahipal A. Unexpected hepatotoxicity in a phase I study of TAS266, a novel tetravalent agonistic Nanobody® targeting the DR5 receptor. Papadopoulos KP1, Cancer Chemother Pharmacol. май 2015 г.;75(5):887-95. doi: 10.1007/s00280-015-2712-0. Epub 27 Febr 2015). Эту идею подтверждали хорошо задокументированные данные о том, что агрегированные формы агонистов DR5 индуцируют гепатотоксичность, тогда как неагрегированные формы не индуцируют гепатотоксичность (J Lemke, S von Karstedt, J Zinngrebe and H Walczak. Getting TRAIL back on track for cancer therapy. Cell Death and Differentiation (2014 г.) 21, 1350-1364).

[0013] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере один DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит две или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит три или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит четыре или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит пять или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит шесть или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91.

[0014] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере один DR5BD, который содержит определяющую комплементарность область 1 (CDR1), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; определяющую комплементарность область 2 (CDR2), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и определяющую комплементарность область 3 (CDR3), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит две или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит три или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит четыре или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит пять или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит шесть или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190.

[0015] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере один DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91, и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит две или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91, и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит три или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91, и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит четыре или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91, и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит пять или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91, и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит шесть или более копий домена DR5BD, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91, и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127.

[0016] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит по меньшей мере один DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190; и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит две или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190; и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит три или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190; и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит четыре или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190; и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит пять или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190; и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит шесть или более копий домена DR5BD, который содержит CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 31, 128, 134, 138, 141, 142, 159, 162, 163, 168, 173, 176, 178, 181 и 188; CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 129, 131-133, 135, 137, 139, 143, 160, 164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 177, 179, 182, 184, 185 и 189; и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 130, 136, 140, 144-158, 161, 165, 170, 175, 180, 183, 186, 187 и 190; и по меньшей мере один полипептид Fc-области иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-5 или 127.

[0017] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 92-124. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 92-118. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 119-124.

[0018] Гибридные белки настоящего раскрытия способны к повышенной кластеризации представителей TNFRSF по сравнению с несшитыми двухвалентными антителами. Представители TNFRSF с повышенной кластеризацией, опосредованной гибридными белками настоящего раскрытия, индуцируют повышенную TNFRSF-зависимую сигнализацию по сравнению с несшитыми двухвалентными антителами. В большинстве вариантов осуществления гибридный белок будет включать в себя более 2 доменов DR5BD, например три, четыре, пять или шесть. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок будет включать в себя DR5BD и связывающий домен, направленный на антиген, не относящийся к представителю семейства TNFRSF. В этих вариантах осуществления взаимодействие с антигеном, не относящимся к представителю семейства TNFRSF, способно обеспечить функцию дополнительной сшивки, а активация TNFRSF достигается только одним или двумя DR5BD. В этих вариантах осуществления гибридный белок является мультиспецифическим, связывающим два отдельных антигена. В других вариантах осуществления гибридный белок включает в себя три или более DR5BD и связывающий домен, направленный на антиген, отличный от DR5, причем взаимодействие с этой дополнительной дозой антигена не увеличивает кластеризацию DR5 сверх того, что достигается только частью, содержащей DR5BD, а скорее обеспечивает преимущество биораспределения, фокусируя агонистическую активность гибридного белка к DR5 на конкретном участке внутри субъекта. Например, четырехвалентный гибридный белок настоящего раскрытия, связывающий DR5, может включать в себя дополнительный антигенсвязывающий домен, который фокусирует активность на конкретном участке, но не повышает агонистическую активность сверх достигаемой четырехвалентным гибридным белком, связывающим DR5, не имеющим этого дополнительного антигенсвязывающего домена.

[0019] В некоторых вариантах осуществления DR5BD настоящего раскрытия получен из антител или фрагментов антител, включая scFv, Fab, однодоменные антитела (sdAb), V_NAR или VHH. В предпочтительных вариантах осуществления DR5BD представляют собой человеческие или гуманизированные sdAb. Фрагменты sdAb могут быть получены из VHH, V_NAR, сконструированных доменов VH или VK. VHH могут быть получены из антител верблюдовых, состоящих только из тяжелых цепей. V_NAR могут быть получены из антител хрящевых рыб, состоящих только из тяжелых цепей. Были осуществлены различные способы получения мономерных sdAb из обычно гетеродимерных доменов VH и VK, включая конструирование интерфейса и выбор конкретных семейств зародышевых линий. В других вариантах осуществления DR5BD получают из каркасных белков, не относящихся к антителам, например, без ограничений, из сконструированных белков с повторами анкирина (дарпинов), авимеров, антикалин/липокалинов, центиринов и финомеров.

[0020] Обычно гибридные белки настоящего раскрытия состоят из по меньшей мере двух или более DR5BD, функционально связанных посредством линкерного полипептида. Использование фрагментов sdAb в качестве специфического DR5BD в гибриде настоящего изобретения обеспечивает преимущество в предотвращении проблемы неправильного спаривания «тяжелая цепь: легкая цепь», характерной для многих подходов с би/мультиспецифическими антителами. Кроме того, в гибридных белках настоящего раскрытия устраняется использование длинных линкеров, необходимых для многих биспецифических антител.

[0021] В некоторых вариантах осуществления все DR5BD гибридного белка распознают тот же самый эпитоп на DR5. Например, гибридные белки настоящего раскрытия могут включать в себя 2, 3, 4, 5 или 6 DR5BD с различной специфичностью распознавания по отношению к различным эпитопам на DR5. В этих вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия содержат множество DR5BD, которые оказывают целевое воздействие на различные области DR5. В некоторых вариантах осуществления DR5BD могут распознавать различные эпитопы на DR5 или распознавать эпитопы на DR5 и отличающемся антигене. Например, в настоящем раскрытии предложены мультиспецифические гибридные белки, включающие в себя DR5BD, которые связываются с DR5 и по меньшей мере со вторым антигеном.

[0022] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок настоящего раскрытия состоит из одного полипептида. В других вариантах осуществления гибридный белок настоящего раскрытия состоит из более чем одного полипептида. Например, в тех случаях, когда домен гетеродимеризации включен в гибридный белок так, чтобы конструировать асимметричный гибридный белок. Например, если в гибридный белок включена Fc-область иммуноглобулина, домен CH3 можно использовать в качестве домена гомодимеризации, или область интерфейса димера CH3 может быть подвергнута мутации, чтобы обеспечить гетеродимеризацию.

[0023] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит DR5BD на противоположных концах. Например, DR5BD расположены как на аминоконцевой (N-концевой) части гибридного белка, так и на карбоксиконцевой (С-концевой) части гибридного белка. В других вариантах осуществления все DR5BD расположены на одном и том же конце гибридного белка. Например, DR5BD расположены либо на аминоконцевой либо на карбоксиконцевой части гибридного белка.

[0024] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит Fc-область иммуноглобулина. В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина имеет изотип IgG, выбранный из группы, состоящей из изотипа IgG1, изотипа IgG2, изотипа IgG3 и подкласса IgG4.

[0025] В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина или его иммунологически активный фрагмент имеет изотип IgG. Например, Fc-область иммуноглобулина гибридного белка имеет изотип IgG1 человека, имеющий аминокислотную последовательность:

PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK (SEQ ID NO: 1)

[0026] В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина или его иммунологически активный фрагмент содержат полипептидную последовательность IgG1 человека, которая по меньшей мере на 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1.

[0027] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG1 человека модифицирована в положении аминокислоты Asn297 (в рамке, нумерация согласно Кабату) для предотвращения гликозилирования гибридного белка, например, Asn297Ala (N297A) или Asn297Asp (N297D). В некоторых вариантах осуществления Fc-область гибридного белка модифицирована в положении аминокислоты Leu235 (в рамке, нумерация согласно Кабату) для изменения взаимодействий Fc-рецептора, например, Leu235Glu (L235E) или Leu235Ala (L235A). В некоторых вариантах осуществления Fc-область гибридного белка модифицирована в положении аминокислоты Leu234 (в рамке, нумерация согласно Кабату) для изменения взаимодействий Fc-рецептора, например, Leu234Ala (L234A). В некоторых вариантах осуществления Fc-область гибридного белка изменена в двух положениях аминокислот 234 и 235, например, Leu234Ala и Leu235Ala (L234A/L235A) или Leu234Val и Leu235Ala (L234V/L235A). В некоторых вариантах осуществления Fc-область гибридного белка изменена на Gly235 для уменьшения связывания с Fc-рецептором. Например, где Gly235 удалена из гибридного белка. В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG1 человека модифицирована в положении аминокислоты Gly236 для улучшения взаимодействия с CD32A, например, Gly236Ala (G236A). В некоторых вариантах осуществления в Fc-области IgG1 человека отсутствует Lys447 (индекс EU в соответствии с Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest).

[0028] В некоторых вариантах осуществления для уменьшения связывания с Fc-рецептором Fc-область гибридного белка изменена в одном или более из следующих положений: Leu 234 (L234), Leu235 (L235), Asp265 (D265), Asp270 (D270), Ser298 (S298), Asn297 (N297), Asn325 (N325) или Ala327 (A327). Например, Leu 234Ala (L234A), Leu235Ala (L235A), Asp265Asn (D265N), Asp270Asn (D270N), Ser298Asn (S298N), Asn297Ala (N297A), Asn325Glu (N325E) или Ala327Ser (A327S). В предпочтительных вариантах осуществления модификации в пределах Fc-области уменьшают связывание с рецепторами Fc-рецептор-гамма, хотя они оказывают минимальное влияние на связывание с неонатальным Fc-рецептором (FcRn).

[0029] В некоторых вариантах осуществления для уменьшения связывания с Fc-рецептором в Fc-области гибридного белка отсутствует аминокислота в одном или более из следующих положений: Glu233 (E233), Leu234 (L234) или Leu235 (L235). В этих вариантах осуществления делеция в Fc этих трех аминокислот уменьшает связывание белка комплемента C1q.

PAPGGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSHEDPE VKFNWYVDGV EVHNAKTKPR EEQYNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI EKTISKAKGQ PREPQVYTLP PSRDELTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL HNHYTQKSLS LSPGK (SEQ ID NO: 2)

[0030] В некоторых вариантах осуществления гибрид или его иммунологически активный фрагмент содержит полипептидную последовательность IgG2 человека, которая по меньшей мере на 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2.

[0031] В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина или иммунологически активный фрагмент гибридного белка имеет изотип IgG2 человека, имеющий аминокислотную последовательность:

PAPPVAGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTF RVVSVLTVVH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPA PIEKTISKTK GQPREPQVYT LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDISVE WESNGQPENN YKTTPPMLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK (SEQ ID NO: 3)

[0032] В некоторых вариантах осуществления гибрид или его иммунологически активный фрагмент содержит полипептидную последовательность IgG2 человека, которая по меньшей мере на 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3.

[0033] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG2 человека модифицирована в положении аминокислоты Asn297 (в рамке) для предотвращения гликозилирования антитела, например, Asn297Ala (N297A) или Asn297Asp (N297D). В некоторых вариантах осуществления в Fc-области IgG2 человека отсутствует Lys447 (индекс EU в соответствии с Kabat et al 1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest).

[0034] В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина или иммунологически активный фрагмент гибридного белка имеет изотип IgG3 человека, имеющий аминокислотную последовательность:

PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVQFKWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST FRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKT KGQPREPQVY TLPPSREEMT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESSGQPEN NYNTTPPMLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNIFSCSVMH EALHNRFTQK SLSLSPGK (SEQ ID NO: 4)

[0035] В некоторых вариантах осуществления антитело или его иммунологически активный фрагмент содержит полипептидную последовательность IgG3 человека, которая по меньшей мере на 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4.

[0036] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG3 человека модифицирована в положении аминокислоты Asn297 (в рамке, нумерация согласно Кабату) для предотвращения гликозилирования антитела, например, Asn297Ala (N297A) или Asn297Asp (N297D). В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG3 человека модифицирована в положении аминокислоты 435 для продления периода полужизни, например, Arg435His (R435H). В некоторых вариантах осуществления в Fc-области IgG3 человека отсутствует Lys447 (индекс EU в соответствии с Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest).

[0037] В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина или иммунологически активный фрагмент гибридного белка имеет изотип IgG4 человека, имеющий аминокислотную последовательность:

PAPEFLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSQE DPEVQFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQFNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKGLP SSIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSQEEMT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSR LTVDKSRWQE GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSLGK (SEQ ID NO: 5)

[0038] В некоторых вариантах осуществления антитело или его иммунологически активный фрагмент содержит полипептидную последовательность IgG4 человека, которая по меньшей мере на 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5.

[0039] В некоторых вариантах осуществления Fc-область иммуноглобулина или иммунологически активный фрагмент гибридного белка имеет изотип IgG4 человека, имеющий аминокислотную последовательность:

PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSQE DPEVQFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQFNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKGLP SSIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSQEEMT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSR LTVDKSRWQE GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSLGK (SEQ ID NO: 127)

[0040] В некоторых вариантах осуществления антитело или его иммунологически активный фрагмент содержит полипептидную последовательность IgG4 человека, которая по меньшей мере на 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 127.

[0041] В других вариантах осуществления Fc-область IgG4 человека модифицирована в положении аминокислоты 235 для изменения взаимодействий Fc-рецептора, например, Leu235Glu (L235E). В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG4 человека модифицирована в положении аминокислоты Asn297 (в рамке, нумерация согласно Кабату) для предотвращения гликозилирования антитела, например, Asn297Ala (N297A) или Asn297Asp (N297D). В некоторых вариантах осуществления в Fc-области IgG4 человека отсутствует Lys447 (индекс EU в соответствии с Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest).

[0042] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG человека модифицирована для усиления связывания с FcRn. Примеры мутаций Fc, которые усиливают связывание с FcRn, представляют собой Met252Tyr, Ser254Thr, Thr256Glu (M252Y, S254T, T256E соответственно) (нумерация согласно Кабату, Dall'Acqua et al., 2006, J. Biol Chem Vol. 281(33) 23514-23524), Met428Leu и Asn434Ser (M428L, N434S) (Zalevsky et al., 2010, Nature Biotech, Vol. 28(2) 157-159) или Met252Ile, Thr256Asp, Met428Leu (M252I, T256D, M428L соответственно) (индекс EU в соответствии с Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest).

[0043] В некоторых вариантах осуществления, в которых гибридный белок по раскрытию включает в себя Fc-полипептид, этот Fc-полипептид подвергнут мутации или модификации. В этих вариантах осуществления мутированный или модифицированный Fc-полипептид включает в себя следующие мутации: Met252Tyr и Met428Leu или Met252Tyr и Met428Val (M252Y, M428L или M252Y, M428V) в соответствии с системой нумерации согласно Кабату.

[0044] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG человека модифицирована для изменения антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксичности (АЗКЦ) и/или комплементзависимой цитотоксичности (КЗЦ), например, аминокислотные модификации, описанные в публикациях Natsume et al., 2008, Cancer Res, 68(10): 3863-72; Idusogie et al., 2001, J Immunol, 166(4): 2571-5; Moore et al., 2010, mAbs, 2(2): 181-189; Lazar et al., 2006, PNAS, 103(11): 4005-4010, Shields et al., 2001, JBC, 276(9): 6591-6604; Stavenhagen et al., 2007, Cancer Res, 67(18): 8882-8890; Stavenhagen et al., 2008 г. Advan. Enzyme Regul., 48: 152-164; Alegre et al., 1992 г. J Immunol, 148: 3461-3468; обзор представлен в публикации Kaneko and Niwa, 2011, Biodrugs, 25(1):1-11. Примеры мутаций, усиливающих АЗКЦ, включают модификацию на Ser239 и Ile332, например Ser239Asp и Ile332Glu (S239D, I332E). Примеры мутаций, усиливающих КЗЦ, включают модификации на Lys326 и Glu333. В некоторых вариантах осуществления Fc-область модифицирована на одном или обоих из этих положений, например Lys326Ala и/или Glu333Ala (K326A и E333A) в соответствии с системой нумерации согласно Кабату.

[0045] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG человека модифицирована для индуцирования гетеродимеризации. Например, она имеет аминокислотную модификацию в пределах домена CH3 на Thr366, которая при замене более объемной аминокислотой, например, Try (T366W), способна преимущественно спариваться со вторым доменом CH3, имеющим аминокислотные модификации с заменой на менее объемные аминокислоты в положениях Thr366, Leu368, и Tyr407, например, Ser, Ala и Val соответственно (T366S/L368A/Y407V). Гетеродимеризацию посредством модификаций CH3 можно дополнительно стабилизировать путем введения дисульфидной связи, например, путем замены Ser354 на Cys (S354C) и Y349 на Cys (Y349C) на противоположных доменах CH3 (обзор приведен в публикации Carter, 2001, Journal of Immunological Methods, 248: 7-15).

[0046] В некоторых вариантах осуществления Fc-область IgG человека модифицирована для предотвращения димеризации. В этих вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия являются мономерными. Например модификация на остатке Thr366 на заряженный остаток, например Thr366Lys, Thr366Arg, Thr366Asp или Thr366Glu (T366K, T366R, T366D или T366E соответственно), предотвращает димеризацию CH3-CH3.

[0047] В некоторых вариантах осуществления для уменьшения связывания с Fc-рецептором Fc-область гибридного белка изменена в одном или более из следующих положений: Leu 234 (L234), Leu235 (L235), Asp265 (D265), Asp270 (D270), Ser298 (S298), Asn297 (N297), Asn325 (N325) или Ala327 (A327). Например, Leu 234Ala (L234A), Leu235Ala (L235A), Asp265Asn (D265N), Asp270Asn (D270N), Ser298Asn (S298N), Asn297Ala (N297A), Asn325Glu (N325E) или Ala327Ser (A327S). В предпочтительных вариантах осуществления модификации в пределах Fc-области уменьшают связывание с рецепторами Fc-рецептор-гамма, хотя они оказывают минимальное влияние на связывание с неонатальным Fc-рецептором (FcRn).

[0048] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит полипептид, полученный из шарнирной области иммуноглобулина. Шарнирная область может быть выбрана из любого подкласса IgG человека. Например, гибридный белок может содержать модифицированный шарнир IgG1, имеющий последовательность EPKSSDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 6), где Cys220, который образует дисульфид с C-концевым цистеином легкой цепи, мутирован на серин, например Cys220Ser (C220S). В других вариантах осуществления гибридный белок содержит усеченный шарнир, имеющий последовательность DKTHTCPPC (SEQ ID NO: 7).

[0049] В некоторых вариантах осуществления гибридный белок имеет модифицированный шарнир из IgG4, который модифицирован для предотвращения или уменьшения обмена цепей, например, Ser228Pro (S228P), имеющий последовательность ESKYGPPCPPC (SEQ ID NO: 8). В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит линкерные полипептиды. В других вариантах осуществления гибридный белок содержит линкерные и шарнирные полипептиды.

[0050] В некоторых вариантах осуществления в гибридных белках настоящего раскрытия отсутствует фукоза или снижен уровень фукозы, прикрепленной к N-связанной гликановой цепи на N297. Существует множество способов предотвращения фукозилирования, включая, без ограничений, продукцию в клеточной линии, дефицитной по FUT8; добавление в среду для культивирования клеток млекопитающих ингибиторов, например кастаноспермина; и метаболическая инженерия производственной клеточной линии.

[0051] В некоторых вариантах осуществления DR5BD сконструирован для устранения распознавания уже существующими антителами, обнаруженными у людей. В некоторых вариантах осуществления однодоменные антитела настоящего раскрытия модифицированы посредством мутации в положении Leu11, например Leu11Glu (L11E) или Leu11Lys (L11K). В других вариантах осуществления однодоменные антитела настоящего раскрытия модифицированы посредством изменений в карбоксиконцевой области, например концевая последовательность состоит из GQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 9) или GQGTLVTVEPGG (SEQ ID NO: 10) или их модификаций. В некоторых вариантах осуществления однодоменные антитела настоящего раскрытия модифицированы посредством мутации в положении 11 и посредством изменений в карбоксиконцевой области.

[0052] В некоторых вариантах осуществления DR5BD гибридных белков настоящего раскрытия функционально связаны посредством аминокислотных линкеров. В некоторых вариантах осуществления эти линкеры преимущественно состоят из аминокислот глицина и серина и обозначены в настоящем описании как GS-линкеры. GS-линкеры гибридных белков настоящего раскрытия могут иметь разную длину, например длину из 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 аминокислот.

[0053] В некоторых вариантах осуществления GS-линкер содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из GGSGGS, т.е. (GGS)₂ (SEQ ID NO: 11); GGSGGSGGS, т.е. (GGS)₃ (SEQ ID NO: 12); GGSGGSGGSGGS, т.е. (GGS)₄ (SEQ ID NO: 13); и GGSGGSGGSGGSGGS, т. е. (GGS)₅ (SEQ ID NO: 14).

[0054] В некоторых вариантах осуществления мультивалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, является четырехвалентным. В некоторых вариантах осуществления четырехвалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, имеет следующую структуру: VHH-линкер-VHH-линкер-шарнир-Fc, где VHH представляет собой гуманизированную или полностью человеческую последовательность VHH, которая связывается по меньшей мере с DR5.

[0055] В некоторых вариантах осуществления мультивалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, является четырехвалентным. В некоторых вариантах осуществления четырехвалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, имеет следующую структуру: DR5BD-линкер-DR5BD-линкер-шарнир-Fc, где DR5BD представляет собой гуманизированную или полностью человеческую последовательность VHH.

[0056] В некоторых вариантах осуществления мультивалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, является шестивалентным. В некоторых вариантах осуществления шестивалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, имеет следующую структуру: VHH-линкер-VHH-линкер-VHH-линкер-шарнир-Fc, где VHH представляет собой гуманизированную или полностью человеческую последовательность VHH, которая связывается по меньшей мере с DR5.

[0057] В некоторых вариантах осуществления мультивалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, является шестивалентным. В некоторых вариантах осуществления шестивалентный гибридный белок, связывающийся с TNFRSF, имеет следующую структуру: DR5BD-линкер-DR5BD-линкер-DR5BD-линкер-шарнир-Fc, где DR5BD представляет собой гуманизированную или полностью человеческую последовательность VHH.

[0058] В некоторых вариантах осуществления мультивалентные гибридные белки настоящего раскрытия, нацеленные на DR5, функционально связаны посредством аминокислотных линкеров. В некоторых вариантах осуществления эти линкеры преимущественно состоят из аминокислот глицина и серина и обозначены в настоящем описании как GS-линкеры. GS-линкеры гибридных белков настоящего раскрытия могут иметь разную длину, например длину из 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 аминокислот.

[0059] В некоторых вариантах осуществления GS-линкер содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из GGSGGS, т.е. (GGS)₂ (SEQ ID NO: 11); GGSGGSGGS, т.е. (GGS)₃ (SEQ ID NO: 12); GGSGGSGGSGGS, т.е. (GGS)₄ (SEQ ID NO: 13); и GGSGGSGGSGGSGGS, т.е. (GGS)₅ (SEQ ID NO: 14).

[0060] В некоторых вариантах осуществления мультивалентный гибридный белок, связывающийся с DR5, является четырехвалентным. В некоторых вариантах осуществления четырехвалентный гибридный белок, связывающийся с DR5, имеет следующую структуру: VHH-линкер-VHH-линкер-шарнир-Fc, где VHH представляет собой гуманизированную или полностью человеческую последовательность VHH. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения последовательность VHH выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления четырехвалентный гибридный белок, связывающийся с DR5, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 92-118.

[0061] В некоторых вариантах осуществления мультивалентный гибридный белок, связывающийся с DR5, является шестивалентным. В некоторых вариантах осуществления шестивалентный гибридный белок, связывающийся с DR5, имеет следующую структуру: VHH-линкер-VHH-линкер-VHH-линкер-шарнир-Fc, где VHH представляет собой гуманизированную или полностью человеческую последовательность VHH. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения последовательность VHH выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-91. В некоторых вариантах осуществления шестивалентный гибридный белок, связывающийся с DR5, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 119-124.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0062] На фиг. 1 представлена схема иллюстративных мультивалентных и мультиспецифических гибридных белков настоящего раскрытия.

[0063] На фиг. 2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F и 2G представлена серия графиков, демонстрирующих связывание репрезентативных VHH DR5 или их гуманизированных вариантов либо с человеческим DR5 (фиг. 2A, 2B, 2E, 2F и 2G) либо с DR5 яванского макака (фиг. 2C и 2D). На фиг. 2A, 2B, 2E, 2F и 2G продемонстрировано связывание некоторых VHH и гуманизированных VHH с DR5 человека по результатам оценки с помощью проточной цитометрии в клетках ЯКХ (CHO), экспрессирующих DR5. На фиг. 2C и 2D продемонстрировано связывание VHH и гуманизированных VHH с DR5 яванского макака по результатам оценки с помощью анализа ИФА с использованием рекомбинантного DR5 яванского макака. Показанные на фиг. 2A, B, C, D и E использованные гибридные белки, нацеленные на DR5, были двухвалентными, а используемыми форматами были VHH-Fc или гуманизированный (hz) hzVHH-Fc. На фиг. 2F и 2G показаны использованные гуманизированные четырехвалентные (VHH-линкер-VHH-Fc) Fc-гибридные белки, нацеленные на DR5.

[0064] На фиг. 3A, 3B и 3C представлена серия графиков, демонстрирующих способность гибридных белков настоящего раскрытия, нацеленных на DR5, индуцировать прямой апоптоз. Во всех анализах использовали клетки Colo205, и VHH, нацеленный на DR5, представлял собой H10 в формате: (A) H10-Fc (двухвалентный), (B) H10-линкер-H10-Fc (четырехвалентный) или (C) H10-линкер-H10-линкер-H10-Fc (шестивалентный). На фиг. 3A представлен график, демонстрирующий повышенную способность двухвалентного гибридного белка, нацеленного на DR5, индуцировать апоптоз при использовании сшивающего агента. На фиг. 3B представлен график, демонстрирующий повышенную способность четырехвалентного гибридного белка, нацеленного на DR5, индуцировать апоптоз по сравнению с двухвалентным гибридным белком, нацеленным на DR5. На фиг. 3C представлен график, демонстрирующий повышенную способность четырехвалентного и, более того, шестивалентного гибридного белка, нацеленного на DR5, индуцировать апоптоз по сравнению с двухвалентным гибридным белком, нацеленным на DR5, и по сравнению с TRAIL.

[0065] На фиг. 4A представлен график, демонстрирующий способность шестивалентного гибридного белка, нацеленного на DR5, индуцировать апоптоз резистентной клеточной линии Panc-1. Для сравнения показаны клетки Colo205. Показан VHH, нацеленный на DR5 (H10).

[0066] На фиг. 4B представлен график, демонстрирующий повышенную чувствительность клеток Panc-1 к четырехвалентному гибридному белку, нацеленному на DR5, при добавлении доксорубицина. Показанный VHH, нацеленный на DR5, представляет собой гуманизированный F03 (hzF03), в формате hzF03-линкер-hzF03-Fc.

[0067] На фиг. 5 представлен график, демонстрирующий противоопухолевую активность четырехвалентных гибридных белков настоящего раскрытия, нацеленных на DR5, в мышиной модели ксенотрансплантата опухоли с использованием клеток Colo-205. Гибридные белки вводили в дозе 1 мг/кг еженедельно в течение 4 недель посредством внутривенного (в/в) введения. Введение начинали, когда размер опухоли достигал приблизительно 300 мм³.

[0068] На фиг. 6A, 6B, 6C, 6D, 6E, 6F, 6G, 6H, 6I и 6J представлены серии графиков, демонстрирующих способность некоторых четырехвалентных гибридных белков настоящего раскрытия, нацеленных на DR5, индуцировать прямую клеточную смерть по сравнению с TAS266 (четырехвалентное нанотело к DR5, описанное в публикации PCT № WO 2011/098520A1) в различных раковых клеточных линиях (фиг. 6A и 6B) Colo-205, Panc-1 (фиг. 6C и 6J), JL-1 (фиг. 6D), HCT-116 (фиг. 6E), NCI-H28 (фиг. 6F), NCI-H460 (фиг. 6G), HT-29 (фиг. 6H) и MSTO-211H (фиг. 6I). На фиг. 6A-6D VHH, нацеленный на DR5, представляет собой гуманизированный вариант 1F5 (hz1F5) в формате hzVHH-линкер-hzVHH-Fc. На фиг. 6E-6J VHH, нацеленный на DR5, представляет собой гуманизированный вариант либо 1F2 (hz1F2), либо 2C6 (hz2C6) в формате вариантов hzVHH-линкер-hzVHH-Fc.

[0069] На фиг. 7A представлен график, демонстрирующий различия в распознавании аутоантителом TAS266 (четырехвалентное нанотело к DR5, описанное в публикации PCT № WO 2011/098520A1) и гуманизированного четырехвалентного 1F5 (Tet-hz1F5v5) настоящего раскрытия. На этом графике представлены результаты, полученные в анализах сыворотки от 45 доноров-людей. Аутоантитела, содержащие легкую цепь каппа или лямбда, были обнаружены в отдельных анализах с использованием соответствующих вторичных антител против каппа-цепи человеческого Ig или против лямбда-цепи человеческого Ig, конъюгированных с HRP. Данные нормализуются к положительному контролю IgG-антитела, имеющего соответственно легкую цепь лямбда или каппа. TAS266 демонстрирует значительное распознавание аутоантителами, в то время как распознавание аутоантителами Tet-hz1F5v5 уменьшено до такого же распознавания, как у контрольного фонового IgG.

[0070] На фиг. 7B представлен график, демонстрирующий, что объединенная сыворотка от множества доноров-людей (IVIG, Gamunex®-C, Grifols) содержит некоторые IgG-антитела, которые распознают однодоменные антитела (sdAb), включая TAS266.

[0071] На фиг. 7C представлен график, демонстрирующий, что распознавание TAS266 аутоантителами в пределах IVIG индуцирует апоптоз первичных гепатоцитов человека.

[0072] На фиг. 8A и 8B представлены серии графиков, демонстрирующих зависимую от распознавания аутоантителом гепатотоксичность TAS266, но не Tet-hz1F5v5, на клетках HepRG™, окончательно дифференцированных печеночных клетках, полученных из линии печеночных клеток-предшественников. На фиг. 8A апоптоз отслеживали с использованием каспаза-3/7-специфичного флуорогенного субстрата с помощью микроскопа для визуализации живых клеток IncuCyte Zoom (Essen Biosciences); показаны данные были получены через 48 часов. На фиг. 8B, апоптоз отслеживали через 48 часов с использованием анализа CellTiter Glo (Promega). В качестве аутоантитела, направленного на sdAb, содержащегося в пуле антител, использовали IVIG (Gamunex®-C, Grifols).

[0073] На фиг. 9A, 9B, 9C и 9D представлена серия графиков, демонстрирующих зависимую от распознавания аутоантителом гепатотоксичность TAS266, но не четырехвалентных гибридных белков настоящего раскрытия, нацеленных на DR5. В качестве заменителя человеческих гепатоцитов использовали клетки HepRG™. В качестве аутоантитела, направленного на sdAb, содержащегося в пуле антител, использовали IVIG (Gamunex®-C, Grifols). На фиг. 9A и 9C представлены независимые 48-часовые анализы и показано, что TAS266 индуцирует гепатотоксичность при сшивании аутоантителами. Умеренная гепатотоксичность наблюдалась при добавлении сшивающего вторичного антитела к Fc человека к четырехвалентным гибридным белкам настоящего раскрытия, нацеленным на DR5, hz1F5, hz1F2 или hz2C6 в формате hzVHH-линкер-hzVHH-Fc. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью анализа CellTiter Glo (Promega). На фиг. 9D показано снижение зависимой от распознавания аутоантителом гепатотоксичности TAS266 при его модификации в положениях аминокислот Leu11 и C-концевой области каждого из четырех sdAb DR5 (FIX-TAS266, SEQ ID NO: 126). Эти данные демонстрируют, что гепатоцитотоксичность FIX-266 в присутствии IVIG снижается до гепатоцитотоксичности TAS266 при отсутствии IVIG. Жизнеспособность клеток HepRG оценивали с помощью анализа CellTiter Glo (Promega). На фиг. 9B показаны кинетики зависимой от распознавания аутоантителом гепатотоксичности TAS266 и зависимой от сшивания вторичным антителом гепатотоксичности Tet-hz1F5v6. Апоптоз отслеживали на протяжении 46-часового периода с использованием каспаза-3/7-специфичного флуорогенного субстрата с помощью микроскопа для визуализации живых клеток IncuCyte Zoom (Essen Biosciences). Четырехвалентные гибридные белки настоящего раскрытия, нацеленные на DR5, не индуцируют гепатотоксичность в присутствии или при отсутствии антител, содержащих аутоантитело, направленное на sdAb.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[0074] В раскрытии предложены молекулы, которые специфическим образом взаимодействуют с рецептором смерти 5 (DR5), представителем суперсемейства рецепторов TNF (TNFRSF). Более конкретно, это раскрытие относится к мультивалентным молекулам, которые связывают по меньшей мере DR5. Эти мультивалентные гибридные белки, связывающиеся с TNFRSF, содержат два или более доменов, связывающихся с TNFRSF (DR5BD), где по меньшей мере один DR5BD связывается с DR5. Эти молекулы в настоящем документе называются молекулами, нацеленными на DR5.

[0075] Эти нацеленные на DR5 молекулы включают в себя по меньшей мере одну копию последовательности однодоменного антитела (sdAb), которое специфически связывается с DR5. В некоторых вариантах осуществления нацеленные на DR5 молекулы включают в себя две или более копий sdAb, которое специфически связывается с DR5, например, три или более, четыре или более, пять или более или шесть или более копий sdAb, которое специфически связывается с DR5.

[0076] Однодоменное антитело (sdAb) представляет собой фрагмент антитела, состоящий из одного мономерного вариабельного домена антитела, который способен избирательно связываться со специфическим антигеном. При молекулярной массе, составляющей всего лишь 12-15 кДа, однодоменные антитела являются намного меньшими по сравнению с обычными антителами (150-160 кДа), которые состоят из двух тяжелых белковых цепей и двух легких цепей, и даже меньшими, чем Fab-фрагменты (~50 кДа, одна легкая цепь и половина тяжелой цепи) и одноцепочечные вариабельные фрагменты (~25 кДа, два вариабельных домена, один из легкой и один из тяжелой цепи).

[0077] Однодоменные антитела представляют собой антитела, в которых определяющие комплементарность области, являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают, без ограничений, антитела, состоящие только из тяжелых цепей, антитела, по природе лишенные легких цепей, однодоменные антитела, полученные из обычных 4-цепочечных антител, сконструированных антител и однодоменных каркасов, отличных от тех, которые получены из антител. Однодоменные антитела могут быть получены из любых видов, включая, без ограничений, мышь, человека, верблюда, ламу, козу, кролика и/или быка. В некоторых вариантах осуществления однодоменное антитело в контексте настоящего документа представляет собой однодоменное антитело природного происхождения, известное как антитело, состоящее только из тяжелых цепей, лишенное легких цепей. Для ясности этот вариабельный домен, полученный из антитела, состоящего только из тяжелых цепей, по природе лишенного легких цепей, в настоящем документе называется VHH, чтобы отличить его от обычного VH из четырехцепочечных иммуноглобулинов. Такая молекула VHH может быть получена из антител, выращенных в видах семейства Camelidae, таких как, например, верблюд, лама, дромадер, альпака и гуанако. Антитела, состоящие только из тяжелых цепей, по природе лишенные легких цепей, могут продуцировать и другие виды, кроме Camelidae; такие VHH входят в объем раскрытия.

[0078] Однодоменное антитело может быть получено иммунизацией дромадеров, верблюдов, лам, альпак или акул желаемым антигеном и последующим выделением мРНК, кодирующей антитела тяжелой цепи. Посредством обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции получают генную библиотеку однодоменных антител, содержащих несколько миллионов клонов. Методы скрининга, такие как фаговый дисплей и рибосомный дисплей, помогают идентифицировать клоны, связывающие антиген. (См., например, Arbabi Ghahroudi, M.; Desmyter, A.; et al. (1997 г.). Selection and identification of single domain antibody fragments from camel heavy-chain antibodies. FEBS Letters 414 (3): 521-526.)

[0079] В другом способе используют библиотеки генов от животных, которые ранее не были иммунизированы. Такие интактные библиотеки обычно содержат только антитела с низкой аффинностью к желаемому антигену, что делает необходимым применение аффинного созревания с использованием в качестве дополнительной стадии случайного мутагенеза. (Saerens, D.; et al. (2008 г.). Single-domain antibodies as building blocks for novel therapeutics. Current Opinion in Pharmacology 8 (5): 600-608.)

[0080] Когда идентифицированы наиболее сильные клоны, их последовательность ДНК оптимизируют, например, для улучшения их устойчивости к ферментам. Другой целью является гуманизация для предотвращения иммунологических реакций организма человека против антитела. Гуманизация не представляет проблем из-за гомологии между VHH верблюдовых и VH-фрагментами человека. (См., например, Saerens, et al., (2008 г.). Single-domain antibodies as building blocks for novel therapeutics. Current Opinion in Pharmacology 8 (5): 600-608). Конечным этапом является трансляция оптимизированного однодоменного антитела в E. coli, Saccharomyces cerevisiae или других подходящих организмах.

[0081] Фрагменты однодоменного антитела также получают из обычных антител. В некоторых вариантах осуществления однодоменные антитела могут быть получены из обычного мышиного или человеческого IgG с четырьмя цепями. (Holt, L. J.; et al. (2003 г.). Domain antibodies: proteins for therapy. Trends in Biotechnology 21 (11): 484-490). Способ является аналогичным, включая библиотеки генов от иммунизированных или интактных доноров и методы отображения для идентификации наиболее специфических антигенов. Проблема с этим подходом заключается в том, что область связывания общего IgG состоит из двух доменов (VH и VL), которые имеют тенденцию к димеризации или агрегации из-за их липофильности. Мономеризацию обычно осуществляют путем замены липофильной аминокислоты гидрофильной аминокислотой, но это часто приводит к потере аффинности к антигену. (См., например, Borrebaeck, C. A. K.; Ohlin, M. (2002 г.). Antibody evolution beyond Nature. Nature Biotechnology 20 (12): 1189-90). Если аффинность можно сохранить, однодоменные антитела могут быть также получены в E.coli, S. cerevisiae или в других организмах.

[0082] Одновалентные однодоменные антитела могут быть сделаны мультивалентными посредством нескольких способов. Например, кДНК, кодирующая первое sdAb, может быть генетически слита с линкерной последовательностью кодирующей ДНК, за которой следует вторая кДНК, кодирующая sdAb и т.д. Альтернативно, кДНК, кодирующая sdAb, может быть слита с кДНК, кодирующей второй белок или его фрагмент, который мультимеризуется по природе или сконструирован для мультимеризации. Например, слияние sdAb с Fc-областью IgG приведет к димеризации sdAb. В том случае, когда конструкт, кодирующий тандем sdAb, связан с конструктом, кодирующим Fc, полученный в результате гибридный белок после экспрессирования будет четырехвалентным. В том случае, когда конструкт, кодирующий три sdAb, связан с конструктом, кодирующим Fc, полученный в результате гибридный белок после экспрессирования будет шестивалентным. В этом раскрытии предусмотрено использование дополнительных доменов мультимеризации, включая домены гомотримеризации и гетеротримеризации коллагена, домены лейциновой молнии, домены тетрамеризации р53, гетеродимерные пептидные последовательности c-Jun:Fos, белок олигомерной матрицы хряща (COMP48), трехмерный адипонектин, трехмерный поверхностно-активный белок D и/или тетрамер синаптической ацетилхолинэстеразы.

Нацеливание на рецептор смерти 5 (TRIAL-R2, TNFRSF10B)

[0083] TNF-зависимый лиганд, индуцирующий апоптоз (TRAIL), эволюционировал и стал играть важную роль в развитии млекопитающих и защите хозяев посредством избирательного уничтожения нежелательных, инфицированных и злокачественных клеток в популяциях здоровых клеток. При связывании с представителями семейства TNF DR4 или DR5, TRAIL индуцирует клеточную смерть посредством каспаза-зависимого апоптоза. По-видимому, DR5 (TNFRSF10B) является основным рецептором опухолевых клеток, который облегчает наблюдаемую измененную опухолью активность пути TRAIL. DR5 активируется природным лигандом TRAIL, который приводит три рецептора DR5 в непосредственную близость, тем самым активируя внутриклеточную каспазу-8 и инициируя активацию других индуцирующих смерть каспаз, таких как каспазы-9 и каспазы-3. Таким образом, инициирование этого пути клеточной смерти требует кластеризации рецепторов DR5 для эффективной клеточной смерти.

[0084] Попытки клинического использования пути TRAIL для лечения рака основывались на рекомбинантной версии природного лиганда TRAIL и антител, специфичных к DR5. В доклинических экспериментах in vitro агонисты антител, нацеленные на DR5, нуждались в сшивающем агенте. Это было связано с тем, что обычные антитела приводили к кластеризации только двух рецепторов DR5 (по одному на каждую тяжелую и легкую цепь). Двух рецепторов DR5 недостаточно для активации пути клеточной смерти, таким образом, появляется потребность в сшивающем агенте. В доклинических мышиных моделях человеческих видов рака неожиданно было обнаружено, что введение in vivo антител, нацеленных на DR5, продемонстрировало значительную активность при самых разных типах опухолей. Позднее было показано, что эта активность зависит от мышиных рецепторов Fc-гамма-R (FcγR). В клинических исследованиях с участием людей не удалось воспроизвести устойчивые ответы, наблюдаемые в этих доклинических мышиных моделях. Предполагается, что отсутствие активности у людей связано с недостаточной сшивкой антител. Это может быть связано с различиями в сывороточных концентрациях IgG, Fc-гамма-R (FcγR) и/или TRAIL между мышами с подавленным иммунитетом и онкологическими пациентами-людьми.

[0085] В настоящем раскрытии предложены мультивалентные гибридные белки, нацеленные на DR5, способные оказывать мощное агонистическое воздействие на сигнализацию DR5, опосредуя прямую клеточную смерть. Гибридные белки настоящего раскрытия могут быть трехвалентными, четырехвалентными, пятивалентными или шестивалентными. Важно, что гибридные белки настоящего раскрытия способны вызывать апоптоз клеток, экспрессирующих DR5, независимо от экзогенных сшивающих агентов.

[0086] В некоторых вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия включают в себя домен DR5BD, который связывает DR5. В предпочтительных вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, не связывается с DR4, приманкой R1, приманкой R2, остеопонтином или любым другим представителем TNFRSF. В предпочтительных вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, связывается с DR5 человека и яванского макака. В некоторых вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, блокирует взаимодействие DR5 и его лиганда TRAIL. В других вариантах осуществления домен DR5BD, связывающийся с DR5, не блокирует взаимодействие DR5 и его лиганда TRAIL. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок настоящего раскрытия включает в себя множество доменов DR5BD, связывающихся с DR5, которые распознают отдельные эпитопы на DR5. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок настоящего раскрытия включает в себя множество доменов DR5BD, связывающихся с DR5, причем некоторые DR5BD блокируют взаимодействие DR5-TRAIL, а другие не блокируют взаимодействие DR5-TRAIL. В предпочтительных вариантах осуществления гибридные белки настоящего раскрытия, нацеленные на DR5, индуцируют прямую клеточную смерть опухолевых клеток. Гибридные белки настоящего раскрытия, нацеленные на DR5, пригодны для лечения опухолей, как гематологических, так и солидных по своей природе.

Примеры sdAb, связывающихся с DR5

[0087] VHH DR5 (получен из ламы) и гуманизированные последовательности показаны ниже, а последовательности CDR показаны ниже каждой последовательности. В некоторых вариантах осуществления sdAb, связывающееся с DR5, слито с Fc-областью IgG, и в этих вариантах осуществления гибридный белок является двухвалентным и имеет два DR5-связывающих домена на молекулу. В некоторых вариантах осуществления два sdAb (2 x), связывающихся с DR5, слиты с Fc-областью IgG, и в этих вариантах осуществления гибридный белок является четырехвалентным и имеет четыре DR5-связывающих домена на молекулу. В некоторых вариантах осуществления три sdAb (3 x), связывающихся с DR5, слиты с Fc-областью IgG, и в этих вариантах осуществления гибридный белок является шестивалентным и имеет шесть DR5-связывающих домена на молекулу.

1F5

QVQLVQSGGGLVQAGDSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGEEREFLAVIYWSGGTVFYADSVKGRFTISRDAAKNMVYLQMNSLKSDDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGRGTQVTVSS (SEQ ID NO: 15)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: VIYWSGGTVF (SEQ ID NO: 129)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v1

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 16)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v1opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 17)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v1opt1

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 18)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v2

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTQVTVKP (SEQ ID NO: 19)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v1DS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVCAIYWSGGTVYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 20)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v3

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVFYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 85)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVF (SEQ ID NO: 132)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v4

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVFYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 86)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: VIYWSGGTVF (SEQ ID NO: 129)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v5

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 87)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 88)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: VIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 133)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v7

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 89)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: AIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 131)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

hz1F5v8

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 90)

CDR1: SGLTFPNYGM (SEQ ID NO: 128)

CDR2: VIYWSGGTVY (SEQ ID NO: 133)

CDR3: AVTIRGAATQTWKYDYW (SEQ ID NO: 130)

2C6

QVQLVQSGGGLVQAGGSLRLTCTASGRTVSNYAMGWFRQTPGKDREFVAALNWSGDTTSYADSVRGRFTISRDNTRNTVYLQMDSLKREDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 21)

CDR1: SGRTVSNYAM (SEQ ID NO: 134)

CDR2: ALNWGGDTTS (SEQ ID NO: 135)

CDR3: AAAQSFRRGGAPYGDNYW (SEQ ID NO: 136)

hz2C6v1

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSALNWGGDTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 22)

CDR1: SGRTVSNYAM (SEQ ID NO: 134)

CDR2: ALNWGGDTTY (SEQ ID NO: 137)

CDR3: AAAQSFRRGGAPYGDNYW (SEQ ID NO: 136)

hz2C6v1opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSALNWGGDTTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 23)

CDR1: SGRTVSNYAM (SEQ ID NO: 134)

CDR2: ALNWGGDTTY (SEQ ID NO: 137)

CDR3: AAAQSFRRGGAPYGDNYW (SEQ ID NO: 136)

hzC06v2

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMGWFRQAPGKDREFVSALNWGGDTTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 91)

CDR1: SGRTVSNYAM (SEQ ID NO: 134)

CDR2: ALNWGGDTTY (SEQ ID NO: 137)

CDR3: AAAQSFRRGGAPYGDNYW (SEQ ID NO: 136)

C12

EVQLVQSGGGLVQAGDSLRLSCAASGRALTGYHMAWFRQAPGKEREFVTYGIWDRAGAAYADSVKGRFTMSRDNAKNTVYLQMNNLKTEDTAVYYCAASMAVRTYYSPRSYDSWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 24)

CDR1: SGRALTGYHMAW (SEQ ID NO: 138)

CDR2: YGIWDRAGAA (SEQ ID NO: 139)

CDR3: ASMAVRTYYSPRSYDSW (SEQ ID NO: 140)

hzC12v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRALTGYHMSWFRQAPGKGREFVSYGIWDRAGAAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAASMAVRTYYSPRSYDSWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 25)

CDR1: SGRALTGYHMSW (SEQ ID NO: 141)

CDR2: YGIWDRAGAA (SEQ ID NO: 139)

CDR3: ASMAVRTYYSPRSYDSW (SEQ ID NO: 140)

hzC12v3

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRALTGYHMSWFRQAPGKGLEFVSYGIWDRAGAAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAASMAVRTYYSPRSYDSWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 26)

CDR1: SGRALTGYHMSW (SEQ ID NO: 141)

CDR2: YGIWDRAGAA (SEQ ID NO: 139)

CDR3: ASMAVRTYYSPRSYDSW (SEQ ID NO: 140)

1F2

EVQLVQSGGGLVQAGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKERAFVAAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAENTTYLQMNSLKPEDSAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 27)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 144)

hz1F2v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 29)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 144)

hz1F2v1

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 30)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 144)

hz1F2v2

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDTQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 32)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDTQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 145)

hz1F2v3

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 33)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 146)

hz1F2v4

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 34)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVESQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 147)

hz1F2v5

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGYDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 35)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDSQPTYSGGVYYPRYGYDVW (SEQ ID NO: 148)

hz1F2v6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGDDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 36)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDSQPTYSGGVYYPRYGDDVW (SEQ ID NO: 148)

hz1F2v7

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGLDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 37)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDSQPTYSGGVYYPRYGLDVW (SEQ ID NO: 149)

hz1F2-DS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVCAISRSGDNIYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 38)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVESQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 147)

hz1F2-MA

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGADVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 39)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGADVW (SEQ ID NO: 150)

hz1F2-ME

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGEDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 40)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGEDVW (SEQ ID NO: 150)hz1F2-MH

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGHDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 41)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGHDVW (SEQ ID NO: 151)

hz1F2-MN

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGNDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 42)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGNDVW (SEQ ID NO: 152)

hz1F2-MP

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGPDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 43)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGPDVW (SEQ ID NO: 153)

hz1F2-MQ

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGQDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 44)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGQDVW (SEQ ID NO: 154)

hz1F2-MR

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGRDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 45)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGRDVW (SEQ ID NO: 155)

hz1F2-MS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGSDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 46)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGSDVW (SEQ ID NO: 156)

hz1F2-MT

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGTDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 47)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGTDVW (SEQ ID NO: 157)

hz1F2-MV

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVDAQPTYSGGVYYPRYGVDVWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 48)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVDAQPTYSGGVYYPRYGVDVW (SEQ ID NO: 158)

B04

EVQLVQSGGGLVQAGGSLRLSCAASGRAFSNYALGWFRQAPGKEREFIAAINWNGENRYGVDSVKGRFTISRDNAQNMGYLQMNNLKPEDTAVYRCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 49)

CDR1: SGRAFSNYALGW (SEQ ID NO: 159)

CDR2: AINWNGENRY (SEQ ID NO: 160)

CDR3: AAALSFRLGGEPYGDAYW (SEQ ID NO: 161)

hzB04v1

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 50)

CDR1: SGRAFSNYAMSW (SEQ ID NO: 162)

CDR2: AINWNGENRY (SEQ ID NO: 160)

CDR3: AAALSFRLGGEPYGDAYW (SEQ ID NO: 161)

5A04

QVQLQESGGGLVQAGGSLRLSCVASGSIFTNNAMGWYRQAPGKQRDLVAQITMGGGITNYAPSMEGRFAISRDNAKSTVYLQMNNLKPEDTAVYYCNAEVKSADWGAYANYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 51)

CDR1: SGSIFTNNAM (SEQ ID NO: 163)

CDR2: QITMGGGITN (SEQ ID NO: 164)

CDR3: NAEVKSADWGAYANYW (SEQ ID NO: 165)

hz5A04v1

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFTNNAMSWYRQAPGKGLELVSAITMGGGITYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCNAEVKSADWGAYANYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 52)

CDR1: SGSIFTNNAM (SEQ ID NO: 163)

CDR2: AITMGGGITY (SEQ ID NO: 166)

CDR3: NAEVKSADWGAYANYW (SEQ ID NO: 165)

hz5A04v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFTNNAMSWYRQAPGKGRELVSQITMGGGITYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCNAEVKSADWGAYANYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 53)

CDR1: SGSIFTNNAM (SEQ ID NO: 163)

CDR2: QITMGGGITY (SEQ ID NO: 167)

CDR3: NAEVKSADWGAYANYW (SEQ ID NO: 165)

F03

QVQLQESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFLAASVWNNGGNYYADSVKGRFTASRDDAKSTAYLQMSRLRPEDTGIYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 54)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNNGGNY (SEQ ID NO: 169)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 55)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNNGGNY (SEQ ID NO: 169)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v1opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNGGNYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 56)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNNGGNY (SEQ ID NO: 169)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v2opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNGGNYYAESVKGRFTISRDDAKSTLYLQMSSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 57)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNNGGNY (SEQ ID NO: 169)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v3opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNQGGNYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 58)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNQGGNY (SEQ ID NO: 171)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v4opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNAGNYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 59)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNNAGNY (SEQ ID NO: 172)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v5opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNQGGNYYAESVKGRFTISRDDAKSTLYLQMSSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 60)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNQGGNY (SEQ ID NO: 171)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

hzF03v6opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNAGNYYAESVKGRFTISRDDAKSTLYLQMSSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 61)

CDR1: SGRSISNYAM (SEQ ID NO: 168)

CDR2: ASVWNNAGNY (SEQ ID NO: 172)

CDR3: VVARTPETPITSARGANYW (SEQ ID NO: 170)

3B7

QVQLQESGGGSVQAGGSLTLSCAASGRAASDYAVGWFRQAPGKEREFVAACNWSGEDTVYAYIVKGRFTISRDNAGNTVSLRMSSLEPEDTAVYYCAAAPSFSRSVLDGNLSQIDYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 62)

CDR1: SGRAASDYAV (SEQ ID NO: 173)

CDR2: ACNWSGEDTV (SEQ ID NO: 174)

CDR3: AAAPSFSRSVLDGNLSQIDYW (SEQ ID NO: 175)

hz3B7v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAASDYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWGGEDTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAAPSFSRSVLDGNLSQIDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 63)

CDR1: SGRAASDYAM (SEQ ID NO: 176)

CDR2: INWGGEDTV (SEQ ID NO: 177)

CDR3: AAAPSFSRSVLDGNLSQIDYW (SEQ ID NO: 175)

6G01

QVQLVQSGGGLAQAGGSLRLSCVASGRTFTNYAMGWFRQAPGKEREFVAAINWSGDSTYHADSVKGRFTISRDNAKDSVYLQMTKLKPEDTADYYCASAESFSRGGLPYGMNYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 64)

CDR1: SGRTFTNYAM (SEQ ID NO: 178)

CDR2: AINWSGDSTY (SEQ ID NO: 179)

CDR3: ASAESFSRGGLPYGMNYW (SEQ ID NO: 180)

hz6G01v1

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTFTNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWSGDSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASAESFSRGGLPYGMNYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 65)

CDR1: SGRTFTNYAM (SEQ ID NO: 178)

CDR2: AINWSGDSTY (SEQ ID NO: 179)

CDR3: ASAESFSRGGLPYGMNYW (SEQ ID NO: 180)

hz6G01v1opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTFTNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWSGDSTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCASAESFSRGGLPYGMNYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 66)

CDR1: SGRTFTNYAM (SEQ ID NO: 178)

CDR2: AINWSGDSTY (SEQ ID NO: 179)

CDR3: ASAESFSRGGLPYGMNYW (SEQ ID NO: 180)

H10

QVQLVQSGGGLVQAGGSLTLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVRGRFKNSKDNAKRTAYLQMNRLKPEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 67)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDGVGAY (SEQ ID NO: 182)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10v3

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWEGVGAYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKP (SEQ ID NO: 68)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWEGVGAY (SEQ ID NO: 184)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 69)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDGVGAY (SEQ ID NO: 182)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10v1opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 70)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDGVGAY (SEQ ID NO: 182)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10-DS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVCAIRWEGVGAYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 71)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWEGVGAY (SEQ ID NO: 184)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10v4opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDAVGAYYAESVKGRFTISKDNAKRTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 72)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDAVGAY (SEQ ID NO: 185)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10v5opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYAESVKGRFTISKDNAKRTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGESELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 73)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDGVGAY (SEQ ID NO: 182)

CDR3: ALPRRGESELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 186)

hzH10v6opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYAESVKGRFTISKDNAKRTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDAELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 74)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDGVGAY (SEQ ID NO: 182)

CDR3: ALPRRGDAELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 187)

hzH10v7opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 75)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDGVGAY (SEQ ID NO: 182)

CDR3: ALPRRGDSELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 183)

hzH10v8opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWEGVGAYYAESVKGRFTISKDNAKRTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGESELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 76)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWEGVGAY (SEQ ID NO: 184)

CDR3: ALPRRGESELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 186)hzH10opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWEGVGAYYAESVKGRFTISKDNAKRTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDAELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 77)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWEGVGAY (SEQ ID NO: 184)

CDR3: ALPRRGDAELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 187)

hzH10v10opt

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDAVGAYYAESVKGRFTISKDNAKRTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGESELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 78)

CDR1: SVSTFGTSPV (SEQ ID NO: 181)

CDR2: AIRWDAVGAY (SEQ ID NO: 185)

CDR3: ALPRRGESELPSTVKEYGYW (SEQ ID NO: 186)

H11

QLQLQESGGGLVQAGDSLRLSCQVSGRTLSAYLMAWFRQAPNKVREYLGRIRWNEGDTYYPDSVKGRFTISKDDAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCAARSIFNPSDQYVYWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 79)

CDR1: SGRTLSAYLM (SEQ ID NO: 188)

CDR2: RIRWNEGDTY (SEQ ID NO: 189)

CDR3: AARSIFNPSDQYVYW (SEQ ID NO: 190)

hzH11v1

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTLSAYLMSWFRQAPGKGLEYVSAIRWNEGDTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAARSIFNPSDQYVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 80)

CDR1: SGRTLSAYLM (SEQ ID NO: 188)

CDR2: AIRWNEGDTY (SEQ ID NO: 28)

CDR3: AARSIFNPSDQYVYW (SEQ ID NO: 190)

hzH11v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGRTLSAYLMSWFRQAPGKGREYVSRIRWNEGDTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLKAEDTAVYYCAARSIFNPSDQYVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 81)

CDR1: SGRTLSAYLM (SEQ ID NO: 188)

CDR2: RIRWNEGDTY (SEQ ID NO: 189)

CDR3: AARSIFNPSDQYVYW (SEQ ID NO: 190)

1F10

EVQLVQSGGGLVQAGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKERAFVAAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAENTMYLQMNSLKPEDSAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTQVTVSS (SEQ ID NO: 82)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVESQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 147)

hz1F10

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMSWFRQAPGKGLEFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 83)

CDR1: SGSTFSSLDMSW (SEQ ID NO: 31)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVESQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 147)

hz1F10v2

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 84)

CDR1: SGSTFSSLDMGW (SEQ ID NO: 142)

CDR2: AISRSGDNIY (SEQ ID NO: 143)

CDR3: AVESQPTYSGGVYYPRYGMDVW (SEQ ID NO: 147)

2x_1F5-DS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVCAIYWSGGTVYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVCAIYWSGGTVYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGG (SEQ ID NO: 92)

2x_1F5

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGG (SEQ ID NO: 93)

2x_1F5_gs6

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 94)

2x_1F5_gs12

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVSSGGGSGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 95)

2x_1F5_gs15

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMSWFRQAPGKGLEFVSAIYWSGGTVYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 96)

2x_hz1F2v2-gs6

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 97)

2x_hz1F2v2-gs9

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 98)

2x_hz1F2v2-gs12

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSGGGSGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 99)

2x_hz1F2v2-gs15

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMSWFRQAPGKGLEFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMSWFRQAPGKGLEFVSAISRSGDNIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAVDSQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 100)

2x_hzB04v1-gs6

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 101)

2x_hzB04v1-gs12

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSSGGGSGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 102)

2x_hzB04v1-gs15

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRAFSNYAMSWFRQAPGKGLEFVSAINWNGENRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAAALSFRLGGEPYGDAYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 103)

2x_F03v2-gs6

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMGWFRQAPGKEREFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 104)

2x_F03v1-gs6

EVQLLESGGGKVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 105)

2x_F03v1-gs9

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 106)

2x_F03v1-gs12

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSGGGSGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 107)

2x_F03v1-gs15

EVQLLESGGGKVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 108)

2x_hzH10v2-gs6

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVSGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 109)

2x_hzH10v2-gs15

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 110)

2x_hz1F5v3_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVFYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVFYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 111)

2x_hz1F5v4_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVFYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVFYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 112)

2x_hz1F5v5_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 113)

2x_hz1F5v6_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 114)

2x_hz1F5v7_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFVSAIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 115)

2x_hz1F5v8_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGLTFPNYGMGWFRQAPGKEREFLAVIYWSGGTVYYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMSSLRAEDTAVYYCAVTIRGAATQTWKYDYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 116)

2x_hzC06v2_gs6

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMGWFRQAPGKDREFVSALNWGGDTTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMGWFRQAPGKDREFVSALNWGGDTTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 117)

2x_hzC06v2_gs9

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMGWFRQAPGKDREFVSALNWGGDTTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTLVTVKPGGSGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGRTVSNYAMGWFRQAPGKDREFVSALNWGGDTTYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAAAQSFRRGGAPYGDNYWGQGTLVTVKPGGGGDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 118)

3x_hzF03

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRSISNYAMSWFRQAPGKGLEFVSASVWNNGGNYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVVARTPETPITSARGANYWGQGTLVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 119)

3x_H10-DS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVCAIRWEGVGAYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVCAIRWEGVGAYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVCAIRWEGVGAYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGGGG (SEQ ID NO: 120)

3x_H10

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWEGVGAYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWEGVGAYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWEGVGAYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTLVTVKPGGGG (SEQ ID NO: 121)

3x_1F2-DS

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVCAISRSGDNIYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVCAISRSGDNIYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVCAISRSGDNIYYAESVKGRFTCSRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGGGG (SEQ ID NO: 122)

3x_1F2

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGGSGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGSTFSSLDMGWFRQAPGKGREFVSAISRSGDNIYYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMSSLRAEDTAVYYCAVESQPTYSGGVYYPRYGMDVWGQGTLVTVKPGGGG (SEQ ID NO: 123)

3x_H10-gs15

QVQLVQSGGGLVQAGGSLTLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVRGRFKNSKDNAKRTAYLQMNRLKPEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTQVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVQSGGGLVQAGGSLTLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVRGRFKNSKDNAKRTAYLQMNRLKPEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTQVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVQSGGGLVQAGGSLTLSCAASVSTFGTSPVGWFRQAPGKEREFVSAIRWDGVGAYYADSVRGRFKNSKDNAKRTAYLQMNRLKPEDTAVYYCALPRRGDSELPSTVKEYGYWGQGTQVTVSSAGGGG (SEQ ID NO: 124)

TAS266/11H6_hu_tetramer (человеческий, тетрамер)

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 125)

FIX-TAS266

EVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGEVQPGGSLRLSCAASGTFDKINNMGWYRQAPGKQRDLVAQITPGGITDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRPEDTAVYYCNAEILKRAYIDVYVNYWGQGTLVTVKPGG (SEQ ID NO: 126)

[0088] Белки, нацеленные на DR5, описанные в настоящем документе, применяются при различных терапевтических, диагностических и профилактических показаниях. Например, белки, нацеленные на DR5, применяются в лечении различных заболеваний и расстройств у субъекта. В некоторых вариантах осуществления белки, нацеленные на DR5, применяются для лечения, облегчения симптомов, ослабления и/или задержки прогрессирования заболевания или расстройства у субъекта, страдающего или имеющего установленный риск развития воспалительного заболевания или расстройства. В некоторых вариантах осуществления белки, нацеленные на DR5, применяются для лечения, облегчения симптомов, ослабления и/или задержки прогрессирования рака или других неопластических состояний. В некоторых вариантах осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак матки/шейки матки, рак яичников, рак предстательной железы, рак яичка, рак пищевода, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, колоректальный рак, рак толстой кишки, рак почек, раковые образования головы и шеи, рак легкого, рак желудка, герминогенный рак, рак костей, рак печени, рак щитовидной железы, рак кожи, новообразование центральной нервной системы, лимфому, лейкоз, миелому, саркому, мезотелиому, лейкоз, лимфому, миелому и связанный с вирусом рак. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой метастатический рак, рефрактерный рак или рецидивирующий рак. В некоторых вариантах осуществления белки, нацеленные на DR5, используются для уменьшения или истощения количества регуляторных T-клеток в опухоли нуждающегося в этом субъекта. В некоторых вариантах осуществления белки, нацеленные на DR5, используются для стимуляции у субъекта иммунного ответа. В некоторых вариантах осуществления белки, нацеленные на DR5, применяются для лечения, облегчения симптомов, ослабления и/или задержки прогрессирования аутоиммунного заболевания или расстройства. В некоторых вариантах осуществления белки, нацеленные на DR5, применяются для лечения, облегчения симптомов, ослабления и/или задержки прогрессирования вирусных, бактериальных и паразитарных инфекций.

[0089] Терапевтические композиции раскрытия, которые включают молекулу по раскрытию, нацеленную на DR5, используют для лечения или облегчения симптома, связанного с заболеванием или расстройством, связанным с нарушенной активностью и/или экспрессией DR5 у субъекта. Схему лечения осуществляют путем идентификации субъекта, например пациента, страдающего заболеванием или расстройством, связанным с нарушенной активностью и/или экспрессией DR5 (или имеющего риск развития такого заболевания или расстройства), с использованием стандартных способов, включая любую из множества клинических и/или лабораторных процедур. Термин «пациент» включает субъектов-людей и животных. Термин «субъект» включает людей и других млекопитающих.

[0090] Эффективность лечения определяется в связи с любым известным способом диагностики или лечения конкретного заболевания или расстройства, связанного с нарушенной активностью и/или экспрессией DR5. Облегчение одного или более симптомов заболевания или расстройства, связанного с нарушенной активностью и/или экспрессией DR5, указывает на то, что молекула, нацеленная на DR5, обеспечивает клиническое преимущество.

[0091] Виды терапевтического применения нацеленных на DR5 молекул раскрытия могут также включать введение одного или более дополнительных агентов.

[0092] В некоторых вариантах осуществления молекулу, нацеленную на DR5, вводят во время и/или после лечения в комбинации с одним или более дополнительными агентами. В некоторых вариантах осуществления молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят в состав одной терапевтической композиции, и молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят одновременно. Альтернативно молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент отделяют друг от друга, например, каждое из них вводят в состав отдельной терапевтической композиции, и молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят одновременно или молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят в разное время в ходе осуществления схемы лечения. Например, молекулу, нацеленную на DR5, вводят перед введением дополнительного агента, молекулу, нацеленную на DR5, вводят после введения дополнительного агента или молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят чередующимся образом. Как описано в настоящем документе, молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят в виде однократных доз или множества доз.

[0093] В некоторых вариантах осуществления молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный(-ые) агент(-ы) вводят одновременно. Например, молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный(-ые) агент(-ы) можно ввести в состав одной композиции или вводить в виде двух или более отдельных композиций. В некоторых вариантах осуществления молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный(-ые) агент(-ы) вводят последовательно, или молекулу, нацеленную на DR5, и дополнительный агент вводят в разное время в ходе осуществления схемы лечения.

[0094] Способы скрининга молекул, нацеленных на DR5, обладающих желательной специфичностью, включают, без ограничений, иммуноферментный твердофазный анализ (ИФА), ферментные анализы, проточную цитометрию и другие иммунологически-опосредованные методики, известные в данной области техники.

[0095] В раскрытии дополнительно предложены последовательности аминокислот и, в частности, последовательности ДНК, которые кодируют гибридные белки настоящего изобретения. Предпочтительно, носителем последовательности ДНК является вектор, пригодный для внехромосомной репликации, такой как фаг, вирус, плазмида, фагемид, космида, искусственные хромосомы дрожжей (YAC) или эписома. В частности, вектор ДНК, который кодирует желаемый гибридный белок, может быть использован для облегчения способов получения описанных в настоящем документе молекул, нацеленных на DR5, и получения значительных количеств гибридного белка. Последовательность ДНК может быть вставлена в соответствующий экспрессионный вектор, то есть в вектор, который содержит необходимые элементы для транскрипции и трансляции вставленной последовательности, кодирующей белок. Для экспрессии последовательности, кодирующей белок, могут быть использованы различные системы «хозяин-вектор». К ним относятся системы клеток млекопитающих, инфицированных вирусом (например, вирусом коровьей оспы, аденовирусом и т.п.); системы клеток насекомых, инфицированных вирусом (например, бакуловирусом); микроорганизмы, такие как дрожжевые векторы, содержащие дрожжи, или бактерии, трансформированные ДНК бактериофага, ДНК плазмиды или ДНК космиды. В зависимости от используемой системы «хозяин-вектор» может использоваться любой из ряда подходящих элементов транскрипции и трансляции.

[0096] В раскрытии также предложены способы получения молекулы, нацеленной на DR5, посредством культивирования клетки в условиях, которые приводят к экспрессии полипептида, причем клетка содержит выделенную молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую молекулу, нацеленную на DR5, описанную в настоящем документе, и/или векторы, включающие в себя эти выделенные последовательности нуклеиновой кислоты. В раскрытии предложены способы получения молекулы, нацеленной на DR5, посредством культивирования клетки в условиях, которые приводят к экспрессии молекулы, нацеленной на DR5, причем клетка содержит выделенную молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую молекулу, нацеленную на DR5, описанную в настоящем документе, и/или векторы, включающие в себя эти выделенные последовательности нуклеиновой кислоты.

[0097] Гибридные белки по раскрытию (также называемые в настоящем документе «активными соединениями») и их производные, фрагменты, аналоги и гомологи, могут быть включены в фармацевтические композиции, пригодные для введения. Такие композиции обычно содержат гибридный белок и фармацевтически приемлемый носитель. В контексте настоящего документа термин «фармацевтически приемлемый носитель» предназначен для включения всех возможных растворителей, дисперсионных сред, покрытий, антибактериальных и противогрибковых агентов, изотонических и задерживающих абсорбцию агентов и подобных веществ, являющихся совместимыми с фармацевтическим введением. Подходящие носители описаны в последнем издании Remington's Pharmaceutical Sciences, являющемся стандартным справочным источником в данной области, который включен в настоящий документ путем ссылки. Предпочтительные примеры таких носителей или разбавителей включают, без ограничений, воду, физиологический раствор, растворы Рингера, раствор декстрозы и 5% раствор сывороточного альбумина человека. Также могут быть использованы липосомы и неводные носители, такие как нелетучие масла. В данной области техники хорошо известно применение таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ. За исключением случаев, когда любая обычная среда или агент несовместим с активным соединением, предполагается их использование в композициях. В состав композиций также могут быть введены дополнительные активные соединения.

[0098] Рецептура фармацевтической композиции по раскрытию составлена так, чтобы она соответствовала предполагаемому пути введения. Примеры путей введения включают парентеральный, например, внутривенный, внутрикожный, подкожный, пероральный (например, ингаляционный), трансдермальный (т.е. местное нанесение), через слизистые оболочки и ректальный пути. Растворы или суспензии, используемые для парентерального, внутрикожного или подкожного применения, могут включать любой из следующих компонентов: стерильные разбавители, такие как вода для инъекций, солевой раствор, нелетучие масла, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители; антибактериальные агенты, такие как бензиловый спирт или метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или бисульфит натрия; хелатирующие агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТК); буферы, такие как ацетаты, цитраты или фосфаты, и агенты для регулирования тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. Уровень pH можно регулировать кислотами или основаниями, такими как хлористоводородная кислота или гидроксид натрия. Препарат для парентерального введения может быть разлит в ампулы, одноразовые шприцы или флаконы, содержащие несколько доз и изготовленные из стекла или пластика.

[0099] Фармацевтические композиции, пригодные для инъекционного применения, включают стерильные водные растворы (водорастворимые) или дисперсии и стерильные порошки для экстемпорального приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий. Подходящие для внутривенного введения носители включают физиологический раствор, бактериостатическую воду, Cremophor EL^™ (BASF, г. Парсипини, штат Нью-Джерси, США) или фосфатно-солевой буферный раствор (ФСБР). Во всех случаях композиция должна быть стерильной и должна быть жидкой до такой степени, чтобы ее можно было ввести с помощью шприца. Композиция должна быть стабильной при заданных условиях изготовления и хранения и должна быть защищена от загрязняющего воздействия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носителем может быть растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль и т.п.) и их соответствующие смеси. Надлежащая текучесть может поддерживаться, например, применением покрытия, такого как лецитин, поддержанием необходимого размера частиц в случае дисперсий и применением поверхностно-активных веществ. Предупреждение действия микроорганизмов может быть достигнуто с помощью различных антибактериальных и противогрибковых агентов, таких как парабены, хлорбутанол, фенол, аскорбиновая кислота, тимеросал и т.п. Во многих случаях будет предпочтительным включать в композицию изотонические агенты, например, сахара, полиспирты, такие как маннит, сорбит и натрия хлорид. Пролонгированная абсорбция инъекционных композиций может быть достигнута включением в композицию агента, который замедляет абсорбцию, например, моностеарата алюминия и желатина.

[00100] Стерильные инъекционные растворы могут быть получены путем включения активного соединения в необходимом количестве в подходящий растворитель с одним или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, по необходимости, с последующей стерилизующей фильтрацией. Как правило, дисперсии получают введением активного соединения в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и необходимые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае использования стерильных порошков для изготовления стерильных инъекционных растворов способами приготовления являются вакуумная сушка и лиофилизация, в результате которых образуется порошкообразное вещество активного ингредиента, и добавление любого необходимого дополнительного ингредиента из раствора, предварительно стерилизованного путем фильтрации.

[00101] Композиции для перорального введения в общем содержат инертный разбавитель или съедобный носитель. Они могут быть заключены в желатиновые капсулы или спрессованы в таблетки. Для целей перорального терапевтического введения активное соединение можно вводить с эксципиентами и использовать в форме таблеток, пастилок или капсул. Пероральные композиции также могут быть получены с использованием жидкого носителя для использования в качестве жидкости для полоскания рта, при этом соединение в жидком носителе применяют перорально и смывают и отхаркивают или проглатывают. Фармацевтически совместимые связующие агенты и/или адъюванты могут быть включены как часть композиции. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и т.п. могут содержать любые из следующих ингредиентов или соединений подобного происхождения: связующее вещество, такое как микрокристаллическая целлюлоза, трагакантовая камедь или желатин; эксципиент, такой как крахмал или лактоза, дезинтегрирующий агент, такой как альгиновая кислота, примогель или кукурузный крахмал; смазывающее вещество, такое как стеарат магния или Sterotes; глидант, такой как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как мята, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор.

[00102] Соединения для ингаляционного введения могут быть доставлены в виде брызг аэрозоля из емкости под давлением или диспенсера, который содержит подходящий пропеллент, например газ, такой как диоксид углерода, или небулайзер.

[00103] Системное введение может осуществляться через слизистые оболочки или через кожу. Для введения через слизистые оболочки или через кожу, в композиции используются пенетранты, подходящие для барьера, сквозь который будет осуществляться проникновение. Такие пенетранты общеизвестны из уровня техники и включают, например, для введения через слизистые оболочки - детергенты, соли желчных кислот и производные фузидиновой кислоты. Введение через слизистые оболочки может быть достигнуто посредством применения назальных спреев или суппозиториев. Для введения через кожу активные соединения вводят в рецептуру мазей, бальзамов, гелей или кремов, как по существу известно в данной области техники.

[00104] Соединения можно получить в форме суппозиториев (например, с обычными основами суппозитория, например масло какао, и другими глицеридами) или удерживающих клизм для ректальной доставки.

[00105] В одном варианте осуществления активные соединения получают с носителями, которые будут защищать соединение от быстрого выведения из организма, такими как состав с контролируемым высвобождением, включая имплантаты и микроинкапсулированные системы доставки. Могут использоваться биоразрушаемые, биосовместимые полимеры, такие как, этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. Способы получения таких составов очевидны для специалистов в данной области техники. Такие материалы можно получать из коммерческих источников, например, от компаний Alza Corporation и Nova Pharmaceuticals, Inc. В качестве фармацевтически приемлемых носителей можно также применять липосомные суспензии. Они могут быть получены в соответствии со способами, известными специалистам в данной области техники, например, как описано в патенте США № 4,522,811.

[00106] Особенным преимуществом будет составление парентеральных композиций в стандартной дозированной форме для простоты введения и однородности дозы. Термин «стандартная дозированная форма» в контексте настоящего документа относится к физически дискретным единицам, пригодным в качестве однократных доз для субъектов, подлежащих лечению; причем каждая единица содержит определенное количество активного соединения, рассчитанное для обеспечения заданного терапевтического эффекта, в сочетании с заданным фармацевтическим носителем. Спецификация стандартных лекарственных форм настоящего раскрытия обусловлена и напрямую зависит от уникальных характеристик активного соединения и конкретного ожидаемого терапевтического эффекта и от ограничений, существующих в области составления композиций такого активного соединения пациентов.

[00107] Фармацевтические композиции могут быть включены в набор, емкость, пакет или диспенсер вместе с инструкциями по введению. Эти фармацевтические композиции могут быть включены в диагностические наборы вместе с инструкциями по применению.

[00108] Если в данном документе не указано иное, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим раскрытием, имеют значения, которые традиционно подразумеваются специалистами в данной области техники. Кроме того, если иное не требуется по контексту, термины в единственном числе включают формы во множественном числе, и термины во множественном числе включают формы в единственном числе. Как правило, номенклатура и методы, используемые в связи с культивированием клеток и тканей, молекулярной биологией и химией белков и олиго- или полинуклеотидов и гибридизацией, описанных в настоящем документе, хорошо известны и широко используются в данной области техники. Для получения рекомбинантных ДНК, синтеза олигонуклеотидов, культивирования и трансформации тканей используют стандартные методики (например, электропорацию, липофекцию). Ферментативные реакции и методы очистки осуществляют в соответствии с рекомендациями производителя или как общепринято в данной области техники или как описано в настоящем документе. Вышеизложенные методики и процедуры, как правило, осуществляются с использованием общепринятых способов, хорошо известных в данной области техники и описанных в различных общих и специализированных источниках, которые цитируются и обсуждаются в тексте настоящего описания. См. например, Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2^nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989 г.)). Описанные в данном документе лабораторные процедуры и методы аналитической химии, синтетической органической химии, а также медицинской и фармацевтической химии и используемая в связи с ними терминология, являются хорошо известными и традиционно используемыми в данной области техники. Для химического синтеза, химического анализа, фармацевтического приготовления, составления рецептуры и доставки, а также лечения пациентов применяют стандартные методики. Термин «пациент» включает субъектов-людей и животных.

[00109] Следует понимать, что применяемые в соответствии с настоящим раскрытием перечисленные ниже термины имеют приведенные ниже значения, если не указано иное.

[00110] В контексте настоящего документа термины «нацеленный гибридный белок» и «антитело» могут быть синонимами. В контексте настоящего документа термин «антитело» относится к молекулам иммуноглобулина и иммунологически активным участкам молекул иммуноглобулина (Ig), т.е. молекулам, содержащим антигенсвязывающий сайт, который специфически связывается с (вступает в иммунную реакцию с) антигеном. Термин «специфически связывается», или «вступает в иммунную реакцию с», или «направлен против» означает, что антитело реагирует с одной или более антигенными детерминантами заданного антигена и не реагирует с другими полипептидами или связывается с ними с гораздо меньшей аффинностью (K_d>10^-6). Антитела включают, без ограничений, поликлональные, моноклональные, химерные, dAb (доменное антитело), одноцепочечные, фрагменты Fab, Fab' и F(ab')₂, F_v, scFv, библиотеку экспрессии Fab и фрагменты однодоменного антитела (sdAb), например V_HH, V_NAR, сконструированный V_H или V_K.

[00111] Известно, что базовая структурная единица антитела представляет собой тетрамер. Каждый тетрамер состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, каждая пара имеет одну «легкую» (около 25 кДа) и одну «тяжелую» цепь (около 50-70 кДа). N-концевая область каждой цепи содержит вариабельную область, содержащую от около 100 до 110 или более аминокислот, главным образом ответственную за распознавание антигена. C-концевая область каждой цепи определяет константную область, главным образом ответственную за эффекторную функцию. В общем, молекулы антител, полученных от людей, относятся к любому из классов IgG, IgM, IgA, IgE и IgD, которые отличаются друг от друга по характеру тяжелой цепи, присутствующей в молекуле. Определенные классы также имеют подклассы (также известные как изотипы), такие как IgG₁, IgG₂ и другие. Кроме того, у людей легкая цепь может представлять собой каппа-цепь или лямбда-цепь.

[00112] Термин «моноклональное антитело» (mAb) или «композиция моноклонального антитела» в контексте настоящего документа относится к популяции молекул антитела, содержащей только одну молекулярную разновидность молекул антитела, состоящую из уникального генного продукта легкой цепи и уникального генного продукта тяжелой цепи. В частности, определяющие комплементарность области (CDR), моноклонального антитела являются идентичными у всех молекул популяции. MAb содержат антигенсвязывающий сайт, способный вступать в иммунную реакцию с определенным эпитопом антигена, характеризующимся уникальной аффинностью связывания с ним.

[00113] Термин «антигенсвязывающий сайт» или «связывающий участок» относится к части молекулы иммуноглобулина, которая участвует в связывании антигена. Антигенсвязывающий сайт образуется аминокислотными остатками N-концевых вариабельных (V) областей тяжелой (Н) и легкой (L) цепей. Три сильно дивергентных отрезка в пределах V-областей тяжелой и легкой цепей, называемые «гипервариабельными областями», расположены между более консервативными фланкирующими отрезками, известными как «каркасные области», или «FR». Таким образом, термин «FR» относится к аминокислотным последовательностям, которые обычно расположены в иммуноглобулинах между гипервариабельными областями и рядом с ними. В молекуле антитела три гипервариабельные области легкой цепи и три гипервариабельные области тяжелой цепи расположены в трехмерном пространстве относительно друг друга, образуя антигенсвязывающую поверхность. Антигенсвязывающая поверхность комплементарна трехмерной поверхности связанного антигена, а три гипервариабельные области каждой из тяжелой и легкой цепей называются «определяющими комплементарность областями» или «CDR». Аминокислоты присваивают каждому домену в соответствии с определениями, приведенными в публикациях Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987 г. и 1991 г.)) или Chothia & Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987 г.), Chothia et al., Nature 342:878-883 (1989 г.).

[00114] Фрагменты однодоменного антитела (sdAb) и части гибридных белков настоящего раскрытия упоминаются в настоящем документе взаимозаменяемо как нацеливающие полипептиды.

[00115] В контексте настоящего документа термин «эпитоп» включает в себя любую детерминанту белка, способную специфически связываться с иммуноглобулином, или его фрагментом, или Т-клеточным рецептором. Термин «эпитоп» включает в себя любую детерминанту белка, способную специфически связываться с иммуноглобулином или Т-клеточным рецептором. Детерминанты эпитопов обычно состоят из химически активных поверхностно расположенных групп молекул, таких как аминокислотные или сахарные боковые цепи, а также обычно имеют специфическую трехмерную структуру, а также специфические зарядовые характеристики. Говорят, что антитело специфически связывается с антигеном, если константа диссоциации составляет ≤1 мкM; например, ≤100 нМ, предпочтительно ≤10 нМ и более предпочтительно ≤1 нМ.

[00116] В контексте настоящего документа термины «иммунологическое связывание», и «характеристики иммунологического связывания», и «специфическое связывание» относятся к нековалентным взаимодействиям такого типа, который наблюдается между молекулой иммуноглобулина и антигеном, по отношению к которому иммуноглобулин является специфическим. Сила, или аффинность, взаимодействий иммунологического связывания может быть выражена с помощью константы диссоциации (K_d) взаимодействия, причем меньшие значения K_d соответствуют большей аффинности. Характеристики иммунологического связывания выбранных полипептидов могут быть количественно определены с использованием способов, хорошо известных в данной области техники. Один из таких способов включает измерение скоростей образования и диссоциации комплекса антигенсвязывающий сайт/антиген, где указанные скорости зависят от концентраций партнеров по комплексообразованию, аффинности взаимодействия и геометрических параметров, в равной степени влияющих на скорость в обоих направлениях. Таким образом, как «константа ассоциации» (k_on), так и «константа диссоциации» (k_off) могут быть определены путем расчета концентраций и фактических скоростей ассоциации и диссоциации. (См. Nature 361:186-87 (1993 г.)). Соотношение k_off/k_on позволяет устранить все параметры, не относящиеся к аффинности, и равно константе диссоциации K_d. (См., в основном, Davies et al. (1990 г.) Annual Rev Biochem 59:439-473). Говорят, что антитело настоящего раскрытия специфически связывается с антигеном, если равновесная константа связывания (K_d) имеет значение ≤1 мкM, предпочтительно ≤100 нM, более предпочтительно≤10 нM, и наиболее предпочтительно от ≤100 пМ до около 1 пМ по результатам измерения с помощью таких анализов, как анализы связывания с использованием радиоактивных лигандов, анализы связывания с использованием поверхностного плазмонного резонанса (SPR), проточной цитометрии или подобные анализы, известные специалистам в данной области техники.

[00117] Предпочтительно позиции неидентичных остатков отличаются консервативными аминокислотными заменами.

[00118] Консервативные аминокислотные замены относятся к взаимозаменяемости остатков, имеющих подобные боковые цепи. Например, группу аминокислот, имеющих алифатические боковые цепи, составляют глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин; группу аминокислот, имеющих алифатические гидроксильные боковые цепи, составляют серин и треонин; группу аминокислот, имеющих амид-содержащие боковые цепи, составляют аспарагин и глутамин; группу аминокислот, имеющих ароматические боковые цепи, составляют фенилаланин, тирозин и триптофан; группу аминокислот, имеющих основные боковые цепи, составляют лизин, аргинин и гистидин; а группу аминокислот, имеющих содержащие серу боковые цепи, составляют цистеин и метионин. Предпочтительными консервативными аминокислотными заменами являются замены в пределах таких групп, как валин-лейцин-изолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин, глутаминовая кислота-аспарагиновая кислота и аспарагин-глутамин.

[00119] Как обсуждается в настоящем документе, небольшие изменения в аминокислотных последовательностях молекул антител или иммуноглобулинов рассматриваются как изменения, входящие в объем настоящего изобретения, при условии, что такие изменения в аминокислотной последовательности будут составлять, по меньшей мере 75%, более предпочтительно, по меньшей мере 80%, 90%, 95%, и наиболее предпочтительно, 99%. В частности, предусмотрены консервативные аминокислотные замены. Консервативными заменами являются замены, которые происходят в пределах семейства аминокислот, являющихся родственными по их боковым цепям. Генетически кодируемые аминокислоты по существу подразделяются на следующие семейства: (1) кислотные аминокислоты представляют собой аспартат, глутамат; (2) основные аминокислоты представляют собой лизин, аргинин, гистидин; (3) неполярные аминокислоты представляют собой аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан и (4) незаряженные полярные аминокислоты представляют собой глицин, аспарагин, глутамин, цистеин, серин, треонин, тирозин. Гидрофильные аминокислоты включают аргинин, аспарагин, аспартат, глутамин, глутамат, гистидин, лизин, серин и треонин. Гидрофобные аминокислоты включают аланин, цистеин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, пролин, триптофан, тирозин и валин. Другие семейства аминокислот включают: (i) серин и треонин, принадлежащие к семейству алифатических гидроксильных оксикислот; (ii) аспарагин и глутамин, принадлежащие к семейству амид-содержащих кислот; (iii) аланин, валин, лейцин и изолейцин, принадлежащие к семейству алифатических аминокислот, и (iv) фенилаланин, триптофан и тирозин, принадлежащие к семейству ароматических аминокислот. Например, следует ожидать, что отдельная замена лейцина изолейцином или валином, замена аспартата глутаматом, замена треонина серином или аналогичная замена аминокислоты структурно родственной аминокислотой не будет оказывать значительного влияния на функцию связывания или свойства полученной молекулы, особенно, если эта замена не является аминокислотной заменой в пределах каркасного участка. Продуцирование функционального пептида в результате такой аминокислотной замены может быть легко установлено путем анализа на удельную активность полипептидного производного. Анализы подробно описаны в настоящем документе. Фрагменты или аналоги молекул антител или иммуноглобулинов могут быть легко получены обычными специалистами в данной области. Предпочтительно, чтобы амино- и карбоксиконцы этих фрагментов или аналогов находились вблизи границ функциональных доменов. Структурные и функциональные домены могут быть идентифицированы путем сравнения данных о нуклеотидных и/или аминокислотных последовательностях с данными о последовательностях, имеющихся в известных общедоступных базах данных или в базах данных, находящихся в частной собственности. Предпочтительно для идентификации мотивов последовательностей или конформационных доменов предсказанных белков, которые встречаются в других белках с известной структурой и/или функцией, применяются методы компьютерного сравнения. Известны методы идентификации последовательностей белка, которые сложены в известную трехмерную структуру. Bowie et al., Science 253:164 (1991 г.). Так, например, описанные ранее примеры демонстрируют, что специалист в данной области может легко выявить мотивы последовательностей и структурные конформации, которые могут быть использованы для определения структурных и функциональных доменов в соответствии с приведенным раскрытием.

[00120] Предпочтительными аминокислотными заменами являются замены, которые: (1) снижают чувствительность к протеолизу, (2) снижают чувствительность к окислению, (3) изменяют аффинности связывания для образования белковых комплексов, (4) изменяют аффинности связывания и (4) придают другие физико-химических или функциональные свойств таких аналогов или модифицируют их. Аналоги могут включать в себя различные мутеины с последовательностью, отличающейся от пептидной последовательности природного происхождения. Например, одна или более аминокислотных замен (предпочтительно консервативных аминокислотных заменах) могут быть сделаны в последовательности природного происхождения (предпочтительно в части полипептида за пределами межмолекулярных контактов, образующих домен(-ы)). Консервативная аминокислотная замена по существу не должна изменять структурные характеристики исходной последовательности (например, замена аминокислоты не должна приводить к разрушению спирали, которая встречается в исходной последовательности, или разрушению других типов вторичной структуры, которые характеризуют исходную последовательность). Примеры известных в данной области техники вторичных и третичных структур полипептида описаны в публикациях Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton, Ed., W. H. Freeman and Company, New York (1984 г.)); Introduction to Protein Structure (C. Branden and J. Tooze, eds., Garland Publishing, New York, N.Y. (1991 г.)); и Thornton et al., Nature 354:105 (1991 г.).

[00121] В контексте настоящего документа термин «фрагмент полипептида» относится к полипептиду, который содержит аминоконцевую и/или карбоксиконцевую делецию, но в котором остальная аминокислотная последовательность в соответствующих положениях аминокислот идентична аминокислотной последовательности природного происхождения, происходящей, например, от полноразмерной последовательности кДНК. Длина фрагментов обычно составляет по меньшей мере 5, 6, 8 или 10 аминокислот, предпочтительно, по меньшей мере 14 аминокислот, более предпочтительно, по меньшей мере 20 аминокислот, обычно по меньшей мере 50 аминокислот, и еще более предпочтительно по меньшей мере 70 аминокислот. Термин «аналог» в контексте настоящего документа относится к полипептидам, которые состоят из сегмента, содержащего по меньшей мере 25 аминокислот, имеющих значительную степень идентичности установленной аминокислотной последовательности, и которые обладают способностью специфического связывания с DR5 в подходящих условиях связывания. По сравнению с последовательностью природного происхождения полипептидные аналоги обычно содержат консервативную аминокислотную замену (добавление или делецию). Аналоги обычно имеют длину, составляющую по меньшей мере 20 аминокислот, предпочтительно по меньшей мере 50 аминокислот или более, а часто они имеют такую же длину, как и полноразмерный полипептид природного происхождения.

[00122] Пептидные аналоги обычно используются в фармацевтической промышленности в качестве непептидных лекарственных средств, обладающих свойствами, аналогичными свойствам матричного пептида. Непептидные соединения этого типа называются «пептидными миметиками» или «пептидомиметиками». Fauchere, J. Adv. Drug Res. 15:29 (1986 г.), Veber and Freidinger TINS p.392 (1985 г.); и Evans et al., J. Med. Chem. 30:1229 (1987 г.). Такие соединения часто разрабатывают с помощью компьютерной программы молекулярного моделирования. Пептидные миметики, структурно сходные с терапевтически используемыми пептидами, могут применяться для достижения эквивалентного терапевтического или профилактического эффекта. Обычно пептидомиметики являются структурно сходными с репрезентативным полипептидом (т.е. с полипептидом, который обладает биохимическими свойствами или фармакологической активностью), таким как человеческое антитело, но они обычно имеют одну или более пептидных связей, необязательно замененных связью, выбранной из группы, состоящей из: -- CH₂NH--, --CH₂S-, --CH₂-CH₂--, --CH=CH--(цис и транс), --COCH₂--, CH(OH)CH₂-- и -CH₂SO-- в соответствии со способами, хорошо известными в данной области техники. Системная замена одной или более аминокислот консенсусной последовательности D-аминокислотой того же типа (например, замена L-лизина на D-лизин) может быть использована для создания более стабильных пептидов. Кроме того, пептиды с конформационными ограничениями, содержащие консенсусную последовательность или вариант последовательности по существу идентичный консенсусной последовательности, могут быть созданы в соответствии со способами, хорошо известными в данной области техники (Rizo and Gierasch Ann. Rev. Biochem. 61:387 (1992 г.)); например, путем присоединения внутренних цистеиновых остатков, способных образовывать внутримолекулярные дисульфидные мостики, которые циклизуют пептид.

[00123] Термин «агент» в контексте настоящего документа означает химическое соединение, смесь химических соединений, биологическую макромолекулу и/или экстракт, полученный из биологических материалов.

[00124] В контексте настоящего документа термин «метка» или «меченый» относится к включению обнаруживаемого маркера, например, путем включения радиоактивно меченой аминокислоты или присоединения к полипептиду биотинильных фрагментов, которые могут быть обнаружены с помощью меченого авидина (например, стрептавидина, содержащего флуоресцентный маркер или имеющего ферментативную активность, которая может быть обнаружена оптическими или калориметрическими способами). В определенных ситуациях метка или маркер также могут быть терапевтическими. В данной области техники известны и могут быть использованы разные способы мечения полипептидов и гликопротеинов. Примеры меток для полипептидов включают, без ограничений, следующие: радиоизотопы или радионуклиды (например, ³H, ¹⁴C, ¹⁵N, ³⁵S, ⁹⁰Y, ⁹⁹Tc, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I), флуоресцентные метки (например, FITC, родамин, люминофоры на основе комплексов лантанидов), ферментативные метки (например, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, люцифераза, щелочная фосфатаза), хемилюминесцентные, биотинильные группы, предварительно определенные полипептидные эпитопы, распознаваемые вторичным репортером (например, последовательности лейциновой молнии, сайты связывания вторичных антител, металл-связывающие домены, эпитопные метки). В некоторых вариантах осуществления метки присоединены с помощью спейсерных плеч различной длины для уменьшения потенциальных стерических затруднений. Термин «фармацевтический агент или лекарственное средство» в контексте настоящего документа относится к химическому соединению или композиции, способным индуцировать требуемый терапевтический эффект при их соответствующем введении пациенту.

[00125] В контексте настоящего документа термины «лечить», «лечение» и т.п. относятся к уменьшению и/или облегчению расстройства и/или связанных с ним симптомов. Под термином «облегчать» и/или «облегчение» подразумевается уменьшение, подавление, ослабление, затухание, приостановление и/или стабилизация развития или прогрессирования заболевания, такого как, например, рак. Следует понимать, что, хотя это и не исключается, лечение расстройства или состояния не требует полного устранения расстройства, состояния или симптомов, связанных с ним.

[00126] В этом раскрытии термины «содержит», «содержащий», «вмещающий», «имеющий» и т.п. могут иметь значение, приписываемое им в патентном праве США, и могут означать «включает», «включающий» и т.п.; подобным образом термины «состоящий по существу из» или «состоит по существу» также имеют значение, приписываемое им в патентном праве США, и эти термины являются открытыми, что допускает наличие большего количества компонентов, чем те, которые перечислены до тех пор, пока основные или новые характеристики не изменятся наличием большего, чем указано, но исключает варианты осуществления предшествующего уровня техники.

[00127] Под «эффективным количеством» подразумевается количество, необходимое для облегчения симптомов заболевания по сравнению с пациентом, которого не лечили. Эффективное количество активного(-ых) соединения(-ий), используемое для осуществления на практике настоящего раскрытия для терапевтического лечения заболевания, варьируется в зависимости от способа введения, возраста, массы тела и общего состояния здоровья субъекта. В конечном счете, подходящее количество и схему лечения определяет лечащий врач или ветеринар. Такое количество называется «эффективным» количеством.

[00128] Под «субъектом» подразумевается млекопитающее, включая, без ограничений, человека или млекопитающее, не являющееся человеком, такое как бык, лошадь, собака, грызун, овца, примат, верблюдовое или кошка.

[00129] Термин «введение» в контексте настоящего документа относится к любому способу передачи, доставки, введения или транспортировки терапевтического агента субъекту, нуждающемуся в лечении таким агентом. Такие способы включают, без ограничений, пероральное, местное, внутривенное, внутрибрюшинное, внутримышечное, внутрикожное, интраназальное и подкожное введение.

[00130] Под «фрагментом» подразумевают часть полипептида или молекулы нуклеиновой кислоты. Эта часть содержит, предпочтительно, по меньшей мере 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или 90% всей длины эталонной молекулы нуклеиновой кислоты или полипептида. Фрагмент может содержать 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 или 1000 нуклеотидов или аминокислот.

[00131] Представленные в настоящем документе диапазоны понимаются как сокращение, охватывающее все значения в пределах диапазона. Например, понятно, что диапазон от 1 до 50 включает любое число, комбинацию чисел или поддиапазон из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 или 50.

[00132] Если особо не указано или не очевидно из контекста, в настоящем описании термины в форме единственного числа означают единственное или множественное число. Если особо не указано или не очевидно из контекста, в настоящем описании термин «или» понимается как включительный.

[00133] Если особо не указано или не очевидно из контекста, в настоящем описании термин «около» указывает на нахождение в пределах диапазона нормального допуска в данной области техники, например, в пределах 2 стандартных отклонений от среднего значения. Термин «около» можно понимать как «находящийся в пределах» 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05% или 0,01% от заявленного значения. Если из контекста не ясно иное, все числовые значения, представленные в настоящем документе, модифицированы термином «около».

[00134] Изобретение будет дополнительно описано в следующих примерах, которые не ограничивают объем раскрытия, описанный в формуле изобретения.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Анализы связывания

[00135] Связывание гибридных белков, нацеленных на DR5, оценивали с помощью проточной цитометрии с использованием клеточной линии ЯКХ (CHO), стабильно трансфицированной кДНК, кодирующей полноразмерные DR5, или раковых клеточных линий, которые эндогенно экспрессируют DR5. Серии титрования гибридного белка инкубировали в 96-луночных планшетах с клеточными линиями, экспрессирующими DR5 (приблизительно 2,5-5×10⁴ клеток/лунка) в течение 30 минут при 4°C в буфере для FACS (ФСБР 1% БСА, 0,1% NaN₃ pH 7,4). После 3 стадий промывки в буфере для FACS, добавляли вторичное антитело (Jackson ImmunoResearch), специфичное к Fcγ человека, конъюгированное с аллофикоцианином (APC), и инкубировали в течение 30 минут при 4°C. После трех дополнительных стадий промывки в буфере для FACS, выполняли обнаружение связанного антитела с помощью проточной цитометрии (IQue Intellicyte). Связывание гибридных белков с DR5 яванского макака (cynoDR5) определяли посредством ИФА, причем рекомбинантный белок, соответствующий внеклеточному домену (ECD) cynoDR5, слитому с мышиной областью Fc (mFc), иммобилизовали на 96-луночных планшетах Medisorp (Nunc). После достаточных этапов блокирования и промывки связанные гибридные белки обнаруживали с использованием вторичного антитела (Jackson ImmunoResearch), специфичного к Fcγ человека, конъюгированного с пероксидазой хрена (HRP), и реагента TMB, и определяли абсорбцию при A_{650 нм}.

Пример 2. Анализы апоптоза

[00136] Опосредованное антителом прямое уничтожение клеток определяли путем измерения количества АТФ, присутствующего после периода обработки, длившегося 16-48 ч, с помощью анализа CellTiter-Glo® (Promega G7572). Раковые клетки высевали в концентрации 1,5-3×10⁴ клеток/лунка, 7×10⁴ клеток/лунка в 96-луночные плоскодонные планшеты, обработанные тканевой культурой. Альтернативным методом измерения клеточной смерти является флуоресцентное окрашивание клеток с использованием реагента каспаза-3/7 IncuCyte™ для анализа апоптоза (Essen BioScience 4440) во время обработки антителом и количественного определения флуоресцентных клеток с использованием системы IncuCyte® ZOOM System. В некоторых вариантах осуществления гибридный белок содержит полипептид. Используемые клеточные линии включали следующие: Colo-205 (ATCC® CCL-222™), Panc-1 (ATCC® CRL-1469™), HCT-116 (ATCC® CCL-247™), JL-1 (DSMZ ACC 596), NCI-H28 (ATCC® CRL-5820™), NCI-H460 (ATCC® HTB-177™), HT-29 (ATCC® HTB-38™). MSTO-211H (ATCC® CRL-2081™). В некоторых экспериментах для сшивки и дополнительной кластеризации гибридных белков настоящего раскрытия, нацеленных на DR5, использовали вторичное антитело (Jackson ImmunoResearch), специфичное к Fcγ IgG человека. В других экспериментах для сенсибилизации клеток к DR5-опосредованному апоптозу использовали 6 мкМ доксициклина.

Пример 3. Предварительно существующие аутоантитела, распознающие sdAb

[00137] Уже существующие человеческие антитела к VH (HAVH) в плазме человека или IVIG (очищенный IgG из объединенной плазмы людей, товарный знак Gamunex®-C) анализировали с помощью ИФА. Исследуемые материалы (TAS266, гибридные белки или терапевтические антитела) наносили на планшет для ИФА в ФСБР, планшет блокировали с использованием 3% БСА в ФСБР, после чего плазму человека или IVIG (как источник HAVH природного происхождения) разводили в ФСБР+0,1% полисорбат-20 (ФСБРT) и оставляли для связывания с планшетом. После промывки планшета с использованием ФСБРT, связанные плазменные антитела (HAVH) обнаруживали с помощью вторичных антител к легкой цепи (к Ig-каппа или Ig-лямбда цепям человека), конъюгированных с HRP, и проявляли с использованием субстрата TMB. Эта стратегия обнаружения HAVH с использованием вторичного антитела к легкой цепи совместима с исследуемыми материалами, в которых отсутствуют легкие цепи, включая TAS266 и описанные мультивалентные sdAb, и облегчает обнаружение HAVH любого изотипа. Наносили контрольные терапевтические антитела с легкими цепями каппа или лямбда, и полученные данные использовали в качестве эталона 100% связывания для нормализации данных и в качестве контрольных IgG для обратного вторичного антитела.

Пример 4. Анализы гепатотоксичности

[00138] Первичные гепатоциты человека или HepRG™ (Thermo Fisher Scientific), окончательно дифференцированные печеночные клетки, полученные из линии печеночных клеток-предшественников, использовали для оценки апоптоза гепатоцитов, опосредованного агонистом DR5. Все анализы проводили аналогично анализам апоптоза с использованием линий раковых клеток (пример 2). Объединенные IgG человека, полученные от множества доноров, IVIG (Gamunex®-C, Grifols), использовали как источник природных аутоантител, направленных на sdAb, которые также называют человеческими аутоантителами к VH (HAVH). В некоторых экспериментах проводили титрование IVIG или использовали IVIG в фиксированной концентрации. В некоторые анализы был включен FIX-TAS266, который является модифицированным вариантом TAS266, сконструированным для того, чтобы избежать распознавания аутоантителами HAVH. FIX-2TAS66 включает в себя модификации Leu11 и в C-концевой области каждого из четырех DR5 sdAb TAS266.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> INHIBRX LP

<120> МУЛЬТИВАЛЕНТНЫЕ И МУЛЬТИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ, СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С DR5S

<130> INHI-021001WO 322124-2098

<140> PCT/US16/42862

<141> 2016-07-18

<150> US 62/193,309

<151> 2015-07-16

<160> 190

<170> PatentIn версии 3.5

<210> 1

<211> 218

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 1

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

1 5 10 15

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

20 25 30

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

35 40 45

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

50 55 60

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

65 70 75 80

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

85 90 95

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

100 105 110

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

115 120 125

Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135 140

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150 155 160

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180 185 190

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200 205

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210 215

<210> 2

<211> 215

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 2

Pro Ala Pro Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

1 5 10 15

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

20 25 30

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp

35 40 45

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

50 55 60

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

65 70 75 80

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

85 90 95

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

100 105 110

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys

115 120 125

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

130 135 140

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

145 150 155 160

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

165 170 175

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

180 185 190

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

195 200 205

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210 215

<210> 3

<211> 217

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 3

Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

1 5 10 15

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

20 25 30

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr

35 40 45

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

50 55 60

Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His

65 70 75 80

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

85 90 95

Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln

100 105 110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120 125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135 140

Ser Asp Ile Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155 160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170 175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185 190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210 215

<210> 4

<211> 218

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 4

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

1 5 10 15

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

20 25 30

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp

35 40 45

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

50 55 60

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

65 70 75 80

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

85 90 95

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly

100 105 110

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

115 120 125

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135 140

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn

145 150 155 160

Asn Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180 185 190

Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr

195 200 205

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210 215

<210> 5

<211> 218

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 5

Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

1 5 10 15

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

20 25 30

Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp

35 40 45

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

50 55 60

Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

65 70 75 80

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

85 90 95

Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

100 105 110

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu

115 120 125

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135 140

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150 155 160

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn

180 185 190

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200 205

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

210 215

<210> 6

<211> 14

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 6

Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

1 5 10

<210> 7

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 7

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

1 5

<210> 8

<211> 11

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 8

Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys

1 5 10

<210> 9

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 9

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10

<210> 10

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 10

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Glu Pro Gly Gly

1 5 10

<210> 11

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 11

Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5

<210> 12

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 12

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5

<210> 13

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 13

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 14

<211> 15

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 14

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 15

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 15

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Glu Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ala Ala Lys Asn Met Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 16

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 16

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 17

<211> 125

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 17

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 18

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 18

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 19

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 19

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 20

<211> 125

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 20

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Cys Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 21

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 21

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Asp Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ala Ala Leu Asn Trp Ser Gly Asp Thr Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Arg Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Lys Arg Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 22

<211> 125

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 22

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

100 105 110

Tyr Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 23

<211> 126

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 23

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 24

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 24

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Leu Thr Gly Tyr

20 25 30

His Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Thr Tyr Gly Ile Trp Asp Arg Ala Gly Ala Ala Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Met Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ser Met Ala Val Arg Thr Tyr Tyr Ser Pro Arg Ser Tyr Asp

100 105 110

Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 25

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 25

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Leu Thr Gly Tyr

20 25 30

His Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Tyr Gly Ile Trp Asp Arg Ala Gly Ala Ala Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ser Met Ala Val Arg Thr Tyr Tyr Ser Pro Arg Ser Tyr Asp

100 105 110

Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 26

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 26

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Leu Thr Gly Tyr

20 25 30

His Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Tyr Gly Ile Trp Asp Arg Ala Gly Ala Ala Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ser Met Ala Val Arg Thr Tyr Tyr Ser Pro Arg Ser Tyr Asp

100 105 110

Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 27

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 27

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Ala Phe Val

35 40 45

Ala Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Thr Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 28

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 28

Ala Ile Arg Trp Asn Glu Gly Asp Thr Tyr

1 5 10

<210> 29

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 29

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 30

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 30

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

<210> 31

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 31

Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Ser Trp

1 5 10

<210> 32

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 32

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Thr Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

<210> 33

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 33

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

<210> 34

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 34

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

<210> 35

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 35

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Tyr Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 36

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 36

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Asp Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 37

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 37

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 38

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 38

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Cys Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 39

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 39

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Ala Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 40

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 40

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Glu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 41

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 41

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly His Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 42

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 42

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Asn Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 43

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 43

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Pro Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 44

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 44

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Gln Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 45

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 45

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Arg Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 46

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 46

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 47

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 47

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Thr Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 48

<211> 130

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 48

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Val Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly

130

<210> 49

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 49

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Ile

35 40 45

Ala Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Gly Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Gln Asn Met Gly Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Arg Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 50

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 50

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 51

<211> 122

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 51

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Ser Ile Phe Thr Asn Asn

20 25 30

Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val

35 40 45

Ala Gln Ile Thr Met Gly Gly Gly Ile Thr Asn Tyr Ala Pro Ser Met

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Asn Ala Glu Val Lys Ser Ala Asp Trp Gly Ala Tyr Ala Asn Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 52

<211> 122

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 52

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Phe Thr Asn Asn

20 25 30

Ala Met Ser Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val

35 40 45

Ser Ala Ile Thr Met Gly Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Asn Ala Glu Val Lys Ser Ala Asp Trp Gly Ala Tyr Ala Asn Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 53

<211> 122

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 53

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Phe Thr Asn Asn

20 25 30

Ala Met Ser Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Leu Val

35 40 45

Ser Gln Ile Thr Met Gly Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Asn Ala Glu Val Lys Ser Ala Asp Trp Gly Ala Tyr Ala Asn Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 54

<211> 125

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 54

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ala Ser Arg Asp Asp Ala Lys Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Arg Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Ile Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 55

<211> 125

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 55

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 56

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 56

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 57

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 57

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 58

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 58

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Gln Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 59

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 59

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Ala Gly Asn Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 60

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 60

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Gln Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 61

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 61

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Ala Gly Asn Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 62

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 62

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Ala Ser Asp Tyr

20 25 30

Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ala Ala Cys Asn Trp Ser Gly Glu Asp Thr Val Tyr Ala Tyr Ile Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Gly Asn Thr Val Ser

65 70 75 80

Leu Arg Met Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Pro Ser Phe Ser Arg Ser Val Leu Asp Gly Asn Leu Ser

100 105 110

Gln Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 63

<211> 127

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 63

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Ala Ser Asp Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Gly Gly Glu Asp Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Pro Ser Phe Ser Arg Ser Val Leu Asp Gly Asn Leu Ser

100 105 110

Gln Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 64

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 64

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Ala Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Arg Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ala Ala Ile Asn Trp Ser Gly Asp Ser Thr Tyr His Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp Ser Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Thr Lys Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Asp Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Ala Glu Ser Phe Ser Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Gly Met Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 65

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 65

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Ser Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Ala Glu Ser Phe Ser Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Gly Met Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 66

<211> 126

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 66

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Ser Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Ala Glu Ser Phe Ser Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Gly Met Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 67

<211> 126

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 67

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Arg Gly Arg Phe Lys Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Arg Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 68

<211> 126

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 68

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

<210> 69

<211> 126

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 69

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 70

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 70

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 71

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 71

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Cys Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 72

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 72

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Ala Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 73

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 73

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Glu Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 74

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 74

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ala Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 75

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 75

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 76

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 76

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Glu Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 77

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 77

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ala Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 78

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 78

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Ala Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Glu Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

<210> 79

<211> 121

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 79

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Gln Val Ser Gly Arg Thr Leu Ser Ala Tyr

20 25 30

Leu Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Asn Lys Val Arg Glu Tyr Leu

35 40 45

Gly Arg Ile Arg Trp Asn Glu Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asp Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Arg Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Arg Ser Ile Phe Asn Pro Ser Asp Gln Tyr Val Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 80

<211> 121

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 80

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Leu Ser Ala Tyr

20 25 30

Leu Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asn Glu Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Arg Ser Ile Phe Asn Pro Ser Asp Gln Tyr Val Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 81

<211> 121

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 81

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Arg Thr Leu Ser Ala Tyr

20 25 30

Leu Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Tyr Val

35 40 45

Ser Arg Ile Arg Trp Asn Glu Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Arg Ser Ile Phe Asn Pro Ser Asp Gln Tyr Val Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 82

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 82

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Ala Phe Val

35 40 45

Ala Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Met Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 83

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 83

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 84

<211> 128

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 84

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 85

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 85

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 86

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 86

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 87

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 87

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 88

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 88

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 89

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 89

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 90

<211> 123

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 90

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 91

<211> 124

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 91

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120

<210> 92

<211> 256

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 92

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Cys Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe

165 170 175

Val Cys Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

<210> 93

<211> 256

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 93

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe

165 170 175

Val Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

<210> 94

<211> 267

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 94

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

145 150 155 160

Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly

165 170 175

Lys Gly Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile

180 185 190

Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

195 200 205

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp

210 215 220

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly

225 230 235 240

Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr

245 250 255

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265

<210> 95

<211> 263

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 95

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly

130 135 140

Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser

145 150 155 160

Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro

165 170 175

Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr

180 185 190

Val Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp

195 200 205

Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu

210 215 220

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr

225 230 235 240

Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

245 250 255

Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260

<210> 96

<211> 266

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 96

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu

130 135 140

Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys

145 150 155 160

Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr Gly Met Ser Trp Phe Arg

165 170 175

Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ile Tyr Trp Ser

180 185 190

Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile

195 200 205

Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu

210 215 220

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly

225 230 235 240

Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

245 250 255

Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265

<210> 97

<211> 267

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 97

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

145 150 155 160

Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly

165 170 175

Lys Gly Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile

180 185 190

Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

195 200 205

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp

210 215 220

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly

225 230 235 240

Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr

245 250 255

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265

<210> 98

<211> 270

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 98

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser

130 135 140

Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala

145 150 155 160

Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln

165 170 175

Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly

180 185 190

Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser

195 200 205

Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg

210 215 220

Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr

225 230 235 240

Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly

245 250 255

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265 270

<210> 99

<211> 273

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 99

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

130 135 140

Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp

165 170 175

Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Ser

180 185 190

Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe

195 200 205

Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn

210 215 220

Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ser

225 230 235 240

Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp

245 250 255

Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly

260 265 270

Gly

<210> 100

<211> 276

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 100

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu

130 135 140

Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser

145 150 155 160

Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp

165 170 175

Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser

180 185 190

Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

195 200 205

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

210 215 220

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

225 230 235 240

Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr

245 250 255

Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala

260 265 270

Gly Gly Gly Gly

275

<210> 101

<211> 259

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 101

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser

145 150 155 160

Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu

165 170 175

Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp

180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr

195 200 205

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr

210 215 220

Tyr Cys Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly

225 230 235 240

Asp Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly

245 250 255

Gly Gly Gly

<210> 102

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 102

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

145 150 155 160

Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala

165 170 175

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu

180 185 190

Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg

195 200 205

Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala

210 215 220

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu

225 230 235 240

Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

245 250 255

Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265

<210> 103

<211> 268

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 103

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu

130 135 140

Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser

145 150 155 160

Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe

165 170 175

Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp

180 185 190

Asn Gly Glu Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr

195 200 205

Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser

210 215 220

Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Ala Leu Ser

225 230 235 240

Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265

<210> 104

<211> 261

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 104

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

130 135 140

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile

145 150 155 160

Ser Asn Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg

165 170 175

Glu Phe Val Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala

180 185 190

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

195 200 205

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

210 215 220

Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala

225 230 235 240

Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250 255

Ala Gly Gly Gly Gly

260

<210> 105

<211> 261

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 105

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Lys Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

130 135 140

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile

145 150 155 160

Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

165 170 175

Glu Phe Val Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala

180 185 190

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

195 200 205

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

210 215 220

Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala

225 230 235 240

Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250 255

Ala Gly Gly Gly Gly

260

<210> 106

<211> 264

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 106

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

145 150 155 160

Arg Ser Ile Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly

165 170 175

Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn

180 185 190

Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

195 200 205

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp

210 215 220

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile

225 230 235 240

Thr Ser Ala Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

245 250 255

Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260

<210> 107

<211> 267

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 107

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser

130 135 140

Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala

145 150 155 160

Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln

165 170 175

Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn

180 185 190

Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser

195 200 205

Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg

210 215 220

Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg Thr Pro Glu

225 230 235 240

Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

245 250 255

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265

<210> 108

<211> 261

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 108

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Lys Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

130 135 140

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile

145 150 155 160

Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

165 170 175

Glu Phe Val Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala

180 185 190

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

195 200 205

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

210 215 220

Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala

225 230 235 240

Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250 255

Ala Gly Gly Gly Gly

260

<210> 109

<211> 263

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 109

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val

130 135 140

Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr

145 150 155 160

Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu

165 170 175

Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr

180 185 190

Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys

195 200 205

Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala

210 215 220

Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser

225 230 235 240

Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

245 250 255

Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260

<210> 110

<211> 272

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 110

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln

130 135 140

Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg

145 150 155 160

Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly

165 170 175

Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile

180 185 190

Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg

195 200 205

Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met

210 215 220

Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro

225 230 235 240

Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr

245 250 255

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

260 265 270

<210> 111

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 111

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe

165 170 175

Val Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 112

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 112

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe

165 170 175

Leu Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 113

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 113

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe

165 170 175

Val Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 114

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 114

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe

165 170 175

Leu Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 115

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 115

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe

165 170 175

Val Ser Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 116

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 116

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Leu

35 40 45

Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly

130 135 140

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn

145 150 155 160

Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe

165 170 175

Leu Ala Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr Tyr Ala Glu Ser

180 185 190

Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val

195 200 205

Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp

225 230 235 240

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

245 250 255

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 117

<211> 267

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 117

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro

130 135 140

Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser

145 150 155 160

Asn Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu

165 170 175

Phe Val Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Glu

180 185 190

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr

195 200 205

Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr

210 215 220

Tyr Cys Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly

225 230 235 240

Asp Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

245 250 255

Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265

<210> 118

<211> 270

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 118

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

100 105 110

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu

130 135 140

Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg

145 150 155 160

Thr Val Ser Asn Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys

165 170 175

Asp Arg Glu Phe Val Ser Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr

180 185 190

Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala

195 200 205

Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala

225 230 235 240

Pro Tyr Gly Asp Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys

245 250 255

Pro Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

260 265 270

<210> 119

<211> 410

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 119

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

100 105 110

Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

130 135 140

Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp

165 170 175

Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ser Val

180 185 190

Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe

195 200 205

Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn

210 215 220

Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg

225 230 235 240

Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly

245 250 255

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

260 265 270

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

275 280 285

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

290 295 300

Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala

305 310 315 320

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly

325 330 335

Gly Asn Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg

340 345 350

Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala

355 360 365

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr

370 375 380

Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

385 390 395 400

Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

405 410

<210> 120

<211> 394

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 120

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Cys Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val

130 135 140

Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr

145 150 155 160

Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu

165 170 175

Arg Glu Phe Val Cys Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr

180 185 190

Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys

195 200 205

Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala

210 215 220

Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser

225 230 235 240

Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

245 250 255

Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

260 265 270

Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

275 280 285

Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala

290 295 300

Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Cys Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val

305 310 315 320

Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg

325 330 335

Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala

340 345 350

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser

355 360 365

Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

370 375 380

Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

385 390

<210> 121

<211> 394

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 121

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val

130 135 140

Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr

145 150 155 160

Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu

165 170 175

Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr Tyr

180 185 190

Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys

195 200 205

Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala

210 215 220

Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser

225 230 235 240

Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

245 250 255

Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

260 265 270

Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

275 280 285

Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala

290 295 300

Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val

305 310 315 320

Gly Ala Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg

325 330 335

Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala

340 345 350

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser

355 360 365

Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

370 375 380

Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

385 390

<210> 122

<211> 400

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 122

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Cys Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

145 150 155 160

Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly

165 170 175

Lys Gly Arg Glu Phe Val Cys Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile

180 185 190

Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Cys Ser Arg Asp Asn

195 200 205

Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp

210 215 220

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly

225 230 235 240

Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr

245 250 255

Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

260 265 270

Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu

275 280 285

Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp

290 295 300

Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val Cys Ala Ile Ser

305 310 315 320

Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe

325 330 335

Thr Cys Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser

340 345 350

Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Glu Ser

355 360 365

Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp

370 375 380

Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

385 390 395 400

<210> 123

<211> 400

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 123

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu

20 25 30

Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

145 150 155 160

Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly

165 170 175

Lys Gly Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile

180 185 190

Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

195 200 205

Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp

210 215 220

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly

225 230 235 240

Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr

245 250 255

Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Ser Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

260 265 270

Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu

275 280 285

Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp

290 295 300

Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Ser

305 310 315 320

Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe

325 330 335

Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser

340 345 350

Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Glu Ser

355 360 365

Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg Tyr Gly Met Asp

370 375 380

Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly

385 390 395 400

<210> 124

<211> 413

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 124

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser

20 25 30

Pro Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val

35 40 45

Ser Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Arg Gly Arg Phe Lys Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Arg Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

100 105 110

Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln

130 135 140

Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly

165 170 175

Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile

180 185 190

Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg

195 200 205

Phe Lys Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Ala Tyr Leu Gln Met

210 215 220

Asn Arg Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro

225 230 235 240

Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr

245 250 255

Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser

260 265 270

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val Gln

275 280 285

Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys

290 295 300

Ala Ala Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser Pro Val Gly Trp Phe Arg

305 310 315 320

Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ser Ala Ile Arg Trp Asp

325 330 335

Gly Val Gly Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Lys Asn

340 345 350

Ser Lys Asp Asn Ala Lys Arg Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Arg Leu

355 360 365

Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Pro Arg Arg Gly

370 375 380

Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln

385 390 395 400

Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Ala Gly Gly Gly Gly

405 410

<210> 125

<211> 593

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 125

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn

20 25 30

Asn Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val

35 40 45

Ala Gln Ile Thr Pro Gly Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn

85 90 95

Ala Glu Ile Leu Lys Arg Ala Tyr Ile Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

130 135 140

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln

145 150 155 160

Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg

165 170 175

Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn Asn Met Gly

180 185 190

Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val Ala Gln Ile

195 200 205

Thr Pro Gly Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe

210 215 220

Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn

225 230 235 240

Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ile

245 250 255

Leu Lys Arg Ala Tyr Ile Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp Gly Gln Gly

260 265 270

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

275 280 285

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

290 295 300

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu

305 310 315 320

Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys

325 330 335

Ala Ala Ser Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn Asn Met Gly Trp Tyr Arg

340 345 350

Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val Ala Gln Ile Thr Pro Gly

355 360 365

Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser

370 375 380

Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg

385 390 395 400

Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ile Leu Lys Arg

405 410 415

Ala Tyr Ile Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

420 425 430

Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

435 440 445

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

450 455 460

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly

465 470 475 480

Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser

485 490 495

Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn Asn Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro

500 505 510

Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val Ala Gln Ile Thr Pro Gly Gly Ile Thr

515 520 525

Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

530 535 540

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp

545 550 555 560

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ile Leu Lys Arg Ala Tyr Ile

565 570 575

Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

580 585 590

Ser

<210> 126

<211> 595

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 126

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn

20 25 30

Asn Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val

35 40 45

Ala Gln Ile Thr Pro Gly Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn

85 90 95

Ala Glu Ile Leu Lys Arg Ala Tyr Ile Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

130 135 140

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln

145 150 155 160

Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg

165 170 175

Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn Asn Met Gly

180 185 190

Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val Ala Gln Ile

195 200 205

Thr Pro Gly Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe

210 215 220

Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn

225 230 235 240

Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ile

245 250 255

Leu Lys Arg Ala Tyr Ile Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp Gly Gln Gly

260 265 270

Thr Leu Val Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

275 280 285

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

290 295 300

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu

305 310 315 320

Ser Gly Gly Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys

325 330 335

Ala Ala Ser Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn Asn Met Gly Trp Tyr Arg

340 345 350

Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val Ala Gln Ile Thr Pro Gly

355 360 365

Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser

370 375 380

Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg

385 390 395 400

Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ile Leu Lys Arg

405 410 415

Ala Tyr Ile Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

420 425 430

Thr Val Lys Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

435 440 445

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

450 455 460

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly

465 470 475 480

Gly Glu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser

485 490 495

Gly Thr Phe Asp Lys Ile Asn Asn Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro

500 505 510

Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val Ala Gln Ile Thr Pro Gly Gly Ile Thr

515 520 525

Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

530 535 540

Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp

545 550 555 560

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ile Leu Lys Arg Ala Tyr Ile

565 570 575

Asp Val Tyr Val Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Lys

580 585 590

Pro Gly Gly

595

<210> 127

<211> 218

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 127

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

1 5 10 15

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

20 25 30

Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp

35 40 45

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

50 55 60

Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

65 70 75 80

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

85 90 95

Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

100 105 110

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu

115 120 125

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135 140

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150 155 160

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn

180 185 190

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200 205

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

210 215

<210> 128

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 128

Ser Gly Leu Thr Phe Pro Asn Tyr Gly Met

1 5 10

<210> 129

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 129

Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe

1 5 10

<210> 130

<211> 17

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 130

Ala Val Thr Ile Arg Gly Ala Ala Thr Gln Thr Trp Lys Tyr Asp Tyr

1 5 10 15

Trp

<210> 131

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 131

Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr

1 5 10

<210> 132

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 132

Ala Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Phe

1 5 10

<210> 133

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 133

Val Ile Tyr Trp Ser Gly Gly Thr Val Tyr

1 5 10

<210> 134

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 134

Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr Ala Met

1 5 10

<210> 135

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 135

Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Ser

1 5 10

<210> 136

<211> 18

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 136

Ala Ala Ala Gln Ser Phe Arg Arg Gly Gly Ala Pro Tyr Gly Asp Asn

1 5 10 15

Tyr Trp

<210> 137

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 137

Ala Leu Asn Trp Gly Gly Asp Thr Thr Tyr

1 5 10

<210> 138

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 138

Ser Gly Arg Ala Leu Thr Gly Tyr His Met Ala Trp

1 5 10

<210> 139

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 139

Tyr Gly Ile Trp Asp Arg Ala Gly Ala Ala

1 5 10

<210> 140

<211> 17

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 140

Ala Ser Met Ala Val Arg Thr Tyr Tyr Ser Pro Arg Ser Tyr Asp Ser

1 5 10 15

Trp

<210> 141

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 141

Ser Gly Arg Ala Leu Thr Gly Tyr His Met Ser Trp

1 5 10

<210> 142

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 142

Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Leu Asp Met Gly Trp

1 5 10

<210> 143

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 143

Ala Ile Ser Arg Ser Gly Asp Asn Ile Tyr

1 5 10

<210> 144

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 144

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Met Asp Val Trp

20

<210> 145

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 145

Ala Val Asp Thr Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Met Asp Val Trp

20

<210> 146

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 146

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Met Asp Val Trp

20

<210> 147

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 147

Ala Val Glu Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Met Asp Val Trp

20

<210> 148

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 148

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Tyr Asp Val Trp

20

<210> 149

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 149

Ala Val Asp Ser Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Leu Asp Val Trp

20

<210> 150

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 150

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Ala Asp Val Trp

20

<210> 151

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 151

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly His Asp Val Trp

20

<210> 152

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 152

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Asn Asp Val Trp

20

<210> 153

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 153

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Pro Asp Val Trp

20

<210> 154

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 154

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Gln Asp Val Trp

20

<210> 155

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 155

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Arg Asp Val Trp

20

<210> 156

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 156

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Ser Asp Val Trp

20

<210> 157

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 157

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Thr Asp Val Trp

20

<210> 158

<211> 22

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 158

Ala Val Asp Ala Gln Pro Thr Tyr Ser Gly Gly Val Tyr Tyr Pro Arg

1 5 10 15

Tyr Gly Val Asp Val Trp

20

<210> 159

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 159

Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr Ala Leu Gly Trp

1 5 10

<210> 160

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 160

Ala Ile Asn Trp Asn Gly Glu Asn Arg Tyr

1 5 10

<210> 161

<211> 18

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 161

Ala Ala Ala Leu Ser Phe Arg Leu Gly Gly Glu Pro Tyr Gly Asp Ala

1 5 10 15

Tyr Trp

<210> 162

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 162

Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp

1 5 10

<210> 163

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 163

Ser Gly Ser Ile Phe Thr Asn Asn Ala Met

1 5 10

<210> 164

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 164

Gln Ile Thr Met Gly Gly Gly Ile Thr Asn

1 5 10

<210> 165

<211> 16

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 165

Asn Ala Glu Val Lys Ser Ala Asp Trp Gly Ala Tyr Ala Asn Tyr Trp

1 5 10 15

<210> 166

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 166

Ala Ile Thr Met Gly Gly Gly Ile Thr Tyr

1 5 10

<210> 167

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 167

Gln Ile Thr Met Gly Gly Gly Ile Thr Tyr

1 5 10

<210> 168

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 168

Ser Gly Arg Ser Ile Ser Asn Tyr Ala Met

1 5 10

<210> 169

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 169

Ala Ser Val Trp Asn Asn Gly Gly Asn Tyr

1 5 10

<210> 170

<211> 19

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 170

Val Val Ala Arg Thr Pro Glu Thr Pro Ile Thr Ser Ala Arg Gly Ala

1 5 10 15

Asn Tyr Trp

<210> 171

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 171

Ala Ser Val Trp Asn Gln Gly Gly Asn Tyr

1 5 10

<210> 172

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 172

Ala Ser Val Trp Asn Asn Ala Gly Asn Tyr

1 5 10

<210> 173

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 173

Ser Gly Arg Ala Ala Ser Asp Tyr Ala Val

1 5 10

<210> 174

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 174

Ala Cys Asn Trp Ser Gly Glu Asp Thr Val

1 5 10

<210> 175

<211> 21

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 175

Ala Ala Ala Pro Ser Phe Ser Arg Ser Val Leu Asp Gly Asn Leu Ser

1 5 10 15

Gln Ile Asp Tyr Trp

20

<210> 176

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 176

Ser Gly Arg Ala Ala Ser Asp Tyr Ala Met

1 5 10

<210> 177

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 177

Ile Asn Trp Gly Gly Glu Asp Thr Val

1 5

<210> 178

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 178

Ser Gly Arg Thr Phe Thr Asn Tyr Ala Met

1 5 10

<210> 179

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 179

Ala Ile Asn Trp Ser Gly Asp Ser Thr Tyr

1 5 10

<210> 180

<211> 18

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 180

Ala Ser Ala Glu Ser Phe Ser Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Gly Met Asn

1 5 10 15

Tyr Trp

<210> 181

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 181

Ser Val Ser Thr Phe Gly Thr Ser Pro Val

1 5 10

<210> 182

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 182

Ala Ile Arg Trp Asp Gly Val Gly Ala Tyr

1 5 10

<210> 183

<211> 20

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 183

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

1 5 10 15

Tyr Gly Tyr Trp

20

<210> 184

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 184

Ala Ile Arg Trp Glu Gly Val Gly Ala Tyr

1 5 10

<210> 185

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 185

Ala Ile Arg Trp Asp Ala Val Gly Ala Tyr

1 5 10

<210> 186

<211> 20

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 186

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Glu Ser Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

1 5 10 15

Tyr Gly Tyr Trp

20

<210> 187

<211> 20

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 187

Ala Leu Pro Arg Arg Gly Asp Ala Glu Leu Pro Ser Thr Val Lys Glu

1 5 10 15

Tyr Gly Tyr Trp

20

<210> 188

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 188

Ser Gly Arg Thr Leu Ser Ala Tyr Leu Met

1 5 10

<210> 189

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 189

Arg Ile Arg Trp Asn Glu Gly Asp Thr Tyr

1 5 10

<210> 190

<211> 15

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> химически синтезированная

<400> 190

Ala Ala Arg Ser Ile Phe Asn Pro Ser Asp Gln Tyr Val Tyr Trp

1 5 10 15

<---

Claims

1. Выделенный полипептид, который связывается с рецептором смерти 5 (DR5) и содержит множество DR5-связывающих доменов (DR5BD), причем каждый DR5BD представляет собой VHH, содержащий CDR1, CDR2 и CDR3, соответственно содержащие аминокислотные последовательности:

a) SEQ ID NO: 128, 129 и 130;

b) SEQ ID NO: 128, 131 и 130;

c) SEQ ID NO: 128, 132 и 130;

d) SEQ ID NO: 128, 133 и 130;

e) SEQ ID NO: 134, 137 и 136;

f) SEQ ID NO: 142, 143 и 144;

g) SEQ ID NO: 142, 143 и 147;

h) SEQ ID NO: 168, 169 и 170; или

i) SEQ ID NO: 181, 182 и 183,

и причем каждый VHH содержит одну и ту же аминокислотную последовательность, и причем смежные DR5BD функционально связаны аминокислотным линкером.

2. Выделенный полипептид по п. 1, в котором каждый DR5BD независимо представляет собой VHH, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 85% или по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 98%, или по меньшей мере 99 % идентична аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 15-20, 22, 23, 27, 29, 30, 34, 38, 54-57, 67, 69, 70, 75, 82 и 84-91.

3. Выделенный полипептид по п. 2, в котором каждый DR5BD представляет собой, независимо, VHH, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 15-20, 22, 23, 27, 29, 30, 34, 38, 54-57, 67, 69, 70, 75, 82 и 84-91.

4. Выделенный полипептид по п. 1, в котором каждый DR5BD представляет собой VHH, содержащий CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 128, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 131, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 130.

5. Выделенный полипептид по п. 4, в котором каждый DR5BD представляет собой VHH, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 85% или по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 98%, или по меньшей мере 99% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 87.

6. Выделенный полипептид по п. 4, в котором каждый DR5BD представляет собой VHH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 87.

7. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-6, в котором множество DR5BD составляет два DR5BD.

8. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-6, в котором множество DR5BDs составляет четыре DR5BD.

9. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-6, в котором множество DR5BDs составляет шесть DR5BD.

10. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-6, причем полипептид содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 92-100 и 104-118.

11. Выделенный полипептид по п. 10, причем полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113.

12. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-6, причем полипептид содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 119 и 122-124.

13. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-12, причем выделенный полипептид содержит шарнирную область иммуноглобулина и область Fc иммуноглобулина.

14. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-6, 10 или 11, причем полипептид имеет структуру: DR5BD-линкер-DR5BD-линкер-шарнир-Fc, в которой шарнир представляет собой шарнирную область иммуноглобулина, и Fc представляет собой область Fc иммуноглобулина.

15. Выделенный полипептид по п. 1 или 3, в котором шарнирная область иммуноглобулина содержит аминокислотную последовательность, выбранную из EPKSSDKTHTCPPC (SEQ ID NO: 6), DKTHTCPPC (SEQ ID NO: 7), ESKYGPPCPPC (SEQ ID NO: 8).

16. Выделенный полипептид по любому из пп. 13-15, в котором область Fc иммуноглобулина представляет собой область Fc IgG1, область Fc IgG2 или область Fc IgG3 Fc.

17. Выделенный полипептид по любому из пп. 13-16, в котором область Fc иммуноглобулина содержит аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1-5 или 127.

18. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-17, причем полипептид представляет собой гомодимер в физиологических условиях.

19. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-18, в котором каждый линкер состоит из 5-20 аминокислот.

20. Выделенный полипептид по п. 19, в котором по меньшей мере один линкер состоит преимущественно из глицина и серина.

21. Выделенный полипептид по п. 20, в котором каждый линкер состоит преимущественно из глицина и серина.

22. Выделенный полипептид по п. 20, в котором по меньшей мере один линкер содержит аминокислотную последовательность, выбранную из GGSGGS (SEQ ID NO: 11); GGSGGSGGS (SEQ ID NO: 12); GGSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 13); и GGSGGSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 14).

23. Выделенный полипептид по п. 21, в котором каждый линкер независимо содержит аминокислотную последовательность, выбранную из GGSGGS (SEQ ID NO: 11); GGSGGSGGS (SEQ ID NO: 12); GGSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 13); и GGSGGSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 14).

24. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-23, в котором каждый VHH представляет собой гуманизированный VHH.

25. Выделенный полипептид, который связывается с рецептором смерти 5 (DR5), причем полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113, слитую с областью Fc полипептида SEQ ID NO: 2, и причем полипептид представляет собой гомодимер в физиологических условиях.

26. Применение полипептида по любому из пп. 1-24 для лечения новообразований у субъекта.

27. Применение по п. 26, в котором новообразование представляет собой рак.

28. Применение по п. 27, в котором рак представляет собой рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак матки или шейки матки, рак яичников, рак предстательной железы, рак яичек, рак пищевода, желудочно-кишечный рак, рак поджелудочной железы, колоректальный рак, рак толстой кишки, рак почки, рак головы и шеи, рак легкого, рак желудка, рак половых клеток, рак кости, рак печени, рак щитовидной железы, рак кожи, новообразование центральной нервной системы, лимфому, лейкоз, миелому, саркому, мезотелиому, лейкоз или связанный с вирусом рак.

29. Применение по п. 27 или 28, где рак представляет собой метастатический рак, рефрактерный рак или рецидивирующий рак.

30. Применение полипептида по п. 25 для лечения новообразований у субъекта.

31. Применение по п. 33, где новообразование представляет собой рак.

32. Применение по п. 31, где рак представляет собой рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак матки или шейки матки, рак яичников, рак предстательной железы, рак яичек, рак пищевода, желудочно-кишечный рак, рак поджелудочной железы, колоректальный рак, рак толстой кишки, рак почки, рак головы и шеи, рак легкого, рак желудка, рак половых клеток, рак кости, рак печени, рак щитовидной железы, рак кожи, новообразование центральной нервной системы, лимфому, лейкоз, миелому, саркому, мезотелиому, лейкоз или связанный с вирусом рак.

33. Применение по п. 31 или 32, где рак представляет собой метастатический рак, рефрактерный рак или рецидивирующий рак.

34. Применение полипептида по любому из пп. 1-24 для модуляции иммунных клеток для усиления разрушения опухоли у субъекта.

35. Применение полипептида по п. 25 для модуляции иммунных клеток для усиления разрушения опухоли у субъекта.

36. Применение полипептида по любому из пп. 1-24 для уменьшения или истощения числа регуляторных Т-клеток в опухоли у субъекта.

37. Применение полипептида по п. 25 для уменьшения или истощения числа регуляторных Т-клеток в опухоли у субъекта.

38. Применение полипептида по любому из пп. 1-24 для лечения, облегчения симптома, облегчения и/или замедления прогрессии аутоиммунного заболевания или расстройств у субъекта.

39. Применение полипептида по п. 25 для лечения, облегчения симптома, облегчения и/или замедления прогрессии аутоиммунного заболевания или расстройств у субъекта.

40. Применение полипептида по любому из пп. 1-24 для лечения, облегчения симптома, облегчения и/или замедления прогрессии вирусной, бактериальной или паразитарной инфекции у субъекта.

41. Применение полипептида по п. 25 для лечения, облегчения симптома, облегчения и/или замедления прогрессии вирусной, бактериальной или паразитарной инфекции у субъекта.