RU2713656C2

RU2713656C2 - СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ДИСРЕГУЛЯЦИИ ЯДЕРНОГО ФАКТОРА КОРОТКОЦЕПОЧЕЧНОГО ЭНХЕНСЕРА КАППА АКТИВИРОВАННОЙ КЛЕТКИ В (NF-κB) В ОРГАНИЗМЕ, НУЖДАЮЩЕМСЯ В ЭТОМ, С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМПОЗИЦИЙ МЕМБРАН ЯИЧНОЙ СКОРЛУПЫ

Info

Publication number: RU2713656C2
Application number: RU2017130716A
Authority: RU
Inventors: Кевин Дж. РАФФ
Original assignee: Есм Текнолоджис, Ллс
Priority date: 2015-10-08
Filing date: 2015-10-08
Publication date: 2020-02-06
Also published as: KR20180063091A; AU2015411324B2; EP3359170B1; DK3359170T3; EP3359170A4; RS63620B1; AU2015411324A1; RU2017130716A; WO2017062016A1; US20180339002A1; PL3359170T3; US10328104B2; ES2927890T3; EP3359170A1; RU2017130716A3; CA2970101A1; CN107206029A; JP2018531212A; MX2017007130A; HUE060219T2

Abstract

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ активации ядерного фактора короткоцепочечного энхенсера каппа активированных клеток В (NF-κВ) в пищеварительном тракте организма, нуждающегося в этом. Способ содержит введение упомянутому организму эффективного количества композиции, состоящей из мембран яичной скорлупы природного происхождения. Изобретение обеспечивает эффективное лечение состояний, связанных с дисрегуляцией NF-κВ. 13 з.п. ф-лы, 5 ил., 13 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к применению композиций мембран яичной скорлупы для активации уровней ядерного фактора короткоцепочечного энхенсера каппа активированных клеток В ("NF-κB") в пищеварительном тракте организма, нуждающегося в этом, и способы лечения состояний, связанных с дисрегуляцией NF-κB.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Воспаление играет критическую роль в защите организма от возбудителей инфекции и в восстановлении тканей после ранений. Однако, если воспаление не регулировать должным образом, оно может приводить к значительным отрицательным проявлениям внутри организма. Общепринято, что хроническое воспаление вносит вклад в патогенез бесчисленного множества заболеваний. Этот тип воспалений обычно приводит к разрушению тканей и/или недостаточности органов и может вызвать симптомы, которые могут оказывать сильное влияние на качество жизни тех, кто поражен воспалением.

Если причиной разрушения тканей является физический, химический или биологический фактор, то сначала фосфолипиды в клеточных мембранах метаболизируют до арахидоновой кислоты, которая в дальнейшем метаболизирует до простагландинов с помощью хорошо известных ферментов циклооксигеназы (СОХ-1 и СОХ-2). Полученные простагландины в основном вызывают хорошо известные внешние эффекты, видимые в месте поражения, включая эдему (отек), эритему (покраснение), местную лихорадку и боль.

Одновременно, локальными клетками, а также иммунными клетками (когда они поступают в место повреждения) высвобождаются цитокины, связанные с воспалением, в особенности интерлейкин 1 бета (IL-Iβ) и фактор некроза опухоли альфа (TNF-α). Эти цитокины, связанные с воспалением, усиливают как воспалительный процесс, так и болевой каскад по механизмам обратной связи, как показано на диаграмме на Фигуре 1.

Внутри этого каскада хронические воспалительные состояния могут затрагивать любой из ряда ферментов или рецепторов. Например, кортикостероиды, подавляющие активность фосфолипазы А2, замедляя высвобождение арахидоновой кислоты при конверсии фосфолипидов внутри клеточной мембраны, а также аспирин (ацетилсалициловая кислота), один из наиболее широко известных нестероидных противоспалительных лекарственных средств (NSAID), не селективно и необратимо ингибируют циклооксигеназу-1 (СОХ-1), один из первичных ферментов в продуцировании нисходящих в каскаде простагландинов. Однако, почти нет исследований, посвященных конкретно изучению роли, которую играет в этом противоспалительном каскаде NF-κB.

NF-κB представляет собой семью белковых комплексов, обнаруживаемых в цитоплазме почти всех типов клеток животных, а об активности связывания ДНК данной семьей транскрипционных факторов впервые сообщили в 1986 году. Будучи активированным и перемещенным в ядро, NF-κВ контролирует транскрипцию множества генов, включаемых в быстрый ответ на отрицательные или вредные внешние клеточные стимулы, как показано на диаграмме на Фигуре 2.

Активный NF-κВ представляет собой гетеродимерный белок, состоящий или из р50 мономера с RelA мономером (p50/RelA), либо р52 мономера с RelB мономером (p52/RelB). Rel белки (RelA и RelB) представляют собой высоко консервативный (от вида к виду) ДНК-связывающий домен, известный как гомологичный домен Rel (RHD), также содержащий трансактивирующий домен (TAD), способный активировать экспрессию целевых генов. Про мономеры р50 и р52 известно, что они представляют собой белки NF-κB и состоят в основном из анкириновых повторов с двумя N-терминальными сериновыми остатками. Они также содержат домен RHD, однако в них отсутствует TAD, присутствующий в белках Rel и потому они не могут активировать экспрессию генов, ни в их мономерной форме, ни в гомодимерной (р50/р50 или р52/р52) форме. Для активации последовательностей ДНК, известных как κВ сайты, они должны быть связаны с белком Rel.

До активации p50/RelA гетеродимер находится в цитоплазме в виде неактивного комплекса, в котором он связан с ингибитором кВ, известным как IκВα, а гетеродимер p52/RelB находится в цитоплазме в виде неактивного гетеродимера pl00/RelB. Существует два общепринятых пути активации NF-κB - канонический или классический путь и неканонический или альтернативный путь. При каноническом пути IκВα последовательно фосфорилируется ингибитором κВ киназы (IKK-α), нацеливая IκВα на убиквитинирование и в конечном итоге на окончательную деструкцию в протеозоме. При неканоническом пути р100, действующий как ингибитор κВ (IκВ), последовательно фосфорилируется ингибитором κВ киназы (IKK-β) и частично деградирует в активный белок р52. Эти IκВ киназы (IKK-α и IKK-β) существуют в цитоплазме в тримерной форме, известной как IKK комплекс. IKK связаны с регуляторным каркасным белком NF-κВ, незаменимым модулятором (NEMO), для предотвращения непрерывной активации NF-κВ. При любом метаболическом пути (каноническом или неканоническом) IKK комплекс активируют, когда сигнальные молекулы связываются рецепторами поверхности клеток. Бактериальные или вирусные антигены, разнообразные цитокины (например, IL-Iβ, TNF-α, и так далее), оксидативный стресс, ультрафиолетовое облучение и свободные радикалы являются только некоторыми из стимулов, известных в качестве триггеров активации того или иного из метаболических путей NF-κB путем прямого связывания этих рецепторов поверхности клетки или понуждая образовывать другие сигнальные молекулы, которые в дальнейшем связываются с рецепторами.

NF-κB первоначально исследовали ввиду его важной роли в регулировании иммунного ответа на инфекцию. Однако, спустя десятилетия после открытия, дисрегуляцию NF-κB стали связывать с многочисленными типичными воспалительными заболеваниями, такими как сепсис, астма, ревматоидный артрит (RA), и воспалительное заболевание кишечника (IBD). Интересно, что ряд заболеваний, не являющихся по своей природе явно воспалительными, такие как атеросклероз, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, диабет и некоторые виды рака, стали также связывать с дисрегуляцией NF-κB.

В целом дисрегуляция NF-κB, включаемая в патологию заболеваний, приводит к их избыточной активации, неправильной активации или хронической активации. При типичном воспалительном заболевании, таком как астма, раздражители дыхательных путей, только умеренно раздражающие здоровый дыхательные пути, вызывают тяжелое воспаление в дыхательных путях при астме (то есть избыточная активация). При воспалительном заболевании кишечника, таком как болезнь Крона или непереносимость глютена, компоненты персональной диеты, не раздражающие здоровый кишечник, вызывают острое воспаление, которое может привести к тяжелому поражению кишечника (то есть неправильная активация). Или, в случае ревматоидного артрита, организм больного, страдающего RA, становится чувствительным к фрагментам изношенного хряща (то есть глюкозоаминоглюканам, коллагену типа II, и так далее), что приводит к аутоиммунной реакции на свой собственный хрящ, приводя в конечном итоге к дополнительному и тяжелому поражению хряща (то есть хроническая активация). Логично, что для лечения заболеваний такого рода необходимо найти способ каким-либо образом деактивировать или ингибировать NF-κB, чтобы восстановить его правильное функционирование.

Заявители неожиданно обнаружили, что активация NF-κB в пищеварительном тракте организма оказывает положительное влияние на многие заболевания и состояния, а также лечение дисрегуляции NF-κB. Не углубляясь в теорию, заявители полагают, что активация NF-κB в пищеварительном тракте организма приводит к уменьшению или систематической деактивации NF-κB в организме.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Представляемое изобретение предлагает способ активирования NF-κB в пищеварительном тракте организма, нуждающегося в этом. Способ содержит пероральное введение в организм эффективного количества композиции, состоящей в основном из мембран яичной скорлупы и/или изолятов мембран яичной скорлупы и/или гидролизатов мембран яичной скорлупы.

Представляемое изобретение также предлагает способ систематического уменьшения NF-κB в организме, нуждающемся в этом. Способ содержит пероральное введение в организм эффективного количества композиции, состоящей в основном из мембран яичной скорлупы, и/или изолятов мембран яичной скорлупы и/или гидролизатов мембран яичной скорлупы.

В одном варианте осуществления изобретения организм, нуждающийся в этом, страдает от заболеваний или состояний легких. Заболевание или состояние легких выбирают из группы, состоящей из астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита, эмфиземы, муковисцидоза, пульмонарной эдемы, саркоидоза, синдрома острой дыхательной недостаточности, пневмокониоза, легочной гипертензии, гиперчувствительного пневмонита и аллергий.

Заболевание и состояние легких также выбирают из группы, состоящей из периодического застоя в легких в легкой форме; периодического кашля в легкой форме; периодической заложенности носовых пазух в легкой форме; периодического чихания или периодического воспаления легких в легкой форме.

В другом варианте осуществления изобретения организм, нуждающийся в этом, страдает от заболевания или состояния, влияющего на головной мозг или нервную систему. Заболевание или состояние, влияющее на головной мозг и нервную систему, выбирают из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, фибромиалгии, преходящей ишемической атаки, васкулита, церебральной эдемы, рассеянного склероза, болезни Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона, эпилепсии и нейродегенерации.

Заболевание или состояние, влияющее на головной мозг или нервную систему, также выбирают из группы, состоящей из периодического беспамятства; периодического нервного покалывания в легкой форме или фантомных ощущений, или периодических мышечных судорог в легкой форме.

В еще одном варианте осуществления изобретения организм, нуждающийся в этом, страдает от сердечно-сосудистого заболевания или состояния. Сердечно-сосудистое заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из атеросклероза, кардиомиопатии, Синдрома Марфана, перикардита, болезни сердечных клапанов, ревматического заболевания сердца, заболевания периферических артерий, венозного тромбоза, воспалительного заболевания, гипертензии, гиперлипидемии и гипертриглицеридемии.

Сердечно-сосудистое заболевание или состояние также выбирают из группы, состоящей из воспаления сосудов в легкой форме; умеренно повышенного давления крови; умеренно повышенного холестерина или умеренно повышенного уровня триглицеридов.

В способе по изобретению организм, нуждающийся в этом, представляет собой также организм, страдающий от заболевания или состояния желудочно-кишечной системы. Заболевание или состояние желудочно-кишечной системы выбирают из группы, состоящей из болезни Крона, неспецифического язвенного колита, гастрита, дивертикулита, синдрома раздраженного кишечника, глютеновой энтеропатии, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, диспепсии, пептической язвы и язвы двенадцатиперстной кишки.

Заболевание или состояние желудочно-кишечной системы также выбирают из группы, состоящей из периодической диареи в легкой форме; периодической констипации в легкой форме; периодического спазма желудка в легкой форме или боли; воспаления желудка в легкой форме; воспаления кишечника в легкой форме или воспаления толстой кишки в легкой форме.

Согласно варианту осуществления изобретения, организм, нуждающийся в этом, страдает от рака. Рак выбирают из группы, состоящей из лейкоза, лимфомы, рака молочной железы, рака мочевого пузыря, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и рака щитовидной железы.

В другом варианте осуществления изобретения, организм, нуждающийся в этом, страдает от заболевания, выбранного из группы, состоящей из стеатогепатита неалкогольной природы, гепатита, нефрита, дерматита, конъюнктивита и гингивита.

Изобретение предназначено для организма, нуждающегося в этом, страдающего от состояния, при котором произошла дисрегуляция NF-κB.

Согласно варианту осуществления изобретения, способ дополнительно содержит совместное введение в упомянутый организм противовоспалительного агента.

Противовоспалительный агент выбирают из группы, состоящей из ингалируемого кортикостероида; кортикостероида, вводимого перорально, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства; омега-3 или омега-6 полиненасыщенной жирной кислоты; вида Босвеллия или экстракта Босвеллия; куркумы длинной или экстракта куркумы длинной; куркумина или куркуминоидов; белой коры ивы или экстракта белой коры ивы; протеолитических ферментов; коллагена или гидролизатов коллагена; экстракта коры сосны; витамина или предшественника витамина и минерала.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фигура 1: Данная диаграмма иллюстрирует механизм ответа на воспалительный процесс в организме.

Фигура 2: Данная диаграмма иллюстрирует влияние активированного NF-κB на гены, включаемые в ответ на отрицательные или вредные внешние клеточные стимулы.

Фигура 3: Данная диаграмма иллюстрирует активность ферментации NF-κB и ферментативных гидролизатов мембран яичной скорлупы в одноядерных клетках периферической крови человека in vitro.

Фигура 4: Данная диаграмма иллюстрирует активность ферментации NF-κB, ферментативных и химических гидролизатов мембран яичной скорлупы в моноцитарной линии клеток человека ТНР-1 in vitro.

Фигура 5: Данный график иллюстрирует измерения с применением штангенциркуля отека лодыжки от 9 до 17 суток у крыс с индуцированным коллагеном артритом: в необработанном контроле, контроле с артритом, после обработки метотрексатом и после обработки NEM.

ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способам активации NF-κB в пищеварительном тракте организма, нуждающегося в этом. Настоящее изобретение также относится к способам систематической деактивации NF-κB в организме, нуждающемся в этом. Способы содержат пероральное введение в организм эффективного количества композиции, состоящей в основном из мембран яичной скорлупы и/или изолятов мембран яичной скорлупы и/или гидролизатов мембран яичной скорлупы.

Термин "активация" означает, что активируют эндогенный NF-κB, присутствующий в клетках организма, то есть понуждают к действию посредством иммунного ответа, провоцируемого в пищеварительном тракте организма в ответ на композицию мембраны яичной скорлупы. В результате упомянутой активации увеличиваются уровни активного NF-κB в пищеварительном тракте организма.

Термин "системная деактивация" означает, что в теле организма, нуждающегося в этом, уменьшается количество активного NF-κB. "Организм" охватывает все части физического тела организма. Организм включает в себя конечности, системы органов, головной мозг, кожу и скелетную систему тела организма.

Термин "пищеварительная система" означает, что включается пищеварительный тракт во всей свой полноте, пищеварительная система включает все части пищеварительной системы организма от пилоруса до анального отверстия. Пищеварительная система также означает, что включается передняя кишка, средняя кишка и задняя кишка организма. Это включает, например, желудок, толстую кишку и тонкую кишку. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, активация NF-κB происходит в тонкой и толстой кишке.

Термин "организм, нуждающийся в этом" означает любой организм, получающий пользу от деактивации NF-κB. Организм представляет собой любое млекопитающее, земноводное, пресмыкающееся, рыбу или птицу. Млекопитающие включают в себя, например, человека, домашних животных и сельскохозяйственных животных. Домашние животные включают в себя, например, кошек и собак. Сельскохозяйственные животные включают в себя, например, коров, лошадей, свиней, кур и овец. Земноводные включают в себя любое земноводное, включая, например, лягушек, жаб, саламандр и тритонов. Пресмыкающиеся включают в себя любое пресмыкающееся, включая, например, змей, ящериц и черепах. Рыбы включают в себя любую рыбу, включая морских и пресноводных рыб. Птицы включают в себя любую птицу.

Деактивация NF-κB происходит в любой части физического тела организма. Например, деактивация NF-κB происходит в легких, головном мозге, сердце или пищеварительной системе. В предпочтительном варианте осуществления изобретения деактивация NF-κB происходит в организме системно.

Примеры «организма, нуждающегося в этом», включают организм, который страдает от заболевания или состояния легких, заболевания или состояния, поражающего головной мозг или нервную систему, сердечно-сосудистого заболевания или состояния, заболевания или состояния желудочно-кишечной системы, от рака, других заболеваний и состояний или состояния, при которых имеет место дисрегуляция NF-κB.

Заболевание и состояние легких может представлять собой любое заболевание и состояние легких. Например, заболевание и состояние легких выбирают из группы, состоящей из астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита, эмфиземы, муковисцидоза, пульмонарной эдемы, саркоидоза, синдрома острой дыхательной недостаточности, пневмокониоза, легочной гипертензии, гиперчувствительного пневмонита и аллергий. Кроме того, заболевание и состояние легких также выбирают из группы, состоящей из периодического застоя в легких в легкой форме; периодического кашля в легкой форме; периодической заложенности носовых пазух в легкой форме; периодического чихания или периодического воспаления легких в легкой форме.

Заболевание или состояние, влияющее на головной мозг или нервную систему, может представлять собой любое заболевание или состояние, влияющее на головной мозг или нервную систему. Например, заболевание или состояние, влияющее на головной мозг или нервную систему, выбирают из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, фибромиалгии, преходящей ишемической атаки, васкулита, церебральной эдемы, рассеянного склероза, болезни Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона, эпилепсии и нейродегенерации.

Заболевание или состояние, влияющее на головной мозг или нервную систему, также выбирают из группы, состоящей из периодического беспамятства; периодического нервного покалывания в легкой форме или фантомных ощущений; или периодических мышечных судорог в легкой форме.

Сердечно-сосудистое заболевание или состояние может представлять собой любое заболевание или состояние, поражающее сердечно-сосудистую систему. Например, сердечно-сосудистое заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из атеросклероза, кардиомиопатии, синдрома Марфана, перикардита, болезни сердечных клапанов, ревматического заболевания сердца, заболевания периферических артерий, венозного тромбоза воспалительной болезни сердца, гипертензии, гиперлипидемии и гипертриглицеридемии. Сердечно-сосудистое заболевание или состояние также выбирают из группы, состоящей из воспаления сосудов в легкой форме; умеренно повышенного давления крови; умеренно повышенного уровня холестерина или умеренно повышенного уровня триглицеридов.

Заболевание или состояние желудочно-кишечной системы может представлять собой любое заболевание или состояние, поражающее желудочно-кишечную систему организма. Например, заболевание или состояние желудочно-кишечной системы выбирают из группы, состоящей из Болезни Крона, неспецифического язвенного колита, гастрита, дивертикулита, синдрома раздраженного кишечника, глютеновой энтеропатии, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, диспепсии, пептической язвы и язвы двенадцатиперстной кишки. Заболевание или состояние желудочно-кишечной системы также выбирают из группы, состоящей из периодической диареи в легкой форме; периодической констипации в легкой форме; периодического спазма желудка в легкой форме или боли; воспаления желудка в легкой форме; воспаления кишечника в легкой форме или воспаления толстой кишки в легкой форме.

Рак может представлять собой любую форму рака. Например, рак выбирают из группы, состоящей из лейкоза, лимфомы, рака молочной железы, рака мочевого пузыря, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и рака щитовидной железы.

Другие заболевания включают любое заболевание, которое могло бы оказать благоприятное воздействие благодаря активации NF-κB в пищеварительном тракте. Например, другие заболевания выбирают из группы, состоящей из стеатогепатита неалкогольной природы, гепатита, нефрита, дерматита, конъюнктивита и гингивита.

Заболевания и состояния, в которых происходит дисрегуляция NF-κB, включают в себя любое заболевание или состояние, в котором одним из способствующих факторов является дисрегуляция NF-κB. Например, включают в себя заболевания или состояния, в которых этиология и/или патология заболевания связана с дисрегуляцией и относится к болезненному состоянию, при котором NF-κB чрезмерно активирован (либо избыточно активирован, либо неправильно активирован или хронически активирован) на клеточном уровне, либо локально, или системно и которое вносит вклад в развитие и/или прогрессию болезненного состояния, либо непосредственно, либо косвенно, поражая другие системы организма.

Дополнительно, за организм с ненормально активированным NF-κB принимают организм, в котором внутриклеточные уровни не ингибированного или активного NF-κB повышены по сравнению с внутриклеточными уровнями в соответствующем нормальном состоянии организма одного и того же вида, имеющего тот же самый пол, массу, рост и/или возраст, как и организм, подвергаемый лечению. Этот эффект обычно происходит в результате активации NF-κB, что приводит к последующей активации иммунной системы, что в свою очередь приводит к ненормальному хроническому воспалительному ответу. В случае астмы такое воспаление возникает в легких. В случае болезни Альцгеймера такое воспаление возникает в ткани головного мозга. В случае артрита такое воспаление возникает в тканях сустава (например, сухожилиях, связках, синовиальной оболочке, суставном хряще, и так далее). В случае сердечнососудистого заболевания такое воспаление возникает в ткани сердца или стенках кровеносных сосудов. В случае диабета воспаление возникает в поджелудочной железе. В случае болезни раздраженного кишечника (IBD) такое воспаление возникает в различных областях желудочно-кишечного тракта, в зависимости от конкретного типа IBD (например, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника (IBS), неспецифический язвенный колит, и так далее). В случае рассеянного склероза такое воспаление возникает в нервных и мышечных тканях.

