RU2235481C2 - Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) - Google Patents
Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2235481C2 RU2235481C2 RU2002131180/13A RU2002131180A RU2235481C2 RU 2235481 C2 RU2235481 C2 RU 2235481C2 RU 2002131180/13 A RU2002131180/13 A RU 2002131180/13A RU 2002131180 A RU2002131180 A RU 2002131180A RU 2235481 C2 RU2235481 C2 RU 2235481C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fusarium
- biomass
- biologically active
- macroconidia
- vsb
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области пищевой промышленности и биотехнологии, а именно к способу получения биологически активной добавки (БАД) к пище из грибов, используемой для восстановления и укрепления иммунной системы человека. Предложен способ получения биологически активной добавки к пище, включающий выращивание грибов рода Fusarium на питательной среде, отделение биомассы от культуральной жидкости. При этом штаммы гриба рода Fusarium выбраны из ряда: Fusarium sambucinum ВКМ F-26109Д, F-165Д-ВСБ-916(PS-64), F 169Д-ВСБ-917, F-3051Д, F-3052Д, F-8427Д, F-199Д-52587, F-676Д-139С, а перед выращиванием готовят посевной материал. Сначала с 10-суточного косяка культуры Fusarium на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры. Хламидоспоры используют как инокулят для приготовления макроконидий, выращиваемых на 3,5°Б сусла при 27°С в течение 3 суток. Полученные макроконидии культивируют в тех же условиях в течение 20 часов с получением густого мицелия из мелких хлопьевидных колоний в качестве посевного материала. Отделенную от культуральной жидкости биомассу подвергают автолизу при температуре 35-45°С в присутствии этанола и получают биологически активную добавку к пище, обогащенную новыми биологически активными соединениями. Как вариант, готовую биомассу подвергают действию литических ферментов, содержащих хитиназу. Изобретение позволяет благодаря предлагаемому способу подготовки посевного материала увеличить и стандартизовать выход биомассы до 12-13 г/л, увеличить выход БАС и обогатить композиции БАД новыми биологически активными соединениями, в частности энниатином. 2 н.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к области пищевой промышленности и биотехнологии, а именно к способу получения биологически активной добавки (БАД) к пище из грибов, используемой для восстановления и укрепления иммунной системы человека.
Применяемые в настоящее время биологически активные средства, в частности БАДы, основаны главным образом на биологически активных веществах растений и животных.
Известна, например, БАД “косметическое масло” с экстрактами водоросли фукус и лекарственных трав [1], серия косметических добавок ИНАГ-МАРЕ, содержащая оливковое и соевое масло, сывороточный гликопротеин и хитозан, полученный из краба [2].
Из грибов биологически активные добавки применяются в более ограниченной сфере, например, известна БАД к пище, направленная на укрепление иммунной системы человека, обладающая общеукрепляющими, антиоксидантными и адаптогенными свойствами [3].
Наиболее близкой по технической сущности и достигаемому эффекту является способ получения БАД к пище, а также ее вариантов, на основе биологически активной субстанции, выделяемой, например, из грибов Fusarium sambucinum BKM F-3051Д [4] (прототип). Предложен способ выращивания этого гриба глубинным способом в жидкой питательной среде, содержащей источники углерода - 3-4%, азота - 0,2-0,3%, фосфора - 0,2-0,3% и микроэлементы - 0,07-0,08% в стерильных условиях при температуре 26-30°C с перемешиванием и аэрацией в течение 36-72 часов. Биомассу гриба отделяют от жидкой среды и извлекают биологически активные субстанции органическим растворителем, а также используют жидкие среды, получаемые после отделения биомассы гриба (культуральную жидкость). Полученные этим способом БАД содержат такие биологически активные соединения (БАС), как липиды, в том числе фосфолипиды, убихинон Q10, ферменты с протеазной, коллагеназной, липазной и рибонуклеазной активностями, а также β-глюкан [4].
Недостатком данного способа является низкий выход БАС, нестандартность ферментации, ограниченность штаммов-продуцентов и необходимость использования других штаммов грибов Fusarium sambucinum для создания БАД, содержащих новые биологически активные соединения.
Задачей предложенного изобретения является создание новых способов получения биологически активной добавки к пище.
Эта задача решается тем, что предлагается способ получения биологически активной добавки к пище, включающий выращивание грибов рода Fusarium на среде, содержащей источник углерода - 3-4%, азота - 0,2-0,3%, фосфора - 0,2-0,3% и микроэлементы - 0,07-0,08% в стерильных условиях при температуре 26-30°C с перемешиванием и аэрацией в течение 36-72 часов, отделение биомассы от культуральной жидкости. При этом штаммы гриба рода Fusarium выбраны из ряда: Fusarium sambucinum ВКМ F-26109Д, F-165Д-ВСБ-916(PS-64), F 169Д-ВСБ-917, F-3051Д, F-3052Д, F-8427Д, F-199Д-52587, F-676Д-139С, а перед выращиванием готовят посевной материал следующим образом. Сначала с 10-суточного косяка культуры Fusarium на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры, затем их используют как инокулят для приготовления макроконидий. Макроконидии выращивают на 3,5°Б сусла при 27°С в течение 3 суток. Полученные макроконидии культивируют в тех же условиях в течение 20 часов с получением густого мицелия из мелких хлопьевидных колоний. Последние используют в качестве посевного материала, а отделенную от культуральной жидкости биомассу подвергают автолизу при температуре 35-45 С в присутствии этанола.
Как вариант, предлагается также способ получения биологически активной добавки к пище, включающий выращивание грибов рода Fusarium на среде, содержащей источник углерода - 3-4%, азота - 0,2-0,3%, фосфора - 0,2-0,3% и микроэлементы - 0,07-0,08% в стерильных условиях при температуре 26-30°С с перемешиванием и аэрацией в течение 36-72 часов, отделение биомассы от культуральной жидкости. При этом штаммы гриба рода Fusarium выбраны из ряда: Fusarium sambucinum ВКМ F-26109Д, F-165Д-ВСБ-916(Р8-64), F 169Д-ВСБ-917, F-3051Д, F-3052Д, F-8427Д, F-199Д-52587, F-676Д-139С, перед выращиванием готовят посевной материал следующим образом. Сначала с 10-суточного косяка культуры Fusarium на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры, затем их используют как инокулят для приготовления макроконидий. Макроконидии выращивают на 3,5°Б сусла при 27°С в течение 3 суток. Полученные макроконидии культивируют в тех же условиях в течение 20 часов с получением густого мицелия из мелких хлопьевидных колоний. Последние используют в качестве посевного материала, а отделенную от культуральной жидкости биомассу подвергают действию литических ферментов, содержащих хитиназу.
Используемые в качестве продуцентов БАС штаммы гриба рода Fusarium - Fusarium sambucinum: ВКМ F-26109Д, F-165Д-ВСБ-916(РS-64), F 169Д-ВСБ-917, F-3051Д, F-3052Д, F-8427Д, F-199Д-52587, F-676Д-139С являются известными и депонированы Всесоюзной коллекцией промышленных микроорганизмов института “ВНИИгенетика” и Всесоюзной коллекцией микроорганизмов ИБФН АН СССР.
Технический результат настоящего изобретения состоит в стандартности ферментации, в повышении выхода биомассы и образуемых биологически активных соединений.
Приготовленный вышеуказанным способом посевной материал в дальнейшем обеспечивает максимальный выход биомассы (до 13,0 г/л) у указанных выше штаммов гриба рода Fusarium. Полученные вышеуказанными способами биологически активные добавки к пище содержат ферменты, полисахариды, энниатин.
Проведенные клинические испытания позволили установить, что кроме указанных в прототипе [4] применений, например очистки стенок сосудов от бляшек посредством стимуляции образования простагландинов и простациклинов, полученные в настоящем изобретении, БАД к пище могут быть использованы для коррекции нарушений кишечника больных, страдающих дисбактериозом, а также для профилактики язвенной болезни 12-перстной кишки и побочных явлений, появляющихся в ходе лечения по стандартным методам.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами, которые, однако, не охватывают, а тем более не ограничивают весь объем притязаний данного изобретения. Пример 1 (вариант 1).
Сначала готовят посевной материал следующим образом. С 10-суточного косяка культуры Fusarium sambucinum ВКМ Р-26109Д на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры. Полученную суспензию хламидоспор используют как инокулят для приготовления макроконидий, при этом хламидоспорами засевали колбу вместимостью 250 мл с 30 мл 3,5°Б сусла и проводили культивирование на качалке с 220 об/мин при 27°С в течение 3 суток. Приготовленные Макроконидии в количестве 3-5% вносили в колбу вместимостью 250 мл с 30 мл 3,5°Б сусла и культивировали на качалке с 220 об/мин при 27°С в течение 20 часов. Полученный посевной материал, представляющий собой густой мицелий из мелких хлопьевидных колоний, использовали в качестве жидкого инокулята (10% по объему) для засева производственной среды в ферментере. Выращивание посевного материала в ферментере проводили на среде F следующего состава (г/л): сахароза (сахар) - 30; NaNO3 - 3; К2НРO4 - 1; MgSO4 - 0,5; FeSO4 - 0,01; KCL - 0,5; Н2О водопроводная. После культивирования в течение 45 часов был получен оптимальный выход биомассы - 12,9 г/л. Биомасса была представлена густым беловатым хлопьевидным мицелием. После отделения культуральной жидкости от биомассы, последнюю подвергают автолизу при температуре 45°С в присутствии этанола 10 мл/кг при влажности 80%. В результате получают биологически активную добавку, содержащую новые биологически активные соединения:
общие липиды, экстрагируемые по методу Фолча - 10-30%, в том числе 12-24% полярных липидов и 76-88% нейтральных липидов, при этом жирно-кислотный состав общих липидов следующий (% от суммы липидов): Пальмитиновая (C16:0) - 19,8, Пальмитоолеиновая (C16:1) - 1,3, Стеариновая (C18:0) - 7,2, Олеиновая (C18:1) - 36,0, Линолевая (C18:2) - 25,5, Линоленовая (C18:3) - 6,4, Эруковая (С22:1) - 3,8. Основными компонентами нейтральных липидов являются триацил-глицерины (40-50%), стерины (10-20%) и эфиры стеринов (10-15%), минорными - моноацилглицерины, диацилглицерины и свободные жирные кислоты. Полярные липиды биомассы представлены гликолипидами и фосфолипидами, последние состоят из фосфатидилхолина (около 50-60% от суммы фосфолипидов), фосфатидилэтаноламина (около 30-40%) и фосфатидилсерином (около 10%);
коллагеназа - 1500-2500 ед./мл, протеаза - 2-3,5 ед./мл, пектиназы - 1-2 ед./мл.
Кроме того, в мицелии гриба содержится до 100-800 мг/л энниатина В (антибиотик, относимый к группе мембранных ионофоров), который по мере развития гриба переходит в среду выращивания.
В следующих примерах 2, 3 представлены способы получения посевного материала при меньшем, по сравнению с заявленным, времени культивирования хламидоспор.
Пример 2
То же, что и в примере 1, но при приготовлении посевного материала хламидоспоры выращивают на среде F с добавлением 10% сусла в течение 48 часов (2 суток) с получением макроконидии. Для выращивания вносят в ферментер 3-4% посевного материала. Выход сухой биомассы - до 7,0-7,5 г/л. При этом содержание БАС, в частности коллагеназы, снижается в 1,5-2 раза.
Пример 3
То же, что и в примере 1, но при приготовлении посевного материала хламидоспоры (взятые с 10-суточного косяка на картофельно-морковном агаре) выращивают в течение 24 часов (1 сутки) с получением макроконидий. Выход биомассы составляет 5,7 г/л. Содержание БАС, в частности коллагеназы, снижается в 1,5-2,1 раза.
Таким образом, из примеров 2 и 3 видно, что при приготовлении посевного материала, в частности при выращивании хламидоспор с получением макроконидий, в течение менее 3 суток (по сравнению с примером 1) наблюдается снижение выхода биомассы и обеднение готовых БАД биологически активными соединениями.
Пример 4 (вариант 2).
Посевной материал готовят следующим образом. С 10-суточного косяка культуры Fusarium sambucinum BKM F-676Д-139С на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры. Полученной суспензией хламидоспор засевали колбу вместимостью 250 мл с 30 мл 3,5°Б сусла и проводили культивирование на качалке с 220 об/мин при 27°С в течение 3 суток. Приготовленные макроконидии в количестве 3-5% вносили в колбу вместимостью 250 мл с 30 мл 3,5°Б сусла и культивировали на качалке с 220 об/мин при 27°С в течение 20 часов. Полученный посевной материал, представляющий собой густой мицелий из мелких хлопьевидных колоний, использовали в качестве жидкого инокулята (10% по объему) для засева производственной среды в ферментере. Выращивание посевного материала в ферментере проводили на среде F следующего состава, г/л: сахароза (сахар) - 30; NaNО3 - 3; К2НРO4 - 1; MgSO4 - 0,5; FeSO4 - 0,01; KCL - 0,5; H2O водопроводная. После культивирования в течение 45 часов был получен оптимальный выход биомассы - 13,0 г/л. Выращенную биомассу отделяют от культуральной жидкости и подвергают действию литических ферментов, содержащих хитиназу. Полученная БАД содержит биологически активные соединения, такие как коллагеназу - 2500-3500 ед/мл, протеазу 3-4 ед/мл, пектиназу 2-3 ед/мл, полисахариды 5-10 мг/мл.
Таким образом, заявленное изобретение позволяет благодаря предлагаемому способу подготовки посевного материала увеличить и стандартизовать выход биомассы до 12-13 г/л, увеличить выход БАС и обогатить композиции БАД новыми биологически активными соединениями, в частности энниатином.
Литература
1. Биологически активные добавки //Материалы VIII-й Научно-практической конференции “Эффективность применения БАД в различных областях медицины”. Москва, 21-23 мая 2001.
2. Концепция ИНАГ-ФАРМА “ИНАГ: косметика + биодобавки”. Теоретические основы и практические подходы. Москва. 2001.
3. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Меморская А.С., Вакулова Л.А., Шашкина М.Я. Способ получения биологически активного средства //Патент РФ №2166868, 2001.
4. Брагинцева Л.М., Григораш А.И., Макланов А.И., Устынюк Т.К., Коваленко В.А. Биологически активная добавка к пище (варианты) и способы ее получения (варианты) //Патент РФ №2177699, 2002. (прототип 1).
Claims (2)
1. Способ получения биологически активной добавки к пище, включающий выращивание грибов рода Fusarium на среде, содержащей источник углерода 3-4%, азота 0,2-0,3%, фосфора 0,2-0,3% и микроэлементы 0,07-0,08% в стерильных условиях при температуре 26-30°С с перемешиванием и аэрацией в течение 36-72 ч, отделение биомассы от культуральной жидкости, отличающийся тем, что штаммы гриба рода Fusarium выбраны из ряда: Fusarium sambucinum BKM F-26109Д, F-165Д-ВСБ-916(PS-64), F-169Д-ВСБ-917, F-3051Д, F-3052Д, F-8427Д, F-199Д-52587, F-676Д-139С, перед выращиванием готовят посевной материал, при этом сначала с 10-суточного косяка культуры Fusarium на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры, затем их используют как инокулят для приготовления макроконидий, выращиваемых на 3,5°Б сусла при 27°С в течение 3 суток, полученные макроконидии культивируют в тех же условиях в течение 20 ч с получением густого мицелия из мелких хлопьевидных колоний в качестве посевного материала, а отделенную от культуральной жидкости биомассу подвергают автолизу при температуре 35-45°С в присутствии этанола.
2. Способ получения биологически активной добавки к пище, включающий выращивание грибов рода Fusarium на среде, содержащей источник углерода 3-4%, азота 0,2-0,3%, фосфора 0,2-0,3% и микроэлементы 0,07-0,08% в стерильных условиях при температуре 26-30°С с перемешиванием и аэрацией в течение 36-72 ч, отделение биомассы от культуральной жидкости, отличающийся тем, что штаммы гриба рода Fusarium выбраны из ряда: Fusarium sambucinum BKM F-26109Д, F-165Д-ВСБ-916(PS-64), F 169Д-ВСБ-917, F-3051Д, F-3052Д, F-8427Д, F-199Д-52587, F-676Д-139С, перед выращиванием готовят посевной материал, при этом сначала с 10-суточного косяка культуры Fusarium на картофельно-морковном агаре получают хламидоспоры, затем их используют как инокулят для приготовления макроконидий, выращиваемых на 3,5°Б сусла при 27°С в течение 3 суток, полученные макроконидии культивируют в тех же условиях в течение 20 ч с получением густого мицелия из мелких хлопьевидных колоний в качестве посевного материала, а отделенную от культуральной жидкости биомассу подвергают действию литических ферментов, содержащих хитиназу.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002131180/13A RU2235481C2 (ru) | 2002-11-20 | 2002-11-20 | Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002131180/13A RU2235481C2 (ru) | 2002-11-20 | 2002-11-20 | Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2235481C2 true RU2235481C2 (ru) | 2004-09-10 |
| RU2002131180A RU2002131180A (ru) | 2004-12-10 |
Family
ID=33433187
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002131180/13A RU2235481C2 (ru) | 2002-11-20 | 2002-11-20 | Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2235481C2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007027121A1 (fr) * | 2005-08-31 | 2007-03-08 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostyu Gella-Pharma | Produit bioactif a base de lait |
| US9611488B2 (en) | 2011-07-21 | 2017-04-04 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| US9668499B2 (en) | 2010-01-19 | 2017-06-06 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
-
2002
- 2002-11-20 RU RU2002131180/13A patent/RU2235481C2/ru active
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007027121A1 (fr) * | 2005-08-31 | 2007-03-08 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostyu Gella-Pharma | Produit bioactif a base de lait |
| US9668499B2 (en) | 2010-01-19 | 2017-06-06 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| US9924733B2 (en) | 2010-01-19 | 2018-03-27 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| US9611488B2 (en) | 2011-07-21 | 2017-04-04 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| US9649287B2 (en) | 2011-07-21 | 2017-05-16 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
| US10925850B2 (en) | 2011-07-21 | 2021-02-23 | Dsm Ip Assets B.V. | Eicosapentaenoic acid-producing microorganisms, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hsieh et al. | Effect of plant oil and surfactant on the production of mycelial biomass and polysaccharides in submerged culture of Grifola frondosa | |
| FI120648B (fi) | Menetelmä arakidonihapon valmistamiseksi | |
| Karwowski et al. | 5-N-ACETYLARDEEMIN, A NOVEL HETEROCYCLIC COMPOUND WHICH REVERSES MULTIPLE DRUG RESISTANCE IN TUMOR CELLS I. TAXONOMY AND FERMENTATION OF THE PRODUCING ORGANISM AND BIOLOGICAL ACTIVITY | |
| Park et al. | Stimulatory effect of plant oils and fatty acids on the exo-biopolymer production in Cordyceps militaris | |
| Shih et al. | Influence of nutritional components and oxygen supply on the mycelial growth and bioactive metabolites production in submerged culture of Antrodia cinnamomea | |
| JPH08214893A (ja) | アラキドン酸の生成方法 | |
| WO1994028891A1 (en) | Method of treating coronary vascular disease using docosahexaenoic acid | |
| US6410282B1 (en) | Method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid fungi | |
| RU1836425C (ru) | Способ получени комплексного антибиотика циклоспорина и/или его компонентов и штамм грибка ТоLYросLаDIUм VаRIUм | |
| CN111281897B (zh) | 用于心血管的复合菌剂 | |
| RU2235481C2 (ru) | Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) | |
| CN102224873B (zh) | 一种原料含有咖啡豆的食品的制备方法 | |
| TWI241344B (en) | Processes for producing an antrodia camphorata culture having pharmacological activity, processes for obtaining a pharmacologically active composition from a culture of A camphorata, products produced thereby and pharmaceutical compositions of cancer... | |
| CN110713956B (zh) | 一株赖氨酸芽孢杆菌s12及其应用 | |
| JP2022548092A (ja) | ヘマトコッカス・プルビアリス（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）の従属栄養培養によってアスタキサンチンを産生する方法 | |
| CN115161254B (zh) | 一种提高乳酸菌胞外囊泡产量的方法 | |
| AU2004225662A1 (en) | A method of enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid protists | |
| KR101407231B1 (ko) | 락토바실러스 헬베티커스 ｒｍｋ85를 이용한 ｇａｂａ 증진 발효 식물 추출물 제조방법 | |
| KR20170076075A (ko) | 고함량의 코디세핀과 유기 게르마늄 성분이 함유된 동충하초 재배방법 | |
| EP1276891B1 (en) | A method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrids | |
| RU2192873C1 (ru) | Препарат, влияющий на тканевой обмен, и применение штамма гриба pleurotus 1137 для его получения | |
| RU2656143C1 (ru) | Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов | |
| CN104830736A (zh) | 一株戊糖片球菌及其应用 | |
| RU2322491C1 (ru) | Штамм lecanicillium sp. 347а - продуцент комплекса биологически активных соединений | |
| RU2620078C1 (ru) | Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов |