RU2020113411A - Способы дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток - Google Patents
Способы дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2020113411A RU2020113411A RU2020113411A RU2020113411A RU2020113411A RU 2020113411 A RU2020113411 A RU 2020113411A RU 2020113411 A RU2020113411 A RU 2020113411A RU 2020113411 A RU2020113411 A RU 2020113411A RU 2020113411 A RU2020113411 A RU 2020113411A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mscs
- cells
- cells derived
- heparin
- tgfβ
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0663—Bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/115—Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/15—Transforming growth factor beta (TGF-β)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/90—Polysaccharides
- C12N2501/91—Heparin
Claims (15)
1. Способ получения клеток, происходящих из мезенхимальных стволовых клеток (МСК), из МСК, включающий приведение МСК в контакт in vitro или ex vivo с фактором роста фибробластов-2 (FGF-2), трансформирующим фактором роста бета (TGFβ) и гепарином или его производным или аналогом в концентрации по меньшей мере 0,01 МЕ/мл.
2. Способ по п. 1, включающий стадии: (а) культивирования МСК, выделенной из биологического образца субъекта, в среде, содержащей FGF-2, TGFβ и гепарин или его производное или аналог в концентрации по меньшей мере 0,01 МЕ/мл; (b) удаления неадгезивного материала и дальнейшего культивирования адгезивных клеток в среде, содержащей FGF-2, TGFβ и гепарин или его производное или аналог в концентрации по меньшей мере 0,01 МЕ/мл, с получением таким образом клеток, происходящих из МСК.
3. Способ по п. 1 или 2, где TGFβ выбран из группы, состоящей из TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3 и их смесей, предпочтительно, где TGFβ представляет собой TGFβ1.
4. Способ получения клеток, происходящих из МСК, с улучшенными трансплантационными свойствами из МСК, включающий стадию уменьшения размера, которая характеризуется приведением МСК или клеток, происходящих из МСК, в контакт in vitro или ex vivo с гепарином или его производным или аналогом в концентрации по меньшей мере 0,01 МЕ/мл.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где концентрация гепарина или его производного или аналога составляет по меньшей мере 0,05 МЕ/мл, предпочтительно приблизительно 0,1 МЕ/мл; и/или гепарин или его производное или аналог выбран из группы, состоящей из нефракционированного гепарина (UFH); низкомолекулярного гепарина (LMWH), такого как эноксапарин, дальтепарин, надропарин, тинзапарин, цертопарин, ревипарин, ардепарин, парнапарин, бемипарин или их смеси; гепариноида, такого как гепарансульфат, дерматансульфат, хондроитинсульфат, ахаран сульфат, кератансульфат или их смеси, такие как данапароид; соли гепарина; соли гепариноида; фрагмента гепарина; фрагмента гепариноида; и их смесей.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где по меньшей мере 60 % клеток, происходящих из МСК, в суспензии имеют диаметр, равный или менее 25 мкм (D60 ≤ 25 мкм), и где не более 5 % клеток, происходящих из МСК, в суспензии имеют диаметр более 35 мкм.
7. Способ по любому из пп. 1-6, где клетки, происходящие из МСК, принадлежат к остеохондробластной, предпочтительно к остеобластной линии.
8. Способ по любому из пп. 1-7, где МСК или клетки, происходящие из МСК, дополнительно приводят в контакт, например, когда среда дополнительно содержит одно или более из плазмы, сыворотки или их заменителя.
9. Способ получения клеток, происходящих из МСК, из МСК, включающий приведение МСК в контакт in vitro или ex vivo с FGF-2, TGFβ и гепарином или его производным или аналогом, причем по меньшей мере 60 % клеток, происходящих из МСК, в суспензии имеют диаметр, равный или менее 25 мкм (D60 ≤ 25 мкм), и где не более 5 % клеток, происходящих из МСК, в суспензии имеют диаметр более 35 мкм.
10. Способ по п. 9, где МСК приводят в контакт с гепарином или его производным или аналогом в концентрации по меньшей мере 0,01 МЕ/мл; и/или TGFβ выбран из группы, состоящей из TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3 и их смесей; предпочтительно, где TGFβ представляет собой TGFβ1.
