RU2104702C1 - Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, фармакологическая композиция и ее применение - Google Patents
Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, фармакологическая композиция и ее применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2104702C1 RU2104702C1 RU96119997A RU96119997A RU2104702C1 RU 2104702 C1 RU2104702 C1 RU 2104702C1 RU 96119997 A RU96119997 A RU 96119997A RU 96119997 A RU96119997 A RU 96119997A RU 2104702 C1 RU2104702 C1 RU 2104702C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- brain
- drug
- biologically active
- target product
- daltons
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 50
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 35
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 34
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 33
- 230000003925 brain function Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims description 31
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 title 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000010606 normalization Methods 0.000 claims abstract 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 15
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 9
- 230000011514 reflex Effects 0.000 claims description 9
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 7
- 230000002920 convulsive effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 67
- 230000007177 brain activity Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 2
- 230000002082 anti-convulsion Effects 0.000 abstract 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 64
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 33
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 26
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 13
- 230000009529 traumatic brain injury Effects 0.000 description 13
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 10
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 10
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 5
- CWRVKFFCRWGWCS-UHFFFAOYSA-N Pentrazole Chemical compound C1CCCCC2=NN=NN21 CWRVKFFCRWGWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001773 anti-convulsant effect Effects 0.000 description 5
- 206010008129 cerebral palsy Diseases 0.000 description 5
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 4
- 208000014094 Dystonic disease Diseases 0.000 description 4
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 208000010118 dystonia Diseases 0.000 description 4
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 4
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229960003965 antiepileptics Drugs 0.000 description 3
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 3
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 2
- NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N Valproic acid Chemical compound CCCC(C(O)=O)CCC NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 210000001557 animal structure Anatomy 0.000 description 2
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150092110 gfh1 gene Proteins 0.000 description 2
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 206010013033 Diplegia Diseases 0.000 description 1
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 1
- 206010019468 Hemiplegia Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000019430 Motor disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 208000006633 Tonic-Clonic Epilepsy Diseases 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- KRMDCWKBEZIMAB-UHFFFAOYSA-N amitriptyline Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2C(=CCCN(C)C)C2=CC=CC=C21 KRMDCWKBEZIMAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000836 amitriptyline Drugs 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N carbamazepine Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- DERZBLKQOCDDDZ-JLHYYAGUSA-N cinnarizine Chemical compound C1CN(C(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CCN1C\C=C\C1=CC=CC=C1 DERZBLKQOCDDDZ-JLHYYAGUSA-N 0.000 description 1
- PMGQWSIVQFOFOQ-YKVZVUFRSA-N clemastine fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.CN1CCC[C@@H]1CCO[C@@](C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PMGQWSIVQFOFOQ-YKVZVUFRSA-N 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002566 clonic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000001490 effect on brain Effects 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 210000004884 grey matter Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000001660 hyperkinetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 208000018879 impaired coordination Diseases 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000036630 mental development Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000001769 paralizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001936 parietal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001314 paroxysmal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- LJCNRYVRMXRIQR-UHFFFAOYSA-L potassium sodium tartrate Chemical compound [Na+].[K+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O LJCNRYVRMXRIQR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000272 proprioceptive effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000000862 serotonergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007727 signaling mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 description 1
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- -1 veroshpiron Chemical compound 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Способ позволяет подучить комплекс биологически активных полипептидов, которые нормализуют функции головного мозга. Ткань головного мозга замораживают при -40oC, измельчают, экстрагируют раствором уксусной кислоты, содержащей хлористый цинк, 30-48 ч при 10-15oC обрабатывают ацетоном, после высушивания надосадка порошок растворяют в дистиллированной воде pH 5,5-6,5 при 18-22o, удаляют вещества с мол. м. более 15000 Да. Фармакологическое средство, содержащее в качестве активного начала выделенный целевой продукт в виде комплекса биологически активных полипептидов с мол. м. от 500 до 15000 Да и изоэлектрической точкой 3,5-9,5, предлагается использовать в медицинской практике для нормализации функций головного мозга. Способ нормализации функций головного мозга, проявляющийся в снятии синдрома противосудорожной активности и восстановлении нарушенной рефлекторной деятельности мозга, включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества фармакологического средства. 3 с. и 2 з.п. ф-лы, 5 табл.
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается выделения биологически активных веществ из органов животных. Выделенный целевой продукт может использоваться в медицине как фармакологическое средство, способное нормализовывать функции головного мозга у субъекта, нуждающегося в этом (млекопитающее, например человек, домашние животные и скот, имеющие одно или более клиническое проявление нарушения функции головного мозга).
Известен способ получения препарата [1], обладающего восстанавливающей активностью при нарушении функции головного мозга, который позволяет выделить из коры головного мозга убойных животных биологически активные полипептиды щелочной природы.
Этот препарат получают путем обработки исходного сырья (ткань, содержащая серое вещество полушарий головного мозга) ацетоном при температуре от -10 до -4oC и соотношении ткани мозга и ацетона 1:5 в течение 18-30 ч, гомогенизации, экстрагирования гомогената 2-4%-ным раствором уксусной кислоты в течение 48-72 ч при pH=3,5-4,5 в присутствии хлористого цинка в концентрации 0,6-1,2 г/л и при соотношении гомогената и раствора уксусной кислоты 1: (8-4), центрифугирования, осаждения биологически активных веществ ацетоном при температуре от -3 до -5oC и соотношении супернатанта и ацетона 1:(7-5) и ионообменной хроматографии полученного осадка на катионите "Биокарб". В результате ионообменной хроматографии получают фракцию, содержащую щелочные полипептиды, которые обладают стимулирующим (или восстанавливающим при снижении активности мозга) действием на клетки коры головного мозга.
Однако описанный известный способ не позволяет извлечь из коры головного мозга кислые и нейтральные полипептиды и получить биологически активные вещества, обладающие другим действием (например, противосудорожной активностью).
Известно вещество [2], обладающее активностью предупреждать и улучшать расстройство функции головного мозга. Однако указанное вещество получают из альбумина, а не из ткани головного мозга, поэтому оно не содержит природных регуляторов нервных клеток и, следовательно, обладают узким спектром биологической активности, а именно нормализует функции головного мозга, нарушенные недостатком кислорода в крови.
Известно применение в терапии церебрального эндогенного фактора [3], который может быть получен экстракцией коры головного мозга с фильтрацией на фракции геля 10000-100 дальтон, хроматографической очисткой, представляющего собой пептид мол. м. 3500 дальтон с рК 5, что обуславливает его узкую биологическую активность, а именно серотонинергическую.
Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, состоит в расширении видов и повышении биологической активности целевого продукта, полученного путем выделения из коры больших полушарий головного мозга животных комплекса, содержащего, помимо щелочных, биологически активные кислые и нейтральные полипептиды, а также в создании фармакологического средства, содержащего в качестве активного начала целевой продукт, полученный заявляемым способом, и оказывающего нормализующее действие на функции головного мозга субъекта, нуждающегося в этом.
Сущность заявляемого способа получения препарата состоит в том, что кору больших полушарий головного мозга убойных животных замораживают при t=- 40oC с последующим хранением при t от -20 до -22oC. Сырье подвергают гомогенизации, экстракции гомогената раствором уксусной кислоты при t = 10-15oC в течение 30-48 ч 2-4%-ным раствором уксусной кислоты при pH=3,2-3,8 в присутствии хлористого цинка в концентрации 0,6- 1,2 г/л при соотношении гомогената и раствора уксусной кислоты 1:(8-4). Для отделения нерастворимых компонентов проводят фильтрацию.
После фильтрации жидкую фазу обрабатывают ацетоном при t = от -3 до -5oC и при соотношении экстракта и ацетона 1:(7-5). При этом образуется осадок в виде белых хлопьев. Полученный осадок промывают ацетоном и высушивают под воздушной тягой.
Полученный после осаждения и высушивания порошок дополнительно экстрагируют водой при pH= 5,5-6,5 в течение часа при t = 18-22oC. Нерастворимые компоненты удаляют из экстракта путем центрифугирования. Полученный раствор препарата подвергают мембранной ультрафильтрации и лиофилизируют фильтрат.
Следует отметить, что в заявляемый способ в отличие от известного введены такие приемы выделения целевого продукта, как замораживание сырья, очистка экстракта с помощью фильтрации, дополнительная водная экстракция субстрата, которые в совокупности с изложенными выше приемами позволяют извлечь, помимо щелочных, биологически активные кислые и нейтральные полипептиды. Введение мембранной ультрафильтрции для удаления высокомолекулярных веществ с мол. м. более 15000 дальтон дает возможность провести очистку целевого продукта от балластных компонентов.
Целевой продукт представляет собой лиофилизированный порошок белого или белого с желтоватым оттенком цвета и содержит комплекс биологически активных полипептидов. При добавлении растворителя препарат умеренно растворим в воде, 0,9%-ном растворе NaCl, 0,25-0,5%-ном растворе новокаина. Раствор препарата прозрачен. Цвет раствора не превышает эталон 56 (ГФХ1, с. 194-197).
Отсутствие в препарате высокомолекулярных белковых компонентов подтверждает то, что при добавлении к 1%-ному раствору препарата 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты раствор препарата остается прозрачным.
Для более подробной характеристики препарата, полученного по заявляемому способу, проведено изучение его состава, основных физико-химических свойств, токсичности и специфической биологической активности.
Для определения в препарате пептидных связей к его раствору добавляют биуретовый реактив. Окрашивание раствора в фиолетовый цвет свидетельствует об имеющихся в препарате пептидных связях.
С целью определения в препарате полипептидов и их фракций использовали методы ультрафиолетовой спектрофотометрии, гель-хроматографии, изоэлектрического фокусирования и их модификации.
Ультрафиолетовый спектр раствора препарата в вводе снимали в области длин волн от 250 до 350 нм с максимумом поглощения при 270±5 нм.
Методом изоэлектрического фокусирования показано, что в состав препарата, полученного заявляемым способом, входят полипептиды с изоэлектрической точкой pI 3,5-9,5, что существенно отличает его от препарата, получаемого известным способом и содержащим только щелочные полипептиды с pI 6,5-9,5.
Методом гель-хроматографии установлено, что препарат, полученный по заявляемому способу, может быть разделен на 3 фракции (А, Б и В), содержащие полипептиды с мол. м. от 500 до 15000 дальтон. В тех же условиях препарат, полученный известным способом и содержащий только щелочные полипептиды, может быть разделен на 2 фракции (Б и В) с мол. м. компонентов от 2000 до 6000 дальтон. В табл. 1 приведена сравнительная характеристика препаратов, полученных заявляемым способом и известным, по данным изоэлектрического фокусирования и гель-хроматографии.
