RU2113480C1 - Фрагмент к днк, кодирующий гликопротеин tcf-ii - Google Patents
Фрагмент к днк, кодирующий гликопротеин tcf-ii Download PDFInfo
- Publication number
- RU2113480C1 RU2113480C1 RU95110767A RU95110767A RU2113480C1 RU 2113480 C1 RU2113480 C1 RU 2113480C1 RU 95110767 A RU95110767 A RU 95110767A RU 95110767 A RU95110767 A RU 95110767A RU 2113480 C1 RU2113480 C1 RU 2113480C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tcf
- activity
- cdna
- factor
- glycoprotein
- Prior art date
Links
- 239000012634 fragment Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 title claims abstract description 8
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 title claims abstract description 8
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 3
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract 2
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 abstract 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000002585 base Substances 0.000 description 6
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 3
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 3
- 101000702488 Rattus norvegicus High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 3
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003145 cytotoxic factor Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N guanidinium thiocyanate Chemical compound SC#N.NC(N)=N ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- WZIMSXIXZTUBSO-UHFFFAOYSA-N 2-[[bis(carboxymethyl)amino]methyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O WZIMSXIXZTUBSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 101150022655 HGF gene Proteins 0.000 description 1
- 101000617808 Homo sapiens Synphilin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108010053229 Lysyl endopeptidase Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108010021757 Polynucleotide 5'-Hydroxyl-Kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000008422 Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102100021997 Synphilin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KNYAHOBESA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] dihydroxyphosphoryl hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)O[32P](O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KNYAHOBESA-N 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010058966 bacteriophage T7 induced DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N dATP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N dATP Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J dCTP(4-) Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)C1 RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J 0.000 description 1
- HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N dGTP Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N dTTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/4753—Hepatocyte growth factor; Scatter factor; Tumor cytotoxic factor II
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Получение нуклеотидная последовательность фрагмента к ДНК, кодирующего новый гликопротеин ТСF-II человеческого происхождения, обладающий противоопухолевой активностью, активностью по индуцированию дифференциации клеток лейкемии, активностью по усилению клеточной иммунологии, активностью по стимулированию роста клеток эндотелия сосудов, а также активностью по стимулированию роста генатоцитов. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.
Description
Изобретение касается последовательности ДНК, кодирующей гликопротеин человеческого происхождения.
Гликопротеин проявляет цитотоксическую активность по отношению к различным линиям опухолевых клеток, но не по отношению к нормальным клеткам, выступает как новый противоопухолевый цитотоксический фактор, фактор, способствующий дифференциации лейкемических клеток, фактор, усиливающий клеточную иммунологию, фактор, обеспечивающий рост клеток эндотелия сосудов, фактор, обеспечивающий рост гепацитов.
В выложенной патентной заявке Японии N 64-10998 описаны вся последовательность аминокислот, а также нуклеотидная последовательность в комплементарной ДНК (кДКН) кодирующая противоопухолевый цитотоксический фактор, получаемый из культуры фибробластов человеческого происхождения и имеющего характеристики: молекулярная масса 36000±1000, изоэлектрическая точка свыше 10,5.
Согласно изобретению праймерная последовательность TCF-II была выведена из его кДНК, которая была клонирована сортировкой библиотеки кДНК, полученной с использованием мРНК, выделенной в чистом виде из общего количества всей РНК, которая в свою очередь была экстрагирована из клеток IMR-90 фибробластов зародыша человека согласно следующей методике.
(1) Экстрагирование поли(A) РНК из клеток UMR-90.
Вся РНК была приготовлена методом, предусматривающим использование тиоцианата гуанидина и хлорида цезия. Из клеток IMR-90, взятых в количестве 200 млн, которые культивируют в среде, предложенной Иглом (Eagle) и модифицированной Дулбэкко (Dulbecco), содержащей 5% сыворотки новорожденного теленка (NBCS). Клетки IMR-90, подвергнутые усреднению, представляют собой суспензию в 28 мл 6М тиоцианата гуанидина, содержащую также цитрат натрия (5 мМ), 0,5% препарата Саркосил и бета-меркаптоэтанол (0,1 М). В пробирки центрифуги, выполненные из полиалломера, помещают по 4 мл 5,7 М раствора хлорида цезия, содержащего 0,1 М этилендиаминтетрауксусной кислоты. Затем к раствору хлорида цезия добавляют по 7 мл гомогенизированной клеточной суспензии и осуществляют центрифугирование с частотой вращения 35000 1/мин при 20oC в течение 16 ч на бекмановской (Beckman) центрифуге с ротором 40Т1. После центрифугирования частицы дважды промывают 95%-ным этиловым спиртом и растворяют в 200 мкл буферного раствора Tris HCl (10 мм, pH 75,5), содержащего 1 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, посредством нагревания при 65oC в течение 5 мин. Полученный раствор далее обозначен как раствор всей РНК. Поли (A) РНК выделяют в чистом виде из общей (всей) РНК методом хроматографии в колонке с олиго (dT) целлюлозой. Раствор всей РНК заливают в колонку с олиго (dT) целлюлозой, приведенную в равновесие с использованием 10 мМ буферного раствора Tris HCl (10 мМ, pH 7,4), содержащего 1 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты и 0,05% SDS. Полученный раствор ниже обозначен как раствор поли(A) РНК.
(2) Синтез библиотеки кДНК.
Двойную спираль кДНК синтезируют с использованием (поли)A РНК из параграфа (1) в качестве шаблона, а также с использованием фирменного средства синтеза кДНК (производство фирмы Pharmacia Co. Ltd), причем дополнительно присоединяют адаптор EcoR 1. Методику синтеза осуществляют согласно рекомендациям указанной фирмы за исключением добавления (на стадии синтеза одинарной спирали ДНК) обратной транскриптазы (40 ед. на реакционную смесь, производство фирмы Life Science Co. Ltd), полученной из культуры несферического болезнетворного вируса, поражающего костный мозг птиц.
(3) Подготовка библиотеки кДНК.
Комплементарную ДНК (кДНК), полученную, как указано в параграфе (2), встраивают EcoR 1 часть (производство фирмы Promega Co Ltd) вектора λgt 10 фага. Эту кДНК в количестве 3,3 мкг, синтезированную из (поли)A РНК, растворяют в 150 мкл буферного раствора 66 мМ Tris-HCl (pH 7,6) для хроматографической колонки, содержащего спермидин (1 мМ), хлорид магния (10 мМ), дитиотрейтол (15 мМ), а также альбумин бычьей сыворотки (0,2 мг/мл). Данный раствор в количестве 6,2 мкл смешивают с 1 мкг EcoR 1 части фага (вектор λgt 10), после чего осуществляют осаждение этиловым спиртом. Рекомбинантный фаг ДНК, включающий оба компонента, λgt 10 и кДНК, готовят следующим образом. Упомянутый выше осадок переводят в суспензию с использованием 9 кмл буферного раствора, предназначенного для хроматографической колонки, и оставляют на инкубирование на ночь при 16oC при условии добавления 1 мкл 10 мМ трифосфата аденозина, а также 1 мкл лигазы Т4 ДНК в количестве 350 ед. на 1 мкл.
(4) Скрининг библиотеки ДНК.
(i) Приготовление олигонуклеотидной пробы.
Для приготовления пробы составляют смесь (маркировка 5' terminus) комплементарного олигонуклеотида с характеристикой 17 мер (mer) (сочетание 384 разновидностей) соответствующего последовательности аминокислот от Va11 до Pro6 в N-терминальной последовательности аминокислот бета-цепи фактора TCF-II, с полинуклеотидной киназой (производство фирмы TAKARA SHUZO) и фактором [γ-32P]ATP (производство фирмы Amersham Co., Ltd). Указанная проба ниже показана следующим образом: дополнительная спираль, использованная в качестве эталона (смесь 384 разновидностей):
(ii) Скренинг рекомбинантного фага.
(ii) Скренинг рекомбинантного фага.
500 тыс. дисков фага получают лабораторной расфасовкой раствора рекомбинантного фага ДНК, приготовленного согласно параграфу (3), с использованием препарата Gigapack Gold (Stratagene) и с последующим заражением кишечной палочкой E.coli С600hf1. После адсорбирования дисков фага на фильтре марки Hybond-N (фирма Amersham) эти диски денатурируют щелочью, нейтрализуют и подвергают термообработке при 80oC в течение 2 ч. Гибридизацию по методике, которую разработали Белл и сотр., проводят с использованием смешанной пробы, полученной согласно параграфу (1). Один из клонов, который должен был содержать фрагмент TCF-II, был найден среди позитивных клонов, обнаруженных при первой сортировке.
(5) Клонирование полной длины кДНК фактора TCF-II.
Внутренние последовательности аминокислот (однобуквенные коды): (α) NYMGNLSQTRSGL и (β) TSXSVYGWGYTGLINYDGLL (аминокислота X не идентифицирована) определяют из альфа- и бета- цепей TCF-II посредством обработки лизилэндопептидазой при условии последующего картирования (mapping) фрагментов. N-терминальная последовательность аминокислот бета-цепи TCF-II совпадала с аналогичной последовательностью бета-цепи одного из факторов (hHGF) роста гепатоцитов человека. Более того, упомянутые выше внутренние последовательности (α) и (β) фактора TCF-II имелись соответственно и в альфа- и бета-цепях hHGF. Следовательно, было сделано заключение о том, что фактор TCF-II есть следствие экспрессии одного из генов семейства hHGF. Были сообщены данные о библиотеках кДНК генов hHGF из плаценты и печени соответственно (3-u). Сравнение полных праймерных последовательностей, выведенных из обеих кДНК, выявило различия аминокислот на 14 позициях в их последовательности. На основании этих данных было выдвинуто предположение о присутствии генов семейства hHGF. Области, идентичные для кДНК (сDNA) генов hHGF как из плаценты, так и из печени, были выбраны в качестве праймерных (primer) последовательностей для цепной реакции полимеразы (Polymerase Chain Reaction-PCR). Химически синтезируют идентичные олигонуклеотиды обеих кДНК генов hHGF на некодирующих позициях 5' и 3'. Сортировку кДНК фактора TCF-II проводят методом PCR c использованием этих олигонуклеотидов в качестве праймеров (primer). Праймер Sa1-77, имеющий участок расщепления ограничивающего энзима Sa1 I, и праймер Sph 2203, имеющий участок расщепления ограничивающего энзима Sph1, синтезируют с использованием реагента, способствующего синтезу ДНК (производство фирмы Applied Co, Ltd). Ниже эти праймеры показаны следующим образом:
праймер Sa1 - 77: 5'-GGTCGACTAGGGACTGACTCCGAACAGGATTC-3' Sa1 I
праймер Sph 2203: 5'-GGCATGCACAGTTGTATTGGTGGGTGCTTCAG-3' Sph I
Клонирование методом PCR проводят по следующей методике.
праймер Sa1 - 77: 5'-GGTCGACTAGGGACTGACTCCGAACAGGATTC-3' Sa1 I
праймер Sph 2203: 5'-GGCATGCACAGTTGTATTGGTGGGTGCTTCAG-3' Sph I
Клонирование методом PCR проводят по следующей методике.
(i) Цепная реакция полимеразы (PCR), мкл:
Дополнительная ДНК (cDNA), синтезированная как описано в параграфе (2) и растворенная в 150 мкл буферного раствора хроматографической колонки - 1
20 мкМ праймер Sa1-77 - 2,5
20 мкМ праймер Sph 2203 - 2,5
10 порций реакционного раствора для проведения реакции PCR (буферный раствор на основе 100 мМ Tris HCl с величиной pH 8,3, содержащий 500 мМ KCl, 15 мМ MgCl и 0,1% (мас.ч./об.ч) желатина) - 10
Смесь 1,25 мМ dGTP, dATP, dTTP, dCTP - 16
Amp1i Tag (5 ед. на 1 мкл, производство фирмы TAKARA SHUZO) - 0,5
Дистиллированная вода - 67,5
Затем указанные выше растворы смешивают в пробирке микрофуги объемом 0,5 мл, причем поверхность жидкости закрывают минеральным маслом в количестве 100 мкл (производство фирмы Sigma Co., Ltd). Реакцию PCR проводят с использованием системы Quick Thermo (производство фирмы Japan Genetics Co., Ltd). После предварительной обработки при 94oC в течение 7 мин 35 раз повторяют трехстадийную реакцию, включающую: 1) термообработку при 55oC в течение 3 мин; 2) реакцию с участием полимеразы при 72oC в течение 2 мин, и 3) реакцию денатурирования при 94oC в течение 2 мин. Далее реакционную смесь нагревают при 55oC в течение 3 мин, а затем при 72oC в течение 11 мин, после чего охлаждают ее до комнатной температуры (в указанное время включают также время перехода с одного режима на другой). При анализе части реакционной смеси методом электрофореза с использованием геля агарозы получают фрагмент ДНК, состоящий из приблизительно 2,3 Kb оснований (Kirobases) и признанный в качестве искомой кДНК фактора TCF-II. Далее ДНК, полученную из четырех пробирок, содержащих вышеупомянутую реакционную смесь, осаждают этиловым спиртом и гидролизуют энзимами Sa1 I и Sph I. В результате электрофореза на геле агарозы с использованием бумажного фильтра DE81 (производство фирмы Watmen Co., Ltd) был получен фрагмент ДНК с приблизительно 2,3 Kb.
Дополнительная ДНК (cDNA), синтезированная как описано в параграфе (2) и растворенная в 150 мкл буферного раствора хроматографической колонки - 1
20 мкМ праймер Sa1-77 - 2,5
20 мкМ праймер Sph 2203 - 2,5
10 порций реакционного раствора для проведения реакции PCR (буферный раствор на основе 100 мМ Tris HCl с величиной pH 8,3, содержащий 500 мМ KCl, 15 мМ MgCl и 0,1% (мас.ч./об.ч) желатина) - 10
Смесь 1,25 мМ dGTP, dATP, dTTP, dCTP - 16
Amp1i Tag (5 ед. на 1 мкл, производство фирмы TAKARA SHUZO) - 0,5
Дистиллированная вода - 67,5
Затем указанные выше растворы смешивают в пробирке микрофуги объемом 0,5 мл, причем поверхность жидкости закрывают минеральным маслом в количестве 100 мкл (производство фирмы Sigma Co., Ltd). Реакцию PCR проводят с использованием системы Quick Thermo (производство фирмы Japan Genetics Co., Ltd). После предварительной обработки при 94oC в течение 7 мин 35 раз повторяют трехстадийную реакцию, включающую: 1) термообработку при 55oC в течение 3 мин; 2) реакцию с участием полимеразы при 72oC в течение 2 мин, и 3) реакцию денатурирования при 94oC в течение 2 мин. Далее реакционную смесь нагревают при 55oC в течение 3 мин, а затем при 72oC в течение 11 мин, после чего охлаждают ее до комнатной температуры (в указанное время включают также время перехода с одного режима на другой). При анализе части реакционной смеси методом электрофореза с использованием геля агарозы получают фрагмент ДНК, состоящий из приблизительно 2,3 Kb оснований (Kirobases) и признанный в качестве искомой кДНК фактора TCF-II. Далее ДНК, полученную из четырех пробирок, содержащих вышеупомянутую реакционную смесь, осаждают этиловым спиртом и гидролизуют энзимами Sa1 I и Sph I. В результате электрофореза на геле агарозы с использованием бумажного фильтра DE81 (производство фирмы Watmen Co., Ltd) был получен фрагмент ДНК с приблизительно 2,3 Kb.
(ii) Субклонирование.
Фрагмент ДНК (2,3 Kb), содержащий Sa1 I и Sph I, сайты, полученный согласно параграфу (1), встраивают с использованием (ligation) буфера для лигирования (производство фирмы TАKARA SHUZO) в плазмидный вектор pUC18 (производство фирмы Japan gene Сo., Ltd), обработанный энзимами Sa1 I и Sph I. Рекомбинантной ДНК трансфецируют кишечные палочки Esherichia Co1i DH5 по методике фирмы BRL Co, Ltd. Удавалось получить более 20 субклонов.
(iii) Определение последовательности оснований.
Последовательности оснований в полученных субклонах определяют дидеокси-методом с использованием секвеназы (версия 2,0 производства фирмы TOYOBO). Ошибочно включенные нуклеотиды на препарате Ampi Tag (производство фирмы TAKARA SHUZO) были исправлены путем анализа нуклеотидной последовательности оснований в нескольких субклонах.
На фиг. 1 и 2 представлены нуклеотидная последовательность кДНК фактора TCF-II, полученная по упомянутой выше методике, а также последовательность аминокислот, выведенная из этой нуклеотидной последовательности.
Нуклеотидная последовательность содержит 2172 пары оснований (п.о.) от АТС запускающего кодона до кодона ТАС терминации транскрипции. После аминокислотного транслирования фактор TCF-II содержит 723 аминокислоты. Было сделано допущение о том, что последовательность аминокислот от первого, метионинового (Met) до 29-го аланинового (A1a) остатков представляет собой сигнальную последовательность. Как показано на фиг.1, фактор TCF-II - это полипептид, содержащий цепи α и β, связанные дисульфидной связью, которые сначала синтезируются как единая цепь. Поскольку N-замыкание цепи фактора TCF-II было блокировано, его не удалось идентифицировать. Однако N-замыкающая последовательность аминокислот цепи β, а также несколько внутренних последовательностей аминокислот фактора TCF-II были определены, как упомянуто выше.
Полученная нуклеотидная последовательность кДНК TCF-II очень похожа на соответствующую последовательность в hHGF, которую установил Миядзава и сотр. Однако в кДНК фактора TCF-II отсутствуют кодоны пяти аминокислотных остатков (F-L-P-SS) от Phe162 до Ser166, присутствующие в последовательности аминокислот, характерной для hHGF. Таким образом, факты свидетельствуют о том, что кДНК фактора TCF-II - одна из новых разновидностей семейства генов hHGF.
На фиг. 3 представлено сравнение последовательности аминокислот TCF-II, выведенной из упомянутой выше нуклеотидной последовательности, и последовательности аминокислот, соответствующей гену HGF (по данным Миядзавы и сотр. ).
На фиг. 1 и 2 соответственно показаны нуклеотидная последовательность к ДНК, а также последовательность аминокислот фактора TCF-II, выведенная из указанной последовательности оснований.
На фиг.3 дано сравнение последовательности аминокислот TCF-II, выведенной из вышеупомянутой нуклеотидной последовательности и последовательности аминокислот гена hHGF, о которой сообщили Миядзава и сотр.
Полученную согласно изобретению ДНК можно использовать для получения гликопротеина, обладающего противоопухолевой цитотоксической активностью, индуцирующего дифференции линии клеток лейкемии активностью, усиливающего клеточную иммунологию активностью, способствующего росту клеток эндотелии сосудов активностью.
Claims (2)
1. Фрагмент кДНК, кодирующий гликопротеин TCF-II и имеющий нуклеотидную последовательность I представленную на с.
2. Фрагмент кДНК по п.1, отличающийся тем, что кодирует последовательность аминокислот II, представленную на с.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP5863189 | 1989-03-10 | ||
JP58631/1989 | 1989-03-10 | ||
JP6692/1990 | 1990-01-16 | ||
JP669290 | 1990-01-16 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU95110767A RU95110767A (ru) | 1997-06-10 |
RU2113480C1 true RU2113480C1 (ru) | 1998-06-20 |
Family
ID=26340889
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU95110767A RU2113480C1 (ru) | 1989-03-10 | 1990-03-09 | Фрагмент к днк, кодирующий гликопротеин tcf-ii |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5587359A (ru) |
EP (1) | EP0462277B1 (ru) |
JP (1) | JPH0768272B1 (ru) |
KR (1) | KR960009054B1 (ru) |
AT (1) | ATE123498T1 (ru) |
AU (1) | AU629314B2 (ru) |
CA (1) | CA2049017C (ru) |
DE (1) | DE69019962T2 (ru) |
DK (1) | DK0462277T3 (ru) |
ES (1) | ES2075199T3 (ru) |
FI (1) | FI102681B1 (ru) |
HU (2) | HU212513B (ru) |
IE (1) | IE64005B1 (ru) |
NO (1) | NO180796C (ru) |
NZ (1) | NZ232813A (ru) |
RU (1) | RU2113480C1 (ru) |
WO (1) | WO1990010651A1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2693472C2 (ru) * | 2014-04-28 | 2019-07-03 | Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. | Лиофилизированный состав на основе hgf |
US11548926B2 (en) | 2016-03-17 | 2023-01-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Method for producing an active hepatocyte growth factor (HGF) |
Families Citing this family (35)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5362716A (en) * | 1989-12-27 | 1994-11-08 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Methods for stimulating hematopoietic progenitors using hepatocyte growth factor and lymphokines |
EP0461560B1 (en) * | 1990-06-11 | 1998-11-18 | Toshikazu Nakamura | Recombinant human hepatocyte growth factor and method for production thereof |
WO1992001053A1 (fr) * | 1990-07-13 | 1992-01-23 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Plasmide contenant l'adn qui code pour la sequence d'acides amines du facteur tcf-ii, cellules transformees par ce plasmide et production d'une substance physiologiquement active grace a l'utilisation de ce plasmide |
US5821223A (en) * | 1990-09-14 | 1998-10-13 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method of stimulating cell growth with a novel broad spectrum human lung fibroblast-derived mitogen |
EP0571387B1 (en) * | 1990-09-14 | 2003-12-17 | THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce | A non-mitogenic competitive hgf antagonist |
JP3200609B2 (ja) * | 1990-12-28 | 2001-08-20 | 敏一 中村 | 上皮細胞増殖促進剤 |
JPH0597A (ja) * | 1991-06-21 | 1993-01-08 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 新規抗tcf−iiモノクローナル抗体及びそれを用いるtcf−iiの測定方法 |
KR100271087B1 (en) * | 1992-07-16 | 2000-11-01 | Snow Brand Milk Products Co Ltd | Protein synthesis stimulator comprising tcf-2 for the treatment of hypoproteinemia |
KR100260964B1 (ko) * | 1992-07-16 | 2000-07-01 | 쇼노 카츄야 | Tcf-ii를 유효성분으로 하는 혈액응고 정상화제 |
US5648233A (en) * | 1992-12-28 | 1997-07-15 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Modified tumor cytotoxic factor (TCF) and DNA encoding such |
JP3552240B2 (ja) * | 1993-02-23 | 2004-08-11 | 第一製薬株式会社 | 高濃度tcf製剤 |
US5837676A (en) * | 1993-10-18 | 1998-11-17 | Long Island Jewish Medical Center | Use of scatter factor to enhance angiogenesis |
JP2747979B2 (ja) * | 1994-08-19 | 1998-05-06 | 雪印乳業株式会社 | ヒト由来の糖蛋白質からなる生理活性因子を有効成分とする医薬 |
ES2206523T3 (es) * | 1994-12-27 | 2004-05-16 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Mutantes de tecf. |
NZ298141A (en) * | 1994-12-27 | 2000-12-22 | Snow Brand Milk Products Co Ltd | Treating lipid metabolism disorder using TCF-II |
AU4027601A (en) * | 1995-07-11 | 2001-07-26 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Lyophilized HGF preparations |
JP3927248B2 (ja) * | 1995-07-11 | 2007-06-06 | 第一製薬株式会社 | Hgf凍結乾燥製剤 |
JP4006058B2 (ja) | 1997-03-11 | 2007-11-14 | 第一三共株式会社 | 多臓器不全予防及び/又は治療剤 |
ZA982068B (en) * | 1997-03-14 | 1998-09-16 | Snow Brand Milk Products Co Ltd | Agent for preventing and/or treating cachexia |
JPH1129493A (ja) * | 1997-07-14 | 1999-02-02 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 放射線障害予防及び/又は治療剤 |
JPH11269091A (ja) * | 1998-03-19 | 1999-10-05 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 敗血症予防及び/又は治療剤 |
CN1352087A (zh) * | 2000-11-02 | 2002-06-05 | 上海博德基因开发有限公司 | 一种新的多肽——人糖蛋白42和编码这种多肽的多核苷酸 |
KR100562824B1 (ko) | 2002-03-20 | 2006-03-23 | 주식회사 바이로메드 | 유전자 발현효율이 높으며 간세포 성장인자의 두 가지이형체를 동시에 발현하는 하이브리드 간세포 성장인자유전자 |
US8034831B2 (en) | 2002-11-06 | 2011-10-11 | Celgene Corporation | Methods for the treatment and management of myeloproliferative diseases using 4-(amino)-2-(2,6-Dioxo(3-piperidyl)-isoindoline-1,3-dione in combination with other therapies |
US7563810B2 (en) | 2002-11-06 | 2009-07-21 | Celgene Corporation | Methods of using 3-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl)-piperidine-2,6-dione for the treatment and management of myeloproliferative diseases |
CN100417412C (zh) * | 2003-03-28 | 2008-09-10 | 威海赛洛金药业有限公司 | 促肝细胞生长素注射液及制备方法和应用 |
JP4728807B2 (ja) * | 2003-09-03 | 2011-07-20 | 敏一 中村 | ヒト組換えhgfを含有する皮膚潰瘍予防治癒剤 |
RU2520817C2 (ru) * | 2006-01-25 | 2014-06-27 | Октафарма Аг | Очистка и применение фактора, способствующего заживлению ран |
US20100124782A1 (en) * | 2007-04-28 | 2010-05-20 | Applied Cell Biotechnologies, Inc. | Composition For Repairing Defect In Skin Or Gingival Soft Tissue And Method Of Culturing Autologous Fibroblasts |
US20090202606A1 (en) * | 2008-01-25 | 2009-08-13 | Viromed Co., Ltd. | Treatment and Prevention of Cardiac Conditions Using Two or More Isoforms of Hepatocyte Growth Factor |
CN102046792B (zh) * | 2008-04-09 | 2014-12-10 | 百疗医株式会社 | 用于提高质粒dna表达的冻干dna制剂 |
CN105682676B (zh) | 2013-10-22 | 2020-10-23 | 赫利世弥斯株式会社 | 利用肝细胞生长因子的两种以上的异构体的肌萎缩性侧索硬化症预防或治疗用组合物 |
DK3192524T3 (da) | 2014-09-10 | 2022-02-14 | Kringle Pharma Inc | Hgf præparat egnet til behandling af neurologiske lidelser |
EP3823677A4 (en) | 2018-07-19 | 2022-06-01 | Helixmith Co., Ltd. | FREEZE-DRIED PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS INTENDED FOR NAKED-DNA GENE THERAPY |
CA3218000A1 (en) | 2021-05-14 | 2022-11-17 | Claris Biotherapeutics, Inc. | Compositions of growth factor for the treatment of eye disease |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS58148826A (ja) * | 1982-02-26 | 1983-09-05 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | 糖蛋白質および腫瘍治療剤 |
JP2564486B2 (ja) * | 1986-07-14 | 1996-12-18 | 修治 橋本 | 肝細胞増殖因子 |
US5037644A (en) * | 1986-10-27 | 1991-08-06 | Cetus Corporation | Pharmaceutical compositions of recombinant interleukin-2 and formulation processes |
DE3643182A1 (de) * | 1986-12-18 | 1988-06-30 | Behringwerke Ag | Arzneimittel enthaltend das gewebeprotein pp4, verfahren zur herstellung von pp4 und zu seiner pasteurisierung sowie die verwendung von pp4 |
JPS6410998A (en) * | 1986-12-22 | 1989-01-13 | Green Cross Corp | Tumor cell inhibitory factor |
JPS63243032A (ja) * | 1987-03-27 | 1988-10-07 | Green Cross Corp:The | トロンビンの加熱処理方法 |
DE3729863A1 (de) * | 1987-09-05 | 1989-03-16 | Boehringer Mannheim Gmbh | Stabilisierte erythropoietin-lyophilisate |
JPH0741891B2 (ja) * | 1987-08-26 | 1995-05-10 | 凸版印刷株式会社 | 容器素材成形装置 |
FI80741C (fi) * | 1987-10-29 | 1990-07-10 | Laennen Tehtaat Oy | Modifierat papper. |
WO1992001053A1 (fr) * | 1990-07-13 | 1992-01-23 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | Plasmide contenant l'adn qui code pour la sequence d'acides amines du facteur tcf-ii, cellules transformees par ce plasmide et production d'une substance physiologiquement active grace a l'utilisation de ce plasmide |
-
1990
- 1990-03-06 NZ NZ232813A patent/NZ232813A/en unknown
- 1990-03-09 AT AT90904429T patent/ATE123498T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-03-09 RU RU95110767A patent/RU2113480C1/ru active
- 1990-03-09 KR KR1019910701058A patent/KR960009054B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1990-03-09 EP EP90904429A patent/EP0462277B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-09 HU HU902330A patent/HU212513B/hu unknown
- 1990-03-09 DE DE69019962T patent/DE69019962T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-09 ES ES90904429T patent/ES2075199T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-09 WO PCT/JP1990/000314 patent/WO1990010651A1/ja active IP Right Grant
- 1990-03-09 AU AU51774/90A patent/AU629314B2/en not_active Expired
- 1990-03-09 IE IE86390A patent/IE64005B1/en not_active IP Right Cessation
- 1990-03-09 CA CA002049017A patent/CA2049017C/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-03-09 DK DK90904429.9T patent/DK0462277T3/da active
- 1990-03-09 JP JP2504271A patent/JPH0768272B1/ja not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-09-09 FI FI914234A patent/FI102681B1/fi active
- 1991-09-09 NO NO913546A patent/NO180796C/no not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-09-12 US US08/304,419 patent/US5587359A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-06-02 HU HU95P/P00149P patent/HU211229A9/hu unknown
-
1996
- 1996-03-19 US US08/617,621 patent/US6333309B1/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JP, заявка, 64-10993, C 12 P 21/02, C 12 N 15/00, 1989. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2693472C2 (ru) * | 2014-04-28 | 2019-07-03 | Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. | Лиофилизированный состав на основе hgf |
US11547743B2 (en) | 2014-04-28 | 2023-01-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Lyophilized formulation of HGF |
US11548926B2 (en) | 2016-03-17 | 2023-01-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Method for producing an active hepatocyte growth factor (HGF) |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NZ232813A (en) | 1992-08-26 |
EP0462277A1 (en) | 1991-12-27 |
AU5177490A (en) | 1990-10-09 |
HU211229A9 (en) | 1995-11-28 |
HUT58797A (en) | 1992-03-30 |
DE69019962T2 (de) | 1995-11-23 |
FI102681B (fi) | 1999-01-29 |
WO1990010651A1 (fr) | 1990-09-20 |
CA2049017C (en) | 1998-10-27 |
KR960009054B1 (ko) | 1996-07-10 |
DE69019962D1 (de) | 1995-07-13 |
ATE123498T1 (de) | 1995-06-15 |
DK0462277T3 (da) | 1995-10-30 |
EP0462277A4 (en) | 1992-08-12 |
IE900863L (en) | 1990-09-10 |
NO180796B (no) | 1997-03-17 |
US6333309B1 (en) | 2001-12-25 |
IE64005B1 (en) | 1995-06-28 |
NO913546D0 (no) | 1991-09-09 |
NO913546L (no) | 1991-11-11 |
US5587359A (en) | 1996-12-24 |
FI914234A0 (fi) | 1991-09-09 |
HU212513B (en) | 1996-07-29 |
KR920701256A (ko) | 1992-08-11 |
FI102681B1 (fi) | 1999-01-29 |
HU902330D0 (en) | 1991-12-30 |
ES2075199T3 (es) | 1995-10-01 |
EP0462277B1 (en) | 1995-06-07 |
NO180796C (no) | 1997-06-25 |
RU95110767A (ru) | 1997-06-10 |
JPH0768272B1 (ru) | 1995-07-26 |
CA2049017A1 (en) | 1990-09-11 |
AU629314B2 (en) | 1992-10-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2113480C1 (ru) | Фрагмент к днк, кодирующий гликопротеин tcf-ii | |
Budworth et al. | Tissue distribution of the human soluble guanylate cyclases | |
Nonaka et al. | Complete complementary DNA sequence of the third component of complement of lamprey. Implication for the evolution of thioester containing proteins. | |
Andrews et al. | Purification of a terminal uridylyltransferase that acts as host factor in the in vitro poliovirus replicase reaction. | |
White et al. | Molecular cloning of a novel human UDP-GalNAc: polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase, GalNAc-T8, and analysis as a candidate autosomal dominant hypophosphatemic rickets (ADHR) gene | |
Nonaka et al. | Molecular cloning of a lamprey homologue of the mammalian MHC class III gene, complement factor B. | |
Miceli et al. | Identification and structural characterization of a cDNA clone encoding a membrane-bound form of the polypeptide pheromone Er-1 in the ciliate protozoan Euplotes raikovi. | |
Heinze et al. | The primary structure of the human ribosomal protein S6 derived from a cloned cDNA. | |
Kutsunai et al. | Ripening-related polygalacturonase cDNA from avocado. | |
Mermod et al. | Specific control of messenger translation in Drosophila oocytes and embryos | |
Sato et al. | Primary structure of rat brain protein carboxyl methyltransferase deduced from cDNA sequence | |
US6660847B1 (en) | Rheumatoid arthritis gene | |
Manrow et al. | Identification and characterization of developmentally regulated mRNP proteins of Dictyostelium discoideum | |
Kasama‐Yoshida et al. | A comparative study of 2′, 3′‐cyclic‐nucleotide 3′‐phosphodiesterase in vertebrates: cDNA cloning and amino acid sequences for chicken and bullfrog enzymes | |
Kelly et al. | Characterization of a cDNA encoding a novel band 4.1-like protein in zebrafish | |
JIANG et al. | Sequence of bovine carbonic anhydrase VI: potential recognition sites for N-acetylgalactosaminyltransferase | |
Grahn et al. | Cloning and sequencing of nineteen transcript isoforms of the human α2, 3-sialyltransferase gene, ST3Gal III; its genomic organisation and expression in human tissues | |
Bell et al. | The N-terminus of PE2 in Sindbis virus-infected cells | |
JP2003000281A (ja) | Ifnアルファー2遺伝子の新規ポリヌクレオチド及びポリペプチド | |
Huang et al. | Facilitated geranylgeranylation of shrimp ras‐encoded p25 fusion protein by the binding with guanosine diphosphate | |
CA2177816A1 (en) | Rna polymerase transcription factor | |
US6670123B1 (en) | Method for detecting hematopoietic stem cells | |
ZA200202311B (en) | Novel polypeptides and genes encoding the same. | |
Yamazaki et al. | Molecular cloning of cDNA encoding a human heat-shock protein whose expression is induced by adenovirus type 12 E1A in HeLa cells | |
DITTMAR et al. | Mapping of G2/M-phase prevalences of chaperon-encoding transcripts by means of a sensitive differential hybridization approach |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD4A | Correction of name of patent owner | ||
PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20090714 |