RU2012118851A - Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде - Google Patents

Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде Download PDF

Info

Publication number
RU2012118851A
RU2012118851A RU2012118851/10A RU2012118851A RU2012118851A RU 2012118851 A RU2012118851 A RU 2012118851A RU 2012118851/10 A RU2012118851/10 A RU 2012118851/10A RU 2012118851 A RU2012118851 A RU 2012118851A RU 2012118851 A RU2012118851 A RU 2012118851A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cells
microcarriers
flask
serum
rotating
Prior art date
Application number
RU2012118851/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Юйлинь Ли
Цзиньюй Лю
Original Assignee
Цзилиньский Университет
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Цзилиньский Университет filed Critical Цзилиньский Университет
Publication of RU2012118851A publication Critical patent/RU2012118851A/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602Vertebrate cells
    • C12N5/0652Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
    • C12N5/0662Stem cells
    • C12N5/0666Mesenchymal stem cells from hair follicles
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2531/00Microcarriers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

1. Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде, состоящий из следующих этапов:1) настаивание волосяных фолликул или тканевых блоков волосяных фолликул с использованием протеазы для получения клеток, засевания этих клеток в микроносителях с диапазоном плотности от 1×10клеток/г до 1×10клеток/г с их последующим помещением в жидкую питательную среду,2) перенос микроносителей с клетками во вращающуюся колбу,3) заполнение вращающейся колбы жидкой питательной средой в пропорциях 1/10-1/3 от объема колбы,4) помещение вращающейся колбы в клеточный инкубатор при условиях 37°C, 5 v/v % COи вращение колбы в течение 1-5 минут каждый час со скоростью 10-300 об/мин,5) использование дигестивного агента для выращивания клеток из микроносителей. После получения примерно монослоя клеток в микроносителях выполняется инактивация трипсина с помощью сыворотки и после промывки от сыворотки и антибиотиков с использованием фосфатно-буферного раствора можно собирать увеличенное количество стволовых клеток волосяных фолликул.2. Способ по п.1, где дигестивным агентом является раствор из 0, 25% трипсина и 0, 02% EDTA.3. Способ по п.1, где в качестве жидкой питательной среды используется DMEM, DMM-F12, EGM, KGM, IMDM, MEM или EBM как базальная среда, содержащая комбинацию из одного или нескольких биологических факторов.4. Способ по п.3, где в качестве биологических факторов используется IGF, bFGF, EGF, VEGF, фосфатный витамин C, дексаметазон, инсулин, трансферрин, гипофизарная вытяжка животных, пенициллин-стрептомицин, амфотерицин, человеческая или животная сыворотка.5. Способ по п.4, где в качестве животной сыворотки используется одна или комбинация из к

Claims (10)

1. Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде, состоящий из следующих этапов:
1) настаивание волосяных фолликул или тканевых блоков волосяных фолликул с использованием протеазы для получения клеток, засевания этих клеток в микроносителях с диапазоном плотности от 1×103 клеток/г до 1×108 клеток/г с их последующим помещением в жидкую питательную среду,
2) перенос микроносителей с клетками во вращающуюся колбу,
3) заполнение вращающейся колбы жидкой питательной средой в пропорциях 1/10-1/3 от объема колбы,
4) помещение вращающейся колбы в клеточный инкубатор при условиях 37°C, 5 v/v % CO2 и вращение колбы в течение 1-5 минут каждый час со скоростью 10-300 об/мин,
5) использование дигестивного агента для выращивания клеток из микроносителей. После получения примерно монослоя клеток в микроносителях выполняется инактивация трипсина с помощью сыворотки и после промывки от сыворотки и антибиотиков с использованием фосфатно-буферного раствора можно собирать увеличенное количество стволовых клеток волосяных фолликул.
2. Способ по п.1, где дигестивным агентом является раствор из 0, 25% трипсина и 0, 02% EDTA.
3. Способ по п.1, где в качестве жидкой питательной среды используется DMEM, DMM-F12, EGM, KGM, IMDM, MEM или EBM как базальная среда, содержащая комбинацию из одного или нескольких биологических факторов.
4. Способ по п.3, где в качестве биологических факторов используется IGF, bFGF, EGF, VEGF, фосфатный витамин C, дексаметазон, инсулин, трансферрин, гипофизарная вытяжка животных, пенициллин-стрептомицин, амфотерицин, человеческая или животная сыворотка.
5. Способ по п.4, где в качестве животной сыворотки используется одна или комбинация из коровьей, овечьей и свиной сыворотки.
6. Способ по п.1, где в качестве микроносителей для выращивания клеток используется один или комбинация нескольких типов биодеградируемых материалов, либо небиодеградируемых материалов, либо биодеградируемых и небиодеградируемых материалов.
7. Способ по п.6, где в качестве биодеградируемых материалов используется коллаген, фибринолитический протеин крови, желатин, гиалуроновая кислота, полимолочная кислота, полигликолиевая кислота, полиуретан или хитозан.
8. Способ по п.6, где в качестве небиодеградируемых материалов используется стекло, силикон, металл и пластик.
9. Способ по п.1, где в качестве микроносителей используются сферические или эллипсоидные частицы со средним размером в диапазоне от 10 мкм до 1000 мкм.
10. Способ по п.1, где в качестве микроносителей используются сферические или эллипсоидные частицы со средним размером в диапазоне от 100 мкм до 800 мкм.
RU2012118851/10A 2010-07-22 2011-07-20 Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде RU2012118851A (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201010238350.3 2010-07-22
CN201010238350.3A CN101914495A (zh) 2010-07-22 2010-07-22 用于体外大量扩增毛囊干细胞的培养方法
PCT/CN2011/001185 WO2012009958A1 (zh) 2010-07-22 2011-07-20 用于体外大量扩增毛囊干细胞的培养方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2012118851A true RU2012118851A (ru) 2014-08-27

Family

ID=43322141

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012118851/10A RU2012118851A (ru) 2010-07-22 2011-07-20 Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде

Country Status (5)

Country Link
US (1) US8524492B2 (ru)
EP (1) EP2484755A1 (ru)
CN (2) CN101914495A (ru)
RU (1) RU2012118851A (ru)
WO (1) WO2012009958A1 (ru)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AUPR298901A0 (en) 2001-02-07 2001-03-08 McComb Foundation, Inc., The Cell suspension preparation technique and device
CN101914495A (zh) * 2010-07-22 2010-12-15 吉林大学 用于体外大量扩增毛囊干细胞的培养方法
AU2013205148B2 (en) 2013-03-14 2014-10-30 AVITA Medical Americas, LLC Systems and methods for tissue processing and preparation of cell suspension therefrom
CN103487585B (zh) * 2013-07-10 2015-08-12 杭州市萧山区中医院 蛋白印迹法检测毛囊干细胞vegf165蛋白表达的方法
CN104419659A (zh) * 2013-08-30 2015-03-18 翔宇生医科技股份有限公司 脂肪干细胞及其干细胞分泌物的培养与量产方法
SG11201707615YA (en) 2013-09-19 2017-10-30 Univ Leland Stanford Junior Methods and compositions for producing hepatocyte-like cells
WO2017044158A1 (en) * 2015-09-07 2017-03-16 Bioreactor Sciences Llc Method of continuous mass production of progenitor stem-like cells using a bioreactor system
CN105326862A (zh) * 2015-11-16 2016-02-17 深圳爱生再生医学科技有限公司 治疗烧伤皮肤的干细胞制剂及其制备方法
CN106854640A (zh) * 2017-01-16 2017-06-16 广东万海细胞生物科技有限公司 一种毛囊干细胞的无血清培养基及其制备方法
CN106635967A (zh) * 2017-01-16 2017-05-10 广东万海细胞生物科技有限公司 一种毛囊干细胞的移植方法
CN110038497A (zh) * 2019-04-11 2019-07-23 山东大学 一种用于干细胞培养的氧化石墨烯/壳聚糖微球及其连续制备方法
CN110038496A (zh) * 2019-04-11 2019-07-23 山东大学 一种壳聚糖-氧化石墨烯微球的喷雾制备方法及其应用
CN110923197A (zh) * 2019-11-11 2020-03-27 浙江卫未生物医药科技有限公司 毛囊源细胞培养基
CN111197025A (zh) * 2020-03-03 2020-05-26 刘景卫 用于治疗白癜风的黑素细胞干细胞体外培养的技术方法
CN111500443B (zh) * 2020-04-20 2023-09-05 湖南旭智生物科技有限公司 一种用于毛囊干细胞诱导分化的培养装置及使用方法
CN111411078A (zh) * 2020-04-21 2020-07-14 清远市人民医院 一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法
CN115404203A (zh) * 2021-05-26 2022-11-29 上海我武干细胞科技有限公司 毛囊间充质干细胞的制备方法以及应用
CN115011545A (zh) * 2022-06-06 2022-09-06 北京熙朵医疗美容门诊部有限公司 一种毛囊干细胞的培养方法
CN115197898A (zh) * 2022-07-06 2022-10-18 北京晶莱华科生物技术有限公司 一种毛囊干细胞的制备方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE534728T1 (de) * 2001-09-20 2011-12-15 Anticancer Inc Nestinexprimierende haarfollikelstammzellen
CN1594554A (zh) * 2003-09-12 2005-03-16 中国医学科学院基础医学研究所 快速粘附法分离富集毛囊干细胞
CN100529062C (zh) * 2004-04-09 2009-08-19 华东理工大学 三维立体培养和诱导骨髓间充质干细胞成软骨细胞的方法
CN1316014C (zh) * 2004-04-09 2007-05-16 华东理工大学 骨髓间充质干细胞的规模化制备方法
US7655465B2 (en) * 2004-06-07 2010-02-02 Massachusetts Institute Of Technology Methods for ex vivo propagation of somatic hair follicle stem cells
CN1699558A (zh) * 2005-06-09 2005-11-23 郑丽琴 使用生物反应器对造血干细胞来源的细胞因子诱导的杀伤细胞的大规模培养技术
CN100494359C (zh) * 2006-06-23 2009-06-03 中日友好医院 神经干细胞三维立体培养体外扩增的方法
CN101045916A (zh) * 2007-03-13 2007-10-03 天津市天津医院 人发来源的毛囊干细胞及其扩增制备方法
CN102086451B (zh) * 2009-12-07 2013-08-28 韩春茂 一种皮肤组织工程种子细胞的扩增方法
CN101914495A (zh) * 2010-07-22 2010-12-15 吉林大学 用于体外大量扩增毛囊干细胞的培养方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102985534A (zh) 2013-03-20
US20120252121A1 (en) 2012-10-04
WO2012009958A1 (zh) 2012-01-26
CN101914495A (zh) 2010-12-15
US8524492B2 (en) 2013-09-03
EP2484755A1 (en) 2012-08-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2012118851A (ru) Способ размножения стволовых клеток волосяных фолликул в искусственной среде
CN104436305B (zh) 以脱细胞生物膜为载体的心肌补片及制备方法与应用
EP1874921B1 (en) Transplantation of differentiated immature adipocytes and biodegradable scaffold for tissue augmentation
CN108138133B (zh) 再生毛囊原基的集合体的制造方法、含毛囊组织薄片及含毛囊组织薄片的制造方法
Guasti et al. Chondrogenic differentiation of adipose tissue-derived stem cells within nanocaged POSS-PCU scaffolds: a new tool for nanomedicine
US20070104692A1 (en) Breast tissue regeneration
Tang et al. Chondrocyte-laden GelMA hydrogel combined with 3D printed PLA scaffolds for auricle regeneration
CN102892880A (zh) 生物工程化组织构建物及其制备和使用方法
CN112263713A (zh) 负载人脐带间充质干细胞的纤维蛋白水凝胶支架及其应用
CN104399125B (zh) 表皮干细胞向汗腺样上皮细胞分化的方法
KR101862885B1 (ko) 배양 연골 조직 재료
CN108938669B (zh) 一种用于治疗皮肤损伤的干细胞软膏及其制备方法
JP6857877B2 (ja) 毛細血管構造を有する再生毛包原基の集合体の製造方法、毛包組織含有シート、及び毛包組織含有シートの製造方法
CN101657536B (zh) 软骨细胞制备方法
Huang et al. In vivo differentiation of adipose-derived stem cells in an injectable poloxamer-octapeptide hybrid hydrogel
CN104491927B (zh) 一种脱细胞舌基质材料及其制备方法
JP2009011588A (ja) 人工皮膚およびその製造方法
KR20080071656A (ko) 배양된 모낭구성세포를 이용한 생인공피부 제조방법
CN104971382A (zh) 一种用无血清和牛垂体提取物培养液构建的创口贴式人工活性组织及其构建方法
CN105169484A (zh) 一种在体内形成骨组织的细胞移植培养方法
CN103041453A (zh) 胶原/纤维蛋白胶-vegf与间充质干细胞复合构建的双层皮肤覆盖物及制备方法和应用
Jeong et al. Human cartilage tissue engineering with pluronic and cultured chondrocyte sheet
KR20130102506A (ko) 성숙 낭성 기형종 유래 세포 및 조직의 용도
WO2022265021A1 (ja) アテロコラーゲンと毛球部毛根鞘(dsc)細胞とを含む組成物、毛髪を再生するためのキット、毛髪を再生するための組成物を製造する方法及び毛髪を再生する方法
CN107320781B (zh) 含活细胞的组织工程皮肤及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20140625