RU2656143C1 - Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов - Google Patents
Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2656143C1 RU2656143C1 RU2016151254A RU2016151254A RU2656143C1 RU 2656143 C1 RU2656143 C1 RU 2656143C1 RU 2016151254 A RU2016151254 A RU 2016151254A RU 2016151254 A RU2016151254 A RU 2016151254A RU 2656143 C1 RU2656143 C1 RU 2656143C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- sulphureus
- laetiporus sulphureus
- lipids
- mycelium
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм базидиомицета Laetiporus sulphureus МТ-11.01, обладающий способностью продуцировать липиды в условиях погруженного культивирования, депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика под номером ВКПМ F-1286. Штамм базидиомицета Laetiporus sulphureus ВКПМ F-1286 может быть использован в качестве сырья для получения биодизельного топлива, в медицине, фармацевтике и в парфюмерно-косметической, пищевой и химической промышленностях. Изобретение позволяет повысить выход липидов. 2 табл., 5 пр.
Description
Область техники
Изобретение относится к биотехнологии и касается штамма базидиомицета Laetiporus sulphureus, продуцирующего липиды. Липиды, полученные микробиологическим путем, могут быть использованы в качестве сырья для получения биодизельного топлива, в медицине, фармацевтике и в парфюмерно-косметической, пищевой и химической промышленностях.
Уровень техники
Известны штаммы базидиомицетов Ganoderma tsugae var.jannieae Tay-1 [Wasser S.P. et al. New Ganoderma tsugae var. jannieae strain Tay-1 and biologically active biomass and extracts therefrom. WO 2009017462 A2. - 2007] и Pleurotus ostreatus CBS 101937 [Wasser S.P. et al. For higher Basidiomycetes mushrooms grown as biomass in submerged culture. US 6372964 B1 - 2002], содержащие в составе мицелия до 10,2 и 7,2% липидов от сухого веса грибов, соответственно. Недостатком указанных штаммов является низкое содержание липидной фракции.
Наиболее близким к заявленному штамму является штамм Laetiporus sulphureus LS 1-06, способный накапливать в составе мицелия до 8,4% липидов от сухого веса грибов. Недостатком указанного штамма является низкая скорость роста и низкое содержание липидной фракции [Уфимцева О.В., Миронов П.В. Получение биомассы мицелия грибов вешенки обыкновенной Р 05/88 Pleurotus ostreatus и серно-желтого трутовика LS 1-06 Laetiporus sulphureus в глубинных условиях //Хвойные бореальной зоны. - 2009. - Т. 26. - №. 2. - С. 294-296].
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является получение нового штамма базидиомицета Laetiporus sulphureus, продуцирующего липиды в условиях погруженного культивирования.
Поставленная задача решается штаммом базидиального гриба Laetiporus sulphureus ВКПМ F-1286 (Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика), продуцирующего липиды в условиях погруженного культивирования.
Техническим результатом заявляемого изобретения является выделение штамма базидиомицета Laetiporus sulphureus, продуцирующего липиды в условиях погруженного культивирования с максимальным выходом липидной фракции до 24% от веса воздушно высушенной биомассы, а также в расширении арсенала технических средств заявляемого назначения.
Осуществление изобретения
Новый штамм Laetiporus sulphureus выделен из природного плодового тела, найденного на стволе Querqus robur. Кусочки гриба, вырезанные из середины плодового тела, в асептических условиях были перенесены на селективную плотную питательную среду (сусловый агар), содержащую 30 мг/л цефотаксима. Выросший мицелий был идентифицирован как чистая базидиальная культура по наличию пряжек на мицелии. Таксономическая принадлежность заявляемого штамма к виду Laetiporus sulphureus подтверждена молекулярно-генетическим методом. Штамм базидиального гриба Laetiporus sulphureus депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика и имеет регистрационный номер ВКПМ F-1286.
Характеристики штамма Laetiporus sulphureus.
Выделенный штамм относится к отделу Basidiomycota, подотделу Agaricomycotina, классу Agaricomycetes, порядку Polyporales, роду Laetiporus, виду sulphureus. Вид L. sulphureus не патогенен для человека и не образует токсичные метаболиты ни на одной из стадий морфогенеза.
Условия культивирования: сусловый агар, температура +28°С.
Условия хранения: в пробирках с сусловым агаром при +4°С в течение 12-18 месяцев без пересева.
Макроморфологические признаки: колония округлая, концентрически зональная, пушится вокруг инокулюма, профиль слабоприподнятый, воздушный мицелий бледно-оранжевого цвета, цвет субстратного мицелия бесцветный, по мере старения мицелий становится ярко-оранжевым за счет наличия пигментов-каратиноидов.
Микроморфологические признаки: гифы воздушного мицелия до 5-6 мкм в диаметре, длинные, отсутствие пряжек на гифах, характерно образование бластоспор.
При культивировании штамма в жидкой среде окрашивает среду в ярко-оранжевый цвет (за счет наличия пигментов-каратиноидов).
Вегетативный мицелий базидиомицета выращивают в погруженной культуре в асептических аэробных условиях. Культивирование осуществляют в качалочных колбах объемом 750 мл на орбитальной качалке при температуре 28°С. Среда для погруженного культивирования содержит: глюкозу - 10-30 г/л, соевую муку - 5-15 г/л, дигидрофосфат калия - 2-3 г/л, сульфат магния - 0,2-0,3 г/л и водопроводную воду. Значение рН среды доводят до 5,5-6,2. Питательную среду автоклавируют при температуре 121°С в течение 30 минут. Длительность процесса получения жидкого посевного мицелия составляет 10 суток, ферментации - 6 суток.
Биомассу отделяют от культуральной жидкости фильтрованием через лавсановую ткань. Липиды выделяют из влажной биомассы (влагосодержание 80-85%) по методу Фолча [Folch J. et al. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues //J biol chem. - 1957. - Vol. 226. - №. 1. - pp. 497-509].
Сведения, подтверждающие возможность осуществления предлагаемого изобретения.
Пример 1. Получение погруженного мицелия L. sulphureus.
Погруженное культивирование штамма L. sulphureus проводят на орбитальном шейкере со скоростью вращения 250 об/мин при температуре 28°С в качалочных колбах объемом 750 мл, содержащих 100 мл питательной среды следующего состава: глюкоза - 20 г/л, соевая мука - 10 г/л, дигидрофосфат калия - 2,5 г/л и сульфат магния - 0,25 г/л. Уровень рН среды доводят до 5,5-6,2. Процесс погруженного культивирования проводят в два этапа. На первом этапе получают жидкий посевной материал, на втором этапе осуществляют ферментацию.
Для приготовления посевного материала используют культуру, выращенную в пробирках на сусловом агаре. Кусочки агара размером не более 3×3 мм в количестве 30-40 штук асептически вносят в качалочные колбы, содержащие 100 мл питательной среды, и культивируют в течение 10 суток. Затем 10 л посевного материала в асептических условиях вносят в качалочные колбы, содержащие 100 мл питательной среды, и культивируют в течение 6 суток. Выход воздушно высушенной биомассы составляет 4,1 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляет 24% от веса воздушно высушенной биомассы.
Пример 2. Получение погруженного мицелия L. sulphureus.
Получение погруженного мицелия L. sulphureus проводят, как описано в примере 1, но глюкозу, соевую муку, дигидрофосфат калия и сульфат магния в питательную среду вносят в количестве 10 г/л, 5 г/л, 3 г/л и 0,3 г/л, соответственно. Выход воздушно высушенной биомассы составляет 3,7 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляет 18,1% от веса воздушно высушенной биомассы.
Пример 3. Получение погруженного мицелия L. sulphureus.
Получение погруженного мицелия F. pinicola проводят, как описано в примере 1, но глюкозу, соевую муку, дигидрофосфат калия и сульфат магния в питательную среду вносят в количестве 30 г/л, 15 г/л, 2 г/л и 0,2 г/л, соответственно. Выход воздушно высушенной биомассы составляет 3,9 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляет 17,2% от веса воздушно высушенной биомассы.
Пример 4. Получение липидов L. sulphureus
Получают погруженную культуру L. sulphureus, как описано в примере 1. Биомассу отделяют от культуральной жидкости фильтрованием через лавсановую ткань и однократно промывают дистиллированной водой. Навеску влажной биомассы (влагосодержание 80-85%) растирают с песком в жидком азоте до пастообразного состояния и экстрагируют смесью хлороформа и метанола (1:1 по объему). Экстракт фильтруют через бумажный фильтр, твердый остаток подвергают повторной экстракции. К объединенному фильтрату добавляют дистиллированную воду. Водно-метанольную и хлороформную фазу разделяют в делительной воронке. Хлороформный слой, содержащий липиды, сушат над слоем безводного сульфата натрия, растворитель упаривают на вакуумном ротационном испарителе.
Пример 5. Динамика накопления липидов штаммом L. sulphureus
Получают погруженную культуру L. sulphureus, как описано в примере 1. Отбор проб для определения содержания липидов в мицелии проводят каждые 24 часа. Липиды из биомассы выделяют, как описано в примере 5. Максимальный выход липидной фракции составляет 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы на 6 сутки культивирования (таблица 1).
Жирно-кислотный состав липидов, выделенных из L. sulphureus, определяют методом газовой хроматографии. В составе липидной фракции преобладают линолевая, олеиновая и пальмитиновая кислоты (таблица 2).
Таким образом, выделен штамм базидиомицета Laetiporus sulphureus, продуцирующий липиды в условиях погруженного культивирования с максимальным выходом липидной фракции до 24% от веса воздушно высушенной биомассы.
Claims (1)
- Штамм базидиального гриба Laetiporus sulphureus ВКПМ F-1286 (Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика), продуцирующего липиды в условиях погруженного культивирования.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016151254A RU2656143C1 (ru) | 2016-12-26 | 2016-12-26 | Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016151254A RU2656143C1 (ru) | 2016-12-26 | 2016-12-26 | Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2656143C1 true RU2656143C1 (ru) | 2018-05-31 |
Family
ID=62560226
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016151254A RU2656143C1 (ru) | 2016-12-26 | 2016-12-26 | Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2656143C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
UA74241U (ru) * | 2012-03-20 | 2012-10-25 | Донецкий Национальный Университет | Способ глубинного культивирования высших базидиомицетов |
RU2473679C2 (ru) * | 2011-04-22 | 2013-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩЕГО ПРЕПАРАТА БИОМАССЫ Laetiporus sulphureus MZ-22 |
RU2584602C2 (ru) * | 2014-03-21 | 2016-05-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" Министерства образования и науки Российской Федерации | ШТАММ ГРИБА Laetiporus sulphureus - ПРОДУЦЕНТ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ |
-
2016
- 2016-12-26 RU RU2016151254A patent/RU2656143C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2473679C2 (ru) * | 2011-04-22 | 2013-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩЕГО ПРЕПАРАТА БИОМАССЫ Laetiporus sulphureus MZ-22 |
UA74241U (ru) * | 2012-03-20 | 2012-10-25 | Донецкий Национальный Университет | Способ глубинного культивирования высших базидиомицетов |
RU2584602C2 (ru) * | 2014-03-21 | 2016-05-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" Министерства образования и науки Российской Федерации | ШТАММ ГРИБА Laetiporus sulphureus - ПРОДУЦЕНТ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
ИВАНОВА И.Е. Изучение штаммов Laetiporus sulphureus (Bull.) Murrill, ксилотрофов древостоев хвойных, и оценка перспектив их использования в биотехнологии. Автореф. дисс. на соискание ученой степени кандидата биологических наук, М., 2013, с. 6-23. * |
УФИМЦЕВА О.В., МИРОНОВ П.В. Получение биомассы мицелия грибов вешенки обыкновенной Р 05/88 Pleurotus ostreatus и серно-желтого трутовика LS- 1-06 Laetiporus sulphureus в глубинных условиях. Хвойные бореальной зоны, 2009. XXVI, N 2. c. 294-296. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN113307848B (zh) | 具有抗真菌和清除自由基活性的环色-丝-缬-异亮-亮肽及制备方法 | |
CN113264987B (zh) | 具有抗真菌和清除自由基活性的环色-苏-缬-异亮-亮肽及制备方法 | |
Duvnjak et al. | Advances in batch culture fermented Coriolus versicolor medicinal mushroom for the production of antibacterial compounds | |
US9249429B2 (en) | Microorganism having high squalene-producing ability, and method for producing squalene by means of same | |
JP2022516888A (ja) | エルゴチオネインを産生する菌株及びそのスクリーニングのための方法 | |
JP2018520636A (ja) | ω−7脂肪酸合成物、及び黄緑色藻を培養して該合成物を生産する方法と応用 | |
WO2022100568A1 (zh) | 松蕈及其用于生产麦角硫因的方法 | |
Ma et al. | Influence of rutin, FeSO4, Tween 80, aspartate and complex vitamins on synthesis of fungal exopolysaccharide | |
Dong et al. | Identification of a symbiotic fungus from blue–green alga and its extracellular polysaccharide | |
CN110004065B (zh) | 一种红褐灵芝新菌种及其人工栽培方法和应用 | |
RU2409658C1 (ru) | Посевной мицелий базидиомицета и способ его приготовления | |
Asatiani et al. | Antioxidant activity of submerged cultured mycelium extracts of higher Basidiomycetes mushrooms | |
TWI241344B (en) | Processes for producing an antrodia camphorata culture having pharmacological activity, processes for obtaining a pharmacologically active composition from a culture of A camphorata, products produced thereby and pharmaceutical compositions of cancer... | |
EP3339443A1 (en) | Use of streptomyces psammoticus and method for producing vanillin | |
CN107893033B (zh) | 烟曲霉sqh4及在生物转化法制备花旗松素中的应用 | |
KR20160122469A (ko) | 조류 또는 단백질 첨가를 통한 코디세핀 생산 방법 | |
RU2716106C1 (ru) | Способ получения полиненасыщенных жирных кислот с высоким содержанием арахидоновой кислоты в липидах воздушного мицелия гриба Mortierella alpina (варианты) | |
RU2656143C1 (ru) | Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов | |
RU2620078C1 (ru) | Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов | |
RU2567672C1 (ru) | ШТАММ ГРИБА Eremothecium ashbyi - ПРОДУЦЕНТ ЭФИРНОГО МАСЛА, АНАЛОГИЧНОГО БОЛГАРСКОМУ РОЗОВОМУ | |
KR101999273B1 (ko) | 고순도 코디세핀의 제조 방법, 고함량의 코디세핀을 함유하는 동충하초 및 그로부터 얻어지는 고순도 코디세핀 | |
Bolla et al. | Effect of oils on the production of exopolysaccharides and mycelial biomass in submerged culture of Schizophyllum commune | |
JP5137204B2 (ja) | マンノシルエリスリトールリピッドの製造方法 | |
RU2235481C2 (ru) | Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) | |
RU2700267C2 (ru) | Способ получения бионанокомпозитов селена |