RU2674264C1 - Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний или деменции и способ ее получения и применение - Google Patents
Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний или деменции и способ ее получения и применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2674264C1 RU2674264C1 RU2017121638A RU2017121638A RU2674264C1 RU 2674264 C1 RU2674264 C1 RU 2674264C1 RU 2017121638 A RU2017121638 A RU 2017121638A RU 2017121638 A RU2017121638 A RU 2017121638A RU 2674264 C1 RU2674264 C1 RU 2674264C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- group
- chinese medicinal
- dementia
- chinese
- saffron
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 296
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 title claims abstract description 49
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 title claims abstract description 30
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 title claims abstract description 30
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 239000003390 Chinese drug Substances 0.000 title abstract description 57
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 64
- 244000124209 Crocus sativus Species 0.000 claims abstract description 63
- 235000015655 Crocus sativus Nutrition 0.000 claims abstract description 63
- 239000004248 saffron Substances 0.000 claims abstract description 63
- 235000013974 saffron Nutrition 0.000 claims abstract description 63
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 56
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 claims abstract description 54
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 claims abstract description 54
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 47
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 claims abstract description 47
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 47
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims abstract description 13
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 59
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 58
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 241000218628 Ginkgo Species 0.000 claims description 53
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 50
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 48
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 35
- -1 filter Substances 0.000 claims description 17
- 239000009429 Ginkgo biloba extract Substances 0.000 claims description 14
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims description 14
- 201000004810 Vascular dementia Diseases 0.000 claims description 12
- 235000020710 ginseng extract Nutrition 0.000 claims description 12
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 11
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 11
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 6
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 6
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims description 3
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims description 3
- 229930182494 ginsenoside Natural products 0.000 claims description 3
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 3
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 2
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 claims 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 125
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 71
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 abstract 1
- 244000131316 Panax pseudoginseng Species 0.000 abstract 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 138
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 90
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 71
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 58
- 240000005373 Panax quinquefolius Species 0.000 description 39
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 38
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 38
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 35
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 35
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 35
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 31
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 28
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 28
- DUUGKQCEGZLZNO-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxyindoleacetic acid Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 DUUGKQCEGZLZNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 25
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 25
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 25
- HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N alloxan Chemical compound O=C1NC(=O)C(=O)C(=O)N1 HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 24
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 23
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 23
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 23
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 22
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 20
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 20
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 20
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 20
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 20
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 20
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 20
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 20
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 19
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 19
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 19
- ZQPQGKQTIZYFEF-WCVJEAGWSA-N Huperzine Natural products C1([C@H]2[C@H](O)C(=O)N[C@H]2[C@@H](O)C=2C=CC=CC=2)=CC=CC=C1 ZQPQGKQTIZYFEF-WCVJEAGWSA-N 0.000 description 18
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 18
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 18
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 17
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 17
- 102100033639 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 16
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 16
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 16
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 16
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 16
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 16
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 16
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 15
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 14
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 14
- 238000011161 development Methods 0.000 description 14
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 14
- RVWZUOPFHTYIEO-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxyindoleacetic acid Natural products C1=C(O)C=C2C(C(=O)O)=CNC2=C1 RVWZUOPFHTYIEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000003310 5-hydroxyindoleacetic acid Substances 0.000 description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 13
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 13
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000000306 component Substances 0.000 description 11
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 11
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 11
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 11
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 10
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 10
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 10
- 210000002763 pyramidal cell Anatomy 0.000 description 10
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 9
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 8
- 108090000932 Calcitonin Gene-Related Peptide Proteins 0.000 description 8
- 102100025588 Calcitonin gene-related peptide 1 Human genes 0.000 description 8
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 8
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 8
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 8
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 8
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 8
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 8
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 8
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 8
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 8
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 7
- 230000003727 cerebral blood flow Effects 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 7
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 6
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 6
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 6
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 6
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 6
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 6
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 6
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 6
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 6
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 6
- ZRJBHWIHUMBLCN-SEQYCRGISA-N Huperzine A Natural products N1C(=O)C=CC2=C1C[C@H]1/C(=C/C)[C@]2(N)CC(C)=C1 ZRJBHWIHUMBLCN-SEQYCRGISA-N 0.000 description 5
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 5
- ZRJBHWIHUMBLCN-UHFFFAOYSA-N Shuangyiping Natural products N1C(=O)C=CC2=C1CC1C(=CC)C2(N)CC(C)=C1 ZRJBHWIHUMBLCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000000269 carotid artery external Anatomy 0.000 description 5
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 5
- ZRJBHWIHUMBLCN-YQEJDHNASA-N huperzine A Chemical compound N1C(=O)C=CC2=C1C[C@H]1\C(=C/C)[C@]2(N)CC(C)=C1 ZRJBHWIHUMBLCN-YQEJDHNASA-N 0.000 description 5
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 5
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 5
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 5
- ZRJBHWIHUMBLCN-BMIGLBTASA-N rac-huperzine A Natural products N1C(=O)C=CC2=C1C[C@@H]1C(=CC)[C@@]2(N)CC(C)=C1 ZRJBHWIHUMBLCN-BMIGLBTASA-N 0.000 description 5
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 5
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 5
- CFFZDZCDUFSOFZ-UHFFFAOYSA-N 3,4-Dihydroxy-phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 CFFZDZCDUFSOFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930000680 A04AD01 - Scopolamine Natural products 0.000 description 4
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N Hyoscine Natural products C1([C@H](CO)C(=O)OC2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N 0.000 description 4
- 101710151321 Melanostatin Proteins 0.000 description 4
- STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-scopolamin Natural products C1C(C2C3O2)N(C)C3CC1OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 4
- 102400000064 Neuropeptide Y Human genes 0.000 description 4
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100023038 WD and tetratricopeptide repeats protein 1 Human genes 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 4
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 4
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 4
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 4
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 4
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 4
- URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N nucleopeptide y Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 4
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 4
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 4
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N scopolamine Chemical compound C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N 0.000 description 4
- 229960002646 scopolamine Drugs 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N (+-)-Isoprenaline Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNXIKVLOVZVMQF-UHFFFAOYSA-N (3beta,16beta,17alpha,18beta,20alpha)-17-hydroxy-11-methoxy-18-[(3,4,5-trimethoxybenzoyl)oxy]-yohimban-16-carboxylic acid, methyl ester Natural products C1C2CN3CCC(C4=CC=C(OC)C=C4N4)=C4C3CC2C(C(=O)OC)C(O)C1OC(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 DNXIKVLOVZVMQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 3
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 3
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 3
- OKIZCWYLBDKLSU-UHFFFAOYSA-M N,N,N-Trimethylmethanaminium chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)C OKIZCWYLBDKLSU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 3
- LCQMZZCPPSWADO-UHFFFAOYSA-N Reserpilin Natural products COC(=O)C1COCC2CN3CCc4c([nH]c5cc(OC)c(OC)cc45)C3CC12 LCQMZZCPPSWADO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QEVHRUUCFGRFIF-SFWBKIHZSA-N Reserpine Natural products O=C(OC)[C@@H]1[C@H](OC)[C@H](OC(=O)c2cc(OC)c(OC)c(OC)c2)C[C@H]2[C@@H]1C[C@H]1N(C2)CCc2c3c([nH]c12)cc(OC)cc3 QEVHRUUCFGRFIF-SFWBKIHZSA-N 0.000 description 3
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 3
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N aldehydo-D-galactose Chemical group OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000004004 carotid artery internal Anatomy 0.000 description 3
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 3
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 229940039009 isoproterenol Drugs 0.000 description 3
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 3
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- BJOIZNZVOZKDIG-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C([C]5C=CC(OC)=CC5=N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 BJOIZNZVOZKDIG-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 3
- 229960003147 reserpine Drugs 0.000 description 3
- MDMGHDFNKNZPAU-UHFFFAOYSA-N roserpine Natural products C1C2CN3CCC(C4=CC=C(OC)C=C4N4)=C4C3CC2C(OC(C)=O)C(OC)C1OC(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 MDMGHDFNKNZPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 3
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 2
- 201000006306 Cor pulmonale Diseases 0.000 description 2
- 241001559589 Cullen Species 0.000 description 2
- IROWCYIEJAOFOW-UHFFFAOYSA-N DL-Isoprenaline hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 IROWCYIEJAOFOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 2
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010050661 Platelet aggregation inhibition Diseases 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 2
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 2
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 2
- 230000001964 calcium overload Effects 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 2
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 2
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000010030 glucose lowering effect Effects 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 2
- 238000013238 high-fat diet model Methods 0.000 description 2
- QRMZSPFSDQBLIX-UHFFFAOYSA-N homovanillic acid Chemical compound COC1=CC(CC(O)=O)=CC=C1O QRMZSPFSDQBLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 229940018448 isoproterenol hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 230000007087 memory ability Effects 0.000 description 2
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 230000010082 neurochemical mechanism Effects 0.000 description 2
- BPGXUIVWLQTVLZ-OFGSCBOVSA-N neuropeptide y(npy) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 BPGXUIVWLQTVLZ-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 2
- 230000008285 neurophysiological mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003478 temporal lobe Anatomy 0.000 description 2
- 210000001103 thalamus Anatomy 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 230000031836 visual learning Effects 0.000 description 2
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDRFUUBRGGDEIZ-UHFFFAOYSA-N 3,6-dichloro-2-methoxybenzoate;dimethylazanium Chemical compound CNC.COC1=C(Cl)C=CC(Cl)=C1C(O)=O JDRFUUBRGGDEIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDDLHHRCDSJVKV-UHFFFAOYSA-N 7028-40-2 Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O BDDLHHRCDSJVKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 102400000748 Beta-endorphin Human genes 0.000 description 1
- 101800005049 Beta-endorphin Proteins 0.000 description 1
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 1
- 208000002381 Brain Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008469 Chest discomfort Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 102400000686 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101800004490 Endothelin-1 Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070511 Hypoxic-ischaemic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000007177 Left Ventricular Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027525 Microalbuminuria Diseases 0.000 description 1
- 208000019022 Mood disease Diseases 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 102100038991 Neuropeptide Y receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710197945 Neuropeptide Y receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000004186 Pulmonary Heart Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010063661 Vascular encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010057469 Vascular stenosis Diseases 0.000 description 1
- 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 1
- ATBRJKHXJCLVNL-UHFFFAOYSA-N [N-2]CC[N-2].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+] Chemical class [N-2]CC[N-2].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+] ATBRJKHXJCLVNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- JUGOREOARAHOCO-UHFFFAOYSA-M acetylcholine chloride Chemical compound [Cl-].CC(=O)OCC[N+](C)(C)C JUGOREOARAHOCO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960004266 acetylcholine chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 208000037919 acquired disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001800 adrenalinergic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 235000019606 astringent taste Nutrition 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004227 basal ganglia Anatomy 0.000 description 1
- 231100000871 behavioral problem Toxicity 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- FCPVYOBCFFNJFS-LQDWTQKMSA-M benzylpenicillin sodium Chemical compound [Na+].N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C([O-])=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 FCPVYOBCFFNJFS-LQDWTQKMSA-M 0.000 description 1
- WOPZMFQRCBYPJU-NTXHZHDSSA-N beta-endorphin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WOPZMFQRCBYPJU-NTXHZHDSSA-N 0.000 description 1
- 238000011325 biochemical measurement Methods 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000012503 blood component Substances 0.000 description 1
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 1
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 1
- 230000009460 calcium influx Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 238000010523 cascade reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002932 cholinergic neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000000225 effect on diabetes Effects 0.000 description 1
- 230000000001 effect on platelet aggregation Effects 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 238000005485 electric heating Methods 0.000 description 1
- 238000000835 electrochemical detection Methods 0.000 description 1
- 230000010102 embolization Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000007692 exotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 210000001652 frontal lobe Anatomy 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007446 glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000009191 jumping Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000007787 long-term memory Effects 0.000 description 1
- 230000027928 long-term synaptic potentiation Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000028161 membrane depolarization Effects 0.000 description 1
- 230000006386 memory function Effects 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- ZYWIWGUMKCZKOO-BQTSRIDJSA-N methyl (1r,15s,17r,18r,19s,20s)-6,18-dimethoxy-17-(3,4,5-trimethoxybenzoyl)oxy-1,3,11,12,14,15,16,17,18,19,20,21-dodecahydroyohimban-19-carboxylate;hydrochloride Chemical compound Cl.O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 ZYWIWGUMKCZKOO-BQTSRIDJSA-N 0.000 description 1
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 1
- 230000003680 myocardial damage Effects 0.000 description 1
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000003188 neurobehavioral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002182 neurohumoral effect Effects 0.000 description 1
- 230000007658 neurological function Effects 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000007410 oral glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000004783 oxidative metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 210000002442 prefrontal cortex Anatomy 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 239000008732 sailuotong Substances 0.000 description 1
- 229960004499 scopolamine hydrobromide Drugs 0.000 description 1
- WTGQALLALWYDJH-MOUKNHLCSA-N scopolamine hydrobromide (anhydrous) Chemical compound Br.C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 WTGQALLALWYDJH-MOUKNHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 230000006403 short-term memory Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 230000007958 sleep Effects 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- HRQDCDQDOPSGBR-UHFFFAOYSA-M sodium;octane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCS([O-])(=O)=O HRQDCDQDOPSGBR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000005482 strain hardening Methods 0.000 description 1
- 230000002739 subcortical effect Effects 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003568 synaptosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000008479 weinaokang Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/258—Panax (ginseng)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/16—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae (Ginkgo family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к композиции для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции. Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции, полученная из лекарственного сырья, состоящего из ингредиентов со следующим массовым соотношением: 1 часть женьшеня, 0,8-1,5 части листьев гинкго, 0,018-0,030 части рылец шафрана. Способ получения китайской лекарственной композиции. Китайский лекарственный состав для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции. Применение китайской лекарственной композиции или китайского лекарственного состава для получения лекарственного средства для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции. Вышеописанная композиция обладает повышенным эффектом для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 24 табл., 10 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к китайской лекарственной композиции для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний или деменции, а также способу получения и применению указанной китайской лекарственной композиции.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Сердечно-сосудистые и цереброваскулярные заболевания являются основными заболеваниями, которые угрожают жизни и здоровью людей, и характеризуются высоким уровнем заболеваемости, высоким уровнем смертности, высокой частотой инвалидизации и высокой частотой рецидивов. Согласно статистическим данным последних лет, случаи смерти, вызванной сердечнососудистыми и цереброваскулярными заболеваниями, ежегодно в Китае составляют примерно половину от всех случаев смерти. Распространенность сердечнососудистых и цереброваскулярных заболеваний тесно связана с развитием общества и повышением уровня жизни, и причинами таких заболеваний являются высокое давление, неправильное питание, недостаток физической активности, чрезмерное потребление табака и алкоголя и ожирение. Сердечно-сосудистые и цереброваскулярные заболевания включают коронарную болезнь сердца, стенокардию, инфаркт миокарда, гемодинамически зависимое сердечно-легочное заболевание (blood addicted pulmonary heart disease), ишемическую энцефалопатию, тромбоз сосудов головного мозга, гипертензию, гиперлипидемию, и основными причинами, вызывающими эти заболевания, является атеросклероз; они приводят к стенозу сосудов, закупорке протоков, что влечет за собой недостаточное кровоснабжение сердца и головного мозга, вызывая ощущение тяжести в голове, головокружение, головную боль, чувство сдавленности в груди и другие симптомы, а в тяжелых случаях могут привести к инсульту и инфаркту миокарда. Сердечнососудистая ишемия оказывает влияние на энергетический метаболизм с последующими многочисленными изменениями, такими как накопление молочной кислоты, кальциевая перегрузка, свободно-радикальные повреждения. Таким образом, сердечно-сосудистые и цереброваскулярные заболевания причиняют серьезный вред здоровью человека, и раннее их предотвращение и своевременное лечение имеют чрезвычайно важное значение.
Деменция представляет собой приобретенный устойчивый синдром умственного расстройства, вызванный органическими поражениями головного мозга. Деменцию, встречающуюся у людей пожилого возраста, подразделяют на: А. первичную дегенеративную деменцию, а именно болезнь Альцгеймера (сокращенно БА); В. сосудистую деменцию (СД); С. смешанную деменцию (сочетание БА и СД); D. другие типы деменции (болезнь Пика, деменцию с тельцами Леви). БА и СД представляют собой два основных типа деменции.
Сосудистая деменция связана с однократным или повторными инсультами и высоким артериальным давлением, высоким уровнем холестерина, диабетом, курением, потреблением алкоголя и т.д., и она проявляется в виде нарушений памяти, способности к счету, ориентации и способности к рассуждению, аффективных расстройств и патологического поведения, и даже потери жизнеспособности при достижении поздней стадии.
Данные исследований указывают на то, что вероятность возникновения деменции вследствие церебрального инфаркта связана в основном с размером, количеством и локализацией очаговых поражений, возникающих при церебральном инфаркте. Исследования показали, что очаговое поражение при инфаркте объемом более 50 мл может сопровождаться деменцией, объемом более 100 мл - часто сопровождается деменцией; в результате исследований также было обнаружено, что среди пациентов с СД большая площадь очаговых поражений при инфаркте составляет 11,2% случаев, малая площадь очаговых поражений при инфаркте составляет 88,8% случаев, множественные очаговые поражения составляли 97,6% случаев, и отмечается, что деменция также может возникать, даже если объем очаговых поражений мал - в частности, чем больше количество очаговых поражений при инфаркте, тем выше частота возникновения деменции. Также существуют исследования, подтверждающие, что локализация церебрального инфаркта является ключевым фактором, приводящим к деменции; в большинстве сообщений упоминалось, что инфаркты, приводящие к очаговым изменениям перивентрикулярного белого вещества, обнаруживаемым с помощью КТ, значительно увеличивали частоту возникновения деменции. Павикс (Pavics) изучал изменения мозгового кровотока у пациентов и обнаружил, что у пациентов с сосудистой деменцией усредненный кровоток в полушарии был значительно снижен, перфузия в области инфаркта значительно снижена по сравнению с нормальными тканями, полностью неперфузируемые области редки; в исследованиях, сопоставляющих шкалу оценки когнитивных функций с мозговым кровотоком, была обнаружена положительная корреляция между усредненным кровотоком в полушарии и степенью деменции, что позволяет предположить, что снижение кровотока при СД тесно связано с умственной деятельностью. В исследованиях последних лет было отмечено, что мозговой кровоток и интенсивность метаболизма глюкозы в некоторых участках, таких как лобная доля, височная доля, в частности таламус, базальные ганглии, у пациентов с СД были значительно снижены по сравнению с мозговым кровотоком и интенсивностью метаболизма глюкозы в других участках, что свидетельствует о возможной ассоциированности СД с разрывом связей между корой головного мозга и подкорковыми структурами, т.е. неполной связью между неврологическими функциями головного мозга. Сопротивление сосудов головного мозга, вязкость крови и нейрогуморальные факторы могут оказывать прямое или косвенное влияние на поддержание постоянного мозгового кровотока.
Исследования показали, что ишемическое поражение головного мозга представляет собой каскадный процесс, и в каждом секторе происходит индукция различных молекулярных сетей, вызывающих дегенеративное повреждение нейронов; после возникновения церебрального инфаркта происходят нарушение мозгового кровотока и реперфузия, что вызывает энергетический дефицит ткани головного мозга, повышение уровня нейромедиатора, в частности, возбуждающей аминокислоты, вызывает дальнейшее снижение кровотока и поток или высвобождение ионов кальция из внутриклеточных запасов кальция, вызывает активацию большого количества сигнальных каскадов, запускаемых ферментами, активность некоторых ферментов приводит к образованию радикалов кислорода, которые сами по себе также играют роль вторичного мессенджера, повреждают клеточные белки, сахара, жирные кислоты, дополнительно вызывают периинфарктную деполяризацию, допускают распространение области инфаркта до области ишемической полутени; свободные радикалы и другие мессенджеры активируют воспалительные цитокины и ферменты, приводят к активации клеток микроглии с развитием воспаления, таким образом происходит увеличение проницаемости сосудов, повреждение нейронального скелета, тогда как вторичное повреждение приводит к деменции. Исследования показали, что после состояния ишемии уровни нейромедиаторов сначала повышаются, а затем снижаются, такие нейромедиаторы как ацетилхолин, катехоламин, нейропептид тесно связаны со снижением когнитивных способностей. Данные нейромедиаторы участвуют в патофизиологическом процессе развития СД и могут стать важным индикатором, отражающим тяжесть СД.
В последние годы традиционная китайская медицина показала уникальные преимущества при лечении сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний, сенильной деменции, в частности, сосудистой деменции; традиционная китайская медицина является эффективной, долгосрочной, характеризуется меньшим количеством неблагоприятных реакций, особенно удовлетворяет требованию долгосрочной эффективности и, таким образом, широко используется в клинической практике. Результаты многочисленных исследований и применений в клинической практике доказали, что традиционная китайская медицина имеет уникальные преимущества, поскольку она характеризуется хорошей переносимостью и незначительными побочными эффектами, и, соответственно, она подходит для длительного применения пациентами.
Женьшень является «теплым» по своей природе и имеет сладкий и немного горький вкус и выполняет функцию питания сердца и почек, благоприятен для энергии ци и повышения интеллекта; листья гинкго являются «нейтральными» по своей природе и имеют горький и вяжущий вкус и выполняют функцию стимулирования кровообращения с устранением закупорки кровеносных сосудов. Рыльца шафрана являются «нейтральными» по своей природе, имеют сладкий вкус и выполняют функцию стимулирования кровообращения с устранением закупорки кровеносных сосудов, что приводит к уменьшению закупорки и растворению тромбов. Современные фармакологические исследования подтвердили, что женьшень содержит различные сапонины, которые могут значительно облегчить реперфузионное повреждение и нарушение памяти при ишемии головного мозга при изучении многих экспериментальных животных, эти сапонины могут улучшать способность к обучению и запоминанию у нормальных животных и обладать эффектами увеличения поглощения нейромедиаторов синаптосомами и усиления экспрессии фактора роста нервов; экстракт листьев гинкго может ингибировать перекисное окисление липидов клеточных мембран и может способствовать расширению кровеносных сосудов, увеличивать кровоток, снижать вязкость крови, ингибировать тромбоз и противодействовать агрегации тромбоцитов, что обеспечивает улучшение метаболизма в головном мозге и защиту нервных клеток; рыльца шафрана обладают эффектами блокирования притока внеклеточного кальция и высвобождения кальция из эндоплазматического ретикулума, антиоксидантной активностью, антигипертензивной активностью, действием против атеросклероза, отека головного мозга и т.д., они также могут улучшать парциальное давление кислорода в кровотоке млекопитающих, а в последние годы также было обнаружено, что они действенны против нарушений памяти и способности к познанию, вызванных употреблением алкоголя.
В патенте ZL 02131435.7 раскрыта китайская лекарственная композиция, содержащая терапевтически эффективное количество женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана для лечения ишемического цереброваскулярного заболевания и сосудистой деменции, сенильной деменции и т.д. На основании вышеуказанного патента заявитель разработал «капсулу Sailuotong» (оригинальное торговое наименование «Weinaokang»), и в настоящее время препарат проходит клинические испытания.
В заявке WO 2007118363 A1 раскрыта сходная китайская лекарственная композиция для лечения ишемического цереброваскулярного заболевания и сенильной деменции, приготовленная из женьшеня, листьев гинкго, рылец шафрана и соевых бобов.
При систематическом изучении вышеупомянутых патентов авторы настоящего изобретения обнаружили, что могут быть достигнуты лучшие результаты в случае применения конкретного компонентного состава и содержаний компонентов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы настоящего изобретения провели систематическое экспериментальное исследование эффектов компонентов композиций, указанных в патенте ZL 02131435.7 и заявке WO 2007118363 A1, по предотвращению или лечению сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и деменции и обнаружили, что эффект соевых бобов, содержащихся в композиции, не является очевидным. В ходе оптимизационного исследования состава лекарственного средства авторы настоящего изобретения обнаружили, что можно достичь лучшего по сравнению с композицией согласно WO 2007118363 A1 фармакологического эффекта с применением лишь трех ингредиентов, использующихся в китайской медицине: женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана.
Кроме того, авторы настоящего изобретения также обнаружили, что композиция, которая получена при конкретном массовом соотношении женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана, обладает улучшенным действием в отношении лечения или предотвращения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и деменции, в частности, при лечении ишемического цереброваскулярного заболевания, ишемической болезни сердца, стенокардии и сенильной деменции. В частности, указанная композиция обладает улучшенным действием в отношении лечения заболеваний, ассоциированных с сосудистой деменцией. Согласно данному исследованию, дозы композиции, приготовленной из женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана, в лекарстве дополнительно могут быть уменьшены, и, таким образом, могут быть обеспечены экономия энергии и уменьшение стоимости, и дополнительно могут быть уменьшены побочные эффекты, вызванные долгосрочным применением композиции.
Таким образом, задачей настоящего изобретения является обеспечение китайской лекарственной композиции для предотвращения или лечения сердечнососудистого заболевания или деменции с повышенной эффективностью и способа ее получения и применения.
Задача настоящего изобретения решена с помощью следующих технических решений:
Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистого и цереброваскулярного заболевания или деменции, сырье для получения которой представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 0,8-1,5 части листьев гинкго, 0,018-0,030 части рылец шафрана.
Предпочтительно, сырье для получения китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 1 часть листьев гинкго, 0,018-0,030 части рылец шафрана.
Более предпочтительно, сырье для получения китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 0,9-1,2 части листьев гинкго, 0,020-0,025 части рылец шафрана.
Еще более предпочтительно, сырье для получения китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 1 часть листьев гинкго, 0,020-0,025 части рылец шафрана.
Наиболее предпочтительно, сырье для получения китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 1 часть листьев гинкго, 0,022 части рылец шафрана.
Согласно настоящему изобретению также предложен способ получения вышеуказанной китайской лекарственной композиции.
Китайская лекарственная композиция согласно настоящему изобретению может быть получена различными способами.
В одном варианте реализации настоящего изобретения взвешивание трех видов китайского лекарственного сырья: женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана в соответствии с вышеуказанным соотношением, смешивание, затем измельчение или измельчение, далее смешивание с получением композиции.
В другом варианте реализации настоящего изобретения взвешивание трех видов китайского лекарственного сырья: женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана в соответствии с вышеуказанным соотношением, смешивание, затем экстрагирование с получением композиции.
В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения способ получения китайской лекарственной композиции включает следующие стадии: стадию взвешивания трех видов китайского лекарственного сырья: женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана в соответствии с вышеуказанным соотношением, стадию получения экстракта женьшеня, стадию получения экстракта листьев гинкго, стадию получения экстракта рылец шафрана, стадию смешивания указанных экстракта женьшеня, экстракта листьев гинкго и экстракта рылец шафрана.
Предпочтительно, на стадии получения экстракта женьшеня основной получаемый компонент представляет собой общую фракцию гинзенозидов; на стадии получения экстракта листьев гинкго основной получаемый компонент представляет собой общую фракцию флавоноидов и общую фракцию лактонов, содержащихся в листьях гинкго; на стадии получения экстракта рылец шафрана основной получаемый компонент представляет собой общую фракцию гликозидов, содержащихся в рыльцах шафрана.
Экстракты трех вышеупомянутых компонентов могут быть получены обычными способами экстракции для экстрагирования вышеуказанных компонентов, способ получения компонентов путем экстракции представляет собой отработанный способ, например, общая фракция гинзенозидов, общая фракция флавоноидов и общая фракция лактонов, содержащихся в листьях гинкго, могут быть получены с применением способов экстракции, описанных в фармакопее, способ экстракции общей фракции гликозидов, содержащихся в рыльцах шафрана, может заимствовать способ экстракции, описанный в литературном источнике «Chinese modern applied Pharmacy» (August 2011, Vol. 28 No. 8, page 729-731).
В одном варианте реализации настоящего изобретения способ получения экстракта женьшеня является следующим: женьшень измельчают в порошок, затем его 2 раза подвергают экстракции с этанолом при нагревании с обратным холодильником, фильтруют, снижают давление в полученном фильтрате с регенерацией растворителя до достижения относительной плотности 1,12-1,14 при 70°С, добавляют воду в количестве, в 2-6 раз превышающем количество неочищенного лекарственного средства, для гомогенного перемешивания, затем смесь охлаждают для осаждения, супернатант наносят на макропористую адсорбирующую смолу, указанную смолу, которая содержит лекарственное средство, сначала промывают дистиллированной водой, затем элюируют этанолом, этанольный элюент собирают и концентрируют досуха с получением экстракта женьшеня.
В одном варианте реализации настоящего изобретения способ получения экстракта листьев гинкго является следующим: к крупнодисперсному порошку листьев гинкго добавляют теплый этанол для обеспечения погружения, порошок фильтруют, и остаток на фильтре погружают в теплый этанол, затем фильтруют, фильтраты, полученные в результате двукратного погружения, объединяют, концентрируют при пониженном давлении до достижения относительной плотности 1,12-1,14 при 70°С, добавляют воду в количестве, в 2-6 раз превышающем количество неочищенного лекарственного средства, смесь перемешивают до гомогенного состояния, затем ее охлаждают для осаждения, фильтруют, фильтрат наносят на макропористую адсорбирующую смолу, указанную смолу, которая содержит лекарственное средство, сначала промывают дистиллированной водой, затем элюируют этанолом, этанольный элюент собирают и концентрируют до достижения относительной плотности 1,02-1,04 при 70°С, его подвергают экстракции смесью этилацетат : н-бутиловый спирт, экстракты объединяют и снижают в них давление с регенерацией растворителя с получением экстракта листьев гинкго.
В одном варианте реализации настоящего изобретения способ получения экстракта рылец шафрана является следующим: к неочищенному лекарственному сырью рылец шафрана добавляют холодный этанол для погружения, затем фильтруют, к остаткам добавляют холодный этанол для погружения, далее фильтруют, фильтраты, полученные в результате двукратного погружения, объединяют, концентрируют при пониженном давлении до достижения относительной плотности 1,12-1,14 при 70°С, добавляют воду, затем смесь наносят на макропористую адсорбирующую смолу, указанную смолу, которая содержит лекарственное средство, сначала промывают дистиллированной водой, затем элюируют этанолом, этанольный элюент концентрируют до достижения относительной плотности 1,02-1,04 при 70°С, его концентрируют досуха с получением экстракта рылец шафрана.
Согласно настоящему изобретению также предложена китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции, которая состоит из вышеуказанной китайской лекарственной композиции и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества.
Состав согласно настоящему изобретению может представлять собой твердый состав или полутвердый состав, жидкий состав или газообразный состав.
Твердый или полутвердый состав выбран из одного из следующих составов: таблетки, пилюли, мази, сублимированные препараты, мелкие порошки, гранулы, суппозитории, порошки, эмульсии, жевательные препараты, капсулы.
Жидкий состав выбран из одного из следующих составов: жидкость для перорального введения, суспензии, сиропы, составы для инъекций, лекарственный раствор и настойки.
Газообразный состав представляет собой аэрозоль или состав для ингаляции.
Согласно настоящему изобретению также предложено применение китайской лекарственной композиции или состава для предотвращения или лечения сердечнососудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции.
Предпочтительно, сердечно-сосудистое и цереброваскулярное заболевание выбрано из по меньшей мере одного из следующих заболеваний: ишемического цереброваскулярного заболевания, ишемической болезни сердца или стенокардии.
Предпочтительно, деменция выбрана из сенильной деменции, в частности, сосудистой деменции.
По сравнению с предшествующим уровнем техники китайская лекарственная композиция согласно настоящему изобретению обладает следующими техническими эффектами:
(1) Китайские лекарственные композиции и составы согласно настоящему изобретению более эффективны для предотвращения или лечения сердечнососудистого и цереброваскулярного заболевания или деменции.
(2) В лекарстве используется меньшее количество китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению, что, таким образом, обеспечивает экономию затрат и энергии.
(3) Побочные эффекты китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению незначительны, и указанная композиция обладает хорошими характеристиками безопасности, поэтому она может применяться в течение длительного времени и имеет хорошие перспективы для применения в медицине.
ВАРИАНТЫ РЕАЛИЗАЦИИ
Настоящее изобретение далее будет проиллюстрировано с помощью комбинации последующих примеров, сравнительных примеров и соответствующих тестовых примеров, однако эти примеры и тестовые примеры должны использоваться исключительно для иллюстрации настоящего изобретения, но они не ограничивают объем настоящего изобретения. В последующих примерах и тестовых примерах методы проведения эксперимента, описанные без указания конкретных условий эксперимента, были выполнены в соответствии с обычными условиями или в соответствии с условиями, рекомендованными производителями.
Часть 1: Получение китайской лекарственной композиции и состава согласно настоящему изобретению
Пример 1
женьшень 1 часть
листья гинкго 0,8 части
рыльца шафрана 0,018 части
Экстракт женьшеня, экстракт листьев гинкго, экстракт рылец шафрана получали в соответствии со способами, описанными в примере 1 патента ZL 02131435.7, указанные три экстракта смешивали и далее готовили в виде гранул, капсул и препаратов для инъекций в соответствии с обычными способами.
Пример 2
женьшень 1 часть
листья гинкго 1,5 части
рыльца шафрана 0,030 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 3
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,018 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 4
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,030 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 5
женьшень 1 часть
листья гинкго 0,9 части
рыльца шафрана 0,020 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 6
женьшень 1 часть
листья гинкго 1,2 части
рыльца шафрана 0,025 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 7
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,20 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 8
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,025 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Пример 9
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,022 части
Экстракт женьшеня и экстракт листьев гинкго экстрагировали в соответствии со способами, описанными в фармакопее Китая (издание 2010 г., часть первая), стр. 367-368 и стр. 392-393, соответственно, экстракт рылец шафрана экстрагировали в соответствии со способом, описанным в литературном источнике «Chinese modern applied Pharmacy» (August 2011, Vol. 28 No. 8, page 729-731), указанные три экстракта смешивали и далее готовили в виде гранул, капсул и препаратов для инъекций в соответствии с обычными способами.
Пример 10
женьшень 1 часть
листья гинкго 0,8 части
рыльца шафрана 0,030 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 9 настоящего изобретения.
Пример 11
женьшень 1 часть
листья гинкго 1,5 части
рыльца шафрана 0,018 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 9 настоящего изобретения.
Пример 12
женьшень 1 часть
листья гинкго 0,9 части
рыльца шафрана 0,025 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 9 настоящего изобретения.
Пример 13
женьшень 1 часть
листья гинкго 1,2 части
рыльца шафрана 0,02 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 9 настоящего изобретения.
Часть 2: Получение китайской лекарственной композиции и состава согласно сравнительным примерам
Сравнительный пример 1
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,1 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Сравнительный пример 2
женьшень 1 часть
листья гинкго 1 часть
рыльца шафрана 0,015 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Сравнительный пример 3
женьшень 1 часть
листья гинкго 1,5 части
рыльца шафрана 0,4 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 1 настоящего изобретения.
Сравнительный пример 4
женьшень 1 часть
листья гинкго 1,9 части
рыльца шафрана 0,05 части
Смесь экстрактов и препарат получали в соответствии со способами согласно примеру 9 настоящего изобретения.
Сравнительный пример 5
Смесь экстрактов и соответствующий состав получали в соответствии с композицией и способом получения согласно примеру 1 патента ZL 02131435.7.
Сравнительный пример 6
Смесь экстрактов и соответствующий состав получали в соответствии с композицией и способом получения согласно примеру 2 патента ZL 02131435.7.
Сравнительный пример 7
Смесь экстрактов и соответствующие капсулы получали в соответствии с назначением композиции и способом получения согласно примеру 1 заявки WO 2007/118363.
Сравнительный пример 8
Смесь экстрактов и соответствующие капсулы получали в соответствии с назначением композиции согласно примеру 2 заявки WO 2007/118363 и способом получения согласно примеру 1 заявки WO 2007/118363.
Часть 3: Фармакодинамические эксперименты
Тестовый пример 1. Защитное действие на ишемический миокард экспериментальных крыс
Материалы для проведения эксперимента
Здоровые самцы крыс Wastar с массой тела 180~220 г, чистая линия, были предоставлены Центром проведения экспериментов на животных Vital River.
Китайскую лекарственную композицию согласно настоящему изобретению и китайскую лекарственную композицию согласно сравнительным примерам (смесь трех экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,15 г/мл (расчет на основе исходной дозы китайской лекарственной композиции).
Реагенты: уретан, гидрохлорид изопротеренола, хлорид натрия для инъекций, набор для определения креатинкиназы (КК) и ее изофермента креатинкиназы-МВ (КК-МВ).
Приборы: регистратор физиологических параметров, система сбора физиологического сигнала BL-420, центрифуги, полуавтоматический биохимический анализатор.
Метод проведения эксперимента
а) Формирование групп и создание модели:
Перед исследованием и до введения лекарств осуществляли обследование крыс с помощью ЭКГ, не принимали во внимание сегмент ST, наблюдали аномальные изменения и аномальные сердечные ритмы в зубце Т. Крыс случайным образом разделяли на не получавшую лекарства контрольную группу и модельную группу, по 10 крыс в каждой группе, каждая часть животных получала с помощью желудочного зонда каждый день соответственно следующее: контрольной группе вводили физиологический раствор, группе китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению (композицию согласно примеру 1, примеру 2, примеру 5, примеру 6, примеру 9, примеру 11 вводили в дозе 3 г/кг/день, дозу рассчитывали на основе исходной дозы женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана), группе композиций согласно сравнительным примерам (при этом лекарства согласно сравнительному примеру 1, сравнительному примеру 2, сравнительному примеру 3, сравнительному примеру 4, сравнительному примеру 5, сравнительному примеру 6 вводили в дозе 3 г/кг/день, дозу рассчитывали на основе исходной дозы женьшеня, листьев гинкго, рылец шафрана; лекарства согласно сравнительному примеру 7, сравнительному примеру 8 вводили в дозе 3 г/кг/день, причем дозу рассчитывали на основе исходной дозы женьшеня, листьев гинкго, рылец шафрана, соевых бобов), лекарства вводили непрерывно в течение 10 дней, на 10-й день, через 30 мин после перфузии, создавали модель в соответствии со следующим способом: крысам из каждой группы вводили посредством внутрибрюшинной инъекции 20% уретан в дозе 5 мл/кг, затем крыс подвергали легкой анестезии, спины крыс фиксировали, вводили гидрохлорид изопротеренола посредством подкожной инъекции с несколькими проколами, нормальной контрольной группе вводили равный объем физиологического раствора, крыс подключали к электрокардиографам, скорость перемещения бумаги составляла 50 см/с, стандартное напряжение составляло 10 мм/мВ, были зарегистрированы изменения ЭКГ после создания модели. Регистрировали ЭКГ, наблюдали изменения сегмента ST. Одно из следующих состояний считали положительным признаком ишемии миокарда: 1) горизонтальная элевация или депрессия сегмента ST≥0,1 мВ; 2) зубец Т выше 1/2 зубца R; 3) высокий зубец Т и смещение сегмента ST. Стандартными отрицательными признаками являлись: 1) косонисходящее или горизонтальное смещение сегмента ST<0,1 мВ; 2) зубец Т сглажен и снижен или двухфазный. Элевацию сегмента ST≥0,1 мВ на ЭКГ крыс в модельной группе считали признаком успешного создания модели.
b) Метод проведения эксперимента:
Лекарства непрерывно вводили в течение 10 дней, через 30 мин после последнего введения с помощью желудочного зонда создавали модель, регистрировали ЭКГ с применением регистратора физиологических параметров непосредственно и через 5 мин, 10 мин, 20 мин, 30 мин до создания модели и после создания модели, и через 6 ч осуществляли забор крови, собирали сыворотку после центрифугирования, проводили анализы уровней КК, КК-МВ.
c) Статистический анализ:
Данные эксперимента выражали как среднее значение ± стандартное отклонение, для статистического анализа использовали t-критерий.
3 Результаты
а) Влияние на смещение точки J
Были обнаружены значительные различия между контрольной группой и модельной группой (Р<0,01); группы китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению демонстрировали значительные эффекты смещения точки J в различные моменты времени (Р<0,05-0,01) по сравнению с модельной группой, и эффекты китайских лекарственных композиций были лучше, чем для каждой из сравнительных групп. См. таблицу 1.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
b) Влияние на уровни КК, КК-МВ в сыворотке у крыс с индуцированной изопротеренолом острой ишемией миокарда
Группы китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению демонстрировали очень значительные различия по сравнению с контрольной группой; по сравнению с модельной группой, уровни креатинкиназы КК, изофермента креатинкиназы КК-МВ через 6 ч после создания модели были значительно снижены; и по сравнению со сравнительной группой эффекты композиций согласно настоящему изобретению были лучшими. Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению показали лучший защитный эффект при индуцированном изопротеренолом ишемическом повреждении миокарда у крыс. См. таблицу 2.
Краткий вывод: ишемия миокарда относится к патологическому состоянию, сопровождающемуся снижением перфузии тканей сердца кровью, что приводит к уменьшению доставки кислорода в ткани сердца, аномальному энергетическому метаболизму миокарда и отсутствию поддержки нормальной работы сердца. Ишемическая болезнь сердца является основной причиной и наиболее распространенной причиной ишемии миокарда. По сравнению с китайскими лекарственными композициями согласно сравнительным примерам, китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению были способны к значительному смещению точки J у крыс с индуцированной изопротеренолом ишемией миокарда в различные моменты времени (Р<0,05~0,01), были способны к значительному снижению уровней КК, КК-МВ в сыворотке, что свидетельствовало о том, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению обладали значительным защитным эффектом против ишемии миокарда, и их эффекты были лучше, чем аналогичные эффекты китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам.
Тестовый пример 2. Эксперименты по снижению уровня липидов
Материалы для проведения эксперимента
Мыши Kunming, масса тела 18~22 г, поровну самцы и самки, были предоставлены Центром проведения экспериментов на животных Vital River.
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,2 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Реагенты: набор для определения общего холестерина (ОХ); набор для определения триглицеридов (ТГ).
Приборы: водяная баня-термостат В-260; низкоскоростная центрифуга 80-2В; устройство для прочтения микропланшетов МК3 от компании THERMO LABSYSTEM.
Метод проведения эксперимента
Мышей Kunming случайным образом разделяли на контрольную группу (16), модельную группу, получавшую питание с высоким содержанием жира (16), группы композиций согласно настоящему изобретению (10 в каждой группе), группы композиций согласно сравнительным примерам (10 в каждой группе), в каждой группе самцов и самок было поровну. Нормальная контрольная группа получала обычное питание, другие группы получали питание с высоким содержанием жира (ингредиенты были следующими: 77,5% основное питание, 2% холестерин, 10% свиной жир, 10% сухой яичный желток, 0,5% дезоксихолат натрия). Мышей взвешивали один раз в неделю, питание обеспечивали в течение пяти недель. Через пять недель отбирали случайным образом 3 самок и самцов мышей из нормальной сравнительной группы и группы, получавшей питание с высоким содержанием жира, осуществляли забор крови из глазных яблок, измеряли уровни ОХ и ТГ в сыворотке. Уровни ОХ и ТГ в сыворотке в нормальной сравнительной группе были ниже соответствующих уровней для модельной группы, получавшей питание с высоким содержанием жира, различие результатов было значимым, что свидетельствовало о том, что была создана модель гиперлипидемии на мышах, и указанных мышей можно было применять для формального исследования. Затем мышам из каждой группы вводили в желудок равный объем перфузионного раствора в соответствии с дозой, указанной в таблице 4 (где китайскую лекарственную композицию согласно настоящему изобретению (композицию согласно примеру 1, примеру 2, примеру 5, примеру 6, примеру 9, примеру 11 вводили в дозе 4 г/кг/день, дозу рассчитывали в соответствии с исходной дозой женьшеня, листьев гинкго, рылец шафрана), сравнительная группа (где композицию согласно сравнительному примеру 1, сравнительному примеру 2, сравнительному примеру 3, сравнительному примеру 4, сравнительному примеру 5, сравнительному примеру 6 вводили в дозе 4 г/кг/день, дозу рассчитывали на основе исходной дозы женьшеня, листьев гинкго, рылец шафрана; композицию согласно сравнительному примеру 7, сравнительному примеру 8 вводили в дозе 3 г/кг/день, дозу рассчитывали в соответствии с исходной дозой женьшеня, листьев гинкго, рылец шафрана и соевых бобов). Лекарство для каждой группы готовили в виде суспензии, содержащей 1% карбоксиметилцеллюлозы натрия. После 3 недель введения лекарств всех животных лишали пищи на 12 ч, взвешивали и удаляли их глазные яблоки для забора крови, образцы крови центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин, сыворотки отделяли, анализ проводили в соответствии с инструкцией к наборам для определения общего холестерина и триглицеридов, измеряли уровни ОХ и ТГ. Полученные данные обрабатывали с применением программного обеспечения для статистических расчетов SPSS10.0, данные выражали в виде X±S.
Результаты
а) Влияние лекарства для каждой группы на увеличение массы тела мышей, имеющих высокий уровень липидов
В начале эксперимента масса тела мышей в каждой группе составляла примерно 18-20 г, после создания модели с применением питания с высоким содержанием жира в течение пяти недель изменения массы тела мышей в каждой группе были различными. Можно видеть, что: по сравнению с нормальной контрольной группой, изменения массы тела в модельной группе, получавшей питание с высоким содержанием жира, в группах композиций согласно настоящему изобретению и в группах композиций согласно сравнительным примерам значительно увеличивались, после 3 недель введения масса тела животных в модельной группе увеличивалась до наибольшего значения, что указывало на функционирование модельной группы, получавшей питание с высоким содержанием липидов, китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам обладали способностью значительно уменьшать массу тела животных в модельной группе, получавшей питание с высоким содержанием жира (Р<0,05). Также лекарственные композиции согласно настоящему изобретению демонстрировали лучший эффект по снижению массы тела. См. таблицу 3.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05
b) Влияние лекарства в каждой группе на уровни ОХ, ТГ в сыворотке мышей с гиперлипидемией
После 3 недель введения лекарств измеряли уровни общего холестерина (ОХ) и триглицеридов (ТГ) в сыворотке мышей в каждой группе. Результаты представлены в таблице 4.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05;**Р<0,01
Из данных таблицы 4 можно видеть, что уровни ОХ и ТГ в модельной группе, получавшей питание с высоким содержанием липидов, были значительно повышены по сравнению с нормальной контрольной группой, что свидетельствовало об успешном создании модели мышей с высоким уровнем липидов. По сравнению с модельной группой, в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению и в группах композиций согласно сравнительным примерам могло наблюдаться значительное снижение уровней ОХ и ТГ у мышей, а эффекты китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были лучше, чем эффекты композиций согласно сравнительным примерам, что указывало на то, что эффекты по снижению уровня липидов для композиций согласно настоящему изобретению были лучше, чем аналогичные эффекты композиций согласно сравнительным примерам.
Краткий вывод: гиперлипидемия ассоциирована с повышенными уровнями холестерина или триглицеридов в плазме. Гиперлипидемия в основном связана с уровнем холестерина, причем повышение уровня холестерина является одним из наиболее важных факторов риска, которые вызывают повышение смертности от сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний, таких как ишемическая болезнь сердца. Дислипидемия, особенно увеличение концентрации холестерина, способна легко приводить к «сгущению крови» и может вызывать образование отложений на стенках сосудов и постепенное образование небольших бляшек (процесс, который мы часто называем «атеросклерозом»), количество и размер этих «бляшек» увеличиваются, что приводит к постепенной закупорке кровеносных сосудов, является причиной замедления кровотока, который может даже прерываться, если ситуация становится серьезной; если эта ситуация возникает в сердце, она вызывает ишемическую болезнь сердца; если она возникает в головном мозге, она вызывает сердечно-сосудистые и цереброваскулярные заболевания, такие как инсульт. По сравнению с модельной группой, китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению сильно различались по эффекту снижения уровней ОХ и ТГ в сыворотке мышей с гиперлипидемией (**Р<0,01), что свидетельствовало о том, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению демонстрировали лучший эффект для лечения и предотвращения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний, чем китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам.
Тестовый пример 3. Эксперимент по снижению уровня глюкозы в крови
Материалы для проведения эксперимента
Мыши Kunming, масса тела 18~22 г, самцы, были предоставлены Центром проведения экспериментов на животных Vital River.
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,2 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Реагенты: аллоксан, набор для определения инсулина посредством радиоиммуноанализа.
Приборы: прибор и входящие в его комплект тест-полоски для определения уровня глюкозы/кетонов в крови, водяная баня-термостат с электрическим нагревом, электронные весы, низкоскоростная центрифуга с охлаждением, счетчик излучения для радиоиммуноанализа.
Метод проведения эксперимента
Получение модельных мышей с диабетом:
Самцы мышей получали адаптивное питание в течение одной недели. 10 животных были выбраны случайным образом в качестве нормального контроля, а остальных мышей лишали пищи (не ограничивая доступ к воде) на 24 часа, готовили свежий раствор 2% аллоксана на физиологическом растворе и вводили посредством внутрибрюшинной инъекции в дозе 200 мг/кг, через 72 часа надрезали хвосты для забора крови и определения уровня глюкозы в крови, мыши с уровнем глюкозы в крови, составляющим 11,1 ммоль/л, являлись модельными мышами с диабетом и были включены в эксперимент.
b) Формирование групп и введение лекарств:
Модельных мышей с диабетом случайным образом разделяли на группы, по 10 в каждой группе. Уровни глюкозы в крови были близкими в данных группах, при этом одна группа представляла собой модельную контрольную группу, 6 групп представляли собой группы композиций согласно настоящему изобретению, 8 групп представляли собой группы композиций согласно сравнительным примерам. Мыши из указанных групп получали соответствующие лекарства с помощью желудочного зонда (дозы были такими же, как в тестовом примере 2), соответствующее количество физиологического раствора вводили нормальной контрольной группе и модельной контрольной группе, регулярно измеряли массу тела для корректировки количества вводимых лекарств, введение лекарств продолжали в течение 21 дня.
c) Определение индикаторов диабета:
В ходе эксперимента хвосты надрезали на 0-й день, 7-й день, 14-й день, 21-й день для забора крови и определения уровня глюкозы в крови. Пероральный тест на толерантность к глюкозе проводили после окончания введения лекарств с помощью желудочного зонда и определения уровня глюкозы в крови, мышам вводили глюкозу посредством перфузии в дозе 2,5 г/кг и определяли уровень глюкозы в крови через 0 мин, 30 мин, 60 мин, 120 мин. На 22-й день забирали кровь из глазницы мышей, сыворотку отделяли при 4°С, центрифугировали в течение 10 мин при 3000 об/мин, измеряли уровень инсулина в сыворотке в соответствии с инструкцией к наборам.
Данные эксперимента подвергали статистическому анализу с применением программного обеспечения SPSS, результаты определения индикаторов диабета выражали как среднее значение ± стандартное отклонение, сравнение между двумя группами выполняли с применением t-критерия.
Результаты
а) Влияние на уровень глюкозы в крови у модельных мышей с индуцированной аллоксаном гипергликемией
После инъекции аллоксана уровень глюкозы в крови мышей был значительно повышен, уровень глюкозы в крови мышей, которым вводили аллоксан в течение 7 дней и 14 дней, был высоким и сильно отличался от нормальной группы, что указывало на успешное создание модели индуцированного аллоксаном диабета, и уровень глюкозы в крови этих мышей оставался высоким в течение эксперимента. Через 7 дней после введения аллоксана уровень глюкозы в крови мышей, которым вводили лекарства, начинал снижаться, после введения лекарств в течение 14 дней уровень глюкозы в крови мышей из группы композиций согласно настоящему изобретению значительно снижался по сравнению с модельной группой, полученные различия были значимыми. После введения лекарств с помощью желудочного зонда в течение 21 дня результаты для групп композиций согласно настоящему изобретению значительно отличались (Р<0,01), результаты для групп композиций согласно сравнительным примерам значительно отличались (Р<0,05). Данные результаты показали, что композиции согласно настоящему изобретению обладали лучшим эффектом снижения уровня глюкозы в крови, и эффект снижения уровня глюкозы в крови для композиций согласно настоящему изобретению был лучше, чем аналогичный эффект в группе композиций согласно сравнительным примерам.
Тест на толерантность к глюкозе показал, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению в значительной степени улучшали толерантность экспериментальных мышей к глюкозе (Р<0,01), композиции согласно сравнительным примерам были способны значительно улучшать толерантность экспериментальных мышей к глюкозе (Р<0,05). Результаты позволили предположить, что эффект снижения уровня глюкозы в крови для китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению был лучше, чем аналогичный эффект в сравнительных группах. См. таблицу 5.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
b) Влияние на уровень инсулина в сыворотке у модельных мышей с индуцированным аллоксаном диабетом
По сравнению с нормальными парами, уровень инсулина в сыворотке модельных мышей был значительно снижен, что указывало на нарушение функции В-клеток этих мышей после внутрибрюшинной инъекции аллоксана, и это свидетельствовало об успешном создании модели; по сравнению с модельной группой, уровни инсулина в сыворотке в группе китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению и в группе композиций согласно сравнительным примерам были повышены в различной степени, причем результаты для групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению имели очень значительные отличия (Р<0,01), тогда как результаты для групп композиций согласно сравнительным примерам 1, 2, 4, 7, 8, имели значительные отличия (Р<0,05), в группах композиций согласно другим сравнительным примерам уровни инсулина в сыворотке были повышены, но результаты не были статистически значимыми, что позволило предположить, что для композиций согласно настоящему изобретению эффект повышения уровня инсулина в сыворотке у мышей с индуцированным аллоксаном диабетом был лучше, чем аналогичный эффект в группе композиций согласно сравнительным примерам. Результаты представлены в таблице 6.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05, **Р<0,01
Краткий вывод: в результате повышения уровня жизни людей и воздействия факторов окружающей среды, аномальный метаболизм глюкозы все чаще появляется у пациентов с сердечно-сосудистыми и цереброваскулярными заболеваниями, если у пациентов с такими заболеваниями одновременно наблюдается аномальный метаболизм глюкозы, прогноз развития их состояния может быть неблагоприятным. Риски рецидива инфаркта миокарда у больных диабетом, которые однажды перенесли инфаркт миокарда, превышают 40%. Кроме того, аномальный уровень глюкозы может вызывать патологический процесс, такой как эндотелиальная дисфункция, уменьшение эластичности аорты, гипертрофия левого желудочка, образование атеросклеротических бляшек в сонной артерии, микроальбуминурия, и в конечном итоге приводить к развитию атеросклероза. Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению могут значительно снижать уровень глюкозы в крови модельных мышей с индуцированной аллоксаном гипергликемией, улучшать уровень инсулина в сыворотке мышей с индуцированным аллоксаном диабетом, что указывает на то, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению обладают полезным эффектом для лечения и предотвращения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний.
Тестовый пример 4. Исследование антитромботической активности
1. Материалы для проведения эксперимента
Крысы Спрег-Доули (SD), масса тела 180,0-220,0 г, самцы и самки, были предоставлены Центром проведения экспериментов на животных Vital River, крысы получали адаптивное питание в течение недели при содержании в виварии (с контролем температуры) перед проведением эксперимента.
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,15 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Аспирин: белые таблетки, 50 мг/шт., был предоставлен компанией Shanghai Branch группы компаний China Pharmaceutical. Пентобарбитал натрия: белый порошок, предоставленный компанией Shanghai Chemical Reagent (группа компаний China Pharmaceutical), был приготовлен в виде 0,8% водного раствора на физиологическом растворе для использования в качестве стокового раствора. Гепарин: белый порошок, 125 ед/мг, предоставленный компанией Shanghai Chemical Reagent (группа компаний China Pharmaceutical), был приготовлен в виде 0,1% раствора на физиологическом растворе для использования в качестве стокового раствора. Цитрат натрия: был предоставлен компанией China Pharmaceutical Industry, фабрика Southwest Pharmaceutical, был приготовлен в виде 3,8% раствора на физиологическом растворе. АДФ: производство компании Sigma, был приготовлен в виде раствора с концентрацией 200 мкмоль/л на фосфатном буфере, рН 7,4 для использования в качестве стокового раствора.
Устройство для подсчета тромбоцитов MK4/НС (производство компании USA Baker Instruments), двухканальное устройство для измерения агрегации тромбоцитов Labor aggregometer-153 (компания German Labor GmbHHanburg).
2. Метод проведения эксперимента
Крыс случайным образом разделяли на группы, каждая из которых состояла из 15 крыс, а именно, не получавшую лекарств контрольную группу, группу аспирина (измельчали и готовили в виде суспензии с концентрацией 0,88 мг/мл в 1% растворе карбоксиметилцеллюлозы натрия (CMC-Na), вводили в дозе 0,0044 г/кг/день), группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению (6 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 1), группы композиций согласно сравнительным примерам (8 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 1). Равный объем физиологического раствора вводили не получавшей лекарств контрольной группе. Введение осуществляли один раз в день в течение 7 дней.
Эксперименты по тромбообразованию in vivo: через 1 ч после введения в течение 7 дней крыс из указанных групп подвергали наркозу с помощью внутрибрюшинной инъекции, содержащей 0,8% пентобарбитал натрия в дозе 40 мг/кг в соответствии со способом моделирования тромбообразования, включающим применение артериовенозного шунта [Zhang Jun Tian. Modern pharmacology experimental methods. Beijing: Beijing Medical University Press, 1998; 1216-1217], разделяли правую общую сонную артерию и левую наружную яремную вену. Брали три секции полиэтиленовой пластиковой трубки, диаметр средней секции составлял 2 мм, длина составляла примерно 8,5 см, диаметр двух пластиковых трубок с двух концов составлял 1,5 мм, длина составляла 10 см, соответственно. Взвешенную ранее хирургическую шелковую нить №4 длиной примерно 7 см помещали в пластиковую трубку в средней части, при этом один конец нити длиной 0,5 см выставляли в трубку для фиксации положения нити, и шелковую нить длиной 6,5 см оставляли в трубке, указанную полиэтиленовую пластиковую трубку заполняли раствором гепарина, один конец пластиковой трубки вставляли в левую наружную яремную вену, другой конец пластиковой трубки вставляли в правую общую сонную артерию, тогда сразу начинался ток крови. Через 20 минут после начала тока крови указанный ток быстро прекращали и быстро извлекали шелковую нить из средней части, шелк взвешивали и указанную массу считали общей массой. Разность общей массы и массы нити составляла массу влажного тромба. Скорость ингибирования тромбоза рассчитывали по следующей формуле:
Скорость ингибирования = (масса влажного тромба в контрольной группе - масса влажного тромба в экспериментальной группе) / масса влажного тромба в контрольной группе × 100%. Массу влажного тромба в каждой группе оценивали статистически.
Тест ингибирования агрегации тромбоцитов: через 1 ч после 7 дней введения крысам, разделенным на группы, крыс подвергали наркозу в соответствии с указанным выше способом, в общую сонную артерию вводили трубку для сбора крови, в кровь добавляли 3,8% цитрата натрия в качестве антикоагулянта в отношении 1:9, проводили центрифугирование в течение 5 минут при 500 об/мин, верхнюю часть плазмы отбирали в качестве обогащенной тромбоцитами плазмы (англ.: platelet-rich plasma, PRP), оставшуюся часть снова центрифугировали в течение 15 минут при 3500 об/мин, супернатант представлял собой обедненную тромбоцитами плазму (англ.: platelet poor plasma, РРР), количество тромбоцитов в PRP подсчитывали с помощью прибора для подсчета тромбоцитов, количество тромбоцитов PRP регулировали с помощью РРР до примерно 3×105/мм2. Температуру пробирки для образцов поддерживали на уровне 37°С в течение 3 минут, затем добавляли 5 мкл АДФ (конечная концентрация 5 мкмоль/л), скорость перемешивания мешалки составляла 500 об/мин, отмечали пространство между рядами движения записывающего пера после добавления, и скорость агрегации рассчитывали по следующей формуле:
Скорость агрегации (%) = путь при добавлении АДФ × 100% / 0 ~ 100% пути.
Для каждой экспериментальной группы вычисляли средние скорости накопления и стандартные отклонения, а скорости ингибирования агрегации тромбоцитов для каждой экспериментальной группы рассчитывали по следующей формуле:
Степень ингибирования агрегации (%) = (скорость агрегации в контрольной группе - скорость агрегации в экспериментальной группе) / скорость агрегации в контрольной группе × 100%.
3. Результаты
а) Влияние на экспериментальное тромбообразование
По сравнению с не получавшей лекарств контрольной группой, в группах, которые получали лекарства, наблюдали значительные эффекты ингибирования тромбообразования по сравнению с контрольной группой, массы влажных тромбов у крыс из групп китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению и групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительному примеру 2 и примеру 7 значительно отличались (Р<0,01), массы влажных тромбов у крыс из групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительному примеру 1, сравнительному примеру 3, сравнительному примеру 4, сравнительному примеру 5, сравнительному примеру 6 и сравнительному примеру 8 (Р<0,05) значительно отличались (Р<0,05), что указывало на то, что эффекты ингибирования тромбообразования у крыс, получавших китайскую лекарственную композицию согласно настоящему изобретению, были лучше, чем аналогичные эффекты в группе композиций согласно сравнительным примерам. Результаты представлены в таблице 7.
PS: по сравнению с контрольной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
(2) Влияние на агрегацию тромбоцитов
В процессе эксперимента количество тромбоцитов в образцах крови, собранных в исследуемых группах животных, составляло примерно 3×105/мм2, значимого отличия обнаружено не было. Результаты представлены в таблице 8.
PS: по сравнению с контрольной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
Из приведенной выше таблицы можно видеть, что, по сравнению с не получавшей лекарств контрольной группой, в группах, которые получали лекарства, наблюдали ингибирование АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов у крыс. Значения степени ингибирования агрегации в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению (по сравнению с контрольной группой, **Р<0,01) были выше, чем в группах композиций согласно сравнительным примерам (по сравнению с контрольной группой *Р<0,05), что указывало на то, что эффекты, противодействующие агрегации тромбоцитов, в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были лучше, чем аналогичные эффекты в группах композиций согласно сравнительным примерам.
Краткий вывод: тромбообразование представляет собой агрегацию некоторых компонентов крови с образованием сгустков, которая влияет на кровоток. Причинами появления тромбов являются, в основном, изменение компонентного состава крови, повреждение эндотелия сосудов и изменение скорости кровотока. Тромбы могут блокировать коронарные кровеносные сосуды, что приводит к резкому снижению или прерыванию кровотока, которое вызывает тяжелую и стойкую острую ишемию соответствующих сердечных мышц, приводящую к ишемическому некрозу миокарда; кроме того, некоторые части кровеносных сосудов головного мозга подвержены спонтанному тромбозу, что приводит к блокированию кровеносных сосудов головного мозга, недостаточному кровообращению, образованию «мозгового тромба», после тромбоза сосудов головного мозга тромбы отрываются и затем вызывают блокирование кровеносных сосудов и, таким образом, приводят к церебральному инфаркту. По сравнению с китайскими лекарственными композициями согласно сравнительным примерам, китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению обладали лучшим эффектом уменьшения размера тромба, ингибирования тромбообразования и снижения степени агрегации тромбоцитов, что позволило предположить, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению обладали лучшими эффектами для лечения и предотвращения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний.
Тестовый пример 5. Влияние на индуцированное скополамина гидробромидом приобретенное нарушение памяти в модели на мышах
1. Материалы для проведения эксперимента
Мыши ICR, 18-22 г, поровну самцы и самки, были предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Development Company Ltd.
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,2 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Гуперзин (таблетки гуперзина А), 50 мкг/шт., были произведены компанией Henan Zhu Lin Zhong Sheng Pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 4 мкг/мл; таблетки танакана (танакан), стандартизованный экстракт листьев гинкго (Egb761), 40 мг/таблетка, были произведены компанией France Beaufort - Ipsen pharmaceutical industry Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 1,5 мг/мл; скополамина гидробромид, 0,6 мг/мл, был произведен компанией Shanghai Hefeng pharmaceutical Co.
Автоматический программируемый регулятор прыжков для мышей ТТ-2, разработанный в Институте фармакологии Китайской академии медицинских наук.
2. Метод проведения эксперимента
Животных, самцов и самок поровну, случайным образом разделяли на группы: не получавшую лекарств контрольную группу, модельную группу, группу, получавшую гуперзин в дозе 0,08 мг/кг, группу, получавшую танакан в дозе 30 мг/кг, группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению (6 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 2), группы композиций согласно сравнительным примерам (8 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 2).
Животным вводили лекарства внутрижелудочно один раз в день в дозе 20 мл/кг, не получавшей лекарств контрольной группе и модельной группе вводили дистиллированную воду один раз в день, введение продолжали в течение 15 дней, через 50 минут после введения на 14-й день мышам из не получавшей лекарств контрольной группы вводили физиологический раствор посредством внутрибрюшинной инъекции в объеме 10 мл/кг, остальным животным вводили скополамин посредством инъекции (6 мг/кг). Через 10 минут мышей помещали на автоматический программируемый регулятор прыжков для адаптации в течение 3 минут, затем включали питание, мышей стимулировали электрошоком 5 раз, когда мышей стимулировали, они прыгали на погружную платформу, чтобы избежать электрошока, мышей обучали в течение 5 минут для приобретения памяти. Через 60 минут после введения на 15-й день животных помещали на автоматический программируемый регулятор прыжков, определяли количество раз, которое мыши покидали платформу для прыжков и получали электрошок (количество ошибок), и время покидания платформы (инкубационный период). Результаты анализировали с применением статистического метода (t-критерий). См. таблицу 9.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
Результаты: по сравнению с модельной группой, количество ошибок за 5 минут у мышей из не получавшей лекарств контрольной группы было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,01), что свидетельствовало об успешном создании моделей. По сравнению с модельной группой, количество ошибок за 5 минут у мышей из группы гуперзина было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,01); количество ошибок за 5 минут у мышей из групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационные периоды были значительно увеличены (Р<0,01); количество ошибок за 5 минут у мышей из группы танакана и групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 1-4, 7, 8 было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационные периоды были значительно увеличены (Р<0,01). Количество ошибок в группах китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 5, 6 имели тенденцию к уменьшению, а инкубационные периоды для указанных групп имели тенденцию к увеличению, результаты не были статистическая значимыми.
Краткий вывод: перед обучением мышам вводили антагонист М-рецептора скополамина, который может вызывать снижение содержания ацетилхолина в головном мозге, что вызывает приобретенное нарушение памяти. В данном эксперименте тест с применением платформы выполняли с расчетом на это химическое повреждение, при этом в качестве индикаторов нарушения памяти использовали количество ошибок у мышей за 5 минут и инкубационные периоды, наблюдали эффекты композиций согласно настоящему изобретению и композиций согласно сравнительным примерам на созданной модели. Результаты показали, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению значительно облегчали индуцированные скополамином приобретенные нарушения памяти у мышей, причем эффекты были лучше, чем в сравнительных группах, что позволило предположить, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению могли обладать эффектами повышения содержания ацетилхолина в головном мозге, и эти эффекты были выражены сильнее, чем аналогичные эффекты в сравнительных группах.
Тестовый пример 6. Влияние на индуцированное резерпином приобретенное нарушение памяти в модели на мышах
1. Материалы для проведения эксперимента
Мыши ICR, 25-32 г, поровну самцы и самки, были предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Development Company Ltd.
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,2 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Гуперзин (таблетки гуперзина А), 50 мкг/шт., были произведены компанией Henan Zhu Lin Zhong Sheng Pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 4 мкг/мл; таблетки танакана (танакан), стандартизованный экстракт листьев гинкго (Egb761), 40 мг/таблетка, были произведены компанией France Beaufort - Ipsen pharmaceutical industry Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 1,5 мг/мл; резерпин для инъекций, 1 мг/мл, фармацевтическая фабрика Hong Qi Шанхайского медицинского университета, и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 0,05 мг/мл.
Автоматический программируемый регулятор прыжков для мышей ТТ-2, разработанный в Институте фармакологии Китайской академии медицинских наук.
2. Метод проведения эксперимента.
Экспериментальные группы были такими же, как в тестовом примере 5.
Животным вводили лекарства внутрижелудочно один раз в день в дозе 20 мл/кг, не получавшей лекарств контрольне группе, и модельной группе вводили дистиллированную воду один раз в день, введение продолжали в течение 15 дней. После введения на 14-й день мышам из не получавшей лекарств контрольной группы незамедлительно вводили физиологический раствор посредством подкожной инъекции в область спины и шеи в объеме 10 мл/кг, остальные животные получали гидрохлорид резерпина (0,5 мг/кг) посредством подкожной инъекции в область спины и шеи. Через 60 минут после инъекции мышей помещали на автоматический программируемый регулятор прыжков для адаптации в течение 3 минут, затем включали питание, мышей стимулировали электрошоком 5 раз, когда мышей стимулировали, они прыгали на погружную платформу, чтобы избежать электрошока, мышей обучали в течение 5 минут для приобретения памяти. Через 60 минут после введения на 15-й день животных помещали на автоматический программируемый регулятор прыжков, определяли количество ошибок и инкубационный период для мышей за 5 минут. Результаты анализировали с применением статистического метода (t-критерий).
3. Результаты
По сравнению с модельной группой количество ошибок за 5 минут у мышей из не получавшей лекарств контрольной группы было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,01), что свидетельствовало об успешном создании модели. По сравнению с модельной группой, количество ошибок за 5 минут у мышей из группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,05). Количество ошибок за 5 минут у мышей из группы, получавшей лекарства согласно сравнительным примерам, группы гуперзина и группы танакана было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период имел тенденцию к увеличению, однако результаты не были статистически значимыми. См. таблицу 10.
PS: по сравнению с модельной группой, Р<0,05; **Р<0,01
Краткий вывод: данное исследование подтвердило, что резерпин может вызывать дефицит моноаминового нейромедиатора в головном мозге, нарушать процесс запоминания и обучения, введение мышам резерпина до обучения может вызывать у них нарушение памяти, касающееся получения или сохранения информации. Количество ошибок и инкубационный период за 5 минут использовали в качестве индикатора для настоящего эксперимента, наблюдали эффекты китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению и композиций согласно сравнительным примерам на созданной модели. После введения мышам с помощью желудочного зонда китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению и композиций согласно сравнительным примерам, два вышеуказанных индикатора улучшались в различной степени, и улучшения в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были намного лучше, чем в группах композиций согласно сравнительным примерам, что указывало на то, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению обладали эффектами облегчения приобретенного нарушения памяти у животных, это позволило предположить, что данные эффекты связаны с механизмом, заключающимся в том, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению могли увеличивать содержание катехоламинового нейромедиатора, и эффекты китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были лучше, чем аналогичные эффекты композиций согласно сравнительным примерам.
Тестовый пример 7. Влияние на индуцированное нитритом натрия приобретенное нарушение консолидированной памяти в модели на мышах
1. Материалы для проведения эксперимента
Мыши ICR, 18-22 г, поровну самцы и самки, были предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Development Company Ltd.
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,2 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Гуперзин (таблетки гуперзина А), 50 мкг/шт., были произведены компанией Henan Zhu Lin Zhong Sheng Pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 4 мкг/мл; таблетки танакана (танакан), стандартизованный экстракт листьев гинкго (Egb761), 40 мг/таблетка, были произведены компанией France Beaufort - Ipsen pharmaceutical industry Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 1,5 мг/мл; нитрит натрия, был произведен компанией Beijing Yili fine chemicals Co., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена его дозировка 12 мг/мл.
Автоматический программируемый регулятор прыжков для мышей ТТ-2, разработанный в Институте фармакологии Китайской академии медицинских наук.
2. Метод проведения эксперимента
Экспериментальные группы были такими же, как в тестовом примере 5.
Животным вводили лекарства внутрижелудочно один раз в день в дозе 20 мл/кг, животным из не получавшей лекарств контрольной группы и модельной группы вводили дистиллированную воду один раз в день, введение продолжали в течение 15 дней. Через 60 минут после введения на 14-й день мышей помещали на автоматический программируемый регулятор прыжков для адаптации в течение 5 минут, и мышей стимулировали электрошоком 5 раз. После обработки мышам из сравнительной группы незамедлительно вводили физиологический раствор посредством подкожной инъекции в область спины и шеи в объеме 10 мл/кг, остальным животным вводили посредством инъекции нитрит натрия (120 мг/кг). Через 60 минут после введения на 15-й день животных из ислледуемых групп помещали на автоматический программируемый регулятор прыжков, определяли количество ошибок и инкубационный период за 5 мин. Результаты анализировали с применением статистического метода (t-критерий).
3. Результаты
По сравнению с модельной группой, количество ошибок у мышей из не получавшей лекарств контрольной группы за 5 минут было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,01), что свидетельствовало об успешном создании моделей. По сравнению с модельной группой, количество ошибок за 5 минут у мышей из группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению, группы гуперзина и группы танакана было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,01~0,05). Количество ошибок за 5 минут у мышей из группы китайской лекарственной композиции согласно сравнительному примеру 7 было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период был значительно увеличен (Р<0,05). Количество ошибок за 5 минут у мышей из группы китайской лекарственной композиции согласно сравнительному примеру 2 было значительно уменьшено (Р<0,05), инкубационный период имел тенденцию к увеличению, однако результаты не были статистически значимыми. Количество ошибок в других сравнительных группах имело тенденции к уменьшению, инкубационный период имел тенденцию к увеличению, результаты не были статистически значимыми. Результаты представлены в таблице 11.
PS: по сравнению с модельной группой *Р<0,05; **Р<0,01
Данное исследование подтвердило, что нитрит натрия может вызывать денатурацию гемоглобина, что приводит к ишемии и гипоксии тканей головного мозга, нарушает процесс обучения и запоминания, введение мышам нитрита натрия незамедлительно после обучения вызывало у мышей нарушение консолидированной памяти или нарушение сохранения информации. Принимая во внимание это химическое повреждение, используя количество ошибок и инкубационный период в качестве индикаторов для настоящего эксперимента, наблюдали эффекты композиций согласно настоящему изобретению и композиций согласно сравнительным примерам на созданных моделях. После введения мышам с помощью желудочного зонда композиций согласно настоящему изобретению и композиций согласно сравнительным примерам, два вышеуказанных индикатора улучшались в различной степени, и улучшения в группах композиций согласно настоящему изобретению были намного лучше, чем в группах композиций согласно сравнительным примерам, что указывало на то, что композиции согласно настоящему изобретению обладали эффектами облегчения нарушения консолидированной памяти у животных, это позволило предположить, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению могут улучшать процесс запоминания путем улучшения мозгового кровотока и облегчения ишемии и гипоксии тканей головного мозга, и эффекты китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были лучше, чем аналогичные эффекты композиций согласно сравнительным примерам.
Тестовый пример 8. Влияние на СД, вызванное постоянной перевязкой двусторонней общей сонной артерии крыс
1. Материалы для проведения эксперимента
(1) Животные: крысы SD, масса тела 250~270 г, самцы, были предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Development Company Ltd.
(2) Лекарства:
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,3 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Гуперзин (таблетки гуперзина А), 50 мкг/шт., были произведены компанией Henan Zhu Lin Zhong Sheng Pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 6 мкг/мл; таблетки танакана (танакан): стандартизованный экстракт листьев гинкго (Egb761), 40 мг/таблетка, были произведены компанией France Beaufort - Ipsen pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 2 мг/мл.
(3) Реагенты:
Жидкость для высокоэффективной жидкостной хроматографии: хлорид ацетилхолина (AXCl), гидрофосфат натрия (Na2HPO4), хлорид, хлорид тетраметиламмония (TMACl), октаносульфонат натрия (OSA), тиосульфат натрия (Na2S2O5), тетранатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA) все класса ВЭЖХ, производство Sigma, США; фосфорная кислота (H3PO4, 85%), хлорная кислота (HClO4), все класса ВЭЖХ, производство компании Fisher Scientific, США; реагент МВ, производство компании ESA, США.
Биохимические измерения: набор для определения ацетилхолинэстеразы (ТСНЕ); набор для определения супероксиддисмутазы (СОД); набор для определения малондиальдегида (МДА); набор для количественного определения белка (биуретовым методом); все предоставлены Институтом биоинженерии Яньчэн в Нанкине (Jiancheng Institute of Bioengineering of Nanjing); набор для определения нейропептидов Y (NPY), предоставлен Радиоиммунологическим центром развития науки и технологий Госпиталя Народно-освободительной армии (RIA center of Science and technology development center of PLA General Hospital); набор для определения β-эндорфина (β-EP), предоставлен Морским радиоиммунологическим технологическим центром.
(4) Прибор:
Водный лабиринт Морриса производства Института лекарственных средств Китайской академии медицинских наук (Institute of Medicines of Chinese Academy of Medical Sciences). Счетчик FT-630Gy производства Пекинской атомной электростанции. Спектрофотометр UV-120-02 производства компании Shimadzu, Япония. 16-канальная рабочая станция Coularray Cullen для высокоэффективной жидкостной хроматографии и хроматографии с электрохимическим детектором, 582 насосов, электрохимический детектор 5600А, автоматический пробоотборник 542, твердый пористый электрод типа 5040 (платиновый электрод, твердые палладиевые электроды), колоночный термостат типа СН150, реактор с иммобилизованным ферментом перед колонками, реактор с иммобилизованным ферментом после колонок, все продукты из компании ESA, США; колонки (С18150×3 мм (внутренний диаметр)), продукция компании ESA, США; ультрацентрифуга 55Р-72, продукт компании HITACHI, Япония; криогенные холодильники, продукты компании JOUAN, Франция; шприц с микропористым мембранным фильтром: водная мембрана (0,22 мкм), продукт фабрики фильтров Тяньцзинь Тенгда (Tianjin Tengda).
(5) Условия определения содержания ацетилхолина (АХ)
Подвижная фаза: Na2HPO4 (100 ммоль/л), TMACl (0,5 ммоль/л), OSA (2,0 ммоль/л), реагент МВ (0,005% об./об.), разбавление бидистиллированной водой, 85% рН доводили до 8,00 посредством H3PO4, фильтровали через водную мембрану с размером пор 0,22 мкм.
Условия проведения хроматографии: насосная система типа ESA582 для двухкомпонентных смесей, колонка ESA АСН-3 (150×3 мм, внутренний диаметр 5 мкм), первый реактор ESA с иммобилизованным ферментом перед колонками (ESA ACH-SPR, 3 см), скорость потока, 0,35 мл/мин, температура колонки 35°С.
Условия проведения эксперимента: электрохимический детектор 5600А; твердый пористый электрод типа 5040 (платиновый рабочий электрод, твердотельный палладиевый электрод сравнения), потенциал: + 300 мВ
2. Метод проведения эксперимента
Ложнооперированная группа, модельная группа, группа гуперзина, группа танакана, группы китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению (шесть групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 1), группы композиций согласно сравнительным примерам (8 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 1).
Крыс подвергали анестезии с помощью хлоральгидрата (350 мг/кг), делали разрезы в середине шеи, отделяли двусторонние общие сонные артерии и осуществляли их перевязку (в ложнооперированной группе артерии только отделяли, но не перевязывали), образовавшиеся у крыс раны зашивали, затем крыс кормили в клетках, крысам проводили противоинфекционную терапию пенициллином в течение 4 дней. Через месяц проводили испытание на плавание в водном лабиринте Морриса, отбирали крыс с тенденцией к снижению обучаемости и ухудшению памяти по показателю времени пребывания в лабиринте, и случайным образом группировали крыс следующим образом: модельная группа; группа гуперзина 60 мкг/кг; группа танакана 20 мг/кг; группа китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению и группа китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам (дозы те же, что и в экспериментальном примере 1), введение крысам проводили внутрижелудочно один раз в сутки (10 мл/кг) в течение 2 месяцев. Ложнооперированной группе и модельной группе вводили через желудочный зонд дистиллированную воду того же объема. Через 2 месяца, 3 месяца после создания моделей (1 месяц и 2 месяца после введения) определяли время пребывания в водном лабиринте Морриса. После последнего измерения брали кровь из брюшной аорты, быстро отбирали головной мозг, и его левое полушарие отвердевали жидким азотом. На ледяной бане гомогенаты в 0,15 М HClO4 (на 100 мг головного мозга добавляли 1 мл) центрифугировали в условиях 14000×g, 4°С в течение 20 мин, отбирали супернатант, фильтровали через мембрану с размером пор 0,22 мкм, 10 мкл подавали в автоматический пробоотборник, определяли содержание АХ с применением ВЭЖХ; правое полушарие, 4 для каждой группы, отвердевали формалином, дегидратировали, внедряли, нарезали, окрашивали НЕ для определения патологии, получали гомогенаты шести тканей головного мозга, определяли активность АХЭ, активность СОД и содержание МДА (колориметрический метод); определяли такие показатели, как нейропептид Y, β-ЕР в плазме (посредством радиоиммуноанализа). Результаты анализировали с применением статистического метода (t-критерий).
3. Результаты
3.1. Влияние на продолжительность пребывания крыс в водном лабиринте
Через месяц после перевязки двух общих сонных артерий крыс, хотя тенденция к снижению обучаемости и ухудшению памяти и проявилась, по сравнению с ложнооперированной группой больших отличий не было. Спустя два месяца, через три месяца после перевязки, время пребывания крыс в водном лабиринте Морриса у ложнооперированной группы было значительно меньше, чем у модельной группы (Р<0,01). Это указывало на то, что модели были созданы успешно. Во время от 2 до 3 месяцев после введения способность к обучению и запоминанию у крыс, получавших китайскую лекарственную композицию согласно настоящему изобретению, была значительно улучшена по сравнению с модельной группой, время пребывания в лабиринте было значительно сокращено (Р<0,01); такие же эффекты были обнаружены для сравнительной группы, получавшей лекарство гуперзин, и группы китайских лекарственных композиций согласно сравнительному примеру 2, сравнительному примеру 3, сравнительному примеру 6 и сравнительному примеру 7 (Р<0,05~0,01); через 3 месяца после введения способность к обучению и запоминанию у крыс сравнительной группы, получавшей лекарство танакан, имели тенденцию к улучшению, однако результаты не были статистически значимыми. Результаты представлены в таблице 12.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.2. Влияние на активность АХЭ и содержание АХ в головном мозге крыс
Через 3 месяца после перевязки двусторонних общих сонных артерий у крыс активность АХЭ в головном мозге была повышена, а содержание АХ было снижено, наблюдали значительные различия между ложнооперированной группой и модельной группой (Р<0,01); через 2 месяца после введения активность АХЭ в головном мозге крыс группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению была значительно снижена (Р<0,05), содержание АХ во всем мозге крыс было значительно повышено (Р<0,01); тот же эффект наблюдали в сравнительной группе, получавшей лекарство гуперзин, и группе китайской лекарственной композиции согласно сравнительному примеру 7 (Р<0,05~0,01), для других групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам и группы танакана изменения активности АХЭ были незначимыми, содержание АХ было значительно повышено (Р<0,05). Результаты представлены в таблице 13.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.3. Влияние на активность СОД, содержание МДА в ткани головного мозга
Через 3 месяца после перевязки двусторонних общих сонных артерий крыс активность СОД в головном мозге значительно снижалась, наблюдались значительные различия между ложнооперированной группой и модельной группой (Р<0,01), значительных изменений в содержании МДА не было; по сравнению с модельной группой активность СОД в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению была значительно повышена (Р<0,05), значительных изменений активности СОД для остальных групп не было. По сравнению с модельной группой значительных изменений в содержании МДА в головном мозге крыс указанных групп не было. Результаты представлены в таблице 14.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.4. Влияние на уровни NPY, β-ЕР в плазме крыс
Через 3 месяца после перевязки двусторонних общих сонных артерий крыс содержание NPY в плазме было значительно снижено, содержание β-ЕР было значительно повышено, наблюдались значительные различия между ложнооперированной и модельной группой (Р<0,01); через 2 месяца после введения содержание NPY у крыс из группы китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению, группы китайской лекарственной композиции согласно сравнительному примеру 2 и группы китайской лекарственной композиции согласно сравнительному примеру 7 были значительно повышены, содержание β-ЕР в каждой группе было значительно снижено (Р<0,01 для всех), содержание NPY у крыс из групп китайских лекарственных композиций согласно другим сравнительным примерам было значительно повышено, содержание β-ЕР для каждой группы было значительно снижено (Р<0,05 для всех), указанные эффекты не были очевидны для сравнительных групп, получавших лекарства гуперзин и танакан. Результаты можно увидеть в таблице 15.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.5 Исследование по определению патологии
Исследование по определению патологии показало, что расположение пирамидного клеточного слоя гиппокампа ложнооперированной группы было почти регулярным, структура была компактной и имела несколько слоев, клеточная ядерная мембрана была свежей и гладкой. Расположение некоторых частей большей части пирамидных клеток гиппокампа в модельной группе было рыхлым, на ядерной мембране клеток были «морщины», ядрышко было относительно небольшим, структуры части пирамидных клеток были нечеткими, окрашенными, они представляли собой треугольники или агломераты, вокруг были видимые промежутки, ядро исчезло. Расположение пирамидной клетки гиппокампа в группе гуперзина было слегка рыхлым, большинство мембран ядер клеток можно было увидеть, небольшая часть ядрышка была относительно небольшой, часть ядрышка исчезла. В группе танакана и группах китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 1-3 и 7 расположение пирамидной клетки гиппокампа было четким, размеры клеток были приемлемыми, мембраны ядер были прозрачными, часть ядрышка можно было увидеть. Расположение большинства пирамидных клеток гиппокампа группы китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению было упорядоченным, структуры между клетками были компактными, мембраны ядер клеток были относительно свежими и ядрышко было приемлемым, они были рассеяны в области, с видимыми «морщинами», окрашенными пирамидными клетками. Расположение пирамидных клеток гиппокампа группы китайской лекарственной композиции согласно сравнительному примеру 4 было относительно рыхлым, клетки были относительно небольшими, часть клеток были окрашенными с неясными нечеткими границами, у каждой клетки были «морщины», клетки представляли собой треугольники и агломераты. Расположение пирамидных клеток гиппокампа групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 5-6 и 8 было приемлемым, можно было видеть слои, границы между пирамидными клетками были нечеткими, мембрана ядер была обесцвечена, ядрышко было небольшим, они находились в денатурированном состоянии, а часть их исчезла.
Краткий вывод:
Хроническая церебральная ишемия представляет собой распространенный патологический процесс развития многих заболеваний, таких как сосудистая деменция (СД), болезнь Альцгеймера (AD) и подкорковая артериосклеротическая энцефалопатия (болезнь Бинсвангера) и другие заболевания. Исследование подтвердило, что после перевязки двухсторонней общей сонной артерии (2VO) у крыс кровоток может продолжать снижаться, через три недели начинается хроническая фаза, через месяц она все еще ниже, чем в нормальной группе; нейроны, которые были задействованы в обучении и памяти, такие как кора и гиппокамп, были атрофированы, вырождены, депигментированы, что означает, что состояние постепенно усугубляется; через 3 месяца после 2VO адгезия между М-ацетилхолиновым рецептором коры и гиппокампа снижалась; были значительные проблемы в поведении, таком как обучение и запоминание.
Многие исследования показали, что после церебральной ишемии может возникать перегрузка Са2+ в клетках, экзотоксичность и воспалительные реакции, что дополнительно приводит к нарушению функции и структуры нейронов. Церебральная ишемия и гипоксия также могут вызывать нарушение окислительного метаболизма митохондрий, приводя к избыточной выработке активных кислородных радикалов, включая О-2, НО-2, ОН-, Н2О2 и тому подобное. Эти активные кислородные радикалы могут взаимодействовать с белками, липидами, молекулами нуклеиновых кислот в нейронах и разрушать их молекулярную структуру, происходят супероксидные изменения, которые могут дополнительно вызывать повреждение структуры и функции клеток головного мозга и обеспечивать избыточную выработку продуктов перекисного окисления, таких как малондиальдегид (МДА). Нейроны гиппокампа, префронтальной коры, височной доли и коры головного мозга чувствительны к ишемии, и эти области представляют собой области головного мозга, которые тесно связаны со способностью к обучению и запоминанию. Нарушение функции и структуры этих нейронов в головном мозге после церебральной ишемии вызовет нарушение нейромедиаторов, связанных с обучением и памятью, приведет к снижению способности к обучению и запоминанию и даже к деменции.
Полученные посредством 2VO модели СД, использованные в настоящем эксперименте, подтвердили вышеуказанные биохимические, патологические и поведенческие изменения процесса, и было отмечено, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению могут значительно ингибировать активность АХЭ, увеличивая содержание АХ в головном мозге модельных животных, вызывая улучшения при нарушении обучаемости и запоминания, указанное лекарство также может в значительной степени увеличить активность DOS в головном мозге, устраняя свободные кислородные радикалы для защиты тканей мозга, при этом было показано, что группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению имеют значительные терапевтические эффекты в отношении СД, и эти эффекты намного лучше, чем эффекты китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам.
Сообщается, что в плазме пациентов с СД содержание нейропептида Y снижается, содержание β-ЕР увеличивается, заявитель определял содержание нейропептида Y и β-ЕР в полученных посредством 2VO моделях на животных, полученные данные согласуются с изложенным, и отмечается, что в группе китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению содержание нейропептида Y в плазме может быть в значительной степени увеличено, а содержание β-ЕР в плазме может быть значительно уменьшено.
Исследование по определению патологии показало, что некоторые области гиппокампа в модельной группе были расположены свободно, на ядерных мембранах можно наблюдать видимые сжатые участки, ядрышки были относительно небольшими, структура части пирамидных клеток была нечеткой, окрашенной, они представляли собой треугольники или агломераты, видимые промежутки рядом, ядрышко исчезло. Большая часть пирамидных клеток гиппокампа в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению была упорядочена, структуры между клетками были компактными, ядерная мембрана была свежей и степень поражений была значительно снижена.
Тестовый пример 9. Влияние на ишемическую реперфузию и нарушение способности к обучению и памяти у мышей, индуцированное подкожной инъекцией D-галактозы
1. Материалы для проведения эксперимента
(1) Животные: мыши ICR, 25-32 г, поровну самцы и самки. Предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Development Company Ltd.
(2) Лекарства:
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,2 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Гуперзин (таблетки гуперзина А), 50 мкг/шт., были произведены компанией Henan Zhu Lin Zhong Sheng Pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 4 мкг/мл; таблетки танакана (танакан): стандартизованный экстракт листьев гинкго (Egb761), 40 мг/таблетка, были произведены компанией France Beaufort - Ipsen pharmaceutical Co., Ltd., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 1,5 мг/мл. D-галактоза, была произведена компанией Shanghai Hengxin chemical reagent со., LTD; набор для определения ацетилхолинэстеразы (ТСНЕ); набор для определения супероксиддисмутазы (СОД); набор для определения малондиальдегида (МДА); набор для определения глутатионпероксидазы (GSH-Px); набор для определения оксида азота (NO); набор для количественного определения белка (биуретовым методом); все предоставлены Институтом биоинженерии Яньчэн в Нанкине (Jiancheng Institute of Bioengineering of Nanjing).
(3) Приборы:
Водный лабиринт Морриса производства Института лекарственных средств Китайской академии медицинских наук (Institute of Medicines of Chinese Academy of Medical Sciences). Спектрофотометр UV-120-02 производства компании Shimadzu, Япония.
2. Метод проведения эксперимента
Мышей случайным образом разделяли на группы, самцов и самок было поровну: ложнооперированную группу, группу комбинированной модели, группу D-галактозы, группу ишемии и реперфузии, группу гуперзина, группу танакана, группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению (шесть групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 2), группы композиций согласно сравнительным примерам (8 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 2).
Мышей подвергали анестезии с помощью хлоральгидрата, делали разрезы в области шеи, применяли операцию для моделирования ишемии и реперфузии: отделяли двусторонние общие сонные артерии, зажимали на 20 минут с помощью зажима типа "бульдог", ослабляли зажим на 2 минуты, затем снова зажимали на 20 минут, затем ослабляли, в то же время надрезали хвосты мышей, забирали 0,5 мл крови, при этом развивалось поражение головного мозга вследствие повторной ишемии-реперфузии, образовавшиеся у крыс раны зашивали, затем крыс кормили в клетках. Через 7 дней после операции мышам вводили D-галактозу (100 мг/кг, 10 мл/кг) посредством подкожной инъекции в область спины, и одновременно мышам вводили внутрижелудочно лекарства (20 мл/кг) один раз в день, введение продолжали в течение 8 недель; для ложнооперированной группы общие сонные артерии отделяли без установки зажима, такой же объем физиологического раствора вводили посредством подкожной инъекции в область спины; в группе D-галактозы общие сонные артерии отделяли без установки зажима, D-галактозу (100 мг/кг, 10 мл/кг) вводили посредством подкожной инъекции в область спины; группа ишемии и реперфузии была подвергнута операции, вызывающей развитие ишемии и реперфузии, и ей вводили такой же объем физиологического раствора посредством подкожной инъекции в область спины. Ложнооперированной группе, группе комбинированной модели, группе D-галактозы вводили с помощью желудочного зонда такой же объем дистиллированной воды.
После 8 недель введения лекарств мышей обучали в течение 3 дней в водном лабиринте Морриса два раза в день, параметры, характеризующие обучаемость и память, определяли на 4-й день, на 5-й день животных декапитировали для забора головного мозга, готовили препараты тканей мозга в виде 10% гомогенатов на физиологическом растворе, определяли активность АХЭ, СОД, GSH-Px и содержание биохимических индикаторов, таких как МДА, NO, в тканях головного мозга (колориметрическими методами). Результаты анализировали с применением статистического метода (t-критерий).
3. Результаты
3.1. Влияние на обучаемость и память у мышей в тесте водного лабиринта Морриса
Через 8 недель после введения в состояние ишемии-реперфузии и подкожной инъекции D-галактозы продолжительность пребывания и длина траектории движения мышей в водном лабиринте Морриса увеличивались, были значительные различия по сравнению с ложнооперированной группой (Р<0,01); стратегии поиска выхода в основном представляли собой тип «край лабиринта» или тип «случайный поиск». По сравнению с ложнооперированной группой и модельной группой, не было значительных различий в продолжительности пребывания и длине траектории движения для группы, которую подвергали только ишемии-реперфузии, по сравнению с группой комбинированной модели, были значительные различия в стратегии поиска (Р<0,05); по сравнению с группой комбинированной модели не было значительных различий в продолжительности пребывания, длине траектории движения и стратегии поиска для группы, которая получала только D-галактозу посредством подкожной инъекции; это указывало на то, что нарушение обучения и памяти у мышей может быть вызвано только подкожной инъекцией D-галактозы и только повреждениями вследствие ишемии и реперфузии, но степень нарушений была не такой значительной, как при комбинации этих двух воздействий; по сравнению с группой комбинированной модели была уменьшена длина траектории движения в сравнительной группе лекарства гуперзина, стратегия поиска была значительно улучшена (Р<0,05-0,01); продолжительность пребывания и длина траектории движения в группе танакана были значительно уменьшены (Р<0,05~0,01), стратегия поиска не была значительно улучшена; продолжительность пребывания и длина траектории движения у мышей из групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были значительно уменьшены (Р<0,05~0,01), стратегии поиска были значительно улучшены (Р<0,01); продолжительность пребывания и длина траектории движения в группах композиций согласно сравнительным примерам 2, 3, 7, 8 были значительно уменьшены (Р<0,05~0,01), стратегии поиска были значительно улучшены (Р<0,05~0,01); продолжительность пребывания и длина траектории движения в группах композиций согласно сравнительным примерам 1, 4, 5, 6 были значительно уменьшены (Р<0,05), стратегии поиска были значительно улучшены. Результаты представлены в таблице 16.
Р5: стратегия поиска: тип «прямая линия», 1 балл; тип «направление», 2 балла; тип «край», 3 балла; тип «случайный поиск», 4 балла; по сравнению с ложнооперированной группой, *Р<0,05, **Р<0,01; по сравнению с модельной группой, *Р<0,05, **Р<0,01.
3.2. Влияние на активность СОД, GSH-Px и содержание МДА и NO в головном мозге
Через 8 недель после введения в состояние ишемии-реперфузии и подкожной инъекции D-галактозы активность СОД, GSH-Px в ткани головного мозга мышей (группа комбинированной модели) была снижена, а содержание МДА, NO было повышено, наблюдались значимые отличия по сравнению с ложнооперированной группой (Р<0,05~0,01); в группе, которая получала только D-галактозу посредством подкожной инъекции, активность СОД, GSH-Px в ткани головного мозга была снижена, а содержание МДА, NO было повышено, наблюдались значительные изменения по сравнению с ложнооперированной группой (Р<0,05~0,01 для всех), не было обнаружено значительных изменений по сравнению с группой комбинированной модели; в группе, которую подвергали только ишемии-реперфузии, активность СОД, GSH-Px и содержание МДА, NO в ткани головного мозга по сравнению с ложнооперированной группой были снижены (Р<0,05), по сравнению с ложнооперированной группой, не наблюдали значительных изменений содержания МДА. По сравнению с группой комбинированной модели, не наблюдали значительных изменений для активности СОД, GSH-Px и содержания МДА, NO в сравнительной группе лекарства гуперзина; в группе танакана активность СОД, GSH-Px была значительно повышена, а содержание МДА, NO было значительно снижено (Р<0,05~0,01); в группе китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению активность СОД, GSH-Px была значительно повышена, а содержание МДА, NO было значительно снижено (Р<0,05~0,01); в группах китайской лекарственной композиции согласно сравнительным примерам 1~3, 7 активность СОД в ткани головного мозга мышей была значительно повышена, содержание NO было значительно снижено (Р<0,05 для всех), не было обнаружено значительных изменений активности GSH-Px и содержания МДА; в группах композиций согласно сравнительным примерам 4~6, 8 содержание NO было значительно снижено (Р<0,05 для всех), не было обнаружено значительных изменений активности СОД, GSH-Px и содержания МДА. Результаты представлены в таблице 17.
PS: по сравнению с ложнооперированной группой, *Р<0,05, **Р<0,01; по сравнению с группой комбинированной модели, *Р<0,05, **Р<0,01
3.3. Влияние на активность АХЭ в ткани головного мозга
Через 8 недель после введения в состояние ишемии-реперфузии и подкожной инъекции D-галактозы активность АХЭ в ткани головного мозга мышей (группа комбинированной модели) была значительно повышена, наблюдались значимые отличия по сравнению с ложнооперированной группой (Р<0,01); в группе, которая получала только подкожную инъекцию D-галактозы, и в группе, которую подвергали только ишемии-реперфузии, активность АХЭ в тканях головного мозга была повышена, наблюдались значимые отличия по сравнению с ложнооперированной группой (Р<0,05), не было обнаружено значительных различий по сравнению с группой комбинированной модели. По сравнению с группой комбинированной модели, активность АХЭ в группах китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению, в группах китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 1-3, 7 (Р<0,05); не было обнаружено значительных изменений активности АХЭ в группах китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 4~6, 8. Результаты представлены в таблице 18.
PS: по сравнению с ложнооперированной группой, *Р<0,05, **Р<0,01; по сравнению с группой комбинированной модели, *Р<0,05, **Р<0,01
Краткий вывод: Точный механизм ишемически-реперфузионного повреждения головного мозга неясен, большинство ученых полагают, что оно связано с каскадной реакцией, вызванной увеличением числа свободных кислородных радикалов. В нормальных условиях образуется очень небольшое количество свободных кислородных радикалов и время их существования невелико, поэтому они не вызывают опасности для организма, и при этом поглотители эндогенных свободных кислородных радикалов играют очень важную роль. Глутатионпероксидаза (GSH-Px) является важным ферментом, разлагаемым каталитическими гидроксильными свободными радикалами; СОД является представителем поглотителей эндогенных свободных кислородных радикалов, в определенной степени ее активность отражает активность по поглощению эндогенных свободных кислородных радикалов; основной метаболит МДА, образуемый при расщеплении липидов мембраны, обычно используется в качестве индикатора перекисного окисления липидов, NO является чрезвычайно важным мессенджером организма и играет двойную роль в процессе церебральной ишемии: с одной стороны, он может уменьшить площадь инфаркта, увеличить кровоснабжение коры, а с другой стороны он может действовать синергически со свободными кислородными радикалами, вызванными ишемией, приводя к повреждению нервных клеток. Мониторинг уровня СОД, GSH-Px, МДА и NO в ткани головного мозга важен для изучения ишемически-реперфузионного повреждения головного мозга.
D-галактозная подострая модель старения построена следующим способом: мышам давали большие дозы D-галактозы непрерывно посредством подкожной инъекции, чтобы вызвать нарушение метаболизма глюкозы у животных. При катализе D-галактозооксидазой D-галактоза может обеспечить выработку свободных кислородных радикалов, таких как супероксидный анион. Свободные кислородные радикалы являются высокореакционноспособными, могут атаковать ненасыщенные жирные кислоты, белки, ферменты мембранных фосфолипидов и ДНК в ядре и т.д.; свободные радикалы также могут обеспечить перикисное окисление липидов с образованием пероксида липидов (ПОЛ), МДА образуется в кислой среде после осаждения ПОЛ белком, МДА является активным сшивающим агентом, он может быстро образовывать флуоресцентный краситель с фосфатидилэтаноламином, а затем образовать пластинчатый липофусцин (ПЛ) с белками, пептидами, липидами. При непрерывной инъекции D-галактозы мыши могут продуцировать изменения ряда биохимических показателей, таких как увеличение МДА в головном мозге, содержание ПЛ; снижение активности СОД в головном мозге, активности GSH-Px в крови, активности эритроцитарного CAT, и эти изменения согласуются с естественными изменениями, происходящими при старении, что указывает на то, что D-галактоза может вызывать старение клеток и организмов. Активности СОД, GSH-Px и CAT косвенно отражают способность организма устранять свободные кислородные радикалы; а уровни МДА и ПЛ косвенно отражают тяжесть атак свободных радикалов на клетки.
В этом эксперименте у мышей с реперфузионно-ишемическим повреждением головного мозга в сочетании с подкожной инъекцией D-галактозы вызывали повреждение головного мозга, затем активность АХЭ значительно увеличивали, вследствие чего появлялись когнитивные нарушения, уменьшалась способность к пространственному обучению; при тестировании также наблюдали что для мозговой ткани мышей комплексной модели активности СОД, GSH-Px были значительно снижены, содержание МДА и NO не было значительно увеличено. После того, как мышам давали через желудочный зонд китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению, в мозговой ткани мышей активность АХЭ была снижена, активности СОД и GSH-Px были значительно повышены, содержания МДА и NO были значительно снижены, способность к пространственному обучению была значительно улучшена, что указывало на то, что китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению подавляли эффекты выработки реакционноспособного кислорода и перекисного окисления липидов, вызванные ишемией-реперфузией, тем самым предотвращая необратимое повреждение нервных клеток, и следовательно улучшая способность к обучению и запоминанию, и эффективность китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению была выше, чем эффективность китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам.
Тестовый пример 10. Влияние на модель мультиинфарктной деменции (МИД) на крысах
1. Материалы для проведения эксперимента
(1) Животные: крысы SD, самцы, масса тела 260-280 г, были предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Development Company Ltd.
(2) Лекарства:
Китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам (смесь соответствующих экстрактов была получена самостоятельно в соответствии со способами, описанными в примерах и сравнительных примерах согласно настоящему изобретению) готовили в ходе эксперимента, используя дистиллированную воду, с получением концентрации 0,15 г/мл (расчет на основе исходной дозы композиции).
Таблетки танакана (танакан), стандартизированный экстракт листьев гинкго (Egb761) 40 мг/таблетка, были произведены компанией France Beaufort - Ipsen pharmaceutical Co., и с помощью дистиллированной воды в ходе эксперимента была получена их концентрация 2,0 мг/мл. Агент для эмболизации сосудов на основе микросфер альгината натрия (KMG), размер: 100~200 мкм, Beijing Sheng Yi Yao Technology Development Co., Ltd.; набор для радиоиммунологического определения соматостатина (СС), нейропептид Y (NPY), были предоставлены Морским радиоиммунологическим технологическим центром; набор для радиоиммунологического определения пептида, связанного с геном кальцитонина (CGRP), биоинженерная компания Beijing Furui, эндотелии (ЭТ), был предоставлен Институтом биотехнологии Пекина Бей Миан Донг (Beijing Bei Mian Dong Ya Institute of biotechnology), норепинефрин (NE), допамин (DA), 3,4-дигидроксифенилуксусная кислота (DOPAC), гомованиловая кислота (HVA), 5-гидрокситриптамин (5-HT), 5-гидроксииндолуксусная кислота (5-HIAA), дигидрофосфат натрия (NaH2PO4), лимонная кислота, тиосульфат натрия (Na2S2O5), этилендианаттетрауксусная кислота, тетранатриевая соль (ЭДТА), все чистоты для анализа; октаносульфонат натрия (OSA), класс ВЭЖХ, все продукты компании Sigma, США; ацетонитрил (ACN), хлорная кислота (HClO4), все класса ВЭЖХ, продукты компании Fisher Scientific, США.
(3) Прибор:
Ультрацентрифуга (Япония, HITACHI 55Р-72); 16-канальная рабочая станция Coularray Cullen для высокоэффективной жидкостной хроматографии и хроматографии с электрохимическим детектором, 580 насосов, электрохимический детектор 5600А, автоматический пробоотборник 542, продукт компании ESA, США; колонки (С1815×4,6 мм 5 мкм), продукт компании WATERS, США. криогенные холодильники, продукты компании JOUAN, Франция; шприц с микропористым мембранным фильтром: водный (0,22 мкм), продукт фабрики фильтров Тяньцзинь Тенгда. Водный лабиринт Морриса производства Института лекарственных средств Китайской академии медицинских наук. Счетчик FT-630Gy производства Пекинской атомной электростанции.
(4) Условия проведения хроматографии:
Состав подвижной фазы: дигидрофосфат натрия 90 ммоль/л, лимонная кислота 50 ммоль/л, октансульфонат натрия 1,7 ммоль/л, тетранатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) 0,05 мкмоль/л. Раствор фильтровали через водную мембрану с размером пор 0,2 мкм. К фильтрату добавляли ацетонитрил (10%). Скорость потока подвижной фазы составляла 0,6 мкл/мин, рабочий электрод 1: -150 мВ, рабочий электрод 2: 450 мВ, рабочий электрод 3: 500 мВ, рабочий электрод 4: 550 мВ.
Получение стандартного раствора: исходный раствор (100 мкг/мл) готовили с 0,1 моль/л хлорной кислоты и стандартным веществом, полученный раствор хранили в холодильнике при -70°С. Данный исходный раствор разбавляли до 10 мкг/мл разбавителем. Готовили последовательные разведения с получением растворов, которые использовали в качестве стандартных. В качестве рабочей жидкости использовали 0,15 моль/л хлорной кислоты (0,04% метабисульфита натрия и 0,04% ЭДТА).
2. Метод проведения эксперимента
Крысы получали внутрибрюшинную анестезию хлоральгидратом (350 мг/кг), волосы на шее выбривали, проводили дезинфекцию, крысам делали разрез в середине шеи, отделяли общую сонную артерию, внутреннюю сонную артерию и наружную сонную артерию. Наружную сонную артерию перевязывали, общую сонную артерию пережимали зажимом типа «бульдог», вводили 0,1 мл KMG во внутреннюю сонную артерию шприцом из наружной сонной артерии, зажим типа «бульдог» удаляли, наружную сонную артерию перевязывали, образовавшиеся у крыс раны зашивали, затем крыс кормили в клетках. Для ложнооперированной группы только отделяли общую сонную артерию, внутреннюю сонную артерию и наружную сонную артерию, микросферы не вводили. Для предотврашения инфекции вводили пенициллин натрия для инъекций в течение 4 дней. На следующий день после операции наблюдали поведение животных, если были изменения поведения передних конечностей, тогда модели были успешно созданы (если нет - крыс не использовали в исследовании), и полученных крыс разделяли на модельную группу, группу танакана 20 мг/кг, группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению (6 групп, дозы были такими же, как и в примере 1), группы, получавшие композиции согласно сравнительным примерам (8 групп, дозы были такими же, как в тестовом примере 1).
Через 10 дней после операции крысам производили внутрижелудочное введение (ложнооперированная группа и модельная группа получали через зонд дистиллированную воду того же объема) один раз в день в течение 90 дней. Через 40, 100 дней создания моделей (через 30, 90 дней после введения) определяли время пребывания и длину пути крыс для поиска платформы в водном лабиринте Морриса, через 60 минут после последнего введения крысы получали внутрибрюшинную анестезию с помощью хлоралгидрата, брали кровь из брюшной аорты, обрабатывали антикоагулянтом, плазму отделяли, и быстро отрезали головы для извлечения головного мозга, кору, гиппокамп и полосатое тело, взвешивали, взвешивали, отвердевали жидким азотом, хранящемся в холодильнике при температуре -70°С. К каждым 100 мг ткани головного мозга добавляли 1 мл холодной рабочей жидкости, полученные комбинации гомогенизировали с помощью электронного гомогенизатора в течение 15 с на ледяной бане (11000 оборотов в минуту), центрифугировали при 0-4°С со скоростью 14000 об/мин в течение 20 минут, супернатант подврергали экстракции, фильтровали через мембрану с размером пор 0,22 мкм фильтр шприцевого типа, полученный фильтрат отделяли, хранили в холодильнике при -20°С. Отбирали 10 мкл каждого образца с помощью автоматического пробоотборника, определяли содержание моноаминовых нейромедиаторов, таких как 5-НТ, 5-HIAA, NE, DA и тому подобное посредством ВЭЖХ (метод ВЭЖХ с электрохимическим детектированием). Определяли содержание ЕТ, NPY, SS, CGRP в плазме (посредством радиоиммуноанализа). Результаты анализировали с применением статистического метода (t-критерий).
3. Результаты
3.1. Влияние на массу коры головного мозга, полосатого тела и гиппокампа После инъекции биомикросферы микросферы попадали в кровь головного мозга с кровотоком, через 24 часа они могут образовывать в головном мозге множественные очаги омертвения разных размеров, и указанные очаги в основном находятся в области коры, гиппокампа и полосатого тела. Через 100 дней для модельной группы указанные очаги были более жидкими и произошел некроз таких очагов, появились полости, ткань мозга была сжата, гиппокамп был меньше, кора была тоньше, масса уменьшилась по сравнению с модельной группой, были обнаружены значительные различия для ложнооперированной группы (Р<0,05~0,01) по сравнению с модельной группой, для групп, получавших китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению и китайские лекарственные композиций согласно сравнительным примерам, масса коры головного мозга крыс была увеличена, но отсутствовала статистическая значимость для групп, получавших китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению, массы полосатого тела и гиппокампа были значительно увеличены (Р<0,05); для группы, получавшей леакрство танакан, и групп, получавших китайские лекарственные композиции согласно сравнительным примерам были увеличены массы коры головного мозга, полосатого тела, гиппокампа крыс, но статистическая значимость отсутствала. См. таблицу 19.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.2. Влияние на время пребывания в водном лабиринте Морриса
По сравнению с модельной группой, для ложнооперированной модельной группы время пребывания в водном лабиринте было значительно уменьшено (Р<0,05); через 30 дней после введения, по сравнению с модельной группой, для групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению время пребывания в водном лабиринте было значительно уменьшено (Р<0,05), для других групп значительных изменений не наблюдалось; через 90 дней после введения для групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению время пребывания в водном лабиринте было значительно уменьшено (Р<0,05~0,01), по сравнению с модельной группой, для групп композиций согласно сравнительным примерам 1~3 и 7 время пребывания в водном лабиринте было значительно уменьшено (Р<0,05), для других групп значительных изменений не наблюдалось. См. таблицу 20.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.3. Влияние на содержание ЕТ, NPY, SS, CGRP в плазме
Через 100 дней после создания моделей, по сравнению с модельной группой, для ложнооперированной группы содержание NPY в плазме животных было значительно повышено, содержание ЕТ было значительно снижено (Р<0,01 для всех), содержание SS и CGRP было повышено, но статистическая значимость отсутствовала (Р<0,01); через 100 дней после создания моделей (через 90 дней после введения), по сравнению с модельной группой, для групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению содержание NPY и SS было значительно повышено (Р<0,01), содержание ЕТ было значительно снижено (Р<0,05), значительных изменений содержания CGRP не наблюдалось; для групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 1~3 и 7 содержание NPY и SS было значительно повышено (Р<0,05~0,01), содержание ЕТ имело тенденцию к уменьшению, значительных изменений содержания CGRP не наблюдалось; для групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 4~6 и 8 содержание NPY и SS имело тенденцию к увеличению, содержание ЕТ имело тенденцию к уменьшению, значительных изменений содержания CGRP не наблюдалось; для сравнительной группы лекарства танакана содержание NPY и SS было значительно повышено (Р<0,01), содержание ЕТ было значительно снижено (Р<0,01), значительных изменений содержания CGRP не наблюдалось. См. таблицу 21.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
3.4. Влияние на содержание моноаминовых нейромедиаторов в головном мозге
(1) Влияние на содержание моноаминовых нейромедиаторов коры головного мозга
Через 100 дней после создания моделей, по сравнению с модельной группой, для ложнооперированной группы содержание 5-НТ, 5-HIAA в коре головного мозга крыс было значительно повышено (Р<0,05), содержание NE и DA было повышено, но статистическая значимость отсутствовала; для групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению содержание 5-НТ было значительно повышено (Р<0,01), содержание DA и 5-HIAA было значительно повышено (Р<0,05); для групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 1~3 и 7 содержание DA и 5-НТ было значительно повышено (Р<0,05); для групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам 4~6 и 8 содержание 5-НТ было значительно повышено, но статистическая значимость отсутствовала; для сравнительной группы лекарства танакана содержание 5-НТ и 5-HIAA было значительно повышено (Р<0,01), значительных различий для других показателей не наблюдалось. См. таблицу 22.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
(2) Влияние на содержание моноаминовых нейромедиаторов полосатого тела
Через 100 дней после создания моделей, по сравнению с модельной группой, для ложнооперированной группы содержание 5-НТ и 5-HIAA в полосатом теле головного мозга крыс было значительно повышено (Р<0,05), что свидетельствовало об успешном создании моделей; через 100 дней после создания моделей (через 90 дней после введения), по сравнению с модельной группой, для групп композиций согласно примерам 5 и 9 настоящего изобретения содержание 5-НТ было значительно повышено (Р<0,05), для групп композиций согласно примерам 1, 2, 6 и 11 настоящего изобретения содержание 5-HIAA было значительно повышено (Р<0,05); для групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам и сравнительной группы лекарства танакана значительных различий для содержания 5-НТ и 5-HIAA не наблюдалось. См. таблицу 23.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
(3) Влияние на содержание моноаминовых нейромедиаторов гиппокампа
Через 100 дней после создания моделей (через 90 дней после введения), по сравнению с модельной группой, для ложнооперированной группы содержание DA, 5-НТ и 5-HIAA в гиппокампе крыс было значительно повышено (Р<0,05~0,01), содержание NE было повышено, но статистическая значимость отсутствовала; для групп китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению содержание NE, DA и 5-НТ было значительно повышено (Р<0,05~0,01); для групп китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам содержание 5-НТ было значительно повышено (Р<0,05); для сравнительной группы лекарства танакана значительных различий для каждого из показателей не наблюдалось. См. таблицу 24.
PS: по сравнению с модельной группой, *Р<0,05; **Р<0,01
Краткий вывод:
Исследования подтверждают, что возможность возникновения деменции вследствие церебрального инфаркта связана в основном с размером, количеством и локализацией очаговых поражений, возникающих при церебральном инфаркте. Исследования показали, что, если объем очагового поражения при инфаркте превышает 50 мл, он может сочетаться с деменцией, если этот объем превышает 100 мл, он часто сочетается с деменцией; в результате исследований также было обнаружено, что среди пациентов с СД, пациенты с большой площадью очаговых поражений при инфаркте составляли 11,2% случаев, пациенты с малой площадью очаговых поражений при инфаркте составляли 88,8% случаев, пациенты с множественными очаговыми поражениями при инфаркте составляли 97,6% случаев, и это позволяет предположить, что малый объем очаговых поражений также может вызывать деменцию, в частности, чем больше количество очаговых поражений при инфаркте, тем выше частота возникновения деменции. Также существуют исследования, подтверждающие, что локализация церебрального инфаркта является ключевым фактором, приводящим к деменции; в большинстве сообщений упоминалось, что инфаркты, приводящие к очаговым изменениям перивентрикулярного белого вещества, обнаруживаемым с помощью КТ, значительно увеличивали частоту возникновения деменции. Исследования, основанные на модели мультиинфарктной деменции (МИД), содержат рекомендации по определению эффективности лечения СД с применением лекарственных средств.
Механизмы обучения и памяти в головном мозге в основном включают нейрофизиологические механизмы и нейрохимические механизмы, причем нейрофизиологические механизмы фокусируются на локализации памяти в головном мозге и сопутствующих процессах биоэлектрической активности, а нейрохимический механизм в основном объясняет влияние нейромедиаторов, нейропептидов и биологических макромолекул на обучение и память и их связь. Нейропептид обычно относится к эндогенному активному веществу, он присутствует в нервной ткани и участвует в функционировании нервной системы, являясь своего рода специфическим информационным веществом. Нейропептид характеризуется низким содержанием, высокой активностью, обширным и сложным эффектом, регулирующим самые разнообразные физиологические функции организма, такие как боль, сон, настроение, обучение и память, а также дифференцировку и развитие самой нервной системы; все эти процессы регулируются нейропептидом. Соматостатин (SS) является нейроактивным пептидом, который широко распространен в нервной системе, наивысшее содержание SS обнаружено в гипоталамусе и коре головного мозга и гиппокампе, такое распределение связано с его регуляцией когнитивной функции. SS в тканях головного мозга обладает положительной регуляторной ролью для обучения и памяти, сигнальные пути SS, регулирующие обучение и память, представляют собой: первый, прямой путь, опосредован возбуждением SS-чувствительных нервов, что вызывает увеличение притока кальция, а второй возможно опосредован другими нервными путями. SS-нейроны и холинергические нейроны очень близки и имеют синаптические связи, что свидетельствует об их функциональном контакте: SS может способствовать высвобождению ацетилхолина, который влияет на функции обучения и памяти. Эндотелии (эндотелин-1, ЕТ) является результатом недавнего углубленного изучения вазоактивного пептида, он является нейромедиатором и обладает сильными сосудосуживающими свойствами, широко распространен в различных органах тела, кроме способности вызывать сужение сосудов, ЕТ также способен вызывать прямое повреждение нейронов и глиальных клеток, у пациентов с геморрагическим, ишемическим цереброваскулярным заболеванием концентрации ЕТ в плазме были значительно повышены, наблюдается значительная положительная корреляция между уровнями ЕТ и размерами очаговых поражений при церебральном инфаркте. ЕТ действует на нервные клетки, вызывает кальциевую перегрузку нервных клеток и способствует образованию свободных радикалов, что еще больше усугубляет повреждение головного мозга. Нейропептид Y (NPY) является активным полипептидом, состоящим из 36 аминокислот, в центральной нервной системе он в основном локализуется в коре головного мозга, гиппокампе, таламусе, гипоталамусе и стволе головного мозга, самая высокая концентрация NPY обнаружена в гиппокампе, и гиппокамп представляет собой ключевой участок головного мозга, который регулирует обучение и память. NPY первоначально синтезируется внутри нервных клеток, затем транспортируется к нервным окончаниям и хранится в везикулах, и он сосуществует с классическими нейромедиаторами, такими как норэпинефрин, эпинефрин, y-аминомасляная кислота и соматостатин. NPY не только тесно связан с долговременной памятью, но также оказывает влияние на кратковременную память. NPY выполняет свою биологическую роль главным образом посредством своих рецепторов, и современные исследования позволяют предположить, что экспрессия мРНК рецептора Y2 в гиппокампе наиболее распространена, регулирование рецепторов при обучении и запоминании может представлять собой механизм долговременной потенциации передачи (long-transfer potentiation, LTP). По причине наличия вышеуказанной корреляции между уровнями нейропептидов и способностями к обучению и запоминанию и их корреляцией с уровнями холинергических и адренергических нейромедиаторов, авторы настоящего изобретения исследовали содержание нейропептидов в плазме, уровни моноаминовых нейромедиаторов в коре головного мозга, полосатом теле, гиппокампе и эффекты лекарственных средств в модели МИД на крысах.
В проведенном эксперименте в сонную артерию вводили микросферы для создания модели мультиинфарктной деменции (МИД) на крысах. Результаты показали, что через 24 часа у модельных животных возникало нейроповеденческое расстройство, развивался множественный инфаркт, через 10 дней происходил разжижающий некроз тканей головного мозга в очагах инфарктического поражения, уменьшалась толщина коры головного мозга, происходила атрофия гиппокампа, массы коры головного мозга, стриатума, гиппокампа значительно уменьшались, появлялись нарушения процессов обучения и памяти, содержание 5-НТ, 5-HIAA в коре головного мозга и гиппокампе значительно снижалось, содержание DA имело тенденцию к уменьшению, но статистическая значимость отсутствовала (Р<0,01), содержание NPY в плазме было значительно снижено, содержание ЕТ было значительно повышено, содержание SS и CGRP имело тенденцию к уменьшению.
После 30~90 дней введения крысам с помощью желудочного зонда китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению (через 40~100 дней после создания моделей), по сравнению с модельной группой, время пребывания в водном лабиринте Морриса крыс группы китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению было значительно уменьшено, способности к обучению и памяти были значительно увеличены; после 90 дней введения масса гиппокампа была значительно увеличена (Р<0,05), содержание 5-НТ, 5-HIAA и DA в коре головного мозга, содержание 5-НТ, 5-HIAA в полосатом теле и содержание NE, DA, 5-НТ в гиппокампе было значительно повышено (Р<0,05~0,01), содержание NPY и SS в плазме было значительно повышено, содержание ЕТ было значительно снижено. Следует указать, что содержание нейромедиаторов, связанных с обучением и памятью, в головном мозге крыс с МИД может быть увеличено путем применения китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению, таким образом, китайские лекарственные композиции согласно настоящему изобретению обладают терапевтическим эффектом при сосудистой деменции. Кроме того, по данным сравнительных экспериментов можно видеть, что эффекты китайских лекарственных композиций согласно настоящему изобретению были лучше, чем аналогичные эффекты китайских лекарственных композиций согласно сравнительным примерам, и результаты были статистически значимыми.
Claims (15)
1. Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции, полученная из лекарственного сырья, состоящего из ингредиентов со следующим массовым соотношением: 1 часть женьшеня, 0,8-1,5 части листьев гинкго, 0,018-0,030 части рылец шафрана.
2. Китайская лекарственная композиция по п. 1, отличающаяся тем, что сырье для получения указанной китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 1 часть листьев гинкго, 0,018-0,030 части рылец шафрана.
3. Китайская лекарственная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что сырье для получения указанной китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 0,9-1,2 части листьев гинкго, 0,020-0,025 части рылец шафрана.
4. Китайская лекарственная композиция по п. 3, отличающаяся тем, что сырье для получения указанной китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 1 часть листьев гинкго, 0,020-0,025 части рылец шафрана.
5. Китайская лекарственная композиция по п. 4, отличающаяся тем, что сырье для получения указанной китайской лекарственной композиции представляет собой лекарственное сырье со следующим массовым соотношением ингредиентов: 1 часть женьшеня, 1 часть листьев гинкго, 0,022 части рылец шафрана.
6. Способ получения китайской лекарственной композиции по любому из пп. 1-5, включающий стадию взвешивания женьшеня, листьев гинкго и рылец шафрана в массовом соотношении 1: 0,8-1,5: 0,018-0,030, стадию получения экстракта женьшеня, стадию получения экстракта листьев гинкго, стадию получения экстракта рылец шафрана, стадию смешивания указанных экстракта женьшеня, экстракта листьев гинкго и экстракта рылец шафрана.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что на стадии получения экстракта женьшеня основной получаемый компонент представляет собой общую фракцию гинзенозидов; на стадии получения экстракта листьев гинкго основной получаемый компонент представляет собой общую фракцию флавоноидов и общую фракцию лактонов, содержащихся в листьях гинкго; на стадии получения экстракта рылец шафрана основной получаемый компонент представляет собой общую фракцию гликозидов, содержащихся в рыльцах шафрана.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что стадии получения экстракта женьшеня следующие: женьшень измельчают в порошок, затем 2 раза подвергают экстракции с этанолом при нагревании с обратным холодильником, фильтруют, снижают давление в полученном фильтрате с извлечением растворителя до достижения относительной плотности 1,12-1,14 при 70°С, добавляют воду в количестве, в 2-6 раз превышающем количество неочищенного лекарственного средства, для гомогенного перемешивания, затем смесь охлаждают с образованием осадка, супернатант выгружают на макропористую адсорбирующую смолу, и указанную смолу, содержащую лекарственное средство, сначала промывают дистиллированной водой, затем элюируют этанолом, этанольный элюент собирают и концентрируют досуха с получением экстракта женьшеня;
стадии получения экстракта листьев гинкго следующие: к крупнодисперсному порошку листьев гинкго добавляют теплый этанол, покрывая порошок, фильтруют, и остаток с фильтра погружают в теплый этанол, повторно фильтруют, полученные фильтраты объединяют и концентрируют при пониженном давлении до достижения относительной плотности 1,12-1,14 при 70°С, добавляют воду в количестве, в 2-6 раз превышающем количество неочищенного лекарственного средства, перемешивают до гомогенного состояния, затем охлаждают с образованием осадка, фильтруют, фильтрат выгружают на макропористую адсорбирующую смолу, и указанную смолу, содержащую лекарственное средство, сначала промывают дистиллированной водой, затем элюируют этанолом, этанольный элюент собирают и концентрируют до достижения относительной плотности 1,02-1,04 при 70°С, его подвергают экстракции смесью этилацетат:н-бутиловый спирт, экстракты объединяют и сбрасывают давление с извлечением растворителя с получением экстракта листьев гинкго;
стадии получения экстракта рылец шафрана следующие: к лекарственному сырью в виде рылец шафрана добавляют холодный этанол с покрытием рылец шафрана, затем фильтруют, к остаткам повторно добавляют холодный этанол с покрытием, далее фильтруют, полученные фильтраты объединяют, концентрируют при пониженном давлении до достижения относительной плотности 1,12-1,14 при 70°С, добавляют воду, затем смесь выгружают на макропористую адсорбирующую смолу, и указанную смолу, содержащую лекарственное средство, сначала промывают дистиллированной водой, затем элюируют этанолом, этанольный элюент концентрируют до достижения относительной плотности 1,02-1,04 при 70°С и концентрируют досуха с получением экстракта рылец шафрана.
9. Китайский лекарственный состав для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции, состоящий из китайской лекарственной композиции по любому из пп. 1-5 или китайской лекарственной композиции, полученной по способу по любому из пп. 6-8, и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества.
10. Применение китайской лекарственной композиции по любому из пп. 1-5, китайской лекарственной композиции, полученной по способу по любому из пп. 6-8, или китайского лекарственного состава по п. 9 для получения лекарственного средства для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний и/или деменции.
11. Применение по п. 10, отличающееся тем, что указанные сердечно-сосудистое и цереброваскулярное заболевание выбраны из по меньшей мере одного из следующих заболеваний: ишемического цереброваскулярного заболевания, коронарной болезни сердца или стенокардии.
12. Применение по п. 10, отличающееся тем, что указанная деменция выбрана из сенильной деменции.
13. Применение по п. 10, отличающееся тем, что указанная деменция представляет собой сосудистую деменцию.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410840192.7A CN104587087B (zh) | 2014-12-30 | 2014-12-30 | 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物 |
CN201410840192.7 | 2014-12-30 | ||
PCT/CN2015/099381 WO2016107540A1 (zh) | 2014-12-30 | 2015-12-29 | 一种预防或治疗心脑血管疾病或痴呆症的中药组合物及其制备方法和用途 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2674264C1 true RU2674264C1 (ru) | 2018-12-06 |
Family
ID=53113358
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017121638A RU2674264C1 (ru) | 2014-12-30 | 2015-12-29 | Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний или деменции и способ ее получения и применение |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20170354700A1 (ru) |
JP (1) | JP6548734B2 (ru) |
KR (1) | KR102005265B1 (ru) |
CN (1) | CN104587087B (ru) |
AU (1) | AU2015373702B2 (ru) |
CA (1) | CA2971080C (ru) |
DE (1) | DE112015005869T5 (ru) |
RU (1) | RU2674264C1 (ru) |
WO (1) | WO2016107540A1 (ru) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104587087B (zh) * | 2014-12-30 | 2018-10-23 | 神威药业集团有限公司 | 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物 |
CN105943804B (zh) * | 2015-10-09 | 2019-11-08 | 临沂大学 | 一种复方黑蒜制剂 |
CN107536919A (zh) * | 2016-06-23 | 2018-01-05 | 上海医药集团股份有限公司 | 一种治疗和/或预防胃神经官能症的中药组合物、其制备方法及用途 |
CN106581399A (zh) * | 2017-01-12 | 2017-04-26 | 喻鸿章 | 一种治疗心脑血管疾病用胶囊及其制作方法 |
CN109223846A (zh) * | 2018-11-21 | 2019-01-18 | 北京诚毅投资股份有限公司 | 一种改善记忆力下降和缓解老年痴呆的药物组合物及其制备方法 |
CN111665107A (zh) * | 2020-06-16 | 2020-09-15 | 湖南一方天江药业有限公司 | 一种便于定量提取的中药实验检验用提取装置 |
CN112754014A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-05-07 | 西安巨子生物基因技术股份有限公司 | 一种防治心脑血管系统疾病的组合物及其制备方法 |
CN113189071B (zh) * | 2021-04-29 | 2022-11-22 | 上海交通大学 | 用于完整器官血管三维网络精准成像的试剂盒及成像方法 |
CN113144081A (zh) * | 2021-06-02 | 2021-07-23 | 陈庆国 | 一种治疗心脑血管堵塞的中药组合物 |
CN114184693B (zh) * | 2021-10-14 | 2023-10-13 | 重庆医科大学 | 4-羟苯乙酸作为标志物在制备脓毒症脑病的诊断试剂盒中的应用 |
CN114869920B (zh) * | 2022-05-16 | 2024-02-20 | 暨南大学 | 一种具有乙酰胆碱酯酶抑制作用的千层塔提取物及其制备方法与应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1413656A (zh) * | 2002-10-14 | 2003-04-30 | 刘建勋 | 治疗缺血性脑血管疾病和老年性痴呆的药物维脑康及其制造方法 |
CN1562186A (zh) * | 2004-03-17 | 2005-01-12 | 北京奇源益德药物研究所 | 一种治疗心脑缺血性疾病的中药制剂及其制备方法 |
WO2007118363A1 (fr) * | 2006-04-19 | 2007-10-25 | Jianxun Liu | Composition médicinale chinoise, procédé de préparation et utilisation de celle-ci |
RU2408384C2 (ru) * | 2006-04-19 | 2011-01-10 | Джианксан ЛЬЮ | Китайский лекарственный состав, способ его получения и применение |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2363701A (en) * | 1999-12-17 | 2001-06-25 | Boehringer Ingelheim Pharmaton Sa | Composition comprising ingredients of panax ginseng and ginko biloba |
CN1730008A (zh) * | 2005-08-02 | 2006-02-08 | 孙毅 | 一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物 |
CA2585682A1 (en) * | 2007-04-19 | 2008-10-19 | Allegiance Equity Corporation | New compound for improvement of memory function, cognitive function and mental health |
DE102007030495A1 (de) * | 2007-06-30 | 2009-01-15 | Alzchem Trostberg Gmbh | Verwendung einer eine Kreatin-Komponente enthaltende Zusammensetzung zur Verbesserung der Gedächtnisleistung, der Merkfähigkeit, des Langzeitgedächtnisses und zur Vorbeugung geistiger Ermüdungszustände |
CN102843922B (zh) | 2010-05-13 | 2015-12-16 | 尼特罗米加公司 | 硝基脂肪酸–认知减退的神经保护和/或抑制 |
US9211298B2 (en) | 2012-11-16 | 2015-12-15 | Song Gao | Compositions containing enriched natural crocin and/or crocetin, and their therapeutic or nutraceutical uses |
CN104288370A (zh) * | 2014-10-21 | 2015-01-21 | 神威药业集团有限公司 | 塞络通胶囊新的医药用途 |
CN104352671A (zh) * | 2014-10-24 | 2015-02-18 | 神威药业集团有限公司 | 一种中药组合物的新的医药用途 |
CN104491226B (zh) * | 2014-12-26 | 2018-01-12 | 河北神威药业有限公司 | 一种药物组合物的新的医药用途 |
CN104587087B (zh) * | 2014-12-30 | 2018-10-23 | 神威药业集团有限公司 | 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物 |
-
2014
- 2014-12-30 CN CN201410840192.7A patent/CN104587087B/zh active Active
-
2015
- 2015-12-29 KR KR1020177021241A patent/KR102005265B1/ko active IP Right Grant
- 2015-12-29 US US15/540,831 patent/US20170354700A1/en not_active Abandoned
- 2015-12-29 RU RU2017121638A patent/RU2674264C1/ru active
- 2015-12-29 DE DE112015005869.9T patent/DE112015005869T5/de active Pending
- 2015-12-29 JP JP2017535818A patent/JP6548734B2/ja active Active
- 2015-12-29 CA CA2971080A patent/CA2971080C/en active Active
- 2015-12-29 WO PCT/CN2015/099381 patent/WO2016107540A1/zh active Application Filing
- 2015-12-29 AU AU2015373702A patent/AU2015373702B2/en active Active
-
2019
- 2019-07-09 US US16/506,426 patent/US10967023B2/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1413656A (zh) * | 2002-10-14 | 2003-04-30 | 刘建勋 | 治疗缺血性脑血管疾病和老年性痴呆的药物维脑康及其制造方法 |
CN1562186A (zh) * | 2004-03-17 | 2005-01-12 | 北京奇源益德药物研究所 | 一种治疗心脑缺血性疾病的中药制剂及其制备方法 |
WO2007118363A1 (fr) * | 2006-04-19 | 2007-10-25 | Jianxun Liu | Composition médicinale chinoise, procédé de préparation et utilisation de celle-ci |
RU2408384C2 (ru) * | 2006-04-19 | 2011-01-10 | Джианксан ЛЬЮ | Китайский лекарственный состав, способ его получения и применение |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2018505155A (ja) | 2018-02-22 |
DE112015005869T5 (de) | 2017-11-02 |
AU2015373702A1 (en) | 2017-07-13 |
US10967023B2 (en) | 2021-04-06 |
CA2971080C (en) | 2021-10-26 |
CN104587087B (zh) | 2018-10-23 |
US20170354700A1 (en) | 2017-12-14 |
JP6548734B2 (ja) | 2019-07-24 |
KR102005265B1 (ko) | 2019-07-30 |
US20190328810A1 (en) | 2019-10-31 |
CN104587087A (zh) | 2015-05-06 |
CA2971080A1 (en) | 2016-07-07 |
AU2015373702B2 (en) | 2018-08-09 |
KR20170120582A (ko) | 2017-10-31 |
WO2016107540A1 (zh) | 2016-07-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2674264C1 (ru) | Китайская лекарственная композиция для предотвращения или лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний или деменции и способ ее получения и применение | |
JP4657714B2 (ja) | 心疾患用の組成物、その組成物を調製する方法、及びそれらの使用。 | |
Boukhettala et al. | Methotrexate induces intestinal mucositis and alters gut protein metabolism independently of reduced food intake | |
Fan et al. | Evodiamine inhibits zymosan-induced inflammation in vitro and in vivo: inactivation of NF-κB by inhibiting IκBα phosphorylation | |
Chai et al. | Scutellarin and caffeic acid ester fraction, active components of Dengzhanxixin injection, upregulate neurotrophins synthesis and release in hypoxia/reoxygenation rat astrocytes | |
JP2001513332A (ja) | 天然成分を含有する食物サプリメント | |
Liu et al. | GJ-4 ameliorates memory impairment in focal cerebral ischemia/reperfusion of rats via inhibiting JAK2/STAT1-mediated neuroinflammation | |
KR20020035855A (ko) | 약용인삼을 포함하는 뇌세포 또는 신경세포 보호제 | |
Ye et al. | The protective mechanism of SIRT1 in the regulation of mitochondrial biogenesis and mitochondrial autophagy in Alzheimer’s disease | |
Hu et al. | Effect of kai xin san on learning and memory in a rat model of paradoxical sleep deprivation | |
Wu et al. | YiQi tongluo granule against cerebral ischemia/reperfusion injury in rats by freezing GluN2B and CaMK II through NMDAR/ERK1/2 signaling | |
CN104546809B (zh) | 3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚在预防及治疗缺血性脑卒中中的应用 | |
US9877938B2 (en) | Modified taurine, and pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases containing same | |
KR20180073557A (ko) | 조성물 및 그의 방법 | |
Buddhala et al. | Modes of action of taurine and granulocyte colony-stimulating factor in neuroprotection | |
CN111588763B (zh) | 血栓通脉药物、制备方法及含量测定方法 | |
CN102188447A (zh) | 一种吡拉西坦脑蛋白水解物片中脑蛋白水解物的制备方法 | |
CN105641363B (zh) | 青娥方提取物抗抑郁抗焦虑用途 | |
CN111298035B (zh) | 一种用于治疗老年痴呆症肾虚质的中药组合物及其制备方法和应用 | |
CN112023027B (zh) | 胸腺素或其衍生物的应用和治疗快感缺乏型抑郁症的药物 | |
Wu et al. | Objectives: We aimed to evaluate the effect of Shenfu injection in a rat model of ischemic heart failure and explore its mechanism. Methods: A rat model of ischemic heart failure after myocardial infarction was established by ligating the left anterior descending coronary artery. Forty-eight hours after surgery, the rats were intraperitoneally administered Shenfu injection for 7 weeks. Then, left | |
Zhang et al. | Erythroside Regulates Synaptic Damage in Alzheimer’s Disease Through Targeting Rho-Associated Kinase (ROCK) Signaling Pathway | |
Lva et al. | Early-stage Protective Effects of Tea Polyphenols on Hippocampal Neurogenesis and Cognitive Dysfunction in Alzheimer's Disease Model | |
Lu et al. | Local anesthetic effect and safety of ropivacaine oily solution | |
Khajehlandi et al. | Protective effect of high-intensity interval training and moderate-intensity continuous training with quercetin supplementation on the apoptosis cardiomyopathy related factors in the diabetic cardiac of obese rats |