CN111281882B - 肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用 - Google Patents

肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111281882B
CN111281882B CN202010091336.9A CN202010091336A CN111281882B CN 111281882 B CN111281882 B CN 111281882B CN 202010091336 A CN202010091336 A CN 202010091336A CN 111281882 B CN111281882 B CN 111281882B
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkaline phosphatase
intestinal
sodium butyrate
mineral
activity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010091336.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111281882A (zh
Inventor
高辰哲
韩建春
李建平
秦璐楠
徐庆
李鑫荣
惠觅宙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Huinuode Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Qingdao Huinuode Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Huinuode Biotechnology Co ltd filed Critical Qingdao Huinuode Biotechnology Co ltd
Priority to CN202010091336.9A priority Critical patent/CN111281882B/zh
Publication of CN111281882A publication Critical patent/CN111281882A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111281882B publication Critical patent/CN111281882B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/015—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/03—Organic compounds
    • A23L29/035—Organic compounds containing oxygen as heteroatom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/03—Organic compounds
    • A23L29/035—Organic compounds containing oxygen as heteroatom
    • A23L29/04—Fatty acids or derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P20/00—Coating of foodstuffs; Coatings therefor; Making laminated, multi-layered, stuffed or hollow foodstuffs
    • A23P20/10—Coating with edible coatings, e.g. with oils or fats
    • A23P20/15—Apparatus or processes for coating with liquid or semi-liquid products
    • A23P20/18—Apparatus or processes for coating with liquid or semi-liquid products by spray-coating, fluidised-bed coating or coating by casting
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P30/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the process or apparatus
    • A23P30/30—Puffing or expanding
    • A23P30/32—Puffing or expanding by pressure release, e.g. explosion puffing; by vacuum treatment
    • A23P30/34—Puffing or expanding by pressure release, e.g. explosion puffing; by vacuum treatment by extrusion-expansion
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用，属于复方药物和功能性食品领域。本复方制剂含有增强碱性磷酸酶活性肠碱化矿物质水滑石、阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质蒙脱石粉、爆膨敷料燕麦粉和调味剂木糖醇混合的爆膨颗粒和促进肠碱性磷酸酶表达的微胶囊包膜丁酸钠。本发明的制剂有治疗碱性磷酸酶和内毒素相关疾病高血脂、高血糖、高血压和结肠炎的作用。

Description

肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用 方法和应用
技术领域
本发明涉及药物和功能性食品领域，特别是涉及一种肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其使用方法和应用。
背景技术
碱性磷酸酶(AP)分布于人和动物的各种组织器官，体外实验发现碱性磷酸酶(AP)功能是有效脱掉有各种有机磷化合物的磷(Pi)，特别是在碱性pH活性更高。例如，当pH从6升高到9时，碱性磷酸酶(AP)活性增高约7倍。人体和动物的碱性磷酸酶(AP)主要有三个类型，即组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)、肠碱性磷酸酶(IAP)和胎盘碱性磷酸酶(PLAP)(1)。三个类型的碱性磷酸酶的结构都大约是60KD糖化旦白，有多个二硫键，结构结实，不易降解(耐辐射和酸处理)。三个类型的碱性磷酸酶都是通过PI(phosphatidylinositol)连接在细胞膜上，是连接在细胞膜上的典型蛋白酶(1)。碱性磷酸酶在细胞膜上的表达生产一般认为是细胞功能成熟细胞分化的标志和表现。例如，组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)在细胞膜上的表达是成骨细胞、肝细胞、干细胞成熟分化的标志。30年前，大家公认组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的功能是促进骨钙化(1)。
随着80年代末动物细胞和小动物基因转移技术的发展，90年代初,Mizhou Hui(惠觅宙)首次使用基因转移技术在不同动物细胞表面高表达生产组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP),发现组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)在不同组织细胞水平特异性表达或升高可能引发病理性了钙化(2、3)和促进细胞成熟分化(1、4、5)。Mizhou Hui(惠觅宙)没有发现组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)明显参与细胞的其它功能。随后1999年，Feddeetal在小动物水平敲除组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)基因，也没有发现除骨钙化之外的功能(6)。
碱性磷酸酶(AP)功能研究突破发生在1997年。那一年，荷兰科学家Poelstra和Meijer发现碱性磷酸酶(AP)可以将内毒素活性区的磷(Pi)消除，使内毒素失去80％以上的活性(7、8、9)。这个意外的发现提示人体表达的三个类型的碱性磷酸酶(TNAP、IAP、PLAP)可能是调解人或动物身体与微生物(胞膜是内毒素的细菌)和睦相处的关健因子(9、10、11、12、13、14、15、16)。例如，产生内毒素的大肠杆菌在人体其他组织(尿道、创口)会引发感染，但在肠道内不会。肠道粘膜有大肠杆菌，但不产生炎症，这与肠粘膜表面表达生产大量肠碱性磷酸酶(IAP)有关(17)。肠道粘膜是各种营养和水的吸收器组织，在吸收各种营养的同时，也必然吸收大肠杆菌内毒素，即大肠杆菌内毒素也从肠道内通过，经门静脉转移入血，会引发全身炎症反应和发热。但是，人和动物从肠道吸收大肠杆菌内毒素时，肠碱性磷酸酶(IAP)对内毒素进行充分灭活，使其失去大部分活性；没有被肠碱性磷酸酶(IAP)灭活的残留内毒素经通门静脉先转移进入肝脏，再进入全身血液循环。有趣的是，肝脏有大量的组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)，可以将进入肝脏的内毒素进一步灭活，从而保护人体免受内毒素毒害(18、19、20、21)。
更有兴趣的现象是人和动物生殖系统也是开放器官，受细胞内毒素的威胁。胎盘需扎根子宫为胎儿提供血液营养，子宫是开放器官，内有少量细菌和细菌内毒素，会引发胎盘炎症反应，导致胎盘植入失败和流产(22)。然而，人和动物胎盘表达生产大量耐热型胎盘碱性磷酸酶(PLAP)(23)。胎盘碱性磷酸酶(PLAP)可以将内毒素活性区的磷(Pi)消除，使内毒素失去活性，可能有协调细菌和细菌内毒素和胎盘和睦相处，使人和动物组织不发生针对细菌内毒素的炎症反应和排斥胎盘植入。
近年来，碱性磷酸酶(AP)功能研究进入大发展时期。Sonoko Narisawa等敲除肠碱性磷酸酶(IAP)基因，发现没有肠碱性磷酸酶(IAP)严重影响脂代谢，造成脂肪吸收过多和脂肪堆积，表明肠碱性磷酸酶(IAP)可以用于治疗高血脂(24、25、26)。进一步研究表明，肠碱性磷酸酶(IAP)或其它碱性磷酸酶(AP)可以用来治疗糖尿病和代谢综合征(高血糖、高血脂、高血压)和结肠炎(27、28、29、30、31、32、33)。最近作者团队说明书外使用肠碱性磷酸酶(IAP)激活剂或结合使用含有外源性肠碱性磷酸酶(IAP)的食品，针对代谢综合征(高血糖、高血脂、高血压)和结肠炎试验治疗，达到大部分治愈高血脂、二型糖尿病、结肠炎的效果。研究还提示内源性肠碱性磷酸酶(IAP)激活剂结合使用外源肠碱性磷酸酶(IAP)食品可能是通过减少胰岛素依赖或提高组织对胰岛素敏感度，达到了大部分治愈糖尿病的目标。
最近，AM Pharma使用大剂量重组人肠碱性磷酸酶肠道内滴注有效治疗人结肠炎，开辟了肠内使用碱性磷酸酶的先河。
肠道内的pH直接决定了肠碱性磷酸酶的活性，而尿pH可以间接反应肠道内pH的变化。Masanori Shimodaira(36)等人研究日本5430位受试者(其中4691有代谢综合征，739健康人)发现患代谢综合征的受试者尿pH低于健康受试者；Young Hye Cho(37)等人研究韩国10938位受试者，得出结论低尿pH患者通常患有代谢综合征；Naim M(38)等人证明了过度的酸性尿是代谢综合征的一种表现，且与胰岛素抵抗的程度有关。大便中碱性磷酸酶活性可以直接反映出肠道碱性磷酸酶活性，Madhu S.Malo等人(39)研究发现代谢综合征患者粪便碱性磷酸酶活性较低，健康人粪便中碱性磷酸酶活性较高。
参考文献
1.Mizhou Hui(1995)A Study of Tissue Non-Specific AlkalinePhosphatase:In Search of Its Functions.PhD dissertation,University ofToronto,Canada.
2.Mizhou Hui and Howard C Tenenbaum(1998)，New Face of an Old Enzyme:Alkaline Phosphatase May Contribute to Human Tissue Aging by Inducing TissueHardening and Calcification，The Anatomical Record(NEW ANAT),91-94.
3.Hui M,Li SQ,Holmyard D,Cheng PT(1997)Stable transfection of non-osteo-genic cell lines with tissue non-specific alkaline phosphatase enhancesmineral deposition both in the presence and ab-sence of betaglycerophosphate:Possible role for alkaline phosphatase in pathologicalmineralization.Calcif Tissue Int,60:467-472.
4.Hui M,Sukhu B,Tenenbau m HC(1996)Expression of tissue non-specificalkaline phosphatase stimulates differentiated behaviour in specifictransformed cell population.Anat Rec 244:423-436.
5.Hui M,Tenenbaum HC,McCulloch CAG(1997)Collagen phagocytosis andapoptosis are induced by high level alkaline phosphatase expression in ratfibroblasts.J Cell Physiol,172:323-333.
6.Fedde et al(1999),Alkaline phosphatase knock-out mice recapitulatethe metabolic and skeletal defects of infantile hypophosphatasia,Journal ofBone an dMineral Research,14(12):2015-2026.
7.Poelstra K,Bakker WW,Klok PA,Hardonk MJ,Meijer DK(1997),Aphysiologic function for alkaline phosphatase:endotoxin detoxification.LabInvest,76:319–327.
8.Poelstra K,Bakker WW,Klok PA,Kamps JA,Hardonk MJ,Meijer DK(1997),Dephosphorylation of endotoxin by alkaline phosphatase in vivo,Am JPathol.151(4):1163-9.
9.Bentala H,Verweij WR,Huizinga-Van der Vlag A,van Loenen-Weemaes AM,Meijer DK,Poelstra K(2002),Removal of phosphate from lipid A as a strategy todetoxify lipopolysaccharide,Shock,18(6):561-6.
10.Jennifer et al(2007),Intestinal alkaline phosphatase detoxifieslipopolysaccharide and prevents inflammation in response to the gutmicrobiota,Cell Host Microbe,2(6):371-382.
11.Kaooru Geddes and Dana J Philpott(2008),A new role for intestinalalkaline phosphatasein gut barrier maintenance,Gastroenterology,135:8-12.
12.Melo et al(2016),Intestinal alkaline phosphatase:potential rolesin promoting gut health in weaning piglets and its modulation by feedadditives-a review,Asian Australas J Anom Sci,29(1):16-22.
13.Jean-Paul Lalles(2014),Luminal ATP:the missing link betweenintestinal alkaline phosphatase,the gut microbiota,and inflammation？Am JPhysiol Gastrointest Liver Physiol,306:G824-G825.
14.Jean-Paul Lalles(2016),Intestinal alkaline phosphatase:novelfunctions and protective effects,Nutrition Reviews,72(2):82-94.
15.Mehrbodet al(2014),interplay between intestinal alkalinephosphatase,diet,gut microbes and immunity,World Journal of Gastroenterology,20(42):15650-15656.