Таким образом, по результатам изучения состава и основных физико-химических свойств установлено, что препарат, полученный по заявляемому способу, содержит в своем составе преимущественно (от 70 до 95%) кислые и нейтральные полипептиды с мол. м. от 500 до 15000 дальтон и pI 3,5-6,5, в то время как препарат, полученный известным способом [1], содержит в своем составе преимущественно щелочные полипептиды с мол. м. от 2000 до 6000 дальтон и рI 6,5-9,5.
Согласно изобретению фармакологическое средство для нормализации функций головного мозга содержит в качестве активного начала эффективное количество целевого продукта, полученного указанным способом и представляющего собой комплекс биологически активных полипептидов с мол. м. от 500 до 15000 дальтон и фармацевтически приемлемый компонент. При этом в качестве фармацевтически приемлемого компонента предлагается использовать, например, 0,9%-ный раствор NaCl.
Во время проведения сравнительных исследований in vivo на экспериментальных моделях были обнаружены новые терапевтические эффекты препарата, полученного заявляемым способом, такие как способность купировать судорожный синдром, восстанавливать нарушенную рефлекторную деятельность мозга, память и координацию движений.
Согласно изобретению способ нормализации функций головного мозга заключается в купировании судорожного синдрома, восстановлении нарушенной рефлекторной деятельности мозга, памяти и координации движений посредством введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества фармакологического средства, включающего в себя в качестве активного начала целевой продукт, полученный указанным способом и представляющий собой комплекс биологически активных полипептидов с мол. м. от 500 до 15000 дальтон и фармацевтически приемлемый носитель. Фармакологическое средство целесообразно применять в дозах от 0,1 до 1,0 мг на 1 кг массы тела в течение 10-40 дней в зависимости от характера течения и тяжести заболевания.
Изобретение иллюстрируется примерами конкретного выполнения способа получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов (пример 1) и испытания биологической активности продукта, полученного заявляемым способом (примеры 2, 3), примерами результатов клинического изучения препарата, демонстрирующими его фармакологические свойства и подтверждающими возможность достижения лечебного эффекта (примеры 4,5), а также табл. 1-5.
Пример 1. Исходное количество головного мозга 1 кг. Ткань мозга очищают от сгустков крови, жировой клетчатки, промывают водой и замораживают при t = -40oC и хранят при t=-22oC. Сырье подвергают гомогенизации и проводят экстракцию 3%-ным раствором уксусной кислоты (pH=3,6),содержащей хлористый цинк в концентрации 1,2 г/л, при t=15oC в течение 48 ч, при массовом соотношении измельченной массы и раствора уксусной кислоты 1:6. Экстракт охлаждают до t= 5oC и отделяют осадок. Фильтрат обрабатывают ацетоном при t= -5oC и массовом соотношении супернатанта и ацетона 1:5. Полученный осадок промывают ацетоном при t=0oC и массовом соотношении 1:3, затем сушат при t=35oC в течение 4 ч. После чего порошок растворяют в 100 мл дистиллированной воды (pH=6,5) в течение 1 ч при t = 22oC, отделяют осадок. Фильтрат очищают от высокомолекулярных белков с молекулярной массой более 15000 Да методом ультрафильтрации на мембранах. В очищенный раствор объемом 40 мл добавляют наполнитель NaCl в количестве 360 мг. Стерилизуют и лиофилизируют фильтрат.
Целевой продукт представляет собой порошок (в количестве 760-800 мг) белого или белого с желтоватым оттенком цвета. Цвет 1%-ного раствора препарата не превышает эталон 56 (ГФХ1).
Тестирование на отсутствие высокомолекулярных белковых компонентов осуществляют путем добавления к 1%ному раствору препарата 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Прозрачность раствора свидетельствует об отсутствии высокомолекулярных белковых компонентов.
Для определения в препарате пептидных связей к 1 мл 1%-ного раствора препарата добавляют биуретовый реактив в количестве 4 мл. Окрашивание раствора в фиолетовый цвет свидетельствует об имеющихся в препарате полипептидных связях. Для приготовления биуретового реактива 0,75 г меди сульфата и 3,0 л натрия (калия) виннокислого растворяют в 250 мл. воды. К полученному раствору добавляют 150 мл 10%-ного раствора NaOH и 1 г калия иодида. Затем объем раствора доводят водой до 1000 мл.
Идентификацию препарата проводят с помощью ультрафиолетовой спектрофотометрии. Содержимое 5 флаконов (в одном флаконе вместимостью 5 мл содержится 10 мг биологически активного вещества) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора до водной метки. На спектрофотометре снимают УФ-спектр раствора препарата в воде, который дает максимум поглощения при 273 нм.
Для характеристики компонентов препарата, полученного заявляемым способом, по заряду и изоэлектрическим точкам (рI) проводят исследование методом изоэлектрического фокусирования. Для этого препарат растворяют в 8 М мочевине, содержащей 3% NP-40 и 10% бета-меркаптоэтанола и наносят в концентрации 50 мг/мл на пластину Ampholine PAG plate с диапазоном pH 3,5-9,5. Фракционирование препарата проводят на приборе "Multiphor" (LKB, Швеция) в течение 12 ч при напряжении 200 В и t=3oC. Далее гель окрашивают кумасси ярко-синим R-250 и денситометрируют при длине волны 600 нм. Исследование методом изоэлектрического фокусирования показывает, что в состав препарата, полученного заявляемым способом, входят полипептиды с pI от 3,5 до 9,5.
