RU2620078C1 - Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов - Google Patents
Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2620078C1 RU2620078C1 RU2015156842A RU2015156842A RU2620078C1 RU 2620078 C1 RU2620078 C1 RU 2620078C1 RU 2015156842 A RU2015156842 A RU 2015156842A RU 2015156842 A RU2015156842 A RU 2015156842A RU 2620078 C1 RU2620078 C1 RU 2620078C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- pinicola
- lipids
- mycelium
- fomitopsis pinicola
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Botany (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola МТ-5.21 обладает способностью продуцировать липиды в условиях погруженного культивирования, с высоким содержанием липидной фракции. Штамм Fomitopsis pinicola депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ГосНИИгенетика под номером ВКПМ F-1285 и может быть использован в медицине, фармацевтике и в парфюмерно-косметической, пищевой и химической отраслях промышленности. Изобретение позволяет повысить выход липидной фракции. 2 табл., 5 пр.
Description
Область техники
Изобретение относится к биотехнологии и касается штамма базидиомицета Fomitopsis pinicola, продуцирующего липиды. Липиды, полученные микробиологическим путем, могут быть использованы в качестве сырья для получения биодизельного топлива, в медицине, фармацевтике и в парфюмерно-косметической, пищевой и химической отраслях промышленности.
Уровень техники
Из уровня техники известны штаммы базидиомицетов Ganoderma tsugae var. jannieae Tay-1 [WO 2009017462 A2, 2007] и Pleurotus ostreatus CBS 101937 [US 6372964 B1, 2002], содержащие в составе мицелия до 10,2 и 7,2% липидов от сухого веса грибов соответственно. Недостатком указанных штаммов является низкое содержание липидной фракции.
Наиболее близким к заявленному штамму является штамм Laetiporus sulphureus LS 1-06, способный накапливать в составе мицелия до 8,4% липидов от сухого веса грибов. Недостатком указанного штамма являются низкая скорость роста и низкое содержание липидной фракции [Уфимцева О.В., Миронов П.В. Получение биомассы мицелия грибов вешенки обыкновенной Р 05/88 Pleurotus ostreatus и серно-желтого трутовика LS 1-06 Laetiporus sulphureus в глубинных условиях //Хвойные бореальной зоны. - 2009. - Т. 26. -№. 2. - С. 294-296].
Раскрытие изобретения
Целью изобретения является получение нового штамма базидиомицета Fomitopsis pinicola, продуцирующего липиды в условиях погруженного культивирования, с высоким содержанием липидной фракции.
Поставленная цель достигается тем, что выделен новый штамм Fomitopsis pinicola (F. pinicola), задепонированный во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика под регистрационным номером ВКПМ F-1285.
Новый штамм выделен из природного плодового тела, найденного на мертвой древесине Betula pendula. Кусочки гриба, вырезанные из середины плодового тела, в асептических условиях были перенесены на селективную плотную питательную среду (сусловый агар), содержащую 30 мг/л ампициллина и 4 мг/л беномила. Выросший мицелий был идентифицирован как чистая базидиальная культура по наличию пряжек на мицелии. Таксономическая принадлежность заявляемого штамма к виду Fomitopsis pinicola подтверждена молекулярно-генетическим методом. Штамм базидиального гриба F. pinicola депонирован.
Характеристики штамма Fomitopsis pinicola
Выделенный штамм относится к классу Basidiomicetes, подклассу Agaricomycetidae, порядку Polyporales, семейству Fomitopsidaceae, роду Fomitopsis, виду pinicola.
Вид F. pinicola не патогенен для человека и не образует токсичные метаболиты ни на одной из стадий морфогенеза.
Условия культивирования: сусловый агар, температура +28°С.
Условия хранения: в пробирках с сусловым агаром при +4°С в течение 12-18 месяцев без пересева.
Макроморфологические признаки: на сусловом агаре колония округлая с ризоидным краем, пушится вокруг инокулюма, профиль приподнятый. Воздушный мицелий белого цвета, субстратный мицелий бесцветный, обратная сторона колонии не окрашена. Структура колонии ватно-пушистая, слабошероховатая, плотная. По мере старения мицелий становится плотным.
Гифы воздушного мицелия до 4 мкм в диаметре, разветвленные, короткие. На мицелии имеются округлые медальонные пряжки стабильной формы.
Вегетативный мицелий базидиомицета выращивают в погруженной культуре в асептических аэробных условиях.
Культивирование осуществляют в качалочных колбах объемом 750 мл на орбитальной качалке при температуре 28°С.
Среда для погруженного культивирования содержит: глюкозу - 10-30 г/л, соевую муку - 5-15 г/л, дигидрофосфат калия - 2-3 г/л, сульфат магния - 0,2-0,3 г/л и водопроводную воду. Значение рН среды доводят до 5,5-6,2. Питательную среду автоклавируют при температуре 121°С в течение 30 минут. Длительность процесса получения жидкого посевного мицелия составляет 4 суток, ферментации - 6 суток.