16.BENDER B,BARANYIM,KEREKES A,BODROGI L,BRANDS R,UHRIN P,Z(2015),Recombinant Human Tissue Non-Specific Alkaline PhosphataseSuccessfully Counteracts Lipopolysaccharide Induced Sepsis in Mice,PhysiolRes 64:731-738.
17.Cani et al(2007),metabolic endotoxemia initiates obesity andinsulin resistance,Diabetes,56:1761-1772.
18.Beumer et al(2003)Calf intestinal alkaline phosphatase,a noveltherapeutic drug for lipopolysaccharide(LPS)-mediated diseases,attenuates LPStoxicity in mice and piglets,307(2):737-744.
19.Suzanne et al(2009),Anti-Inflammatory Effects of AlkalinePhosphatase in Coronary Artery Bypass Surgery with Cardiopulmonary Bypass,Recent Patents on inflammation&aleergy drug discovery,3(3):214-220.
20.Jason Fawley and David M.Gourlay(2016),Intestinal alkalinephosphatase:a summary of its role in clinical disease,Journal of SurgicalResearch,202(1):1225-1234.
21.Sanjiv et al(2017),Intestinal alkaline phosphatase decreasesintraperitoneal adhesion formation,Journal of Surgical Research,208:84-92.
22.Lei W,Ni H,Herington J,Reese J,Paria BC(2015)Alkaline PhosphataseProtects Lipopolysaccharide-Induced Early Pregnancy Defects in Mice.PLos ONE10(4):e0123243.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123243
23.Kiffe-Moreira and Milan et al(2014),Catalytic signature of a heat-stable,chimeric human alkaline phosphatase with therapeutic potential,PlosOne，9(2):e89374.
24.Sonoko Narisawa,Lei Huang,Arata Iwasaki,Hideaki Hasegawa,DavidH.Alpers,and Jose LuisMillan(2003),Accelerated Fat Absorption in IntestinalAlkaline Phosphatase Knockout Mice.MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY,23(21):7525–7530.
25.Takanari Nakano,Ikuo Inoue,Iwao Koyama,Kenta Kanazawa,Koh-ichiNakamura,Sonoko Narisawa and Al(2007),Disruption of the murine intestinalalkaline phosphatase gene Akp3 impairs lipid transcytosis and inducesvisceral fat accumulation and hepatic steatosis.Am J Physiol GastrointestLiver Physiol 292:G1439-G1449.
26.Sarah et al(2017),Inhibition of the gut enzyme intestinal alkalinephosphatasemay explain how aspartame promotes glucose intolerance and obesityin mice,Appl Physiol Nutr Metab,42:77-83.
27.Kaliannan et al(2013),Intestinal alkaline phosphatase preventsmetabolic syndrome in mice,PNAS,110(17):7003-7008.
28.Jean-Paul Lalles(2015),Intestinal alkaline phosphatase in stool:Anovel biomarker for metabolic diseases,EBioMedicine,2:1866.
29.Madhu S Malo(2015),A high level of intestinal alkaline phosphataseis protective against type 2 diabetes mellitus irrespective of obesity,EBioMedicine 2:2016-2023.
30.Kanakaraju Kaliannan,Sulaiman R.Hamarneh,KonstantinosP.Economopoulos,Sayeda Nasrin Alam,Omeed Moaven,Palak Patel,Nondita S.Malo,Madhury Ray,M.Abtahi,Nur Muhammad,Atri Raychowdhury,Abeba Teshager,MussaM.Rafat Mohamed,Angela K.Rizwan Ahmed,Shahrad Hakimian,Sonoko Narisawa,JoseLuis Millan,Elizabeth Hohmann,H.Shaw Warren,Atul K.Bhan,Madhu S.Malo,andRichard A.Hodin(2013),Intestinal alkaline phosphatase prevents metabolicsyndrome in mice,PNAS,110(17):7003-7008.
31.Bethany A Rader(2017),Alkaline phosphatase,an unconventionalimmune protein,Frontiers in Immunology,Volume 8,Article 897,page 1-4.
32.Esther et al(2016),Pharmacokinatic modeling and dose selection ina randomized,double-blind,placebo-controled trial of a human recombinantalkaline phosphatase in healthy volunteers,Clin Pharmacokinet,55:1227-1237.
33.Milan et al(2010),Exogenous alkaline phosphatase for the treatmentof patients with moderate to severe ulcerative colitis,Inflamm Bowel Dis,16(7):1180-1186.
34.Carl Grunfeld and Kenneth R.Feingold(2009)，Endotoxin in the gutand chylomicrons:translocation or transportation？Journal of Lipid Research，50:1-2.
35.TIMOTHY D.KANE,M.D.,SCOTT R.JOHNSON,M.D.,J.WESLEY ALEXANDER,M.D.,SC.D.,GEORGE F.BABCOCK,PH.D.,*AND CORA K.OGLE,PH.D(1996),Detection ofIntestinal Bacterial Translocation Using PCR,JOURNAL OF SURGICAL RESEARCH 63,59–63.
36.Shimodaira M,Okaniwa S,Nakayama T.Fasting Single-Spot Urine Ph IsAssociated with Metabolic Syndrome in the Japanese Population[J].MedicalPrinciples and Practice,2017,26(5):433-437.
37.Cho Y H,Lee S Y,Jeong D W,et al.The Association between a LowUrine Ph and the Components of Metabolic Syndrome in the Korean Population:Findings Based on the 2010 Korea National Health and Nutrition ExaminationSurvey[J].Journal of Research in Medical Sciences,2014,19(7):599-604.
38.Maalouf N M,Cameron M A,Moe O W,et al.Low Urine Ph:A Novel Featureof the Metabolic Syndrome[J].Clinical Journal of the American Society ofNephrology,2007,2(5):883-888.
39.Malo M S.A High Level of Intestinal Alkaline Phosphatase IsProtective against Type 2 Diabetes Mellitus Irrespective of Obesity[J].Ebiomedicine,2015,2(12):2016-2023.
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能够提高肠道内碱性磷酸酶活性起到治疗相关疾病的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用，本申请通过含有微胶囊包膜丁酸钠(或联合使用胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒作为肠碱性磷酸酶(IAP)活性增强剂，来治疗人、猪、犬的糖尿病、高血压、高血脂和结肠炎。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
一方面，本发明提供一种肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂，包括肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质、阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质、爆膨敷料、调味剂和微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)。
进一步地，各成分的重量份组成为：所述肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质为9～9.5重量份，所述阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质为3.5～4重量份，所述爆膨敷料为12.5～13重量份，所述调味剂为4～5重量份，所述微胶囊包膜丁酸钠为3重量份。
进一步地，所述肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质为水滑石，所述阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质为蒙脱石粉，所述爆膨敷料为燕麦粉，所述调味剂为木糖醇。
进一步地，所述各物质组成为：水滑石9.11重量份、蒙脱石粉3.64重量份、燕麦粉12.75重量份、木糖醇4.50重量份和微胶囊包膜丁酸钠3.00重量份。
进一步地，所述复方制剂为粉剂，每袋包装量为33.00g，其中：水滑石9.11克、蒙脱石粉3.64克、燕麦粉12.75克、木糖醇4.50克和微胶囊包膜丁酸钠3.00克。
进一步地，所述复方制剂经人服用有效剂量后的尿液pH呈碱性。
进一步地，所述复方制剂于提高肠道内碱性磷酸生产酶表达水平和活性。
进一步地，所述复方制剂用于提高肠道内碱性磷酸酶灭活内毒素的活性和减少脂肪携带的内毒素吸收。
进一步地，所述复方制剂为爆膨颗粒和微胶囊包膜颗粒的混合物，所述爆膨颗粒为肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质、阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质、爆膨敷料和调味剂制成的爆膨颗粒。
进一步地，所述微胶囊包膜丁酸钠中丁酸钠的质量分数为30％。
进一步地，所述微胶囊包膜丁酸钠为通过胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠，因微胶囊包膜丁酸钠口感不佳，使用胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹微胶囊包膜丁酸钠，可提高口感。
进一步地，所述微胶囊包膜丁酸钠的制备方法为：
1)将羟丙基甲基纤维素、壳聚糖、二氧化硅合并在流化床中230度高温沸腾膨胀，然后将丁酸钠水溶液喷涂到上述三种物质混合物上，高温干燥后低温固化，使丁酸钠颗粒固化成型；
2)然后将包膜材料巴西棕榈蜡、棕榈油脂和聚乙二醇溶于有机溶剂，在流化床中进行底喷包衣，得到包膜均匀的微胶囊包膜丁酸钠颗粒，使丁酸钠质量百分比为30％。注：关于上述生产可以使用商业化获得胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹微胶囊包膜丁酸钠。
另一方面，提供一种所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂的制备方法，包括如下步骤：
1)将羟丙基甲基纤维素、壳聚糖、二氧化硅合并在流化床中230度高温沸腾膨胀，然后将丁酸钠水溶液喷涂到上述三种物质混合物上，高温干燥后低温固化，使丁酸钠颗粒固化成型；然后将包膜材料巴西棕榈蜡、棕榈油脂和聚乙二醇溶于有机溶剂，在流化床中进行底喷包衣，得到包膜均匀的微胶囊包膜丁酸钠颗粒，使丁酸钠质量百分比为30％；
2)将肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质、脂肪吸收阻断矿物质、爆膨辅料和调味剂按比例利用双螺杆膨化机爆膨，然后将获得的爆膨颗粒与微胶囊包膜丁酸钠颗粒混合制得复方制剂。
再一方面，提供一种所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂的使用方法，每日在早晚两餐前各服用33g所述的复方制剂。
又一方面，提供一种所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂的应用，所述复方制剂作为治疗肠碱性磷酸酶活性降低相关疾病的药品和保健品的应用。
进一步地，所述肠碱性磷酸酶活性降低相关疾病包括高血糖、高血脂、高血压、结肠炎。
进一步地，所述的复方制剂通过降低2型糖尿病人的血浆炎症因子内毒素和CRP的水平及增加肠K细胞高血糖控制因子GLP-1的分泌来治疗糖尿病。
进一步地，所述的复方制剂通过增高肠道内pH促进肠碱性磷酸酶活性来治疗。
进一步地，所述的复方制剂通过增高肠道内pH来促进肠碱性磷酸酶灭活内毒素的活性。
进一步地，所述的复方制剂通过增高肠道内pH来促进肠碱性磷酸酶对ATP、ADP、AMP、UDP脱磷。
进一步地，所述的复方制剂促进肠碱性磷酸酶灭活内毒素的活性用来减少中性粒细胞分泌炎症因子TNF。
进一步地，所述的复方制剂促进肠碱性磷酸酶脱磷ATP、ADP、AMP生产腺苷减少中性粒细胞分泌炎症因子TNF。
采用这样的设计后，本发明至少具有以下优点：
本发明经过研究获得一种复方制剂，复方制剂作为含有微胶囊包膜丁酸钠(或联合使用胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒进行使用，比直接使用肠碱性磷酸酶治疗肠碱性磷酸酶活性降低相关疾病更具有应用价值。具体的用途是肠道碱化矿物质或碱性磷酸酶活性增强矿物质联合脂肪(包括脂溶性内毒素)吸收阻断矿物质在制备降血压和/或降血糖和/或降血脂药物的用途。
附图说明
上述仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，以下结合附图与具体实施方式对本发明作进一步的详细说明。
图1是本发明制备的含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒的产品效果图；
图2是本发明研究水滑石、蒙脱石粉、燕麦粉和含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒的水溶液对盐酸和碳酸氢钠调节的缓冲效果示意图；
图3是本发明研究三高患者服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后与健康参与者的血浆内毒素LPS水平比较示意图(p<0.001)；
图4是本发明研究三高患者服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后与健康参与者的血浆C反应蛋白CRP水平比较实施例示意图(p<0.001)；
图5是本发明研究三高患者服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后与健康参与者的血浆胰高血糖素类似物GLP-1水平的比较示意图(p<0.001)；
图6是本发明研究不同pH水平对含有碱性磷酸酶的猪小肠粘膜的碱性磷酸酶活性的影响；
图7是本发明研究recIAP(43.00U/mL)在不同pH条件下灭活LPS效果示意图；
图8是本发明研究重组肠碱性磷酸酶(0.43U/mL)在不同pH条件下对0.5mMATP的脱磷效果示意图；
图9是本发明研究重组肠碱性磷酸酶(0.43U/mL)在不同pH条件下对0.5mMADP的脱磷效果示意图；
图10是本发明研究重组肠碱性磷酸酶(0.43U/mL)在不同pH条件下对0.5mMAMP的脱磷效果示意图；
图11是本发明研究重组肠碱性磷酸酶(0.43U/mL)在不同pH条件下对0.5mMUDP的脱磷效果示意图；
图12是本发明研究LPS刺激小肠粘膜局部炎症细胞(人白细胞+人肠粘膜细胞系HT-29)分泌TNF-α模型示意图；
图13是本发明研究ATP刺激人外周血白细胞和HT-29分泌TNF-α的影响示意图；
图14是本发明研究ADP刺激人外周血白细胞和HT-29分泌TNF-α的影响示意图；
图15是本发明研究AMP刺激人外周血白细胞和HT-29分泌TNF-α的影响示意图；
图16是本发明研究腺苷刺激人外周血白细胞和HT-29分泌TNF-α的影响示意图。
图17是本发明研究肠碱性磷酸酶抑制人中性粒细胞从胶滴内向胶滴外培养液中移走结果示意图；
图18是本发明研究肠碱性磷酸酶抑制人单个核细胞从胶滴内向胶滴外培养液中移走结果示意图。
具体实施方式
下面将参照附图更详细地描述本发明的示例性实施例。虽然附图中显示了本发明的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明，并且能将本发明的范围完整的传达给本领域技术人员。
本发明的发明人采用碱性磷酸酶消灭LPS、ATP、ADP、AMP、UDP及细胞学的机制研究，证明了碱性磷酸酶消炎效果极佳。发明人通过碱性物质激活肠道内的碱性磷酸酶，且其缓释效果极好，碱性磷酸酶在碱性条件下才具有活性，而尿及口腔的pH可间接反映出肠道内的pH。
本发明制备的复方制剂含有微胶囊包膜丁酸钠(或联合使用胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒为含有碱性物质的碱性磷酸酶激活剂，作为食品、保健品或药物在治疗高血脂、高血糖、高血压和/或肠道粘膜炎症性疾病中有较好的效果，可作为可口服的生物制剂。
实施例1
目的：研究“小肠碱性磷酸酶”肠内生理功能的实验，大便IAP高，肠粘膜IAP相对少，脱落入大便多，IAP肠灌注太贵，使用碱化IAP增强剂更有效和价格低；
方法：分别抽取试验参与者或猪全血至含有肝素钠的无热源采血管中，4℃离心(3500g/min，8min)，取血浆；取试验参与者或猪打碎小肠组织1.00g(人小肠经长春磐石医院伦理委员会许可，取外伤手术病人靠近结肠端的小肠组织)，添加Tris-Hcl缓冲液(50mmol/L，pH8.0)10mL；取试验参与者或猪粪便1.00g，添加Tris-Hcl缓冲液(50mmol/L，pH8.0)10mL，充分震荡混匀，4℃离心(12000g/min，10min)，取上清液，稀释，利用碱性磷酸酶试剂盒(Leagene Biological Ltd,catalogue#TE0005)，在波长为510nm下测定其活性。结果见表1和表2。
表1人碱性磷酸酶活性。
注：血液碱性磷酸酶活性包括组织非特异性碱性磷酸酶(肝脏、骨、血管内皮、中性粒细胞)和肠碱性磷酸酶活性。小肠和粪便碱性磷酸酶活性反映肠碱性磷酸酶活性。
表2猪碱性磷酸酶活性。
讨论：小肠粘膜产生的细胞膜结合的碱性磷酸酶比大便内的非细胞膜结合的碱性磷酸酶少7倍，人粪便IAP变异比较大，提示IAP含量个体差异大。人小肠计为1kg，小肠IAP含量按15U/g计算，即人小肠IAP总量为15000U；每人每日排出粪便计为200g，人粪便IAP含量按100U/g计算，即正常人每天粪便中IAP总量为20000U；提示小肠粘膜大量产生非细胞膜结合的碱性磷酸酶，并排入大便内深度灭活内毒素和ATP等炎性物质，可能是减少内毒素和ATP等炎性物质活性的主要机制。
结论：小肠粘膜会产生肠碱性磷酸酶，本发明的发明人认为通过改变肠道环境来提高肠碱性磷酸酶活性，以此来灭活肠道内毒素和减少肠道内毒素吸收，比使用提取或重组表达的碱性磷酸酶制剂更有可行性。
实施例2
目的：生产一种在胃肠道中具有较好的缓释效果，且对胃肠道无损伤的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒。
方法：将肠碱性磷酸酶活性增强矿物质(水滑石)、脂肪吸收阻断矿物质(蒙脱石粉)、燕麦粉、木糖醇以30.4％：12.1％：42.5％：15.0％的比例利用MT70双螺杆膨化机爆膨。
结果：使用MT70双螺杆膨化机爆膨生产了肠道碱化或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质和脂肪吸收阻断矿物质、燕麦粉和木糖醇混合的爆膨颗粒(可参考图1)，其口感酥脆，在胃肠道中具有较好的中和胃酸效果，最高pH<9.0,对胃肠道无损伤(可参考图2)。
结论：MT70双螺杆膨化机可以用来爆膨生产肠道碱化或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质和脂肪吸收阻断矿物质、燕麦粉和木糖醇混合爆膨颗粒。
实施例3
目的：生产一种含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质联合脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒的混合物。
方法：我们直接使用丁酸钠在细胞培养中促进肠碱性磷酸酶表达；在食物中为了形成缓释，避免胃酸降解，本研究采用包裹方法如下：1)将羟丙基甲基纤维素、壳聚糖、二氧化硅合并在流化床中230度高温沸腾膨胀，然后将丁酸钠水溶液喷涂到上述三种物质混合物上，高温干燥后低温固化，使丁酸钠颗粒固化成型，然后将包膜材料巴西棕榈蜡、棕榈油脂和聚乙二醇溶于有机溶剂，在流化床中进行底喷包衣，得到包膜均匀的丁酸钠颗粒，使丁酸钠质量百分比为30％；2)将3g微胶囊包膜丁酸钠混合实施例2爆膨颗粒30g(含9.11g水滑石，3.64g蒙脱石粉，12.75g燕麦粉，4.50g木糖醇)混合后使用。
结果如图1和图2所示。水滑石、蒙脱石粉、燕麦粉和含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化或肠碱性磷酸酶活性增强和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒的水溶液对盐酸和碳酸氢钠调节的缓冲行为研究：(1)用HCl将100ml水调pH2.5，模拟胃酸环境；(2)加入样品(方块代表阴性对照水；圆代表燕麦粉；正三角代表蒙脱石粉；倒三角代表水滑石；菱形代表燕麦蒙脱石粉、水滑石混合物)；(3)加入碳酸氢钠把酸化水pH提升4个单位，其他加等量碳酸氢钠调节；(4)模拟进入小肠的时间；(5)模拟进入大肠的时间。
讨论：
含有微胶囊包膜(或胶囊或肠溶胶囊包裹)丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒安全性研究，包括最高pH和中和能力。食物进入胃后至少滞留1小时，同时刺激胃酸分泌，使胃液pH最低达2.5；含有酸解食物的胃液进入十二指肠后被分泌的碳酸氢钠迅速碱化，短期内可提升pH高达4个单位；碱化的酸解食物进入小肠，被胰腺分泌的各种消化酶消化，其营养成分在小肠吸收。图2的结果表明使用含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒比单独使用水滑石在水溶液中对盐酸的缓冲比单独使用水滑石缓慢，形成的最高pH<9.0,对胃肠道无损伤。比单独使用水滑石形成的低，其作用应该比单独使用水滑石更温和，并且含有燕麦对胃刺激小。
结论：成功制造了含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒产品。
实施例4
目的：丁酸钠对人结肠癌细胞HT-29表达人肠碱性磷酸酶的研究。
方法：每孔100uL接种1×105个/ml的HT-29细胞(ATCC)于96孔板，37℃培养24h。实验当天细胞吸附后，试验组加入终浓度2mM的丁酸钠刺激HT-29细胞，对照组接入相同体积缓冲液。48h后后收集培养液上清，利用碱性磷酸酶活性试剂盒(Leagene Biological Ltd,catalogue#TE0005)检测其中的IAP活性水平(U/mg细胞总蛋白)。结果如表3。
表3.丁酸钠对于HT-29产生IAP活性水平的影响。
人结肠癌细胞HT-29产生的肠碱性磷酸酶的活性水平极低，丁酸钠明显增加了肠碱性磷酸酶的活性水平(p<0.001)。
结论：丁酸钠可显著增加HT-29表达IAP水平，是人IAP诱导剂。
实施例5
目的：使用低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒产品(见实施例3)直接口服治疗高血糖、高血脂、高血压，并探究其对胰岛素抵抗、尿pH、血浆LPS、CRP、GLP-1影响。
方法：经长春嘉和外科医院的医学伦理委员会批准，招募患有轻度高血糖、高血脂与高血压的受试者25名，男12名，女13名，年龄59.6±12.4岁，记录受试者的相关数据(即仅服用相关药物不食用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒进行治疗前)。不停用胰岛素或口服降糖药或改变药物剂量下，每日早晚两餐前两次口服含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒产品33克(见实施例3)，连续4周后(30d)，记录受试者的相关数据，并比较治疗前后、空腹及餐后血糖、糖化血红蛋白、体重、甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、舒张压、收缩压、空腹胰岛素与C肽、尿pH、血浆LPS、CRP、GLP-1的变化。患者参与服用药物统计为25人，在使用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前：只服用二甲双胍6人，只服用消渴丸3人，二甲双胍+胰岛素4人，二甲双胍+消渴丸2人，二甲双胍+格列齐特3人，二甲双胍+降糖宁2人，二甲双胍+糖适平1人，二甲双胍+阿卡波糖+胰岛素1人，不服用药物为3人。
不停用胰岛素或口服降糖药或改变药物剂量，以服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒前为治疗前，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒后为治疗后，只观察治疗前后血糖的降低情况，结果如表11所示。
低剂量治疗糖尿病人的高血糖水平的研究。
表11服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后血糖变化水平。
从表11可知，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前，代表糖尿病的糖化血红蛋白(％)平均高达9.8％,而在服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗后，代表糖尿病的糖化血红蛋白(％)平均降为7.7％，说明含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有改善糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平，改善了患者的体质。
不停用胰岛素或口服降糖药或改变药物剂量，以服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒前为治疗前，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒后为治疗后，只观察治疗前后血脂的降低情况，结果如表12所示。
从表12可知，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后，代表高血脂与高血压的甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白均有明显下降，说明含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有改善高血脂与高血压患者的甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白的水平，改善了患者的体质。
表12服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后血脂变化水平。
不停用胰岛素或口服降糖药或改变药物剂量，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒前为治疗前，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒后为治疗后，只观察治疗前后血压的降低情况。
表13服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后血压与体重变化水平。
结论：4周口服低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有效减少糖尿病人的血糖水平(p<0.01)；4周口服低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒明显降低了胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白(p<0.01),对于高密度脂蛋白的提升不明显(p>0.05)；4周口服低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有效治疗还缓解了高血压(p<0.05)。本研究发现治疗前后体重无显著性变化(p>0.05)，提示以上治疗效果与体重无关。
低剂量治疗糖尿病人的胰岛素抵抗水平的研究。
不停用胰岛素或口服降糖药或改变药物剂量，服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒只观察治疗前后胰岛素抵抗缓解情况。
表14服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后胰岛素抵抗变化水平。
结论：本研究通过测定治疗前后血糖/糖化血红蛋白和血浆胰岛素/C肽的比值发现均减小，提示4周口服低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有效治疗还缓解了组织胰岛素抵抗(p<0.01)。
低剂量治疗糖尿病人的尿pH水平的研究。
表15服用含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗前后尿pH变化水平。
结论：本研究还发现治疗后尿pH明显升高，提示小肠碱负荷增加和肠道pH升高，进一步增加肠碱性磷酸酶活性和灭活LPS效果。4周口服低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有效增强了肠道pH水平(p<0.01)。
低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗糖尿病人的血液学指标的研究。
结论：1)图3显示：对比2型糖尿病病人治疗前后的血浆LPS水平(n＝3)，发现治疗明显抑制了病人血浆LPS水平(p<0.001)；2)图4显示：对比2型糖尿病病人治疗前后的血浆CRP水平(n＝3)，发现治疗明显抑制了病人血浆CRP水平(p<0.001)；3)图5显示，对比2型糖尿病病人治疗前后的血浆GLP-1水平(n＝3)，发现治疗逐渐升高了病人血浆GLP-1水平(p<0.01)。
实施例6
尿代谢健康检测已做过近3万亚洲人的临床研究，结果表明其用来做代谢综合征和“肠漏”的诊断和治疗效果检测可靠性>90％。
目的：通过酸与碱的饮食来研究其对口腔和尿液pH值的影响。
方法：采用pH试纸法检测空腹口腔pH和晨起尿液pH，所述的方法具体步骤如下：
1)招募5位健康参与者(3女2男)与5位代谢综合征患者(2女3男)，每日晚饭时间与睡前分别口服500ml雪碧、8片碳酸氢钠片(0.5g/片)、180g红烧肉(熟)、180g高温低油低盐炒包菜。次日清晨测定唾液pH与尿液pH，连续5d；2)5位健康参与者每日晚饭时间与睡前分别食用180g高温豆油油炸包菜、180g高温花生油油炸包菜、180g高温菜籽油油炸包菜、180g高温低油低盐炒包菜。次日清晨测定唾液pH与尿液pH，连续5d。
结果如表16、17、18所示。
表16健康参与者酸碱饮食后口腔pH和尿液pH。
空腹 柠檬酸饮料 小苏打片 红烧肉 低油低盐食品
尿pH 6.7±0.2 4.9±0.4 7.7±0.1 5.8±0.2 6.3±0.2
口腔pH 6.8±0.3 5.6±0.3 6.9±0.0 6.1±0.4 6.7±0.3
表17代谢综合征患者酸碱饮食后口腔pH和尿液pH。
空腹 柠檬酸饮料 小苏打片 红烧肉 低油低盐食品
尿pH 5.3±0.2 4.6±0.3 7.4±0.4 5.7±0.2 5.9±0.3
口腔pH 6.7±0.0 6.3±0.1 7.2±0.1 6.3±0.0 6.6±0.2
健康参与者与代谢综合征患者通过上述酸碱饮食可以发现，服用酸性与肉类食品时，其尿pH反应为较低；当服用碱性食品与低油低盐食品时，其尿pH反应为较高，因此，尿pH和口腔pH反映胃肠pH水平，是测定肠道pH的间接测定方法。
表18健康参与者食用不同食用油炒蔬菜后口腔pH和尿液pH。
空腹 豆油 菜籽油 花生油
尿pH 6.7±0.2 5.7±0.2 5.2±0.0 5.1±0.1
口腔pH 6.8±0.3 6.3±0.4 6.2±0.2 6.2±0.1
结论：实验结果表明豆油比其它油刺激胃酸分泌少，可能更健康。
实施例7
目的：胃、小肠道和尿液pH值比较。
方法：取饲养小鼠的胃、小肠和尿液，利用pH试纸检测胃、小肠和小鼠尿液pH，所述的方法具体步骤如下：
1)选取30只SPF级C57BL/6小鼠，体重18-22g，在自然光线下，环境温度(23±1℃)，12小时明亮和黑暗循环。将小鼠用普通饲料适应性喂养一周，适应生活环境；适应环境一周后将小鼠随机分为2组，每组15只，分别是酸性食物组和碱性食物组；酸性食物组喂普通饲料和添加了5ml雪碧的无菌水，碱性食物组喂普通饲料和添加了0.04g/mL小苏打水，连续喂养30d；处死小鼠，解剖，取胃液上清液、肠道内容物、尿液滴在pH试纸上测定pH。注：动物实验经东北农业大学食品学院伦理委员会审批同意。
结果如表19，当给小鼠酸性饮食时，其胃、小肠与尿的pH均显著低于碱性饮食时相应的pH。
表19小鼠使用酸碱食物后胃、小肠道和尿pH。
胃 小肠 尿 样本数
酸性食物 2.4±0.1 6.2±0.2 5.1±0.1 15
碱性食物 4.6±0.3 7.4±0.2 7.0±0.3 15
结论：试验结果表明胃、小肠道和尿液pH值呈正相关。
实施例8
分子水平研究
目的1：在不同pH条件下(5.0-8.0)，探究其对猪小肠粘膜碱性磷酸酶活性的影响。
方法1：含有碱性磷酸酶的猪小肠粘膜和部分纯化的猪小肠粘膜碱性磷酸酶(纯度15-20％)被用来研究不同pH(5.0-8.0)对碱性磷酸酶活性的影响。碱性磷酸酶活性采用PNP微板法碱性磷酸酶检测试剂盒(LEAGENE公司，Catalogue#TE0002)。结果如图6所示。
结论1：图6的结果表明，pH从5.0变化到8.0使含有碱性磷酸酶的猪小肠粘膜的碱性磷酸酶活性从27.60±0.39增加到53.42±0.82，增加了约26单位。这个结果表明小肠粘膜碱性磷酸酶的活性在肠粘膜原位在高pH时活性明显增加。
目的2：在不同pH条件下(5.0-8.0)，探究重组肠碱性磷酸酶对LPS的灭活效果与对ATP、ADP、AMP、UDP的脱Pi效果。
不同pH下，重组肠碱性磷酸酶对LPS灭活效果。
方法2：将内毒素(以下称LPS)(大肠杆菌0111：B4，Sigma)用Tris-Hcl缓冲液(50mM，pH8.0)稀释为0.1mg/mL；取990uLpH5.0-8.0的重组人肠碱性磷酸酶(以下称recIAP)稀释液(43.00U/mL)，添加10uL相同pH的LPS的溶液，混匀，37℃孵育180min；将上述recIAP在65℃水浴处理60min灭活，取990uL灭活recIAP稀释液，添加10uLLPS溶液，混匀,37℃孵育180min作为空白对照；利用内毒素检测鲎试剂盒(试管定量显色基质法，EC32545S，厦门鲎试剂生物科技股份有限公司)测定其活性。结果如图7。
结论2：图7显示，碱性磷酸酶灭活LPS活性与酸碱度有关，重组肠碱性磷酸酶只在中性或碱性条件下(pH7.0-8.0)才对LPS有灭活效果。
目的3：在不同pH条件下(5.0-8.0)，探究重组肠碱性磷酸酶对ATP、ADP、AMP、UDP的脱Pi效果。
方法3：配制10mM,pH5.0-8.0的ATP/ADP/AMP/UDP溶液(ATP、ADP、AMP、UDP上海源叶生物)；取950uL的重组人肠AP(以下称recIAP)稀释液(酶活0.43U/mL，pH5.0-8.0)，添加50uL相同pH的ATP/ADP/AMP/UDP溶液，混匀，37℃孵育60min；将上述重组肠碱性磷酸酶在65℃水浴处理60min灭活，取950uL灭活重组肠碱性磷酸酶稀释液，添加50uL ATP/ADP/AMP/UDP溶液，混匀，37℃孵育60min作为空白对照；利用无机磷测试盒(磷钼酸法，C006-1-1，南京建成生物工程研究所)测定无机磷含量。结果如图8、9、10、11所示。
结论3：本实施例在不同pH条件下研究了重组肠碱性磷酸酶(0.43U/ml)对ATP、ADP、AMP、UDP的脱磷效果，如图8、9、10、11所示，表明重组肠碱性磷酸酶对ATP、ADP、AMP、UDP的脱磷受pH影响，在pH条件7.0-8.0时脱Pi效果稳定。
实施例9
细胞水平研究
目的1：建立人外周血白细胞分泌TNF-α模型。
方法1：将存储的HT-29细胞与含有0.05％胰蛋白酶的溶液解离并且在0.53mMEDTA在磷酸盐缓冲盐水中浸泡1.5分钟，收集的细胞按1:15(面积/面积比)接种于96孔板，1×105个/mL，每孔100uL，37℃培养24h。实验当天，将新鲜提取的人静脉血白细胞加入单层培养的HT-29细胞的96孔板中，建立白细胞和和HT-29间相互作用模型。用不同浓度的LPS(0.05、0.10、0.50、1.00ng/ml)刺激新鲜提取的人外周血白细胞和HT-29组，24h后收集细胞上清液。用酶联免疫法(ELISA)测定TNF-α的产生，用培养基培养对照细胞。结果如图12所示。
结论1：本实施例使用新鲜提取人白细胞+人肠粘膜细胞系HT-29建立LPS刺激分泌TNF-α的小肠粘膜局部炎症细胞互相间作用模型。本实施例图12表明内毒素呈剂量依赖型刺激小肠粘膜局部炎症细胞模型分泌TNF-α(p<0.01,n＝3)。成功建立人小血管内和炎症区的炎症反应模型。
目的2：探究重组肠碱性磷酸酶与牛小肠碱性磷酸酶对LPS产生的炎症因子的抑制作用。
方法2：利用重组肠碱性磷酸酶和商品化的牛小肠碱性磷酸酶(Sigma,P6774，以下简称bIAP)(均为5U/ml)，与LPS同时加入小肠粘膜细胞模型。培育24h后收取细胞上清液检测TNF-α与IL-6水平，结果如表20、21所示。
表20.重组肠碱性磷酸酶和bIAP一样在有/无LPS的情况下均抑制小肠粘膜局部炎症细胞(人白细胞+人肠粘膜细胞系HT-29)模型分泌TNF-α。
注：小肠粘膜局部炎症细胞模型中，和对照组相比，差异极显著***(P<0.001)；和LPS组相比，差异极显著###(P<0.001)。
表21.重组肠碱性磷酸酶和bIAP一样,在有/无LPS的情况下均抑制小肠粘膜局部炎症细胞(人白细胞+人肠粘膜细胞系HT-29)模型分泌IL-6。
注：小肠粘膜局部炎症细胞模型中，和对照组相比，差异极显著***(P<0.001)；和LPS组相比，差异极显著###(P<0.001)。
结论2：本实施例发现重组肠碱性磷酸酶和提取牛肠碱性磷酸酶(bIAP)在有/无LPS的情况下均抑制人白细胞分泌TNF-α和IL-6(表2021)，提示肠碱性磷酸酶在肠粘膜有抑制炎症因子和抗炎效果。由此可以得出结论，所述的重组肠碱性磷酸酶和bIAP或其活性增强矿物质可用于治疗人白细胞TNF-α与IL-6分泌增多相关肠道粘膜疾病。
目的3：探究ATP/ADP/AMP/腺苷对小肠粘膜细胞模型TNF-α释放的影响。
方法3：分别用重组肠碱性磷酸酶(5U/ml)与低浓度ATP/ADP/AMP/腺苷(0.10、0.25、0.50、1.00uM)刺激小肠粘膜细胞模型，24h后收集培养液上清检测其中的TNF-α水平，结果如图13、14、15、16。
结论：ATP没有明显升高小肠粘膜局部炎症细胞(人白细胞+人肠粘膜细胞系HT-29)模型TNF-α的分泌水平。本研究图14、15、16表明ATP的脱磷产物随着脱磷程度的增加，其产物ADP、AMP、adenosine对TNF-α分泌水平的抑制作用逐渐明显，其中腺苷adenosine对于TNF-α分泌水平抑制作用最强。即重组人肠碱性磷酸酶通过降解ATP、ADP、AMP产生最终降解产物Adenosine在肠道和组织内产生抑制TNF分泌的抗炎作用。肠碱性磷酸酶可能还通过其它基质的脱磷产生抑制人白细胞分泌炎症因子TNF-α的作用，包括细胞核酸DNA的降解产物腺嘌呤核苷三磷酸、鸟嘌呤核苷三磷酸、胞嘧啶核苷三磷酸、胸腺嘧啶核苷三磷酸和RNA的降解产物腺嘌呤核苷三磷酸、鸟嘌呤核苷三磷酸、胞嘧啶核苷三磷酸、尿嘧啶核苷三磷酸。
实施例10
目的：肠碱性磷酸酶抑制人中性粒和单个核细胞移走研究
方法：新鲜提取的人中性粒细胞和单个核细胞移走研究：(1)称取0.08g琼脂糖粉溶于10ml蒸馏水中，高压灭菌，放置恒温烘箱备用。(2)本研究采用糖密度梯度离心法，即人静脉血中性粒细胞分离试剂盒(内毒素<0.1EU，天津灏洋华科生物科技有限公司)，分离静脉血。常温下采集人静脉血520g离心20min，分别吸取单个核细胞层(淋巴细胞和少部分单核细胞)和多核细胞层(中性粒细胞为主)，充分裂解红细胞，反复清洗两次，新鲜提取的中性粒细胞和单个核细胞分别用少量PBS培养基重悬，计数，染色看细胞形态。用1×R1640重悬调整细胞密度至3×108个/ml备用。(3)将0.8％琼脂糖胶放入37℃水中保温，取500ul琼脂糖与等量2×R1640(20％FBS+1％P/S)混合；(4)分别取100ul上述混合液与100ul中性粒细胞悬液和单个核细胞混悬液混合，置37℃水浴；(5)取两个预冷的96孔板，向其中一个冷却的96孔板各孔加入2ul中性粒细胞琼脂糖混合液，另外一个冷却的96孔板各孔加入2ul单个核细胞琼脂糖混合液，要求在孔底中心形成直径为2mm的微滴；(6)将铺好胶滴的96孔板放置4℃，15min；(7)配制含10％FBS、1.0ng/ml LPS+10％FBS、1.0ng/ml LPS+2.5U/ml+10％FBS、2.5U/ml recIAP+10％FBS的R1640培养基；(8)待孔内琼脂糖微滴凝固后，将100ul上述试剂分别加入各孔，每组4个平行；(9)加盖后放入37℃恒温培养箱3h；(10)取出96孔板，置倒置显微镜下观察迁移距离并拍照记录，运用Imagej软件计算细胞运动面积。
结果如图17、18所示：
结论：1.肠碱性磷酸酶抑制人中性粒细胞移走研究中：
1)肠碱性磷酸酶抑制人中性粒细胞从胶滴内向胶滴外培养液中移走(胶滴内含有5％FBS。胶滴外含有10％FBS)，结果如图17所示，结果表明肠碱性磷酸酶在有和没有LPS的情况下均抑制人中性粒细胞从胶滴内向胶滴外培养液中移走。使用不同健康志愿者的中性粒细胞重复本研究两次获得基本相同结果。
2)肠碱性磷酸酶抑制人单个核细胞从胶滴内向胶滴外培养液中移走(胶滴内含有5％FBS。胶滴外含有10％FBS。)，结果如图18所示，结果表明肠碱性磷酸酶在有和没有LPS的情况下均抑制人单个核细胞从胶滴内向胶滴外培养液中移走。使用不同健康志愿者的中性粒细胞重复本研究两次获得类似结果。
结论：本研究发现肠碱性磷酸酶在有和无内毒素的情况下均抑制人中性粒细胞和单个核细胞移走和吞噬功能。
实施例11
目的：研究低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒口服治疗结肠炎的临床效果。
方法：使用低剂量含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒(见实施例3)口服治疗患有轻度结肠炎(偶有脓血便，大便次数>3次/天，轻度腹部不适)的受试者15例。受试者每次口服含有微胶囊包膜丁酸钠的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒33克，每日两次，共治疗4周；观察受试者治疗前后脓血便，大便次数，腹部不适的改善情况(见表22)。注：可以使用商业化获得胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片与混合物一起服用。
结果：
表22显示15例患有轻度结肠炎的受试者治疗4周前后脓血便，大便次数，腹部不适的改善情况。
表22.每日两次每次33克口服含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的含有3g微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒治疗4周前后患有结肠炎的受试者的症状和体征情况。
样本数 大便次数 腹部不适 血便
治疗前 15 >3 有 有
治疗后 15 <3 无 无
结论：口服含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒有效治疗结肠炎。
综上，本发明制备的含有微胶囊包膜丁酸钠(或胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠)的肠碱化和脂肪吸收阻断矿物质爆膨颗粒为碱性磷酸酶表达促进和活性增强剂，作为药品和保健品在治疗高血脂、高血糖、高血压和结肠炎中有较好的效果。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，本领域技术人员利用上述揭示的技术内容做出些许简单修改、等同变化或修饰，均落在本发明的保护范围内。

Claims (7)

1.一种肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂，其特征在于，包括肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质、阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质、爆膨敷料、调味剂和微胶囊包膜丁酸钠；
各成分的重量份组成为：所述肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质为9～9.5重量份，所述阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质为3.5～4重量份，所述爆膨敷料为12.5～13重量份，所述调味剂为4～5重量份，所述微胶囊包膜丁酸钠为3重量份；
所述肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质为水滑石，所述阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质为蒙脱石粉，所述爆膨敷料为燕麦粉，所述调味剂为木糖醇；
所述微胶囊包膜丁酸钠的制备方法为：
1)将羟丙基甲基纤维素、壳聚糖、二氧化硅合并在流化床中230度高温沸腾膨胀，然后将丁酸钠水溶液喷涂到上述三种物质混合物上，高温干燥后低温固化，使丁酸钠颗粒固化成型；
2)然后将包膜材料巴西棕榈蜡、棕榈油脂和聚乙二醇溶于有机溶剂，在流化床中进行底喷包衣，得到包膜均匀的微胶囊包膜丁酸钠颗粒，，使丁酸钠质量百分比为30％。
2.根据权利要求1所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂，其特征在于，所述各物质组成为：水滑石9.11重量份、蒙脱石粉3.64重量份、燕麦粉12.75重量份、木糖醇4.50重量份和微胶囊包膜丁酸钠3.00重量份。
3.根据权利要求1或2所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂，其特征在于，所述复方药用制剂经人服用有效剂量后的尿液pH呈碱性；
和/或，所述复方药用制剂于提高肠道内碱性磷酸生产酶表达水平和活性；
和/或，所述复方药用制剂用于提高肠道内碱性磷酸酶灭火内毒素的活性和减少脂肪携带的内毒素吸收。
4.根据权利要求1或2所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂，其特征在于，所述复方药用制剂为爆膨颗粒和微胶囊包膜颗粒的混合物，所述爆膨颗粒为肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质、阻断内毒素和脂肪吸收的矿物质、爆膨敷料和调味剂制成的爆膨颗粒。
5.根据权利要求1或2所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂，其特征在于，所述微胶囊包膜丁酸钠中丁酸钠的质量分数为30％；
和/或，所述微胶囊包膜丁酸钠为胶囊或肠溶胶囊或肠溶包片包裹的微胶囊包膜丁酸钠。
6.一种权利要求1至5任一所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将羟丙基甲基纤维素、壳聚糖、二氧化硅合并在流化床中230度高温沸腾膨胀，然后将丁酸钠水溶液喷涂到上述三种物质混合物上，高温干燥后低温固化，使丁酸钠颗粒固化成型；然后将包膜材料巴西棕榈蜡、棕榈油脂和聚乙二醇溶于有机溶剂，在流化床中进行底喷包衣，得到包膜均匀的微胶囊包膜丁酸钠颗粒，使丁酸钠质量百分比为30％；
2)将肠碱化矿物质或肠碱性磷酸酶活性增强矿物质、脂肪吸收阻断矿物质、爆膨辅料和调味剂按比例利用双螺杆膨化机爆膨，然后将获得的爆膨颗粒与微胶囊包膜丁酸钠颗粒混合制得复方药用制剂。
7.一种权利要求1至5任一所述的肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方药用制剂的应用，其特征在于，所述复方药用制剂作为制备治疗肠碱性磷酸酶活性降低相关疾病的药品的应用，所述疾病为高血脂、高血糖、高血压或者结肠炎。
CN202010091336.9A 2020-02-13 2020-02-13 肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用 Active CN111281882B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010091336.9A CN111281882B (zh) 2020-02-13 2020-02-13 肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010091336.9A CN111281882B (zh) 2020-02-13 2020-02-13 肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111281882A CN111281882A (zh) 2020-06-16
CN111281882B true CN111281882B (zh) 2024-04-16

Family

ID=71029203

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010091336.9A Active CN111281882B (zh) 2020-02-13 2020-02-13 肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111281882B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112868909A (zh) * 2021-01-22 2021-06-01 湖北神舟化工有限公司 一种无臭型丁酸钠及其生产方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1917899A (zh) * 2004-02-04 2007-02-21 塞浦西斯阿瓦药物集团 碱性磷酸酶对存在于粘膜屏障的脂多糖解毒的用途
CN103238730A (zh) * 2012-03-22 2013-08-14 杭州康德权饲料有限公司 一种微囊化包膜丁酸钠的制备方法
CN105213422A (zh) * 2015-09-10 2016-01-06 北京师范大学 一种预防肥胖和降低高血脂的蒙脱石制剂及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1917899A (zh) * 2004-02-04 2007-02-21 塞浦西斯阿瓦药物集团 碱性磷酸酶对存在于粘膜屏障的脂多糖解毒的用途
CN103238730A (zh) * 2012-03-22 2013-08-14 杭州康德权饲料有限公司 一种微囊化包膜丁酸钠的制备方法
CN105213422A (zh) * 2015-09-10 2016-01-06 北京师范大学 一种预防肥胖和降低高血脂的蒙脱石制剂及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
冉舒文 ; 慕春龙 ; 朱伟云 ; .丁酸抑制溃疡性结肠炎分子机制的研究进展.世界华人消化杂志.2018,(第14期),第856-861页. *
陈国顺等.日粮中添加包膜丁酸钠对香猪生产性能和血液生化指标的影响.中国畜牧兽医.2012,第39卷(第6期),第98-100页. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111281882A (zh) 2020-06-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5877902B2 (ja) バクテロイデス門の胃腸管微生物相対フィルミクテス門の微生物相の比を上昇させるための組成物および製剤の使用
Zhang et al. Grape skin extract inhibits mammalian intestinal α-glucosidase activity and suppresses postprandial glycemic response in streptozocin-treated mice
CA2540467C (en) Compositions and methods for augmenting kidney function
US5229374A (en) Method for treatment of lower gastrointestinal tract disorders
CN107106584A (zh) 用于治疗代谢障碍的合成组合物
US20030082168A1 (en) Compositions and methods for facilitating weight loss
US20080003207A1 (en) Treating inflammatory bowel disease with live bacteria
EP3463404A1 (en) Composition of probiotics and digestive enzymes and method of preparing and using the same
CN113181365A (zh) 一种可降尿酸、溶解尿酸结晶和痛风石的组合物及其应用
US7998470B2 (en) Compositions and methods improving renal function
CN111281882B (zh) 肠碱性磷酸酶表达促进和活性增强复方制剂及其制备、使用方法和应用
CN109620948A (zh) 高尿酸/痛风的全自然细胞调理方法
US20040197352A1 (en) Methods of improving or augmenting kidney function
CN112971154A (zh) 一种富含水溶性膳食纤维及α-淀粉酶抑制剂的固体混合物及其制备方法、应用
CN101129394B (zh) 秦皮甲素预防和/或治疗心脑血管疾病的新用途
RU2713656C2 (ru) СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ДИСРЕГУЛЯЦИИ ЯДЕРНОГО ФАКТОРА КОРОТКОЦЕПОЧЕЧНОГО ЭНХЕНСЕРА КАППА АКТИВИРОВАННОЙ КЛЕТКИ В (NF-κB) В ОРГАНИЗМЕ, НУЖДАЮЩЕМСЯ В ЭТОМ, С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМПОЗИЦИЙ МЕМБРАН ЯИЧНОЙ СКОРЛУПЫ
US7026160B2 (en) Oral bacteriotherapy compositions and methods
CN103037901B (zh) 抑制cd36以控制肥胖和胰岛素敏感性
JP2002371003A (ja) 血糖値上昇抑制剤
US5773426A (en) Proteoglucan and antidiabetic drug thereof
US11839633B2 (en) Composition and method of treating gastrointestinal disease with microbial and soy mixture
JP5238957B2 (ja) ラミナリンまたはオリゴラミナリンを主成分とする敗血症および敗血症性ショック治療用薬物
Ueda et al. Chrysanthemum flower oil inhibits diet-induced serum uric acid elevation in adult male subjects: A randomised, double-blind, placebo-controlled cross-over comparison study
CN108619283B (zh) 一种用于改善脂质代谢、减少内脏脂肪的组合物
JP2023518058A (ja) ヒト対象でウロリチンの産生を増強するための組成物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20240321

Address after: 266600 Hainuo Building, No.1 Guangdong Road, Foreign Industrial Park, Jiangshan Town, Laixi City, Qingdao City, Shandong Province

Applicant after: QINGDAO HUINUODE BIOTECHNOLOGY CO.,LTD.

Country or region after: China

Address before: 266600 Hainuo Building, No.1 Guangdong Road, Foreign Industrial Park, Jiangshan Town, Laixi City, Qingdao City, Shandong Province

Applicant before: Li Xinrong

Country or region before: China

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant