RU2242005C2 - Способ осаждения золота, способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, способ определения присутствия анализируемого вещества в образце и набор средств, используемый в способе (варианты) - Google Patents

Способ осаждения золота, способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, способ определения присутствия анализируемого вещества в образце и набор средств, используемый в способе (варианты)

Info

Publication number
RU2242005C2
RU2242005C2 RU2001114202/15A RU2001114202A RU2242005C2 RU 2242005 C2 RU2242005 C2 RU 2242005C2 RU 2001114202/15 A RU2001114202/15 A RU 2001114202/15A RU 2001114202 A RU2001114202 A RU 2001114202A RU 2242005 C2 RU2242005 C2 RU 2242005C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
gold
substrate
nucleation
centers
sample
Prior art date
Application number
RU2001114202/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2001114202A (ru
Inventor
Эрез БРАУН (IL)
Эрез БРАУН
Йоав ЭЙЧЕН (IL)
Йоав ЭЙЧЕН
Ури СИВАН (IL)
Ури СИВАН
Original Assignee
Текнион Рисерч Энд Дивелопмент Фаундейшн Лтд.
Эрез БРАУН
Йоав ЭЙЧЕН
Ури СИВАН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Текнион Рисерч Энд Дивелопмент Фаундейшн Лтд., Эрез БРАУН, Йоав ЭЙЧЕН, Ури СИВАН filed Critical Текнион Рисерч Энд Дивелопмент Фаундейшн Лтд.
Publication of RU2001114202A publication Critical patent/RU2001114202A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2242005C2 publication Critical patent/RU2242005C2/ru

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/585—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with a particulate label, e.g. coloured latex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6834—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54373—Apparatus specially adapted for solid-phase testing involving physiochemical end-point determination, e.g. wave-guides, FETS, gratings
    • G01N33/5438—Electrodes

Abstract

Предлагается способ осаждения золота на подложке. В этом аспекте центры зародышеобразования связываются, осаждаются или формируются на одном или нескольких активных центрах на положке, подложка затем приводится в контакт с композицией для обработки, которая содержит растворимый агент, содержащий золото, из которого золото осаждается на центре зародышеобразования с получением осажденных слоев металлического золота. Способ согласно изобретению может быть использован для различных методик повышения качества изображения, а также для методик диагностики и детектирования анализируемых веществ. 5 с. и 37 з.п. ф-лы, 7 ил.

Description

Область техники
Изобретение относится к химическому осаждению металлического золота на подложки.
Уровень техники
Существуют различные способы, в которых металлические вещества осаждаются на подложках. В таких различных способах осаждаемый металл получают в форме растворимого комплекса или молекулы, например, в водном растворе. При соответствующих условиях такой комплекс или молекула восстанавливается и осаждает металл на подложку.
Иногда, с целью гарантирования осаждения металла из раствора на подложку, является предпочтительным сначала создать центры зародышеобразования на этой подложке. Такие центры зародышеобразования могут быть, например, различными комплексами металлов, кластерами или малыми металлическими частицами, осажденными на поверхность или прикрепленными к поверхности.
Примерами способов, включающих в себя осаждение металлов, являются различные способы получения изображения или увеличения контраста скрытого изображения для фотографии, оптической микроскопии или электронной микроскопии. Другим примером лабораторных способов, в которых на подложку осаждаются комплексы металлов, является визуализация продуктов разделения, например белков или нуклеиновых кислот, в различных хроматографических или злектрофоретических способах.
Металл, чаще всего используемый в таких способах, представляет собой серебро. Однако типичным недостатком осаждения серебра является то, что осаждение не является полностью специфичным, и в определенной степени спонтанное осаждение серебра может происходить также без априорного осаждения центров зародышеобразования. Таким образом, когда осаждение серебра используется в способах улучшения качества изображения или улучшения контрастности, как правило, существует ограниченное отношение сигнал/шум.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение имеет, в качестве одной из своих целей, создание способа осаждения золота на специфичные активные центры на подложке. Другой целью настоящего изобретения является создание композиции и набора для использования в таком способе.
В соответствии с настоящим изобретением золото, изначально содержащееся в растворимом золотонесущем агенте, который представляет собой золотосодержащую молекулу, кластер или комплекс, осаждается на центрах зародышеобразования. Термин "центры зародышеобразования", как он используется здесь, относится к любой соли, комплексу, кластеру или частице, имеющей каталитические свойства преобразования золота из золотосодержащей молекулы или комплекса в металлическое золото. Частицы с металлической поверхностью представляют собой, например, коллоидные металлические частицы, различные комплексы металлов, содержащие атомы металлов, кластеры и тому подобное.
В соответствии с настоящим изобретением предлагается способ осаждения золота на один или большее количество активных центров на подложке, включающий в себя:
(a) связывание, осаждение или образование центров зародышеобразования на указанном одном или большем количестве активных центров;
(b) приведение в контакт указанных одного или большего количества активных центров с обрабатывающей композицией, содержащей указанный золотонесущий агент и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что металлическое золото по существу не осаждается на подложку до тех пор, пока на подложке не присутствует центр зародышеобразования, а в присутствии центра зародышеобразования на указанном одном или большем количестве активных центров атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанный центр зародышеобразования с формированием отложений (осажденных слоев) металлического золота на указанном одном или большем количестве активных центров.
Понятно, что как только золото осаждается на подложку, оно служит в качестве центра зародышеобразования для дальнейшего осаждения золота. Путем соответствующего управления временем выдерживания, а также другими условиями, влияющими на осаждение золота (некоторые из них будут в общем виде описаны ниже), можно управлять количеством осажденного золота на активном центре осаждения. Более того, хотя изначально осаждение золота может происходить на отдельных активных центрах на подложке, путем предоставления возможности для роста отложений золота при дальнейшем осаждении отдельные активные центры могут объединяться с формированием одного большого отложения золота, соединяющего объединенные таким образом активные центры.
Термин "по существу не осаждается" используется для обозначения того, что золото либо не выделяется из раствора и атомы золота остаются в растворимой молекуле или комплексе, либо того, что осаждение металлического золота на подложку является пренебрежимо малым и, таким образом, ненаблюдаемым или лишь слабо наблюдаемым и измеряемым с получением высокого отношения сигнал/шум.
В соответствии с одним из возможных вариантов выполнения способа центры зародышеобразования формируют путем химического или физического осаждения агента, формирующего центры зародышеобразования, на одном или большем количестве активных центров. В соответствии с другим вариантом выполнения такие центры зародышеобразования могут быть сформированы химически на указанном одном или большем количестве активных центров путем окислительно-восстановительной реакции, в которой ионы металла, в частности ионы серебра, окисляются до металлического серебра. Такое химическое формирование центров зародышеобразования само по себе является известным (см., например, WO 99/04402 и PCT/IL 99/00232).
В соответствии с еще одним вариантом выполнения центры зародышеобразования формируются путем связывания формирующих центры зародышеобразования агентов на указанном одном или большем количестве активных центров. Такие агенты содержат по меньшей мере один связывающийся остаток с афинностью или, иначе говоря, сродством к связыванию (которое может быть специфичным или не специфичным) с указанным одним или большим количеством активных центров, который связывается по меньшей мере с одним остатком центра зародышеобразования. Остаток центра зародышеобразования представляет собой частицу, которая может действовать в качестве каталитического агента для осаждения металлического золота, например соль, металлическую частицу, кластер из атомов металла или содержащий металл комплекс. Связывающийся остаток может быть, например, одним функциональным элементом распознающей группы, в то время как другой функциональный элемент распознающей группы образует или включен в указанный один или большее количество активных центров. Распознающая группа, как правило распознающая пара, состоит из двух или более веществ со сродством к связыванию друг с другом. Распознающая группа может представлять собой, хотя и не ограничиваясь этим, любую из следующих пар: антиген и антитело или производное антитела с комплементарным антигенсвязывающим участком (доменом); сахар и лектин; рецептор и лиганд; нуклеотидная последовательность и комплементарная нуклеотидная последовательность; нуклеотидная последовательность и связывающий ее белок или синтетический связывающий агент; биотин и авидин или стрептавидин; целлюлоза или хитин и целлюлозосвязывающий домен.
Остаток центра зародышеобразования предпочтительно представляет собой частицу золота или кластер, содержащий атомы золота, например, Аu11, или Au55, или Au147 (кластеры золота, которые содержат соответственно 11, 55 или 147 атомов золота). Обрабатывающая композиция обычно представляет собой водный раствор. Указанный золотонесущий агент предпочтительно представляет собой комплекс золота, такой как AuI(SCN) - 2 , как правило в форме соли щелочного металла (например, Nа+ или К+) или аммония.
Реагент в обрабатывающей композиции может быть восстанавливающим агентом. Если указанным золотонесущим агентом является AuI(SCN) - 2 , реагентом предпочтительно является хинон, например гидрохинон (HQ) или нафтогидрохинон (NHQ). Однако также может быть использован любой другой восстанавливающий агент, который может восстановить золотосодержащую молекулу или комплекс с получением металлического золота, но из-за кинетических ограничений (например, из-за большой энергии активации и малого предэкспоненциального множителя) будет делать это с пренебрежимо малой скоростью в отсутствие центра зародышеобразования и вместе с тем с разумной скоростью (а именно со скоростью, которая приводит к получению заметных результатов через не слишком длинный период времени) в присутствии центра зародышеобразования.
Обрабатывающая композиция, содержащая AuI(SCN) - 2 и HQ, является стабильной в кислотной среде, что означает, что золото остается в виде растворимых частиц в растворе и не осаждается в виде твердого металла и не осаждается на твердые подложки, отличные от центров зародышеобразования. Когда значение рН такой обрабатывающей композиции является более низким, чем приблизительно 6, обрабатывающая композиция является особенно стабильной. При контакте с центром зародышеобразования металлическое золото осаждается на активные центры подложки, содержащие центры зародышеобразования.
Скоростью осаждения металлического золота можно управлять, например, путем управления значением рН обрабатывающей композиции: увеличение рН будет увеличивать скорость осаждения золота, а уменьшение рН будет уменьшать скорость осаждения. Кроме того, скоростью осаждения можно также управлять с помощью различных других средств, например: путем управления параметрами потока обрабатывающей композиции (быстрый поток предотвращает отравление побочными продуктами, такими как СN-, которое может понизить скорость осаждения золота); путем добавления поверхностно-активных веществ, которые могут либо увеличивать, либо уменьшать скорость осаждения (так, например, полиамины, поликислоты или полиспирты и другие поверхностно-активные вещества могут оказывать эффект изменения скорости осаждения золота). Кроме того, путем использования различных добавок, например, тех, которые отмечены выше, можно изменять степень шероховатости поверхности осажденного золота (такое изменение может приводить к изменению цвета и электрических свойств осажденного золота).
Способ согласно изобретению может быть использован для определения присутствия или концентрации конкретного вещества на активных центрах на подложке. Такой способ включает в себя следующие стадии:
(a) создание условий, делающих возможным формирование центров зародышеобразования на активных центрах, содержащих указанное вещество;
(b) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей указанный золотонесущий агент и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что при таком соприкосновении металлическое золото по существу не осаждается на подложку до тех пор, пока на ней не присутствует центр зародышеобразования, а в присутствии центра зародышеобразования на указанных активных центрах атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанные центры зародышеобразования с формированием металлического золота на указанных активных центрах; и
(c) детектирование отложений золота на указанной подложке, причем отложение золота на активном центре подложки указывает на присутствие указанного вещества на указанном активном центре.
Настоящий способ определения может быть применим, например, во множестве методик определения, например, в методиках, включающих в себя визуализацию образцов в микроскопии (которая может быть оптической или электронной микроскопией) или любой SPM методике, или при идентификации конкретных продуктов разделения на подложке (например, продукта разделения при электрофорезе или хроматографии, содержащегося в геле или на твердой подложке, такой как ДНК-чип). В любом из таких определений центры зародышеобразования могут быть сформированы путем использования указанных формирующих центры зародышеобразования агентов, в которых остаток со специфическим сродством к связыванию представляет собой один функциональный элемент распознающей группы, который может быть любым из тех, которые рассмотрены выше, а определяемый агент представляет собой другой функциональный элемент этой распознающей группы.
В соответствии с другим вариантом выполнения способ осаждения золота согласно изобретению используется при определении, направленном на детектирование присутствия анализируемого вещества в образце. В частности, настоящее изобретение может применяться в таком способе, в котором используется удерживаемый на подложке захватывающий агент для детектирования присутствия в образце анализируемого вещества, которое специфически связывается с этим захватывающим агентом. Такой захватывающий агент может представлять собой функциональный элемент распознающей группы, в то время как анализируемое вещество представляет собой другой функциональный элемент этой распознающей группы. Конкретным примером является случай определения присутствия целевого олигонуклеотида в образце, при этом захватывающий агент является олигонуклеотидом с последовательностью, комплементарной к нему. Формирующий центр зародышеобразования остаток может связываться с анализируемыми веществами, присутствующими в образце, например с олигонуклеотидами в образце, а затем обеспечивать возможность для взаимодействия образца с подложкой и для осуществления описанной выше реакции осаждения золота, при этом формирование отложений золота будет указывать на присутствие анализируемого вещества в образце.
Способ подготовки образца для получения изображения под микроскопом согласно настоящему изобретению включает в себя следующие стадии:
(a) создание условий, делающих возможным формирование центров зародышеобразования на селективных активных центрах образца; и
(b) приведение указанного образца в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей указанный золотонесущий агент и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что золото по существу не осаждается на образце до тех пор, пока на нем не присутствует центр зародышеобразования, а при его присутствии атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанный образец на указанных селективных активных центрах.
Способ детектирования присутствия анализируемого вещества в образце согласно настоящему изобретению включает в себя следующие стадии:
(a) обработка образца для связывания формирующих центры зародышеобразования остатков с анализируемым веществом, если оно присутствует в образце;
(b) взаимодействие образца с подложкой, удерживающей захватывающие агенты, которые специфически связываются с указанным анализируемым веществом, и удаление несвязанных частей образца;
(c) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей указанный золотонесущий агент и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что при таком соприкосновении металлическое золото по существу не осаждается на подложку до тех пор, пока на ней не присутствует центр зародышеобразования, а в присутствии центра зародышеобразования на указанных активных центрах атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанные центры зародышеобразования с формированием металлического золота на указанных активных центрах; и
(d) детектирование отложений золота на указанной подложке, при этом отложение золота указывает на присутствие анализируемого вещества в образце.
Конкретное применение настоящий способ находит в олигонуклеотидных чипах. Олигонуклеотидные чипы имеют различные захватывающие олигонуклеотиды, осажденные на различных активных центрах на чипе. Применение указанного выше способа может сделать возможным одновременное определение большого количества различных олигонуклеотидов в образце.
В приготовленном таким образом образце указанные селективные активные центры содержат отложения золота, которые делают возможной их визуализацию. Указанные селективные активные центры, как правило, могут быть активными центрами, содержащими конкретное вещество, и затем на указанных активных центрах с помощью формирующих центры зародышеобразования агентов с остатком, имеющим специфическое сродство к связыванию с указанным конкретным веществом, формируются центры зародышеобразования. Таким способом, например, могут четко быть визуализированы конкретные клетки, органеллы, богатые конкретным веществом области и тому подобное.
Способ идентификации положений конкретного продукта разделения на подложке согласно настоящему изобретению содержит следующие стадии:
(a) создание условий, делающих возможным формирование центров зародышеобразования на активных центрах указанной подложки, содержащих указанный конкретный продукт разделения;
(b) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей указанный золотонесущий агент и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что золото осаждается на подложку по существу только там, где на ней присутствует центр зародышеобразования, и при таком контакте атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанные центры зародышеобразования с формированием металлического золота; и
(c) детектирование присутствия золота на указанной подложке, при этом такое золото обозначает присутствие указанного конкретного продукта разделения на подложке на том месте, где детектируется золото.
В методике разделения, где образец разделяется на различные фракции на основе различных скоростей движения различных веществ через некоторую среду (как правило, гель или твердое вещество) при приложенных условиях, например при электрофорезе, тонкослойной хроматографии (ТСХ) и тому подобном, формирующие центры зародышеобразования агенты могут быть подмешаны в образец перед разделением. Обычно это является предпочтительным. При этом такое предварительное добавление формирующего центры зародышеобразования агента может быть более экономичным, поскольку может требоваться меньше материала. Кроме того, когда такие агенты наносятся на подложку после разделения, они должны диффундировать через среду для достижения расположенного в этой среде разделенного вещества. Такая диффузия может быть ограничивающим фактором при правильном проявлении (контрастировании) золотом разделенных фракций. Однако иногда, как легко заметить, также является возможным добавление указанного формирующего центры зародышеобразования агента и после разделения.
Настоящее изобретение также предусматривает способ определения присутствия анализируемого вещества в образце. Такой способ включает в себя следующие стадии:
(а) обеспечение наличия подложки, несущей захватывающие агенты, которые связывают указанное анализируемое вещество;
(b) приведение указанной подложки в контакт с указанным образцом, при этом указанное анализируемое вещество связывается с указанными захватывающими агентами;
(c) создание условий, делающих возможным формирование центров зародышеобразования на активных центрах указанной подложки, содержащих указанное анализируемое вещество;
(d) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей указанный золотонесущий агент и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что золото осаждается на подложку по существу только на ее активных центрах, содержащих центры зародышеобразования; и
(е) детектирование отложений металлического золота на указанной подложке, которые указывают на присутствие указанного анализируемого вещества в указанном образце.
Детектирование на стадии (е) способа определения присутствия анализируемого вещества в образце может быть осуществлено путем исследования внешнего вида осажденного на подложке золота (осажденное золото в зависимости от размера и степени шероховатости поверхности может иметь цвет, изменяющийся от желтого до оранжевого и красного).
В соответствии с одним из вариантов выполнения настоящего изобретения, детектирование на стадии (е) основывается на электрической проводимости осажденного золота. В этом варианте выполнения захватывающие агенты могут находиться на подложке между электродами или могут быть нанесены на один или большее количество электродов, так что золото, осажденное на центр зародышеобразования на стадии (d), устанавливает электрический контакт между электродами. Детектирование отложений золота на стадии (е) осуществляется, таким образом, путем определения существования электрического контакта между электродами, например, путем измерения соотношения ток-потенциал между электродами. Величина соотношения ток-потенциал может быть использована в качестве датчика для концентрации агента в образце. Альтернативно, определение числа соединений в большом массиве одинаковых пар электродов с идентичными захватывающими агентами, нанесенными между ними или на них, может также обеспечить количественную меру концентрации анализируемого вещества.
Определяемое анализируемое вещество может быть функциональным элементом любой из распознающих пар, рассмотренных выше, при этом другой функциональный элемент такой пары затем включается в виде остатка в захватывающий агент. Формирование центров зародышеобразования на стадии (с) может быть условием для агентов, имеющих связывающийся остаток со специфическим сродством к связыванию с анализируемым веществом, захватываемым на подложке захватывающим агентом, для связывания с формирующим зародыши остатком, который может быть металлической частицей, содержащим атомы металла кластером или металлсодержащим комплексом, либо любой другой частицей, имеющий каталитические свойства преобразования содержащих золото молекулярных частиц в металлическое золото. Например, если анализируемое вещество является одним функциональным элементом связывающейся пары, то связывающийся остаток может быть другим функциональным элементом (например, если анализируемое вещество является антигеном, то формирующий центр зародышеобразования агент может содержать антитело, которое может быть таким же самым или отличным от антитела, используемого в качестве захватывающего агента).
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает набор для использования в указанном выше способе. Такой набор, как правило, содержит обрабатывающую композицию. Кроме того, такой набор может также содержать реагент для формирования центров зародышеобразования на конкретных активных центрах подложки, например, имеющих специфически связывающийся остаток, являющийся функциональным элементом любой из указанных выше связывающихся пар. Кроме того, набор для использования в указанном выше способе определения может также содержать, в соответствии с некоторыми вариантами выполнения, систему реагентов для “маркировки” анализируемого вещества в образце с помощью формирующего центр зародышеобразования остатка. Далее, в соответствии с некоторыми вариантами выполнения настоящего изобретения, набор может включать в себя подложку, содержащую электроды с захватывающими агентами, расположенными между электродами и/или на них.
С целью более детального понимания сущности настоящего изобретения и его практических вариантов осуществления изобретение поясняется с помощью не ограничивающего примера с соответствующими ссылками на прилагаемые чертежи.
Краткое описание чертежей
На Фиг.1 представлены схемы реакций способа приготовления обрабатывающей композиции в соответствии с изобретением (схема (а) и схема (b)) и осаждения золота на центр зародышеобразования (схема (с)).
Фиг.2 представляет собой схематическое изображение определения анализируемого вещества в образце согласно одному из вариантов выполнения изобретения.
Фиг.3 представляет собой схематическое изображение определения вещества в соответствии с другим вариантом выполнения изобретения.
Фиг.4 представляет собой схематическое изображение определения в соответствии с еще одним вариантом выполнения изобретения.
Фиг.5 представляет собой схематическую иллюстрацию способа усиления конкретных полос на твердой или гелевой подложке, разделенных с помощью хроматографии или электрофореза.
Фиг.6 представляет собой схематическую иллюстрацию способа получения изображения (визуализации) отдельных частей микроскопического образца в соответствии с вариантом выполнения изобретения.
Фиг.7 демонстрирует применение системы при детектировании анализируемых веществ в образце, в этом конкретном примере представляющих собой олигонуклеотиды с конкретной последовательностью.
Подробное описание предпочтительных вариантов выполнения
Приготовление обрабатывающей композиции и общая схема осаждения золота
Обрабатывающая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом выполнения изобретения включает в себя содержащий золото комплекс auiscn-. С целью получения такой обрабатывающей композиции на первой стадии приготавливают раствор, содержащий KAuIIICl4 и KSCN, как правило, путем смешивания двух исходных растворов, один из них содержит золотосодержащий комплекс, а другой - KSCN. Например, такой раствор может быть получен путем смешивания одинаковых объемов первого раствора, содержащего около 0,5 М KSCN, и второго раствора, содержащего около 0,05 М KAuIIICl4. Такое смешивание приводит к образованию комплекса KAuIII(SCN)4 (смотри схему (а) на фиг.1). Такой комплекс выпадает в осадок, но при этом спонтанно образует комплекс KAuI(SCN)2. Как правило, после выпадения KAuIII(SCN)4 в осадок его промывают и повторно суспендируют в воде или буфере и дают возможность для осуществления отмеченной выше спонтанной реакции (иллюстрируется как “СПОНТАННО” на схеме (b) фиг.1).
Затем раствор KAuI(SCN)2 смешивают с восстанавливающим агентом, например, с около 0,055 М гидрохинона (HQ). Восстановление золотосодержащего комплекса с помощью гидрохинона при этом является термодинамически выгодным, но из-за большой энергии активации и малого предэкспоненциального множителя кинетика этой реакции является очень медленной. При значениях рН менее около 6 спонтанное восстановление является практически нулевым. Таким образом, раствор является стабильным и металлическое золото спонтанно не осаждается.
Однако, как показано на схеме (с) фиг.1, при соприкосновении с центрами зародышеобразования (ЦЗ), действующими как катализаторы, которые могут, например, быть коллоидными частицами золота, другими коллоидными металлами, кластерами из атомов металла, металлсодержащими комплексами, ионами металлов и тому подобным, на поверхность центра зародышеобразования осаждается металлическое золото (Au0), что связано с образованием бензохинона (BQ).
Уровень рН управляет скоростью осаждения золота: подкисление раствора, т.е. понижение рН, замедляет осаждение металла, в то время как добавление основания, т.е. повышение рН, ускоряет скорость осаждения металла.
Необходимо заметить, что при щелочных значениях рН некоторое спонтанное осаждение золота может иметь место даже без центров зародышеобразования.
Различные добавки, которые могут быть либо добавлены к обрабатывающему раствору изначально, либо добавляются во время процесса осаждения, могут влиять на скорость процесса осаждения золота и на структуру отложений золота (размер отложений, степень шероховатости поверхности, цвет и тому подобное). Например, добавление галогенидных ионов в обрабатывающую композицию приводит к отравлению поверхности растущих центров металла. Это будет ограничивать скорость, а возможно и прекращать процесс осаждения золота. Поэтому использование таких добавок делает возможным управление кристалличностью и размером зерен осажденного золота, скоростью осаждения золота, степенью шероховатости поверхности осажденного золота, электрическими свойствами и тому подобное. Очевидно, что процессом осаждения золота можно также управлять с помощью изменения множества других параметров, таких как температура, содержание кислорода, поток света, скорость перемешивания раствора и тому подобное.
Процесс осаждения золота по настоящему изобретению может использоваться для множества различных применений, некоторые примеры которых будут проиллюстрированы ниже.
Детектирование анализируемых веществ в образце
Определение в соответствии с одним из вариантов выполнения настоящего изобретения иллюстрируется на фиг.2. В этом варианте выполнения предусматривается устройство 20, имеющее непроводящую подложку 22, несущую электрически проводящие электроды 23. В зазоре между электродами на подложку 22 нанесены захватывающие агенты 24, которые имеют специфическое сродство к связыванию с анализируемым веществом 26, которое необходимо определить.
Образец S, который содержит анализируемое вещество 26, предварительно обрабатывается путем добавления центров 28 зародышеобразования и обработки таким образом, что центры зародышеобразования становятся связанными с анализируемым веществом посредством ковалентного или нековалентного взаимодействия с получением модифицированного анализируемого вещества 30. В случае анализируемого вещества, которое является олигонуклеотидом, такое связывание может осуществляться, например, путем нагрева образца в присутствии цис-платина-биотина, а затем добавления соответствующим образом дериватизированного кластера, например кластера Au55(Рb3Р)12Сl6-стрептавидина. Цис-платина-биотин связывается с олигонуклеотидами, затем Au55(Рh3Р)12Сl6-стрептавидин связывается с остатками биотина на указанных нуклеотидах, таким образом связывая остатки зародышей с анализируемым веществом. В случае не являющегося нуклеотидом анализируемого вещества связывание может быть достигнуто, например, путем связывания амино-дериватизированного кластера или коллоида с карбоксильными остатками анализируемого вещества; путем связывания карбокси-дериватизированных кластеров или коллоидов с амино-остатками анализируемого вещества; путем связывания малеимидо-дериватезированного кластера или коллоида с тиольными остатками анализируемого вещества; и тому подобное. Как станет очевидным, в этом процессе могут также стать “мечеными” и другие вещества в образце с помощью центра зародышеобразования. Однако они не будут связываться с захватывающими агентами 24, и связанные с ними центры зародышеобразования не будут, таким образом, оставаться на подложке после обработки (смотри описание ниже).
При контакте с устройством 20 модифицированное анализируемое вещество 30 связывается с захватывающими агентами с получением формирующих центры зародышеобразования комплексов 32, которые иммобилизованы на подложке 22. Промывка подложки удаляет несвязанные вещества (NB, от англ. non bound).
Устройство 20 может затем быть приведено в контакт с обрабатывающим раствором 34, который содержит золотосодержащий комплекс, такой как КАuI(SCN)2, и восстанавливающий агент, такой как гидрохинон (HQ), а затем при контакте с центрами зародышеобразования 28 на них осаждается золото и образует непрерывную золотую массу 36, простирающуюся между электродами 23. Для предотвращения действия электродов 23 в качестве центров зародышеобразования они могут либо выполняться из проводящего материала, у которого отсутствуют каталитические свойства, например из кремния, пассивированного с помощью окиси кремния, пассивированного с помощью длинных алкильных цепей или пассивированного путем покрытия инертным материалом, либо, когда электроды выполнены из металла, они могут быть предварительно обработаны таким образом, чтобы сделать их инертными в качестве катализаторов осаждения золота, например, путем выдерживания с раствором, содержащим алкантиол с длинной цепью, такой как 1-октадецил-тиол.
Путем измерения соотношений между током и напряжением с использованием измерительного устройства 40 может быть определено существование электрического контакта между электродами 23, присутствие которого указывает на присутствие анализируемого вещества в определяемом образце.
Как в целом понятно специалисту в данной области техники, связывание захватывающих агентов с подложкой может быть достигнуто рядом способов. Например, оксидные поверхности могут быть дериватизированы с помощью кремнийсодержащего реагента, такого как (СН3СН2О)3Si-R-Х, где R может быть алкилом, арилом или другой разделительной группой, а Х может быть активным остатком для последующего связывания с остатком Y в захватывающем агенте. Природа Х и Y зависит от выбранной пары, и они могут быть выбраны из пар, состоящих из кислоты и амина, гидроксида и кислоты, реакций добавления цикла, радикальных реакций, нуклеофильных замещений, нековалентных взаимодействий и тому подобное, как хорошо известно и понятно специалисту в данной области техники. Если вещество выполнено из полимерного материала, то связывание может также быть достигнуто между захватывающим агентом и боковой группой полимерного материала с помощью любой из реакций указанного выше или другого типа.
Устройство 20 может содержать два или большее количество электродов, как правило - множество электродов, расположенных в виде массива. Термин “в виде массива” может подразумевать самые различные геометрии. Между различными парами электродов могут содержаться одинаковые захватывающие агенты, и/или различные захватывающие агенты могут быть осаждены между различными электродами. Устройство последнего рода может быть использовано для мультиплексного (параллельного и одновременного) анализа с целью одновременного определения множества анализируемых веществ. Кроме того, когда между различными парами электродов содержатся одинаковые захватывающие агенты, это может дать возможность для осуществления количественного анализа концентрации анализируемого вещества. Например, концентрация может оцениваться на основе числа электрических контактов, образованных между различными парами электродов: большое количество электрических контактов означает большую концентрацию, а малое количество соответствует малой концентрации.
Массив электродов может быть также частью более сложной электронной схемы (устройства), содержащей различные компоненты, например диоды, транзисторы, проводники, конденсаторы и тому подобное.
Другой вариант выполнения анализа в соответствии с настоящим изобретением можно увидеть на фиг.3. Главное отличие в случае варианте выполнения по фиг.3 от того, который показан на фиг.2, заключается в том, что вместо обработки образца S для связывания центров 28 зародышеобразования с анализируемым веществом 26 для получения модифицированного анализируемого вещества 30, в случае варианта по фиг.3 предусматривается формирующий центры зародышеобразования агент 150. Другие используемые в этом анализе компоненты являются очень похожими на компоненты, используемые в варианте по фиг.2, и поэтому на фиг.3 для обозначения подобных компонентов используются такие же самые цифровые обозначения по сравнению с фиг.2, но сдвинутые на одну сотню (а именно, с "1" в начале).
После контакта устройства 120 с образцом анализируемое вещество 126 связывается с захватывающим агентом 124, а затем, после отмывки свободных (не связанных (NB)) молекул анализируемого вещества и других веществ в образце, устройство приводится в контакт с формирующим центры зародышеобразования агентом 150, который содержит связанный с центром зародышеобразования 154 остаток 152 со специфическим сродством к связыванию с анализируемым веществом 126, которое теперь является связанным с захватывающими агентами 124. Таким образом, на подложке в зазоре между электродами 123 формируется иммобилизованный центр зародышеобразования 132. Затем после удаления несвязанных агентов 150 (NB) и добавления обрабатывающей композиции 134 формируется золотая масса 136, которая обеспечивает электрический контакт между электродами 123, который затем может быть определен подобно тому, как показано на фиг.2.
Еще один вариант выполнения анализа в соответствии с настоящим изобретением показан на фиг.4. Элементы, подобные элементам на фиг.2 и 3, обозначены на фиг.4 с помощью таких же цифровых обозначений, какие используются на фиг.2, но сдвинутых на одну сотню (а именно, с "2" в начале). Образец S, содержащий анализируемое вещество 226, взаимодействует с биотином 227 для получения обработанного образца S' с комплексами 231 анализируемое вещество-биотин. Затем они приводятся в контакт с подложкой 222, которая содержит захватывающие агенты 224, размещенные между электродами 223, для получения модифицированных захватывающих комплексов 233 на подложке 222.
Коллоидные частицы 240 золота взаимодействуют с авидином или стрептавидином 242 для получения формирующих центры зародышеобразования агентов 243. Затем приведение в контакт агента 243 с модифицированной подложкой 222 приводит к образованию иммобилизованных центров зародышеобразования 235.
Затем данный объект может быть приведен в контакт с обрабатывающим раствором 234 подобно тому, как показано на фиг.2 и 3, что приводит к осаждению золота с формированием сплошной золотой массы 236 между электродами 223.
Как несомненно будет ясно для специалиста в данной области техники, являются возможными различные модификации представленных выше вариантов выполнения.
Визуализация продуктов разделения
Способ согласно изобретению может быть использован для визуализации продуктов разделения, полученных в ряде таких методик разделения, как гель-электрофорез, гельпроникающие методики, эксклюзионная хроматография, афинная хроматография, и тому подобное. Это схематически иллюстрируется на фиг.5.
Подложка 200, которая может представлять собой гель или твердую подложку, содержащую различные дорожки 202, каждая из которых состоит из множества полосок 204, каждая из которых представляет собой отдельную фракцию образца, разделенного на каждой дорожке. Такая подложка 200 может быть получена с помощью любой из методик, отмеченных выше.
С целью визуализации существования конкретного вещества и локализации его полоски в контакт с подложкой 200 приводится формирующий центры зародышеобразования агент 206, имеющий остаток 208, который специфически связывается с указанным веществом в центре 210 зародышеобразования, и после успешного взаимодействия агенты 206 вымываются, а подложка приводится в контакт с обрабатывающим раствором 212, в результате чего на содержащих это вещество полосках будут формироваться отложения 214 золота (остальные полоски являются невидимыми и показаны на чертеже только для иллюстративных целей). Однако является предпочтительным, когда формирующие центры зародышеобразования агенты 206 могут быть добавлены к подложке перед началом процесса разделения, поскольку диффузия добавленных впоследствии агентов может быть ограничивающим фактором для достижения связывания этих агентов с разделенным веществом.
В зависимости от конкретных условий осаждения, которые среди прочего определяют степень шероховатости поверхностей осажденной золотой массы, цвет полосок может изменяться от желтого до черного. При использовании различных методик визуализации, основанных на измерении поглощения или прохождения света через эти полоски, может быть осуществлено количественное измерение разделенного вещества.
В качестве альтернативы оптическим методикам, отложения золота могут также детектироваться с помощью различных методик электрического детектирования. Это может быть достигнуто, например, путем создания двух планарных массивов электродов, между которыми находится разделяющая матрица, которая делает возможным автоматическое электрическое детектирование.
Усиление контраста в методиках визуализации
Существует множество методик визуализации, которые требуют контрастирующих агентов для того, чтобы увидеть определенные компоненты. Такими методиками являются оптическая микроскопия, электронная микроскопия (просвечивающая электронная микроскопия, сканирующая электронная микроскопия), а также другие методики визуализации, например, атомно-силовая микроскопия (AFM). До настоящего времени такие методики визуализации использовали осаждение металлического серебра или осаждение углерода и некоторых других веществ.
В случае биологических образцов усилители контраста требуется для того, чтобы сделать возможным визуализацию конкретных тканей, клеток, органелл и т.п.
В соответствии с настоящим изобретением и согласно иллюстрируемому на фиг.6 биологический образец 300, содержащий клетку 302 с невидимой органеллой 304, обрабатывается в соответствии с настоящим изобретением путем последовательного контакта с формирующим центры зародышеобразования агентом 306, который имеет остаток 308, специфически связывающийся с содержащимся в органелле 304 веществом, и центр 310 зародышеобразования, и после обработки такого образца обрабатывающей композицией 312 органелла 304 становится видимой как черное или непрозрачное отложение 314.
Визуализация гибридизации олигонуклеотидов
Определение присутствия и концентрации олигонуклеотидов с конкретной последовательностью в последнее время осуществляется обычно с использованием проб олигонуклеотидов с комплементарной последовательностью, прикрепленных в известных местах к подложке. Конкретными и широко используемыми примерами таких систем являются так называемые ДНК-чипы. Такие чипы представляют собой поверхности, несущие множество пробных олигонуклеотидов с известными последовательностями в известных и дискретных положениях на указанной поверхности. Образец, который может содержать или не содержать целевые последовательности, комплементарные к пробным последовательностям на чипе, обрабатывается таким образом, что все фрагменты ДНК являются мечеными (обычно с помощью флуоресцентных меток). При контакте образца с поверхностью чипа при соответствующих условиях заданные олигонуклеотиды прикрепляются к поверхности в местах, несущих комплементарную последовательность. Детектирование продуктов гибридизации, как правило, производится путем отслеживания флуоресценции меченых дуплексов. Положение продукта гибридизации указывает последовательность образца, а интенсивность флуоресценции показывает их поверхностную концентрацию.
Обратимся теперь к фиг.7, представляющей применение способа осаждения золота согласно изобретению при визуализации продуктов гибридизации на ДНК-чипе с использованием различных возможных методик визуализации, таких как оптические методики (поглощение, отражение) и неоптические методики визуализации (AMF, STM и подобных им). Как несомненно будет понятно, это является только примером использования способа согласно изобретению для визуализации связывания исследуемых объектов с образцами в целом, например, связывания с-цепей ДНК с комплементарными цепями, связывания антитела с антигеном и других типов распознающих пар.
Подложка ДНК-чипа 400 содержит множество активных центров с пробами ДНК, причем на фигуре в качестве примера представлены три, т.е. 402, 404 и 406, каждый из них имеет различную последовательность нуклеотидов. Образец S, который может содержать целевые олигонуклеотиды 410, обрабатывается таким образом, что все частицы ДНК в растворе становятся мечеными с помощью метки 412, при этом получается модифицированный образец S', который может содержать модифицированное анализируемое вещество (если это анализируемое вещество присутствует в образце S). Приведение в контакт модифицированного образца S' с подложкой ДНК-чипа 400 при соответствующих условиях делает возможной селективную гибридизацию проб ДНК на чипе с целевыми олигонуклеотидами, если они присутствуют в модифицированном образце S'. После промывки чипа в систему вводятся формирующие центры зародышеобразования агенты 430 при условиях, делающих возможным их связывание с метками 412 на меченых олигонуклеотидах, если они присутствуют на различных активных центрах чипа. После промывки центры зародышеобразования присутствуют только в тех местах, где происходит гибридизация между пробами на чипе и целевыми частицами из раствора. Визуализация гибридизации достигается путем применения способа осаждения золота согласно изобретению, и таким образом из центров зародышеобразования на чипе выращиваются зерна золота, и эти зерна 440 золота детектируются с использованием различных методик, таких как оптические методики и SPM методики (AFM, STM и им подобные).
В другом варианте выполнения метка сама по себе служит в качестве центра зародышеобразования. В таком случае, стадия прикрепления центра зародышеобразования к метке пропускается.

Claims (42)

1. Способ осаждения золота на одном или большем количестве активных центров на подложке, включающий в себя
a) связывание, осаждение или формирование центров зародышеобразования на указанном одном или большем количестве активных центров, содержащих по меньшей мере один первый функциональный элемент распознающей группы, состоящей из двух или более молекул или комплексов, которые связываются друг с другом, при этом второй функциональный элемент указанной распознающей группы включает в себя или формирует указанный один или большее количество активных центров и связан с по меньшей мере одним центром зародышеобразования, выбранным из группы, состоящей из металлической частицы, содержащего атомы металла кластера, металлсодержащего комплекса и молекул; и
b) приведение указанного одного или большего количества активных центров при соответствующих условиях в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей растворимый золотонесущий агент в виде золотосодержащей молекулы или комплекса и реагент и являющейся стабильной при рН менее 6 и кинетически стабильной, так что металлическое золото, по существу, не осаждается до тех пор, пока не присутствует центр зародышеобразования, а в присутствии центра зародышеобразования на указанном одном или большем количестве активных центров атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанный центр зародышеобразования с формированием отложений металлического золота на указанном одном или большем количестве активных центров.
2. Способ по п.1, в котором один функциональный элемент распознающей группы связывается с по меньшей мере одним центром зародышеобразования, который представляет собой один или несколько компонентов группы, состоящей из содержащих ионы металла кластеров и металлсодержащих комплексов и молекул.
3. Способ по п.1, в котором один функциональный элемент распознающей группы связывается с по меньшей мере одним центром зародышеобразования, который представляет собой один или несколько компонентов группы, состоящей из частиц золота, содержащих атомы золота кластеров и золотосодержащих комплексов и молекул.
4. Способ по п.1, в котором один функциональный элемент распознающей группы связывается с по меньшей мере одним центром зародышеобразования, который представляет собой один или несколько компонентов группы, состоящей из содержащих атомы золота кластеров и золотосодержащих комплексов и молекул.
5. Способ по п.1, в котором указанная распознающая группа представляет собой пару из группы, состоящей из антигена и антитела или производного антитела с антигенсвязывающим доменом; сахара и лектина; рецептора и лиганда; нуклеотидной последовательности и комплементарной нуклеотидной последовательности; нуклеотидной последовательности и связывающего ее белка или другого специфически связывающего агента; биотина и авидина или стрептавидина; целлюлозы или хитина и целлюлозосвязывающего домена.
6. Способ по любому из пп.1-5, в котором указанная обрабатывающая композиция представляет собой водный раствор.
7. Способ по п.6, в котором указанный золотонесущий агент представляет собой AuI(SCN) - 2 .
8. Способ по п.7, в котором указанный реагент представляет собой гидрохинон или нафтогидрохинон.
9. Способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, включающий в себя
a) создание условий для формирования центров зародышеобразования на активных центрах, содержащих указанное вещество;
b) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей растворимый золотонесущий агент в виде золотосодержащей молекулы или комплекса и реагент и являющейся стабильной при рН менее 6 и кинетически стабильной, так что при таком соприкосновении металлическое золото, по существу, не осаждается на подложку до тех пор, пока на ней не присутствует центр зародышеобразования, а в присутствии центра зародышеобразования на указанных активных центрах атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанные центры зародышеобразования с формированием металлического золота на указанных активных центрах; и
c) детектирование отложений металлического золота на указанной подложке, при этом отложение золота на активном центре подложки указывает на присутствие указанного вещества на указанном активном центре.
10. Способ по п.9, в котором стадия а) включает в себя а1) обеспечение наличия формирующих центры зародышеобразования агентов, каждый из которых содержит по меньшей мере один остаток, имеющий специфическое сродство к связыванию с указанным веществом и связанный с по меньшей мере одним центром зародышеобразования, представляющим собой один или несколько компонентов из группы, состоящей из металлической частицы, содержащего атомы металла кластера и металлсодержащего комплекса; и а2) приведение указанной подложки в контакт с указанными агентами.
11. Способ по п.10, в котором указанный остаток включен в один функциональный элемент распознающей пары, состоящей из двух молекул или комплексов, которые специфически связываются друг с другом, при этом другой функциональный элемент составляет или включен в указанное вещество.
12. Способ по п.11, в котором указанная распознающая пара представляет собой пару из группы, состоящей из антигена и антитела или производного антитела с антигенсвязывающим доменом; сахара и лектина; рецептора и лиганда; нуклеотидной последовательности и комплементарной нуклеотидной последовательности; нуклеотидной последовательности и связывающего ее белка или другого специфически связывающего агента; биотина и авидина или стрептавидина; целлюлозы или хитина и целлюлозосвязывающего домена; при этом указанный остаток представляет собой один из функциональных элементов распознающей пары, а указанное вещество является другим функциональным элементом или включает его.
13. Способ по любому из пп.9-12, предназначенный для определения присутствия в образце одного или нескольких целевых олигонуклеотидов с конкретной целевой последовательностью и включающий в себя
a) обеспечение наличия подложки, несущей один или большее количество пробных олигонуклеотидов, каждый из которых имеет пробную последовательность, комплементарную к одной из указанных целевых последовательностей;
b) приведение указанной подложки в контакт с образцом и создание условий для формирования центров зародышеобразования, где целевой олигонуклеотид гибридизуется с пробными олигонуклеотидами;
c) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей растворимый золотонесущий агент в виде золотосодержащей молекулы или комплекса и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что при таком соприкосновении металлическое золото по существу не осаждается на подложку до тех пор, пока на ней не присутствует центр зародышеобразования, а в присутствии центра зародышеобразования на указанных активных центрах атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанные центры зародышеобразования с формированием отложений металлического золота на указанных активных центрах; и
d) детектирование отложений металлического золота на указанной подложке, при этом отложение золота на активном центре подложки указывает на присутствие указанного вещества на указанном активном центре.
14. Способ по п.13, в котором стадия b) включает в себя b1) обработку указанного образца для связывания метки с олигонуклеотидами в образце; b2) приведение указанного образца в контакт с указанной подложкой и b3) приведение указанной подложки в контакт с содержащим центры зародышеобразования агентом, способным к специфическому связыванию с указанной меткой.
15. Способ по п.13, в котором стадия b) включает в себя b1) обработку указанного образца таким образом, чтобы связать центры зародышеобразования с присутствующими в нем олигонуклеотидами, и b2) приведение указанного образца в контакт с указанной подложкой.
16. Способ по любому из пп.9-15, в котором указанный центр зародышеобразования представляет собой частицу золота, содержащий атомы золота кластер или золотосодержащий комплекс или молекулы.
17. Способ по любому из пп.9-16, в котором указанная обрабатывающая композиция представляет собой водный раствор.
18. Способ по п.17, в котором указанный золотонесущий агент представляет собой AuI(SCN) - 2 , а указанный реагент представляет собой хинон.
19. Способ по любому из пп.9-18, в котором указанная подложка представляет собой образец для просмотра в методе получения изображения или визуализации.
20. Способ по п.19, в котором методика детектирования основывается на свете.
21. Способ по п.19, в котором методика детектирования основывается на поглощении света, и/или прохождении света, и/или отражении света, и/или рассеивании света.
22. Способ по п.19, в котором указанное детектирование производят с помощью методик, выбранных из просвечивающей электронной микроскопии, сканирующей электронной микроскопии, атомно-силовой микроскопии.
23. Способ по п.19, предназначенный для приготовления образца к просмотру под микроскопом и включающий в себя следующие стадии:
a) создание условий для формирования центров зародышеобразования на селективных активных центрах образца и
b) приведение указанного образца в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей растворимый золотонесущий агент в виде золотосодержащей молекулы или комплекса и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что золото практически не осаждается на образце до тех пор, пока на нем не присутствует центр зародышеобразования, а в его присутствии атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанный образец на селективных активных центрах.
24. Способ по любому из пп.9-18, в котором указанная подложка содержит разделенные фракции образца.
25. Способ по п.23, предназначенный для идентификации положений конкретного продукта разделения на подложке и включающий в себя стадии
a) создания условий для формирования центров зародышеобразования на активных центрах указанной подложки, содержащих указанный конкретный продукт разделения;
b) приведения указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей растворимый золотонесущий агент в виде золотосодержащей молекулы или комплекса и реагент и являющейся кинетически стабильной, так что золото, по существу, осаждается на подложку только там, где на ней присутствует центр зародышеобразования, и при таком контакте атомы золота высвобождаются из указанного золотонесущего агента и осаждаются на указанный центр зародышеобразования; и
c) детектирования присутствия золота на указанной подложке, причем такое золото обозначает присутствие конкретного продукта разделения на подложке на том активном центре, где детектируется золото.
26. Способ определения присутствия анализируемого вещества в образце, включающий в себя
a) обеспечение наличия подложки, несущей захватывающие агенты, которые связывают указанное анализируемое вещество;
b) приведение указанной подложки в контакт с указанным образцом, при этом анализируемое вещество связывается с указанными захватывающими агентами;
c) создание условий для формирования центров зародышеобразования на активных центрах подложки, содержащих указанное анализируемое вещество;
d) приведение указанной подложки в контакт с обрабатывающей композицией, содержащей растворимую золотосодержащую молекулу или комплекс и реагент и являющуюся стабильной при рН менее 6 и кинетически стабильной, так что золото осаждается на подложке, по существу, только на ее активных центрах, содержащих центры зародышеобразования; и
е) детектирование отложений металлического золота на указанной подложке, которые указывают на присутствие указанного анализируемого вещества в указанном образце.
27. Способ по п.26, в котором стадия с) включает в себя с1) обеспечение наличия формирующих центры зародышеобразования агентов, каждый из которых содержит по меньшей мере один остаток, имеющий специфическое сродство к связыванию с указанным анализируемым веществом и связанный с по меньшей мере одним центром зародышеобразования, представляющим собой один или несколько компонентов из группы, состоящей из металлической частицы, кластера из атомов металла и металлсодержащего комплекса, и с2) приведение указанной подложки в контакт с указанными агентами.
28. Способ по п.27, в котором указанное анализируемое вещество представляет собой один из функциональных элементов связывающейся пары, состоящей из антигена и антитела или производного антитела с антигенсвязывающим доменом; сахара и лектина; рецептора и лиганда; нуклеотидной последовательности и комплементарной нуклеотидной последовательности; нуклеотидной последовательности и связывающего ее белка или другого специфически связывающего агента; биотина и авидина или стрептавидина; целлюлозы или хитина и целлюлозосвязывающего домена, и при этом указанный по меньшей мере один остаток является другим функциональным элементом указанной связывающейся пары.
29. Способ по п.26, в котором стадия b) включает в себя b1) приведение указанного образца в контакт с центрами зародышеобразования, представляющими собой один или несколько компонентов из группы, состоящей из металлических частиц, кластера из атомов металла и металлсодержащих комплексов или молекул, и создание условий для связывания указанных центров зародышеобразования с анализируемым веществом, если оно присутствует в образце, с получением таким образом модифицированного образца, содержащего модифицированные анализируемые вещества, и b2) приведение указанной подложки в контакт с модифицированными анализируемыми веществами, связанными с указанными центрами зародышеобразования.
30. Способ по п.29, в котором указанное анализируемое вещество представляет собой один из функциональных элементов связывающейся пары, состоящей из антигена и антитела или производного антитела с антигенсвязывающим доменом; сахара и лектина; рецептора и лиганда; нуклеотидной последовательности и комплементарной нуклеотидной последовательности; нуклеотидной последовательности и связывающего ее белка или другого специфически связывающего агента; биотина и авидина или стрептавидина; целлюлозы или хитина и целлюлозосвязывающего домена, и при этом указанный захватывающий агент является другим функциональным элементом указанной связывающейся пары.
31. Способ по любому из пп.26-30, в котором указанные захватывающие агенты наносят на подложку между электродами, так что золото, осажденное на указанные центры зародышеобразования на стадии d), устанавливает электрический контакт между электродами; и осуществляют детектирование отложений золота на стадии е) путем измерения соотношения ток - потенциал между электродами.
32. Способ по любому из пп.26-31, в котором указанная(ый) по меньшей мере одна(ин) металлическая частица, кластер из атомов металла или металлсодержащий комплекс представляет собой частицу золота или кластер, содержащий атомы золота.
33. Способ по любому из пп.26-32, в котором указанная обрабатывающая композиция представляет собой водный раствор.
34. Способ по п.33, в котором указанный золотонесущий агент представляет собой AuI(SCN) - 2 .
35. Способ по п.33, в котором указанный реагент представляет собой гидрохинон.
36. Набор для использования в способе по любому из пп.1-35.
37. Набор по п.36, включающий в себя обрабатывающую композицию, содержащую растворимый золотонесущий агент в виде золотосодержащей молекулы или комплекса и реагент и являющуюся кинетически стабильной, так что при контакте с подложкой золото осаждается на подложке, по существу, только на активных центрах подложки, содержащих центры зародышеобразования.
38. Набор по п.36 или 37, дополнительно включающий в себя формирующие центры зародышеобразования агенты для формирования центров зародышеобразования на одном или большем количестве активных центров на подложке, причем каждый из указанных агентов содержит по меньшей мере один функциональный элемент распознающей группы, имеющий специфическое сродство к связыванию с веществом, присутствующим на указанном одном или большем количестве активных центров, и связанный с по меньшей мере одним остатком центра зародышеобразования, представляющим собой один или несколько компонентов из группы, состоящей из металлической частицы, кластера из атомов металла и металлсодержащего комплекса или молекулы.
39. Набор для использования в способе по любому из пп.26-35, предназначенный для определения анализируемого вещества в образце и включающий в себя (i) подложку, несущую захватывающие агенты, которые связывают указанное анализируемое вещество; (ii) агенты для формирования центров зародышеобразования на тех частях подложки, на которых иммобилизуется указанное анализируемое вещество; (iii) обрабатывающую композицию, содержащую растворимую золотосодержащую молекулу или комплекс и реагент и являющуюся кинетически стабильной, так что золото осаждается на подложке, по существу, только на ее активных центрах, содержащих центры зародышеобразования.
40. Набор по п.39, в котором агент для формирования центров зародышеобразования содержит центр зародышеобразования и вещества, необходимые для связывания указанного центра зародышеобразования с указанным анализируемым веществом.
41. Набор по п.39, дополнительно включающий в себя агенты для формирования центров зародышеобразования, каждый из которых содержит по меньшей мере один остаток, имеющий специфическое сродство к связыванию с указанным анализируемым веществом и связанный с по меньшей мере одним остатком центра зародышеобразования, представляющим собой один или несколько компонентов из группы, состоящей из металлической частицы, кластера из атомов металла и металлсодержащего комплекса.
42. Набор по любому из пп.39-41, в котором указанная подложка содержит два или большее количество электродов и указанные захватывающие агенты нанесены в зазорах между электродами.
RU2001114202/15A 1998-10-27 1999-10-27 Способ осаждения золота, способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, способ определения присутствия анализируемого вещества в образце и набор средств, используемый в способе (варианты) RU2242005C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IL126776 1998-10-27
IL12677698A IL126776A (en) 1998-10-27 1998-10-27 A method of investing gold

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001114202A RU2001114202A (ru) 2003-05-10
RU2242005C2 true RU2242005C2 (ru) 2004-12-10

Family

ID=11072075

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001114202/15A RU2242005C2 (ru) 1998-10-27 1999-10-27 Способ осаждения золота, способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, способ определения присутствия анализируемого вещества в образце и набор средств, используемый в способе (варианты)

Country Status (12)

Country Link
US (2) US7056748B1 (ru)
EP (1) EP1125128B1 (ru)
JP (1) JP4453856B2 (ru)
CN (1) CN1145028C (ru)
AT (1) ATE320002T1 (ru)
AU (1) AU759205B2 (ru)
CA (1) CA2348415C (ru)
DE (1) DE69930285T2 (ru)
ES (1) ES2263289T3 (ru)
IL (1) IL126776A (ru)
RU (1) RU2242005C2 (ru)
WO (1) WO2000025136A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2578977C1 (ru) * 2015-05-12 2016-03-27 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" Способ подготовки биологического образца к исследованию при помощи сканирующей электронной микроскопии

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6506564B1 (en) 1996-07-29 2003-01-14 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
US7098320B1 (en) 1996-07-29 2006-08-29 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
US6984491B2 (en) 1996-07-29 2006-01-10 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
ES2287956T3 (es) 1996-07-29 2007-12-16 Nanosphere Inc. Nanoparticulas que tienen oligonucleotidos unidos a las mismas y usos de las mismas.
US6582921B2 (en) 1996-07-29 2003-06-24 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses thereof
US6750016B2 (en) 1996-07-29 2004-06-15 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
IL121312A (en) 1997-07-14 2001-09-13 Technion Res & Dev Foundation Microelectronic components, their manufacture and electronic networks containing them
US6974669B2 (en) 2000-03-28 2005-12-13 Nanosphere, Inc. Bio-barcodes based on oligonucleotide-modified nanoparticles
IL124322A (en) * 1998-05-04 2002-05-23 Technion Res & Dev Foundation Detection of an entity in a sample
IL126776A (en) * 1998-10-27 2001-04-30 Technion Res & Dev Foundation A method of investing gold
AU773978B2 (en) 1999-04-07 2004-06-10 Dennis Michael Connolly High resolution DNA detection methods and devices
US7364920B2 (en) 1999-10-27 2008-04-29 Technion Research And Development Foundation Ltd. Method for gold deposition
WO2001051665A2 (en) 2000-01-13 2001-07-19 Nanosphere Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
US6726847B2 (en) 2000-12-06 2004-04-27 Northwestern University Silver stain removal by chemical etching and sonication
WO2003081202A2 (en) 2001-11-09 2003-10-02 Nanosphere, Inc. Bioconjugate-nanoparticle probes
EP1439392A3 (en) * 2003-01-15 2005-07-27 Agilent Technologies, Inc. Biosensor systems and methods for determining the presence of biomolecules
DE10322912A1 (de) * 2003-05-21 2004-12-16 Bayer Technology Services Gmbh Verfahren zum Nachweis von Nukleinsäuren
DE10328136A1 (de) * 2003-06-23 2005-01-27 Infineon Technologies Ag Sensor-Element, Sensor-Array und Verfahren zum Erfassen von in einem Analyten möglicherweise enthaltenen Partikeln
DE10330717A1 (de) * 2003-07-03 2005-02-10 Friedrich-Schiller-Universität Jena Vorrichtung und Verfahren zum Nachweis von Analyt
GB0812679D0 (en) 2008-07-10 2008-08-20 Sec Dep For Innovation Universities Sample carrier for effecting chemical assays
EP2220494B1 (en) * 2007-11-26 2011-11-09 The Secretary Of State For Innovation, Universities And Skills Of Her Majesty's Britannic Government Electrochemical detection of a metal labelled analyte
ITTO20080632A1 (it) * 2008-08-12 2010-02-13 Consiglio Naz Delle Ricerche Infm Istituto Procedimento per la configurazione a scala micrometrica e nanometrica di strati metallici su un substrato
GB201217390D0 (en) 2012-09-28 2012-11-14 Agplus Diagnostics Ltd Test device and sample carrier
CN115951070A (zh) * 2023-01-19 2023-04-11 北京青莲百奥生物科技有限公司 一种检测样品中的蛋白的方法

Family Cites Families (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3032436A (en) 1960-11-18 1962-05-01 Metal Proc Co Inc Method and composition for plating by chemical reduction
GB1343642A (en) * 1971-04-28 1974-01-16 May & Baker Ltd Zinc sulphided pigments
US3833894A (en) 1973-06-20 1974-09-03 Ibm Organic memory device
US4314821A (en) 1979-04-09 1982-02-09 Minnesota Mining And Manufacturing Company Sandwich immunoassay using piezoelectric oscillator
US4323641A (en) * 1980-08-15 1982-04-06 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Photographic image enhancement by a gold-toning neutron-activation process
US5241060A (en) * 1982-06-23 1993-08-31 Enzo Diagnostics, Inc. Base moiety-labeled detectable nucleatide
GB8331514D0 (en) * 1983-11-25 1984-01-04 Janssen Pharmaceutica Nv Visualization method
US5202151A (en) 1985-10-14 1993-04-13 Hitachi, Ltd. Electroless gold plating solution, method of plating with gold by using the same, and electronic device plated with gold by using the same
US4822566A (en) 1985-11-19 1989-04-18 The Johns Hopkins University Optimized capacitive sensor for chemical analysis and measurement
US4794089A (en) 1986-03-25 1988-12-27 Midwest Research Microscopy, Inc. Method for electronic detection of a binding reaction
US5137827A (en) * 1986-03-25 1992-08-11 Midwest Research Technologies, Inc. Diagnostic element for electrical detection of a binding reaction
US5491098A (en) * 1987-03-09 1996-02-13 Janssen Pharmaceutica N.V. Method for depositing metal particles on a marker
US5283174A (en) * 1987-09-21 1994-02-01 Gen-Probe, Incorporated Homogenous protection assay
GB8800702D0 (en) * 1988-01-13 1988-02-10 Nycomed As Test method & reagent kit therefor
US5063417A (en) 1988-07-18 1991-11-05 California Institute Of Technology Molecular shift register based on electron transfer
US4995402A (en) 1988-10-12 1991-02-26 Thorne, Smith, Astill Technologies, Inc. Medical droplet whole blood and like monitoring
CA2002660A1 (en) 1988-11-10 1990-05-10 Susan J. Mroczkowski Method for electrical detection of a binding reaction
US5089545A (en) 1989-02-12 1992-02-18 Biotech International, Inc. Switching and memory elements from polyamino acids and the method of their assembly
US5143854A (en) 1989-06-07 1992-09-01 Affymax Technologies N.V. Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof
DE3924454A1 (de) 1989-07-24 1991-02-07 Cornelis P Prof Dr Hollenberg Die anwendung von dna und dna-technologie fuer die konstruktion von netzwerken zur verwendung in der chip-konstruktion und chip-produktion (dna chips)
CA2026409C (en) * 1989-09-29 2004-11-09 Ernest G. Schutt Method of producing a reagent containing a narrow distribution of colloidal particles of a selected size and the use thereof
CA2034266A1 (en) 1990-02-27 1991-08-28 Paul A. D'orazio Thick film reagent spreading and reagent immobilization layer
HU218095B (hu) 1990-05-01 2000-05-28 Amgen Inc. Eljárás átvitt szennyeződések csökkentésére, amplifikációs eljárásokban
US5714327A (en) * 1990-07-19 1998-02-03 Kreatech Diagnostics Platinum-containing compounds, methods for their preparation and applications thereof
US5210015A (en) * 1990-08-06 1993-05-11 Hoffman-La Roche Inc. Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase
JP3064001B2 (ja) 1990-10-09 2000-07-12 株式会社アドバンス 分子固定装置
US5294369A (en) 1990-12-05 1994-03-15 Akzo N.V. Ligand gold bonding
DE69109653T2 (de) * 1991-01-15 1996-01-11 Agfa Gevaert Nv Verfahren zur photographischen Herstellung von Silberbildern.
JP2778304B2 (ja) 1991-09-17 1998-07-23 三菱電機株式会社 有機電子素子材料
JPH05105444A (ja) * 1991-09-25 1993-04-27 Mitsubishi Materials Corp 球状金微粒子の製造方法
US6051380A (en) 1993-11-01 2000-04-18 Nanogen, Inc. Methods and procedures for molecular biological analysis and diagnostics
US5787032A (en) 1991-11-07 1998-07-28 Nanogen Deoxyribonucleic acid(DNA) optical storage using non-radiative energy transfer between a donor group, an acceptor group and a quencher group
IL103674A0 (en) 1991-11-19 1993-04-04 Houston Advanced Res Center Method and apparatus for molecule detection
US5846708A (en) 1991-11-19 1998-12-08 Massachusetts Institiute Of Technology Optical and electrical methods and apparatus for molecule detection
GB9210176D0 (en) * 1992-05-12 1992-06-24 Cemu Bioteknik Ab Chemical method
DE69333226T2 (de) 1992-06-01 2004-07-22 Yale University, New Haven Elektronischer schaltkreis im nanobereich und verfahren zu dessen herstellung
US5331183A (en) 1992-08-17 1994-07-19 The Regents Of The University Of California Conjugated polymer - acceptor heterojunctions; diodes, photodiodes, and photovoltaic cells
US5312527A (en) 1992-10-06 1994-05-17 Concordia University Voltammetric sequence-selective sensor for target polynucleotide sequences
WO1994017091A2 (en) 1993-01-21 1994-08-04 Hybridon Inc. Foldback triplex-forming oligonucleotides
US5384265A (en) * 1993-03-26 1995-01-24 Geo-Centers, Inc. Biomolecules bound to catalytic inorganic particles, immunoassays using the same
US5858659A (en) 1995-11-29 1999-01-12 Affymetrix, Inc. Polymorphism detection
US5837546A (en) 1993-08-24 1998-11-17 Metrika, Inc. Electronic assay device and method
US5824473A (en) 1993-12-10 1998-10-20 California Institute Of Technology Nucleic acid mediated electron transfer
US6071699A (en) 1996-06-07 2000-06-06 California Institute Of Technology Nucleic acid mediated electron transfer
US5563424A (en) 1994-03-24 1996-10-08 Uniax Corporation Polymer grid triodes
US5871918A (en) * 1996-06-20 1999-02-16 The University Of North Carolina At Chapel Hill Electrochemical detection of nucleic acid hybridization
CA2213854C (en) * 1995-03-10 2010-08-10 Meso Scale Technologies, Llc Multi-array, multi-specific electrochemiluminescence testing
US5679519A (en) * 1995-05-09 1997-10-21 Oprandy; John J. Multi-label complex for enhanced sensitivity in electrochemiluminescence assay
US5595878A (en) * 1995-06-02 1997-01-21 Boron Biologicals, Inc. Detection of biopolymers and biooligomers with boron hydride labels
US5614832A (en) * 1995-06-02 1997-03-25 International Business Machines Corporation High voltage protected ohmmeter
JPH0973780A (ja) 1995-09-01 1997-03-18 Toshiba Corp 半導体集積回路
US5888370A (en) * 1996-02-23 1999-03-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Method and apparatus for fractionation using generalized dielectrophoresis and field flow fractionation
CA2255952A1 (en) 1996-05-22 1997-11-27 Australian Membrane And Biotechnology Research Institute Nucleic acid sensor
DE19622628A1 (de) 1996-06-05 1997-12-11 Boehringer Mannheim Gmbh Stabilisierung von Metallkonjugaten
US6506564B1 (en) 1996-07-29 2003-01-14 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
US6582921B2 (en) 1996-07-29 2003-06-24 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses thereof
US6984491B2 (en) 1996-07-29 2006-01-10 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
US6750016B2 (en) 1996-07-29 2004-06-15 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
JPH1068730A (ja) 1996-08-27 1998-03-10 Wako Pure Chem Ind Ltd イムノクロマト法用試験用具
US5787332A (en) 1996-09-26 1998-07-28 Fansteel Inc. Process for recovering tantalum and/or niobium compounds from composites containing a variety of metal compounds
US5874046A (en) 1996-10-30 1999-02-23 Raytheon Company Biological warfare agent sensor system employing ruthenium-terminated oligonucleotides complementary to target live agent DNA sequences
US6306584B1 (en) * 1997-01-21 2001-10-23 President And Fellows Of Harvard College Electronic-property probing of biological molecules at surfaces
WO1998037417A1 (en) 1997-02-20 1998-08-27 The Regents Of The University Of California Plasmon resonant particles, methods and apparatus
US5946550A (en) 1997-03-14 1999-08-31 University Of Connecticut Self-assembled semiconductor and method of making same
US6391558B1 (en) 1997-03-18 2002-05-21 Andcare, Inc. Electrochemical detection of nucleic acid sequences
US6210880B1 (en) 1997-09-19 2001-04-03 Third Wave Technologies, Inc. Polymorphism analysis by nucleic acid structure probing with structure-bridging oligonucleotides
AU7697998A (en) 1997-05-27 1998-12-30 State of Oregon Acting By and Through The State Board of Higher Education On Behalf of The Unive, The Scaffold-organized metal, alloy, semiconductor and/or magnetic clusters and electronic devices made using such clusters
IL121312A (en) 1997-07-14 2001-09-13 Technion Res & Dev Foundation Microelectronic components, their manufacture and electronic networks containing them
US20020025552A1 (en) 1998-01-06 2002-02-28 Institut Pasteur Screening interactor molecules with whole genome oligonucleotide or polynucleotide arrays
AU2559599A (en) 1998-01-20 1999-08-02 Bruce Parkinson Detection of genetic information
US6060023A (en) 1998-03-31 2000-05-09 Motorola, Inc. Molecular sensing apparatus
IL124322A (en) 1998-05-04 2002-05-23 Technion Res & Dev Foundation Detection of an entity in a sample
JP4460158B2 (ja) 1998-05-20 2010-05-12 インテグレイティド ナノ−テクノロジーズ エルエルシー 化学的にアセンブリされたナノ−スケールデバイス
US6093370A (en) 1998-06-11 2000-07-25 Hitachi, Ltd. Polynucleotide separation method and apparatus therefor
US6171870B1 (en) * 1998-08-06 2001-01-09 Spectral Diagnostics, Inc. Analytical test device and method for use in medical diagnoses
IL126776A (en) * 1998-10-27 2001-04-30 Technion Res & Dev Foundation A method of investing gold
US6333146B1 (en) * 1999-03-10 2001-12-25 Fuji Photo Film Co., Ltd. Methine compound and silver halide photographic material containing the same
AU773978B2 (en) 1999-04-07 2004-06-10 Dennis Michael Connolly High resolution DNA detection methods and devices
US7364920B2 (en) * 1999-10-27 2008-04-29 Technion Research And Development Foundation Ltd. Method for gold deposition
US6602669B2 (en) * 2000-07-11 2003-08-05 Northwestern University Method of detection by enhancement of silver staining
US6670113B2 (en) * 2001-03-30 2003-12-30 Nanoprobes Enzymatic deposition and alteration of metals
US7266855B2 (en) * 2002-06-04 2007-09-11 Qingping Zhuan Electric toothbrush
US7488607B2 (en) * 2003-09-30 2009-02-10 Agilent Technologies, Inc. Electronically readable microarray with electronic addressing function
US20060014083A1 (en) * 2004-03-01 2006-01-19 University Of Washington Methods and systems for fabricating electronic and/or microfluidic structures on elastomeric substrates

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2578977C1 (ru) * 2015-05-12 2016-03-27 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" Способ подготовки биологического образца к исследованию при помощи сканирующей электронной микроскопии

Also Published As

Publication number Publication date
US20040033626A1 (en) 2004-02-19
EP1125128B1 (en) 2006-03-08
EP1125128A1 (en) 2001-08-22
AU6485999A (en) 2000-05-15
CN1331800A (zh) 2002-01-16
WO2000025136A1 (en) 2000-05-04
CA2348415A1 (en) 2000-05-04
JP4453856B2 (ja) 2010-04-21
DE69930285T2 (de) 2006-12-07
IL126776A (en) 2001-04-30
ES2263289T3 (es) 2006-12-01
US7851149B2 (en) 2010-12-14
CN1145028C (zh) 2004-04-07
US7056748B1 (en) 2006-06-06
ATE320002T1 (de) 2006-03-15
JP2002528098A (ja) 2002-09-03
CA2348415C (en) 2010-09-07
AU759205B2 (en) 2003-04-10
DE69930285D1 (de) 2006-05-04
IL126776A0 (en) 1999-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2242005C2 (ru) Способ осаждения золота, способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, способ определения присутствия анализируемого вещества в образце и набор средств, используемый в способе (варианты)
EP1075656B1 (en) Detection of a target in a sample
US7985539B2 (en) Nanoparticle probes with raman spectroscopic fingerprints for analyte detection
EP2510342A2 (en) Detecting analytes
IE69371B1 (en) Method and apparatus for magnetic microparticulate based luminescence assay including plurality of magnets
US20100203516A1 (en) Detecting analytes using both an optical and an electrical measurement method
RU2001114202A (ru) Способ осаждения золота, способ определения присутствия конкретного вещества на активных центрах на подложке, способ определения присутствия анализируемого вещества в образце и набор средств, используемых в способе (варианты)
KR101075760B1 (ko) 생물학적 샘플에서 디엔에이를 검출하기 위한 장치 및 방법
US7364920B2 (en) Method for gold deposition
US20050255515A1 (en) Biomolecular sensors and detection methods utilizing photoinduced charge separation
JP5214941B2 (ja) 単一プローブ分子素子及び単一プローブ分子素子の製造方法
JP5473382B2 (ja) 免疫測定方法
CN114184662A (zh) 一种外泌体分析用mof电化学传感器及其制备与应用
MXPA01004280A (en) Method for gold deposition
JP4017420B2 (ja) 生体成分検出方法
Wen et al. Electrogenerated chemiluminescence immunoassay for human IgG with electrochemical polymerization-based immobilization method

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20171028