RU2437879C2 - Аминоизохинолиновый ингибитор тромбина с улучшенной биодоступностью - Google Patents
Аминоизохинолиновый ингибитор тромбина с улучшенной биодоступностью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2437879C2 RU2437879C2 RU2009107917/04A RU2009107917A RU2437879C2 RU 2437879 C2 RU2437879 C2 RU 2437879C2 RU 2009107917/04 A RU2009107917/04 A RU 2009107917/04A RU 2009107917 A RU2009107917 A RU 2009107917A RU 2437879 C2 RU2437879 C2 RU 2437879C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- amino
- methyl
- compound
- phenylalanyl
- phenyl
- Prior art date
Links
- SMAWQDAZNWXAJK-FTJBHMTQSA-N CCCOC(CN[C@H](Cc(cc1)ccc1OC)C(N(CCC1)[C@@H]1C(NCc1cc2ccnc(N)c2cc1)=O)=O)=O Chemical compound CCCOC(CN[C@H](Cc(cc1)ccc1OC)C(N(CCC1)[C@@H]1C(NCc1cc2ccnc(N)c2cc1)=O)=O)=O SMAWQDAZNWXAJK-FTJBHMTQSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
Abstract
Настоящее изобретение относится к соединению -N-(2-оксо-2-пропоксиэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)-метил]-L-пролинамиду, или его фармацевтически приемлемой соли, к фармацевтической композиции, содержащей указанное соединение, а также к применению соединения для производства лекарственного средства для лечения или профилактики заболеваний, опосредованных тромбином. Также изобретение относится к соединению - собой N-(карбоксиметил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамиду, или его фармацевтически приемлемой соли. Технический результат: получены новые соединения, обладающие полезными биологическими свойствами. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 табл.
Description
Изобретение относится к ингибитору тромбина, имеющему аминоизохинолиновую группу, к содержащей его фармацевтической композиции, а также к применению указанного ингибитора для производства лекарственного средства для лечения заболеваний, опосредованных тромбином.
Большинство пептидоподобных ингибиторов тромбина, о которых сообщалось в литературе, содержат основную группу в так называемом положении Р1 (R. Pfau, «Structure-based design of thrombin inhibitors», Current Opinion in Drug Discovery & Development, 6, 437-450, 2003). Примеры таких основных групп включают основные аминокислоты-аргинин и лизин, а также гуанидины и бензамиды. Полагают, что основный фрагмент в таких соединениях является необходимым для антитромбиновой активности. Однако такие высокоосновные группы обычно протонированы при физиологических рН и, как следствие, такие соединения плохо абсорбируются через желудочно-кишечный тракт после перорального приема и имеют низкую пероральную биодоступность.
В общем случае терапевтические агенты, которые можно вводить перорально, наиболее предпочтительны, и они имеют повышенный коммерческий потенциал вследствие свойственной им простоты применения.
В международной патентной заявке WO 98/47876 (Akzo Nobel N.V.) раскрыт класс ингибиторов тромбина, имеющих в качестве основной группы аминоизохинолиновый фрагмент, и данные соединения обладают улучшенными свойствами трансэпителиального транспорта.
В частности, данная патентная заявка в качестве примера содержит соединения N-(карбоксиметил)-D-фенилаланил-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид (WO 98/47876, пример 77) и N-(карбоксиметил)-D-(4-метоксифенил)аланил-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид (WO 98/47876, пример 111as), также как и их сложноэфирные пролекарственные производные.
Желательно разработать ингибиторы тромбина с более высокой биодоступностью, особенно - подходящие для перорального введения.
Настоящее изобретение касается нового соединения - N-(2-оксо-2-пропоксиэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамида, которое имеет высокую биодоступность при пероральном введении.
В другом аспекте изобретение относится к N-(карбоксиметил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамиду, который является селективным ингибитором тромбина, образующимся in situ из N-(2-оксо-2-пропоксиэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамида при пероральном введении, который полезен в качестве промежуточного соединения в синтезе н-пропильного пролекарственного производного в соответствии с изобретением.
Соединение данного изобретения, т.е. N-(2-оксо-2-пропоксиэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид, представлено структурной формулой 1A:
Настоящим изобретением установлено, что н-пропильное сложноэфирное пролекарственное производное 1A обладает высокой биодоступностью при пероральном введении по сравнению с биодоступностью соответствующих н-пропильных сложноэфирных пролекарственных производных структурно близкородственных аминоизохинолиновых ингибиторов тромбина, таких как N-(карбоксиметил)-D-фенилаланил-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид (2А) и N-(карбоксиметил)-D-(4-метоксифенил)аланил-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид (3А), раскрытых в WO 98/47876.
Таким образом, введение соединения 1А в соответствии с изобретением приводит к заметно более высоким концентрациям в плазме ингибитора тромбина 1В - производного свободной кислоты 1А, которое быстро образуется in vivo как только соединение попадает в кровоток.
Неожиданное повышение пероральной биодоступности нового дифенилаланинового производного 1А по сравнению с соответствующим фенилаланиновым производным 2А или с метоксифенилаланиновым производным 3А позволяет разработать антитромботический агент для перорального введения, действующий при относительно низкой дозировке.
Экспериментальная часть
Общие замечания
Результаты анализа методом ЖХ-МС были получены на масс-спектрометре Applied Biosystems API150EX. Спектры 1Н ЯМР были зарегистрированы на спектрометрах Bruker DPX 400 или DRX 400.
Пример 1 (Схема I):
N-(2-оксо-2-пропоксиэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид (1A)
A: N-[2-(1,1-диметилэтокси)-2-оксоэтил]-β-фенил-D-фенилаланин (а)
К перемешиваемому раствору D-дифенилаланина, H-D-Dpa-OH (20,0 г, 82,9 ммоль), и карбоната кальция (17,2 г, 125 ммоль) в смеси диоксан/вода (1:1 (об./об.), 100 мл) добавляют трет-бутилбромацетат (12,2 мл, 83,0 ммоль). После перемешивания в течение ночи добавляют воду (100 мл) и рН доводят до 5,5 добавлением 0,5 М раствора лимонной кислоты. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой, затем - диэтиловым эфиром и высушивают в вакууме, получают 10,4 г указанного в заголовке соединения а.
Схема I
B: Гидрохлорид 1,1-диметилэтилового эфира (S)-2-[[[(1-амино-6-изоизохинолил)метил]амино]карбонил]-1-пирролидинкарбоновой кислоты (b)
К перемешиваемому раствору N-трет-бутоксикарбонил-L-пролина, Boc-Pro-OH (6,73 г, 31,25 ммоль), в безводном N,N-диметилформамиде (100 мл) в атмосфере аргона добавляют тонко измельченный гидрохлорид 1-амино-6-аминометилизохинолина (10,0 г, 40,63 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (16,17 г, 125,00 ммоль). После перемешивания суспензии в течение 15 минут при комнатной температуре в течение 5 минут порциями добавляют гексафторфосфат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (17,67 г, 46,88 ммоль), что со временем приводит к растворению суспендированного гидрохлорида 1-амино-6-аминометилизохинолина. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере аргона еще 90 минут, по истечении этого времени образуется желтый осадок гидрохлорида 1,1-диметилэтилового эфира (S)-2-[[[(1-амино-6-изоизохинолил)метил]амино]карбонил]-1-пирролидинкарбоновой кислоты (b). Осадок отделяют фильтрацией, промывают дихлорметаном (300 мл) до обесцвечивания фильтрата, а затем высушивают в вакууме, получают 7,8 г (56%) указанного в заголовке соединения (чистота 94% по данным ВЭЖХ на колонке Luna C18(2) 46×30 мм, градиент, подвижная фаза - ацетонитрил:вода, 5-100%/4 мин, постоянно содержит 0,1% трифторуксусной кислоты). Затем продукт выделяют из фильтрата выпариванием в вакууме для удаления диметилформамида и избытка диизопропилэтиламина с добавлением 500 мл дихлорметана. Полученный осадок удаляют фильтрацией, промывают дихлорметаном (300 мл) и высушивают в вакууме, получают 4,6 г (33%) (чистота 91% по данным ВЭЖХ на колонке Luna C18(2) 46×30 мм, градиент, подвижная фаза - ацетонитрил:вода, 5-100%/4 мин, постоянно содержит 0,1% трифторуксусной кислоты).
С: Гидрохлорид N-[2-(1,1-диметилэтокси)-2-оксоэтил]-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида (с)
К суспензии гидрохлорида 1,1-диметилэтилового эфира (S)-2-[[[(1-амино-6-изоизохинолил)метил]амино]карбонил]-1-пирролидинкарбоновой кислоты (b) (4,14 г, 9,34 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (8 мл). После перемешивания раствора в течение 2 часов растворитель и избыток трифторуксусной кислоты удаляют в вакууме. Остаток затем растворяют в N,N-диметилформамиде (41 мл) и добавляют 2-(трет-бутокси-карбонилметил-амино)-3,3-дифенил-пропионовую кислоту (Boc-D-Dpa-OH) (3,30 г, 9,3 ммоль), гексафторфосфат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (5,31 г, 13,9 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (9,75 мл, 56 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем добавляют воду до образования осадка. Влажный осадок отделяют фильтрованием, затем переносят в этилацетат, осушают (MgSO4), фильтруют и выпаривают досуха, получают неочищенный продукт (7,2 г). Очистка колоночной хроматографией (диоксид кремния, режим градиентного элюирования смесями дихлорметана и метанола (0-10%)) дает 4,6 г указанного в заголовке соединения с в виде смолы.
D: Гидрохлорид N-(карбоксиметил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида (1В)
К раствору гидрохлорида N-[2-(1,1-диметилэтокси)-2-оксоэтил]-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида (с) (4,6 г, 7,1 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (4,6 мл). После стояния в течение ночи раствор выпаривают досуха, растворяют в дихлорметане и добавляют избыток хлористого водорода в диэтиловом эфире. Продукт осаждают добавлением безводного диэтилового эфира, затем отделяют фильтрацией и сушат в вакууме, получают 2,8 г. Дополнительные 0,8 г получают осаждением из маточного раствора.
1H ЯМР δ (CD3OD) 1,32 (м, 1H), 1,83 (м, 3H), 2,86 (м, 1H), 3,53(м, 1H), 3,68 (дд, 2H; J=17,1 Гц), 3,80 (д, 2H; J=17,1 Гц) (4,15 (м, 1H), 4,52 (д, 1H; J=16,6 Гц), 4,59 (д, 1H; J=11,5 Гц), 4,69 (д, 1H; J=16,1 Гц), 5,3 (д, 1H; 11,5 Гц), 7,2-7,6 (м, 10H), 7,66 (д, 2H; J=7,5 Гц), 7,72 (дд, 1H; J=1,5, 8,0 Гц), 7,89 (c, 1H), 8,38 (д, 1H; J=9 Гц); MC m/z 552,2 (М+H)+.
E: Гидрохлорид N-(2-пропокси-2-оксоэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида (1А)
К суспензии гидрохлорида N-(карбоксиметил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида (1В; 300 мг, 0,5 ммоль) в н-пропаноле (5 мл) по каплям добавляют тионилхлорид (0,4 мл). После перемешивания в течение 3 дней раствор разбавляют дихлорметаном, промывают 5% водным раствором бикарбоната натрия и выпаривают досуха. Неочищенный продукт очищают обращеннофазной ВЭЖХ, а затем превращают в гидрохлоридную соль растворением в малом количестве метанола и осаждением 1М раствором хлористого водорода в диэтиловом эфире. После добавления дополнительного количества безводного диэтилового эфира образовавшийся осадок отделяют фильтрованием и высушивают в вакууме, получают 185 мг указанного в заголовке соединения в виде белого порошка.
1H ЯМР δ (CD3OD) δ 0,85 (т, 3H; J=7,5 Гц), 1,33 (м, 1H), 1,57 (секст, 2H; J=7 Гц), 1,83 (м, 3H), 2,88 (м, 1H), 3,51 (м, 1H), 3,73 (д, 1H; J=17,6 Гц), 3,84 (д, 1H; J=17,6 Гц), 4,07 (м, 2H), 4,16 (дд, 1H; J=5,0, 8,0 Гц), 4,53 (д, 1H; J=16,6 Гц), 4,56 (д, 1H,; J=13,6 Гц), 4,70 (д, 1H; J=16,6 Гц), 5,20 (д, 1H; J=11 Гц), 7,23-7,44 (м, 7H), 7,50 (т, 2H; J=7,5 Гц), 7,56 (д, 1H; J=7,0 Гц), 7,65 (д, 2H; J=7,5 Гц), 7,72 (дд, 1H; J=1,5, 8,0 Гц), 7,90 (c, 1H), 8,39 (д, 1H; J=8,5 Гц); MC m/z 594,4 (М+H)+.
С применением способов, подобных раскрытым выше и изображенным на схеме I, исходя из D-фенилаланина или О-метил-D-тирозина вместо D-дифенилаланина, были получены соответствующие производные. Соединения 2В и 3В были выделены и использованы для последующего исследования в виде трифторацетатных солей.
Пример 2
2В: Трифторацетат N-(карбоксиметил)-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида
1H ЯМР δ (CD3OD) δ 1,41 (м, 1H), 1,85 (м, 2H), 1,99 (м, 1H), 2,47 (м, 1H), 3,35 (дд, 1H; J=5,0, 13,1 Гц), 3,40 (дд, 1H; J=10,6, 13,1 Гц), 3,45 (м, 1H), 3,73 (д, 1H; J=16,6 Гц), 3,80 (д, 1H; J=16,6 Гц), 4,34 (дд, 1H; J=4,5, 8,1 Гц), 4,5 (дд, 1H; J=5,0, 10,6 Гц), 4,51 (д, 1H; J=16,1 Гц), 4,72 (д, 1H; J=16,6 Гц), 7,23 (д, 1H; J=7,1 Гц), 7,27-7,43 (м, 5H), 7,52 (д, 1H; J=7,1 Гц), 7,71 (дд, 1H; J=1,5, 8,6 Гц), 7,90 (c, 1H), 8,34 (д, 1H; J=8,6 Гц); MC m/z 476,0 (М+H)+.
2А: Гидрохлорид N-(2-пропокси-2-оксоэтил)-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида
1H ЯМР δ (CD3OD) δ 0,89 (т, 3H; J=7,6 Гц), 1,41 (м, 1H), 1,62 (секст, 2H; J=7,6 Гц), 1,83 (м, 2H), 2,00 (м, 1H), 2,44 (м, 1H), 3,16 (дд, 1H; J=1,5, 10,6 Гц), 3,37 (дд, 1H; J=5,5, 13,1 Гц), 3,47 (м, 1H), 3,93 (д, 1H; J=17,1 Гц), 4,06 (д, 1H; J=17,1 Гц), 4,14 (м, 2H), 4,36 (дд, 1H; 5,0, 9,1 Гц), 4,54 (м, 2H), 4,71 (д, 1H; J=17,1 Гц), 7,26 (д, 1H; 7,1 Гц), 7,29-7,44 (м, 5H), 7,56 (д, 1H; J=7,1 Гц), 7,73 (д, 1H; J=8,6 Гц), 7,92 (c, 1H), 8,38 (д, 1H; J=8,6 Гц); MC m/z 518,2 (М+H)+
Пример 3
3В: Трифторацетат N-(карбоксиметил)-О-метил-D-тирозинил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида
1H ЯМР δ (CD3OD) δ 1,46 (м, 1H), 1,87 (м, 2H), 2,02 (м, 1H), 2,56 (м, 1H), 3,08 (дд, 1H; J=10,6, 12,6 Гц), 3,27 (дд, 1H; J=5,5, 13,6 Гц), 3,47 (м, 1H), 3,71 (д, 1H; J=16,1 Гц), 3,79 (д, 1H; J=15,6 Гц), 3,79 (c, 3H), 4,36 (дд, 1H; J=4,0, 8,6 Гц), 4,46 (дд, 1H; J=4,0, 8,66 Гц), 4,51 (д, 1H; J=16,6 Гц), 4,72 (д, 1H; J=16,6 Гц), 6,92 (д, 2H; J=8,6 Гц), 7,21 (д, 2H; J=8,6 Гц), 7,24 (д, 1H; 7,1 Гц), 7,52 (д, 1H; J=7,1 Гц), 7,71 (д, 1H; J=8,1 Гц), 7,90 (c, 1H), 8,35 (д, 1H; J=9,1 Гц); MC m/z 506,3 (М+H)+.
3А: Гидрохлорид N-(2-пропокси-2-оксоэтил)-О-метил-D-тирозинил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида
1H ЯМР δ (CD3OD) δ 0,88 (т, 3H; J=7,1 Гц), 1,47 (м, 1H), 1,61 (секст, 2H; J=7,1 Гц), 1,86 (м, 2H), 2,04 (м, 1H), 2,54 (м, 1H), 3,10 (дд, 1H; J=10,6, 15,1 Гц), 3,31 (м„ 1H), 3,49 (м, 1H), 3,79 (c, 1H), 3,91 (д, 1H; J=16,6 Гц), 4,04 (д, 1H; J=16,6 Гц), 4,13 (м, 2H), 4,38 (дд, 1H; 5,0, 9,1 Гц), 4,48 (дд, 1H; J=5,0, 10,6 Гц), 4,54 (д, 1H; J=16,1 Гц), 4,71 (д, 1H; J=16,1 Гц), 6,93 (д, 2H; J=8,6 Гц), 7,22 (д, 2H; J=8,6 Гц), 7,26 (д, 1H; 7,1 Гц), 7,55 (д, 1H; J=7,1 Гц), 7,73 (дд, 1H; J=2,0, 8,6 Гц), 7,92 (c, 1H), 8,38 (д, 1H; J=8,6 Гц); MC m/z 548,3 (М+H)+.
Пример 4
Исследование активности тромбина
Активность ингибирования тромбина оценивают преинкубированием исследуемого соединения при различных концентрациях с α-тромбином человека при 37°С. Через 10 минут к смеси добавляют хромогенный субстрат H-D-Phe-Пипеколинил-Arg-п-нитроанилид (S-2238) и измеряют изменение поглощения через последующие 8 минут. Оба соединения 1А и 1В являются эффективными ингибиторами α-тромбина человека зависимым от концентрации образом со значениями IC50, равными 13,0 нМ и 12,6 нМ соответственно (для обоих n=5; фиг.1). В последующих опытах, в которых также изменяют концентрацию S-2238, графики зависимостей [S]/V от [S] параллельны для каждой использованной концентрации S-2238, что указывает на конкурентную природу ингибирования. Анализ указанных данных по Хейнсу-Вульфу позволил определить значения Ki, равные 0,9 нМ (n=5) для 1В и 1,0 нМ (n=3) для 1А. Сравнение с показателями активности соединений 2 и 3 проведено в таблице 1.
| Таблица 1 Показатели активности ингибирования тромбина |
||
| Соединение | IC50 (нМ) | Ki (нМ) |
| 1А | 13,0 | 1,0 |
| 1В | 12,6 | 0,9 |
| 2А | 573 | 34,5 |
| 2В | 864 | 45,5 |
| 3А | 197 | 1,8 |
| 3В | 358 | 5,4 |
Пример 5
Определение биодоступности соединений 1А, 2А и 3А у крыс
Животные
Самцы крыс Wistar Ola (~250 г). Во время исследований имели свободный доступ к пище и воде.
Хирургические подготовительные действия
Для внутривенных фармакокинетических исследований в правую яремную вену под изофлурановой анестезией были введены катетеры (Portex polythene - внутренний диаметр 0,58 мм, наружный диаметр 0,96 мм, завершающиеся насадкой, изготовленной из трубки из медицинского силикона SF, SFM-1350). Трубки были выведены в заднюю часть шеи, заполнены гепаринизированным солевым раствором (100 ед/мл) и закрыты пробками. Животным был дан период для восстановления минимум 48 часов перед введением соединений.
Введение соединений
Соединения 1А, 2А и 3А вводили перорально (РО). Соединения 1В, 2В и 3В вводили внутривенно (IV). Последовательные образцы крови (для получения плазмы) отбирали из латеральной вены в моменты времени от 3 минут до 24 часов (конечный образец, взятый сердечной пункцией) в соответствии с протоколом в виде матрицы (3 образца в каждый момент времени). Образцы плазмы до проведения анализа хранили при -20°С.
Анализ образцов плазмы
В образцах плазмы определяли соответствующие тромбиновые производные свободных кислот 1В, 2В и 3В, используя метод ЖХ-МС. Cmax (максимальные концентрации в плазме) и значения AUC определяли из профилей средняя концентрация в плазме - время.
Опыты
Были выполнены следующие опыты:
- Соединение 1В в солевом растворе вводили внутривенно (IV) 5 крысам из расчета 5 мг/кг (5 мг/мл раствора, дозируемого по 1 мл/кг).
- Соединение 1В в солевом растворе вводили перорально (РО) 4 крысам из расчета 10 мг/кг (2 мг/мл раствора, дозируемого по 5 мл/кг).
- Соединение 1А в растворе, содержащем 5% мульфогена/95% солевого раствора, вводили перорально 5 крысам из расчета 10 мг/кг (2 мг/мл раствора, дозируемого по 5 мл/кг).
- Соединение 2В в солевом растворе вводили внутривенно 4 крысам из расчета 2 мг/кг (2 мг/мл раствора, дозируемого по 1 мл/кг).
- Соединение 2А в солевом растворе вводили перорально 4 крысам из расчета 10 мг/кг (2 мг/мл раствора, дозируемого по 5 мл/кг).
- Соединение 3В в солевом растворе вводили внутривенно 4 крысам из расчета 2 мг/кг (2 мг/мл раствора, дозируемого по 1 мл/кг).
- Соединение 3А в солевом растворе вводили перорально 4 крысам из расчета 10 мг/кг (2 мг/мл раствора, дозируемого по 5 мл/кг).
Результаты
Некомпартментный фармакокинетический анализ был выполнен с помощью WinNonlin Professional 3.1 и 4.1. Полученные фармакокинетические параметры представлены в таблице 2.
Было установлено, что биодоступность, выраженная как ППК(IV)/ППК(PO)×100%, для н-пропильного сложноэфирного производного (1А) дифенилаланинового производного гидрохлорида N-(карбоксиметил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолил)метил]-L-пролинамида является исключительно высокой (58%) по сравнению с биодоступностями соответствующих фенилаланинового (2А) и п-метоксифенилаланинового (3А) ингибиторов тромбина.
| Таблица 2 Фармакокинетические параметры |
|||||||
| Соединение | 1В а | 1B b | 1B b с последующим введением 1А |
2В | 2В с последующим введением 2А |
3В | 3В с последующим введением 3А |
| Доза (мг/кг) | 5 | 10 | 10 | 2 | 10 | 2 | 10 |
| Путь | IV | PO | PO | IV | PO | IV | PO |
| Носитель | Солевой раствор | мульфоген/ солевой раствор |
Солевой раствор | Солевой раствор | Солевой раствор | Солевой раствор | |
| AUC(IV) (нг/мл·ч) | 4864 | 659 | 1008 | ||||
| Т1/2 (ч) | 0,32 | 0,61 | 0,16 | ||||
| Клиренс (мл/мин/кг) | 17 | 54 | 34 | ||||
| Vss (л/кг) | 0,48 | 2,4 | 0,46 | ||||
| Cmax (нг/мл) | 35 | 2130 | 4 | 62 | |||
| Tmax (ч) | 1,2 | 1 | 0,067 | 1,6 | |||
| AUC(РО) (нг/мл·ч) | 119 | 5647 | н/и | 97 | |||
| Биодоступность (%) | 1,3 | 58b | незначительная | 1,9 | |||
| н/и = не определено. а = данные являются средним для двух опытов. b = биодоступность 1В после введения 1А изменяется от 30 до 60%, что измерено в ряде опытов на крысах Wistar Ola с различающимся типом носителя (суспензия в смеси желатин/маннит или раствор маннит/забуференный фосфатом солевой раствор, или смесь 5% мульфоген/95% солевой раствор), использованным для соединения 1А. |
|||||||
Claims (5)
1. Соединение, представляющее собой N-(2-оксо-2-пропоксиэтил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1 в виде дигидрохлорида.
3. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики заболеваний, опосредованных тромбином, содержащая соединение по п.1 и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
4. Применение соединения по п.1 для производства лекарственного средства для лечения или профилактики заболеваний, опосредованных тромбином.
5. Соединение, представляющее собой N-(карбоксиметил)-β-фенил-D-фенилаланил-N-[(1-амино-6-изохинолинил)метил]-L-пролинамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP06118608.6 | 2006-08-08 | ||
| EP06118608 | 2006-08-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009107917A RU2009107917A (ru) | 2010-09-20 |
| RU2437879C2 true RU2437879C2 (ru) | 2011-12-27 |
Family
ID=37561257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009107917/04A RU2437879C2 (ru) | 2006-08-08 | 2007-08-06 | Аминоизохинолиновый ингибитор тромбина с улучшенной биодоступностью |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8299091B2 (ru) |
| EP (1) | EP2054402B1 (ru) |
| JP (1) | JP5271904B2 (ru) |
| KR (1) | KR20090048496A (ru) |
| CN (1) | CN101511816B (ru) |
| AR (1) | AR062215A1 (ru) |
| AU (1) | AU2007283596B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0715384A2 (ru) |
| CA (1) | CA2659154A1 (ru) |
| CL (1) | CL2007002294A1 (ru) |
| CO (1) | CO6150148A2 (ru) |
| IL (1) | IL196783A (ru) |
| MX (1) | MX2009001384A (ru) |
| MY (1) | MY143949A (ru) |
| NO (1) | NO20090448L (ru) |
| NZ (1) | NZ574550A (ru) |
| PE (1) | PE20080526A1 (ru) |
| RU (1) | RU2437879C2 (ru) |
| TW (1) | TWI389899B (ru) |
| WO (1) | WO2008017650A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200900903B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2644947C2 (ru) * | 2012-08-27 | 2018-02-15 | Аррэй Байофарма Инк. | Ингибиторы серин/треонин киназы для лечения гиперпролиферативных заболеваний |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4115468A1 (de) * | 1991-05-11 | 1992-11-12 | Behringwerke Ag | Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien |
| GB9322976D0 (en) * | 1993-11-08 | 1994-01-05 | Pfizer Ltd | Therapeutic agents |
| US5523308A (en) * | 1995-06-07 | 1996-06-04 | Costanzo; Michael J. | Peptidyl heterocycles useful in the treatment of thrombin related disorders |
| CN1247542A (zh) * | 1996-12-06 | 2000-03-15 | 康泰驰公司 | 丝氨酸蛋白酶抑制剂 |
| IL123986A (en) | 1997-04-24 | 2011-10-31 | Organon Nv | Medicinal compounds |
| TW575567B (en) | 1998-10-23 | 2004-02-11 | Akzo Nobel Nv | Serine protease inhibitor |
| CN1441784A (zh) * | 2000-07-12 | 2003-09-10 | 阿克佐诺贝尔公司 | 含有氨基异喹啉基团的凝血酶抑制剂 |
-
2007
- 2007-07-18 TW TW096126164A patent/TWI389899B/zh not_active IP Right Cessation
- 2007-08-06 EP EP07788235.5A patent/EP2054402B1/en active Active
- 2007-08-06 US US12/376,529 patent/US8299091B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-08-06 WO PCT/EP2007/058111 patent/WO2008017650A1/en active Application Filing
- 2007-08-06 CA CA002659154A patent/CA2659154A1/en not_active Abandoned
- 2007-08-06 AR ARP070103455A patent/AR062215A1/es not_active Application Discontinuation
- 2007-08-06 RU RU2009107917/04A patent/RU2437879C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-08-06 CN CN2007800328071A patent/CN101511816B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-08-06 AU AU2007283596A patent/AU2007283596B2/en not_active Ceased
- 2007-08-06 BR BRPI0715384-8A patent/BRPI0715384A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-08-06 KR KR1020097004645A patent/KR20090048496A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-08-06 NZ NZ574550A patent/NZ574550A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-08-06 JP JP2009523262A patent/JP5271904B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2007-08-06 MX MX2009001384A patent/MX2009001384A/es active IP Right Grant
- 2007-08-07 MY MYPI20071301A patent/MY143949A/en unknown
- 2007-08-07 PE PE2007001050A patent/PE20080526A1/es not_active Application Discontinuation
- 2007-08-07 CL CL200702294A patent/CL2007002294A1/es unknown
-
2009
- 2009-01-29 IL IL196783A patent/IL196783A/en not_active IP Right Cessation
- 2009-01-29 NO NO20090448A patent/NO20090448L/no not_active Application Discontinuation
- 2009-02-06 ZA ZA200900903A patent/ZA200900903B/xx unknown
- 2009-03-06 CO CO09023453A patent/CO6150148A2/es unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2644947C2 (ru) * | 2012-08-27 | 2018-02-15 | Аррэй Байофарма Инк. | Ингибиторы серин/треонин киназы для лечения гиперпролиферативных заболеваний |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW200821294A (en) | 2008-05-16 |
| BRPI0715384A2 (pt) | 2013-06-18 |
| MX2009001384A (es) | 2009-04-30 |
| RU2009107917A (ru) | 2010-09-20 |
| EP2054402B1 (en) | 2013-11-27 |
| CN101511816B (zh) | 2013-01-02 |
| CN101511816A (zh) | 2009-08-19 |
| EP2054402A1 (en) | 2009-05-06 |
| US20100305153A1 (en) | 2010-12-02 |
| NO20090448L (no) | 2009-02-05 |
| CO6150148A2 (es) | 2010-04-20 |
| WO2008017650A1 (en) | 2008-02-14 |
| IL196783A0 (en) | 2009-11-18 |
| IL196783A (en) | 2013-03-24 |
| TWI389899B (zh) | 2013-03-21 |
| CL2007002294A1 (es) | 2008-04-18 |
| US8299091B2 (en) | 2012-10-30 |
| AR062215A1 (es) | 2008-10-22 |
| KR20090048496A (ko) | 2009-05-13 |
| JP5271904B2 (ja) | 2013-08-21 |
| ZA200900903B (en) | 2010-06-30 |
| CA2659154A1 (en) | 2008-02-14 |
| PE20080526A1 (es) | 2008-06-13 |
| AU2007283596A1 (en) | 2008-02-14 |
| AU2007283596B2 (en) | 2012-07-05 |
| NZ574550A (en) | 2010-09-30 |
| MY143949A (en) | 2011-07-29 |
| JP2010500321A (ja) | 2010-01-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI119812B (fi) | Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi | |
| KR20040010748A (ko) | 당뇨병 치료제로서의 3-플루오로-피롤리딘 | |
| CZ63699A3 (cs) | Sloučeniny na bázi amidů kyseliny fosfinové jako inhibitory metaloprotáz mezibuněčné hmoty, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv | |
| JPH08511017A (ja) | 新規なペプチド誘導体 | |
| SK63194A3 (en) | Peptide derivatives | |
| SK23394A3 (en) | New isosteric peptides | |
| EP2038282B1 (en) | Salts of pyrrolopyrimidinone derivatives and process for preparing the same | |
| AU2016253911B2 (en) | Carboxylic acid URAT1 inhibitor containing diarylmethane structure, preparation method and use thereof | |
| EP3466961A1 (en) | Prolinamide derivative as thrombin inhibitor, preparation method and application thereof | |
| JPH05222005A (ja) | ３（ｓ）−アミノ−４−シクロヘキシル−２（ｒ）−ヒドロキシ酪酸若しくは４−シクロヘキシル−（２ｒ，３ｓ）−ジヒドロキシ酪酸又は関連類似体を含む環状レニン阻害剤 | |
| KR940006768B1 (ko) | 스퍼구알린(Spergualin)관련 유도체의 제조방법 | |
| HU203766B (en) | Process for producing estramustine-esters and pharmaceutical compositions containing them as active components | |
| RU2437879C2 (ru) | Аминоизохинолиновый ингибитор тромбина с улучшенной биодоступностью | |
| US5178877A (en) | Encapsulated renin inhibitor composition | |
| JPH09505317A (ja) | 新規アミノ酸誘導体、それらの製造方法及びこれらの化合物を含有する医薬組成物 | |
| EP1664089B1 (de) | Basisch-substituierte benzylaminanaloga als inhibitoren des gerinnungsfaktors xa, ihre herstellung und verwendung | |
| CA2070983A1 (en) | Cyclic renin inhibitors | |
| US5888531A (en) | Freeze-dried preparation for pharmaceutical use | |
| JPS63275575A (ja) | ピペラジン誘導体 | |
| EP1073449A1 (en) | Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors | |
| JPH0848664A (ja) | 新規なグアニジノ安息香酸エステル誘導体 | |
| KR20210141203A (ko) | 에르도스테인 유도체 및 이를 함유하는 약학 조성물 | |
| JP3605158B2 (ja) | Ｈｉｖプロテアーゼ阻害剤 | |
| CN117534595A (zh) | 同位素富集的3-氨基-1-丙磺酸衍生物及其用途 | |
| CN112714760A (zh) | 依达拉奉前体药物化合物及其在治疗或改善神经退行性或运动神经元疾病中的医药用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20120326 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20130917 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20140402 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140807 |