Биомассу отделяют от культуральной жидкости фильтрованием через лавсановую ткань. Липиды выделяют из влажной биомассы (влагосодержание 80-85%) по методу Фолча [Folch J. et al. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues // J biol chem. - 1957. - Vol. 226. - №. 1. - pp.497-509].
Максимальный выход липидной фракции составляет 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы через 6 суток культивирования при температуре 28°С.
Осуществление изобретения
Сведения, подтверждающие возможность осуществления предлагаемого изобретения
Пример 1. Получение погруженного мицелия F. pinicola
Погруженное культивирование штамма F. pinicola проводили на орбитальном шейкере со скоростью вращения 250 об/мин при температуре 28°С в качалочных колбах объемом 750 мл, содержащих 100 мл питательной среды следующего состава: глюкоза - 20 г/л, соевая мука - 10 г/л, дигидрофосфат калия - 2,5 г/л и сульфат магния - 0,25 г/л. Уровень рН среды доводят до 5,5-6,2. Процесс погруженного культивирования проводили в два этапа. На первом этапе получали жидкий посевной материал, на втором этапе осуществляли ферментацию.
Для приготовления посевного материала использовали культуру, выращенную в пробирках на сусловом агаре. Кусочки агара размером не более 3×3 мм в количестве 30-40 штук асептически вносили в качалочные колбы, содержащие 100 мл питательной среды, и культивировали в течение 4 суток. Затем 10 мл посевного материала в асептических условиях вносили в качалочные колбы, содержащие 100 мл питательной среды, и культивировали в течение 6 суток. Выход воздушно высушенной биомассы составлял 6,7 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляло 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы.
Пример 2. Получение погруженного мицелия F.pinicola
Получение погруженного мицелия F. pinicola проводили, как описано в примере 1, но глюкозу, соевую муку, дигидрофосфат калия и сульфат магния в питательную среду вносили в количестве 10 г/л, 5 г/л, 3 г/л и 0,3 г/л соответственно. Выход воздушно высушенной биомассы составлял 4,9 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляло 19,3% от веса воздушно высушенной биомассы.
Пример 3. Получение погруженного мицелия F. pinicola
Получение погруженного мицелия F. pinicola проводили, как описано в примере 1, но глюкозу, соевую муку, дигидрофосфат калия и сульфат магния в питательную среду вносили в количестве 30 г/л, 15 г/л, 2 г/л и 0,2 г/л соответственно. Выход воздушно высушенной биомассы составлял 5,2 г/л питательной среды на 6 сутки ферментации. Содержание суммарных липидов в погруженном мицелии, определенное весовым методом, составляло 19,7% от веса воздушно высушенной биомассы.
Пример 4. Получение липидов F. pinicola
Получали погруженную культуру F. pinicola, как описано в примере 1. Биомассу отделяли от культуральной жидкости фильтрованием через лавсановую ткань и однократно промывали дистиллированной водой. Навеску влажной биомассы (влагосодержание 80-85%) растирали с песком в жидком азоте до пастообразного состояния и экстрагировали смесью хлороформа и метанола (1:1 по объему). Экстракт фильтровали через бумажный фильтр, твердый остаток подвергали повторной экстракции. К объединенному фильтрату добавляли дистиллированную воду. Водно-метанольную и хлороформную фазы разделяли в делительной воронке. Хлороформный слой, содержащий липиды, сушили над слоем безводного сульфата натрия, растворитель упаривали на вакуумном ротационном испарителе.
Пример 5. Динамика накопления липидов штаммом F. pinicola
Получали погруженную культуру F. pinicola, как описано в примере 1. Отбор проб для определения содержания липидов в мицелии проводили каждые 24 часа. Липиды из биомассы выделяли, как описано в примере 5. Максимальный выход липидной фракции составлял 21,3% от веса воздушно высушенной биомассы на 6 сутки культивирования (таблица 1).
Жирнокислотный состав липидов, выделенных из F. pinicola, определяли методом газовой хроматографии. В составе липидной фракции преобладают линолевая, олеиновая и пальмитиновая кислоты (таблица 2).
Claims (1)
- Штамм базидиального гриба Fomitopsis pinicola, продуцирующий липиды в условиях погруженного культивирования, депонированный во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ГосНИИгенетика под регистрационным номером ВКПМ F-1285.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015156842A RU2620078C1 (ru) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015156842A RU2620078C1 (ru) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2620078C1 true RU2620078C1 (ru) | 2017-05-22 |
Family
ID=58881188
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015156842A RU2620078C1 (ru) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2620078C1 (ru) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6372964B1 (en) * | 1999-11-02 | 2002-04-16 | Med Myco Ltd. | For higher basidiomycetes mushrooms grown as biomass in submerged culture |
-
2015
- 2015-12-29 RU RU2015156842A patent/RU2620078C1/ru active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6372964B1 (en) * | 1999-11-02 | 2002-04-16 | Med Myco Ltd. | For higher basidiomycetes mushrooms grown as biomass in submerged culture |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| HUM FELD. et. al., Mushroom Mycelium production by submerged propagation, Food Technology, 1949, v.3, N.11, p. 355-356. КОВАЛЕВА Г.К. Биологические особенности и биохимический состав ксилотрофных базидиомицетов Fomitopsis officinalis(Vill.:FR) bond. Et. sing., Ganoderma applanatum (pers.) pat. и Trametes versicolor (L:FR) Pilat, Автореф. Дисс. на соискание ученой степени кандидата биологических наук, М., 2009, стр. 7-22. * |
| КОВАЛЕВА Г.К. Биологические особенности и биохимический состав ксилотрофных базидиомицетов Fomitopsis officinalis(Vill.:FR) bond. Et. sing., Ganoderma applanatum (pers.) pat. и Trametes versicolor (L:FR) Pilat, Автореф. Дисс. на соискание ученой степени кандидата биологических наук, М., 2009, стр. 7-22. * |
| УФИМЦЕВА О.В., МИРОНОВ П.В. Получение биомассы мицелия грибов вешенки обыкновенной Р 05/88 Pleurotus ostreatus и серно-желтого трутовика LS-106 Laetiporus sulphureus в глубинных условиях. Хвойные бореальной зоны, 2009, т. 26, N. 2, стр. 294-296. * |
| УФИМЦЕВА О.В., МИРОНОВ П.В. Получение биомассы мицелия грибов вешенки обыкновенной Р 05/88 Pleurotus ostreatus и серно-желтого трутовика LS-106 Laetiporus sulphureus в глубинных условиях. Хвойные бореальной зоны, 2009, т. 26, N. 2, стр. 294-296. HUM FELD. et. al., Mushroom Mycelium production by submerged propagation, Food Technology, 1949, v.3, N.11, p. 355-356. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113307848B (zh) | 具有抗真菌和清除自由基活性的环色-丝-缬-异亮-亮肽及制备方法 | |
| WO2020177390A1 (zh) | 一种猴头菌发酵制备含麦角硫因的化妆品原液的方法 | |
| JP6548520B2 (ja) | 多種多様な効能を有する蛹虫草及びその生産方法 | |
| JP6807329B2 (ja) | ω−７脂肪酸合成物、及び黄緑色藻を培養して該合成物を生産する方法と応用 | |
| Duvnjak et al. | Advances in batch culture fermented Coriolus versicolor medicinal mushroom for the production of antibacterial compounds | |
| EP2650356B1 (en) | Aurantiochytrium strains having high squalene-producing ability, and method for producing squalene thereof | |
| US9284585B2 (en) | Method for increasing yield of total flavonoids in Ganoderma lucidum mycelium | |
| JP2022516888A (ja) | エルゴチオネインを産生する菌株及びそのスクリーニングのための方法 | |
| JP2009500013A (ja) | 植物細胞懸濁培養によるコロソール酸の製造方法 | |
| WO2022100568A1 (zh) | 松蕈及其用于生产麦角硫因的方法 | |
| CN106916853A (zh) | 利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法 | |
| Dong et al. | Identification of a symbiotic fungus from blue–green alga and its extracellular polysaccharide | |
| CN110004065B (zh) | 一种红褐灵芝新菌种及其人工栽培方法和应用 | |
| US10364446B2 (en) | Streptomyces psammoticus and methods of using the same for vanillin production | |
| CN107893033B (zh) | 烟曲霉sqh4及在生物转化法制备花旗松素中的应用 | |
| RU2620078C1 (ru) | Штамм базидиомицета Fomitopsis pinicola ВКПМ F-1285 - продуцент липидов | |
| RU2656143C1 (ru) | Штамм базидиомицета laetiporus sulphureus вкпм f-1286 - продуцент липидов | |
| CN104278070A (zh) | 一种提高桑黄液体发酵产物中麦角甾醇含量的方法 | |
| Bolla et al. | Effect of oils on the production of exopolysaccharides and mycelial biomass in submerged culture of Schizophyllum commune | |
| Gregori et al. | Growth characteristics and ergosterol content of Grifola frondosa in various solid-state substrates | |
| JP5137204B2 (ja) | マンノシルエリスリトールリピッドの製造方法 | |
| KR101062272B1 (ko) | 에르고티오네인의 함량 증가를 위한 자흑색불로초 균사체 배양 배지 및 자흑색불로초 균사체 배양 방법 | |
| KR100754821B1 (ko) | 벌 동충하초 ｊ―201 균주의 균사체와 그 세포외 다당체의대량 생산방법 | |
| RU2235481C2 (ru) | Способ получения биологически активной добавки к пище (варианты) | |
| KR100441741B1 (ko) | 항산화 효과를 증진시키는 상황버섯의 균사체 제조법 |