RU2573422C2 - Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, для применения в качестве агента, маскирующего антиген - Google Patents
Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, для применения в качестве агента, маскирующего антиген Download PDFInfo
- Publication number
- RU2573422C2 RU2573422C2 RU2013128884/10A RU2013128884A RU2573422C2 RU 2573422 C2 RU2573422 C2 RU 2573422C2 RU 2013128884/10 A RU2013128884/10 A RU 2013128884/10A RU 2013128884 A RU2013128884 A RU 2013128884A RU 2573422 C2 RU2573422 C2 RU 2573422C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biologically active
- immune response
- active substance
- igg
- human lactoferrin
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 56
- 101000798114 Homo sapiens Lactotransferrin Proteins 0.000 title claims abstract description 45
- 102000050459 human LTF Human genes 0.000 title claims abstract description 45
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 59
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 claims abstract description 48
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 20
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 24
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 20
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 13
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 63
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 45
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 28
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 7
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 7
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 7
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 7
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 5
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 5
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 5
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 description 4
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 4
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 4
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 4
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical group C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 4
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 4
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 4
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 3
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 3
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 2
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000000781 anti-lymphocytic effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- -1 antibiotics Chemical class 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000947840 Alteromonadales Species 0.000 description 1
- 108090000668 Annexin A2 Proteins 0.000 description 1
- 102100034613 Annexin A2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000669 Annexin A4 Proteins 0.000 description 1
- 102100034612 Annexin A4 Human genes 0.000 description 1
- 241000239290 Araneae Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101000798100 Bos taurus Lactotransferrin Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000043587 Collimonas fungivorans Species 0.000 description 1
- OABOXRPGTFRBFZ-IMJSIDKUSA-N Cys-Cys Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O OABOXRPGTFRBFZ-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 241000970811 Dictyoglomi Species 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000607473 Edwardsiella <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 241000182328 Foraminitermes group Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108010036176 Melitten Proteins 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000242583 Scyphozoa Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 238000005411 Van der Waals force Methods 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000005574 benzylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- 229960000182 blood factors Drugs 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 108010004073 cysteinylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- KDQPSPMLNJTZAL-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dihydrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O KDQPSPMLNJTZAL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229940046528 grass pollen Drugs 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 102000003664 human lactoferrin peptide 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010057114 human lactoferrin peptide 2 Proteins 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 229940124622 immune-modulator drug Drugs 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- VDXZNPDIRNWWCW-UHFFFAOYSA-N melitten Chemical compound NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC(C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NCC(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(=O)NC(C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(N)=O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 VDXZNPDIRNWWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000008185 minitablet Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/644—Transferrin, e.g. a lactoferrin or ovotransferrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности к применению пептида, полученного из человеческого лактоферрина, в качестве маскирующего агента. Также раскрыт способ получения фармацевтической композиции. Изобретение обладает способностью маскировать биологически активное вещество и предотвращать нежелательный иммунный ответ IgG или IgE. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл., 2 пр.
Description
Уровень техники
Общие сведения об иммуноглобулине G: иммуноглобулин G (IgG) представляет собой молекулы антител. IgG наиболее распространенный иммуноглобулин и приблизительно в равной степени распространен в крови и в жидкостях тканей, составляя основную часть сывороточных иммуноглобулинов у млекопитающих и человека. Молекулы IgG синтезируются и секретируются клетками плазмы B.
IgG антитела преимущественно участвуют во вторичном иммунном ответе. Присутствие специфического IgG в общем соответствует готовности гуморального иммунного ответа. IgG представляет собой единственный изотип антитела, который может проходить через человеческую плаценту, таким образом, обеспечивая защиту плода в матке. Наряду с IgA, секретированным в грудном молоке, остаточный IgG, абсорбированный через плаценту, обеспечивает новорожденному гуморальный иммунитет до развития его собственной иммунной системы.
IgG может связываться с множеством видов патогенов, например с вирусами, бактериями и грибами, и защищает организм от них путем агглютинации и иммобилизации, активации комплемента (классический путь), опсонизации для фагоцитоза и/или нейтрализации их токсинов. Он также играет важную роль в антитело-зависимой клетка-опосредованной цитотоксичности (ADCC).
IgG млекопитающих, генерирующие иммунные ответы, сильно связаны с другими и каскадами иммунных ответов и сигнальными путями. Так что гаптен или иммуноген мотивы или рецепторы и семейства рецепторов коррелируют и регулируют во многих известных и неизвестных путях у отдельных млекопитающих индивидуальным образом.
Вот почему любой биологически активный агент, введенный в качестве терапевтического средства, может вводить иммунный ответ, желательный и нежелательный, даже после многих отдельных доз.
В WO 2007/048599 описываются системы доставки лекарственного средства в виде твердых частиц на основе полимерного носителя, отличающиеся тем, что по меньшей мере одно сигнальное вещество для транспорта через биологический барьер и по меньшей мере один активный ингредиент включены с носителем, причем сигнальное вещество и активный ингредиент не показывают ковалентное связывание друг с другом. Сигнальное вещество представляет собой лактоферрин или пептид, полученный из лактоферрина.
В особенно предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения сигнальный пептид выбирается из группы пептидов, имеющих аминокислотную последовательность
| KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR | (SEQ ID No. 3 в WO 2007/048599), |
| CFQWQRNMRKVRGPPVSC | (SEQ ID No. 4 в WO 2007/048599), |
| FQWQRNMRKVRGPPVS | (SEQ ID No. 5 в WO 2007/048599), |
| FQWQRNMRKVR | (SEQ ID No. 6 в WO 2007/048599), |
| KCRRWQWRMKKLGAPSITCVRR | (SEQ ID No. 29 в WO 2007/048599) и |
| CRRWQWRMKKLGAPSITC | (SEQ ID No. 30 в WO 2007/048599) |
или их производной.
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения проникающие в клетку пептиды согласно WO 2007/048599 содержат аминокислотную последовательность, как показано в WO 2007/048599, SEQ ID No. 3, SEQ ID No. 4, SEQ ID No. 29 или SEQ ID No. 30, или соответствующую последовательность с идентичностью по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 50%, особенно предпочтительно с идентичностью более 75% или лучше более 90%.
В WO 2007/076904 A1 описывается пептид, имеющий аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере 8 последовательных аминокислот белка человеческого лактоферрина или белка бычьего лактоферрина, причем пептид подходит для действия в качестве проникающего в клетку пептида. Многие пептиды, упомянутые в WO 2007/076904 A1 и в WO 2007/048599, идентичны.
Наиболее эффективный проникающий в клетку пептид согласно WO 2007/076904 A1 с наилучшими эффектами, показанными в примерах, представляет собой KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR (SEQ ID No. 3 в WO 2007/076904 A1, SEQ ID No. 1 в настоящей заявке).
Полученные из лактоферрина, проникающие в клетку пептиды, как подразумевается, обеспечивают транспорт транспортных молекул, которые представляют собой активные фармацевтические ингредиенты, такие как ДНК, РНК, пептиды или антигены для вакцинации, которые могут приниматься перорально, через биологические мембраны, и, таким образом, обеспечивают эффективное внедрение этих молекул в организм человека или животного.
Проблема и решение
Когда биологически активное вещество, которое доставляется в организм млекопитающего для излечения заболевания, индуцирует нежелательный иммунный ответ, это может стать серьезной проблемой, когда такое же биологически активное вещество должно доставляться в этот же определенный организм позже еще раз.
Задача настоящего изобретения состояла в обнаружении агента, маскирующего антиген, который может применяться в качестве вспомогательного средства или в качестве эксципиента при получении фармацевтической композиции для доставки биологически активного вещества в организм млекопитающего, где биологически активное вещество способно индуцировать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего, с тем эффектом, что после доставки фармацевтической композиции в организм млекопитающего в нем не происходит или происходит только пониженная индукция нежелательного иммунного ответа против биологически активного вещества.
Проблема решается с помощью пептида, полученного из человеческого лактоферрина, для применения в качестве агента, маскирующего антиген, при получении фармацевтической композиции для доставки биологически активного вещества в организм млекопитающего, где биологически активное вещество способно индуцировать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего, где фармацевтическая композиция содержит надмолекулярный агрегат биологически активного вещества и пептида, полученного из лактоферрина, с тем эффектом, что после доставки фармацевтической композиции в организм млекопитающего в нем не происходит или происходит только пониженная индукция нежелательного иммунного ответа против биологически активного вещества.
Подробное описание настоящего изобретения
Настоящее изобретение относится к пептиду, полученному из человеческого лактоферрина, для применения в качестве агента, маскирующего антиген, при получении фармацевтической композиции для доставки биологически активного вещества в организм млекопитающего, где биологически активное вещество способно индуцировать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего, где фармацевтическая композиция содержит конъюгат биологически активного вещества и пептида, полученного из человеческого лактоферрина, с тем эффектом, что после доставки фармацевтической композиции в организм млекопитающего в нем не происходит или происходит только пониженная индукция нежелательного иммунного ответа против биологически активного вещества.
Так как пептид, полученный из человеческого лактоферрина, получают из человеческого лактоферрина, он является неиммунногенным в отношении иммунной системы человека.
Неожиданно было получено, что пептид, полученный из человеческого лактоферрина, является неиммунногенным или иммунногенным только в низкой степени относительно иммунной системы млекопитающих, предпочтительно продуктивных животных или домашних животных, как, например, свиньи, овцы, коровы или собаки, применяемые в качестве модельных образцов при разработке лекарственных средств, хотя последовательности являются генетически неконсервативными. Таким образом, преимущества настоящего изобретения не ограничиваются до применения человеком, но настоящее изобретение может также применяться в ветеринарных применениях и для разработки терапевтических средств для человека, с применением животных моделей.
Пептид, полученный из человеческого лактоферрина
Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, может иметь длину от 19 до 30 аминокислот.
Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, может иметь длину от 19 до 30 аминокислот и может включать аминокислотную последовательность согласно SEQ. ID. No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR или последовательность, которая по меньшей мере на 90, 95 или 98% гомологична этой последовательности SEQ. ID. No. 1.
Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, предпочтительно представляет собой пептид с аминокислотной последовательностью согласно SEQ. ID. No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR или последовательность, которая по меньшей мере на 90, 95 или 98% гомологична этой последовательности.
Наиболее предпочтительно пептид, полученный из человеческого лактоферрина, по меньшей мере на 90, 95 или 98% гомологичен последовательности SEQ: ID1, и в нем присутствуют цистеиновые остатки в положениях 2 и 19. Предпочтительно цистеиновые остатки присутствуют в окисленной форме, формируя внутренний Cys-Cys-мостик.
Может быть включена любая дополнительная стандартная химическая модификация, применяемая в пептидном GMP-синтезе, как, например N-ацетилирование, ацилирование, метилирование, бензилирование, C-амидирование, эстерификация, C-терминальная-эстерификация в массе, изостерические аминокислотные модификации, и неприродные аминокислоты, такие как тиофенил-аланин или циклопролин-аланин, или любое другое аминокислотное замещение амид-, сложный эфир- или простой эфир-основная цепь.
Однако предпочтительно, чтобы за исключением образования Cys-Cys-мостика, пептид, полученный из человеческого лактоферрина, не показывал дополнительных химических модификаций.
Биологически активное вещество, которое способно вызывать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего
Биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего, как правило, содержится или присутствует в фармацевтической форме или фармацевтическом препарате.
Биологически активные вещества, которые, как предполагается, применяются для индицирования желательного иммунного ответа в организме млекопитающего, например большинство вакцин, не попадают под определение "нежелательный иммунный ответ".
Биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего, может предпочтительно выбираться из группы биологически активных белков или биологически активных пептидов, антисыворотки, поликлональных или моноклональных антител. Также необходимо упомянуть рекомбинантные белки, обеспечивающие другие "растворимые рецепторы", или "связующие растворимых рецепторов", или модифицированные рекомбинантные белки, такие как полиэтиленгликол(PEG)ированные вещества, а также терапевтические средства с риском иммуногенности в качестве нежелательного побочного эффекта, включая маленькие молекулы, где такой риск известен, или потенциально релевантные, как антибиотики, пептидные лекарственные средства и пептидомиметики.
Биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный IgG иммунный ответ, может содержаться в образце крови, которая переливается в организм млекопитающего.
Биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный IgG иммунный ответ, содержится в или на поверхности органа, который трансплантируется в организм млекопитающего.
Нежелательный иммунный ответ
Нежелательный иммунный ответ организма млекопитающего представляет собой ответ иммунной системы посредством производства антител против биологически активного вещества, которое доставляется в организм млекопитающего для того, чтобы вызвать благоприятный терапевтический эффект, который отличается от иммунного ответа, или когда иммунный ответ представляет собой нежелательный побочный эффект.
Нежелательный иммунный ответ может представлять собой (предпочтительно) IgG иммунный ответ.
Нежелательный иммунный ответ может представлять собой (предпочтительно) IgE иммунный ответ.
Даже когда нежелательный иммунный ответ может не вызывать нежелательные побочные эффекты при первой доставке этой фармацевтической формы или в фармацевтическом препарате, содержащем или включающем биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный иммунный ответ, нежелательный иммунный ответ может вызывать нежелательные побочные эффекты, когда фармацевтический препарат содержит или включает биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный (IgG или IgE) иммунный ответ, доставляется или должно быть доставлено во второй раз, или другой раз, или несколько раз, или через период времени. В этом случае, например, существующие уровни IgG в плазме могут частично или полностью инактивировать биологически активное вещество и уменьшать желательный терапевтический эффект. В некоторых случаях частичная или полная инактивация биологически активного вещества может также идти рука об руку с раздражением, жаром или другими нежелательными побочными эффектами. Эти побочные эффекты могут неспецифически вызываться присутствием агрегатов или преципитатов IgG-антитела с биологически активным веществом.
Типичным примером биологически активного вещества, которое способно вызывать нежелательный IgG иммунный ответ организма млекопитающих, является, например, противоядие на основе антисыворотки против яда ядовитых животных. Например, змей, насекомых, пауков или определенных видов медуз, где антисыворотка производится животными, как правило, лошадьми, где антисыворотка, как подразумевается, вылечивает человека, имевшего контакт с этим ядом. После первой доставки этой антисыворотки у отдельного человека, как правило, развивается нежелательный преобладающий IgG иммунный ответ против лошадиных белков, главным образом IgG-антител, содержащихся в антисыворотке.
Хорошо известен случай противоядия против яда змей на основе антисыворотки, производимой лошадьми, которая доставляется в организм человека, который был укушен определенными видами змей, для излечения некоторых эффектов змеиного яда. После первой доставки антисыворотки против яда змей отдельный человек может быть излечен посредством инактивации яда, но может развиться нежелательный IgG иммунный ответ против лошадиных белков, главным образом лошадиных IgG-антител, содержащихся в сыворотке. Если этот же человек позже будет укушен этой же или другой змеей, обработка его лошадиной антисывороткой против змеиного яда еще раз может быть опасна из-за имеющегося уровня IgG антител, возникших против лошадиных сывороточных белков.
Также известны иммуномодуляторные лекарственные средства миелодиспластических синдромов низкой степени риска у человека, где применяются антилимфоцит/антитимо-лимфоцит глобулины. В этих терапевтических средствах глобулины с антителами, направленными против человеческих иммуногенных клеток, которые продуцируются в кроликах или лошадях, доставляются в организм пациента-человека через определенный период времени. Также в этом случае имеется опасность нежелательного IgG иммунного ответа против белков кролика или лошади, главным образом лошадиных IgG антител, содержащихся в фракциях глобулина. Этот нежелательный IgG иммунный ответ может отрицательно влиять на имеющуюся или повторную терапию.
Известно другое применение фармацевтических препаратов, содержащих или включающих моноклональные антитела, возникшие против эпитопов на раковых клетках.
Другие случаи, когда подавление нежелательного IgG иммунного ответа согласно настоящему изобретению может быть предпочтительно, могут относиться к области переливания крови, когда может иметь место несовместимость между переливаемой кровью и иммунной системой пациента в контексте нежелательного IgG иммунного ответа.
Другие случаи, когда подавление нежелательного IgG иммунного ответа согласно настоящему изобретению может быть предпочтительно, могут относиться к области трансплантации органов, когда может иметь место несовместимость между трансплантируемым органом, которым может быть почка, печень, легкое или сердце, среди прочих примеров, и иммунной системой пациента в контексте нежелательного IgG иммунного ответа, и, таким образом, могут иметь место по меньшей мере частичные реакции отталкивания или отторжения.
Биологически активное вещество, которое способно вызывать нежелательный IgG иммунный ответ организма млекопитающего, таким образом, может содержать фармакологически или биологически активные белки или пептиды, особенно белки или пептиды, которые являются не нативными относительно организма млекопитающего, в который они доставляются.
«Не нативный» может означать, что биологически активные белки или пептиды происходят либо из других видов, предпочтительно из других видов млекопитающих, по сравнению с видами, в которые они доставляются, или из тех же видов, либо имеют полусинтетическое происхождение.
«Не нативный» может означать, что биологически активные белки или пептиды модифицированы таким образом, что это делает их обнаруживаемыми IgG иммунным ответом организма млекопитающего, в который они, как предназначается, доставляются.
Предпочтительный млекопитающий организм, в который биологически активное вещество, которое способно вызывать нежелательный IgG иммунный ответ, может быть доставлено, представляет собой Homo sapiens (человек разумный).
Например, белок, который происходит из определенного организма млекопитающего может стать обнаруживаемым IgG-иммунным ответом этого организма млекопитающего, когда он будет продуцирован рекомбинантным микробиологическим организмом.
Например, гликозилированный белок, происходящий их эукариотического организма-источника, но который был получен в рекомбинантном прокариотическом организме, как правило, не будет показывать гликозилирование. Таким образом, рекомбинантный белок может стать обнаруживаемым IgG-ответом этого исходного млекопитающего организма-источника, когда он доставляется назад в этот организм в форме фармацевтического препарата.
Побочные эффекты в связи с нежелательным IgE иммунным ответом хорошо известны, как, например, аллергия, анафилаксия или даже анафилактический шок.
Биологически активное вещество, которое способно вызывать нежелательный IgG или IgE иммунный ответ организма млекопитающего, может содержать препараты, которые содержат или включают антисыворотку, или поликлональные или моноклональные антитела, или рекомбинантные белки, обеспечивающие другие "растворимые рецепторы" или "связующие растворимых рецепторов", или модифицированные рекомбинантные белки, такие как полиэтиленгликоль, полиэтиленгликол(PEG)ированные, усеченные или генетически модифицированные вещества, а также терапевтические средства с риском иммуногенности в качестве нежелательных, или критических, или летальных побочных эффектов, как, например анафилаксия и анафилактический шок, включая маленькие молекулы, такие как антибиотики, обезболивающие, где такой риск известен, а также любое биологически активное соединение, где иммуногенность потенциально релевантна, включая пептидные лекарственные средства и пептидомиметики, факторы роста или некроза, или смеси, такие как фракции жидкостей тела, как, например, факторы крови из крови человека или клеточные культуры.
Кроме того, иммуномодуляторный эффект фрагмента человеческого лактоферрина мог бы применяться для маскирования антигена, чтобы управлять потенциальным иммунным ответом, включая средства в области аллергии. Например, ассоциация фрагмента человеческого лактоферрина с пыльцой, травяной пыльцой, молочными белками, меллитином, яичными белками и т.д. могла бы регулировать аллергическую реакцию человеческого организма против этих эпитопов и антигенов.
Фармацевтическая композиция
Пептид, полученный из лактоферрина человека, может применяться в качестве агента, маскирующего антиген, при получении фармацевтической композиции для доставки биологически активного вещества в организм млекопитающего.
Фармацевтическая композиция может представлять собой фармацевтическую форму или предпочтительно многочастичную фармацевтическую форму, предпочтительно выбранную из пеллет, гранул, мини-таблеток, таблеток или капсул или других фармацевтических форм. Фармацевтическая композиция может также включать ветеринарные фармацевтические композиции.
Фармацевтическая композиция, содержащая пептид, полученный из лактоферрина человека, и биологически активное вещество, может содержать другие эксципиенты, которые, как известно специалистам в данной области техники, полезны при формировании фармацевтических форм. Типичными эксципиентами являются антиоксиданты, блескообразователи, связывающие агенты, разбавители, наполнители, придающие вкус вещества, вещества, способствующие текучести, ароматизирующие вещества, глиданты, способствующие проникновению агенты, пигменты, пластификаторы, полимеры, формирующие поры агенты, растворители или стабилизаторы.
Фармацевтическая композиция может содержать, может содержать по существу или может содержать до 80, до 50, до 25, до 10 мас.% любых фармацевтических эксципиентов, например других эксципиентов, которые, как известно специалистам в данной области техники, полезны для получения фармацевтических форм.
Надмолекулярный агрегат
Наиболее предпочтительно, пептид, полученный из человеческого лактоферрина, и биологически активное вещество образуют надмолекулярный агрегат, который также может быть назван комплексом или конъюгатом, где пептид, полученный из человеческого лактоферрина, и биологически активное вещество ковалентно не связаны друг с другом. В этом случае надмолекулярный агрегат удерживается, например, с помощью ионных сил или Ван-дер-ваальсовых сил.
Эти надмолекулярные агрегаты очень предпочтительно могут быть получены путем добавления биологически активного соединения в водный раствор или раствор среды процесса или суспензию пептида, полученного из человеческого лактоферрина. Этот раствор должен мягко перемешиваться в течение коротко периода времени, предпочтительно в течение до 2 минут, или инкубироваться в течение до 1 часа, до 2 часов или больше.
Помимо пептида, полученного из человеческого лактоферрина, и биологически активного вещества, надмолекулярный агрегат может дополнительно содержать или включать носитель, например полимерный носитель, такой как дендрический полимер.
Также возможно, но менее предпочтительно, пептид, полученный из человеческого лактоферрина, и биологически активное вещество образуют надмолекулярный агрегат, в котором пептид, полученный из человеческого лактоферрина, и биологически активное вещество ковалентно связаны друг с другом. В этом случае надмолекулярный агрегат может образовываться посредством химической реакции реакционно-способных групп в пептиде, полученном из человеческого лактоферрина, с реакционно-способными группами в биологически активном веществе. Альтернативно дополнительные химически реакционно-способные линкерные молекулы могут применяться для связи молекул.
Предпочтительно надмолекулярные агрегаты могут содержать, могут по существу содержать или могут содержать по меньшей мере 20%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90% или 100 мас.% пептида, полученного из человеческого лактоферрина, и биологически активного вещества. Надмолекулярный агрегат может быть частью фармацевтической композиции, которая может содержать другие эксципиенты.
Предпочтительно фармацевтическая композиция может содержать, может по существу содержать или может содержать по меньшей мере 20, по меньшей мере 50, по меньшей мере 75, по меньшей мере 90% или 100 мас.% надмолекулярного агрегата.
Способ получения фармацевтической композиции
Настоящее изобретение также относится к способу получения фармацевтической композиции, как определено в настоящей заявке, путем смешивания пептида, полученного из человеческого лактоферрина, и биологически активного агента в природных условиях, инкубации смеси с обеспечением (ковалентного или нековалентного) формирования надмолекулярного агрегата и добавления смеси в фармацевтическую композицию.
В самом простом варианте выполнения настоящего изобретения фармацевтическая композиция может быть идентична указанной смеси, что означает, что готовая фармацевтическая композиция содержит по существу только пептид, полученный из человеческого лактоферрина, и биологически активный агент. Однако во многих случаях может быть предпочтительно или надлежаще добавить другие фармацевтические эксципиенты с формированием (готовой) фармацевтической композиции.
Природные условия должны означать условия, при которых поддерживается биологическая активность пептида, полученного из человеческого лактоферрина, и биологическая активность агента. Природным условием может быть, например, смешивание пептида, полученного из человеческого лактоферрина, и биологически активного агента в водном буферном растворе, например фосфатно буферизованном соляном растворе, pH 7.4, или в физиологическом натрий хлоридном растворе.
Инкубация смеси с обеспечением образования надмолекулярных агрегатов должна продолжаться достаточное время для обеспечения агрегации пептида, полученного из человеческого лактоферрина, и биологически активного агента. Как правило, может быть достаточно смешивание и инкубация в течение до 2 минут при комнатной температуре. Однако инкубация в течение до 1 часа, до 2 часов или больше также может быть подходящей. Подходящие температуры для формирования надмолекулярных агрегатов могут лежать в интервале от 0 до 37°C, предпочтительно от 4 до 30°C, комнатная температура от 18 до 28°C может быть подходящей.
Примеры
Пример 1: нековалентное связывание фрагмента человеческого лактоферрина (hLf) с бактериальным лизатом
Материал:
Бактериальный лизат из Escherichia coli, фрагмент человеческого лактоферрина, SEQ. ID. No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR, фосфатно буферизированный соляной раствор, pH 7.4 (Европейская фармакопея): 5.97 г дигидрата гидрофосфата динатрия (соответствует 4.76 г гидрофосфата динатрия), 0.38 г дигидрофосфата калия и 16 г хлорида натрия растворили в 1.8 л дистиллированной воды. Затем полученный чистый раствор помещают в колбу, объемом 2 л, заполняют до калибровочной метки дистиллированной водой и затем гомогенизируют. Затем доводят pH до 7.43 при 23.2°C, применяя 3 мл 2H HCl перед помещением конечного раствора в PE бутылки.
Устройство:
Malvern Zetasizer Nano ZS90; Параметры размера:
Материал: белок RI: 1.45 поглощение: 0.00, диспергирующее вещество: вода 25°C: 0.8872 сП RI: 1.330; 37°C: 0.6864 сП RI: 1.330, Клетка: DTS 1060C: чистый разовый дзета-потенциал клетки
Измерения: 3 автоматических цикла, способ представления: поиск оптимального положения, автоматический выбор внимания, анализ модели: общая цель
Дзета-параметры: диэлектрическая проницаемость: 78.5 при 25°C и 74.4 при 37°C
Модель: Smoluchowski F(KA)value: 1.5, измерения: 3 автоматических цикла
Автоматический выбор внимания
Получение образца
Окисление пептида: пептид растворили при концентрации ниже 1 мМ (2.75 мг/мл) в фосфатно буферизированном соляном растворе (PBS), pH 7.4. (Европейская фармакопея), например, 5 мг в 10 мл (=0.5 мг/мл). Раствор продували чистым кислородом в течение 5 минут при 37°C. Инкубировали в течение 2 часов при 37°C.
Для разбавления бактериального лизата 1 мл бактериального клеточного лизата разбавили до 10 мл с помощью PBS pH 7.4. (Европейская фармакопея).
Присоединение к частицам лизата достигалось путем добавления 1 мл бактериального лизата (=1.2 мг Е. coli) с 0.097714286 мг hLF.
20 мкл 0.5 мг/мл раствора пептида добавили к 1 мл ранее разведенной вакцины (0.12 мг/мл) и инкубировали 2 часа при медленном перемешивании, 100-150 оборотов в минуту, при 4°C, предотвращая любое пенообразование.
| Таблица 1 | |||
| Проанализированные образцы и их состав | |||
| ОБРАЗЕЦ | РАЗРУШЕНИЕ | СУСПЕНЗИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ЛИЗАТА | РАСТВОР ОКИСЛЕННОГО ФРАГМЕНТА HLF |
| Бактериальный лизат 1:10 | нет | 5 мл 0.12 мг/мл | - |
| Бактериальный лизат 4:10 | 1 мин, ультразвуковой зонд | 5 мл 0.12 мг/мл | - |
| Бактериальный лизат 1:10+1 мин ультразвуковой зонд | нет | 5 мл 0.48 мг/мл | - |
| Бактериальный лизат 4:10+1 мин ультразвуковой зонд | 1 мин, ультразвуковой зонд | 5 мл 0.48 мг/мл | - |
| hLF | нет | - | 1.5 мл 0.5 мг/мл |
| hLF+2 мин ультразвуковая ванна | 2 мин, ультразвуковая ванна | - | 1.5 мл 0.5 мг/мл |
| Бактериальный | Предварительное | 5 мл 0.12 мг/мл | 200 мкл 0.5 мг/мл |
| лизат 1:10+hLF | разрушение ультразвуком, как показано выше | ||
| Бактериальный лизат 1:10+hLF 2 мин ультразвуковая ванна | Предварительное разрушение ультразвуком, как показано выше, +2 мин ультразвуковая ванна после hLF присоединения | 5 мл 0.12 мг/мл | 200 мкл 0.5 мг/мл |
| Бактериальный лизат 4:10+hLF | Предварительное разрушение ультразвуком, как показано выше | 5 мл 0.48 мг/мл | 200 мкл 0.5 мг/мл |
| Бактериальный лизат 4:10+hLF 2 мин ультразвуковая ванна | Предварительное разрушение ультразвуком, как показано выше, +2 мин ультразвуковая ванна после hLF присоединения | 5 мл 0.48 мг/мл | 200 мкл 0.5 мг/мл |
Заключения
Дзета-потенциал (Фиг.1)
Было показано, что лизат Е. coli представляет собой суспензию, содержащую отрицательно заряженные поверхностные частицы. hLF пептидный фрагмент, даже если наблюдается образование агрегатов, показывает общий положительный заряд, и добавление второго к первому приводит к изменению поверхностных свойств лизата.
Размер частиц (Фиг.2)
На чертежах "размер частиц" показывает средние значения
Заключения относительно данных по размеру частиц:
- Склонность к агрегации возникает во всех случаях: вакцина сама по себе, hLF фрагмент сам по себе и их комбинация.
- Эти явления агрегации приводят к большим размерам частиц
- Агрегация и осаждение могут происходить обратимые посредством разрушения ультразвуком и/или подходящего перемешивания.
Пример 2: Иммуномодуляция иммунной системы крысы путем обработки антигеном, фрагментом человеческого лактоферрина и комбинацией антигена и фрагмента человеческого лактоферрина
Материал
Бактериальный лизат: Klebsiella pneumoniae CECT 141; 12.000 миллионов бактерий/мл (десятикратная конечная концентрация), стандартная не обработанная глицерином композиция, без фенола
hLF фрагмент, SEQ. ID. No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR
окисленная форма, в виде продукта лиофилизата; дозирована в пробирках по 50 мг каждая, в 25 мл пробирках, подлежит восстановлению. Сразу после восстановления хранится охлажденной (4°C).
Фосфатно буферизированный соляной раствор (PBS) стерилизуется любой подходящей методикой и хранится в подходящем контейнере, если не применяется сразу после получения. Хранится при 4°C в течение всего периода времени.
Методики
Восстановление hLF стокового раствора осуществляли путем восстановления 50 мг фрагмента hLF в пробирке путем добавления 20 мл PBS. Это обеспечивало полное надлежащее восстановление до гомогенного свободного от частиц раствора. Пробирку мягко перемешивали посредством повторяемых поворотов закрытой пробирки. В результате получили hLF-стоковый раствор для исследования: номинальная концентрация 2.5 мг/мл.
hLF разбавления для испытания на животных осуществляли ежедневно. Для этого 1 мл восстановленного hLF стокового раствора переносили в новую 25 мл пробирку, с последующим добавлением 21.5 мл PBS и аккуратно перемешивали посредством повторяемых поворотов закрытой пробирки, чтобы избежать пенообразования. Результатом было ежедневное разбавление стока, номинальная концентрация 0,1 мг/мл.
"A+B" композиция
4.5 мл ежедневного hLf разбавления перенесли в подходящую пробирку (емкостью 5 мл или больше), с последующим добавлением 0.5 мл 12,000 миллионов бактерий/мл бактериального лизата, и аккуратно перемешивали посредством повторяемых поворотов закрытой пробирки, чтобы избежать пенообразования, Результатом было 5 мл A+B вакцины, 1200 миллионов бактерий/мл, 0.1 мг hLf фрагмента/мл, при соотношении 12:1.
"B" композиция
4.5 мл ежедневного hLf разбавления перенесли в подходящую пробирку PBS и аккуратно перемешивали посредством повторяемых поворотов закрытой пробирки, чтобы избежать пенообразования. Результатом было 5 мл 0.1 мг/мл раствора фрагмента hLf.
"A" композиция
0.5 мл бактериального лизата (12,000 миллионов бактерий/мл) перенесли в подходящую пробирку (емкостью 5 мл или больше), с последующим добавлением 4.5 мл PBS, и аккуратно перемешивали посредством повторяемых поворотов закрытой пробирки, чтобы избежать пенообразования. Результатом было 5 мл бактериального лизата, 1200 миллионов бактерий/мл ("A" бактериальный лизат).
Дозы и режимы введения:
"A+B" введение
Введение 0.5 мл "A+B" каждой из трех крыс из группы A+B (интраперитонеально).
Введение 0.5 мл "A+B" каждой из трех крыс из группы α+β (внутрижелудочно).
"B" введение
Введение 0.5 мл B крысам из группы B (интраперитонеально).
Введение 0.5 мл B трем крысам из группы β (внутрижелудочно).
"A" введение
Введение 0.5 мл вакцины A трем крысам из группы A
Введение 0.5 мл вакцины A трем крысам из группы α
Обработка животных
Пероральные лизаты Klebsiella pneumoniae CECT 141 применялись в качестве модели для инокулята, который индуцирует IgG иммунный ответ у крыс в качестве моделей организмов при внутрижелудочном или интраперитонеальном введении. Пептид, полученный из человеческого лактоферрина с аминокислотной последовательностью SEQ. ID. No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR, применялся для получения конъюгатов с лизатами Klebsiella pneumoniae CECT 141 следующим образом.
Исследовались 6 групп по три крысы:
a. Группа A: интраперитонеально вводили бактериальный лизат (композиция "A")
b. Группа B: интраперитонеально вводили фрагмент hLf (композиция "B")
c. Группа C: интраперитонеально вводили конъюгат (композиция "A+B")
d. Группа α: внутрижелудочно вводили композицию "A"
е. Группа β: внутрижелудочно вводили композицию "B"
f. Группа δ: внутрижелудочно вводили композицию "A+B"
Продолжительность испытания: 4 недели (28 дней)
Модель применения продукта
| Таблица 2 | ||||
| Обработка групп крыс и количество | ||||
| День | A | B | A+B | Контроль |
| 0 | 0.5 мл | 0.5 мл | 0.5 мл | нет дозы |
| 7 | 0.5 мл | 0.5 мл | 0.5 мл | нет дозы |
| 14 | 0.5 мл | 0.5 мл | 0.5 мл | нет дозы |
| 21 | 0.5 мл | 0.5 мл | 0.5 мл | нет дозы |
Параметр и график отбора проб
Измеряемые параметры показывают общий IgG. Способ осуществили посредством ELISA. График отбора проб для всех групп был следующим (Таблица 3):
| Таблица 3 | |
| Образцы крови берутся по следующей схеме | |
| День | Замечание |
| 0 | Перед введением дозы |
| 6 | |
| 13 | |
| 20 | |
| 27 | умерщвление |
Заключения
Изменение уровней IgG со временем
Контрольная группа (Фиг.3)
У животных контрольной группы уровни IgG оставались постоянными с течением времени без статистически значимых различий, наблюдающихся между различными моментами исследования.
Группа с человеческим лактоферрином (hLf, „B”-композиция) (Фиг.4):
Обработка человеческим лактоферрином, как оказалось, не оказывает какой-либо эффект на уровни IgG со временем, без статистически значимых различий, наблюдающихся между уровнями IgG крыс, подвергающихся обработке hLf в любые моменты исследования, независимо от способа введения.
Группа, обрабатываемая бактериальным экстрактом („A”-композиция) (Фиг.5):
У животных, подвергающихся интраперитонеальной обработке бактериальным экстрактом, наблюдалось, что уровни IgG имеют тенденцию к значительному повышению со временем. Дополнительно, необходимо отметить, что уровни IgG повышаются с числом доз бактериального экстракта, что означает, что эффект этого лечения является кумулятивным, объясняя повышение уровней IgG со временем. Такое же поведение наблюдалось у животных, обрабатываемых внутрижелудочно бактериальным экстрактом. Эти результаты очень важны, так как они показывают, что действие бактериального экстракта на уровни IgG не зависит от способа введения.
Группа, обрабатываемая бактериальным экстрактом + hLf (Фиг.6)
Для животных, подвергающихся обработке бактериальным экстрактом + hLf, необходимо отметить два основных факта. Прежде всего, мы можем наблюдать, что IgG незначительно отличается от уровней, обнаруживаемых в контрольной группе, независимо от применяемого способа введения. С другой стороны, уровни IgG, обнаруживаемые в каждый момент исследования, не достигают уровней, ожидаемых на основе эффекта бактериального экстракта, либо при интраперитонеальном, либо при внутрижелудочном введении.
Сравнительный анализ уровней IgG среди различных групп
Интраперитонеальное введение
Контроль по сравнению с группой бактериального экстракта:
При сравнении уровней IgG контрольной группы с уровнями, обнаруженными в группе, которая подвергается обработке бактериальным экстрактом, видно статистически значимое повышение в последней группе, начиная с 6-го дня после первого введения бактериального лизата (p<0.001). Эти различия поддерживаются в течение всего времени до завершения изучения на 27-й день.
Контрольная группа относительно группы hLf:
При интраперитонеальном введении не увидели статистически значимой разности (p>0.05) между уровнями IgG крыс, которые подвергаются обработке hLF, и уровнями, обнаруживаемыми в контрольной группе, в любой момент изучения.
Контрольная группа относительно группы hLf + бактериальный экстракт:
Не увидели статистически значимой разности (p>0.05) между уровнями IgG крыс, которые подвергаются конъюгированной обработке hLF + бактериальный лизат, и уровнями, обнаруживаемыми в контрольной группе, в любой момент изучения.
Группа бактериального лизата относительно группы hLf:
Уровни IgG, обнаруживаемые в крысах, которые подвергаются обработке бактериальным экстрактом самим по себе, значительно выше (p<0.001), чем уровни IgG, обнаруживаемые у животных, которые подвергаются обработке hLF самим по себе, с первых дней (6-й день) до завершения исследования на 27-й день после первого введения.
Группа бактериально экстракта относительно группы hLf + бактериальный экстракт:
Уровни IgG, обнаруживаемые в крысах, которые подвергаются обработке бактериальным экстрактом самим по себе, значительно выше (p<0.001), чем уровни IgG, обнаруживаемые у животных, которые подвергаются комбинированной обработке hLF и бактериальным экстрактом в течение всего исследования после первого введения.
Группа hLf относительно группы hLf + бактериальный экстракт:
Никаких статистически значимых различий не было обнаружено (p>0.005) между уровнями IgG крыс, которые подвергаются обработке hLf, и уровнями, обнаруживаемыми у животных, которые подвергаются комбинированной обработке hLf + бактериальный экстракт. Это позволяет предположить, что должен быть защитный эффект hLf, который маскирует эффект обработки бактериальным экстрактом.
Внутрижелудочное введение
Когда различные обработки осуществляются внутрижелудочно, результаты подобны описанным при интраперитонеальном введении, однако обнаружили несколько небольших различий между обоими способами введения. В этом случае, различия в отношении уровней IgG, обнаруживаемых у животных, обрабатываемых бактериальным экстрактом, и другими группами (контроль, hLf, hLf + экстракт) являются статистически значимыми (p<0.001), начиная с 13-го дня после начала введения вместо 6-го дня, по сравнению с применением интраперитонеального способа введения, то есть, как оказывается, иммунный ответ является слегка замедленным при внутрижелудочном введении. С другой стороны, видны значительные различия на 6-й день изучения между группой животных, подвергающихся обработке hLf, и группой животных, подвергающихся обработке hLf + экстракт, при более высоких уровнях IgG в hLf группе.
Пример 2
3 различных класса гликозилированных белков, полученных естественным образом из клеточной культуры и крови, смешивали вместе в нативном, то есть физиологически подобном стандартном электролитном буфере с концентрацией, показанной в таблице с таким же 22-мером пептидов человеческого лактоферрина, описанных выше (применяя последовательность SEQ. ID. No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR).
Промежуточное измерение изменения диффузионной кинетики со стандартным конфокальным микроскопом с временной корреляцией с применением флуоресцентных меток показало даже при более низкой концентрации (hLf 94 нМ в HBS, 0,1% BSA, 130 нМ IgG1) легко формирование для всех трех классов соединений путем неспецифического умеренного связывания фрагмента с примерами fragment терапевтических классов белков, включая класс соединения примера 1.
Колонка f1 показывает без оптимизации эксперимента изменение очевидной диффузионной кинетики, аккумулированной в каналах hLf-фрагмента. Белок I представляет собой альбумин, фракцию белков крови, известный в его рекомбинантной человеческой версии или в виде продукта крови, белок II представляет собой селективное IgG антитело. Оба из коммерческих источников. hLf в качестве ссылки двигается как "свободный" в объемном элементе фокуса микроскопа, тогда как около 4% или 15% фрагмента, соответственно, неспецифически связываются и двигаются медленнее. Показано, что надмолекулярный агрегат hLf-фрагмента материализуется в образце композиции.
| Таблица 4 | ||||||||||
| TauT1 (us) | A1=T/(1-T) | TauT 2 (us) | A2=T/(1-T) | TauD1 (us) | f1 (%) | TauD2 (us) | N (#) | s=z0/w0 | CPS | |
| hlf-BSA | 2,91491 | 0,185 | 1 | 0 | 35 | 85 | 244 | 1,4704 | 4,96004 | 7442 |
| hlf-IgG | 2,91491 | 0,185 | 1 | 0 | 33 | 96 | 382 | 0,6862 | 4,96004 | 3072 |
| hlf-pep | 2,91491 | 0,185 | 1 | 0 | 33 | 99 | 1419 | 0,5912 | 4,96004 | 2963 |
Краткое описание чертежей
Фиг.1: диаметр частиц, измеренный с помощью анализатора размера частиц, молекулярной массы и дзета-потенциала zetasizer;
Фиг.2: дзета-потенциал частиц, измеренный с помощью анализатора размера частиц, молекулярной массы и дзета-потенциала zetasizer;
Фиг.3: IGG - уровень в контрольной группе
Фиг.4: IgG - уровень в группе, обработанной с помощью "B"-композиции (hLf)
Фиг.5: IgG - уровень в группе, обработанной с помощью "A"-композиции (бактериальные лизаты)
Фиг.6: IgG - уровень в группе, обработанной с помощью "A+B"-композиции (бактериальные лизаты + hLf)
Claims (8)
1. Применение пептида, полученного из человеческого лактоферрина, в качестве агента, маскирующего антиген, при получении фармацевтической композиции для доставки биологически активного вещества в организм млекопитающего, где биологически активное вещество способно индуцировать нежелательный иммунный ответ в организме млекопитающего, выбранный из группы IgG иммунного ответа и IgE иммунного ответа, где фармацевтическая композиция содержит надмолекулярный агрегат биологически активного вещества и пептида, полученного из человеческого лактоферрина, с тем эффектом, что после доставки фармацевтической композиции в организм млекопитающего в нем не происходит или происходит только пониженная индукция нежелательного иммунного ответа против биологически активного вещества,
причем пептид, полученный из человеческого лактоферрина, имеет аминокислотную последовательность согласно SEQ.ID.No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR, и
причем биологически активное вещество выбрано из группы биологически активных белков или биологически активных пептидов, антисыворотки или поликлональных или моноклональных антител.
причем пептид, полученный из человеческого лактоферрина, имеет аминокислотную последовательность согласно SEQ.ID.No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR, и
причем биологически активное вещество выбрано из группы биологически активных белков или биологически активных пептидов, антисыворотки или поликлональных или моноклональных антител.
2. Применение по п. 1, где нежелательный иммунный ответ представляет собой IgG иммунный ответ.
3. Применение по п. 1, где нежелательный иммунный ответ представляет собой IgE иммунный ответ.
4. Применение по п. 1, где биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный иммунный ответ, содержится в образце крови, переливаемой в организм млекопитающего.
5. Применение по п. 1, где биологически активное вещество, которое способно индуцировать нежелательный иммунный ответ, содержится в или на поверхности органа, который трансплантируется в организм млекопитающего.
6. Применение по одному из пп. 1-5, где биологически активное вещество и пептид, полученный из человеческого лактоферрина, ковалентно не связаны друг с другом в надмолекулярном агрегате.
7. Применение по одному из пп. 1-5, где биологически активное вещество и пептид, полученный из человеческого лактоферрина, ковалентно связаны друг с другом в надмолекулярном агрегате.
8. Способ получения фармацевтической композиции путем смешивания пептида, полученного из человеческого лактоферрина, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ.ID.No. 1 KCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKR, и биологически активного вещества в природных условиях, инкубации смеси с обеспечением формирования надмолекулярного агрегата и добавления смеси в готовую фармацевтическую композицию.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/EP2010/068302 WO2012069089A1 (en) | 2010-11-26 | 2010-11-26 | Human lactoferrin derived peptide for use as an antigen masking agent |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013128884A RU2013128884A (ru) | 2015-01-10 |
| RU2573422C2 true RU2573422C2 (ru) | 2016-01-20 |
Family
ID=43837881
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013128884/10A RU2573422C2 (ru) | 2010-11-26 | 2010-11-26 | Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, для применения в качестве агента, маскирующего антиген |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9724422B2 (ru) |
| EP (1) | EP2643344B1 (ru) |
| JP (1) | JP6073239B2 (ru) |
| KR (1) | KR101765364B1 (ru) |
| CN (1) | CN103906760B (ru) |
| AU (1) | AU2010364538B2 (ru) |
| BR (1) | BR112013012811B8 (ru) |
| CA (1) | CA2818951C (ru) |
| ES (1) | ES2627960T3 (ru) |
| HK (1) | HK1196379A1 (ru) |
| HU (1) | HUE033501T2 (ru) |
| IL (1) | IL226198B (ru) |
| MX (1) | MX348337B (ru) |
| PL (1) | PL2643344T3 (ru) |
| RU (1) | RU2573422C2 (ru) |
| SI (1) | SI2643344T1 (ru) |
| WO (1) | WO2012069089A1 (ru) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2767501T3 (es) | 2014-05-28 | 2020-06-17 | Evonik Operations Gmbh | Nanopartícula |
| US11225520B2 (en) | 2016-02-16 | 2022-01-18 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Immunotherapy compositions and methods |
| DE102016008601B4 (de) | 2016-07-14 | 2019-05-23 | Giesecke+Devrient Currency Technology Gmbh | Sicherheitselement mit reversibel veränderbarem Farbbereich |
| WO2018160791A1 (en) | 2017-03-03 | 2018-09-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Antimicrobial constructs and uses thereof |
| CN107226860B (zh) * | 2017-07-06 | 2020-04-10 | 浙江辉肽生命健康科技有限公司 | 一种生物活性多肽skhssldcvl及其制备方法和应用 |
| IL278469B2 (en) | 2018-05-08 | 2024-02-01 | Evonik Operations Gmbh | A nanoparticle containing a bioresorbable polyester, a hydrophilic polymer, and an acylated human lactoferrin-derived peptide |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2165769C1 (ru) * | 2000-07-13 | 2001-04-27 | Якубовская Раиса Ивановна | Антибактериальный, антиоксидантный, иммуномодулирующий и антиканцерогенный препарат и способ его применения |
| US20040137536A1 (en) * | 2002-10-25 | 2004-07-15 | Boone James Hunter | Inflammatory bowel disease and irritable bowel syndrome IBD-first chek diagnostic panel |
| WO2007048599A2 (de) * | 2005-10-25 | 2007-05-03 | Evonik Degussa Gmbh | Drug delivery systeme |
| US20070259007A1 (en) * | 1999-10-19 | 2007-11-08 | Kruzel Marian L | Lactoferrin: an adjuvant for vaccines |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6066469A (en) * | 1990-03-08 | 2000-05-23 | Ferro Dynamics, Inc. | Cloning, expression, and uses of human lactoferrin |
| US5977337A (en) | 1997-06-03 | 1999-11-02 | Connaught Laboratories Limited | Lactoferrin receptor genes of Moraxella |
| US6423509B1 (en) | 1998-07-15 | 2002-07-23 | Samyang Genex Corporation | Pichia pastoris strain for producing lactoferrin and methods of use |
| JP2000045182A (ja) * | 1998-07-23 | 2000-02-15 | Peptide Science:Kk | 抗菌性繊維および繊維・皮革用抗菌加工剤 |
| US7592306B2 (en) | 2002-12-10 | 2009-09-22 | Agennix, Inc. | Lactoferrin as an agent in the prevention of organ transplant rejection and graft-versus-host-disease |
| JP5264502B2 (ja) | 2005-12-30 | 2013-08-14 | エボニック レーム ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 細胞透過性ペプチドとして使用できるペプチド |
-
2010
- 2010-11-26 PL PL10784307T patent/PL2643344T3/pl unknown
- 2010-11-26 US US13/988,829 patent/US9724422B2/en active Active
- 2010-11-26 SI SI201031471A patent/SI2643344T1/sl unknown
- 2010-11-26 KR KR1020137016498A patent/KR101765364B1/ko active IP Right Grant
- 2010-11-26 MX MX2013005820A patent/MX348337B/es active IP Right Grant
- 2010-11-26 ES ES10784307.0T patent/ES2627960T3/es active Active
- 2010-11-26 HU HUE10784307A patent/HUE033501T2/en unknown
- 2010-11-26 RU RU2013128884/10A patent/RU2573422C2/ru active
- 2010-11-26 WO PCT/EP2010/068302 patent/WO2012069089A1/en active Application Filing
- 2010-11-26 JP JP2013540244A patent/JP6073239B2/ja active Active
- 2010-11-26 EP EP10784307.0A patent/EP2643344B1/en active Active
- 2010-11-26 BR BR112013012811A patent/BR112013012811B8/pt active IP Right Grant
- 2010-11-26 CA CA2818951A patent/CA2818951C/en active Active
- 2010-11-26 CN CN201080070362.8A patent/CN103906760B/zh active Active
- 2010-11-26 AU AU2010364538A patent/AU2010364538B2/en active Active
-
2013
- 2013-05-07 IL IL226198A patent/IL226198B/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-09-26 HK HK14109719.5A patent/HK1196379A1/zh unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070259007A1 (en) * | 1999-10-19 | 2007-11-08 | Kruzel Marian L | Lactoferrin: an adjuvant for vaccines |
| RU2165769C1 (ru) * | 2000-07-13 | 2001-04-27 | Якубовская Раиса Ивановна | Антибактериальный, антиоксидантный, иммуномодулирующий и антиканцерогенный препарат и способ его применения |
| US20040137536A1 (en) * | 2002-10-25 | 2004-07-15 | Boone James Hunter | Inflammatory bowel disease and irritable bowel syndrome IBD-first chek diagnostic panel |
| WO2007048599A2 (de) * | 2005-10-25 | 2007-05-03 | Evonik Degussa Gmbh | Drug delivery systeme |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2818951A1 (en) | 2012-05-31 |
| EP2643344B1 (en) | 2017-03-22 |
| KR101765364B1 (ko) | 2017-08-08 |
| KR20130119955A (ko) | 2013-11-01 |
| IL226198B (en) | 2019-01-31 |
| BR112013012811B8 (pt) | 2022-07-05 |
| ES2627960T3 (es) | 2017-08-01 |
| JP6073239B2 (ja) | 2017-02-01 |
| AU2010364538A1 (en) | 2013-07-11 |
| CA2818951C (en) | 2018-03-13 |
| AU2010364538B2 (en) | 2016-04-14 |
| CN103906760B (zh) | 2017-02-22 |
| BR112013012811A2 (pt) | 2016-09-13 |
| BR112013012811B1 (pt) | 2021-07-06 |
| HK1196379A1 (zh) | 2014-12-12 |
| RU2013128884A (ru) | 2015-01-10 |
| JP2014501723A (ja) | 2014-01-23 |
| MX348337B (es) | 2017-06-07 |
| WO2012069089A1 (en) | 2012-05-31 |
| EP2643344A1 (en) | 2013-10-02 |
| US20130302342A1 (en) | 2013-11-14 |
| US9724422B2 (en) | 2017-08-08 |
| CN103906760A (zh) | 2014-07-02 |
| HUE033501T2 (en) | 2017-12-28 |
| MX2013005820A (es) | 2013-07-12 |
| SI2643344T1 (sl) | 2017-07-31 |
| IL226198A0 (en) | 2013-07-31 |
| PL2643344T3 (pl) | 2017-09-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI845803B (zh) | 抗ｃｃｒ８抗體及其用途 | |
| RU2573422C2 (ru) | Пептид, полученный из человеческого лактоферрина, для применения в качестве агента, маскирующего антиген | |
| JP6002128B2 (ja) | プロテインＡ（ＳｐＡ）変種に関連する組成物および方法 | |
| JP5793194B2 (ja) | 感染防御ブドウ球菌抗原が関与する方法および組成物 | |
| JP2002523474A (ja) | ドナーの選択およびドナーの刺激によるブドウ球菌の免疫療法 | |
| EA007218B1 (ru) | Предотвращение и лечение амилоидогенного заболевания | |
| KR20080082893A (ko) | 면역 질환의 예방 또는 치료제 및 방법 | |
| Scaramuzzi et al. | Nanostructured SBA-15 silica: An effective protective vehicle to oral hepatitis B vaccine immunization | |
| JPH11509558A (ja) | 免疫反応を惹起するための、多数エピトープ含有抗原の再構成法および組成物 | |
| JP2002513398A (ja) | フィブロネクチン結合タンパク質組成物および使用法 | |
| WO2022083694A1 (zh) | 叶酸和叶酸修饰在诱导B细胞免疫耐受和靶向mIgM阳性表达的B细胞淋巴瘤中的用途 | |
| IL148598A (en) | Multifunctional complex for targeting specific phagocytosis of a target agent and a composition comprising it | |
| Castro | Immunology for surgeons | |
| NL2031833B1 (en) | Immunotherapeutic compositions and adjuvants | |
| WO2021207303A1 (en) | Immune stimulation against coronavirus infections | |
| US9944684B2 (en) | CETP antigenic peptide and fusion protein and their composition and applications | |
| US20190345229A1 (en) | Methods for affecting salmonella infections | |
| KR20230107810A (ko) | Pd-l1의 세포 외 도메인을 포함하는 키메라 항원 | |
| WO2004050119A1 (en) | Vaccine against enteropathogenic and enterohaemorragic escherichia coli | |
| JP2013510188A (ja) | 黄色ブドウ球菌に由来する菌血症関連抗原 | |
| EP3415160A1 (en) | Polypeptides derived from enterococcus and their use for vaccination and the generation of therapeutic antibodies | |
| JP2008105953A (ja) | Ｂ細胞傷害抑制剤 | |
| MXPA00009626A (en) | Immune response modulator alpha-2 macroglobulin complex |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20201118 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |