RU2438696C2 - Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей - Google Patents
Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2438696C2 RU2438696C2 RU2007127888/15A RU2007127888A RU2438696C2 RU 2438696 C2 RU2438696 C2 RU 2438696C2 RU 2007127888/15 A RU2007127888/15 A RU 2007127888/15A RU 2007127888 A RU2007127888 A RU 2007127888A RU 2438696 C2 RU2438696 C2 RU 2438696C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- connexin
- seq
- alpha
- peptide
- tissue
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 124
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 127
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 title abstract description 17
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 title abstract description 12
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 title abstract description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 357
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 171
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 131
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 119
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims abstract description 93
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 claims abstract description 89
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 83
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 71
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 46
- 230000035876 healing Effects 0.000 claims abstract description 39
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 206
- 108010069241 Connexin 43 Proteins 0.000 claims description 61
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 58
- 108050001175 Connexin Proteins 0.000 claims description 32
- 102000010970 Connexin Human genes 0.000 claims description 31
- -1 analgesic Substances 0.000 claims description 30
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 27
- 102100030525 Gap junction alpha-4 protein Human genes 0.000 claims description 22
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 20
- 239000007943 implant Substances 0.000 claims description 20
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 20
- 102100039290 Gap junction gamma-1 protein Human genes 0.000 claims description 19
- 102100030540 Gap junction alpha-5 protein Human genes 0.000 claims description 17
- 108010015408 connexin 37 Proteins 0.000 claims description 16
- 108010014510 connexin 40 Proteins 0.000 claims description 16
- 108010015426 connexin 45 Proteins 0.000 claims description 15
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 13
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 10
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 9
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 9
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 9
- 108700031308 Antennapedia Homeodomain Proteins 0.000 claims description 7
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 claims description 5
- 108010043655 penetratin Proteins 0.000 claims description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 4
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000002729 catgut Substances 0.000 claims description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 3
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims description 3
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 claims description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 claims description 2
- 102100021337 Gap junction alpha-1 protein Human genes 0.000 claims 2
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 claims 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims 1
- 239000003356 suture material Substances 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 27
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 24
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 15
- 230000037390 scarring Effects 0.000 abstract description 13
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 abstract description 4
- 238000002483 medication Methods 0.000 abstract 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 144
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 122
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 78
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 73
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 66
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 64
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 64
- 102000001045 Connexin 43 Human genes 0.000 description 59
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 58
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 56
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 48
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 37
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 31
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 30
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 29
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 29
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 27
- 230000006870 function Effects 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 26
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 26
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 25
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 25
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 23
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 23
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 22
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 22
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 22
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 22
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 21
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 20
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 19
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 18
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 18
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 18
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 18
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 18
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 17
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 16
- 108010014633 connexin 50 Proteins 0.000 description 16
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 16
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 15
- 102100025283 Gap junction alpha-8 protein Human genes 0.000 description 15
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 14
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 14
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 14
- 102100025623 Gap junction delta-2 protein Human genes 0.000 description 13
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 13
- 108010015417 connexin 36 Proteins 0.000 description 13
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 230000004044 response Effects 0.000 description 13
- 101100492584 Caenorhabditis elegans ast-1 gene Proteins 0.000 description 12
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 12
- 102100030526 Gap junction alpha-3 protein Human genes 0.000 description 12
- 241000530626 Percina Species 0.000 description 12
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 12
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 12
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108010015433 connexin 46 Proteins 0.000 description 11
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 11
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 11
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 11
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 11
- 241000699798 Cricetulus Species 0.000 description 10
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 10
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 10
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 10
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 10
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 10
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 10
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 10
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 10
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 10
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 10
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 10
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 10
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 9
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 9
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 9
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 9
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 9
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 9
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 9
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 9
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 9
- 101710190724 Gap junction alpha-4 protein Proteins 0.000 description 8
- 102100039288 Gap junction gamma-2 protein Human genes 0.000 description 8
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 8
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 8
- 101001092197 Homo sapiens RNA binding protein fox-1 homolog 3 Proteins 0.000 description 8
- 102100035530 RNA binding protein fox-1 homolog 3 Human genes 0.000 description 8
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 8
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 8
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 8
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 101150019028 Antp gene Proteins 0.000 description 7
- 241000699678 Mesocricetus Species 0.000 description 7
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 7
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 7
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 7
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 7
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 7
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 7
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 7
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 6
- 101710178487 Gap junction delta-2 protein Proteins 0.000 description 6
- 101000746084 Homo sapiens Gap junction gamma-2 protein Proteins 0.000 description 6
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 6
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 6
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 6
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 5
- 101100000858 Caenorhabditis elegans act-3 gene Proteins 0.000 description 5
- 101100161935 Caenorhabditis elegans act-4 gene Proteins 0.000 description 5
- 102100037156 Gap junction beta-2 protein Human genes 0.000 description 5
- 101710198067 Gap junction beta-2 protein Proteins 0.000 description 5
- 206010061431 Glial scar Diseases 0.000 description 5
- 206010018341 Gliosis Diseases 0.000 description 5
- 101000894966 Homo sapiens Gap junction alpha-1 protein Proteins 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 5
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 5
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 5
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 5
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 5
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 5
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 5
- 102000048481 human GJA1 Human genes 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 5
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 5
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 5
- 230000009520 penetrating brain damage Effects 0.000 description 5
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 5
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 5
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 5
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100031102 C-C motif chemokine 4 Human genes 0.000 description 4
- 101100054773 Caenorhabditis elegans act-2 gene Proteins 0.000 description 4
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 4
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 4
- 101000746047 Gallus gallus Gap junction gamma-1 protein Proteins 0.000 description 4
- 101710178004 Gap junction gamma-1 protein Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000746078 Homo sapiens Gap junction gamma-1 protein Proteins 0.000 description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 4
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 101000856665 Mus musculus Gap junction delta-3 protein Proteins 0.000 description 4
- 101000856715 Mus musculus Gap junction delta-4 protein Proteins 0.000 description 4
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 4
- 101000858027 Ovis aries Gap junction alpha-8 protein Proteins 0.000 description 4
- 102000000470 PDZ domains Human genes 0.000 description 4
- 108050008994 PDZ domains Proteins 0.000 description 4
- KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N Phalloidin Chemical compound N1C(=O)[C@@H]([C@@H](O)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C[C@@](C)(O)CO)NC(=O)[C@H](C2)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](O)CN3C(=O)[C@@H]1CSC1=C2C2=CC=CC=C2N1 KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N 0.000 description 4
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 4
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 4
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 4
- 101000726564 Rattus norvegicus Gap junction alpha-6 protein Proteins 0.000 description 4
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 4
- 241000214655 Tetraodon Species 0.000 description 4
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 241000269370 Xenopus <genus> Species 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 4
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 229960001146 clobetasone Drugs 0.000 description 4
- XXIFVOHLGBURIG-OZCCCYNHSA-N clobetasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CCl)(O)[C@@]1(C)CC2=O XXIFVOHLGBURIG-OZCCCYNHSA-N 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 4
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 4
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 4
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 4
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 4
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 4
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 4
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 4
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 4
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 4
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 4
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 3
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 102100028072 Fibroblast growth factor 4 Human genes 0.000 description 3
- 101710091789 Gap junction alpha-6 protein Proteins 0.000 description 3
- 102100025284 Gap junction alpha-9 protein Human genes 0.000 description 3
- 102100025251 Gap junction gamma-3 protein Human genes 0.000 description 3
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 3
- 101001060274 Homo sapiens Fibroblast growth factor 4 Proteins 0.000 description 3
- 101000726548 Homo sapiens Gap junction alpha-5 protein Proteins 0.000 description 3
- 101000858028 Homo sapiens Gap junction alpha-9 protein Proteins 0.000 description 3
- 101000856663 Homo sapiens Gap junction delta-3 protein Proteins 0.000 description 3
- 101000858078 Homo sapiens Gap junction gamma-3 protein Proteins 0.000 description 3
- 108010070875 Human Immunodeficiency Virus tat Gene Products Proteins 0.000 description 3
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 3
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 3
- BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N O-phosphoryl-L-serine Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 3
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 3
- 102100036691 Proliferating cell nuclear antigen Human genes 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 3
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 3
- 102100036976 X-ray repair cross-complementing protein 6 Human genes 0.000 description 3
- 101710124907 X-ray repair cross-complementing protein 6 Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 108010025307 buforin II Proteins 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- UKVZSPHYQJNTOU-IVBHRGSNSA-N chembl1240717 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)[C@H](C)O)CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 UKVZSPHYQJNTOU-IVBHRGSNSA-N 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 108010015431 connexin 44 Proteins 0.000 description 3
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 229950006137 dexfosfoserine Drugs 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 3
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 3
- 239000002657 fibrous material Substances 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 3
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 3
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 3
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 3
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 3
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 3
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 3
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 3
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 3
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 108010062760 transportan Proteins 0.000 description 3
- PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N transportan Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- USSIQXCVUWKGNF-UHFFFAOYSA-N 6-(dimethylamino)-4,4-diphenylheptan-3-one Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(CC(C)N(C)C)(C(=O)CC)C1=CC=CC=C1 USSIQXCVUWKGNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000002267 Anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 2
- 241000282551 Cercopithecus Species 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 2
- 208000006343 Cutaneous Mastocytosis Diseases 0.000 description 2
- 241000269381 Cynops Species 0.000 description 2
- 241000252231 Cyprinus Species 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 2
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 2
- 101000746045 Danio rerio Gap junction gamma-1 protein Proteins 0.000 description 2
- 241000205397 Devario aequipinnatus Species 0.000 description 2
- 108700019745 Disks Large Homolog 4 Proteins 0.000 description 2
- 102100022264 Disks large homolog 4 Human genes 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 101000894969 Gallus gallus Gap junction alpha-1 protein Proteins 0.000 description 2
- 101710198379 Gap junction alpha-3 protein Proteins 0.000 description 2
- 102100025624 Gap junction delta-3 protein Human genes 0.000 description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 101000945496 Homo sapiens Proliferation marker protein Ki-67 Proteins 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 208000034693 Laceration Diseases 0.000 description 2
- 229920001410 Microfiber Polymers 0.000 description 2
- 241000713869 Moloney murine leukemia virus Species 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- TWOFBVMVSYSAFW-UFUGHDFUSA-N N'-(3-aminopropyl)butane-1,4-diamine (3S,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-10,13-dimethyl-17-[(2R)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol guanidine Chemical compound NC(N)=N.NC(N)=N.NCCCCNCCCN.C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 TWOFBVMVSYSAFW-UFUGHDFUSA-N 0.000 description 2
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 description 2
- MITFXPHMIHQXPI-UHFFFAOYSA-N Oraflex Chemical compound N=1C2=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C2OC=1C1=CC=C(Cl)C=C1 MITFXPHMIHQXPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 108010009711 Phalloidine Proteins 0.000 description 2
- 241000699698 Phodopus Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 2
- 102100034836 Proliferation marker protein Ki-67 Human genes 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 2
- 241000283925 Spermophilus Species 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282890 Sus Species 0.000 description 2
- 201000008736 Systemic mastocytosis Diseases 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 108700021031 cdc Genes Proteins 0.000 description 2
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 2
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- OROGSEYTTFOCAN-DNJOTXNNSA-N codeine Chemical compound C([C@H]1[C@H](N(CC[C@@]112)C)C3)=C[C@H](O)[C@@H]1OC1=C2C3=CC=C1OC OROGSEYTTFOCAN-DNJOTXNNSA-N 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 2
- 108010015404 connexin 38 Proteins 0.000 description 2
- 108010015440 connexin 47 Proteins 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 2
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 150000002169 ethanolamines Chemical class 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- NOOCSNJCXJYGPE-UHFFFAOYSA-N flunixin Chemical compound C1=CC=C(C(F)(F)F)C(C)=C1NC1=NC=CC=C1C(O)=O NOOCSNJCXJYGPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000588 flunixin Drugs 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 230000003661 hair follicle regeneration Effects 0.000 description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 description 2
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 2
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229960001797 methadone Drugs 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 2
- 239000003658 microfiber Substances 0.000 description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 2
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 2
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 2
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 2
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003955 neuronal function Effects 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 2
- 108010035945 nucleolar organizer region associated proteins Proteins 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 230000033667 organ regeneration Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002702 piroxicam Drugs 0.000 description 2
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 2
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 2
- OLTAWOVKGWWERU-UHFFFAOYSA-N proxazole Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(CC)C1=NOC(CCN(CC)CC)=N1 OLTAWOVKGWWERU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001801 proxazole Drugs 0.000 description 2
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 2
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 2
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 208000000649 small cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N thiocyanic acid Chemical compound SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 2
- RJMIEHBSYVWVIN-LLVKDONJSA-N (2r)-2-[4-(3-oxo-1h-isoindol-2-yl)phenyl]propanoic acid Chemical compound C1=CC([C@H](C(O)=O)C)=CC=C1N1C(=O)C2=CC=CC=C2C1 RJMIEHBSYVWVIN-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- OPCHFPHZPIURNA-MFERNQICSA-N (2s)-2,5-bis(3-aminopropylamino)-n-[2-(dioctadecylamino)acetyl]pentanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(CC(=O)NC(=O)[C@H](CCCNCCCN)NCCCN)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OPCHFPHZPIURNA-MFERNQICSA-N 0.000 description 1
- MDKGKXOCJGEUJW-VIFPVBQESA-N (2s)-2-[4-(thiophene-2-carbonyl)phenyl]propanoic acid Chemical compound C1=CC([C@@H](C(O)=O)C)=CC=C1C(=O)C1=CC=CS1 MDKGKXOCJGEUJW-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- AUDFHJLSHQWFQQ-SFHVURJKSA-N (2s)-2-[[2-[1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-2-methylindol-3-yl]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC1=C(CC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 AUDFHJLSHQWFQQ-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- XYRIRLDHOQSNLW-UHFFFAOYSA-N (3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl) 2-[1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-2-methylindol-3-yl]acetate Chemical compound CC1=C(CC(=O)OC2C3=CC=CC=C3C(=O)O2)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 XYRIRLDHOQSNLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHCYQUDTKWHARF-UHFFFAOYSA-N (3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl) 2-acetyloxybenzoate Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(=O)OC1C2=CC=CC=C2C(=O)O1 SHCYQUDTKWHARF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDHHGGFQZRPUSN-UHFFFAOYSA-N (4-chlorophenyl)-[3-(2h-tetrazol-5-ylmethyl)indol-1-yl]methanone Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(=O)N1C2=CC=CC=C2C(CC2=NNN=N2)=C1 ZDHHGGFQZRPUSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- CFGDUGSIBUXRMR-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydropyrrol-2-ide Chemical class C=1C=[C-]NC=1 CFGDUGSIBUXRMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- ULIDRMKBVYYVIQ-UHFFFAOYSA-N 1-phenyltetrazol-5-amine Chemical compound NC1=NN=NN1C1=CC=CC=C1 ULIDRMKBVYYVIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFPYWIDHMRZLRN-UHFFFAOYSA-N 17alpha-ethynyl estradiol Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)(O)C#C)C4C3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- SRETXDDCKMOQNE-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(4-methoxyphenyl)-1h-indole Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(C=2C=CC(OC)=CC=2)C2=CC=CC=C2N1 SRETXDDCKMOQNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 description 1
- ODZUWQAFWMLWCF-UHFFFAOYSA-N 2-(3-phenyl-1-benzofuran-7-yl)propanoic acid Chemical compound C=1OC=2C(C(C(O)=O)C)=CC=CC=2C=1C1=CC=CC=C1 ODZUWQAFWMLWCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRXFKKPEBXIPMW-UHFFFAOYSA-N 2-(9h-fluoren-2-yl)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C3=CC=C(C(C(O)=O)C)C=C3CC2=C1 LRXFKKPEBXIPMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IDCAZKFFVIMCCS-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(4-chlorophenyl)-4-imino-2-oxoimidazolidin-1-yl]acetonitrile Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1N1C(=O)N(CC#N)CC1=N IDCAZKFFVIMCCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XILVEPYQJIOVNB-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(trifluoromethyl)anilino]benzoic acid 2-(2-hydroxyethoxy)ethyl ester Chemical compound OCCOCCOC(=O)C1=CC=CC=C1NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 XILVEPYQJIOVNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLGUJWNOGYWZBI-UHFFFAOYSA-N 2-[3-chloro-4-(thiophene-2-carbonyl)phenyl]propanoic acid Chemical compound ClC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C(=O)C1=CC=CS1 NLGUJWNOGYWZBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JIEKMACRVQTPRC-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(4-chlorophenyl)-2-phenyl-5-thiazolyl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CC=1SC(C=2C=CC=CC=2)=NC=1C1=CC=C(Cl)C=C1 JIEKMACRVQTPRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKKLKGVIECOSRM-CODXZCKSSA-N 2-[4-[3-(2-chlorophenothiazin-10-yl)propyl]piperazin-1-yl]ethanol;4-[2-[(8s,9s,10r,11s,13s,14s,17r)-11,17-dihydroxy-10,13-dimethyl-3-oxo-7,8,9,11,12,14,15,16-octahydro-6h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-oxoethoxy]-4-oxobutanoic acid Chemical compound C1CN(CCO)CCN1CCCN1C2=CC(Cl)=CC=C2SC2=CC=CC=C21.O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)COC(=O)CCC(O)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 QKKLKGVIECOSRM-CODXZCKSSA-N 0.000 description 1
- FVTSYHPRVGNAQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethanol;4-hydroxy-2-methyl-1,1-dioxo-n-pyridin-2-yl-1$l^{6},2-benzothiazine-3-carboxamide Chemical compound NCCO.OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 FVTSYHPRVGNAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEKHORVJMXDXNE-UHFFFAOYSA-N 2-cyanoethoxyphosphonamidic acid Chemical compound NP(O)(=O)OCCC#N VEKHORVJMXDXNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYSICVOJSJMFKP-UHFFFAOYSA-N 3,5-dibromo-2-chloropyridine Chemical compound ClC1=NC=C(Br)C=C1Br PYSICVOJSJMFKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLZMRGRLCWCLFW-UHFFFAOYSA-N 3-[5-(3-bromophenyl)tetrazol-2-yl]-1-piperidin-1-ylpropan-1-one Chemical compound BrC1=CC=CC(C2=NN(CCC(=O)N3CCCCC3)N=N2)=C1 PLZMRGRLCWCLFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLJRTDTWWRXOFG-UHFFFAOYSA-N 3-[5-(4-chlorophenyl)furan-2-yl]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound O1C(C(CC(O)=O)O)=CC=C1C1=CC=C(Cl)C=C1 YLJRTDTWWRXOFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZRJTRPJURQBRM-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-(5-methyl-1,2-oxazol-3-yl)benzenesulfonamide;5-[(3,4,5-trimethoxyphenyl)methyl]pyrimidine-2,4-diamine Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1.COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 WZRJTRPJURQBRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SYCHUQUJURZQMO-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-2-methyl-1,1-dioxo-n-(1,3-thiazol-2-yl)-1$l^{6},2-benzothiazine-3-carboxamide Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=NC=CS1 SYCHUQUJURZQMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEOZYYOUKGGSBJ-UHFFFAOYSA-N 5-(4-methoxybenzoyl)-2,3-dihydro-1h-pyrrolizine-1-carboxylic acid Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(=O)C1=CC=C2N1CCC2C(O)=O HEOZYYOUKGGSBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- OAIZNWQBWDHNIH-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-4-phenyl-1-(2,2,2-trifluoroethyl)quinazolin-2-one Chemical compound N=1C(=O)N(CC(F)(F)F)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 OAIZNWQBWDHNIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWXVKXXKKLBDDJ-UHFFFAOYSA-N 7-chloro-3,3a-dihydro-2h-[1,2]oxazolo[3,2-b][1,3]benzoxazin-9-one Chemical compound O1C2CCON2C(=O)C2=CC(Cl)=CC=C21 XWXVKXXKKLBDDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCKFPALGXKOOBK-NRYMJLQJSA-N 7332-27-6 Chemical compound C1([C@]2(O[C@]3([C@@]4(C)C[C@H](O)[C@]5(F)[C@@]6(C)C=CC(=O)C=C6CC[C@H]5[C@@H]4C[C@H]3O2)C(=O)CO)C)=CC=CC=C1 HCKFPALGXKOOBK-NRYMJLQJSA-N 0.000 description 1
- ZOCUOMKMBMEYQV-GSLJADNHSA-N 9alpha-Fluoro-11beta,17alpha,21-trihydroxypregna-1,4-diene-3,20-dione 21-acetate Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)COC(=O)C)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O ZOCUOMKMBMEYQV-GSLJADNHSA-N 0.000 description 1
- 239000013607 AAV vector Substances 0.000 description 1
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 102100022900 Actin, cytoplasmic 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 206010053779 Allergic cough Diseases 0.000 description 1
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 1
- 101710085003 Alpha-tubulin N-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101710085461 Alpha-tubulin N-acetyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800002011 Amphipathic peptide Proteins 0.000 description 1
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- 208000025978 Athletic injury Diseases 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N BROMODEOXYURIDINE Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000025940 Back injury Diseases 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- HNNIWKQLJSNAEQ-UHFFFAOYSA-N Benzydamine hydrochloride Chemical compound Cl.C12=CC=CC=C2C(OCCCN(C)C)=NN1CC1=CC=CC=C1 HNNIWKQLJSNAEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021657 Birth injury Diseases 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 description 1
- VOVIALXJUBGFJZ-KWVAZRHASA-N Budesonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(CCC)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O VOVIALXJUBGFJZ-KWVAZRHASA-N 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 1
- 241000220450 Cajanus cajan Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 206010008190 Cerebrovascular accident Diseases 0.000 description 1
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- 241000251556 Chordata Species 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- KATBVKFXGKGUFE-UHFFFAOYSA-N Cintazone Chemical compound C12=CC=CC=C2N2C(=O)C(CCCCC)C(=O)N2C=C1C1=CC=CC=C1 KATBVKFXGKGUFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- 102000005853 Clathrin Human genes 0.000 description 1
- 108010019874 Clathrin Proteins 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 206010011985 Decubitus ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010012455 Dermatitis exfoliative Diseases 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 101150029662 E1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710140859 E3 ubiquitin ligase TRAF3IP2 Proteins 0.000 description 1
- 102100026620 E3 ubiquitin ligase TRAF3IP2 Human genes 0.000 description 1
- 101150059079 EBNA1 gene Proteins 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHAXSHUQNIEUEY-UHFFFAOYSA-N Epirizole Chemical compound COC1=CC(C)=NN1C1=NC(C)=CC(OC)=N1 RHAXSHUQNIEUEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010015108 Epstein-Barr virus infection Diseases 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000289667 Erinaceus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N Ethinyl estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001034 Frostbite Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101000726554 Gallus gallus Gap junction alpha-8 protein Proteins 0.000 description 1
- 101710177922 Gap junction alpha-5 protein Proteins 0.000 description 1
- 101710086969 Gap junction alpha-8 protein Proteins 0.000 description 1
- 101710129297 Gap junction delta-4 protein Proteins 0.000 description 1
- 102100025627 Gap junction delta-4 protein Human genes 0.000 description 1
- 101710191197 Gap junction gamma-2 protein Proteins 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 108050002220 Green fluorescent protein, GFP Proteins 0.000 description 1
- YCISZOVUHXIOFY-HKXOFBAYSA-N Halopredone acetate Chemical compound C1([C@H](F)C2)=CC(=O)C(Br)=C[C@]1(C)[C@]1(F)[C@@H]2[C@@H]2CC[C@](OC(C)=O)(C(=O)COC(=O)C)[C@@]2(C)C[C@@H]1O YCISZOVUHXIOFY-HKXOFBAYSA-N 0.000 description 1
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 206010019909 Hernia Diseases 0.000 description 1
- GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N Heroin Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)OC(C)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4OC(C)=O GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101001033280 Homo sapiens Cytokine receptor common subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101000726577 Homo sapiens Gap junction alpha-3 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000726582 Homo sapiens Gap junction alpha-4 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000856653 Homo sapiens Gap junction delta-2 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000856667 Homo sapiens Gap junction delta-4 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000018982 Leg injury Diseases 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- JAQUASYNZVUNQP-USXIJHARSA-N Levorphanol Chemical compound C1C2=CC=C(O)C=C2[C@]23CCN(C)[C@H]1[C@@H]2CCCC3 JAQUASYNZVUNQP-USXIJHARSA-N 0.000 description 1
- 206010061223 Ligament injury Diseases 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- SBDNJUWAMKYJOX-UHFFFAOYSA-N Meclofenamic Acid Chemical compound CC1=CC=C(Cl)C(NC=2C(=CC=CC=2)C(O)=O)=C1Cl SBDNJUWAMKYJOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XADCESSVHJOZHK-UHFFFAOYSA-N Meperidine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(C(=O)OCC)CCN(C)CC1 XADCESSVHJOZHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000714177 Murine leukemia virus Species 0.000 description 1
- 101000726578 Mus musculus Gap junction alpha-3 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000726551 Mus musculus Gap junction alpha-6 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000856659 Mus musculus Gap junction delta-2 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000746083 Mus musculus Gap junction gamma-2 protein Proteins 0.000 description 1
- 208000029549 Muscle injury Diseases 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- BLXXJMDCKKHMKV-UHFFFAOYSA-N Nabumetone Chemical compound C1=C(CCC(C)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 BLXXJMDCKKHMKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029216 Nervousness Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 1
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 241000669298 Pseudaulacaspis pentagona Species 0.000 description 1
- 206010037575 Pustular psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 102000014450 RNA Polymerase III Human genes 0.000 description 1
- 108010078067 RNA Polymerase III Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 101000894987 Rattus norvegicus Gap junction alpha-1 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000726579 Rattus norvegicus Gap junction alpha-3 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000856661 Rattus norvegicus Gap junction delta-2 protein Proteins 0.000 description 1
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 1
- 241000712907 Retroviridae Species 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000710960 Sindbis virus Species 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020339 Spinal injury Diseases 0.000 description 1
- 208000010040 Sprains and Strains Diseases 0.000 description 1
- LKAJKIOFIWVMDJ-IYRCEVNGSA-N Stanazolol Chemical compound C([C@@H]1CC[C@H]2[C@@H]3CC[C@@]([C@]3(CC[C@@H]2[C@@]1(C)C1)C)(O)C)C2=C1C=NN2 LKAJKIOFIWVMDJ-IYRCEVNGSA-N 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 1
- 208000033809 Suppuration Diseases 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 101150003725 TK gene Proteins 0.000 description 1
- 208000021945 Tendon injury Diseases 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- UFLGIAIHIAPJJC-UHFFFAOYSA-N Tripelennamine Chemical compound C=1C=CC=NC=1N(CCN(C)C)CC1=CC=CC=C1 UFLGIAIHIAPJJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710175714 Tyrosine aminotransferase Proteins 0.000 description 1
- 208000008385 Urogenital Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006593 Urologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000282485 Vulpes vulpes Species 0.000 description 1
- ISXSJGHXHUZXNF-LXZPIJOJSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] n-[2-(dimethylamino)ethyl]carbamate;hydrochloride Chemical compound Cl.C1C=C2C[C@@H](OC(=O)NCCN(C)C)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 ISXSJGHXHUZXNF-LXZPIJOJSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- LSWBQIAZNGURQV-WTBIUSKOSA-N algestone acetonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 LSWBQIAZNGURQV-WTBIUSKOSA-N 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- NSZFBGIRFCHKOE-LFZVSNMSSA-N amcinafal Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(CC)(CC)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O NSZFBGIRFCHKOE-LFZVSNMSSA-N 0.000 description 1
- 229950004850 amcinafal Drugs 0.000 description 1
- 229950003408 amcinafide Drugs 0.000 description 1
- QZNJPJDUBTYMRS-UHFFFAOYSA-M amfenac sodium hydrate Chemical compound O.[Na+].NC1=C(CC([O-])=O)C=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 QZNJPJDUBTYMRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 229950004699 anirolac Drugs 0.000 description 1
- 229950002412 anitrazafen Drugs 0.000 description 1
- HDNJXZZJFPCFHG-UHFFFAOYSA-N anitrazafen Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=NN=C(C)N=C1C1=CC=C(OC)C=C1 HDNJXZZJFPCFHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GXDALQBWZGODGZ-UHFFFAOYSA-N astemizole Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1CCN1CCC(NC=2N(C3=CC=CC=C3N=2)CC=2C=CC(F)=CC=2)CC1 GXDALQBWZGODGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003140 astrocytic effect Effects 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001671 azapropazone Drugs 0.000 description 1
- WOIIIUDZSOLAIW-NSHDSACASA-N azapropazone Chemical compound C1=C(C)C=C2N3C(=O)[C@H](CC=C)C(=O)N3C(N(C)C)=NC2=C1 WOIIIUDZSOLAIW-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000560 balsalazide disodium Drugs 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 229960005149 bendazac Drugs 0.000 description 1
- BYFMCKSPFYVMOU-UHFFFAOYSA-N bendazac Chemical compound C12=CC=CC=C2C(OCC(=O)O)=NN1CC1=CC=CC=C1 BYFMCKSPFYVMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005430 benoxaprofen Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000003397 biobrane Substances 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- QRZAKQDHEVVFRX-UHFFFAOYSA-N biphenyl-4-ylacetic acid Chemical compound C1=CC(CC(=O)O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 QRZAKQDHEVVFRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 description 1
- 229960000725 brompheniramine Drugs 0.000 description 1
- ZDIGNSYAACHWNL-UHFFFAOYSA-N brompheniramine Chemical compound C=1C=CC=NC=1C(CCN(C)C)C1=CC=C(Br)C=C1 ZDIGNSYAACHWNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004398 broxuridine Drugs 0.000 description 1
- 229960004436 budesonide Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N buprenorphine Chemical compound C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]11CC[C@]3([C@H](C1)[C@](C)(O)C(C)(C)C)OC)CN2CC1CC1 RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N 0.000 description 1
- 229960001736 buprenorphine Drugs 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- IFKLAQQSCNILHL-QHAWAJNXSA-N butorphanol Chemical compound N1([C@@H]2CC3=CC=C(C=C3[C@@]3([C@]2(CCCC3)O)CC1)O)CC1CCC1 IFKLAQQSCNILHL-QHAWAJNXSA-N 0.000 description 1
- 229960001113 butorphanol Drugs 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 229960003184 carprofen Drugs 0.000 description 1
- IVUMCTKHWDRRMH-UHFFFAOYSA-N carprofen Chemical compound C1=CC(Cl)=C[C]2C3=CC=C(C(C(O)=O)C)C=C3N=C21 IVUMCTKHWDRRMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- CKMOQBVBEGCJGW-UHFFFAOYSA-L chembl1200760 Chemical compound [Na+].[Na+].C1=C(C([O-])=O)C(O)=CC=C1N=NC1=CC=C(C(=O)NCCC([O-])=O)C=C1 CKMOQBVBEGCJGW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 150000001838 cholestanes Chemical class 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002812 cholic acid derivative Substances 0.000 description 1
- 150000001842 cholic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- GPUVGQIASQNZET-CCEZHUSRSA-N cinnoxicam Chemical compound C=1C=CC=CC=1/C=C/C(=O)OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 GPUVGQIASQNZET-CCEZHUSRSA-N 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 229960002436 cladribine Drugs 0.000 description 1
- 229930193282 clathrin Natural products 0.000 description 1
- 210000002806 clathrin-coated vesicle Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002881 clemastine Drugs 0.000 description 1
- YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N clemastine Chemical compound CN1CCC[C@@H]1CCO[C@@](C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N 0.000 description 1
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 description 1
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 description 1
- 229950005384 cliprofen Drugs 0.000 description 1
- 229960004703 clobetasol propionate Drugs 0.000 description 1
- CBGUOGMQLZIXBE-XGQKBEPLSA-N clobetasol propionate Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CCl)(OC(=O)CC)[C@@]1(C)C[C@@H]2O CBGUOGMQLZIXBE-XGQKBEPLSA-N 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229940047766 co-trimoxazole Drugs 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229960004126 codeine Drugs 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 108010014654 connexin 56 Proteins 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 239000012059 conventional drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000007711 cytoplasmic localization Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N d-ephedrine Natural products CNC(C)C(O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 229960001145 deflazacort Drugs 0.000 description 1
- FBHSPRKOSMHSIF-GRMWVWQJSA-N deflazacort Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(C)=N[C@@]3(C(=O)COC(=O)C)[C@@]1(C)C[C@@H]2O FBHSPRKOSMHSIF-GRMWVWQJSA-N 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229960003662 desonide Drugs 0.000 description 1
- WBGKWQHBNHJJPZ-LECWWXJVSA-N desonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O WBGKWQHBNHJJPZ-LECWWXJVSA-N 0.000 description 1
- 229960002593 desoximetasone Drugs 0.000 description 1
- VWVSBHGCDBMOOT-IIEHVVJPSA-N desoximetasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H](C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O VWVSBHGCDBMOOT-IIEHVVJPSA-N 0.000 description 1
- 230000009547 development abnormality Effects 0.000 description 1
- 229950000250 dexamethasone dipropionate Drugs 0.000 description 1
- CIWBQSYVNNPZIQ-PKWREOPISA-N dexamethasone dipropionate Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)COC(=O)CC)(OC(=O)CC)[C@@]1(C)C[C@@H]2O CIWBQSYVNNPZIQ-PKWREOPISA-N 0.000 description 1
- XLMALTXPSGQGBX-GCJKJVERSA-N dextropropoxyphene Chemical compound C([C@](OC(=O)CC)([C@H](C)CN(C)C)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 XLMALTXPSGQGBX-GCJKJVERSA-N 0.000 description 1
- 229960004193 dextropropoxyphene Drugs 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 229960002069 diamorphine Drugs 0.000 description 1
- KXZOIWWTXOCYKR-UHFFFAOYSA-M diclofenac potassium Chemical compound [K+].[O-]C(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl KXZOIWWTXOCYKR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960004515 diclofenac potassium Drugs 0.000 description 1
- 229960001193 diclofenac sodium Drugs 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N diethylstilbestrol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(\CC)C1=CC=C(O)C=C1 RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N 0.000 description 1
- 229960000452 diethylstilbestrol Drugs 0.000 description 1
- HUPFGZXOMWLGNK-UHFFFAOYSA-N diflunisal Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(C=2C(=CC(F)=CC=2)F)=C1 HUPFGZXOMWLGNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000616 diflunisal Drugs 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- SDIXRDNYIMOKSG-UHFFFAOYSA-L disodium methyl arsenate Chemical compound [Na+].[Na+].C[As]([O-])([O-])=O SDIXRDNYIMOKSG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 101150069842 dlg4 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 229950002798 enlimomab Drugs 0.000 description 1
- 231100000317 environmental toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950003801 epirizole Drugs 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 201000005619 esophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229960002568 ethinylestradiol Drugs 0.000 description 1
- ULANGSAJTINEBA-UHFFFAOYSA-N ethyl n-(3-benzoylphenyl)-n-(trifluoromethylsulfonyl)carbamate Chemical compound CCOC(=O)N(S(=O)(=O)C(F)(F)F)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 ULANGSAJTINEBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 229960005293 etodolac Drugs 0.000 description 1
- XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N etodolac Chemical compound C1COC(CC)(CC(O)=O)C2=N[C]3C(CC)=CC=CC3=C21 XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001493 etofenamate Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000004880 explosion Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- 229960000192 felbinac Drugs 0.000 description 1
- 229960001395 fenbufen Drugs 0.000 description 1
- ZPAKPRAICRBAOD-UHFFFAOYSA-N fenbufen Chemical compound C1=CC(C(=O)CCC(=O)O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZPAKPRAICRBAOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IDKAXRLETRCXKS-UHFFFAOYSA-N fenclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1OC1=CC=C(Cl)C=C1Cl IDKAXRLETRCXKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006236 fenclofenac Drugs 0.000 description 1
- HAWWPSYXSLJRBO-UHFFFAOYSA-N fendosal Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N2C(=CC=3C4=CC=CC=C4CCC=32)C=2C=CC=CC=2)=C1 HAWWPSYXSLJRBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950005416 fendosal Drugs 0.000 description 1
- PJMPHNIQZUBGLI-UHFFFAOYSA-N fentanyl Chemical compound C=1C=CC=CC=1N(C(=O)CC)C(CC1)CCN1CCC1=CC=CC=C1 PJMPHNIQZUBGLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002428 fentanyl Drugs 0.000 description 1
- 229960002679 fentiazac Drugs 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 229960003592 fexofenadine Drugs 0.000 description 1
- RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N fexofenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- LPEPZBJOKDYZAD-UHFFFAOYSA-N flufenamic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 LPEPZBJOKDYZAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004369 flufenamic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- OPYFPDBMMYUPME-UHFFFAOYSA-N flumizole Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(C=2C=CC(OC)=CC=2)NC(C(F)(F)F)=N1 OPYFPDBMMYUPME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000676 flunisolide Drugs 0.000 description 1
- XWTIDFOGTCVGQB-FHIVUSPVSA-N fluocortin butyl Chemical group C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2C[C@@H](C)[C@H](C(=O)C(=O)OCCCC)[C@@]2(C)C[C@@H]1O XWTIDFOGTCVGQB-FHIVUSPVSA-N 0.000 description 1
- 229950008509 fluocortin butyl Drugs 0.000 description 1
- RLWXXXHAQBWSPA-UHFFFAOYSA-N fluoromethanol Chemical compound OCF RLWXXXHAQBWSPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 229950007253 fluquazone Drugs 0.000 description 1
- 229960002390 flurbiprofen Drugs 0.000 description 1
- SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N flurbiprofen Chemical compound FC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WMWTYOKRWGGJOA-CENSZEJFSA-N fluticasone propionate Chemical compound C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@]1(F)[C@@H]2[C@@H]2C[C@@H](C)[C@@](C(=O)SCF)(OC(=O)CC)[C@@]2(C)C[C@@H]1O WMWTYOKRWGGJOA-CENSZEJFSA-N 0.000 description 1
- 229960000289 fluticasone propionate Drugs 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 229940084434 fungoid Drugs 0.000 description 1
- 229950008156 furaprofen Drugs 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229950004611 halopredone acetate Drugs 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 201000003911 head and neck carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008642 heat stress Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000014617 hemorrhoid Diseases 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 102000055647 human CSF2RB Human genes 0.000 description 1
- 102000057301 human GJD3 Human genes 0.000 description 1
- 102000048914 human GJD4 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- OROGSEYTTFOCAN-UHFFFAOYSA-N hydrocodone Natural products C1C(N(CCC234)C)C2C=CC(O)C3OC2=C4C1=CC=C2OC OROGSEYTTFOCAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WVLOADHCBXTIJK-YNHQPCIGSA-N hydromorphone Chemical compound O([C@H]1C(CC[C@H]23)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O WVLOADHCBXTIJK-YNHQPCIGSA-N 0.000 description 1
- 229960001410 hydromorphone Drugs 0.000 description 1
- MSYBLBLAMDYKKZ-UHFFFAOYSA-N hydron;pyridine-3-carbonyl chloride;chloride Chemical compound Cl.ClC(=O)C1=CC=CN=C1 MSYBLBLAMDYKKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- CYWFCPPBTWOZSF-UHFFFAOYSA-N ibufenac Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(CC(O)=O)C=C1 CYWFCPPBTWOZSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950009183 ibufenac Drugs 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 1
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 229960004187 indoprofen Drugs 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 1
- 230000002687 intercalation Effects 0.000 description 1
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 1
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 1
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000006662 intracellular pathway Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 229950004204 intrazole Drugs 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003317 isoflupredone acetate Drugs 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QFGMXJOBTNZHEL-UHFFFAOYSA-N isoxepac Chemical compound O1CC2=CC=CC=C2C(=O)C2=CC(CC(=O)O)=CC=C21 QFGMXJOBTNZHEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950011455 isoxepac Drugs 0.000 description 1
- YYUAYBYLJSNDCX-UHFFFAOYSA-N isoxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC=1C=C(C)ON=1 YYUAYBYLJSNDCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950002252 isoxicam Drugs 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 101150066555 lacZ gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 229960003406 levorphanol Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 229960003088 loratadine Drugs 0.000 description 1
- JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N loratadine Chemical compound C1CN(C(=O)OCC)CCC1=C1C2=NC=CC=C2CCC2=CC(Cl)=CC=C21 JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DMKSVUSAATWOCU-HROMYWEYSA-N loteprednol etabonate Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)OCCl)(OC(=O)OCC)[C@@]1(C)C[C@@H]2O DMKSVUSAATWOCU-HROMYWEYSA-N 0.000 description 1
- 229960003744 loteprednol etabonate Drugs 0.000 description 1
- 231100000516 lung damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041033 macrolides Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000415 mammalian chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 229960003803 meclofenamic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960004616 medroxyprogesterone Drugs 0.000 description 1
- FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N medroxyprogesterone Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](O)(C(C)=O)CC[C@H]21 FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N 0.000 description 1
- 229960001786 megestrol Drugs 0.000 description 1
- RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N megestrol acetate Chemical compound C1=C(C)C2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N 0.000 description 1
- 229960003194 meglumine Drugs 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- 210000002418 meninge Anatomy 0.000 description 1
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- PSCNNGGPKIBAHB-WFVOKNHCSA-N methylprednisolone 21-suleptanic acid ester Chemical compound C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCCCCCC(=O)N(C)CCS(O)(=O)=O)CC[C@H]21 PSCNNGGPKIBAHB-WFVOKNHCSA-N 0.000 description 1
- 229950010796 methylprednisolone suleptanate Drugs 0.000 description 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 1
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 229960004270 nabumetone Drugs 0.000 description 1
- NETZHAKZCGBWSS-CEDHKZHLSA-N nalbuphine Chemical compound C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]1(O)CC[C@@H]3O)CN2CC1CCC1 NETZHAKZCGBWSS-CEDHKZHLSA-N 0.000 description 1
- 229960000805 nalbuphine Drugs 0.000 description 1
- UZHSEJADLWPNLE-GRGSLBFTSA-N naloxone Chemical compound O=C([C@@H]1O2)CC[C@@]3(O)[C@H]4CC5=CC=C(O)C2=C5[C@@]13CCN4CC=C UZHSEJADLWPNLE-GRGSLBFTSA-N 0.000 description 1
- 229960004127 naloxone Drugs 0.000 description 1
- 229960004719 nandrolone Drugs 0.000 description 1
- NPAGDVCDWIYMMC-IZPLOLCNSA-N nandrolone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 NPAGDVCDWIYMMC-IZPLOLCNSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229960003940 naproxen sodium Drugs 0.000 description 1
- CDBRNDSHEYLDJV-FVGYRXGTSA-M naproxen sodium Chemical compound [Na+].C1=C([C@H](C)C([O-])=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CDBRNDSHEYLDJV-FVGYRXGTSA-M 0.000 description 1
- 229950006890 naproxol Drugs 0.000 description 1
- LTRANDSQVZFZDG-SNVBAGLBSA-N naproxol Chemical compound C1=C([C@H](C)CO)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 LTRANDSQVZFZDG-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 238000002663 nebulization Methods 0.000 description 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 201000011682 nervous system cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007658 neurological function Effects 0.000 description 1
- 230000002276 neurotropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229950006046 nimazone Drugs 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000003170 nutritional factors Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 229960004534 orgotein Drugs 0.000 description 1
- 108010070915 orgotein Proteins 0.000 description 1
- 229950003655 orpanoxin Drugs 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002739 oxaprozin Drugs 0.000 description 1
- OFPXSFXSNFPTHF-UHFFFAOYSA-N oxaprozin Chemical compound O1C(CCC(=O)O)=NC(C=2C=CC=CC=2)=C1C1=CC=CC=C1 OFPXSFXSNFPTHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005244 oxymetholone Drugs 0.000 description 1
- ICMWWNHDUZJFDW-DHODBPELSA-N oxymetholone Chemical compound C([C@@H]1CC2)C(=O)\C(=C/O)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@](C)(O)[C@@]2(C)CC1 ICMWWNHDUZJFDW-DHODBPELSA-N 0.000 description 1
- ICMWWNHDUZJFDW-UHFFFAOYSA-N oxymetholone Natural products C1CC2CC(=O)C(=CO)CC2(C)C2C1C1CCC(C)(O)C1(C)CC2 ICMWWNHDUZJFDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000649 oxyphenbutazone Drugs 0.000 description 1
- HFHZKZSRXITVMK-UHFFFAOYSA-N oxyphenbutazone Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=C(O)C=C1 HFHZKZSRXITVMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000008010 parenteral excipient Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- 210000003899 penis Anatomy 0.000 description 1
- VOKSWYLNZZRQPF-GDIGMMSISA-N pentazocine Chemical compound C1C2=CC=C(O)C=C2[C@@]2(C)[C@@H](C)[C@@H]1N(CC=C(C)C)CC2 VOKSWYLNZZRQPF-GDIGMMSISA-N 0.000 description 1
- 229960005301 pentazocine Drugs 0.000 description 1
- 229960000482 pethidine Drugs 0.000 description 1
- 230000004526 pharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- ISWRGOKTTBVCFA-UHFFFAOYSA-N pirfenidone Chemical compound C1=C(C)C=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1 ISWRGOKTTBVCFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003073 pirfenidone Drugs 0.000 description 1
- QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N piroxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001369 piroxicam cinnamate Drugs 0.000 description 1
- 229960000851 pirprofen Drugs 0.000 description 1
- PIDSZXPFGCURGN-UHFFFAOYSA-N pirprofen Chemical compound ClC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1N1CC=CC1 PIDSZXPFGCURGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 1
- 229950008421 prednazate Drugs 0.000 description 1
- 150000003128 pregnanes Chemical class 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- JTIGKVIOEQASGT-UHFFFAOYSA-N proquazone Chemical compound N=1C(=O)N(C(C)C)C2=CC(C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1 JTIGKVIOEQASGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002466 proquazone Drugs 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 210000004777 protein coat Anatomy 0.000 description 1
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 108010030416 proteoliposomes Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 229960003908 pseudoephedrine Drugs 0.000 description 1
- KWGRBVOPPLSCSI-WCBMZHEXSA-N pseudoephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WCBMZHEXSA-N 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- MIXMJCQRHVAJIO-TZHJZOAOSA-N qk4dys664x Chemical compound O.C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]2(C)C[C@@H]1O.C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]2(C)C[C@@H]1O MIXMJCQRHVAJIO-TZHJZOAOSA-N 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 108010041189 rat connexin 39 Proteins 0.000 description 1
- 230000007342 reactive astrogliosis Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000014493 regulation of gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000011808 rodent model Methods 0.000 description 1
- INVGWHRKADIJHF-UHFFFAOYSA-N sanguinarine Natural products C1=C2OCOC2=CC2=C3[N+](C)=CC4=C(OCO5)C5=CC=C4C3=CC=C21 INVGWHRKADIJHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 229950002093 seclazone Drugs 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229950006250 sermetacin Drugs 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- HVBBVDWXAWJQSV-UHFFFAOYSA-N sodium;(3-benzoylphenyl)-(difluoromethylsulfonyl)azanide Chemical compound [Na+].FC(F)S(=O)(=O)[N-]C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 HVBBVDWXAWJQSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUEMQUIQAPPJDL-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3-dihydroxypropanoate Chemical compound [Na+].OCC(O)C([O-])=O IUEMQUIQAPPJDL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M sodium;2,6-dichloro-n-phenylaniline;acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O.ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=CC=CC=C1 JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- SEEXPXUCHVGZGU-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[5-(4-chlorobenzoyl)-1,4-dimethylpyrrol-2-yl]acetate Chemical compound [Na+].C1=C(CC([O-])=O)N(C)C(C(=O)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1C SEEXPXUCHVGZGU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229960000912 stanozolol Drugs 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229950005175 sudoxicam Drugs 0.000 description 1
- 229960000894 sulindac Drugs 0.000 description 1
- MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N sulindac Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(F)=CC=C2\C1=C/C1=CC=C(S(C)=O)C=C1 MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 229960004492 suprofen Drugs 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229950005100 talmetacin Drugs 0.000 description 1
- 229950005400 talosalate Drugs 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- WZWYJBNHTWCXIM-UHFFFAOYSA-N tenoxicam Chemical compound O=C1C=2SC=CC=2S(=O)(=O)N(C)C1=C(O)NC1=CC=CC=N1 WZWYJBNHTWCXIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002871 tenoxicam Drugs 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- TUGDLVFMIQZYPA-UHFFFAOYSA-N tetracopper;tetrazinc Chemical compound [Cu+2].[Cu+2].[Cu+2].[Cu+2].[Zn+2].[Zn+2].[Zn+2].[Zn+2] TUGDLVFMIQZYPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 229940040944 tetracyclines Drugs 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 229960001017 tolmetin Drugs 0.000 description 1
- UPSPUYADGBWSHF-UHFFFAOYSA-N tolmetin Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(CC(O)=O)N1C UPSPUYADGBWSHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002044 tolmetin sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000002627 tracheal intubation Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 229950008073 triclonide Drugs 0.000 description 1
- VSVSLEMVVAYTQW-VSXGLTOVSA-N triclonide Chemical compound C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@]1(Cl)[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CCl)[C@@]2(C)C[C@@H]1Cl VSVSLEMVVAYTQW-VSXGLTOVSA-N 0.000 description 1
- 150000005691 triesters Chemical class 0.000 description 1
- 229950000451 triflumidate Drugs 0.000 description 1
- 229960001128 triprolidine Drugs 0.000 description 1
- CBEQULMOCCWAQT-WOJGMQOQSA-N triprolidine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(\C=1N=CC=CC=1)=C/CN1CCCC1 CBEQULMOCCWAQT-WOJGMQOQSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 229960003516 zomepirac sodium Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/07—Tetrapeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1767—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/08—Materials for coatings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
- C07K14/43563—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects
- C07K14/43577—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects from flies
- C07K14/43581—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects from flies from Drosophila
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/10—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a tag for extracellular membrane crossing, e.g. TAT or VP22
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Neurology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Surgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области медицины и касается разработки лекарственных средств для ускорения заживления ран и регенерации тканей после повреждения ткани у индивидуума. Предлагается композиция для ускорения заживления тканей, содержащая по меньшей мере один полипептид, состоящий из 4-30 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина или его консервативного варианта, где указанный по меньшей мере один полипептид альфа-коннексин связан на амино-конце с переносчиком клеточной интернализации. Предлагаются также композиция для ускорения заживления тканей, составленная для местного применения, содержащая полипептид, состоящий из 4-30 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина или его консервативного варианта, и материал для лечения ран для ускорения заживления тканей, покрытый таким полипептидом. Набор для ускорения заживления тканей может содержать вышеуказанные композиции или материал для лечения ран и инструкцию по их применению. Предлагается также применение вышеуказанных композиций или материала для получения лекарственного средства, ускоряющего заживление тканей. Использование полипептида, состоящего из 4-30 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина или его консервативного варианта, обеспечивает снижение воспаления после повреждения ткани, ускорение заживления, снижение рубцевания, усиление регенерации сложной ткани. 5 н. и 26 з.п. ф-лы, 6 табл., 17 ил.
Description
ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент США №60/638366, поданной 21 декабря 2004 года, и предварительной заявки на патент США №60/671796, поданной 15 апреля 2005 года, которые включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Настоящее изобретение было выполнено при поддержке правительства в рамках гранта, присужденного RO-1 HL56728, National Institutes of Heath. В этой связи, правительство имеет определенные права на настоящее изобретение.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Практически каждому ребенку известно, что если ящерица потеряет хвост, то у нее постепенно отрастет другой. Кроме того, дети и подростки, изучающие такие явления, знают, что многие низшие животные способны к регенерации достаточно сложных структур, включая целые конечности и органы, после их повреждения. Например, рыба способна отращивать сердце после того, как значительная часть старого сердца рыбы была отсечена (Poss et al., 2002). Это удивительный результат в свете известного факта, насколько важным является сердце для ежеминутного выживания большинства животных.
Однако регенерация тканей, конечностей и органов после повреждения у людей не столь проста, как у рыб. Хотя ткани человека, пораженные механическим воздействием, болезнью и другими факторами, способны к заживлению, сложная тканевая структура и функции редко, если вообще, восстанавливаются. Напротив, восстановление практически всех тканей у человека и других высших позвоночных животных при их повреждении сопровождается преимущественным образованием фиброзной ткани. Наиболее подходящим иллюстрирующим примером будет образование обесцвеченных фиброзных рубцов, которые остаются после заживления пореза кожи или разрыва. Менее известен тот факт, что образование глиальной фиброзной ткани после повреждения мозга или позвоночника является одним из основных препятствий для восстановления нейрональных функций после повреждения центральной нервной системы (Silver and Miller JH, 2004). В настоящее время отсутствуют способы лечения или профилактики таких процессов рубцевания и усиления регенерации сложной тканевой структуры и функций после повреждений.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Предлагается выделенный полипептид, содержащий карбокси-концевую аминокислотную последовательность альфа-коннексина (называемого также как карбокси-концевой полипептид альфа-коннексина (АСТ)), или его консервативный вариант.
Предлагается также способ ускорения заживления раны после повреждения ткани у индивидуума, включающий введение указанному индивидууму одной или нескольких описываемых композиций (например, полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов) вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
Дополнительные преимущества описанного способа и композиций частично отмечены в приведенном ниже описании и будут очевидны из описания заявки и могут быть выявлены при практическом осуществлении приведенного в описании способа на основе композиций по настоящему изобретению. Преимущества раскрываемых способа и композиций могут быть поняты и реализованы на основе тех элементов и сочетаний, которые конкретно указаны в приведенной формуле изобретения. Следует понимать также, что и приведенное ниже общее описание и далее подробное описание даны лишь в качестве примеров и приведены лишь для пояснения, но не с целью ограничения области изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Прилагаемые для рассмотрения чертежи, включенные в текст описания и составляющие его часть, иллюстрируют несколько вариантов осуществления настоящего изобретения, применительно к раскрываемым способу и композициям, и в сочетании с описанием служат для пояснения принципов предлагаемых способа и композиций.
На фиг.1 показано, что карбокси-концевой полипептид альфа-коннексина (АСТ) усиливает степень закрытия бреши Cx43 в культуре неонатальных миоцитов. Миоциты из сердец новорожденных крыс растят до образования почти сливающегося монослоя клеток на чашке с тканевой культурой по стандартным процедурам. Далее культуры растят в течение еще 5 дней в культуральной среде, содержащей: (а) 30 мкМ АСТ 1 пептида (SEQ ID NO: 2); (b) 30 мкМ неактивного контрольного пептида (SEQ ID NO: 55); или (с) фосфатно-буферного раствора (PBS), не содержащего АСТ или контрольный пептид. Культуральные среды с добавленными пептидами или носителями-контролями меняют каждые 24 часа в ходе эксперимента. На чертеже (а) показано, что АСТ-пептид заметно повышает степень закрытия бреши Cx43 (пунктиры и линии указаны стрелками) между миоцитами, в сравнении с контрольными условиями (b) и (с). Указанное повышение степени закрытия бреши Cx43 в ответ на введение АСТ-пептида свойственно множеству клеточных типов, экспрессирующих Cx43.
На фиг.2 показано, что АСТ-пептид ингибирует пролиферацию и миграцию трансформированных фибробластов (NIH-3T3 клеток) при повреждении их царапиной. Монослой NIH-3T3 клеток подвергают предварительной обработке ACT-пептидом (SEQ ID NO: 2) в течение 24 часов и наносят кончиком пипетки p200 «повреждение царапиной». «Повреждение царапиной» далее подвергают «заживлению» в течение 24 часов в присутствии (a, b) 30 мкМ ACT 1 пептида (SEQ ID NO: 2), (c, d) 30 мкМ неактивного контрольного пептида (SEQ ID NO: 55) или (e, f) контрольного раствора носителя, не содержащего ACT-пептид или контрольный пептид. Клетки, обработанные ACT-пептидом после нанесения «повреждения царапиной», остаются относительно незаживленными в течение 24 часов (а), при этом отмечается лишь несколько клеток (крупные стрелки), повторно заселивших зону, находящуюся в пределах границ исходного «повреждения царапиной» (то есть в пределах зоны, обозначенной на чертеже маленькими черными стрелками-указателями). И, наоборот, в контрольных условиях (с) и (е) большое число клеток (крупные стрелки) повторно заселяют зону внутри исходного «повреждения царапиной». Повторное заселение в зоне «повреждения царапиной» происходит частично за счет миграции трансформированных клеток в зону «повреждения царапиной». На фиг.(b), (d) и (f) показан результат иммунологического мечения клеток в зоне «повреждения царапиной» или на краях повреждения ядерным антигеном пролиферирующих клеток (PCNA). Клетки, обработанные АСТ-пептидом (b), демонстрируют лишь низкую люминесценцию, соответствующую фоновому уровню, и отсутствие пролиферации. Только в двух контрольных условиях, показанных на (d) и (f), отмечаются ярко меченые пролиферирующие клетки (белые стрелки). Это указывает на то, что АСТ-пептид также снижает пролиферацию трансформированных клеток.
На фиг.3 показаны результаты количественной оценки ингибирования или миграции АСТ-пептидов на экспериментальной клеточной модели после нанесения повреждения. NIH-3T3 фибробласты подвергают «повреждению царапиной» и далее выдерживают при непрерывном наличии 30 мкМ ACT 1 пептида (SEQ ID NO: 2) в течение 24 часов или выдерживают в контрольных условиях, как показано на фиг.2. На фиг.(а) показан поврежденный конец клеток, обработанных АСТ-пептидом и обработанных неактивным пептидом контрольных клеток в течение 24-часового периода. Клетки метили флуоресцентным фаллоидином для целей визуализации. Клетки, обработанные АСТ-пептидом, демонстрируют низкие уровни репопуляции зоны «повреждения царапиной» (белые двойные стрелки-указатели). На фиг.(b) показана диаграмма, демонстрирующая процент площади с клетками, которые повторно заселили зону повреждения царапиной, через 24 часа. Снижение клеток в зоне повреждения в присутствии АСТ-пептида является очень резким, со значением p<0,000001.
На фиг.4 показано, что экспрессия полинуклеотида, кодирующего АСТ-пептид, который функционально связан с промотором в эпителиальных клетках WB-F344, ингибирует миграцию после повреждения царапиной на экспериментальной клеточной модели. Клетки WB-F344 представляют собой клеточную линию трансформированных эпителиальных клеток крысы, полученную путем обработки выделенных клеток печени крысы агентом, вызывающим рак (Tsao et al., 1984; Hayashi et al., 1997; Hayashi et al., 1998; Hayashi et al., 2001).
Клетки WB-F344 трансфицируют конструкцией плазмиды экспрессии кДНК и проводят отбор с использованием антибиотика по стандартному протоколу, применяемому для получения клеточных линий, которые стабильно экспрессируют полинуклеотид, кодирующий ACT-пептид (SEQ ID NO: 6), функционально связанный с промоторной последовательностью, или полинуклеотид, кодирующий зеленый флуоресцентный белок (GFP), функционально связанный с промоторной последовательностью, в качестве контроля. Полинуклеотид, кодирующий АСТ-пептид, также кодирует GFP. В качестве таковой, экспрессия АСТ-пептида может быть выявлена в рамках стандартной процедуры оценки флуоресценции GFP с использованием светового микроскопа. На фиг.(a) и (b) показаны изображения, полученные при высоком увеличении, флуоресценции GFP в клеточных линиях WB-F344, экспрессирующих GFP плюс карбокси-концевую последовательность ACT-пептида (a), или один GFP (b). Практически сливающиеся монослои клеток из клеточной линии WB-F344 подвергают «повреждению царапиной» и оставляют «для заживления» на 24 часа. Аналогично контрольным вариантам клеток NIH-3T3, обработанных носителем или неактивным контрольным пептидом, контрольная линия эпителиальных клеток, экспрессирующих GFP, повторно заселяет зону «повреждения царапиной» (d). Однако в эпителиальной клеточной линии, которая стабильно экспрессирует полинуклеотид, кодирующий ACT-пептид, функционально связанный с промоторной последовательностью, отмечается ингибирование репопуляции зоны повреждения царапиной (c).
На фиг.5 показано, что АСТ-пептид снижает воспаление, улучшает заживление и снижает образование рубца после повреждения кожи разрезом у новорожденных мышей. Новорожденных мышей десенсибилизируют с использованием гипотермии. С помощью скальпеля делают разрез кожи длиной 4 мм по всей толщине кожи (вниз до уровня нижележащей мышцы) на средней линии спины между лопатками. В полученный разрез вносят 30 мкл раствора 20% геля плуроника (pluronic) (F-127), не содержащего (контроль) или содержащего растворенный АСТ 1 пептид (SEQ ID NO: 2) в концентрации 60 мкМ. Гель, содержащий АСТ-пептид или контрольный пептид, вносят через 24 часа после исходного нанесения. После второго нанесения больше не добавляют гели ни с контрольным, ни с АСТ-пептидом. Через 48 часов повреждение, обработанное АСТ-пептидом (а), значительно больше затягивается, в меньшей степени воспалено и набухает (отмечаются выступы на конце раны) и в основном выглядит более заживленным, чем контрольное повреждение, в которое не вносили АСТ-пептид (b). Указанные различия в степени воспаления, набухания и заживления между контролем и повреждением, обработанным АСТ-пептидом и контрольным пептидом, продолжается до 72 (c, d) и 96 (e, f) часов. К 7 дню рана, обработанная АСТ-пептидом (g), выглядит более гладкой и менее зарубцевавшейся, чем повреждение, обработанное контрольным пептидом (h). Следует отметить, что на чертеже показаны изображения одного и того же повреждения у одного и того же животного в разные временные точки в ходе процесса заживления.
На фиг.6 показано, что АСТ-пептид снижает воспаление, улучшает заживление и снижает рубцевание после крупного повреждения разрезом кожи у взрослых мышей. Взрослым мышам под анестезией делают круговые разрезы кожи шириной 8 мм хирургическими ножницами, вниз по направлению к нижележащей мышце в середине спины между лопатками (например, как показано на фиг.(a) и (b)). Границы повреждения маркируют круговой полосой из пластика шириной 8 мм. В разрез вносят 100 мкл раствора 30% геля плуроника, не содержащего (контроль) или содержащего растворенный АСТ 1 пептид (SEQ ID NO: 2) в концентрации 100 мкМ. Позже, через 24 часа после нанесения, вносят контрольный гель или гель, содержащий АСТ-пептид. После второго нанесения больше не добавляют ни контрольный гель, ни гель, содержащий АСТ-пептид. Крупное повреждение разрезом, на которое был нанесен АСТ-пептид (a, c, e, g, i) закрывается быстрее, меньше воспаляется по виду, быстрее заживает и в меньше степени рубцуется, чем контрольное повреждение, в которое не добавляли АСТ-пептид (b, d, g, h, j), в течение 14-дневного курса. Фактически, контрольное повреждение на 14 день все еще демонстрирует частичное наличие корки, указывающее на то, что острое заживление повреждения было не полным (j). Следует отметить, что на чертеже приведены изображения одного и того же повреждения у одного и того же животного в разные временные точки в ходе периода заживления.
На фиг.7 показано, что АСТ-пептид снижает плотность воспалительных клеток после разреза кожи у взрослых мышей. Материал биопсии кожи из всего участка раны отбирают от нескольких мышей через 24 часа после нанесения разреза, в соответствии с процедурой эксперимента, описанного на фиг.6. На фиг.(a) и (b) показан при низком увеличении вид разрезов, взятых из областей рядом с центром раны у контрольных животных и у животных с повреждениями после лечения АСТ-пептидом. В обоих случаях заметен край раны (обозначенный малыми стрелками), окруженный кожей нормального гистологического вида. Черный прямоугольник помещен над изображениями (a) и (b) в левой части края раны. Гистологические структуры в пределах двух указанных прямоугольников показаны при более высоком увеличении на фиг.(c) и (d) для тканей, обработанных контрольным и АСТ-пептидом. Наибольший интерес представляет собой «воротникообразная» ткань объединенного фиброзного материала (показана стрелками), выступающая из базальных частей повреждения в направлении к краю раны и к наружной поверхности раны. Объединенный фиброзный субстрат имеет вид более организованный в контрольном повреждении (d), чем в поврежденной ткани после лечения АСТ-пептидом (с). Кроме того, отмечается сниженная плотность воспалительных клеток, заполняющих фиброзный субстрат в ткани, обработанной АСТ-пептидом. Это подтверждается на (e) и (f), где участки гистологического среза внутри черных прямоугольников, показанных на (c) и (d), соответственно, показаны при большем увеличении. Воспалительные клетки в фиброзном субстрате включают тучные клетки, нейтрофилы и макрофаги. Указанные воспалительные клетки характеризуются значительно большей плотностью в контрольном повреждении, чем в поврежденной ткани, обработанной АСТ-пептидом.
На фиг.8 показано, что АСТ-пептид ускоряет заживление, снижает рубцевание и ускоряет регенерацию сложной тканевой структуры после нанесения повреждения разрезом у взрослых мышей. К концу 14-дневного периода в эксперименте, показанном на фиг.6, отбирают биопсийный материал кожи из полного места разреза и проводят гистохимическое окрашивание (H&E) гистологических срезов из этих образцов. На фиг.(a) и (b) показаны при низком увеличении виды срезов из мест, расположенных рядом с центром повреждения, относящиеся к ACT и к контролю, соответственно. В обоих случаях виден край раны (указан маленькими стрелками), окруженный кожей нормального гистологического вида. В изображениях на фиг.(a) и (b), рядом с центром каждого повреждения, помещен черный треугольник. Показаны гистологические структуры внутри указанных двух прямоугольников при большем увеличении на фиг.(c) и (d) для ткани, обработанной АСТ-пептидом, и контрольной ткани, соответственно. Видно, что ткань в локусе повреждения, обработанном АСТ-пептидом, характеризуется значительно большей сложностью структуры. На наружной поверхности, обработанной ACT, отмечается непрерывный слой эпителиальных клеток, указывающих на полную повторную эпителизацию поврежденной поверхности, хотя эпителий еще относительно тонкий возле центра раны (с). Регенерация волосяных фолликул также отмечается уже в состоянии дифференцировки de novo из стволовых клеток в новом эпителии, покрывающем заживленное повреждение (с, малые стрелки). При сравнении, в эпителии контрольного повреждения (d) повторная эпителизация поверхности повреждения происходит не полностью, и отсутствуют признаки регенерации волосяных фолликул. Под реформированным эпителием кожи в повреждении, обработанном АСТ-пептидом, отмечается выраженное восстановление нормальной сложности структуры с наличием гландулярных структур, фиброзной и соединительной ткани, сосудистых тканей, мышечных и жировых клеток (а, с). Аналогично, волосяные фолликулы, в контексте тканевой структурированности, регенерируют при дифференцировке стволовых клеток. И наоборот, в контрольном повреждении ткань раны характеризуется полным доминированием однородной крупной массы фиброзной рубцевой ткани (b, d), тогда как другие признаки сложности тканевой структуры не выявляются в пределах указанной ткани.
На фиг.9 показано, что ACT-пептиды снижают воспаление, улучшают заживление и снижают рубцевание при нанесении взрослым мышам повреждения разрезом. Взрослым мышам под анестезией наносят ранение в виде двух маленьких разрезов (диаметр 5 мм) тонкими хирургическими ножницами на шее и на спине (в верхней части). Границы повреждений маркируют круговой лентой шириной 5 мм из пластика. В разрезы вносят 50-60 мкл раствора 20% геля плуроника, который не содержит (контроль) или содержит один из АСТ-пептидов (АСТ 2 - SEQ ID NO: 1, АСТ 1 - SEQ ID NO: 2, АСТ 3 - SEQ ID NO: 3, АСТ 4 - SEQ ID NO: 4, АСТ 5 - SEQ ID NO: 5), растворенных в концентрации 100 мкМ. Гель, содержащий контрольный или ACT-пептид, наносят позже, через 24 часа после первого нанесения. После второго нанесения не вносят ни контрольный гель, ни гель, содержащий АСТ-пептид. Видно, что в случае внесения ACT 1 (e-h), ACT 2 (i-l), ACT 3 (m-p) и ACT 5 (u-x) пептидов повреждения разрезом закрываются быстрее, значительно менее воспалены по виду, гораздо быстрее заживают и меньше рубцуются, чем контрольные повреждения, в которые не вносили АСТ-пептид (a-d), в течение 240-часового времени исследования (10 дней). ACT 4 пептид (q-t) также демонстрирует умеренное улучшение заживления, в сравнении с контролем в ходе обследования, хотя в меньшей степени, чем другие пептиды. Следует отметить, что показана одна и та же рана на одном и том же животном в разные временные точки в ходе процесса заживления.
На фиг.10 показано, что АСТ-пептид снижает количество и плотность астроцитов, формирующих глиальный рубец, после проникающего повреждения мозга у взрослых крыс. На фиг.(b) и (c) показан, при малом увеличении, вид срезов мозговой ткани (коркового вещества), окруженной имплантатами вогнутой фиброзной мембраны (HFM), заполненной АСТ-пептидом (100 мкМ) плюс гель-носитель (b) или один гель с коллагеновым носителем, в качестве контроля (c). В контрольной ткани (с) отмечается высокая плотность иммунологически меченых астроцитов, позитивных по GFAP, возле места повреждения, вызванная HFM. Плотность указанных клеток, как видно, несколько снижается при удалении от повреждения. И наоборот, наблюдается значительно меньшая плотность GFAP-позитивных астроцитов рядом с HFM, заполненной ACT-пептидом (b). Фактически, уровни GFAP-позитивных клеток не очень отличаются от того, что наблюдается в нормальной не поврежденной ткани мозга. Участки ткани внутри белых прямоугольников на фиг.(b) и (c) показаны при большем увеличении для (d) и (e), соответственно. В ткани поврежденного мозга, обработанной АСТ-пептидом (d), видно, что GFAP-позитивные астроциты не только менее многочисленны, но также меньше по размеру, чем клетки, отмечаемые в контрольном повреждении (e).
На фиг.11 показано, что АСТ-пептид способствует поддержанию числа и регенерации нейронов после проникающего повреждения мозга у взрослых крыс. На фиг.(a) и (b) показаны при малом увеличении изображения срезов мозговой ткани (коркового вещества), окруженной имплантатами HFM (имплантат или граница повреждения показаны стрелками), заполненными коллагеном, как контрольным гелем-носителем, или АСТ-пептидом плюс гель-носитель, через 1 неделю после проникающего повреждения мозга. В контрольной ткани (b) отмечается высокая плотность иммунологически меченых GFAP-позитивных астроцитов и низкая плотность нейронов, иммунологически меченых по NeuN, возле места повреждения, вызванного HFM. Плотность указанных клеток, как видно, снижается и возрастает, соответственно, дистально относительно HFM. И наоборот, отмечается значительно сниженная плотность GFAP-позитивных астроцитов и большее число нейронов, иммунологически меченых по NeuN, проксимально (а также дистально) к HFM, заполненной АСТ-пептидом (а). Площади на (a) и (b), проксимально к HFN, показаны при высоком увеличении на (с) и (b), соответственно. И снова, в контрольной ткани (d) отмечается поразительное повышение плотности GFAP-позитивных астроцитов и сниженная плотность NeuN-позитивных нейронов в сравнении с тканью, обработанной АСТ-пептидом (c). Комплементарная картина наблюдается возле HFM, содержащей АСТ-пептид, при доминировании NeuN-позитивных нейронов над астроцитами (c). Интересно отметить, что изображение при высоком увеличении, показанное на (c), выявляет высокую частоту нейронов в процессе деления, в сравнении с контролем (d).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Раскрываемые в описании способ и композиции будут легко понятны из прилагаемого описания конкретных вариантов осуществления изобретения и соответствующих примеров, а также чертежей и относящихся к ним описаний.
Предлагается выделенный полипептид, содержащий карбокси-концевую аминокислотную последовательность альфа-коннексина (также называемого как карбокси-концевой полипептид альфа-коннексина (ACT)), или его консервативный вариант. В одном из аспектов осуществления изобретения предлагаемый полипептид АСТ после повреждения ткани снижает воспаление, ускоряет заживление, снижает рубцевание, повышает прочность на разрыв и усиливает регенерацию сложной ткани. В другом аспекте настоящего изобретения предлагаемый полипептид повышает протяженность затягивающих брешь канальных агрегатов, образованных из коннексина.
Следует понимать, что раскрываемые в описании композиции и способы не ограничиваются специфическими методами синтеза, конкретными аналитическими методиками или конкретными реактивами, если особо не указано иное, и в качестве таковых могут варьировать. Следует также понимать, что используемая в описании терминология дана только лишь для целей описания конкретных вариантов и не направлена на их ограничение.
В описании описаны материалы, композиции и компоненты, которые могут использоваться как таковые или в сочетании для достижения определенной цели, или в качестве продуктов, образуемых при осуществлении описываемых методов на основе данных композиций. В настоящем описании приводятся указанные и другие материалы и следует понимать, что когда описывается сочетание, подмножество, взаимодействие, группы и т.п. указанных материалов, то в случае отсутствия явно выраженной конкретной ссылки на каждое из различных индивидуальных и коллективных сочетаний и перестановок данных соединений, каждое из них конкретно включается и рассматривается в настоящем изобретении. Например, если описывается и обсуждается вектор и множество векторных компонентов, включающих промоторы, то каждый из них и любое сочетание и перестановка промоторов и других векторных компонентов и модификаций, которые возможны, специфически рассматривается, если особо не указано иное. Таким образом, если рассматриваются молекулы класса A, B и C, а также молекулы класса D, E и F и описывается пример сочетания молекул A-D, то даже если по отдельности не каждый из них указан, рассматривается также каждый индивидуально и в сочетании. Таким образом, в данном примере каждое из сочетаний A-E, A-F, B-D, B-E, B-F, C-D, C-E и C-F конкретно рассматривается и следует понимать как вытекающее из описания A, B и C; D, E и F, а также примера сочетания A-D. Аналогично, любое подмножество или сочетание их также конкретно рассматривается и описывается. Таким образом, например, подгруппа A-E, B-F и C-E конкретно включается и должна рассматриваться как вытекающая из описания A, B, и C; D, E и F, а также примера сочетания A-D. Данная концепция относится ко всем аспектам настоящей заявки, включая, без ограничения, стадии способов получения и применения описываемых композиций. Таким образом, если имеется множество дополнительных стадий, которые могут быть выполнены, то следует понимать, что каждая из указанных дополнительных стадий может выполняться в рамках конкретного варианта или сочетания вариантов раскрываемых способов и что каждое такое сочетание конкретно включается и должно рассматриваться как описанное.
В настоящем описании приводится множество последовательностей и указанные последовательности и другие могут быть найдены в Genbank на странице www.pubmed.gov. Для специалистов в данной области понятно, как разрешить вопрос несоответствия последовательностей и их различий и как применить композиции и способы, относящиеся к конкретной последовательности, на другие родственные последовательности. На основе информации, приведенной в настоящем описании и известной в данной области, могут быть разработаны праймеры и/или зонды для любой последовательности.
Приводимый в описании полипептид может быть любым полипептидом, включающим большую часть аминокислот на карбокси-конце альфа-коннексина, где указанный полипептид не включает белок альфа-коннексина полной длины. Таким образом, в одном аспекте описываемый полипептид не включает цитоплазматический N-концевой домен альфа-коннексина. В другом аспекте описываемый полипептид не включает два внеклеточных домена альфа-коннексина. В другом аспекте предлагаемый полипептид не включает четыре трансмембранных домена альфа-коннексина. В еще одном аспекте описываемый полипептид не включает цитоплазматический петлевой домен альфа-коннексина. В еще одном аспекте описываемый полипептид не включает ту часть последовательности цитоплазматического домена альфа-коннексина на карбоксильном конце, которая локализована проксимально к четвертому трансмембранному домену. Имеется консервативный пролиновый или глициновый остаток в альфа-коннексине, локализованные постоянно на расстоянии 17-30 аминокислот от наиболее близкой к карбокси-концу аминокислоте (Таблица 2). Например, в случае человеческого Сх43 пролиновый остаток аминокислоты 363 расположен на 19 аминокислот в сторону от ближайшей к карбоксильному концу аминокислоты изолейцина. В другом примере пролиновый остаток куриного Сх43 в положении аминокислоты 362 локализован на 18 аминокислот в сторону от самой близкой к карбокси-концу аминокислоты изолейцина. В другом примере, в человеческом Сх45 глициновый остаток в положении аминокислоты 377 локализован на 19 аминокислот в сторону от самой близкой к карбокси-концу аминокислоты изолейцина. В другом примере в крысином Сх33 пролиновый остаток аминокислоты 258 локализован на 28 аминокислот в сторону от самой близкой к карбокси-концу аминокислоты изолейцина. Таким образом, в другом аспекте предлагаемый полипептид не включает аминокислоты, проксимальные к указанному консервативному пролиновому или глициновому остатку альфа-коннексина. Таким образом, предлагаемый полипептид может включать наиболее близкие к С-концу 4-30 аминокислот альфа-коннексина, включая самые близкие к С-концу 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 аминокислот альфа-коннексина.
Самые близкие к карбокси-концу аминокислоты альфа-коннексина в предлагаемых пептидах могут быть фланкированы аминокислотами, отличными от альфа-коннексина, или аминокислотами, отличными от АСТ коннексина. В настоящем описании приведены примеры фланкирующих аминокислот, отличных от альфа-коннексина, и аминокислот, отличных от АСТ коннексина. Примеры аминокислот, отличных от АСТ коннексина, включают карбокси-концевые 20-120 аминокислот человеческого Сх43 (SEQ ID NO: 72). Другим примером могут быть карбокси-концевые 20-120 аминокислот куриного Сх43 (SEQ ID NO: 73). Другим примером могут быть карбокси-концевые 20-120 аминокислот человеческого Сх45 (SEQ ID NO: 74). Другим примером могут быть карбокси-концевые 20-120 аминокислот куриного Сх45 (SEQ ID NO: 75). Другим примером могут быть карбокси-концевые 20-120 аминокислот человеческого Сх37 (SEQ ID NO: 76). Другим примером могут быть карбокси-концевые 20-120 аминокислот крысиного Сх33 (SEQ ID NO: 77).
Было показано, на одном из примеров коннексина, отличного от альфа-коннексина, что он представляет собой последовательность из 239 аминокислот более активного зеленого флуоресцентного белка (АСТ 1 функционально слит с GFP, как показано фиг.4; SEQ ID NO: 78). В другом аспекте, ввиду того, что АСТ 1, как было показано, становится функциональным при слиянии с карбокси-концом последовательности из 239 аминокислот с GFP (фиг.4), АСТ-пептиды, как ожидается, будут сохранять свою функцию при фланкировании полипептидами, отличными от коннексина и содержащими по меньшей мере до 239 аминокислот. Фактически, пока АСТ-последовательность поддерживается в виде свободного карбокси-конца данного полипептида, АСТ-пептид способен достигать своих мишеней.
Таким образом, кроме АСТ-пептида, полипептиды, превышающие в длину 239 аминокислот, могут также функционировать в направлении снижения воспаления, ускорения заживления, повышения прочности на разрыв, снижения рубцевания и ускорения регенерации ткани после повреждения.
Коннексины представляют собой субъединичный белок в канале соединения двунитевого разрыва, который ответственен за межмолекулярную коммуникацию (Goodenough and Paul, 2003). На основании результатов оценки картины консервации нуклеотидной последовательности гены, кодирующие белки коннексина, были разделены на два семейства, обозначенные как гены альфа и бета коннексина. Самые удаленные к карбокси-концу аминокислотные последовательности альфа-коннексинов характеризуются различными отличительными и устойчивыми к изменению особенностями (см. таблицу 2). Указанная консервация в организации согласуется со способностью АСТ-пептидов образовывать отличительные 3D структуры, взаимодействовать с множеством соответствующих белков-партнеров, вовлекаться во взаимодействие с липидами и мембранами, взаимодействовать с нуклеиновыми кислотами, включая ДНК, участвовать в переносе по мембранным каналам и/или в блокировании мембранных каналов и обеспечивать образование консенсусных мотивов для протеолитического расщепления, сшивание белков, АДФ-рибозилирования, гликозилирования и фосфорилирования. Таким образом, рассматриваемый полипептид взаимодействует с доменом белка, который в норме вовлекается в связывание указанного белка с карбокси-концом альфа-коннексина. Например, белок, который подвергается суперэкспрессии нефрабластомой (NOV), взаимодействует с С-концевым доменом Сх43 (Fu et al., J. Biol. Chem. 2004, 279(35): 36943-50). Считается, что этот и другие белки взаимодействуют с карбокси-концом альфа-коннексина и также взаимодействуют с другими белками, формирующими макромолекулярный комплекс. Таким образом, рассматриваемый полипептид может ингибировать функционирование молекулярной машины, такой как, например, механизм, вовлекаемый в регуляцию агрегации каналов связи разрывов в Сх43.
В контексте настоящего описания термины «ингибируют», «ингибирующий» и «ингибирование» и связанные с ними формы используются для обозначения снижения активности, ответа, состояния, заболевания или другого биологического параметра. Данный термин может также включать, без ограничения, полную потерю активности, ответа, характерного состояния или заболевания. Данный термин может также включать, например, 10% снижение активности, ответа, характерного состояния или заболевания, в сравнении с нативным или контрольным уровнем. Таким образом, снижение может составлять 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100% или характеризоваться любым уровнем снижения между указанными значениями, в сравнении с нативным или контрольным уровнями.
АСТ-последовательность рассматриваемого полипептида может быть взята из любого альфа-коннексина. Таким образом, компонент альфа-коннексина в данном полипептиде может быть получен из человеческого, мышиного, бычьего коннексина, коннексина монотрена, коннексина сумчатых, приматов, грызунов, китовых, млекопитающих, птиц, рептилий, амфибий, рыб, хордовых животных, протохордовых или из другого альфа-коннексина.
Таким образом, предлагаемый полипептид может включать АСТ коннексина, выбранного из группы, состоящей из мышиного коннексина 47, человеческого коннексина 47, человеческого коннексина 46.6, коровьего коннексина 46.6, мышиного коннексина 30.2, крысиного коннексина 30.2, человеческого коннексина 31.9, собачьего коннексина 31.9, овечьего коннексина 44, коровьего коннексина 44, крысиного коннексина 33, мышиного коннексина 33, человеческого коннексина 36, мышиного коннексина 36, крысиного коннексина 36, собачьего коннексина 36, куриного коннексина 36, коннексина перцины 36, коннексина 35 морона, коннексина 35 морона, коннексина 35 Cynops, коннексина 36 Tetraodon, человеческого коннексина 37, коннексина 37 шимпанзе, коннексина 37 собаки, коннексина 37 Cricetulus, коннексина 37 мыши, коннексина 37 Mesocricetus, коннексина 37 крысы, коннексина 39 мыши, коннексина 39 крысы, человеческого коннексина 40.1, коннексина 38 Xenopus, коннексина 39.9 перцины, человеческого коннексина 40, коннексина 40 шимпанзе, коннексина 40 собаки, коннексина 40 коровы, коннексина 40 мыши, коннексина 40 крысы, коннексина 40 Cricetulus, куриного коннексина 40, человеческого коннексина 43, коннексина 43 Cercopithecus, коннексина 43 Oryctolagus, коннексина 43 Spermophilus, коннексина 43 Cricetulus, коннексина 43 Phodopus, крысиного коннексина 43, коннексина 43 Sus, коннексина 43 Mesocricetus, мышиного коннексина 43, коннексина 43 Cavia, коннексина 43 коровы, коннексина 43 Erinaceus, куриного коннексина 43, коннексина 43 Xenopus, коннексина 43 Oryctolagus, коннексина 43 Cyprinus, коннексина 43 перцины, коннексина 43 Danio aequipinnatus, коннексина 43.4 перцины, коннексина 44.2 перцины, коннексина 44.1 перцины, человеческого коннексина 45, коннексина 45 шимпанзе, коннексина 45 собаки, коннексина 45 мыши, коннексина 45 коровы, коннексина 45 крысы, куриного коннексина 45, коннексина 45 Tetraodon, куриного коннексина 45, человеческого коннексина 46, коннексина 46 шимпанзе, коннексина 46 мыши, коннексина 46 собаки, коннексина 46 крысы, коннексина 46 Mesocricetus, коннексина 46 Cricetulus коннексина 46, куриного коннексина 56, коннексина 39.9 перцины, коровьего коннексина 49, человеческого коннексина 50, коннексина 50 шимпанзе, крысиного коннексина 50, коннексина 50 мыши, коннексина 50 собаки, коннексина 49 овцы, коннексина 50 Mesocricetus, коннексина 50 Cricetulus, куриного коннексина 50, человеческого коннексина 59 или другого альфа-коннексина. Аминокислотные последовательности алфа-коннексина известны в данной области и приведены в таблице 1 под номером доступа.
ТАБЛИЦА 1
Альфа-коннексины |
|||
БЕЛОК | №доступа: | БЕЛОК | №доступа: |
Коннексин 47 мыши | NP_536702 | Коннексин 43 Phodopus | AAR33085 |
Коннексин 47 человека | AAH89439 | Коннексин 43 крысы | AAH81842 |
Коннексин 46.6 человека | AAB94511 | Коннексин 43 Sus | AAR33087 |
Коннексин 46.6 коровы | ХР_582393 | Коннексин 43 Mesocricetus | AAO61857 |
Коннексин 30.2 мыши | NP_848711 | Коннексин 43 мыши | AAH55375 |
Коннексин 30.2 крысы | XP_343966 | Коннексин 43 Cavia | AAU06305 |
Коннексин 31.9 человека | AAM18801 | Коннексин 43 коровы | NP_776493 |
Коннексин 31.9 собаки | XP_548134 | Коннексин 43 Erinaceus | AAR33083 |
Коннексин 44 овцы | AAD56220 | Коннексин 43 курицы | AAA53027 |
Коннексин 44 коровы | I46053 | Коннексин 43 Xenopus | NP_988856 |
Коннексин 33 крысы | P28233 | Коннексин 43 Oryctolagus | AAS89649 |
Коннексин 33 мыши | AAR28037 | Коннексин 43 Cyprinus | AAG17938 |
Коннексин 36 человека | Q9UKL4 | Коннексин 43 перцины | CAH69066 |
Коннексин 36 мыши | NP_34420 | Коннексин 43 Danio aequipinnatus | AAC19098 |
Коннексин 36 крысы | NP_062154 | Коннексин 43.4 перцины | NP_571144 |
Коннексин 36 собаки | XP_544602 | Коннексин 44.2 перцины | AAH45279 |
Куриный коннексин 36 | NP_989913 | Коннексин 44.1 перцины | NP_571884 |
Коннексин 36 перцины | NP_919401 | Коннексин 45 человека | I38430 |
Коннексин 35 морона | AAC31884 | Коннексин 45 шимпанзе | XP_511557 |
Коннексин 35 морона | AAC31885 | Коннексин 45 собаки | XP_548059 |
Коннексин 35 Cynops | BAC22077 | Коннексин 45 мыши | AAH71230 |
Коннексин 36 Tetraodon | CAG06428 | Коннексин 45 коровы | XP_588395 |
Коннексин 37 человека | I55593 | Коннексин 45 крысы | AAN17802 |
Коннексин 37 шимпанзе | XP_524658 | Коннексин 45 курицы | NP_990834 |
Коннексин 37 собаки | XP_539602 | Коннексин 45 Tetraodon | CAF93782 |
Коннексин 37 Cricetulus | AAR98615 | Коннексин 45.6 курицы | I50219 |
Коннексин 37 мыши | AAH56613 | Коннексин 46 человека | NP_068773 |
Коннексин 37 Mesocricetus | AAS83433 | Коннексин 46 шимпанзе | XP_522616 |
Коннексин 37 крысы | AAH86576 | Коннексин 46 мыши | NP_058671 |
Коннексин 39 мыши | NP_694726 | Коннексин 46 собаки | XP_543178 |
Коннексин 39 крысы | AAN17801 | Коннексин 46 крысы | NP_077352 |
Коннексин 40.1 человека | NP_699199 | Коннексин 46 Mesocricetus | AAS83437 |
Коннексин 38 Xenopus | AAH73347 | Коннексин 46 Cricetulus | AAS776618 |
Коннексин 39.9 перцины | NP_997991 | Коннексин 56 курицы | A45338 |
Коннексин 40 человека | NP_859054 | Коннексин 39.9 перцины | NP_997991 |
Коннексин 40 шимпанзе | XP_513754 | Коннексин 49 коровы | XP_602360 |
Коннексин 40 собаки | XP_540273 | Коннексин 50 человека | P48165 |
Коннексин 40 коровы | XP_587676 | Коннексин 50 шимпанзе | XP_524857 |
Коннексин 40 мыши | AAH53054 | Коннексин 50 крысы | NP_703195 |
Коннексин 40 крысы | AAH70935 | Коннексин 50 мыши | AAG59880 |
Коннексин 40 Cricetulus | AAP37454 | Коннексин 50 собаки | XP_540274 |
Коннексин 40 курицы | NP_990835 | Коннексин 49 овцы | AAF01367 |
Коннексин 43 человека | P17302 | Коннексин 50 Mesocricetus | AAS83438 |
Коннексин 43 Cercopithecus | AAR33082 | Коннексин 50 Cricetulus | AAR98618 |
Коннексин 43 Oryctolagus | AAR33084 | Коннексин 50 курицы | BAA05381 |
Коннексин 43 Spermophilus | AAR33086 | Коннексин 59 человека | AAG09406 |
Коннексин 43 Cricetulus | AAO61858 |
Таким образом, рассматриваемый полипептид может включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 90 или SEQ ID NO: 91 или их консервативные варианты или фрагменты.
Последовательность альфа-коннексинов из 20-30 аминокислотных карбокси-концевых последовательностей характеризуется отчетливой и консервативной организацией. Такая отчетливая и консервативная организация включает PDZ-связывающий мотив типа II (Φ-х-Φ, где х = любая аминокислота, и Φ = гидрофобная аминокислота; например, как указано в таблице 2, путем выделения жирным шрифтом) и проксимальный к данному мотиву пролиновый (P) и/или глициновый (G) шарнирные остатки; высокую частоту встречаемости фосфосериновых (S) и/или фосфотреониновых (T) остатков; и высокую частоту встречаемости положительно заряженного аргинина (R), лизина (K) и отрицательно заряженных аминокислот аспарагиновой кислоты (D) или глютаминовой кислоты (E). В случае многих альфа-коннексинов P и G остатки встречаются в составе кластерных мотивов (см., например, в Таблице 2, выделенные курсивом участки), проксимальных к карбокси-концевому PDZ-связывающему мотиву типа II. S и T аминокислоты в большинстве альфа-коннексинов также в типичном случае организованы в виде кластеров с мотивами типа повторов (см. в Таблице 2, подчеркнутые участки). Такая организация особенно выражена в случае Cx43, где 90% из 20 самых близких к карбоксильному концу аминокислот включают указанные семь аминокислот. Другим примером высокой консервации последовательности является организация АСТ-пептида в Cx43, которая характеризуется высокой консервативностью, от человека до рыбы (например, в Таблице 2 проиллюстрированы результаты сравнения АСТ-последовательностей Cx43 у человека и перцины). В другом примере организация АСТ-пептида в Cx43 характеризуется высокой консервативностью от людей до птиц (например, в таблице 2 проиллюстрированы результаты сравнения АСТ-последовательностей Cx45 для человека и курицы). В другом примере организация АСТ-пептида в Cx36 характеризуется высокой консервативностью от приматов до рыб (например, в таблице 2 проиллюстрированы результаты сравнения АСТ-последовательностей Cx36 для шимпанзе и перцины).
Таким образом, в одном аспекте настоящего изобретения предлагаемый полипептид включает один, два, три или все аминокислотные мотивы, выбранные из группы, состоящей из: 1) PDZ-связывающего мотива типа II; 2) пролинового (Р) и/или глицинового (G) шарнирных остатков; 3) кластеров из фосфосеринового (S) и/или фосфотреонинового (Т) остатков; и 4) положительно заряженные аргинин (R), лизин (К) и отрицательно заряженные аспарагиновая кислота (D) и/или глютаминовая (E) кислота с высокой частотой встречаемости. В другом аспекте настоящего изобретения предлагаемый полипептид включает PDZ-связывающий мотив типа II на карбокси-конце, пролиновый (Р) и/или глициновый (G) шарнирные остатки, проксимальные к PDZ-связывающему мотиву, и положительно заряженные остатки (K, R, D, E), проксимальные к шарнирным остаткам.
PDZ-домены первоначально были идентифицированы как консервативные элементы последовательности в составе пост-синаптических белков высокой плотности PSD95/SAP90, опухолевого супрессора Drosophila dlg-А, и белка ZO-1 с прочной соединяющей способностью. Хотя исходно рассматривались мотивы GLGF или DHR, в настоящее время известно, что под данным термином закодированы указанные первые три PDZ-содержащих белка (PSD95/DLG/ZO-1). Указанные последовательности из 80-90 аминокислот были идентифицированы в более чем 75 белках, которые характеризуются экспрессией в виде множественных копий одного белка. Таким образом, в одном аспекте настоящего изобретения предлагаемый полипептид может ингибировать связывание альфа-коннексина с белком, включающим PDZ-домен. PDZ-домен представляет собой модуль специфического типа, определяющий взаимодействие с белком, который характеризуется наличием структурно определенного некого «кармана» для взаимодействия, который может заполняться PDZ-связывающим мотивом, обозначаемым в настоящем описании как «PDZ-мотив». PDZ-мотивы представляют собой консенсусные последовательности, которые в норме, но не всегда, локализованы на самом ближнем к карбоксильному концу внутриклеточном участке. В настоящее время описано четыре типа PDZ-мотивов: тип I (S/T-x-Ф), тип II (Ф-х-Ф), тип III (ψ-x-Φ) и тип IV (D-x-V), где х обозначает любую аминокислоту, Φ обозначает гидрофобный остаток (V, I, L, A, G, W, C, M, F), и ψ обозначает основной гидрофобный остаток (H, R, K) (Songyang, Z., et al., 1997, Science 275, 73-77). Таким образом, в одном аспекте настоящего изобретения предлагаемый полипептид включает PDZ-связывающий мотив типа II.
Следует отметить, что последовательность из 18 аминокислот, находящаяся ближе всего к карбокси-концу альфа-Cx37, представляет собой исключительную вариацию в АСТ-пептиде. АСТ-подобные последовательности Cx37 представляют собой GQKPPSRPSSSASKKQ*YV (SEQ ID NO: 43). Таким образом, четыре карбокси-концевые аминокислоты в Сх37 составляют только часть PDZ-домена типа II. Вместо классического PDZ-связывающего домена типа II, Cx37 содержит нейтральный Q* в положении 2, где может ожидаться наличие гидрофобной аминокислоты. В качестве такового Cx37 включает последовательность, которую можно рассматривать как похожую на PDZ-связывающий домен типа II. Тем не менее, Cx37 четко поддерживает все другие аспекты организации АСТ-пептида, включая кластерные сериновые остатки, частую встречаемость R и K остатков и Р-обогащенную последовательность, расположенную проксимально к последовательности, подобной PDZ-связывающему домену. При том, что общий уровень консервации АСТ-подобной организации соответствует другим перечисленным выше более 70 альфа-коннексинам, следует понимать, что АСТ-подобная карбокси-концевая структура в Сх37 функционирует с заданной способностью.
В таблице 2 показан для сравнения бета-коннексин Сх26. Сх26 не содержит PDZ-связывающего мотива типа II на карбоксильном конце, менее 30% самых близких к карбоксильному концу аминокислот включают S, T, R, D или E остатки; при этом не выявляются мотивы, проксимально к PDZ-связывающему мотиву типа II или участку, подобному PDZ-связывающему мотиву, содержащему кластеры P и G шарнирных остатков; и не выявляется кластерных мотивов, подобных повторяющимся единицам серин- и треонин-фосфоаминокислот. Cx26 содержит три лизиновых (K) остатка, собранных друг за другом в кластер около карбоксильного конца последовательности. Однако более чем в 70 альфа-коннексинах, перечисленных выше, не выявляется альфа-коннексин, который бы демонстрировал указанную особенность, определяемую наличием трех доменов с повторяющимися остатками (К) на карбокси-конце (Сх26 представляет собой бета-коннексин, и поэтому, по определению, не должен иметь АСТ-домен).
В контексте настоящего описания уникальная функциональная характеристика указанного относительно короткого тяжа аминокислот включает его неожиданную роль в снижении воспаления, ускорении заживления, снижении рубцевания, повышении прочности на разрыв и ускорении регенерации сложных тканевых структур и функций после разных повреждений ткани кожи и мозга. Таким образом, в одном аспекте предлагаемый полипептид включает PDZ-связывающий мотив типа II (Φ-х-Φ; где х = любая аминокислота и Φ = гидрофобная аминокислота). В другом аспекте более чем 50%, 60%, 70%, 80%, 90% аминокислот в рассматриваемом АСТ-полипептиде включают один или несколько пролиновых (P), глициновых (G), фосфосериновых (S), фосфотреониновых (T), аргининовых (R), лизиновых (K), аспарагиновых (D) или глютаминовых (E) аминокислотных остатков.
Аминокислоты пролин (P), глицин (G), аргинин (R), лизин (K), аспарагиновая кислота (D) и глютаминовая кислота (E) являются необходимыми детерминантами структуры и функции белка. Пролиновые и глициновые остатки обеспечивают прочные изгибы в 3D структуре белков, позволяя образовывать складчатые конформации полипептида, необходимые для его функционирования. Заряженные аминокислоты зачастую расположены на поверхности складчатых белков и необходимы для осуществления химических взаимодействий, опосредованных полипептидами, включая белок-белковые взаимодействия, белок-липидные взаимодействия, фермент-субстратные взаимодействия и взаимодействия типа белок-нуклеиновая кислота. Таким образом, в другом аспекте участки, обогащенные пролином (P) и глицином (G), лизином (K), аспарагиновой кислотой (D) или глютаминовой кислотой (E), проксимальные к PDZ-связывающему мотиву типа II, обеспечивают свойства, необходимые для соответствующей активности АСТ-пептидов. В другом аспекте предлагаемый в настоящем изобретении полипептид включает участки, обогащенные пролином (P), глицином (G), лизином (K), аспарагиновой кислотой (D) и/или глютаминовой кислотой (E), проксимальные к PDZ-связывающему мотиву типа II.
Фосфорилирование представляет собой наиболее частую пост-трансляционную модификацию белков и является важнейшим фактором для модуляции или модификации структуры и функции белка. Те аспекты структуры и функции белка, которые подвергаются модификации при фосфорилировании, включают конформацию белка, белок-белковые взаимодействия, белок-липидные взаимодействия, взаимодействия типа белок-нуклеиновая кислота, функции открытия-закрытия каналов, перенос белка и метаболизм белка. Таким образом, в одном аспекте настоящего изобретения последовательности, обогащенные фосфосерином (S) и/или фосфотреонином (T), необходимы для модификации функции АСТ-пептидов, повышения или снижения эффективности полипептидов в указанных действиях. В другом аспекте предлагаемый полипептид включает последовательности или мотивы, обогащенные серином (S) и/или фосфотреонином (Т).
В другом примере, относящемся к определению АСТ-пептида, весьма вероятно, в свете высокого уровня потенциала регенерации ткани/органа у низших животных, таких как рыбы, что метионин встречается около амино-конца АСТ-последовательности Сх43 перцины (Таблица 2). Кроме функции кодирования метионина, метиониновый триплет оснований представляет собой альтернативный сайт старта трансляции. Если трансляция начинается от указанного метионина, то должна создаваться последовательность SSRARPDDLDV (SEQ ID NO: 90). Такой продукт трансляции поддерживает все консервативные и отличительные особенности канонического АСТ-пептида. Конкретно, данный пептид включает PDZ-связывающий домен типа II на карбокси-конце и содержит домен, обогащенный P, R и D остатками, проксимально PDZ-связывающему домену. Кроме того, указанная последовательность включает кластерный S мотив, обладающий потенциалом к модуляции функции АСТ-пептида на амино-конце. Это поднимает интересный вопрос относительно того, что животные с высоким потенциалом регенерации ткани/органа, такие как рыбы, могут непосредственно осуществлять трансляцию последовательностей АСТ-пептидов.
Таким образом, предлагаемый в настоящем изобретении полипептид может включать С-концевую последовательность человеческого Сх43. Соответственно, предлагаемый полипептид может включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2. Полипептид может включать 9 аминокислот на карбокси-конце человеческого Сх40. Таким образом, указанный полипептид может включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
В том случае, когда в настоящем описании рассматриваются специфические белки, описание относится, соответственно, к их вариантам, производным и фрагментам. Варианты и производные белков хорошо известны специалистам в данной области и могут включать модификации аминокислотной последовательности. Например, модификации аминокислотной последовательности в типичном случае попадают в один или более классов из числа следующих трех классов: варианты по замещению, вставке и делеции. Вставки включают слияние с амино- и/или карбоксильным концом, а также вставки внутри последовательности одной или нескольких аминокислотных остатков. Вставки обычно представляют собой меньшие по размеру вставки, чем соответствующие вставки, вводимые в случае слияния с амино- или карбоксильным концом, отличаясь, например, на порядок от одного до четырех остатков. Делеции характеризуются удалением одного или нескольких аминокислотных остатков из белковой последовательности. Указанные варианты обычно получают путем сайт-специфического мутагенеза нуклеотидов в ДНК, кодирующей белок, что приводит в получению ДНК, кодирующей вариант, с последующей экспрессией ДНК в культуре рекомбинантной клетки. Методики получения мутантов по замещению в заданных сайтах ДНК, обладающих известной последовательностью, хорошо известны и включают, например, мутагенез с использованием праймера М13 и ПЦР-мутагенез. Замещения аминокислот в типичном случае включают один остаток, но могут производиться одновременно во множестве разных сайтов; вставки обычно включают примерно от 1 до 10 аминокислот. Делеции или вставки предпочтительно осуществляют в соседних парах, например, делецию двух остатков или вставку двух остатков. Замещения, делеции, вставки или любое их сочетание могут быть объединены для получения окончательной конструкции. Мутации не должны выводить последовательность из рамки считывания и предпочтительно не должны создавать комплементарные участки, которые могут образовывать вторичную структуру мРНК, если только такое изменение во вторичной структуре мРНК не является желательным. Варианты по замещению включают такие варианты, в которых по меньшей мере одни остаток был удален, а другой остаток встроен на его место. Такие замещения в основном осуществляются в соответствии приведенной таблицей 3 и называются консервативными замещениями.
Например, замещение аминокислотного остатка другим, который биологически и/или химически ему близок, известно специалистам в данной области как консервативное замещение. Например, консервативным замещением будет замена одного гидрофобного остатка на другой гидрофобный остаток или одного полярного остатка на другой полярный остаток. Указанные замещения включают сочетания, показанные в таблице 3. Консервативно замещенные варианты такой явно раскрытой последовательности включаются в полипептиды согласно настоящему описанию.
В типичном случае консервативное замещение оказывает незначительное или вообще не оказывает влияние на биологическую активность полученного полипептида. В конкретном примере консервативное замещение представляет собой такое замещение аминокислот в пептиде, которое по существу не оказывает влияния на биологическую функцию пептида. Пептид может включать одно или несколько аминокислотных замещений, например, 2-10 консервативных замещений, 2-5 консервативных замещений, 4-9 консервативных замещений, таких как 2, 5 или 10 консервативных замещений.
Полипептид может быть получен таким образом, что он будет содержать одно или несколько консервативных замещений за счет манипуляции нуклеотидной последовательностью, которая кодирует данный полипептид, с использованием, например, стандартных процедур, таких как сайт-направленный мутагенез или ПРЦ. Альтернативно, полипептид может быть получен таким образом, что он будет содержать одно или несколько консервативных замещений за счет использования стандартных методик белкового синтеза. Может использоваться аланиновое сканирование для идентификации того, какой из аминокислотных остатков в белке может быть толерантен к аминокислотному замещению. В одном примере биологическая активность белка не снижается более чем на 25%, например, снижается не более чем на 20%, например, не более чем на 10%, когда аланином или другой консервативной аминокислотой (такой как в приведенном ниже перечне) замещают одну или несколько нативных аминокислот.
Больше информации о консервативном замещении можно найти, в числе других, в следующих работах: Ben-Bassat et al., (J. Bacteriol. 169: 751-7, 1987), O'Regan et al., (Gene 77: 237-51, 1989), Sahin-Toth et al., (Protein Sci. 3: 240-7, 1994), Hochuli et al., (Bio/Technology 6: 1321-5, 1988) и в стандартных руководствах по генетике и молекулярной биологии.
Мутагенез путем замещения или делеционный мутагенез может использоваться для встраивания сайтов для N-гликозилирования (Asn-X-Thr/Ser) или O-гликозилирования (Ser или THr). Могут быть также желательны делеции цистеина или других лабильных остатков. Делеции или замещения потенциальных сайтов протеолиза, например Arg, вводятся, например, путем делеции одного или нескольких основных остатков или путем замещения такого остатка глютаминильным или гистидильным остатками.
Некоторые пост-трансляционные дериватизации являются результатом действия рекомбинантных клеток на экспрессированный полипептид. Глютаминильные и аспарагинильные остатки зачастую подвергаются пост-трансляционному дезамидированию до соответствующих глютамильных и аспартильных остатков. Альтернативно, указанные остатки подвергают дезамидированию в мягких кислотных условиях. Другие пост-трансляционные модификации включают гидроксилирование пролина и лизина, фосфорилирование гидроксильных групп серильных или треонильных остатков, метилирование О-аминогрупп боковых цепей лизина, аргинина и гистидина (T.E. Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties, W. H. Freeman & Co., San Francisco, p.79-86 [1983]), ацетилирование N-концевого амина и в некоторых случаях амидирование C-концевого карбоксила.
Следует понимать, что имеется множество аминокислотных и пептидных аналогов, которые могут быть включены в описываемые композиции. Например, имеется множество D-аминокислот или аминокислот, которые включают различные функциональные заместители, отличные от аминокислот, приведенных в таблице 3. В их числе описываются противоположные стероизомеры природных пептидов, а также стереоизомеры пептидных аналогов. Указанные аминокислоты могут быть легко встроены в полипептидные цепи путем подсоединения выбранных аминокислот к молекулам тРНК с последующим созданием генетических конструкций, которые используют, например, амбер-кодоны, для вставки аналога аминокислоты в пептидную цепь сайт-специфическим образом (Thorson et al., Method in Molec. Biol. 77: 43-73 (1991), Zoller, Current Opinion in Biotechnology 3: 348-354 (1992); Ibba, Biotechnology & Genetic Enginerring Reviews 13: 197-216 (1995); Cahill et al., TIBS, 14(10): 400-403 (1989); Benner, TIB Tech, 12: 158-163 (1994); Ibba and Hennecke, Bio/technology, 12: 678-682 (1994), где все работы включены в качестве ссылки по меньшей мере в части, относящейся к аминокислотным аналогам).
Могут быть получены молекулы, которые близки к полипептидам, но которые не содержат природных пептидных связей. Например, связи в аминокислотах или аминокислотных аналогах могут включать: CH2NH--, --CH2S--, --CH2--CH2--, --CH=CH- (цис и транс), --COCH2--, --CH(OH)CH2-- и -CHH2SO- (указанные и другие соединения описаны в работе Spatola, A. F. in Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins, B. Weinstein, eds., Marcel Dekker, New York, p.267 (1983); Spatola, A. F., Vega Data (March 1983), Vol.1, Issue 3, Peptide Backbone Modifications (general review); Morley, Trends Pharm Sci (1980) p.463-468; Hudson, D. et al., Int J Pept Prot Res 14: 177-185 (1979) (--CH2NH--, CH2CH2--); Spatola et al, Life Sci 38: 1243-1249 (1986) (--CH H2--S); Hann J. Chem. Soc Perkin Trans. I 307-314 (1982) (--CH--CH--, cis и trans); Almquist et al., J. Met. Chem. 23: 1392-1298 (1980) (--COCH2--); Jennings-White et al., Tetrahedron Lett 23: 2533 (1982) (--COCH2--); Szelke et al., European Appln, EP 45665 CA (1982); 97: 39405 (1982) (--CH(OH)CH2--); Holladay et al., Tetrahedron Lett 24: 4401-4404 (1983) (--C(OH)CH2--); и Hruby Life Sci 31: 189-199 (1982) (--CH2--S--); где каждая из указанных работ приведена в настоящем описании в качестве ссылки. Следует понимать, что пептидные аналоги могут включать более одного атома между связываемыми атомами, такие как в случае b-аланина, g-аминомасляной кислоты и т.п.
Аминокислотные аналоги и пептидные аналоги зачастую обладают усиленными или просто желательными свойствами, такими как более экономичные условия их продукции, повышенная химическая стабильность, улучшенные фармакологические свойства (период полувыведения, абсорбция, эффективность), измененная специфичность (например, широкий спектр биологической активности), сниженная антигенность, повышенная способность проходить через биологические барьеры (например, через стенку кишки, кровеносных сосудов, гематоэнцефалический барьер) и другие.
D-аминокислоты могут использоваться для получения более стабильных пептидов, поскольку D-аминокислоты не распознаются пептидазами и аналогичными ферментами. Систематическое замещение одной или нескольких аминокислот в консенсусной последовательности D-аминокислотой того же типа (например, вводить D-лизин вместо L-лизина) может использоваться для получения более стабильных пептидов. Цистеиновые остатки могут использоваться для циклизации или для объединения двух или более пептидов вместе. Это может быть благоприятно для целей удержания белков в определенных конформациях (Rizo and Gierasch Ann. Rev. Biochem. 61: 387 (1992), данная работа включена в настоящее описание в качестве ссылки).
Таким образом, рассматриваемый полипептид может включать консервативный вариант с-конца альфа-коннексина (АСТ). Как видно из таблицы 4, единичное консервативное замещение в последовательности SEQ ID NO: 2 дано на примере последовательности SEQ ID NO: 3. Пример трех консервативных замещений в составе последовательности SEQ ID NO: 2 дан в последовательности SEQ ID NO: 4. Таким образом, предлагаемый полипептид может включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4.
Следует понимать, что один из способов определения любых вариантов, модификаций или производных раскрываемых генов и белков лежит через определение вариантов, модификаций и производных применительно к идентичности последовательности (также называемой в настоящем описании как гомология) известных специфических последовательностей. Конкретно раскрываются варианты нуклеиновых кислот и полипептидов, которые обладают по меньшей мере на 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 процентов идентичностью по последовательности к указанной или известной последовательности. Специалистам в данной области хорошо известно, как определить идентичность по последовательности для двух белков или нуклеиновых кислот. Например, идентичность по последовательности может быть рассчитана после сопоставления двух последовательностей, так чтобы идентичность по последовательности была на наивысшем уровне.
Другим способом расчета идентичности по последовательности является использование известных и опубликованных алгоритмов. Оптимальность сопоставления последовательностей с целью сравнения может быть проведена с помощью алгоритма определения идентичности к локальной последовательности Смита и Ватермана (Smith and Waterman Adv. Appl. Math. 2: 482 (1981)), по алгоритму сопоставления для определения идентичности по последовательности Нидлмана и Вунша (Needlman and Wunsh, J. Mol. Biol. 48: 443 (1970)), при поиске по методу оценки сходства Пирсона и Липмана (Pearson and Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 2444 (1988)) с применением комьютеризированных инсталляций указанных алгоритмов (GAP, BESTFIT, FASTA и TFASTA в рамках пакета прикладных программ Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Ds., Madison, WI) или при осмотре. Указанные материалы включены в настоящее описание в качестве ссылок полностью, в том, что касается методик расчета идентичности по последовательности.
Аналогичного рода определение идентичности по последовательности может быть проведено для нуклеиновых кислот, например, с использованием известных алгоритмов, описанных в литературе (Zuker, M. Science 244: 48-52, 1989, Jaeger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 7706-7710, 1989, Jaeger et al., Methods Enzymol. 183: 281-306, 1989), где указанные работы включены в настоящее описание в качестве ссылок, по меньшей мере в части материала, касающегося сопоставления нуклеиновых кислот.
Таким образом, рассматриваемый полипептид может включать аминокислотную последовательность, характеризующуюся наличием по меньшей мере 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 процентов идентичности по последовательности с с-концом альфа-коннексина (АСТ). Таким образом, в одном аспекте рассматриваемый полипептид включает аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере на 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 процентов идентичностью по последовательности с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 90 или SEQ ID NO: 91. В качестве примера предлагается полипептид (SEQ ID NO: 4), обладающий 66% идентичностью по последовательности с тем самым тяжом из 9 аминокислот, который находится на карбокси-конце человеческого Сх43 (SEQ ID NO: 2).
Рассматриваемые в настоящем описании полипептиды могут быть введены непосредственно в повреждение ткани у индивидуума. Однако эффективность цитоплазматической локализации предлагаемого полипептида повышается путем присоединения переносчика клеточной интернализации в цис- или транс-положении к полипептиду. Эффективность переносчика клеточной интернализации повышается также под действием света или при совместной трансдукции клеток пептидом Tat-HA.
Таким образом, предлагаемый полипептид может включать переносчик клеточной интернализации или соответствующую последовательность. Последовательность клеточной интернализации может представлять собой последовательность интернализации, известную или недавно обнаруженную в данной области, или ее консервативные варианты. Не ограничивающие примеры переносчиков клеточной интернализации и соответствующих последовательностей включают последовательности Antennapedia, TAT, HIV-Tat, Penetratin, Antp-3A (мутант Antp), Buforin II, Transportan, MAP (модельный амфипатический пепетид), K-FGF, Ku70, Prion, pVEC, Pep-1, SynB1, Pep-7, HN-1, BGSC (бис-гуанидиний-спермидин-холестерин) и BGTC (бис-гуанидиний-трен-холестерин) (см. Таблицу 5).
Таким образом, предлагаемый полипептид может также включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 14 (Bucci, M. et al., 2000. Nat. Med. 6, 1362-1367), SEQ ID NO: 15 (Derossi, D., et al., 1994, Biol. Chem. 269, 10444-10450), SEQ ID NO: 16 (Fischer, P. M., et al., 2000. J. Pept. Res. 55, 163-172), SEQ ID NO: 17 (Frankel, A. D. & Pabo, C. O. 1988. Cell 55, 1189-1193; Green, M. & Loewenstein, P. M. 1988. Cell 55, 1179-1188), SEQ ID NO: 18 (Park, C. B., et al., 2000. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97, 8245-8250), SEQ ID NO: 19 (Pooga, M., et al., 1998. FASEB J. 12, 67-77), SEQ ID NO: 20 (Oehlke, J. et al., 1998. Biochim. Biophys. Acta. 1414, 127-139), SEQ ID NO: 21 (Lin, Y. Z., et al., 1995. J. Biol. Chem. 270, 14255-14258), SEQ ID NO: 22 (Sawada, M., et al., 2003. Nature Cell Biol. 5, 352-357), SEQ ID NO: 23 (Lundberg, P., et al., 2002. Biochem. Biophys. Res. Commun. 299, 85-90), SEQ ID NO: 24 (Elmquist, A., et al., 2001. Exp. Cell Res. 269, 237-244), SEQ ID NO: 25 (Morris, M. C., et al., 2001. Nature Biotechnol. 19, 1173-1176), SEQ ID NO: 26 (Rousselle, C., et al., 2000. Mol. Pharmacol. 57, 679-686), SEQ ID NO: 27 (Gao, C., et al., 2002. Bioorg. Med. Chem. 10, 4057-4065) или SEQ ID NO: 28 (Hong, F. D & Clayman, G. L., 2000. Cancer Res. 60, 6551-6556). Предлагаемый полипептид может также включать BGSC (бис-гуанидиний-спермидин-холестерин) или BGTC (бис-гуанидиний-трен-холестерин) (Vigneron, J. P., et al., 1998 Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93, 9682-9686). Указанные выше материалы включены в настоящее описание в качестве ссылок полностью, применительно к описанию векторов и последовательностей для клеточной интернализации. Любые другие последовательности интернализации, уже известные или которые будут позже идентифицированы, могут быть объединены с пептидом согласно настоящему изобретению.
Предлагаемый полипептид может включать любую АСТ-последовательность (то есть любой из АСТ-пептидов, приведенных в настоящем описании) в сочетании с любой из описанных здесь последовательностей для клеточной интернализации. Примеры указанных сочетаний приведены в таблице 6. Таким образом, предлагаемый полипептид может включать последовательность Antennapedia, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7. Таким образом, предлагаемый полипептид может также включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8 SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12.
Также предлагаются выделенные нуклеиновые кислоты, кодирующие полипептиды согласно настоящему изобретению. Описанные нуклеиновые кислоты состоят, например, из нуклеотидов, нуклеотидных аналогов или замещенных нуклеотидов. Не ограничивающие примеры указанных и других молекул обсуждаются в настоящем описании. Следует понимать, что, например, в том случае, когда вектор экспрессируется в клетке, экспрессированная мРНК будет в типичном случае составлена из A, C, G и U.
Термин «выделенная нуклеиновая кислота» или «очищенная нуклеиновая кислота» обозначает ДНК, которая свободна от генов, которые в природном геноме организма, из которого ДНК согласно настоящему изобретению была получена, фланкируют ген. В этой связи, данный термин, включает, например, рекомбинантную ДНК, которая встроена в вектор, такой как автономно реплицирующаяся плазмида или вирус; или встроена в геномную ДНК прокариот или эукариот (например, трансген), или которая существует в виде отдельной молекулы (например, кДНК или геномная ДНК, или фрагмент кДНК, получаемый методом ПЦР, путем расщепления рестрикционными эндонуклеазами, или в результате химического синтеза или синтеза in vitro). Данный термин также включает рекомбинантную ДНК, которая является частью гибридного гена, кодирующего дополнительную полипептидную последовательность. Термин «выделенная нуклеиновая кислота» также относится к РНК, например, к молекуле мРНК, которая кодируется выделенной молекулой ДНК или которая была химически синтезирована, или которая отделена или по существу не содержит по меньшей мере некоторые клеточные компоненты, например, другие типы молекул РНК или полипептидных молекул.
Таким образом, предлагается выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12.
Таким образом, предлагаемая нуклеиновая кислота может включать последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 88 или SEQ ID NO: 89.
Нуклеиновая кислота согласно настоящему изобретению может быть функционально связана с последовательностью контроля экспрессии. Также описывается вектор, включающий одну или несколько нуклеиновых кислот согласно настоящему изобретению, где указанная нуклеиновая кислота функционально связана с последовательностью контроля экспрессии. Имеется множество композиций и способов, которые могут использоваться для доставки нуклеиновых кислот в клетки, либо in vitro, либо in vivo. Указанные способы и композиции могут быть в основном распределены по двум классам: системы доставки, основанные на вирусах, и системы доставки, основанные не на вирусах. Например, нуклеиновые кислоты могут быть доставлены с помощью различных систем непосредственной доставки, таких как электропорация, липофекция, осаждение фосфатом кальция, плазмиды, вирусные векторы, вирусные нуклеиновые кислоты, фаговые нуклеиновые кислоты, фаги, космиды, или с помощью переносчика генетического материала в клетки или с использованием носителей, таких как катионные липосомы. Соответствующие методы для осуществления трансфекции, включающие вирусные векторы, химические трансфектанты или физико-механические процедуры, такие как электропорация или прямая диффузия ДНК, описаны, например, в работе Волффа с соавт. (Wolff, J. A., et al., Science, 247, 1465-1468 (1990); и Wolff, J. A., Nature, 352, 815-818 (1991)). Такие способы хорошо известны в данной области и могут быть легко адаптированы для использования в сочетании с композициями и способами согласно настоящему изобретению. В некоторых случаях указанные способы могут быть модифицированы применительно к конкретному варианту использования, включающему крупные молекулы ДНК. Кроме того, указанные способы могут использоваться для целевого воздействия на некоторые заболевания и клеточные популяции посредством целевого направления носителя.
Транспортирующие векторы могут представлять собой любую нуклеотидную конструкцию, используемую для доставки генов в клетки (например, плазмиду), или представлять собой часть конструкции, функционирующей в процедурах основной стратегии доставки генов, например, в виде части рекомбинантного ретровируса или аденовиуса (Ram et al., Cancer Res. 53: 83-88 (1993)).
В контексте настоящего описания используемые плазмидные или вирусные векторы представляют собой агенты, которые переносят описываемые нуклеиновые кислоты, такие как SEQ ID NO: 6, в клетку без деградации, и включают промотор, способствующий экспрессии гена в тех клетках, в которые осуществляется доставка. В некоторых вариантах промоторы получают из вируса или ретровируса. Вирусные векторы включают, например, аденовирус, аденоассоциированный вирус, вирус герпеса, вирус осповакцины, полиовирус, вирус СПИДа, нейротропный вирус, вирус Синдбис и другие РНК-вирусы, включая вирусы с ВИЧ-скелетом. Описываются также любые вирусные семейства, которые имеют общие свойства с указанными вирусами и которые делают их подходящими для использования в качестве векторов. Ретровирусы включают вирус мышиного лейкоза Малони, MMLV и ретровирусы, которые экспрессируют желательные свойства MMLV, в качестве вектора. Ретровирусные векторы способны переносить более крупные генетические структуры, например, трансген или маркерный ген, чем другие вирусные векторы, и по это причине представляют собой наиболее часто используемые векторы. Однако они не используются в случае непролиферирующих клеток. Аденовирусные векторы представляют собой в основном стабильные и удобные для манипуляций векторы, имеют высокие титры, могут доставляться в виде аэрозольных композиций и способны трансфицировать не делящиеся клетки. Векторы на основе вируса оспы являются крупными и обладают несколькими сайтами для встраивания генов, они термостибильны и могут храниться при комнатной температуре. Описывается также вирусный вектор, который был получен методом генетической инженерии, с тем чтобы подавлять иммунный ответ хозяйского организма, за счет проявления вирусных антигенов. Векторы данного типа могут переносить кодирующие участки для интерлейкина 8 или 10.
Вирусные векторы могут обладать более высокой способностью к транзакции (способностью вводить гены), чем это свойственно химическим или физическим способам встраивания генов в клетки. В типичном случае вирусные векторы содержат неструктурные ранние гены, структурные поздние гены, транскрипт РНК-полимеразы III, инвертированные концевые повторы, необходимые для репликации и инкапсидирования, и промоторы для контроля транскрипции и репликации вирусного генома. Вирусы, в случае их получения генноинженерными методами в качестве векторов, содержат в типичном случае один или несколько удаленных ранее генов и ген или генную/промоторную кассету, вставленную в вирусный геном вместо удаленной вирусной ДНК. Конструкции данного типа могут переносить примерно 8 килобайт чужеродного генетического материала. Необходимая функция удаленных ранее генов в типичном случае выполняется клеточными линиями, которые были созданы генноинженерными методами для целей экспрессии генных продуктов ранних генов в трансформе.
Ретровирус представляет собой вирус животных, принадлежащий к вирусному семейству Retroviridae, включающему любые типы подсемейств, роды или тропизмы. Ретровирусные векторы в основном описаны в работе Верма (Verma, I.M., Retroviral vectors for gene transfer. In Microbiology-1985, American Society for Microbiology, p.229-232, Washington, (1985)), которая включена в настоящее описание в качестве ссылки. Примеры способов, используемых применительно к ретровирусным векторам для проведения генной терапии, описаны в патентах США №№4868116 и 4980286; в PCT заявках WO 90/02806 и WO 89/07136; и Mulligan (Science 260: 926-932 (1993)), которые включены в настоящее описание в качестве ссылок.
Ретровирус представляет собой по существу упаковку, которая содержит введенную в нее нуклеиновую кислоту. Указанная нуклеиновая кислота несет в себе упаковочный сигнал, гарантирующий, что реплицированные дочерние молекулы будут эффективно упакованы внутри оболочки. Кроме упаковочного сигнала, имеется множество молекул, которые необходимы в цис-форме, например, для репликации и упаковки реплицированного вируса. В типичном случае ретровирусный геном содержит gag, pol и env гены, которые вовлекаются в образование белковой оболочки. Это те самые gag, pol и env гены, которые в типичном случае замещаются чужеродной ДНК, предназначенной для переноса в целевую клетку. Ретровирусные векторы в типичном случае содержат упаковочный сигнал для включения в оболочку, последовательность, которая дает сигнал для старта единицы транскрипции gag, элементы, необходимые для обратной транскрипции, включая сайт связывания праймера для связывания праймера тРНК для обратной транскрипции, последовательности терминирующих повторов, которые направляют переключение нитей РНК в ходе синтеза ДНК, обогащенную пуринами последовательность от 5' до 3' LTR, которые служат в качестве сайта примирования в синтезе второй цепи в синтезе ДНК, и специфические последовательности в районе концов LTR, которые позволяют осуществлять встраивание ДНК-ретровируса, для введения ее в хозяйский геном. Удаление gag, pol и env генов позволяет встроить в вирусный геном примерно 8 килобайт чужеродной последовательности, которая подвергается обратной транскрипции и после репликации упаковывается с образованием новых ретровирусных частиц. Указанное количество нуклеиновой кислоты достаточно для доставки одного или множества генов, в зависимости от размера каждого транскрипта.
Поскольку механизм репликации и упаковки белков в большинстве ретровирусных векторов удален (gag, pol и env), векторы получают в типичном случае путем помещения их в линию упаковочных клеток. Линия упаковочных клеток представляет собой такую клеточную линию, которая была трансфицирована или трансформированы ретровирусом, содержащим механизм репликации и упаковки, но не содержащим какого-либо сигнала для упаковки. В том случае, когда вектор, несущий выбранную ДНК, трансфицируют в указанные клеточные линии, вектор, содержащий интересующий ген, реплицируется и упаковывается с получением новых ретровирусных частиц под действием механизма хелперной клетки, представленного в цис-форме. Геномы для такого механизма не входят в состав упаковки, поскольку они не содержат необходимых сигналов.
Конструирование дефектных по репликации аденовирусов было описано в литературе (Berkner et al., J. Virology 61: 1213-1220 (1987); Massie et al., Mol. Cell. Biol. 6: 2872-2883 (1986); Haj-Ahmad et al., J. Virology 57: 265-274 (1986); Davidson et. al., J. Virology 61: 1226-1239 (1987); Zhang «Generation and identification of recombinant adenovirus by liposome-mediated transfection and PCR analysis» BioTechniques 15: 868-872 (1993)). Преимущество использования указанных вирусов в качестве векторов заключается в том, что они ограничены в степени распространения на другие клеточные типы, поскольку могут реплицироваться внутри исходной инфицированной клетки, но не способны образовывать новые инфекционные вирусные частицы. Было показано, что рекомбинантные аденовирусы достигают высокой эффективности по генному переносу после направленной доставки in vivo в эпителий дыхательных путей, гепатоциты, сосудистый эндотелий, паренхиму ЦНС и множество других тканевых сайтов (Morsy, J. Clin. Invest. 92: 1580-1586 (1993); Kirshenbaum, J. Clin. Invest. 92:381-387 (1993); Roessler, J. Clin. Invest. 92: 1085-1092 (1993): Moullier, Nature Genetics 4: 154-159 (1993); La Salle, Science 259: 988-990 (1993); Gomes-Foix, J. Biol. Chem. 267: 25129-25134 (1992); Rich, Human Gene Therapy 4: 461-476 (1993); Zabner, Nature Genetics 6: 75-83 (1994); Guzman, Circulation Research 73: 1201-1207 (1993); Bout, Human Gene Therapy 5: 3-10 (1994); Zabner, Cell 75: 207-216 (1993); Caillaud, Eur J. Neuroscience 5: 1287-1291 (1993) и Ragot, J. Gen. Virology 74: 501-507 (1993)). Рекомбинантные вирусы осуществляют генную трансдукцию путем связывания со специфическими рецепторами на клеточной поверхности, после чего вирус подвергается интернализации по механизму эндоцитоза, опосредованного рецептором, таким же образом, что и аденовирус дикого типа или аденовирус, дефектный по репликации (Chardonnet and Dales, Virology 40: 462-477 (1970); Brown and Burlingham, J. Virology 12: 386-396 (1973); Svensson and Persson, J. Virology 55: 442-449 (1985); Seth et al., J. Virol. 51: 650-655 (1984); Seth et al., Mol. Cell. Biol. 4: 1528-1533 (1984); Varga et al., J. Virology 65: 6061-6070 (1991); Wickham et al., Cell 73: 309-319 (1993)).
Вирусным вектором может быть такой вектор, который основан на аденовирусе с удаленным геном Е1, где указанные вирионы получают в клеточной линии, такой как линия клеток человека 293. В одном аспекте и Е1, и гены Е3 удаляют из генома аденовируса.
Другой тип вирусного вектора основан на аденоассоциированном вирусе (AAV). Указанный дефектный парвовирус может инфицировать клетки любого типа, и он не патогенен для человека. Вирусы AAV типа могут транспортировать от 4 до 5 килобайт и известно, что AAV дикого типа стабильно встраиваются в хромосому 19. В качестве примера можно отметить, что указанный вектор может представлять собой вектор P4.1 C, производимый компанией Avigen, San Francisco, CA, который может содержать хелперный ген тимидинкиназы вируса простого герпеса, HSV-tk и/или маркерный ген, такой как ген, кодирующий зеленый флуоресцентный белок, GFP.
В случае другого типа AAV вируса, указанный AAV содержит пару инвертированных концевых повторов (ITR), которые фланкируют по меньшей мере одну кассету, содержащую промотор, направляющий специфичную для клетки экспрессию, который функционально связан с гетерологичным геном. Термин «гетерологичный» в данном контексте относится к любой нуклеотидной последовательности или гену, которые не являются нативными для AAV или B19 парвовируса.
В типичном случае кодирующие участки AAV и В19 делетируют, что приводит к получению безопасного не цитотоксичного вектора. ITR AAV или их модификации придают инфекционность и возможность сайт-специфической интеграции, но не цитотоксичность, а промотор направляет экспрессию, специфичную для клетки. В настоящее изобретение включен патент США №6261834 в качестве ссылки, в части, относящейся к AAV-вектору.
Таким образом, описываемые векторы обеспечивают наличие молекул ДНК, способных к интеграции в хромосому млекопитающих без заметной токсичности.
Встроенные гены в вирусных и ретровирусных системах обычно содержат промоторы и/или энхансеры, помогающие контролировать экспрессию желательного генного продукта. В основном промотор представляет собой одну или несколько последовательностей ДНК, которые функционируют в том случае, когда они находятся в относительно фиксированном положении от сайта старта транскрипции. Промотор содержит ядерные элементы, необходимые для базисного взаимодействия РНК-полимеразы и факторов транскрипции, и может содержать элементы и отвечающие элементы, расположенные против направления считывания информации.
Молекулярно-генетические эксперименты с использованием крупных вирусов герпеса человека позволили разработать механизм, посредством которого крупные гетерологичные фрагменты ДНК могут быть клонированы, размножены и установлены в клетках, чувствительных к инфекции вирусами герпеса (Sun et al., Nature genetics 8: 33-41, 1994; Cotter and Robertson, Curr Opin Mol Ther. 5: 633-644, 1999). Указанные крупные ДНК вирусов (вируса простого герпеса (HSV) и вируса Эпштейна-Барра (EBV)) обладают способностью к доставке фрагментов человеческой гетерологичной ДНК размером >150 килобайт в специфические клетки. Рекомбинантные EBV могут поддерживать существование крупных частей ДНК в инфицированных B-клетках в виде эписомальной ДНК. Индивидуальные клоны несут вставки человеческого генома до размером 330 кбайт, будучи, по всей видимости, генетически стабильными. Поддержание указанных эписом требует наличия специфического ядерного белка EBV, EBNA1, который конститутивно экспрессируется в ходе инфекции EBV. Дополнительно, указанные векторы могут использоваться для трансфекции, входе которой временно может генерироваться in vitro большое количество белка. Системы с ампликоном вируса герпеса также используются для целей упаковки частей ДНК размером >220 кбайт и инфекции клеток, которые могут стабильно поддерживать ДНК в виде эписом.
Другие полезные системы включают, например, векторы на основе вируса осповакцины, реплицирующиеся и ограниченные по хозяйскому организму.
Описываемые композиции могут доставляться в целевые клетки с помощью множества способов. Например, указанные композиции могут доставляться с помощью электропорации или с помощью липофекции, или по методу осаждения фосфатом кальция. Выбранный механизм доставки зависит частично от типа целевой клетки и от того, как будет осуществляться доставка, например, in vivo или in vitro.
Таким образом, рассматриваемые композиции могут включать, в дополнение к описываемым полипептидам, нуклеиновые кислоты или векторы, например, липиды, такие как липосомы, такие как катионные липосомы (например, DOTMA, DOPE, DC-холестерин) или анионные липосомы. Липосомы могут также включать белки для облегчения доставки в конкретную клетку, при желании. Введение композиции, включающей указанное соединение и катионную липосому, может осуществляться в кровь, афферентно к целевому органу, или путем ингаляции в дыхательные пути в направлении к целевым клеткам дыхательных путей. Информация по липосомам приведена, например, в следующих работах: Brighman et al., Am. J. Resp. Cell. Mol. Biol. 1: 95-100 (1989); Felgner et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 7413-7417 (1987); патент США №4897355. Кроме того, указанное соединение может вводиться в качестве компонента микрокапсулы, которая может направляться к клеткам специфических типов, таким как макрофаги, или в тех случаях, когда диффузия соединения или доставка соединения из микрокапсулы должна осуществляться с определенной скоростью или с достижением определенной дозировки.
В описанных выше способах, которые включают введение и поглощение экзогенной ДНК в клетки индивидуума (например, путем генной трансдукции или трансфекции), доставка композиции в клетки может осуществляться с помощью множества механизмов. В качестве одного примера можно отметить, что доставка может осуществляться с помощью липосомы при использовании коммерчески доступных липосомных препаратов, таких как LIPOFECTIN, LIPOFECTAMINE (GIBCO-BRL, Inc., Gaithersburg, MD), SUPERFECT (Qiagen, Inc. Hilden, Germany) и TRANSFECTAM (Promega Biotec, Inc., Madison, WI), а также с использованием других липосом, разработанных в соответствии с процедурами, стандартными для данной области. Кроме того, описываемые нуклеиновая кислота или вектор могут доставляться in vivo путем электропорации, методика проведения которой доступна от компании Genetronics, Inc. (San Diego, CA), а также с помощью устройства для сонопорации SONOPORATION (ImaRx Pharmaceutical Corp., Tucson, AZ).
Нуклеиновые кислоты, которые доставляются в клетки, где они должны интегрироваться в геном хозяйской клетки, в типичном случае содержат последовательности для интеграции. Указанные последовательности зачастую являются последовательностями, близкими к вирусным, в частности, в том случае, когда используют системы на основе вирусов. Указанные системы вирусной интеграции могут быть также включены в нуклеиновые кислоты, которые подлежат доставке с использованием системы, основанной не на нуклеиновой кислоте, такой как липосома, так что нуклеиновая кислота, содержащаяся в системе доставки, может быть интегрирована в хозяйский геном.
Другие основные методики интеграции в хозяйский геном включают, например, систему, разработанную для усиления гомологичной рекомбинации с хозяйским геномом. Указанная система в типичном случае основана на последовательности расположенной по обе стороны подлежащей экспрессии нуклеиновой кислоты, которая обладает достаточной гомологией с целевой последовательностью в геноме хозяйской клетки, так что происходит рекомбинация между нуклеиновой кислотой вектора и целевой нуклеиновой кислотой, приводящая к интеграции доставляемой нуклеиновой кислоты в хозяйский геном. Указанные системы и способы, необходимые для усиления гомологичной рекомбинации, известны специалистам в данной области.
Композиции могут доставляться в клетки индивидуума in vivo и/или ex vivo с использованием множества механизмов, известных в данной области (например, поглощение оголенной ДНК, слияние липосом, внутримышечная инъекция ДНК с помощью генной пушки, эндоцитоз и т.п.).
Если используются методы ex vivo, клетки или ткани могут быть отобраны и далее поддерживаться за пределами организма по стандартным протоколам, известным в данной области. Композиции могут быть введены внутрь клеток посредством любого механизма генного переноса, такого как, например, генная доставка с использованием фосфата кальция, электропорация, микроинъекция или использование протеолипосом. Трансдуцированные клетки далее подвергают инфузии (например, в фармацевтически приемлемом носителе) или в гомотропном варианте трансплантируют назад в организм индивидуума с использованием стандартных методик, подходящих для данного типа клетки или ткани. В данной области известны стандартные методики, подходящие для трансплантации или инфузии различных клеток в организм индивидуума.
Нуклеиновые кислоты, которые доставляются в клетки, в типичном случае содержат системы контроля экспрессии. Например, встроенные гены в вирусных и ретровирусных системах обычно содержат промоторы и/или энхансеры, помогающие контролировать экспрессию желательного генного продукта. Промотов представляет собой, в основном, одну или несколько последовательностей ДНК, которые функционируют, находясь в относительно фиксированном положении от сайта старта транскрипции. Промотор содержит ядерные элементы, необходимые для базисного взаимодействия РНК-полимеразы и факторов транскрипции, и может содержать элементы и отвечающие элементы против направления считывания информации.
Промоторы, контролирующие транскрипцию из векторов в хозяйских клетках млекопитающих, могут быть получены из различных источников, например, из геномов вирусов, таких как вирус полиомы, обезьяний вирус 40 (SV40), аденовирус, ретровирусы, вирус гепатита B, цитомегаловирус, или могут быть получены из гетерологичных промоторов млекопитаюшщих, например, из промотора бета-актина. Ранние и поздние промоторы вируса SV40 могут быть легко получены в виде фрагмента рестрикции SV40, который также содержит ориджин репликации SV40 (Fiers et al., Nature, 273: 113 (1978)). Очень ранний промотор человеческого мегаловируса может быть получен в виде фрагмента рестрикции HindIII E (Greenway, P.J. et al., Gene 18: 355-360 (1982)). И разумеется, промоторы из хозяйской клетки или родственного вида также могут использоваться в данном контексте.
Энхансеры в основном относятся к последовательности ДНК, которые функционируют на расстоянии от сайта старта транскрипции, которое не фиксировано, и могут быть либо в 5'- (Laimins. P.J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78: 993 (1981)), либо в 3'- (Lusky, M.L., et al., Mol. Cell. Biol. 3: 1108 (1983) положении относительно единицы транскрипции. Кроме того, энхансеры могут находиться в составе интрона (Banerji, J. L. et al., Cell 33: 729 (1983)), а также в составе самой кодирующей последовательности (Osborn, T.F., et al., Mol. Cell. Biol. 4: 1293 (1984)). Они обычно включают от 10 до 300 пн в длину и функционируют в цис-положении. Функция энхансеров заключается в повышении транскрипции от близлежащих промотеров. Энхансеры также зачастую содержат отвечающие элементы, которые вовлекаются в регуляцию транскрипции. Промоторы могут также содержать отвечающие элементы, которые вовлекаются в регуляцию транскрипции. Энхансеры зачастую определяют регуляцию экспрессии гена. Хотя в настоящее время известно множество энхансерных последовательностей в генах млекопитающих (глобина, эластазы, альбумина, α-фетопротеина и инсулина), в типичном случае для основной экспрессии используют энхансер из вируса эукариотической клетки. Соответствующие примеры включают энхансер SV40 на поздней стороне ориджина репликации (100-270 пн), энхансер раннего промотора цитомегаловируса, энхансер вируса полиомы на поздней стороне ориджина репликации и энхансеры аденовируса.
Промотор и/или энхансер могут быть специфически активированы либо светом, либо специфическими химическими факторами, которые запускают данную функцию. Системы могут подвергаться регуляции реагентами, такими как тетрациклин и дексаметазон. Имеется несколько путей повышения экспрессии гена вирусного вектора, таких как воздействие облучением, таким как гамма-облучение, или с помощью алкилирующих химиотерапевтических препаратов.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения промоторный и/или энхансерный участки могут действовать как конститутивный промотор и/или энхансер в направлении максимизации экспрессии участка единицы транскрипции, подвергаемого транскрибции. В некоторых конструкциях промоторный и/или энхансерный участки будут активны во всех типах эукариотических клеток, даже если они экспрессируются только в конкретном типе клетки в конкретное время. К промотору данного типа относится промотор CMV (650 оснований). Другие такие промоторы включают промоторы SV40, цитомегаловируса (промотор полной длины) и промотор ретровирусного вектора LTR.
Было показано, что все специфические регуляторные элементы могут быть клонированы и использованы для конструирования векторов экспрессии, которые селективно экспрессируются в клетках конкретных клеточных типов, таких как клетки меланомы. Промотор глиального фибриллярного уксусного белка (GFAP) использовался для селективной экспрессии генов в клетках глиального происхождения.
Векторы экспрессии, используемые в эуакариотических хозяйских клетках (дрожжи, грибы, насекомые, растение, животное, человек или ядерные клетки), могут также содержать последовательности, необходимые для терминации транскрипции, которые могут влиять на экспрессию мРНК. Указанные участки транскрибируются в виде полиаденилированных сегментов в нетранслируемой части мРНК, кодирующей тканевой белковый фактор. 3'-нетранслируемые участки также включают сайты терминации транскрипции. Единица транскрипции может также содержать участок полиаденилирования. Одним преимуществом такого участка является тот факт, что он повышает вероятность того, что транскрибируемая единица будет далее процессирована и транспортирована как мРНК. Идентификация и использование сигналов полиаденилирования в конструкциях экспрессии хорошо известны. Гомологичные сигналы полиаденилирования могут использоваться в трансгенных конструкциях. В некоторых единицах транскрипции участок полиаденилирования происходит из раннего сигнала полиаденилирования SV40 и состоит примерно из 400 оснований. Транскрибированные единицы содержат другие стандартные последовательности, сами по себе или в сочетании с указанными выше последовательностями, для повышения экспрессии или стабильности конструкции.
Вирусные векторы могут включать последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую маркерный продукт. Указанный маркерный продукт используют для определения того, был ли ген доставлен в клетку и, при доставке, был ли он экспрессирован. Примеры маркерных генов включают lacZ-ген E.coli, который кодирует β-галактозидазу, а также зеленый флуоресцентный белок.
В некоторых вариантах осуществления изобретения маркер может представлять собой селективный маркер. Примеры подходящих селектируемых маркеров для использования в клетках млекопитающих, включают дигидрофолятредуктазу (DHFR), тимидинкиназу, неомицин, аналог неомицина G418, гидромицини пуромицин. В том случае, когда такие селектируемые маркеры успешно переносятся в клетку хозяина-млекопитающего, указанная трансформированная хозяйская клетка может выжить, если она помещена в условия селективного давления. Имеется две широко используемые различные группы режимов селекции. Первая категория определяется клеточным метаболизмом и основана на использовании мутантной клеточной линии, которая потеряла способность расти без добавок среды. Два других примера включают DHFR-клетки яичника китайского хомяка (CHO) и мышиные LTK-клетки. Указанные клетки потеряли способность расти без добавления таких питательных компонентов, как тимидин или гипоксантин. Поскольку указанные клетки потеряли определенные гены, необходимые для осуществления полного пути синтеза нуклеотидов, они не могут выживать, если отсутствуют соответствующие нуклеотиды в виде добавок к среде. Альтернативой использования добавок к среде является встраивание интактного DHFR-гена или TK-гена в клетки, потерявшие соответствующие гены, что изменяет их ростовые потребности. Индивидуальные клетки, которые не были трансформированы DHFR или TK-генами, будут не способны выживать в средах без добавок.
Вторая категория представляет собой доминантную селекцию, которая относится к схеме селекции, используемой в любом типе клеток и которая не требует наличия мутантной клеточной линии. Указанные схемы в типичном случае основаны на применении лекарственного препарата, останавливающего рост хозяйской клетки. Те клетки, которые содержат новый ген, будут экспрессировать белок, придающий лекарственную резистентность, и будут выживать в ходе селекции. Примеры такой доминантной селекции включают использование препаратов неомицина (Southern P. and Berg, P., J. Molec. Appl. Genet. 1: 327 (1982)), микофеноловой кислоты (Mulligan, R. C. and Berg P. Science 209: 1422 (1980)) или гидромицина (Sugden, B. et al., Mol. Cell. Biol. 5: 410-413 (1985)). Три примера относятся к использованию бактериального гена, функционирующего под контролем эукариотических клеток и придающего резистентность к соответствующему препарату G418 или неомицину (генетицин), xgpt (микофеноловая кислота) или гигромицину, соответственно. Другие включают неомициновый аналог G418 и пуромицин.
Настоящее изобретение также относится к клетке, включающей один или несколько описываемых векторов. В контексте настоящего описания термины «клетка», «клеточная линия» и «клеточная культура» могут использоваться взаимозаменяемо, и все такие обозначения включают потомство данных клеток. Описываемая клетка может быть любой клеткой, используемой для клонирования или размножения векторов согласно настоящему описанию. Таким образом, клетка может относиться к первичной клеточной культуре или к установленной клеточной линии. Указанный метод применим к любой клетке, включая прокариотическую или эукариотическую клетку, такую как бактериальная клетка, клетка растения, животного и т.п. Тип клетки может быть выбран специалистом в данной области с учетом выбранного вектора и желательного направления использования.
Настоящее изобретение также относится к животным, получаемым по способу трансфекции клетки животного любыми молекулами нуклеиновой кислоты или векторами согласно настоящему описанию. Настоящее описание относится к животным, получаемым в результате трансфекции клетки животного любыми молекулами нуклеиновой кислоты или векторами согласно настоящему описанию, где указанное животное представляет собой млекопитающее. Изобретение также относится к животным, получаемым по способу трансфекции клетки животного любыми молекулами нуклеиновой кислоты или векторами согласно настоящему описанию, где указанное животное представляет собой мышь, крысу, кролика, корову, овцу, свинью или примата.
Предлагается композиция, включающая один или несколько полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов согласно настоящему описанию в фармацевтически приемлемом носителе. Таким образом, предлагается композиция, включающая сочетание двух или более любых приведенных в настоящем описании АСТ-полипептидов в фармацевтически приемлемом носителе. Например, предлагается композиция, включающая SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 5 в фармацевтически приемлемом носителе.
Термин «фармацевтически приемлемый» относится к материалу, который не является биологически или в ином плане нежелательным, то есть к материалу, вводимому в организм индивидуума вместе с нуклеиновой кислотой или вектором и который не будет вызывать какие-либо нежелательные биологические эффекты или вредные взаимодействия с любыми другими компонентами фармацевтической композиции, в составе которой он находится. Носитель обычно выбирают таким образом, чтобы достичь минимизации любой возможной деградации активного ингредиента, а также с целью минимизации любых возможных побочных эффектов у индивидуума, в соответствии с методиками, известными специалистам в данной области.
Композиция согласно настоящему описанию может также включать любое известное или заново открытое вещество, которое может вводиться в рану, повреждение ткани, сайт воспаления или сайт рака. Например, композиция согласно настоящему изобретению может также включать один или несколько классов антибиотиков (например, аминогликозиды, цефалоспорины, хлорамфеникол, клиндамицин, эритромицины, фторхинолоны, макролиды, азолиды, метронидазол, пенициллины, тетрациклины, триметоприм-сульфаметоксазол, ванкомицин), стероидов (например, андраны (например, тестостерон), холестаны (например, холестерин), холевые кислоты (например, холевая кислота), кортикостероиды (например, дексаметазон), эстраены (например, эстрадиол), прегнаны (например, прогестерон), наркотических и не наркотических анальгетиков (например, морфин, кодеин, героин, гидроморфон, леворфанол, меперидин, метадон, оксидон, пропоксифен, фентанил, метадон, налоксон, бупренорфин, буторфанол, налбуфин, пентазоцин), хемотерапевтических агентов (например, противораковые препараты, включающие, без ограничения, альтретамин, аспарагиназу, блеомицин, бусульфан, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, диэтилстилбестрол, этинилэстрадиол, этопозид, флоксуридин, флударабин, фторурацил, флутамид, гозерелин, гидроксимочевину, идарубицин, ифосфамид, леупролид, левамизол, ломустин, меклоретамин, медроксипрогестерон, мегестрол, мелфалан, меркаптопурин, метотрексат, митомицин, митотан, митоксантрон, паклитаксел, пентастатин, пипоброман, пликамицин, преднизон, прокарбазин, стрептозоцин, тамоксифен, тенипозид, винбластин, винкристин), противовоспалительных средств (например, алклофенак, дипропионат алклометазона, ацетонид алгестона, альфа-амилаза, амцинафал, амцинафид, амфенак-натрий, гидрохлорид амиприлоза, анакинра, аниролак, анитразафен, апазон, балсалазид-динатрий, бендазак, беноксапрофен, гидрохлорид бензидамина, бромелаины, броперамол, будезонид, карпрофен, циклопрофен, цинтазон, клипрофен, пропионат клобетазола, бутират клобетазона, клопирак, пропионат клотиказона, ацетат корметазона, деканоат кортодоксона, дефлазакорт, делатестрил, депо-тестостерон, дезонид, дезоксиметазон, дипропионат дексаметазона, диклофенак-калий, диклофенак-натрий, диацетат дифлоразона, дифлумидон-натрий, дифлунизал, дифлупреднат, дифталон, диметилсульфоксид, дроцинонид, эндризон, энлимомаб, эноликам-натрий, эпиризол, этодолак, этофенамат, фелбинак, фенамол, фенбуфен, фенклофенак, фенклорак, фендозал, фенпипалон, фентиазак, флазалон, флуазакорт, флуфенамовая кислота, флумизол, ацетат флунизолида, флуниксин, флуниксин-меглумин, флуокортинбутил, ацетат фторметанола, флуквазон, флурбипрофен, флуретофен, пропионат флутиказона, фурапрофен, фуробуфен, галцинонид, пропионат галобетазола, ацетат галопредона, ибуфенак, ибупрофен, ибупрофен-алюминий, ибупрофен-пиконол, илонидап, индометацин, индометацин-натрий, индопрофен, индоксол, интразол, ацетат изофлупредона, изоксепак, изоксикам, кетопрофен, гидрохлорид лофемизола, ломоксикам, этабонат лотепреднола, меклофенамат-натрий, меклофенамовая кислота, дибутират меклоризона, мефенамовая кислота, мезаламин, мезеклазон, местеролон, метандростенолон, метенолон, ацетат метенолона, сулептанат метилпреднизолона, момифлумат, набуметон, нандролон, напроксен, напроксен-натрий, напроксол, нимазон, олсалазин-натрий, орготеин, орпаноксин, оксандролан, оксапрозин, оксифенбутазон, оксиметолон, гидрохлорид параналина, полисульфат пентозан-натрия, глицерат фенбутазон-натрия, пирфенидон, пироксикам, циннамат пироксикама, пироксикам-оламин, пирпрофен, предназат, прифелон, продолиновая кислота, проквазон, проксазол, цитрат проксазола, римексолон, ромазарит, салколекс, салнацедин, салзалат, хлорид сангинариума, секлазон, серметацин, станозолол, судоксикам, сулиндак, супрофен, талметацин, талнифлумат, талозалат, тебуфелон, тенидап, тенидап-натрий, теноксикам, тезикам, тезимид, тестостерон, тестостероновая смесь, тетридамин, тиопинак, пивалат тиксокортола, толметин, толметин-натрий, триклонид, трифлумидат, зидометацин, зомепирак-натрий) или антигистаминных средств (например, этаноламины (типа дифенгидраминкарбоноксамина), этилендиамин (типа трипеленнаминпириламина), алкиламин (типа хлорфенирамина, дексхлорфенирамина, бромфенирамина, трипролидина) и другие антигистаминные препараты, такие как астемизол, лоратадин, фексофенадин, бромфенирамин, клемастин, ацетаминофен, псевдоэфедрин, трипролидин).
Указанные композиции могут вводиться местно, перорально или парентерально. Например, композиции могут вводиться экстракорпорально, интракраниально, интравагинально, интраанально, подкожно, внутрикожно, интракардиально, внутрижелудочно, внутривенно, внутримышечно, путем внутрибрюшинной инъекции, трансдермально, интраназально или путем ингаляции. В контексте настоящего описания термин «интракраниальное введение» обозначает прямую доставку веществ в мозг, включая, например, интратекальную, интрецистеральную, внутрижелудочковую или транс-сфеноидальную доставку с помощью катетера или иглы.
Парентеральное введение композиции, в случае его использования, в основном проводится путем инъекции. Инъецируемее средства могут быть изготовлены в виде традиционных форм, имеющих вид либо жидких растворов, либо суспензий, а также твердых форм, приемлемых для получения раствора или суспензий в жидкости непосредственно перед инъекцией, или в виде эмульсии. В недавно разработанной новой стратегии парентерального введения используется система замедленного высвобождения или пролонгированного высвобождения веществ, так что поддерживается постоянная дозировка. См., например, патент США №3610795, который включен в настоящее описание в качестве ссылки.
В контексте настоящего описание термин «местное интраназальное введение» обозначает доставку композиции в нос и носовые пути через одну или обе ноздри и может включать доставку с использованием распыляющего устройства или путем капельного введения, или с помощью аэрозольных форм нуклеиновой кислоты или вектора. Введение композиции ингаляцией может быть осуществлено через нос или рот путем распыления или капельного нанесения. Доставка может также осуществляться на любую область дыхательной системы (например, в легкие) путем интубации.
Точное количество необходимых композиций будет варьировать от индивидуума к индивидууму и зависит от вида, возраста, веса, общего состояния здоровья индивидуума, тяжести аллергического расстройства, подлежащего лечению, конкретного вида используемых нуклеиновой кислоты или вектора, способа введения и т.п. Таким образом, невозможно определить точное количество для каждой композиции. Однако соответствующие количества могут быть определены специалистом в данной области с использованием лишь несложных стандартных экспериментов, приведенных в настоящем описании.
Вводимые материалы могут находиться в растворе или суспензии (например, включенные в состав микрочастиц, липосом или клеток). Они могут быть направлены на доставку к определенному типу клеток посредством антител, рецепторов или лигандов рецептора. Приведенные ниже ссылки описывают примеры использования методики доставки специфических белков в опухолевую ткань (Senter, et al., Bioconjugate Chem., 2: 447-451 (1991); Bagshawe, K. D., Br. J. Cancer, 60: 275-281 (1989); Bagshawe, et al., Br. J. Cancer, 58: 700-703, (1988); Senter, et al., Bioconjugate Chem., 4: 3-9 (1993); Battelli, et al., Cancer Immunol. Immunother., 35: 421-425, (1992); Pietersz and McKenzie, Immunolog. Reviews, 129: 57-80 (1992); и Roffler, et al., Biochem. Pharmacol, 42: 2062-2065 (1991)). Используются носители, такие как «stealth», и другие липосомы, конъюгированные с антителом (включая липидные средства доставки в клетки карциномы ободочной кишки), опосредованная рецептором доставка ДНК через специфические клеточные лиганды, лимфоцитарные средства доставки к опухолевой ткани и высокоспецифичные терапевтические ретровирусные системы доставки мышиных клеток глиомы in vivo. Приведенные ниже ссылки относятся к примерам использования данной технологии для целевой доставки специфических белков в опухолевую ткань (Hughes et al., Cancer Research, 49: 6214-6220 (1989); и Litzinger and Huang, Biochimica et Biophysica Acta, 1104: 179-187 (1992)). В основном, рецепторы вовлекаются в способах эндоцитоза, либо конститутивного, либо индуцированного лигандами. Указанные рецепторы собираются в кластер в покрытых клатрином впадинах, входят в клетку через везикулу, покрытую клатрином, проходят через окисленную эндосому, в которой рецепторы сортируются, и затем либо возвращаются в рецикл на клеточную поверхность и хранятся внутриклеточно, либо подвергаются деградации в лизосомах. Пути интернализации служат для достижения множества функций, таких как поглощение питательных компонентов, удаление активированных белков, выведение макромолекул, факультативное поступление вирусов и токсинов, диссоциация и деградация лиганда и регуляция на уровне рецептора. Многие рецепторы участвуют более чем в одном внутриклеточном пути, в зависимости от типа клетки, концентрации рецептора, типа лиганда, валентности лиганда и концентрации лиганда. Молекулярные клеточные механизмы опосредованного рецепторами эндоцитоза описаны в обзоре Брауна и Грина (Brown and Green, DNA and Cell Biology 10: 6, 399-409 (1991)).
Подходящие носители и их композиции описаны в руководстве Ремингтона (Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19th ed.) ed. A.R. Gennaro, Mack Publishung Company, Easton, PA 1995). В типичном случае используют подходящее количество фармацевтически приемлемой соли в композиции, с тем, чтобы придать композиции изотоничность. Примеры фармацевтически приемлемого носителя включают, без ограничения, солевой раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Величина pH раствора может составлять от примерно 5 до примерно 8, от примерно 7 до примерно 7,5. Другие носители включают препараты с пролонгированным высвобождением, такие как полупроницаемые матрицы твердых гидрофобных полимеров, содержащих антитело, где указанные матрицы могут иметь вид изделия определенной формы, например, могут представлять собой пленки, липосомы или микрочастицы. Для специалистов в данной области очевидно, что определенные носители могут быть более предпочтительными, что определяется, например, способом введения и концентрацией вводимой композиции.
Фармацевтические носители известны специалистам в данной области. Большая часть из них в типичном случае представляет собой стандартные носители для введения препаратов человеку, включающие растворы, такие как стерильная вода, солевой раствор и буферные растворы со значением рН в физиологическом диапазоне. Композиции могут вводиться внутримышечно или подкожно. Другие соединения также могут вводиться в соответствии со стандартными процедурами, используемыми специалистами в данной области.
Фармацевтические композиции могут, кроме выбранной молекулы, включать также носители, загустители, разбавители, буферы, консерванты, поверхностно-активные вещества и аналогичные агенты. Фармацевтические композиции могут включать один или несколько активных ингредиентов, таких как антимикробные средства, противовоспалительные средства, анестетики и т.п.
Фармацевтическая композиция может вводиться различными способами, в зависимости от того, какое введение желательно: местное или системное, и от зоны, подлежащей лечению. Введение может осуществляться местно (например, через глаза, вагинально, ректально, интраназально), перорально, путем ингаляции или парентерально, например, путем внутривенного прокапывания, подкожной, внутрибрюшинной или внутримышечной инъекцией.
Препараты для парентерального введения включают стерильные водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Примеры неводных растворителей включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительное масло, такое как оливковое масло, и инъецируемые сложные органические эфиры, такие как этилолеат. Водные носителя включают воду, спиртовые/водные растворы, эмульсии или суспензии, включая солевой раствор и забуференные среды. Парентеральные наполнители включают раствор хлорида натрия, раствор декстрозы Рингера, декстрозу и хлорид натрия, лактат-содержащий раствор Рингера или жирные масла. Носители для внутривенного введения включают жидкости и восполнители питательных компонентов, восполнители электролитных компонентов (такие как растворы на основе раствора декстрозы Рингера) и т.п. Могут также быть внесены консерванты и другие добавки, такие как, например, антимикробные агенты, антиоксиданты, хелатирующие агенты, инертные газы и т.п.
Композиции для местного введения включают мази, лосьоны, кремы, гели (например, гель полоксамера), капли, суппозитории, распыляемые препараты, жидкости и порошки. Могут быть необходимы или желательны традиционные фармацевтические носители, водные, порошковые или масляные основы, загустители и т.п. Описываемые композиции могут вводиться, например, в составе микроволокнистого продукта, полимера (например, коллагена), наносферы, аэрозоля, лосьона, крема, ткани, пластика, ткани, имеющей складчатую структуру, созданную по генно-инженерной технологии, матричного материала, таблетки, имплантируемого контейнера, порошка, масла, смолы, повязки на рану, шарика, микрошарика, шарика с замедленным высвобождением, капсулы, инъецируемых агентов, средств для внутривенного прокапывания, насосного устройства, силиконовых имплантатов или с помощью любых материалов, изготовленных методами биологический инженерии.
В одном аспекте предлагаемый фармацевтически приемлемый носитель представляет собой полоксамер. Полоксамеры, имеющие торговое название Pluronics®, представляют собой неионные поверхностно-активные вещества, которые образуют явные термообратимые гели в воде. Полоксамеры представляют собой три-блок-сополимеры полиэтиленоксида, полипропиленоксида и полиэтиленоксида (ПЭО-ППО-ПЭО). Две полиэтиленоксидных цепи являются гидрофильными, тогда как полипропиленовая цепь имеет гидрофобную природу. Указанные гидрофобные и гидрофильные характеристики оказывают свое воздействие, когда полимер вводят в водный раствор. ПЭО-ППО-ПЭО цепи принимают форму небольших цепочек, в которых гидрофобные центры объединяются с образованием мицелл. Мицеллы постепенно приобретают желирующие характеристики, поскольку они объединяются в группы с образованием твердых веществ (гелей), где вода присутствует лишь в незначительном количестве возле гидрофильных концов. При охлаждении мицелла становится жидкой и затвердевает при нагревании. Указанные свойства делают данный полимер полезным в фармацевтике при создании композиций, поскольку такая композиция может быть введена в шприц с возможностью точного отмеривания дозы в холодном состоянии. При нагревании до температуры тела (при нанесении на кожу) такая композиция затвердевает до нужной консистенции (особенно в случае объединения с соевым лецитином/изопропилпальмитатом) для облегчения втирания и адгезии. Pluronic® F127 (F127) широко используется, поскольку он может быть легко получен и, в этой связи, используется в такого рода фармацевтическом применении. F127 характеризуется соотношением ЭО:ПО:ЭО, равным 100:65:100, и весовым соотношением ПЭО:ППО, равным 2:1. Гель плуроника представляет собой водный раствор, который в типичном случае содержит 20-30% F127. Таким образом, предлагаемая композиция может вводиться в F127.
Композиции для перорального введения включают порошки или гранулы, суспензии или растворы в воде или в неводных средах, капсулы, пакетики или таблетки. Могут быть также желательны загустители, вкусовые вещества, разбавители, эмульгаторы, средства, способствующие диспергированию, или связующие вещества.
Некоторые композиции могут вводиться в виде фармацевтически приемлемой соли кислоты или основания, образуемой при реакции с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, хлорная кислота, азотная кислота, тиоциановая кислота, серная кислота и фосфорная кислота, и с органическими кислотами, такими как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, малеиновая кислота и фумаровая кислота, или в результате реакции с неорганическим основанием, таким как гидроксид натрия, гидроксид аммония, гидроксид калия, и органическими основаниями, такими как моно-, ди-, три-алкил- и ариламины и замещенные этаноламины.
Эффективные дозировки и режимы введения композиций могут быть определены эмпирически и выполнение таких определений доступно любому специалисту со средним уровнем знаний в данной области. Диапазон дозировок, подходящих для введения композиции, достаточно большой и определяется созданием желательного эффекта в отношении симптомов расстройства. Дозировка не должна быть слишком большой, с тем чтобы не вызвать неблагоприятных побочных реакций, таких как нежелательные перекрестные реакции, анафилактические реакции и т.п. В основном дозировка варьирует в зависимости от возраста пациента, состояния его здоровья, пола и тяжести заболевания, способа введения и от того, включены ли другие лекарственные препараты в курс лечения, и может быть определена любым специалистом со средним уровнем знаний в данной области. Дозировка может быть откорректирована лечащим врачом, в случае наличия каких-либо противопоказаний. Дозировка может варьировать и может вводиться однократно или в виде нескольких доз ежедневно, в течение одного или нескольких дней. Соответствующее руководство по подбору подходящих дозировок для конкретных классов фармацевтических продуктов можно найти в литературе. Диапазон дозировок в основном зависит от направления применения данной композиции, тяжести состояния пациента и способа введения композиции.
Например, при использовании в качестве лабораторного инструмента для исследований, композиции АСТ-пептида могут вводиться в таких низких дозах, как 0,01% (вес/объем). Дозировка может быть столь низкой, как 0,02% (вес/объем) и, возможно, столь высокой, как 2% (вес/объем), при местном нанесении на кожную рану. Значительно более высокие концентрации композиций, сами по себе или в сочетании с другими соединениями, могут использоваться в таких направлениях применения, как лечение рака/опухоли или в случае введения концентрированного болюса сразу после острого повреждения ткани. Таким образом, верхние границы предлагаемых полипептидов могут составлять 2-5% (вес/объем или объем/объем), в случае проведения первоначальной доставки болюсом, например, непосредственно в массу опухоли. Рекомендуемые верхние границы дозировки при парентеральном введении, например, при внутримышечном, интрацеребральном, интракардиальном и интраспинальном введении, могут состоять 1% (вес/объем или объем/объем), в зависимости от тяжести повреждения. Указанная верхняя граница дозировки может варьировать, в зависимости от композиции и определяется, например, тем, каким образом один или несколько указанных полипептидов объединяют с другими агентами, которые усиливают их действие или которые действуют в сочетании с указанными одним или несколькими полипептидами.
Для целей непрерывной доставки рассматриваемых полипептидов, например, в сочетании с внутривенным прокапыванием, верхние границы до 0,01 г/кг веса тела в течение курса лечения определяются лечащим врачом с учетом данных по улучшении состояния. В другом примере верхние границы концентрации предлагаемых нуклеиновых кислот при их местной доставке, например в рану на коже, составляют 5-10 мкг/см2 поверхности раны в зависимости, например, от того, как объединяют нуклеиновые кислоты с другими агентами, усиливающими их действие или действующими в сочетании с нуклеиновыми кислотами. При этом может осуществляться повторное введение с частотой, определяемой лечащим врачом на основании данных об улучшении состояния. В другом примере верхние границы концентрации предлагаемых нуклеиновых кислот, доставляемых в организм, например, путем внутримышечного, интрацеребрального, интракардиального и интраспинального введения, составляют 50-100 мкг/мл раствора. И также частота введения определяется лечащим врачом на основании данных об улучшении состояния.
Также раскрываются способы предварительной обработки соответствующей зоны предлагаемыми полипептидами перед хирургическим вмешательством. Концентрация полипептидов может составлять 10-200 мкМ в смеси с 10-30% гелем плуроника или с любым таким носителем, который способствует проникновению одного или нескольких пептидов в нужный сайт в течение периода времени, равного по меньшей мере 3-6 часов, до хирургического вмешательства. Такая предварительная обработка может улучшить последующее заживление после хирургии, включая сниженную воспалительную реакцию.
Вирусные векторы остаются широко используемыми экпериментальными инструментами, которые тем не менее демонстрируют значительный потенциал в плане их клинического применения. В этом случае следует соблюдать осторожность при расчете ожидаемых режимов дозировки для вирусных векторов, которые будут зависеть в основном от типа используемого вектора. Например, ретровирусные векторы эффективно инфицируют делящиеся клетки, такие как раковые клетки, путем интеркаляции в геном хозяйской клетки и непрерывной экспрессии кодируемых белков с неопределенными параметрами. Типичные дозировки ретровирусов на установленной модели животных составляют порядка 107-109 инфицирующих единиц на мл. И наоборот, аденовирусы наиболее эффективно действуют на постмитотические клетки, но клетки быстро устраняются иммунной системой хозяина, или вирус постепенно теряется, если инфицированные клетки вновь продолжают пролиферацию и впоследствии разбавляют эписомальную ДНК вируса. Фактически, такой временный курс инфекции может использоваться для кратковременной доставки композиции согласно настоящему изобретению в ряде клинических ситуаций, например, для облегчения состояния при небольшом повреждении. На экспериментальных моделях животных используют в типичном случае концентрации 108-1011 инфицирующих единиц на мл аденовируса. Диапазон дозировок вируса, определяемый на основании данных, полученных на моделях животных, должен быть тщательно изучен с целью их возможной адаптации в клинических учреждениях при разработке одной или нескольких фармацевтически приемлемых композиций.
Два местных нанесения АСТ-композиции в концентрациях 0,02% (вес/объем): где одна наносится в острой фазе, а вторая наносится через 24 часа, оказываются достаточными для снижения воспаления, ускорения заживления, снижения рубцевания, повышения прочности на разрыв и усиления регенерации ткани. При этом в клинических учреждениях рекомендуется повышенная частота введения, до 3 введений в день местно в концентрации до 5%, до достижения существенного улучшения, определяемого лечащим врачом. При введении внутрь организма, например, внутримышечно, внутривенно, интрацеребрально, интракардиально и интраспинально также рекомендуется повышенная частота введения, до 3 дозировок 1% (вес/объем или объем/объем) в день до достижения существенного улучшения, по оценке лечащего врача.
После введения описываемой композиции, такой как полипептид, для целей ускорения заживления раны, эффективность терапевтической композиции может быть оценена различными способами, известными специалистам в данной области. Например, для специалиста в данной области очевидно, что композиция, такая как полипептид согласно настоящему изобретению, будет считаться эффективной с точки зрения ускорения заживления раны у индивидуума, если данная композиция снижает рубцевание, снижает образование фиброзной ткани, улучшает регенерацию ткани или снижает воспаление у индивидуума после повреждения ткани. Способы измерения данных критериев известны специалистам в данной области и обсуждаются в настоящем описании.
В изобретении также предлагаются материалы, включающие описанные композиции (например, полипептиды, нуклеиновые кислоты или векторы). Например, предлагается материал, используемый для лечения ран, где указанные материалы покрывают АСТ-полипептидом. Неограничивающие примеры материалов, используемых для лечения ран, включают бандажи, стерильные полоски, кетгуты, сшивки, или трансплантаты (например, трансплантаты кожи).
Например, указанный материалы (в частности, бандаж, стерильная полоска, кетгут, сшивка, трансплантат) может быть погружен в данный полипептид с концентрацией от 10 до 200 мкМ. Далее материал может быть высушен и запечатан в стерильном контейнере. Материал может быть также погружен в жидкость, содержащую 10-30% геля плуроника при температуре 4°С, который содержит полипептид в концентрации 10-200 мкМ. Указанный материал затем может быть перенесен в комнату с температурой, которая примерно соответствует температуре полимеризации геля, при этом создается покрытие из геля, пропитанного полипептидом, окружающее материал, и далее указанный материал может быть введен в стерильный контейнер. Данный полипептид может быть также включен в систему сшитого гидрогеля, такого как поли(молочная-ко-гликолевая кислота) (PLGA) или полиуретан, который может быть изготовлен с получением соответствующих материалов для лечения ран (например, бандажа, стерильной полоски, кетгута, сшивки, трансплантата). Таким образом, предлагаются композитные гидрогель-пептидные материалы.
Описываются также медицинские имплантаты, которые покрывают данным полипептидом перед имплантацией индивидууму. Например, общей проблемой в таких направлениях имплантационной хирургии является образование сократимой капсулы вокруг имплантата в результате образования рубцовой ткани, которая ведет к нежелательному затвердеванию, сокращению и изменению формы интересующей ткани. Использование полипептида согласно настоящему изобретению в имплантатах или на имплантатах может снизить или предупредить такое изменение формы. Неограничивающие примеры медицинских имплантатов включают протезы конечности, имплантаты молочной железы, имплантаты полового члена, имплантаты яичек, искусственные глаза, имплантаты для лица, искусственнее суставы, протезы сердечного клапана, протезы сосудов, зубные протезы, лицевые протезы, скашивание дискового клапана, изолирование шарового клапана, ушные протезы, протезы носа, водители ритма, улитковые имплантаты и замещающие кожные имплантаты (например, свиной гетеротрансплантат/свиная кожа, BIOBRANE, культура кератиноцитов).
А. Способы
Ниже описывается способ ускорения заживления раны после повреждения ткани у индивидуума, включающий введение указанному индивидууму одной или нескольких композиций согласно настоящему изобретению (например, полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов) в фармацевтически приемлемом носителе. Далее описывается способ лечения индивидуума с повреждением ткани, включающий введение указанному индивидууму одной или нескольких композиций согласно настоящему изобретению (например, полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов) в фармацевтически приемлемом носителе.
Термины «ускорять», «ускорение» и «усиление» относятся к повышению активности, ответа, отзывчивости, выраженности состояния, заболевания или другого биологического параметра. Указанное явление может включать, без ограничения, инициацию активности, ответа, состояния или заболевания. Указанное явление может включать, например, 10% повышение активности, ответа, выраженности состояния или заболевания, в сравнении с нативным или контрольным уровнем. Таким образом, повышение может составлять 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100% или может описываться любым показателем повышения между указанными значениями, в сравнении с нативным или контрольным уровнями.
Под термином «лечить» или «лечение» понимают способ снижения эффектов заболевания или состояния. Лечение может также относиться к способу снижения причины заболевания или состояния, а не просто симптомов. Лечение может представлять собой снижение относительно нативных уровней и может представлять собой, без ограничения, полное устранение заболевания, состояния или симптомов заболевания или состояния. Например, описываемый способ ускорения заживления раны может рассматриваться как лечение, если отмечается 10% снижение одного или нескольких симптомов заболевания у индивидуума с данным заболеванием, при сравнении с нативными уровнями у того же индивидуума или у контрольных индивидуумов. Таким образом, снижение может составлять 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100% или может описываться любым показателем повышения между указанными значениями, в сравнении с нативным или контрольным уровнями.
Термин «индивидуум» в контексте настоящего описания относится, без ограничения, к животным, растениям, бактериям, вирусам, паразитам и любому другому организму или существу, которое содержит нуклеиновую кислоту. Индивидуум может представлять собой позвоночный индивидуум, более конкретно, млекопитающее (например, это может быть человек, лошадь, свинья, кролик, собака, овца, коза, примат, отличный от человека, корова, кошка, морская свинка или представитель грызунов), рыбы, птицы или пресмыкающееся или земноводное. Индивидуум может представлять собой беспозвоночное животное, например членистоногих (например, это могут быть насекомые и ракообразные). Данный термин не используется для обозначения конкретного возраста или пола. Таким образом, взрослый или новорожденный индивидуум, а также их плод, независимо от того, мужского или женского рода, охватывается данным термином. Пациентом может быть индивидуум, пораженный заболеванием или расстройством. Термин «пациент» включает человека и ветеринарных индивидуумов.
Предлагаемый способ может включать снижение образования рубцовой ткани у индивидуума после повреждения ткани. Термин «рубцовая ткань» обозначает фиброзную (фибротическую) соединительную ткань, которая образуется в месте повреждения или поражения заболеванием в любой ткани организма, в результате избыточной продукции коллагена и других белков соединительной ткани, которые действуют в направлении разрушения ткани. Рубцовая ткань может замещать поврежденную ткань и лежащие ниже мышцы, повреждая сердечную мышцу или поврежденные заболеванием зоны внутренних органов, таких как печень. Будучи плотной и толстой, она обычно более бледная, чем окружающая ткань, поскольку хуже снабжается кровью и, хотя структурно замещает разрушенную ткань, не может выполнять функции удаленной ткани. Она состоит в основном из коллагеновых волокон, которые часто ограничивают нормальную эластичность вовлеченной ткани. В этой связи, рубцовая ткань ограничивает диапазон мышечного движения или препятствует соответствующей циркуляции жидкости, поражая лимфатическую или кровеносную систему. Наличие глиальной рубцовой ткани после повреждения в мозге или позвоночнике представляет собой одну из основных проблем восстановления нейрональных функций после повреждения центральной нервной системы. Снижение образования рубцовой ткани может быть идентифицировано при оценке популяций клеточных типов в сайте повреждения. Например, снижение глиальной рубцовой ткани может быть оценено по увеличению соотношения нейронов к астроцитам. Снижение уровня образования рубцовой ткани может быть определено прямым измерением размера рубца, например, ширины или площади рубцовой ткани (Wilgus et al., 2003). Кроме того, может быть проведен гистологический анализ для оценки степени восстановления структурной сложности в пределах заживляемой ткани в сравнении с нормальной тканью.
Кроме использования в направлении снижения образования фиброзной ткани у индивидуума после повреждения ткани, описываемые композиции и способы могут также использоваться для лечений расстройств, ассоциированных с патологическим усилением образования фиброзной ткани у индивидуума, например, в случае псориаза, кожного и системного мастоцитоза, астмы, экземы, синусита, атеросклероза, ревматоидного артрита, воспалительной болезни кишечника, рассеянного склероза, легочного фиброза и кистозного фиброза. Снижение образования фиброзной ткани у индивидуума может быть определено по клиническим показателям лечащим врачом при оценке успешности воссоздания нормальной структуры и функции рассматриваемой ткани и/или органа у индивидуума после лечения. В качестве примера можно отметить, что в случае псориаза лечащий врач оценивает кожу у индивидуума для определения, имеется ли снижение числа пятен выступающей красной кожи, покрытой белыми чешуйками. Некоторые виды псориаза характеризуются наличием узелков (пустулярный псориаз) или выглядят как обожженные участки (эритодермный вариант). В таких случаях лечащий врач оценивает, привело ли проводимое лечение к снижению указанных симптомов. В тех случаях, когда лечащий врач делает вывод, что для данного индивидуума отбор биопсии ткани или органа клинически доступен и/или необходим, или этот вывод относится к модели заболевания человека на животном, получают фрагменты ткани для биопсии и гистологическую структуру исследует специалист в области клинической патологии и/или опытный гистопатолог для определения, имеется ли снижение образования фиброзной ткани и восстановление нормальной структуры и функции ткани. Участок фиброза, замещающий нормальную ткань, также оценивают в количественных показателях при исследовании таких гистологических препаратов.
Предлагаемый способ также позволяет восстановить нормальные механический свойства ткани, такие как прочность на разрыв, после повреждения ткани у индивидуума. Термин «прочность на разрыв» относится к уровню стресса или натяжения, необходимого для разрыва ткани или раны.
Прочность на разрыв ран после проведения лечения может составлять 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100% относительно неповрежденной ткани в первые 3 месяца после лечения. Таким образом, предлагается способ восстановления механических свойств ткани, в том числе повышения прочности на разрыв заживленной ткани, приближающейся или достигающей соответствующего уровня у нормальной неповрежденной ткани у индивидуума, включающий введение индивидууму одной или нескольких композиций согласно настоящему изобретению (например, полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов) в фармацевтически приемлемом носителе.
Тип ран, для которых может быть важен показатель прочности на разрыв-растяжимость, включает повреждение скелетно-мышечных структур/тканей и кожи, покрывающей указанные структуры. Например, предлагаемые способы могут повышать прочность на разрыв соединяющих суставов, кости, хряща, сухожилий или связок. Предлагаемые способы могут также повышать прочность на разрыв кожи при повышенном уровне стресса/напряжения, например, в случае кожи, покрывающей локоть, колено или ступню. Наиболее частые проблемы, ассоциированные с заживлением повреждения суставов, связаны с тем, что повышенное рубцевание на данных участках ведет к сокращению и нерастяжимости заживленного участка сустава. Это вызывает серьезные косметические и психологические последствия. Свойства данных пептидов позволяют модулировать и снижать образование такой рубцовой ткани, что сказывается на большей подвижности сустава.
Предлагаемый способ может повышать регенерацию ткани после повреждения ткани у индивидуума. Термин «регенерация» обозначает обновление, рост заново или восстановление организма или части тела, ткани или вещества после повреждения или в ходе нормального процесса, идущего в организме. В отличие от рубцевания, регенерация ткани приводит к восстановлению ткани до ее исходного структурного, функционального и физиологического состояния. В настоящем описании этот процесс обозначается термином «сложность». Восстановление может быть частичным или полным и составлять 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 100% восстановления, или может описываться любым показателем восстановления между указанными значениями, в сравнении с нативным или контрольным уровнями. В качестве примера можно отметить, что при повреждении кожи регенерация ткани может вовлекать восстановление волосяных фолликул, гландулярных структур, кровеносных сосудов, мышц или жировой ткани. В случае повреждения мозга тканевая регенерация может вовлекать поддержание или восстановление нейронов. В качестве примера можно отметить, что в случае повреждения кожи улучшение регенерации ткани может быть оценено на основании показателя соотношения объемов фиброзной рубцовой ткани и нормальной регенерированной ткани. В качестве примера можно отметить, что подсчет может быть проведен на дискретных регенерирующих структурах, таких как регенерирующая кожа желез, при нормализации до объема пораженной зоны.
В одном аспекте регенерация ткани вовлекает рекрутмент и дифференцировку стволовых клеток для замещения поврежденных клеток. В контексте настоящего описания термин «стволовая клетка» обозначает недифференцированную клетку, выявляемую среди дифференцированных клеток в ткани и органе, или вводимую из внешнего источника, например, в случае эмбриональных стволовых клеток, стволовых клеток костного мозга взрослого организма, которая может обновляться сама и дифференцироваться с образованием множества специализированных клеточных типов ткани или органа. Основная роль стволовых клеток в живом организме состоит в поддержании и восстановлении тканей, в которых они находятся. Под дифференцировкой стволовых клеток понимают процесс, посредством которого неспециализированная клетка (то есть стволовая клетка) приобретает свойства специализированной клетки, такой как кожа, невральная клетка, клетка сердца, печени или мышечная клетка. В качестве примера можно отметить, что в случае повреждения кожи регенерация ткани может вовлекать дифференцировку стволовых клеток, присутствующих в эпителии, до образования волосяных фолликул (Alonso and Fuchs, 2003). В случае повреждения мозга тканевая регенерация может вовлекать дифференцировку стволовых клеток до нейронов. Предлагаемый способ может повышать степень дифференцировки стволовой клетки после повреждения ткани у индивидуума. Повышенная дифференцировка стволовых клеток может быть определена при проведении клинически доступного генетического или другого теста, связанного с маркированием эндогенных или пересаженных стволовых клеток и определением частоты дифференцировки и включения маркированных стволовых клеток в нормальные тканевые структуры. В качестве другого примера можно отметить, что некоторые структуры, такие как волосяные фолликулы, как это известно, регенерируют из эндогенных стволовых клеток после повреждения ткани. При этом подсчет волосяных фолликул, при нормализации до площади повреждения ткани, будет служить мерой количественной оценки дифференцировки стволовых клеток.
Предлагаемый способ может снижать воспаление у индивидуума. Термины «воспаление», «воспалительный ответ» или «иммунный ответ» обозначают реакцию живых тканей на повреждение или раздражение, характеризующуюся покраснением, нагреванием, набуханием, болью и потерей функции, возникающими в результате повышенного кровотока и притока иммунных клеток и секретов. Воспаление представляет собой реакцию организма на внедряющиеся инфицирующиеся микроорганизмы и приводит к повышению кровотока в поврежденную зону, высвобождению химических веществ, которые притягивают лейкоциты, повышению потока плазмы и поступления моноцитов (или астроцитов в случае мозга) для очистки от осколков клеток. Все, что стимулирует воспалительный ответ, можно описать термином «воспалительный». Таким образом, кроме снижения воспаления у индивидуума в ответ на повреждение ткани, предлагаемые композиции и способы могут также использоваться для лечения расстройств, ассоциированных с патологическим повышение уровня воспалительных клеток, включая, например, астму, экзему, синусит, атеросклероз, ревматоидный артрит, воспалительную болезнь кишечника, кожный и системный мастоцитоз, псориаз и рассеянный склероз. Лечение с использованием описываемого полипептида может также снижать зуд, например, в случае заживающих ран. В основном, зуд представляет собой результат высвобождения гистамина тучными клетками. Предлагаемый полипептид может снижать дегрануляцию тучных клеток и высвобождение гистамина. Таким образом, предлагаемый полипептид может использоваться для лечения состояний, вовлекающих высвобождение гистамина, которые включают, без ограничения, зуд, расчесывание, раздражение синусов, аллергический кашель, покраснение глаз, астму и экзему.
Снижение воспаления может быть идентифицировано путем оценки снижения плотности воспалительных клеток таких типов, как, например, моноциты и астроциты. Снижение воспаления может быть также определено как снижение плотности воспалительных клеток таких типов, как нейтрофилы, тучные клетки, базофилы и моноциты. Снижение воспаления может быть подсчитано путем определения in vivo активности нейтрофилов (Jones et al, 1994). Кроме того, для определения снижения воспаления могут быть использованы такие факторы, как частота дегрануляции тучных клеток или уровни гистамина или уровни реакционноспособных видов кислорода. Степень воспаления может быть определена при оценке уровня транскрипции некоторых генов по методу qRT-PCR, например, для таких генов, как интерферон-альфа, -бета или -гамма, фактор некроза опухолевой ткани-альфа, интерлейкин 1 бета, -2, -4, -5, -6, -8, -12, -18, -23, -27, CD4, CD28, CD80, CD86, MHCII и iNOS. Измерение уровней провоспалительных цитокинов тканей или в жидкостях организма у индивидуума, включая плазму, может использоваться для оценки снижения уровня воспаления. Следует отметить, что механизм действия АСТ-пептидов может представлять собой ингибирование миграции воспалительных клеток и/или ингибирование провоспалительных химических компонентов (гистидина, реакционноспособных видов кислорода) и провоспалительных цитокинов, таких как интерлейкин (IL-1, IL-6, IL-8) и фактор некроза опухолевой ткани (TNF).
Описываемый способ может использоваться для ингибирования пролиферации трансформированной клетки у индивидуума (см. фиг.2). Трансформированная клетка в контексте настоящего описания обозначает клетку неоплазмы, рака или опухоли, которая делится или репродуцируется аномально в ходе неконтролируемого роста. Таким образом, ингибирование пролиферации (то есть гиперплазии) указанной трансформированной клетки проводит к снижению роста и, вследствие этого, снижению злокачественного перерождения при раке. Репрезентативный, но не ограничивающий перечень видов рака, для лечения которых могут использоваться описанные композиции и способы, включают следующие виды: глиому, лимфому, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, фунгоидную гранулему, болезнь Ходжкина, миелоидный лейкоз, рак мочевого пузыря, рак головного мозга, рак нервной системы, рак головы и шеи, мелкоклеточную карциному головы и шеи, рак почки, рак легкого, такой как мелкоклеточный рак легкого и не мелкоклеточный рак легкого, нейробластому, глиобластому, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак печени, меланому, мелкоклеточную карциному ротовой полости, горла, гортани и легкого, рак ободочной кишки, цервикальный рак, цервикальную карциному, рак молочной железы, эпителиальный рак, рак почки, рак мочеполового тракта, рак легкого, карциному пищевода, карциному головы и шеи, рак толстой кишки, виды гематопоэтического рака, рак яичка, рак ободочной и прямой кишки, рак простаты или рак поджелудочной железы. Таким образом, предлагаемые способы могут использоваться для лечения рака у индивидуума. Например, предлагаемый способ может использоваться для лечения глиомы у индивидуума.
Ингибирование пролиферации трансформированной клетки может быть определено с использованием множества маркеров пролиферации клеток и наборов, например, набора Ki67/MIB-1 для иммунологического окрашивания, меченого тритием тимидина или меченого бромдезоксиуридина, фракции S-фазы ДНК, экспрессии ядерного антигена пролиферирующей клетки, показателя времени потенциального удвоения, а также при проведении анализа белков, ассоциированных с нуклеолярным организующим участком (AgNORs). Поскольку пролиферативная активность опухоли зависит и от пропорции клеток, поступающих в цикл (фракция роста), и от скорости протекания клеточного цикла, истинная пролиферативная активность опухоли может быть определена по уравнению [PA=Ki67 или показатель MIB-1 × AgNORs] (Pich et al., 2004). В другом примере проводится оценка образцов биопсии опытным гистопатологом с использованием простых качественных и количественных митотических показателей для оценки пролиферации в популяциях трансформированных клеток.
Были разработаны различные модели с использованием мышей для исследования рака. Имеются специфические модели мышей для изучения конкретных видов рака. Например, к ним относятся: рак мочевого пузыря, цервикальный рак, рак эндометрия, рак желудочно-кишечного тракта, рак мочеполового тракта, рак головы и шеи, гематопоэтический рак, рак почки, рак легкого, рак молочной железы, меланома, миелома, рак нервной системы, рак ротовой полости, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, саркома, рак кожи. Указаны модели широко описаны и используются. Благоприятные эффекты полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов согласно настоящему описанию могут быть исследованы на любой из указанных моделей. Например, модель мыши с раком кожи может легко использоваться для целей демонстрации. Рак может культивироваться на модели с ксенотрансплантатом растущей раковой ткани человека с использованием специфической, беспатогенной homo-инбредной мыши (nude) (Yoo, 2004). Полипептиды, нуклеиновые кислоты или векторы согласно настоящему описанию могут вводиться в местном режиме с использованием материалов, полученных методами генной инженерии, таких как полые волокнистые мембраны (Orlandini and Margaria, 1993; Ming Chu et al., 1998) и микроволокна, шарики с замедленным высвобождением, гиподермные иглы, вставляемые катетеры, которые могут вводиться локально в сайт ракового роста или могут вводиться системно для достижения своей мишени, например, путем внутривенной инфузии, внутримышечной или внутрибрюшинной инъекции. Данное лечение может проводиться само по себе или в сочетании с другими терапевтическими соединениями, например, в сочетании с химиотерапевтическими агентами.
Предлагаемый способ позволяет ингибировать метастазирование трансформированной клетки у индивидуума. Термин «метастазирование» обозначает перенос раковых клеток из исходного сайта в один или несколько сайтов по всему телу, обычно посредством кровеносных сосудов или лимфатических сосудов. Метастазы могут быть разрушены в результате серии явлений. Во-первых, миграция раковых клеток начинается с процесса, посредством которого опухолевые клетки покидают сайт первичного роста, зачастую проникая через базальную мембрану и двигаясь в направлении локальной сосудистой сетки. Интравазация представляет собой процесс, посредством которого раковая клетка поступает в сосудистую клетку и распределяется по отдаленным сайтам. Экстравазация относится к процессу выхода раковой клетки из сосудистой сетки. И наконец, пролиферация раковых клеток в удаленном сайте в заметной степени определяется доступностью локализованного ростового фактора, влиянием стромальных клеток и окружающей внеклеточной матрицы (так называемой «почвы»), а также зависит от доступности питательных компонентов и факторов, поставляемых образуемой сосудистой сеткой растущей опухоли. Таким образом, предлагаемые композиции и способы могут ингибировать матастазирование трансформированных клеток у индивидуума посредством ингибирования миграции (то есть метастазной миграции) указанной клетки. Опухолегенез представляет собой результат разбалансировки клеточного цикла, что ведет к неконтролируемой клеточной пролиферации. При этом отсутствует регуляция специфических клеточных процессов-механизмов, которые контролируют прогрессирование клеточного цикла и контрольные точки пресечения через интермитозные фазы. В норме указанные события являются высококонсервативными, в связи с существованием консервирующих механизмов и молекул, таких как гены клеточного цикла и их продукты. Ингибирование метастазной миграции может быть измерено по уровню таких генов клеточного цикла и их продуктов, как, например, циклины, циклин-зависимые киназы (Cdk), ингибиторы Cdk (CKI) и внеклеточные факторы (например, факторы роста). В настоящее время стали доступны поистине революционные методики, на основе использования лазерной цитометрии и коммерческого программного обеспечения, для изучения и количественной оценки процессов клеточного цикла и клеточного роста. Результаты определения фракции S-фазы, в том числе показателей плоидности, с использованием гистограмм и оценки таких показателей, как митотический индекс и показатель времени удвоения опухоли, обеспечивают получение адекватной информации для клинических специалистов, позволяющей оценить агрессивность опухоли.
В контексте настоящего описания повреждение ткани может стать результатом соскоба, пореза, рваной раны, раны при ударе, раны при сжатии, повреждение при растяжении, раны при укусе, разрыва в результате удара, пулевого ранения, повреждения при взрыве, прокола тела, колотой раны, ожога потоком воздуха, солнечного ожога, ожога химическими веществами, хирургической раны, хирургического вмешательства, медицинского вмешательства, реакции отторжения хозяйского организма после трансплантации клетки, ткани или органа, фармацевтического эффекта, фармацевтической побочной реакции, пролежня, радиационного повреждения, косметической раны на коже, повреждения внутреннего органа, болезненного процесса (например, астмы, рака), инфекции, инфекционного агента, процесса развития, процесса нагноения (например, акне), генетической аномалии, аномалии развития, токсина из окружающей среды, аллергена, повреждения скальпа, повреждения лица, повреждения челюсти, повреждения ног, повреждения пальца ноги, повреждения пальца руки, повреждения кости, повреждения полового органа, повреждения сустава, повреждения выделительного органа, повреждения глаза, повреждения роговицы, повреждения мышцы, повреждения жировой ткани, повреждения легкого, повреждения дыхательных путей, грыжи, повреждения ануса, наличия геморроидальных узлов, повреждения уха, повреждения сетчатки, повреждения кожи, повреждения брюшной полости, повреждения руки, повреждения ноги, спортивного повреждения, повреждения спины, повреждения при рождении, повреждения при преждевременных родах, токсического укуса, укуса, повреждения сухожилия, повреждения связки, повреждения сердца, повреждения сердечного клапана, повреждения сосудистой системы, повреждения хряща, повреждения лимфатической системы, краниоцеребральной травмы, смещения, прободения пищевода, свища, повреждения ногтя, наличия инородного тела, перелома, отморожения, повреждения руки, повреждения при тепловом стрессе, рваной раны, повреждения шеи, членовредительства, шока, травматического повреждения мягкой ткани, повреждения спинного мозга, повреждения позвоночника, растяжения, деформации при напряжении, повреждения сухожилия, повреждения связки, повреждения хряща, повреждения грудной клетки, повреждения зуба, травмы, повреждения нервной системы, старения, аневризмы, апоплексического удара, повреждения пищеварительного тракта, инфаркта или ишемического повреждения.
В. Способы получения композиций
Композиции согласно настоящему изобретению и композиции, необходимые для осуществления описанных способов, могут быть изготовлены с использованием любого способа, известного специалистам в данной области, применительно к конкретному реагенту или соединению, если особо не указано иное.
Например, описываемые нуклеиновые кислоты могут быть получены с использованием стандартных методов химического синтеза или могут быть получены с использованием энзиматических методов или любого другого известного способа. Такие методы могут варьировать от стандартного энзиматического расщепления с последующим выделением нуклеотидного фрагмента (см., например, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1989, Chapters 5, 6) до полностью синтетических методов, например, в рамках цианоэтилфосфорамидатного метода с использованием системы синтезатора ДНК Milligen или Beckman System 1 Plus DNA (например, с использованием автоматизированного синтезатора модели 8700 Milligen-Biosearch, Burlington, MA или ABI Model 380B). Методы синтеза, используемые для получения олигонуклеотидов, также описаны Ikuta et al., Ann. Rev. Biochem. 53: 323-356 (1984) (фосфотриэфирный и фосфит-триэфирный методы) и Narang et al., Methods Enzymol., 65: 610-620 (1980) (фосфотриэфирный метод). Молекулы нуклеиновых кислот для соответствующих белков могут быть получены с использованием известных методик, таких как, например, методы, описанные в работе Нильсена с соавт. (Nielsen et al., Bioconjug. Chem. 5: 3-7 (1994)).
Один метод получения описываемых полипептидов, таких как SEQ ID NO: 2, состоит в объединении двух или более пептидов или полипептидов в соответствии с методами белковой химии. Например, пептиды или полипептиды могут быть химически синтезированы с использованием доступного в настоящее время лабораторного оборудования по процедурам методов Fmoc (9-флуоренилметилоксикарбонил) или Boc (трет-бутилоксикарбонил) химии (Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA). Любому специалисту в данной области понятно, что пептид или полипептид, например, соответствующий описываемым белкам, может быть синтезирован в рамках стандартных химических реакций. Например, пептид или полипептид может быть синтезирован и не выщеплен из соответствующей смолы, применяемой для синтеза, тогда как другой фрагмент пептида или белка может быть синтезирован и впоследствии выщеплен из смолы, и тем самым обнажается конечная группа, которая функционально блокирована на другом фрагменте. В рамках реакций конденсации пептидов, два указанных фрагмента могут быть ковалентно соединены через пептидную связь по карбоксильному концу или аминоконцу, соответственно, с образованием белка или его фрагмента (Грант GA (1992) Synthetic Peptides: A User guide. W.H. Freemen and Co., N.Y. (1992); Bodansky M. and Trost B., Ed. (1993) Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag Inc., NY (указанные работы включены в настоящее описание в качестве ссылок, по меньшей мере, в части материала, касающегося пептидного синтеза). Альтернативно, пептид или полипептид синтезируют независимо in vivo, как приведено в настоящем описании. Будучи выделенными, указанные независимые пептиды или полипептиды могут быть соединены с образованием пептида или его фрагмента, с использованием аналогичных реакций пептидной конденсации.
Например, энзиматическое лигирование клонированных или синтезированных пептидных сегментов позволяет соединить относительно короткие пептидные фрагменты с получением более крупных пептидных фрагментов, полипептидов или целых белковых доменов (Abrahmsen L et al., Biochemistry, 30: 4151 (1991)). Альтернативно, может быть использовано нативное химическое лигирование синтетических пептидов для конструирования путем синтеза крупных пептидов и полипептидов из более коротких пептидных фрагментов. Данный метод представляет собой двустадийную химическую реакцию (Dawson et al., Synthesis of Proteins by Native Chemical Ligation. Science, 266: 776-779 (1994)). Первая стадия представляет собой селективную реакцию незащищенного синтетического пептид-триэфира с другим незащищенным пептидным фрагментом, содержащим аминоконцевой Cys-остаток, с образованием промежуточного продукта с тиоэфирной связью, в качестве первичного ковалентного продукта. Без изменения условий реакции, указанный промежуточный продукт подвергается спонтанной быстрой внутримолекулярной реакции с образованием нативной пептидной связи в сайте лигирования (Baggiolini M et al., (1992) FEBS Lett. 307: 97-101; Clark-Lewis I et al., J. Biol. Chem., 269: 16075 (1994); Clark-Lewis I et al., Biochemistry, 30: 3128 (1991); Rajarathnam K et al., Biochemistry 33: 6623-30 (1994)).
Альтернативно, незащищенные пептидные фрагменты подвергают химическому связыванию, при этом связь, образуемая между пептидными сегментами в результате химического лигирования, представляет собой не природную (не пептидную) связь (Schnolzer, M et al., Science, 256: 221 (1992)). Указанная методика была использована для синтеза аналогов белковых доменов, а также больших количеств относительно чистых белков с полной биологической активностью (deLisle Milton RC et al., Techniques in Protein Chemistry IV. Academic Press, New York, pp.257-267 (1992)).
Описываются способы получения соединений, а также промежуточных продуктов на пути создания композиций. Имеется множество методик, которые могут быть использованы для изготовления таких композиций, такие как методы химического синтеза и стандартные методы молекулярной биологии. Разумеется, что способы изготовления данных и других рассматриваемых композиций конкретно описываются. Описываются молекулы нуклеиновых кислот, получаемые в ходе процесса, включающего объединение в оперативном режиме нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид согласно настоящему описанию, и последовательности, контролирующей экспрессию нуклеиновой кислоты. Описываются клетки, получаемые путем трансформации клетки животного молекулами любой нуклеиновой кислотой согласно настоящему описанию. Описываются любые пептиды согласно настоящему изобретению, получаемые по способу экспрессии любой из описываемых нуклеиновых кислот. Описываются животные, которых получают с использованием способа трансфекции клетки животного молекулами любой нуклеиновой кислоты согласно настоящему описанию. Описываются животные, которых получают с использованием способа трансфекции клетки животного молекулами любой нуклеиновой кислоты согласно настоящему описанию, где указанное животное представляет собой млекопитающее. Также описываются животные, которых получают с использованием способа трансфекции клетки животного молекулами любой нуклеиновой кислоты согласно настоящему описанию, где указанное млекопитающее представляет собой мышь, крысу, кролика, корову, овцу, свинью или примата. Также описываются животные, которых получают по способу добавления к указанному животному любой из клеток, приведенных в настоящем описании.
С. Наборы
Описанные выше материалы, а также другие материалы могут быть упакованы вместе в любом подходящем сочетании в виде набора, используемого для проведения описываемого способа или в качестве вспомогательного средства для его проведения. Будет полезно, если компоненты набора в данном наборе будут разработаны и адаптированы для использования в рамках описанного способа. Например, описываются наборы для ускорения заживления раны, где указанный набор включает один или несколько полипептидов, нуклеиновых кислот или векторов согласно настоящему описанию в фармацевтически приемлемом носителе. Такие наборы могут включать гели, бандажи, ленты Millipore, пропитанные лекарственными препаратами Q-tips, распыляемые средства, капли, сиропы, жидкости, одноразовые пробирки или пакетики. Наборы могут также содержать инструкции с описанием соответствующего варианта их применения и информацию по безопасности относительно продукта или композиции. Наборы могут содержать информацию о дозировке, применительно к определенному направлению использования и способу введения, определяемому лечащим врачом.
D. Направления использования
Описываемые способы и композиции применимы к различным направлениям использования, включая, без ограничения, инструменты лабораторных исследований. Указанные композиции выполняют регуляторные роли в ряде клеточных процессов, например, в клеточной пролиферации и миграции клеток. Указанные композиции могут быть использованы в лабораторных модельных системах для исследования in vitro и in vivo различных клеточных процессов, регуляции клеточного цикла, клеточной реакции, ответов органов, клеток или тканей на исследуемые соединения и т.п. Композиции могут поставляться сами по себе или в сочетании с другими соединениями или как часть набора, такого как набор для оценки клеточной пролиферации. Данный набор может содержать композиции, указанные выше, сами по себе или в сочетании с другими соединениями. Такой набор будет включать инструкции, облегчающие проведение эксперимента. Описываются также другие варианты использования, очевидные из приведенного описания, и/или те, которые будут понятны специалистам в данной области.
Примеры
Пример 1: Повреждение царапиной in vitro
Миоциты из сердец новорожденных крыс растят до образования почти слившегося монослоя на чашке с культурой ткани, в соответствии со стандартными протоколами. Далее культуры выращивают в течение еще 5 дней в культуральной среде, содержащей 30 мкМ АСТ 1 пептида (SEQ ID NO: 2), 30 мкМ неактивного контрольного пептида (SEQ ID NO: 55) или фосфатно-буферного раствора (PBS), содержащего не АСТ-пептид, или контрольный пептид. Неактивный контрольный пептид включает полипептид с карбоксильным концом, в котором последовательность АСТ-пептида изменена на обратную. Оба амино-конца в АСТ и контрольном пептидах биотинилированы, что позволяет выявлять (например, в тесте) пептиды в клеточной цитоплазме с использованием стандартных методов микроскопии или биохимических методов на основе высокоафинного связывания стрептавидина с биотином.
Культуральные среды с добавленными пептидами или контрольным носителем меняют каждые 24 часа в ходе эксперимента. На фиг.1а показано, что АСТ-пептид в значительной мере повышает уровень образования затягивающей зоны в бреши Cx43 между миоцитами, относительно контрольных условий (фиг.1b и 1с). Как показано на фиг.4, данное повышение образования затягивающей зоны в бреши Cx43 в ответ на АСТ-пептид свойственно множеству клеточных типов, экспрессирующих Cx43.
Клетки NIH-3T3 растят в течение 2-3 дней до образования почти сливающегося монослоя на чашке для культуры тканей, в соответствии со стандартными протоколами, и затем монослой подвергают предварительной обработке ACT-пептидом (SEQ ID NO: 2) в течение 24 часов, после чего кончиком пипетки p200 наносят «повреждение царапиной». Указанное «повреждение царапиной» затем оставляют для размножения в течение 24 часов в присутствии 30 мкМ ACT 1 пептида (SEQ ID NO: 2), растворенного в культуральной среде (фиг.2а, b), или в присутствии двух контрольных вариантов (фиг.2с-f). В первом варианте контрольных условий клетки с нанесенной «царапиной» оставляют для размножения в течение 24 часов в присутствии неактивного контрольного пептида (как показано на фиг.1), в виде раствора в культуральной среде с концентрацией 30 мкМ (фиг.2с, d). Во втором варианте контрольных условий к культуральной среде добавляют фосфатно-буферный раствор (PBS) и клетки, «поврежденные царапиной», оставляют для заселения зоны в присутствии указанного контрольного раствора носителя, содержащего не АСТ-пептид, или контрольный пептид (фиг.2e, f). «Повреждение царапиной» в клетках, обработанных АСТ-пептидом, остается относительно не заселенным по прошествии 24 часов (фиг.2a), и лишь несколько клеток (на чертеже показаны крупными стрелками) заселяют зону внутри исходных краев «повреждения царапиной» (то есть в пределах зоны, маркированной маленькими черными стрелками на чертеже). И наоборот, в контрольных условиях (фиг.2с, e) большое число клеток (крупные стрелки) заселили зону внутри исходного «повреждения царапиной». Заселение указанной зоны «повреждения царапиной» происходит частично за счет миграции трансформированных клеток, продвигающихся в зону «повреждения царапиной». На чертеже (фиг.2b, d и f) показан результат иммунологического мечения клеток ядерным антигеном пролиферирующих клеток (PCNA) в такой зоне «повреждения царапиной» или по краям повреждения. Клетки, обработанные АСТ-пептидом (фиг.2b), демонстрируют лишь низкую люминесценцию, соответствующую фоновому значению и отсутствию пролиферации. Только в двух контрольных условиях, показанных на чертежах (фиг.2d, f), отмечаются ярко меченые пролиферирующие клетки (белые стрелки). Это указывает на то, что АСТ-пептид также снизил пролиферацию трансформированных клеток на данной экспериментальной клеточной модели.
На фиг.3а показан край повреждения клеток, обработанных АСТ-пептидом, и контрольных клеток, обработанных неактивным пептидом, в конце 24-часового периода. Клетки метят флуоресцентным фаллоидином для визуализации. Клетки, обработанные АСТ-пептидом, демонстрируют низкий уровень заселения клетками зоны «повреждения царапиной» (белые двойные стрелки). На фиг.3b показана диаграмма, демонстрирующая % зоны «повреждения царапиной», заселенной клетками через 24 часа. Снижение числа клеток в зоне повреждения в присутствии АСТ-пептида является резким, со значением p меньше, чем 0,000001.
Клетки WB-F344 представляют собой трансформированную линию эпителиальных клеток крысы, полученную путем обработки выделенных клеток печени крысы агентом, вызывающим рак (Tsao et al., 1984; Hayashi et al., 1997; Hayashi et al., 1998; Hayashi et al., 2001). Клетки WB-F34 трансфицируют конструкцией плазмиды экспрессии кДНК и проводят селекцию с антибиотиком при использовании стандартных процедур получения клеточных линий, которые стабильно экспрессируют полинуклеотид, кодирующий АСТ-пептид (SEQ ID NO: 6), функционально связанный с промоторной последовательностью, или полинуклеотид, кодирующий зеленый флуоресцентный белок (GFP), функционально связанный с промоторной последовательностью, в качестве контроля. Полинуклеотид, кодирующий АСТ-пептид, также кодирует GFP. Экспрессию АСТ-пептида можно оценить по стандартной методике на основе флуоресценции GFP под световым микроскопом. На фиг.4a, b показано изображение при высоком увеличении флуоресценции GFP в клеточных линиях WB-F344, экспрессирующих только GFP (фиг.4а) или GFP плюс карбокси-концевую последовательность АСТ-пептида (фиг.4а) или один GFP (фиг.4b). Почти сливающиеся монослои клеточной линии WB-F344 «повреждают царапиной» и оставляют для размножения на 24 часа. Аналогично контрольным вариантам клеток NIH-3T3, которые обрабатывали носителем или неактивным контрольным пептидом, контрольная линия эпителиальных клеток, экспрессирующая GFP, заселяет зону «повреждения царапиной» (фиг.4с). Однако в линии эпителиальных клеток, которые стабильно экспрессируют полинуклеотид, кодирующий АСТ-пептид, функционально связанный с промоторной последовательностью, наблюдается ингибирование заселения зоны «повреждения царапиной» (фиг.4d). В дополнение к клеточным линиям WB-F344 были получены клеточные линии NIH-3T3 клеток, которые стабильно экспрессируют полинуклеотид, кодирующий ACT-пептид, функционально связанный с промотором.
Пример 2: Заживление раны in vivo
Новорожденных мышей десенсибилизируют с использованием гипотермии. Скальпелем наносят повреждение в виде длинного разреза в 4 мм по всей толщине кожи (вниз на уровень нижележащей мышцы) по средней линии спины между лопатками. Затем в разрез вносят 30 мкл раствора 20% геля плуроника (F-127), либо не содержащего (контроль), либо содержащего растворенный ACT 1 пептид (SEQ ID NO: 2) в концентрации 60 мкМ. Гель плуроника обладает мягкими поверхностно-активными свойствами, которые могут способствовать равномерному распределению ACT-пептида в мицеллах. Более важно то, что 20% гель плуроника остается жидким при температурах ниже 15°С, но полимеризуется при температуре тела (37°С). Указанные свойства геля плуроника, по всей видимости, способствуют контролируемому высвобождению пептида в ткань в сайте «повреждения царапиной», защищая пептид от разрушения окружением раны, обогащенным протеазами, и также способствует поддержанию активных концентраций пептида в течение длительного периода времени. Гель, содержащий контрольный пептид или АСТ-пептид, наносят на 24 часа после нанесения разреза. После второго нанесения не вносят ни контрольный гель, ни гель, содержащий АСТ-пептид. К 48 часам видно, что повреждение, обработанное ACT-пептидом (фиг.5а), значительно больше затягивается, меньше набухает (видны выступы на краю раны) и в основном выглядит как более заживленное, чем контрольное повреждение, в которое не вносили ACT-пептид (фиг.5b). Указанные различия в воспалении, набухании и заживлении между повреждением, обработанным контрольным пептидом и АСТ-пептидом, а также между контрольным повреждением держатся в точке 72 часа (фиг.5с, d) и 96 часов (фиг.5e, f). К 7 дню рана, обработанная ACT-пептидом (фиг.5g), имеет более ровный и менее бугристый вид, чем повреждение, обработанное контрольным пептидом (фиг.5h). Следует отметить, что приведены изображения одного и то же повреждения у одного и того же животного в разные временные точки в ходе периода заживления.
Взрослым мышам под анестезией делают круговое повреждение путем иссечения ткани шириной 8 мм тонкими хирургическими ножницами вниз, к нижележащей мышце, по средней линии спины между лопатками (фиг.6a, b). Края повреждения маркируют пластиковой полосой шириной 8 мм. В повреждение путем иссечения ткани вносят 100 мкл раствора 30% геля плуроника, либо не содержащего (контроль), либо содержащего растворенный АСТ 1 пептид (SEQ ID NO: 2) в концентрации 100 мкМ. Гель, содержащий контрольный пептид или АСТ-пептид, наносят на 24 часа после исходного нанесения. После второго нанесения больше не наносят ни гель с контрольным пептидом, ни гель, содержащий ACT-пептид. Крупное повреждение путем иссечения ткани, обработанное ACT-пептидом (фиг.6a, c, e, g, i), затягивается быстрее, менее воспалено по виду, быстрее заживляется и меньше рубцуется, чем контрольное повреждение, в которое не вносили ACT-пептид (фиг.6b, d, f, h, j), в течение 14-дневного периода лечения. Фактически, контрольное повреждение к 14 дню демонстрирует частичное отслоение, указывая на то, что острое заживление повреждения было не полным (фиг.6j).
Отбирают биопсию кожи из всего места повреждения через 24 часа после нанесения повреждения путем иссечения ткани. Указанные образцы кожи фиксируют в 2% параформальдегиде, погружают в парафин, делают срезы и окрашивают гистохимически гематоксилином и эозином (H&E) по стандартным процедурам. На фиг.7a и 7b приведены изображения при низком увеличении срезов, взятых радом с центром раны, обработанной ACT-пептидом, и контрольной раны, соответственно. Край раны (маркированный маленькими стрелками) граничит с кожей нормального гистологического вида, как видно в обоих случаях. Черный прямоугольник помещен над изображением на фиг.7a и 7b в левой части края раны. Гистологические структуры внутри черного прямоугольника, помещенного над левой частью краев повреждения на фиг.7a и 7b, показаны при большем увеличении на фиг.7с и 7d для тканей, обработанных ACT-пептидом, и после контрольной обработки, соответственно. Представляет интерес «воротникообразная» ткань фиброзного материала (указанного стрелками), простирающегося от базальных частей повреждения в направлении к краю раны и к наружной поверхности повреждения. Фиброзный материал служит в качестве субстрата для миграции воспалительных клеток, движущихся к поверхности повреждения (Elder et al., 1997). Интересно отметить, что рассматриваемый фиброзный субстрат имеет вид значительно более организованный в контрольном повреждении (фиг.7d), чем в повреждении, обработанном ACT-пептидом (фиг.7с). Кроме того, отмечается значительно сниженная плотность воспалительных клеток, заполняющих фиброзный субстрат в ткани, обработанной ACT-пептидом. Этот результат подтверждается на фиг.7f и 7e, где участки гистологического среза внутри черных прямоугольников, приведенные на чертежах (фиг.7d и фиг.7с), показаны при большем увеличении, соответственно. Воспалительные клетки, заполняющие фиброзный субстрат, включают тучные клетки, нейтрофилы и макрофаги. Указанные воспалительные клетки встречаются со значительно большей плотностью в контрольном повреждении, чем в повреждении, обработанном ACT-пептидом.
К концу 14-дневного периода отбирают биопсийные образцы кожи и всей зоны повреждения путем иссечения ткани, и гистологические срезы из образцов кожи окрашивают для гистохимического анализа H&E. На фиг.8a и 8b показаны при низком увеличении изображения поперечных срезов, взятых из области рядом с центром повреждения, обработанного ACT-пептидом и контролем, соответственно. В обоих случаях отмечается край раны (маркированный небольшими стрелками), граничащий с кожей нормального гистологического вида. Черный прямоугольник помещен над изображениями на фиг.8а и 8b около центра каждого повреждения. Гистологические структуры внутри каждого из указанных двух прямоугольников показаны при более высоком увеличении на фиг.8c и 8d для тканей, обработанных ACT-пептидом и контролем, соответственно. Видно, что ткань из места повреждения, обработанного ACT-пептидом, выглядит как структурно значительно более сложная. На наружной поверхности раны, обработанной ACT-пептидом, отмечается непрерывный слой эпителиальных клеток, указывающий на полную реэпителизацию поврежденной поверхности, хотя эпителий все еще относительно тонкий возле центра раны (фиг.8с). Необычно то, что регенерирующие волосяные фолликулы уже отмечаются в состоянии дифференцировки de novo из стволовых клеток в новом эпителии, покрывающем заживленное повреждение (фиг.8с, малые стрелки). И для сравнения, в эпителии контрольного повреждения отмечается неполная реэпителизация поверхности повреждения, без признаков регенерации волосяных фолликул. Под реформированным эпителием поврежденной кожи, обработанной ACT-пептидом, отмечается существенное восстановление нормальной структурной сложности, с наличием гландулярных структур, фиброзной и соединительной ткани, сосудистой ткани, мышечных и жировых клеток (фиг.8а, с). Как и в случае волосяных фолликул, сложность указанной ткани восстанавливается через дифференцировку стволовых клеток. И наоборот, в ткани раны в контрольном повреждении отмечается полное доминирование однородной и крупной массы фиброзной ткани рубца (фиг.8b, d), тогда как другие признаки сложности тканевой структуры не отмечаются в пределах рубцовой ткани.
Взрослым мышам под анестезией наносят две (диаметром 5 мм) раны путем иссечения кожи мелкими хирургическими ножницами на шеи (в верхней части) и спине. Границы повреждений отмечают круговой полосой пластика шириной 5 мм. В повреждение вносят 50-60 мкл раствора 30% геля плуроника, либо не содержащего (контроль), либо содержащего один из ACT-пептидов (АСТ 2 - SEQ ID NO: 1; АСТ 1 - SEQ ID NO: 2; АСТ 3 - SEQ ID NO: 3; АСТ 4 - SEQ ID NO: 4; АСТ 5 - SEQ ID NO: 5), растворенный в концентрации 100 мкМ. Гели, содержащие контрольный или АСТ-пептид, вносят через 24 часа после исходного нанесения. После второго нанесения не добавляют гель ни с контролем, ни ACT-пептидом. В случае АСТ 1 (фиг.9e-h), ACT (фиг.9i-l), ACT 3 (фиг.9m-p) и ACT 5 (фиг.9u-x) пептидов видно, что повреждения путем иссечения ткани затягиваются быстрее, менее воспалены по виду, заживают быстрее и в меньшей степени рубцуются, чем контрольное повреждение, на которое не наносили АСТ-пептид (фиг.9a-d), в течение 240-часового периода (10 дней). ACT 4 пептид (фиг.9q-t) демонстрирует, по всей видимости, небольшое улучшение в заживлении в сравнении с контролем в ходе периода наблюдения. Следует отметить, что показана одна и та же рана, на одном и том же животном в разные временные точки в ходе периода заживления.
Площадь открытой раны измеряют в ходе периода исследования с использованием стандартных процедур на множестве взрослых мышей (примерно по 5 мышей для контроля и экспериментальных условий). Указанные отдельные результаты измерения площади далее нормализуют (например, путем деления) до средней площади, измеряемой в контрольных повреждениях в данной временной точке, умножают на 100 с получением процента незакрытых ран относительно контроля и затем строят график зависимости от времени. Используют U-тест Манна-Уитни для статистической оценки эффектов ACT-пептидов в течение времени. Пептиды АСТ 1, АСТ 2, АСТ 3 и АСТ 5 существенно улучшали скорость затягивания ран после повреждения путем иссечения ткани. Указанные варианты лечения давали результаты с наиболее значимыми показателями p. АСТ 1 и АСТ 3 демонстрировали количественно наиболее выраженное улучшение в сравнении с контролем. Более слабое, хотя неизменное улучшение наблюдалось также для АТС 4 пептида, при его сравнении с контролем.
Взрослых крыс под анестезией помещают в стереотаксический аппарат. Делают срединный разрез по скальпу для обнажения черепа. Стереотаксическое сверло располагают в 2 мм назад от брегмы и сверлят два отверстия сферической формы по 1 мм каждое, на расстоянии 2,5 мм вправо и влево от брегмы и на расстоянии 3,5 мм ниже мозговой оболочки. Делают церебральное повреждение, вставляя иглу 18 размера. Координаты определяют по атласу Паксиноса и Уотсона (Paxinos and Watson (1986)). В отверстие вставляют полую волокнистую мембрану (HFM) и накладывают внешние кожные швы, покрывающие прокол. ACT-пептид растворяют в концентрации 100 мкМ в 2% растворе носителя-коллагена, содержавшемся внутри HFM. Исследование выделенных HFM указывает на то, что данная биоинженерная конструкция способна замедлять высвобождение выявляемых уровней ACT-пептида (по данным теста на основе реакции биотин-стрептавидин) в водных растворах в течение периода времени, равного по меньшей мере 7 дней. Реактивный астроцитоз, ассоциированный с воспалением и последующим образованием глиального рубца, следует известному временному режиму, характерному для модели грызунов после повреждения мозга (Norenberg, 1994; Fawcett and Asher, 1999). В типичном случае астроцитарный ответ в мозге крыс достигает пика через неделю, в сочетании с потерей нейронов и других аспектов сложности мозговой ткани. Впоследствии, с появлением глиальной рубцовой ткани плотность GFAP-позитивных астроцитов снижается. На фиг.10b и 10c при низком увеличении показаны изображения срезов из тканей мозга (коры), окружающие HFM имплантаты, заполненные ACT-пептидом плюс гель-носитель или контрольным гелем с коллагеновым носителем, или АСТ-пептидом плюс гель-носитель, через неделю после проникающего повреждения мозга. В контрольной ткани (фиг.10с) наблюдается высокая плотность иммунологически меченых GFAP-позитивных астроцитов возле сайта повреждения, вызванного HFM. Плотность указанных клеток, по всей видимости, несколько снижается при удалении в стороны от повреждения. И наоборот, наблюдается значительно меньшая плотность GFAP-позитивных астроцитов рядом с HFM, заполненной ACT-пептидом (фиг.10b). Фактически, уровни GFAP-позитивных клеток не отличаются от значений, наблюдаемых в нормальной неповрежденной ткани мозга. Участки ткани внутри белых прямоугольников на фиг.10b и 10c показаны при большем увеличении на фиг.10d и 10e, соответственно. В повреждении мозга, обработанном ACT-пептидом (фиг.10d), можно видеть, что GFAP-позитивные астроциты не только менее многочислены, но также меньше по размеру, чем астроциты, отмечаемые в контрольном повреждении (фиг.10e).
На фиг.11а и 11b показаны при низком увеличении изображения срезов ткани мозга (коры), окружающей HFM имплантаты (имплантат или граница повреждения показаны стрелками), заполненные контрольным гелем коллагенового носителя (фиг.11b) или ACT-пептидом плюс гель-носитель (фиг.11а) через 1 неделю после проникающего повреждения мозга. В контрольной ткани (фиг.11b) отмечается высокая плотность иммунологически меченых GFAP-позитивных астроцитов и низкая плотность иммунологически меченых по NeuN нейронов возле сайта повреждения, вызванного HFM. Плотность указанных клеток, как видно, снижается и повышается дистально от HFM, соответственно. И наоборот, отмечается значительно меньшая плотность GFAP-позитивных астроцитов и большее число иммунологически меченых по NeuN нейронов проксимально (а также дистально) к HFM, заполненной ACT-пептидом (фиг.11а). Участки из фиг.11а и 11b, расположенные проксимально к HFM, показаны при высоком увеличении на 11c и 11d, соответственно. И снова, в контрольной ткани (фиг.11d) отмечается сильное повышение плотности GFAP-позитивных астроцитов и сниженная плотность NeuN-позитивных нейронов, в сравнении с тканью, обработанной ACT-пептидом (фиг.11с). Комплементарная картина наблюдается возле HFM, содержащей ACT-пептид, где NeuN-позитивные нейроны доминируют надо астроцитами (фиг.11с). Интересно отметить, что приведенное при высоком увеличении изображение на фиг.11d демонстрирует высокую частоту делящихся нейронов относительно контроля (фиг.11с). Это позволяет полагать, что высокая плотность нейронов, ассоциированная с лечением ACT-пептидом, может быть результатом образования новых нейронов. ACT-пептид также может частично повышать плотность нейронов за счет спаривания нейронов из погибших клеток после повреждения мозга.
Пример 3: Лечение острого повреждения спинного мозга
Индивидуумы с острым повреждением спинного мозга представляют собой очень сложную проблемную группу, в случае которых даже небольшое восстановление неврологическое функции может оказать большое влияние на последующее развитие процесса. В одном примере индивидууму с острым повреждением спинного мозга проводят инфузию болюсом 0,02%-0,1% раствора ACT-пептида (например, SEQ ID NO: 1) в течение 15 минут в ходе 8-часового периода непосредственно в сайт острого повреждения спинного мозга и затем через 45 минут инфузию 0,01% раствора ACT-пептида в течение последующих 23-48 часов. В другом примере ACT-пептид используют для нанесения покрытия на наночастицы с медленным высвобождением, вводимые в течение 8 часов непосредственно в сайт острого повреждения спинного мозга или в ткань со складчатой структурой, созданной биоинженерными методами, с тем чтобы ускорить образование новых невральных связей в зоне острого повреждения спинного мозга. Наличие улучшения функции оценивает лечащий врач в определенные интервалы времени (например, через 6, 12, 16 и 52 недели) после начала лечения, по результатам неврологического тестирования, включающего оценку моторной активности, кожной чувствительности на укол и восстановления тактильных ощущений.
Пример 4: Количественная оценка затягивания раны, регенерации ткани и прочности на разрыв в ранах с иссечением кожи
По описанной выше методике взрослым мышам наносят рану иссечением кожи диаметром 5 мм и делят на две группы: группу введения ACT-пептида (n=12) и контрольную группу (n=8). Количественные оценки скорости затягивания раны, числа регенерированных волосяных фолликул и измерения прочности на разрыв проводят на пораженной коже в определенных временных точках до 90 дней после исходного повреждения. В сравнении с контрольными ранами, затягивание существенно повышается в течение 24 часов после пептидной обработки. Аналогично, к 10 дням, когда большая часть ран практически полностью затягивается, сохраняется высоко значимое различие, а именно: раны, обработанные ACT-пептидом, становятся в среднем на 43% меньше по размерам, чем контрольные раны. К 10 дням раны, обработанные ACT-пептидом, демонстрируют значительное, в 3,2 раза повышение числа регенерированных волосяных фолликул на единицу площади заживленной раны относительно контрольных ран.
Проводят исследование механических свойств заживленных ран, полученных иссечением кожи диаметром 5 мм через 1 месяц и 3 месяца после повреждения. Для определения механических свойств отбирают образцы кожи у умерщвленного животного и оценивают показатели с использованием системы MTS 858 Mini Bionix (MTS Systems Corporation, MN, USA), снабженный клеткой весом 5 кг. В ходе измерения образец кожи растягивают до момента разрыва со скоростью 0,5 мм/сек. Силу и растяжение измеряют при разрыве. Прочность на разрыв (стресс) и растяжение до разрыва (деформация при напряжении) оценивают следующим образом: Прочность на разрыв (N/мм2) = сила при разрыве (N)/площадь поперечного сечения образца (мм2). Деформация при напряжении (%) = [повышение длины при разрыве (мм)/исходная длина (мм)] × 100. Расчеты прочности на разрыв и деформации при напряжении для каждого пораженного образца кожи нормализуют до нормального образца кожи из близлежащей зоны, отобранного у того же животного.
Через 1 месяц усилие (то есть нормализованная сила), необходимое для разрыва пораженной кожи, аналогично таковому значению для контрольной пораженной кожи. К 3 месяцу нормализованное усилие для разрыва пораженной кожи, обработанной пептидом, в среднем превышает в два раза соответствующее значение для контрольной пораженной кожи, хотя высокие вариации в экспериментальной группе не позволяют значимо отделить среднее значение от контроля. Полученный результат показывает, что раны, обработанные пептидом, имеют такую же или большую прочность на разрыв, что и необработанные раны. Кроме того, выявлено существенное повышение растяжимости ран, обработанных пептидом. Величина деформации (то есть растяжимость), требуемая для разрыва ран, обработанных пептидом, несколько повышена в сравнении с контрольными ранами через 1 месяц. К 3 месяцу раны, обработанные пептидом, демонстрируют более выраженное повышение, примерно до 90% относительно нормальной не поврежденной кожи. Тогда как контрольные раны к 3 месяцу демонстрируют лишь 60% уровень растяжимости относительно нормальной кожи.
Пример 5. Эффективность ниэкомолекулярных пептидов с карбоксиконцевой последовательностью альфа-коннексина
1. Для проверки эффективности различных пептидов с карбоксиконцевой последовательностью альфа-коннексина (ACT) в для ускорения заживления после повреждения тканей, на модели раны у мышей, вызванной разрезом кожи, использованы три различных пептида (ACT 1, ACT 7 и ACT 9). Последовательности каждого пептида ACT соответствовали:
ACT 1: RPRPDDLEI (9 карбокси-концевых аминокислот Сх43; идентичны SEQ ID NO;2, раскрытой в описании)
ACT 7: PRPDDLEI (8 карбокси-концевых аминокислот Сх43)
ACT 9: RQPKIWFPNRRKPWKKDDLEI (последовательность Antennapedia (SEQ ID NO: 7, раскрыта в описании), слитая на аминоконце пептида, содержащего 5 карбокси-концевых аминокислот Сх43).
Взрослым мышам под наркозом производили разрез кожи размером 5 мм в диаметре с помощью хирургических ножниц в области спины до основных мышц по дорзальной линии между лопатками. Решение. Раствор (60 мкл) 30% плюрониевого геля, не содержащего (контроль), либо содержащего один из трех пептидов (ACT 1, ACT 7 или ACT 9), растворенных в количестве 60 мкМ, наносили на рану. Рану визуально оценивали на 1, 4, 7 и 10 день и анализировали различные параметры заживления раны, в том числе покраснение, размер раны и общий вид. Мышей забивали на 10-й день, и брали пробы тканей. В каждой из четырех исследуемых групп было восемь мышей.
Макроскопическая визуализация ран в лечебных группах была оценена «вслепую» по балльной системе оценки раны, в которой два независимых наблюдателя визуально оценивали раны, полученные разрезом кожи, на покраснение и отек. Каждая рана была оценена по 0-5 баллам каждым наблюдателем. Окончательный результат для каждой раны усредняли по данным двух наблюдателей. Меньший балл при оценке покраснения, соответствующий уменьшению, предполагало начальный уровень воспаления. Для оценка общего вида/рубца, раны оценивали на степень обесцвечивания и гладкость. Больший балл был присвоен ране с максимальной относительной степенью обесцвечивания и повышенной гладкостью. Гистограммы, показанные на фигуре 1, изображают средний балл покраснения и внешнего вида раны, обработанной пептидом, и контролем на модели раны у мышей на 1, 4 и 7 день. Звездочки обозначают значение р<0,05 для плюрониевого геля контрольной группы по оценки теста Манна-Уитни. Закрытие раны оценивали количественно по фотографии. Область измерения каждой раны на фото определяли с помощью программного обеспечения ImageJ. Эти измерения были сделаны лицами, имеющими информацию о том, какая из групп является группой, получавшей лечение. На фигуре 10 показана средняя область раны в случае обработки пептидом и контролем в 1, 4 и 7 день. Звездочки указывают значение р<0,05 для плюрониевого геля контрольной группы по оценке критерия Стьюдента.
4. Как показано на фиг.9, раны, обработанные пептидом ACT, демонстрировали меньшее покраснение и улучшенный внешний вид по сравнению с ранами, обработанными только плюрониевым гелем. На фиг.10 показано, что раны, обработанные ACT пептидом, в среднем закрываются быстрее, чем раны, обработанные только плюрониевым гелем, на что указывают меньшие области раны в группах, обработанных пептидом. Результаты этого анализа показывают, что низкомолекулярные пептиды с карбоксиконцевой последовательностью альфа-коннексина, способствуют заживлению после повреждения тканей.
Следует понимать, что описанные способы и композиции приведены не с целью ограничения изобретения конкретной методологией, процедурами и реагентами, которые могут варьировать. Следует также понимать, что используемая терминология дана для целей описания только конкретных вариантов и никоим образом не ограничивает область настоящего изобретения, которое ограничено лишь прилагаемой формулой изобретения.
Следует отметить, что форма единственного числа, используемая в тексте и в прилагаемой формуле изобретения, включает также множественные варианты, если из контекста явно не следует иное. Так, например, ссылка на полипептид означает множество таких полипептидов, ссылка на конкретный полипептид является ссылкой на один или несколько полипептидов и их эквивалентов, известных специалистам в данной области, и т.п.
Термины «необязательный» или «необязательно» означают, что описанные далее событие, условие или материал могут или не могут иметь место или присутствовать, и что описание включает случаи, когда явление, условие или материал имеет место или присутствует, и случаи, когда они не имеют места или не присутствуют.
Диапазоны могут быть выражены с использованием термина «примерно» для одного конкретного значения и/или «примерно» другого конкретного значения. Когда имеет место такой диапазон, также конкретно включается и рассматривается весь диапазон от одного конкретного значения и/или до другого конкретного значения, если из контекста явно не следует иное. Аналогично, когда показатели выражают в виде приблизительных значений, используя для этого определение «примерно», следует понимать, что данное конкретное значение формирует другой, конкретно рассматриваемый вариант, и он также считается включенным, если из контекста явно не следует иное. Следует также понимать, что конечные точки каждого из таких диапазонов значимы как в отношении другой конечной точки, так и независимо от другой конечной точки, если из контекста явно не следует иное. И наконец, следует понимать, что все индивидуальные значения и поддиапазоны значений, содержащихся внутри явно указанного диапазона, также конкретно включаются и следует их рассматривать включенными в него, если из контекста явно не следует иное. Приведенное выше справедливо, независимо от того, описаны ли в конкретных случаях в очевидной форме некоторые или все из указанных вариантов.
Если особо не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном описании, имеют общепринятые значения, известные специалистам в данной области, к которой относятся приведенный метод и композиции. Несмотря на то, что любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные приведенным в настоящем описании, могут использоваться в практике осуществления способов или композиций согласно настоящему изобретения или тестирования в соответствии с ними, были описаны особенно полезные способы, устройства и материалы. Цитированные публикации и материал, к которым они относятся, включены в качестве ссылок. Ничто из приведенного в настоящем описании не следует рассматривать, как допущение того, что настоящее изобретение не предшествует такому подходу, как более раннее изобретение. Ни одно из сделанных допущений не является ссылкой на достигнутый уровень техники. Обсуждение ссылок указывает только на то, что авторам известно, и заявители сохраняют за собой право оспаривать точность и уместность цитированных документов. Следует также явно понимать, что хотя множество публикаций приведено в качестве ссылок, каждую такую ссылку не следует рассматривать как констатацию того, что любой из указанных документов составляет часть общего основного знания, имеющегося в данной области.
Приведенное в тексте всего описания и формулы изобретения слово «включает» и его вариации, такие как «включающие» и другие, означает «включающий, но не ограничивающийся» и не исключает, например, другие добавки, компоненты, целые числа или стадии.
Специалисты в данной области понимают или способны на основе не более чем рутинных экспериментов, убедиться, что существует множество эквивалентов конкретных вариантов осуществления способов и композиций, приведенных в настоящем описании. Такие эквиваленты охватываются прилагаемой формулой изобретения.
Е. Список цитируемой литературы
Последовательности
SEQ ID NO:1 (ACT 2)
SEQ ID NO:2 (ACT 1)
SEQ ID NO:3 (ACT 3)
SEQ ID NO:4 (ACT 4)
SEQ ID NO:5 (ACT 5)
SEQ ID NO:6
SEQ ID NO:7 (Antp)
SEQ ID NO:8 (Antp/ACT 2)
SEQ ID NO:9 (Antp/ACT1)
SEQ ID NO:10 (Antp/ACT 3)
SEQ ID NO:11 (Antp/ACT 4)
SEQ ID NO:12 (Antp/ACT 5)
SEQ ID NO:13 (кодурует полипептид SEQ ID NO: 9)
SEQ ID NO:14 (HIV-Tat)
SEQ ID NO:15 (Penetratin)
SEQ ID NO:16 (Antp-3A)
SEQ ID NO:17 (Tat)
SEQ ID NO:18 (Buforin II)
SEQ ID NO:19 (Transportan)
SEQ ID NO:20 (модельный амфипатический пептид)
SEQ ID NO:21 (K-FGF)
SEQ ID NO:22 (Ku70)
SEQ ID NO:23 (Prion)
SEQ ID NO:24 (pVEC)
SEQ ID NO:25(Pep-1)
SEQ ID NO:26 (SynB1)
SEQ ID NO:27 (Pep-7)
SEQIDNO:28 (HN-1)
SEQ ID NO:29 (Куриный альфа Cx43 ACT)
SEQ ID NO:30 (Человеческий альфа Cx45)
SEQ ID NO:31 (Куриный альфа Cx45)
SEQ ID NO: 32 (Человеческий альфа Cx46)
SEQ ID NO: 33 (Человеческий альфа Cx46.6)
SEQ ID NO:34 (Альфа Cx36 шимпанзе)
SEQ ID NO:35 (Куриный альфа Cx36)
SEQ ID NO:36 (Человеческий альфа Cx47)
SEQ ID NO:37 (Человеческий альфа Cx40)
SEQ ID NO:38 (Человеческий альфа Cx50)
SEQ ID NO:39 (Человеческий альфа Cx59)
SEQ ID NO:40 (Альфа Cx33 крысы)
SEQ ID NO:41 (Альфа Cx44 овцы)
SEQ ID NO:42 (Человеческий бета Cx26)
SEQ ID: 43 (Человеческий альфа Cx37)
SEQ ID 44: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 45: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 46: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 47: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 48: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 49: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 50: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 51: (Консервативный вариант Сх43)
SEQ ID 52: (Консервативный вариант Сх45)
SEQ ID 53: (Консервативный вариант Сх45)
SEQ ID 54: (Консервативный вариант Сх37)
SEQ ID NO: 55 (Неактивный контрольный пептид)
SEQ ID NO:56 (HIV-Tat/ACT 1)
SEQ ID NO:57 (Penetratin/ACT 1)
SEQ ID NO:58 (Antp-3A/ACT 1)
SEQ ID NO:59 (Tat/ACT 1)
SEQ ID NO:60 (Buforin II/ACT 1)
SEQ ID NO:61 (Transportan/ACT 1)
SEQ ID NO:62 (MAP/ACT 1)
SEQ ID NO:63 (K-FGF/ACT 1)
SEQ ID NO:64 (Ku70/ACT 1)
SEQ ID NO:65(Prion/ACT 1)
SEQ ID NO:66 (pVEC/ACT 1)
SEQ ID NO:67 (Pep-1/ACT 1)
SEQ ID NO:68 (SynB1/ACT 1)
SEQ ID NO:69 (Pep-7/ACT 1)
SEQ ID NO:70 (HN-1/ACT 1)
SEQ ID NO: 72 (остатки 20-120, фланкирующие аминокислоту 363 в человеческом Сх43)
SEQ ID NO: 73 (остатки 20-120, фланкирующие аминокислоту 362 в курином Сх43)
SEQ ID NO: 74 (остатки 20-120, фланкирующие аминокислоту 377 в человеческом Сх45)
SEQ ID NO: 75 (остатки 20-120, фланкирующие аминокислоту 375 в курином Сх45)
SEQ ID NO: 76 (остатки 20-120, фланкирующие аминокислоту 313 в человеческом Сх37)
SEQ ID NO: 77 (остатки 20-120, фланкирующие аминокислоту 258 в Сх33 крысы)
SEQ ID NO: 78 (более активный зеленый флуоресцентный белок)
SEQ ID NO:79 (ACT 2)
SEQ ID NO:80 (ACT 1)
SEQ ID NO:81 (ACT 3)
SEQ ID NO:82 (ACT 4)
SEQ ID NO:83 (ACT 5)
Claims (31)
1. Композиция для ускорения заживления тканей, содержащая по меньшей мере один полипептид, состоящий из 4-30 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина или его консервативного варианта, где указанный по меньшей мере один полипептид альфа-коннексин связан на амино-конце с переносчиком клеточной интернализации.
2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что указанный переносчик клеточной интернализации представляет собой последовательность Antennapedia, Penetratin или Antp-3А.
3. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что последовательность Antennapedia представляет собой SEQ ID NO: 7.
4. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что белок альфа-коннексин представляет собой коннексин 37, коннексин 40, коннексин 43 или коннексин 45.
5. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что по меньшей мере один полипептид состоит из 5-19 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина.
6. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что полипептид альфа-коннексина состоит из 9 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина.
7. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что полипептид альфа-коннексина состоит из 8 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина.
8. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что полипептид альфа-коннексина состоит из 5 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина.
9. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что полипептид альфа-коннексина имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 43.
10. Композиция для ускорения заживления тканей, составленная для местного применения, содержащая полипептид, состоящий из 4-30 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина или его консервативного варианта.
11. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что белок альфа-коннексин представляет собой коннексин 37, коннексин 40, коннексин 43 или коннексин 45.
12. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что полипептид альфа-коннексин имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 43.
13. Композиция по п.12, отличающаяся тем, что полипептид альфа-коннексин связан на амино-конце с переносчиком клеточной интернализации.
14. Композиция по п.13, отличающаяся тем, что переносчик клеточной интернализации представляет собой последовательность Antennapedia, Penetratin или Antp-3А.
15. Композиция по п.14, отличающаяся тем, что последовательность Antennapedia представляет собой SEQ ID NO: 7.
16. Композиция по п.13, отличающаяся тем, что белок альфа-коннексин вместе с переносчиком клеточной интернализации содержат SEQ ID NO: 9.
17. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что указанная композиция для местного применения представляет собой мазь, лосьон, спрей, крем или гель.
18. Композиция по п.17, отличающаяся тем, что гель представляет собой гель плуроника.
19. Композиция по п.17, отличающаяся тем, что гель представляет собой гидрогель.
20. Композиция по п.17, отличающаяся тем, что гель представляет собой гель полоксамер.
21. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что гель представляет собой коллагеновый полимер.
22. Композиция по п.10, дополнительно содержащая антибиотик, стероидное, анальгетическое, противовоспалительное средство, антигистаминное средство, химиотерапевтическое средство или их сочетание.
23. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что указанная композиция содержит от 0,01% вес./об. до 2-5% вес./об. или об./об. пептида альфа-коннексина.
24. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что указанная композиция содержит от около 10 до 200 мкМ пептида альфа-коннексина.
25. Материал для лечения ран для ускорения заживления тканей, покрытый полипептидом, состоящим из 4-30 последовательных аминокислот карбокси-конца белка альфа-коннексина или его консервативного варианта.
26. Материал по п.25, отличающийся тем, что указанный материал выбран из группы, состоящей из бандажа, стерильной полоски, кетгута, шовного материала и трансплантата.
27. Материал по п.25, отличающийся тем, что материал представляет собой медицинский имплант.
28. Материал по п.25, отличающийся тем, что материал представляет собой материал, полученный биоинженерными методами.
29. Материал по п.25, отличающийся тем, что указанный материал представляет собой ткань со складчатой структурой.
30. Набор для ускорения заживления тканей, содержащий композицию по п.1 или 10 и фармацевтически приемлемый носитель или материал для лечения ран по п.25 и инструкцию по их применению.
31. Применение композиции по пп.1 и 10 или материала для лечения ран по п.25 для получения лекарственного средства, ускоряющего заживление тканей.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US63836604P | 2004-12-21 | 2004-12-21 | |
US60/638,366 | 2004-12-21 | ||
US67179605P | 2005-04-15 | 2005-04-15 | |
US60/671,796 | 2005-04-15 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011139724/15A Division RU2582394C2 (ru) | 2004-12-21 | 2011-09-29 | Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2007127888A RU2007127888A (ru) | 2009-01-27 |
RU2438696C2 true RU2438696C2 (ru) | 2012-01-10 |
Family
ID=36593626
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007127888/15A RU2438696C2 (ru) | 2004-12-21 | 2005-12-20 | Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей |
RU2011139724/15A RU2582394C2 (ru) | 2004-12-21 | 2011-09-29 | Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011139724/15A RU2582394C2 (ru) | 2004-12-21 | 2011-09-29 | Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (9) | US7786074B2 (ru) |
EP (4) | EP2289535B8 (ru) |
JP (2) | JP5243040B2 (ru) |
KR (1) | KR101236450B1 (ru) |
AU (1) | AU2005319155B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0519737A2 (ru) |
CA (1) | CA2593979C (ru) |
DK (2) | DK1827480T3 (ru) |
ES (1) | ES2620363T3 (ru) |
HU (1) | HUE038099T2 (ru) |
IL (2) | IL184045A (ru) |
NO (1) | NO342964B1 (ru) |
NZ (1) | NZ556541A (ru) |
PL (1) | PL2289535T3 (ru) |
RU (2) | RU2438696C2 (ru) |
SG (1) | SG158153A1 (ru) |
WO (1) | WO2006069181A2 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2549987C1 (ru) * | 2014-06-17 | 2015-05-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Средство для ускорения заживления ран и регенерации тканей |
RU2646792C1 (ru) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Средство для лошадей, обладающее регенеративной активностью |
RU2772456C2 (ru) * | 2017-02-16 | 2022-05-20 | Ферстстринг Рисерч, Инк. | Композиции и способы для предотвращения радиационного поражения и стимуляции регенерации ткани |
Families Citing this family (96)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8658203B2 (en) * | 2004-05-03 | 2014-02-25 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Liposomes useful for drug delivery to the brain |
EP1746976B1 (en) * | 2004-05-03 | 2017-01-11 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Liposomes useful for drug delivery |
US9408381B2 (en) | 2004-12-21 | 2016-08-09 | Musc Foundation For Research Development | Alpha Connexin c-Terminal (ACT) peptides for use in transplant |
WO2006069181A2 (en) | 2004-12-21 | 2006-06-29 | Musc Foundation For Research Development | Compositions and methods for promoting wound healing and tissue regeneration |
KR20080031154A (ko) * | 2005-02-03 | 2008-04-08 | 코다 테라퓨틱스 (엔지) 리미티드 | 항-코넥신 화합물 및 그의 용도 |
AU2016203204A1 (en) * | 2005-02-03 | 2016-06-09 | Coda Therapeutics Limited | Anti-connexin compounds and uses thereof |
CN101965193A (zh) | 2006-11-15 | 2011-02-02 | 科达治疗公司 | 用于伤口愈合的改进方法和组合物 |
CN101652150B (zh) * | 2006-12-01 | 2013-12-11 | 韦克福里斯特大学健康科学院 | 结合胶原抑制剂的医疗装置 |
US8063023B2 (en) | 2006-12-11 | 2011-11-22 | Coda Therapeuctics, Inc. | Impaired wound healing compositions and treatments |
JP5552048B2 (ja) * | 2007-06-21 | 2014-07-16 | ムスク ファンデーション フォー リサーチ ディベロップメント | 加齢性黄斑変性を治療するためのアルファコネキシンc末端(act)ペプチド |
CN104530208B (zh) * | 2007-10-22 | 2018-12-14 | 艾玛菲克有限公司 | 包含磷酸化氨基酸、合成的磷酸化肽和胃石蛋白的稳定的无定形碳酸钙 |
CN107080845A (zh) * | 2007-12-11 | 2017-08-22 | 科达治疗公司 | 受损伤口愈合的组合物和治疗 |
WO2009075882A2 (en) * | 2007-12-11 | 2009-06-18 | Coda Therapeutics, Inc. | Impaired wound healing compositions and treatments |
US8975237B2 (en) | 2007-12-21 | 2015-03-10 | Coda Therapeutics, Inc. | Treatment of fibrotic conditions |
EP2234656A2 (en) | 2007-12-21 | 2010-10-06 | Coda Therapeutics, Inc. | Improved medical devices |
WO2009085268A2 (en) * | 2007-12-21 | 2009-07-09 | Coda Therapeutics, Inc. | Use of anti-connexin peptides, alone or in combination with anti-connexin polynucleotides, for the treatment of surgical adhesions |
GB0803352D0 (en) | 2008-02-22 | 2008-04-02 | Ntnu Technology Transfer As | Oligopeptidic compounds and uses thereof |
WO2009148552A2 (en) * | 2008-06-02 | 2009-12-10 | Kansas State University Research Foundation | Methods and compositions for treating disease |
US8414356B2 (en) | 2008-10-31 | 2013-04-09 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods for making or administering frozen particles |
US8788211B2 (en) | 2008-10-31 | 2014-07-22 | The Invention Science Fund I, Llc | Method and system for comparing tissue ablation or abrasion data to data related to administration of a frozen particle composition |
US9072688B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-07-07 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for therapeutic delivery with frozen particles |
US9060926B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-06-23 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for therapeutic delivery with frozen particles |
US9060931B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-06-23 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for delivery of frozen particle adhesives |
US9040087B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-05-26 | The Invention Science Fund I, Llc | Frozen compositions and methods for piercing a substrate |
US8793075B2 (en) | 2008-10-31 | 2014-07-29 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for therapeutic delivery with frozen particles |
US8221480B2 (en) * | 2008-10-31 | 2012-07-17 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for biological remodeling with frozen particle compositions |
US9050251B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-06-09 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for delivery of frozen particle adhesives |
US8762067B2 (en) | 2008-10-31 | 2014-06-24 | The Invention Science Fund I, Llc | Methods and systems for ablation or abrasion with frozen particles and comparing tissue surface ablation or abrasion data to clinical outcome data |
US9050317B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-06-09 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for therapeutic delivery with frozen particles |
US9072799B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-07-07 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for surface abrasion with frozen particles |
US9050070B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-06-09 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for surface abrasion with frozen particles |
US9060934B2 (en) | 2008-10-31 | 2015-06-23 | The Invention Science Fund I, Llc | Compositions and methods for surface abrasion with frozen particles |
CN102215788A (zh) * | 2008-11-20 | 2011-10-12 | 生命细胞公司 | 用于治疗和预防造口旁疝的方法 |
US20100286762A1 (en) * | 2009-03-18 | 2010-11-11 | Musc Foundation For Research Development | Compositions and Methods for Ameliorating Clinical Electrical Disturbances |
US8609409B2 (en) | 2009-06-04 | 2013-12-17 | Clemson University | Methods and compositions for cell culture platform |
US8680182B2 (en) | 2009-06-04 | 2014-03-25 | Clemson University Research Foundation | Methods for promoting the revascularization and reenervation of CNS lesions |
US20110038921A1 (en) * | 2009-08-13 | 2011-02-17 | Clemson University Research Foundation | Methods and compositions for temporal release of agents from a biodegradable scaffold |
EP3434201B1 (en) * | 2010-02-19 | 2020-06-24 | LifeCell Corporation | Abdominal wall treatment devices |
CA2695337A1 (en) * | 2010-03-04 | 2011-09-04 | Ian De Belle | Compositions and methods for inhibition of hiv |
ES2369101B2 (es) * | 2010-05-07 | 2012-08-02 | Universidade De Santiago De Compostela | Sistema farmacéutico acuoso para la administración de fármacos en las uñas. |
BR112012029611A2 (pt) | 2010-05-21 | 2017-07-25 | Merrimack Pharmaceuticals Inc | proteína de fusão biespecífica, composição farmacêutica, método de tratamento de dano ao tecido em um indivíduo, método de promoção da regeração ou sobrevivência do tecido em um indivíduo e molécula de ácido nucleico |
RU2468795C1 (ru) * | 2011-05-10 | 2012-12-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Сорбционное, антимикробное и дезодорирующее лекарственное средство для наружного применения |
CA3115561A1 (en) * | 2011-10-08 | 2013-04-11 | Next Science IP Holdings Pty Ltd | Antimicrobial compositions and methods employing same |
BR112014014975B1 (pt) | 2011-12-20 | 2019-06-25 | Lifecell Corporation | Produto de tecido, e método para produzir uma composição de tecido |
US9532863B2 (en) | 2011-12-20 | 2017-01-03 | Lifecell Corporation | Sheet tissue products |
WO2013112350A1 (en) | 2012-01-24 | 2013-08-01 | Lifecell Corporation | Elongated tissue matrices |
BR112014021653B1 (pt) | 2012-03-01 | 2023-03-28 | Firststring Research, Inc. | Formulação tópica, uso da formulação tópica e método para fabricar uma formulação tópica |
US9950282B2 (en) | 2012-03-15 | 2018-04-24 | Flodesign Sonics, Inc. | Electronic configuration and control for acoustic standing wave generation |
US9745548B2 (en) | 2012-03-15 | 2017-08-29 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
US10322949B2 (en) | 2012-03-15 | 2019-06-18 | Flodesign Sonics, Inc. | Transducer and reflector configurations for an acoustophoretic device |
US10689609B2 (en) | 2012-03-15 | 2020-06-23 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic bioreactor processes |
US9458450B2 (en) | 2012-03-15 | 2016-10-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustophoretic separation technology using multi-dimensional standing waves |
US10704021B2 (en) | 2012-03-15 | 2020-07-07 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
US9752113B2 (en) | 2012-03-15 | 2017-09-05 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
US10967298B2 (en) | 2012-03-15 | 2021-04-06 | Flodesign Sonics, Inc. | Driver and control for variable impedence load |
US10737953B2 (en) | 2012-04-20 | 2020-08-11 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustophoretic method for use in bioreactors |
ES2749178T3 (es) | 2012-04-24 | 2020-03-19 | Lifecell Corp | Matrices de tejido funcionalizado |
US9345744B2 (en) | 2012-04-25 | 2016-05-24 | Musc Foundation For Research Development | Peptide-based collagen modulators for wound healing and tissue repair |
TWI474831B (zh) | 2012-09-14 | 2015-03-01 | Univ Taipei Medical | 免疫調節蛋白於促進傷口癒合或組織損傷治療的用途 |
US8962028B2 (en) | 2012-10-18 | 2015-02-24 | MiCal Pharmaceuticals LLC—H Series, a Series of MiCal Pharmaceuticals LLC, a Multi-Division Limited Liability Company | Topical steroid composition and method |
WO2015017034A1 (en) * | 2013-08-02 | 2015-02-05 | Gourdie Robert G | Methods of treating a cancer through targeted disruption of alpha connexin 43-zonula occludens-1 (zo-1) interaction |
US9745569B2 (en) | 2013-09-13 | 2017-08-29 | Flodesign Sonics, Inc. | System for generating high concentration factors for low cell density suspensions |
CN105939767B (zh) | 2014-01-08 | 2018-04-06 | 弗洛设计声能学公司 | 具有双声电泳腔的声电泳装置 |
US9744483B2 (en) | 2014-07-02 | 2017-08-29 | Flodesign Sonics, Inc. | Large scale acoustic separation device |
EP3183346A4 (en) | 2014-08-22 | 2018-10-24 | Auckland Uniservices Limited | Channel modulators |
US11021699B2 (en) | 2015-04-29 | 2021-06-01 | FioDesign Sonics, Inc. | Separation using angled acoustic waves |
US11708572B2 (en) | 2015-04-29 | 2023-07-25 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic cell separation techniques and processes |
US11377651B2 (en) | 2016-10-19 | 2022-07-05 | Flodesign Sonics, Inc. | Cell therapy processes utilizing acoustophoresis |
RU2748976C2 (ru) | 2015-06-04 | 2021-06-02 | Аморфикал Лтд. | Композиции аморфного карбоната кальция для ингаляции, подъязычного или трансбуккального введения |
US11474085B2 (en) | 2015-07-28 | 2022-10-18 | Flodesign Sonics, Inc. | Expanded bed affinity selection |
US11459540B2 (en) | 2015-07-28 | 2022-10-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Expanded bed affinity selection |
MA42991A (fr) | 2015-10-16 | 2018-08-22 | Ipsen Biopharm Ltd | Stabilisation de compositions pharmaceutiques de camptothécine |
US11554158B2 (en) * | 2016-04-13 | 2023-01-17 | Northeast Ohio Medical University | GPNMB compositions for treatment of skin wounds |
US11433116B2 (en) * | 2016-04-14 | 2022-09-06 | Cedars-Sinai Medical Center | GJA1 isoforms protect against metabolic stress |
US11085035B2 (en) | 2016-05-03 | 2021-08-10 | Flodesign Sonics, Inc. | Therapeutic cell washing, concentration, and separation utilizing acoustophoresis |
US11214789B2 (en) | 2016-05-03 | 2022-01-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Concentration and washing of particles with acoustics |
US11136368B2 (en) | 2016-08-23 | 2021-10-05 | The Cleveland Clinic Foundation | Cancer treatment using CX26 blocking peptides |
EP3529347A1 (en) | 2016-10-19 | 2019-08-28 | Flodesign Sonics, Inc. | Affinity cell extraction by acoustics |
WO2018078616A1 (en) | 2016-10-25 | 2018-05-03 | Amorphical Ltd | Amorphous calcium carbonate for treating a leukemia |
US20230147795A1 (en) * | 2017-02-16 | 2023-05-11 | Firststring Research, Inc. | Composition and methods for preventing radiation injury and promoting tissue regeneration |
US11466069B2 (en) | 2017-04-28 | 2022-10-11 | Auckland Uniservices Limited | Methods of treatment and novel constructs |
WO2018209169A1 (en) * | 2017-05-12 | 2018-11-15 | Ohio State Innovation Foundation | Peptides and methods for treating neurodegenerative disorders |
WO2019009628A2 (ko) * | 2017-07-07 | 2019-01-10 | 주식회사 리포바이오랩 | 화상 및 욕창의 완화 및 치료용 조성물 |
US11344603B2 (en) | 2017-07-19 | 2022-05-31 | Auckland Uniservices Limited | Cytokine modulation |
CN107446018B (zh) * | 2017-08-07 | 2020-07-17 | 温州千瑞生物科技有限公司 | 促进伤口愈合的肽及其应用 |
CA3085784A1 (en) | 2017-12-14 | 2019-06-20 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic transducer driver and controller |
KR20210057072A (ko) * | 2018-09-12 | 2021-05-20 | 퍼스트스트링 리서치 인코포레이티드 | 알파 코넥신 c-말단 펩타이드에 대한 나노 입자 제제 및 사용 방법 |
WO2021007275A1 (en) * | 2019-07-08 | 2021-01-14 | Firststring Research, Inc. | Compositions and methods for preserving organ transplants |
ES2804039A1 (es) * | 2019-07-30 | 2021-02-02 | Fund Profesor Novoa Santos | Fragmentos peptidicos de cx43 para su uso como agentes senoliticos |
CN110606872B (zh) * | 2019-10-12 | 2022-06-21 | 珠海市雅莎医疗器械有限公司 | 一种促皮肤创伤修复的抗氧化多肽oa-gl17及其制备方法与应用 |
KR102251640B1 (ko) | 2019-11-27 | 2021-05-17 | 서울대학교산학협력단 | 지방세포 분화 촉진용 펩타이드 및 이를 포함하는 지방세포 분화 촉진용 조성물 |
KR20210104319A (ko) | 2020-02-17 | 2021-08-25 | 노태성 | 궤양 치료를 위한 조성물 |
JP2023520910A (ja) * | 2020-04-07 | 2023-05-22 | ファーストストリング・リサーチ・インコーポレイテッド | ウイルス感染症および他の呼吸器障害の合併症を処置するための組成物および方法 |
WO2021226310A2 (en) | 2020-05-06 | 2021-11-11 | Ohio State Innovation Foundation | Compositions and methods for treating atrial fibrillation |
JP2024519126A (ja) | 2021-05-21 | 2024-05-08 | エンブレーション リミテッド | 組織のマイクロ波治療 |
WO2024085246A1 (ja) * | 2022-10-21 | 2024-04-25 | 株式会社カネカ | 認知症の罹患の有無の判定のためのキット及び方法 |
Family Cites Families (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR1601438A (ru) | 1968-10-17 | 1970-08-24 | ||
NO812612L (no) | 1980-08-06 | 1982-02-08 | Ferring Pharma Ltd | Enzym-inhibitorer. |
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US4980286A (en) | 1985-07-05 | 1990-12-25 | Whitehead Institute For Biomedical Research | In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells |
JP2703893B2 (ja) | 1985-07-05 | 1998-01-26 | ホワイトヘッド・インスティテュ−ト・フォ−・バイオメディカル・リサ−チ | 外来遺伝子物質を発現する上皮細胞 |
JPS62209523A (ja) | 1986-03-11 | 1987-09-14 | Fuji Photo Film Co Ltd | 感光材料 |
WO1989007136A2 (en) | 1988-02-05 | 1989-08-10 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Modified hepatocytes and uses therefor |
EP0432216A1 (en) | 1988-09-01 | 1991-06-19 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Recombinant retroviruses with amphotropic and ecotropic host ranges |
US5234809A (en) | 1989-03-23 | 1993-08-10 | Akzo N.V. | Process for isolating nucleic acid |
US6261834B1 (en) | 1991-11-08 | 2001-07-17 | Research Corporation Technologies, Inc. | Vector for gene therapy |
FR2739621B1 (fr) | 1995-10-05 | 1997-12-05 | Centre Nat Rech Scient | Peptides utilisables comme vecteurs pour l'adressage intracellulaire de molecules actives |
ES2245638T3 (es) | 1999-01-27 | 2006-01-16 | Becker, David, Dr. | Formulaciones que comprenden nucleotidos antisentido para conexinas. |
EP1178817A2 (en) * | 1999-05-14 | 2002-02-13 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in haematopoietic cells |
US7250397B2 (en) | 2000-02-23 | 2007-07-31 | Zealand Pharma A/S | Antiarrhythmic peptides |
AU2002239336A1 (en) * | 2000-11-10 | 2002-06-03 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in hematopoietic cells |
WO2002088370A2 (en) * | 2001-04-30 | 2002-11-07 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Autogene nucleic acids encoding a secretable rna polymerase |
US20050053918A1 (en) * | 2001-05-16 | 2005-03-10 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Method of identifying peptides capable of binding to MHC molecules, peptides identified thereby and their uses |
US6867283B2 (en) | 2001-05-16 | 2005-03-15 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Peptides capable of binding to MHC molecules, cells presenting such peptides, and pharmaceutical compositions comprising such peptides and/or cells |
US6685971B2 (en) | 2001-06-28 | 2004-02-03 | Rongxiang Xu | Method and composition for repairing and promoting regeneration of mucosal tissue in the gastrointestinal tract |
CN1827766B (zh) | 2001-06-28 | 2010-08-25 | 徐荣祥 | 体外细胞的培养方法 |
AU2002321903A1 (en) * | 2001-08-03 | 2003-02-24 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in cells |
EP1435925A2 (en) * | 2001-10-17 | 2004-07-14 | University of Wales College of Medicine | Gap junctions and edhf |
JP2003238441A (ja) | 2002-02-08 | 2003-08-27 | 英行 ▲高▼野 | 血管新生抑制剤 |
US20030215424A1 (en) * | 2002-05-15 | 2003-11-20 | Seul Kyung Hwan | Method of modulating angiogenesis |
US7560430B2 (en) | 2003-02-14 | 2009-07-14 | Human Matrix Sciences, Llc | Elastin digest compositions and methods utilizing same |
DK1699924T3 (da) | 2003-12-03 | 2019-10-21 | Ocunexus Therapeutics Inc | Connexin 43-målrettede hæmmende forbindelser og fremgangsmåder til anvendelse deraf i behandling af hornhindetraume |
US9408381B2 (en) | 2004-12-21 | 2016-08-09 | Musc Foundation For Research Development | Alpha Connexin c-Terminal (ACT) peptides for use in transplant |
WO2006069181A2 (en) | 2004-12-21 | 2006-06-29 | Musc Foundation For Research Development | Compositions and methods for promoting wound healing and tissue regeneration |
KR20080031154A (ko) | 2005-02-03 | 2008-04-08 | 코다 테라퓨틱스 (엔지) 리미티드 | 항-코넥신 화합물 및 그의 용도 |
JP5552048B2 (ja) | 2007-06-21 | 2014-07-16 | ムスク ファンデーション フォー リサーチ ディベロップメント | 加齢性黄斑変性を治療するためのアルファコネキシンc末端(act)ペプチド |
JP5879841B2 (ja) * | 2011-09-12 | 2016-03-08 | 富士ゼロックス株式会社 | 画像形成装置 |
EP2586436A1 (en) * | 2011-10-31 | 2013-05-01 | Commissariat à l'Énergie Atomique et aux Énergies Alternatives | Use of anti-connexin agents for enhancing the therapeutic effect of acetylcholinesterase inhibitor |
-
2005
- 2005-12-20 WO PCT/US2005/046442 patent/WO2006069181A2/en active Application Filing
- 2005-12-20 CA CA2593979A patent/CA2593979C/en active Active
- 2005-12-20 HU HUE10185372A patent/HUE038099T2/hu unknown
- 2005-12-20 NZ NZ556541A patent/NZ556541A/en unknown
- 2005-12-20 EP EP10185372.9A patent/EP2289535B8/en active Active
- 2005-12-20 DK DK05855065.8T patent/DK1827480T3/en active
- 2005-12-20 ES ES10185398.4T patent/ES2620363T3/es active Active
- 2005-12-20 EP EP05855065.8A patent/EP1827480B1/en active Active
- 2005-12-20 EP EP10185398.4A patent/EP2377546B1/en active Active
- 2005-12-20 RU RU2007127888/15A patent/RU2438696C2/ru active
- 2005-12-20 PL PL10185372T patent/PL2289535T3/pl unknown
- 2005-12-20 KR KR1020077015282A patent/KR101236450B1/ko active IP Right Grant
- 2005-12-20 EP EP10185428A patent/EP2374469A3/en not_active Withdrawn
- 2005-12-20 SG SG200908483-1A patent/SG158153A1/en unknown
- 2005-12-20 DK DK10185398.4T patent/DK2377546T3/en active
- 2005-12-20 BR BRPI0519737-6A patent/BRPI0519737A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2005-12-20 US US11/721,529 patent/US7786074B2/en active Active
- 2005-12-20 JP JP2007548442A patent/JP5243040B2/ja active Active
- 2005-12-20 AU AU2005319155A patent/AU2005319155B2/en active Active
-
2007
- 2007-06-12 US US11/761,729 patent/US7888319B2/en active Active
- 2007-06-19 IL IL184045A patent/IL184045A/en active IP Right Grant
- 2007-07-17 NO NO20073654A patent/NO342964B1/no unknown
-
2010
- 2010-06-20 IL IL206497A patent/IL206497A/en active IP Right Grant
- 2010-08-30 US US12/871,461 patent/US8357668B2/en active Active
-
2011
- 2011-09-29 RU RU2011139724/15A patent/RU2582394C2/ru active
-
2012
- 2012-12-14 US US13/715,626 patent/US8809257B2/en active Active
-
2013
- 2013-01-30 JP JP2013015823A patent/JP5602891B2/ja active Active
- 2013-03-15 US US13/842,506 patent/US8916515B2/en active Active
- 2013-03-15 US US13/842,529 patent/US8859733B2/en active Active
-
2014
- 2014-11-14 US US14/542,151 patent/US9394351B2/en active Active
-
2016
- 2016-06-23 US US15/190,810 patent/US9855313B2/en active Active
-
2017
- 2017-11-29 US US15/825,423 patent/US10398757B2/en active Active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
DANG XITONG et al. The carboxy-tail of connexin-43 localizes to the nucleus and inhibits cell growth. Molecular and Cellular Biochemistry, vol.242, N1-2, Jan. 2003, p.35-38. HUNTER ANDREW W. et al. Fusion of GFP to the carboxyl Terminus of Connexin43 increases Gaap Junction Size in Hela Cells. Cell Communication and Adhesion, 2003, vol.10, N4-6, p.211-214. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2549987C1 (ru) * | 2014-06-17 | 2015-05-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Средство для ускорения заживления ран и регенерации тканей |
RU2646792C1 (ru) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Средство для лошадей, обладающее регенеративной активностью |
RU2772456C2 (ru) * | 2017-02-16 | 2022-05-20 | Ферстстринг Рисерч, Инк. | Композиции и способы для предотвращения радиационного поражения и стимуляции регенерации ткани |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2438696C2 (ru) | Композиции и способы, используемые для ускорения заживления ран и регенерации тканей | |
CN101151043B (zh) | 促进伤口愈合和组织再生的组合物和方法 | |
AU2012202117B2 (en) | Compositions and methods for promoting wound healing and tissue regeneration | |
CA2592285C (en) | Compositions comprising connexin polypeptides and methods for promoting wound healing and tissue regeneration using connexin polypeptides | |
RU2772456C2 (ru) | Композиции и способы для предотвращения радиационного поражения и стимуляции регенерации ткани |