RU2017133449A - Кристаллы моноклональных антител к pd-1 человека - Google Patents

Claims (20)

1. Кристалл моноклонального антитела к PD-1 (mAb), где mAb к PD-1 является пембролизумабом, или вариантом пембролизумаба, или антителом в биосимиляре пембролизумаба.

2. Кристалл по п.1, где кристалл отличается длиной в диапазоне, выбранном из группы, состоящей из: от 1 до 200 мкм, от 1 до 100 мкм, от 1 до 20 мкм, от 5 до 100 мкм, от 5 до 50 мкм, от 5 до 40 мкм, от 5 до 30 мкм, от 5 до 20 мкм, от 5 до 10 мкм, от 10 до 100 мкм, от 10 до 50 мкм и от 10 до 20 мкм.

3. Кристалл по п.2, где кристалл отличается длиной от 5 до 10 мкм, от 5 до 20 мкм, от 5 до 40 мкм или от 50 до 100 мкм.

4. Кристалл по любому из пп. 1-3, где mAb к PD-1 является пембролизумабом, и кристалл отличается постоянными решетки a=от 63,5 до 78,9 Å, b=от 110,2 до 112,2 Å, c=от 262,5 до 306 Å, α=90, β=90, γ=90° и пространственной группой P2₁2₁2₁.

5. Кристалл по любому из пп. 1-4, способный дифрагировать рентгеновские лучи до разрешения, выбранного из группы, состоящей из от 2,3 Å до 3,5 Å, от 2,3 Å до 3,0 Å, от 2,3 Å до 2,75 Å, от 2,3 Å до 2,5 Å и 2,3 Å.

6. Способ получения кристаллов моноклонального антитела к PD-1 (mAb), где mAb к PD-1 является пембролизумабом, вариантом пембролизумаба или антителом в биосимиляре пембролизумаба, и способ включает воздействие на раствор, содержащий mAb к PD-1, раствора осаждающего средства при температуре, составляющей по меньшей мере 25°C и не более 50°C, в течение времени, достаточного для образования кристаллов, где раствор осаждающего средства имеет pH от 4,0 до 5,0 и содержит 1,0-2,5 M дигидроортофосфат аммония.

7. Способ по п.6, где стадия воздействия включает смешивание раствора антитела и раствора осаждающего средства для получения кристаллизационной смеси и использование способа кристаллизации в отношении смеси, где способ кристаллизации выбран из группы, состоящей из способа висячей капли посредством диффузии в парах, способа диффузии в парах в сидячей капле и массовой кристаллизации.

8. Способ по п.7, где способ кристаллизации является массовой кристаллизацией, и способ дополнительно включает затравливание кристаллизационной смеси кристаллами mAb против PD-1.

9. Способ по любому из пп. 6-8, где раствор антитела содержит mAb к PD-1 в концентрации от 2 до 200 мг/мл, от 3 до 100 мг/мл, от 10 до 90 мг/мл, от 20 до 80 мг/мл, от 30 до 70 мг/мл, от 40 до 60 мг/мл или приблизительно 50 мг/мл, и раствор осаждающего средства имеет pH, выбранный из группы, состоящей из от 4,2 до 4,8, от 4,4 до 4,6 и 4,5.

10. Способ по любому из пп. 6-9, где раствор осаждающего средства содержит (a) 1,5-2,0 M дигидроортофосфат аммония и 100-120 мМ Трис-HCl или (b) 1,9 M дигидроортофосфат аммония и 0,09 M гидрофосфат аммония.

11. Способ по любому из пп. 6-10, где стадию воздействия осуществляют в течение по меньшей мере 3, 4 или 5 дней при температуре приблизительно 30°C.

12. Способ кристаллизации моноклонального антитела к PD-1 (mAb) из раствора, содержащего mAb к PD-1, где антитело является пембролизумабом, вариантом пембролизумаба или антителом в биосимиляре пембролизумаба, и способ включает: (a) комбинирование раствора mAb к PD-1 с раствором осаждающего средства и затравочными кристаллами mAb к PD-1 для получения затравленной кристаллизационной смеси; (b) инкубацию затравленной кристаллизационной смеси при температуре по меньшей мере 20°C и не более приблизительно 40°C; и (c) сбор кристаллов, где затравочные кристаллы получают из затравочного стока кристаллов mAb к PD-1, полученных способом по любому из пп.1-11.

13. Фармацевтическая композиция, содержащая (a) кристаллы моноклонального антитела к PD-1 (mAb), где антитело является пембролизумабом, вариантом пембролизумаба или антителом в биосимиляре пембролизумаба, и (b) по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.

14. Композиция по п.13, где каждый из кристаллов mAb к PD-1 в композиции является кристаллом по любому из пп. 1-5 или полученным способом по любому из пп. 6-10.

15. Композиция по п.13 или 14, где кристаллы mAb к PD-1 суспендируют в жидкости, и концентрация mAb к PD-1 в композиции составляет по меньшей мере 50 мг/мл, по меньшей мере 100 мг/мл, по меньшей мере 200 мг/мл или по меньшей мере 250 мг/мл.

16. Композиция по п.13 или 14, являющаяся твердым веществом.

17. Способ лечения рака у человека, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 13-16.

18. Способ по п.17, где раком является рак мочевого пузыря, рак молочной железы, светлоклеточный рак почки, плоскоклеточная карцинома головы и шеи, плоскоклеточная карцинома легких, злокачественная меланома, немелкоклеточный рак легких (NSCLC), рак яичников, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, почечноклеточная карцинома, мелкоклеточный рак легких (SCLC), тройной негативный рак молочной железы, острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелолейкоз (AML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), хронический миелолейкоз (CML), диффузная крупноклеточная B-клеточная лимфома (DLBCL), EBV-положительная DLBCL, первичная медиастинальная крупноклеточная B-клеточная лимфома, T-клеточная/гистиоцитарная крупноклеточная B-клеточная лимфома, фолликулярная лимфома, лимфома Ходжкина (HL), лимфома из клеток мантийной зоны (MCL), множественная миелома (MM), белок миелоцитарного лейкоза-1 (Mcl-1), миелодиспластический синдром (MDS), неходжкинская лимфома (NHL) или мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома (SLL).

19. Способ по п.18, где фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере 200 мг/мл mAb, и ее вводят подкожно.

20. Способ по п.18 или 19, где рак является солидной опухолью, и срез ткани рака, удаленный из индивидуума перед первым введением фармацевтической композиции, при тестировании положителен на экспрессию одного или обоих из PD-L1 и PD-L2.