11. Популяция клеток, происходящих из МСК, которые представляют собой клетки мезенхимальной линии, полученные путем дифференцировки МСК in vitro или ex vivo, причем по меньшей мере 60 % клеток, происходящих из МСК, в суспензии имеют диаметр, равный или менее 25 мкм (D60 ≤ 25 мкм), и где не более 5 % клеток, происходящих из МСК, в суспензии имеют диаметр более 35 мкм.
12. Популяция клеток, происходящих из МСК, по п. 11, где клетки, происходящие из МСК, могут быть получены способом, включающим приведение МСК в контакт in vitro или ex vivo с FGF-2, TGFβ и гепарином или его производным или аналогом, предпочтительно, где TGFβ выбран из группы, состоящей из TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3 и их смесей, более предпочтительно, где TGFβ представляет собой TGFβ1, предпочтительно, где МСК приводят в контакт с гепарином или его производным или аналогом в концентрации по меньшей мере 0,01 МЕ/мл, и необязательно МСК дополнительно приводят в контакт с одним или более из плазмы, сыворотки или их заменителя; и/или клетки, происходящие из МСК, принадлежат к остеохондробластной или остеобластной линии, предпочтительно, где по существу все клетки, происходящие из МСК, остеохондробластной или остеобластной линии являются положительными в отношении CD73, CD63 и CD166; по существу все клетки, происходящие из МСК, остеохондробластной или остеобластной линии являются отрицательными в отношении CD45; по меньшей мере 70 % клеток, происходящих из МСК, остеохондробластной или остеобластной линии являются положительными в отношении щелочной фосфатазы (ALP); и менее 10% клеток, происходящих из МСК, остеохондробластной или остеобластной линии являются положительными в отношении HLA-DR (человеческий лейкоцитарный антиген изотипа DR).
13. Фармацевтическая композиция, содержащая популяцию клеток, происходящих из МСК, как определено в п. 11 или 12.
14. Популяция клеток, происходящих из МСК, по п. 11 или 12, или фармацевтическая композиция по п. 13 для применения в качестве лекарственного средства, предпочтительно для применения в лечении субъекта, нуждающегося в трансплантации клеток, происходящих из МСК.
15. Популяция клеток, происходящих из МСК, для применения по п. 14, где популяция клеток, происходящих из МСК, присутствует в концентрации от приблизительно 1×107 клеток/мл до приблизительно 1×108 клеток/мл, предпочтительно, 7,5×107 клеток/мл; и/или популяция клеток, происходящих из МСК, или указанная фармацевтическая композиция пригодны для чрескожного или внутрисосудистого введения.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP17197605 | 2017-10-20 | ||
EP17197605.3 | 2017-10-20 | ||
PCT/EP2018/076030 WO2019076591A1 (en) | 2017-10-20 | 2018-09-25 | METHODS FOR DIFFERENCING MESENCHYMAL STEM CELLS |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2020113411A true RU2020113411A (ru) | 2021-11-22 |
RU2020113411A3 RU2020113411A3 (ru) | 2021-11-22 |
Family
ID=60153205
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020113411A RU2020113411A (ru) | 2017-10-20 | 2018-09-25 | Способы дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11447749B2 (ru) |
EP (1) | EP3697894A1 (ru) |
JP (1) | JP7039711B2 (ru) |
KR (1) | KR102185697B1 (ru) |
CN (1) | CN111247240A (ru) |
AU (1) | AU2018351804B2 (ru) |
BE (1) | BE1025935A9 (ru) |
BR (1) | BR112020007775A2 (ru) |
CA (1) | CA3079439C (ru) |
IL (1) | IL273987B (ru) |
RU (1) | RU2020113411A (ru) |
SG (1) | SG11202003524XA (ru) |
WO (1) | WO2019076591A1 (ru) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA3112636A1 (en) * | 2018-09-25 | 2020-04-02 | Bone Therapeutics Sa | Methods for differentiating mesenchymal stem cells |
CN113648417A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-11-16 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | Postn作为调控间充质干细胞分化能力的标志物及其应用 |
CN113355279A (zh) * | 2021-06-07 | 2021-09-07 | 深圳市中佳生物医疗科技有限公司 | 一种人韧带成纤维细胞的制备方法 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4764369A (en) | 1983-07-14 | 1988-08-16 | New York Blood Center Inc. | Undenatured virus-free biologically active protein derivatives |
US5811094A (en) | 1990-11-16 | 1998-09-22 | Osiris Therapeutics, Inc. | Connective tissue regeneration using human mesenchymal stem cell preparations |
US5837539A (en) | 1990-11-16 | 1998-11-17 | Osiris Therapeutics, Inc. | Monoclonal antibodies for human mesenchymal stem cells |
US5486359A (en) | 1990-11-16 | 1996-01-23 | Osiris Therapeutics, Inc. | Human mesenchymal stem cells |
US5972703A (en) | 1994-08-12 | 1999-10-26 | The Regents Of The University Of Michigan | Bone precursor cells: compositions and methods |
US5736396A (en) | 1995-01-24 | 1998-04-07 | Case Western Reserve University | Lineage-directed induction of human mesenchymal stem cell differentiation |
US5827740A (en) | 1996-07-30 | 1998-10-27 | Osiris Therapeutics, Inc. | Adipogenic differentiation of human mesenchymal stem cells |
US7687505B2 (en) * | 2002-01-14 | 2010-03-30 | Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Use of modified pyrimidine compounds to promote stem cell migration and proliferation |
KR20080109726A (ko) | 2006-02-16 | 2008-12-17 | 유니베르시테 리브레 드 브룩크젤즈 | 골수 줄기 세포(bmsc)의 골 분화 방법 및 이의 용도 |
WO2008129563A2 (en) * | 2007-04-23 | 2008-10-30 | Stempeutics Research Private Limited, | Human mesenchymal stem cells and preparation thereof |
US20100278788A1 (en) | 2008-01-11 | 2010-11-04 | Bone Therapeutics, S.A. | Osteogenic Differentiation Of Bone Marrow Stem Cells And Mesenchymal Stem Cells Using A Combination Of Growth Factors |
BR112014020119A2 (pt) | 2012-02-13 | 2020-10-27 | Gamida-Cell Ltd | cultura de células-tronco mesenquimais |
CN105142650B (zh) | 2013-01-12 | 2019-08-27 | 西斯卡治疗学有限公司 | 自体骨髓源性干细胞的快速输注 |
JP2017506511A (ja) * | 2014-02-14 | 2017-03-09 | ナショナル ユニバーシティー オブ アイルランド, ゴールウェイ | 無血清培地 |
JP6446222B2 (ja) * | 2014-09-30 | 2018-12-26 | 株式会社ジーシー | 軟骨分化培養液、及び軟骨組織の製造方法 |
-
2018
- 2018-09-25 CA CA3079439A patent/CA3079439C/en active Active
- 2018-09-25 US US16/757,033 patent/US11447749B2/en active Active
- 2018-09-25 KR KR1020207014262A patent/KR102185697B1/ko active IP Right Grant
- 2018-09-25 JP JP2020537646A patent/JP7039711B2/ja active Active
- 2018-09-25 AU AU2018351804A patent/AU2018351804B2/en active Active
- 2018-09-25 BR BR112020007775-5A patent/BR112020007775A2/pt unknown
- 2018-09-25 WO PCT/EP2018/076030 patent/WO2019076591A1/en active Search and Examination
- 2018-09-25 CN CN201880068267.0A patent/CN111247240A/zh active Pending
- 2018-09-25 BE BE201805662A patent/BE1025935A9/fr active IP Right Grant
- 2018-09-25 RU RU2020113411A patent/RU2020113411A/ru unknown
- 2018-09-25 SG SG11202003524XA patent/SG11202003524XA/en unknown
- 2018-09-25 EP EP18779627.1A patent/EP3697894A1/en active Pending
-
2020
- 2020-04-16 IL IL273987A patent/IL273987B/en active IP Right Grant
-
2022
- 2022-08-05 US US17/817,757 patent/US20230042822A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BE1025935B9 (fr) | 2019-10-29 |