Молекулярную массу полипептидов, входящих в препарат, определяют методом гель-хроматографии на сефадексах G-25 и G-50 ("Pharmacia", Швеция). Для калибровки колонки 1,6 60 см используют Peptide Molecuar Weight Kit MS III ("Serva", Германия). Установлено, что препарат, полученный заявляемым способом, методом гель-хроматографии может быть разделен на 3 фракции, содержащие полипептиды с мол. м. от 500 до 15000 дальтон. Результаты изучения состава, физико-химических свойств препарата приведены в табл. 2.
Изучение возможного токсического влияния на организм препарата, полученного заявляемым способом, проводилось в соответствии с "Требованиями к доклиническому изучению обще- токсического действия новых фармакологических веществ", 1984 г (изданы Управлением по внедрению новых лекарственных препаратов и медицинской техники МЗ СССР).
Цель изучения состояла в определении переносимых токсических доз препарата, оценке степени и характера патологических изменений в различных органах и системах организма и выявлении зависимости токсических эффектов от дозы и длительности применения препарата.
Изучение "острой" токсичности препарата, полученного заявляемым способом, было проведено при однократном введении его животным по методу Кербера. Исследование выполнено на 96 мышах-самцах массой 20-22 г. Животные были разделены на 8 групп по 12 мышей в каждой. Препарат растворяли в стерильном 0,9%-ном растворе NaCl и вводили внутримышечно в дозах 700-1500 мг/кг. Наблюдение за животными вели в течение 14 суток. ЛД50 рассчитывали с помощью графика зависимости гибели животных от вводимой дозы препарата.
В результате проведенного исследования установлено, что ЛД50 для белых беспородных мышей при однократном введении препарата составляет 992±27,2 мг/кг. Необходимо отметить, что ДЛ50 препарата для мышей превышает предполагаемую однократную терапевтическую дозу (0,01-0,1 мг/кг) в среднем в 10000 раз.
"Хроническую" токсичность препарата, полученного заявляемым способом, изучали при повторном и длительном введении его крысам и кроликам. Животным ежедневно вводили внутримышечно препарат в дозе 1,0 мг/кг в течение 6 мес. Оценивали общее состояние животного, состав и свойства периферической крови, функции сердечно-сосудистой системы, печени, поджелудочной железы, почек и надпочечников. Часть животных подвергали патоморфологическому исследованию с целью оценки состояния различных отделов головного и спинного мозга, сердца, аорты, легких, печени, почек, органов эндокринной и иммунной систем.
При изучении "хронической" токсичности препарата, полученного заявляемым способом в дозе, которая в 10-100 раз превышала предполагаемую терапевтическую дозу, было установлено, что общее состояние животных, двигательная активность, а также основные функции изученных органов и систем находились в пределах физиологической нормы.
При патоморфологическом исследовании различных органов животных также не было обнаружено патологических изменений. Следовательно, препарат, полученный заявляемым способом, при длительном введении животным не обладает токсическими свойствами, препятствующими дальнейшему его применению в качестве лекарственного средства.
Для изучения биологической активности препарата, полученного заявляемым способом и известным, использовали экспериментальные модели, позволяющие оценить способность биологически активных веществ восстанавливать нарушенные функции головного мозга после черепно-мозговой травмы (пример 2) и нормализовывать его функции, в частности оказывать противосудорожное действие путем модуляции медиаторных систем нервных клеток (пример 3).
Пример 2. В первой модели у белых крыс вызывали тяжелую компрессионную черепно-мозговую травму с помощью падающего с определенной высоты на теменную область мозга свинцового груза. Для дальнейшей работы отбирали животных с симптомо-комплексом тяжелой черепно-мозговой травмы, который характеризовался судорогами длительностью 20-30 с и более, отсутствием корнеального рефлекса в течение 2-5 мин, нарушением ритма дыхания (типа Чейн-Стокса), ослаблением проприоцептивной чувствительности и другими признаками данной патологии. В течение последующих 4-6 недель у крыс с черепно-мозговой травмой наблюдали астенизацию, снижение двигательной активности, мышечного тонуса, нарушение координации, способности к обучению и воспроизведению информации и т. д. Контрольная группа животных получала инъекции 0.9%-ного раствора NaCl. Препараты, полученные заявляемым способом и известным, растворяли в 0.9%-ном растворе NaCl и вводили крысам подкожно через 1, 24, 72, 96 и 120 ч после травмы в дозах 0,1 и 1,0 мг/кг. Биологическую активность препаратов оценивали в тестах плавания с нагрузкой, открытого поля, вращающегося стержня и выработки оборонительного условного рефлекса в Y-образной камере.
Результаты изучения биологической активности препаратов из головного мозга приведены в табл. 3 и 4. Установлено, что тяжелая черепно-мозговая травма приводит к резкому нарушению у животных рефлекторной деятельности мозга, восприятия и переработки информации, памяти, поведенческих реакций, способности к обучению, координации движений и других функций. Это связано с повреждением и гибелью различных популяций нейронов в коре головного мозга. Восстановление функций головного мозга после черепно-мозговой травмы происходит медленно, а остаточные явления могут сохраняться в течение всей последующей жизни.
Выявлено отчетливое положительное влияние препарата, полученного заявляемым способом, на координацию движений и мышечный тонус животных через 48 ч после травмы. Время удержания крыс на стержне при скорости его вращения 3 об/мин достоверно превышало контрольные показатели, что наглядно представлено в табл. 3. Животные контрольной группы практически не могли удержаться на стержне при скорости его вращения 6 и 12 об/мин. В то же время крысы, которым вводили препараты, могли некоторое время удерживаться на стержне как при скорости его вращения 6 об/мин, так и 12 об/мин. Причем в данной экспериментальной модели эффективность препарата, полученного заявляемым способом, содержащего кислые и нейтральные полипептиды, превосходила действие препарата, полученного известным способом, содержащего только щелочные полипептиды, и проявлялось в дозе 0,1 мг/кг. Препарат, полученный известным способом, в этой же дозе был практически не активен.
Таким образом, введение препарата, полученного заявляемым способом из коры головного мозга, в раннем периоде после тяжелой черепно-мозговой травмы способствует восстановлению координации движений и мышечного тонуса у животных.
Результаты оценки способности крыс к обучению и скорости выработки у них оборонительного рефлекса после тяжелой черепно-мозговой травмы приведены в табл. 4.
Установлено, что после травмы значительно снижалась способность животных к обучению. При этом среди крыс, которым вводили препараты из коры головного мозга, число животных, отказывающихся от обучения, было значительно меньше, чем в контроле. У крыс, способных к обучению, после введения препаратов было выявлено достоверное уменьшение показателей количества сочетаний раздражителей до критерия обученности и времени выработки оборонительного рефлекса. Однако у крыс, получавших препарат, полученный заявляемым способом и содержащий кислые и нейтральные полипептиды, все показатели обучаемости были лучше, чем у животных, которым вводили препарат, полученный известным способом и содержащий только щелочные полипептиды.
Таким образом, применение препарата, полученного заявляемым способом, для восстановления функций головного мозга после черепно-мозговой травмы приводит к значительному улучшению способности животных к обучению и воспроизведению рефлекторного навыка, нормализации мышечного тонуса и координации движений. Ускоренное восстановление функций и поведенческих реакций в раннем посттравматическом периоде свидетельствует о том, что препарат активизирует репаративные процессы в головном мозге, что важно для сокращения сроков реабилитации организма и восстановления функций центральной нервной системы после тяжелой черепно-мозговой травмы. Следовательно, препарат может быть применен у пострадавших с целью снижения ранней посттравматической смертности, числа возможных осложнений, а также сокращения сроков лечения.
Пример 3. Оценку противосудорожной активности препарата, полученного заявляемым способом, проводили с использованием теста метразоловых судорог, который служит классической моделью для проверки активности противосудорожных средств. Для воспроизведения экспериментальной модели мышам вводят внутрибрюшинно метразол (син. коразол) в дозе 150 мг/кг. При этом у животных возникают тонико-клонические судороги, механизм развития которых связан с возбуждающим действием метразола на двигательные центры головного мозга. Оно опосредуется различными медиаторными системами мозга, в том числе зависимыми ГАМК. Поэтому антиметразоловое действие лекарственных препаратов свидетельствует о транквилизирующих свойствах и возможном вовлечении ГАМК-зависимых механизмов передачи сигналов.
Для изучения биологической активности препаратов, полученных заявляемым способом и известным, использовали 54 беспородных белых мыши массой 20-23 г. Первой группе животных (контрольной) вводили 0,9%-ный раствор NaCl. Второй группе животных вводили внутрибрюшинно препарат, полученный заявляемым способом, в дозе 1,0 мг/кг за 1 ч до введения метразола. Третьей группе животных вводили по аналогичной схеме препарат, полученный известным способом и содержащий только щелочные полипептиды. У мышей регистрировали суммарную продолжительность судорожных периодов и выживаемость. Результаты исследования приведены в табл. 5.
Как следует из таблицы, препарат, полученный заявляемым способом, обладает выраженным противосудорожным действием, вызывает укорочение клонической фазы судорожного припадка и достоверно защищает животных от гибели. Препарат, полученный известным способом и содержащий только щелочные полипептиды, практически не обладает противосудорожной активностью.
Следовательно, нормализующее действие препарата, полученного заявляемым способом, на двигательные нервные центры связано с присутствием в этом препарате кислых и нейтральных полипептидов, отличающихся по физико-химическим и биологическим свойствам от щелочных полипептидов.
Таким образом препарат, полученный заявляемым способом, не токсичен, обладает нормализующим действием в отношении функций головного мозга.
Выявленные в результате экспериментального доклинического исследования новые свойства препарата позволяют считать показанным его применение при ряде заболеваний головного мозга.
Приведенные ниже примеры клинического применения препарата подтверждают возможность его терапевтического применения с достижением лечебного эффекта.
Пример 4. Исследование эффективности препарата при последствиях черепно-мозговой травмы (далее ЧМТ), эпилепсии, вегетососудистой дистонии, мигренозной и невротической цефалгии.
Проведено первичное открытое сравнительное испытание препарата в рамках одной клиники при последствиях ЧМТ, эпилепсии, вегетососудистой дистонии, мигренозной и невротической цефалгии. Терапию исследуемым препаратом проводили курсами внутримышечных инъекций по 10 мг ежедневно в течение 10 дней.
Обследовано 96 больных с последствиями ЧМТ разной степени выраженности, 50 больных эпилепсией и 30 детей школьного возраста с явлениями вегетососудистой дистонии и головными болями мигренозного и невротического характера.
При последствиях ЧМТ препарат нормализовывал биоэлектрическую активность головного мозга, повышал концентрацию и устойчивость внимания, улучшал память и устранял явления церебральной астении. Значительный положительный клинический эффект препарата наблюдался в 76% случаев, в то время как традиционная терапия, проводимая в группе сравнения (церебролизин, амитриптилин, конвулекс, тавегил, верошпирон, стугерон) была эффективна лишь у 40% пациентов.
При эпилепсии препарат устранял патологические типы электроэнцефалограмм, пароксизмальную активность, повышал альфа-индекс, что приводило к значительному уменьшению частоты припадков, не купируемых ранее длительными приемами финлепсина и конвулекса.
При вегетососудистой дистонии, мигренозной и невротической цефалгии после курса лечения препаратом у пациентов наблюдалось уменьшение головных болей, улучшение эмоционального фона, памяти и внимания, устранялась судорожная готовность мозга.
Препарат не вызывал побочных эффектов, осложнений и лекарственной зависимости.
Исследование эффективности препарата при паралитических синдромах (детский церебральный паралич).
Проведено клиническое исследование эффективности препарата при детском церебральном параличе (ДЦП). В исследование было включено 89 детей, имеющих клиническое проявление одного из синдромов, характерных для ДЦП (диплегия, гемиплегия, тетрапарез, гиперкинетический и атонический синдромы).
Лечение препаратом проводили в виде трех последовательных курсов внутримышечных инъекций (10-100 мг/курс в зависимости от массы тела) с интервалом 1-3 мес. Наблюдались следующие клинические проявления позитивного терапевтического действия препарата: уменьшение проявлений двигательных расстройств (74% пациентов), улучшение умственного развития (65%) и купирование судорожного синдрома (41%). Клинические данные подтверждены ЭЭГ и свидетельствуют об эффективности препарата при детском церебральном параличе.
Источники информации:
1. Патент РФ N 1298979, кл. A 61 K 35/50, 1993 г.
1. Патент РФ N 1298979, кл. A 61 K 35/50, 1993 г.
2. Патент США N 4067963, кл. A 61 K 35/12, 1978.
3. Патент Франции N 2657784, кл. A 61 K 37/02, 1991.
Claims (5)
1. Способ получения комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, путем гомогенизации ткани головного мозга животного, экстракции раствором уксусной кислоты, содержащей хлористый цинк, отделения осадка, обработки надосадочной жидкости ацетоном, промывки образовавшегося осадка ацетоном, высушивании с последующей очисткой, стерилизации и лиофилизации целевого продукта, отличающийся тем, что ткань мозга перед гомогенизацией замораживают при 40oС, экстракцию проводят при 10 15oС в течение 30 48 ч, после высушивания порошок растворяют в дистиллированной воде при 18 22oС и рН 5,5 6,5, отделяют осадок, после чего с помощью фильтрования на ультрамембранах удаляют высокомолекулярные вещества с мол. м. более 15000 Дальтон.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что целевой продукт в УФ-спектре имеет полосы с максимумом поглощения 270 ± 5 нм.
3. Способ получения вещества по п.1, отличающийся тем, что целевой продукт содержит кислые, нейтральные и щелочные пептиды с мол. м. 500 15000 Дальтон и изоэлектрической точкой 3,5 oC 9,5.
4. Фармакологическое средство для нормализации функций головного мозга, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый носитель, отличающееся тем, что в качестве активного начала содержит в эффективном количестве целевой продукт, полученный способом по п.1 и представляющий собой комплекс биологически активных полипептидов с мол. м. 500 15 000 Дальтон и изоэлектрической точкой 3,5 9,5.
5. Способ нормализации функций головного мозга, заключающийся в купировании судорожного синдрома, восстановления нарушенной рефлекторной деятельности мозга, памяти, координации движений путем введения субъекту терапевтически эффективного количества фармакологического средства, отличающийся тем, что в качестве фармакологического средства используют целевой продукт, полученный способом по п.1 и представляющий собой комплекс биологически активных полипептидов с мол. м. 500 15000 Дальтон и изоэлектрической точкой 3,5 9,5.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96119997A RU2104702C1 (ru) | 1996-10-16 | 1996-10-16 | Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, фармакологическая композиция и ее применение |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96119997A RU2104702C1 (ru) | 1996-10-16 | 1996-10-16 | Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, фармакологическая композиция и ее применение |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2104702C1 true RU2104702C1 (ru) | 1998-02-20 |
| RU96119997A RU96119997A (ru) | 1998-05-10 |
Family
ID=20186299
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96119997A RU2104702C1 (ru) | 1996-10-16 | 1996-10-16 | Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, фармакологическая композиция и ее применение |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2104702C1 (ru) |
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2147888C1 (ru) * | 1998-02-24 | 2000-04-27 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Способ получения гидролизата мозговой ткани |
| RU2151605C1 (ru) * | 1997-12-03 | 2000-06-27 | Александр Николаевич Макаренко | Средство "церебрал" для лечения инсульта и способ его получения |
| RU2220732C2 (ru) * | 2001-11-01 | 2004-01-10 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Средство, нормализующее функцию почек, и способ его получения |
| RU2275924C2 (ru) * | 2004-08-04 | 2006-05-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Герофарм" | Способ получения комплекса биологически активных полипептидов для нормализации функций головного мозга и фармацевтическое средство на его основе |
| RU2290936C1 (ru) * | 2006-01-31 | 2007-01-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Способ получения средства для поддерживающей терапии, обладающего тканеспецифической активностью |
| RU2302871C1 (ru) * | 2006-06-22 | 2007-07-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Средство, нормализующее функции головного мозга, и способ его получения |
| EA010722B1 (ru) * | 2006-06-22 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Средство, нормализующее тонус мочевого пузыря, и способ его получения |
| RU2368383C1 (ru) * | 2008-02-12 | 2009-09-27 | Андрей Борисович Лисицын | Продукт диетического питания "прометей", обладающий восстановительным нейрореабилитационным действием у пациентов в отдаленном периоде перенесенных острых цереброваскулярных заболеваний и травматических повреждений центральной нервной системы |
| RU2385651C2 (ru) * | 2008-06-10 | 2010-04-10 | Андрей Борисович Лисицын | Функциональный мясной продукт и способ его получения |
| RU2415676C1 (ru) * | 2009-12-09 | 2011-04-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гармония" | Способ получения средства, обладающего тканеспецифической активностью, и средство, полученное данным способом (варианты) |
| RU2428196C1 (ru) * | 2010-07-01 | 2011-09-10 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ получения биологически активного комплекса и биологически активный белково-полипептидный комплекс |
| WO2012002840A1 (ru) | 2010-07-01 | 2012-01-05 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения заболеваний центральной и периферической нервной системы сосудистого, травматического, токсического, гипоксического и аутоиммунного генеза |
| WO2012087180A1 (ru) | 2010-12-24 | 2012-06-28 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ лечения острого нарушения мозгового и спинального кровообращения ишемического и геморрагического характера |
| WO2012166004A1 (ru) | 2011-05-30 | 2012-12-06 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс специфического действия на нервную систему, способ его получения и фармкомпозиция на его основе |
| RU2501808C1 (ru) * | 2009-12-28 | 2013-12-20 | Калпис Ко., Лтд. | Композиция для улучшения функции мозга и способ улучшения функции мозга |
| RU2751331C1 (ru) * | 2020-01-30 | 2021-07-13 | Александр Александрович Сидякин | Лекарственный препарат для лечения нарушений мозгового кровообращения и восстановления утраченных функций мозга |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4067963A (en) * | 1974-01-07 | 1978-01-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Substance acting to prevent and improve cerebral function disorder and process for preparing the same |
| FR2657784A1 (fr) * | 1990-02-05 | 1991-08-09 | Pasteur Institut | Facteur endogene cerebral, procede d'obtention et applications therapeutiques et diagnostiques. |
| FR2624019B1 (fr) * | 1987-12-11 | 1991-09-06 | Peda G Le | Preparation pour la regulation physiologique du systeme neuro-endocrinien, la stimulation de l'immunite, et l'inhibition de la croissance des tumeurs hormono-dependantes, et procede d'obtention de cette preparation. |
-
1996
- 1996-10-16 RU RU96119997A patent/RU2104702C1/ru active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4067963A (en) * | 1974-01-07 | 1978-01-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Substance acting to prevent and improve cerebral function disorder and process for preparing the same |
| FR2624019B1 (fr) * | 1987-12-11 | 1991-09-06 | Peda G Le | Preparation pour la regulation physiologique du systeme neuro-endocrinien, la stimulation de l'immunite, et l'inhibition de la croissance des tumeurs hormono-dependantes, et procede d'obtention de cette preparation. |
| FR2657784A1 (fr) * | 1990-02-05 | 1991-08-09 | Pasteur Institut | Facteur endogene cerebral, procede d'obtention et applications therapeutiques et diagnostiques. |
Cited By (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2151605C1 (ru) * | 1997-12-03 | 2000-06-27 | Александр Николаевич Макаренко | Средство "церебрал" для лечения инсульта и способ его получения |
| RU2147888C1 (ru) * | 1998-02-24 | 2000-04-27 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Способ получения гидролизата мозговой ткани |
| RU2220732C2 (ru) * | 2001-11-01 | 2004-01-10 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Средство, нормализующее функцию почек, и способ его получения |
| RU2275924C2 (ru) * | 2004-08-04 | 2006-05-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Герофарм" | Способ получения комплекса биологически активных полипептидов для нормализации функций головного мозга и фармацевтическое средство на его основе |
| RU2290936C1 (ru) * | 2006-01-31 | 2007-01-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Способ получения средства для поддерживающей терапии, обладающего тканеспецифической активностью |
| EA010720B1 (ru) * | 2006-01-31 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гармония" | Способ получения средства для поддерживающей терапии, обладающего тканеспецифической активностью, и средство, полученное данным способом (варианты) |
| RU2302871C1 (ru) * | 2006-06-22 | 2007-07-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Средство, нормализующее функции головного мозга, и способ его получения |
| EA010739B1 (ru) * | 2006-06-22 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Средство, нормализующее функции головного мозга, и способ его получения |
| EA010722B1 (ru) * | 2006-06-22 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Средство, нормализующее тонус мочевого пузыря, и способ его получения |
| RU2368383C1 (ru) * | 2008-02-12 | 2009-09-27 | Андрей Борисович Лисицын | Продукт диетического питания "прометей", обладающий восстановительным нейрореабилитационным действием у пациентов в отдаленном периоде перенесенных острых цереброваскулярных заболеваний и травматических повреждений центральной нервной системы |
| RU2385651C2 (ru) * | 2008-06-10 | 2010-04-10 | Андрей Борисович Лисицын | Функциональный мясной продукт и способ его получения |
| RU2415676C1 (ru) * | 2009-12-09 | 2011-04-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гармония" | Способ получения средства, обладающего тканеспецифической активностью, и средство, полученное данным способом (варианты) |
| RU2501808C1 (ru) * | 2009-12-28 | 2013-12-20 | Калпис Ко., Лтд. | Композиция для улучшения функции мозга и способ улучшения функции мозга |
| RU2428196C1 (ru) * | 2010-07-01 | 2011-09-10 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ получения биологически активного комплекса и биологически активный белково-полипептидный комплекс |
| WO2012002840A1 (ru) | 2010-07-01 | 2012-01-05 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения заболеваний центральной и периферической нервной системы сосудистого, травматического, токсического, гипоксического и аутоиммунного генеза |
| WO2012002837A1 (ru) | 2010-07-01 | 2012-01-05 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ получения биологически активного комплекса и биологически активный белково-полипептидный комплекс |
| RU2445106C1 (ru) * | 2010-07-01 | 2012-03-20 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения заболеваний центральной и периферической нервной системы сосудистого, травматического, токсического, гипоксического и аутоиммунного генеза |
| EA024733B1 (ru) * | 2010-07-01 | 2016-10-31 | Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Биологически активный белково-полипептидный комплекс, стимулирующий регенерацию нервной ткани, и способ его получения |
| EA024732B1 (ru) * | 2010-07-01 | 2016-10-31 | Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения заболеваний центральной и периферической нервной системы сосудистого, травматического, токсического, гипоксического и аутоиммунного генеза |
| WO2012087180A1 (ru) | 2010-12-24 | 2012-06-28 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ лечения острого нарушения мозгового и спинального кровообращения ишемического и геморрагического характера |
| WO2012166004A1 (ru) | 2011-05-30 | 2012-12-06 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс специфического действия на нервную систему, способ его получения и фармкомпозиция на его основе |
| RU2485132C2 (ru) * | 2011-05-30 | 2013-06-20 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс, обладающий антигипоксическим, тканеспецифическим репаративным действием на центральную и периферическую нервную систему, способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе |
| RU2751331C1 (ru) * | 2020-01-30 | 2021-07-13 | Александр Александрович Сидякин | Лекарственный препарат для лечения нарушений мозгового кровообращения и восстановления утраченных функций мозга |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2104702C1 (ru) | Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, нормализующих функции головного мозга, фармакологическая композиция и ее применение | |
| RU2266129C2 (ru) | Способ воздействия на нейродегенеративное нарушение или нарушение миелинизации | |
| RU2155063C1 (ru) | Тетрапептид, стимулирующий функциональную активность нейронов, фармакологическое средство на его основе и способ его применения | |
| DE69030956T2 (de) | Inhibierung des Transformierenden Wachstumsfaktors zur Verhinderung der Anhäufung Extrazellulärer Matrix | |
| KR100189144B1 (ko) | 신규 생리 활성 물질 | |
| WO2009088314A1 (ru) | Способ получения биологически активного комплекса, обладающего нейрорегенеративным и нейропротекторным действием | |
| JPS60258120A (ja) | 胸腺製品の製造方法 | |
| RU2275924C2 (ru) | Способ получения комплекса биологически активных полипептидов для нормализации функций головного мозга и фармацевтическое средство на его основе | |
| JPS6241567B2 (ru) | ||
| WO2004067549A2 (de) | Peptide gegen kälteunverträglichkeit hervorrufende autoantikörper und ihre verwendung | |
| US5070076A (en) | Thymus-gland preparation and method for producing same | |
| EP2730586B1 (en) | Protein-polypeptide complex obtained from tissues of hoofed livestock embryos, process for preparing same and pharmaceutical composition | |
| EP2024388B1 (en) | Peptide substance stimulating regeneration of central nervous system neurons, pharmaceutical composition on its base, and the method of its application | |
| RU2163129C1 (ru) | Способ получения из животного сырья комплекса биологически активных полипептидов, обладающих антиоксидантным и геропротекторным действием, фармакологическое средство и способ его применения | |
| DE60036638T2 (de) | Verwendung von colostrinin, dessen peptidbestandteile und deren analoga zur förderung der neuronalen zelldifferenzierung | |
| KR101920152B1 (ko) | 면역증진 효과가 있는 녹용약침 및 이의 조제방법 | |
| RU2485132C2 (ru) | Белково-полипептидный комплекс, обладающий антигипоксическим, тканеспецифическим репаративным действием на центральную и периферическую нервную систему, способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе | |
| JPH05301896A (ja) | 繊維芽細胞増殖促進作用を有する胎盤由来蛋白加水分解物 | |
| RU2302871C1 (ru) | Средство, нормализующее функции головного мозга, и способ его получения | |
| AU725661B2 (en) | Antitumor agents isolated from intestinal mucosa, a method for their isolation and their application | |
| JPS6310601A (ja) | コンドロイチン硫酸誘導体 | |
| RU2771678C1 (ru) | Биологически активная субстанция и фармацевтическая композиция в виде стерильной водной дисперсии для конъюнктивального в виде капель и субъюнктивального, пара-, ретробульбарного инъекционного введения при проведении терапии сосудистых и дисметаболических офтальмологических заболеваний | |
| GB2213485A (en) | Brain derived peptide complex | |
| CN114272361A (zh) | 一种胶原蛋白分子单体皮肤涂敷液的组成和应用方法 | |
| RU2302237C2 (ru) | Способ получения биологически активной фракции s-1-10, фармацевтическая композиция, снижающая тремор при паркинсонизме и судорожную активность при эпилепсии |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20061017 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20080720 |
|
| QZ41 | Official registration of changes to a registered agreement (patent) |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20000221 Effective date: 20120627 |