RU2006132340A - Слитые белки карциноэмбрионального антигена - Google Patents

Claims (35)

1. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; где слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего.

2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где белком СЕА является белок СЕА человека или его вариант.

3. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где белком СЕА является белок СЕА макака-резуса или его вариант.

4. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где белок СЕА является укороченным на С-конце.

5. Молекула нуклеиновой кислоты по п.4, где С-концевое укорочение содержит аминокислоты 679-702 последовательности SEQ ID NO:20.

6. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где иммуноусиливающий элемент содержит существенную часть субъединицы А термолабильного энтеротоксина E. coli (LT).

7. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где иммуноусиливающий элемент содержит существенную часть субъединицы В термолабильного энтеротоксина E. coli (LT).

8. Молекула нуклеиновой кислоты по п.7, где у субъединицы В LT отсутствует сигнальная последовательность.

9. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где иммуноусиливающий элемент содержит существенную часть DOM или FcIgG.

10. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где нуклеотидная последовательность содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:7, 9, 11, 12, 14, 21, 25, 49, 50 и 52.

11. Молекула нуклеиновой кислоты по п.10, где нуклеотидная последовательность содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:11 или SEQ ID NO:12.

12. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая последовательность нуклеотидов, которая кодирует слитый белок СЕА, где нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID NO:12.

13. Молекула нуклеиновой кислоты по п.8, где С-конец белка СЕА слит с N-концом субъединцы В LT.

14. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

15. Вектор по п.14, где вектор является аденовирусным вектором или плазмидным вектором.

16. Вектор по п.15, где вектором является вектор Ad5.

17. Вектор по п.15, где вектором является вектор Ad6 или вектор Ad24.

18. Вектор по п.15, где вектором является вектор Ad шимпанзе.

19. Вектор по п.15, где вектором является pV1JnsB.

20. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.15.

21. Способ экспрессии слитого белка СЕА в рекомбинантной клетке-хозяине, предусматривающий (а) введение вектора, содержащего молекулу нуклеиновой кислоты по п.1, в подходящую клетку-хозяина; и (b) культивирование клетки-хозяина при условиях, которые делают возможной экспрессию указанного слитого белка СЕА человека.

22. Очищенный слитый белок СЕА, кодируемый молекулой нуклеиновой кислоты по п.1.

23. Очищенный слитый белок СЕА по п.22, где слитый белок содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:8, 10, 13, 15, 45, 46, 51 и 53.

24. Способ профилактики или лечения рака, предусматривающий введение млекопитающему вакцинного вектора, содержащего молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

25. Способ по п.24, где млекопитающим является человек.

26. Способ по п.25, где вектором является аденовирусный вектор или плазмидный вектор.

27. Способ по п.26, где вектором является аденовирусный вектор, содержащий аденовирусный геном с делецией в районе Е1 аденовируса и инсерцией в районе Е1 аденовируса, где инсерция содержит экспрессионную кассету, содержащую

(а) полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; и где этот слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего; и

(b) промотор, функционально связанный с полинуклеотидом.

28. Способ по п.26, где вектором является плазмидный вакцинный вектор, который содержит плазмидную часть и экспрессионную кассету, содержащую

(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; и где слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего; и

(b) промотор, функционально связанный с полинуклеотидом.

29. Аденовирусный вакцинный вектор, содержащий аденовирусный геном с делецией в районе Е1 и инсерцией в районе Е1, где инсерция содержит экспрессионную кассету, содержащую

(а) полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; и где слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего;

(b) промотор, функционально связанный с полинуклеотидом.

30. Аденовирусный вектор по п.29, который является вектором Ad5.

31. Аденовирусный вектор по п.29, который является вектором Ad6 или вектором Ad24.

32. Вакцинная плазмида, содержащая плазмидную часть и часть экспрессионной кассеты, причем часть экспрессионной кассеты содержит

(а) полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; и где слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего;

(b) промотор, функционально связанный с полинуклеотидом.

33. Способ лечения млекопитающего, страдающего СЕА-обусловленным раком или предрасположенного к СЕА-обусловленному раку, предусматривающий

(а) введение млекопитающему первого вектора, содержащего

(i) полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; и где слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего;

(ii) промотор, функционально связанный с полинуклеотидом;

(b) выдерживание в течение заданного периода времени;

(с) введение млекопитающему второго вектора, содержащего

(i) полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеотидов, которая кодирует слитый белок СЕА, где слитый белок СЕА содержит белок СЕА или его вариант, слитый с существенной частью иммуноусиливающего элемента, выбранного из группы, состоящей из DOM, FcIgG, СТ, LTA и LTB; и где слитый белок способен вызывать иммунный ответ у млекопитающего;

(ii) промотор, функционально связанный с полинуклеотидом.

34. Способ по п.33, где первым вектором является плазмида, а вторым вектором является аденовирусный вектор.

35. Способ по п.33, где первым вектором является аденовирусный вектор, а вторым вектором является плазмида.