RU2015104165A - Мутантные штаммы mycoplasma hyopneumoniae - Google Patents
Мутантные штаммы mycoplasma hyopneumoniae Download PDFInfo
- Publication number
- RU2015104165A RU2015104165A RU2015104165A RU2015104165A RU2015104165A RU 2015104165 A RU2015104165 A RU 2015104165A RU 2015104165 A RU2015104165 A RU 2015104165A RU 2015104165 A RU2015104165 A RU 2015104165A RU 2015104165 A RU2015104165 A RU 2015104165A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dna sequence
- mhyo
- protein
- seq
- sequence encoding
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/0241—Mollicutes, e.g. Mycoplasma, Erysipelothrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/64—General methods for preparing the vector, for introducing it into the cell or for selecting the vector-containing host
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/522—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2800/00—Nucleic acids vectors
- C12N2800/70—Vectors containing special elements for cloning, e.g. topoisomerase, adaptor sites
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2820/00—Vectors comprising a special origin of replication system
- C12N2820/55—Vectors comprising a special origin of replication system from bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/35—Mycoplasma
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Electrotherapy Devices (AREA)
Abstract
1. Способ получения мутантного штамма Mycoplasma hyopneumoniae, отличающийся тем, что он включает в себя этап трансформации штамма M. hyopneumoniae посредством применения вектора-носителя, содержащего, по меньшей мере, одну экзогенную последовательность ДНК, которая является последовательностью, находящейся под контролем последовательности ДНК, имеющий степень идентичности с промоторной областью M. hyopneumoniae, по меньшей мере, 80%.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что экзогенная последовательность ДНК выбрана из группы, состоящей из гена устойчивости к антибиотику, гена, кодирующего рекомбиназу, гена, кодирующего транспозазу, последовательности-мишени для транспозазы, фрагмента ДНК Mhyo, фрагмента, который предпочтительно перегруппирован или рекомбинирован с одним или несколькими фрагментами ДНК, гена, кодирующего антигенный компонент микроорганизма, вызывающего заболевания свиней, и их комбинаций.3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что экзогенная последовательность ДНК представляет собой ген устойчивости к антибиотику, комбинированный с геном, кодирующим антигенный компонент микроорганизма, вызывающего заболевания свиней, и при необходимости комбинированный с геном, кодирующим мембранный белок Mhyo.4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что вектор-носитель представляет собой репликативный плазмидный вектор, который содержит:1) последовательность ДНК, содержащую область oriC штамма Mycoplasma sp., и2) экзогенную последовательность ДНК, содержащую маркерный ген, и при необходимости дополнительную экзогенную последовательность ДНК, которые находятся под контролем последовательности ДНК, имеющей степень идентичности, по меньшей мере, 80% с промоторной областью Mhyo.5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что
Claims (34)
1. Способ получения мутантного штамма Mycoplasma hyopneumoniae, отличающийся тем, что он включает в себя этап трансформации штамма M. hyopneumoniae посредством применения вектора-носителя, содержащего, по меньшей мере, одну экзогенную последовательность ДНК, которая является последовательностью, находящейся под контролем последовательности ДНК, имеющий степень идентичности с промоторной областью M. hyopneumoniae, по меньшей мере, 80%.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что экзогенная последовательность ДНК выбрана из группы, состоящей из гена устойчивости к антибиотику, гена, кодирующего рекомбиназу, гена, кодирующего транспозазу, последовательности-мишени для транспозазы, фрагмента ДНК Mhyo, фрагмента, который предпочтительно перегруппирован или рекомбинирован с одним или несколькими фрагментами ДНК, гена, кодирующего антигенный компонент микроорганизма, вызывающего заболевания свиней, и их комбинаций.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что экзогенная последовательность ДНК представляет собой ген устойчивости к антибиотику, комбинированный с геном, кодирующим антигенный компонент микроорганизма, вызывающего заболевания свиней, и при необходимости комбинированный с геном, кодирующим мембранный белок Mhyo.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что вектор-носитель представляет собой репликативный плазмидный вектор, который содержит:
1) последовательность ДНК, содержащую область oriC штамма Mycoplasma sp., и
2) экзогенную последовательность ДНК, содержащую маркерный ген, и при необходимости дополнительную экзогенную последовательность ДНК, которые находятся под контролем последовательности ДНК, имеющей степень идентичности, по меньшей мере, 80% с промоторной областью Mhyo.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что вектор-носитель представляет собой транспозонный вектор, который содержит:
1) последовательность ДНК, кодирующую транспозазу,
2) экзогенную последовательность ДНК, содержащую маркерный ген, и
3) при необходимости дополнительную экзогенную последовательность ДНК,
где последовательность ДНК, кодирующая транспозазу, и, по меньшей мере, одна экзогенная последовательность ДНК находятся под контролем последовательности ДНК, имеющей степень идентичности, по меньшей мере, 80%, с промоторной областью Mhyo.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что вектор представляет собой плазмиду.
7. Способ по п. 4, отличающийся тем, что вектор содержит дополнительную экзогенную последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный белок, который индуцирует защитный ответ против заболеваний или патологических состояний, поражающих свиней, вызываемых микроорганизмами группы, состоящей из Actinobacillus sp., Brachyspira sp., Pasteurella multocida, Salmonella sp., Streptococcus sp., Isospora sp., Erysipelothrix rhusiopathiae, Leptospira sp., Staphylococcus sp., Haemophilus parasuis, Bordetella bronchiseptica, Clostridium sp., Mycoplasma sp., Lawsonia intracellularis, Escherichia coli, вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней, вируса свиного гриппа, вируса контагиозного гастроэнтерита, свиного парвовируса, вируса энцефаломиокардита, коронавируса, ротавируса, агента синдрома послеотъемного снижения веса у поросят, вируса классической чумы свиней, вируса африканской чумы свиней, калицивируса, вируса гепатита TTV и цирковируса свиней.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что дополнительная экзогенная последовательность ДНК выбрана из группы, состоящей из последовательности ДНК, кодирующей белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), и последовательности ДНК, кодирующей белок, содержащий белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), дополнительно несущий аминокислоты MetSerGlySer на N-конце указанного белка, указанная дополнительная экзогенная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5.
9. Способ по п. 4, отличающийся тем, что дополнительная экзогенная последовательность ДНК представляет собой ген Mhyo, находящийся в обратной ориентации по отношению к промоторной области Mhyo.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что промоторная область Mhyo содержит промоторную область гена белка Mhyo, выбранного из группы, состоящей из белков P36, P46, P65, P76, P97, P102, P146 и P216.
11. Способ по п. 5, отличающийся тем, что вектор содержит последовательность ДНК, кодирующую транспозазу, последовательность ДНК, кодирующую маркерный ген, при необходимости фланкированный последовательностями loxP, и последовательность ДНК, кодирующую белок капсида ЦВС-2, указанная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, определена последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 4, которая слита с последним основанием гена, кодирующего мембранный белок P46 Mhyo, и SEQ ID NO: 3, которая вставлена между аминокислотами 92 и 93 белка P46 Mhyo, где каждая из этих последовательностей ДНК находится под контролем промоторной области Mhyo, выбранной из промоторной области белка P97 или белка P46 Mhyo, SEQ ID NO: 5 предпочтительно находится под контролем промоторной области белка P97, а SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4 предпочтительно находятся под контролем промоторной области белка P46.
12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что этап трансформации бактерий осуществляется путем инкубации этой бактерии в присутствии соли, содержащей двухвалентные ионы, воздействия смеси полиэтиленгликоля или электропорации.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что этап трансформации бактерий осуществляется путем электропорации.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что перед проведением электропорации суспензию бактерий Mhyo подвергают инкубации в буфере для электропорации с хелатирующим агентом, имеющим двухвалентный ион.
15. Репликативный плазмидный вектор, отличающийся тем, что он содержит:
1) последовательность ДНК, содержащую область oriC штамма Mycoplasma sp., и
2) экзогенную последовательность ДНК, содержащую маркерный ген, и при необходимости дополнительную экзогенную последовательность ДНК, которые находятся под контролем последовательности ДНК, имеющей степень идентичности, по меньшей мере, 80% с промоторной областью Mhyo.
16. Транспозонный вектор, отличающийся тем, что он содержит:
1) последовательность ДНК, кодирующую транспозазу,
2) экзогенную последовательность ДНК, содержащую маркерный ген, и
3) при необходимости дополнительную экзогенную последовательность ДНК,
где последовательность ДНК, кодирующая транспозазу, и, по меньшей мере, одна экзогенная последовательность ДНК находятся под контролем последовательности ДНК, имеющей степень идентичности, по меньшей мере, 80% с промоторной областью Mhyo.
17. Вектор по п. 15, отличающийся тем, что он содержит дополнительную экзогенную последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный белок, который индуцирует защитный ответ против заболеваний или патологических состояний, поражающих свиней, вызываемых микроорганизмами группы, состоящей из Actinobacillus sp., Brachyspira sp., Pasteurella multocida, Salmonella sp., Streptococcus sp., Isospora sp., Erysipelothrix rhusiopathiae, Leptospira sp., Staphylococcus sp., Haemophilus parasuis, Bordetella bronchiseptica, Clostridium sp., Mycoplasma sp., Lawsonia intracellularis, Escherichia coli, вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней, вируса свиного гриппа, вируса контагиозного гастроэнтерита, свиного парвовируса, вируса энцефаломиокардита, коронавируса, ротавируса, агента синдрома послеотъемного снижения веса у поросят, вируса классической чумы свиней, вируса африканской чумы свиней, калицивируса, вируса гепатита TTV и цирковируса свиней.
18. Вектор по п. 17, отличающийся тем, что дополнительная экзогенная последовательность ДНК выбрана из группы, состоящей из последовательности ДНК, кодирующей белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), и последовательности, кодирующей белок, содержащий белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), дополнительно несущий аминокислоты MetSerGlySer на N-конце указанного белка, указанная дополнительная экзогенная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5.
19. Вектор по п. 15, отличающийся тем, что промоторная область Mhyo содержит промоторную область гена белка Mhyo, выбранного из группы, состоящей из белков P36, P46, P65, P76, P97, P102, P146 и P216.
20. Вектор по п. 16, отличающийся тем, что он содержит последовательность ДНК, кодирующую транспозазу, последовательность ДНК, кодирующую маркерный ген, при необходимости фланкированный последовательностями loxP, и последовательность ДНК, кодирующую белок капсида ЦВС-2, указанная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, определена последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 4, которая слита с последним основанием гена, кодирующего мембранный белок P46 Mhyo, и SEQ ID NO: 3, которая вставлена между аминокислотами 92 и 93 белка P46 Mhyo, где каждая из этих последовательностей ДНК находится под контролем промоторной области Mhyo, выбранной из промоторной области белка P97 или белка P46 Mhyo, SEQ ID NO: 5 предпочтительно находится под контролем промоторной области белка P97, а SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4 предпочтительно находятся под контролем промоторной области белка P46.
21. Мутантный штамм Mhyo, получаемый способом по п. 1.
22. Мутантный штамм Mhyo, отличающийся тем, что он содержит, по меньшей мере, одну экзогенную последовательность ДНК, стабильно включенную в его геном или в цитозоль.
23. Мутантный штамм Mhyo по п. 21, который представляет собой мутантный штамм Mhyo, депонированный в коллекции DSMZ Лейбниц-института и выбран из мутантного штамма Mhyo с регистрационным номером DSM 26020, мутантного штамма Mhyo с регистрационным номером DSM 26027, мутантного штамма Mhyo с регистрационным номером DSM 26033, мутантного штамма Mhyo с регистрационным номером DSM 26034 и мутантного штамма Mhyo с регистрационным номером DSM 26049.
24. Вакцина для защиты свиней от энзоотической пневмонии свиней, вызываемой Mhyo, и при необходимости от другого заболевания или дополнительных патологических состояний, поражающих свиней, содержащая иммунологически эффективное количество мутантного штамма Mhyo по п. 21.
25. Вакцина по п. 24, отличающаяся тем, что она объединена с дополнительной вакцинной или антигенной композицией.
26. Набор для вакцинации свиней против инфекции или заболевания, вызываемого Mhyo, и при необходимости против другого заболевания или патологических состояний, вызываемых микроорганизмами, поражающими свиней, включающий в себя контейнер, содержащий иммунологически эффективное количество мутантного штамма по п. 21.
27. Способ по п. 5, отличающийся тем, что вектор содержит дополнительную экзогенную последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный белок, который индуцирует защитный ответ против заболеваний или патологических состояний, поражающих свиней, вызываемых микроорганизмами группы, состоящей из Actinobacillus sp., Brachyspira sp., Pasteurella multocida, Salmonella sp., Streptococcus sp., Isospora sp., Erysipelothrix rhusiopathiae, Leptospira sp., Staphylococcus sp., Haemophilus parasuis, Bordetella bronchiseptica, Clostridium sp., Mycoplasma sp., Lawsonia intracellularis, Escherichia coli, вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней, вируса свиного гриппа, вируса контагиозного гастроэнтерита, свиного парвовируса, вируса энцефаломиокардита, коронавируса, ротавируса, агента синдрома послеотъемного снижения веса у поросят, вируса классической чумы свиней, вируса африканской чумы свиней, калицивируса, вируса гепатита TTV и цирковируса свиней.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что дополнительная экзогенная последовательность ДНК выбрана из группы, состоящей из последовательности ДНК, кодирующей белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), и последовательности, кодирующей белок, содержащий белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), дополнительно несущий аминокислоты MetSerGlySer на N-конце указанного белка, указанная дополнительная экзогенная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5.
29. Вектор по п. 16, отличающийся тем, что он содержит дополнительную экзогенную последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный белок, который индуцирует защитный ответ против заболеваний или патологических состояний, поражающих свиней, вызываемых микроорганизмами группы, состоящей из Actinobacillus sp., Brachyspira sp., Pasteurella multocida, Salmonella sp., Streptococcus sp., Isospora sp., Erysipelothrix rhusiopathiae, Leptospira sp., Staphylococcus sp., Haemophilus parasuis, Bordetella bronchiseptica, Clostridium sp., Mycoplasma sp., Lawsonia intracellularis, Escherichia coli, вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней, вируса свиного гриппа, вируса контагиозного гастроэнтерита, свиного парвовируса, вируса энцефаломиокардита, коронавируса, ротавируса, агента синдрома послеотъемного снижения веса у поросят, вируса классической чумы свиней, вируса африканской чумы свиней, калицивируса, вируса гепатита TTV и цирковируса свиней.
30. Вектор по п. 29, отличающийся тем, что дополнительная экзогенная последовательность ДНК выбрана из группы, состоящей из последовательности ДНК, кодирующей белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), и последовательности, кодирующей белок, содержащий белок капсида цирковируса свиней типа 2 (ЦВС-2), дополнительно несущий аминокислоты MetSerGlySer на N-конце указанного белка, указанная дополнительная экзогенная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5.
31. Вектор по п. 16, отличающийся тем, что промоторная область Mhyo содержит промоторную область гена белка Mhyo, выбранного из группы, состоящей из белков P36, P46, P65, P76, P97, P102, P146 и P216.
32. Способ лечения энзоотической пневмонии свиней, вызываемой Mhyo, и при необходимости другого заболевания или дополнительных патологических состояний, поражающих свиней, путем введения мутантного штамма Mhyo по любому из пп. 21, 22 или 23.
33. Способ по п. 6, отличающийся тем, что дополнительная экзогенная последовательность ДНК представляет собой ген Mhyo, находящийся в обратной ориентации по отношению к промоторной области Mhyo.
34. Способ по п. 6, отличающийся тем, что вектор содержит последовательность ДНК, кодирующую транспозазу, последовательность ДНК, кодирующую маркерный ген, при необходимости фланкированный последовательностями loxP, и последовательность ДНК, кодирующую белок капсида ЦВС-2, указанная последовательность ДНК, кодирующая белок капсида ЦВС-2, определена последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 4, которая слита с последним основанием гена, кодирующего мембранный белок P46 Mhyo, и SEQ ID NO: 3, которая вставлена между аминокислотами 92 и 93 белка P46 Mhyo, где каждая из этих последовательностей ДНК находится под контролем промоторной области Mhyo, выбранной из промоторной области белка P97 или белка P46 Mhyo, SEQ ID NO: 5 предпочтительно находится под контролем промоторной области белка P97, а SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4 предпочтительно находятся под контролем промоторной области белка P46.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP12382277.7 | 2012-07-10 | ||
EP12382277.7A EP2684959A1 (en) | 2012-07-10 | 2012-07-10 | Vectors for transforming Mycoplasma hyopneumoniae, transformed M.hyopneumoniae strains, and use thereof |
PCT/ES2013/070492 WO2014009586A2 (es) | 2012-07-10 | 2013-07-09 | Cepas mutantes de mycoplasma hyopneumoniae |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2015104165A true RU2015104165A (ru) | 2016-08-27 |
RU2689671C2 RU2689671C2 (ru) | 2019-05-28 |
Family
ID=46832318
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015104165A RU2689671C2 (ru) | 2012-07-10 | 2013-07-09 | Мутантные штаммы mycoplasma hyopneumoniae |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10076561B2 (ru) |
EP (3) | EP2684959A1 (ru) |
JP (2) | JP6571523B2 (ru) |
KR (1) | KR102157911B1 (ru) |
BR (2) | BR122022000531B1 (ru) |
DK (1) | DK2873733T4 (ru) |
ES (1) | ES2745720T5 (ru) |
MX (1) | MX362977B (ru) |
PL (1) | PL2873733T5 (ru) |
PT (1) | PT2873733T (ru) |
RU (1) | RU2689671C2 (ru) |
WO (1) | WO2014009586A2 (ru) |
ZA (1) | ZA201500067B (ru) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2684959A1 (en) * | 2012-07-10 | 2014-01-15 | Laboratorios Hipra, S.A. | Vectors for transforming Mycoplasma hyopneumoniae, transformed M.hyopneumoniae strains, and use thereof |
WO2014174257A2 (en) * | 2013-04-22 | 2014-10-30 | The Royal Veterinary College | Methods |
EP2994162B1 (en) | 2013-05-08 | 2021-04-07 | Pharmgate Biologics Inc. | Vaccine for pcv2 and mycoplasma |
JP2021506874A (ja) | 2017-12-22 | 2021-02-22 | ヒプラ シエンティフィック エセ.エレ.ウ. | マイコプラズマ及びブタサーコウイルスに対する皮内混合ワクチン |
CN110093324B (zh) * | 2019-04-26 | 2020-02-18 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) | 基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及其作为疫苗的应用 |
RU2743594C1 (ru) * | 2020-12-09 | 2021-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Пептидные иммуногены, используемые в качестве компонентов вакцинной композиции против коронавирусной инфекции COVID-19 |
RU2743595C1 (ru) * | 2020-12-09 | 2021-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Вакцинная композиция против коронавирусной инфекции COVID-19 |
RU2743593C1 (ru) * | 2020-12-09 | 2021-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Пептидные иммуногены и вакцинная композиция против коронавирусной инфекции COVID-19 с использованием пептидных иммуногенов |
RU2752858C1 (ru) * | 2021-02-04 | 2021-08-11 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Интегративный плазмидный вектор pVEAL2-S-RBD, обеспечивающий экспрессию и секрецию рекомбинантного рецепторсвязывающего домена (RBD) коронавируса SARS-CoV-2 в клетках млекопитающих, рекомбинантный штамм клеточной линии CHO-K1-RBD и рекомбинантный белок RBD SARS-CoV-2, продуцируемый указанным штаммом клеточной линии CHO-K1-RBD |
KR102640730B1 (ko) * | 2023-08-01 | 2024-02-29 | 주식회사 케어사이드 | 돼지 소모성 질병 관련 재조합 항원 제조용 신규한 벡터, 및 이를 이용한 백신 조성물 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE512232T1 (de) * | 2003-12-03 | 2011-06-15 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Expressionssystem mit einem säuger-beta-actin- promotor |
KR101225304B1 (ko) * | 2007-11-06 | 2013-01-22 | 와이어쓰 엘엘씨 | 마이코플라스마 하이오뉴모니아에 비독성 항원보강된 살아있는 백신 |
KR20090061798A (ko) * | 2007-12-12 | 2009-06-17 | 기아자동차주식회사 | 차량 시트용 시트 백의 허리 지지구조 |
TWI449533B (zh) * | 2008-04-18 | 2014-08-21 | Intervet Int Bv | 防備胞內勞森菌(Lawsonia intracellularis)、豬肺炎黴漿菌(Mycoplasma hyopneumoniae)及豬環狀病毒(Porcine circo virus)用疫苗 |
JP2010136627A (ja) * | 2008-12-09 | 2010-06-24 | Nippon Oil Corp | 酵母にガラクトースを利用させる方法 |
JP5257939B2 (ja) * | 2009-02-24 | 2013-08-07 | 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 豚丹毒・豚マイコプラズマ肺炎経口投与型多価ワクチン |
AU2010251761B2 (en) | 2009-05-19 | 2014-10-09 | Bioproperties Pty Ltd | A temperature sensitive vaccine strain of Mycoplasma hyopneumoniae and uses thereof |
EP2571980A4 (en) * | 2010-05-19 | 2014-02-26 | Bioproperties Pty Ltd | METHOD RELATED TO A WEAKEN MYCOPLASMA |
EP2684959A1 (en) * | 2012-07-10 | 2014-01-15 | Laboratorios Hipra, S.A. | Vectors for transforming Mycoplasma hyopneumoniae, transformed M.hyopneumoniae strains, and use thereof |
WO2014174257A2 (en) * | 2013-04-22 | 2014-10-30 | The Royal Veterinary College | Methods |
-
2012
- 2012-07-10 EP EP12382277.7A patent/EP2684959A1/en not_active Withdrawn
-
2013
- 2013-07-09 DK DK13766387.8T patent/DK2873733T4/da active
- 2013-07-09 BR BR122022000531-4A patent/BR122022000531B1/pt active IP Right Grant
- 2013-07-09 US US14/413,946 patent/US10076561B2/en active Active
- 2013-07-09 BR BR112015000585-3A patent/BR112015000585B1/pt active IP Right Grant
- 2013-07-09 KR KR1020157003569A patent/KR102157911B1/ko active IP Right Grant
- 2013-07-09 MX MX2015000287A patent/MX362977B/es active IP Right Grant
- 2013-07-09 EP EP13766387.8A patent/EP2873733B2/en active Active
- 2013-07-09 WO PCT/ES2013/070492 patent/WO2014009586A2/es active Application Filing
- 2013-07-09 ES ES13766387T patent/ES2745720T5/es active Active
- 2013-07-09 EP EP19174710.4A patent/EP3546580A1/en active Pending
- 2013-07-09 JP JP2015521032A patent/JP6571523B2/ja active Active
- 2013-07-09 RU RU2015104165A patent/RU2689671C2/ru active
- 2013-07-09 PL PL13766387.8T patent/PL2873733T5/pl unknown
- 2013-07-09 PT PT137663878T patent/PT2873733T/pt unknown
-
2015
- 2015-01-06 ZA ZA2015/00067A patent/ZA201500067B/en unknown
-
2019
- 2019-05-22 JP JP2019095908A patent/JP6883607B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2873733B2 (en) | 2023-01-18 |
JP2015523080A (ja) | 2015-08-13 |
KR20150027836A (ko) | 2015-03-12 |
BR122022000531B1 (pt) | 2022-06-21 |
BR112015000585A8 (pt) | 2018-01-16 |
JP2019176861A (ja) | 2019-10-17 |
RU2689671C2 (ru) | 2019-05-28 |
KR102157911B1 (ko) | 2020-09-21 |
WO2014009586A8 (es) | 2019-02-21 |
DK2873733T4 (da) | 2023-04-03 |
DK2873733T3 (da) | 2019-09-30 |
US10076561B2 (en) | 2018-09-18 |
WO2014009586A2 (es) | 2014-01-16 |
PT2873733T (pt) | 2019-10-14 |
EP3546580A1 (en) | 2019-10-02 |
MX2015000287A (es) | 2015-04-10 |
JP6883607B2 (ja) | 2021-06-09 |
PL2873733T3 (pl) | 2019-12-31 |
EP2873733B1 (en) | 2019-06-26 |
ZA201500067B (en) | 2016-11-30 |
MX362977B (es) | 2019-02-28 |
BR112015000585A2 (pt) | 2017-08-08 |
ES2745720T3 (es) | 2020-03-03 |
EP2684959A1 (en) | 2014-01-15 |
JP6571523B2 (ja) | 2019-09-04 |
ES2745720T5 (es) | 2023-06-05 |
WO2014009586A3 (es) | 2014-06-12 |
PL2873733T5 (pl) | 2023-05-15 |
BR112015000585B1 (pt) | 2022-03-29 |
EP2873733A2 (en) | 2015-05-20 |
US20150306200A1 (en) | 2015-10-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2015104165A (ru) | Мутантные штаммы mycoplasma hyopneumoniae | |
JP2015523080A5 (ru) | ||
AR117530A2 (es) | Una composición que comprende un virus del síndrome reproductor y respiratorio porcino (prrsv) de un tipo europeo, un producto de vacuna, una composición de proteína, un ácido nucleico aislado y un vector de expresión recombinante | |
Jacobsen et al. | Enzymes involved in anaerobic respiration appear to play a role in Actinobacillus pleuropneumoniae virulence | |
EP3199178B1 (en) | Live attenuated parvovirus | |
RU2016144766A (ru) | Парвовирус свиней | |
Maglennon et al. | Transposon mutagenesis in Mycoplasma hyopneumoniae using a novel mariner-based system for generating random mutations | |
AU717769B2 (en) | Immunity against actinobacillus pleuropneumoniae's RTX toxins APX | |
Bhuyan et al. | The construction of recombinant Lactobacillus casei expressing BVDV E2 protein and its immune response in mice | |
CA2235445A1 (en) | Clostridium perfringens vaccine | |
Lee et al. | Generation of safety enhanced Edwardsiella tarda ghost vaccine | |
JPH10290695A (ja) | アクチノバシラス・プレウロニューモニアの弱毒化生菌 | |
CN105797152A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
Margawati et al. | Optimization of expression JTAT protein with emphasis on transformation efficiency and IPTG concentration | |
US6783764B1 (en) | Actinobacillus pleuropneumoniae subunit vaccine | |
CN104685057B (zh) | 用于转化猪肺炎支原体的载体,转化的猪肺炎支原体菌株及其用途 | |
Zhou et al. | Oral immunization with attenuated Salmonella choleraesuis expressing the P42 and P97 antigens protects mice against Mycoplasma hyopneumoniae challenge | |
O’Neill et al. | Population-based analysis of Actinobacillus pleuropneumoniae ApxIVA for use as a DIVA antigen | |
Yuan et al. | Influences of ORF1 on the virulence and immunogenicity of Actinobacillus pleuropneumoniae | |
Long et al. | Cloning and optimizing the culture parameters for expression of R1 and R2 repeat regions of P97 adhesin from Mycoplasma hyopneumoniae in Escherichia coli | |
EP1518558B1 (en) | Vaccine against infection with Actinobacillus pleuropneumoniae comprising purified ApxIV toxin | |
DK1015579T4 (en) | Clostridium toxin as well as process for the preparation of immunogenic compositions | |
EP1350796A1 (en) | Attenuated gram negative bacteria | |
Mostaan et al. | PlpE epitopes of Pasteurella multocida fusion protein as novel subunit vaccine candidates | |
AU2021100449A4 (en) | A fusion expression of Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae immunogen and its application |