RU2514673C2 - Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом - Google Patents

Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом Download PDF

Info

Publication number
RU2514673C2
RU2514673C2 RU2011140482/13A RU2011140482A RU2514673C2 RU 2514673 C2 RU2514673 C2 RU 2514673C2 RU 2011140482/13 A RU2011140482/13 A RU 2011140482/13A RU 2011140482 A RU2011140482 A RU 2011140482A RU 2514673 C2 RU2514673 C2 RU 2514673C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
ginkgo
pesticides
water
solution
extracts
Prior art date
Application number
RU2011140482/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2011140482A (ru
Inventor
Андреа ДЖИОРИ
Джакомо МОМБЕЛЛИ
Сабрина АРПИНИ
Марио АЧЕРБИ
Original Assignee
Индена С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41786232&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2514673(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Индена С.П.А. filed Critical Индена С.П.А.
Publication of RU2011140482A publication Critical patent/RU2011140482A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2514673C2 publication Critical patent/RU2514673C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/16—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae (Ginkgo family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A23L5/23—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by extraction with solvents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/04—Solvent extraction of solutions which are liquid
    • B01D11/0492—Applications, solvents used
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D9/00—Crystallisation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/35—Extraction with lipophilic solvents, e.g. Hexane or petrol ether
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу удаления пестицидов из экстрактов Ginkgo biloba. Способ включает подвергание экстракта, полученного экстрагированием листьев Ginkgo biloba гексаном, следующим стадиям: а) жидкостно-жидкостной экстракции c получением фракции средней полярности, содержащей терпены гинкго и пестициды, не удаляемые гексаном, и фракцию высокой полярности, содержащую флавоновые гликозиды гинкго; b) кристаллизации из фракции средней полярности, полученной на стадии а), с образованием промежуточного продукта с содержанием гинкголида не менее 50% кристаллизованного продукта; с) кристаллизации из остаточного раствора, полученного на стадии b), с образованием промежуточного продукта с содержанием билобалида не менее 50% кристаллизованного продукта; d) смешивания фракции высокой полярности, полученной на стадии а), с промежуточным продуктом терпенов гинкго и промежуточным продуктом билобалида, полученными на стадиях b) и с). Изобретение позволяет получить продукт с заданным соотношением терпенов, в котором существенным образом снижено остаточное содержание пестицидов либо полностью удалены пестициды. 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 пр.

Description

Данное изобретение относится к способу удаления пестицидов из экстрактов Ginkgo biloba и экстрактам, получаемым упомянутым способом.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Лиственные экстракты Ginkgo biloba давно используют в китайской традиционной медицине и во многих западных странах благодаря различным фармакологическим свойствам компонентов упомянутых экстрактов (сосудорасширяющие, иммуностимулирующие, антиоксидантные и антиагрегационные свойства).
Способы приготовления лиственных экстрактов Ginkgo biloba раскрыты в US 5700468, EP 360556, EP 431535 и JP 09110713.
Пестициды, такие как органические фосфаты, токсичность которых хорошо документирована, использовали или используют при выращивании растений, из которых получают упомянутые экстракты. Хотя многие законодательства по здравоохранению и сельскому хозяйству запретили или ограничили применение таких пестицидов, не всегда легко установить источник растительного материала, и даже в странах, где применение пестицидов контролируется, невозможно исключить запрещенное или незаконное применение веществ с пестицидным действием, присутствие которых в фармацевтическом или пищевом стандартном экстракте совершенно нежелательно. Особенно коварная проблема состоит в возможном перекрестном загрязнении пестицидами близко расположенных сельскохозяйственных культур.
Проблема загрязнения в целом обсуждена в публикации Journal of AOAC International, Vol. 88(3), 2005, 729-735, которая также описывает метод для определения содержания фосфаторганических пестицидов в листьях Ginkgo газовой хроматографией.
В патенте США 5660832 описан способ очистки растительных экстрактов пестицидов, включающий экстракцию полярным растворителем при определенном рН с последующей абсорбцией и деабсорбцией на полимерах. В случае листьев Ginkgo biloba, экстракция проведена смесью этанола и воды.
Пестициды представляют собой не только нежелательные загрязнители в экстрактах Ginkgo biloba: например, ЕР 1968625 описывает многостадийный способ приготовления экстракта Ginkgo biloba c низким содержанием 4'-O-метилпиридоксина, также известного как токсин гинкго, и/или бифлавонов. В данном случае, однако, нежелательные компоненты естественным образом присутствуют в растении.
Наконец, ЕР 1868626 раскрывает способ приготовления экстрактов Ginkgo biloba, имеющих низкое содержание полициклических ароматических углеводородов, полученных от применения ископаемых топлив вблизи культур гинкго. Описанный способ является очень сложным, включает одиннадцать стадий, периоды длительного приготовления и применение дорогих реагентов, таких как полиамиды, или токсичных реагентов, таких как соли свинца.
Практически все известные методы включают одну или несколько стадий удаления липофильных компонентов экстракта гинкго (в особенности, бифлавонов и гинкголов). Упомянутая экстракция также уменьшает присутствие содержания любого липофильного пестицида, хотя пестициды с более высокой полярностью остаются в экстракте, так как их поведение более похоже на поведение гидрофильных компонентов (таких как флавоновые гликозиды и терпены).
Следовательно, имеется потребность в подходящем способе очистки, который снижает или удаляет пестициды или другие загрязнители из лиственных экстрактов Ginkgo biloba, чтобы удовлетворять пределам, установленным законодательством, особенно в США, контролирующим остаточное содержание любого типа пестицида в продуктах растительного происхождения для фармацевтического, пищевого или косметического применения.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Теперь установлено, что пестицидное содержание экстрактов Ginkgo biloba может быть снижено способом, включающим:
а) жидкостно-жидкостную экстракцию с получением фракции средней полярности, содержащей терпены гинкго и пестициды, не удаляемые гексаном, и фракцию высокой полярности, содержащую флавоновые гликозиды гинкго;
b) кристаллизацию из фракции средней полярности, полученной на стадии а), с образованием промежуточного продукта с содержанием гинкголида не менее 50%;
с) кристаллизацию из остаточного раствора, полученного на стадии b), с образованием промежуточного продукта с содержанием билобалида не менее 50%;
d) смешивание фракции высокой полярности, полученной на стадии а), с промежуточным продуктом терпенов гинкго и промежуточным продуктом билобалида, полученными на стадиях b) и с).
Способ по изобретению, кроме удаления или существенным образом снижения остаточного содержания пестицида, также допускает содержание терпенов гинкго и их относительное соотношение будет контролироваться.
Изобретение поэтому также относится к экстрактам, получаемым от способа, описанного выше, с заданным соотношением терпенов гинкго.
Согласно изобретению стадия а) дает одну фракцию, обогащенную терпенами гинкго, и фракцию, обогащенную флавоновыми гликозидами гинкго, экстракцией растворителем, не смешивающимся с водой, выбираемым из сложных эфиров, хлорированных углеводородов, смесей углеводородов и спиртов, кетонов и смесей кетонов и спиртов, предпочтительно С2-С8 сложных эфиров, таких как этилацетат и трет-бутилацетат или смесь толуол-бутанол.
Терпены гинкго кристаллизованы в смесях воды и С1-С5 спиртов, тогда как кристаллизация из обогащенной терпенами фракции, полученной на стадии с), проведена в воде или в смеси воды и С1-С3 спиртов. Способ согласно изобретению удаляет пестициды средней полярности, которые не удалены с гинкголами.
Изобретение проиллюстрировано подробнее в примерах ниже.
Пример 1: Очистка экстракта, полученного по примеру I патента США 5700468 и EP 0 360 556 (Indena)
1) 100 кг измельченных листьев экстрагируют 4 раза с помощью 400 л 60% (мас./мас.) ацетона при температуре приблизительно 50°С.
2) Объединенные фильтраты экстрагируют в противотоке с помощью 500 л гексана.
3) Обезжиренный раствор концентрируют в вакууме до объема 200 л, оставляют в продолжение ночи при 2°С и затем центрифугируют, чтобы отделить фракцию бифлавона.
4) Водный раствор экстрагируют в противотоке с помощью 400 л 8/2 об./об. смеси н-бутанол/толуол.
5) Органический раствор концентрируют в вакууме до маленького объема, с дополнением водой. Концентрат поглощают водой для получения раствора с приблизительно 30% сухого остатка.
6) Раствор экстрагируют в противотоке с помощью приблизительно 65 л этилацетата. Водную фазу концентрируют до сиропо-подобной консистенции и сушат в вакууме, чтобы получить промежуточный продукт, обогащенный флавоновыми гликозидами гинкго и лишенный терпенов (1,95 кг).
7) Этилацетатную фазу концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и остаток поглощают с помощью 3 л 75% водного этанола.
8) Раствор экстрагируют в противотоке с помощью 20 л гексана, удаляя объединенные органические фазы.
9) Водно-спиртовый раствор концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и добавляют 0,9 л 50% водного этанола.
Полученный раствор нагревают при кипении с обратным холодильником при перемешивании, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 4 суток.
10) Раствор затем фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 50% EtOH и сушат в вакууме с получением 95 г очищенных гинкголидов.
11) Маточник концентрируют в вакууме для удаления этанола, и остаток затем поглощают с помощью 1,9 л воды и нагревают до 90°С при перемешивании в течение 30 минут. Водный раствор отделяют, и остаток поглощают еще 3 раза с помощью 1,9 л воды при 90°С, причем водный раствор каждый раз регенерируется.
12) Водные растворы объединяют и экстрагируют в противотоке с помощью 14 л гексана.
13) Водный раствор концентрируют до объема 0,3 л, затем добавляют 0,1 л 95° EtOH, и раствор нагревают до 50°С при перемешивании, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 3 суток.
14) Раствор фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 20% EtOH и сушат в вакууме с получением 103 г очищенного билобалида.
15) Продукты, полученные в пунктах 6, 10 и 14, смешивают с получением 2,15 кг экстракта Ginkgo biloba со следующими характеристиками: флавоновые гликозиды гинкго 26,0%; билобалид 3,2%; гинкголиды 3,5%; гинкголовые кислоты <5,0 ч/млн; каждый пестицид <10 ч/млрд.
Пример 2: Очистка экстракта, полученного по примеру II патента США 5700468 и EP 0 360 556 (Indena)
1) 100 кг измельченных листьев экстрагируют 4 раза с помощью 400 л 50% (мас./мас.) метанола при температуре приблизительно 35°С.
2) Объединенные фильтраты концентрируют до 100 л в вакууме при 40°С, концентрат поглощают с помощью 100 л метанола и полученную суспензию фильтруют.
3) Фильтрованный раствор экстрагируют 3 раза с помощью 100 л 9:2 смеси толуол/н-бутанол.
4) Объединенные органические фазы промывают встречным образом с помощью 50 л 50% метанола.
5) Водно-метанольные растворы концентрируют в вакууме до водного раствора и после фильтрования экстрагируют с помощью 8:2 смеси н-бутанол/толуол.
6) Органический слой промывают встречным образом водой и концентрируют в вакууме до маленького объема, с дополнением водой. Раствор поглощают водой для получения раствора с 20% сухого остатка.
7) Полученный раствор экстрагируют в противотоке с помощью 90 л 1:1 смеси н-бутанол/толуол. Водную фазу концентрируют до сиропо-подобной консистенции и сушат в вакууме, чтобы получить промежуточный продукт, обогащенный флавоновыми гликозидами гинкго и лишенный терпенов (2,05 кг).
8) Смесь н-бутанол/толуол концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и остаток поглощают с помощью 3,5 л 60% водного этанола.
9) Полученный раствор экстрагируют в противотоке с помощью 20 л гексана, удаляя объединенные органические фазы.
10) Водно-спиртовый раствор концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и добавляют 1,2 л 40% водного этанола.
Полученный раствор нагревают при кипении с обратным холодильником при перемешивании в течение 45 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 3-4 суток.
11) Раствор затем фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 40% EtOH и сушат в вакууме с получением 97 г очищенных гинкголидов.
12) Маточник концентрируют в вакууме для удаления этанола и остаток затем поглощают с помощью 2 л воды и нагревают при 90°С при перемешивании в течение 30 минут. Водный раствор отделяют и остаток поглощают еще 3 раза с помощью 2 л воды при 90°С, причем водный раствор каждый раз регенерируется.
13) Водные растворы объединяют и экстрагируют в противотоке с помощью 17 л гексана.
14) Водные растворы концентрируют до объема 0,4 л и добавляют 0,15 л 95° EtOH; полученный раствор нагревают при 50-55°С при перемешивании в течение 30 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 3-4 суток.
15) Раствор фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 20% EtOH и сушат в вакууме при 60°С с получением 110 г очищенного билобалида.
16) Продукты, полученные в пунктах 7, 11 и 15, смешивают с получением 2,26 кг экстракта Ginkgo biloba, аналогичного экстракту, полученному в примере 1.
Пример 3: Очистка экстракта, полученного по примеру IEP 431535 (Schwabe)
1) 100 кг измельченных листьев экстрагируют дважды с помощью 750 кг 60% (мас./мас.) ацетона в течение 30 мин при температуре 57-59°С.
2) Объединенные экстракты концентрируют до водного раствора с 30-40% сухого остатка, добавляют равный объем воды и смесь оставляют при перемешивании в течение одного часа при 12°С.
3) Обогащенный алкилфенолом осадок отделяют центрифугированием и удаляют.
4) 30% сульфат аммония добавляют к прозрачному раствору при перемешивании и раствор дважды экстрагируют половиной объема 6:4 смеси метилэтилкетон/ацетон.
5) Объединенные растворы смеси метилэтилкетон/ацетон концентрируют в вакууме до сухого остатка в 50-70% и затем разбавляют водой и 95% этанолом с получением 50% этанольного раствора с 10% сухого остатка.
6) Водный раствор гидроксидацетата свинца добавляют при перемешивании до тех пор, пока цвет изменяется от коричневого до светло-коричневого. Полученный осадок удаляют центрифугированием.
7) Центрифугированный раствор экстрагируют 3 раза с помощью 1/3 объема гексана.
8) Обезжиренный раствор концентрируют в вакууме до водного раствора и добавляют 20% сульфат аммония и дважды экстрагируют половиной объема 6:4 смеси метилэтилкетон/этанол. Объединенные органические фазы промывают 20% сульфатом аммония, удаляя любую воду и образовавшееся твердое вещество.
9) Прозрачный раствор затем концентрируют до маленького объема, с дополнением водой.
Концентрат поглощают водой с получением раствора с приблизительно 10% сухого остатка.
10) Раствор экстрагируют в противотоке с помощью приблизительно 100 л трет-бутилацетата. Водную фазу концентрируют до сиропо-подобной консистенции и сушат в вакууме, чтобы получить промежуточный продукт, обогащенный флавоновыми гликозидами гинкго и лишенный терпенов (1,88 кг).
11) Бутилацетатную фазу концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и добавляют 0,8 л 60% водного этанола.
Полученный раствор нагревают при кипении с обратным холодильником при перемешивании в течение 25 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 2 суток.
12) Раствор затем фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 60% EtOH и сушат в вакууме с получением 98 г очищенных гинкголидов.
13) Маточник концентрируют в вакууме для удаления этанола и остаток затем поглощают с помощью 1,9 л воды и нагревают при 90°С с перемешиванием в течение 30 минут. Водный раствор отделяют и остаток поглощают еще 3 раза с помощью 1,9 л воды при 90°С, причем водный раствор каждый раз регенерируется.
14) Объединенные водные растворы концентрируют до объема 0,6 л и нагревают до 70°С, при перемешивании, в течение 60 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 1 суток.
15) Полученный раствор фильтруют и твердое вещество промывают водой и сушат в вакууме с получением 99 г очищенного билобалида.
16) Продукты, полученные в пунктах 10, 12 и 15, смешивают с получением 2,08 кг экстракта Ginkgo biloba, аналогичного экстракту, полученному в примере 1.
Пример 4: Очистка экстракта, полученного по JP 09110713 (Nippon Green wave)
1) 100 кг измельченных листьев экстрагируют 3 раза с помощью 500 л 70% этанола при 50°С в течение 30 часов.
2) Объединенные фильтраты концентрируют до 100 л в вакууме и концентрат поглощают с помощью 100 л воды.
Полученную суспензию фильтруют.
3) Фильтрованный раствор вводят в хроматографическую колонку, содержащую 100 л НР20 смолы (Mitsubishi), чтобы адсорбировать экстракт. Колонку затем промывают с помощью 200 л воды и экстракт получают элюированием с помощью 200 л 70% этанола.
4) Водно-этанольный раствор концентрируют в вакууме до маленького раствора, с дополнением водой. Концентрат поглощают с помощью 20% этанола с получением раствора с 20% сухого остатка.
5) Полученный раствор экстрагируют в противотоке с помощью 70 л метиленхлорида. Водно-этанольную фазу концентрируют до сиропо-подобной консистенции и сушат в вакууме, чтобы получить промежуточный продукт, обогащенный флавоновыми гликозидами гинкго и лишенный терпенов (2,4 кг).
6) Хлорметиленовую фазу концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и остаток поглощают с помощью 4 л 75% водного метанола.
7) Полученный раствор экстрагируют 10 раз с помощью 2 л гексана, удаляя объединенные гексановые фазы.
8) Водно-спиртовый раствор концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и добавляют 1 л 50% водного метанола.
Полученный раствор нагревают при кипении с обратным холодильником при перемешивании в течение 30 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 5 суток.
9) Раствор затем фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 50% MeOH и сушат в вакууме с получением 105 г очищенных гинкголидов.
10) Маточник концентрируют в вакууме для удаления метанола и остаток затем поглощают с помощью 2,1 л воды и нагревают при 90°С с перемешиванием в течение 30 минут. Водный раствор отделяют и остаток поглощают еще 3 раза с помощью 2 л воды при 90°С, причем водный раствор каждый раз регенерируется.
11) Объединенные водные растворы концентрируют до объема 0,4 л и добавляют 0,1 л МеОН; полученный раствор нагревают при 50°С при перемешивании в течение 30 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 3 суток.
12) Полученный раствор фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 20% MeOH и сушат в вакууме с получением 102 г очищенного билобалида.
13) Продукты, полученные в пунктах 5, 9 и 12, смешивают с получением 2,6 кг экстракта Ginkgo biloba, аналогичного экстракту, полученному в примере 1.
Пример 5: Очистка очищенного экстракта, включащего пестициды, с высоким содержанием терпенов
1) 1 кг лиственного экстракта Ginkgo biloba, содержащего 24% флавоновых гликозидов гинкго, 12% терпенов гинкго, 2 ч/млн гинкголовых кислот и 315 ч/млрд хлорпирифоса и трициклазола, суспендируют при перемешивании в 5 л воды.
2) Суспензию экстрагируют 12 раз с помощью 5 л этилацетата при комнатной температуре. Водную фазу затем концентрируют до сиропо-подобной консистенции и сушат в вакууме, чтобы получить промежуточный продукт, обогащенный флавоновыми гликозидами гинкго и лишенный терпенов (810 г).
3) Объединенные этилацетатные фазы концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции и остаток поглощают с помощью 2 л 50% водного этанола.
Полученный раствор нагревают при кипении с обратным холодильником при перемешивании в течение 1 часа, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 2 суток.
4) Раствор затем фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 50% EtOH и сушат в вакууме с получением 82 г очищенных гинкголидов.
5) Маточник концентрируют в вакууме для удаления этанола и остаток затем поглощают с помощью 2,1 л воды и нагревают при 90°С при перемешивании в течение 15 минут. Водный раствор отделяют и остаток поглощают 2 раза с помощью 2 л воды при 90°С, причем водный раствор каждый раз регенерируется.
6) Водные растворы объединяют и концентрируют в вакууме до сиропо-подобной консистенции; остаток затем поглощают с помощью 400 мл 10% EtOH. Полученный раствор нагревают при 50°C при перемешивании в течение 60 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и оставляют кристаллизоваться в течение 2 суток.
7) Раствор фильтруют и твердое вещество промывают с помощью 10% EtOH и сушат в вакууме с получением 70 г очищенного билобалида.
8) 41 г очищенных гинкголидов и 35 г очищенного билобалида смешивают с продуктом, полученным в пункте 2, с выходом 885 г экстракта Ginkgo biloba со следующими характеристиками: а. флавоновые гликозиды гинкго 27%; b. терпены гинкго, 6,8%; с. гинкголовые кислоты 1,0 ч/млн; d. каждый пестицид < 10 ч/млрд.
Описанный способ удаляет пестициды и допускает, что содержание терпенов в экстрактах Ginkgo biloba будет регулироваться, причем оно устанавливается как требуется на стадии, когда смешивают очищенные промежуточные продукты. На практике, отношение 24/6 (GFG/GT), рассматриваемое идеальным в экстрактах, часто отличается от природного отношения, встречаемого в растениях. Например, китайские листья часто имеют более высокое содержание терпенов, и требуется стадия снижения титра терпенов гинкго для получения соответствующих экстрактов.
Ниже представленная таблица показывает пестицидные содержания экстрактов, полученных согласно процедурам, описанным выше. Для каждого примера проводили два теста: во-первых, точно следуют по процедуре, раскрытой в патенте, во-вторых, добавляют обработку терпеновой фракции.
Все экстракты получали из того же самого растения.
  Пример 1-Ссыл. патенты Indena US 5700468, EP 0 3600 556 B1; (пример I) Пример 2-Ссыл. патенты Indena US 5700468, EP 0 3600 556 B1; (пример II) Пример 3-Ссыл. патент Schwabe EP 0 431 535 B1; (пример I) Пример 4-Ссыл. патент Nippon Green Wave J09110713
Перед удале-нием пести-цида После удале-ния пести-цида Перед удале-нием пести-
цида		 После удале-ния пести-цида Перед удале-нием пести-цида После удале-ния пести-цида Перед удале-нием пести-цида После удаления пестицида
Трицик-лазол ч/млрд 85 <10 55 <10 63 <10 212 <10
Ацетами-прид ч/млрд 24 <10 16 <10 27 <10 92 <10
Имидак-лоприд ч/млрд 48 <10 37 <10 45 <10 175 <10
Форат ч/млрд 33 <10 28 <10 26 <10 84 <10

Claims (4)

1. Способ удаления пестицидов из экстрактов Ginkgo biloba, который включает подвергание экстракта, полученного путем экстрагирования листьев Ginkgo biloba гексаном, следующим стадиям:
a) жидкостно-жидкостной экстракции с получением фракции средней полярности, содержащей терпены гинкго и пестициды, не удаляемые гексаном, и фракцию высокой полярности, содержащую флавоновые гликозиды гинкго, причем указанную экстракцию осуществляют не смешивающимся с водой растворителем, выбранным из сложных эфиров, хлорированных углеводородов, смесей углеводородов и спиртов, кетонов и смесей кетонов и спиртов;
b) кристаллизации из фракции средней полярности, полученной на стадии а), с образованием промежуточного кристаллизованного продукта с содержанием гинкголида не менее 50% кристаллизованного продукта;
c) кристаллизации из остаточного раствора, полученного на стадии b), с образованием промежуточного кристаллизованного продукта с содержанием билобалида не менее 50% кристаллизованного продукта;
d) смешивания фракции высокой полярности, полученной на стадии a), с промежуточным продуктом терпенов гинкго и промежуточным продуктом билобалида, полученными на стадиях b) и c).
2. Способ по п.1, в котором указанный растворитель представляет собой сложный эфир, имеющий от 2 до 8 атомов углерода.
3. Способ по п.1 или 2, в котором кристаллизацию терпенов гинкго на стадии b) осуществляют в смесях воды и C1-C3 спиртов.
4. Способ по любому из пп.1-3, в котором кристаллизацию билобалида на стадии c) осуществляют в воде или в смеси воды и C1-C3 спиртов.
RU2011140482/13A 2009-04-06 2010-03-31 Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом RU2514673C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ITMI2009A000548 2009-04-06
IT000548A ITMI20090548A1 (it) 2009-04-06 2009-04-06 Processo di rimozione di pesticidi da estratti di ginkgo biloba e estratti ottenibili da detto processo
PCT/EP2010/002046 WO2010115566A2 (en) 2009-04-06 2010-03-31 Process for removing pesticides from gingko biloba extracts, and extracts obtainable by said process

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014106648/13A Division RU2014106648A (ru) 2009-04-06 2014-02-21 Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2011140482A RU2011140482A (ru) 2013-05-20
RU2514673C2 true RU2514673C2 (ru) 2014-04-27

Family

ID=41786232

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011140482/13A RU2514673C2 (ru) 2009-04-06 2010-03-31 Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом
RU2014106648/13A RU2014106648A (ru) 2009-04-06 2014-02-21 Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014106648/13A RU2014106648A (ru) 2009-04-06 2014-02-21 Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом

Country Status (21)

Country Link
US (3) US20120100232A1 (ru)
EP (2) EP2427662B1 (ru)
JP (1) JP5745499B2 (ru)
KR (1) KR101350433B1 (ru)
CN (1) CN102368911A (ru)
AU (1) AU2010234008B2 (ru)
BR (1) BRPI1016023B1 (ru)
CA (1) CA2757925C (ru)
CL (1) CL2011002474A1 (ru)
DK (1) DK2427662T3 (ru)
ES (1) ES2402235T3 (ru)
HR (1) HRP20130151T1 (ru)
IL (1) IL215546A (ru)
IT (1) ITMI20090548A1 (ru)
MX (1) MX2011010510A (ru)
PL (1) PL2427662T3 (ru)
PT (1) PT2427662E (ru)
RU (2) RU2514673C2 (ru)
SG (1) SG175065A1 (ru)
SI (1) SI2427662T1 (ru)
WO (1) WO2010115566A2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2778292C1 (ru) * 2018-08-20 2022-08-17 Спх Син Лин Сай. & Тек. Фармасьютикал Ко., Лтд. Гранулированный сложный кетоновый эфир гинкобилоба и способ его получения

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011014260A1 (en) * 2009-07-30 2011-02-03 Becton, Dickinson And Company Lancing device having saddle-shaped tip
KR101722829B1 (ko) 2015-02-16 2017-04-05 주식회사 한국인삼공사 식물에서 잔류 농약을 제거하는 방법
CN107670218A (zh) * 2017-08-24 2018-02-09 江苏金纳多生物科技有限公司 一种紫外辅助光催化降解银杏叶中农药残留的方法
CN109762800B (zh) * 2018-12-14 2022-04-08 南京农业大学 一种啶虫脒酰胺酶基因aceAB及其编码蛋白质及其应用
CN114367076A (zh) * 2021-11-26 2022-04-19 湖南科技学院 一种去除银杏提取物中残留农药的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4753929A (en) * 1986-03-12 1988-06-28 Daicel Chemical Industries, Ltd. Flavone glycoside
EP0360556A1 (en) * 1988-09-20 1990-03-28 INDENA S.p.A. New extracts of ginkgo biloba and their methods of preparation
EP0431535A1 (en) * 1989-12-04 1991-06-12 Dr. Willmar Schwabe GmbH &amp; Co. Extract from Ginkgo biloba leaves, its method of preparation and pharmaceuticals containing the extract
RU2094054C1 (ru) * 1994-07-14 1997-10-27 Эмиль Флахсманн АГ Способ получения обедненного пестицидами концентрата биологически активного вещества из растений
WO2006009373A1 (en) * 2004-07-22 2006-01-26 Seoul National University Industry Foundation The purified leaf extract of ginkgo biloba having neuronal cell-protecting activity, the method for preparing them and the composition comprising the same

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4927323A (ru) * 1972-07-04 1974-03-11
US5637302A (en) * 1988-09-20 1997-06-10 Indena Spa Extracts of Ginkgo biloba and their methods of preparation
DE3940094A1 (de) * 1989-12-04 1991-06-06 Montana Ltd Wirkstoffkonzentrate und neue wirkstoff-kombinationen aus blaettern von ginkgo biloba, ein verfahren zu ihrer herstellung und die wirkstoff-konzentrate bzw. die wirkstoff-kombinationen enthaltenden arzneimittel
AU678929B2 (en) * 1995-03-06 1997-06-12 Frutarom Schweiz Ag A process for the removal of undesired lipophilic contaminations and/or residues, which are contained in beverages or in vegetable preparations
JPH09110713A (ja) 1995-10-13 1997-04-28 Nippon Green Ueebu Kk グルタチオン−ｓ−トランスフェラーゼ活性化剤並びにそれを含む医薬品及び飲食物
EP1033994A4 (en) * 1997-11-25 2002-04-03 Pharmanex Inc METHOD FOR PRODUCING BIOGINKGO
US6030621A (en) * 1998-03-19 2000-02-29 De Long; Xie Ginkgo biloba composition, method to prepare the same and uses thereof
US6132726A (en) 1998-10-21 2000-10-17 Hauser, Inc. Process for removing impurities from natural product extracts
CN1322723A (zh) * 2001-04-24 2001-11-21 哈尔滨市应用技术研究所 在亚临界状态下用co2从银杏叶中萃取黄酮和萜类的方法
CN100391979C (zh) * 2004-12-02 2008-06-04 华东师范大学 一种单甲氧基聚乙二醇-胰岛素复合物及其制备方法
DE602006002733D1 (de) 2005-05-03 2008-10-23 Schwabe Willmar Gmbh & Co Verbessertes verfahren zur herstellung von ginkgoextrakten mit geringem gehalt an polycyclischen aromatischen kohlenwasserstoffen
EP1968625A2 (en) 2005-12-15 2008-09-17 Laboratoires Serono SA New chemokine antagonists
KR100723609B1 (ko) * 2006-04-28 2007-06-04 주식회사 유유 신규한 조성의 알츠하이머형 치매 및 파킨슨씨병 예방 또는 치료용 은행잎 추출물, 그리고 은행잎으로부터의 추출 및 정제 방법
FR2926994B1 (fr) * 2008-02-06 2010-08-27 Sod Conseils Rech Applic Nouveau procede pour la preparation d'extraits de ginkgo biloba

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4753929A (en) * 1986-03-12 1988-06-28 Daicel Chemical Industries, Ltd. Flavone glycoside
EP0360556A1 (en) * 1988-09-20 1990-03-28 INDENA S.p.A. New extracts of ginkgo biloba and their methods of preparation
EP0431535A1 (en) * 1989-12-04 1991-06-12 Dr. Willmar Schwabe GmbH &amp; Co. Extract from Ginkgo biloba leaves, its method of preparation and pharmaceuticals containing the extract
RU2094054C1 (ru) * 1994-07-14 1997-10-27 Эмиль Флахсманн АГ Способ получения обедненного пестицидами концентрата биологически активного вещества из растений
WO2006009373A1 (en) * 2004-07-22 2006-01-26 Seoul National University Industry Foundation The purified leaf extract of ginkgo biloba having neuronal cell-protecting activity, the method for preparing them and the composition comprising the same

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2778292C1 (ru) * 2018-08-20 2022-08-17 Спх Син Лин Сай. & Тек. Фармасьютикал Ко., Лтд. Гранулированный сложный кетоновый эфир гинкобилоба и способ его получения

Also Published As

Publication number Publication date
US9504270B2 (en) 2016-11-29
BRPI1016023B1 (pt) 2019-06-18
JP5745499B2 (ja) 2015-07-08
US20120100232A1 (en) 2012-04-26
AU2010234008A1 (en) 2011-11-03
BRPI1016023A2 (pt) 2015-09-01
KR20120004986A (ko) 2012-01-13
ITMI20090548A1 (it) 2010-10-07
RU2014106648A (ru) 2015-08-27
EP2554054A1 (en) 2013-02-06
AU2010234008B2 (en) 2015-04-30
DK2427662T3 (da) 2013-03-25
IL215546A0 (en) 2011-12-29
CN102368911A (zh) 2012-03-07
US20170042952A1 (en) 2017-02-16
WO2010115566A8 (en) 2010-12-23
CL2011002474A1 (es) 2012-03-23
PT2427662E (pt) 2013-04-03
ES2402235T3 (es) 2013-04-30
EP2427662A2 (en) 2012-03-14
CA2757925C (en) 2017-10-17
SG175065A1 (en) 2011-11-28
KR101350433B1 (ko) 2014-01-14
EP2427662B1 (en) 2013-01-09
CA2757925A1 (en) 2010-10-14
MX2011010510A (es) 2011-11-29
WO2010115566A2 (en) 2010-10-14
RU2011140482A (ru) 2013-05-20
WO2010115566A3 (en) 2011-02-10
BRPI1016023A8 (pt) 2017-12-05
IL215546A (en) 2015-01-29
HRP20130151T1 (hr) 2013-03-31
JP2012522815A (ja) 2012-09-27
PL2427662T3 (pl) 2013-06-28
SI2427662T1 (sl) 2013-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Stéphane et al. Extraction of bioactive compounds from medicinal plants and herbs
CN108966638B (zh) 用于形成保护性涂层的植物提取物组合物
RU2514673C2 (ru) Способ удаления пестицидов из экстрактов ginkgo biloba и экстракты, получаемые упомянутым способом
KR101393359B1 (ko) 수지상에서 분획하여 얻을 수 있는 포도 씨 추출물
JP2800040B2 (ja) いちょうの新規抽出物およびその製法
JPH01108952A (ja) スパイス抽出物の製造方法
JP2001503391A (ja) ポリフェノール含有組成物の製造方法
EP0402925B1 (en) A method of isolating ginkgolides from the leaves of the ginkgo tree and purifying them
US20220313655A1 (en) Carnosic acid, carnosol and rosmarinic acid isolation method
AT502717A1 (de) Pharmazeutische verwendung einer verbindung
US5955084A (en) Process for the simultaneous production of artemisnin and essential oil from the plant artemisia annua
US20080306141A1 (en) Method of Extraction of Catechin Type-A Proanthocyanidins
WO2007066926A1 (en) A mass production method of brazilein from caesalpinia sappan l
KR20100045485A (ko) 증류된 올리브 쥬스 추출물의 제조 방법
Outtrup et al. Isolation of dihydromyricetin and dihydroquercetin from bark of Pinus contorta
US6447819B2 (en) Water-soluble complex of an extract of Ginkgo biloba, process for the preparation thereof and composition comprising the same
SU1187825A1 (ru) Способ получени фламина и экстракта бессмертника
KR100197353B1 (ko) 은행잎 추출물의 신규한 제조방법
JP2023537185A (ja) 高いオエノテインｂ含有量を有するエピロビウム属の抽出物の調製プロセス
KR100475129B1 (ko) 된장 제조시 부산물로부터 이소플라본을 추출하는 방법
BG107944A (bg) Метод за получаване на бета-аесцин от индийски конски кестен (aesculus indica)
TR201809158A2 (tr) Bi̇ber atiklarindan kapsanoi̇d ve analoglarinin elde edi̇lmesi̇ i̇çi̇n bi̇r yöntem
KR20180086651A (ko) 밀싹 또는 보리싹으로부터 클로로필a를 제조하는 방법.
Challenge Experimental Protocols in Phytochemistry and Natural Products: 10
KR20040032250A (ko) 두릅나무 및 갈화추출물의 에멀젼 제조방법