RU2007108717A - Получение рекомбинантного белка рфно-lg - Google Patents

Получение рекомбинантного белка рфно-lg Download PDF

Info

Publication number
RU2007108717A
RU2007108717A RU2007108717/13A RU2007108717A RU2007108717A RU 2007108717 A RU2007108717 A RU 2007108717A RU 2007108717/13 A RU2007108717/13 A RU 2007108717/13A RU 2007108717 A RU2007108717 A RU 2007108717A RU 2007108717 A RU2007108717 A RU 2007108717A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
total
culture
total amount
conditions
glutamine
Prior art date
Application number
RU2007108717/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2458988C2 (ru
Inventor
Дэнис ДРЭПЕ (US)
Дэнис ДРЭПЕ
Йен-Туанг ЛУАН (US)
Йен-Туанг ЛУАН
Джэймс Р. МЕРСЕР (US)
Джэймс Р. МЕРСЕР
Венг ВАНГ (US)
Венг ВАНГ
Дэниэл ЛАСКО (US)
Дэниэл ЛАСКО
Original Assignee
Вайет Рисерч Айрлэнд Лимитед (Ie)
Вайет Рисерч Айрлэнд Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35500648&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2007108717(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Вайет Рисерч Айрлэнд Лимитед (Ie), Вайет Рисерч Айрлэнд Лимитед filed Critical Вайет Рисерч Айрлэнд Лимитед (Ie)
Publication of RU2007108717A publication Critical patent/RU2007108717A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2458988C2 publication Critical patent/RU2458988C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/32—Amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C12N2500/95—Protein-free medium and culture conditions

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Claims (50)

1. Способ крупномасштабного получения рФНО-lg в культуре клеток, включающий следующие этапы:
обеспечение культуры клеток, содержащей:
клетки млекопитающего, которые содержат ген, кодирующий рФНО-lg, экспрессия которого происходит в условиях культивирования клеток; и; среду, содержащую глютамин, и обладающую свойствами, выбранными из группы, состоящей из следующего: (i) суммарное количество аминокислот на единицу объема больше приблизительно 70 мМ; (ii) отношение суммарного молярного количества глютамина к суммарному количеству аспарагина меньше, чем приблизительно 2; (iii) отношение суммарного молярного количества глютамина к суммарному количеству всех аминокислот меньше, чем приблизительно 0.2; (iv) отношение суммарного молярного количества неорганических ионов к суммарному количеству всех аминокислот составляет приблизительно от 0.4 до 1; (v) совокупное суммарное количество глютамина и аспарагина на единицу объема больше, чем приблизительно 16 мМ; и комбинаций указанных свойств;
поддержание указанной культуры в фазе начального роста при первом наборе условий культивирования в течение первого периода времени, достаточного для того, чтобы клетки размножились до получения плотности жизнеспособных клеток, лежащей в диапазоне приблизительно 20%-80% от максимальной плотности жизнеспособных клеток, которую можно было бы получить при выращивании указанной культуры при указанном первом наборе условий культивирования;
изменение по меньшей мере одного из условий культивирования с получением второго набора условий культивирования;
поддержание указанной культуры при указанном втором наборе условий в течение второго периода времени, с тем, чтобы в культуре произошло накопление рФНО-lg.
2. Способ крупномасштабного получения рФНО-lg в культуре клеток, включающий следующие этапы:
обеспечение культуры клеток, содержащей:
клетки млекопитающего, которые содержат ген, кодирующий рФНО-lg, экспрессия которого происходит в условиях культивирования клеток; и
среду, в которой отношение суммарного молярного количества глютамина к суммарному количеству аспарагина меньше, чем приблизительно 22; и
указанная среда содержит глютамин; и указанная среда обладает двумя свойствами, выбранными из группы, состоящей из следующего: (i) суммарное количество аминокислот в среде на единицу объема больше приблизительно 70 мМ; (ii) отношение суммарного молярного количества глютамина к суммарному количеству всех аминокислот меньше, чем приблизительно 0.2; (iii) отношение суммарного молярного количества неорганических ионов к суммарному количеству всех аминокислот составляет приблизительно от 0.4 до 1; (iv) совокупное суммарное количество глютамина и аспарагина на единицу объема больше, чем приблизительно 16 мМ; и комбинаций указанных свойств; поддержание указанной культуры в фазе начального роста при первом наборе условий культивирования в течение первого периода времени, достаточного для того, чтобы клетки размножились до получения плотности жизнеспособных клеток, лежащей в диапазоне приблизительно 20%-80% от максимальной плотности жизнеспособных клеток, которую можно было бы получить при выращивании указанной культуры при указанном первом наборе условий культивирования;
изменение по меньшей мере одного из условий культивирования с в получением второго набора условий культивирования;
поддержание указанной культуры при указанном втором наборе условий в течение второго периода времени, с тем, чтобы в культуре произошло накопление рФНО-lg.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанное условие культивирования на указанном этапе изменения по меньшей мере одного из условий культивирования выбрано из группы, состоящей из: (i) температуры; (ii) рН; (iii) осмоляльности; (iv) уровня химического активатора и их комбинаций.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что исходная концентрация глютамина в указанной среде меньше или равна 10 мМ.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что исходная концентрация глютамина в указанной среде меньше или равна 4 мМ.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество глютамина на единицу объема в указанной среде меньше или равно 10 мМ.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество глютамина на единицу объема в указанной среде меньше или равно 4 мМ.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что глютамин обеспечивают только в исходной среде в начале культивирования клеток.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что исходная плотность указанных клеток млекопитающего составляет по меньшей мере 2·105 клеток/мл.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что исходная плотность указанных клеток млекопитающего составляет по меньшей мере 2·106 клеток/мл.
11. Способ по п.1, отличающийся тем, что этап обеспечения включает обеспечение по меньшей мере 1000 л культуры.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что этап обеспечения включает обеспечения по меньшей мере 10,000 л культуры.
13. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный первый набор условий включает первый диапазон температур, который составляет приблизительно от 30 до 42°С.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный первый набор условий включает первый диапазон температур, который составляет приблизительно от 37°С.
15. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный второй набор условий включает второй диапазон температур, который составляет приблизительно от 25 до 41°С.
16. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный второй набор условий включает второй диапазон температур, который составляет приблизительно от 29 до 35°С.
17. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный второй набор условий включает второй диапазон температур, который составляет приблизительно 31°С.
18. Способ по п.1, который дополнительно включает следующий за первым указанным этапом изменения по меньшей мере одного из условий культивирования второй этап изменения условий, включающий изменение по меньшей мере одного из условий культивирования, в результате которого получают третий набор условий культивирования.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что второй этап изменения условий включает изменение по меньшей мере одного из условий культивирования, выбранного из группы, состоящей из: (i) температуры; (ii) pH; (iii) осмоляльности; (iv) уровня химического активатора, и их комбинаций.
20. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный третий набор условий включает третий диапазон температур, который составляет приблизительно 27 до 37°С.
21. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный первый период времени составляет 1-7 дней.
22. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный первый период времени составляет 4 дня.
23. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный первый период времени и указанный второй период времени вместе составляют по меньшей мере 5 дней.
24. Способ по п.1, отличающийся тем, что на этапе подержания культуры в течение второго периода времени уровень лактата снижается после того, как уровень лактата в культуре достиг максимального уровня.
25. Способ по п.1, отличающийся тем, что на этапе подержания культуры в течение второго периода времени уровень аммония снижается после того, как уровень аммония в культуре достиг максимального уровня.
26. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанное общее количество указанного получаемого рФНО-lg по меньшей мере в 1.5 раза выше, чем количество полипептида, получаемого при в остальном идентичных условиях и в остальном идентичной среде, которая не обладает указанным свойством.
27. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанное общее количество указанного полученного рФНО-lg по меньшей мере в 2 раза выше, чем количество рФНО-lg, получаемого при в остальном идентичных условиях и в остальном идентичной среде, которая не обладает указанным свойством.
28. Способ по п.1, отличающийся тем, что в указанную культуру клеток добавляют дополнительные компоненты.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что указанные дополнительные компоненты добавляют в множественные моменты времени.
30. Способ по п.28, отличающийся тем, что указанные дополнительные компоненты выбраны из группы, состоящей из: гормонов и/или других факторов роста, определенных ионов (таких как натрий, хлор, кальций, магний и фосфат-ион), буферов, витаминов, нуклеозидов или нуклеотидов, микроэлементов (неорганических соединений, обычно присутствующих в очень низких конечных концентрациях), аминокислот, липидов, глюкозы или других источников энергии.
31. Способ крупномасштабного получения рФНО-lg в культуре клеток, включающий следующие этапы:
обеспечение культуры клеток, содержащей:
клетки млекопитающего, которые содержат ген, кодирующий рФНО-lg, экспрессия которого происходит в условиях культивирования клеток; и
среду определенного состава, содержащую глютамин и обладающую по меньшей мере двумя свойствами, выбранными из группы, состоящей из следующего: i) начальная концентрация аминокислот больше, чем 70 мМ; ii) отношение молярного количества глютамина к молярному количеству аспарагина меньше, чем приблизительно 2; iii) отношение молярного количества глютамина к количеству всех аминокислот меньше, чем приблизительно 0.2; отношение молярного количества неорганических ионов к количеству всех аминокислот составляет приблизительно от 0.4 до 1; и v) совокупная концентрация глютамина и аспарагина больше, чем приблизительно 16 мМ;
поддержание указанной культуры в фазе начального роста при первом наборе условий культивирования в течение первого периода времени, достаточного для того, чтобы клетки размножились до получения плотности жизнеспособных клеток, лежащей в диапазоне приблизительно 20%-80% от максимальной плотности жизнеспособных клеток, которую можно было бы получить при выращивании указанной культуры при указанном первом наборе условий культивирования;
изменение по меньшей мере одного из условий культивирования с получением второго набора условий культивирования;
поддержание указанной культуры при указанном втором наборе условий в течение второго периода времени, с тем, чтобы в культуре произошло накопление рФНО-lg.
32. Способ крупномасштабного получения рФНО-lg в культуре клеток, включающий следующие этапы:
обеспечение культуры клеток, содержащей:
клетки млекопитающего, которые содержат ген, кодирующий рФНО-lg, экспрессия которого происходит в условиях культивирования клеток; и
среду определенного состава, содержащую глютамин и отличающуюся тем, что: i) начальная концентрация аминокислот больше, чем 70 мМ; ii) отношение молярного количества глютамина к молярному количеству аспарагина меньше, чем приблизительно 2; iii) отношение молярного количества глютамина к количеству всех аминокислот меньше, чем приблизительно 0.2; iv) отношение молярного количества неорганических ионов к количеству всех аминокислот составляет приблизительно от 0.4 до 1; и v) совокупная концентрация глютамина и аспарагина больше, чем приблизительно 16 мМ;
поддержание указанной культуры в фазе начального роста при первом наборе условий культивирования в течение первого периода времени, достаточного для того, чтобы клетки размножились до получения плотности жизнеспособных клеток, лежащей в диапазоне приблизительно 20%-80% от максимальной плотности жизнеспособных клеток, которую можно было бы получить при выращивании указанной культуры при указанном первом наборе условий культивирования;
изменение по меньшей мере одного из условий культивирования с получением второго набора условий культивирования;
поддержание указанной культуры при указанном втором наборе условий в течение второго периода времени, с тем, чтобы в культуре произошло накопление рФНО-lg.
33. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная среда включает среду, содержащую глютамин, которая обладает свойством, выбранным из группы, состоящей из следующего:
(i) а начальная концентрация аминокислот больше, чем 70 мМ; (ii) начальное отношение молярного количества глютамина к молярному количеству аспарагина меньше, чем приблизительно 2; (iii) начальное отношение молярного количества глютамина к количеству всех аминокислот меньше, чем приблизительно 0.2; (iv) начальное отношение молярного количества неорганических ионов к количеству всех аминокислот составляет приблизительно от 0.4 до 1; (v) совокупная концентрация глютамина и аспарагина больше, чем приблизительно 16 мМ; и комбинаций указанных свойств.
34. Способ по любому из пп.1-2 или 31-33, отличающийся тем, что:
уровень лактата ниже, чем уровень лактата, наблюдаемый при в остальном идентичных условиях и в остальном идентичной среде, которая не обладает указанным свойством;
уровень аммония ниже, чем уровень аммония, наблюдаемый при в остальном идентичных условиях и в остальном идентичной среде, которая не обладает указанным свойством; и
общее количество получаемого рФНО-lg по меньшей мере так же высоко, как количество рФНО-lg, получаемое при в остальном идентичных условиях и в остальном идентичной среде, которая не обладает указанным свойством.
35. Способ по п.1, отличающийся тем, что в указанную культуру в ходе получения рФНО-lg не добавляют дополнительных компонентов.
36. Способ по п.1, отличающийся тем, что в указанной культуре вместо глютамина используют глицилглютамин.
37. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество гистидина, изолейцина, лейцина, метионина, фенилаланина, пролина, триптофана, тирозина и пролина на единицу объема в указанной культуре больше, чем приблизительно 25 мМ.
38. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество гистидина, изолейцина, лейцина, метионина, фенилаланина, пролина, триптофана, тирозина и пролина на единицу объема в указанной культуре больше, чем приблизительно 35 мМ.
39. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная среда обладает свойством, выбранным из группы, состоящей из следующего:
(i) суммарное общее количество гистидина на единицу объема больше, чем приблизительно 1.7 мМ;
(ii) суммарное общее количество изолейцина на единицу объема больше, чем приблизительно 3.5 мМ;
(iii) суммарное общее количество лейцина на единицу объема больше, чем приблизительно 5.5 мМ;
(iv) суммарное общее количество метионина на единицу объема больше, чем приблизительно 2.0 мМ;
(v) суммарное общее количество фенилаланина на единицу объема больше, чем приблизительно 2.5 мМ;
(vi) суммарное общее количество пролина на единицу объема больше, чем приблизительно 2.5 мМ;
(vii) суммарное общее количество триптофана на единицу объема больше, чем приблизительно 1.0 мМ;
(viii) суммарное общее количество тирозина на единицу объема больше, чем приблизительно 2.0 мМ; и
(ix) суммарное общее количество пролина на единицу объема больше, чем приблизительно 2.5 мМ.
40. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество серина на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 10 мМ.
41. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество аспарагина на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 8 мМ.
42. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество аспарагина на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 12 мМ.
43. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество фосфора на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 5 мМ.
44. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество глютамата на единицу объема в указанной среде меньше, чем приблизительно 1 мМ.
45. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество пантотената кальция на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 20 мг/л.
46. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество никотинамида на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 25 мг/л.
47. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество пиридоксина и пиридоксала на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 35 мг/л.
48. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество рибофлавина на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 2.0 мг/л.
49. Способ по п.1, отличающийся тем, что суммарное общее количество тиамина гидрохлорида на единицу объема в указанной среде больше, чем приблизительно 35 мг/л.
50. Способ крупномасштабного получения рФНО-Fc в культуре клеток, включающий следующие этапы:
обеспечение культуры клеток, содержащей:
клетки млекопитающего, которые содержат ген, кодирующий рФНО-Fc, экспрессия которого происходит в условиях культивирования клеток; и; среду, содержащую глютамин, и обладающую свойствами, выбранными из группы, состоящей из следующего: (i) суммарное количество аминокислот на единицу объема больше приблизительно 70 мМ; (ii) отношение суммарного молярного количества глютамина к суммарному количеству аспарагина меньше, чем приблизительно 2; (iii) отношение суммарного молярного количества глютамина к суммарному количеству всех аминокислот меньше, чем приблизительно 0.2; (iv) отношение суммарного молярного количества неорганических ионов к суммарному количеству всех аминокислот составляет приблизительно от 0.4 до 1; (v) совокупное суммарное количество глютамина и аспарагина на единицу объема больше, чем приблизительно 16 мМ; и комбинаций указанных свойств;
поддержание указанной культуры в фазе начального роста при первом наборе условий культивирования в течение первого периода времени, достаточного для того, чтобы клетки размножились до получения плотности жизнеспособных клеток, лежащей в диапазоне приблизительно 20%-80% от максимальной плотности жизнеспособных клеток, которую можно было бы получить при выращивании указанной культуры при указанном первом наборе условий культивирования;
изменение по меньшей мере одного из условий культивирования с получением второго набора условий культивирования;
поддержание указанной культуры при указанном втором наборе условий в течение второго периода времени, с тем, чтобы в культуре произошло накопление рФНО-Fc.
RU2007108717/10A 2004-08-27 2005-08-26 ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА pФНО-lg RU2458988C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US60537904P 2004-08-27 2004-08-27
US60/605,379 2004-08-27

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007108717A true RU2007108717A (ru) 2008-10-10
RU2458988C2 RU2458988C2 (ru) 2012-08-20

Family

ID=35500648

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007108717/10A RU2458988C2 (ru) 2004-08-27 2005-08-26 ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА pФНО-lg

Country Status (38)

Country Link
US (1) US7300773B2 (ru)
EP (2) EP1781802B1 (ru)
JP (3) JP2008511330A (ru)
KR (1) KR100988451B1 (ru)
CN (2) CN102876761A (ru)
AR (2) AR050537A1 (ru)
AT (2) ATE446376T1 (ru)
AU (1) AU2005280036B2 (ru)
BR (1) BRPI0514694B8 (ru)
CA (1) CA2578138C (ru)
CL (1) CL2017000577A1 (ru)
CR (2) CR8998A (ru)
CY (2) CY1109721T1 (ru)
DE (2) DE602005020076D1 (ru)
DK (2) DK1992697T3 (ru)
EC (1) ECSP077354A (ru)
EG (1) EG26922A (ru)
ES (2) ES2341390T3 (ru)
GT (2) GT200500233A (ru)
HK (2) HK1121497A1 (ru)
HN (1) HN2005000485A (ru)
HR (2) HRP20100011T1 (ru)
IL (1) IL181588A (ru)
MX (1) MX2007002381A (ru)
MY (1) MY137803A (ru)
NO (1) NO344785B1 (ru)
NZ (1) NZ579208A (ru)
PE (2) PE20100448A1 (ru)
PL (2) PL1992697T3 (ru)
PT (2) PT1992697E (ru)
RS (2) RS51255B (ru)
RU (1) RU2458988C2 (ru)
SI (2) SI1992697T1 (ru)
SV (1) SV2006002211A (ru)
TW (1) TWI364458B (ru)
UA (1) UA89383C2 (ru)
WO (1) WO2006026447A2 (ru)
ZA (1) ZA200701672B (ru)

Families Citing this family (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI374935B (en) 2004-08-27 2012-10-21 Pfizer Ireland Pharmaceuticals Production of α-abeta
TWI384069B (zh) 2004-08-27 2013-02-01 Pfizer Ireland Pharmaceuticals 多胜肽之製法
BRPI0611901A2 (pt) 2005-06-14 2012-08-28 Amgen, Inc composição, liofilizado, kit, e, processo para preparar uma composição
AR058140A1 (es) * 2005-10-24 2008-01-23 Wyeth Corp Metodo de produccion proteica utilizando compuestos anti-senescencia
US20070231895A1 (en) * 2005-11-02 2007-10-04 Lee Gene W Methods for adapting mammalian cells
ES2668212T3 (es) * 2006-07-13 2018-05-17 Wyeth Llc Producción de factor de coagulación IX con patrón de glucosilación mejorado
CA2666317C (en) * 2006-11-03 2013-08-06 Wyeth Glycolysis-inhibiting substances in cell culture
CA2668771C (en) * 2006-11-08 2016-03-15 Wyeth Rationally designed media for cell culture
RU2009132986A (ru) * 2007-03-02 2011-04-10 Уайт (Us) Применение меди и глутамата в культуре клеток для производства полипептидов
TW200902708A (en) 2007-04-23 2009-01-16 Wyeth Corp Methods of protein production using anti-senescence compounds
DK2154244T3 (en) 2007-04-26 2017-06-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd CELL CULTIVATION PROCEDURE WHEN AN ACID-ENRICHED MEDIUM IS USED
AU2009236187B2 (en) * 2008-04-17 2012-08-02 Wyeth Llc Methods for enhanced production of bone morphogenetic proteins
JP2011516086A (ja) * 2008-04-18 2011-05-26 上海中信国健薬業股▲ふん▼有限公司 濃縮培養液及びその使用方法
US8318416B2 (en) 2008-08-08 2012-11-27 Biogen Idec Ma Inc. Nutrient monitoring and feedback control for increased bioproduct production
LT2464725T (lt) 2009-08-11 2020-06-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Baltymų gamyba ląstelių mitybinėje terpėje, kurioje nėra glutamino
IN2012DN05169A (ru) * 2009-12-02 2015-10-23 Acceleron Pharma Inc
CN102858953B (zh) 2010-04-26 2015-09-09 诺瓦提斯公司 改进的细胞培养基
CN107254499B (zh) 2010-04-26 2021-09-17 诺华股份有限公司 改进的细胞培养方法
CA2807607A1 (en) 2010-08-20 2012-02-23 Wyeth Llc Cell culture of growth factor-free adapted cells
US20130331554A1 (en) * 2010-11-15 2013-12-12 Biogen Idec Inc. Enrichment and concentration of select product isoforms by overloaded bind and elute chromatography
ES2560470T3 (es) 2011-04-29 2016-02-19 Biocon Research Limited Un método para reducir la heterogeneidad de anticuerpos y un proceso de producción de dichos anticuerpos
EP2718328A4 (en) 2011-06-08 2014-12-24 Acceleron Pharma Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR INCREASING THE HALF TIME OF SERUM
TW201325606A (zh) 2011-10-18 2013-07-01 Coherus Biosciences Inc 用氯化鈉穩定化之依那西普調配物
US10493151B2 (en) 2011-10-18 2019-12-03 Coherus Biosciences, Inc. Etanercept formulations stabilized with sodium chloride
SG11201401220SA (en) * 2011-10-21 2014-07-30 Pfizer Addition of iron to improve cell culture
CN104159916A (zh) * 2012-02-22 2014-11-19 Nvip私人有限公司 肿瘤坏死因子受体融合蛋白及其使用方法
JP2015525762A (ja) 2012-07-09 2015-09-07 コヒラス・バイオサイエンシズ・インコーポレイテッド エタネルセプトの安定な水性製剤
CA2882551A1 (en) 2012-09-11 2014-03-20 Coherus Biosciences, Inc. Correctly folded etanercept in high purity and excellent yield
US9217168B2 (en) 2013-03-14 2015-12-22 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods of cell culture
WO2014160790A1 (en) 2013-03-26 2014-10-02 Coherus Biosciences, Inc. Protein production method
KR101439195B1 (ko) 2013-04-18 2014-09-12 동아대학교 산학협력단 에셰리키아 콜리 a-53 균주를 이용하여 섬유소 분해효소의 생산성을 향상시키는 공정
MX2016004564A (es) * 2013-10-11 2016-07-12 Regeneron Pharma Cultivo celular metabolicamente optimizado.
US11390663B2 (en) 2013-10-11 2022-07-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Metabolically optimized cell culture
AU2015210930B2 (en) 2014-01-30 2020-04-30 Coherus Biosciences, Inc. Perfusion media
EP3102589A1 (en) 2014-02-04 2016-12-14 Biogen MA Inc. Use of cation-exchange chromatography in the flow-through mode to enrich post-translational modifications
SG11201704351WA (en) * 2014-12-01 2017-06-29 Amgen Inc Process for manipulating the level of glycan content of a glycoprotein
KR102007930B1 (ko) 2014-12-31 2019-08-06 주식회사 엘지화학 재조합 당단백질의 글리코실화 조절 방법
CN105777897A (zh) * 2015-03-20 2016-07-20 广东东阳光药业有限公司 一种cho细胞收获液的前处理方法
CN107429227B (zh) * 2015-04-01 2022-03-01 勃林格殷格翰国际公司 细胞培养基
KR101936049B1 (ko) * 2015-10-15 2019-01-08 (주)알테오젠 IgG Fc 도메인을 가지는 융합 단백질의 생산방법
CN114917185B (zh) 2016-10-21 2023-11-14 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN110484487A (zh) * 2019-08-21 2019-11-22 安徽欣乐生物技术有限公司 一种适用于cho细胞培养用无蛋白培养基及其培养方法
KR20230124578A (ko) 2020-12-22 2023-08-25 암젠 인크 세포 배양 방법
CN115073607A (zh) * 2021-03-12 2022-09-20 上海康岱生物医药技术股份有限公司 Tnfr2与baff受体的融合蛋白
CN114480492B (zh) * 2022-01-28 2023-04-21 景泽生物医药(合肥)股份有限公司 一种重组人抗体融合蛋白的制备方法

Family Cites Families (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4713339A (en) 1983-01-19 1987-12-15 Genentech, Inc. Polycistronic expression vector construction
AU2353384A (en) 1983-01-19 1984-07-26 Genentech Inc. Amplification in eukaryotic host cells
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
US5672502A (en) 1985-06-28 1997-09-30 Celltech Therapeutics Limited Animal cell culture
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
ATE135397T1 (de) * 1988-09-23 1996-03-15 Cetus Oncology Corp Zellenzuchtmedium für erhöhtes zellenwachstum, zur erhöhung der langlebigkeit und expression der produkte
US6048728A (en) 1988-09-23 2000-04-11 Chiron Corporation Cell culture medium for enhanced cell growth, culture longevity, and product expression
US6291159B1 (en) 1989-05-16 2001-09-18 Scripps Research Institute Method for producing polymers having a preselected activity
US5395760A (en) 1989-09-05 1995-03-07 Immunex Corporation DNA encoding tumor necrosis factor-α and -β receptors
US5605690A (en) 1989-09-05 1997-02-25 Immunex Corporation Methods of lowering active TNF-α levels in mammals using tumor necrosis factor receptor
NZ235148A (en) 1989-09-05 1991-12-23 Immunex Corp Tumour necrosis factor receptor protein and dna sequences
JPH0396383A (ja) 1989-09-08 1991-04-22 Riso Kagaku Corp 画像形成装置
EP1132471A3 (de) 1989-09-12 2001-11-28 F. Hoffmann-La Roche Ag TNF-bindende Proteine
ES2118066T3 (es) 1989-10-05 1998-09-16 Optein Inc Sintesis y aislamiento, exentos de celulas, de nuevos genes y polipeptidos.
US6657103B1 (en) 1990-01-12 2003-12-02 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5538983A (en) 1990-05-16 1996-07-23 The Rockefeller University Method of treating amyloidosis by modulation of calcium
US5156964A (en) 1990-08-16 1992-10-20 Cetus Corporation Methods for adapting cells for increased product production through exposure to ammonia
US5122469A (en) * 1990-10-03 1992-06-16 Genentech, Inc. Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins
GB9021679D0 (en) 1990-10-05 1990-11-21 Gorman Scott David Antibody preparation
GB9022545D0 (en) 1990-10-17 1990-11-28 Wellcome Found Culture medium
GB2251249B (en) 1990-12-28 1995-06-21 Mogam Biotech Res Inst High-density medium for animal cell culture
GB9118664D0 (en) 1991-08-30 1991-10-16 Celltech Ltd Cell culture
US5447851B1 (en) 1992-04-02 1999-07-06 Univ Texas System Board Of Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells
JP3504963B2 (ja) 1993-10-22 2004-03-08 智靖 羅 抗ヒト高親和性ＩｇＥ受容体モノクローナル抗体に係るアミノ酸配列をコードするＤＮＡ断片
US6310185B1 (en) 1994-03-08 2001-10-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Recombinant human anti-Lewis Y antibodies
US5856179A (en) 1994-03-10 1999-01-05 Genentech, Inc. Polypeptide production in animal cell culture
US5589154A (en) 1994-11-22 1996-12-31 Rutgers, The State University Of New Jersey Methods for the prevention or treatment of vascular hemorrhaging and Alzheimer's disease
IL117175A (en) * 1995-02-20 2005-11-20 Sankyo Co Osteoclastogenesis inhibitory factor protein
US5721121A (en) 1995-06-06 1998-02-24 Genentech, Inc. Mammalian cell culture process for producing a tumor necrosis factor receptor immunoglobulin chimeric protein
US6656466B1 (en) * 1995-06-06 2003-12-02 Genetech, Inc. Human tumor necrosis factor—immunoglobulin(TNFR1-IgG1) chimera composition
US5705364A (en) 1995-06-06 1998-01-06 Genentech, Inc. Mammalian cell culture process
JP4306813B2 (ja) * 1995-09-19 2009-08-05 アスビオファーマ株式会社 動物細胞の新規培養方法
US20020012991A1 (en) * 1997-04-07 2002-01-31 Florence Chua Nee Ho Kit Fong Cell culture media for enhanced protein production
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
EP1150688A4 (en) 1998-10-19 2004-06-16 Yeda Res & Dev TREATING SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATODES BY REGULATING THE AUTOIMMUNE RESPONSE TO AUTOANTIGENS
PE20020574A1 (es) 2000-12-06 2002-07-02 Wyeth Corp Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta
TWI329129B (en) 2001-02-08 2010-08-21 Wyeth Corp Modified and stabilized gdf propeptides and uses thereof
ES2437875T3 (es) 2001-04-30 2014-01-14 Eli Lilly And Company Anticuerpos humanizados que reconocen el péptido beta-amiloide
ES2312569T3 (es) 2001-04-30 2009-03-01 Eli Lilly And Company Anticuerpos humanizados.
CA2447791A1 (en) 2001-06-13 2002-12-19 Neslihan Delacruz Methods of culturing animal cells and polypeptide production in animal cells
US7320789B2 (en) 2001-09-26 2008-01-22 Wyeth Antibody inhibitors of GDF-8 and uses thereof
CA2476654A1 (en) 2002-02-21 2003-09-04 Wyeth Follistatin domain containing proteins
MXPA04008150A (es) 2002-02-21 2005-06-17 Wyeth Corp Gasp1: una proteina que contiene dominio de folistatina.
MY139983A (en) 2002-03-12 2009-11-30 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
DK1507556T3 (en) 2002-05-02 2016-09-12 Wyeth Holdings Llc Calicheamicin derivative-carrier conjugates
AR047392A1 (es) 2002-10-22 2006-01-18 Wyeth Corp Neutralizacion de anticuerpos contra gdf 8 y su uso para tales fines
US20040223966A1 (en) 2002-10-25 2004-11-11 Wolfman Neil M. ActRIIB fusion polypeptides and uses therefor
TWI384069B (zh) 2004-08-27 2013-02-01 Pfizer Ireland Pharmaceuticals 多胜肽之製法
TWI374935B (en) 2004-08-27 2012-10-21 Pfizer Ireland Pharmaceuticals Production of α-abeta

Also Published As

Publication number Publication date
CR20120560A (es) 2012-12-04
US7300773B2 (en) 2007-11-27
BRPI0514694B1 (pt) 2019-04-24
CA2578138A1 (en) 2006-03-09
JP2012095672A (ja) 2012-05-24
PT1781802E (pt) 2010-01-04
JP2008511330A (ja) 2008-04-17
HK1099941A1 (en) 2007-08-31
CN101061231B (zh) 2012-09-26
US20060121569A1 (en) 2006-06-08
ZA200701672B (en) 2012-04-24
ECSP077354A (es) 2007-05-30
EP1781802B1 (en) 2009-10-21
TW200619388A (en) 2006-06-16
RS51072B (sr) 2010-10-31
IL181588A (en) 2010-12-30
ATE461285T1 (de) 2010-04-15
WO2006026447A2 (en) 2006-03-09
HK1121497A1 (en) 2009-04-24
CY1110092T1 (el) 2015-01-14
MX2007002381A (es) 2007-06-15
CN102876761A (zh) 2013-01-16
CY1109721T1 (el) 2014-08-13
BRPI0514694A (pt) 2008-06-17
SI1781802T1 (sl) 2010-01-29
TWI364458B (en) 2012-05-21
UA89383C2 (ru) 2010-01-25
RU2458988C2 (ru) 2012-08-20
MY137803A (en) 2009-03-31
CL2017000577A1 (es) 2017-12-01
NO20071570L (no) 2007-05-23
CN101061231A (zh) 2007-10-24
SI1992697T1 (sl) 2010-07-30
PL1781802T3 (pl) 2010-03-31
HN2005000485A (es) 2009-06-09
ES2335518T3 (es) 2010-03-29
EG26922A (en) 2014-12-25
GT200500234A (es) 2006-10-10
HRP20100271T1 (hr) 2010-06-30
CA2578138C (en) 2010-10-05
AU2005280036A1 (en) 2006-03-09
CR8998A (es) 2007-11-23
DE602005017285D1 (ru) 2009-12-03
SV2006002211A (es) 2006-10-04
WO2006026447A9 (en) 2006-06-01
ATE446376T1 (de) 2009-11-15
DK1781802T3 (da) 2010-01-25
PL1992697T3 (pl) 2010-08-31
RS51255B (sr) 2010-12-31
WO2006026447A3 (en) 2006-04-20
PE20100448A1 (es) 2010-06-22
AR050537A1 (es) 2006-11-01
DK1992697T3 (da) 2010-05-17
ES2341390T3 (es) 2010-06-18
NZ579208A (en) 2012-01-12
IL181588A0 (en) 2007-07-04
JP2016056214A (ja) 2016-04-21
BRPI0514694B8 (pt) 2021-05-25
PT1992697E (pt) 2010-04-21
PE20060815A1 (es) 2006-09-14
AR088824A2 (es) 2014-07-10
NO344785B1 (no) 2020-04-27
JP5921910B2 (ja) 2016-05-24
EP1992697B1 (en) 2010-03-17
KR100988451B1 (ko) 2010-10-18
HRP20100011T1 (hr) 2010-02-28
GT200500233A (es) 2006-03-09
EP1781802A2 (en) 2007-05-09
DE602005020076D1 (de) 2010-04-29
KR20070069140A (ko) 2007-07-02
EP1992697A1 (en) 2008-11-19
AU2005280036B2 (en) 2011-11-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2007108717A (ru) Получение рекомбинантного белка рфно-lg
RU2007108718A (ru) Получение антител против амилоида бета
JP2008511330A5 (ru)
JP2008511328A5 (ru)
RU2009138226A (ru) Способы производства белка с использованием соединений, препятствующих старению
JP2008511329A5 (ru)
CN109337861B (zh) 一种支持产物高表达的cho细胞无血清培养基
Ljunggren et al. Catabolic control of hybridoma cells by glucose and glutamine limited fed batch cultures
JP6347949B2 (ja) 改良型細胞培養培地
RU2008152449A (ru) Получение гликопротеинов
JP2018533366A5 (ru)
JP6393267B2 (ja) かん流細胞培養システムを最適化するための方法およびシステム
CN101195817A (zh) 一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途
RU2015144020A (ru) Среды для культивирования клеток и способы получения антител
CN1778903A (zh) 一种动物细胞高密度连续灌注培养方法
CN109929897A (zh) 一种促进hau-m1光合细菌菌群产氢的培养基及其应用
KR20210152507A (ko) 케토산을 포함하는 세포 배양 배지
CN101381748A (zh) 通过两步法供氧策略提高发酵生产l-精氨酸产量的方法
Wall et al. A pleiotropic mutant of Rhodopseudomonas capsulata defective in nitrogen metabolism
CN105087460A (zh) 一种st细胞培养基
Zawada et al. Effects of growth rate on cell extract performance in cell‐free protein synthesis
RU2007108719A (ru) Производство полипептидов
CN114854695B (zh) 提高β-2微球蛋白在HEK-293细胞中表达水平的细胞转染培养方法
RU2008146193A (ru) Способ получения грамицидина с при глубинном выращивании культуры - продуцента bacillus brevis
CN104651297A (zh) 用于人胚胎肾细胞高密度大规模悬浮培养的培养基及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20121101