BE1025935A9 (fr) | 2019-11-05 |
AU2018351804B2 (en) | 2020-07-09 |
BE1025935A1 (fr) | 2019-08-13 |
BR112020007775A2 (pt) | 2020-10-20 |
IL273987B (en) | 2021-06-30 |
JP7039711B2 (ja) | 2022-03-22 |
US11447749B2 (en) | 2022-09-20 |
KR102185697B1 (ko) | 2020-12-03 |
AU2018351804A1 (en) | 2020-05-14 |
CA3079439A1 (en) | 2019-04-25 |
RU2020113411A3 (ru) | 2021-11-22 |
CN111247240A (zh) | 2020-06-05 |
SG11202003524XA (en) | 2020-05-28 |
BE1025935B1 (fr) | 2019-10-18 |
CA3079439C (en) | 2022-08-09 |
WO2019076591A1 (en) | 2019-04-25 |
JP2020537539A (ja) | 2020-12-24 |
US20200354682A1 (en) | 2020-11-12 |
US20230042822A1 (en) | 2023-02-09 |
EP3697894A1 (en) | 2020-08-26 |
KR20200063241A (ko) | 2020-06-04 |
IL273987A (en) | 2020-05-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2020113411A (ru) | Способы дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток | |
US9180166B2 (en) | Cartilage repair systems and applications utilizing a glycosaminoglycan mimic | |
Alves da Silva et al. | Chondrogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells in chitosan‐based scaffolds using a flow‐perfusion bioreactor | |
Chong et al. | Human peripheral blood derived mesenchymal stem cells demonstrate similar characteristics and chondrogenic differentiation potential to bone marrow derived mesenchymal stem cells | |
Karunanithi et al. | Three dimensional alginate-fucoidan composite hydrogel augments the chondrogenic differentiation of mesenchymal stromal cells | |
Singh et al. | Directing chondrogenesis of stem cells with specific blends of cellulose and silk | |
Liu et al. | Reorganization of cytoskeleton and transient activation of Ca2+ channels in mesenchymal stem cells cultured on silicon nanowire arrays | |
JP2013507931A (ja) | 再生医療用途のための接着性骨髄幹細胞の閉鎖系統分離システム | |
CN108348555B (zh) | 细胞扩增方法和治疗组合物 | |
Canadas et al. | Polyhydroxyalkanoates: waste glycerol upgrade into electrospun fibrous scaffolds for stem cells culture | |
Yan et al. | Scalable generation of mesenchymal stem cells from human embryonic stem cells in 3D | |
Arisoly Xavier Acasigua et al. | Novel chemically modified bacterial cellulose nanocomposite as potential biomaterial for stem cell therapy applications | |
Yang et al. | Osteodifferentiation of mesenchymal stem cells on chitosan/hydroxyapatite composite films | |
Panda et al. | Development and evaluation of cross-linked collagen-hydroxyapatite scaffolds for tissue engineering | |
Vachiraroj et al. | A comparison of Thai silk fibroin-based and chitosan-based materials on in vitro biocompatibility for bone substitutes | |
Alessio et al. | Timely supplementation of hydrogels containing sulfated or unsulfated chondroitin and hyaluronic acid affects mesenchymal stromal cells commitment toward chondrogenic differentiation | |
CN105861425B (zh) | 透明质酸促人羊膜干细胞增殖的方法及其应用 | |
CN104017102A (zh) | 乙醇沉淀法从肝素副产物制备舒洛地特原料的方法 | |
CN105602893A (zh) | 一种无血清培养脐带间充质干细胞方法及应用 | |
CN113056557A (zh) | 用于分化间充质干细胞的方法 | |
TWI419970B (zh) | 使成體幹細胞產生為一球體細胞群體的方法 | |
WO2013000672A1 (en) | Method for cultivating cells in platelet-lysate-containing medium | |
Xu et al. | Chain structure and immunomodulatory activity of a fructosylated chondroitin from an engineered Escherichia coli K4 | |
CN113425619A (zh) | 一种间充质干细胞分泌因子的纯化制备方法及用途 | |
EP3957717A1 (en) | Rapid and efficient method for expanding human mesenchymal stem cells in vitro and application thereof |