RU2005137697A - Синтетический ген, кодирующий человеческий раково-эмбриональный антиген, и его применение - Google Patents
Синтетический ген, кодирующий человеческий раково-эмбриональный антиген, и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2005137697A RU2005137697A RU2005137697/13A RU2005137697A RU2005137697A RU 2005137697 A RU2005137697 A RU 2005137697A RU 2005137697/13 A RU2005137697/13 A RU 2005137697/13A RU 2005137697 A RU2005137697 A RU 2005137697A RU 2005137697 A RU2005137697 A RU 2005137697A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vector
- nucleic acid
- acid molecule
- protein
- codon
- Prior art date
Links
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims 7
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 title 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims 34
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 17
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims 16
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims 16
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 12
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 8
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims 7
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 5
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 claims 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims 1
- 101100348738 Mus musculus Noc3l gene Proteins 0.000 claims 1
- 229940021704 adenovirus vaccine Drugs 0.000 claims 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 208000029565 malignant colon neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 claims 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
- C07K14/70—Enkephalins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2799/00—Uses of viruses
- C12N2799/02—Uses of viruses as vector
- C12N2799/021—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid
- C12N2799/022—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid where the vector is derived from an adenovirus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Claims (28)
1. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты, включающая в себя последовательность нуклеотидов, которая кодирует белок человеческого раково-эмбрионального антигена (СЕА), представленную в SEQ ID NO:2, где указанная синтетическая молекула нуклеиновой кислоты оптимизирована по кодонам для достижения высокого уровня экспрессии в клетке человека.
2. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты по п.1, отличающаяся тем, что указанная нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
3. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты по п.1, отличающаяся тем, что указанная нуклеиновая кислота представляет собой мРНК.
4. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты по п.1, отличающаяся тем, что указанная нуклеиновая кислота представляет собой кДНК.
5. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты по п.1, отличающаяся тем, что указанная последовательность нуклеотидов включает последовательность, представленную в SEQ ID NO:1.
6. Вектор, включающий в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.
7. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.6.
8. Способ экспрессирования белка человеческого раково-эмбрионального антигена (СЕА) в рекомбинантной хозяйской клетке, включающий в себя
(а) введение вектора, содержащего нуклеиновую кислоту по п.1, в подходящую хозяйскую клетку; и
(b) культивирование хозяйской клетки в условиях, позволяющих экспрессию указанного белка человеческого СЕА.
9. Способ профилактики или лечения рака, включающий в себя введение млекопитающему вакцинного вектора, содержащего синтетическую молекулу нуклеиновой кислоты, оптимизированной по кодонам, где указанная молекула нуклеиновой кислоты включает в себя последовательность нуклеотидов, которая кодирует белок человеческого раково-эмбрионального антигена (hCEA), представленную в SEQ ID NO:2, или вариант белка СЕА, представленный в SEQ ID NO:16.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанное млекопитающее представляет собой человека.
11. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный вектор представляет собой аденовирусный вектор или плазмидный вектор.
12. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный вектор представляет собой аденовирусный вектор, содержащий геном аденовируса с делецией в области Е1 аденовируса и вставкой в области Е1 аденовируса, где указанная вставка содержит кассету экспрессии, включающую в себя
(а) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий белок человеческого СЕА или его вариант;
(b) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом.
13. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанный вектор представляет собой плазмидный вектор, содержащий плазмидную часть и экспрессируемую кассету, включающую в себя
(а) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий белок человеческого СЕА или его вариант;
(b) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом.
14. Аденовирусный вакцинный вектор, включающий в себя геном аденовируса с делецией в области Е1 аденовируса и вставкой в области Е1 аденовируса, где указанная вставка содержит кассету экспрессии, включающую в себя
(а) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий белок человеческого СЕА или его вариант;
(b) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом.
15. Аденовирусный вектор по п.14, который представляет собой вектор Ad5.
16. Аденовирусный вектор по п.14, который представляет собой вектор Ad6.
17. Аденовирусный вектор по п.14, который представляет собой вектор Ad24.
18. Вакцинный плазмидный вектор, содержащий плазмидную часть и часть кассеты экспрессии, где указанная часть кассеты экспрессии включает в себя
(а) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий белок человеческого СЕА или его вариант; и
(b) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом.
19. Способ защиты млекопитающего от злокачественной опухоли, включающий в себя
(a) введение в организм млекопитающего первого вектора, включающего в себя
i) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий белок человеческого раково-эмбрионального антигена (CEA) или его вариант; и
ii) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом;
(b) выдерживание в течение некоторого определенного периода времени; и
(c) введение в организм млекопитающего второго вектора, включающего в себя
i) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий человеческий белок СЕА и его вариант; и
ii) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что первый вектор представляет собой плазмиду, а второй вектор представляет собой аденовирусный вектор.
21. Способ по п.19, отличающийся тем, что первый вектор представляет собой аденовирусный вектор, а второй вектор представляет собой плазмиду.
