RU2017135831A

RU2017135831A - Способы идентификации иммунных связующих веществ поверхностных антигенов клетки

Info

Publication number: RU2017135831A
Application number: RU2017135831A
Authority: RU
Inventors: Валери ХУЛЬМАН-КОТЬЕ; Дэвид УРЕХ
Original assignee: ИЭсБиЭйТЕК, ЭН АЛЬКОН БАЙОМЕДИКАЛ РИСЕРЧ ЮНИТ ЭлЭлСи
Priority date: 2009-02-24
Filing date: 2017-10-09
Publication date: 2019-04-09
Also published as: ZA201103125B; RU2017135831A3; KR20180005752A; IL226955A0; SG10201408247SA; PH12014502468B1; KR102059866B1; KR101817279B1; SG10201708233VA; JP2015146825A; RU2577965C2; SG2014014864A; MX352922B; KR20160150642A; RU2011124039A; IL263158A; JP2017192384A; JP2018196395A; KR101689791B1; JP6604989B2

Claims

1. Способ получения иммунного связующего вещества, способного связывать мишеневый антиген, где иммунное связующее вещество получают введением последовательности нуклеиновой кислоты в экспрессионную среду так, чтобы происходил синтез кодируемого иммунного связующего вещества, и где иммунное связующее вещество получают из В-клеточного клона, идентифицируемого:

(a) выделением B-клеток из животного;

(b) приведением в контакт B-клеток с экспрессирующими антиген клетками, экспрессирующими мишеневый антиген, или клеточноподобными образованиями, отражающими мишеневый антиген; и

(c) выделением одного или более комплексов, в которых B-клетка связана с экспрессирующей антиген клеткой или указанным клеточноподобными образованиями, отражающими мишеневый антиген, где выделение осуществляют с использованием сортировки клеток и где В-клетку в выделенном комплексе идентифицируют как В-клеточный клон, который связывается с мишеневым антигеном.

2. Иммунное связующее вещество по п. 1, где иммунное связующее вещество представляет собой антитело.

3. Иммунное связующее вещество по п. 2, где антитело является мышиным, кроличьим, куриным, верблюжьим, крысиным, антителом хомячка, овцы, человека, гуманизированным и химерным антителом.

4. Иммунное связующее вещество по п. 3, где антитело представляет собой полноразмерный иммуноглобулин, Fab, Dab, scFv или нанотело.

5. Иммунное связующее вещество по п. 1, где мишеневый антиген является интегральным мембранным белком.

6. Иммунное связующее вещество по п. 5, где интегральный мембранный белок представляет собой GPCR или ионный канал.

7. Иммунное связующее вещество по п. 5, где интегральный мембранный белок представляет собой CXCR2, CXCR1, CXCR3, CXCR4, CXCR6, CCR1, CCR2, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR8, CFTR, CIC-1, CIC-2, CIC-4, CIC-5, CIC-7, CIC-Ka, CIC-Kb, бестрофины, TMEM16A, рецептор GABA, рецептор глицина, АВС переносчики, NAV1.1, NAV1.2, NAV1.3, NAV1.4, NAV1.5, NAV1.6, NAV1.7, NAV1.8, NAV1.9, рецептор сфингозин-1-фосфата (S1P1R) или канал NMDA.

8. Иммунное связующее вещество по п. 1, где мишеневый антиген представляет собой растворимый антиген.

9. Иммунное связующее вещество по п. 1, где мишеневый антиген экспрессируется из экзогенного гена.

10. Способ по п.1, где животное было иммунизировано указанным мишеневым антигеном.

11. Способ по п.1, где B-клетки мечены первой сортируемой меткой, и экспрессирующие антиген клетки или клеточноподобными образованиями, отражающими мишеневый антиген мечены второй сортируемой меткой.

12. Способ по п.11, где первая и/или вторая сортируемая метка представляет собой флуоресцентную метку.

13. Способ по п. 12, где флуоресцентная метка представляет собой флуоресцентный белок или флуоресцентную клеточную метку.

14. Способ по п. 1, где животное представляет собой кролика.

15. Способ по п. 1, где клеточноподобными образованиями являются покрытый антигеном шарик, липосома или однослойное мембранное образование.

16. Способ по п. 1, где экспрессирующие антиген клетки представляют собой дрожжевую клетку или клетку млекопитающего, или дрожжевой сферобласт.