RU2013148804A - Способ получения рекомбинантного полипептида - Google Patents

Abstract

1. Способ получения полипептида, предусматривающий культивирование клетки, которая экспрессирует APES и в которую была введена ДНК, кодирующая желаемый полипептид, с получением посредством этого желаемого полипептида.2. Способ по п. 1, где эта APES является молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, которая может связываться с ДНК или мРНК гена NfkBia, полученной из человека, мыши, крысы или хомячка спариванием оснований, и может супрессировать экспрессию гена NfkBia.3. Способ по п. 2, где эта APES является малой РНК с длиной самое большее 30 нуклеотидов, содержащей последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов, которая может связываться с частью мРНК NfkBia спариванием оснований.4. Способ по п. 2, где эта APES является некодирующей РНК мРНК-типа с длиной самое большее 561 нуклеотид, содержащей последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов, которая может связываться с частью мРНК NfkBia спариванием оснований.5. Способ по п. 2, где эта APES является некодирующей РНК мРНК-типа с длиной 561-1579 нуклеотидов, содержащей последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов, которая может связываться с частью мРНК NfkBia спариванием оснований.6. Способ по любому из пп. 3-5, где эта непрерывная последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов является любой частичной последовательностью в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2.7. Способ по п. 6, где эта APES выбрана из молекул нуклеиновых кислот, каждая из которых содержит любую из следующих нуклеотидных последовательностей:(a) ДНК, состоящей из нуклеотидной последовательности любой из SEQ ID NO: 1-16 и 29;(b) ДНК, которая содержит вышеупомянутую последовательность (а) и является частично

Claims (20)

1. Способ получения полипептида, предусматривающий культивирование клетки, которая экспрессирует APES и в которую была введена ДНК, кодирующая желаемый полипептид, с получением посредством этого желаемого полипептида.

2. Способ по п. 1, где эта APES является молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, которая может связываться с ДНК или мРНК гена NfkBia, полученной из человека, мыши, крысы или хомячка спариванием оснований, и может супрессировать экспрессию гена NfkBia.

3. Способ по п. 2, где эта APES является малой РНК с длиной самое большее 30 нуклеотидов, содержащей последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов, которая может связываться с частью мРНК NfkBia спариванием оснований.

4. Способ по п. 2, где эта APES является некодирующей РНК мРНК-типа с длиной самое большее 561 нуклеотид, содержащей последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов, которая может связываться с частью мРНК NfkBia спариванием оснований.

5. Способ по п. 2, где эта APES является некодирующей РНК мРНК-типа с длиной 561-1579 нуклеотидов, содержащей последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов, которая может связываться с частью мРНК NfkBia спариванием оснований.

6. Способ по любому из пп. 3-5, где эта непрерывная последовательность с длиной 19-25 нуклеотидов является любой частичной последовательностью в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2.

7. Способ по п. 6, где эта APES выбрана из молекул нуклеиновых кислот, каждая из которых содержит любую из следующих нуклеотидных последовательностей:

(a) ДНК, состоящей из нуклеотидной последовательности любой из SEQ ID NO: 1-16 и 29;

(b) ДНК, которая содержит вышеупомянутую последовательность (а) и является частичной последовательностью 3'-нетранслируемого района гена NfkBia;

(c) ДНК, состоящей из нуклеотидной последовательности, идентичной вышеупомянутой последовательности (a) или (b), за исключением одного или нескольких нуклеотидов

(d) РНК, которая является вышеупомянутым транскриптом (a), (b) или (c); и

(e) ДНК или РНК, состоящей из последовательности, которая может связываться с вышеупомянутой последовательностью (a) спариванием оснований.

8. Способ по п. 1 где эта клетка является сильно экспрессирующей APES клеткой.

9. Способ по п. 1, где экзогенная ДНК, кодирующая желаемый полипептид, была введена в эту клетку и APES была искусственно введена в эту клетку.

10. Способ по п. 9, где клетка, в которую была искусственно введена APES, является клеткой, трансфицированной этой APES.

11. Способ по п. 9, где клетка, в которую была введена APES, является клеткой, в которой была активирована транскрипция эндогенной APES.

12. Способ по п. 9, где ДНК, кодирующая транспортер таурина, была дополнительно введена в эту клетку.

13. Способ по п. 9, где ДНК, кодирующая декарбоксилазу цистеинсульфиновой кислоты, была дополнительно введена в эту клетку.

14. Способ по п. 9, где ДНК, кодирующая аланинтрансферазу, была дополнительно введена в эту клетку.

15. Способ по п. 1, где этот полипептид является антителом.

16. Способ по п. 1, где эта клетка является клеткой яичника Китайского хомячка.

17. Способ получения фармацевтического препарата, содержащего полипептид, полученный по любому из пп. 1-16.

18. Молекула нуклеиновой кислоты, которая содержит любую из следующих нуклеотидных последовательностей и имеет активность APES, при условии, что исключена молекула нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1.

(a) ДНК, состоящую из нуклеотидной последовательности любой из SEQ ID NO: 2-16 и 29;

(b) ДНК, которая содержит последовательность (а) и является частичной последовательностью 3'-нетранслируемого района гена NfkBia;

(c) ДНК, состоящую из нуклеотидной последовательности, идентичной последовательности любой из SEQ ID NO: 1-16 и 29 или последовательности (b), за исключением одного или нескольких нуклеотидов;

(d) РНК, которая является вышеупомянутым транскриптом (a), (b) или (b); или

(e) ДНК или РНК, состоящую из последовательности, которая может связываться с вышеупомянутой последовательностью (a) спариванием оснований.

19. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 18.

20. Клетка, в которую были искусственно введены молекула нуклеиновой кислоты по п. 18 или вектор по п. 19.