В еще одном аспекте изобретения, организм, нуждающийся в этом, находится в состоянии "доклинической стадии болезни". Например, в доклинической стадии болезни дисрегуляция NF-κB может происходить на самой ранней стадии, но при этом отсутствуют или являются несущественными клинические симптомы заболевания, которые могли бы позволить диагностировать такое заболевание, и иначе говоря, субъект считают «здоровым». Хотя субъект и считается «здоровым» введение композиции принесло бы ему пользу, что является объектом данного изобретения, и такое лечение возможно способно даже предотвратить переход заболевания субъекта в клиническую стадию. Таким образом, в одном варианте осуществления изобретения организм, нуждающийся в этом, представляет собой «здоровый» организм.

Введение

Согласно изобретению композицию, состоящую в основном из мембран яичной скорлупы и/или изолятов мембран яичной скорлупы и/или гидролизатов мембран яичной скорлупы, вводят перорально в организм, нуждающийся в этом. Пероральное введение включает в себя введение через рот в любой подходящей форме. Например, подходящие формы включают в себя пилюли, таблетки, капсулы, порошки, жевательные резинки, пастилки и эликсиры. Композицию также вводят перорально в качестве составляющего пищевых продуктов, диетических добавок или лекарственных препаратов.

Специалист в данной области техники может предположить другие виды перорального введения и подразумевается, что они охватываются объемом настоящего изобретения.

Эффективное количество

Термин "эффективное количество" означает любое количество, эффективно активирующее NF-κB в пищеварительном тракте организма, нуждающегося в этом. Данное количество определяют, принимая во внимание массу тела организма. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, ежедневная доза композиции, состоящей в основном из мембран яичной скорлупы и/или изолятов мембран яичной скорлупы и/или гидролизатов мембран яичной скорлупы составляет приблизительно 500 мг в сутки для человека средней величины (например, 132 фунта или 60 кг). Для более мелких организмов, таких как псовые или кошачьи, ежедневная доза композиции составляет 15 мг/кг (6,8 мг/фунт). Для более крупных организмов, таких как лошадь, ежедневная доза композиции составляет 5 мг/кг (2,3 мг/фунт).

Ежедневную дозу вводят всю целиком или, разделив на 2 или более мелких дозы, добавляя в организм до приблизительной ежедневной дозы. Например, дозу в приблизительно 500 мг/сутки можно вводить утром в дозе приблизительно 250 мг и вечером в дозе 250 мг. Также рассматриваются лекарственные формы с замедленным высвобождением.

Композиции по изобретению

Композиции по изобретению состоят в основном из мембран яичной скорлупы и/или изолятов мембран яичной скорлупы и/или гидролизатов мембран яичной скорлупы. Композиция включает комбинации обработанных мембран яичной скорлупы, изолятов мембран яичной скорлупы и гидролизатов.

Материал мембран яичной скорлупы получают способами, предпочтительно включающими до последовательных этапов обработки и отделения, этап отделения мембран яичной скорлупы от желтка яйца, белка яйца и скорлупы яйца. Мембраны яичной скорлупы, обработанные мембраны яичной скорлупы и изоляты мембран яичной скорлупы, а также гидролизаты предпочтительно освобождают от любых компонентов зародыша или их следов, например, животной ткани, крови или жидких компонентов организма, являющихся вредными или нежелательными для рассматриваемого применения продуктов или комбинаций продуктов.

Как правило источником мембран яичной скорлупы будут являться треснувшие куриные яйца, в которых мембраны яичной скорлупы еще присоединены к яичной скорлупе. Мембраны яичной скорлупы могут отделяться от яичной скорлупы любым удобным способом. Предпочтительно, чтобы мембраны яичной скорлупы отделялись от яичной скорлупы без любого нежелательного вещества, которое могло бы оставаться в исходном материале. Нежелательные вещества главным образом включают карбонат кальция из оставшейся яичной скорлупы.

Однако, незначительные количества этого источника кальция могут оказаться полезными для некоторых применений, например, в качестве диетических добавок.

Способы отделения мембран яичной скорлупы от яичной скорлупы могут включать чисто механические приемы, например, посредством вращения и вынимания мембран из промытых скорлуп после удаления желтка и белка из свежих или неприготовленных яиц. Также рассматриваются способы отделения мембран яичной скорлупы из вареных яиц.

Для отделения мембран яичной скорлупы от яичной скорлупы также может применяться комбинация механического и химического способов, таких как встряхивание произвольно измельченной яичной скорлупы, содержащей прилипшие мембраны, в присутствии разбавленной кислоты до разделения мембран и скорлупы, и отделения освободившихся мембран от скорлуп. Патент США №.3194732, выданный Neuhauser, который вводится в настоящий документ путем ссылки, предоставляет более подробное рассмотрение способов отделения мембран яичной скорлупы от яичной скорлупы.

Способ также предпочтительно включает в себя высушивание отделенной мембраны яичной скорлупы с целью получения хлопьев различных размеров мембран яичной скорлупы и последующее измельчение или размалывание хлопьев мембран яичной скорлупы для получения порошка мембран яичной скорлупы с размером частиц между 50-500 микронов. Измельчение в порошок выполняют, применяя стандартные процедуры измельчения, размалывания или растирания, обрабатывая хлопья мембран яичной скорлупы, содержащие около 10% влаги или менее. Сортировку по размеру проводят с применением сит.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения порошкообразные мембраны яичной скорлупы подвергают химическому или ферментативному гидролизу. Полученная суспензия как правило содержит растворимую фракцию, содержащую в основном белки или более мелкие пептиды и другие водорастворимые фракции, а также нерастворимую фракцию, содержащую в основном высокомолекулярные белки и другие нерастворимые фракции. Химический гидролиз мембран яичной скорлупы можно осуществить с применением минеральных кислот, органических кислот, минеральных оснований, органических оснований, металлических катализаторов, аминокислот, восстанавливающих агентов, окисляющих агентов или иных химикатов, каким-либо образом катализирующих гидролиз или растворяющих материал. Ферментативный гидролиз мембран яичной скорлупы может быть осуществлен с применением ферментов из растительных или животных источников, или из микроорганизмов, таких как бактерии или дрожжи. К типам ферментов, применимым для гидролиза относятся: протеазы, коллагеназы, эластазы, гидролазы, лиазы, лигазы или любые другие ферменты, каким-либо образом катализирующие гидролиз или растворяющие материал.

В другом варианте осуществления изобретения,

порошкообразные мембраны яичной скорлупы подвергают ферментации в живом инокуляте. Инокулят состоит из живых микроорганизмов, таких как бактерии, дрожжи, грибки или их комбинации. Некоторыми примерами видов микроорганизмов являются: Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus stearothermophilus, Streptomyces griseus, Serratia marcescens, Rhizopus niveus, Rhizopus oryzae, Penicillium duponti, Aspergillus oryzae, Aspergillus niger, Aspergillus melleus, Aspergillus sojae, Aspergillus saitoi, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces fragilis, и так далее. Полученная суспензия как правило содержит растворимую фракцию, содержащую в основном белки или более мелкие пептиды и другие водорастворимые фракции и нерастворимую фракцию, содержащие в основном высокомолекулярные белки и другие нерастворимые фракции. Предпочтительно, чтобы изоляты мембран яичной скорлупы и гидролизаты готовили без существенного изменения природного материала, находящегося в мембране яичной скорлупы.

Предпочтительно, чтобы материалы, находящиеся в мембране яичной скорлупы, являлись материалами природного происхождения, то есть, не подвергшимися существенному изменению в результате процессов, применяемых при приготовлении изолятов или гидролизатов.

Термины "природный материал", "материал природного происхождения" или "активный материал природного происхождения," выделенные из мембран яичной скорлупы, обозначают, что материал, полученный из мембран яичной скорлупы содержит значительное количество по меньшей мере одного ингредиента или компонента мембран яичной скорлупы, существенно не отличающегося от необработанных мембран яичной скорлупы, в контексте их функции в качестве ингредиента, полезного для терапевтических применений. Термин "существенно не отличающийся" означает, что выбранный(е) или желаемый(е) ингредиент(ы) или компонент(ы) в основном сохраняет(ют) свои/их физические характеристики и не подвергся(лись) значительному разложению, перевариванию или расщеплению. Однако, иные компоненты или ингредиенты некоторых изолятов или гидролизатов могут быть изменены. Например, в гидролизатах, полученных ферментативной обработкой, некоторые белки природного происхождения могут оказаться по меньшей мере частично переваренными. Предпочтительно, чтобы большинство ингредиентов природного происхождения, находящихся в мембране яичной скорлупы, оставались существенно не поврежденными и, более предпочтительно, чтобы в основном все ингредиенты природного происхождения оставались в основном в не поврежденном состоянии. Хотя физические характеристики индивидуальных компонентов мембран яичной скорлупы остаются существенно не поврежденными, композиция в целом или количество различных компонентов могут изменяться в зависимости от желаемого состава для конкретного изолята или гидролизата.

Композиции могут включать в себя механически обработанные мембраны яичной скорлупы, такие как хлопья или порошок, или изоляты или гидролизаты мембран яичной скорлупы. Изоляты или гидролизаты мембран яичной скорлупы могут находиться в жидкой, полутвердой или твердой форме, например, в частично дегидратированной порошкообразной форме, содержащей различные количества жидкости или влаги.

Хотя настоящее изобретение направлено на мембраны яичной скорлупы кур (то есть, Gallus gallus или Gallus domesticus), специалист в данной области техники может допустить применение мембран яичной скорлупы любых других птиц, таких как утка, гусь, страус, голубь, перепел, и так далее. Более того, в некоторых примерах описание настоящей заявки проводится с отсылкой на способ ферментативного гидролиза мембран яичной скорлупы с последующей экстракцией и очисткой веществ мембран яичной скорлупы натурального происхождения. Специалист в данной области техники может легко найти разнообразные способы гидролиза мембран яичной скорлупы. Подразумевается, что объем настоящего изобретения охватывает такие эквиваленты.

Изобретение также рассматривает терапевтические композиции, включающие мембраны яичной скорлупы в сочетании с терапевтически приемлемым носителем или транспортером. Подразумевается, что терапевтически приемлемым носителем является любой материал, не влияющий на терапевтический(е) эффект(ы) по изобретению, но выполняющий функцию доставки терапевтической композиции при пероральном введении. Это может включать типичные фармацевтические наполнители и/или связующие, такие как карбонат кальция, микрокристаллическая целлюлоза, силикагель, крахмал, маннитол, фруктоза, сахароза, сорбит, лимонная кислота, альгинат, фосфат кальция, желатин, глицерин, пектин, гипромеллоза, стеарат магния, полиэтиленгликоль, метилпарабен, и так далее

Изобретение также предполагает композицию, содержащую как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) противовоспалительный агент.

Термин "противовоспалительный агент" означает, что включают любое соединение, про которое известно, что оно оказывает на организм противовоспалительный эффект. Например, противовоспалительный агент выбирают из группы, состоящей из вдыхаемого кортикостероида; кортикостероида, вводимого перорально; нестероидного противовоспалительного лекарственного средства; омега-3 или омега-6 полинасыщенной жирной кислоты; вида Босвеллия или экстракта Босвеллия; куркумы длинной или экстракта куркумы длинной; куркумина или куркуминоидов; белой коры ивы или экстракта белой коры ивы; протеолитических ферментов; коллагена или гидролизатов коллагена; экстракта коры сосны; витамина или предшественника витамина и минерала.

Изобретение также предполагает композицию, содержащую как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) пробиотик, пребиотик и/или их сочетание. Изобретение также предполагает композицию, содержащую как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) пищеварительные ферменты, L-глутамин или волокно. Такие композиции являются полезными для улучшения состояния пищеварительной системы или для лечения заболеваний или состояний, затрагивающих пищеварительную систему.

Изобретение также предполагает композицию, содержащую как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) корицу или пиколинат хрома, или Джимнему сильвестра, или альфа липоевую кислоту, или экстракт белой фасоли. Такие композиции полезны для контроля глюкозы в крови.

Также предполагают композицию, содержащую, как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) никотиновую кислоту или омега-3 или омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты, или коэнзим Q10, или токотриенол. Такие композиции полезны для лечения заболеваний или состояний, включая сердечно-сосудистые заболевания или состояния, для улучшения общего состояния сердечно-сосудистой системы.

Также предполагают композицию, содержащую как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) Гингко билоба или витамин D. Такие композиции являются полезными для улучшения состояния головного мозга и лечения заболеваний или состояний головного мозга и нервной системы.

Также предполагают композицию, содержащую как (а) мембраны яичной скорлупы и/или изоляты мембран яичной скорлупы и/или гидролизаты мембран яичной скорлупы, так и (b) антиоксиданты, включая, например, кверцитин, экстракт коры сосны и экстракт зеленого чая. Такие композиции являются полезными для лечения рака и/или симптомов, связанных с раком, и/или обеспечения иммунной поддержки.

ПРИМЕРЫ

Для иллюстрации разных вариантов осуществления изобретения были приведены нижеследующие, не ограничивающие примеры:

Пример 1: приготовление хлопьев и порошков мембран яичной скорлупы

Нижеследующий пример иллюстрирует приготовление мембран хлопьев и порошка яичной скорлупы. Скорлупу куриных яиц с присоединенными мембранами яичной скорлупы получали с помощью устройства для разбивания яиц. Первоначально мембраны яичной скорлупы отделяли от яичной скорлупы. Хлопья мембран яичной скорлупы собирали и сразу после этого высушивали до содержания влаги менее 10%. Порошок высушенных хлопьев мембран яичной скорлупы получали, применяя стандартные процедуры размола и измельчения. Измельченный порошок затем отсортировывали по размеру с помощью ряда калиброванных сит, получая частицы с размером в диапазоне 50-500 микрон.

Пример 2: Приготовление гидролизата мембран яичной скорлупы путем ферментации

Нижеследующий пример является иллюстрацией приготовления гидролизата мембран яичной скорлупы с использованием процесса ферментации. Порошок мембран яичной скорлупы, приготовленный согласно примеру 1, помещали в водный раствор, содержащий инокулят бактерий и дрожжей. Эту суспензию подвергали ферментации в течение около 24 часов при комнатной температуре (около 25°С). Суспензию фильтровали, чтобы удалить все частицы порошка не переваренных мембран яичной скорлупы. Ферментативный гидролизат (отфильтрованную жидкость) хранили при охлаждении или замораживали в том случае, если его не применяли немедленно, со ссылкой на ESM-FH.

