RU2000130808A - Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена zwa2 - Google Patents
Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена zwa2Info
- Publication number
- RU2000130808A RU2000130808A RU2000130808/13A RU2000130808A RU2000130808A RU 2000130808 A RU2000130808 A RU 2000130808A RU 2000130808/13 A RU2000130808/13 A RU 2000130808/13A RU 2000130808 A RU2000130808 A RU 2000130808A RU 2000130808 A RU2000130808 A RU 2000130808A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- polynucleotide
- gene encoding
- gene
- amino acid
- encoding
- Prior art date
Links
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 title 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 title 1
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 claims 16
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims 16
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims 5
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 claims 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims 4
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 claims 4
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 claims 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 3
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 claims 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 2
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 2
- DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-N Phosphoenolpyruvic acid Natural products OC(=O)C(=C)OP(O)(O)=O DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 2
- 230000000295 complement Effects 0.000 claims 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims 2
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 claims 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 claims 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 claims 2
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 claims 1
- 101710010137 46.1 Proteins 0.000 claims 1
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 claims 1
- 108060002107 DAPA Proteins 0.000 claims 1
- 108010055400 EC 2.7.2.4 Proteins 0.000 claims 1
- 108091000044 EC 4.3.3.7 Proteins 0.000 claims 1
- 108010053763 EC 6.4.1.1 Proteins 0.000 claims 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 1
- 108010081616 FAD-dependent malate dehydrogenase Proteins 0.000 claims 1
- 102100006425 GAPDH Human genes 0.000 claims 1
- 101710008404 GAPDH Proteins 0.000 claims 1
- 102100007000 PC Human genes 0.000 claims 1
- 101710017505 PP_4473 Proteins 0.000 claims 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims 1
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 claims 1
- 230000037348 biosynthesis Effects 0.000 claims 1
- 230000003197 catalytic Effects 0.000 claims 1
- 101700045639 dapD Proteins 0.000 claims 1
- 108060005955 dapE Proteins 0.000 claims 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000002068 genetic Effects 0.000 claims 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 claims 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims 1
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 claims 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N p-acetaminophenol Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims 1
- 108010056371 succinyldiaminopimelate desuccinylase Proteins 0.000 claims 1
- 101710004873 yclM Proteins 0.000 claims 1
Claims (18)
1. Выделенный полинуклеотид, содержащий полинуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей а) полинуклеотид, идентичный по крайней мере на 70% полинуклеотиду, кодирующему полипептид, который содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2, б) полинуклеотид, кодирующий полипептид, который содержит аминокислотную последовательность, идентичную по крайней мере на 70% аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2, в) полинуклеотид, комплементарный полинуклеотидам, указанным в подпункте а) или б), и г) полинуклеотид, содержащий по крайней мере 15 последовательных пар оснований полинуклеотидной последовательности, указанной в подпункте а), б) или в).
2. Полинуклеотид по п. 1, который представляет собой реплицируемую в коринебактериях, предпочтительно рекомбинантную, ДНК.
3. Полинуклеотид по п. 1, который представляет собой РНК.
4. Полинуклеотид по п. 2, содержащий нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1.
5. Реплицируемая ДНК по п. 2, которая включает (I) нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, или (II) по крайней мере одну последовательность, которая соответствует последовательностям, указанным в подпункте (I), в пределах вырожденности генетического кода, или (III) по крайней мере одну последовательность, которая гибридизуется с последовательностями, комплементарными последовательностям, указанным в подпункте (I) или (II), и при необходимости (IV) функционально нейтральные смысловые мутации в последовательности, указанной в подпункте (I).
6. Вектор, прежде всего челночный вектор pCR2.1zwa2int, отличающийся тем, что он имеет рестрикционную карту, представленную на чертеже, и депонирован в штамме Е. coli DH5α под регистрационным номером DSM 13113.
7. Коринебактерии, которые служат в качестве клеток-хозяев и в которые в результате интеграционного мутагенеза встроен вектор по п. 6.
8. Способ получения L-аминокислот, прежде всего L-лизина, отличающийся тем, что осуществляют следующие стадии а) ферментацию с использованием продуцирующих целевую L-аминокислоту бактерий, в которых по крайней мере ослабляют ген zwa2, б) накопление целевого продукта в среде или в клетках бактерий и в) выделение L-аминокислоты.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что применяют бактерии, в которых дополнительно усиливают другие гены пути биосинтеза целевой L-аминокислоты, прежде всего ген zwal.
10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что применяют бактерии, в которых по крайней мере частично подавляют пути обмена веществ, препятствующие образованию целевой L-аминокислоты.
11. Способ по п. 8, отличающийся тем, что понижают экспрессию полинуклеотида, кодирующего ген zwa2.
12. Способ по п. 8, отличающийся тем, что понижают каталитические свойства полипептида (протеина фермента), кодируемого полинуклеотидом zwa2.
13. Способ по п. 8, отличающийся тем, что ослабления достигают путем интеграционного мутагенеза с использованием вектора pCR2.1zwa2int, представленного на чертеже и депонированного в Е. coli под регистрационным номером DSM 13113.
14. Способ по п. 8, отличающийся тем, что для получения L-лизина осуществляют ферментацию с использованием бактерий, в которых одновременно усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют или амплифицируют, один или несколько генов, выбранных из группы, включающей 14.1. ген dapA, кодирующий дигидродипиколинат-синтазу, 14.2. ген lysC, кодирующий устойчивую в отношении обратной связи аспартаткиназу, 14.3. ген рус, кодирующий пируваткарбоксилазу, 14.4. ген dapD, кодирующий тетрадигидродипиколинат-сукцинилазу, 14.5. ген dapE, кодирующий сукцинилдиаминопимелат-десукцинилазу, 14.6. ген gap, кодирующий глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу, 14.7. ген mqo, кодирующий малат-хинон-оксидоредуктазу, 14.8. ген lysE, кодирующий экспорт лизина.
15. Способ по п. 8, отличающийся тем, что для получения L-лизина осуществляют ферментацию с использованием бактерий, в которых одновременно ослабляют один или несколько генов, выбранных из группы, включающей 15.1. ген рск, кодирующий фосфоенолпируват-карбоксикиназу, 15.2. ген pgi, кодирующий глюкозо-6-фосфатизомеразу.
16. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что применяют микроорганизмы вида Corynebacterium glutamicum.
17. Применение полинуклеотидных последовательностей по п. 1 или их частей в качестве гибридизационных зондов для выделения кДНК, кодирующей генный продукт zwa2.
18. Применение полинуклеотидных последовательностей по п. 1 или их частей в качестве гибридизационных зондов для выделения кДНК или генов, обладающих высоким сходством с последовательностью гена zwa2.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19959327.2 | 1999-12-09 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2000130808A true RU2000130808A (ru) | 2003-01-10 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2000130809A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена zwa1 | |
CN100357431C (zh) | 新的赖氨酸脱羧酶基因以及生产l-赖氨酸的方法 | |
RU2000126322A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена pck | |
RU2000117837A (ru) | Продуцирующие l-лизин коринебактерии и способ получения l-лизина | |
RU2000123636A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена pg1 | |
KR101142885B1 (ko) | 트립토판 생합성 관련 변이유전자를 함유한 대장균 변이주및 이를 이용한 트립토판 제조방법 | |
RU2000122755A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена thre и способ ферментативного получения l-треонина с использованием коринебактерий | |
RU2001108535A (ru) | Нуклеотидные последовательности гена tal | |
US7074607B2 (en) | Polynucleotide sequences which encode the zwa1 gene | |
US20020106748A1 (en) | Novel nucleotide sequences encoding the zwa2 gene | |
RU2000125061A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена eno | |
EP1491634A1 (en) | Feedback resistant acetohydroxy acid synthetase mutants | |
KR20010062280A (ko) | sdhA, sdhB 및 sdhC 유전자를 암호화하는신규한 뉴클레오타이드 서열 | |
US7105302B2 (en) | Nucleotide sequences coding for the pknB gene | |
RU2001100696A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена ptsh | |
RU2000130808A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена zwa2 | |
US7226763B2 (en) | Process for preparing L-amino acids with corynebacteria with enhanced nucleotide sequences coding for pknD | |
RU2000129933A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена glk | |
KR20220152728A (ko) | 3-메틸-2-옥소뷰타노에이트 하이드록시 메틸트랜스퍼라아제의 활성이 강화된 미생물, 및 이의 용도 | |
MXPA00010779A (es) | Proceso para la produccion por fermentacion de l-lisina empleando bacterias corineformes. | |
KR20220101509A (ko) | GlxR 단백질 변이체 또는 이를 이용한 쓰레오닌 생산방법 | |
US7205131B2 (en) | Process for the preparation of L-amino acids via overexpression of the PTSH gene | |
RU2000129483A (ru) | Новые нуклеотидные кодирующие последовательности генов sucC и sucD | |
RU2001107500A (ru) | Кодирующие нуклеотидные последовательности гена dapc и способ получения l-лизина | |
RU2001108877A (ru) | Новые кодирующие нуклеотидные последовательности гена rp1k |