22. Способ лечения млекопитающего, страдающего от злокачественной опухоли ободочной и прямой кишки, включающий в себя
(a) введение в организм млекопитающего первого вектора, включающего в себя
i) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий белок человеческого раково-эмбрионального антигена (CEA) или его вариант; и
ii) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом;
(b) выдерживание в течение некоторого определенного периода времени; и
(c) введение в организм млекопитающего второго вектора, включающего в себя
i) оптимизированный по кодонам полинуклеотид, кодирующий человеческий белок CEA или его вариант; и
ii) промотор, оперативно связанный с полинуклеотидом.
23. Способ по п.22, отличающийся тем, что первый вектор представляет собой плазмиду, а второй вектор представляет собой аденовирусный вектор.
24. Способ по п.22, отличающийся тем, что первый вектор представляет собой аденовирусный вектор, а второй вектор представляет собой плазмиду.
25. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты, включающая в себя последовательность нуклеотидов, которая кодирует белок человеческого раково-эмбрионального антигена (СЕА), представленную в SEQ ID NO:16, где указанная синтетическая молекула нуклеиновой кислоты оптимизирована по кодонам для достижения высокого уровня экспрессии в клетке человека.
26. Синтетическая молекула нуклеиновой кислоты по п.25, отличающаяся тем, что указанная последовательность нуклеотидов включает в себя последовательность, представленную в SEQ ID NO:15.
27. Вектор, включающий в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п.25.
28. Клетка-хозяин, включающая в себя вектор по п.27.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US46797103P | 2003-05-05 | 2003-05-05 | |
US60/467,971 | 2003-05-05 | ||
US54361204P | 2004-02-11 | 2004-02-11 | |
US60/543,612 | 2004-02-11 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2005137697A true RU2005137697A (ru) | 2006-05-10 |
Family
ID=33436748
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005137697/13A RU2005137697A (ru) | 2003-05-05 | 2004-05-03 | Синтетический ген, кодирующий человеческий раково-эмбриональный антиген, и его применение |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20070104685A1 (ru) |
EP (1) | EP1622937A2 (ru) |
JP (1) | JP2007523610A (ru) |
KR (1) | KR20060003903A (ru) |
CN (1) | CN1784424A (ru) |
AU (1) | AU2004235943A1 (ru) |
CA (1) | CA2523720A1 (ru) |
IS (1) | IS8053A (ru) |
NO (1) | NO20055708L (ru) |
NZ (1) | NZ543922A (ru) |
RU (1) | RU2005137697A (ru) |
WO (1) | WO2004099247A2 (ru) |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060286114A1 (en) * | 2003-08-22 | 2006-12-21 | Luigi Aurisicchio | Synthetic gene encoding rhesus monkey carcinoembryonic antigen and uses thereof |
US8188244B2 (en) | 2004-02-11 | 2012-05-29 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa | Carcinoembryonic antigen fusions and uses thereof |
JP4881623B2 (ja) | 2006-01-27 | 2012-02-22 | シスメックス株式会社 | Cea核酸増幅用プライマー、プライマーセット、及びがんの診断支援方法 |
EP1981533A1 (en) * | 2006-02-06 | 2008-10-22 | Medizinische Universität Wien | Vaccine and antigen mimotopes against cancerous diseases associated with the carcinoembryonic antigen cea |
ES2725450T3 (es) | 2007-07-02 | 2019-09-24 | Etubics Corp | Métodos y composiciones para la producción de un vector adenoviral para su uso en vacunaciones múltiples |
SI2567707T1 (sl) * | 2007-07-27 | 2017-01-31 | Immatics Biotechnologies Gmbh | Sestava s tumorjem povezanih peptidov in zadevnih cepiv proti raku |
WO2009117656A2 (en) * | 2008-03-21 | 2009-09-24 | Vectorlogics,Inc. | Capsid-incorporated antigen for novel adenovirus vaccine |
KR101815322B1 (ko) * | 2010-01-12 | 2018-01-05 | 서울대학교산학협력단 | 항암 펩타이드 서열 |
US9605276B2 (en) * | 2012-08-24 | 2017-03-28 | Etubics Corporation | Replication defective adenovirus vector in vaccination |
AU2016205215B2 (en) | 2015-01-09 | 2021-03-11 | Etubics Corporation | Methods and compositions for combination immunotherapy |
KR20170102002A (ko) | 2015-01-09 | 2017-09-06 | 이투빅스 코포레이션 | 에볼라 바이러스 백신접종을 위한 방법 및 조성물 |
US11149087B2 (en) | 2015-04-20 | 2021-10-19 | Etubics Corporation | Methods and compositions for combination immunotherapy |
US20210388383A1 (en) * | 2018-10-12 | 2021-12-16 | Children's Hospital Medical Center | Modular expression systems for gene expression and methods of using same |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5795737A (en) * | 1994-09-19 | 1998-08-18 | The General Hospital Corporation | High level expression of proteins |
DE10055545A1 (de) * | 2000-11-09 | 2002-07-25 | Deutsches Krebsforsch | Für Expression in Eukaryonten optimierte HPV 16-L1 und HPV 16-L2 kodierende DNA Sequenzen |
-
2004
- 2004-05-03 CN CNA2004800121157A patent/CN1784424A/zh active Pending
- 2004-05-03 JP JP2006505382A patent/JP2007523610A/ja not_active Withdrawn
- 2004-05-03 US US10/555,744 patent/US20070104685A1/en not_active Abandoned
- 2004-05-03 KR KR1020057021059A patent/KR20060003903A/ko not_active Application Discontinuation
- 2004-05-03 AU AU2004235943A patent/AU2004235943A1/en not_active Abandoned
- 2004-05-03 RU RU2005137697/13A patent/RU2005137697A/ru not_active Application Discontinuation
- 2004-05-03 CA CA002523720A patent/CA2523720A1/en not_active Abandoned
- 2004-05-03 NZ NZ543922A patent/NZ543922A/en unknown
- 2004-05-03 WO PCT/EP2004/004802 patent/WO2004099247A2/en active Application Filing
- 2004-05-03 EP EP04739137A patent/EP1622937A2/en not_active Ceased
-
2005
- 2005-09-29 IS IS8053A patent/IS8053A/is unknown
- 2005-12-02 NO NO20055708A patent/NO20055708L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NZ543922A (en) | 2008-05-30 |
NO20055708L (no) | 2006-02-06 |
IS8053A (is) | 2005-09-29 |
CN1784424A (zh) | 2006-06-07 |
WO2004099247A2 (en) | 2004-11-18 |
KR20060003903A (ko) | 2006-01-11 |
CA2523720A1 (en) | 2004-11-18 |
AU2004235943A1 (en) | 2004-11-18 |
US20070104685A1 (en) | 2007-05-10 |
EP1622937A2 (en) | 2006-02-08 |
JP2007523610A (ja) | 2007-08-23 |
WO2004099247A3 (en) | 2005-02-24 |
NO20055708D0 (no) | 2005-12-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2006132340A (ru) | Слитые белки карциноэмбрионального антигена | |
RU2005137697A (ru) | Синтетический ген, кодирующий человеческий раково-эмбриональный антиген, и его применение | |
RU2009117325A (ru) | Слитый белок теломеразной обратной транскриптазы, кодирующие его нуклеотиды и их применение | |
ATE348108T1 (de) | Methode zum nachweis von tumoren | |
JP2010519904A5 (ru) | ||
JP2020530437A5 (ru) | ||
WO2000075317A3 (en) | Compositions and methods for the treatment of tumor | |
PL1760153T3 (pl) | Hybrydowy wektor adenowirusowy/alfawirusowy do skutecznego podawania i ekspresji genów terapeutycznych w komórkach nowotworowych | |
CN103614416A (zh) | 一种携带人穿膜肽p53与GM-CSF基因的重组溶瘤腺病毒及其用途 | |
RU2006105195A (ru) | Синтетический ген, кодирующий человеческий антиген эпидермального фактора роста 2/neu, и его применение | |
JP2003528604A5 (ru) | ||
KR100517848B1 (en) | Compositions and Methods for The Treatment of Tumor | |
CN1526012A (zh) | 一种高效表达抗癌基因的肿瘤细胞内特异性增殖的病毒及其用途 | |
Rowe et al. | Transformation of rodent cells by DNA extracted from transformation-defective adenovirus mutants | |
KR20220111244A (ko) | 종양용해바이러스 및 이의 응용과 암 치료용 약물 | |
WO2000037640A3 (en) | Compositions and methods for the treatment of tumor | |
JP2024501841A (ja) | アデノウイルス血清型35ヘルパーベクター | |
JP2009535031A5 (ru) | ||
KR100357054B1 (ko) | 종양 특이증식 재조합 아데노바이러스 및 그를 이용하여 종양세포만을 특이적으로 형질전환시키는 방법 | |
JP2006501166A5 (ru) | ||
JP2008509117A5 (ru) | ||
RU2012100085A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pAd-SN, КОДИРУЮЩАЯ БЕЛКИ SOX2 И NANOG ЧЕЛОВЕКА, ЯВЛЯЮЩАЯСЯ ОСНОВОЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ВИРУЛЕНТНЫХ АДЕНОВИРУСОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ИНДУЦИРОВАННЫХ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА | |
RU2019144018A (ru) | Варианты b4galt1 и их применение | |
HUP0301136A2 (hu) | Szénmetabolizmusban és energiatermelésben szerepet játszó fehérjéket kódoló Corynebacterium glutamicum gének | |
Cheng et al. | Adenovirus-mediated transfer of RA538 gene and its antitumor effect |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FA93 | Acknowledgement of application withdrawn (no request for examination) |
Effective date: 20070609 |
|
FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20070618 |