Пример 3: Приготовление гидролизата мембран яичной скорлупы путем ферментативного гидролиза

Нижеследующий пример является иллюстрацией приготовления гидролизата мембран яичной скорлупы с применением ферментативного переваривания. Порошок мембран яичной скорлупы, приготовленный по примеру 1, помещали в буферный раствор (pН около 9), содержащий очищенную щелочную протеазу из Bacillus licheniformis в отношении 1:10 к порошку мембран (масс./масс.). Эту суспензию подвергали перемешиванию в течение до 5 суток при приблизительно 55°С. Суспензию охлаждали и фильтровали для удаления всех частиц не переваренного порошка мембран яичной скорлупы. Ферментативный гидролизат (отфильтрованную жидкость) хранили при охлаждении или замораживали, в том случае если его не использовали сразу, со ссылкой на ESM-EH.

Пример 4: Приготовление гидролизата мембран яичной скорлупы путем химического гидролиза

Нижеследующий пример является иллюстрацией приготовления гидролизата мембран яичной скорлупы с применением химического гидролиза. Порошок мембран яичной скорлупы готовили по примеру 1, помещая в щелочной раствор (pН приблизительно 14), содержащий 3М гидроксид натрия. Эту суспензию перемешивали в течение около 8 часов при около 55°С. Суспензию охлаждали и фильтровали для удаления любых частиц не переваренного порошка мембран яичной скорлупы. Отфильтрованную жидкость нейтрализовали (рН приблизительно 7) при помощи 12М хлористоводородной кислоты, охлаждая для поглощения избытка тепла нейтрализации. Химический гидролизат хранили охлажденным или замороженным в том случае, если его не использовали сразу, со ссылкой на ESM-CH.

Пример 5: Приготовление продукта мембран яичной скорлупы по бренду NEM^® (ESM Technologies, Carthage, МО)

Нижеследующий пример является иллюстрацией приготовления продукта мембран яичной скорлупы, являющегося сочетанием мембран яичной скорлупы, приготовленных по примеру 1, и гидролизата мембран яичной скорлупы, приготовленного по примерам 2-4. Порошок мембран яичной скорлупы помещали в смеситель, заключенный в кожух. В процессе смешивания гидролизат мембран яичной скорлупы осторожно распыляли на порошок мембран яичной скорлупы. Кожух смесителя подогревали до по меньшей мере 185°F (85°С) и прикладывали к сосуду небольшой вакуум, чтобы облегчить удаление влаги. Как только уровень влаги достигал менее 10% по массе, высушенный порошок удаляли из смесителя и помещали в мельницу, чтобы измельчить любые комки, которые возможно могли бы образоваться.

Данный продукт (NEM®) хранили в условиях окружающей среды в картонной коробке с двойными стенками.

Пример 6: Определение активности NF-κB в гидролизатах мембран яичной скорлупы в одноядерных клетках периферической крови человека in vitro

Нижеследующий пример является иллюстрацией определения активности NF-κB в гидролизатах мембран яичной скорлупы мембран яичной скорлупы в одноядерных клетках периферической крови человека (РВМС), in vitro. РВМС брали у здоровых добровольцев и культурировали в количестве 3,2×10⁶ клеток/ячейка в культуральной среде [RPMI-164 0, дополненной 10% сыворотки зародыша теленка (FBS), L-глутамином (2 мМ), пенициллином (100 Ед./мл) и стрептомицином (100 мг/мл)]. Клетки наносили в двукратной повторности. Гидролизаты мембран яичной скорлупы, приготовленные согласно примерам 2 и 3, разбавляли в отношении 1:1 физиологическим раствором в фосфатном буфере (PBS), стерилизовали фильтрованием через диск из ацетата целлюлозы с диаметром пор 0,22 микрон (например, удаляя бактерии, дрожжи, и/или плесень). Затем гидролизаты разбавляли (1:100; 1:1,000; 1:10,000) культуральной средой. Каждое разбавление (60 мкл) добавляли в ячейку для культурирования, и клетки инкубировали при 37°С, 5% СО₂ в течение 4 часов. В качестве положительного контроля применяли известный активатор NF-κB, липополисахарид (LPS) (100 нг/мл), и известный ингибитор NF-κB, витамин С (аскорбиновую кислоту) (20 мМ) (Bowie & O'Neill, 2000) применяли в качестве компаратора ингибирующего эффекта клеток, обработанных LPS. Активность сравнивали с активностью необработанных клеток. Клетки брикетировали центрифугированием при 150 × g (1200 оборотов в минуту) в течение 3 минут и надосадочную жидкость отбрасывали. Лизаты клеток готовили из инкубированных культур помолом в шаровой мельнице. Активность NF-κB лизатов целых клеток исследовали при помощи коммерчески доступного набора для иммуноферментного твердофазного анализа (ELISA), (TransAM^® NF-κB р65 ELISA Assay kit); Active Motif-Carlsbad, CA). Образцы исследовали в двукратной повторности и вносили поправку на содержание общего белка с помощью способа Bradford (Bio-Rad Laboratories - Hercules, CA). Относительную активность NF-κB в РВМС для каждого оцененного раствора (необработанного, LPS, витамин С, ESM-FH, и ESM-EH) можно видеть на Фигуре 3.

Пример 7: Определение активности NF-κB в гидролизатах мембран яичной скорлупы в линии клеток моноцитов человека in vitro

Нижеследующий пример является иллюстрацией определения активности NF-κB в гидролизатах мембран яичной скорлупы в линии клеток (ТНР-1) моноцитов человека in vitro. Клетки ТНР-1 были получены из American Type Culture Collection, (Коллекции культур американского типа) (Manassas, VA) и культурировали по 2,0 × 10⁵ клеток/ячейка в культуральной среде [RPMI-1640 дополненной 10% сыворотки зародыша теленка (FBS), 2-меркаптоэтанолом (0,05 мМ) и 1% смеси пенициллина и стрептомицина]. Клетки размещали на платах по 350 мкл на ячейку в двукратной повторности при количестве плат n=3. Гидролизаты мембран яичной скорлупы, приготовленных по примерам 2, 3 и 4, стерилизовали (например, удаляя бактерии, дрожжи и/или плесень) фильтрованием через микрополиэфирсульфоновый диск диаметром 0,2 микрон. Гидролизаты разбавляли культуральной средой (1:1,000; 1: 10,000). Каждое разбавление добавляли в ячейку для культурирования, и клетки инкубировали при 37°С, 5% C0₂ в течение 4 часов. В качестве положительного контроля применяли известный активатор NF-κB, липополисахарид (LPS)(100 нг/мл), а необработанные клетки применяли в качестве отрицательного контроля. Клетки брикетировали путем центрифугирования при 150 × g (1200 оборотов/мин) в течение 3 минут и надосадочную жидкость отбрасывали. Лизаты клеток готовили из инкубированных культур, добавляя 4 5 мл полного лизирующего буфера (содержащего лизирующий буфер, коктейль из ингибиторов протеаз и дитиотрейтол). Активность NF-κB лизатов целых клеток исследовали при помощи коммерчески доступного набора для иммуноферментного твердофазного анализа (ELISA), (TransAM^® NF-κB р65 ELISA Assay kit); Active Motif -Carlsbad, CA). Образцы исследовали в двукратной повторности и вводили поправку на содержание общего белка при помощи способа Bradford (Bio-Rad Laboratories Hercules, CA). Относительную активность NF-κB в клетках ТНР-1 для каждого тестированного раствора (необработанного, LPS, ESM-FH, ESM-EH, и ESM-CH) можно видеть на Фигуре 4.

Пример 8: Эффективность перорального введения мембран яичной скорлупы бренда NEM® с применением опосредованной NF-κB экспериментальной модели ревматоидного артрита

Нижеследующий пример является иллюстрацией определения эффективности продукта из мембран яичной скорлупы (торговое название NEM®) in vivo в экспериментальной модели ревматоидного артрита опосредованной NF-κB. Известно, что NF-κB активируется при ревматоидном артрите человека (Simmonds & Foxwell, 2008; Brown, Claudio, & Siebenlist, 2008) и твердо установлено, что он играет ключевую роль в экспериментальной модели ревматоидного артрита, индуцированного коллагеном (Han, Boyle, Manning, & Firestein, 1998; Seetharaman, Mora, Nabozny, Boothby, & Chen, 1999). Крысы Lewis, самки (10 на группу, рандомизированные по массе тела) (Charles River Laboratories, Inc. - Wilmington, MA) массой 115-139 граммов получали перорально через желудочный зонд в течение 14 суток или NEM® (52 мг/кг от массы тела), или транспортер (0,5% метилцеллюлозы в воде). Дополнительная группа сравнения получала метотрексат (0,0075 мг/кг по массе тела) (Sigma-Aldrich - St. Louis, МО), начиная с дня 0 (без предварительного дозирования). После предварительного дозирования (в день 0), крыс анестезировали изофлураном и вводили им в двух местах у основания хвоста 400 мкл Difco™ Freund's Incomplete Adjuvant (Detroit, MI) содержащий 2 мг/мл коллагена свиней типа II (Chondrex - Portland, OR) (по 200 мкл на место инъекций). Семь суток спустя, крысы получали вторичную инъекцию 100 мкл в единственном месте у основания хвоста. Только группу транспортера предварительно разделили на полный контроль (нет артрита) и контроль с артритом (нет лечения). Животных содержали по 3-4 на клетку при стандартных лабораторных условиях (67-76°F (19,4-24,4°С), 30-70% влажности, 12-часовой цикл освещения и темноты) при доступе к пище и питью ad libitum. В сутки 9-17 исследования проводили измерения отека лодыжек штангенциркулем Digitrix II Point Micrometer (Fowler - Newton, MA). Результаты измерений отека лодыжек штангенциркулем в 9-17 сутки при артрите, индуцированном коллагеном, в полном контроле, контроле с артритом, обработке метотрексатом и у крыс, получавших NEM, можно видеть на Фигуре 5.

Пример 9: Эффективность перорального введения мембран яичной скорлупы бренда NEM® для человека, страдающего болезнью раздраженного кишечника

Нижеследующий пример является иллюстрацией эффективности продукта мембран яичной скорлупы (торговое название NEM®) при лечении человека, страдающего от разновидности болезни раздраженного кишечника. Мужчина, страдающий от частых тяжелых приступов диареи, сопровождаемых метеоризмом и болезненными спазмами. Эти эпизоды часто длились 3-4 суток, они требовали многочисленных посещений туалета в каждые сутки. Были периоды 1-2 суток, когда эти тяжелые симптомы отсутствовали, после чего следовали многодневные эпизоды тяжелой диареи, метеоризма и спазмов. Впоследствии субъекту поставили формальный диагноз неспецифического язвенного колита по результатам биопсии, взятой после колоноскопии. Субъект не смог излечить свое состояние с помощью предписанного лечения из-за побочных эффектов. Эксклюзивная диета, исключающая или сводящая к минимуму жирную пищу, жареную пищу и другую пищу, богатую углеводами или волокнами помогла уменьшить тяжесть эпизодов диареи, но мало повлияла на их частоту. Субъект начал получать перед едой одну капсулу в день, содержащую 500 мг NEM®, приготовленного по примеру 5. После около 7-10 суток, тяжесть и частота эпизодов диареи начала уменьшаться. После около 2 месяцев приема NEM® субъект испытывал только 1 или 2 эпизода диареи в неделю, каждый длящийся 1 или 2 суток. После добавления пищеварительных ферментов по поводу спазмов желудка и пробиотиков lactobacillus acidophilus и L-глутамина с целью поддержания образа жизни в процессе лечения кишечника, субъект получил возможность поглощать больше пищи, ранее исключаемой эксклюзивной диетой, в особенности мяса и хлеба. Следуя этому образу жизни, субъект пережил только один эпизод, потребовавший только одно посещение туалета. После приблизительно 6 месяцев лечения пациент получил возможность постепенно снизить дозу приема до одной поддерживающей дозы капсулы NEM®, пищеварительных ферментов, L-глутамина и пробиотиков, с сохранением только случайного эпизода диареи. Колоноскопия по прошествии 2 лет подтвердила уменьшение тяжести воспаления толстой кишки и отсутствие неспецифического язвенного колита.

Пример 10: Эффективность перорального введения мембран яичной скорлупы бренда NEM® для человека, страдающего болезнью сердечно-сосудистой системы

Нижеследующие примеры являются иллюстрацией эффективности продукта мембран яичной скорлупы (торговое название NEM®) в лечении сердечно-сосудистого заболевания человека. Мужчина с долгой историей сердечно-сосудистого заболевания (гиперлипидемия, гипертриглицеридемия, гипертензия, атеросклероз, и так далее) до лечения имел следующую липидограмму: общий холестерин (ТС)=186 мг/дл, липопротеин низкой плотности (LDL)=108 мг/дл, липопротеин высокой плотности (HDL)=42 мг/дл и триглицериды (TG)=181 мг/дл. Субъект был не мог излечить свое состояние с помощью предписанной липидоснижающей терапии из-за побочных эффектов, а диеты и упражнений также оказалось недостаточно, чтобы контролировать заболевание. Субъект купировал свою гипертензию дозой 100 мг/сутки атенолола. Это приводило к сохранению систолического/диастолического давления крови (bp) 146/84 мм Нg. Субъекту также были установлены в сердце четыре стента для лечения атеросклеротического стеноза (сужения) различных кровеносных сосудов сердца. Субъект получал в сутки одну капсулу 500 мг NEM®, приготовленного по примеру 5, в течение около 12 месяцев, когда был отмечен эффект на состав липидов. Субъект дополнительно получал курс NEM® еще в течение приблизительно 12 месяцев (в целом около 2 лет). Следующие результаты состава липидов были: ТС=138 мг/дл, LDL=80 мг/дл, HDL=41 мг/дл и TG=84 мг/дл. Все результаты по липидам теперь были в пределах нормы. Стало также необходимо уменьшить дозу атенолола от 100 мг/сутки до 25 мг/сутки. Даже на фоне такого уменьшения дозы препарата давление крови у субъекта в покое составило 102/78 мм Нg.

Второй мужчина имел недавнюю историю сердечно-сосудистого заболевания (только гиперлипидемия и гипертриглицеридемия) и получал ежедневно 10 мг/сутки аторавастатина. Полученный состав липидов составлял для этого субъекта: ТС=207 мг/дл, LDL=114 мг/дл, HDL=4 7 мг/дл и TG=247 мг/дл. Данный субъект имел давление крови в покое в пределах нормы. Субъект получал одну капсулу 500 мг в сутки NEM®, приготовленного по примеру 5, в течение около 2 суток. Последующие результаты липидограмм: ТС=150 мг/дл, LDL=81 мг/дл, HDL=46 мг/дл и TG=113 мг/дл. Все результаты липидограмм были в пределах нормы.

Пример 11: Эффективность перорального введения мембран яичной скорлупы бренда NEM® у человека, страдающего разновидностью заболевания печени

Нижеследующий пример является иллюстрацией эффективности продукта мембран яичной скорлупы (торговое название NEM®) в лечении человека, страдающего разновидностью заболевания печени. У мужчины во время планового обследования состояния здоровья обнаружили умеренно повышенный уровень ферментов печени. Первоначально результаты по ферментам печени были: аланинтрансаминаза (ALT)=81 и аспартаттрансаминаза (AST)=41. Ввиду ожирения у субъекта и отсутствия других конкурирующих добытых сведений, у субъекта диагностировали стеатогепатит неалкогольного происхождения, разновидность заболеваний печени. Первичной целью лечения при этом состоянии является снижение массы тела. Субъект получал ежедневно одну капсулу по 500 мг NEM®, приготовленного по примеру 5, в течение около 2 лет. Последующие результаты по ферментам печени были: ALT=40 и AST=21. Теперь количества ферментов печени находились в пределах нормы.

Пример 12: Эффективность перорального введения мембран яичной скорлупы бренда NEM® у человека с тугоподвижностью суставов и дискомфортом

Нижеследующий пример является иллюстрацией эффективности перорального введения продукта мембран яичной скорлупы (торговое название NEM®) при лечении человека с не поставленным диагнозом, страдающего тугоподвижностью суставов и дискомфортом. Мужчина страдал от дискомфорта суставов в обоих плечах и обоих бедрах, а также тугоподвижностью суставов и дискомфортом в обоих коленях. У субъекта не диагностировали артрит, а дискомфорт не имел значительных признаков ухудшения в течение многих лет, как имело бы место в случае дегенеративного заболевания суставов, такого как артрит. Субъект испытывал боль в плечах и бедрах, в положении лежа на кровати, что мешало ему спать. Такая особенность нарушения сна обычно происходила 1-2 раза в неделю. Субъекту было также трудно встать на колени или перейти в позицию сидя на полу, и затем было очень трудно перейти в положение стоя. Субъект получал ежедневно три капсулы по 500 мг NEM®, приготовленного по примеру 5, в течение около 4 недель. Субъект более не испытывал какого-либо дискомфорта в плечах или бедрах во время сна. Колени субъекта стали также намного менее тугоподвижными, дискомфорт очень сильно уменьшился, и субъект стал гораздо легче вставать на колени или сидеть на полу, и испытывал намного меньше затруднений при возвращении в позицию стоя.

Пример 13: Эффективность перорального введения мембран яичной скорлупы бренда NEM® у человека, страдающего Фибромиалгией

Нижеследующий пример является иллюстрацией эффективности перорального введения продукта мембран яичной скорлупы (торговое название NEM®) при лечении человека, страдающего от фибромиалгии. Женщина с 4-х летней историей фибромиалгии страдала от боли в суставах и соединительной ткани во многих местах тела, испытывала чрезмерную усталость и получала лечением мелоксикамом (7,5 мг/сутки утром), ибупрофеном (200 мг дважды в сутки - утром и пополудни), традамолом (50 мг/сутки перед сном) и амитриптилином (20 мг/сутки перед сном). Субъект получала NEM®, 500 мг/сутки перед постановкой диагноза фибромиалгии. Субъект в особенности испытывала ухудшение симптомов при выполнении ее ежедневных обязанностей, включая продолжительное стояние или ходьбу (например, уборку, стирку, посещение магазинов, и так далее). Со временем, фибромиалгия действительно начала ограничивать возможность субъекта выполнять ежедневные обязанности. Даже в условиях уменьшения уровня активности появилась необходимость увеличить дозу приема субъектом: трамадол по 50 мг два раза в день (два раза в день) и иногда даже 50 мг три раза в день (три раза в день) для купирования болезненных симптомов. Ввиду озабоченности по поводу увеличения потребности в трамадоле, анальгетике опиоидного типа (подобен наркотикам), и жжения в желудке от ибупрофена, субъект начал получать дополнительно ежедневно капсулу по 500 мг (то есть, 500 мг два раза в день) NEM®, приготовленного по примеру 5, с интервалом 4-5 часов в течение 3 недель. Субъект почувствовал значительное облегчение от боли и ломоты и оказался в состоянии уменьшить дозу трамадола до первоначальной дозы 50 мг/сутки и полностью отменить ибупрофен.

Claims

1. Способ активации ядерного фактора короткоцепочечного энхенсера каппа активированных клеток В (NF-κВ) в пищеварительном тракте организма, нуждающегося в этом, причем способ содержит введение упомянутому организму эффективного количества композиции, состоящей по существу из мембран яичной скорлупы природного происхождения.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что организм, нуждающийся в этом, страдает от сердечно-сосудистого заболевания или состояния.

3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что сердечно-сосудистое заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из атеросклероза, кардиомиопатии, синдрома Марфана, перикардита, болезни сердечных клапанов, ревматического заболевания сердца, заболевания периферических артерий, венозного тромбоза, воспалительного заболевания сердца, гипертензии, гиперлипидемии и гипертриглицеридемии.

4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что сердечно-сосудистое заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из воспаления сосудов, повышенного давления крови, умеренно повышенного уровня холестерина или умеренно повышенного уровня триглицеридов.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что организм, нуждающийся в этом, страдает от заболевания или состояния желудочно-кишечной системы.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что заболевание или состояние желудочно-кишечной системы выбирают из группы, состоящей из болезни Крона, неспецифического язвенного колита, гастрита, дивертикулита, синдрома раздраженного кишечника, глютеновой энтеропатии, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, диспепсии, пептической язвы и язвы двенадцатиперстной кишки.

7. Способ по п. 5, отличающийся тем, что заболевание или состояние желудочно-кишечной системы выбирают из группы, состоящей из периодической диареи, периодической констипации, периодического спазма желудка или боли, воспаления желудка, воспаления кишечника или воспаления толстой кишки.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что организм, нуждающийся в этом, страдает от заболевания, выбранного из группы, состоящей из стеатогепатита неалкогольной природы, гепатита, нефрита, дерматита, конъюнктивита и гингивита.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что организм, нуждающийся в этом, страдает от состояния, при котором имеет место дисрегуляция NF-κВ.

10. Способ по п. 1, дополнительно содержащий введение в упомянутый организм противовоспалительного агента.

11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что противовоспалительный агент представляет собой омега-3 или омега-6 полиненасыщенную жирную кислоту.

12. Способ по п. 1 дополнительно содержащий введение упомянутому организму известного агента, улучшающего здоровье пищеварительной системы или излечивающего заболевание или состояние пищеварительной системы.

13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что агент, улучшающий состояние пищеварительной системы, представляет собой волокна.

14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что организм представляет собой организм человека.