RU2015144057A - Масштабный производственный способ получения рекомбинантных лентивирусных векторов в системе культивирования клеток в бессывороточной суспензии - Google Patents

Масштабный производственный способ получения рекомбинантных лентивирусных векторов в системе культивирования клеток в бессывороточной суспензии Download PDF

Info

Publication number
RU2015144057A
RU2015144057A RU2015144057A RU2015144057A RU2015144057A RU 2015144057 A RU2015144057 A RU 2015144057A RU 2015144057 A RU2015144057 A RU 2015144057A RU 2015144057 A RU2015144057 A RU 2015144057A RU 2015144057 A RU2015144057 A RU 2015144057A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
viral vectors
exchange column
factor
column chromatography
filtrate
Prior art date
Application number
RU2015144057A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2709678C2 (ru
Inventor
Гуан ЦЮЙ
Джон Фрейзер РАЙТ
Original Assignee
Дзе Чилдрен'З Хоспитал Оф Филадельфия
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дзе Чилдрен'З Хоспитал Оф Филадельфия filed Critical Дзе Чилдрен'З Хоспитал Оф Филадельфия
Publication of RU2015144057A publication Critical patent/RU2015144057A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2709678C2 publication Critical patent/RU2709678C2/ru

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0091Purification or manufacturing processes for gene therapy compositions
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011Details
    • C12N2740/10011Retroviridae
    • C12N2740/15011Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15041Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2740/15043Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011Details
    • C12N2740/10011Retroviridae
    • C12N2740/15011Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15051Methods of production or purification of viral material

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Claims (79)

1. Способ крупномасштабной очистки вирусного вектора, включающий:
a) получение рекомбинантных вирусных векторов, включая трансген, из бессывороточной суспензии культуры;
b) очистка сбора стадии a) посредством фильтрации;
c) получение фильтрата на стадии b) и необязательно подвергание указанного фильтрата нуклеазному расщеплению для устранения примесей ДНК/РНК;
d) подвергание фильтрата стадии c) PEG-модулированной аффинной или ионнообменной колоночной хроматографии, выделяя посредством этого указанные вирусные векторы;
e) дополнительную очистку вирусных векторов, полученных на стадии d), посредством тангенциальной поточной фильтрации для уменьшения объема и буферного обмена;
f) подвергание фильтрата стадии e) эксклюзионной колоночной хроматографии для дополнительной очистки указанных вирусных векторов;
g) подвергание векторов стадии f) тангенциальной поточной фильтрации и получение посредством этого итогового титра вектора; и
h) фильтрование раствора вектора, полученного на стадии g) с помощью фильтра; и
i) сбор указанных очищенных вирусных векторов.
2. Способ крупномасштабной очистки вирусного вектора, включающий:
a) получение рекомбинантных вирусных векторов, включая трансген, из бессывороточной суспензии культуры;
b) очистка сбора стадии a) посредством фильтрации;
c) подвергание очищенной суспензии стадии b) тангенциальной поточной фильтрации для уменьшения объема и буферного обмена;
d) получение фильтрата на стадии c) и необязательно подвергание указанного фильтрата нуклеазному расщеплению для устранения примесей ДНК/РНК;
e) подвергание фильтрата стадии d) PEG-модулированной аффинной или ионнообменной колоночной хроматографии, выделяя посредством этого указанные вирусные векторы;
f) подвергание вирусных векторов, полученных на стадии e) эксклюзионной колоночной хроматографии для дополнительной очистки указанных вирусных векторов;
g) подвергание векторов стадии f) тангенциальной поточной фильтрации и получение посредством этого итогового титра вектора; и
h) фильтрование раствора вектора, полученного на стадии g) с помощью фильтра; и
i) сбор указанных очищенных вирусных векторов.
3. Способ крупномасштабной очистки вирусного вектора, включающий:
a) получение рекомбинантных вирусных векторов, включая трансген, из бессывороточной суспензии культуры;
b) очистка сбора стадии a) посредством фильтрации;
с) подвергание очищенной суспензии стадии b) тангенциальной поточной фильтрации для уменьшения объема и буферного обмена;
d) получение фильтрата на стадии c) и необязательно подвергание указанного фильтрата нуклеазному расщеплению для устранения примесей ДНК/РНК;
e) подвергание фильтрата стадии d) PEG-модулированной аффинной или ионнообменной колоночной хроматографии, выделяя посредством этого указанные вирусные векторы;
f) дополнительную очистку вирусных векторов, полученных на стадии e), посредством тангенциальной поточной фильтрации для уменьшения объема и буферного обмена;
g) подвергание фильтрата стадии f) эксклюзионной колоночной хроматографии для дополнительной очистки указанных вирусных векторов;
h) подвергание векторов стадии g) тангенциальной поточной фильтрации, и получение посредством этого итогового титра вектора; и
i) фильтрование раствора вектора, полученного на стадии h), с помощью фильтра; и
j) сбор указанных очищенных вирусных векторов.
4. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный вирусный вектор представляет собой рекомбинантный лентивирусный вектор (rLV).
5. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный вирусного вектор включает рекомбинантный лентивирусный вектор (rLV), выбранный из ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ-1/ВИЧ-2 псевдотипа, ВИЧ-1/SIV, FIV, лентивируса артроэнцефалита козлов (CAEV), вируса инфекционной анемии лошадей, вируса иммунодефицита крупного рогатого скота, ВИЧ и их псевдотипов или вируса везикулярного стоматита G-псевдотипированного лентивируса (VSVG-псевдотипированного) вектора.
6. Состав rLV вектора, включающий rLV частицы, очищенные с применением способа по любому из пп.1-3 в фармацевтически приемлемом носителе.
7. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген кодирует нуклеиновую кислоту, выбранную из группы, состоящей из миРНК, нечувствительной молекулы и микроРНК рибозима и коротких РНК, образующих шпильки.
8. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген кодирует генный продукт, выбранный из группы, состоящей из инсулина, глюкагона, гормона роста (GH), паратиреоидного гормона (PTH), соматотропин-рилизинг-фактора (GRF), фолликулстимулирующего гормона (FSH), лютеинизирующего гормона (LH), человеческого хорионического гонадотропина (hCG), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), ангиопоэтинов, ангиостатина, колониестимулирующего фактора гранулоцитов (GCSF), эритропоэтина (EPO), фактора роста соединительной ткани (CTGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), кислотного фактора роста фибробластов (aFGF), эпидермального фактора роста (EGF), трансформирующего ростового фактора-α (TGFα), фактора роста тромбоцитов (PDGF), инсулиноподобных факторов роста I и II (IGF-I и IGF-II), TGFβ, активинов, ингибинов, костного морфогенетического белка (BMP), фактора роста нервной ткани (NGF), нейротрофического фактора головного мозга (BDNF), нейротрофинов NT-3 и NT4/5, цилиарного нейротрофического фактора (CNTF), нейротрофического фактора глиальной клеточной линии (GDNF), нейротурина, агрина, нетрина-1 и нетрина-2, фактора роста гепатоцитов (HGF), эфринов, ноггина, «звукового ежика» и тирозингидроксилазы.
9. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген кодирует генный продукт, выбранный из группы, состоящей из тромбопоэтина (TPO), интерлейкинов (с IL-1 по IL-17), моноцитарного хемоаттрактантного белка, фактора, ингибирующего лейкоз, гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора, лиганда Fas, факторов некроза опухоли α и β, интерферонов α, β и γ, фактора стволовой клетки, flk-2/flt3 лиганда, IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, химерных иммуноглобулинов, гуманизированных антител, одноцепочечных антител, рецепторов Т-клеток, рецепторов химерных Т-клеток, одноцепочечных рецепторов Т-клеток, рецепторов, связанных с G-белком (GPCRs), CCR5 и молекул MHC класса I и класса II.
10. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген включает нуклеиновую кислоту, кодирующую белок, пригодный для коррекции врожденного нарушения обмена веществ, выбранный из группы, состоящей из карбамоилсинтетазы I, орнитинтранскарбамилазы, аргининосукцинатсинтетазы, аргининосукцинат-лиазы, аргиназы, фумарилацетоацетатгидролазы, фениаланингидролазы, альфа-1 антитрипсина, глюкоза-6-фосфатазы, порфобилиногендезаминазы, Фактора V, Фактора VIII, Фактора IX, цистатионин-бета-синтетазы, разветвленнойо цепи кетоацидодекарбоксилазы, альбумина, изовалерил-КоА-дегидрогеназы, пропионил-КоА-карбоксилазы, метилмалонил-КоА-мутазы, глутарил-КоА-дегидрогеназы, инсулина, бета-глюкозидазы, пируваткарбоксилазы, печеночной фосфорилазы, фосфорилазы-киназы, глициндекарбоксилазы, белка, специфичного для пигментного эпителия сетчатки, с молекулярной массой 65 кДа (RPE65), H-белка, T-белка, последовательности трансмембранного регулятора муковисцидоза (CFTR) и последовательности дистрофина кДНК.
11. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген кодирует генный продукт, выбранный из Фактора VIII и Фактора IX.
12. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген кодирует опухолеспецифический антиген (TAA).
13. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный трансген кодирует генный продукт, выбранный из группы, состоящей из CAIX, CD19, CD20, CD20, CD22, CD30, CD33, CD44v7/8, CEA, EGF-RIII (варианта 3 рецептора эпидермального фактора роста) EGP-2, erb-B2, erb-B2, 3, 4, FBP, ацетилхолинового рецептора фетального типа, GD2, Her2/neu, IL-13R-a2, KDR, k-легкой цепи, LeY, L1 молекулы клеточной адгезии, MAGE-A1, мезотелина, MUC1, NKG2D, раково-эмбрионального антигена (h5T4), PSCA, PSMA, mAb IgE, меченного TAA, TAG-72 или VEGF-R2.
14. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанные рекомбинантные вирусные векторы продуцируются клетками млекопитающих.
15. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанные рекомбинантные вирусные векторы продуцируются клетками HEK293T (ATCC); HEK293F (Life Technologies); HEK293(ATCC); 293S (ATCC), BHK (ATCC), BHK-21 (ATCC), CHO (ATCC), CHO/dhFr- (ATCC)l или CHO K1 (ATCC).
16. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная бессывороточная суспензия культуры включает бессывороточную среду для выращивания клеток.
17. Способ по п.16, в котором указанная бессывороточная среда для выращивания выбрана из: FreeStyleTM293 (GibcoR, Life Technologies), DMEM/F12 (GibcoR, Life Technologies), SFM4Transfx-293 (HyCloneTM, ThermoScientific), CDM4HEK293 (HyCloneTM, ThermoScientific), StemPro-34SFM (GibcoR, Life Technologies), FreeStyle F17 (GibcoR, Life Technologies), 293SFM II (GibcoR, Life Technologies) и CD293 (GibcoR, Life Technologies).
18. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная нуклеаза включает эндонуклеазу, экзонуклеазу или их комбинации.
19. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная нуклеаза включает дезоксирибонуклеазу, рибонуклеазу или их комбинации.
20. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная нуклеаза включает бензоназу или ДНКазу.
21. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная ионнообменная колоночная хроматография включает анионнообменную колоночную хроматографию.
22. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная ионнообменная колоночная хроматография включает сильную или слабую анионнообменную колоночную хроматографию.
23. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная ионнообменная колоночная хроматография включает катионнообменную колоночную хроматографию.
24. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная ионнообменная колоночная хроматография включает сильную или слабую катионнообменную колоночную хроматографию.
25. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная ионнообменная колонка включает кватернизированную смолу на основе полиэтиленимина; или четвертичную аминовую смолу.
26. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная ионнообменная колонка включает в себя смолу на основе полиэтиленимина; смолу на основе диэтиламиноэтила (DEAE); или смолу на основе диэтиламинопропила.
27. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная аффинная колонка включает смолу на основе сульфопропила.
28. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная аффинная колонка включает на основе карбоксиметила.
29. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная аффинная колонка включает многофункциональную хроматографическую смолу.
30. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная аффинная или ионнообменная колонка включает смолу на основе гидроксиапатита ((Ca5(PO4)3OH)2); мультимодальную слабую катионнообменную смолу; смолу на основе N-бензил-n-метилэтаноламина; или смолу на основе октиламина.
31. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная аффинная колонка включает металло-хелатную аффинную смолу или среду; смолу или среду на основе гепарина, или группоспецифическую аффинную смолу или среду.
32. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанная PEG-модулированная аффинная или ионнообменная колоночная хроматография включает:
i) регулирование фильтрата стадии c) к связывающему раствору, при этом указанный связывающий раствор необязательно включает в себя PEG, и приведение в контакт указанного фильтрата с аффинной или ионнообменной колонкой, связывая таким образом вирусные векторы с аффинной или ионнообменной колонкой,
ii) отмывание связанных вирусны векторов для устранения примеси отмывающим раствором, включающим PEG, или раствором, включающим в себя PEG и соль; и
iii) элюирование вирусных векторов из аффинной или ионнообменной колонки элюирующим раствором.
33. Способ по п.32, в котором указанный связывающий раствор включает PEG в количестве от приблизительно 0% до 10% вес/объем, или от приблизительно 0% до 5% вес/объем, или от приблизительно 0% до 2% вес/объем.
34. Способ по п.32, в котором указанный связывающий раствор включает PEG, имеющий молекулярную массу от приблизительно 2000 кДа до приблизительно 40000 кДа.
35. Способ по п.32, в котором указанный отмывающим раствор включает PEG в количестве от приблизительно 1% до 10% вес/объем, или от приблизительно 1% до 5% вес/объем, или от приблизительно 1% до 2% вес/объем.
36. Способ по п.32, в котором указанный отмывающий раствор включает PEG, имеющий молекулярную массу от приблизительно 2000 кДа до приблизительно 40000 кДа.
37. Способ по п.32, в котором указанный элюирующий раствор включает PEG в количестве от приблизительно 0% до 20% вес/объем.
38. Способ по п.32, в котором указанный элюирующий раствор включает PEG, имеющий молекулярную массу от приблизительно 2000 кДа до приблизительно 40000 кДа.
39. Способ по п.32, в котором указанный связывающий, отмывающий или элюирующим раствор дополнительно включает соль.
40. Способ по п.32, в котором указанный элюирующий раствор включает соль в количестве от приблизительно 500 мМоль до приблизительно 1000 мМоль.
41. Способ пп.39 или 40, в котором указанная соль включает натрия хлорид или калия хлорид.
42. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанную стадию фильтрования h) или i) осуществляют с помощью фильтра, имеющего диаметр пор, составляющий приблизительно 0,20-0,5 мкм.
43. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанную стадию фильтрования g) осуществляют через фильтр с диаметром пор 0,20 мкм.
44. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанную стадию фильтрования g) осуществляют через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм.
45. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанную стадию фильтрования g) осуществляют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
46. Способ по любому из пп.1-3, в котором получают приблизительно 5×105 инфекционных единиц (IU)/мл указанного вирусного вектора.
47. Способ по любому из пп.1-3, в котором получают приблизительно 6×106 инфекционных единиц (IU)/мл указанного вирусного вектора.
48. Способ по любому из пп.1-3, в котором получают приблизительно 3×108 инфекционных единиц (IU)/мл указанного вирусного вектора.
RU2015144057A 2013-03-15 2014-03-17 Масштабный производственный способ получения рекомбинантных лентивирусных векторов в системе культивирования клеток в бессывороточной суспензии RU2709678C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361787818P 2013-03-15 2013-03-15
US61/787,818 2013-03-15
PCT/US2014/030370 WO2014145578A1 (en) 2013-03-15 2014-03-17 Scalable manufacturing process to produce recombinant lentiviral vectors in serum-free suspension cell culture system

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015144057A true RU2015144057A (ru) 2017-04-27
RU2709678C2 RU2709678C2 (ru) 2019-12-19

Family

ID=51538029

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015144057A RU2709678C2 (ru) 2013-03-15 2014-03-17 Масштабный производственный способ получения рекомбинантных лентивирусных векторов в системе культивирования клеток в бессывороточной суспензии

Country Status (17)

Country Link
US (2) US20140323556A1 (ru)
EP (1) EP2970920B1 (ru)
JP (1) JP6480910B6 (ru)
KR (1) KR102200278B1 (ru)
CN (1) CN105378074A (ru)
AU (1) AU2014232879B2 (ru)
BR (1) BR112015022292A2 (ru)
CA (1) CA2904366C (ru)
DK (1) DK2970920T3 (ru)
ES (1) ES2681434T3 (ru)
HK (1) HK1219978A1 (ru)
IL (1) IL241058B (ru)
MX (1) MX364690B (ru)
PT (1) PT2970920T (ru)
RU (1) RU2709678C2 (ru)
WO (1) WO2014145578A1 (ru)
ZA (1) ZA201506478B (ru)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2016221305B2 (en) 2015-02-18 2021-05-27 Enlivex Therapeutics Rdo Ltd Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment
US11497767B2 (en) 2015-02-18 2022-11-15 Enlivex Therapeutics R&D Ltd Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment
US11000548B2 (en) 2015-02-18 2021-05-11 Enlivex Therapeutics Ltd Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment
US11596652B2 (en) 2015-02-18 2023-03-07 Enlivex Therapeutics R&D Ltd Early apoptotic cells for use in treating sepsis
US11304976B2 (en) 2015-02-18 2022-04-19 Enlivex Therapeutics Ltd Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment
US11318163B2 (en) 2015-02-18 2022-05-03 Enlivex Therapeutics Ltd Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment
TWI547782B (zh) * 2015-03-16 2016-09-01 智易科技股份有限公司 可擴充式製程系統與實現該系統的方法
JP6803339B2 (ja) 2015-04-21 2020-12-23 エンリヴェックス セラピューティクス リミテッド 治療用のプールされた血液アポトーシス細胞調製物及びそれらの使用
MX2018006682A (es) * 2015-12-01 2018-09-26 Spark Therapeutics Inc Metodos escalables para producir vector viral adenoasociado (aav) recombinante en un sistema de cultivo celular en suspension libre de suero adecuado para su uso clinico.
CN107043784A (zh) * 2016-02-05 2017-08-15 上海吉凯基因化学技术有限公司 一种慢病毒载体的制备方法
JP6884155B2 (ja) 2016-02-18 2021-06-09 エンリヴェックス セラピューティクス リミテッド 癌治療のための併用免疫療法及びサイトカイン制御療法
BR112018070250A2 (pt) * 2016-03-30 2019-01-29 Spark Therapeutics Inc linhagem celular para proteína recombinante e/ou produção de vetores virais
WO2017180724A1 (en) 2016-04-12 2017-10-19 Artemis Biosystems, Inc. Perfusion filtration systems
CN106497882A (zh) * 2016-10-29 2017-03-15 复旦大学 同时过表达R‑spondin1和Noggin的细胞株及其构建方法和应用
WO2018161858A1 (en) 2017-03-06 2018-09-13 Guangzhou Realbenefitspot Pharmaceutical Co., Ltd. Methods of producing and characterizing virus vaccine and virus vaccine composition
EP3420076B1 (en) 2017-03-06 2024-02-21 Guangzhou Realbenefitspot Pharmaceutical Co., Ltd. Methods of producing and characterizing virus vaccine and virus vaccine composition
CN109251939A (zh) * 2017-07-14 2019-01-22 孙搏 Il-17g-197a慢病毒表达载体、其构建方法及慢病毒的包装测定方法
WO2019147036A1 (ko) * 2018-01-24 2019-08-01 주식회사 에스엘바이젠 뇌유래-신경영양인자를 발현하는 중간엽줄기세포 및 이의 용도
CN111763238B (zh) * 2019-04-02 2022-07-29 普莱柯生物工程股份有限公司 一种蛋白抗原的纯化方法、制备的蛋白抗原及其应用
HUE064411T2 (hu) * 2019-04-11 2024-03-28 Regenxbio Inc Méretkizárásos kromatográfiás módszerek rekombináns adeno-asszociált víruskészítmények jellemzésére
CN110054678B (zh) * 2019-05-16 2023-04-18 中国医学科学院血液病医院(血液学研究所) 一种膜结合型mFLT3LG蛋白及其应用
CN110894494B (zh) * 2019-11-22 2022-09-27 广西梧州制药(集团)股份有限公司 一种大规模高密度悬浮培养293细胞高产腺病毒的方法
CN110938654A (zh) * 2019-12-11 2020-03-31 和元生物技术(上海)股份有限公司 一种细胞转染试剂及其应用
CN113122501B (zh) * 2019-12-30 2023-06-16 重庆精准生物技术有限公司 适合大规模临床级病毒载体制备的培养基及其应用
EP4196596A1 (en) * 2020-08-13 2023-06-21 Tmunity Therapeutics Inc. Methods for producing clinical-grade lentiviral vector
CN112746076B (zh) * 2020-12-28 2023-05-12 中吉智药(南京)生物技术有限公司 一种密码子优化的col7a1基因及慢病毒和应用
US20240101964A1 (en) * 2020-12-29 2024-03-28 Jiangsu Genscript Probio Biotech Co., Ltd. Hek293t cell strain having high dispersibility and screening method therefor
KR20240035852A (ko) * 2021-07-19 2024-03-18 2세븐티 바이오, 인코포레이티드 벡터 제조 프로세스
CN113980916A (zh) * 2021-09-27 2022-01-28 湖南丰晖生物科技有限公司 一种慢病毒的纯化方法
WO2023061409A1 (zh) * 2021-10-12 2023-04-20 江苏金斯瑞蓬勃生物科技有限公司 适应无血清悬浮培养的hek293细胞株及其应用
CN114990077A (zh) * 2022-08-01 2022-09-02 深圳市先康达生命科学有限公司 一种慢病毒包装与纯化方法

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5869445A (en) * 1993-03-17 1999-02-09 University Of Washington Methods for eliciting or enhancing reactivity to HER-2/neu protein
US20030157070A1 (en) * 1994-12-30 2003-08-21 Jolly Douglas J. High efficiency ex vivo transduction of cells by high titer recombinant retroviral preparations
US6544769B1 (en) * 1996-12-13 2003-04-08 Schering Corporation Compostions comprising viruses and methods for concentrating virus preparations
US6207455B1 (en) 1997-05-01 2001-03-27 Lung-Ji Chang Lentiviral vectors
US5994136A (en) 1997-12-12 1999-11-30 Cell Genesys, Inc. Method and means for producing high titer, safe, recombinant lentivirus vectors
US7575924B2 (en) * 2000-11-13 2009-08-18 Research Development Foundation Methods and compositions relating to improved lentiviral vectors and their applications
WO2003039459A2 (en) * 2001-11-05 2003-05-15 Genvec, Inc. Viral vector production methods and compositions
AU2003229159B2 (en) * 2002-04-30 2008-02-21 Oncolytics Biotech Inc. Improved viral purification methods
AU2003272868A1 (en) * 2003-10-15 2005-04-27 Agtc Gene Technology Company Ltd. Method for large-scale production, isolation, purification and the uses of multi-type recombinant adeno-associated virus vectors
CA2609093C (en) * 2005-07-06 2014-12-30 Ge Healthcare Bio-Sciences Ab Method of preparing a separation matrix
EP2012122A1 (en) * 2007-07-06 2009-01-07 Medigene AG Mutated parvovirus structural proteins as vaccines
WO2008148304A1 (fr) * 2007-05-31 2008-12-11 Xiamen University Cible d'interférence arn pour traiter le sida
WO2009153563A1 (en) * 2008-06-18 2009-12-23 Oxford Biomedica (Uk) Limited Virus purification
RU2547587C2 (ru) * 2008-09-24 2015-04-10 Медиммун, Ллк Способы культивирования клеток, размножения и очистки вирусов
SG10201403290SA (en) 2009-06-16 2014-10-30 Genzyme Corp Improved methods for purification of recombinant aav vectors
JP6009357B2 (ja) 2010-01-12 2016-10-19 バスキュラー バイオジェニックス リミテッド アデノウイルスベクターの生産方法およびそれによって生成されるウイルス調製物
WO2011097447A2 (en) * 2010-02-04 2011-08-11 Neurologix, Inc. Production of recombinant virus

Also Published As

Publication number Publication date
HK1219978A1 (zh) 2017-04-21
ES2681434T3 (es) 2018-09-13
EP2970920A1 (en) 2016-01-20
CA2904366A1 (en) 2014-09-18
EP2970920A4 (en) 2016-09-14
US20140323556A1 (en) 2014-10-30
CN105378074A (zh) 2016-03-02
KR102200278B1 (ko) 2021-01-07
CA2904366C (en) 2023-07-04
EP2970920B1 (en) 2018-04-25
US10994028B2 (en) 2021-05-04
KR20160024841A (ko) 2016-03-07
IL241058B (en) 2020-05-31
MX364690B (es) 2019-05-06
JP6480910B2 (ja) 2019-03-13
MX2015012450A (es) 2016-04-25
AU2014232879B2 (en) 2020-03-05
WO2014145578A1 (en) 2014-09-18
JP2016512700A (ja) 2016-05-09
JP6480910B6 (ja) 2019-04-03
IL241058A0 (en) 2015-11-30
DK2970920T3 (en) 2018-08-06
US20170368201A1 (en) 2017-12-28
BR112015022292A2 (pt) 2017-07-18
PT2970920T (pt) 2018-07-30
ZA201506478B (en) 2021-09-29
AU2014232879A1 (en) 2015-09-24
RU2709678C2 (ru) 2019-12-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2015144057A (ru) Масштабный производственный способ получения рекомбинантных лентивирусных векторов в системе культивирования клеток в бессывороточной суспензии
JP2016512700A5 (ru)
JP2018121653A5 (ru)
RU2018138164A (ru) ПОЛНОСТЬЮ МАСШТАБИРУЕМЫЙ СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА rAAV НА ОСНОВЕ КОЛОНОК
JP2016185153A5 (ru)
US20210079422A1 (en) Aav vector column purification methods
JP2019509745A5 (ru)
CN105980571A (zh) 用于纯化包膜病毒或病毒载体的方法
CN114456940B (zh) 一种提高大肠杆菌裂解过程中质粒稳定性的方法
US11807865B2 (en) Large commercial scale lentiviral vector production system and vectors produced thereby
Pedro et al. Purification of bionanoparticles
KR102669561B1 (ko) Aav 벡터 컬럼 정제 방법
CN117660373A (zh) 一种慢病毒大规模纯化方法及其应用
CN117778433A (zh) 一种从大肠杆菌中提取质粒的高效稳定方法
CN117757759A (zh) 一种针对nk细胞的慢病毒纯化的方法及其应用
CN116761892A (zh) 生产重组腺相关病毒颗粒的方法
Hollis et al. 712. Simplified large-scale production of lentiviral vectors